Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа

Шаркова, Инна Валентиновна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа
ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа"

На правах рукописи УДК 575.1.599.9

ШАРКОВА Инна Валентиновна

КЛИНИКО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ НАСЛЕДСТВЕННОЙ МОТОРНО-СЕНСОРНОЙ НЕЙРОПАТИИ 1 X ТИПА.

03.00.15 - «Генетика» 14.00.13 - «Нервные болезни»

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА 2004

Работа выполнена в Государственном Образовательном Учреждении Высшего Профессионального Образования "Российский Государственный медицинский университет Министерства Здравоохранения Российской Федерации".

Научные руководители:

Доктор биологических наук

профессор Поляков Александр Владимирович

Доктор медицинских наук

профессор Дадали Елена Леонидовна

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук

профессор Иллариошкин Сергей Николаевич

Доктор медицинских наук

профессор Петрин Александр Николаевич

Ведущее учреждение: Российская академия последипломного образования.

часов

Защита диссертации состоится 004 г.

На заседание Диссертационного совета К-208.072.03

ГОУ ВПО "Российский Государственный медицинский университет МЗ РФ" по адресу: 117997 г. Москва, ул. Островитянова, д. 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО "РГМУ Минздрава России"

Автореферат разослан «

Ученый секретарь Диссертационного совета, доктор медицинских наук профессор

Л.Ф. Марченко

2jQOfe-4 1&0Ü4

ZliûfOf

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность исследования

Наследственная моторно-сенсорная нейропатия 1 X типа (НМСН IX)-одна из наиболее распространенных форм наследственных демиелинизирующих полинейропатий, на долю которой приходится около 20% от всех генетических вариантов этой группы болезней [Дадали E.JL, 1999, Hanemann С., 2003]. Заболевание наследуется по Х-сцепленному доминантному типу [Herringham W.P., 1889, McMillan J.C., 1994] и обусловлено мутациями в гене gap junction B1 type (GJB1) [Bergoffen J., 1993], продуктом коюрого является коннексин 32 (Сх32) [Beckett J., 1985]. Этот белок участвует в формировании щелевых соединений и ионных каналов глии, посредством которых обеспечиваются прямые контакты между различными слоями шванновских клеток миелиновой оболочки периферических нервов, а также сальтаторный характер проведения возбуждения по периферическим нервам [Katz,1966, Fishman G., 1991, Bruzzone R., 1994]. К настоящему времени идентифицировано более 230 различных мутаций в гене GJB1 [Nelis Е., 2004] и их поиск продолжается. Известно, что Сх32 содержит 9 доменов, которым отводится различная роль в формировании щелевого соединения и ионного канала в миелиновой оболочке [Falk M., 1994, Evans W., 1994, Goodenough D., 1996, Martin P., 2000, VanSlyke J., 2000]. He многочисленные работы, посвященные изучению клинико-генетических корреляций, позволяют предположить, что мутации в гене GJB1, приводящие к нарушению структуры отдельных белковых доменов, могут обуславливать особенности формирования патогенетических механизмов и клинических проявлений НМСН 1 X типа [Ionasescu V., 1996, Martin P., 2000]. Выявление таких особенностей при различных аллельных вариантах НМСН 1 X типа позволит определить функциональную значимость отдельных доменов белка в формировании щелевых соединений и составить представление о патофункциональной карте Сх32, а также прогнозировать тяжесть течения заболевания и оптимизировать процесс проведения медико-генетического консультирования отягощенных

семей.

сы'тПч;ург ХЮоРК

Юс кл>:» СИЛЬНАЯ

■> С. I,/ и,__

Цель исследования

Целью исследования явилось изучение особенностей клинических проявлений НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола, а также аллельных вариантов обусловленных мутациями в гене вЛИ, нарушающими структуру отдельных доменов Сх32.

Для осуществления поставленной цели решались следующие задачи:

1. Определить частоту встречаемости аллельных вариантов НМСН 1 X типа, обусловленных нарушением функционирования трех основных доменов Сх32.

2. Проанализировать особенности фенотипических проявлений у больных мужского и женского пола с НМСН 1 X типа при различных мутациях в гене

3. Оценить спектр клинических симптомов и частоту их встречаемости при аллельных вариантах НМСН 1 X типа, обусловленных мутациями, нарушающими структуру отдельных доменов Сх32.

4. Проследить динамику формирования клинического фенотипа НМСН 1 X типа, обусловленного изменением аминокислотной последовательности первого и третьего трансмембранных доменов Сх32.

Научная иовизна

Впервые в выборке больных с НМСН 1 X типа из популяции РФ проведен анализ спектра и частот встречаемости мутаций в гене С1В1. Идентифицировано семь ранее не описанных миссенс-мутаций ^2411, >^44в, \V44C, С53У, У840, А97Р, Р193К), три делеции (62с1еЮ, 606с1е1С, 784-785с1е1АТ) не кратные трем нуклеотидам и одна мутации в сайте сплайсинга, и описаны особенности неврологических проявлений у больных с вновь выявленными аллельными вариантами заболевания. Впервые выявлены различия тяжести клинического течения НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в гене 01В1, нарушающими структуру восьми доменов Сх32 и высказано предположение об их различной функциональной

значимости. Выявлены различия тяжести течения заболевания у больных мужского и женского пола. Впервые показано, что у больных женщин значительная тяжесть течения заболевания может наблюдаться при наличии четырех мутаций - \V44C, У91М, Ш42С>, Е208К - в гене СШ1.

Практическая значимость работы

Определен спектр, частоты встречаемости клинических симптомов и динамика формирования фенотипа НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола с миссенс-мутациями, нарушающими структуру восьми доменов Сх32, позволяющие оптимизировать процедуру постановки диагноза и прогнозировать тяжесть течения заболевания.

Проведено медико-генетическое консультирование 31 семьи с НМСН 1 X типа, в ходе которого уточнен генетический статус 104 человек. На основании неврологического осмотра и молекулярно-генетического анализа выявлено 17 носителей мутаций в гене ОШ1, не предъявляющих жалоб, и осуществлены профилактические мероприятия, направленные на предотвращение появления у них больного потомства. Результаты проведенного исследования могут быть использованы в практической работе врачей-генетиков и неврологов, работающих в области наследственной патологии нервной системы.

Положения, выдвигаемые на защиту

1. Частоты встречаемости и спектр мутаций в гене вЛЕИ у больных НМСН 1 X типа из популяции Центральной России сходны с таковыми в выборке из различных популяций мира. В большинстве случаев обнаруживаются миссенс-мутации в кодирующей части гена, на долю которых приходится 87,1% всех выявленных мутаций. Наибольшее количество мутаций локализуется в трансмембранных (ТМ) и экстрацеллюлярных (ЕС) доменах, а наименьшее - в области С-концевого участка белка.

2. Клинические проявления и тяжесть течения НМСН 1 X типа значительно более выражены у больных мужского пола. Появление выраженных клинических проявлений у больных женщин можно ожидать только при наличии мутаций \V44C, У91М, 11142(3, Е208К.

3. Существуют различия степени выраженности НМСН 1 X, обусловленной мутациями, изменяющими структуру отдельных белковых доменов Сх32. Наибольшая тяжесть течения НМСН 1 X типа наблюдается при нарушение аминокислотой последовательности С-концевого участка, ЕС2 и ТМЗ доменов, а наименьшая - интрацеллюлярных (1С) и ТМ1 белковых доменов. Показано, что даже наличие делеции в ТМ1 приводит к появлению умеренно выраженных клинических симптомов полинейропатии.

4. При аллельных вариантах НМСН 1 X типа, обусловленных миссенс-мутациями - М34К, '\V44C, С53У, 11142(2, Е208К и 120Н;С218, наряду типичными клиническими проявлениями периферической полинейропатии могут возникать симптомы поражения различных структур ЦНС.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены на европейской конференции «Генетика человека» в июне 2004 года, Мюнхен, Германия и на совместной конференции кафедры генетики МБФ ГОУ ВПО РГМУ и научно-консультативного отдела ГУ МГНЦ РАМН в мае 2004 года.

Публикации.

По материалам исследования опубликовано 6 работ (4 статьи и 2 тезиса).

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 131 странице машинописного текста и включает введение и главы, посвященные обзору литературы, описанию материалов и методов исследования, изложению и обсуждению полученных результатов, заключение, выводы. Работа иллюстрирована 22 таблицами и 12 рисунками.

Библиографический указатель включает 201 наименование источников, из них 15 отечественных и 186 зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследуемая выборка больных включала 104 пациента, из 31 семьи, которые находились под наблюдением врачей кафедры генетики МБФ ГОУ ВПО РГМУ, научно-консультативного отдела ГУ МТТГЦ РАМН и Воронежской межобластной медико-генетической консультации. Все больные были выходцами из центральных регионов России.

Клиническая диагностика НМСН осуществлялась с использованием критериев диагностики наследственных периферических нейропатий, изложенных в материалах Европейского Консорциума по изучению нервно-мышечных заболеваний.

На всех больных заполнялась специально разработанная карта фенотипа, включающая 26 клинических признаков и показатели скорости проведения импульса по срединному нерву. При наличии единственного больного в семье всем родственникам пробанда первой и, при необходимости, второй степени родства проводились тщательный клинический осмотр и ЭНМГ исследование. При наличии сомнительных результатов клинико-

электронейромиографического обследования всем родственникам пробанда с целью уточнения генетического статуса проводился молекулярно-генетический анализ.

ЭНМГ-исследование проводилось на 4-х канальных электромиографах Reporter ESAOTE Biomedica (Италия), М-440 «Медикор» (Венгрия), Sapphire 2МЕ «Medelec» (Англия), и Нейро-МВП «Нейрософт» (Россия).

Молекулярно-генетическая диагностика НМСН 1 X осуществлялась сотрудниками лаборатории ДНК-диагностики ГУ МГНЦ РАМН методом SSCP-анализа с последующим секвенированием одноцепочечных фрагментов ДНК с изменённой электрофоретической подвижностью.

Статистическая обработка полученных результатов была направлена на оценку значимости различий в частотах встречаемости клинических признаков в отдельных группах больных и проводилась на основе критерия Стьюдента с учетом поправки Иейтса на непрерывность или непараметрического критерия Манна-Уитни.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

1. Молекулярно-генетическая характеристика аллельных вариантов НМСН 1 X типа.

В выборке 104 больных с НМСН 1 X типа (57 мужчин 47 женщин) из 31 семьи проведен анализ спектра и частот встречаемости различных типов мутаций в гене ОГО1. В 26 семьях (83,9%) наблюдалась сегрегация заболевания в двух и более поколениях, а 5 случаев (16,1%) были изолированными. Показано, что подавляющее число мутаций (96,8%) локализовано в кодирующей части гена (в области второго экзона) и лишь в одной семье (3,2%) обнаружена мутация в сайте сплайсинга на границе 1Ь экзона и 1Ь интрона. Основное количество мутаций (87,1%) являлись точковыми миссенс-мутациями, а в 9,7 % случаев выявлены делеции некратные трем нуклеотидам, приводящие к сдвигу рамки считывания. В обследованной нами выборке не выявлено нонсенс мутаций, а также делеций и инсерций, не приводящих к сдвигу рамки считывания, которые в мировой суммарной выборке больных с НМСН 1 X типа составляли 7,4%, 3,4% и 0,9% соответственно (таблица 1).

Впервые выявлено одиннадцать ранее не описанных мутаций в гене в-ГО!, семь из которых являются миссенс-мутациями (>^2411, №"44(2, W44C, С53У, У840, А97Р, П93К), три делеции со сдвигом рамки считывания в кодирующей части гена (62с1еЮ, 606(1е1С, 784-785ёе1АТ) и одна мутация в сайте сплайсинга (1У81+2Т->С).

Данные о локализации миссенс-мутаций в российской популяции, приводящих к аминокислотным заменам в различных белковых доменах, представлены в таблице 2 и на рисунке 1.

Таблица 1. Частота встречаемости и спектр мутаций в гене 01В1 у больных с НМСН 1 X типа в выборке из популяции России и общей выборке больных из различных популяций мира.

Тип мутаций Доля от общего количества в мировой выборке (%) Доля от общего количества в выборке из России (%)

Миссенс 78,4 87,1

Нонсенс 7,4 -

Со сдвигом рамки считывания 9,9 9,7

Делеции и инсерции кратные трем нуклеотидам 4,3 -

Мутации в сайте сплайсинга - 3,2

Мутации, выявленные нами, локализовались с 59 по 262 нуклеотид второго экзона гена С1В1 и приводили к изменению аминокислотной последовательности 1-4 трансмембранных (ТМ) доменов, первой и второй экстрацеллюлярных (ЕС) петель, интрацеллюлярной (1С) петли, а также С-конца белка Сх32. Мутация 1У81+2Т->С располагалась в области первого интрона и затрагивала консенсусную последовательность донорного сайта сплайсинга после первого экзона.

