Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ И ИЗОЛЯТОВ Ж И М-ВИРУСОВ КАРТОФЕЛЯ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В РАСТЕНИЯХ-ХОЗЯЕВАХ

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "ИЗУЧЕНИЕ ШТАММОВ И ИЗОЛЯТОВ Ж И М-ВИРУСОВ КАРТОФЕЛЯ И ИХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В РАСТЕНИЯХ-ХОЗЯЕВАХ"

Миниотеротво сельского хоэлйотва СССР

Мооковакая ордена Ленина я оравна Трудового КЬаоного Зншенл свльскохоэ.чйотвенная акад^мия имени К«А,Тичнрявева -

На права* рукопяоя

/7-Ш,

ЗЗЯРГК Владимир Николаевич

ИЗУЧЕНИЕ ШТАШП И ИЗОДЯТОВ Г И ВНВИРГООВ НАРГОВДЩ И Ш ВЗАИМСШВЙСТВШ В РАСТЕНИЯХ-ХОЗЯЕВАХ

Специальность 06,01.11 - фитопатология к защита растений

Автореферат диооертации на оожоканав ученой степенв каниидага биологических

наук

Моокр-ч - 1982

Работа выполнена в отделе по борьба о вирусными болевшая ; ■ оздоровлении картофеля Научво-моояедоватвльского института картофельного хозяйотва. '

Научный руководитель - кандидат биологических наук Л.Н.Трофшец.

Официальные оппонента: член-корреопондент ВАСХНДО, доктор бволог*чвокгас наук, Профессор И.Г.Атабеков, кандидат биологических наук, доцент Б.А.Шмыглг, .

Ведущее предприятие - Московское отделение Всесоюзного ваучно-нооладовательокого института растениеводства,

Запщта диссертации ооотонтся лсСЛ_1982 г.

в часов на ваавдашга Опециалиэированвого оовета К-120.35.0Э

в Московской оельскоховяйствслной академии им. К.А.Тимирязева.

АдреоМ27550, Мооквя* й-650, ул .Тимирязевскаял,49, Учений совет ТСХА.

С чиосертацией мояно ознакомиться в ЦИБ ТСХА;

Автореферат разослан н О-тг^хьлЦ 1982 г;

1\ -шй оемретар*. ' ,__„ „ „

Снега . .'эиров&тш;.-< с г^а Н} Н.К.Торянокая

, ОБДАЙ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ ' Актуаяьноом. ггроДдеш. В решениях ХХУ1 сьезда МЮС помавлеш задача за пятилетку увеличить среднегодовое производство Продук-цяп сельского хозяйства на 12-14^ и принять моры к совершенством-няю и укреплению служба защиты растений. . ... . ,

. Значительней ущерб урожаю картофеля наносят вирусные болезни. Анализ данных советских и зарубежных ученых показывает, что к настоящему времени количество возделываемых сортов картофеля с комплексной устойчивостью к вирусным болезням отграничено, Внедрение &й«ктявиых мер борьбы о мозаичными вирусами и прежде всего о. вирусами т и М картофеп в большей мере осложняется недостаточной . изученностью,их шташового состава я не со вершенством методов диагностики. , .

. Известно, что в СССР и некоторых зарубежных странах, в последние года получил распространение метод защитной вакцинации томатов слабопатогенными штаммами вируса табачной мозаики (Влаоови Редько, . 1:71; Сейма и др., 1966; В«1* ,1972; Сухов а др., 1978; . Нодъяпольокая « др., 1960), основанный на эффект® ипгерфоренаюг. Имеются данные об эффективности вакцинации олабоиатогешшм штаммом ХВК о деды) снижении потерь урожая н на .картофеле. (Рей^лап,'Рот-нова, 1978). ДальнеЕшее развитие этого направления требует тгтгель-його изучения штаммов вирусов и их взаимодействия п. растениях. хозяевах,

, Цель и задачи исследований. Целыо наотояишй работы было изучение шташового состава т к М-вирусов картофеля, взаимодействия различных по патогенности и эолитов в рлстеннях-хоаяевах и усовер-шенств ова^чв методов дивгиоотики. , ,. В задачу исследований входило:

- изучить ютамш.т-вируса по. биологическим, физическим и анти-

генным свойствам; .

гУ " а

- усовершенствовать мет оды ■ диагностики Y ВК ;

- изучить взаимодействие■сильно и слаболатогенгадх иэолятов и штаммов ЗСВК на растениях-шщнкаторас и сортах картофеля!

