Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение, разработка и стандартизация микротест-системы для выявления и идентификации уреплазм

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Безруков, Владислав Михайлович

Список сокращений.

Введение.*.

Часть 1. Обзор литературы.

Глава 1. Общая характеристика бактерий рода Ureaplasma.

Глава 2. Питательные среды для культивирования и выявления уреаплазм.

Глава 3. Определение концентрации уреаплазменных культур.

Глава 4. Диагностика уреаплазменной инфекции.

Глава 5. Оценка качества диагностических препаратов.

Часть 2. Собственные исследования.

Глава 1. Материалы и методы исследования.

Глава 2. Разработка питательной среды для выявления Ureaplasma spp.

Глава 3. Количественная оценка роста бактерий рода Ureaplasma в жидкой питательной среде.

Глава 4. Оценки ростовых свойств питательной среды для выявления Ureaplasma spp.

Глава 5. Определение чувствительности штаммов Ureaplasma spp. к антибактериальным препаратам.

Глава 6. Разработка микротест-системы для выявления и идентификации Ureaplasma urealyticum (Ureaplasma spp.) «Уреаплазма Микротест» и оценка ее диагностической эффективности в государственных испытаниях.

Обсуждение.

Выводы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение, разработка и стандартизация микротест-системы для выявления и идентификации уреплазм"

Уреаплазменная инфекция продолжает оставаться одной из актуальных проблем клинической микробиологии. Возбудители - Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum, относящиеся к семейству Mycoplasmataceae класса Mollicutes, часто колонизируют урогенитальную систему человека. Обычно наблюдается скрытое, бессимптомное носительство уреаплазм среди клинически здоровых лиц. Вместе с тем, уреаплазменная инфекция может сопровождаться развитием патологических процессов, в числе которых негонококковый уретрит, хориоамнионит, преждевременные роды, поражение дыхательной системы и ЦНС у преждевременно родившихся маловесных детей, артриты у лиц со сниженным иммунитетом и др. [15, 33, 44, 204, 221, 233, 253]. В связи с этим, существует необходимость в объективном и достоверном выявлении Ureaplasma spp. в клиническом материале.

Лабораторные методы исследований играют решающую роль в диагностике уреаплазменной инфекции вследствие отсутствия четких клинических проявлений, широкого распространения бессимптомного носительства и частого сочетания уреаплазм с другими инфекционными агентами.

Наибольшую диагностическую ценность имеют прямые методы выявления микроорганизмов, их антигенов и генетического материала, являющихся специфическими микробными маркерами. Арсенал прямых методов диагностики уреаплазменной* инфекции включает в себя [33, 34]:

1) иммуноморфологический метод (РИФ) - обнаружение в клиническом материале антигенов Ureaplasma spp. с помощью антител, меченных флюорохромом;

2) молекулярно-биологические методы, в том числе ПЦР - методы идентификации генетического материала микроорганизмов, основанные на обнаружении специфических для микроба последовательностей ДНК;

3) микробиологический метод - наиболее объективный метод в диагностике инфекций, поскольку обладает высокой, чувствительностью и специфичностью («золотой стандарт» диагностики инфекций). Основан на выделении чистой культуры возбудителя из клинического материала и последующей идентификации на основе изучения морфологических, культуральных, биохимических и других свойств.

Несмотря на широкое применение в последнее время молекулярно-биологических методов диагностики, уреаплазменной инфекции, микробиологический метод не утратил своего1 значения. При одинаковой чувствительности и специфичности молекулярно-биологических и микробиологического методов [40], последний имеет несомненные преимущества, так как является наиболее информативным методом, позволяющим определить степень обсемененности микроорганизмом исследуемого материала, а также чувствительность выделенных штаммов микроба к антибактериальным препаратам [20, 33, 248]. Кроме того, микробиологический метод является методом выбора для оценки эффективности проведенного лечения.

Культивирование уреаплазм, чрезвычайно требовательных к составу питательных сред, связано с рядом трудностей, в числе которых отсутствие сред определенного состава; сложность состава сред; необходимость максимального соответствия состава питательным потребностям Ureaplasma [17, 33, 248]. В классическом исполнении микробиологическое исследование - трудоемкий процесс, проводящийся в несколько этапов, включая большую подготовительную работу, требующий большого количества дифференциально-диагностических сред, реактивов, стерильной посуды, а также затрат труда. Результат при этом удается получить не ранее, чем через 3 суток. Микробиологическая диагностика уреаплазменной инфекции в практических лабораториях сопряжена с трудоемкостью приготовления питательных сред, требующих строгого соблюдения заданных физико-химических условий. Достоверность результатов исследования при этом зависит от квалифицированного приготовления сред, а также качества используемых компонентов сред. Контроль качества каждого компонента среды - необходимый этап приготовления сред в лаборатории. Кроме того, необходимо проводить оценку ростовых свойств каждых новых серий питательной среды [248].

В настоящее время отмечается тенденция перехода от классических, многоступенчатых исследований к современным, унифицированным технологиям анализа; при этом большее значение придается оптимизации и стандартизации, воспроизводимости, надежности, а также упрощению и автоматизации метода. Весьма перспективным является использование микротест-систем, избавляющих практических микробиологов от трудоемких работ и позволяющих получить стандартные, воспроизводимые результаты [35].

Стремление к усовершенствованию и стандартизации микробиологического метода реализовано разработкой и внедрением в практику за рубежом ряда диагностических наборов для выявления и идентификации урогенитальных микоплазм, определения их количества и чувствительности к антибактериальным препаратам, в числе которых «Mycoplasma Lyo», «Mycoplasma 1ST» (bioMerieux, Франция); «Mycoplasma Duo», «Mycoplasma SIR» (Bio-Rad, Франция); «Mycofast All-in», «Mycofast Evolution 2», «Mycofast US» (International Microbio, Франция). Показано, что перечисленные выше наборы обладают высокой диагностической эффективностью [18, 40, 41, 66, 168, 220]. Однако в России указанные диагностические наборы имеют ограниченное использование, прежде всего, в связи с их достаточно высокой ценой; некоторые из них недоступны вообще.

В нашей стране еще недостаточно решена проблема микробиологической диагностики уреаплазменной инфекции, хотя имеются питательные среды лабораторного изготовления для выявления Ureaplasma spp., однако, производственный выпуск данных препаратов, разрешенных для использования в Российской Федерации, отсутствует.

В свете сказанного, несомненно важнейшей задачей является совершенствование микробиологического метода как основного, наиболее объективного и информативного метода диагностики уреаплазменной инфекции.

Перечисленные выше предпосылки позволили сформулировать цель и определить задачи работы.

Цель настоящей работы - разработка и стандартизация микротест-системы для выявления и идентификации Ureaplasma spp.

В соответствии с целью задачами данного исследования являлись:

1. Разработать селективную питательную среду для культивирования Ureaplasma spp. Изучить рост штаммов уреаплазм на предложенной среде. Оценить селективные свойства среды и пригодность для выявления уреаплазм в образцах клинического материала.

2. Разработать транспортную среду для сохранения жизнеспособности уреаплазм в образцах клинического материала.

3. Разработать метод оценки роста уреаплазм на основе измерения оптической плотности культур в процессе роста на предложенной питательной среде.

4. Разработать методику оценки ростовых свойств питательной среды для культивирования и выявления Ureaplasma spp. в лабораторных условиях.

5. Создать микротест-систему для выявления и идентификации Ureaplasma spp. и внедрить ее в практику здравоохранения.

6. Разработать методику оценки качества микротест-системы для выявления и идентификации Ureaplasma spp. в клинико-эпидемиологических испытаниях.

7. Разработать программу проведения государственных испытаний микротест-системы совместно с ГИСК им. JI.A. Тарасевича и Комитетом МИБП.

Научная новизна

В связи с необходимостью усовершенствования микробиологической диагностики уреаплазменной инфекции, нами разработаны селективная питательная среда для культивирования и выявления Ureaplasma spp. и транспортная среда для сохранения жизнеспособности уреаплазм в образцах клинического материала. На основе разработанных сред впервые предложена микротест-система для выявления и идентификации Ureaplasma spp. - «Уреаплазма Микротест».

Использование микротест-системы позволяет: 1) выявлять и идентифицировать бактерии рода Ureaplasma; 2) определять обсемененность исследуемого материала уреаплазмами, что важно для оценки их этиологической роли в развитии патологических процессов в урогенитальной системе; 3) оценивать чувствительность выделенных штаммов к антибактериальным препаратам, являющуюся основанием для рационального выбора антибактериальной терапии и одновременно дифференциально-диагностическим критерием идентификации (по отношению штаммов Ureaplasma spp. к антибиотикам групп макролидов и линкозамидов).