Обнаружены различия в частоте встречаемости мутаций, нарушающих аминокислотную последовагельность различных групп белковых доменов (таблица 3).

Наибольшее количество мутаций обнаруживается в области гена, кодирующей ЕС2 домен, а наименьшее - в области ТМ4 домена и С-концевого участка Сх32. В большинстве случаев мутации в гене 01В1 приводили к нарушению аминокислотной последовательности ТМ и ЕС доменов, на долю которых приходилось 43,3% и 36,7% соответственно. Нами не обнаружено случаев заболевания, обусловленных мутациями, нарушающими структуру Ы-конца молекулы Сх32, которые составляют 6,5% в общей выборке больных с НМСН 1 X.

Таблица 2. Сводные данные о количестве больных с различными типами

мутаций в гене вЛЛ.

Домен Нуклеотидная замена Аминокислотная замена Количест во больных Количест во семей Доля от общего числа больных в %

ТМ1 59Т>А+6Ш>А 120Ы;0218 6 1 5,9

62с1еЮ 4 1 4,0

68Т>С У23А 14 1 13,9

70Т>С W24R 4 1 4,0

101Т>А М34К 5 1 5,0

ТМ2 239А>в двоя 1 1 1,0

251Т>0 У84в 2 1 2,0

2710А У91М 3 1 3,0

ТМЗ 425С>А Я142(2 7 1 6,9

424С>Т Я142У 4 4,0

ТМ4 579С>й Б193Ь 2 1 2,0

606(1е1С 2 1 2,0

ЕС1 130ТХ} 2 1 2,0

13Ю>С \V44C 4 1 4,0

1580>А С53У 7 1 6,9

ЕС2 4910 А Я164д 20 19,8

54Ш>А У181М 3 1 3,0

5480>А Я183Н 1 1 1,0

5560>А Е186К 1 1 1,0

1С 277А>в М93У 1 1 1,0

287в>А А97Р 2 1 2,0

319С>Т R107W 2 2,0

с- конец 622С>А Е208К 4 1 4,0

784-785(1е1АТ 1 1 | 1,0

Таблица 3. Частота встречаемости мутаций в гене вЛ?!, нарушающих структуру различных доменов Сх32 в выборке из российской популяции и

других популяциях мира.

Домены Доля от общего количества (%) в мировой выборки Доля от общего количества (%) в выборке из России

ТМ 37,6 43,3

ЕС 33,4 36,7

1С 29 20

Рисунок 1. Локализация миссенс-мутаций, приводящих к аминокислотным заменам в различных доменах Сх32.

Н2К

экстр ацеллюлярнын ишрикс

цнтогошматгасмя

тпрацеллюлнрнын лирике

ООН

Обнаружены также различия в частоте встречаемости мутаций, нарушающих аминокислотную последовательность отдельных доменов Сх32 (таблица 4).

Таблица 4. Частота встречаемости мутаций в гене С1В1, приводящих к аминокислотным заменам в различных доменах Сх32 у больных с НМСН 1 X из не родственных семей из России и мировой популяции.

Домены Количество мутаций (%)

Данные литературы Собственные данные

И-конец 6,5 0

ТМ1 12,0 16,7

ТМ2 10,8 10

ТМЗ 7,8 10

ТМ4 7,0 6,6

ЕС1 13,4 10

ЕС2 20,0 26,7

1С 11,7 16,7

С-конец 10,8 3,3

Всего 100 100

Преобладание мутаций в некоторых доменах Сх32 можно объяснить с точки зрения их устойчивости к нарушению аминокислотного состава и меньшей значимости для формирования коннексона и функционирования щелевых соединений миелиновой оболочки периферических нервов. Подтверждением этого предположения могут служить литературные данные экспериментальных исследований, свидетельствующих о том, что при некоторых миссенс-мутациях, приводящих к аминокислотным заменам в области ТМ1 и 1С, Сх32 нормально транспортируется к мембране шванновской клетки и участвует в образовании коннексона.

Таким образом, результаты анализа частоты и спектра мутаций в гене

СШ1 у больных с НМСН 1 X типа в целом сходны с данными литературы,

свидетельствующими о превалировании мутаций в гене С.1В1, нарушающих

аминокислотную последовательность некоторых белковых доменов Сх32.

Преобладание больных НМСН 1 X с мутациями, нарушающими структуру ТМ1

и 1С доменов можно объяснить с точки зрения их устойчивости к нарушению аминокислотного состава. Отсутствие в нашей выборке больных с НМСН 1 X типа, обусловленной мутациями в Ы-конце гена ОХВ1 и низкая частота встречаемости мутаций в С-терминальном участке могут быть связаны с высокой функциональной значимостью этих доменов в формировании щелевого соединения и ионного канала глии.

2. Клинические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленной мутациями в гене С ЛИ.

Изучение клинических проявлений НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в гене ОЛ31, проведено в выборке из 95 больных (54 мужчин и 41 женщины) из 27 семей. Для оценки клинического полиморфизма НМСН 1 X типа проанализированы частоты встречаемости клинических симптомов, а также показатели скорости проведения импульса (СПИ) по срединному нерву и возраст манифестации заболевания. Выявлены различия средних значений возраста манифестации заболевания в группах больных мужского и женского пола, которые, однако, не носили достоверного характера. Так в группе больных мужчин этот показатель составил 14,0 ± 2,3 лет, а в группе женщин - 21,0 ± 7,0 (р>0,05).

Сравнительный анализ возраста манифестации заболевания в четырех возрастных интервалах в группах больных НМСН 1 X типа мужского и женского пола представлен на рисунке 2.

У больных мужского пола заболевание начиналось в широком возрастном диапазоне от 5 до 37 лет. Половина больных отмечала появление первых признаков заболевания в возрасте от 11 до 20 лет, в 27,8 % случаев заболевание дебютировало в возрасте от 6 до 10 лет, у 16,7% больных мужчин заболевание манифестировало после 20-летнего возраста. Лишь у одного больного (1,85%) клинические признаки заболевания появились в возрасте 5 лет.

Дебют заболевания у женщин находился в более широком возрастном диапазоне от 8 до 60 лет. Приблизительно с одинаковой частотой заболевание

начиналось в возрасте от 11 до 20 и после 20 лет (29,3% и 31,7% соответственно). Только в 4,9% случаев заболевание дебютировало в возрасте от 6 до 10 лег. Необходимо отметить, что 36,2% носительницы мутаций в гене С.ТВ1 не предъявляли жалоб и считали себя практически здоровыми, а не резко выраженные клинические симптомы выявлялись лишь при неврологическом осмотре.

Рисунок 2. Сравнительный анализ возраста манифестации заболевания в четырех возрастных интервалах у больных НМСН 1 X типа мужского и женского пола.

от 1 до 5 от 6 до 10 от 11 до 20 после 20

■ женщины ■ мужнины

В группах больных мужского и женского пола также не обнаружено достоверных различий средних значений СПИ по срединному нерву. Так среднее значение этого показателя в группе больных мужчин составило 30,2 ± 5,3, а в группе женщин - 42,6 ± 8,3 (р>0,05). Важно отметить, что у части больных женского пола показатели СПИ по срединному нерву превышали пороговое значение в 38 м/сек, что приводило к ошибочной диагностике у них аксонального варианта НМСН.

При анализе частот встречаемости 26 клинических признаков в группах больных мужчин и женщин достоверные отличия обнаружены для 16 из них (61% от общего количества анализируемых). Результаты проведенного

исследования в группах больных мужского и женского пола суммированы в таблице 5.

Таблица 5. Анализ частот встречаемости клинических признаков у больных

мужского и женского пола с НМСН 1 X.

Наименование симптома Частота в % Р

мужчины женщины

Деформация стоп по типу фридрейховых 22,22 2,44 0,0066*

Деформация стоп по типу полых 57,41 73,17 0,1159

Деформация стоп по типу эквиноварусных 9,26 7,32 0,7367

Гипостезия стоп 59,26 36,59 0,0311*

Гипостезия кистей 42,59 14,63 0,0043**

Гиперестезия стоп 25,93 17,07 0,3053

Гиперестезия кистей 24,07 14,63 0,2575

Нарушение проприоцептивной чувствительности в ногах 44,44 24,39 0,0464*

Нарушение проприоцептивной чувствительности в руках 29,63 7,32 0,0084*

Отсутствие/снижение ахилловых рефлексов 94,44 63,41 0,0002**

Отсутствие/снижение коленных рефлексов 83,33 51,22 0,0011**

Отсутствие/снижение рефлекса с двуглавой мышцы 44,44 9,76 0,0004**

Отсутствие/снижение карпорадиального рефлекса 87,04 36,59 0,0001**

Деформация кистей 33,33 9,76 0,0083**

Гипотрофия мышц кистей 51,85 19,51 0,0018**

Степпаж 72,22 39,02 0,0016**

Интенционный тремор кистей 38,89 17,07 0,0231*

Фасцикулярный тремор кистей 48,15 34,15 0,1743

Фасцикуляция мышц 44,44 7,32 0,0001**

Спиномозжечковая атаксия 79,63 43,9 0,0002**

Нарушение черепно-мозговой иннервации 16,67 2,44 0,0276*

Гипотрофия мышц голени 35,19 31,71 0,7231

Асимметрия поражения 11,11 12,2 0,8697

Гипертрофия икроножных мышц 1,85 7,32 0,1918

Вегетативные нарушения 9,26 0 0,0482*

Олигофрения 7,41 0 0,0782

*р<0,05 **р<0,01

Как видно из таблицы, в выборках больных мужского и женского пола спектр клинических симптомов был практически идентичен. Исключение составляет лишь отсутствие у женщин вегетативных нарушений и олигофрении, которые у больных мужского пола обнаружены в 9,3% и 7,4% случаев соответственно. Показано, что у больных с НМСН 1 X, как мужского, так и женского пола, ядро клинических признаков составили три группы симптомов, характерные для поражении периферических нервов - сухожильная гипо- или арефлексия с нижних и верхних конечностей, расстройства чувствительности и парез мышц дистальных отделов рук и ног.

В 73,2% у пораженных женщин обнаруживалась деформация стоп по типу полых. Наличие фридрейховых стоп выявлено нами лишь у 2,2% женщин, в то время как у больных мужского пола они наблюдались в 22% случаев. У всех больных мужчин и у 78% больных женщин отмечены расстройства чувствительности в зоне пораженных мышц ног. Наиболее часто у больных мужского пола наблюдалось сочетанное снижение поверхностной и проприоцептивной чувствительности в ногах, однако в 25,9% случаев выявлялась гиперестезия стоп, которая в ряде случаев сочеталась с нарушением двумерно пространственного чувства. Наряду с этим отмечена высокая частота встречаемости симптомов спиноцеребеллярной атаксии, нарушения проприоцептивной чувствительности в ногах, фасцикулярного тремора кистей и фасцикулляций мышц тазового и плечевого пояса, наличие которых свидетельствовало о заинтересованности мотонейронов передних рогов и проводящих путей задних столбов спинного мозга.

Эти данные позволяют предположить, что морфологический дефект при НМСН 1 X типа не ограничивается поражением только периферических нервов, но может быть более генерализованным с распространением поражения на структуры ЦНС. В пользу этого свидетельствуют также выявленные нами симптомы поражения черепно-мозговых нервов (3, 7 и 8 пары) и выраженные вегетативные расстройства, обнаруженные нами у 16,7% и 9,3% больных мужского пола соответственно. Наряду с этим у 1,8% больных мужского пола

обнаружена также недифференцированная олигофрения в степени глубокой дебильности или имбецильности.

У больных женщин симптомы поражения ЦНС обнаруживались значительно реже и характеризовались только нарушением черепно-мозговой иннервации у 2,44% больных. Полученные результаты можно объяснить на основании данных морфологических и иммунохимических исследований, свидетельствующих о наличии экспрессии Сх32 не только в структурах миелиновой оболочки, но и в олигодендроцитах 1ЩС. Исследования ряда авторов показали, что у части больных с НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в гене 01В1, прежде всего, таких как '№24С, А39У,

Т551, Т55Я, У631, У120Е, Ы31Р, 11142(2 могут наблюдаться клинические симптомы поражения ЦНС, или изменения вызванных стволовых потенциалов при проведении стимуляционной электронейромиографии. В обследованной нами выборке больных с НМСН 1 X типа симптомы поражения различных структур ЦНС выявлены у больных с наличием пяти миссенс-мутаций: М34К, \V44C, С53У, 11142(3, Е208К, а также комплексной перестройки 120Ы;С218.

Таким образом, в результате проведенного нами исследования обнаружены различия в спектре и частоте встречаемости значительного числа клинических признаков у больных НМСН 1 X мужского и женского пола.

