Изучение иммунобиологических свойств изолятов рабического вируса и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством в Республике Татарстан

Савицкая, Татьяна Александровна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изучение иммунобиологических свойств изолятов рабического вируса и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством в Республике Татарстан
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Изучение иммунобиологических свойств изолятов рабического вируса и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством в Республике Татарстан"

На правах рукописи

САВИЦКАЯ ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ИЗОЛЯТОВ РАБИЧЕСКОГО ВИРУСА И СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ЭПИЗООТОЛОГО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОГО НАДЗОРА ЗА БЕШЕНСТВОМ В РЕСПУБЛИКЕ ТАТАРСТАН

03.00.07 - микробиология

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Казань - 2007

003068555

Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении «Федеральный Центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (ФГУ "ФЦТРБ - ВНИВИ" (г.Казань)).

Научный руководитель:

Научный консультант:

доктор биологических наук Хисматуллина Наиля Анваровна Заслуженный деятель науки РФ и РТ, доктор ветеринарных наук, профессор Юсупов Расых Халиуллович

Официальные оппоненты:

Доктор биологических наук Гильмутдинов Рустам Якубович Доктор медицинских наук, профессор Поздеев Оскар Кимович

Ведущее учреждение:

ФГУ "Федеральный центр охраны здоровья животных" ( ФГУ «ВНИИЗЖ»)

Защита состоится

J » JUJL4

.2007 года в /О часов на заседании диссертационного совета Д-220.012.01 при ФГУ "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных" (420075, Казань, Научный городок-2).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ "Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных" Автореферат разослан « » марта 2007 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат ветеринарных наук, ст. научный сотрудник

В.И.Степанов

1.0БЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

1.1.Актуальность темы. Несмотря на определенные достижения в изучении бешенства, борьба с этим зоонозом продолжает оставаться важной проблемой ветеринарии и медицины.

В большинстве регионов России эпизоотическая ситуация по бешенству чрезвычайно сложна - резко активизировались природные очаги этой инфекции, увеличилось число случаев заболеваний среди различных видов животных, ежегодно регистрируются случаи заболеваний людей с летальным исходом (Ведерников В.А. и соавт., 2002; Хадарцев О.С. и соавт., 2006 и др.).

Научно обоснованные противоэпизоотические и противоэпидемические мероприятия, по данным ряда авторов (Авилов B.C. и соавт.1998; Хисматуллина H.A., Юсупов Р.Х. и соавт., 1995; Иванов A.B. и соавт., 2005) должны основываться на изучении особенностей краевой эпизоотологии, прогнозировании ситуации по этому зоонозу, своевременном выявлении возбудителя бешенства и изучении его биологических свойств, а также контроле иммунного состоянием животных и людей, вакцинированных против бешенства

В последнее время показана также перспективность использования твердофазного ИФА для обнаружения антител в сыворотке крови людей, привитых антирабическими вакцинами, а также у иммунизированных животных (Сазанова Э.Я. и соавт., 1988; Ботвинкин А.Д., Селимов М.А. и соавт., 1990; Atanasiu Р. et al., 1977; Nicholson K.G., Prestage H., 1982 и др.).

Вместе с тем, совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством, а также разработка новых средств контроля эффективности вакцинопрофилактики этого зооноза по-прежнему остаются актуальными.

1.2.Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов рабического вируса, циркулирующих на территории Республики Татарстан (РТ) и усовершенствовать эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством.

Исходя из поставленной цели, решались следующие задачи:

1 .Провести идентификацию и изучить иммунобиологические свойства

эпизоотических изолятов рабического вируса, циркулирующих на территории РТ.

2.Разработать иммуноферментную тест-систему на основе глико-протеина рабического вируса для контроля эффективности вакци-нопрофилактики бешенства.

3.Изучить эпизоотолого-эпидемиологическую ситуацию по бешенству в РТ за период 1997-2005 гг.

4.Изучить влияние биотических и абиотических факторов на энзоотию бешенства в РТ для прогнозирования ситуации по данному заболеванию.

1.3.Научная новизна. Впервые изучены иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Татарстан. Установлено антигенное родство их с вакцинным штаммом «Овечий» ГНКИ рабического вируса. Показана возможность применения средств и методов, разработанных в ФГУ «ФЦТРБ -ВНИВИ» на основе поликлональных антител к вакцинному штамму «Овечий» ГНКИ для прижизненной диагностики бешенства.

Впервые разработана и апробирована иммуноферментная тест-система с применением гликопротеина вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, обеспечивающая выявление специфических антител в сыворотках крови животных и людей, а также глазной жидкости лисиц, иммунизированных против бешенства.

Проведен ветеринарно-географический анализ распространения бешенства на территории Республики Татарстан за 1997-2005 гг., разработана карта эпизоотологического районирования территории республики. Представлена математическая модель прогнозирования энзоотии бешенства в Республике Татарстан.

1.4.Практическая значимость. Результаты проведенных исследований вошли в "Наставление по применению набора препаратов для выявления антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства методом иммуноферментного анализа" (от 21.11.03 г.) и Методическое руководство "Эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством" (от 4.07.06г.), утвержденные в установленном порядке.

1.5.Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

-выделение и идентификация эпизоотических изолятов возбудителя бешенства, циркулирующих на территории РТ, изучение их иммунобиологических свойств и соответствия вакцинному штамму;

-разработка и применение иммуноферментной тест-системы для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства;

-характеристика эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по заболеваемости бешенством в Республике Татарстан за 1997-2005гг. и районирование ее территории по степени распространения заболевания;

-разработка математической модели прогнозирования энзоотии бешенства по биотическим и абиотическим факторам;

-усовершенствование мероприятий по эпизоотолого-эпидемиоло-гическому надзору за бешенством.

1.6.Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на: 1) Ежегодных отчетных научных сессиях ФГУ "ФЦТРБ - ВНИВИ" по итогам НИР а также ежегодных семинарах-совещаниях с врачами хирургами и эпидемиологами районов и городов Республики Татарстан за 2002-2006 гг.; 2) Международной научно-практической конференции, посвященной 45-летию создания ВНИИВВиМ "Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов" (Покров, 2003); 3) Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 45-летию ВНИВИ (Казань, 2005); 4) Международном симпозиуме "Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний" (Казань, 2005); 5) Первой международной конференции "Бешенство в Европе" (Киев, 2005).

1.7.Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ.

1.8,Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, библиографический список использованной литературы (всего 240 источников, в том числе 68 иностранных) и приложение. Диссертация иллюстрирована 23 таблицами и 9 рисунками.

2.СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 .Материалы и методы исследований

Работа выполнена в 2001 - 2006 гг. в лаборатории иммунологии ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» МСХ РФ (№№ гос.регистрации 01200202602 и 01200202604). Отдельные фрагменты работы были выполнены с участием д.м.н. Ситдиковой И.Д., к.м.н. Ишуткиной О.И., с.н.с., к.в.н. Гумерова В.Г., с.н.с., к.в.н. Гизатуллиной A.C. и м.н.с. Тимиргапеева Р.В.

В опытах применяли 2 штамма вируса бешенства (ВБ): производственный, фиксированный - "Овечий" ГНКИ и стандартный - CVS.

В работе использовали животных: 5 овец, живой массой 40-50 кг; 20 кроликов 3,0-3,5 кг; 30 морских свинок 0,3-0,35 кг; 2000 белых мышей -беспородных, живой массой 6-7 гр. В опытах применяли перевиваемую культуру клеток невриномы Гассерова узла крысы - НГУК-1 (Авцын A.B. и соавт.,1984).

Проводили исследования 58 проб патологического материала (головной мозг, подчелюстные слюнные железы), доставленного из неблагополучных по заболеваемости бешенством районов Республики Татарстан, из них 21 - от сельскохозяйственных, 6 - от домашних животных, 29 - от лисиц, а также 1 — от человека, поступившего из инфекционной больницы №1 г. Казани. Контролями в опытах служили суспензии головного мозга интактных белых мышей (контрольные отрицательные антигены), а также иммуноглобулин (Ig) сывороток крови неиммунизированных животных и человека. В качестве контрольных положительных антигенов использовали мозг белых мышей, зараженных вирусом бешенства (штамм "Овечий" ГНКИ), в качестве гетерологичного антигена - мозг мышей, зараженных вирусом болезни Ауески (штамм ВГНКИ).

В опытах исследовали 12 проб сывороток крови людей, вакцинированных культуральной антирабической вакциной из штамма "Внуково-32", а также 44 пробы глазной жидкости лисиц, доставленных в период отстрела из неблагополучных по заболеваемости бешенством районов РТ, для определения антирабических антител.

В экспериментах использовали диагностические наборы препаратов, разработанные в ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»: «Флуоресцирующий антирабический глобулин» (ТУ 9388-012-00492374-99) и «Набор препаратов

для лабораторной диагностики бешенства методом

иммуноферментного анализа (ИФА)» (ТУ 9388 - 083 - 00008064-98), а также диагностические антитела против иммуноглобулинов барана и человека, меченные пероксидазой и флуоресцеинизотиоционатом производства НИИЭиМ им. Н.Ф.Гамалеи (Москва). Кроме того, в опытах применяли калибровочный набор белков для электрофореза (Pharmacia Biotech, США), блокирующий раствор "NEW LAV BLOT I R2", 5X ("Sanofi diagnostics pasteur" Франция) и др.

Метод иммунофлуоресценции (ИФ) проводили в прямом и непрямом вариантах на предметных стеклах по М.А.Селимову и соавт. (1964).

Реакцию длительного связывания комплемента (РДСК) осуществляли в пробирках по схеме, описанной E.Kuvert (1973).

Световую микроскопию проводили согласно ГОСТу 26075-84.

Иммуноферментный анализ проводили на 96-луночных пластиковых микротитрационных планшетах (ВНИИ медицинской техники, Москва). Для определения антигенов вируса бешенства применяли сэндвич-вариант ИФА. Для обнаружения антител в сыворотках крови иммунизированных животных и людей применяли непрямой вариант ИФА.

Выделение эпизоотических штаммов вируса бешенства в культуре клеток НГУК-1 проводили согласно Методическим указаниям по лабораторной диагностике бешенства, утвержденным ДВ МСХиП РФ 14.05.1997 г.

Биологическую пробу проводили согласно ГОСТу 26075-84.

Реакцию нейтрализации (РН) проводили по P.Atanasiu (1975). В опытах применяли антирабический иммуноглобулин, полученный из сыворотки крови овец, иммунизированных вакцинным штаммом "Овечий" ГНКИ вируса бешенства с индексом нейтрализации равным 2 и более.

Получение и очистка антигена. Использовали метод накопления вирусного материала путем интрацеребрального введения 10%-ной вируссодержащей суспензии белым, беспородным мышам. Для получения культурального вируса бешенства (штамм "Овечий" ГНКИ) проводили заражение культуры клеток НГУК-1 путем внесения 10%-ной вируссодержащей суспензии мозга белых мышей в суспензию клеточной культуры в концентрации 5x10s кл/мл в соотношении 1:1.

Освобождение вирусного материала от клеточного дебриса проводили

по методу Н.А.Хисматуллиной, Р.Х.Юсупова (1998), с последующей очисткой и фракционированием в линейном градиенте плотности сахарозы (15-50%) - по B.Dietzschold (1996).

Методы вертикального электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) и иммуноблотинга. Степень очистки рабического вируса и его белковых фракций изучали методом диск-электрофореза в 12,5%-ном ПААГ в присутствии додецилсульфата натрия по U.K.Laemmli (1970) и B.Dietzschold (1996). Контролем служил набор белков стандартной молекулярной массы (94.0, 67.0, 43.0, 30.0, 20.1, 14.4 кД). Специфичность гликопротеино-вой фракции определяли иммуноблотингом по Н. Towbin et al. (1979).