Впервые предложен оригинальный метод определения концентрации уреаплазменных культур в экспоненциальной фазе роста по измерению оптической^ плотности среды, что позволило разработать метод строгой оценки ростовых свойств питательной среды в условиях лаборатории и стандартизовать инокулят при определении чувствительности штаммов Ureaplasma к антибактериальным препаратам.

Впервые разработан метод оценки ростовых свойств питательной среды для культивирования и выявления Ureaplasma spp., основанный'на анализе кривых изменения оптической плотности среды в процессе роста тест-штамма в средах сравнения и испытуемой.

Разработана программа клинико-эпидемиологических испытаний диагностической микротест-системы с использованием принципов доказательной медицины. Показана высокая диагностическая эффективность микротест-системы «Уреаплазма Микротест», предназначенной для выявления и идентификации условно-патогенных бактерий рода Ureaplasma.

Теоретическая и практическая значимость работы

В теоретическом плане проведенные исследования расширяют представления о биологических свойствах бактерий рода Ureaplasma; позволяют оптимизировать методические подходы к количественному определению уреаплазм в клиническом материале и стандартизовать процесс выявлениям идентификации Ureaplasma spp.

Практическая значимость работы заключается в том, что разработана технология производства микротест-системы для выявления и идентификации Ureaplasma spp. «Уреаплазма Микротест». Разработаны и утверждены фармакопейная статья предприятия ФСП № 42-0115624405 на микротест-систему для выявления и идентификации Ureaplasma spp. «Уреаплазма Микротест»; инструкция по применению препарата № 01-041/135-05 и производственный регламент № 01897593-00805.

Получен патент 2265656 на разработанную питательную среду для выявления Ureaplasma spp. и предложенный способ диагностики уреаплазменной инфекции.

Полученный фактический материал представляет интерес при конструировании препаратов для диагностики микоплазмозов другой этиологии, например, вызванных Mycoplasma hominis.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Предложенная микротест-система для выявления и идентификации Ureaplasma spp. «Уреаплазма Микротест» обеспечивает стандартизацию микробиологического метода диагностики уреаплазменной инфекции.

2. Методы определения наиболее вероятного количества бактерий и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени позволяют определить концентрацию уреаплазм в исследуемом материале.

3. Изменение оптической плотности среды в экспоненциальной фазе роста культуры Ureaplasma spp. в стандартных условиях культивирования отражает накопление жизнеспособных клеток уреаплазм.

4. Анализ кривых изменения оптической плотности среды в процессе роста культур тест-штамма в средах сравнения и испытуемой в стандартных условиях позволяет оценить ростовые свойства испытуемой среды.

5. Критерий диагностической эффективности U-U{P) позволяет в клинико-эпидемиологических испытаниях определить ценность микротест-системы «Уреаплазма Микротест», предназначенной для выявления и идентификации условно-патогенных бактерий рода Ureaplasma.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 176 страницах машинописного текста, иллюстрирована 18 рисунками и 39 таблицами; состоит из введения, обзора литературы, главы материалов и методов исследования, пяти глав собственных исследований, обсуждения результатов исследования, выводов, списка и приложения. В работе использовано 39 отечественных и 223 зарубежных источников литературы.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Безруков, Владислав Михайлович

153 ВЫВОДЫ

1. Разработаны питательная среда для культивирования бактерий рода Ureaplasma, обладающая высокими ростовыми и селективными свойствами, и транспортная среда, обеспечивающая оптимальные условия для сохранения жизнеспособности уреаплазм. Использование сред позволяет эффективно выявлять Ureaplasma spp. в образцах клинического материала.

2. Показано, что примененные для Ureaplasma spp. методы наиболее вероятного количества бактерий и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени могут быть использованы для определения концентрации уреаплазм в исследуемом материале.

3. Показано, что изменение оптической плотности среды в процессе роста бактерий рода Ureaplasma в стандартных условиях культивирования на разработанной питательной среде отражает накопление жизнеспособных клеток уреаплазм в поздней экспоненциальной фазе роста культур.

4. Разработан метод оценки ростовых свойств питательной среды для культивирования и выявления Ureaplasma spp. на основе анализа кривых изменения оптической- плотности среды в процессе роста тест-штамма в стандартных условиях культивирования в средах сравнения и испытуемой. Метод позволяет дифференцировать ростовые свойства разных серий указанной среды, а также отдельных ее компонентов.

5. Предложен микрометод определения чувствительности штаммов Ureaplasma spp. к антибактериальным препаратам, являющийся модификацией метода серийных разведений в жидкой питательной среде, с использованием пограничных концентраций.

6. Разработана микротест-система для выявления и идентификации Ureaplasma urealyticum (Ureaplasma spp.) «Уреаплазма микротест», обеспечивающая стандартизацию выявления, оценки количества и определения чувствительности бактерий рода Ureaplasma к антибактериальным препаратам.

7. Разработана методика оценки качества микротест-системы «Уреаплазма микротест» в клинико-эпидемиологических испытаниях, позволяющая определить диагностическую эффективность препарата, предназначенного для выявления и идентификации условно-патогенных бактерий.

Заключение

Этиологическая структура урогенитальных инфекций постоянно меняется. В последнее время значительно возросла частота микоплазменных инфекций, борьба с которыми представляет значительные трудности в связи с развивающейся устойчивостью к антибиотикам и особенностями ответных реакций организма. Особое место среди них занимает уреаплазменная инфекция. Бактерии рода Ureaplasma - U. urealyticum и U. parvum часто колонизируют урогенитальную систему человека, при этом обычно наблюдается скрытое, бессимптомное носительство уреаплазм среди клинически здоровых лиц. Вместе с тем, в ряде случаев уреаплазменная инфекция может сопровождаться развитием патологических процессов, в числе которых неспецифические воспалительные заболевания, патология плода и новорожденных. Лабораторные методы исследования играют решающую»* роль в диагностике уреаплазменной инфекции вследствие отсутствия четких клинических проявлений, широкого распространения бессимптомного носительства уреаплазм и частого сочетания их с другими инфекционными агентами. В связи с этим, существует необходимость в объективном и достоверном выявлении Ureaplasma spp. в клиническом материале. Несмотря на широкое применение в последнее время молекулярно-биологических методов диагностики уреаплазменной инфекции, микробиологический метод не утратил своего значения. Стремление к усовершенствованию и стандартизации микробиологического метода реализовано в разработке за рубежом ряда диагностических наборов для выявления и идентификации урогенитальных микоплазм, определения их титра и чувствительности к антибиотикам. В России еще недостаточно решена проблема микробиологической диагностики уреаплазменной инфекции, хотя имеются питательные среды лабораторного изготовления. В* связи с изложенным несомненно актуальными являются исследования, направленные на разработку, совершенствование и стандартизацию микробиологического метода диагностики уреаплазменной инфекции. Совершенно не освещены вопросы количественной оценки роста уреаплазм и определения концентрации клеток в образцах клинического материала; отсутствует информация о стандартизации питательных сред и препаратов для диагностики уреаплазменной инфекции. Решению этих проблем и посвящена настоящая работа.

ЧАСТЬ 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.1. Штаммы микроорганизмов

Штаммы Ureaplasma spp.: 1) коллекционные, из коллекции живых культур ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (U. parvum серотип 1, U. urealyticum серотип 8) и авторской коллекции штаммов урогенитальных микоплазм, выделенных от пациентов Клиники акушерства и гинекологии ММА им. И.М. Сеченова (U. parvum 455, 465, 468, 481\ U. urealyticum IT, 2Т)\. 2) свежевыделенные от пациентов Клиники акушерства и гинекологии ММА им. И.М. Сеченова.

Штаммы Mycoplasma hominis: 1) коллекционные, из коллекции живых культур ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН (М. hominis Н-34) и авторской коллекции штаммов урогенитальных микоплазм, выделенных от пациентов Клиники акушерства и гинекологии ММА им. И.М. Сеченова (М. hominis 199, 205, 233)\ 2) свежевыделенные от пациентов Клиники акушерства и гинекологии ММА им. И.М. Сеченова.

Коллекционные штаммы грамположительных и грамотрицательных бактерий {Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, Lactobacillus acidophilus, Neisseria gonorrhoeae, Escherichia coli, Proteus morganii, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis), а также штамм Candida albicans получены из государственной коллекции патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л.А. Тарасевича.

