Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение транскрипции локуса CUT Drozophila melanogaster

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Автореферат диссертации по теме "Изучение транскрипции локуса CUT Drozophila melanogaster"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ НАУК.

ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ ми.В-А.Зигельгардта

Не правах рукописи УЖ 577,2 * 575,116

ПОНОМАРЕНКО Натальа Александровна

ИЗУЧЕНИЕ ТРАНСКРИПЦИЙ ЛОКУСА CUT DROSOPHXLA MELAHOGASTEH (03.00.03 - молек/ляраая биология)

кандидата Оиологх'геских наук

Москва, 1993

Работа выполнена в лаборатории организации генома Института молекулярной биологии ич.Б.А.Энгельгардта РАН.

Научная руководитель:

доктор биологических наук Н.А.ЧУРИКОВ

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук П.М.РУБЦОВ доктор биологических наук С.И.ГОРОДЕЦКИИ

Ведущая организация: -

Институт биологии развития им.Н.К.Кольцова РАН

Зашита состоится '¿А" г. в -ЛС'часов

на заседании специализированного совета <Д 002.79.01> в Институте молекулярной биологии ии.В.А.Энгельгардта РАН по адресу: 117964, Москва, ул.Вавилова,'32

С диссертацией мозшо ознакомиться в библиотеке Института молекулярной биологии ии.В.А.Энгельгардта РАН

Автореферат разослан г.

УЧЕНЬЯ СЕКРЕТАРЬ СПЕЦИАЛИЗИРОВАННОГО СОВЕТА

кандидат химических наук ^ / А.М.КРИШН

.¿EXjiSSbUQCIb__1£МЫа Изучение молекулярной организации

генетических локусов дрозофилы представляет большой интерес для понимания механизмов функционирования генсаа. Особую важность при этой имеет клонирование и дальнейшее изучение слотах локусов, т.е.локусов, в которых наблюдается межаллельная когалементация и нлеиотропныя эффект и которые обычно ииеэт большие размеры.

Локус cut - один из генетически наиболее хорош изученных сложных локусов дрозофилы - расположен в Х-хромосоке в районе 7В. Это один из наиболее ыутабельных районов Х-хромосош. Несколько жизнеспособных аллелей локуса имеют многочисленные фенотипические проявления, причем многие иутанты обладают одновременно целый рядом различных дефектов. Большая часть ct-ыутантов нежизнеспособна и огносигся к рецессивны« деталям.

К настоящему времени имеются данные по генетическому картированию локуса, , его молекулярной организации, природе стабильных и нестабильных- мутаций, а также о распределении повторяющихся элементов генома и транскрибирующихся последовательностей. Кроме того, известно, что cut является одним из неярогенных локусов дрозофилы. Один из его продуктов играет роль в дифферениировке чувствительных органов дрозофилы.

Однако до сих пор не проведено полное транскриптное картирование локуса. Эта задача является трудной, поскольку многочисленные транскрибируекыг участки рассеяны по локусу, имеющему величину более 200 кв, и содержат повторяотеся в геноме последовательности.

_Шйь_ваботы^ Целы) настоящей работы било изучение транскрипции локуса cut Drosaphila mslenogaster.

Задачи исследования.

1. Выявление тракскриптов локуса cut D.melanogaster.

2. Анализ спектра транскриптов на разных стадиях развития D. не lanogaster.

3.'Получение и изучение клона х ДНК, с о отв етствуиззго одному мз эмбриональных транскриптов локуса cut.

Научная новизнЗ-И-Практичесхая ценность работы. В - результате проведенных исследований было установлено, что транскрипция локуса cut является стадиеспецифичноя. Наиболее активно локус транскрибируется в зыбрионах, тогда как на личиночной стадии развития транскрипты, соответствующие локусу cut, практически отсутствуют. Кроме того обнаружилось, что каждая стадия развития дрозофилы характеризуется своим набором транскриптов.

При ■ изучении транскриптов локуса, соответствующих эмбриональной стадии развития дрозофилы, было показано, что ряд транскриптов является результатом альтернативного сплайсинга РНК.

В ходе работы был получен и охарактеризован клон кЛНК, соответствую»«» одному из эмбриональных транскриптов локуса cut. При этом в локусе были обнаружены две соседствующие, транскрибирующиеся ора последовательности, принимающие участие в - альтернативном сплаисинге.

