Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Кислородзависимая и нитроксидзависимая ферментные системы макрофагов при стафилококковой и листериозной инфекциях

ВАК РФ 03.00.25, Гистология, цитология, клеточная биология

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Гончарук, Юлия Николаевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы

1.1.Современные представления о функциональной активности бактери- 12 цидных систем мононуклеарных фагоцитов

1.2.Состояние внутриклеточных микробицидных систем мононуклеарных 23 фагоцитов при бактериальных инфекциях

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. Материалы и методы

2.1. Инфекционные агенты и экспериментальные животные

2.2. Методы выделения фагоцитирующих клеток и их культивирование

2.3. Методы оценки функциональной активности фагоцитов 40 2.4 Методы оценки ферментативной активности мононуклеарных фагоци- 41 тов

2.5. Электронномикроскопические исследования

2.6 Методы статистической обработки

ГЛАВА 3. Морфофункционалъная характеристика мононуклеарных фаго- 48 цитов при листериозной инфекции

3.1. Взаимодействие макрофагов первичной культуры с Listeria monocyto- 48 genes

3.1.1. Функциональная активность макрофагов первичной культуры при 48 их контакте с L. monocytogenes

3.1.2. Активность кислородзависимой ферментной системы макрофагов 54 первичной культуры при их контакте с L. monocytogenes

3.1.3. Активность нитроксидзависимой ферментной системы макрофагов 65 первичной культуры при их контакте с L. monocytogenes

3.1.4. Активность кислой фосфатазы в макрофагах первичной культуры 68 при их контакте с L. monocytogenes

3.2. Активность ферментных систем фагоцитов животных, зараженных L. monocytogenes

3.2.1. Активность эктоферментов плазмалеммы фагоцитов животных, за- 73 раженных L. monocytogenes

3.2.2. Активность кислородзависимой ферментной системы фагоцитов 76 животных, зараженных L. monocytogenes

3.2.3. Активность нитроксидзависимой ферментной системы фагоцитов 77 животных, зараженных L. monocytogenes

ГЛАВА 4. Состояние микробицидных систем моноцитов/макрофагов при 82 стафилококковой инфекции

4.1. Взаимодействие макрофагов первичной культуры с Staphylococcus 82 aureus

4.1.1. Функциональная активность макрофагов первичной культуры при 82 их контакте с S. aureus

4.1.2. Активность кислородзависимой ферментной системы макрофагов 86 первичной культуры при контакте с S. aureus

4.1.3. Активность нитроксидзависимой ферментной системы макрофагов 90 первичной культуры при контакте с S. aureus

4.1.4. Активность кислой фосфатазы в макрофагах при их контакте с S. 90 aureus

4.2. Функциональная активность фагоцитов животных, зараженных S. 92 aureus

4.2.1. Активность эктоферментов плазмалеммы фагоцитирующих клеток 95 животных, зараженных S. aureus

4.2.2. Активность кислородзависимой ферментной системы фагоцитов 97 животных, зараженных S. aureus

4.2.3. Активность нитроксидзависимой ферментной системы фагоцитов 99 животных, зараженных S. aureus

ГЛАВА 5. Сравнительная характеристика ферментых систем фагоцитов при стафилококковой и листериозной инфекция

5.1. Сравнительная характеристика ферментных систем макрофагов первичной культуры, взаимодействующих с S. aureus и L. monocytogenes

5.1.1. Функциональная активность макрофагов первичной культуры при 102 их контакте со S. aureus и L. monocytogenes

5.1.2. Сравнительная характеристика активности эктоферментов плазма- 104 леммы резидентных макрофагов при их контакте со S. aureus и L. monocytogenes

5.1.3. Сравнительная характеристика активности кислородзависимой 106 ферментной системы макрофагов первичной культуры при их контакте с

S. aureus и L. monocytogenes

5.1.4 Сравнительная характеристика активности нитроксидзависимой 110 ферментной системы макрофагов первичной культуры при контакте с S. aureus и L. monocytogenes

5.2. Сравнительная характеристика активности ферментных систем 110 фагоцитов животных, зараженных S. aureus и L. monocytogenes

5.2.1. Сравнительная характеристика активности эктоферментов 110 плазмалеммы фагоцитирующих клеток животных, зараженных S. aureus и

L. monocytogenes

5.2.2.Сравнительная характеристика активности кислородзависимой фер- 115 ментной системы фагоцитов животных, зараженных S. aureus и L. monocytogenes

5.2.3. Сравнительная характеристика активности нитроксидзависимой 117 ферментной системы фагоцитов животных, зараженных S. aureus и L. monocytogenes

5.3 Характеристика ультраструктурных изменений макрофагов, заражен- 120 ных S. aureus и L. monocytogenes

5.4 Взаимосвязь кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментных 126 систем резидентных макрофагов, зараженных S. aureus и L. monocytogenes

Введение Диссертация по биологии, на тему "Кислородзависимая и нитроксидзависимая ферментные системы макрофагов при стафилококковой и листериозной инфекциях"

Актуальность. Обострение ситуации по инфекционной заболеваемости за последнее десятилетие ставит вопрос о расширении общепатологических знаний, касающихся антиинфекционной резистентности. Известно, что при бактериальных инфекциях нарушение функций первого барьера защиты, к которому относят клеточные элементы иммунофагоцитарной системы, а именно, моноциты/макрофаги и нейтрофилы, оказывает влияние на течение патологического процесса. По мнению Д.Н.Маянского и А.Н.Маянского [29], именно мобильные фагоциты в комплексе с резидентными макрофагами ре-тикулоэндотелиальной системы являются эшелоном, детерминирующим ба-зальный уровень иммунитета. Различные патологические состояния могут быть связаны с дефектностью системы мононуклеарных фагоцитов или с ее гиперфункцией, в частности с гиперпродукцией провоспалительных цитоки-нов. Вследствие этого течение многих инфекционных заболеваний, особенно вызванных внутриклеточно паразитирующими микроорганизмами, зависит от функциональной активности системы мононуклеарных фагоцитов [185, 221,33].

Предшественники макрофагов - моноциты - после циркулирования в кровяном русле в течение 2-х дней проникают в ткани и преобразуются в зрелые, резидентные макрофаги, формируя систему мононуклеарных фагоцитов. Мощные бактерицидные механизмы, которыми о>бладают макрофаги, определяет их основную функцию для борьбы с теми бактериями, вирусами и простейшими, которые могут существовать внутри клетки-хозяина. В свою очередь, подобный комплекс бактерицидных механизмов в макрофагах подразделяется на кислородзависимые и кислороднезависимые [44].

Кислородзависимая микробицидная активность реализуется через образование значительного количества продуктов с токсическим действием. За их образование ответствен ряд ферментов дыхательной цепи: НАДФ-оксидазный комплекс, сукцинатдегидрогеназа (СДГ), лактатдегидрогеназа

ЛДГ), цитохромоксидаза, которые катализируют перенос электронов от НАДН + Н* или восстановленного убихинона на молекулярный кислород 02, образуя при этом реактивный супероксид-анион (О2")■ Последний быстро трансформируется в перекись водорода и другие активные метаболиты кислорода (АМК) [72, 215, 118, 93]. В присутствие металлов переменной валентности (реакция Фентона), перекись водорода может служить источником образования гидроксильного радикала, который является наиболее реакци-онноспособным по отношению к бактериям[188].

В последнее десятилетие различными исследователями доказано существование в макрофагах активного оксида азота (N0), катализируемого при участии индуцибельной нитроксидсинтазы (iNOS), а также других реактивных промежуточных продуктов его окисления, таких как пероксинитрит (0N00"), нитриты (N0"2) и нитраты (Ж)"з). Известно, что синтез N0 в клетке представлен двумя взаимно дополняющими друг друга механизмами - нит-роксидсинтазным и нитритредуктазным [37]. Наличие нитроксидсинтазного механизма, действующего в присутствии кислорода, обеспечивает эндогенный синтез N0, ионов N0"2 и NC3.

Для фагоцита характерны два функциональных состояния: исходное и активированное, переход в которое обусловлен взаимодействием клеток с различными стимуляторами [29]. Активация макрофагов и процесс фагоцитоза сопровождаются выраженными изменениями клеточного метаболизма, что получило название «дыхательного или метаболического взрыва», в результате которого образуются АМК [245, 126].

Одной из важнейших функций макрофагов в поддержании гомеостаза является их участие в антимикробной защите. До сих пор пристального внимания заслуживает фагоцитарный механизм антибактериальной защиты. Молекулярные основы бактерицидное™ фагоцитоза уточняются вплоть до наших дней. Важную роль в этом процессе играют кислородзависимые и нит-роксидзависимые ферментные системы фагоцитов, генерирующие высоко реактивные радикалы кислорода и оксида азота [27, 24, 4, 78, 5, 8, 254]. Несмотря на большое количество работ, посвященных изучению кислородзави-симой ферментной системы фагоцитов, все еще уточняются механизмы образования АМК в процессе «дыхательного взрыва» в стимулированных макрофагах. До настоящего времени остается открытым вопрос об участии молекулы N0 в защитных функциях макрофагов от различных видов бактерий, обладающих различной степенью вирулентности. Кроме того, не изучен вопрос о взаимосвязи кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментных-систем макрофагов при заражении патогенными бактериями, различающимися по механизмам фагоцитирования.

Цель исследования. Дать комплексную оценку морфофункциональной активности ферментных систем моноцитов/ макрофагов, обеспечивающих их бактерицидную функцию, при листериозной и стафилококковой инфекциях.

Задачи исследования.

1. В системе in vitro изучить морфофункциональную активность макрофагов первичной культуры, зараженных различающимися по вирулентности штаммами S. aureus и L. monocytogenes.

2. В системе in vivo изучить морфофункциональную активность моноцитов/ макрофагов морских свинок, зараженных парентерально штаммами указанных видов бактерий.