1.2. Культивирование микроорганизмов

Питательные среды для культивирования микроорганизмов

Для приготовления питательных сред для культивирования уреаплазм и других микроорганизмов использовали следующие компоненты: основа бульона для микоплазм (Becton Dickinson>microbiology systems, США, кат. № 255420), сердечно-мозговая вытяжка (Becton Dickinson microbiology systems, США, кат. № 237500), триптоза (Becton Dickinson microbiology systems, США, кат. № 211709), дрожжевой экстракт (Becton Dickinson microbiology systems, США, кат. № 211929), среда 199 сухая (Sigma, США, кат. № М 5017),

L-цистеина гидрохлорид (Sigma, США, кат. № С 8277), феноловый красный (Sigma, США, кат. № Р 5530), мочевина (Sigma, США, кат. № U 4128),

L-аргинина гидрохлорид (Sigma, США, кат. № U 4128), лошадиная сыворотка нормальная (Биолот, Россия), бензилпенициллина калиевая соль (Sigma, США, кат. № А 0166) ампициллина натриевая соль (Sigma, США, кат. № А 0166), ванкомицина гидрохлорид (Sigma, США, кат. № V 2002), амфотерицин В (Sigma, США, кат. № А 2411), линкомицина гидрохлорид (Sigma, США, кат. № L 2774), доксициклин (Sigma, США, кат. № D 9891), эритромицин (Sigma, США, кат. № Е 5389), азитромицин (Fluka, США, кат. № 75199), кларитромицин (Клацид, Abbott Laboratories, Франция, per. № П 012673/01-2001), линкомицин (Sigma, США, кат. № L 2774), клиндамицин (Sigma, США, кат. № С 6427), спирамицин (Fluka, США, кат. № 85626), джозамицин (Fluka, США, кат. № 59983), мидекамицин (Sigma, США, кат. № М 3143), ципрофлоксацин (HiMedia, Индия, кат. № RM 1891), офлоксацин (Sigma, США, кат. № О 8757).

GHL-трипептид (глицил-Е-гистидил-Е-лизипа ацетат) (Sigma, США, кат. № G 1887), обогащающая добавка CVA (Gibco, США, кат. № D-1000), обогащающая добавка IsoVitaleX (Becton Dickinson microbiology systems, США, кат. №211876), агар (Becton Dickinson microbiology systems, США, кат. № 214220), соляная кислота концентрированная особо чистая (Химмед, Россия), натрия гидроксид химически чистый (Химмед, Россия), этанол (Химмед, Россия), метанол (Химмед, Россия).

Приготовление сред

Стерилизацию стеклянной посуды проводили в сухожаровом шкафу ED53 (Binder, Германия) при температуре 160 °С в течение 2 часов.

Взвешивание компонентов сред проводили с помощью весов ВА210 и BA110S (Sartorius, Германия).

Измерение рН основ сред и готовых сред проводили с помощью рН-метра рН211 (Hanna Instruments, Германия).

Растворы добавок для сред стерилизовали фильтрованием через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм (Millipore, США).

Стерилизацию основ сред проводили в автоклаве ВК-75 (ТЗМО, Россия) при 0,5 атм в течение 15-30 мин.

Приготовление полных сред проводили в стерильных условиях в ламинарном боксе SG400 (The Baker Co., Inc., США).

Питательная и транспортная среда для выявления Ureaplasma spp. [39] Состав питательной и транспортной среды для выявления Ureaplasma spp. приведен в таблице 2.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Безруков, Владислав Михайлович,

1. Безруков В.М., Бердникова З.Е., Шобухова Т.С. «Метод оценки питательных сред для диагностики уреаплазмоза». Материалы Международной конференции «Ликвидация и элиминация инфекционных болезней прогресс и проблемы». Санкт-Петербург, 2003, с. 50.

2. Безруков В.М., Быков А.С., Цеслюк М.В., Шобухов А.В. Технология количественной оценки концентрации уреаплазменных культур в жидкой питательной среде. Технологии живых систем. 2006, т. 3, № 2, с. 28-37.

3. Безруков В.М., Волкова Р.А., Эльберт Е.В., Шалунова Н.В., Шобухова Т.С., Жуховицкий В.Г. Оценка диагностической ценности ПЦР-тест-систем по результатам государственных испытаний. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2005, № 2, с. 69-73.

4. Безруков В.М., Шобухова Т.С. Новые микротест-системы для выявления и идентификации Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum. Медицинская микробиология XXI век. Материалы Всероссийской научно-практической конференции. Саратов, 2004, с.32-33.

5. Безруков В.М., Шобухов А.В. О применении жидкой селективной питательной среды для количественного определения U. urealyticum. Клиническая лабораторная диагностика. 2005, 9, с. 31.

6. Безруков В.М., Шобухов А.В., Шобухова Т.С. Сравнение методов определения Ureaplasma urealyticum. Тезисы международной конференции «Развитие международного сотрудничества в области изучения инфекционных заболеваний». Новосибирск, 2004.

7. Бойцов А.Г., Иванов В.П., Ластовка О.П., Порин А.А. Введение в клиническую микробиологию. СПб.: СПб ГМА им. И.М. Мечникова, 1999, 102 с.

8. Борхсениус С.Н., Чернова О.А., Чернов В.М., Вонский М.С. Микоплазмы: молекулярная и клеточная биология, взаимодействие с иммунной системой млекопитающих, патогенность, диагностика. СПб.: Наука, 2002, 319 с.

9. Гаджиева Г.Р., Ахмедова Э.М., Раковская И.В., Гамова Н.А. Питательная среда для выделения Ureaplasma urealyticum. Патент SU 1495381, 1987.

10. Гамова Н.А. Ureaplasma urealyticum и ее роль в патогенезе урогенитальной инфекции. Автореф. дисс. . канд. мед. паук. М., 1993, 23 с.

11. Гамова Н.А., Безруков В.М. Сравнение диагностической ценности различных сред для выделения из клинического материала U. urealyticum и М. hominis. Клиническая лабораторная диагностика. 2005, № 9, с. 32-33.

12. Гладкова Н.С., Киселев В.И., Дарижапова Б.Д., Латыпова М.Ф., Дмитриев Г.А., Ушакова Н.И. Оценка различных методов диагностики урогенитальных микоплазм. Вестн. Дерм. Венерол., 1999, № 2, с. 43-45.

13. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1999, 459 с.

14. Дмитриев Г.А. Лабораторная диагностика бактериальных урогенитальных инфекций. М.: Медицинская книга, Н. Новгород: Издательство НГМА, 2003, с. 96-118.

15. Каган Г.Я., Коптелова Е.И., Покровский В.И. О выделении PPLO и L-форм бактерий из ликвора больных гнойными менингитами. Микробиология. 1965, 2, с.105.

16. Мавров И.И., Горисюк А.Ф., Карпенко А.Е. Питательная среда для выделения уреаплазм. Патент SU 1723128, 1992.

17. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. Под редакцией академика РАМН А.А. Воробьева. М.: Медицинское информационное агентство, 2004, 691 с.

18. Мейнелл, Дж., Э. Мейнелл. Экспериментальная микробиология. Теория и практика. М.: Мир, 1967, 347 с.

19. Методические рекомендации к контролю питательных сред по биологическим показателям. Сост. Андреева З.М., Бендас Л.Г., Ельчинова Л.А., Шепилова Р.Г. М., 1980, 15 с.

20. Мыльникова И.С. Стандартизация в здравоохранении в поисках здравого смысла. Качество медицинской помощи. 1998, 2, с. 6-8.

21. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Управление качеством лабораторных исследований. М.: Медицина, 2001, с.169-181.

22. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания 4.2.1890-04. Клин. Микробиол. Антимикроб. Химиотер. 2004, 6 (4), с. 306-359.

23. Определитель бактерий Берджи. Под редакцией Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. 9-е издание. Перевод с англ. Под редакцией академика РАМН Г.А. Заварзина. М.: Мир, 1997, 800 с.

24. Прозоровский С.В., Раковская И.В., Вульфович Ю.В. Медицинская микоплазмология. М.: Медицина, 1995, 288 с.

25. Раковская И.В. Микоплазмы и микоплазмозы человека. Руководство для врачей. М., 1999, 51 с.

26. Раковская И.В:, Горина Л.Г. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека. Клиническая лабораторная диагностика. 2000, № 8, с. 50-53.

27. Скала Л.З., Сидоренко С.В., Нехорошева А.Г., Лукин И.Н., Грудинина С.А. Практические аспекты современной клинической микробиологии. Тверь: «Триада», 2004, с. 107-152.

28. Соловьева С.В., Цой Е.Г., Зигангирова Н.А., Гамова Н.А., Раковская И.В., Гинзбург А.Л. Применение полимеразной цепной реакции для выявления тетрациклин-устойчивых штаммов урогенитальных микоплазм. Клин. Лаб. Диагност. 2000, 1, 143-146.

29. Флетчер, Р., С. Флетчер, Э. Вагнер. Клиническая эпидемиология: основы доказательной медицины. Пер. с англ. М.: Медиа сфера, 1998, 354 е.

30. Фукс Г., А. Крегер. Рост и питание. В Современная микробиология. Прокариоты. Под редакцией Й. Ленгелера, Г. Древса, Г. Шлегеля. М.: Мир, 2005, с. 132-135.