Апробация работЬ. i/атериалы диссертации были представлены - на V Всесоюзном совещании по биологии и генетике дрозофилы

IЛьвов, 1997J, на 10-ол Европейская Конференции по исследованиям на дрозофиле (Барселона. 1967). на 12-оя Езрспэясхоя Конференции по исследованиям ка дрозофиле (Маянц, J 991 ).

-бЗКУ-ЛисйешаамИл. Материал диссертации изложен на 112 страницах чашкнописг.эго текста и содержит 24 рисунка. Список цитированной литературы вклочает 105 наименования.

РЕЗУЛЬТАТЫ К ОЗСУГДЕКИЕ

1. Изучение транскрмпцкк докуса cut.

Гечегическия анализ икеоиихся в локусе cut различных групп иутацкя со спътш способои ксыплемекташ'? позволив выдвинуть предположение о наличии в локусе нескольких, по все?, видимости частично перекрываюямхея трачскркптов.

Поскольку ранее л о кус cut бнл п]ро:<лоайроз=ш методом "прогулки яо хромосоме", бит прздприкята попытка кдентиф:щйрогагь нРКК, . ^сотеетствуоиие Karsov >. клочу, содержащему уч&стик ¡.ечоиноя ДНК покуса раяьарон около 20 кв. Прл з?о>< оЗнарух_илось, что локус соягрьмт очень Дольше число рясличных позти;>яюч!икся в геноме и актт.Бко -•¡■раьскрибирукмыхся пгследозгл-->льност'г«/ которые сильно затрудяялм акглиз. С другой Сизовы, мке:-:«, удаление ¿руг от друга. ге:;оьяые фрагменты '-¡¿являли сходней не величине транскригш*. Таким образом результаты нсэерн-гм^идиз£':ия фрагментов ЯКК докуса с мРНК. предитгвляошии разнне стали?: развития дрозофилы, подтвердили

данные о сложности транскрипции в локусе.

Во-первих. по-видимому,; существует несколько промоторов, с которых синтезируется набор различных м?НК.

Во-вторих. транскрипция в локуса cut является стадиеспеаифичвоя, при этой каждая стадия развития обладает своим набором транскриптов. Наиболее активно лохус транскрибируется в эмбрионах, в то время как на личиночной стадии развития мРНК, соответствующие локусу cut, практически не обнаруживаотся. В мРНК, выделенвоя из куколок и ыух, ряд транскриптов появляется снова, но некоторые характерна только для эмбриональной стадии развития.

В третьих, наличие нескольких различных по величине транскриптов. соответствующих одному фрагменту ДНК локуса, позволили выдвинуть предположение о наличие в локусе cut альтернативного сплэясинга РНК.

2. Изучение кДНК, соответствующей одному из транскриптов локуса cut

Для дальаеяшего изучения транскриптов локуса cut дрозофилы была получена1 библиотека клонов кДНК и выделена последовательность (величиной 7,7 кв). соответствующая району летальных мутация в локусе. При сравнении рестриктных карт полученного квона кЛНК и геномного района локуса, из которого' происходит данная последовательность (рис.1), между ними обнаружилось . хороше'е соответствие. Оказалось, что лишь Э'-концевоя EcoBI фрагмент клона кДНК имеет большую длину (3,4

-7кв), чем соответствуевдп ему геномный фрагмент (3,1 кв>. Эта разница ке является результатом сплайсинга РНК, так как 3,4 кв Фрагмент на К -блоте, содержащей все клоки, представлявшие локус cut, гибридиэуется только с упомянутым винк фрагментом величиной 3,1 кв. По всея видимости, имеется вставка величиной около. 300 п.о. в данном кесте локуса, в той его копки, которой соответствует клонированная кДНК. Другие всзшякые объяснения можно связать с транс-сплаясингом или перестройками во время клонирования.

Гмвмдо вема»йтш

VS и 1.1 V •

-и—------' . 1 ■ <

i ■п 'В п

-'---«-, >

Рис. 1. Физическая карта фрагмента локуса cut I а > и клона кДНК (б). Указаны сайты расщепления рестриктазсй EcoR I

При блот-гибридизации EcoRI фрагментов клона кДНК с геномной ДНК, выделенной из мух линим Oregon RC и обработанной рестриктазой EcoHI, обнаружилось, что фрагменты кДНК величиной 1,8 и 1,4 кв содержат короткие, повторявшиеся в геноме последовательности.