3. Дать сравнительную оценку активности кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментных систем в обеспечении бактерицидной функции макрофагов при листериозной и стафилококковой инфекциях. Провести корреляционный анализ полученных показателей.

Положения, выносимые на защиту.

1. При листериозной и стафилококковой инфекциях в антимикробной защите организма участвуют как кислородзависимая, так и нитро-ксидзависимая ферментные системы макрофагов, активность которых зависит от вида и степени вирулентности возбудителей.

2. Бактерии S. aureus, подвергающиеся активному фагоцитозу, преимущественно активируют кислородзависимую ферментную систему моноцитов/макрофагов. Напротив, L. monocytogenes, способные к выходу из фагосом, резко активируют нитроксидзависимую ферментную систему фагоцитов.

3. Ферментативная и функциональная активность макрофагов более выражена в ответ на инфицирование слабовирулент-ным/авирулентным штаммами L. monocytogenes и S. aureus. Высоковирулентный/вирулентный штаммы указанных видов бактерий оказывают ингибирующее действие на ферментные системы фагоцитов, что приводит к снижению их бактерицидной активности.

4. По данным корреляционного анализа существует определенная взаимосвязь между кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментными системами макрофагов, зараженных L. monocytogenes и S. aureus.

Научная новизна.

• Впервые в сравнительном аспекте показана реактивность кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментных систем макрофагов при заражении бактериями, различающимися по механизмам фагоцитирования: внутрифагосомальные - S. aureus и внутрицитоплазматические - L. monocytogenes.

• На основании цитохимических исследований уточнены данные о различиях ферментативной активности макрофагов в ответ на заражение указанными видами грамположительных бактерий с разной степенью вирулентности.

• Впервые с помощью корреляционного анализа выявлена взаимосвязь между кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментными системами макрофагов, зараженных L. топосуtogenes и S. aureus, характер которой зависит от вида и степени вирулентности штаммов бактерий.

• При электронно-цитохимическом исследовании в макрофагах обнаружен морфологический признак, маркирующий воздействие кислой фосфатазы на фагоцитированные L. monocytogenes и S. aureus, в виде КФ-позитивных плотных гранул вдоль клеточной стенки бактерий.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Комплексная характеристика кислородзависимой и нитроксидзависимой систем моноцитов/макрофагов способствует расширению общепатологических знаний о механизмах бактерицидности фагоцитов, играющих ключевую роль в антиинфекционной резистентности. Углубленное понимание молекулярных механизмов воспалительного реагирования моноцитов/ макрофагов внесет вклад в дальнейшее формирование современного учения о фагоците.

Полученные результаты могут быть использованы для прогнозирования характера патологического процесса при листериозной и стафилококковой инфекцях. Разработка вопроса о роли нитроксидзависимой бактерицидности фагоцитирующих клеток может послужить теоретическому обоснованию новых принципов лечения инфекционных заболеваний, а именно - целесообразности применения нитропрепаратов в качестве бактериостатиков.

Заключение Диссертация по теме "Гистология, цитология, клеточная биология", Гончарук, Юлия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. При стафилококковой и листериозной инфекциях в развитии неспецифической резистентности, наряду с кислородзависимой системой, участвует нитроксидзависимая ферментная система макрофагов. Реактивность этих систем зависит от вида и степени вирулентности возбудителей.

2. При стафилококковой инфекции, возбудитель которой имеет внутрифагосомальную локализацию, основное значение в кил-линге бактерий имеет кислородзависимая ферментная система макрофагов, а при листериозной инфекции, возбудитель которой локализован преимущественно в цитоплазме, более активна нитроксидзависимая ферментная система.

3. Степень активации ферментов кислородзависимой ферментной системы макрофагов более выражена в ответ на заражение сла-бовирулентным/авирулентным штаммами L. monocytogenes и S. aureus. При этом отмечается выраженная стимуляция макрофагов по показателям активности ферментов плазматической мембраны (АТФ-азы, 5л-нуклеотидазы).

4. Вирулентные штаммы L. monocytogenes и S. aureus оказывают ингибирующее действие на активность ферментов фагоцитов (сукцинатдегидрогеназа, лактатдегидрогеназа, цитохромоксида-за, суммарная активность ферментов дыхательной цепи в НСТ-тесте), что коррелирует с низкой бактерицидной способностью этих клеток в отношении данных штаммов. Это явление можно отнести к одному из эффектов факторов вирулентности указанных возбудителей.

5. С помощью корреляционного анализа установлена взаимосвязь между показателями активности нитроксидзависимой и кислородзависимой ферментных систем макрофагов, зараженных L. monocytogenes и S. aureus, указывающая на определенные особенности реагирования данных клеток при этих инфекциях. 6. При электронно-цитохимическом исследовании в макрофагах обнаружен морфологический признак, маркирующий воздействие кислой фосфатазы на фагоцитированные L. monocytogenes и S. aureus, в виде КФ-позитивных плотных гранул вдоль клеточной стенки бактерий.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Функциональные свойства клеток макрофагального ряда настолько многообразны, что их неполноценность, как следствие или причина патологического процесса, со временем неизбежно формирует системное поражение организма, сопровождающееся иммунологической недостаточностью. Недостаточность антимикробной защиты может быть связана с дефектными функциями макрофагов, что в дальнейшем может привести к отягощенному течению инфекций, вызванных персистенцией возбудителей.

Важность оценки функциональной и микробицидной активности макрофагов при их взаимодействии с различными видами возбудителей имеет и другой аспект, относящийся к ответной реакции организма на инфекцию. Не подлежит сомнению, что вирулентность микроорганизмов имеет не только генетическую детерминированность самих бактерий, но и определяется особенностями иммунного ответа хозяина, т. е. проявляется на клеточно-организменном уровне. И в этой связи функциональная и бактерицидная активность макрофагов приобретает особое значение для инфекций, вызываемых возбудителями, способными к внутриклеточному паразитированию. В свою очередь биологические свойства возбудителя способны определять реактивность клеток иммунофагоцитарной системы.

В данной работе исследовалась функциональная и ферментативная активность макрофагов при заражении S .aureus и L. monocytogenes. Процесс фагоцитоза указанных видов бактерий макрофагами различен, поэтому уточнение механизмов их уничтожения в фагоцитах представляет особый интерес. Полученные результаты позволили нам подойти к комплексной оценке состояния макрофагов при их взаимодействии с агентами как хорошо обезвреживающимися бактерицидными системами фагоцитов (S. aureus), так и устойчивыми к их воздействию (L. monocytogenes).

По современным данным известно, что решающую роль в бактерицидном действии фагоцитов играют активные метаболиты кислорода и оксида азота [246, 24, 20, 4, 78, 5, 8, 254, 112]. При этом до сих пор остается спорным, против каких видов бактерий кислородзависимая и нитроксидзависимая ферментные системы макрофагов проявляют свое антимикробное действие и какова взаимосвязь между данными бактерицидными системами. По данным T.Kuncewicz et al. [220], компоненты НАДФН-оксидазной системы взаимодействуют с индуцибельной NOS в активированных макрофагах. Напротив, другие исследователи [4, 6] утверждают, что обе бактерицидные системы макрофагов выступают в роли конкурентов за овладение коферментом НАДФН, который требуется как при образовании активных метаболитов N0, так и при наработке активных форм кислорода. Кроме того, ряд авторов [235, 33] предполагают, что бактерицидность оксида азота главным образом направлена на уничтожение внутриклеточно паразитирующих микроорганизмов. В основе антимикробного действия N0 лежит способность его активных радикалов вызывать нитрозилирование и дезаминирование белков, окислительное повреждение и нарушение системы репарации ДНК бактериальных клеток [110, 144, 160, 30, 201, 194, 204].

В связи с вышеуказанным нами исследована активность кислородзависимой (НСТ-тест, активность СДГ, ЛДГ, цитохромоксидазы) и нитроксидзависимой (количество метаболитов NO) систем макрофагов, зараженных различающимися по вирулентности штаммами S. aureus и L. monocytogenes. Нарушение передачи электронов по электронно-транспортной цепи и клеточных мембран при стимуляции макрофага приводит к появлению активных метаболитов кислорода, которые чрезвычайно нестабильны и реактивны [10]. Из-за малого времени жизни их действие улавливается теми мишенями, которые находятся в непосредственной близости от них, к ним относятся различные соли тетразолия (НСТ-тест), используемые в качестве субстратов для определения активности ферментов. В зараженных слабовирулентным штаммом L. monocytogenes резидентных макрофагах (модель in vitro) нами выявлено повышение суммарной активности ферментов дыхательной цепи в

НСТ-тесте, повышение активности СДГ и ЛДГ, что косвенно свидетельствовало о наработке активных метаболитов кислорода уже через 15 мин контакта макрофагов с бактериями. При заражении фагоцитов высоковирулентным штаммом листерий активность данных ферментов дыхательной цепи достоверно не увеличивалась, оставаясь в пределах контроля. При этом повышение количества метаболитов N0 в фагоцитах наблюдалось как в ответ на заражение слабовирулентным, так и высоковирулентным штаммами L. monocytogenes,, что косвенно указывало на активацию их нитроксидзависимой системы.

При заражении морских свинок (модель in vivo) листериями как в фагоцитах очага воспаления (перитонеальный экссудат), так и в периферической крови отмечалась значительная активация нитроксидзависимой системы. В месте заражения реакция бактерицидных систем фагоцитов в ответ на введение L. monocytogenes, различающихся по вирулентности, была подобна активации таковых в первичной культуре макрофагов. По-нашему мнению, полученные данные об активации кислородзависмой ферментной системы (НСТ-тест) клеток перитонеального экссудата в ответ на инфицирование листериями следует отнести за счет стимуляции нейтрофилов, у которых происходит более мощный «кислородный взрыв», чем у макрофагов [151]. Это связывают с тем, что макрофаги не содержат миелопероксидазы - фермента, катализирующего образование высокореактивных гипогалоидов, а также с недостаточностью компонентов НАДФН-оксидазы [151, 147]. Полученные результаты по изучению бактерицидных функций фагоцитов в ходе листериозной инфекции показали, что защитные внутриклеточные механизмы макрофагов недостаточно активны в борьбе против высоковирулентного штамма L. monocytogenes. На это указывали низкая активность кислородзависимой ферментной системы и кратковременная активация нитроксидзависимой ферментной системы резидентных макрофагов при заражении указанными штаммами листерий. Известно, что вирулентные штаммы L. monocytogenes обладают факторами патогенности - листериолизином О, фосфолипа-зами С [154, 197], которые, по-видимому, способны подавлять и предотвращать действие бактерицидных веществ макрофагов.