31. Шипулин Г.А., Безруков В.М. Питательная среда для выявления Ureaplasma urealyticum и способ диагностики урогенитальных уреаплазмозов. Патент РФ 2265656 С1, 2004.

32. Aaltone, R., J. Jalava, Е. Laurikainen, U. Karkkainen, A. Alanen. Cervical Ureaplasma urealyticum colonization: comparison of PCR and culture for its detection and association with preterm birth. Scand. J. Infect. Dis. 2002, 34 (1), 35-40.

33. Abele-Horn, M., C. Blendinger, C. Becher, P. Emmerling, G. Ruckdeschel. Evaluation of commercial kits for quantitative identification and tests on antibiotic susceptibility of* genital mycoplasmas. Zentralbl. Bakteriol. 1996, 284 (4), 540-549.

34. Abele-Horn, M., O. Genzel-Boroviczeny, T. Uhlig, A. Zimmermann, J. Peters, M. Scholz. Ureaplasma urealyticum colonization and bronchopulmonary dysplasia: a comparative prospective multicentre study. Eur. J. Pediatr. 1998, 157 (12), 1004-1011.

35. Abele-Horn, M., J. Peters, O. Genzel-Boroviczeny, C. Wolff, A. Zimmermann, W. Gottschling. Vaginal Ureaplasma urealyticum colonization: influence on pregnancy outcome and neonatal morbidity. Infection. 1997, 25 (5), 286-291.

36. Abele-Horn, M., M. Scholz, C. Wolff, M. Kolben: High-density vaginal Ureaplasma urealyticum colonization as a risk factor for chorioamnionitis and preterm delivery. Acta Obstet. Gynecol. Scand. 2000, 79 (11), 973-978.

37. Ahmed-Jushuf, I.H., B.C. Pratt, O.P. Arya. Incidence of Ureaplasma urealyticum inendourethral swabs compared with first voided urine from men. Genitourin. Med. 1998, 64 (2), 78-80.

38. Alfa M.J., J.E. Embree, P. Degagne, N. Olson,- J. Lertzman, K.S. McDonald, N.T. McDonald, P.E. Hall. Transmission of Ureaplasma urealyticum from mothers to full and preterm infants. Pediatr. Infect. Dis. 1995, 14 (5), 341-345.

39. American Pharmaceutical Association. The national formulary, 9th ed., АРА, Washington, D.C., 1950.

40. Bebear, C., J.A. Robertson. Determination of minimal inhibitory concentration. In J.G. Tully, S. Razin (editors), Molecular and diagnostic procedures in mycoplasmology, Vol. 2, Academic Press, N.Y., 1996, p. 189-197.

41. Behrens, В., С. Karber. Quelle est la facon la plus opportune d'arranger des series d'experiences pour un enregistrement biologique? Arch. Exp. Pathol. Pharmakol. 1935, 177, 379-388.

42. Benstein, B.D., D.T. Crouse, D.R. Shanklin, D.D. Ourth. Ureaplasma in lung.2. Association-with bronchopulmonary dysplasia in premature newborns. Exp. Mol. Pathol. 2003, 75 (2), 171-177.

43. Black, F.T. Biological and physical properties of human T-mycoplasmas. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1973,225, 131-143.

44. Blanchard, A. Characteristics of Ureaplasma urealyticum urease. J. Bacteriol. 1988, 170 (6), 2692-2697.

45. Blanchard, A. Ureaplasma urealyticum urease genes: use of a UGA tryptophan codon. Mol. Microbiol. 1990,4 (4), 669-676.

46. Bloomster, T.G., RJ. Lynn. Effect of antibiotics on the dynamics of color change in Ureaplasma urealyticum cultures. J. Clin. Microbiol. 1981, 13 (3), 598-600.

47. Bowie, W.R., S.P. Wang., E.R. Alexander, J. Floyd, P.S. Forsyth., H.M. Pollack., J.S. Lin.,

48. T.M. Buchanan, К.К. Holmes. Etiology of nongonococcal urethritis. Evidence for Chlamydia trachomatis and Ureaplasma urealyticum. J. Clin. Invest. 1977, 59 (5), 735-742.

49. Cady, P., S.F. Dufour, J. Shaw, S.J. Kraeger. Electrical impedance measurements: rapid method for detecting and monitoring microorganisms. J. Clin. Microbiol. 1978, 7 (3), 265-272.

50. Carnrot, C., R. Wchclic, S. Eriksson, G. Bolske, L. Wang. Molecular characterization of thymidine kinase from Ureaplasma urealyticum: nucleoside analogues as potent inhibitors of mycoplasmal growth. Mol. Microbiol. 2003, 50 (3), 771-780.

51. Casman, E.P. A noninfusion blood agar base for Neisseriae, Pneumococci and Streptococci. Am. J. Clin. Pathol. 1947, 17, 281-289.

52. Cassell, G.H., K.B. Waites, H.L. Watson, D.T. Crousc, R. Harasawa. Ureaplasma urealyticum-. role in prematurity and disease of newborn. Clin. Microbiol. Rev. 1993, 6 (1), 69-87.

53. Cheah, F.-C., T.P. Anderson, B.A. Darlow, D.R. Murdoch. Comparison of the Mycoplasma Duo test with PCR for detection of Ureaplasma species in endotracheal aspirates from premature infants. J. Clin. Microbiol. 2005, 43 (1), 509-510.

54. Christiansen, C., F.T. Black, E.A. Freundt. Hybridization experiments with deoxyribonucleic acid from Ureaplasma urealyticum serovars I to VIII. Int. J. Syst. Bacterid. 1981, 31, 259-262.

55. Clegg, A., M. Passey, M. Yoannes, A. Michael. High rates of genital mycoplasma infections in the highlands of Papua New Guinea determined both by culture and commercial detection kit. J. Clin. Microbiol. 1997, 35 (1), 197-200.

56. Cocks, B.G., F.A. Brake, A. Mitchell, L.R. Finch. Enzymes of intermediary carbohydrate metabolism in Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma mycoides subsp. mycoides. J. Gen. Microbiol. 1985,131 (9), 2129-2135.

57. Cocks, B.G., L.R. Finch. Characterization of a restriction endonuclease from Ureaplasma urealyticum 960 and differences in deoxyribonucleic acid modification of human ureaplasmas. Int. J. Syst. Bacterid. 1987, 37,451-453.

58. Dammann, O., E.N. Allred, D.R. Genest, R.B. Kundsin, A. Leviton. Antenatal mycoplasma infection, the fetal inflammatory response and cerebral white matter damage in very low birth weight infants. Pediatr. Perinat. Epidemiol. 2003, 17 (1), 49-57.

59. Davis, J.W., Jr., I.S. Moses, C. Ndubuka, R. Ortiz. Inorganic pyrophosphatase activity in cell-free extracts of Ureaplasma urealyticum. J. Gen. Microbiol. 1987, 133 (6), 1453-1459.

60. Davis, J.W., Jr., I. Villanueva. Enzyme differences in serovar clusters of Ureaplasma urealyticum. In G. Stanek, G.H. Cassell, J.G. Tully, R.F. Whitcomb (editors), Recent advances in mycoplasmology. Zentralbl. Bakteriol. Suppl. 1990, 20, 665-666.

61. Deguchi, Т., Т. Yoshida, Т. Miyazawa, M. Yasuda, M. Tamaki, I. Ishiko, S. Maeda. Association of Ureaplasma urealyticum (biovar 2) with nongonococcal urethritis. Sex. Transm. Dis. 2004, 31 (1), 192-195.

62. De Silva, N.S., P.A. Quinn. Endogenous activity of phospholipases A and С in Ureaplasma urealyticum. J. Clin. Microbiol. 1986, 23 (2), 354-359.

63. Difco Manual. Difco Laboratories, Division of Becton Dickinson and Company (ed.). 11th ed. Sparks, Md, 1998, 862 p.

64. Dosa, E., E. Nagy, W. Falk, I. Szoke, U. Bailies. Evaluation of E-test for susceptibility testing of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum. J. Antimicrob. Chemother. 1999, 43, 575-578.

65. Echahida, F., G. Muyldermans, S. Lauwers, A. Naessens. Development of an enzyme-linked immunosorbent assay for serotyping Ureaplasma urealyticum strains using monoclonal' antibodies. Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2001, 8, 52-57.

66. Edward, D.G. A selective medium for pleuropneumonia-like organisms. J. Gen. Microbiol. 1947, 1,238-243.

67. Eschenbach, D.A. Ureaplasma urealyticum as a cause of postpartum fever. Pediatr. Infect. Dis. 1986, 5 (6 Suppl.), S258-261.