Для определения величины полноразмерного траяскрипта и его стадмеспеиифичности меченные EcoRI фрагменты клона кЯНК

>

t

гибридизозапи с препаратами поли (А+)РНК, представлявшими разные стадии развития дрозофилы. Оказалось, что последовательности Фрагмента величиной 1,4 кв обнаруживаются в ряде полос, величиной от ~10 до 1,25 кв (рис.2а>, причем каждая стадия развития дрозофилы характеризуется своим набором транскриптов. Наличие

1гз1 t г з i

Рис.2. Нозерн-гибридизация фрагментов клона кЛНК величиной 1,4 хв (а) и 1,6 кв (б) с РНК. представлявшей различные стадии развития дрозофилы: 1 - мухи 2 - куколки, 3 - личинки, 4 - эмбрионы. Размер транскриптов определялся по ДНК-маркеру I Hind III)

нескольких транскриптов. характерных для одной стадии, подтвердило наши предположения об альтернативном сплаясинге РНК в локусе. Кроме того, даннае результаты гибридизации свидетельствует о том, что обнаружении в фрагменте 1,4 кв геномный повтор транскрибируется только в локусе cut.

Повторявшаяся в геноме последовательность, содержащаяся в фрагменте величиной !,8 кв, напротив, оказалась широко представленной г различных иРНК на всех стадиях развития дрозофилы Iрис.26».

Для дальнейшего изучения этоя повторявшейся последовательности была составлена рестриктная карта EcoRI Фрагмента величиной 1,6 кв с помощью мелкошепяпмх рестриктаз (рис.3).__■

4i

Т Т_ Т t_I?

ГГ~ТЕ---Ч>

гза вш

?—ЕсоР! Т—А1и 11-Мзр I 1 Т-БаиЗА Т-НаеШ

Рис.3. Рестриктная харта фрагмента клона кЛИК, величиной 1,6 кв - повтор.

Методом блот-гибридизации ДНК фрагмента зеличиноя 1,8 кг, обработанной различными мелкошеляззими рестриктазами. с меченными призами геномной ЛНК дрозофилы, кЛКК, синтезированной с пемонью

рассеянной затравки, и кДНК, синтезированной с поиопьо ог.нго'йТ)

у

j

-10г

затравки, пйвтор был локализован в НаеШ фрагменте величиной 0,6 кв.

При гибридизации ЕсоН1 - НаеШ фрагмента величиной 1,1 кЬ, являвшегося уникальной часть» фрагмента 1,3 кв, с поли<А+)РНК кз эмбрионов дрозофилы было обнаружено, что этому участку кДНК соответствует тот же набор транскрилтов что и ЕсоИ! фрагменту величиноя 1,4 кв (рис.4).

_ . • V ¡-8-10

]

I

!

1

Рис.4. Нозерн-гибридизация 132Р1 меченного ЕсоЕ1-НаеШ фрагмента, величиноя 1,1 кв с поли(А+)РНК из эмбрионов дрозофилы.

Лля сравнения различных геномных копил обнаруженного повтора и точной локапизадаи его границ были выделены б различных клонов из геномной библиотеки D.sBlanogaster и клон С9 из библиотеки кДНК, содержащие последовательности, гиОридизуюшиеся с НаеПХ фрагментом величиной 0,6 кв. Для всех геномных клонов были составлены рестриктные карты с помоаь» рестриктаз EcoRI и HlndlII и локализованы фрагменты, содержащие повтор. При этом выяснилось, что степень гибридизации нашего фрагмента с другими копиями повторявшейся последовательности, содержащимися в различных геномных клонах, варьирует. Сходный результат был получен и при гибридизации клона кДНК С9 с ДНК геномных клонов. Некоторые геномные копии повтора вообще не дали гибридизации, в то время как другие проявили большую степень сродства. При гибридизации iiHX геномных клонов с тотальной ЛНК дрозофилы обнаружилось, что разные копии повтора по-разному представлены в геноме. Также, оказалось, что часть клонов содержит и другие повторяющиеся в геноме последовательности.

Для определения первичной последовательности повтора НаеШ Фрагмент величиной 0',6 кв, прилежащие к нему области кДНК и клон С9 были просеквенированы.

При изучении первичной последовательности кДНК локуса cut было обнаружено, что описанный выпе повтор, представляет собой две последовательности типа. opa, разделенные участком ЛИС длинои в 81 нуклеотид. Последовательности обладают большой степенью гомологии (71Х), но вторая отличается большим

содержанием гистидина. Кроне того. перед первой opa -последоватгльностьо находится полипролиновыя участок^ содержащий 10 аминокислотных остатков. Весь просеквекированныя район к ДНК локуса cut содержит открытую рамку считывания (рис.5), т.о. оба ора-повтора находятся в транслируемой области.