Эпизоотологические исследования. Для решения отдельных вопросов краевой эпизоотологии бешенства (распространение, эпизоотичность, сезонность, источник и факторы передачи возбудителя инфекции, математическая обработка материалов) применяли различные приемы и способы, описанные в "Рекомендациях по методике эпизоотического исследования" под редакцией И.А. Бакулова (1975). Эпизоотологическое районирование территории Республики Татарстан, а также количественную оценку напряженности эпизоотической ситуации проводили по методике, описанной М.Г.Таршисом и В.М.Константиновым (1991,1994).

Цифровой материал обрабатывали методом вариационной статистики с применением пакета прикладных программ Microsoft Excel 2000 и модуля "Пакет анализа", входящий в пакет "Excel" и пакет "Statistica".

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Идентификация и изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Татарстана. Обнаружение и идентификацию антигена рабического вируса проводили методами ИФА, ИФ и РН, а выделение возбудителя бешенства - в культуре клеток НГУК-1 и биопробой на белых мышах.

Исследованием 58 проб головного мозга различных видов животных из неблагополучных по заболеваемости бешенством районов Татарстана отмечено полное совпадение результатов ИФА и ИФ с биопробой на белых мышах и в культуре клеток НГУК-1. При этом титры антигена уличного

вируса бешенства, в зависимости от содержания его в патологическом материале, в ИФА варьировали в пределах 1:10 - 1:160, при Ксп=2,1 и более.

Изучаемые изоляты вируса бешенства выделялись в культуре клеток НГУК-1 с последующим обнаружением рабического антигена в реакции ИФ и ИФА через 72-96 ч после заражения без проявлений цитопатического действия. Антиген вируса бешенства в реакции ИФ выявлялся в цитоплазме клеток НГУК-1 в виде ярких гранул различной формы и величины - от едва заметных до имеющих 15-20 мкм в диаметре. Иногда отмечалось небольшое количество мелких желто-зеленых частиц (размером до 0,5 мкм) округлой и овальной формы. В контроле, где клетки НГУК-1 инкубировали с мозговой взвесью от клинически здоровых животных, при окрашивании их флуоресцирующим антирабическим глобулином, специфических гранул не обнаруживали.

Экспериментальным заражением была установлена патогенность изучаемых изолятов для лабораторных животных - белых мышей, морских свинок и кроликов. Исследуемые изоляты вируса бешенства вызывали заболевания белых мышей с летальным исходом как при интрацеребральном, так и при подкожном способах заражения. Продолжительность видимых проявлений болезни (взъерошенность шерсти, горбатость спины, паралич и др.) обычно составляла менее суток и в редких случаях - 2-3 суток.

Изучение степени патогенности проведено с изолятами вируса бешенства, выделенными от лисиц, крупного рогатого скота, собаки и барсука из неблагополучных по бешенству районов Республики Татарстан. Для характеристики вирулентности изолятов вируса бешенства использовали индекс инвазивности, который определяли как разницу титров в пересчете на 1 мл суспензии при интрацеребральном и подкожном заражениях. Индекс инвазивности варьировал от 0,9 до 2,4. При этом инкубационный период уличных изолятов вируса бешенства варьировал в среднем от 12 до 27 суток. Следовательно, в Республике Татарстан циркулируют как высоко-, так и слабопатогенные штаммы вируса бешенства.

В последующих экспериментах было установлено, что изоляты вируса бешенства, выделенные из неблагополучных по бешенству районов Республики Татарстан, обладают преципитирующими и комплементфиксирующими свойствами с активностью в реакциях

диффузионной преципитации и длительного связывания

комплемента 1:2 - 1:8 соответственно. Кроме того, в реакции вирусной нейтрализации установлено антигенное родство изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Татарстан и вакцинного штамма "Овечий" ГНКИ, так как они полностью нейтрализовались антирабическим гамма-глобулином, полученным из сыворотки крови овец, иммунизированных указанным штаммом.

Прижизненная и постморталъная диагностика случая гидрофобии в Татарстане. В 2002 г. в Муслюмовском районе республики зарегистрирован случай гидрофобии. Лабораторными исследованиями методом прямой ИФ отпечатков с роговицы глаза пострадавшей в нескольких полях зрения был обнаружен специфический антиген вируса бешенства в виде типичных, отчетливо выраженных ярких, желто-зеленых гранул различной формы и величины с интенсивностью свечения в три креста. В контрольных препаратах подобных образований не отмечено.

Постмортальный анализ различных отделов головного мозга прямым методом ИФ дал положительный результат по обнаружению специфического антигена вируса бешенства: в аммоновом роге, коре больших полушарий, мозжечке - множество включений (++++) и продолговатом мозге - единичное количество ярко светящихся комплексов-включений (+++).

Методом ИФА в суспензиях различных отделов головного мозга обнаружен специфический антиген вируса бешенства в титрах: в аммоновом роге - 1:160 (Ксп=2,2), продолговатом мозге - 1:80 (Ксп=2,2), мозжечке - 1:80 (Ксп=2,2), коре больших полушарий- 1:80 (Ксп=3,1), слюнных железах - 1:20 (Ксп=2,1).

Световой микроскопией на отпечатках с аммонова рога, продолговатого мозга, мозжечка и коры больших полушарий обнаружены тельца Бабеша-Негри, являющиеся патогномоничными для бешенства.

Таким образом, проведенными лабораторными исследованиями методами ИФ, ИФА и световой микроскопии, а также биопробой на белых мышах получены положительные результаты по обнаружению специфического антигена вируса бешенства в отпечатках с роговицы глаза пострадавшей, а также различных отделов головного мозга и слюнных желез.

При этом методом ИФ диагноз был поставлен за 6 сут до смерти пострадавшей. Полученные результаты подтверждают клинически поставлен-

ный диагноз - гидрофобия.

3.2. Разработка и применение иммуноферментиой тест-системы на основе гликопротеина рабического вируса для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства. Для получения гликопротеина вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, использовали 10%-ную суспензию мозга зараженных мышей или кулыуральные вируссодержащие жидкости с титром инфекционности не ниже 5,7 ЬП50/0,03мл. С целью частичной очистки и концентрирования вируса суспензию подвергали ультрацентрифугированию. Осадок ресуспендировали в ЫТЕ-буфере, рН 7,5. Вирус очищали в линейном градиенте плотности сахарозы (15-50%%) в течение 1 ч. при 50000 g и 4°С.

Наличие антигена вируса бешенства контролировали в сэндвич-варианте метода ИФА. Фракция, содержащая гликопротеин располагалась в зоне 15-20 % плотности сахарозы. Методом электрофореза в 12,5%-ном ПААГе установлена мол.масса этой фракции, соответствующая 67 кД. Специфичность гликопротеина подтверждена иммуноблотингом. В результате исследований получен специфический антиген на основе гликопротеина вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, активность которого в ИФА составила 1:2560 (Ксп=2,1), концентрация белка-338 мкг/мл.

В дальнейших исследованиях провели эксперименты по оптимизации условий постановки непрямого варианта ИФА для выявления антирабических антител, обеспечивающих достижение максимальной точности и чувствительности анализа. Подбор условий иммобилизации антигена осуществляли путем изменения рН среды, температуры и времени инкубации. Влияние заряда буфера на иммобилизацию антигена изучали в диапазоне рН 7,2...10,0, исподьзуя 0,01 М фосфатный и карбонатно-бикарбонатный буферные растворы. Данные исследований показали, что максимальное связывание гликопротеина вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, с полистиролом отмечается при условии, когда рН буферного раствора равен 9,6. В результате исследований установлено также, что наиболее приемлемым является сенсибилизация планшетов специфическим антигеном в течение 3 ч при + 37°С или 18 ч при + 4°С в концентрации 5 мкг/мл на 0,01М карбонатно-бикарбонатном буфере, рН 9,6. Оптимальной является инкубация исследуемых сывороток в течение 2 ч, а конъюгата -1ч при 37 °С.

На основе гликопротеина вируса бешенства разработана иммуноферментная тест-система, включающая гликопротеин вируса

бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ; контрольные

положительную и отрицательную сыворотки; белок А (или антивидовой глобулин), меченный пероксидазой; концентрат фосфатно-буферного раствора (рН 7,4) с твином; концентрат карбонатно-бикарбонатного буфера (рН 9,6); фосфатно-цитратный буферный раствор (рН 4,9); орто-фенилендиамин.

Разработанная тест-система в дальнейшем испытывалась при выявлении специфических антител в сыворотках крови животных и людей, вакцинированных против бешенства для контроля за их иммунным состоянием.

Титрование сывороток крови людей, привитых культуральной антирабической вакциной, с помощью метода ИФА. Непрямым методом ИФА исследовано 12 проб сывороток крови людей, пострадавших от укуса бешеного волка в Муслюмовском и Азнакаевском районах РТ (2002 г.), а также от укусов собак и имевших нарушения в схеме иммунизации против бешенства (несоблюдение интервалов между прививками). Сыворотки крови были титрованы в реакции нейтрализации (РН) на белых мышах с использованием вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, взятого в концентрации от 15 до 500 Ь050/о,оз мл. При этом титры специфических антител варьировали в ИФА от 1:200 до 1:3200, что соответствовало показателям таковых в РН от 1:33 до 1:397. Из полученных данных следует прямая корреляция результатов ИФА и РН (г=0,9; Р<0,05). При этом по чувствительности и быстроте получения результатов ИФА (6-7 ч) превосходит РН на мышах (14 сут.). В результате исследований установлено также, что чувствительность ИФА превосходит непрямой метод ИФ в 10 -20 раз.

Серологический контроль уровня антирабических антител у вакцинированных животных. В дальнейших исследованиях установлена возможность применения разработанной нами иммуноферментной тест-системы на основе гликопротеина вируса бешенства для обнаружения антирабических антител в образцах глазной жидкости лисиц, добытых в природных очагах бешенства на территориях районов Республики Татарстан, где проводилась оральная вакцинация.

Из 44 исследованных образцов глазной жидкости лисиц положительными в ИФА оказалось 25, что составило 57,8% от количества исследованных проб с титром антител в ИФА 1:100 - 1:200 при Ксп= 2,1 и более. При этом постановка ИФА занимала 6-7 ч.

Результаты ИФА выборочно сопоставляли с таковыми РН на белых мышах. Всего исследовано 22 пробы из 44. В целом получено совпадение результатов в 86,2% случаев.

По итогам исследований разработано наставление по применению "Набора препаратов для выявления антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства методом иммуноферментного анализа (ИФА)", утвержденное в установленном порядке 21.11.2003 г.

3.3. Анализ ситуации, мер борьбы с бешенством и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за ним в Республике Татарстан. Анализ эпизоотической ситуации за период 19972005 гг. показал, что РТ неблагополучна по заболеваемости бешенством. Так, за указанный период бешенство в республике зарегистрировано в 42 районах и городах из 45 административных территорий у 1187 животных, в том числе 572 диких, 418 сельскохозяйственных и 197 домашних животных.

Необходимо отметить, что за последние десять лет по сравнению с периодом 1986 - 1995 гг. количество заболевших бешенством животных возросло в 3,5 раза, в том числе среди диких животных - в 5,7 раза (среди лисиц - в 6,2 раза), домашних животных - в 3,7 раза (среди собак - в 3,0 раза, среди кошек - в 4,7 раза), сельскохозяйственных животных - в 2,6 раза (среди КРС - в 2,5 раза). Таким образом, наблюдался рост заболеваний бешенством среди всех групп животных, вовлеченных в эпизоотический процесс бешенства. При этом основным источником и распространителем бешенства в республике являются лисицы, на долю которых среди заболевших диких животных приходится 96,3 %. По данным Управления Россельхознадзора по РТ, плотность популяции лисиц в РТ за 2003-2005 гг. варьировала в различных районах от 0,03 до 0,4 или в среднем по РТ - 0,1 - 0,2 гол./км2. Несмотря на малочисленность районов республики, в которых плотность популяции лисиц превышает упомянутую в литературе пороговую плотность (от 0,6 до 1 гол./км2 - по М.БШЬЬе, 1981 и 0,2 гол./км2 - по В.Тоша, 1977), в целом по РТ обстановка по заболеваемости бешенством сохраняется напряженной. В связи с этим считаем целесообразным рекомендовать снижение плотности популяции лисиц до 0,2 гол ./км2 в районах, где плотность популяции превышает это значение.