Показано, что тяжесть течения и степень поражения периферических нервов у больных женского пола существенно менее выражена. Более чем треть носительниц мутации считали себя практически здоровыми, а симптомы поражения периферических нервов выявлялось у них только при тщательном клиническом осмотре или проведении ЭНМГ исследования. Выявленные различия могут быть связаны, как с модифицирующим влиянием нормальной копии гена С1В1 Х-хромосомы, так и с особенностями патогенетических механизмов аллельных вариантов заболевания.

3. Клинические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленные миссенс-мутациями, приводящими к нарушению аминокислотной

последовательности отдельных доменов Сх32.

Учитывая результаты экспериментальных исследований, показавших, что отдельным доменам Сх32 принадлежит различная роль в функционировании ионного канала глии, нами проведен анализ особенностей клинических проявлений заболевания у больных с мутациями в гене ОЛ31, приводящими к изменению аминокислотной последовательности отдельных белковых доменов. Анализировались особенности фенотипа и течения заболевания в 8 группах больных с миссенс-мутациями, нарушающими структуру 1-4 трансмембранных доменов, 1 и 2 экстрацеллюлярных петель, интрацеллюлярной петли и С-концевого участка.

При изучении возраста начала заболевания показано, что во всех обследуемых группах больных он широко варьировал - от 5 до 67 лет. Достоверные различия показателей среднего возраста начала заболевания обнаружены только в группах больных, с нарушением структуры ТМ1 и ТМЗ доменов. При патологии ТМЗ заболевание достоверно чаще возникает в более раннем возрасте (средний возраст манифестации составил 10,88 ± 3,44), в то время как при нарушении структуры ТМ1 отмечается более поздний дебют (средний возраст начала - 26,22 ± 11,34).

При анализе фенотипических проявлений в сформированных группах больных выявлен ряд достоверных различий в спектре и частоте встречаемости отдельных клинических признаков, свидетельствующих о различии тяжести течения заболевания (таблица 6).

Показано, что НМСН 1 X, обусловленная мутациями, нарушающими структуру первого и второго трансмембранных доменов (ТМ1, ТМ2), а также интрацеллюлярной петли (1С) характеризуется не резко выраженными клиническими симптомами и умеренным темпом прогрессирования заболевания.

Таблица 6. Частота встречаемости клинических симптомов в группах больных НМСН 1 X типа, с миссенс-мутациями нарушающими структуру отдельных

доменов.

Наименование симптома ТМ1 ТМ2 тмз ЕС1 ЕС2 1С С-конец

Количество больных 29 6 и 13 25 5 4

Деформация стоп по типу фридрейховых 0 0 36,4 15,4 20,0 0 0

полых 89,7 83,3 54,5 46,1 52,0 80,0 25,0

эквиноварусных 0 0 9,1 15,4 4,0 20,0 75,0

Гиностезия стоп 13,8 83,3 72,7 53,8 60,0 60,0 100,0

Гипостезия кистей 6,9 33,3 72,7 38,5 40,0 20,0 0

Гиперестезия стоп 34,5 16,7 0 0 28,0 40,0 0

Гиперестезия кистей 17,2 50,0 0 0 20,0 40,0 100,0

Нарушение проприоцептивной чувствительное! и в ногах 13,8 50,0 63,6 84,6 20,0 0 100,0

в руках 0 16,7 63,6 69,2 8,0 0 0

Отсутствие/снижение ахилловых рефлексов 48,3 100,0 100,0 76,9 100,0 100,0 100,0

коленных рефлексов 69,0 66,7 72,7 61,5 72,0 40,0 100,0

рефлекса с двуглавой мышцы 10,3 0 45,4 38,5 44,0 20,0 50,0

карпорадиального рефлекса 41,4 83,3 72,7 69,2 76,0 80,0 100,0

Деформация кистей 10,3 0 27,3 46,1 32,00 40,00 0

Гипотрофия мышц кистей 10,3 16,7 72,7 61,5 52,0 60,0 0

Степпаж 27,6 16,7 100,0 76,9 64,0 80,0 100,0

Интенционный тремор кистей 10,3 50,0 9,1 38,5 40,0 40,0 100,0

Фасцикулярный тремор кистей 27,6 0 45,4 84,6 56,0 20,0

Фасцикуляция мышц 24,1 16,7 9,1 30,7 52,0 25,0

Спиномозжечковая атаксия 44,8 50,0 72,7 84,6 80,0 40,0 100,0

Нарушение черепно-мозговой иннервации 6,9 0 36,4 23,01 0,0 0 25,0

Гипотрофия мышц голени 10,3 0 72,7 0 0 20,0 100,0

Гипертрофия икроножных мышц 13,8 0 0 0 0 0 0

Вегетативные нарушения 0 0 27,3 7,69 4,00 0 0

Олигофрения 0 0 36,4 0 0 0 0

Особенностью клинической картины больных с патологией ТМ1 явилось формирование компенсаторной гипертрофии икроножных мышц, которая наблюдалась 13,8% больных. Наряду с этим у больных с патологией ТМ1, ТМ2 и 1С достоверно чаще, по сравнению с больными из других групп, отмечалось наличие гиперестезии в зоне пораженных мышц кистей и стоп, что также

может свидетельствовать об отсутствии тяжелого поражения периферических нервов. Необходимо отметить, что при нарушении структуры 1С петли у больных мужского и женского пола выраженность клинических проявлений НМСН 1 X гипа была сходной. Показано, что увеличение тяжесги клинических проявлений заболевания не отмечалось даже наличие мутации сдвига рамки считывания в области ТМ1.

Наиболее выраженные симптомы заболевания обнаружены у больных с нарушением аминокислотного состава ТМЗ и ЕС доменов, а также в С-концевом участке Сх32. У 72,7% больных с патологией ТМЗ домена патологический процесс носил более генерализованный характер и распространялся на мышцы голени, а у 81,8% больных в патологический процесс вовлекались мышц кистей. Нами не выявлено достоверных различий в группах больных с патологией ЕС1 и ЕС2. Хотя в группе больных с нарушением структуры ЕС2 домена достаточно часто выявлялась гиперестезия в кистях и стопах, в то время как у больных с нарушением структуры ЕС1 домена этого обнаружено не было. Также у больных с НМСН 1 X типа, с патологией ЕС1 достоверно чаще наблюдалось нарушение проприоцептивной чувствительности в области пораженных мышц кистей и стоп, и у 23% больных выявлялись симптомы поражения черепно-мозговых нервов, которых ни у одного больного с патологией ЕС2 домена зарегистрировано не было.

При нарушении структуры ТМЗ и ЕС доменов достоверно чаще обнаруживались симптомы поражения ЦНС в виде спинно-церебеллярной атаксии, фасцикулярного тремора кистей, нарушение проприоцептивной чувствительности, нарушение черепно-мозговой иннервации. Наибольшая выраженность клинических проявлений НМСН 1 X наблюдалось у больных обоего пола при патологии С-конца белковой молекулы. Так у всех обследованных больных выраженные клинические проявления заболевания, характеризующиеся выраженным парезом стоп, приводящим к их деформации, выраженные расстройства поверхностной и глубокой чувствительности в ногах, сухожильная гипо- и арефлексия, гипотрофия мышц голеней, признаки спиноцеребеллярной атаксии. Поражение мышц рук в этой группе больных

было выражено менее резко и характеризовалось умеренным парезом, не приводящим к деформации кистей

Полученные результаты можно объяснить с точки зрения наибольшей значимости ТМЗ, ЕС и С-концевого доменов в функционировании щелевого соединения и ионного канала глии. В последние годы в экспериментальных исследованиях показано, что именно за счет аминокислотных остатков ТМЗ происходит формирование поры ионного канала глии, ЕС домены обеспечивают сохранность структуры канала и регуляцию процессов его открытия, а обеспечение процессов олигомеризации Сх32 и внутри- и межклеточного обмена кальция осуществляется главным образом за счет С-концевого участка белка. Для оценки значимости отдельных аминокислотных остатков полипептидной цепи Сх32 в функционировании щелевых соединений нами проведен анализ особенностей фенотипических проявлений у больных с наличием некоторых мисенс-мутаций в отдельных белковых доменах. Установлено, что наибольшая тяжесть клинических проявлений наблюдается у больных с наличием мутаций ,»,44С, \V44G, С53У, Ш42<2, У181У, Я183II, Е186К, Е208К, а наименьшая при мутациях С>8(Ж, У840, М93У, А97Р, Ш07\У, Я142У, Р193К.

С целью изучения динамики формирования клинического фенотипа и оценки размаха внутрисемейного полиморфизма нами обследовано две семьи с сегрегацией заболевания в нескольких поколениях с миссенс-мутациями 111420 и 111640.

В семье М-х (миссенс-мутация И. 164(3),с наличием 22 пораженных в пяти поколениях (10 из которых были обследованы лично) показано существование выраженного внутрисемейного клинического полиморфизма, касающегося, как различий фенотипических проявлений у больных мужского пола, так и тяжеста клинического течения у больных мужчин. Симптомы заболевания у 2 женщин-носительниц патологической мутации (IV10 и 1У14) были выражены не значительно и выявлялись только при клиническом осмотре.

Типичными клиническими симптомами заболевания, выявленными у всех больных мужчин в данной семье, были снижение рефлекса с ахилловых

сухожилий, атаксия, фасцикулляции и фасцикулярный тремор. Полиморфизм клинических проявлений характеризовался, прежде всего, различиями в характере и выраженности чувствительных нарушений, типе деформации стоп и наличии деформации кистей. Так, у трех обследованных больных пожилого возраста, имеющих значительную длительность течения заболевания, типичными расстройствами чувствительности были гипостезии кистей и стоп, в то время как у больных молодого возраста с незначительной длительностью течения заболевания наблюдалась гиперестезия в зоне пораженных мышц. Можно предположить, что гиперестезия является первым, часто не диагностируемым, симптомом чувствительных нарушений, обусловленным раздражением периферических нервов. Необходимо отметить, что для этого аллельного варианта НМСН 1 X не характерно возникновение расстройств глубокой чувствительности.

Наряду с этим нами описаны клинические характеристики аллельных вариантов НМСН 1 X типа, обусловленные тремя вновь выявленными мутациями в гене С1В1 - \V44C, '№440 и 2ЫеЮ.

В двух семьях обнаружены миссенс-мутации в одном и том же кодоне, которые характеризовались транзицией Т на в в 130 положении и б на С в 131 положении и приводили к замене триптофана в полипептидной цепи Сх32 в одном случае на цистеин, а в другом - на глицин. Анализ клинических проявлений этого генетического варианта НМСН 1 X типа показал, что у больных мужского пола отмечается значительная тяжесть клинических проявлений заболевания, характеризующаяся выраженным парезом стоп и кистей, приводящим к их деформации, нарушением поверхностной и глубокой чувствительности, признаками сенситивно-мозжечковой атаксии и симптомами поражения периферического мотонейрона. Различия тяжести течения заболевания отмечены только у больных женского пола. Так при наличие мутации 13Ю>С у больных женщин отмечалась значительная выраженность клинических симптомов, в то время как больная с наличием мутации 130 Т>С жалоб не предъявляла и считала себя практически здоровой. При ее клиническом осмотре отмечался легкий парез стоп, отсутствие ахилловых

рефлексов и снижение коленных рефлексов, фасцикулярный тремор кистей и легкие координаторные расстройства, выявляемые при проведении сенсибилизированной пробы Ромберга.

Эти данные являются дополнительным доказательством значимости отдельных аминокислотных остатков полипептидной цепи Сх32, замена которых может приводить к различной степени выраженности нарушений функционирования щелевых соединений в миелиновой оболочке периферических нервов.