Последовательность клона кДНК С9, ;сак оказалось. также содержит opa повтор. Поскольку в ора-подобной последовательности клона С9 находится стоп-кодон, то, либо, в данном случае, ора-повтор приходится на 3" нетракслкруемыя конец мРНК, либо, часть его составляет 3'-концевой экзок этой мРНК.

3. Сравнительный анализ двух различных клонов кДНК соответствующих эмбриональным транскриптам локуса cut.

Данные о наличии альтернативного сплайсинга в локусе cut получили подтверждение, когда был описан другой транскрипт размером 8,2 кв (Blochllnger и др., 1988), относящийся к той яа области летальных мутации,' что и выделенный нами клон к ДНК, длиной 7,7 кв.

При сравнении физических карт клонированных кДНК этих транскриптоЕ и соответствующая им геномной последовательности локуса cut, обнаружилось, что центральная область кДНК величиной 6,2 кв, имеющая 0,5 кв EcoBI фрагмент, происходит из того же самого геномного района, что и 7,7 K2 кДНК. Кроме того, в зтоы ргяоне находится описанный ранее ген Н55 <Чуриков, 1982).

ТСС ААА ААА САА АТТ САТ ААА ТАС ААА ТТТ ССС ТСТ САА ААА ААС ААА САС ТСС СТА ААА Бег Ьуг С1п 11е Аэр 1уг Туг 1.у£ Агг Суз С1и аеп 1.уг Авр Тгр 1еи 1.у£

ААА АСА Ьуз ТПг ААТ А5П ТТТ РЪе СТТ Уа1 ААТ ТТТ ТСС Аеп РЪе Тгр ССТ АГБ ТАТ Туг СТТ ССА Уа1 Рго ТСС АТС ТТС ТТС Тгр Мег 1еа 1.еи АТС Не ААА Ьу£ ТАТ АСА Туг ТЬг

АТА АСА Не Аге ААС Аеп АТА 11е ТСС Суг ТСТ ТСС ТТТ Бег Су$ РЬе ААА 1уг ААС Ьуг САС С1п САА С1п САА САА АТА ССС С1п СТп Пе А1а ССА Рго ТТТ РЬе СТТ ТСТ Уа1 Су£

ТСТ ТАТ Су£ Туг ССС Рго САС С1п ААА 1ув ССА АСС САА Рго ТЬг СТи АТС Не АТС Маг ААС 1УВ АСС ТЬг ААС АСС ААС ТСТ Ьу£ ТЛг 1уг Су£ ССГ САС Агг Стп САС САА СТп С1г.

ста САА 1.еи С1п СТС Ьеи САА С1п САС Н1с ТСС САА ССС Бег С1п Аге СТС 1.еи САА С1п САС ТСС С1п Тгр САА САС САА ТТС С1п Н1£ С1п 1-еи АСА Аге САС Н1е ТТС ССС 1еи А 1а

АСС САТ Т11Г А£р ТСС Зег 6АА «и ССА А 1а ААА ССС АСС ЬуБ А1а 5ег ААТ Абп БАС А5р АТС мег ССС А 1а ССС ААС САС САА Рго Ьуэ С1п'С1и АТС Не САА С1и САА СТС С1и Уа1

САТ САС Аэр Азр САС С1и САТ АБр ССС А1а АСС САТ САА ТЪг Агр С1и ССС Рго йТС Уа1 АТС Не ■СТС 1еи ССС САС'САА СТА Рго СТи С1п 1еи СТС Уа1 ААС АЕП САС ТАТ АБр Туг

ТСС ССА Тгр АГ2 ССС Агг ССС СТу ТТТ РЬе СТС САА ТСС Уа1 С1и Бег ССС С1у ААТ Лгл АСС Бег АСТ ТПг ААТ АСС АСС АСС Абп ТПг Бег П1Г ССТ А1а ССА А1а АТС ССА Мег Рго

ССС АСС ■С1у 5ег ААА ЬуЕ АСС ТЬг ССА Рго АСА АТТ ТАТ ТЫ Не Туг САА С1п ААТ Агп ТТТ РЬе ААС 1У8 (7ГС САС САС САС Уа1 СТи СТП С1п ССА А1а САС СТп ТТС СТС 1.еи 1еи