В. случае заражения резидентных макрофагов (модель in vitro) различающимися по вирулентности штаммами S. aureus проявление активности бактерицидных систем было отличным от такового у фагоцитов, контактировавших с L. monocytogenes. Нами выявлена активация только кислородзависимой ферментной системы клеток, которая была более выраженной в ответ на авирулентный штамм стафилококка. При контакте с указанным штаммом в макрофагах повышалась суммарная активность ферментов дыхательной цепи (НСТ-тест) и активность дегидрогеназ (СДГ, ЛДГ). В случае заражения макрофагов вирулентным штаммом S. aureus на увеличение наработки АМК указывало только кратковременное повышение показателей НСТ-теста. Увеличение количества метаболитов N0 в ответ на инфицирование стафилококком в макрофагах не обнаружено. В системе in vivo реакция бактерицидных систем фагоцитирующих клеток в очаге воспаления и крови животных, зараженных S. aureus, в целом была подобна таковой в резидентных макрофагах.

Общеизвестно, что наличие инфекционного процесса в организме ведет к изменению клеточного состава, как в очаге воспаления, так и в периферической крови. В проведенных нами экспериментах после заражения морских свинок двумя использованными видами возбудителей обнаружено повышение количественного содержания.макрофагов и нейтрофилов в перито-неальном экссудате и крови. При* этом нами было обращено внимание на смену клеточных популяций в очаге воспаления в течение 19 часов после заражения. Если при заражении животных L. monocytogenes было установлено, что в начале в очаге воспаления преобладают макрофаги (через 0,5 ч), а в последующем - нейтрофилы (после 5 ч), то в ответ на введение S. aureus накопление нейтрофилов отмечалось в более ранние сроки (2 ч), при этом количество макрофагов в это время уменьшалось. О ранней реакции макрофагов в ответ на заражение S. typhimiiriurnvi Yersinia pseudotuberculosis указывается в работе Н.Г. Плеховой [35]. По-видимому, общеизвестный факт [29] о смене популяции нейтрофилов на макрофаги в очаге воспаления не является универсальным, что требует дальнейших исследований с использованием широкого спектра микроорганизмов.

Оценка ферментативной активности макрофагов, инфицированных S. aureus и L. monocytogenes, параллельно с функциональной активностью этих клеток позволило нам более полно судить о реактивности фагоцитов. При взаимодействии с листериями резидентные макрофаги проявляли в целом низкую фагоцитарную активность, особенно по отношению к высоковирулентному штамму. Это также подтверждалось при определении бактерицид-ности фагоцитов, которая была низкой в случае заражения указанным штаммом L. monocytogenes. При этом стимуляция макрофагов, контактировавших с листериями, выявляемая по снижению активности ферментов плазматической мембраны (АТФ-азы, S'-HyKrieoTHflasbi), была более интенсивной в ответ на инфицирование слабовирулентным штаммом. D.Portnoy et al. [197] утверждает, что макрофаги способны фагоцитировать листерии в большом количестве. Однако этот факт не подтвердился в наших исследованиях, так как фагоцитарные показатели для макрофагов по отношению к использованным нами штаммам (высоковирулентному и слабовирулентному) L. monocytogenes были низкими.

В случае заражения S. aureus фагоциты проявляли большую фагоцитарную активность, чем по отношению к L. monocytogenes. При исследовании бактерицидной активности макрофагов выявлено, что она проявляется только в отношении авирулентного штамма стафилококка. Снижение активности АТФ-азы и 5л-нуклеотидазы показало более выраженную стимуляцию фагоцитов в ответ на заражение S. aureus, по сравнению с L. monocytogenes.

При использовании метода электронно-цитохимической микроскопии, нами выявлена положительная реакция КФ в макрофагах, взаимодействующих с S. aureus и L. monocytogenes, которая проявлялась в виде КФ-позитивных гранул, расположенных диффузно в цитоплазме. Наряду с этим реакция на кислую фосфатазу в зараженных клетках слабо отличалось от таковой в интактных макрофагах (контроль). Это совпадало с результатами спектрофотометрического исследования данного фермента в фагоцитах, контактировавших с S. aureus и L. monocytogenes, где активность КФ была на протяжении всего срока заражения в пределах контрольного уровня. КФ-позитивные гранулы выявлялись также и на поверхности внутриклеточно расположенных бактерий. Подобная реакция вокруг микроорганизмов встречалась чаще в случае контакта макрофагов со стафилококком, чем при взаимодействии с листериями. В макрофагах, контактировавших с L. monocytogenes, визуализировались бактерии, расположенные как внутрифагосомаль-но, так и внутрицитоплазматически. Это еще раз подтверждает факт о том, что листерии являются внутрицитоплазматическими паразитами [58, 195, 139, 154]. Следует отметить, что при электронно-микроскопическом исследовании нами в фагоцитах выявлены листерии, расположенные внутри цитоплазмы, которые имели актиновый хвост, описанный многими исследователями [241, 218, 123, 190, 253]. С помощью этого образования, состоящего из актин-полимеризующего белка, L. monocytogenes способна не только передвигаться внутри цитоплазмы, но и переходить из клетки в клетку, инфицируя при этом весь организм [108, 152, 150].

По данным S. Duclos и М. Desiardins [101], у фагоцитированных макрофагами бактерий есть несколько возможных «судеб». Одни могут легко обезвреживаться и перевариваться в фагосоме, другие - существовать внутри фагосомы долгое время, а третьи - выходить из нее и размножаться в цитоплазме, инициируя внутриклеточный цикл развития. К последним относят вирулентные штаммы L. monocytogenes, что нашло подтверждение в наших исследованиях. Ряд авторов утверждает [107, 98], что именно макрофаги, инфицированные L. monocytogenes, являются основными распространителями листериозной инфекции. В работе D.A.Drevets [98] микроскопически выявлено, что из 30,5 % культивируемых с фагоцитами L. monocytogenes 22,2 % были ассоциированы с моноцитами и только 1,6 % - с нейтрофилами. Выделенные инфицированные листериями фагоциты затем инкубировали с эндо-телиальными клетками, в результате чего наблюдалось размножение L. monocytogenes и диссеминация их на незараженные эндотелиоциты. По мнению R.J.North et al. [185], резистентность к инфекции, вызванной факультативной внутриклеточной бактерией L. monocytogenes, у мышей зависит от антимикробных механизмов макрофагов и нейтрофилов. На это указывают также и результаты наших комплексных исследований. Если в макрофагах, контактировавших со слабовирулентным штаммом L. monocytogenes, выявлялась активация бактерицидных - нитроксидзависимой и кислородзависимой - систем, то микроорганизмы активней фагоцитировались и переваривались фагоцитами. Напротив, при контакте клеток с высоковирулентным штаммом листерий активность микробицидных систем была низкой, в связи с этим резидентные макрофаги обладали низкой переваривающей, фагоцитарной и бактерицидной активностью. Аналогичная закономерность прослеживалась нами при заражении макрофагов вирулентным штаммом S. aureus.

Таким образом, наши экспериментальные данные как на модели in vivo, так и in vitro показывают, что в развитии неспецифической резистентности к стафилококковой и листериозной инфекциям, наряду с кислородзависимой системой фагоцитов, участвует нитроксидзависимая система. Это согласуется с литературными данными [138, 235, 148, 208]. Вместе с тем, нами показано, что на этапах инициации инфекций реактивность этих ферментных систем зависит от вида и степени вирулентности возбудителя. Основываясь на собственных результатах, мы можем говорить о том, что при стафилококковой инфекции основное значение в киллинге возбудителя имеет кислородзависимая ферментная система макрофагов, а при листериозной -нитроксидзависимая ферментная система. Этот факт согласуется с работами других исследователей. Так, в работе J.D.MacMicking et al. [57] показано, что прогрессирование листериозной инфекции увеличивается у мышей с недостатком индуцибельной NOS, приводящем к дефициту продукции оксида азота.

Исходя из результатов исследования ферментативной и функциональ- . ной- активности фагоцитов, мы можем предположить, что вирулентный/высоковирулентный штаммы S. aureus и L. monocytogenes оказывают ин-гибирующее действие на активность исследованных ферментов и на процесс фагоцитоза, что коррелирует с бактерицидностью макрофагов. По-видимому, такую дезактивация макрофагов следует отнести к одному из эффектов факторов вирулентности'указанных возбудителей, который, вероятно, проявляется еще на начальном этапе контакта фагоцитов с микроорганизмами.

С помощью корреляционного анализа выявлена взаимосвязь между кислородзависимой и нитроксидзависимой ферментными системамигмакрофа-гов, зараженных S. aureus и L. monocytogenes, характер которой зависит от вида бактерий и степени их вирулентности. Наиболее прочная прямая -взаимосвязь между кислородзависимой и нитроксидзависимой фементными системами выявлена в ответ на заражение авирулентным/слабовирулентным штаммами S. aureus и L. monocytogenes. При инфицировании вирулентным/высоковирулентным штаммами указанных видов бактерий установлена слабовыраженная прямая взаимосвязь, а также обратная взаимосвязь по активности цитохромоксидазы и накоплением NO. По отношению к L. monocytogenes выявлена корреляция по активности СДГ и накоплению метаболитов оксида азота, тогда как к S. aureus этот фермент не включается. Следовательно, при листериозной инфекции стимуляция метаболической активности («дыхательный взрыв») идет с участием коферментнезависимой (НАДФ-независимой) дегидрогеназы - СДГ.