~ просестп идентификацию изолятов ШК, "определить их патоген-веють на' различите сортах картофеля;

- изучить взаимодействие сильно' н елабопатогэюшх изолятов МВК на риотениях-индикаторах) ■ ' " ■'"' *

- выявить влияние вторпной инфекции БВК на 'концентрации • вирусов и-урожай картофеля при инокуляции' слабо я ояльнопатоген-ными изоляташ XDK и;ШК» ■"'■'■'" ■

Научыая иоиизна жюледовшпгй г * " '

- установлена перекрестная защита мевду ' отдельными изолятами кз одной l-рутшы штаммов УВК. а также мевду некоторыми" иаоляташ ШК; - •.....'''

- усовершенствована методика серологичеокогс метода определения YBvC; ■' ■.*'"' !'.■>-_■..

- впервые получена экспериментальная' партия антисиворотки к диссоциированному белку YBK с целью применения матода. радиальной имчунодиф||уэ'ии} ' '

. - установлено, что вторичная вн$вкшш ШК в различных по скоро- *" v * * . . • спелости сортах картофеля споооботвовала снижению концентрации''

ШК и повышала урожай картофеля в трканта1смешашоЙив£вкшш а

МИК в оравиенки о мояоинфевцией МВК; '

- определена е^егесивнооть применения раашгчннх по латоген-нооти ,изол.".гоб TBK при оценке селекционного материала на вируоо-устойчивооть.

Политическая ценность работы и реализация результато^ идоледо-ваяяа. Результаты й&^чеиил пятогошгости изолятов TBK и'ШК, ооо-бонности иреявлония п развития енштомов болезни при инфицировании штаммами и пзолдтаки TDK и MBU растений й сешщев картофеля,

положены в основу оценки ооятоев в селекции на устойчивость к ТОК и МВК. При оценке оояицев на устойчивость к ГВК испольэуетол выделенной патогенный изолят т°~з, Зконошш от внедренного в производство изояята составила за 3 года - 4626 рублей.

Установлено влачителъное поришеиио чувствительности серодиагностики т-вируса при центрифугировании сока и добавлении сульфита натрия или сульфата аммония,.

Апробация работа. Результаты исследований доложены' и обоуаденн на наушо-практичеаких кон^оретнщях молода« ученых картофелеводов , проводившихся в Научно-исследовательском института картофельного хозяйства МЗК РС5СР (1977, 1930 гг.) и Украинском научно-исследовательском института каргоЗельгаго хозяйства С1978), эаелугсяяа и одобрены научно-тематическим Ученым советом ИНИКХ.

Публикация результатов исследований. Основные положения диссер-ташш опубликованы в пяти печатных работах;

Структура и обьем работа. Дясоертадионяал работа состоит из введения, обзора отечеотвенной и зарубежной литературипо изучаемым вопросам, опваавия объектов и методов исследования, изложения висперпменталыгах результатов а их обсуждения» выводов и рекоме«-лтдпй производству» Работа иэлояена на 192 страницах машинописного текста* содержит 34 таблица, в 13 рисунков в 'текоте и 35 таблиц о 4 рисунка в приложении. Спиоок попользованной литературы включает 214 наименования» в том числе 80 ипострашпк авторов»

Уо^овдя и методика исследований: Исследования рнполненн в Научно-исследовательском институте картофельного.хозяйства путем постановки нолевих, вегетационных н лабораторных опытов, 1Ьл«р«п опыте проводили в опытном хозяйстве "Коренево"* Почрл легкая по механическому составу, супесчаная, предшественники - пзишя на эерно.

Р исследованиях использовали сорта картофеля оэдоровлешпш от

BttjiyooB методом культу i« ткэия, разлитие по скороспелости -Слгшшвкзй, Jlwdirwu, СлТнр, Лорх» Темп, Мечта = и Раченокий,-

И1гт?.м УВК: т°-:1, hï" гвдзленн стд&лом.впруоологгаги'* ' оздоровления картофеля ШИКХ. .Изодятн ГЕК и. ШК . шделетг авторем в 1976 году» ( * - .. . ■ ■ - ■ ■.■•*-'

Для диагностики п иденти^нкашга штаммов в изолятов'ХВК'ИШЖ бил использовал нпОор растспиЗ-ипдикаторов как с системной; так и о лоюлъио-иокротлчоскоА реакцией.

rimtpoc конически о исследования проводи.тв на электронном' микроскопе ЭВМ-100Д.Црепатты готовили методом разбавленной " суслэнзпв, физические, свойства тВК я ЙЗК определяли по' обсгвпряня-" тич методикам (Л.Е.Дршданко, 1966). ■ ■

Отагплп гштиген длл получения сыворотка к диссоциированному' " " белку TDK в цоэпевом грздионте при.помода даЗДеренциального ' центрифугирования совместное лабораторией производства диаптоотя-чеегшх* сывороток НйИКХ (с,и.о. Чеголяпа М.М.).Испытнвали снйо-ротку методом,радиальной ичмунодвффуэни (.Blette» • • etil., ' ■ I979)v;. ... г . ■„■ - ' ■■ ■ ■ ■ ' '

С.пельн повкшонил чугстрптольности серологического анализа изолягоВ'И штаммов TBÎt исцользокдаг методику ' и.3 tes Bewies ' , r.nwininralcl - (1976). и У.Хаманяа:« М.Рунге (1977)."