Анализ заболеваемости бешенством по экономическим районам

Татарстана за период 1970-2005 гг. свидетельствует о том, что максимальный уровень заболеваемости бешенством приходится на Юго-Восток Республики, где за исследуемый период зарегистрировано 4,95 неблагополучных пункта на 100 км2.

За период 2003-2005 гг. из 43 районов РТ заболевание бешенством встречалось в 41. Проведено разделение районов по степени напряженности эпизоотической ситуации на 4 условные группы. Первая группа - наиболее опасная зона, где показатель степени напряженности эпизоотической ситуации варьировал от 0,38 до 1,2 и заболевание бешенством регистрировалось в 7-79 неблагополучных пунктах 7 административных районов РТ.

Вторая группа - средняя зона, для которой показатель степени напряженности эпизоотической ситуации был в пределах от 0,06 до 0,33, где бешенство регистрировалось в 4-30 неблагополучных пунктах 26 административных районов.

Третья группа - слабая зона, где показатель степени напряженности эпизоотической ситуации был менее 0,05 и бешенство регистрировалось в 1-7 неблагополучных населенных пунктах 8 административных районов.

Четвертая группа - благополучная зона, к ней отнесены 2 административных района, где случаев бешенства среди животных не зарегистрировано.

Не исключается возможность трансграничного переноса возбудителя болезни на территорию Республики Татарстан из приграничных с ней неблагополучных по бешенству республик и областей Российской Федерации, среди которых наиболее неблагополучными являются: Республика Башкортостан, где за 2001-2005 гг. зарегистрировано 1195 случаев бешенства; Оренбургская область - 913; Самарская область - 670 и Ульяновская область -152 случая.

Установлена 3-5-летняя периодичность заболеваемости бешенством с максимальным его проявлением в осеннее-зимне-весенние периоды года (20,9-31,3-33,8%), связанные с биологией лисицы.

Обращает на себя внимание увеличение амплитуды кривой заболеваемости бешенством каждые 3-5 лет. Пики заболеваемости в 1996, 1999, 2003 и 2005 годах идут по возрастающей - соответственно 104 - 150 -

257-319 случаев.

Сезонность болезни должна учитываться при проведении профилактической иммунизации домашних животных. Иммунизацию собак в сельской местности целесообразно проводить в осенние месяцы.

За последние пять лет на фоне роста заболеваемости бешенством среди диких животных был отмечен рост числа пострадавших от них людей, в том числе и от диких животных с лабораторно подтвержденным диагнозом бешенства: 2000 г. - 97 чел, 2001 Г.-156, 2002 г. - 323, 2003 г.- 727, 2004 г.-563 и 2005 г.- 802 чел.

Недостаточная информированность населения об опасности бешенства приводит к тому, что значительное количество лиц, получивших повреждения от животных, отказываются или самовольно прекращают назначенный курс лечебно-профилактических прививок. В среднем их количество за последние годы составляет 8,7-12,0%. Вместе с тем, преобладает контакт пострадавших с сельскохозяйственными и домашними животными - от 93,0% до 99,0%, тогда как с дикими он составляет всего 1,0-7,0%. Значительную долю продолжают составлять пострадавшие от безнадзорных животных. Так, в 2005г. они составили 43,0%, от диких животных пострадало 1,7%.

Таким образом, в республике сохраняется постоянная угроза заражения людей от больных бешенством животных.

Несмотря на неблагополучную обстановку по бешенству в республике, благодаря своевременному назначению и проведению курса антирабичейких прививок, заболевания людей гидрофобией редки. С 1951 по 2005 гг. зарегистрировано 46 случаев гидрофобии. Последние два случая отмечены в 2002 и 2005 гг., где источниками заболеваний были бешеный волк и безнадзорная кошка.

В неблагополучных районах профилактически иммунизируются лица, относящиеся к группам повышенного "риска" заражения: охотники, ветеринарные специалисты, лесники, собаководы и т.д. В городах республики созданы консультативно-методические антирабические центры.

В целях недопущения ухудшения обстановки по бешенству органами ветеринарного и государственного санитарно-эпидемиологического надзора Республики Татарстан проводится совместная организационная работа.

Разработан проект новых "Правил содержания собак и кошек в городах и других населенных пунктах РТ". Принято Постановление Кабинета

Министров РТ № 378 от 21.07.2003 г. "О мерах по профилактике заболевания бешенством в Республике Татарстан" и Республиканский Комплексный план мероприятий по профилактике заболевания бешенством в Республике Татарстан на 2003-2007 гг., предусматривающие проведение в полном объеме специфических мер профилактики районными и городскими службами.

В городах и других населенных пунктах республики специализированными бригадами проводятся мероприятия по отлову бродячих собак и кошек. За период 2001-2005 гг. в республике иммунизировано 268447 животных, в том числе сельхозяйственных - 156726, собак - 93445, кошек -18276.

Ежегодно проводится десятидневное наблюдение за животными, покусавшими людей. Так, за 2001 - 2005гг. под наблюдением находилось 30625 животных.

В системе противоэпизоотических мероприятий отделом охотничьего надзора Управления Россельхознадзора по РТ в лесных угодьях проводится регулирование численности дикой фауны и отстрел безнадзорных собак и кошек. Так, в лесных угодьях только в 2005 г. было уничтожено 48 волков, 2942 лисицы и 10249 бродячих собак.

Для профилактики бешенства диких животных в РТ ежегодно, начиная с 1996 года, весной и осенью, государственной ветеринарной службой совместно с охотоведами районов проводится пероральная иммунизация диких плотоядных животных в лесных угодьях, путем раскладывания мясорыбных приманок, содержащих антирабическую вакцину.

Для ликвидации очагов стационарного неблагополучия и создания защитных иммунных барьеров необходимо, на наш взгляд, с учетом данных литературы, разработать на уровне Приволжского Федерального округа Программу одновременного проведения широкомасштабных кампаний оральной вакцинации диких хищников в регионе. Для полной ликвидации городского и природного бешенства необходима комплексная работа всех министерств, ведомств, учреждений и организаций, ответственных за благополучие в республике по данной инфекции.

В целях совершенствования эпизоотолого-эпидемиологического надзора были разработаны и внедрены для проведения оперативного и ретроспективного эпидемиологического надзора в отдельных

административных районах и в целом по РТ ряд аналитических

таблиц для органов Госсанэпиднадзора. Данные таблицы позволяют провести более полный анализ ситуации по бешенству, обращаемости населения за антирабической помощью и получения лечебно-профилактической иммунизации против бешенства, а также выявлять недостатки в работе и на основании проведенного анализа принимать меры по их устранению.

Контроль за проведением мероприятий среди контингентов профессиональных групп "риска" проводится Управлением Роспотребнадзора по РТ по соблюдению законодательства, касающегося санитарно-эпидемиологического благополучия. Он включает в себя контроль за выполнением санитарно-гигиенических норм и правил в животноводческих хозяйствах и на перерабатывающих предприятиях, соблюдением санитарно-дезинфекционного режима, использованием средств индивидуальной защиты, своевременным прохождением профосмотров, иммунизацией и пр.

Итогом исследований явилась разработка и издание Методического руководства "Эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством", утвержденное в установленном порядке 4.07.2006 г.

В Методическом руководстве представлен комплекс мероприятий, предусматривающий систему сбора, анализа и обмена информацией между ветеринарной и медицинской службами по заболеваемости бешенством у животных и людей, состоянию противоэпизоотических мероприятий и антирабической помощи, позволяющие оценивать эпизоотолого-эпидемиологическую обстановку и на этом основании разрабатывать и осуществлять систему практических действий, направленных на предупреждение, снижение и ликвидацию заболеваемости бешенством. Кроме теоретических положений и практических рекомендаций, взятых из литературы и нормативных документов, обобщен опыт по организации эпизоотолого-эпидемиологического надзора в Республике Татарстан.

Прогнозирование энзоотии бешенства по биотическим и абиотическим факторам. Проведен графический и математический анализ влияния биотических и абиотических факторов на заболеваемость бешенством в РТ и составлен прогноз ситуации по бешенству на 2005 - 2007 гг.

С целью эпизоотологического прогнозирования ситуации по бешенству в РТ помимо анализа многолетнего уровня заболеваемости бешенством животных нами изучена динамика солнечной активности, численности лисиц,

а также мышевидных грызунов - основы кормовой базы лисиц за период 1970 -2005 гг.

Графический анализ заболеваемости животных бешенством в республике в сопоставлении с ходом чисел Вольфа показал статистически достоверную обратную связь (г=-0,45; Р<0,01). Так, минимальная и предминимальная солнечная деятельность в 1973, 1976, 1985 и 1986 гг. соответствовала пикам заболеваемости бешенством у животных, и наоборот, повышение солнечной активности и ее "максимумы" совпали со спадом заболеваемости и благополучием по бешенству в 1971, 1974, 1979,1980, 1984, 1987, 1991 и 2000 гг.

Анализ графических данных прогностических факторов выявил тенденцию прямой зависимости заболеваемости бешенством животных от численности лисиц и обратной зависимости этого показателя от численности мелких млекопитающих.

В последующих исследованиях проводили математический анализ влияния биотических и абиотических факторов на заболеваемость животных бешенством в РТ за период 1970-2006 гт.

Методом ранговой корреляции Спирмена установлено, что заболеваемость бешенством имеет значимую (Р<0,05), сильную корреляцию с численностью лисиц (г=0,55) и урожайностью зерновых (г=0,5), а также обратную корреляцию с численностью мышевидных грызунов (г=-0,38) и солнечной активностью (г=-0,45).

Полученные зависимости стали основой для расчета прогностической модели линейной регрессии энзоотий бешенства в РТ, которая имеет вид:

У = 0,8 X, - 0,77 Х2 +0,99 Х3 - 0,28 X,, где У- количество больных бешенством животных; X) - численность лисиц; Х2 -численность мышевидных грызунов; Х3 -урожайность зерновых; X* -солнечная активность в числах Вольфа.

Коэффициент детерминации модели составляет 52,7%. Модель статистически значима.

С помощью дисперсионного анализа установлены доли влияния этих факторов на уровень заболеваемости среди животных бешенством, которые распределились следующим образом: 37,7% - численность лисиц; 6,7% -численность мышевидных грызунов; 6,6% - урожайность зерновых; 2,1% -

фактор солнечной активности.

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что тенденция прогнозируемой заболеваемости и фактической совпадают по всему анализируемому периоду. Полное совпадение расчетной заболеваемости бешенством с фактической отмечено в 2002 г., которые составили 167,7% и 168,5% соответственно.

На основании математического моделирования энзоотий бешенства в РТ составлен неблагоприятный прогноз по этой инфекции на 2005 гг. и благоприятный прогноз - на 2006 и 2007гт. В связи с этим было усилено проведение всего комплекса противоэпизоотических мероприятий в республике. Прогнозы подтвердились, если в 2004 г. было зарегистрировано 198 случаев бешенства, то в 2005 г. произошло ухудшение обстановки - 319, а в 2006 г. - улучшение обстановки - 139.

Изучение взаимосвязи заболеваемости бешенством от сочетаний различных элементов ландшафта. В дальнейших наших исследованиях представляло интерес изучение взаимосвязи между количеством неблагополучных пунктов по заболеваемости бешенством и различных элементов ландшафта в административных районах РТ: лесистостью, площадью пашен, сенокосов и пастбищ.