139

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Гончарук, Юлия Николаевна, Владивосток

1. Адаме, Р. Методы культуры клеток для биохимиков / Р.Адамс. М.: Мир, 1983.-264с.

2. Антоновская, И.И. Показатели фагоцитоза к стафилококкам с различной биологической активностью / И.И. Антоновская, С.Ф. Анатолий // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1976.-№4.-С.64-67.

3. Бутаков, А.А. Разработка комплекса экспресс-методов оценки фагоцитарного звена иммунитета для иммуноэпидемиологических исследований: Дис. канд. медицинских наук: 14.00.36 /М., 1991.-131с.

4. Бондаренко, В.М. Антимикробная активность окиси азота и ее роль в инфекционном процессе / В.М. Бондаренко, Н.А. Виноградов, В.В. Малеев //Журн. микробиол.-1999.-№5.-С.61-67.

5. Величковский, Б.Т. Молекулярные и клеточные основы экологической пульмонологии / Б.Т. Величковский // Пульмонология.-2000.-Т.10,№3.-С.2-8.

6. Виноградов, Н.А. Антимикробные свойства окиси азота и регуляция ее биосинтеза в макроорганизме / Н.А. Виноградов // Антибиотики и химиотерапия.- 1998.-Т.43, №2.-С.24-29.

7. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю.А. Владимиров //Вестник РАМН.-1998.-№7.-С.43-51.

8. Владимиров, Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Соросовский образовательный журнал.-2000.-Т.6, №12.-С.13-19.

9. Воробьев, А.И. Руководство по гематологии/ А.И. Воробьев-М.-2002.-Т. 1.-3 50с.

10. Гамалей, И.Ф. Перекись водорода как сигнальная молекула / И.Ф. Гамалей, И.В. Клюбин // Цитология.- 1996.-Т.З8, №12.-С. 1223-1247.

11. Горрен, А.К.Ф. Комплексная энзимология синтазы оксида азота / А.К.Ф. Горрен, Б. Майер //Биохимия.-1998.-№7.-С.870-880.

12. Готов, И.Н. Функции и свойства супероксиддисмутаз микроорганизмов / И.Н. Готов, С.М. Кулакова // Успехи микробиологии.-1981.-№13.-С.30-55.

13. Действие даназола на активность 5'-нуклеатидазы периотонеальных макрофагов мышей / В.В. Митькин, Н.И. Волков, Т.Я. Пшеничникова и др. // Бюл. экп. биол. и мед.-1992.-№2.-С.51-54.

14. Зенков, Н.К. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах / Н.К. Зенков, Е.Б. Меныцикова // Успехи современной биологии.-1993.-Т.113, вып.З.-С.286-296.

15. Карр, Я. Макрофаги. Обзор ультраструктуры и функции / Я. Карр. -М.: Медицина, 1978.-190с.

16. Кириличева, Г.Б. Поведение активности ферментов цитоплазматиче-ской мембраны макрофагов под действием бактериальных полисахаридов / Г.Б. Кириличева, А.А. Кирилличева, М.А. Туманян // Имму-номодуляторы в инфекционной патологии. М., 1988.-С.55-56.

17. Кисляк, Н.С. Клетки крови у детей в норме и патологии / Н.С. Кисляк, Р.В. Ленская. М., 1978.-250с.

18. Клебанов, Г.И. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов / Г.И. Клебанов, Ю.А. Владимиров // Успехи современной биологии .-1999.-Т. 119, №5.-С.462-475.

19. Ковальчук, JI.В. Иммунорегуляторная роль моноцитов в норме и при патологии / Л.В. Ковальчук, А.Н. Чередеев // Иммунология.-1991.-Т.27.-С.153-156.

20. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рем. М.: Мир, 2000.-467с.

21. Комплексная оценка функции фагоцитов при воспалительных заболеваниях: Метод. Рекомендации / Сост. Д.Н. Маянский, В.И. Щербаков, О.П. Макарова. Новосибирск, 1988.-18с.

22. Кулинский, В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский образовательный журнал.-1999.- №1.-С.2-7.

23. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высшая школа, 1990. -С.255-303.

24. Лойда, 3. Гистохимия ферментов лабораторные методы / 3. Лойда, Р. Госсрау, Т. Шиблер. М.: Мир, 1982.-270с.

25. Маеда, X. Оксид азота и кислородные радикалы при- инфекции, воспалении и раке / X. Маеда, Т. Акаике // Биохимия.-1998.-Вып.63, №7.-С.1007-1019.

26. Майорова, Г.Ф. Взаимодействие макрофагов иммунизированных животных с различными по токсиногенезу штаммами стафилококка / Г.Ф. Майорова, Т.Н. Маслова, В.Е. Коростелев // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1974.-С.104-108.

27. Маянский, Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / Д.Н. Маянский, А.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1989.-344с.

28. Меныцикова, Е.Б. Оксид азота и NO-синтаза в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях / Е.Б. Меныцикова, Н.К. Зенков, В.П. Реутов // Биохимия.-2000.-Т.65, вып.4.-С.485-503.

29. Меныцикова, Е.Б. Биохимия окислительного стресса / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков, С.М. Шергин. Новосибирск, 1994.- 203с.

30. Мисюк, Н.С. Корреляционно-регрессионный анализ в клинической медицине / Н.С. Мисюк, А.С. Мастыкин, Г.П. Кузнецов. М.: Медицина, 1975.-192с.

31. Оксид азота в механизмах патогенеза внутриклеточных инфекций / С.Я. Проскуряков, С.И. Бикетов, А.И. Иванников и др. // Иммуноло-гия.-2000.-№4.-С.9-20.

32. Паркер, Ч.В. Медиаторы: высвобождение и функции / Ч.В. Паркер // Иммунология.-М.-1987.- Т.З.-С. 170-231.

33. Плехова, Н.Г. Функциональное состояние полиморфноядерных лейкоцитов и их влияние на функции макрофагов при некоторых бактериальных инфекциях: Автореф. дис. канд. мед. наук: 03.00.11 / Владивосток, 1996.-23с.

34. Поздеев, O.K. Медицинская микробиология / O.K. Поздеев. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2001.-668с.

35. Реутов, В.П. NO-синтазная и нитритредуктазная компоненты цикла оксида азота / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина // Биохимия.-1998.-Т. 63, вып. 7.-С.1029-1040.

36. Ройт, А. Основы иммунологии / А. Ройт. М.: Мир, 1991.-328с.

37. Смирнова, A.M. Микробиология и профилактика стафилококковых инфекций / A.M. Смирнова, А.А. Трояшкин, Е.М. Падерина. М.: Медицина, 1977.-146с.

38. Сомов, Г.П. Адаптация патогенных бактерий к абиотическим факторам окружающей среды / Г.П. Сомов, JI.C. Бузолева. Владивосток: ППК, 2004.-167с.

39. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия: Метод, рекомендации / Сост. М.Е. Виксман, А.Н. Маянский. Казань, 1979.-31с.

40. Справочник биохимика / Р. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот и др. М.: Мир, 1991.-51с.

41. Тартаковский, И.С. Факторы патогенности листерий и их роль в патогенезе и лабораторной диагностике листериоза / И.С. Тартаковский, С.А. Ермолова, В.В. Малеев // Журн. микробиол.-2003.-Вып. 4.-С.31-36.

42. Тотолян, А.А. Клетки иммунной системы / А.А. Тоталян, И.С. Фрейд-лин. Санкт-Петербург: Наука, 2000.-232с.

43. Фрейдлин, И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейд-лин. М.: Медицина, 1984.-272с.

44. Фрейдлин, И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейдлин. М: Медицина, 2000.-272с.

45. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих / В.П. Реутов, Е.Г. Сорокина, В.Е. Охотин и др. М.: Наука, 1997.-159с.

46. Хаитов, P.M. Некоторые избранные проблемы функциональной активности макрофагов / P.M. Хаитов, В.М. Земсков // Журнал микробиол.1995.-№3.-С.27-32.

47. Хейхоу, Ф.Г.Дж. Гематологическая цитохимия/ Ф.Г.Дж. Хейхоу, Д. Кваглино. М.: Медицина, 1983.-320с.

48. Электронномикроскопические методы исследования биологических объектов / В.И. Бирюзова, B.JI. Боровякин, В.П. Гилев и др. М., 1963 .-204с.

49. Acquired resistance against a secondary infection with Listeria monocytogenes in mice is not dependent on reactive nitrogen intermediates / J.N. Samsom, J.A.M. Langermans, P.H.P. Groeneveld et al. // Infect. Immun.1996.-Vol.64.-P.l 197-1202.

50. Adams, D.R Nitric oxide: physiological roles, biosynthesis and medical uses / D.R. Adams, M. Brochwicz-Lewinski, A.R. Butler // Fortschr. Chem. Org. Naturst.-1999.-Vol.76.-P.l-211.

51. Aderem, A. Phagocytosis and the inflammatory response / A. Aderem // J.1.fect. Dis.-2003 .-Vol. 187.-P.340-345.

52. Aderem, A. Mechanisms of phagocytosis in macrophages / A. Aderem, D.M. Underhill // Annu. Rev. Immunol.-1999.-Vol.l7.-P.593~623.

53. Alfred, C.E. Role of transferrin, transferrin receptors, and iron in macrophage Listericidal activit / C.E. Alfred, Т.Е. King, P.A. Campbell // J. Exp. Med.-1991 .-Vol. 174, №2.-P.459-466.

54. Altered immune responses in mice lacking inducible nitric oxide synthase / X.-Q. Wei, I.G. Charles, A. Smith et al. // Nature.-1995.-Vol.375.-P.408-411.

55. Altered response to bacterial infection and endotoxic shock in mice lacking inducible nitric oxide synthase / J.D. MacMicking, C. Nathan, G. Horn et al. // Cell.-1995.-Vol.81 .-P.641-650.