Патотшость-иэолятов ïlik- и МВК на сортах ïwpro$èjm* определяли

по J. Darby «tt ali',(I95l). - . ..........-

В основу изуч«Н1Ш(ЛЭапмодеЯотвия-моящу"илаао и'сильноштоген-HHSfn иэолятами- ГВК и ШК н* .растешях-тадиватораж положанн «что- • дики JJÏorrsbt ' ' - (I960), Л .Л. Awîpoconâ, • H.B. RiônKÔfr (1977). Испа-танин по перекрестной эаадато проводили по способу расщепленных1 групп (Ооима*, Комото; Гото, 1966). -< • ■

Пплшю опнти закладывали мелкоделяяочним ' способом в 4-KpaTp<ift'

пойторности, Статистическая ойработкарезульгатов роготшшоига« и колерах опытов, проведена на ЭВМ "Прсминь-г* методом диепер-сионного анализа (Литун, Iö76j Доспехов,' 1973).

''результаты ихлрдсваний

Основные свойства в взаимодействие стадакш и иэолитов тВК в раотениях-индикаторах и сортах картофеля

Иэолятн т-вируса вцделядп на картофеле в СПХ "Коренево* я "Илыпюкое" Мсюкорской области путем маршрутных оЗслпдовгший, Изолятн шцеяюги с растевпй, еиэюпсот внетоио окмггтокм поражчжт полосчатой п'морзпнпотоЯ' мозаккшш, а такко о биссимтстлпнх, о положительной реякцаой на ТВК* В ойлей едо*гаагп öftro отобрало 169 изолятов ТВК. При инопулшшн раствняй-ппдйяпторов иэолятауя IBK, вкделенннмя из растений картофеля, ctorc сбязрупэнн рчзличия-' ■ в характер в и интенсивности спмятомов я сроках юс проявления. Тал изолятн выделенные пз растений сешгаа С30А.41Э5б г), сорта Горизонт (1^-6) и оорта Берлзшшгэн (штаммУ) юзншли на D.netelli с вмятой j мозаики в сальной деформации лпотьев аналогичного характера, но различной степени интенсивности. НатЗолеп сильная деформация яистьов отмечена у изолята -6, Па лястьях D.aetel l*f инфицированного шташами на 14-16 день появилась хорошо заметная белеаая мозашшооть жилок листьев; Изолятн нз ' группа'oflfrtmtx штампов: т°, г°-9,Т°-21 и т°-1 вызывала лишь слабое пооветлепве, жилок листьев на 16-25 лень, га легкуа деформацию, могадяниотооть -а незначительно« торможение роста растений* Лучшим свсточтшм растйнием-яилшитором'дшг лиф^еренлиаоти язолятов тПГ йнл к. бвЬ«ешв^ сорт Сачсуп, на котором изолятн группы Т° рнэивяли на 8-14 день после» раро^ения посретлеиие *ялок, сбнЧяуг мозаику, *1Гри инокуятши яеяротичеоккми изолята*»« па тяйакевчччатг« поймало«. п-мвчтмпяп

шшок листьев, а затем слабое, рое усиливающееся побуроаие черенков, о последующим опадением листьев и гибель» растений. На н ,phjealoiden(t) иэоллчн. грунпи Y11 гшзнвали образование некрозов тешо-<3урого цвета. II« гениях Pb.iloridane Bjbd изолятн группи 1° проявлялись я виде междуаиишоЕИХ некрозов белого цвета, о превращением тс па 20-2t день в сэрснкоркчневые. Некротические изолятн внзнвали на 16-20 депь хлороз и сильное отставание в рооте, Заражение растений ".glutinoaa j,. иэолятами т° вызывало легкое нооветленив жилок листьев о последующим угнетением роста рпотепиЯ, усыхаииеми гибель» листьев нижнего и среднего ярусов. При ЕИокуляцпл некротическимл иэоляташ наблвдалп" депортацию

листьев, закручивание верхушки, крагтчатость» угнетение роста >

растения.