68. Eschenbach D.A. Ureaplasma urealyticum and premature birth. Clin. Infect. Dis. 1993, 17 (Suppl. 1),S100-106.

69. Fiacco, V., M.J. Miller, E. Carney, W.J. Martin. Comparison of media for isolation of Ureaplasma urealyticum and genital Mycoplasma species. J. Clin. Microbiol. 1984, 20 (5), 862-865.

70. Finney, D.J. Statistical method in biological assay. London: Charles Griffin and Co., 1952, 661 p.

71. Ford, D.K. Relationship between mycoplasma and the etiology of nongonococcal urethritis and Reiter's syndrome. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1967, 143 (1), 501-504.

72. Ford, D.K. Inhibition of growth of T-strain mycoplasma by hydroxamic acids and by aurothiomalate. Antimicrob. Agents Chemother. 1972, 2 (5), 340-343.

73. Ford, D.K., J. MacDonald. Influence of urea on the growth of T-strain mycoplasma. J. Bacteriol. 1967, 93 (5), 1509-1512.

74. Ford, D.K., J.R>. Smith. Non-specific urethritis associated with a tetracycline-resistant T-mycoplasma. Br. J. Vener. Dis. 1974, 50 (5), 373-374.

75. Furness, G. T-mycoplasmas: growth patterns and physical characteristics of some human strains. J. Infect. Dis. 1975,132 (5), 592-596.

76. Furr, P.M., D. Taylor-Robinson. Prevalence and significance of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum in the urines of non-venereal disease population. Epidemiol. Infect. 1987, 98 (3), 353-359.

77. Furr, P.M., D. Taylor-Robinson. Long term viability of stored mycoplasmas and ureaplasmas. J. Med. Microbiol. 1990, 31 (3), 203-206.

78. Furr, P. M., D. Taylor-Robinson, A.D. Webster. Mycoplasmas and ureaplasmas in patients with hypogammaglobulinaemia and their role in arthritis: microbiological observations over twenty years. Ann. Rheum. Dis. 1994, 53 (3), 183-187.

79. Garland S.M., L.J. Murton. Neonatal meningitis caused by Ureaplasma urealyticum. Pediatr. Infect. Dis. J. 1987, 6, 868-870.

80. Glass, J.I., EJ. Lefkowitz, J.S. Glass, C.R. Heiner, E.Y. Chen, G.H. Cassell. The complete sequence of the mucosal pathogen Ureaplasma urealyticum. Nature (London) 2000, 407, 757-762.

81. Grattard, F., B. Pozzetto, B. de Barbeyrac, H. Renaudin, M. Clerc, O.G. Gaudin, C. Bebear. Arbitrarily-primed PCR confirms the differentiation of strains of Ureaplasma urealyticum into two biovars. Mol. Cell. Probes. 1995, 9 (6), 383-389.

82. Grenabo, L., H. Hedelin, S. Pettersson. Urinary infection stones caused by Ureaplasma urealyticum: a review. Scand. J. Infect. Dis. 1988, 53 (Suppl.), 46-49.

83. Grosso, M.-H., P. Laconi, C. Escarguel. Procedure for the counting, detection and identification of mycoplasms in general and urinogenital mycoplasms in particular and a biological medium specially adapted to this effect. Patent US5091307, 1992:

84. Halvorson, H.O., N.R. Ziegler. Application of statistics to problems in bacteriology. I. A means of determining bacterial population by the dilution method. J. Bacteriol. 1933, 25 (2), 101-121.

85. Hannaford, K., D. Todd, H. Jeffery, E. John, K. Blyth, G.L. Gilbert. Role of Ureaplasma urealyticum in lung disease of prematurity. Arch. Dis. Child. 1999, 81 (3), 162-167.

86. Harasawa, R., K. Dybvig, H.I. Watson, G.H. Cassell. Two genomic clusters among 14 serovars of Ureaplasma urealyticum. Syst. Appl. Microbiol: 1991, 14, 393-396.

87. Harasawa, R., Y. Imada, M. Ito, K. Koshimizu, G.H. Cassell, M.F. Barile. Ureaplasma felinumsp. nov. and Ureaplasma cati sp. nov. isolated from the oral cavities of cats. Int. J. Syst. Bacterid. 1990, 40, 45-51.

88. Harasawa, R., Y. Imada, H. Kotani, K. Koshimizu, M.F. Barile. Ureaplasma canigenitalium sp. nov., isolated from dogs. Int. J. Syst. Bacteriol. 1993, 43, 640-644.

89. Harasawa, R., Y. Kanamoto. Differentiation of two biovars of Ureaplasma urealyticum based upon the 16S-23S rRNA intergenic spacer region. J. Clin. Microbiol. 1999, 37 (12), 4135-4138.

90. Hedelin, H. Uropathogens and urinary tract concretion formation and catheter encrustations. Int. J. Antimicrob. Agents. 2002, 19 (6), 484-487.

91. Hillier, S.L., J. Martius, M. Krohn, M. Kiviat, K.K. Holmes, D.A. Eschenbach. A case-control study of chorioamnionic infection and histologic chorioamnionitis in prematurity. N. Engl. J. Med. 1988, 319 (15), 972-978.

92. Holland, P.M., R.D. Abramson, R. Watson, D.H. Gelfand. Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5'-3' exonuclease activity of Thermus aquaticus. Proc. Natl. Acad: Sci. 1991, 88 (16), 7276-7280.

93. Horner, P.J., B.J. Thomas, C.B. Gilroy, M. Eggar, D. Taylor-Robinson. Role of Mycoplasma genitalium and Ureaplasma urealyticum in acute chronic non-gonococcal urethritis. Clin. Infect. Dis. 2001, 32 (7), 995-1003.

94. Horowitz, S.A., L. Duffy, B. Garrett, J. Stephens, J.K. Davis, G.H. Cassell. Can group- and serovar-specific proteins be detected in Ureaplasma urealyticum? Pediatr. Infect. Dis. 1986, 5 (6 Suppl), 325-331.

95. Horowitz, S., J. Horowitz, D. Taylor-Robinson, S. Sukenik, R.N. Apte, J. Bar-David, B. Thomas, C. Gilroy. Ureaplasma urealyticum in Reiter's syndrome. J. Rheumatol. 1994, 21 (5), 877-882.

96. Howard, C.J., R.N. Gourlay. Proposal for a second species within the genus Ureaplasma, Ureaplasma diversum sp. nov. Int. J. Syst. Bacteriol. 1982, 32, 446-452.

97. Howard, C.J., D.H. Pocock, R.N. Gourlay. Polyacrylamide gel electrophoretic comparison of the polypeptides from ureaplasmas isolated from cattle and humans. Int. J. Syst. Bacteriol. 1981,31,128-130.

98. International Committee on Systematic Bacteriology, Subcommittee on the Taxonomy of Mollicutes. Proposal of minimal standards for descriptions of new species of the class Mollicutes. Int. J. Syst. Bacteriol. 1979, 29, 172-180.

99. International Committee on Systematic Bacteriology, Subcommittee on the Taxonomy of Mollicutes. Revised minimum standards for descriptions of new species of the class Mollicutes (division Tenericutes). Int. J. Syst. Bacterid. 1995, 45, 605-612.

100. Jacobs, E., M. Vonski, G.W. Stemke, J:A. Robertson. Identification of Ureaplasma biotypes. Med. Microbiol. Lett. 1994, 3, 31-35.

101. Jalil, N., A. Doble, C. Gilchrist, D. Taylor-Robinson. Infection of the epididymis by Ureaplasma urealyticum. Genitourin. Med. 1988, 64 (6), 367-368.

102. Jalil, N., C. Glichrist, D. Taylor-Robinson. Factors influencing the in-vitro sensitivity of Ureaplasma urealyticum to tetracyclines. J. Antimicrob. Chemother. 1989, 23 (3), 341-345.

103. Jansson, E. Isolation of fastidious mycoplasma from human sources. J. Clin. Pathol. 1971, 24, 53-56.

104. Kataoka, S., T. Yamada, K. Ghou, R. Nishida, M. Morikawa, M. Minami, H. Yamada, N. Sakuragi, H. Minakami. Association between preterm birth and vaginal colonization by mycoplasmas in early pregnancy. J. Clin. Microbiol. 2006, 44 (1), 51-55.

105. Katz, В., P. Patel, L. Duffy, R.L. Schelonka, R.A. Dimmitt, K.B. Waites. Characterization of ureaplasmas isolated from preterm infants with and without bronchopulmonary dysplasia. J. Clin. Microbiol. 2005, 43 (9), 4852-4854.

106. Kaya, S., O. Poyraz, G. Gokce, H. Kilicarslan, K. Kaya, S. Ayan. Role of genital mycoplasmata and other bacteria in urolithiasis. Scand. J. Infect. Dis. 2003, 35 (5), 315-317.

107. Kenny, G.E. Inhibition of the growth of Ureaplasma urealyticum by a new urease inhibitor, flurofamide. Yale J. Biol. Med. 1983, 56 (5-6), 717-722.