56. Alvarez-Dommguez, C. Internalized Listeria monocytogenes modulates intracellular trafficking and delays maturation of the phagosome / C. Alva-rez-Dominguez, R. Roberts, P.D. Stahl // J. Cell. Science.- 1997.-Vol.l 10. P.731-743.

57. Amano, F. Improved detection of nitric oxide radical (NO') production in an activated macrophage culture with a radical scavenger, carboxy PTIO, and Griess reagent / F. Amano, T. Noda // FEBS Lett.-1995.-Vol.368, №3.-P.425-428.

58. An outbreak of febrile gastroenteritis associated with corn contaminated by Listeria monocytogenes/ P. Aureli, G.C. Fiorucci, D. Caroli et al. // N. Engl. J. Med.-2000.-Vol.234.-P. 1236-1241.

59. Antimicrobial actions of the NADPH phagocyte oxidase and inducible nitric oxide synthase in experimental' salmonellosis. I. Effects on microbial killing by activated peritoneal macrophages in vitro / A. Vazquez-Torres,

60. J. Jones-Carson, P. Mastroeni et al. // J. Exp. Med.- 2000.-Vol.192, №2.-P.227-236.

61. Antunes, F. Estimation of H2O2 gradients across biomembranes / F. An-tunes, E. Cadenas // FEBS Lett.-2000.-Vol.475.-P. 121-126.

62. Apparent hydroxy 1 radical production by peroxynitrite: implications for endothelial injury from nitric oxide and superoxide / J.S. Beckman, T.W. Beckman, J. Chen et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1990.-Vol.87.-P. 1620-1624.

63. Are free radicals responsible for endothelial cell killing of Staphylococcus aureus? / B. Zhang, M. Centra, G.L. Cao et al. // Immunol. Lett.-1997.-Vol.58.-P.l 13-120.

64. Babior, B.M. Oxygen-dependent microbial killing by phagocytes / B.M. Babior //N. Engl. J. Med.-1978.-Vol.298.-P.659-668.

65. Babior, B.M. NADPH oxidase: an update / B.M. Babior // Blood.-1999.-Vol.93.-P.1464-1476.

66. Babior, B.M. NADPH oxidase / B.M. Babior // Curr. Opin. Immunol.-2004.-Vol.l6.-P.42-47.

67. Bast, A. Is formation of reactive oxygen by cytochrome P-450 perilous and predictable / A. Bast // Trends Pharmacol. Sci.-1986.-Vol.7.-P.266-270.

68. Baughn, E. Cell mediated immune phenomena induced by lymphokines from splenic lymphocytes of mice with chronic staphylococcal infection / E. Baughn, P.F. Bonventre // Infect. And Immun.-1975.-Vol.ll, №2.-P.313-319.

69. Beckman, J.S. Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: The good, the bad, and the ugly / J.S. Beckman, W.H. Koppenol // Am. J. Physiol.-1996.-Vol.40.-P. 1424-1437.

70. Beyer, W. Syperoxide dismutases / W. Beyer, J. Imlay, I. Fridovich // Progr. Nucl. Acid. Res. Mol. Biol.-1991.-Vol.40.-P.221-253.

71. Bogdan, C. Of microbes, macrophages and nitric oxide / C. Bogdan // Behring. Inst. Mitt.-1997.-№99.-P.58-72.

72. Bogdan, C. The Multiplex Function of nitric oxide in (auto)immunity / C. Bogdan // J.' Exp. Med.- 1998.-Vol. 187.-P. 1361 -1365.

73. Bogdan, C. The role of nitric oxide in innate immunity / C. Bogdan, M. Rollinghoff, A. Diefenbach//Immunol. Rev.-2000.-Vol. 173.-P. 17-26.

74. Braun, L. Interactions between Listeria monocytogenes and host mammalian cells / L. Braun, P. Cossart // Microbes Infect.-2000.-Vol.2.-P.803-811.

75. Bredt, D.S. Endogenous nitric oxide synthesis: biological functions and^ pathophysiology / D.S. Bredt // Free Radic. Rec.-1999.-Vol.31, №6.-P.577-596.

76. Burgner, D. Nitric oxide and infections diseased / D. Burgner, K. Rockett, D. Kwiatkowski // Arch. Dis. Child.-1999.-Vol.8, №2.-P.185-189.

77. Ca-calmodulin-dependent formation of hydrogen peroxidase by brain nitric oxide synthase / B. Heinzel, M. John, P. Klatt, et al. // Biochem. J.-1992.-P.627-630.

78. Cattell, V. Inducible nitric oxide synthase in inflammation / V. Cattell, A. Jansen // Histochem. J.-1995.-Vol.27, №10.-P.777-784.

79. Chandel, N.S. Cellular oxygen sensing by mitochondria: old questions, new insight / N.S. Chandel, P.T. Schumacker // J. Appl. Physiol.-2000.-Vol.88- P.1880-1889.

80. Cloned and expressed nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450 reductase / D.S. Bredt, P.M. Hwang, C.E. Glatt et al. // Nature.-1991.-Vol.351.-P.714-718.

81. Conlan, J.W. Critical roles of neutrophils in host defense against experimental systemic infection of mice by Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, and Yersinia enterocolitica / J.W. Conlan // Infect. Immun.-1997.-Vol.65.-P.630-635.

82. Constitutive and inducible nitric-oxide synthases incorporate molecular oxygen into both nitric oxide and citrulline / A.M. Leone, R.M. Palmer, R.G. Knowles et al. //Ibid.-1991.-Vol.266.-P.23790-23795.

83. Cooperation between reactive oxygen and nitrogen intermediates in killing of Rhodococcus equi by activated macrophages / P.A. Darrah, M.R. Hon-dalus, H. Ishiropoulos et al. // Infect, and Immun.-2000.-Vol.68, №6.-P.3587-3593.

84. Croen,.K.D. Evidence for an antiviral effect of nitric oxide. Inhibition of herpes simplex vims type 1 replication / K.D.' Croen // J. Clin. Invest.-1993 .-Vol.91 .-P.2446-2452.

85. Cross, A.R. Enzymic mechanisms of superoxide production/ A.R. Cross, O.T.G. Jones //Biochim. Biophys. Acta.-1991.-Vol.l057.-P.281-298.

86. Cunnion, K.M. Capsule production and growth phase influence binding of complement to Staphylococcus aureus / K.M. Cunnion, J.C. Lee, M.M. Frank // Infect. Immun.-2001.-Vol.69.-P.6796-6803.

87. C.de Chastellier, P. Berche I I Infect. Immun.-l 994.-Vol.62, №2.-P.543-553.

88. DeLeo, F.R. Assembly of the phagocyte NADPH oxidase: molecular interactions of oxidase proteins / F.R. DeLeo, M:T. Quinn // J. Leukoc. Biol.-1996.-Vol.60.- P.677-691.

89. Determination of mitochondrial reactive oxygen species: methodological-aspects / C,cile Batandier, E.Fontaine, K,riel Christiane et al. // J. Cell. Mol. Med.-2002.-Vol.6, №2.-P.175-187.

90. Dramsi, S. Listeriolysin O: a genuine cytolysin optimized for an intracellular parasite / S. Dramsi, P. Cossart // J. Cell Biol.-2002.-Vol.156.-P.943-946.

91. Drapier, J.C. Interferon-y and tumor necrosis factor induced the L-arginine-dependent cytotoxic effector mechanism in murine macrophages / J.C. Drapier, J. Wietzerbin, J.B.Jr. Hibbs // Eur. J. Immunol.-1988.-Vol. 18.-P. 1587-1592.

92. Drevets, D.A. Dissemination of Listeria monocytogenes by infected phagocytes / D.A. Drevets // Infect. Immun.-1999.-Vol.67.-P.3512-3517.

93. Droge, W. Free radicals in the physiological control of cell function / W. Droge //Physiol. Rev.-2002.-Vol.82, №l.-P.47-95.

94. Dual role of phagocytic NADPH oxidase in bacterial killing / B.K. Rada; M. Geiszt, K. Kaldi et al. //Blood.-2004.-Vol.l04.-P.2947-2953.

95. Duclos, S. Subversion of a young phagosome: the survival strategies of intracellular pathogens / S. Duclos, M. Desjardins // Cell Microbiol.-2000.-Vol.2.-P.365-377.

96. E-cadherin is the receptor for internalin, a surface protein required for entry of Listeria monocytogenes into epithelial cells / J. Mengaud, H. Ohayon, P. Gounon et al. // Cell.-1996.-Vol.84.-P.923-932.

97. Edelson, B.T. Immunity to listeria infection / B.T. Edelson, E.R. Unanue // Curr. Opin. Immunol. 2000.-Vol.l2.-P.425-431.

98. Effect of fumonisin B1 on inducible nitric oxide synthase and cyclooxy-genase-2 in LPS-stimulated J774A.1 cells / R. Meli, M.C. Ferrante, G.M. Raso et al. // Life Sci.-2000.-Vol.67, №23.-P.2845-2853.

99. Effect of nitric oxide on staphylococcal killing and interactive effect with" superoxide / S.S. Kaplan, J.R. Lancaster, R.E. Basford et al. // Infect, and Immun.-1996.-Vol.64, №l.-P.69-76.

100. Electron microscopic study of phagocytosis of Echerichia- coli by polymorphonuclear leukocytes / M. Rozenberg-Arska, M.E. Salters, J.A.G. van Strijp et al. // Infect. Immun.-1985.-Vol.50, №6.-P.852-859.

101. Entry of Listeria monocytogenes into neurons occurs by cell-to-cell spread: an in vitro study / S. Dramsi, S. Levi, A. Thriller et al. // Infect. Immun.-1998—Vol.66.-P.4461-4468.

102. Expression of nitric oxide synthases and effects of L-arginine and L-NMMA on nitric oxide production and fluid transport in collagenous colitis / A. Perner, L. Andresen, M. Normark et al // Gut.-2001.-Vol.49.-P.387-394.