Температура инактивации некротических иэолятов варьировала в пределах 56-58°0, точка предельного разведения 1:256. Сохранение кнфекциотюств вируса in vitro . при 4°С в пределах 23-30 пни», а пря к н18°С от 10 до 14 дней. Отмечена обратная зависимость мчдцу ТТЛ и патогеиноотыо изолятов. Изояяты Г®-2, ТЕ, 1^.-19, таза-вшяцпо более слобне симптом! заболевания на сортах картофеля, имели ГШ и ТПР вше,, чем изолятн нормальной группы»

Таким образом, по реакция на тест-растениях, основным Фиаичео-кпм овоИствам изучаемые штаммы и изолятн разделены на две большие группы: обычные или нормальные и некротические. В первой группе выделены иткшгтн т°"9, г°-21, Х°, вызывающие обкчну» моааику на табаке оорта Самоун; изолятн r°-I-I, т°-3 Пес кричную мозаику, ютами Y°-I окпНмлягацую мозаист хилок табака. Во второй группе выделялся изолтт тВ-6, рызывающий сетчатую (паутинообразную) мозаику о бистроII гибелью растений табака. Установлена способность всех ччолчтов к передаче тлей М.рег«1ся Suls. Штамм Т°, яе по-

редаваешй тля?га, по обнаружен.

Для усовершеногвования диагпоотшсп ш; получены диагностические аятионвороткя к четырем штаммам и одному изолнту TGK, В перекрестных реакциях вое штам^н, независимо от их натогенностя, реа-^ птровали меяду собой как в гомологических, так в в гетерологячео-ккх сочетаниях; Сыворотка, полученная к одному штамму ила изоляту, реагирует со всеми остальными, что свидетельствует о близком ■* серологическом родстве иэучаекш: итаммов.

При изучении патогенное?« штаммов и изоллтов TBK На сортах карго|еля установлено (табл.Г), что сорта по разному реагировали на разные пзоюты п гатам-м УВК; Наиболее патогенными оказались изоллты из группа обычных итогов т°-Э п Т°,

}'енее патогенными из группы обычных ита'лмов были изоллты Х°-9 ' и 1°-2Х, а из группа некротических и Изоляты обеих

групп в первый год заражения вызывали на растениях симптош-полосчатой и Морщинистой мозаик. Игашн и изоллты не1фотпческой группы проявились в более слабой форме и яч 1-2 надели позднее (за яскло-ченяем иэолята ГЕ-б). При первичной илокуляхши.в фаяу 4-6 настоящих лястьев вирус обнаруживали в инокулпрогалных листьях, 'через ■ неделю в верхнем и среднем ярусах растения и» через две недели -в нижнем ярусе; У наиболее патогенных изолятов T°-3t Т°-Г-1 отмечали болче быстрое передвижение по растению. Максимальная концентрация вируса в растениях воех сортов обнаружена в фазу бутонизации- . цветения (риоЛ). С возрастом растения концентрация вируса существенно снихаетоя. В 1977 голу яри изучении патогенностй иполятов TBK для оценки сеянцев картоТ-оля на варусоустоЯчявооть . бчло испытано три изолята: У-Г-I, г°-0 иГ°. Зпраженве прорежено на дпух п'бргдных комбинациях, получениях с участием вирусоустойчп-гых paiwVwcmix форм; Контролем слупил "пташ х°-М; Апаляп по оценке

Таблипа I

Иатогеннооть изслотов и штаммов Y-вируса на сортах картофеля (1977 г,)

.....*Г'*Т".....*-1 — .............. j ■ ---------—. —.......... ■■

Штаммы:СлавянскиД : Добтец г Дорх : Са!яр__

И изо-;" - ■ • м^Ычество лшеи чт ^ацажания ' ~~~

ляты :до Гдо :до,, ГДо:до :дс Тло ТЗо

: появле+отш-:появле-: отмп- :появле-:отми- :появле-: отмя-

;ohml-:томов .•рання шил 1 :ботвы:опмп- :рания : ботвы :няя :оиьщ-: томов :ранил :оотвы » п1ия 1симн— : томов ;ранля :ботвы *

•Контроль 53 _ 83 « 84 _ ее

IS 37 16 58 IS 53х 19 , 46

■ 15 34 1С 47 18 46 16 43

Г°-9 16 36 33 63 25 53х 25 49

г°~21 15 37 15 57 32 GO 25 • 53

15 37 15 55 ,18 49 17 ■13

16 37 15 57 118 53х ' 19 46

. 23 37 33 63 32 coi** 25 53

27 47 33 63 т 39 67х 25 53

IS- , 37 23 50 ' ; ю 53 25 , 46

Г»-2 27 44 38 .63 39 67х - . -

Пркмзвдние: х - л о кпльн о -не кротичеокая реакшш;

— oR!TO?ow;i заболевания не проявились, "

сеянцев показал» что наиболое натогеншш бал изолггг т°-3 (табл,2). Процент выбрококшннх ргютений бил в 1,6 раза, больше, чем в контроле. В 1978 году бил испытан ряд других изолятов, во они не показали преимущества пород изолятом т°-3.