108. Kenny, G.E., F.D. Cartwright. Effect of urea concentration on growth of Ureaplasma urealyticum (T-strain mycoplasma). J. Bacterid. 1977, 132 (1), 144-150.

109. Kenny, G.E., F.D. Cartwright. Effect of pH, inoculum size, and incubation time on the susceptibility Ureaplasma urealyticum to erythromycin in vitro. Clin. Infect. Dis. 1993, 17 (Suppl. 1), S215-218.

110. Kenny, G.E., F.D. Gartwright, M.C. Roberts. Agar dilution method of determination of antibiotic susceptibility of Ureaplasma urealyticum. Pediatr. Infect. Dis. 1986, 5 (6 Suppl.), S332-334.

111. Kilian, M., M.B. Brown, Т.A. Brown, Е.А. Freundt, G.H. Cassell. Immunoglobulin Al protease activity in strains of Ureaplasma urealyticum. Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. (Sect. B) 1984, 92 (1), 61-64.

112. Kong, F., Z. Ma, G. James, S. Gordon, G.L. Gilbert. Species identification and subtyping of Ureaplasma parvum and Ureaplasma urealyticum using PCR-based assays. J. Clin. Microbiol. 2000,38 (3), 1175-1179.

113. Kong, F., X. Zhu, W. Wang, X. Zhou, S. Gordon, G.L. Gilbert. Comparative analysis and serovar-specific identification of multiple-banded antigens of Ureaplasma urealyticum biovar 1. J. Clin. Microbiol. 1999, 37 (3), 538-543.

114. Koshimizu, K., R. Harasawa, I.-J. Pan, H. Kotani, M. Ogata, E.B. Stephens, M.F. Barile. Ureaplasma gallorale sp. nov. from the oropharynx of chickens. Int. J. Syst. Bacteriol. 1987, 37, 333-338.

115. Kundsin, R.B., S.A. Poulin. Ureaplasma urealyticum subcultures invalid for antibiotic susceptibility tests. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 1985, 3 (4), 329-336.

116. Lee, G., G.E. Kenny. Humoral immune response to polypeptides of Ureaplasma urealyticum in women with postpartum fever. J. Clin. Microbiol. 1987, 25 (10), 1841-1844.

117. Leland, D.S., M.A. Lapworth, R.B. Jones, M.L.V. French. Comparative evaluation of media for isolation of Ureaplasma urealyticum and genital Mycoplasma species. J. Clin. Microbiol. 1982, 16 (4), 709-714.

118. Ligon, J.V., G.E. Kenny. Virulence of ureaplasmal urease for mice. Infect. Immun. 1991, 59 (3), 1170-1171.

119. Lin, J.S. Complement-mediated killing of Ureaplasma urealyticum by antibody directed against components of the growth medium. J. Med. Microbiol. 1982, 15 (1), 135-140.

120. Lin, J.S., E.H. Kass. Fourteen serotypes of Ureaplasma urealyticum (T-mycoplasmas) demonstrated by the complement-dependent mycoplasmacidal test. Infection. 1980, 8 (4), 152-155.

121. Litwin, J. Further studies on a tryptose based serum-free medium for human diploid fibroblasts. Dev. Biol. Scand. 1985, 60, 25-33.

122. Mabanta, C., G. Pryhuber, G. Weinberg, D. Phelps. Erythromycin for the prevention of chronic lung disease in intubated preterm infants at risk for, or infected with Ureaplasma urealyticum. Cochrane Database Syst. Rev. 2003,4, CD003744.

123. MacFaddin, J.F. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria. Vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, Md, 1985.

124. MacKenzie, C.R., B. Henrich, U. Hadding. Biovar-specific epitopes of the urease enzyme of Ureaplasma urealyticum. J. Med. Microbiol. 1996, 45 (5), 366-371.

125. Manchee, R.J., D. Taylor-Robinson. Enhanced growth of T-strain mycoplasmas with N2-hydroxyethylpiperazine-N'-2 ethane-sulfonic acid buffers. J. Bacteriol. 1969, 100 (1), 78-85.

126. Masover, G.K., J.R. Benson, L. Hayflyck. Growth of T-strain mycoplasmas in medium without added urea: cffect of trace amounts of urea and urease inhibitor. J. Bacteriol. 1974, 117 (2), 765-774.

127. Masover, G.K., H. Catlin, L. Hayflick. The effect of growth and urea concentration on ammonia production by a urea-hydrolysing mycoplasma (Ureaplasma urealyticum). J. Gen. Microbiol. 1977, 98 (2), 587-593.

128. Masover, G.K., S. Razin, L. Hayflick. Effects of carbon dioxide, urea and ammonia on growth of Ureaplasma urealyticum (T-strain mycoplasma). J. Bacteriol. 1977, 130 (1), 292-296.

129. Masover, G.K., J.E. Sawyer, L. Hayflick. Urea-hydrolyzing activity of a T-strain mycoplasma: Ureaplasma urealyticum. J. Bacteriol. 1976, 125 (2), 581-586.

130. Matlow, A., C. Th'ng, D. Kovach, P. Quinn, M. Dunn, E. Wang. Susceptibilities of neonatal respiratory isolates of Ureaplasma urealyticum to antimicrobial agents. Antimicrob. Agents Chemother. 1998,42 (5), 1290-1292.

131. Meloni, G.A., G. Bertolini, F. Busolo, L. Conventi. Colony morphology, ultrastructure, and morphogenesis in Mycoplasma hominis, Acholeplasma laidlawii and Ureaplasma urealyticum. J. Gen. Microbiol. 1980, 116 (2), 435-443.

132. Morgan, J.F., H.J. Morton, R.C. Parker. Nutrition of animal cells in tissue culture; initial studies on a synthetic medium. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1950, 73 (1), 1-8.

133. Morton, H.E., J.G. Lecce. Selective action of thallium acetate and crystal violet for pleuropneumonia like organisms of human origin. J. Bacteriol. 1953, 66 (6), 646-649.

134. Mouches, C., D. Taylor-Robinson, L. Stipkovits, J.M. Bove. Comparison of human and animal ureaplasmas by one- and two-dimensional protein analysis on polyacrylamide slab gel. Ann. Microbiol. (Inst. Pasteur). 1981, 132B (2), 171-196.

135. Muhlrad, A., I. Peleg, J.A. Robertson, I.M. Robinson, I. Kahane. Acetate kinase activity in mycoplasmas. J. Bacteriol. 1981, 147 (1), 271-273.

136. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing: 8th informational supplement. NCCLS document M100-S9. NCCLS, Wayne, Pa, 1999.

137. Nelson, S., A. Matlow, G. Johnson, C. Th'ng, M. Dunn, P. Quinn. Detection of Ureaplasma urealyticum in endotracheal tube aspirates from neonates by PCR. J. Clin. Microbiol. 1998, 36 (5), 1236-1239.

138. Neyrolles, O., S. Ferris, N. Behbahani, L. Montagnier, A. Blanchard. Organization of Ureaplasma urealyticum urease gene cluster an expression in a suppressor strain of Escherichia coli. J. Bacteriol. 1996, 178 (3), 647-655.

139. Nunez-Calonge, R., P. Caballero, C. Redondo, F. Baquero, M. Martinez-Ferrer, M.A. Meseguer. Ureaplasma urealyticum reduses motility and induses membrane alteration in human spermatozoa. Hum. Reprod. 1998, 13 (10), 2756-2761.

140. O'Brien, S.J., J. Simonson, S. Razin, M.F. Barile. On the distribution and characteristics of isozyme expression in Mycoplasma. Yale J. Biol. Med. 1983, 56, 701-708.

141. Ohkawa, M., K. Yamaguchi, S. Tokunaga, T. Nakashima, S. Fujita. Ureaplasma urealyticum in the urogenital tract of patients with chronic prostatitis or related symptomatology. Br. J. Urol. 1993,72 (6), 918-921.

142. Ollikainen, J., H. Hiekkaniemi, M. Korppi, H. Sarkinnen, K. Heinonen. Ureaplasma urealyticum infection associated with acute respiratory insufficiency and death in premature infants. J. Pediatr. 1993, 122 (5Ptl), 756-760.

143. Pacifico, L., A. Panero, M. Roggini, N. Rossi, G. Bucci, C. Chiesa. Ureaplasma urealyticum and pulmonary outcome in a neonatal intensive care population. Pediatr. Infect. Dis. J. 1997, 16 (6), 579-586.

144. Palu, G., S. Valisena, M.F. Barile, G.A. Meoni. Mechanism of macrolide resistance in Ureaplasma urealyticum: a study on collection and'clinical strains. Eur. J. Epidemiol. 1989, 5 (2), 146-153.