Нами проведен также анализ особенностей фенотипа еще одного вновь выявленного генетического варианта НМСН 1 X, обусловленного однонуклеотидной делецией - 62с1еЮ - в области гена, кодирующей ТМ1 домен. Наличие этой мутации приводит к сдвигу рамки считывания и образованию кодона терминирующего транскрипцию после 83 аминокислотного остатка. Под нашим наблюдением находилась семья С-ко с сегрегацией заболевания в трех поколениях. Проведено неврологическое обследование 4 больных членов семьи (3 женщин и 1 мужчины). Первые признаки заболевания у пробанда (мужчина в возрасте 26 лет на момент осмотра) появились в возрасте 17 лет и характеризовались слабостью стоп, болями в области икроножных мышц и частыми подвывихами в голеностопных суставах. При осмотре пробанда - 26-летнего мужчины, выявлены типичные симптомы полинейропатии, симптомы спиноцеребеллярной атаксии и вегетативные нарушения. Клинические симптомы и темп прогрессирования заболевания были выражены умеренно и не приводили к потере трудоспособности больного. Особенностью клинических проявлений заболевания у пробанда была асимметрия поражения, с превалированием симптомов в правой нижней конечности. При проведении ЭНМГ обследования больного обнаружено снижение скорости проведения импульса по срединному нерву до 35 м/ сек. Носители патологической мутации женского пола (мать пробанда и две его сестры в возрасте от 16 до 46 лет) жалоб не предъявляли и считали себя практически здоровыми. Слабо выраженные признаки полинейропатии обнаружены у них только при клиническом осмотре и

скорости проведения импульса по срединному нерву не значительно отличались от контрольных цифр. Таким образом, нами впервые показано, что мутации сдвигающие рамку считывания в области первых двух ТМ доменов не всегда приводят к появлению выраженного фенотипа заболевания. Можно предположить, что большое значение при прогнозировании характера течения заболевания имеет локализация мутации в гене ОЛ31.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ спектра и частоты встречаемости различных типов мутаций в гене СЛ31 проведенный у больных с НМСН 1 X из популяции РФ подтвердил существование выраженной аллельной гетерогенности заболевания. Наряду с ранее описанными мутациями нами выявлено десять новых мутаций в кодирующей части гена ОГО1 (7 миссенс-мутаций - "№2411, ЧЛЧ4С>, \У44С, С53У, У84в, А97Р, Г193К и 3 делеции со сдвигом рамки считывания - 62с1еЮ, 606ёе1С, 784-785с1е1АТ) и одна мутация в сайте сплайсинга (1УБ1+2Т->С), и описаны особенности их клинических характеристик. Сравнительный анализ частоты встречаемости отдельных клинических симптомов заболевания в группах больных с миссенс-мутациями в гене ОХВ1, нарушающими структуру восьми доменов Сх32 позволил выявить наличие особенностей фенотипических проявлений и тяжести течения аллельных вариантов НМСН 1 X. Полученные результаты позволили высказать предположение о различной функциональной значимости отдельных белковых доменов Сх32 и возможности прогнозирования тяжести течения заболевания при обнаружении миссенс-мутаций в гене ОЛ31. Установлено, что наименьшая тяжесть клинических проявлений наблюдается при мутациях, нарушающих аминокислотную последовательность первого ТМ и ТС доменов, а наибольшая - при нарушении аминокислотой последовательности С-концевого участка, второго ЕС и третьего ТМ доменов. Также показано, что при миссенс-мутациях М34К, \V44C, С53У, II 142(2, Е208К и 120ТЧ;0218 наряду с типичными клиническими проявлениями периферической полинейропатии могут возникать симптомы поражения различных структур ЦНС. Установлено, что при наличии

большинства миссенс-мутаций в гене ОХВ1 [яжесть течения заболевания у больных мужчин выражена значительно больше, чем у больных женского пола, что можно объяснить модифицирующим влиянием генов второй X хромосомы. Исключение составляют лишь генетические варианты, обусловленные мутациями W44C, У91М, 11142(3, Е208К, при которых у пораженных женщин может наблюдаться выраженная картина заболевания. Полученные результаты позволяют оптимизировать процесс постановки диагноза НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола, повысить эффективность проведения медико-генетического консультирования отягощенных семей и прогнозировать тяжесть течения заболевания у больных различными аллельными вариантами НМСН 1 X типа.

выводы

1. Определены спектр и частота встречаемости мутаций в гене вХВ 1 у больных с НМСН 1 X типа из популяции Центральной России. Показано, что наиболее распространенным типом мутаций являются миссенс-мутации в кодирующей части гена, на долю которых приходится 87,1% всех выявленных мутаций. Делеции со сдвигом рамки считывания обнаружены у 9,7% семей и в одной ссмье (3,2%) идентифицирована мутация сайта сплайсинга.

2. Выявлены различия частот встречаемости мутаций, нарушающих аминокислотную последовательность различных доменов Сх32. Показано, что 43,3% мутаций приводят к нарушению структуры трансмембранных доменов, 36,7% - экстрацеллюлярных доменов и 20% - интрацеллюлярных доменов.

3. Существуют различия тяжести клинических проявлений и течения НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола. Показано, что у подавляющего числа больных женщин отмечается меньшая выраженность клинических проявлений заболевания. Значительная тяжесть клинического течения заболевания у женщин отмечается только при миссенс-мутациях W44C, У91М, Я142С), Е208К, нарушающих структуру ТМ2, ТМЗ доменов и С-конца белковой молекулы соответственно.

4. Выявлены особенности тяжести клинических проявлений и течения НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями, приводящими к нарушению структуры отдельных доменов Сх32. Наибольшая тяжесть течения заболевания отмечается при изменение аминокислотной последовательности С-концевого участка, второй ЕС петли и третьего ТМ доменов, а наименьшая - 1С и ТМ1и ТМ2 белковых доменов.

5. Показано, что у больных мужского и женского пола с наличием миссенс-мутаций М34К, \У44С, С53У, Е208К и 120Ы;0218 наряду с типичными клиническими проявлениями периферической полинейропатии отмечаются симптомы поражения различных структур ЦНС (мотонейронов передних рогов спинного мозга, ядер черепно-мозговых нервов, проводящих путей задних столбов спинного мозга). У 3 больных мужского пола с мутацией II 142(3 выявлена также олигофрения различной степени выраженности.

6 Описаны клинические характеристики аллельных вариантов НМСН 1 X типа, обусловленных тремя вновь выявленными мутациями в гене С1В1. Показано, что делеция со сдвигом рамки считывания 62<1еЮ в области первого ТМ домена приводит к появлению умеренно выраженных клинических симптомов полинейропатии, наличие миссенс-мутации и >^440 приводит к

появлению выраженных клинических симптомов у больных мужского пола, а при мутации АУ44С и женского пола.

Практические рекомендации:

1. Результаты изучения особенностей спектра клинических проявлений и размаха клинического полиморфизма различных генетических вариантов НМСН 1 X типа позволят повысить эффективность работы практических врачей, занимающихся проблемами наследственных болезней нервной системы.

2. Выявленные особенности пенетрантности и экспрессивности мутантного гена 01В1 у лиц женского пола позволит совершенствовать процесс выявления носителей мутации на доклинической стадии и осуществить своевременную профилактику возникновения повторных случаев заболевания в отягощенных семьях.

3. Предложенная модель изучения особенностей фенотипических проявлений отдельных аллельных вариантов наследственных болезней может быть использована для широкого круга нейрогередитарной патологии.

Список работ опубликованных по теме диссертации:

1. Дадали Е Л., Угаров И.В., Шаркова И.В., Кириленко. Проблемы классификации наследственных полинейропатий. // Медицинская генетика. -2003.- № 5,- с. 194-200.

2. Шаркова И.В., Дадали Е.Л., Поляков А.В., Барышникова Н.В., Наследственная моторно-сенсорная нейропатия 1 X типа. // Медицинская генетика. - 2004 - № 3. - с. 113-118.

3. Дадали Е.Л., Шаркова И.В., Федотов В.П., Мерсиянова И.В., Евдокименков В.Н., Барышникова Н.В., Поляков А.В. Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии 1 X типа (НМСН 1 X).// Медицинская генетика. - 2004. - № 6. - с. 235-241.

4. Кириленко Н.Б., Дадали Е Л, Федотов В.П., Мерсиянова И.А., Шаркова И.В., Тверская С.М., Поляков А.В. Новый аллельный вариант наследственной моторно-сенсорной нейропатии 1 X типа, обусловленный мутацией 62Gde1 в гене GJB1. // Медицинская генетика. - 2004. - № 7. - с. 321-324.

5. Dadali Е., Mersijanova I., Poliakov A., Fedotov V., Kirilenko N., Sharkova I., N. Baryshnikova. Novel GJB1 mutation associated with mild phenotype CMT 1 X disease. // Eur. J. Hum Genet. - 2004. - V.12. - P. 239-240

6. A. Poliakov, I. Mersijanova, E. Dadali, V. Fedotov, I. Sharkova, N. Kirilenko, N. Baryshnikova. The spectrum of mutations CMT 1 X patients from Russia. // Eur. J. Hum. Genet. - 2004. - V. 12. - P. 239.

ОСОБЫЕ ЗАМЕТКИ

Отпечатано в копицентре Москва, Ленинские горы, МГУ, 1 Гуманитарный корпус. www.stprint.ru e-mail: zakaz@stprint.ru тел. 939-3338 Заказ № 76 тираж 100 экз. Подписано в печать 21.10.2004 г.

РНБ Русский фонд

2006-4 18004

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шаркова, Инна Валентиновна

ВВЕДЕНИЕ

СОДЕРЖАНИЕ:

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.История изучения и классификация наследственных полинейропатий.стр.

1.2.Клинико-морфологические особенности НМСН.стр.

1.3.Клинико-генетическая характеристика НМСН, наследующихся сцеплено с Х-хромосомой.стр.

1.3.1. Характеристика клинических проявлений Х-сцепленных НМСН.стр.

1.3.2.Этиопатогенез НМСН 1 Хтипа.стр.

1.3.3.Клиническая характеристика НМСН 1 X типа.стр.

1.3.4.Электоронейромиографические характеристики

НМСН 1 X типа.стр.

1.3.5.Морфологические особенности НМСН 1 X типа.стр.

1.3.6. Клинико-генетические корреляции при НМСН 1 X типа.стр.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1.Характеристика исследуемой группы больных.стр.

2.2.Методы ЭНМГ-исследования.стр.

2.3.Методы молекулярно-генетической диагностики.стр.

2.4.Методы статистической обработки.стр.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Молекулярно-генетическая характеристика аллельных вариантов НМСН 1 X типа.стр.

3.2.Клинические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленной мутациями в гене GJB1 .стр.

3.3.Клинико-генетические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленные миссенс-мутациями, приводящими к нарушению аминокислотной последовательности трансмембранных (ТМ) доменов

Сх32.стр.

3.3.1.Спектр мутаций в гене GJB1, нарушающих аминокислотную последовательность ТМ доменов.стр.

3.3.2.Особенности клинических проявлений НМСН 1 X типа при миссенс-мутациях, нарушающих структуру 1-4 ТМ доменов.стр.

3.3.3.Особенности клинических проявлений у больных с НМСН 1 X типа с наличием миссенс-мутаций в области первого ТМ домена.стр.

3.3.4.Особенности клинических проявлений у больных с НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в области гена GJB1, кодирующего второй ТМ домен Сх32.стр.

3.3.5.Особенности клинических проявлений у больных с НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в области гена GJB1, кодирующего третий ТМ домен.стр.

3.3.6.Сравнительный анализ особенностей клинических проявлений у больных с НМСН 1 X типа с миссенс-мутациями, нарушающими структуру ТМ1 и ТМЗ доменов Сх32.стр.

3.3.7.Особенности клинических проявлений НМСН 1 X, обусловленной точковой делецией - 62delG - в области гена GJB1, кодирующей ТМ1.стр.

3.4.Клинико-генетические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленные миссенс-мутациями, нарушающими аминокислотную последовательность экстрацеллюлярных (ЕС) доменов.стр.

3.4.1.Анализ мутаций в гене GJB1, нарушающих аминокислотную последовательность ЕС доменов.стр.

3.4.2.Сравнительный анализ особенностей клинических проявлений НМСН 1 X типа, обусловленной изменениями аминокислотной последовательности 1 и 2 ЕС доменов.стр.

3.4.3.Сравнительный анализ особенностей клинических проявлений у больных с НМСН 1 X типа с миссенс-мутациями, нарушающими структуру ЕС и ТМ доменов Сх32.стр.

3.5.Клинико-генетические характеристики НМСН 1 X типа, обусловленные нарушением аминокислотной последовательности 2 и 3 1С доменов.стр.

3.5.1.Анализ мутаций в гене GJB1, нарушающих аминокислотную последовательность 1С доменов.стр.

3.5.2.Анализ особенностей клинических проявлений НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в гене GJB1, нарушающими аминокислотную последовательность 1С доменов.стр.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа"

Актуальность исследования

Наследственная моторно-сенсорная нейропатия 1 X типа (НМСН 1 X) - одна из наиболее распространенных форм наследственных демиелинизирующих полинейропатий, на долю которой приходится около 20% от всех генетических вариантов этой группы болезней [Дадали E.JL, 1999, Hanemann С., 2003]. Заболевание наследуется по X-сцепленному доминантному типу [Herringham W.P., 1889, McMillan J.C., 1994] и обусловлено мутациями в гене gap junction В1 type (GJB1) [Bergoffen J., 1993], продуктом которого является коннексин 32 (Сх32) [Beckett J., 1985]. Этот белок участвует в формировании щелевых соединений и ионных каналов глии, посредством которых обеспечиваются прямые контакты между различными слоями шванновских клеток миелиновой оболочки периферических нервов, а также сальтаторный характер проведения возбуждения по периферическим нервам [Katz, 1966, Fishman G., 1991, Bruzzone R., 1994]. К настоящему времени идентифицировано более 230 различных мутаций в гене GJB1 и их поиск продолжается [Nelis Е., 2004]. Известно, что Сх32 содержит 9 доменов, которым отводится различная роль в формировании щелевого соединения и ионного канала в миелиновой оболочке [Falk М., 1994, Evans W., 1994, Goodenough D., 1996, Martin P., 2000, VanSlyke J., 2000]. He многочисленные работы, посвященные изучению клинико-генетических корреляций, позволяют предположить, что мутации в гене GJB1, приводящие к нарушению структуры отдельных белковых доменов, могут обуславливать особенности формирования патогенетических механизмов и клинических проявлений НМСН 1 X типа [Ionasescu V., 1996, Martin P., 2000]. Выявление таких особенностей при различных аллельных вариантах НМСН 1 X типа позволит определить функциональную значимость отдельных доменов белка в формировании щелевых соединений и составить представление

0 патофункциональной карте Сх32, а также прогнозировать тяжесть течения и оптимизировать процесс проведение медико-генетического консультирования отягощенных семей.