103. Extensive nitration of protein tyrosines in human atherosclerosis detected by immunohistochemistry / J.S. Beckman, Yz Ye, P.G. Anderson et al. // Biol. Chem. Hoppe Seyler.-1994.-Vol.375.-P.81-88.

104. Fang, F.C. Mechanisms of nitric oxide-related antimicrobial activity / F.C. Fang // J. Clin. Invest.-1997.-Vol.99.-P.2818-2825.

105. Fang, F.C. Antimicrobial reactive oxygen and nitrogen species: concepts and controversies / F.C. Fang // Nat. Rev. Microbiol.-2004.-Vol.2.-P.820-832.

106. Fang, F.C. Nitric oxide production by human macrophages: there's NO doubt about it / F.C. Fang, A. Vazquez-Torres // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol.-2002.-Vol.282, №5.-P.941 943.

107. Fenton, HJ.H. The oxidation of polyhydric alcohols in the presence of iron /H.J.H. Fenton, H. Jackson//J. Chem. Soc. Trans.-1899.-Vol.75.-P.l-l 1.

108. Ferencik, M. Lysosomal enzymes of phagocytes and the mechanism of their release / M. Ferencik, J. Stefanovic // Folia microbial. Praha.-1979.-Vol.24, №6.-P.503-575.

109. Flesch, I.E.A. Mechanisms involved in mycobacterial growth inhibition by interferon у activated bone marrow macrophages: role of reactive nitrogen intermediates / I.E.A. Flesch, S.H.E. Kaufmann // Infect. Immun.-1991-Vol.59.-P. 3213-3218.

110. Fridovich, I. Overview: biological sources of О{11. Fridovich // Meth. En-zymol.-1984.-Vol.105.-P.59-61.

111. Fridovich, I. Superoxide radical and superoxide dismutases /1. Fridovich // Annu. Rev. Biochem.- 1995.-Vol.64.-P.97-l 12.

112. Furth, R. van. Production and migration of monocytes and kinetics of macrophages / R.van. Furth // Mononuclear Phagocytes.-Leiden, 1992.-P.3-12.

113. Gabig, T.G. The killing of pathogens by phagocytes / T.G. Gabig, B.M. Babior//Annu. Rev. Med.-198l.-Vol.32.-P.313-326.

114. Gamma-interferon limits access of Listeria monocytogenes to the macrophage cytoplasm / D.A. Portnoy, R.D. Schreiber, P. Connelly et al. // J. Exp. Med.-1989.-Vol.l70.-P.2141-2146.

115. Geller, D.A. Molecular biology of nitric oxide synthases / D.A. Geller, T.R. Billiar // Cancer Metastasis Rev.-1998.-Vol. 17, №l.-P.7-23.

116. Goldberg, M.B. Actin-based motility of intracellular microbial pathogens / M.B. Goldberg // Microbiol, and Mol. Biol. Rev. 2001.-Vol.65, №4.-P.595-626.

117. Goulet, V. Listeriosis in 225 non-pregnant patients in 1992: clinical aspects and outcome in relation to predisposing conditions / V. Goulet, P. Marchetti // Scand. J. Infect. Dis.-1996.-Vol.28.-P.367-374.

118. Gow, A J. Reactions between nitric oxide and haemoglobin under physiological conditions / A.J. Gow, J.S. Stamler // Nature.-1998.-Vol.391.-P.169-173.

119. Greenberg, S. Phagocytosis and innate immunity / S. Greenberg, S. Grin-stein// Curr. Opin. Immunol.-2002.-Vol.l4.-P.136~145.

120. Gregory, S.H. Expression of the inlAB operon by Listeria monocytogenes is not required for entry into hepatic cells in vivo / S.H. Gregory, A.J. Sagnimeni, E.J. Wing//Infect. Immun.-1996.-Vol.64.-P.3983-3986.

121. Groves, J.T. Nitric oxide synthase: models and mechanisms / J.T. Groves C.C. Wang // Curr. Opin. Chem. Biol.-2000.-Vol.4, №6.-P.687-695.

122. Haber, F. The catalytic decomposition of hydrogen peroxide by iron salts / F. Haber, J. Weiss //Proc. Roy. Soc. London.-1934:-Vol.l47.-P.332-351.

123. Halliwell, B. Antioxidant defence mechanisms: from the beginning to the end (of the beginning) / B. Halliwell // Free Radic. Res.-1999.-Vol.31.-P.261-272.

124. Han, D. Mitochondrial respiratory chain-dependent generation of superoxide anion and its release into the intermembrane space / D. Han, E. Williams, E. Cadenas // Biochem. J.-2001.-Vol.353.-P.411-416.

125. Harrison, R.E. Microbial killingtoxidants, proteases and ions / R.E. Harrison, N. Touret, S. Grinstein// Curr. Biol.-2002.-Vol.l2.-P.357-359.

126. Hinz, B. Nitric oxide inhibits inducible nitric oxide synthase mRNA expression in RAW 264.7 macrophages / B. Hinz, K. Brune, A. Pahl // Biochem. Biophys. Res. Commun.-2000.-Vol.271, №2.-P. 353-357.

127. Hope, B.T. Histochemical characterization of neuronal NADPH-diaforase / B.T. Hope, S.R. Vincent // J. Histochem. Cytochem.-1989:-Vol.37.-P.653-661.

128. Identification of nitric oxide synthase as a protective locus against tuberculosis / J.D. MacMicking, R.J. North, R. LaCourse et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1997.-Vol.94.-P.5245-5248.

129. Inducible nitric oxide synthase plays a critical role in resolving intestinalinflammation / D.-M. McCafferty, J.S. Mudgett, M.G. Swain et al. // Gastroenterology.- 1997.-Vol. 112.-P. 1022-1027.

130. Induction of in vitro human macrophage anti-Mycobacterium tuberculosis activity: requirement for IFN-gamma and primed lymphocytes / M.G. Вonecini-Almeida, S. Chitale, I. Boutsikakis et al. // J. Immunol.-1998.-Vol.160, №9.-P. 4490-4499.

131. Interaction of Listeria monocytogenes with human brain microvascular endothelial cells: an electron microscopic study / L. Greiffenberg, W. Goebel, K.S. Kim et al. // Infect. Immun.-2000.-Vol.68.-P.3275-3279.

132. Interferon-induced L-arginine-dependent toxoplasmastatic activity in murine peritoneal macrophages is mediated by endogenous TNF / J.A.M.1.ngermans, M.E.B. van der Hulst, P.H. Nibbering et al. // J. Immunol.-1992.-Vol.148.-P.568-574.

133. In vitro model of penetration and intracellular growth of Listeria monocytogenes in the human enterocyte-like cell line Caco-2 / J.-L. Gaillard, P. Berche, J. Mounier et al. // Infect. Immun.-1987.-Vol. 198755.-P.2822-2829.

134. In vivo regulation of replicative Legionella pneumophila lung infection by endogenous tumor necrosis factor alpha and nitric oxide / J.K. Brieland, D.G. Remick, P.T. Freeman et al. //Infect. Immun.-1995.-Vol.63-P.3253-3258.

135. Ischiropoulos, H. Biological tyrosine nitration: A pathophysiological function of nitric oxide and reactive oxygen species / H. Ischiropoulos // Arch. Biochem. Biophys.-1998.-Vol.356.-P.l-l 1.

136. Ischiropoulos, H. Peroxynitrite-mediated oxidative protein modifications / H. Ischiropoulos, A.B. Al-Mehdi //FEBS Lett.-1995.-Vol.364.-P.279-282.

137. Klebanoff, S.J. Reactive nitrogen intermediates and antimicrobialactivity: role of nitrite / S.J. Klebanoff// Free Radic. Biol. Med.-1993.-Vol.14.-P.351-360.

138. Klebanoff, S.J. Myeloperoxidase: friend and foe / S.J. Klebanoff // J. Leu-koc. Biol.-2005.-Vol.77.-P.l-28.

139. Killing mechanisms of Listeria monocytogenes in activated macrophages as determined by an improved assay system / S. Ohya, H. Xiong, Y. Ta-nabe et al. // J. Med. Microbiol.-1998. Vol.47.-P.211-215.

140. Killing of virulent mycobacterium tuberculosis by reactive nitrogen intermediates produced by activated murine macrophages / J. Chan, Y. Xing, R.S. Magliozzo et al. //J. Exp. Med.-1992.-Vol.l75.-P.llll-1122.

141. Kuhn, M. Internalization of Listeria monocytogenes by nonprofessional and professional phagocytes. Subcell / M. Kuhn, W. Goebel // Biochem.-2000.-Vol.33.-P .411-436.

142. Labro, M.-T. Interference of antibacterial agents with phagocyte functions: immunomodulation or "immuno-fairy tales"? / M.-T. Labro // Clin. Microbiol. Rev.-2000.-Vol. 13, № 4.-P.615-650.

143. Listeria monocytogenes exploits normal host cell processes to spread from cell to cell / J.R. Robbins, A.I. Barth, H. Marquis et al. // J. Cell Biol.-1999.-Vol.146.-P: 1333-1350.

144. Listeria monocytogenes infects human endothelial cells by two distinct mechanisms / D.A. Drevets, R.T. Sawyer, T.A. Potter et al.// Infect. Im-mun.-1995 .-Vol.63 .-P.4268-4276.

145. Listeria pathogenesis and molecular virulence determinants / J.A. Vazquez-Boland, M. Kuhn, P. Berche et al. // Clin. Microbiol. Rev-2001.-Vol.14, №3.-P.584-640.

146. Listeriolysin О is essential for virulence of Listeria monocytogenes: direct evidence obtained by gene complementation / P. Cossart, M.F. Vincente, J. Mengaud et al. // Infect. Immun.-1989.-Vol.57.-P.3629-3636.