ССС ССА Рго Рго ССС Рго ССС Рго ССС Рго ССА ССА ССА Рго Рго Рго ССС Рго ССС Рго САС САА С1п СТн САА САТ САА САС С1п Н1£ СТп СТп САС СТп САА СТп САА САА СТп С1п

САА САТ С1п Н15 СТА 1еи САС ни ТТТ РПе ТСА САй САА Бег С1п С1п САС СТп САА Ип САА САА С1п С1п САТ САС САС САА Н15 СТп СТп СТп САТ Н1Е СХА С1у ССА ТСС Рго Бег

ТСА САС Бег Н1£ ССС А 1а СТС 1-еи СГГ Leц АСТ САА СТС Бег С1п Ьеи СТТ Уа1 ААС Агп ТСА Баг АСА ТПг ТГТ ТСС ААС ТСТ РЬе Бег АЕп Бег ТСС Бег ААС Агп ТСТ ТСТ Бег Бег

ССС СТА Аге 1-еи САТ Агр ССС А1а САС Н1з САТ САС САС Н1В СТп Ип САв С1п САС Ип САС Н1Б САС Н1£ САА САС САС САС С1п С1п С1п Н1г САА СТп САС Н1Е САС САА С1п С1п

САА САС САС САС СКА САС САС СТО САС САС САА САТ САС САТ САС СТС САА САС САА ССА СТн Н1£ Н1£ С1П Нп СТП К1$ 1.еи Н15.С1п С1П Н1£ Н1£ Н15 Н1£ 1-еи С1п С1п С1п Рго

ААС АСС ССС АСС ААС АС£ ААТ ССА ССй АСС ААС САС САС САТ САТ ССА САС САТ ТГС САТ Агп Бег С1у Зег Азп Бег Авп Рго А1а Бег Л£П А$р Н15 Н1г Н1£ С1у Шв Н15 1.еи Н1£

С-СС САТ ССТ ТТС СТС САТ ССТ ТСС ТСС ССС САС САТ СТС САС САС САА АСС АСС САА ТСС С1у ни С1у Ьеи 1.еи Н15 Рго Бег Бег А1а Н15 Н15 Ьеи Шэ Н15 СТп ТЬг Ив- СТи Бег

Рис.5. Аминокислотная и нуклеотидная последовательности

лросеквенированного района из кДНК величиной 7,7 кв. Соответствувшая ея последовательность из кЛНК длиной 6,2 кв подчеркнута.

ААТ ТСС ААТ А£п Бег Аеп

Известно, что данный ген транскрибируется, образуя две различных мРНК величиной 2,8 и 1,7 кв, и имеет 3'-концевой экзон, представлении;! повторяющейся последовательностью - суффиксом. Суффикс содержится во многих других генах дрозофилы и вовлечен в созревание 3'-концевых областей мРНК. кДНК величиной 8,2 кв суффикса не содержит, при этом варианта сплайсинга он находится в интроне.

Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей кДНК величиной 6,2 кв и просеквенированнои области кДНК величиной 7,7 кв позволил выявить соответствие между EcoRI фрагментами размером 0,6, 1,4 и 1,8 кв из 7,7 кв кДНК и центральной частью кДНК длиной 8,2 кв. При этом оказалось, что кДНК размером 8,2 кв не содержит большей, части фрагмента 1,8 кв, тогда как при се.квенировании в этой области обнаруживается открытая рамка считывания. Кроме того при нозерн-гибридизации с эмбриональной мРНК эта часть КДНК, а также EcoRI фрагмент величиной 1,4 кв выявляют набор транскриптов различной длины, что свидетельствует о наличии ряда мРНК, содержащих эти последовательности. Данные нозерн-гибридизации и результаты секвенирования, таким образом, независимо подтверждают наличие альтернативного сплайсинга РНК в локусе cut.

Альтернативный сплайсинг РНК описан для многих генов, определяющих ракнее развитие дрозофилы. Альтернативный сплайсинг РНК в локусе cut, по всея видимости, позволяет получать набора родственных белков, ' избирательно функционирующих в процессе морфогенеза е разных тканях, на стадиях развития дрозофилы.

Известно, что балок, кодируемый кДНК величиной 3,2 кв, экепрессируется только в ядрах клеток внешних рецепторов и не обнаруживается в клетках хордотональных органов. Таким образом, одной из функций этого района локуса cut дрозофилы, по-видимому, является лифференцирозка внешних чувствительных органов.