Цель исследования

Целью исследования является изучение особенностей клинических проявлений НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола, а также аллельных вариантов, обусловленных мутациями в гене GJB1, нарушающими структуру отдельных доменов Сх32.

Для осуществления поставленной цели решались следующие задачи;

1. Определить частоту встречаемости аллельных вариантов НМСН 1 X типа, обусловленных нарушением функционирования трех основных групп доменов Сх32.

2. Проанализировать особенности фенотипических проявлений у больных мужского и женского пола с НМСН 1 X типа при различных мутациях в гене GJB1.

4. Проследить динамику формирования клинического фенотипа НМСН

1 X типа, обусловленного изменением аминокислотной последовательности первого и третьего трансмембранных доменов Сх32.

Научная новизна

Впервые в выборке больных с НМСН 1 X типа из популяции РФ проведен анализ спектра и частот встречаемости мутаций в гене GJB1. Идентифицировано семь ранее не описанных миссенс-мутаций (W24R, W44Q, W44C, C53Y, V84G, А97Р, F193K), три делеции (62delG,

606delC, 784-785delAT), не кратные трем нуклеотидам, и одна мутация в сайте сплайсинга (IVS1+2T->C), и описаны особенности неврологических проявлений у больных с вновь выявленными аллельными вариантами заболевания (W44G, W44C, 62delG). Впервые выявлены различия тяжести клинического течения НМСН 1 X типа, обусловленной миссенс-мутациями в гене GJB1, нарушающими структуру восьми доменов Сх32 и высказано предположение об их различной функциональной значимости. Выявлены различия тяжести течения заболевания у больных мужского и женского пола. Показано, что у большинства пораженных женщин отмечается значительно меньшая тяжесть течения НМСН 1 X, а у трети носительниц мутаций симптомы заболевания выявляются только при клиническом осмотре. Впервые показано, что у больных женщин значительная тяжесть течения заболевания может наблюдаться при наличие четырех мутаций - W44C, R142Q, V91M, Е208К - в гене GJB1.

Практическая значимость работы

Проведено медико-генетическое консультирование 31 семьи с НМСН 1 X типа, в ходе которого уточнен генетический статус 104 человек. На основании неврологического осмотра и молекулярно-генетического анализа выявлено 17 носителей мутаций в гене GJB1, не предъявляющих жалоб и осуществлены профилактические мероприятия, направленные на предотвращение появления у них больного потомства. Результаты проведенного исследования могут быть использованы в практической работе врачей-генетиков и неврологов, работающих в области наследственной патологии нервной системы.

Положения, выдвигаемые на защиту

1. Частоты встречаемости и спектр мутаций в гене GJB1 у больных НМСН 1 X типа из популяции Центральной России сходны с таковыми в выборке из различных популяций мира. Наиболее часто обнаруживаются миссенс-мутации в кодирующей части гена, на долю которых приходится 87,1% всех выявленных мутаций. Наибольшее количество мутаций локализуется в трансмембранных (ТМ) и экстрацеллюлярных (ЕС) доменах, а наименьшее в области С-концевого участка белка.

3. Существуют различия степени выраженности НМСН 1 X, обусловленной мутациями изменяющими структуру отдельных белковых доменов Сх32. Наибольшая тяжесть течения НМСН 1 X типа наблюдается при нарушении аминокислотой последовательности С-концевого участка, второго экстрацеллюлярного (ЕС2) и третьего трансмембранного (ТМЗ) доменов, а наименьшая - интрацеллюлярного (1С) и первого трансмембранного (ТМ1) белковых доменов. Показано, что даже наличие делеции в ТМ1 приводит к появлению умеренно выраженных клинических симптомов полинейропатии.

4. При аллельных вариантах НМСН 1 X типа, обусловленных миссенс-мутациями - М34К, W44C, C53Y, R142Q, Е208К и I20N;G21S, наряду с типичными клиническими проявлениями периферической полинейропатии могут возникать симптомы поражения различных структур ЦНС.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены на европейской конференции «Генетика человека» в июне 2004 года, Мюнхен, Германия и совместной конференции кафедры генетики МБФ ГОУ ВПО РГМУ и научно-консультативного отдела ГУ МГНЦ РАМН в мае 2004 года.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, изложения полученных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 131 странице машинописного текста и содержит 22 таблицы, 12 рисунков. Библиографический указатель включает 201 наименование источников, из них 15 отечественных и 186 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Шаркова, Инна Валентиновна

выводы

1. Определены спектр и частота встречаемости мутаций в гене GJB1 у больных с НМСН 1 X типа из популяции Центральной России. Показано, что наиболее распространенным типом мутаций являются миссенс-мутации в кодирующей части гена, на долю которых приходится 87,1% всех выявленных мутаций. Делеции со сдвигом рамки считывания обнаружены у 9,7% семей и в одной семье (3,2%) идентифицирована мутация сайта сплайсинга.

3. Существуют различия тяжести клинических проявлений и течения НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола. Показано, что у подавляющего числа больных женщин отмечается меньшая выраженность клинических проявлений заболевания. Значительная тяжесть клинического течения заболевания у женщин отмечается только при миссенс-мутациях W44G, V91M, R142Q, Е208К, нарушающих структуру ЕС1, ТМ2, ТМЗ доменов и С-конца белковой молекулы соответственно.

4. Выявлены особенности тяжести клинических проявлений и течения НМСН 1 X, обусловленной миссенс-мутациями, приводящими к нарушению структуры отдельных доменов Сх32. Установлено, что наибольшая тяжесть течения заболевания отмечается при изменении аминокислотной последовательности С-концевого участка, ЕС2 и ТМЗ доменов, а наименьшая - 1С и ТМ1и ТМ2 белковых доменов.

5. Показано, что у больных мужского и женского пола с наличием миссенс-мутаций Т44С, М34К, C53Y, Е208К и I20N;G21S наряду с типичными клиническими проявлениями периферической полинейропатии отмечаются симптомы поражения различных структур ЦНС (мотонейронов передних рогов спинного мозга, ядер черепно-мозговых нервов, проводящих путей задних столбов спинного мозга). Наряду с этим у троих больных мужского пола с мутацией R142Q отмечалась олигофрения различной степени выраженности.

6. Описаны клинические характеристики аллельных вариантов НМСН 1 X типа, обусловленных тремя вновь выявленными мутациями в гене GJB1. Показано, что делеция со сдвигом рамки считывания 62delG в области первого ТМ домена приводит к появлению умеренно выраженных клинических симптомов полинейропатии, а наличие миссенс-мутации W44C и W44G обуславливает значительную тяжесть клинических симптомов у больных мужского пола, а при мутации W44C и женского пола.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В результате изучения выборки из 104 больных с НМСН 1 X типа из российской популяции проведен анализ частоты встречаемости различных мутаций в гене GJB1, а также особенностей клинической картины аллельных вариантов, обусловленных нарушением структуры восьми доменов Сх32. Показано, что, как и в большинстве популяций, в российской выборке больных с НМСН 1 X типа наиболее часто обнаруживаются миссенс-мутации в кодирующей части гена, на долю которых приходится 87,1%. В 9,7 % случаев встречаются делеции приводящие к сдвигу рамки считывания. В отличие от литературных данных, в обследованной нами выборке больных не встретилось нонсенс мутаций, а также делеций и инсерций, кратных трем нуклеотидам, которые выявлены у 7,4%, 3,4% и 0,9% соответственно в общей выборке больных с НМСН 1 X типа из других популяций. Подтверждено существование выраженной аллельной гетерогенности заболевания. Показаны различия частот встречаемости мутаций, изменяющих аминокислотную последовательность различных доменов Сх32. Так, наибольшее количество мутаций обнаружено в области гена GJB1, кодирующей трансмембранные домены, а наименьшее интрацеллюлярные домены. При анализе частот встречаемости мутаций в отдельных доменах белка показано, что по 16,7% всех выявленных мутаций обнаружено в области ТМ1 и 1С, по 10% в области ТМ2, ТМЗ и ЕС1, 6,6 % - в области ТМ4, 26,7% в области ЕС2 домена и 3,3% в С-концевом участке Сх32.

Большинство миссенс-мутаций в гене GJB1, обнаруженных в нашей выборке больных, были описаны в литературе. Наряду с этим, нами обнаружены три, ранее не описанные делеции - 62delG, 606delC, 784-785delAT и семь миссенс-мутаций в кодирующей части гена -W24R, W44G, W44C, C53Y, V84G, А97Р, F193K, а так же одна мутация в сайте сплайсинга - IVS1+2T->C.

Анализ особенностей фенотипических проявлений у больных обследуемой выборки позволил выявить значительный размах клинического полиморфизма заболевания. Показано, что наряду с характерными симптомами поражения периферических нервов у значительной части больных отмечаются признаки дисфункции различных структур ЦНС, прежде всего, мотонейронов спинного мозга, задних столбов и ядер 3, 7 и 8 пар черепно-мозговых нервов. Наряду с этим, у трех больных мужского пола, из семьи с сегрегацией мутации R142Q, выявлялась олигофрения различной степени. Наиболее часто заинтересованность структур ЦНС наблюдалась у больных с миссенс-мутациями W44C, М34К, C53Y, R142Q, Е208К, а так же у больных с наличием комплексной перестойки I20N;G21S. Полученные результаты можно объяснить экспрессией Сх32 не только в структурах миелина периферических нервов, но и в олигодендроцитах.

На основании изучения особенностей клинических проявлений НМСН 1 X типа у членов нескольких больших семей с сегрегаций заболевания в двух и более поколениях показано наличие выраженного внутрисемейного полиморфизма и прослежена динамика формирования фенотипа заболевания.

Наибольшая тяжесть течения заболевания наблюдалась при нарушении аминокислотной последовательности С-концевого участка, второй ЕС петли и третьего ТМ домена коннексина, а наименьшая - при мутациях, нарушающих структуру 1С и ТМ1.

На основании подсчета частот встречаемости 26 клинических признаков у больных мужского и женского пола выявлены достоверные различия для 16 из них. Показано, что у большинства больных женского пола отмечается значительно меньшая выраженность клинических проявлений заболевания. При этом приблизительно 30% носительниц мутаций в гене жалоб не предъявляли и считали себя практически здоровыми. У части больных женского пола СПИ по срединному нерву превышала 38 м/сек, что приводило к ошибочной диагностике у них аксонального варианта НМСН. Полученные результаты совпадают с данными других исследователей и могут быть обусловлены влиянием нормальной копии гена GJB1 второй Х-хромосомы у женщин.

Наряду с этим, у ряда больных женского пола с мутациями W44C, V91M и R142Q, Е208 отмечены выраженные клинические проявления заболевания, которые могут быть связаны, как с эффектом несбалансированной лайонизации Х-хромосомы, так и значительной функциональной неполноценностью Сх32 при наличии этих мутаций. Результаты проведенного исследования позволяют оптимизировать процесс постановки диагноза НМСН 1 X типа у больных мужского и женского пола, повысить эффективность проведения медико-генетического консультирования отягощенных семей и прогнозировать тяжесть течения заболевания у больных различными аллельными вариантами НМСН 1 X типа.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шаркова, Инна Валентиновна, Москва

1. Бадалян JI.O., Скворцов И. А. Клиническая электронейромиография. М.: Медицина, 1986. 245 с.

2. Бадалян JI.O., Скворцов И.А., Дунаевская Г.Н. и др. О клинической систематике и диагностике полинейропатий. // Ж. невропат, и псих., 1983. 3. - с. 1-9.

3. Гехт Б.М., Ильина И.А. Нервно-мышечные болезни. М.: Медицина, 1982. 352 с.

4. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Перевод с англ. М.: Практика, 1998.

5. Горбунова В.Н. Молекулярные основы медицинской генетики. С.-П.: «Интермедика», 1999. 212 с.

6. Горбунова В.Н., Савельева В.В., Васильева В.В., Красильников В.В. Молекулярная неврология. Заболевания нервно-мышечной системы. С.-П.: «Интермедика», 2000, часть 1. 319 с.

7. Давиденков С. Н. Проблема полиморфизма наследственных болезней нервной системы. Л.: Изд-во ВИЭМ, 1934. 139 с.

8. Дадали Е. Л. Наследственные нервно-мышечные заболевания: диагностика и медико-генетическое консультирование. // Автореф. докт. дисс., М. 1999. 35 с.