3 результате исследований взаимодействия сильно и сдаботатогев-шх изсдятов и шташог TDK в растениях, табака сорта Сумсун пи в одном олуюе не выявлено п rumo It перекрестной ващита между штаиязмя обнчиой и некротической групп. Вместе с тем вняолилось, tro симпто-m эчболовашш, вызываемые отаммами и изолятами в условиях двойной

--- верхний ярус листьев * I - вэодят

_ино котированное листья п _ СТ£цда! тв

—*—•— ништЗ ярус листьев

ия^екщш.били менее шраюшн, чем в условиях ысэКдщ^экдли.

Во всех случаях окорооть появления симптомов зависела от соотно-пенкя в икокулше объемов стачотз т° и т.е. от концентрации вирионов, от их татогенноотп и от интервала между инокуляциями. ■ Тал, изучение особенностей вззеиэдой твил изолятов тй-6 д Т°-3 поймало, что слабое угиетопяе иголкгои Г°-Э набдпдолооь только гря зараяении растений смесь» изолятов в соотиопнин 1:1; Во всех других вариантах опыта перекрестной эяаитн пожду шага не отмечено. В то да время в пределах грунш 1° Сила обнаругена -перекрестная иадата иеаду отдельными изодятами. Тая» сильпопато-гонннй иэолят т°-3 вызвал на табако моаее интенсивныо спнптомя

Таблица г

Патогенноеть иэолятов при определения устойчивости сеянцев картофеля к ГВК (ЮТ г.)

№ Ш1

Штамм илп нзоллт

-г—"——.....1 ■ -■—■■.. ^ --

4 * * *

гКоллпеотво яно-:Вн0рако* Шроцент ¡Отклонение

:кулярованных :ваио . :пораде- :от контроля,

:сеяпцев (штук) :(штук) :ния ■

Се«ья 1363

I. 229 128 56 22,8*

2. Г° 212 70 32 -1,2

3. Г°-Г-1 241 102 42,6 9,4 *

Л, КОНТРОЛЬ

175 58 33,2 -

Семья 1384

I. тР-з 177 79 45,0 17,0*

2. Y0 249 81 33,0 5,0

а. 199 74 37,2 9,2*

4. Контроль

199 55 20,0 -

»^0,05 = 9,16*

Примечание: я - раэниш математически достоверна.

при добавлении в ииокуяш " ■ слабопатогенного иэолята" т°-21 в соотношения Iii при одновременном заражении. А при 0олее позднем вторичном заражении в этом варианте наблюдалась полная перекрестная зачала, Среди изолягов группы rR отмечена полная защита слаЗонатогенним иэолягш тн-2 от сильнопатогенного изолята 5я-6 при пторггчном инфицировании ям растений табака через 2-3 надели.

При изучении взаимоотношения сильно и олабопатогешшх изолятов и WTfiMvo» тгвк в растениях картофеля использовали четыре различиях цзолята: сглыюпатогешме r°~3> и олабопатогенкна Т°~2Г, tp-I». Для яэследогоннл б';ли пзягн два сорта картофеля - Славян-

гз

ский я Л»)01>.т,"ц. При взаимодействии некритического и обичного иоолп-тов перекрестной защити не яду ии'Щ не наблюдается, хотя в лергнй перкод о печено ослабление симптомов оильнопатогенного изолята '

по сравнении с контролем. Upa изучении взаимодействия нзоля-тсв из группы обнчннх штаммов оточена норекроетнчл залита в олу-чао шгокулятрга оплънончтогонпнм каолягом У°-3 черчз Г Г; дней после слабопатогенного т°-21 (табл.3). Но урогойности клубней, высоте растения и концентрации IBK растопил сущестжшпо не отличаются от инфицированных отдельно счзбоиатогетшм иэолятсм; Перекрестная защита наблпдаотся а при более позднем зар-исении растений оплт.мо-патогенншл изолятом. Она такие установлена при изучении взаимодействия двух изолятов некротической группы! 1в-19 и Y^-S* Наибольший »}фект защиты отмечен при иге^ипировании растений картофеля слабо- • патогепннм изолятом т®-6 через 12 дней поело их заражения слабо- ', патогенным изолятом Г^-ХЭ. Как показали исследования, перекрестная защита меяду изолятями IBK набладалаоь при взаимодействия изолятор* относящихся к одной группе тташ-ш, при интервале мваду первичной* . и вторичной шюкуляциями не менее 12 дней, а также при заражении растений в более поздний период их развития, но не позднее фазы бутояизадан. В большинстве случаев отпечено отсутствие nepeitpooT-ной защиты между иэоляташ, относящимися к различным группам штаммов.