На рис.5 отмечена часть последовательности кДНК величиной 7,7 кз находящаяся в интроне в случае кДН$ размером в,2. кв. Интересно, что при этом варианте сплаясияга в зрелом транскрипте присутствует только один из двух соседствующих ора-повторов, другой находится в интроне, в то время как кЛНХ величиной 7,7 кв содержит обе повторявшиеся последовательности. По-видимоыу, различие в строение траясхрипгов связано с /различием в их функциях. Предполагается, что последовательности типа opa, имеющиеся во многих ткане и сгадиеспецифичных генах различных организмов, играет роль во взаимодействии белков друг с другом и с нуклеиновыми кислотами.

4. Компьютерный анализ ора-последовательностея.

Геномная блот-гибридизация выделенных нами ора-повторов свидетельствует о наличии в геноме больного числа копия данной повторяющейся последовательности сильно варьмруюсих по своему составу и распределению.

Сходные результата были полечены и при компьютерном анализе нуклеотидного банка данных EMBL-28. Оказалось, что целый ряд генов содержит последовательности в той или иной степени гомологичные opa. Причем большая часть этих повторов кодирует

аминокислотнае цепи, состоящие иь остатков глутаыкна и гистидина в различном соотношении. Некоторое мэ найденных ора-подоО.чкх последовательностей находятся « кетрэнслйруеудх районах геноиа, часть из них, !:а:: и в случае клона г.ДНХ С9, содержится в 3'-концевых областях мРКХ. Наличке opa повторов на 3'-концах многих v.FHK подтверждается, в свсс- очередь, и гибри^изаииСй описанного начи opa повтора с ¡¿е*снск кЛНК, ськгезирозакчоя и помощью олиго(йТ) затравкч, и апедстазллпшеп с о Cot; З'-концезие области различных мРНК дрозофилы.

Интересно, что перед одним из opa элементов б локусе cut находится полипролиновая последовательность, содержащая 10 аминокислотных остатков. При компьютерном скрининге нуклеотидного банка данных EMBL-28 бьма наадена сходная последовательность, лгесиая перед opa- повтором 15 г.ролинов, кахо^лшаяся е гене одного кз рецепторов стероидных гормонов дролифили.

Таким образе»« ьнализ ряда последовательностей из нуклеотидного б^нка Eb3L-26, гоиолсг>.чн'.;). сра-повтору, a raKis дгнние геномных блпт-гиСридлзацил псэссгэтт говорить о налами", целого се^аяствь opa- подобных послеуюсательностеч в гекоиз дрозофил*, кодирующих гиинежологш:^ участки, состоите из остатков глут^лкиа и гистид:<:нг.. Наат'чие недобнчх. последовательностей в геномах другая 0>)дгкиЗ»;0о, их распрс/0'i деление, а так:*ь большая кокоерса/иавость пой-орг s транс;:р'/;ируемых областях, говорят с его в аза с я биологической Ф/нкцкк.

ВЫВОДЫ

1. Транскрипция локуса cut является стадиеспзцифичноя. Наиболее активно локус транскрибируется в эмбрионах. Каждая стадий развития дрозофилы характеризуется своим набором транскриптоз.

2. Ряд" трангкриптев локуса является результатом альтернативного сплаясинга РНК.

3. В локусе cut. в открытой рамке считывания иуеются две соседствующие ора-подобные последовательности, одна из которых альтернативно сплаясируется, что, по-видимому, приводит к различию в структуре и функциональной активности конечных белковых продуктов.

Работы, опубликованные по теме диссертации

1.Tchurlkov N.A., Ponomarenko N.A. Tie. molecular analysis of the cut locus of Drosophlla islanogaster - 10th European Drosophlla Research Conference, Barseiona, sept.1987, p. 249.

2. Чуриков H.A., Пономаренко H.A., Георгиев Г.П. Обнаружение альтернативного сплаясинга РНК в локусе cut D.melanogarter. - Докл. АН СССР, 1968, т.303, N 4, с.984-986.

.3. Pononarento N.A., Tchurlkov N.A. Alternative splicing In the cut locus of Drosophlla melanogaster - 12th European

Drosophlla Research Conference, Mainz, Sept. 1991, p.305.

4. Пономаренко H.A., Чуриков H.A. Альтернативный сплапсинг opa- подобных элементов в локусе cut D.oelanogaster - Докл. АН, 1993, т.330, N 1 с.