9. Дадали Е.Л., Федотов В.П., Исмаилов Ш.М., Мерсиянова И.В., Руденская Г.Е., Барышникова Н. Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии с мутациями в гене коннексина. // Неврологический журнал, 2001, №6, с. 13-17.

10. Иллариошкин С. Н., Иванова-Смоленская И. А., Маркова Е. Д. ДНК-диагностика и медико-генетическое консультирование в неврологии. М.: Мед. информ. агент., 2002. 591 с.

11. Иллариошкин С. Н., Наследственные моногенные заболевания нервной системы: молекулярный анализ и клинические сопоставления.// Автореф. докт. дисс., М. 1997. 35 с.

12. Наследственные болезни нервной системы: руководство для врачей под ред. Ю.Е. Вельтищева, П.А. Темина. М.: Медицина, 1998.

13. Поляков А. В. Стратегия идентификации генетических локусов при гетерогенных менделирующих наследственных заболеваниях // Автореф. докт. дисс., 2002. 47 с.

14. Руденская Г.Е., Шагина И.А., Вассерман Н.Н. Наследственная моторно-сенсорная невропатия с Х-сцепленным доминантным наследованием. // Ж. невропат, и псих. 2001. - т. 10. -с. 8-13.

15. Федотов В.П. Клинико-генетический анализ наследственных моторно сенсорных нейропатий в Воронежской области // Автореф. канд. дисс., Воронеж, 2002. 25 с.

16. Эсбери А.К., Джиллиата Р.У. Заболевания периферической нервной системы. М.: Медицина, 1987. 347с.

17. Abrams С.К., Bennett M.V.L., Verselis V.K., Bargiello T.A. Voltage opens unopposed gap junction hemi channels formed by a connexin 32 mutant associated with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. //Neurobiology, 2002. - V. 99(6). -P.3980-3984.

18. Ahmad S., Diez J.A., George C.H., Evans W.H. Synthesis and assembly of connexins in vitro into homomeric and heteromeric functional gap junction hemichannels. // Biochem. J.- 1999,- V. 339.-P.247-253.

19. Ainsworth P.J., Bolton C.F., Murphy B.C. et al. Genotype/phenotype correlation in affected individuals of a family with a deletion of the entire coding sequence of the connexin32 gene. // Hum. Genet.- 1998. -V. 103,-P. 242-244.1.l

20. Anzini P., Neuberg, D.H., Schachner, et al. Structural abnormalities and deficient maintenance of peripheral nerve myelin in mice lacking the gap junction protein connexin32. // J.Neurosci. -1997.-V. 17.-P. 4545-4551.

21. Aridor M. & Balch W.E. Integration of endoplasmic reticulum signaling in health and disease. // Nat. Med. -1999. -V.5. P.745-751.

22. Bahr M., Andres F., Timmerman V.E. et al. Central visual, acoustic, and motor pathway involvement in a Charcot-Marie-Tooth family with an asn 205-to-ser mutation in the connexin32 gene // J. Neurol. Neurosurg. Psychiat. -1999.-V. 66,- P. 202-206.

23. Balice-Gordon R.J., Bone L.J., Scherer S.S. Functional gap junctions in the Schwann cell myelin sheath // J. Cell Biol. 1998,- V. 142,-P. 1095-1104.

24. Baraitser M. The genetics of neurological disorders. Oxford: Oxford, 1985.-P. 523.

25. Barrio L.C., Suchyna Т., Bargiello T. et all. Gap Junctions Formed by Connexins26 and 32 Alone and in Combination are Differently Affected by Applied Voltage. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. October 1; -V. 88 (19). - P. 8410

26. Beardslee M.A., Laing J.G., Beyer E.C. & Saffitz J.E. Rapid turnover of connexin43 in the adult rat heart. // Circ. Res. -1998. -V. 83.-P. 629-635.

27. Becker D.L., Evans W.H., Green C.R., Warner A. Funcnional-analisis of amino-acid-sequences in connexin43 involed in intercellular communication through gap junctions. // J. Cell Ski. 1995. - V.108. -P. 1455-1467.

28. Becker P.E. Humangenetik; ein kurzes Handbuch. Stuttgart: Thieme (pub.) 5, Part 1: 1966. Pp. 427 only.

29. Beckett J., Holden J. J. A., Simpson N. E. et al. Localization of X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth disease (CMT2) to Xql3. // J. Neurogenet. 1986. - V. 3. - P. 225-231.

30. Beckett J., White B.N., Simpson N.E. et al. A linkage study using DNA markers localizes the gene for X-linked ominant Charcot-Marie-Tooth disease at Xql3-Xq22. (Abstract) // Cytogenet. Cell Genet. -1985.-V. 40.-P. 579.

31. Bergoffen J.,Scherer S.S.,Wang S. et al. Connexin mutations in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Science 1993. - V. 262. -P. 2039-2042.

32. Bei-sha Tang, Wei Luo, Kun Xia et al. A new locus for autosomal dominant Charcot-Marie-Tooth disease type 2 (CMT2L) maps to chromosome 12q24. // Hum Genet. 2004. - V. 114. - P. 527533.

33. Bevans C.G., Kordel M., Rhee S.K., Harris A.L. Isoform composition of connexin channels determines selectivity among second messengers and uncharged molecules. // J. Biol. Chem. 1998. -V. 273.-P. 2808-2816.

34. Bird T.D., Ott. J., Giblett E.R. Evidence for linkage of Charcot-Marie- Tooth neuropathy to the Duffy locus on chromosome 1. // Am. J. Hum. Genet. 1982. - V.34. - P. 388-394.

35. Birouk N., LeGuern E., Maisonobe T. et al. X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with connexin32 mutations: clinical and electrophysiologic study // Neurology. 1998,- V,- 50,- P. 1074-1082.

36. Boitano S., Dirksen E.R., Evans W. H. Sequence specific antibodies to connexins blok intercellular calcium signaling through gap junctions. // Cell Calcium. 1998.-V. 23.- P. 1-9.

37. Bone L.J., Deschenes S.M., Balice-Gordon R.J. et al. Connexin32 and X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Neurobiol. Dis. 1997. - V,-4,-P. 221-230.

38. Bone L.J., Dahl N., Lensch M.W. et all. New connexin32 mutations associated with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Neurology. 1995,- V. 45,- P. 1863-1866.

39. Brodsky J.L. & McCracken A.A. ER-associated and proteasome-mediated protein degradation: how two topologically restricted events came together. // Trends Cell Biol. 1997. - V.7. - P. 151-156.

40. Bruzzone R., White T.W., Paul D.L. Connections with connexins: the molecular basis of direct intercellular signaling. // Eur. J. Biochem.- 1996.-V.- 238, №1.- P.l-27.

41. Bruzzone R., White T.W., Scherer S.S. et al. Null mutations of connexin32 in patients with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Neuron. 1994,- V. -13, №5,- P.1253-1260.

42. Bukauskas F.F., Elfgang C., Willecke K. and Weingart R. Heterotypic gap junction channels (connexin26 connexin32) violate the paradigm of unitary conductance. // Pflugers Arch. - Eur. J. Physiol., -1995. -V. 429. - P. 870-872.

43. Cao F., Eckert R., Elfgang C. et al. A quantitative analysis of connexin-specific permeability differences of gap junctions expressed in HeLa transfectants and Xenopus oocytes. // J. Cell Science. 1998. -V. 111.-P. 31-43.

44. Cascio M., Kumar N.M., Safarik R., & Gilula N.B. Physical characterization of gap junction membrane connexons (hemi-channels) isolated from rat liver. // J. Biol. Chem. 1995. - V.270. - P. 1864318648.

45. Castro C., Gomez-Hernandez J.M., Silander K., Barrio L.C. (Altered formation of hemichannels and gap junction channels caused by C-terminal connexin-32 mutations // J. Neurosci.- 1999.-V. 19. -P. 3752-3760.

46. Chance P.F., Alderson M.K., Leppig K.A. et al. DNA deletion associated with hereditary neuropathy with liability to pressure palsies. // Cell. 1993. -V. 72. - P. 143-151.

47. Cherryson A.K., Yeung L., Dennerson M.L., Nicholson G.A. Mutational studies in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease (CMTX) // Am.J. hum. genet. 1994. - Vol.55. - P. 1261 A.

48. Charcot J.M., Marie P. Sur une forme particuliere d'atrophie musculaire progressive, souvent familiale, debutant par les pieds et les jambes et atteignant plus tard les mains // Rev. Med. 1886. -№ 6. - P. 97-138.

49. Cleveland D.W., Bruijn L.I., Wong P.C. et al. Mechanismus of selective motor neuron death in transgenic mouse models of motor neuron disease. //Neurology. 1996. 47(Suppl. 2): S54-S6

50. Corcos I.A., Lafreniere R.G., Begy C.R. et al. Refined localization of human connexin32 gene locus, GJB1, to Xql3.1. // Genomics. 1992. - V. 13. - P. 479-480.

51. Cowchock F.S., Duckett S.W., Streletz U. et al. X-linked motor-sensory neuropathy type-II with deafness and mental retardation: a new disorder. // Am. J. Med. Genet. 1985.-V. 20,- P. 307-315.

52. Dahl G. Identification of a pore lining segment in gap junction hemichannels. // Biophys. J. 1997. -V. 72. - P. 1946-1953.

53. Deschenes S.M., Walcott J.L., Wexler T.L. et al. Altered trafficking of mutant connexin32 // J. Neurosci.- 1997,- V. 17,- P. 9077-9084.

54. Dyck P.J., Lambert E.H. Lower motor and primary sensory neuron disease with peroneal muscular atrophy // Arch. Neurol. 1968. -V. 18.-P. 603-618.

55. Dyck P.J., Chance P., Lebo R.V. et al. Hereditary motor and sensory neuropathies. In: Peripheral neuropathy // Ed.Dyck P.J., Thomas P.K., Griffen J.W. et al. Philadelphia: W.B. Saunders Company. 1993. - P. 1094-1136.

56. Dyck P.G., Ohta M. Neuronal atrophy and degeneration predominantly affecting peripheral sensory neurons. // Peripheral neuropathy Saunders, Philadelphia. 1975. - P. 791-824.

57. Elfgang C., Eckert R., Lichtenberg-Frate H. et al. Specific permeability and selective formation of gap junction channels in connexin-transfected HeLa cells. // J. Cell Biol. 1995. - V.129. - P. 805-817.

58. Emery A.E.H. Population frequencies ofiherited neuromuscular diseases aworld survey. // Neuromusc. Disord. - 1991. - V.l. - P. 1929.

59. Evans W.H. Assembly of gap junction intercellular channels. // Biochem. Soc. Trans.- 1994,- V. 22,- P. 788-792.

60. Evgrafov O.V., Mersiyanova I., Irobi J. et al. Mutant small heat-shock protein 27 causes axonal Charcot-Marie-Tooth disease and distalhereditary motor neuropathy. // Nature genetics. 2004. - V. 36 (6). -P. in press.

61. Fain P.R., Barker D.F., Chance P.F. Refined genetic mapping of X-linked Charcot-Marie-Tooth neuropathy. // Am. J. Hum. Genet. -1994.-V. 54.-P. 229-235.

62. Fairweather N., Bell C., Cochrane S. et al. Mutations in the connexin32 gene in X-linked dominant Chariot-Marie-Tooth disease (CMTX1). // Hum. Mol. Genet. 1994,- Vol.13.- P.-29-34.

63. Fairweather N., Kelly K., Haites N. et al. Linkage study of a Scottish family segregating for X-linked Charcot-Marie tooth disease (MTX). (Abstract) // Clin. Genet. Soc., Aberdeen, Scotland. 1988. -V. 9.-P. 23.

64. Falk M.M., Buehler L.K., Kumar N.M., Gilula N.B. Cell-free synthesis and assembly of connexins info functional gap junction membrane channels. // EMBO J. 1997,- V. 16.- P. 2703- 2716.

65. Falk M.M., Gilula N.B. Membrane insertion of gap junction connexin polytopic channel-forming membrane-proteins. // J.Cell Biol. 1994. - V. 127.-P. 343-354.

66. Fallon R.F., Goodenough D.A. Five-hour half-life of mouse liver gap-junction protein // J. Cell Biol. -1981,- V. 90,- P. 521-526.

67. Fischbeck K.H., ar-Rushdi N., Pericak-Vance M. et al. X-linked neuropathy: gene localization with DNA probes. // Ann. Neurol. -1986.-V. 20.-P. 527-532.

68. Fischbeck K.H., ar-Rushdi N., Rozear M. et al. X-linked neuropathy: gene localization with DNA probes. (Abstract) // Am. J. Hum. Genet. 1985. - V. 37. - P. A153.

69. Fishman G.I., Eddy R.L., Shows T.B. et al. The human connexin gene family of gap junction proteins: distinct chromosomal locations but similar structure // Genomics.-1991,- V. 10,- P. 250-256.