Полученные результаты позволили сделать статистически достоверный вывод о том, что количество неблагополучных пунктов на единицу территории района зависит от площади пастбищ в данном районе (г=0,34; Р<0,05). При этом наиболее предпочтительным для оценки показателей количества неблагополучных пунктов и площади пастбищ является корреляционный анализ по методу Пирсона.

В то же время количество неблагополучных пунктов на единицу территории района не имело статистически достоверную связь с площадью пашен, сенокосов и лесистостью. Для описания полученных взаимосвязей в системе "Количество неблагополучных пунктов на единицу территории района - площадь пастбищ" был проведен регрессионный анализ.

В процессе статистического анализа было рассмотрено 12 регрессионных моделей. Результаты анализа показали, что наиболее полно связь между количеством неблагополучных пунктов на единицу территории каждого района РТ и площадью пастбищ в районе описывается полиномом 3-ей степени:

У=0,0014 X3 - 0.0287Х2 +0.1755Х +0,4619,

где У- предполагаемое количество неблагополучных пунктов на единицу территории данного района, Х-площадь пастбищ в рассматриваемом районе, %. Коэффициент детерминации данной модели 11=0,26.

Анализ взаимосвязи количества неблагополучных пунктов на единицу территории каждого района Республики Татарстан и площадью пастбищ в районе, описываемую полиномом третьей степени, показал, что районы, подверженные максимальному риску возникновения вспышек бешенства относятся к Юго-Восточному экономическому региону республики, где процент площади пастбищ от площади района максимален (до 20,4%). Высокому риску возникновения бешенства подвержены районы, относящиеся к Северо-Западному региону республики (до 13,5%).

В связи с вышеизложенным в районах, подверженных максимальному риску возникновения очагов рабической инфекции, органам местного самоуправления, ветеринарным и медицинским службам, а также другим учреждениям и организациям, ответственным за благополучие по заболеваемости бешенством, необходимо систематически принимать меры по недопущению возникновения данного зооноза.

4.ВЫВОДЫ

1.Изучены иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов, выделенных на территории РТ. Изоляты выделялись в культуре клеток НГУК-1 без проявления цитопатического действия. Установлена патогенность изучаемых изолятов для лабораторных животных, при этом индекс инвазивности варьировал от 0,9 до 2,4. Изоляты обладали ярко выраженными преципитирующими и комплементфиксирующими свойствами с активностью в РДП и РДСК 1:2 - 1:8, а также антигенной гомологией вакцинному штамму рабического вируса.

2.Впервые установлена возможность прижизненной диагностики гидрофобии методом иммунофлуоресцентного обнаружения антигена вируса бешенства в отпечатках с роговицы глаза человека, укушенного бешенным животным.

животных и людей, а также глазной жидкости лисиц,

иммунизированных против бешенства. Сравнительное исследование проб сывороток крови в ИФА и РН выявило прямую корреляцию результатов этих методов и преимущество метода ИФА по чувствительности и экспрессное™ перед РН на мышах.

4.Проведен анализ эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по заболеваемости бешенством в РТ за 1997-2005 гг. За указанный период бешенство зарегистрировано в 42 районах и городах республики у 1187 животных и 2 случая гидрофобии. Основными носителями и распространителями бешенства в Татарстане являются лисицы, на долю которых среди заболевших диких животных приходится 96,3%. За последние 10 лет, по сравнению с предыдущим десятилетним периодом, выявлена тенденция роста заболеваемости бешенством среди домашних животных в 3,7 раза.

5.Проведено картографирование неблагополучных по заболеваемости бешенством районов РТ. По напряженности эпизоотической ситуации районы Татарстана разделены на 4 группы. При этом установлены стационарно неблагополучные по бешенству районы в восточной части Закамья, представляющие "ядро" природных очагов в РТ.

6.На основании проведенного математического анализа влияния биотических и абиотических факторов на заболеваемость бешенством животных в РТ установлена значимая (Р<0,05) сильная корреляция заболеваемости с численностью лисиц (г=0,55) и урожайностью зерновых (г=0,5), а также обратная корреляция с численностью мышевидных грызунов (г=-0,38) и солнечной активностью (г = -0,43). Разработана прогностическая модель энзоотии бешенства в РТ.

7.Установлена прямая корреляция между количеством неблагополучных по заболеваемости бешенством пунктов и площадью пастбищ в конкретных районах РТ (г=0,34; Р<0,05), определяемая регрессионной прогностической моделью полинома 3-ей степени.

5.ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты проведенных исследований вошли в утвержденные в установленном порядке:

- Республиканский "Комплексный план мероприятий по профилактике заболевания бешенством в Республике Татарстан на 2003-2007 гг.";

- "Наставление по применению набора препаратов для выявления антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства методом иммуноферментного анализа";

- Методическое руководство "Эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством".

6. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Савицкая, Т.А. Прижизненная диагностика гидрофобии /H.A. Хис-матуллина, Т.А.Савицкая, Р.В.Тимиргапеев и др.// Тр. Междунар. научно-практич. конф., посвящ. 45-летию ВНИИВВиМ «Ветеринарные и медицинские аспекты зооангропонозов», 24-26 сентября, - Покров, 2003.- Ч.1.- С.157-161.

2. Савицкая, Т.А. Эпизоотолого-эпидемиологический надзор и прогноз бешенства в Республике Татарстан /Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, А.З.Равилов, Т.А.Савицкая и др.// Там же.- Ч.1.- С.107-114.

3. Савицкая, Т.А. Взаимосвязь заболеваемости бешенством с некоторыми биотическими и абиотическими факторами /Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, А.З.Равилов, И.Д.Ситдикова, О.И.Ишуткина, Н.А.Сахибуллин, Т.А.Савицкая и др.// Ветеринарный врач. - 2003. - №4 (16) С. 33-36.

4. Савицкая, Т.А. Иммунологический мониторинг бешенства /Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, С.Р.Янбарисова, Т.А.Савицкая// Ветеринарный врач.-Казань, 2004,- №1 (17).-С. 45-53.

5. Савицкая, Т.А. Идентификация и изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства /Н.А.Хисматуллина, М.М.Каримов, Т.А.Савицкая и др.// Ученые записки КГАВМ.- 2004,- Т.178. -С. 156-162.

6. Савицкая, Т.А. Разработка и применение иммуноферментной тест -системы для контроля эффективности вакцинопрофипактики бешенства /Н.А.Хисматуллина, Т.А.Савицкая, А.Н.Чернов и др.// Всерос. научно-практич. конф., посвящ. 45-летию ФГНУ ВНИВИ, 14-15 апреля, Казань, 2005. -С.402-409.

7. Савицкая, Т.А. Эпизоотолого-эпидемиологическая обстановка по зоонозным инфекциям в Республике Татарстан /Т.А.Савицкая, М.М.Каримов, Н.А.Хисматуллина// Матер. Междунар. симпозиума "Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний", 28-30 ноября, Казань,

2005- Ч.2.- С.300-303.

8. Савицкая, Т.А. Математическое прогнозирование энзоотий бешенства в Республике Татарстан /Н.А.Хисматуллина, Т.А.Савицкая, И.Д.Ситдикова и др.// Там же. - Ч.2.- С.365-370.

9. Savitskya, Т.А. Prognostic modeling of rabies epizootics in Tatarstan accoding to biotic and abiotic factors /N.A.Khismatullina, T.A. Savitskya, I.D.Sitdikova et al.// First International Conference on "Rabies in Europe".- Kiev (Ukraine), 15-18 June 2005. - P. 23-24.

10 Savitskya, T.A. Elaboration of an immuno - enzime assay test system for control of rabies vaccinoprofilaxis efficacy /N.A.Khismatullina, T.A.Savitskya, A.N.Chernov et al.// First International Conference on " Rabies in Europe".- Kiev (Ukraine), 15-18 June 2005. - P. 70.

На правах рукописи

САВИЦКАЯ ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА

03.00.07 - микробиология

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Казань-2007

Подписано в печать 28 03 07 г Сдано в набор . 27 03 07 г Заказ № .35 Формат 60x84/16. Гарнитура Times New Roman Усл. печ л 1,2. Бумага офсетная Способ печати - оперативный

Тираж 100 экз Отпечатано с оригинала-макета в типографии ФГУ «ФЦТРБ - ВНИВИ»

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Савицкая, Татьяна Александровна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1 .Распространение и источники вируса бешенства.

1.2.Биологические свойства возбудителя бешенства.

1.3 .Методы диагностики и эпизоотологического мониторинга бешенства.

1 АПрофилактика и меры борьбы с бешенством.

2. Собственные исследования.

2.1 .Материалы и методы исследований.

2.1.1 .Материалы исследований.

2.1.2.Методы исследований.

3. Результаты собственных исследований.

3.1.Идентификация и изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Татарстан.

3.2.Разработка и применение иммуноферментной тест-системы для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства.

3.3. Анализ ситуации, мер борьбы с бешенством и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за ним в Республике Татарстан.

4. Обсуждение результатов собственных исследований.

Выводы.

Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение иммунобиологических свойств изолятов рабического вируса и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством в Республике Татарстан"

Актуальность темы. Несмотря на определенные достижения в изучении бешенства, борьба с этим зоонозом продолжает оставаться важной проблемой ветеринарии и медицины.

Научно обоснованные противоэпизоотические и противоэпидемические мероприятия, по данным ряда авторов (Хисматуллина Н.А. и соавт., 1995; Авилов B.C. и соавт. 1998; Иванов А.В. и соавт., 2005) должны основываться на изучении особенностей краевой эпизоотологии, прогнозировании ситуации по этому зоонозу, своевременном выявлении возбудителя бешенства и изучении его биологических свойств, а также контроле иммунного состоянием животных и людей, вакцинированных против бешенства.

В последнее время показана также перспективность использования твердофазного ИФА для обнаружения антител в сыворотке крови людей, привитых антирабическими вакцинами, а также у иммунизированных животных (Сазанова Э.Я. и соавт., 1988; Ботвинкин А.Д. и соавт., 1990; Atanasiu P. et al., 1977; Nicholson К. et al., 1982 и др.).

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов рабического вируса, циркулирующих на территории Республики Татарстан (РТ) и усовершенствовать эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством.

Исходя из поставленной цели, решались следующие задачи:

1. Провести идентификацию и изучить иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов рабического вируса, циркулирующих на территории РТ.

2. Разработать иммуноферментную тест-систему на основе гликопротеина рабического вируса для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства.

3. Изучить эпизоотолого-эпидемиологическую ситуацию по бешенству в Республике Татарстан за период 1997 - 2005 гг.

4. Изучить влияние биотических и абиотических факторов на энзоотию бешенства в РТ для прогнозирования ситуации по данному заболеванию.

Научная новизна. Впервые изучены иммунобиологические свойства эпизоотических изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Республики Татарстан. Установлено антигенное родство их с вакцинным штаммом «Овечий» ГНКИ рабического вируса. Показана возможность применения средств и методов, разработанных в ФГУ «ФЦТРБ - ВНИВИ» на основе поликлональных антител к вакцинному штамму «Овечий» ГНКИ для прижизненной диагностики бешенства.

Впервые разработана и апробирована иммуноферментная тест-система на основе гликопротеина для контроля уровня специфических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства животных и людей.

Проведен ветеринарно-географический анализ распространения бешенства на территории Татарстана за 1997-2005 гг., разработана карта эпизоотологического районирования территории республики. Представлена математическая модель прогнозирования энзоотии бешенства в Республике Татарстан.

Практическая значимость. Результаты проведенных исследований вошли в «Наставление по применению набора препаратов для выявления антирабических антител в сыворотках крови вакцинированных против бешенства методом иммуноферментного анализа» (от 21.11.2003г.) и Методическое руководство «Эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством» (от 4.07.2006 г.), утвержденные в установленном порядке.