145. Pereyre, S., H. Renaudin, C. Bebear, C.M. Bebear. In vitro activities of the newer quinolones garenoxacin, gatifloxacin and gemifloxacin against human mycoplasmas. Antimicrob. Agents Chemother. 2004,48 (8), 3165-3168.

146. Pollack, J.D. Metabolic distinctiveness of ureaplasmas. Pediatr. Infect. Dis. 1986, 5 (6 Suppl.), S305-307.

147. Poulin, S.A., R.B. Kundsin. Abstr. G-9. Abstr. 97th Gen. Meet. Am. Soc. Microbiol. Miami Beach, FL, 1997, p. 281.

148. Povlsen, K., J.S. Jensen, I. Lind. Detection of Ureaplasma urealyticum by PCR and biovar determination by liquid hybridization. J. Clin. Microbiol. 1998, 36 (11), 3211-3216.

149. Povlsen, K., P. Thorsen, I. Lind. Relationship of Ureaplasma urealyticum biovars to the presence or absence of bacterial vaginosis in pregnant women and to the time of delivery. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2001, 20 (1), 65-67.

150. Povlsen, К., E. Bjornelius, P. Lidbrink, I. Lind. Relationship of Ureaplasma urealyticum biovar 2 to nongonococcal urethritis. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 2002, 21 (2), 97-101.

151. Purcell, R.H., D. Taylor-Robinson, D. Wong, R.M. Chanock. Color test for the measurement of antibody to T-strain mycoplasmas. J. Bacteriol. 1966, 92 (1), 6-12.

152. Razin, S. Urea hydrolysis. In S. Razin, J.G. Tully (editors), Methods in mycoplasmology, Vol. 1, Academic Press, N.Y., 1983, p. 351-353.

153. Razin, S., R. Harasawa, M.F. Barile. Cleavage patterns of the mycoplasma chromosome, obtained by using restriction endonucleases, as indicators of genetic relatedness among strains. Int. J. Syst. Bacteriol. 1983, 33, 201-206.

154. Razin, S., G.K. Masover, M. Palant, L. Hayflick. Morphology of Ureaplasma urealyticum (T-mycoplasma) organisms and colonies. J. Bacteriol. 1977, 130 (1), 464-471.

155. Reed, L.J., H. Muench. A simple method of estimating fifty per cent end-points. Am. J. Hygiene. 1938, 27, 493-497.

156. Regan, J.A., E.M. Greenberg. Perinatal Ureaplasma urealyticum infection and colonisation: the association with preterm delivery and the spectrum of disease in neonates. Rev. Med. Microbiol. 2001, 12 (2), 97-107.

157. Renaudin, H., С. Bebear. Evaluation of the Mycoplasma Plus and the SIR Mycoplasma kits to quantitative detection and antibiotic susceptibility testing of genital mycoplasma. Pathol. Biol. (Paris), 1990,38 (5), 431-435.

158. Roberts, M.C. Antibiotic resistance. In J. Maniloff, R.N. McElhaney, L.R. Finch, J.B. Baseman (editors), Mycoplasmas: molecular biology and pathogenesis. American society for microbiology, Washington, D.C., 1992, p. 513-523.

159. Roberts, M.C., G.E. Kenny. Dissemination of the tetM tetracycline resistance determinant to Ureaplasma urealyticum. Antimicrob. Agents Chemother. 1986, 29, 350-352

160. Robertson, J.A. Bromothymol blue broth: improved medium for detection of Ureaplasma urealyticum (T-strain mycoplasma). J. Clin. Microbiol. 1978, 7 (2), 127-132.

161. Robertson, J.A. Effect of gaseous conditions on isolation and growth of Ureaplasma urealyticum on agar. J. Clin. Microbiol. 1982, 15 (2), 200-203.

162. Robertson, J.A., M. Alfa, E.S. Boatman. Morphology of the cells and colonies of Mycoplasma hominis. Sex. Transm. Dis. 1983, 10 (4 Suppl.), 232-239.

163. Robertson, J.A., M.C. Chen. Effects of manganese on the growth and morphology of Ureaplasma urealyticum. J. Clin. Microbiol. 1984, 19 (6), 857-864.

164. Robertson, J.A., L.A. Howard. Effects of carbohydrates on growth of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis. J. Clin. Microbiol. 1988, 25 (2), 160-161.

165. Robertson, J.A., L.A. Howard, C.L. Zinner, G.W. Stemke. Comparison of 16S rRNA genes within the T960 and parvo biovars of ureaplasmas isolated from humans. Int. J. Syst. Bacteriol. 1994, 44 (4), 836-838.

166. Robertson, J.A., L. Pyle, G.W. Stemke, L.R. Finch. Human ureaplasmas show diverse genome sizes by pulsed-field electrophoresis. Nucleic Acids Res. 1990, 18 (6), 1451-1455.

167. Robertson, J.A., G.W. Stemke. Modified metabolic inhibition test for serotyping strains of Ureaplasma urealyticum (T-strain mycoplasmas). J. Clin. Microbiol. 1979, 9 (6), 673-676.

168. Robertson, J.A., G.W. Stemke. Expanded serotyping scheme for Ureaplasma urealyticum strains isolated from humans. J. Clin. Microbiol. 1982, 15 (5), 873-878.

169. Robertson, J.A., G.W. Stemke, S.G. Maclellan, D.E. Taylor. Characterization of tetracycline-resistant strains of Ureaplasma urealyticum. J. Antimicrob. Chemother. 1988, 21 (3), 319-332.

170. Robertson, J.A., M.E. Stemler, G.W. Stemke. Immunoglobulin A protease activity in Ureaplasma urealyticum. J. Clin. Microbiol. 1984, 19 (2), 255-258.

171. Robertson, J.A., A. Vekris, C. Bebear, G.W. Stemke. Polymerase chain reaction using 16S rRNA gene sequences distinguishes the two biovars of Ureaplasma urealyticum. J. Clin. Microbiol. 1993, 31 (4), 824-830.

172. Rodwell, A. W., R.F. Whitcomb 1983. Methods of direct and indirect measurement of mycoplasma growth. In S. Razin, J.G. Tully (editors), Methods in mycoplasmology, Vol. 1, Academic Press, N.Y., 1983, p. 185-196.

173. Romano, N., S. Rottem, S. Razin. Biosynthesis of saturated and unsaturated fatty acids by T-strain mycoplasma (Ureaplasma). J. Bacterid. 1976, 128 (1), 170-173.

174. Romano, N., G. Tolone, F. Ajello, R. Licata. Adenosine 5'-triphosphate synthesis induced by urea hydrolysis in Ureaplasma urealyticum. J. Bacterid. 1980, 144 (2), 830-832.

175. Rose, B.I., B. Scott. Sperm motility, morphology, hyperactivation and ionophore induced acrosome reactions after overnight incubation with mycoplasmas. Fertil. Steril. 1994, 61, 341-345.

176. Rosendal, S., A. Valdivieso-Garsia. Enumeration of mycoplasmas after acridine orange staining. Appl. Environ. Microbiol. 1981,41 (4), 1000-1002.

177. Ruifu, Y., Z. Minli, G. Zhaobiao, W. Xiaohui. Biovar diversity is reflected by variations of genes encoding urease of Ureaplasma urealyticum. Microbiol. Immunol. 1997, 41 (8), 625-627.

178. Sayed, I., G.E. Kenny. Effect of ammoniumuon concentration and osmotic pressure on growth of Ureaplasma urealyticum (T-strain mycoplasma). J. Bacteriol. 1978, 134 (3), 967-972.

179. Sayed, I., G.E. Kenny. Comparison of the proteins and polypeptides of the eight serotypes of Ureaplasma urealyticum by isoelectric focusing and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Int. J. Syst. Bacteriol. 1980, 30, 33-41.

180. Schaeffer, W.I., R. Melamede. Fluorometric quantitation of broth-cultured mycoplasmas by using alkaline ethidium bromide. J Clin. Microbiol. 1993, 31 (5), 1303-1307.

181. Shalika, S., R. Dugan, R.D. Smith. The effect of positive semen bacterial and Ureaplasma cultures on in-vitro fertilization success. Hum. Reprod. 1996, 11 (12), 2789-2792.

182. Shaw, N.J., B.C. Pratt, A.M. Weindling. Ureaplasma and Mycoplasma infections of central nervous system in preterm infant (letter). Lancet. 1989, 2, 1530-1531.

183. Shepard, M.C. The recovery of pleuropneumonia-like organisms from Negro men with and without non-gonococcal urethritis. Am. J. Syph. Gonor. Vener. Dis. 1954, 38 (2), 113-124.

184. Shepard, M.C. Cultivation and properties of T-strains of mycoplasma associated with nongonococcal urethritis. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1967, 143 (1), 505-514.