Повышение чувствительности ояраюшчеокого анали з TBrf. Трудность оерологячеокой диагностики объясняется низкой конпептра-цией Т-вируоа в растениях глртоФеля, 0 целью пош^ения чувствительности определения TBK, при обычном капельном «толо до^тяляля к вшитому оону растений 0,25& рястрор сульфита натрия или Т,31/( раствор оульфата аммония* Добаатчгве сульфит« натрии и центрифугирование сока при 3 тно. об/мин. в течение 20 минут онпэч-о npovfiiT неспецифкчлоких ррчкций, хотя и не лово^оцпяо

. Таблица 3

Реакшш взаимодеЙатвЕЛ слабо- и сильнопатогенишс язолятов ТВК (сорт Любимец, ^978 г.)

Г" £ ; : : число некр$

М ¡Варианты :Дата ¡Дата :СредниЙ :Внсота растений :зов ва ляет

ва- : :вто- :урокайо г - - ; и Т,., .

рван* ■ :вач~ :рпч- :куота и, Дата дтчет^..... .......

тон : :ной :но8 :! ~ : : : : :

1 ^юку-ншеку*» г : % :21.06:23.07;13.08:16.07:3.08

•■ : - ' ?ляши;ляцпи.' ?_г : ••_:_:

I. Контроль - - 346,7 100,0 13,3 70,7 88,3 0 0

2. Т°-3 2 .07 - ' 26,7 7,7 13,3 17,0 10,0 4,3 18,3

3; 25.07 - 290,0 83;6- 14,6 70,3 86,0 ■ - 2,3

4. Г°-Т + Т°-2Г. 2.07 15.07 23,3 6,7 13,6 16,0 9,6 3,3 23,0

5.. 1°-21 21.06 - - 263,3 75,9 13,6 64,0 70,0 3,7 7,7

6, 1°-21 13.07 - 286,7 82,7 13,0 66,7 70,3 6,7

7* Т°-21 + 21.06 2,07 220,0 . 63,5' 12,0 62,0 68,0 2,0 3,3

в* ГР-21 + 21.06 25.07 270,0 77,9 12,0 68,0 75,0 4,7 . 9,3 • ;

9.' *°-21 + 15.07 25.07 213,3 6Х,6 15,3 1 77¿7 82,6 11,3

• ;• ШР0>95 '» 43,09 ■ ■ '

от них полностью. Количество' положительных реакций у оортов Приекульокий ранний и Белорусский ранний говросло на 30-60$. В среднем добааэрнпе сульфата натрия повышает 'достоверность серодиагностики па 35,по сравнению с обычным кетодси касольпоЗ агглютинации. Совпадения результатов индикаторного и серэлогячоэко-го (с применением сульфита штрия и инкубацией в течение 24 часов) анализов кодобалкоь по сортам в зависимости от срока проведения анализа от. 66 до 94?. Прл использования в качестве' добавки сернокислого амгкшия (инкубация 3 часа, сорт'Парус) совпадение сероло-: гтсческого и индикаторного1 методов колебалось от 79 до 93&

О налью улучшения диагностик* УБК п?дученч вкопвпишитальная партия СЫШ1ЮТКИ к диссоцииропанноцу бед-ку у-епруса (итй»ад У°-1). Проведено испытание подученной сыворотки методом рэкпальной иммуно-диффузии при разведениях сока эдороин и зарадешых 1ВИ растений табака в соотношениях 1:4, 1:20 и 1:40, Снворотха к болку г-р яруса била в раз веде тш 1:2, В вариантах о центрифугированным соком больных растений молекулы антигена диффундировали из лунок и через 5-6 часов появились белые кольца преципитации.

Основные свойства и взаимоотношение изолятов МВК в растениях-хозяевах

Из выделенных 145 изолятов било отобрано ГО наиболее характерных, рлзлпчалцпхся по скмптоьпм на тезт-растениях, прежде всего та Ьусор«га1соп сЫ1еявв Dtm.ii по физически* сгоКстглм, Они условно были разделены на три группы. К пергой группе - с иль гепатогенных - были отнесены изоляты, £!пчва»ке резко шрмешгы^ симптомы на авдчкаторах - М-5, Ц-6, Ко второй группе -

изоляты, проявляпцие па растешмх-индспоторах промежуточные симптомы - М-2, М-Д2, М-35 с М—46, к третьей - изоллты со слабой реакцией ш тест-растениях или,бесоимптсшше М-3, М-39. Все изолята реагировали о сывороткой к МВК. Между изолятами яягкгыешх различий не шявлено. Не установлено 1юреологических различий у вирнонов всех.изучаемых изолятов. ТТИ пэолягов М-вируса колебалась в пределах б4-70°С, предельное разведение достигало 1:61-1:250..