Апробация результатов исследований. Основные положения диссертации доложены на: 1) Ежегодных отчетных научных сессиях ФГУ «ВНИВИ-ФЦТРБ» по итогам НИР а также ежегодных семинарах-совещаниях с врачами хирургами и эпидемиологами районов и городов Республики Татарстан за 2002-2006 гг.; 2) Международной научно-практической конференции, посвященной 45-летию создания ВНИИВВиМ «Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов» (Покров, 2003); 3) Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 45-летию ВНИВИ (Казань, 2005); 4) Международном симпозиуме «Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний» (Казань, 2005); 5) Первой международной конференции «Бешенство в Европе» (Киев, 2005).

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ.

Основные положения диссертации, выдвигаемые на защиту: -выделение и идентификация эпизоотических изолятов возбудителя бешенства, циркулирующих на территории РТ, изучение их иммунобиологических свойств и соответствия вакцинному штамму;

-характеристика эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по заболеваемости бешенством в Татарстане за 1997-2005 гг. и районирование территории республики по степени распространения заболевания;

-усовершенствование мероприятий по эпизоотолого-эпидеми-ологическому надзору за бешенством.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 163 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов собственных исследований, выводы, практические предложения, библиографический список использованной литературы (всего 240 источников, в том числе 68 иностранных) и приложение. Диссертация иллюстрирована 23 таблицами и 9 рисунками.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Савицкая, Татьяна Александровна

ВЫВОДЫ

3.Разработана и апробирована иммуноферментная тест-система с применением гликопротеина вируса бешенства, штамм "Овечий" ГНКИ, обеспечивающая выявление специфических антител в сыворотках крови животных и людей, а также глазной жидкости лисиц, иммунизированных против бешенства. Сравнительное исследование проб сывороток крови в

ИФА и РН выявило прямую корреляцию результатов этих методов и преимущество метода ИФА по чувствительности и экспрессности перед РН на мышах.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Результаты проведенных исследований вошли в утвержденные в установленном порядке:

Республиканский "Комплексный план мероприятий по профилактике заболевания бешенством в Республике Татарстан на 2003-2007 гг.";

- Методическое руководство "Эпизоотолого-эпидемиологический надзор за бешенством".

Издана Памятка о профилактике бешенства для охотников (1000 экз.), одобренная Управлением Роспотребнадзора по РТ

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Савицкая, Татьяна Александровна, Казань

1. Авилов, В.М. Эпизоотическое состояние и эффективность проводимых мероприятий против бешенства животных в России /В.М.Авилов, А.А.Гусев, А.В.Савин // Ветеринария. 2002. - № 6. - С.З - 6.

2. Авилов, B.C. Актуальные проблемы профилактики особо опасных инфекций животных /В.С.Авилов, В.А.Седов// Ветеринария. 1994. -№ 6. -С. 3-6.

3. Авилов, B.C. Необходим учет новых особенностей эпизоотологии бешенства /В.С.Авилов, В.А.Седов, С.А.Коломыцев, В.А.Ведерников, П.Н.Пыталев, А.М.Гулюкин, Г.В.Хакин// Ветеринария. 1998. -№ 6. -С. 3-6.

4. Адамович, В.Л. Ландшафтно-экологические предпосылки к существованию природных очагов рабической инфекции /В.Л.Адамович// Зоологический журнал. 1978. - Т. 57.- № 2. - С. 260-271.

5. Адамович, В.Л. Природа и охота. Бешеные волки /В.Л.Адамович, Д.И.Бибиков, И.Г.Ротси/ Зоологический журнал. 1995.-№ 2-3. - С. 72-74.

6. Андерсонс, З.Э. Опыт районирования административной территории по риску возникновения бешенства животных /З.Э.Андерсонс// Тез. докл. Всесоюз. науч. конф. по проблемам зоонозных инфекций Казань, 1983. - С. 32.

7. Анина-Радченко, Н.Д. Бешенство и борьба с ним /Н.Д.Анина-Радченко// Кишинев: Штиинца -1979. - С. 98.

8. Анина-Радченко, Н.Д. К вопросу о применении реакции связывания комплемента для диагностики бешенства /Н.Д.Анина-Радченко// Симпозиумпо бешенству. Тез. докл. ин-та полиомиелита и вирус, энцефалитов АМН СССР.-М., 1972-С.123-124.

9. Ю.Бакулов, И.А. Новые проблемы эпизоотологии /И.А.Бакулов// Матер, междунар. научно-практ. конф., посвященной 40-летию ВНИИВВиМ.-Покров, 1998.-С. 135-138.

10. П.Бакулов, И.А. Руководство по общей эпизоотологии /И.А.Бакулов, А.Д.Третьяков// М.: Колос. -1979. - 424 с.

11. Бакулов, И.А. Рекомендации по методике эпизоотологического исследования /И.А.Бакулов, Г.Г.Юрков, А.П.Песковацков, В.А.Ведерников// -Покров, 1975 -С.75.

12. Барановская, С.А. Экспериментальное бешенство белых мышей /С.А.Барановская, Н.М.Балаева//Архив биологических наук -1936. В. 41. -№ 1.-С. 157-163.

13. М.Бегель, К. Особенности распространения эпидемии бешенства среди диких животных в Европе /К. Бегель// Бюл. Всемир. организ. здравоохр. 1977. - Т. 54. - № 4 - С. 972-987.

14. Белоусов, В.И. О совершенствовании диагностической работы в ветеринарных лабораториях России /В.И. Белоусов// Матер, междунар. научно-практич. конф., посвященной 40-летию ВНИИВВиМ. Покров, 1998 -С. 13-14.

15. Бойко, А.А. Создание иммуноферментных препаратов /А.А. Бойко// В кн.: Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов. Тез. докл. третьей Всесоюз. конф. -М., 1987-С.201-202.

16. Ботвинкин, А.Д. Особенности эпидемиологии гидрофобии и экология вируса бешенства в условиях преобладания очагов природного типа /А.Д.Ботвинкин// Дисс. в форме докл. докт. мед. наук. М., 1992 - С.58.

17. Ботвинкин, А.Д. Современное состояние и эпидемиологическое значение природных очагов бешенства в Западной Сибири /А.Д.Ботвинкин, Л.Я.Грибанова, Г.Н. Сидоров и др.// Природноочаговые болезни человека. -Омск, 1988-С.111-113.

18. Ботвинкин, А.Д. К изучению природной очаговости бешенства в Приморье и Приуралье /А.Д.Ботвинкин, В.П.Савицкий, Г.Н. Сидоров, В.Г.Юдин// Природноочаговые болезни человека. Омск, 1981 - С. 122-130.

19. Ботвинкин, А.Д. Обнаружение антител к вирусу бешенства в сыворотке крови людей с помощью иммуноферментного метода /А.Д.Ботвинкин, М.А.Селимов, Т.Н. Згурская // Вопросы вирусологии. -1986. Т. 31. - № 3. - С.333-334.

20. Ботвинкин, А.Д. Антигенные варианты вируса бешенства, связанные с заболеваниями людей в России и странах ближнего зарубежья /А.Д.Ботвинкин, М.А.Селимов, М.А.Штыкова, В.В.Хозинский// В кн. Современные проблемы рабиологии. М., 1998 - С.34.

21. Ботвинкин, А.Д. Природные очаги бешенства в Российской Федерации /А.Д.Ботвинкин, Г.Н.Сидоров// Иркутск , 1992 - С. 182.

22. Ботвинкин, А.Д. Обнаружение вируса бешенства в головном мозге и слюнных железах животных с помощью иммуноферментного метода /А.Д.Ботвинкин, С.М.Чернов, Л.Я. Грибанова// Вопросы вирусологии. 1987. - № 6 - С. 747-750.

23. Ботвинкин, А.Д. Итоги изучения антигенного разнообразия вируса бешенства на территории бывшего СССР /А.Д.Ботвинкин, И.В.Кузьмин, Н.А.Хисматуллина// Ветеринарная патология 2004. - №3. - С. 117-126

24. Бусыгин, К.Ф. Диагностика бешенства методом флуоресцирующих антител / К.Ф. Бусыгин //Тез. докл. Всесоюз. конф. Казань, 1983 -С. 136.

25. Бусыгин, К.Ф. Люминесцентная диагностика инфекционных болезней животных/К.Ф.Бусыгин//-М.: Колос 1975 - С. 160.

26. Бусыгин, К.Ф. Применение метода диффузионной реакции преципитации в агаре-геле для изучения специфичности иммунных сывороток /К.Ф. Бусыгин// Ученые записки КГВИ 1964. - Т. 90 - С. 144149.

27. Бусыгин, К.Ф. Флуоресцирующие иммуглобулины из иммуноасцитической жидкости белых крыс для диагностики бешенства /К.Ф.Бусыгин, Р.Х.Юсупов// Сб. науч. тр. КВИ.- Казань, 1984 — С. 79-81.

28. Бучнев, К.Н. Специфичность и чувствительность реакции преципитации в агаровом геле при диагностике бешенства /К.Н.Бучнев, А.А.Росляков, Э.В. Ивановский// Труды научно-контрольного института ветеринарных препаратов М., 1968 - Т. 15 - С.30-35.

29. Бучнев, К.Н. Диагностика бешенства с применением реакции преципитации в агаровом геле /К.Н. Бучнев, М.М. Шахматов, В.Л. Титов и др.// Ветеринария. -1963. № 3. - С. 66-70.

30. Бюллетень ВОЗ о распространении заболевания бешенством в Европе. -1996. -№ 4. С. 20-23; - 1995 -№ 4 - С. 19-21.

31. Вагабов, A.M. Вирусы группы бешенства / А.М.Вагабов, И.Ф.Баринский// Вопросы вирусологии. -1979. -№ 5. С.451-457.

32. Ведерников, В.А. К вопросу о прогнозировании эпизоотической ситуации бешенства /В.А.Ведерников, Б.Е.Землянова// В кн.: Современные проблемы зоонозных инфекций. Тез. докл. М., 1981 - С. 183 - 184.

33. Ведерников, В.А. Эпизоотологические основы совершенствования мероприятий по профилактике бешенства /В.А.Ведерников, В.А. Седов// Львов, 1988-С. 71-72.

34. Ведерников, В.А. Бешенство животных /В.А.Ведерников, В.А. Седов, Э.В.Ивановский// М.: Колос. - 1974 - С.112.

35. Ведерников, В.А. Бешенство животных в Российской Федерации /В.А.Ведерников, И.В.Балдина, А.А.Шабейкин, А.М.Гулюкин, А.А.Харкевич, М.В.Шабейкина// Ветеринарная патология. 2002. - №1. - С. 52-58.

36. Воллер, А. Иммуноферментные реакции в диагностической медицине. Теория и практика /А.Воллер, Д.Бидуэлл, Анн. Бартлет// Бюллетень ВОЗ. 1977. - Т. 53. - № 1 - С. 38 - 43.

37. Галиуллин, А.К. Оценка противосибиреязвенного иммунитета в иммуноферментном и радиоиммунном анализе /А.К.Галиуллин, В.П.Коксин, К.М.Салмаков// Тез. докл. Республ. научно-производств. конф. Казань, 1992-С. 20.

38. Горбачев, Е.Н. Влияние физикохимических факторов на чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа /Горбачев Е.Н., Вербов В.Н., Артюхов А.И.// Твердофазный иммуноферментный анализ. Л., 1988 - Т. 64 - С. 76 - 80.

39. Грабко, В.И. Рекомбинантный вирус осповакцины, экспрессирующий протективный антиген G рабического вируса /В.И.Грабко,

40. М.А.Селимов, И.И. Фодор и др.// Тез. докл. научн. конф. Современные проблемы рабиологии. М., 1998. - С.33-34.

41. Грибанова, Л.Я. Изменчивость эпизоотической напряженности в природных очагах бешенства, в степи и лесостепи Западной Сибири /Л.Я.Грибанова, Г.Б.Мальков// В кн.: Вопр. природной очаговости болезней. - Алма-Ата, 1978 - С. 107-110.