185. Shepard, M.C. Culture media for ureaplasmas. In S. Razin, J.G. Tully (editors), Methods in mycoplasmology, Vol. 1, Academic Press, N.Y., 1983, p. 137-146.

186. Shepard, M.C., R.S. Combs. Enhancement of Ureaplasma urealyticum growth on a differential agar medium (A7B) by a polyamine, putrescine. J. Clin. Microbiol. 1979, 10 (6), 931-933.

187. Shepard, M.C., D.R. Howard. Identification of "T" mycoplasmas in primary agar cultures by means of a direct test for urease. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1970, 174 (2), 809-819.

188. Shepard, M.C., C.D. Lunceford. Effect of pH on human Mycoplasma strains. J. Bacteriol. 1965, 89, 265-270.

189. Shepard, M.C., C.D. Lunceford. Occurrence of urease in T strains of Mycoplasma. J. Bacteriol. 1967, 93 (5), 1513-1520.

190. Shepard, M.C., C.D. Lunceford. Urease color test medium (U-9) for the detection and identification of "T" mycoplasmas in clinical material. Appl. Microbiol. 1970, 20 (4), 539-543.

191. Shepard, M.C., C.D. Lunceford. Differential agar medium (A7) for identification of Ureaplasma urealyticum (human T-mycoplasmas) in primary cultures of clinical material. J. Clin. Microbiol. 1976, 3 (6), 613-625.

192. Shepard, M.C., C.D. Lunceford. Serological typing of Ureaplasma urealyticum isolates from urethritis patients by an agar growth inhibition method. J. Clin. Microbiol. 1978, 8 (5), 566-574.

193. Shepard, M.C., C.D. Lunceford, D.K. Ford, R.H. Purcell, D. Taylor-Robinson, S. Razin, F.T. Black. Ureaplasma urealyticum gen. nov., sp. nov.: proposed nomenclature for the human T (T-strain) mycoplasmas. Int. J. Syst. Bacteriol. 1974, 24,160-171.

194. Shepard, M.C., G.K. Masover. Special features of ureaplasmas. In M. F. Barile, S. Razin (editors), The mycoplasmas, Vol. 1, Academic Press, N.Y., 1979, p. 452-494.

195. Sillis, M. Genital mycoplasmas revisited an evaluation of new culture medium. Br. J. Biomed. Sci. 1993, 50 (2), 89-91.

196. Skevaki, С., D.A. Kafetzis. Ureaplasma urealyticum airway colonization and pulmonary outcome in neonates. Expert Rev. Anti-infect. Ther. 2003, 1 (1), 183-191.

197. Smith, D.G., W.C. Russell, D. Thirkell. Adherence of Ureaplasma urealyticum to human epithelial cells. Microbiol. 1994, 140 (Pt 10), 2893-2898.

198. Smith, D.G.E., W.C. Russell, W J. Ingledew, D. Thirkell. Hydrolysis of urea by Ureaplasma urealyticum generates a transmembrane potential with resultant ATP synthesis. J. Bacteriol. 1993, 175 (11), 253-258.

199. Smith, P.F. Detection of lipoglycans in ureaplasmas. J. Bacteriol. 1985, 162 (2), 611-614.

200. Spooner, R.K., W.C. Russell, D. Thirkell. Characterization of the immunoglobulin A protease of Ureaplasma urealyticum. Infect. Immun. 1992, 60 (6), 2544-2546.

201. Stalheim, O.V.H:, J.E. Gallagher. Ureaplasmal epithelial lesions related to ammonia. Infect. Immun. 1977, 15 (3), 995-996.

202. Stemke, G.W., J.A. Robertson. Comparison of two methods for enumeration of mycoplasmas. J. Clin. Microbiol. 1982, 16 (5), 959-961.

203. Stemke, G.W., J.A. Robertson. Modified colony indirect epifluorescence test for serotyping Ureaplasma urealyticum, and an adaptation to detect common antigenic specificity. J. Clin. Microbiol. 1981, 14 (5), 582-584.

204. Stemler, M., G.W. Stemke, J.A. Robertson. ATP measurements obtained" by luminometry provide rapid estimation of Ureaplasma urealyticum growth. J. Clin. Microbiol. 1987, 25 (2), 427-429.

205. Swenson, C., J. Van Hamont, B.S. Dunbar. Specific protein differences among strains of Ureaplasma urealyticum as determined by two-dimensional'gel electrophoresis and a sensitive silver stain. Int. J. Syst. Bacteriol. 1983, 33,417-421.

206. Takebe, S., A. Numata, K. Kobashi. Stone formation by Ureaplasma urealyticum in human urine and prevention by urease inhibitors. J. Clin. Microbiol. 1984, 20 (5), 869-873.

207. Taylor-Robinson, D. Infectionsidue to species of Mycoplasma and Ureaplasma: an update. Clin. Infect. Dis. 1996,23 (4), 671-684.

208. Taylor-Robinson, D., G.W. Csonka, MJ. Prentice. Human intra-urethral inoculation of ureaplasmas. Q. J. Med. 1977,46, 309-326.

209. Taylor-Robinson, D., P.M. Furr. Clinical antibiotic resistance of Ureaplasma urealyticum. Pediatr. Infect. Dis. 1986, 5 (6 Suppl.), 335-337.

210. Taylor-Robinson, D., P.M. Furr., A.D.B. Webster. Ureaplasma urealyticum causing persistent urethritis in a patient with hypogammaglobulinemia. Genitourin. Med. 1985, 61 (6), 404-408.

211. Teng, L.J., S.W. Ho, S.J. Liaw, H.C. Lai, K.T. Luh. Rapid detection and biovar differentiation of Ureaplasma urealyticum in clinical specimens by PCR. J. Formos. Med. Assoc. 1995, 94 (7), 396-400.

212. Teng, L.J., X. Zheng, J.I. Glass, H.L. Watson, J. Tsai, G.H. Cassell. Ureaplasma urealyticum biovar specificity and diversity are encoded in multiple-banded antigen gene. J. Clin. Microbiol. 1994, 32 (6), 1464-1469.

213. Texier-Maugein, J., M. Clerc, A. Vekris, C. Bebear. Ureaplasma urealyticum-induced bladder stones in rats and their prevention by flurofamide and doxycycline. Isr. J. Med. Sci. 1984, 6, 565-567.

214. Thirkell, D., A.D. Myles, W.C. Russell. Serotype 8- and serocluster-specific surface expressed antigens of Ureaplasma urealyticum. Infect. Immun. 1989, 57 (6), 1697-1701.

215. Thirkell, D., A.D. Myles, D. Taylor-Robinson. A comparison of four major antigens in five human and several animal strains of ureaplasmas. J. Med. Microbiol. 1990, 32 (3), 163-168.

216. Tull, A.H., E.B. Blair, D.L. Fishman, G.J. Heatley. Significant enhancement of T-strain mycoplasmal growth on supplemented Shepard's A6 differential agar. J. Clin. Microbiol. 1975, 1 (2), 234-236.

217. Tully, J.G., D.L. Rose. 1983. Sterility and quality control of mycoplasma culture media. In S. Razin, J.G. Tully (editors), Methods in mycoplasmology, Vol. 1, Academic Press, N.Y., 1983, p. 121-125.

218. Tully, J.G., R.F. Whitcomb, H.F. Clare, D.L. Williamson. Pathogenic mycoplasmas: cultivation and vertebrata pathogenicity of new spiroplasma. Science. 1977, 195, 892-894.

219. Ullmann, U., S. Schubert, R. Krausse. Comparative in vitro activity of levofloxacin, other fluoroquinolones, doxycycline and erythromycin against Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis. J. Antimicrob. Chemother. 1999, 43 (Suppl. C), 33-36.

220. Velleca, W.M., B.R. Bird, F.T. Forester. Laboratory diagnosis of mycoplasma infections. In Course 8226-C. U.S. Department of health, education and welfare, public health service, Center for Disease Control, Atlanta, Ga, p. A1-A23.

221. Waites, K.B., B. Katz, R.L. Schelonka. Mycoplasmas and ureaplasmas as neonatal pathogens. Clin. Microbiol. Rev. 2005, 18 (4), 757-789.

222. Watson, H.L., D.A. Blalock, G.H. Cassell. Variable antigens of Ureaplasma urealyticum containing both serovar-specific and serovar cross-reactive epitopes. Infect. Immun. 1990, 58 (11), 3679-3688.

223. Woodson, B.A., K.S. McCarty, M.C. Shepard. Arginine metabolism in mycoplasma and infected L929 fibroblasts. Arch. Biochem. 1965, 109, 364-371.

224. Yajko, D.M., E. Balston, D. Wood, R.L. Sweet, W.K. Hadley. Evaluation of PPLO, A7B, E and NYC agar for the isolation of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma species from the genital tract. J. Clin. Microbiol. 1984, 19 (1), 73-76.