Сдабояатогекикэ иэоляти ШК имели более высокую ТТИ, Концентрация вируса в соке раотвго-Д томатов была выке у силмюпатогеиннх пзоллтов.

При изучения 10 пзоллтов ¡.ЗК на сортах картофеля Са{ий, Лорх, Тйг/я, Любимец, Славянский ввдглокк 3 группы разлттзгтиесн по пате-

гчннооти: оилмго-, средне- и слабопатогеиные.

> ■ *

¡tin бол ее тншпннмя симптомами на раотенпях картой ля бнли: «оэалчность листьев верхнего и среднего ярусов, закручнванпе листьев вниз, их деформация от сильной до слабой степени.

_ Виниленн различия в концентрации изолятов вируса Н, которые зависят от сортовнх особенностей картофеля. В то яе время отмечено. Что-в более высокий концегггряцки на всех сортах накаггошалиоь более патогеннне изолятн ï'-6, М-43. На растениях, пнонулировап-них втимя изоялташ свмптсмн щюявлялгоь в более сильной степени*

При изучения взгшюдействия мекау слабопатоганннм изолятом М-27 и сильнопатогешпш - М-43 установлено явление полной перекрестной ваяит» при интервале м^ду инокуляциями в 5 дней а при соотношения ппокултов 2:1 для D.oet-sl L. я 1:1. (в смеси) для ь.сЫ-lwiaeDun, Л D.metel It *

. При увеличении периода между пэрвнм и вторим т заражением до 15 дней tîucsû отмочена перекрестная заэдта между различными по патогенное ги язолгстамн ШК. Вместо о тем при взаимодействии двух .■ других изолятов Ь5-3 п 14—13 ни в одном нз ивучаевдх вариантов не било отмечено полного защитного действия слабопатогенного нэолята М-3.

- В 1978-1930 гг. в лабораторных й полевых условиях изучали влияние - вторичной инфекции SÖK на урожай картофеля при ; заражении ■ ' олабо- и сильнонатогешими изолятам» МВК и TBK» , ; Как показали исследования вторичная инфекпия аВК.на сорте Мэчта способствовала поппженив концентрации ЫВК. Эта тенденция отмечена я вприаятах оо сдабо- и сильнопатогенными иэолятами М-вируса. На протяжении трех лот в растениях,- зараженных stM наблюдалось порнпгчнпе урожайности по сравнению о растениями, зараженными иэолята-ми ШК,. Так, порншоняе уредая растекий оорта Мечта» зараженнчх

в из сравнена» о растениями, за рале иными одним и золят ои М-в состаппдо ТЭ& АПйгогичннэ реаулI тптн нолученк по сорту Раменокяй, Погори урожаи от ТВК по обеим соргоч были практически один Якова как прн ионокнфекшга, так и при омещянноЯ ин^екпии о <г»

ОБЩЕ ШВО.ГЫ

I. По симптомам на те от-растениях, одионлщ физическим свойства«, патогеннооги на растениях картофеля изоллтн и штаммы т-вирусл, вчделоцтм в Мооют с кой области, раздельны на дге грушм!

а) обнчшю или нормальные штаммы (1°);

б) некротические .ига«*« (Iй),

Штамм т°, неспособный к векторной передаче, в нааих уолоряях не обнаружен.

' 2. Нэолятн ТВК в пределах * каждой групнн различались во паго-геняости.

Наибольшую патоген пост ь показали изшттн из группы обнчвнх лтаммов (1°) по сравнению с попротическимя Ст").

При искусственном заражении рютеняй картофеля изолятамн из группы обычных штатов первые симптскй инфекция проявляртсл на

- п

7-12 дней раньше, чем при заражении изолятями Т .

3. Показана высокая э&ректввнооть использования наиболее патогенных идолятов, в частности прн оценке тс(риликх сеянцев в «©лекции на устойчивость к ТИС. ■' V

4. На растениях табака перекрестная защита оточена при взаимодействии отдельных изолятов в пределах каждой группы. Например,

1°-9 задана« растения от заражения Х°-1 н Т°-1-1, а Т°-21 от Т°-э.

Н '

Ползая перекрестная завита наблюдалась, также нежду изолятлмя• Т -2 и Не установлена перекрестная рачата при рагда&ой последовательной инокулядии растений табака иэолятамк ия рачпых групп

штатов, независимо от времени ^оаду вараяения?щ.

5, lia растениях картофеля сортов Славлю кий я Либимец нерекреот пал защита оЗтрршна'мещу'Изд ляхами ' ГВК в пределах каждой грул-пн гзта^юв о интервалом между инокуляциями 12 дней.