42. Грибенча, С.В. Современные аспекты биологии и профилактики лиссавирусных инфекций (экспериментальное исследование): Дис. докт. мед. наук.-М., 1993-80 с.

43. Гришок, А.П. Оральная иммунизация лисиц против бешенства живой культуральной вакциной из штамма "Внуково-32" / А.П.Гришок, М.А. Селимов Т.А.Аксенова// В сб.: Актуальные проблемы медицинской вирусологии. М., 1985.-С. 170-172.

44. Гришок, А.П. Эпизоотологический надзор при оральной иммунизации лисиц /А.П. Гришок// Матер. Всесоюз. конф. «Актуальные вопросы вирусологии» Львов, 1988 -С.74 - 75.

45. Джупина, С.И. Эпизоотология бешенства животных в Западной Сибири /С.И.Джупина, С.А.Юрик// Эпизоотология, диагностика, профилактика и меры борьбы с болезнями животных Новосибирск, 1997 -С. 41-42.

46. Егоров, A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа /А.М.Егоров, А.П.Осипов, Б.Б.Дзантиев, Е.М. ГавриловаУ/ М.: Высшая школа.- 1991 -С.351 .

47. Ивановский, Э.В. Специфическая профилактика бешенства животных /Э.В.Ивановский// Проблемы ветеринарной иммунологии. М., 1985 - С.141-143.

48. Ивановский, Э.В. Разработка и усовершенствование вакцин для специфической профилактики бешенства животных /Э.В.Ивановский// Дисс. в форме докл. докт. мед. наук. -М., 1991. С. 11-12.

49. Информационный бюллетень «Бешенство в Российской Федерации в 2000-2005 гг.»/О.С.Хадарцев, Ю.М.Федоров, Н.Я.Жилина и др.// Роспотребнадзор 2006. - 20 с.

50. Ильясова, Г.Х. Применение иммуноферментного анализа для диагностики инфекционных заболеваний животных /Г.Х.Ильясова, Г.П.Новошинов, Р.Х.Юсупов// Сб. трудов КГВИ Казань, 1983 - С. 15-20.

51. Каплан, М.М. Методы лабораторных исследований по бешенству /М.М.Каплан//ВОЗ.-Женева, 1995-С. 13-26.

52. Клюева, Е.В. Иммунофлуоресцентный метод индикации антигена вируса бешенства, выращиваемого in vitro и in vitro /Е.В. Клюева// Автореф. дисс. канд. биол. наук. -М., 1967. 17 с.

53. Клюева, Е.В. Индикация вируса бешенства с помощью метода флуоресцирующих антител /Е.В.Клюева, Е.В.Семенова// В кн.: Актуальные проблемы вирусных инфекций. - М., 1965 - С. 359-361.

54. Клюева, Е.В. О диагностической ценности метода флуоресцирующих антител при бешенстве /Е.В.Клюева, Е.В.Семенова, М.А. Селимов// Вопросы вирусологии. -1966. -№ 3. -С. 278-282.

55. Клюева, Е.В. Ускоренная диагностика бешенства с помощью флуоресцирующих антител /Е.В.Клюева, Е.В.Семенова, М.А.Селимов// В кн.: Вопросы борьбы с бешенством. - М.,1963 -С. 16-17.

56. Коваклова, Л. Твердофазный вариант иммуноферментного анализа к вирусу бешенства в сыворотках людей /Л.Коваклова, М.Ешкенази, Т.Ганчева, В.Вачева//- Acta vinol. -1984. -№ 28. -С. 422-427.

57. Ковалев, Н.А. Выделение вируса бешенства /Ковалев Н.А.// В кн.: Новые методы диагностики зоонозных инфекций Минск, 1982. - С. 47- 69.

58. Ковалев, Н.А. Радиоиммунологический метод определения напряженности антирабического иммунитета /Н.А.Ковалев// Рекомендации МСХ СССР по внедрению достижений науки и передового опыта в производстве. М., 1980 -№ 1. - С. 73-74.

59. Ковалев, Н.А. Иммунофлуоресцентное исследование отпечатков роговицы при бешенстве /Н.А.Ковалев, А.С. Шашенько// Ветеринария. -1970.-№ 9.-С. 44-46.

60. Коломакин, Г.А. О постановке, учете и специфичности реакции преципитации в агаровом геле при диагностике бешенства /Г.А.Коломакин, Г.А.Бельченко, М.М. Смирнова// Лаб. дело. -1970. № 6. - С. 370-372.

61. Коломакин, Г.А. К вопросу серологической диагностики бешенства. /Г.А.Коломакин, М.С. Тимонина// Ветеринария. 1972. - № 5. -С. 105-106.

62. Красильников, В.Р. Прогнозирование активности очагов бешенства по биотическим и климатическим факторам /В.Р.Красильников, С.А.Куролап// ЖМЭИ. -1987. № 2. - С. 38-42.

63. Крупальник, В.П. Бешенство собак в Шри-Ланке и меры борьбы с ним /В.П.Крупальник, Самнат Нагасинг// Актуальные вопросы инфекционных и инвазионных болезней животных. 1995 - С. 130-131.

64. Кузьмин, И.В. Лиссавирус с необычной антигенной структурой, выделенный от летучий мыши на юге Кыргызстана /И.В.Кузьмин,

65. А.Д.Ботвинкин, С.Н.Рыбин, А.В.Баялиев// Вопр. вирусологии. 1992 -№ 5-6.-С. 256-259.

66. Кузьмин, И.В. Р-41 положительный штамм рабического вируса выделен от человека на Севере Красноярского края /И.В.Кузьмин, З.С. Лукашенко// Тез. докл. науч. конф.: Современные проблемы рабиологии. -М., 1998-С. 6-7.

67. Кузьмин, И.В. Эпизоотическая ситуация и перспективы борьбы с бешенством диких животных на юге Западной Сибири /И.В.Кузьмин, Г.Н.Сидоров, А.Д.Ботвинов, Е.И.Рехов// ЖМЭИ 2001- №3 - С.28-34.

68. Мальков, Г.Б. О биологических основах прогноза эпизоотической обстановки в природных очагах бешенства /Г.Б.Мальков, Л.Я.Грибанова// Тез. докл. 10-й Всесоюз. конф. по природ, очаговости болезней. Душанбе, 1979.-Вып. 2.-С. 132-134.

69. Маналов, А.Д. Твердофазные радиоиммунные и иммуноферментные методы для количественного экспресс-анализа в микробиологии /А.Д.Маналов // ЖМЭИ. 1985 - № 4. - С. 100 - 107.

70. Мовсесянц, А.А. Вопросы экстренной профилактики бешенства /А.А.Мовсесянц, Агеенко Г.Б.// Ветеринарная патология. 2002.- №1. - С. 48-51.

71. Недосеков, В.В. Разработка и усовершенствование средств и методов оценки эффективности вакцин против бешенства /В.В.Недосеков// Автореф. дис. канд. вет. наук. Покров, 1998. - 26 с.

72. Недосеков, В.В Изучение влияния способа и локализации места введения антигена на формирование антирабического иммунитета

73. В.В.Недосеков, И.Ф.Вишняков, К.Н. Груздев// Матер, междун. научно-практ. конф., посвящ. 40-летию ВНИИВВиМ: Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных. -Покров, 1998-С. 120.

74. Недосеков, В.В. Титрование антирабических антител с помощью теста ингибиции фокусов флуоресценции /В.В.Недосеков, И.Ф.Вишняков, В.И.Жестерев и др.// Ветеринария 1998 - № 7- С.28-30.

75. Павлов, М.П. Волк реально опасен в очагах бешенства на Вятской земле /М.П. Павлов// Матер, регион, научн- практ. конф.,посвященной 85-летию первой антирабической прививке в Вятской губернии. Киров, 1999 -С. 38-41.

76. Павловский, В.В. Специфическая профилактика бешенства. /В.В.Павловский, Л.П.Семенова, Э.В.Ивановский// В кн.: Тр. Всесоюз. госуд. научно-контрольного института вет. препаратов. М., 1975 - С. 35-40.

77. Пантелеев, О. А. Непрямой твердофазный метод иммуноферментного анализа, его точность и источники погрешностей /О.А.Пантелеев, Л.И. Ванеев//ЖМЭИ 1986 -№3. - С. 95-99.

78. Пантюшенко, М.С. Использование полимеразной цепной реакции для выявления полевых изолятов вируса бешенства /М.С.Пантюшенко, М.А.Наумкина, В.В.Недосеков и др.// Тез. докл. науч. конф.: Современные проблемы рабиологии. М., 1998 - С. 26-27.

79. Папуниди, К.Х. Иммуноферментный метод для серологической диагностики ботулизма /К.Х. Папуниди, Г.Л. Адгамова// Рациональные методы профилактики, диагностики и терапии незаразных болезней животных: сб. науч. тр. КВИ. Казань, 1993. - С. 94-95.

80. Патраков, Г.Г. Аспекты заболеваемости бешенством в Республике Марий Эл /Г.Г.Патраков, М.П.Семенов, Г.П.Шалаев// Матер. Научно практ. конф., посвящ. 50-летию Центра Госсанэпиднадзора в Республике Марий Эл. - Йошкар-Ола, 1996. - С. 82-84.

81. Перин, П. Совместный анализ эффективности экспериментального набора для ускоренной иммуноферментной диагностики бешенства (УИФДБ) /ПЛерин, Р.Суро// Бюлл. ВОЗ, 1987. Т. 65. - С. 33-37.

82. Пиле, Э.Р. Лиссавирусы /Э.Р. Пилле// Вопросы вирусологии. -1996. -№ 1. С. 2-6.

83. ЮО.Равилов, А.З. Эпизоотическая ситуация и меры борьбы с бешенством в Республике Татарстан /А.З.Равилов, Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов и др.// Ветеринарный врач. 2000. -№ 2. - С. 33-36.

84. Равилов, А.З. К эпизоотологии заразных болезней, распространяемых дикими животными /А.З.Равилов, Р.Х.Юсупов, В.А.Верхолетов, Р.М.Ахметов// В сб.: Болезни и паразиты диких животных. -М., 1992.-С. 27-32.

85. ЮЗ.Савицкая, Т.А. Эпизоотолого-эпидемиологическая обстановка по зоонозным инфекциям в Республике Татарстан /Т.А.Савицкая, М.М.Каримов, Н.А.Хисматуллина// Там же 411.- С.300 - 303.

86. Ю5.Савицкий, В.П. Основные итоги изучения эпидемиологии бешенства в Восточной Сибири и Дальнем Востоке /В.П.Савицкий, Р.А. Канторович, Г.Б.Мальков// В сб.: Природноочаговые болезни человека -Омск, 1982.-С. 99- 107.

87. Юб.Сазанова, Э.Я. Иммуноферментный метод определения уровня антител к вирусу бешенства в сыворотке крупного рогатого скота /Э.Я.Сазанова, Е.В.Маслов, С.В.Кузнецова и др.// Тез. докл. Всесоюзн. конф.по проблемам бешенства. Львов, 1988. - С. 96.

88. Ю7.Сафаров, Р.К. Размножение фиксированного вируса бешенства в культуре ткани и индикация его иммунофлуоресцентным методом.

89. Р.К.Сафаров, Е.В.Клюева// В кн.: Актуальные вопросы ветеринарной вирусологической конференции М., 1966 - Ч. 2. - С.29-30.

90. Ю9.Седов, В.А. Семинар Всемирной организации здравоохранения по борьбе с бешенством диких животных /В.А.Седов, Г.Ф.Коромыслов, А.В.Куликовский// Вестник с.-х. науки. -1991. -№ 4- С. 172-173.

91. Ю.Седов, В.А. Важнейшие инфекции диких парнокопытных животных /В.А.Седов, В.А.Ведерников, С.А.Черниченко// В сб.: Болезни и паразиты диких животных М., 1992. - С. 4-11.