70. Flagg-Newton J., Simpson I. and Loewenstein W.R. Permeability of the cell-to-cell embrane channels in mammalian cell junctions. // Science. 1979. -V. 205. - P. 404-407.

71. Francis D., Stergiopoulos K., Ek-Vitorin J.F. et al. Connexin diversity and gap junction regulation by pHi. // Dev Genet. 1999. - V. 24(1-2). -P. 123-36.

72. Fryns J.P., Van den Berghe H. Sex-linked recessive inheritance in Charcot-Marie-Tooth disease with partial manifestation in female carriers. // Hum. Genet. 1980. - V. 55. - P. 413-415.

73. Gal A., Mucke J., Theile H. et al. X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth disease: suggestion of linkage with a cloned DNA sequence from the proximal Xq // Hum. Genet. 1985. -V. 70. - P. 3842.

74. George C.H., Kendall J.M., Evans W.H. Intercellular trafficking pathways in the assembly of connexins into gap junctions // J. Biol.Chem. 1999,- V. 274,- P. 8678-8685.

75. Gillespie C.S., Sherman D.L., Blair G.E. and Brophy P.J. Periaxin, a novel protein in myelinating Shwann cells with a possible role in axonal ensheathment. // Neuron. 1994. - 12. - P. 479-508.

76. Gilula N.B., Kumar N.M. Molecular biology and genetics of gap junction channels. // Semin. Cell Biol. 1992. -V. 3. - P. 3-16.

77. Gilula N.B., Kumar N.M. The gap junction communication channel. // Cell. 1996. - V. 84,- P. 381- 388.

78. Gilula N.B., Kumar N.M. The gap junction communication channel. // Cell. -1996. -V.84. -P. 381- 388.

79. Goldberg G.S., Martyn K.D., Lau A.F. A connexin43 antisense vector reduces the ability of normal cells to inhibit the foci formation of transformed cells. // Mol Carcinog. 1994. Oct. -V. 11(2). - P. 106114.

80. Goldberg G.S., Bechberger J.F. & Naus C.C. A pre-loading method of evaluating gap junctional communication by fluorescent dye transfer. //Biotechniques. 1995. - V.18. -P. 490-497.

81. Goodenough D.A., Goliger J. A., Paul D.L. Connexins, connexons, and intercellular communication. // Annu. Rev. Biochem.-1996,- V. 65,-P. 475-502.

82. Goodenough D.A., Paul D.L. & Jesaitis L. Topological distribution of two connexin 32 antigenic sites in intact and split rodent hepatocyte gap junctions. // J. Cell Biol. 1988. - V.107. - P. 18171824.

83. Goonewardena P., Welihinda J., Anvret M. et al. A linkage study of the locus for X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Clin. Genet. -1988.-V. 33.-P. 435-440.

84. Graf W.D., Chance P.F., Lensch M.W. et al. Severe vincristine neuropathy in Charcot-Marie-Tooth disease type 1A. // Cancer. -1996. -V. 77.-P. 1356-62.

85. Gutierrez A., England J.D., Sumner A.J. et al. Unusual electrophysiological findings in X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth disease. // Muscle Nerve. -2000. V. 23. - P. 182-8.

86. Hahn, A. F., Brown W. F., Koopman W. J., Feasby Т. E. X-linked dominant hereditary motor and sensory neuropathy // Brain. -1990.-V. 113,-P. 1511-1525.

87. Haites, N.; Fairweather, N.; Clark, C.; Kelly, K. F.; Simpson, S.; Johnston, A. W.: Linkage in a family with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. Clin. Genet. 35: 399-403, 1989.

88. Haites NE, Nelis E, Van Broeckhoven. С 3rd workshop of the European CMT consortium: 54th ENMC international workshop on genotype/phenotype correlations in Charcot-Marie-Tooth type 1 and hereditary neuropathy with liability to pressure palsies, 28-30

89. November 1997, Naarden,// Neuromusc. Disord. 1998. - V.8. - P. 591-603.

90. Hanemann C.O., Bergmann C., Senderek J. et al. Transient, recurrent, white matter lesions in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with novel connexin 32 mutation. //Arch Neurol. 2003. - V. 60(4).-P. 605-9.

91. Hanemann C.O., Bergmann C., Senderek J., Zerres K., Sperfeld A.D. Transient, recurrent, white matter lesions in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with novel connexin 32 mutation. // Arch Neurol.-2003.-V. 60 (4). -P.605-9.

92. Harding A.E. From the syndrome of Chariot-Marie-Tooth to disorders of peripherae myelin proteins. Brain, 1995. V. 118, № 7. -P. 809-818.

93. Hayasaka K.„Himuro M.; Wang Y., et al. Structure and chromosomal localization of the gene encoding the human myelin protein zero (MPZ) // Genomics. 1993. - 17. - P. 755-758.

94. Hayasaka K., Himoro M., Sato W. et al. Charcot-Marie-Tooth neuropathy type IB is associated with mutations of the myelin P(0) gene // Nature Genet. 1993. - V. 5. - P. 31-34.

95. Hayasaka K., Himoro M., Sawaishi Y. et al. De novo mutation of the myelin P(0) gene in Dejerine-Sottas disease (hereditary motor and sensory neuropathy type III) // Nature Genet. 1993. - V. 5. - P. 266268.

96. Herringham W. P. Muscular atrophy of the peroneal type affecting many members of a family // Brain. 1889,- V. 11,- P. 230236

97. Hodgson S.V., Robertson M.E., Fear C.N et al. Prenatal diagnosis of X-linked choroideremia with mental retardation, associated with a cytologically detectable X-chromosome deletion. // Hum. Genet. 1987. - V.75. - P.286-290.

98. Hsu V.W., Yuan L.C., Nuchtern J.G. et al. A recycling pathway betention the endoplasmic reticulum and Colgi apparatus for retention of unassembled MNC class I molecules // Nature. 1991. -V. 352. - P 441-444.

99. Ikegami J., Lin C., Kato M. et al. Four novel mutations of the connexin 32 gene in four Japanese families with Charcot-Marie-Tooth disease type 1// Amer.J.med.genet. 1998. -V.80. - P. 352-355.

100. Ikegami Т., Lin C., Kato M et al. Four novel mutations of the connexin 32 gene in four Japanese families with Charcot-Marie-Tooth disease type 1. // Am. J. Med. Genet. 1998. - V. 80. - P. 352-355.

101. Ionasescu V., Ionasescu R., Searby C. Correlation between connexin 32 gene mutations and clinical phenotype in X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth neuropathy // Am. J. Med. Genet.-1996.-V. 63,-P. 486-491.

102. Ionasescu V.V., Searby C., Ionasescu R. et al. Mutations of the noncoding region of the connexin 32 gene in X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth neuropathy // Neurology. 1996. -V. 47. - P. 541544.

103. Ionasescu VV, Trofatter J, Haines JL, Summers AM, Ionasescu R, Searby C.: X-linked recessive Charcot-Marie-Tooth neuropathy: clinical and genetic study. // Muscle Nerve. 1992. - V. 15(3). - P. 368-73.

104. Ionasescu, R.; Searby, C.: Heterogeneity in X-linked recessive Charcot-Marie-Tooth neuropathy. // Am. J. Hum. Genet. 1991. - V. 48. -P. 1075-1083.

105. Ionasescu V.V., Kimura J., Searby C.C et al. Dejerine-Sottas neuropathy family with a gene mapped on chromosome 8 // Muscle Nerve. 1996. - V. 19. - P. 319-323.

106. Iselius L., Grimby L. A family with Charcot-Marie-Tooth's disease, showing a probable X-linked incompletely dominant inheritance. // Hereditas. 1982. - V.97. - P. 157-158.

107. Jiang J.X. and Goodenough D.A. Heteromeric connexons in lens gap junction channels. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1996. V.93. - P. 1287-1291.

108. Joseph L.J., Le Beau M.M., Jamieson G.A et al. Molecular cloning, sequencing, and mapping of EGR2, a human early growth response gene encoding a protein with 'zinc-binding finger' structure // Proc. Nat. Acad. Sci. 1988. - 85. - P. 7164-7168.

109. Julien J.P., Grosveld F., Yazdanbaksh K. et al. The structure of a human neurofilament gene (NF-L): a unique exon-intron organization in the intermediate filament gene family // Biochim. Biophys. Acta. -1987.-909.-P. 10-20.

110. Klaunig J.E. Alterations in intercellular communication during the stage of promotion. // Proc Soc Exp Biol Med. 1991. - V. 198(2). -P. 688-692.

111. Kochanski A., Ryniewicz В., Jedrzejowska H., Kabzinska D. Charcot-Marie Tooth type X (CMTX) disease: clinical and genetic characteristics of eleven patients. // Neurol Neurochir Pol. 2002. -V. 36(6).-P. 1087-94.

112. Kumar, N. M.; Gilula, N. В.: The gap junction communication channel. // Cell. 1996. - V. 84. - P. 381-388,

113. Kuntzer Т., Dunand M., Schorderet D.F. et al. Phenotypic expression of a Pro 87 to Leu mutation in the connexin 32 gene in a large Swiss family with Charcot-Marie-Tooth neuropathy. // J Neurol Sci. 2003. - V. 207(1-2). - P.77-86.

114. Laird D.W. The life cycle of a connexin: gap junction formation, removal, and degradation. // J Bioenerg Biomembr. 1996. - V. 28(4). -P. 311-318.

115. Latour P., Levy N., Paret, M. et al. Mutations in the X-linked form of Charcot-Marie-Tooth disease in the French population. // Neurogenetics. 1997. - V. 1. - P. 117-123.

116. Lawrence T.S., Beers W.H. and Gilula N.B. Transmission of hormonal stimulation by cell-to-cell communication. // Nature. 1978. -V. 272.-P. 501-506.

117. Lewis R.A. The challenge of CMTX and connexin 32 mutations editorial; comment. // Muscle Nerve. 2000. - V. 23. - P. 147-9.

118. Li H., Liu T.F., Lazrak A. Properties and regulation of gap junctional hemichannels in the plasma membranes of cultured cells // J. Cell Biol. 1996. - V. 134. - P. 1019-1030.

119. Luo W., Tang В., Zhao G. et al. A new mutation in the connexin 32 gene of a Chinese family with Charcot-Marie-Tooth disease associated with central conduction slowing. // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2003. - V. 19(5). - P. 367-9.

120. Marques W., Sweeney J.G., Wood N.W., Wroe S.J., Marques W. Central nervous system involvement in a novel connexin 32 mutationaffecting identical twins letter. 3. // Neurol Neurosurg Psychiatry. -1999.-V. 66.-P. 803-4.

121. Martin P.E., Mambetisaeva E. Т., Archer D.A. et al. Analisis of gap junction assembly using mutated in Charlot-Mfiie-Tooth X-linked disease // J. Neurochemistry. 2000. - V. 74, № 2,- P.711-727.

122. McMillan J.C., Harper P.A. Clinical genetics in neurological disease // J. neurol. neurosurg. psychiatr. 1994. - V. 57, №1,- P.7-15

123. Meggouh F., Benomar A., Rouger H. et al. The first de novo mutation of the connexin 32 gene associated with X linked Charcot-Marie-Tooth disease. // J Med Genet. 1998. - V. 35. - P. 251-2.

124. Melanson-Drapeau L., Beyko S., Dave S. et all Oligodendrocyte progenitor enrichment in the connexin32 null-mutant mouse. // J Neurosci. 2003. - V. 23(5). - P.1759-68.

125. Menichella D.M., Goodenough D.A., Sirkowski E. et all Connexins are critical for normal myelination in the CNS. // J Neurosci. 2003. -V. 23(13). - P. 5963-73.

126. Morley G.E., Taffet S.M., Delmar M. The carboxyl-terminal of connexin 43 alters pH regulation of connexin 32. // Biophys.J. 1996. -V. 70.-P. 1294- 1302.

127. Mostacciuolo M.L., Muller E., Fardin P. et al. X-linked Charcot-Marie-Tooth disease: a linkage study in a large family by using 12 probes of the pericentromeric region. // Hum. Genet. 1991. - V.87. -P. 23-27.

128. Murakami Т., Garcia СЛ., Reiter L.T., & Lupski J.R. Charcot-Marie-Tooth disease and related inherited neuropathies. // Medicine 75. -1996.-P. 233-250.

129. Musil L.S. Structure and assembly of gap junctions. In: Molecular Mechanisms of Epithelial Cell Junctions: From Development to Disease, ed. Citi S., ed Austin, TX: R.G. Landes. -1994.-P. 173-194,

130. Naef R., Adkofer K., Lescher D.,Suter U. Abberant protein trafficking in trembler suggests a mechanism for hereditary human peripheral neuropathies. // Mol. Cell. Neurosci. 1997. - V 9. - P. 1325.