147. Lorber, B. Listeriosis /B. Lorber//Clin. Infect. Dis.-1997.-Vol.24.-P.l-l 1.

148. Lowy, F.D. Staphylococcus aureus infections / F.D. Lowy // N. Engl. J. Med.-1998.-Vol.339.-P.520-532

149. Mackaness, G.B. Cellular resistance to infection / G.B. Mackaness // J. Exp. Med.-1962.-Vol. 116.-P.381 -417.

150. MacMicking, J. Nitric oxide and macrophage function / J. MacMicking, Q.W. Xie, C. Nathan// Annu. Rev. Immunol.-1997.-Vol.l5.-P.-323-350.

151. MacMillan-Crow, L.A. Peroxynitrite-mediated inactivation of manganese superoxide dismutase involves nitration and oxidation of critical tyrosine residues / L.A. MacMillan-Crow, J.P. Crow, J.A. Thompson // Biochemis-try.-1998.-Vol.37.-P. 1613-1622.

152. Macrophage nitric oxide synthase associates with cortical actin but is not recruited to phagosomes / J.L. Webb, M.W. Harvey, D.W. Holden et ah // Infect, and Immun.-2001.-Vol.69, №10.-P.6391-6400.

153. Marrack, P. The staphylococcal enterotoxins and their relatives1/ P.' Mar-rack, J. Kappler // Science.-1990.-Vol.248.-P.705-711.

154. Mayer, B. Brain nitric oxide synthase is a biopterin and flavin-containing multi-functional oxido-reductase / B. Mayer, M. John, B. Heinzel // FEBS Lett.-1991.-Vol.288.-P. 187-191.

155. McCord, J.M. Sources of free radicals / J.M: McCord, B.A. Omar // Toxicol. Ind. Health.-1993.-Vol.9.-P.23-27.

156. McLennan, H.R. The contribution of mitochondrial respiratory complexes to the production of reactive oxygen species / H.R. McLennan, M. Degli Esposti // J. Bioenerg. Biomembr.-2000.-Vol.32.-P.153-162.

157. Mice lacking inducible nitric oxide synthase are not resistant to lipopoly-saccharide-induced death / V.E. Luabach, E.G. Shesely, O. Smithies et al. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1995.-Vol.92.-P. 10688-10692.

158. Miller, R.A. Role of oxidants in microbial pathophysiology / R.A. Miller,

159. B.E. Britigan// Clin. Microbiol. Rev.-1997.-Vol.10.-P.l-18.

160. Mohazzab, K.M. Properties of a superoxide anion-generating microsomal NADPH oxidoreductase, a potential pulmonary artery PO 2 sensor / K.M. Mohazzab, M.S. Wolin // Amer. J. Physiol.-1994.-Vol.267.-P.L823-831.

161. Molecular determinants of Listeria monocytogenes pathogenesis / D.A. Portnoy, T. Chakraborty, W. Goebel et al. // Infect. Immun.-1992.-Vol.60.-P.1263-1267.

162. Murray By, H.W. Macrophage microbicidal mechanisms in vivo: reactive nitrogen versus oxygen intermediates in the killing of intracellular visceral Leishmania donovani / H.W. Murray By, C.F. Nathan // J. Exp. Med.-1999.-Vol.189, №4.-P.741-746.

163. Nathan, C. Nitric oxide as a secretory product of mammalian cells / C. Nathan // Faseb J.-1992.-Vol.6.-P.3051-3064.

164. Nathan, C. Inducible nitric oxide synthase: what difference does it make? /

165. C.Nathan//J. Clin. Invest.-1997.-Vol.100.-P.2417-2423.

166. Nathan, С. Reactive oxygen and nitrogen intermediates in the relationship between mammalian hosts and microbial pathogens / C. Nathan, M.U. Shi-loh // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-2000.-Vol.97, №16.-P.8841-8848.

167. Nitric oxide activates guanylate cyclase and increases guanosine 3'-5'-cyclic monophosphate levels in various tissue preparations / W.P. Arnold, C.K. Mittal, S. Katsuki et all // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-1977.-Vol.74, №8.-P.3203-3207.

168. Nitric oxide: a cytotoxic activated macrophage effector molecule / J.B. Hibbs, R.R. Taintor, Z. Vavrin et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun.-1988 .-Vol. 157.-P.87-94.

169. Nitric oxide and intracellular heme / Y.-M. Kim, H.A. Bergonia, C. Muller et al. // Adv. Pharmacol.-1995.-Vol.34.-P.277-291.

170. Nitric oxide diffusion in membranes determined by fluorescence quenching / A. Denicola, J.M. Souza, R. Radi et al. // Arch. Biochem.OBiophys.-1996.-Vol.328.-P.208-212.

171. Nitric oxide is protective in listeric meningoencephalitis of rats / K.A. Remer, T.W. Jungi, R. Fatzer et al. // Infect, and Immun.-2001.-Vol.69, №6.-P.4086-4093.

172. Nitric oxide produced during murine listeriosis is protective / K.S. Boock-var, D.L. Granger, R.M. Poston et al. // Infect. Immun.-1994.-Vol.62, №3.-P.1089-l 100.

173. Nitric oxide production and inducible nitric oxide synthase expression in peritoneal macrophages of cirrhotic patients / W. Jimenez, J. Ros, M. Morales-Ruiz et al. // Hepatology.-1999.-Vol.30, №3.-P.670-676.

174. North, R.J. Murine listeriosis as a model of antimicrobial defense / R.J. North, P.L. Dunn, J.W. Conlan//Immunol. Rev.-1997.-Vol.l58.-P.27-36.

175. Novikoff, A.B. Visualisation of peroxisomes (microbodies) and mitochondria with diaminobenzidine / A.B. Novikoff, S. Goldfischer // J. Histo-chem. Cytochem.-1969.-Vol. 17.-P.675-680.

176. Nulton-Persson, A.C. Modulation of mitochondrial function by hydrogen peroxide / A.C. Nulton-Persson, L.I. Szweda // J. Biol. Chem.-2001.-Vol.276.-P.23357-23361.

177. Ohkuma, S. Fluorescence probe measurement of the intralisosomal pH in living cells and the perturbation of pH by various agents / S. Ohkuma, B. Poole // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.-1978.-Vol.75, №7.-P.3327-3331.

178. Pantaloni, D. Mechanism of actin-based motility / D. Pantaloni, C. Le Clainche, M.F. Carlier // Science.-200l.-Vol.292.-P. 1502-1506.

179. Parks, D.A. Xanthine oxidase: biochemistry, distribution and physiology / D.A. Parks, D.N. Granger // Acta physiol. Scand.-1986.- Vol.548.-P.87-99.

180. Pavlov, E.P. pH changes of cytoplasm in phagocytosis of microbes stained with indicator dyes / E.P. Pavlov, V.N. Solov'ev // Biull. Eksp. Biol. Med.-1967.-Vol.63 .-P.78-81.

181. Phenotype of mice and macrophages deficient in both phagocyte oxidase and inducible nitric oxide synthase / M.U. Shiloh, J.D. MacMicking, S. Nicholson et al. // Immunity.-1999.-Vol.l0.-P.29-38.

182. Portnoy, D.A. The cell biology of Listeria monocytogenes infection: the intersection of bacterial pathogenesis and cell-mediated immunity / D.A. Portnoy, V. Auerbuch, I.J. Glomski // J. Cell Biol.-2002.-Vol. 158, №3.-P.409-414.

183. Portnoy, D.A. Role of hemolysin for the intracellular growth of Listeria monocytogenes / D.A. Portnoy, P.S. Jacks, D.J. Hinrichs // J. Exp. Med.-1988.-Vol.l67.-P.1459-1471.

184. Protective role of nitric oxide in Staphylococcus aureus infection in mice / S. Sasaki, T. Miura, S. Nishikawa et al. // Infect Immun.-1998.-Vol.3.-P.1017-1022.

185. Protein kinase C5 regulates p67phox phosphorylation in human monocytes / X. Zhao, B. Xu, A. Bhattacharjee et al. // J. Leuk. Biol.-2005.-Vol.77.-P.414-420.

186. Protein tyrosine nitration in mouse peritoneal macrophages activated in vitro and in vivo: evidence against an essential role of peroxynitrite / S. Pfeiffer, A. Lass, K. Schmidt et al. // Faseb J.-2001.-Vol.l5.-P.2355-2364.

187. Pryor, W.A. Oxy-radicals and related species: their formation, lifetimes, and reactions / W.A. Pryor // Annu. Rev. Physiol.-1986.-Vol.48.-P.657-667.

188. Pryor, W.A. The chemistry of peroxynitrite: a product from the reaction of nitric oxide with superoxide / W.A. Pryor, G.L. Squadrito // Am. J. Physiol.-1995.-Vol.268.-P.699-722.

189. Radi, R. Nitric oxide, oxidants, and protein tyrosine nitration / R. Radi // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2004.-Vol.101, №12.-P.4003-4008.

190. Ramasarma, T. Generation of H202 in biomembranes / T. Ramasarma // Biochim. Biophys. Acta.-1982.-Vol.694.-P.69-93.

191. Reaction of superoxide and nitric oxide with peroxynitrite: Implications for peroxynitrite-mediated oxidation reactions in vivo / D. Jourd'heuil, F.L. Jourd'heuil, P.S. Kutchukian et al. // J. Biol. Chem.-2001.-Vol.276.-P.28799-28805.

192. Reactive oxygen species, antioxidant mechanisms / G. Mantovani, A. Maccio, C. Madeddu et al. // J. Cell. Mol. Med.-2002.-Vol.6, №>4.-P.570-582.

193. Reduced antilisterial activity of TNF-deficient bone marrow-derived macrophages is due to impaired superoxide production / M. Mtiller, R. Al-thaus, D. Frohlich et al. //Eur. J. Immunol.- 1999.-Vol.29.-P.3089-3097.

194. Reiter, C.D. Superoxide reacts with nitric oxide to nitrate tyrosine at physiological pH via peroxynitrite / C.D. Reiter, R.J. Teng, J.S.:Beckman //J. Biol. Chem.-2000.-Vol.275.-P.32460-32466.