92. Селимов, М.А. Бешенство /М.А. Селимов// М.: Медицина. 1978.-336 с.

93. Селимов, М.А. Современные достижения в области рабиологии /М.А. Селимов// Обзорная информация. М.: ВНИИМИ. - 1987. - В.4. - С. 35-40.

94. ИЗ.Селимов, М.А. Современная эпизоотическая ситуация и перспективы элиминации бешенства /М.А.Селимов// Вопросы вирусологии. -1998.-№ 5.-С. 196- 198.

95. И5.Селимов, М.А. Идентификация штаммов сильватического и арктического бешенства с помощью моноклональных антител /М.А.Селимов, А.Д.Ботвинкин, А.Г. Татаров// Вопросы вирусологии. 1983.-№ 2. - С. 243 -244.

96. Пб.Селимов, М.А. Новые данные о распространении Р—41 положительных штаммов рабического вируса в арктическом и внеарктическом регионах./М.А.Селимов, А.Д.Ботвинкин, В.В.Хозинский и др.// ЖМЭИ. 1994. - № 2.- С.53-56.

97. Селимов, М.А. Применение реакции связывания комплемента (РСК) для индикации вируса бешенства в культуре ткани /М.А.Селимов, Л.И.Калинина, Т.А.Аксенова и др.// В кн.: Вопросы борьбы с бешенством- Т. 9.-М., 1967. -С.70-79.

98. Селимов, М.А. Использование реакции связывания комплемента для индикации вируса бешенства в культуре ткани /М.А. Селимов, Л.И.Калинина, Т.А.Аксенова, В.И.Кубанова // В кн.: Вопросы борьбы с бешенством. М., 1963.-С.14-15.

99. Селимов, М.А. Современные методы лабораторной диагностики бешенства /М.А.Селимов, Е.В.Клюева, Е.В.Семенова// М.: Медицина. -1964.-С.58.

100. Селимов, М.А. К проблеме генно-инженерной антирабической вакцины /М.А.Селимов, И.И.Фодор, В.И.Грабко// Генно-инженерные и синтетические вакцины Пущино, 1990. - С. 64- 70.

101. Сидоров, Г.Н. Пространственно-временное прогнозирование эпизоотий бешенства природного типа в России /Г.Н.Сидоров// Тез. докл. науч. конф.: Современные проблемы рабиологии. М., 1998. - С. 11-12.

102. Сидоров, Г.Н. Прогнозирование бешенства в Западной Сибири и регуляторные факторы эпизоотического процесса /Г.Н.Сидоров, Л.Н.Грибанова, Н.Г.Корсаков и др.// ЖМЭИ . 1990. - № 7. - С. 31-37.

103. Сидоров, Г.Н. Прогнозирование эпизоотий бешенства в Западной Сибири /Г.Н.Сидоров, Н.Г.Корсаков, Е.П.Рехов и др.// Природноочаговые болезни человека. Омск, 1989. - С.97 - 106.

104. Смирнова, М.М. Сравнительная эффективность методов диагностики бешенства /М.М.Смирнова// Автореф. дис. канд. вет. наук. -Фрунзе, 1975.-С.19.

105. Сологуб, Т.В. Выявление антител к вирусу бешенства методом ингибирования твердофазного ИФА /Т.В.Сологуб, В.Н.Никитин, Н.Ф.Вишняков// Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии. Покров, 1992. - Ч. 2 - С. 261 - 262.

106. Субботина, Л.С. Результаты использования метода ELISA при изучении клещевого энцефалита и бешенства /Л.С.Субботина, О.В.Новолохин, А.Д. Ботвинкин, Л.В.Матюхина// ЖМЭИ. 1985. - № 1. - С. 73- 77.

107. Таршис, М.Г. Математические методы в эпизоотологии /М.Г.Таршис, В.М.Константинов// М.: Колос. - 1975. - 174 с.

108. Ш.Таршис, М.Г. Эпизоотологический прогноз и противоэпизоотический план /М.Г.Таршис// М.: Россельхозиздат- 1979112 с.

109. Таршис, М.Г. Бешенство животных /М.Г. Таршис, Н.А.Ковалев, П.П.Кузнецов // Минск.: Ураджай. - 1990. - С. 100 - 104.

110. Татаров, А.Г. Экспресс-диагностика бешенства в линии клеток невриномы Гассерова узла крысы (НГУК-1) /А.Г.Татаров, М.А.Селимов,

111. В.Я.Кармышева, Н.А. Хисматуллина// Тез. докл. Всесоюзн. конф. по проблемам зоонозных инфекций М., 1985 - С. 172 - 173.

112. Татаров, А.Г. Выделение рабического вируса и экспресс-диагностика бешенства в культуре перевиваемых клеток невриномы Гассерова узла крысы /А.Г.Татаров, Н.А.Хисматуллина, М.А.Селимов,

113. B.Я.Кармышева// Вопросы вирусологии. 1987. - № 6. - С. 619 - 621.

114. Топленинова, К. А. Применение непрямого метода флуоресцирующих антител для обнаружения вируса бешенства /К.А.Топленинова// Вопросы вирусологии. 1961. - № 2. - С. 174.

115. Трубина, J1.M. К вопросу о быстрой лабораторной диагностике бешенства /Л.М.Трубина// Лабораторное дело. 1956. - № 2. - С. 21 - 23.

116. Тятигачев, Ш.А. Краевая эпизоотология бешенства и усовершенствование мер борьбы с ним в Республике Башкортостан /Ш.А.Тятигачев// Автореф.дис.канд. вет. наук. Казань, 1998. - 19 с.

117. Тятигачев, Ш.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству животных в Республике Башкортостан /Ш.А.Тятигачев, С.Р.Янбарисова, Р.Х.Юсупов// Матер, научно-произв. конф. по проблемам зоонозных инфекций Казань, 1995 - С. 33.

118. Фоменко, М.В. Порядок и оценка результатов лабораторных исследований при диагностике бешенства /М.В. Фоменко, И.К.Тутов// Вестник ветеринарии. 1997. - № 6. - С. 47 - 50.

119. МО.Хисамутдинов, Ф.Ф. Эпизоотическая ситуация по бешенству в хозяйствах Республики Татарстан /Ф.Ф. Хисамутдинов, Э.Г.Бурганов, Н.А.Хисматуллина, И.А.Курбанова// Тр. Первого съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. Казань, 1996 - С. 117 - 120.

120. Хисамутдинов, Ф.Ф. Новый метод борьбы с природным бешенством /Ф.Ф.Хисамутдинов, Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, Э.Г.Бурганов// Тез. докл. Респуб. научно-производ. конф. Казань, 1996.1. C.52.

121. Хисматуллина, Н.А. Серологический контроль при антирабической вакцинации животных /Н.А. Хисматуллина// Тез. докл. науч. конф.: Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе. М., 1999. - С. 95-96.

122. Хисматуллина, Н.А. Эпизоотолого эпидемиологическая характеристика и надзор за бешенством в Республике Татарстан /Н.А.Хисматуллина, А.З.Равилов, Р.Х.Юсупов и др.// Матер. Второго съезда ветеринарных врачей Республики Татарстан. - Казань, 2000 - С. 56.

123. Хисматуллина, Н.А. Разработка непрямых вариантов иммуноферментного анализа для определения антигена вируса бешенства и специфических антител /Н.А. Хисматуллина, Р.Х.Юсупов// Матер. Всесоюзн. конф. «Актуальные вопросы вирусологии» Львов, 1988. - С. 98.

124. Хисматуллина, Н.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству в Татарстане и внедрение рекомендаций по борьбе с этой инфекцией /Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, А.Н.Чернов и др.// Тез. докл. науч. конф.: Современные проблемырабиологии-М., 1998-С. 14-15.

125. Хисматуллина, Н.А. Иммунологический мониторинг бешенства /Н.А.Хисматуллина, Р.Х.Юсупов, С.Р.Янбарисова, Т.А. Савицкая// Ветеринарный врач.- Казань, 2004г №1 (17).- С. 45-53.

126. Хисматуллина, Н.А. Идентификация и изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства /Н.А.Хисматуллина, М.М.Каримов, Т.А.Савицкая и др.// Ученые записки Казанской государственной ветеринарной академии.- 2004.- Т. 178.-С. 156-162.

127. Хузин, Д.А. Иммуноферментный метод определения антител к возбудителю некробактериоза /Д.А.Хузин, Е.К.Акимов, Н.А.Хисматуллина, В.В.Сабирова// Матер, международ, конф., посвящ. 125- летию академии. -Казань, 1998.-4.1.-С.111-112.

128. Цвиль, JI.A. Состояние антирабической помощи и организация эпиднадзора за бешенством на территории г. Москвы. /Л.А.Цвиль, Л.В.Родина, И.Р.Лебедева// Тез. докл. научн. конф.: Современные проблемы рабиологии М., 1998.-С. 15-16.

129. Цетлин, Е.М Отработка оптимальной схемы учета результатов при применении иммуноферментной тест-системы для определения антигенной активности культуральной антирабической вакцины /Е.М.Цетлин, Р.А. Волкова//Вопросы вирусологии 1996-№ 1.-С. 21-24.

130. Чард, Т. Радиоиммунологические методы /Т.Чард// М.: Мир. -1981.-247 с.

131. Черкасский, Б.Л. Эпидемиология и профилактика бешенства /Б.Л. Черкасский. М.: Медицина - 1985 - 288 с.

132. Черкасский, Б.Л. Эпидемиология и эпизоотология бешенства на территории бывшего СССР /Б.Л.Черкасский, А.Г.Кноп, В.А.Ведерников// ЖМЭИ.- 1995.-№ 1.-С.21 -27.

133. Черкасский Б.Л. Эпидемическая ситуация и меры профилактики бешенства /Б.Л.Черкасский, О.С.Хадарцев, А.А.Мовсесянц// Вет. и мед. аспекты зооантропонозов. Покров, 2003.- Ч. 1.- С.98.

134. Чернов, С.М. Анализ эффективности твердофазного иммуноферментного метода для ускоренной диагностики бешенства В сб.: Природноочаговые болезни человека /С.М.Чернов, А.Д.Ботвинкин, Л.Д.Грибанова и др.// - Омск, 1989. - С. 90.

135. Шафикова, Р.А. Применение реакции энзим-меченных антител при диагностике хламидиозного аборта овец /Р.А.Шафикова, Х.З.Гаффаров, А.З. Равилов// Матер. Всесоюзн. конф. «Актуальные вопросы вирусологии»-Львов, 1988.-С. 107-108.

136. Шесточенко, М.А. Люминесцентный анализ в ветеринарии /М.А.Шесточенко, Н.А Кузьмин//- М.: Колос. 1979. - С. 195 - 203.

137. Шубладзе, А.К. Электронно-микроскопическое изучение вируса острого энцефаломиелита человека /А.К.Шубладзе, Бочаров А.Ф., Бычкова Е.Н. и др.// Вопросы вирусологии. 1974. -№ 2. - С. 201-203.

138. Шубладзе, А.К. Изучение антигенного родства различных штаммов вирусов группы бешенства /А.К.Шубладзе, Е.Н.Бычков// Вопросы вирусологии. 1975. - № 6. - С. 571- 574.

139. Шустерман, С.З. О случаях нападения бешеных волков в Витебской области /С.З.Шустерман// Совремеи. пробл. профилактики зоонозных болезней и пути их решения. Минск. - 1987 - С. 332 - 333.

140. Юсупов, Р.Х. Эпизоотическая характеристика и динамика заболеваемости животных бешенством в Татарстане /Р.Х.Юсупов, Н.А.Хисматуллина//- В сб.: Болезни и паразиты диких животных. М., 1992. -С. 84-88.