131. Nagy J.I., Ionescu AV, Lynn B.D., Rash J.E. Connexin29 and connexin32 at oligodendrocyte and astrocyte gap junctions and in myelin of the mouse central nervous system. // J Comp Neurol. 2003. -V. 464(3).-P. 356-70.

132. Nakagawa M., Takashima H. et all. Clinical phenotype in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with an entire deletion of the connexin 32 coding sequence. // J. Neural Sci. 2001. - V. 185(1). - P. 31-7.

133. Nelis E, Haites N., Van Broeckhoven C. Mutations in the peripheral myelin genes and associated genes in inherited peripheral neuropathies // Hum. Mutat. 1999. - V. 13. - P. 11-28.

134. Nelis E., Cruts M., Wouters H. http.V/molgen-http://www.uia.ac.be/CMT Mutations/ 11.12.2003.

135. Nelis, E, Haites N., Van Broeckhoven C. World survey of mutations in inheritied peripheral neuropathies. // J. Periph. Nerv. Svst. 1998. - V. 3. - P. 293.

136. Nelis E., Simokovic S., Timmerman V. et al. Mutation analysis of the connexin 32 (Cx32) gene in Charcot-Marie-Tooth neuropathytype 1: identification of five new mutations // Hum. Mutat. 1997. -V. 9. - P. 47-52

137. Nelles E., Butzler C., Jung D. et all Defective propagation of signals generated by sympathetic nerve stimulation in liver of connexin32 deficient mice. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - V. 93.-P. 9565-9570.

138. Nicholson G., Nash J. Intermediate nerve conduction velocities define X-linked Charcot-Marie- Tooth neuropathy families. // Neurology. 1993. - V. 43. - P.2558-64.

139. Nicholson G., Corbett A. Slowing of central conduction in X-linked Charcot-Marie-Tooth neuropathy shown by brain stem auditory evoked responses// J. Neurol. Neurosurg. Psych. 1996. - V. 61. - P.43-46.

140. Nicholson G.A., Yeung L., Corbett A. Efficient neurophysiologic selection of X-linked Charcot-Marie-Tooth families: ten novel mutations //Neurology 1998. - V. 51. - p. 1412-1416

141. Oh S.,Bennett M.V., Trexler E.B. et al Changes in permeability caused by connexin 32 mutations underlie X-linked Charcot-Marie-Tooth disease// Neuron -1997.-Vol. 19.-P. 927-938162

142. Omori Y., Mesnil M., Yamasaki H. Connexin 32 mutations from X-linked Charcot-Marie-Tooth disease patients: functional defects and dominant negative effects // Molec. Biol. Cell. 1996. - V. 7. - P. 907916163

143. Orita M. Orita M., Suzuki Y., Hayashi K. Rapid and sensitive detection of point mutations and DNA polymorphisms using the polymerase chain reaction. // Genomics 1989 - V. 5. - P. 874-879.

144. Panas M, Kalfakis N, Karadimas C, Vassilopoulos D.: Episodes of generalized weakness in two sibs with the C164T mutation of the connexin 32 gene //Neurology. 2001. - V. 57. - P.1906-1908.

145. Paul D.L., Goliger J.A., Goodenough D.A. Connexins, connexons, and intercellular communication Annu. // Rev. Biochem. -1996.-V. 65.-P. 475- 502.

146. Peracchia C., Wang X.G., Li L.Q., Peracchia L.L. Inhibition of calmodulnin expression prevents low-pH-induced gap junction uncoupling in Xenopus oocytes. // Pfluegers Arch. 1996. - V. 431. -P. 379-387.

147. Pfahnl A., Zhou X.W., Tian J., Werner R. and Dahl, G. Mapping of the pore of gap junction channels by cysteine-scanning mutagenesis. // Biophys. J. 1996. -V. 70. - P. A31.

148. Phillips L.H., Kelly Т.Е.; Schnatterly P., Parker, D. Hereditary motor-sensory neuropathy (HMSN): possible X-linked dominant inheritance. //Neurology. 1985. - V.35. - P. 498-502.

149. Pitts J.D., Finbow M.E., Kam E. Junctional communication and cellular differentiation. // Br. J. Cancer. Suppl. 1988. - V.9. - P.52-57.

150. Priest J.M, Fischbeck K.H., Nouri N., Keats B.J. A locus for axonal motor-sensory neuropathy with deafness and mental retardation maps to Xq24-q26. // Genomics. 1995. - V. 29. - P. 409-412.

151. Rabadan-Diehl C., Dahl G., Werner R. A connexin 32 mutation associated with Charcot-Marie-Tooth disease does not affect channel formation in oocytes. FEBS Lett. 1994. - V. 351. - P. 90-94.

152. Rabionet R., Lopez-Bigas N., Arbones M.L., Estivill X. Connexin mutation in hearing loss, dermatologial and neurological sorders. // Trends Mol Med. 2002. - V. 8 (5) - P. 205-12.

153. Raimondi E., Gaudi S., Moralli D. et al. Assignment of the human connexin 32 gene (GJB1) to band Xql3. // Cytogenet. Cell Genet. 1992. -V. 60. - P. 210-211.

154. Ressot C, Gomes D., Dautigny A., et al. Connexin 32 mutation associated with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease show twodistinct behaviors: loss of function and altered gating properties. 11 Neurosci. 1998. - V. 18. - P. 4063-4075.

155. Rouger H., LeGuern E., Birouk N. Charcot-Marie-Tooth disease with intermediate motor nerve conduction velocities: characterization of 14 CX32 mutationsin 35 families // Hum. Mutat. 1997. - Vol. 10.-P. 443-452.

156. Rousset B. Introduction to the structure and functions of junction communications or gap junctions. // Ann Endocrinol (Paris). 1996. -V. 57(6).-P. 476-480.

157. Rozear M. P., Pericak-Vance M. A., Fischbeck K. et al. Hereditary motor and sensory neuropathy, X-linked: a half century follow-up//Neurology. 1997. - V. 37. - P. 1460-1465.

158. Sahin N., Tan M., Kalay E., Calapoglu M., Karaguzel A. Connexin 32 mutation in a Turkish family with X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // J Neurosci. 2003. - V. 113(6). - P. 777-85.

159. Sanderson M.J. Intercellular calcium waves mediated by inositol triphosphate. Ciba Found. Symp. 1995. - V. 188. - P. 175-194.

160. Sanger F., Nicklen S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1977 - V. 74.-P. 5463-5467.

161. Scherer S.S. The biology and patobiology of Schwann cells.// Curr.opin/ neurol. 1997. - V. 10. - P. 386-397.

162. Scherer S.S., Deschenes S.M., Xu Y. et al. Connexin32 is a myelin-related protein in the PNS and CNS. // J. Neurosci. 1995. -Vol. 15. - P. 8281-8294.

163. Scherer S.S. The biology and pathobiology of Schwann cells. // Curr.Opin.Neurol. 1997. - V. 10. - 386-397.

164. Scherer S.S., Xu Y.T., Nelles E., et al. Connexin 32-null mice develop demyelinating peripheral neuropathy. // Glia. 1998. - V. 24, -P. 8-20.

165. Scherer S. S., Bone L.J., Deschenes SM et al. The role of the gap junction protein connexin 32 in the pathogenesis of X-linked Charcot-Marie-Tooth disease. // Novartis Found Symp. 1999. - V. 219. -P. 175-85; discussion 185-7.

166. Silander K., Meretoja P., Pihko et all, Screening for connexin 32 mutations in Charcot-Marie-Tooth disease families with possible X-linked inheritance. // Hum Genet. 1997. - V. 100(3-4). - P.391-7.

167. Sillibourne J, Hackwell SM, Stevens С A, Harvey JF Rapid mutation analysis of Charcot-Marie-Tooth type 1// J Med Genet. -1998.-Suppl.-P. 87

168. Simpson I., Rose B. and Loewenstein W.R. Size limit of molecules permeating the junctional membrane channels. // Science -1977.-V. 195.-P.294

169. Skre H. Genetic and clinical aspects of Charcot-Marie-Tooth disease. // Clin. Genet. 1974/ - V. 6. - P. 98-118.

170. Sladky J.T.; Brown M.J. Infantile axonal polyneuropathy with X-linked inheritance. // Ann. Neurol. 1984. - V.16. - P. 402.

171. Spray D.C., Dermietzel R. Gap junctions in the brain: where, what type, how many and why Trends. // Neurosci. 1993. - V. 16. -P. 186-192.

172. Spray D.C., Dermietzel R. X-linked dominant Charcot-Marie-Tooth disease and other potential gap-junctions diseases of the nervous system. // Trends Neurosci. 1995. - V. 18. - P. 256- 262

173. Stauffer, K.A. The gap junction protein ? -1 connexin (Cx32) and ? -2 connexin (Cx26) can form heteromeric hemichannels. // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270. - P. 6768-6772.

174. Stojkovic Т., Latour P., Vandenberghe A. et all. Sensorineural deafness in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with connexin 32 mutation (R142Q). //Neurology. 1999. - V. 52(5). - P. 1010-4.

175. Stojkovic Т., Latour P., Vandenberghe A. et al. Sensorineural deafness in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease with connexin 32 mutation (R142Q). // Neurology. 1999. - V. 52(9). - P. 1945-1952.

176. Sun Y., Wyman R.J., Ford C. et al. Innexins: a family of invertebrate gap-junction proteins. // Trends Genet. 1998. - V. 14. -P. 348-349

177. Tabaraud F., Lagrange E., Sindou P. et al. Demyelinating X-linked Charcot-Marie-Tooth disease: unusual electrophysiological findings. // Muscle Nerve. 1999. - V. 22. - P. 1442-1447.

178. Tooth H.H. The Peroneal Type of Progressive Muscular Atrophy. London.: H. K. Lewis, 1886.

179. Torok K., Stauffer K., Evans W.H. Connexin 32 of gap lunction contains two cytoplasmic calmodulin-bindig domains. // Biohchem. J. -1997.-V. 326.-P. 479-483.

180. Trexler E.B., Bennett M.V.L., Bargiello T.A. and Verseilis, V.K. Voltage gating and permeation in a gap junction hemichannel. // Proc. Natl. Acad. Sci., USA. 1996. - V. 93. - P. 5836-5841.

181. Unger V.M., Kumar N.M., Gilula,N.B. and Yeager, M. Three-dimensional structure of a recombinant gap junction membrane channel. // Science. 1999. - V. 283. - P. 1776-1180.

182. Unwin N. The structure of channels in membranes of excitable cells. // Neuron. 1989. - V. 3. - P. 665-676.

183. Van Broekhoven C. European CMT Consortium homepage.-1999,- http://molgen-http://www.uia.ac.be/CMT Mutations.

184. Van Eldik L.J., Hertzberg E.L., Berdan R.C. and Gilula N.B. Interaction of calmodulin and other calcium-modulated proteins with mammalian and arthropod junctional membrane proteins. // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1985. - V. 126 - P. 825-832.

185. VanSlyke J.K., Deschenes S.M., Musil L.S. Intracellular Transport, Assembly, and Degradation of Wild-Type and Disease-linked Mutant Gap Junction Proteins. // Mol Biol Cell. 2000. - V. 11 (6).-P. 1933-1946.

186. Veenstra R.D., Wang H.Z., Westphale E.M. and Beyer E.C. Multiple connexins confer distinct regulatory and conductance properties of gap junctions in developing heart. // Circ. Res. 1992. -V. 75.-P. 1277-1283.

187. Wang X.G., Li L.Q., Peracchia L.L., Peracchia C. Chimeric evidence for a role of the connexin cytoplasmic loop in gap junction channel gating // Pfluegers Arch. 1996. - V. 431. - P. 844-852.

188. Wang H.Z. and Veenstra R.D. Monovalent cation and anion selectivity sequences of the rat connexin 43 gap junction channel. // J. Gen. Physiol. 1997. - V. 109. - P. 491-507.

189. Werner R., Levine E., Rabadan-Diehl., Dahl G. Gating properties of connexin 32 cell-cell channels and their mutants expressed in Xenopys oocytes. //Proc. R. Soc. Lond. 1991. - P. 243 5-11.

190. Woratz G. Neurale Muskel atrophie mit dominantem X-hromosomalem Erbgang. Berlin: Akademie-Verlag (pub.) 1964.

191. Zuchner S., Mersiyanova I.V., Muglia M. et al. Mutations in the mitochondrial GTPase mitofusin 2 cause Charcot-Marie-Tooth neuropathy type 2A. // Nature Genet. 2004 April,. Note: Advance Electronic Publication.

Информация о работе

Шаркова, Инна Валентиновна
кандидата медицинских наук
Москва, 2004
ВАК 03.00.15

Диссертация

Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа"

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шаркова, Инна Валентиновна

Введение Диссертация по биологии, на тему "Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа"

Заключение Диссертация по теме "Генетика", Шаркова, Инна Валентиновна

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шаркова, Инна Валентиновна, Москва

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Клинико-генетический анализ наследственной моторно-сенсорной нейропатии I X типа
ВАК РФ 03.00.15, Генетика