195. Rogers, D.E. Futher observation on the behavior of Staphylococci within human leukocytes / D.E. Rogers, M.A. Melly // J. Exp. Med.-1960.-Vol.l 11, №2.-P.333-358.

196. Role of listeriolysin О in cell-to-cell spread of Listeria monocytogenes / M.M. Gedde, D.E. Higgins, L.G. Tilney et al. // Infect. Immun.-2000.-Vol.68.-P.999-1003.

197. Role of nitric oxide in host defense in murine salmonellosis as a function of its antibacterial and antiapoptotic activities /M.S. Alam, T. Akaike, S. Okamoto, et al. //Infect. Immun.-2002.-Vol.70, №6.-P.3130-3142.

198. Sabitha, K.E. Oxidant and antioxidant activity changes in patients with oral cancer and treated with chemotherapy / K.E. Sabitha, C.S. Shyamaladevi // Oral Oncol.-1999.-Vol.35.-P.273-277.

199. Schulz, K. Reevaluation of the Griess method for determining NO/NO"2 in aqueous and protein-containing samples / K. Schulz, S. Kerber, M. Kelm // J. Nitric Oxide.-1999.-Vol.3, №3.-P.225-234.

200. Segal, A.W. The biochemical basic of NADPH oxydas of phagocytes / A.W. Segal, A. Abo //Trend in Biochem. Scien.-1993.-Vol.18, №2.-P.43.

201. Shiloh, M.U. Reactive nitrogen intermediates and the pathogenesis of Salmonella and mycobacteria / M.U. Shiloh, C.F. Nathan // Curr. Opin. Mi-crobiol.-2000.-Vol.3.-P.35-42.

202. Simonet, M. Role of virulence-associated plasmid in the uptake and killing of Yercinia pseudotuberculosis by resident macrophages / M. Simonet, J.L. Fauchere, P. Berche // Ann. Inst. Pasteur/ Microbiol.-1985.-Vol. 136.-P.283-294.

203. Skoble, J. Three regions within ActA promote Arp2/3 complex-mediated actin nucleation and Listeria monocytogenes motility / J. Skoble, D.A. Portnoy, M.D. Welch //J. Cell Biol.-2000.-Vol.l50.-P.527-538:

204. Southwick, F.S. Intracellular pathogenesis of listeriosis / F.S. Southwick, D.L. Purich //N. Engl. J. Med.-1996.-Vol.334, №12.-P.770-776.

205. Specific association of nitric oxide synthase-2 with Rac isoforms in activated murine macrophages / T. Kuncewicz, P. Balakrishnan, M.B. Snuggs et al. // Am. J. Physiol. Renal. Physiol.-2001. Vol.281.-P.326-336:

206. Sprang, R.C. Roel of van der mee quantifying translocation of Listeria monocytogenes in rats by using urinary nitric oxide-derived metabolites / R.C. Sprang; M.F.E. Hulstein // Applied and Environmental Microbiol-ogy.-2000.-Vol.66, №12.-P.5301-5305.

207. Stalmer, J.S. Biochemistry of nitric oxide and its redox-activated forms / J:S. Stalmer, D.J. Singel, J. Loscalzo // Science.-1992.-Vol.258.-P.1898-1902.

208. Staniek, K. H(2)0(2) detection from intact mitochondria as a measure for one- electron reduction of dioxygen requires a non-invasive assay system / K. Staniek, H. Nohl // Biochim. Biophys. Acta.-1999.-Vol.l413.-P.70-80.

209. Staniek, К. Are mitochondria a permanent source of reactive oxygen species? / K. Staniek, H. Nohl // Biochim. Biophys. Acta.-2000.-Vol. 1460.-P.268-275.

210. Staphylococcus aureus microcapsule expression attenuates bacterial virulence in a rat model of experimental endocarditis / L.M. Baddour, C. Lowrance, A. Albus, et al. // J. Infect. Dis.-1992.-Vol.l65.-P.749-753.

211. Strains of mycobacterium tuberculosis differ in susceptibility to reactive nitrogen intermediates in vitro / L. O'Brien, J. Carmichael, D.B. Lowrie et al. //Infect. Immun.-1994.-Vol.62.-P.5187-5190.

212. Structure and chromosomal localisation of the human constitutive endothelial nitric oxide synthase / P.A. Marsden, H.H.Q. Heng, S.W. Scherer et al. //J. Biol. Chem.-1993.-Vol.288.-P. 17478-17488.

213. Studies with МНС-deficient knock-out mice reveal impact of both МНС I-and MHC Independent T cell responses on Listeria monocytogenes infection / C.H. Ladel, I.E.A. Flesch, J. Arnoldi et al. // J. Immunol.-1994.-Vol. 153.-P.3116-3122.

214. Stuehr, D.J. Mammalian nitric oxide synthases / D.J. Stuehr // Biochim. Biophys. Acta.-1999,-Vol. 1411 .-P.217-230.

215. Sun, A.N. Isolation of Listeria monocytogenes small-plaque mutants defective for intracellular growth and cell-to-cell spread / A.N. Sun, A. Camilli, D.A. Portnoy // Infect. Immun.-1990.-Vol.58.-P.3770-3778.

216. Superoxide-forming NADPH oxidase preparation of pig polymorphonuclear leukocytes / H. Wakeyama, K. Takeshige, R. Takayanagi et al. // Biochem. J.-1982.-Vol.205.-P.593-601.

217. Suppression of IFN-y production from Listeria monocytogenes-specific T cells by endogenously produced nitric oxide / H. Xiong, I. Kawamura, T. Nishibori et al. // Cell. Immunol.-1996.-Vol.l72.-P.118-125.к

218. Targeted disruption of the NF-IL-6 gene discloses its essential role in bacteria killing and tumor cytotoxicity by macrophages / T. Tanaka, S. Akira, K. Yoshida et al. // Cell.-1995.-Vol.80.-P.353-361.

219. The biology of nitrogen-oxides in the airways / B. Gaston, J.M. Drazen, J. Localzo et al. // Amer. J. Resp. Crit. Care Med.-1994.-Vol.149, №3.-P.538-551.

220. The phagosome proteome: insight into phagosome functions / J. Garin, R. Diez, S. Kieffer et al. // J. Cell. Biol.-2001.-Vol.l52.-P.165-80. ,

221. The protective role of endogenously synthesized nitric oxide in staphylococcal enterotoxin B-induced shock in mice / S. Florquin, Z. Amraoui, C. Dobois et al. // J. Exp. Med.-1994.-Vol.l80.-P.l 153-1158.

222. The respiratory burst of phagocytic cells is associated with a rise.in vacuolar pH / A.W. Segal, M. Geisow, R. Garcia et al. // Nature.-1981.-Vol.290.-P.406-409.

223. The role of plasmids in opsonin-independent Staphilococcus aureus-leykocyte interactions / P. Garlinski, G. Mlynarczyk, W. Roszkowski et al. // Zbl. Bact. Hyg.-1987.-Vol.A266-P.43-51.

224. The role of staphylococcal polysaccharide microcapsule expression in septicemia and septic arthritis / I.M. Nilsson, J.C. Lee, T. Bremell et al. // Infect. Immun.-1997.-Vol.65 .-P.4216-4221.

225. Tilney, L.T. Actin filaments and the growth, movement, and spread of the intracellular! bacterial parasite, Listeria monocytogenes / L.T.Tilney, D.A. Portnoy // J. Cell Biol.- 1989.-Vol. 109.-P. 1597-1608.

226. TNF-alpha and IFN-gamma stimulate a macrophage precursor cell line to kill Listeria monocytogenes in a nitric oxide-independent manner / P.J.1.enen, B.P. Canono, D.A. Drevets et al. // Infect, and Immun.-2001.-Vol.69, №6.-P. 4086-4093.

227. Torrelli, M.V. Free radicals in molecular biology, aging, and disease / M.V. Torrelli, M.U. Dianzani, D.Eds Armstrong. N.Y.: Raven press, 1984.-355p.

228. Turrens, J.F. Superoxide production by the mitochondrial respiratory chain / J.F. Turrens // Biosci. Rep.-1997.-Vol.17.-P.3- 8.

229. Underhill, D.M. Phagocytosis of microbes: complexity in action / D.M. Underhill, A. Ozinsky//Annu. Rev. Immunol.-2002.-Vol.20.-P.825-852.

230. Vallance, P. Nitric oxide as an antimicrobial agent: does NO always mean NO? / P. Vallance, I. Charles // Gut.-1998.-Vol.42.-P.313-314.

231. Wink, D.A. Chemical biology of nitric oxide: Insights into regulatory, cytotoxic, and cytoprotective mechanisms of nitric oxide / D.A. Wink, J.B. Mitchell // Free Radic. Biol. Med.-1998.-Vol.25.-P.434-456.

232. Wood, S. Multiplication of Listeria monocytogenes in a murine hepatocyte cell line / S. Wood, N. Maroushek, C.J. Czuprinski // Infect. Immun.-1993 .-Vol.61.-P. 123-134.

233. Wright, C.E. The protective and pathological roles of nitric oxide in endotoxin shock / C.E. Wright, D.D. Rees, S. Moncada // Cardiovasc. Res.-1992.-Vol.26.-P.48-57.

234. Zalevsky, J. Activation of the Arp2/3 complex by the Listeria ActA protein. ActA binds two actin monomers and three subunits of the Arp2/3 complex / J. Zalevsky, I. Grigorova, R.D. Mullins // J. Biol. Chem.-2001.-Vol.276.-P.3468-3475.

235. Zamora, R. Inducible Nitric Oxide Synthase and inflammatory diseases / R. Zamora, V. Vodovotz, T.R. Billiar // Molec. Med.-2000. Vol.6, №5.-P.347-373.

236. Zhu, L. Bactericidal activity of peroxynitrite / L. Zhu, C. Gunn, J.S. Beckman//Arch. Biochem. Biophys.-1992.-Vol.298.-P.452-457.