При взаитодо йствяи штаммов некротической н обглной групп перекрестной защити не обнаружено;

6. Ангисшюротки, полученные к изосштам тВК разных груш реагировали с изоллтчли яаге в> готолзггпесютх, _ так и в гетерологичемих сочетаниях, что свидетельствует об их близком серологическом радстве.

' 7; Добавление сульфита натрал к о оку перед центрифугированием ногншаот достоверность серодиагностики TBK па 36,по сравненнв1 . о обычной методпкой, боа 1Гри?.(енснпя добавок. При етом совпадения результатов индикаторного к серологического анализов колебались по сортам от 66 до 04?, а при использовании сульфата аммония от 79 ло £?3<

8. , Получено диагностическая т{тисНворотка к диссоциированному белку ТВК. 'Установлена спешфпноств н чувствительнооть метода радиальной итчиунодиЭД-уэии при_дппгноотико т-вируса.

3. По оимптомлм на раотетаях-ющикаторах н сортах картофеля,

m , » 1 '* , г'

основном физическим свойствам выделенные.из.естественных .популяций' яэолятн МВК разделен« на три группа! сильно-, средне- s слабопатогенные» Различия в йонцентрпгош завш^ как от виковой и сортовой специфичности хозяина ^картофель*, тоттн),.так и йтамвд-воЯ опчцифпчностп вируса. 0 шиболъщбЙ ' концентрация ' накопливаюточ олтьнопатогяттр изоллтн. ( ^ . -*_■' ^

Г0.>Установлено явление полной перекрестной эа-цитм при вяпимо- ■

■1Э

действии; оллбинатогенного М-27 и л илънопатогеиного М-43 взаптов при вторичном заражении через 5 дней (соотнокенпе-,концентрации ШОКулг'.тов 2:1) для , D.raetol L. , И ДЛяй.сЫДапве Wi.H D.iaetel Г-(1:1 в смеси). ISpiFt вэакмодойстРпи изотятбв'м-З и '№-13 в растения! D.aetel L. и b.ohileafle ihm. 'наблвдшш лишь частйчтп лорокроат пую запиту при вторичной инокуляции на 5-й день (соотнэзипиз концентрации инокулюдав 1:1 в' емгег). ... , ,

II. Установлено, что наличие ВВК в рютшилте на ooprè l'oiia (вторичная инфекция) способствовало cmorèniœ концентрации f.TiK (изолятн М-6 и М-29), а также повышало уратлй клубной 1гзрго|еля сортов Мечта и ?аченский в срарнэнии о могои»£екпяей КПК.

ЕЕШШШЦЮ! ПГОЯУШДСТВУ

1. В селекционной работе на устойчивость к ТЕК реко'-еняуэтея для отбора вируооустойчивкх форм использовать при пепнтаннл оильнояагоганныз яэоллты, л частности, врделенпнЯ пзолят т0-");

2. В семеноводческой работе при отборе и опенке растений и клонов на ТВК рекомендуется пряьинять соратапгческпй метод о центрифугированием сока, добшиенийм 1,3155 раствора сульфата аммония или 0,2% сульфита натрия, с инкубацией омюя в трчэпяр 3-х часов.

Основные положения диссертации опубликованы и сголуг^их работах автора:

I* Изучение вирулентности иэалптов и егтатомов Т-ппруса (п

сортах картофеля. Научные труды НШКХ, Селокпия к семеноводство картофеля, вып.XXXI, М., о.88-33.

2. Получение и примэнение диагностическоЗ сыворотки к варуоу г картофеля. Тезисы докладов Всесоюзного соеустния: "Вир^сиче болеэна сельс¡сохоэяйств ешшх рпстчнхй и мери Зорьбч о 4.II» Ленинград, I97B, с.33-34 (в соавторстве о ^.М.Чеголинл*);

3. Серологическая и индикаторная-диагностика т-вируса картофеля. Научные труда НИИКХ» вып.33, Селекция и свиноводство карто-

•феля4,М., 1979 , 0.124-12? (в соавторотве о М.М.Чеголгаюй).

- ' » ** "' - * - -

4: Вавчеаня в1рулентност1 1золятИ в1русу Ы на картоши

р1знйх сорт1в. Картошшротво, Ки1в, 1960, ван.И, 0.80-02;

5. Сравнительное изучение иволятов г-вируоа при оценке.сеянцев картофеля на вирусоуотойчивость» Тезисы докладов научно-практической конференции. "Пути иптеяоификягщи картофелеводства и-овощеводства, Минск, 1981,о;31-<32. , ■

Л-09457 Додпиоапо к печати 8.01.03 г,,

Формат бумаги 60x90 -.' Закаэ 77. Объем Г П,л.

Тирад 100. ' Боонлатно.. • ,

: Отпечатано нд ротапринте 1Е1ИКХ.

д/о Корее»'во, Московской обл.