141. Янбарисова, С.Р. Усовершенствование лабораторных методов диагностики бешенства животных и идентификация возбудителя болезни /С.Р.Янбарисова// Автореф. дис. канд. вет. наук. Казань, 1998. - 19 с.

142. Amano, Т. Neurotransmitter syntesis by neuroblastoma clons /T.Amano, E.Rioheison, M.Nirenberg // Proc. Nath. Akad. Sci. USA. 1972. - V. 69.-P. 258-263.

143. Atanasiu, P. Animal inoculation and the Negri body / P.Atanasiu // The Natural History of rabies T.l. Baer G.M. Ed - Academic Press - New York, 1975.-P.373.

144. Atanasiu, P. Epreuve immunoenzymatique pour la detection rapide des anticorpus antirabiques /P.Atanasiu, V.Savy, P.Perrin// Ann. Microbiol. Inst. Pasteur. 1977. - V. 128A. - P. 489^198.

145. Aubert, M. Le Rhin est-il une barriere efficace contre la rage /M.Aubert, E. Masson// Bull. off. Nat. Chasse. 1993. - V. 177. - P. 30-32.

146. Baer, G.M. The pathogenesis of street rabies virus in rats /G.M.Baer, T.R.Shanthaveerapa, G. Bourne//Bull. WHO. 1968. - V. 38. -119.

147. Barrat, I. Larage animal en France en 1988 bilan die laboratoire d etudes sur la rage et la pathologie des animaux sauvages a nancy-malze-Ville /I.Barrat, M. Aubert // Rev. Med veter. - 1990. - V. 141. - № 5. - P. 369-373.

148. Bell, J.F. The Natural History of Rabies /J.F.Bell//- New York, 1975.-V. 1.-P. 331-353.

149. Bourhy, H.Ecology and evolution of rabies in Europe /H.Bourhy, B.Kissi, L.Audry//J.Gen.Virol. -1999.- Vol.80/- №10. P.2545-2557.

150. Breakfield, X. 0. Neurobiasmitter metabolism in murin neuroblastoma cells /X. 0. Breakfield// Life Sci. 1976. - V. 18. - P. 267- 278.

151. Brochier, B. Elimination of fox rabies from Belgium using a recombinant vaccinia rabies vaccine: an update /B.Brochier, F.Costy, P.- P. Pastoret// Veter. Microbiol. - 1995. - V. 46. - № 1/3 - P.269 - 279.

152. Casey, G. A. Raccon rabies in eastern Canada (1963 to 1994) : A retrospective report /G. A.Casey, A. I.Wandeler, K.M. Charlton// Canad. veter. J. -1996. V. 37. - № 6 . - P. 347 - 348.

153. Cleaveland, S. Maintenance of a microparasite infecting several host species. Rabies in the Serengeti /S.Cleaveland, C. Dye// Parasitology. 1995. - V. III.-P. 33-47.

154. Cortes, Valdson de Angelis. Abrigos diurnos e infecca rabica em morcogos de Botuoatu, Sao Paulo Brasil /Valdson de Angelis Cortes, Sonza Luiz

155. Carlos de, Uieda Wilson, Fig-neirecto Antonio Carlos// Vet e Zootecn. 1994. -V. 6.-P. 179-186

156. Crawford-Miksza, L.K. Molecular epidemiology of enzootic rabies in California /L.K. Crawford-Miksza, D.A. Wadford, D.P. Schnurt// J. Clin. Virol. -1999.-V. 14,N. 3. P. 207-219.

157. David, J.M. Computer simulation model of epi-en-zootic disease of vulpene rabias /J.M. David// Ecological Modelling. 1982. - V. 15. - P. 107-125.

158. Dietzschold, B. Techniques for the purification of rabies virus, its subunits and recombinant products /В. Dietzschol // In: Kaplan M.M., Koprowski H., Meslin F.-X. Laboratory techniques in rabies Eds. WHO. - Geneva, 1996. -P. 175-179.

159. Donald, L. Rabies virus glicoprotein expressed in a vacinia virus recombinant vaccine cross protects mise against unique genetic variants of rabies viruses isolated world-wide /L.Donald, I.Smith, C.Larry//1. Cell Biochem. 1995. - V.19a. -P. 312.

160. Durove, A. Orale immunisierung freilebender Rotfuchse gegen Tolewut inder Slowakei im lahre 1994 /A.Durove, S.Svreek, I. Sokol, et al.// Wien. Tierarztl. Monatsschr. 1996. -V. 83. - № 5. - P. 158-163.

161. Engvall, E. Enzyime-1 inked immunosorbent assay (ELISA). III. Quantitation of specific antibodies by enzyme-labelled anti-immunoglobulin in antigen coated tubes /E.Engvall, P.Perlmann// J. Immunol. 1972. - V. 109. - P. 129-135.

162. Engvall, E. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Quantitative assay of immunoglobulin /Е. Engvall, P. Perlmann// Immunochemistiy. 1971. -V. 8. - P. 871-874.

163. Francki, R.I.B. Classification and Nomenclature of viruses /R.I.B. Francki, et al.//-Wien, 1991.

164. Glick, M.C. Glicopeptides from membranes of neuroblastoma cells /M.C.Glick, Y.Kimhi, U.Z. Littaner// Proc. nath. Acad. Sci. USA. - 1973. - V. 70. - surface P. 1682-1687.

165. Grasset, N. Etude de la diffusion, en Gelose D'Anti-genes de La Rage fixe obtemis sur culture de Tissues /N.Grasset, P. Atanasiu// Ann. Inst. Past. -1961. —V. 1015.-P. 639-647.

166. Jorgenson, R.D. Experimental rabies in a great horned owl. /R.D.Jorgenson, P.M. Gough, D.L.Graham//J. Wildl. Dis. 1976. -V.12. -P.444.

167. Kantorovich, R.A. Natural foci of a rabies-like infection in the far north. /R.A.Kantorovich// J. Hyg. Epidemiol. Miorobiol. Immunol. 1964. - V. 7. -P. 100.

168. Kantorovich, R.A. Experimental investigations into rage and rabies of polar foxes. Natural hosts of the infection. /R.A.Kantorovich, G.V.Kanovalov, G.I.Buzinov, V.R. Riutova// Acta Virol. Praque. 1963. - V. 7. - P. 554.

169. Kat, P.W. Rabies and African wild dogs in Kenya. /P.W.Kat, K. A.Alexander, I.S.Smith, L.Munson// Proc. Ray. Soc. London B. 1995. - V. 262. -№ 1364.-P. 229-233.

170. Kissi, B. Genetic polymorphism in the rabies virus nucleoprotein gene /B.Kissi, N. Tordo, H.Borhy // Virology. 1995. - V. 209. - № 2. - P. 526-537.

171. Komarov, A. Diagnosis of rabies in dogs comparing smears, biological tests and fluorescent Antibody staining /A.Komarov, R.A.Goldwasser// WHO Expert Committee on Rabies Geneva. -1959 - V.19. - P. 107.

172. Krebs, J. W. Rabies surveillance in the United States during 1994. /Krebs J. W., Strine T. W., Smith J. S. et al.// J. Am. Veter. Med. Assn. 1995. -V. 207.-№ 12.-P. 1562- 1575.

173. Kuwert, E. The complement fixation test /E.Kuwert// In: Laboratory Techniques in Rabies WHO. - Geneva. -1973. - P. 124.

174. Masson, E. Les consequences du ramassage par des personnes d appats vaccinaux antirabiques aux renards et distribues par helicoptere en France /E.Masson, P.Rollin, M. Aubert// Ann. med. vet. 1993. - V. 137. - № 4. - P. 275-279.

175. Meredith, C.D. Rabies confirmed in Megachiroptera in South Africa /C.D. Meredith// Rabies Information Exchange. -1980. -V.3. -P.26.

176. Muller, T. Wechselwinkund von oraler Tollwut immunisierund und Fuchs poputions dinamik /T.Muller, H.Schluter, S. Kautzsch// Tierarztl. Urnsch -1995. -V. 50. -№ 1. P. 743-747.

177. Nadin-Davis, S.A. Identification of regional variants of the Canadian province of Ontario. /S.A.Nadin-Davis, G.A. Casey, A. Wandeler// Gen. Virol. -1993. -V. 74. -№ 5. -P. 829-837.

178. Nandi, S. Recent advancement in the diagnosis of rabies /S.Nandi, S.K. Maiti//Asian Livestook.- 1994. -V. 19. -№ II. P.150 - 152.

179. O.Nicholson, K.G. Enzyme-linked immunosorbent Assay: A Reaped Reproducible. Test for the Measurement of Rabies Antibody /K.G.Nicholson, H.Prestage// J. Med. Virol. 1982. - P. 43-49.

180. Piegorsch, W.W. Non-Hierarhical logistic models and case-only designs for assessing susceptibility in population based case - control studies /W.W.Piegorsch, C.R.Weinberg, J.A.Taylor// Statistics in Medicine. - 1994. - V. 13.-P. 153-162.

181. Portnoi, D. Use of Neuroblastoma cells (MNB) for the isolation of street rabies virus from field speciment /D.Portnoi, S.Favre, E.P.Sureau// Department of Health. SC. Human Services Pullic Health Service Center for Disease Control. 1982. - P. 35-36.

182. Rohman, A. Rabies prevention and control in India from a veterinary perspective /A.Rohman// International Rabies Meeting: Abstracts. Paris, 1997. -P. 504.

183. Rudd, R.G. Tissue culture technique for routine isolation of street strain rabies virus /R.G.Rudd, C.V.Trimarchi, M.K.Abelseth// J. Clin. Microbiol. 1980- 12.-590-593.

184. Rupprecht, C.T. Current issues in rabies prevention in the United States /C.T.Rupprecht, J.S.Smith, J. Krebs et al.// Publ. Health Rep. 1996. - V. 3. -P. 400^07.

185. Sacramento, D. PCR technigue as an alternative method for diagnosis and molecular epidemiology of rabies virus /D.Sacramento, H.Bourhy, N.Tordo// Molecular and cellular probes. 1991, 5: 229-240.

186. Schluter, H. Tollwutbekampfung in Deutssfolgerungen aus uber 10 jahriger bekampfung /H.Schluter, T.Muller// Tierarztl. Umsch. 1995. - V.50. -№11.-S. 748-758.

187. Schneider, L.G. The cornea test: a new method for the intravitum diagnosis of rabies /L.G.Schneider// Zentralbl. Veterinarmed. 1969. - V.16 - P. 24.

188. Schneider, L.G. Pathogenesis of rabies and rabies-like virusis /L.G.Schneider, U.Schoop// Ann. Inst. Pasteur. - 1972. - V. 123. - 4. P. 469476.

189. Selimov, M. The Rabies Related Yuli virus and Identification with Panel of the Antinucleo capsid Monoclonal Antibodies (NC MKAb ) /M.Selimov, A.Tatarov, A.Botvinkin et al.// J. Rabies Information Exchange. - June. - 1987. -P. 5-15.

190. Selimov, M.A. New strains of rabies-related Viruses isolated from bats in the Ukraine /M.A.Selimov, A.M.Smeknov, L.A.Antonova et al.// Acta virol. -1991.-V. 35.-P. 326-231.

191. Siebel, H. Tollwutein europaisches problem /H.Siebel// Kleintier -Prax. 1969. -V. 143. - P. 70-76.

192. Smith, A. Alsolation and assay of rabies serogroup viruses in CER cells /A.Smith, G.H.Tignor, K.Mifune, T.Motchaski// lntervirology. 1974. - V. 8. -P. 92-99.

193. Smith, A. Isolation of field rabies virus strains in CER and murine neuroblastoma cell cultures /A.L.Smith, G.H.Tignor, R.W.Emmons, J.D.Woodie// Intervirology. 1978. - V. 9. - N 6. - P. 359-361.

194. Smith, A. Isolation and assay of rabies serogroup viruses in CER cells. /A.L.Smith, G.H.Tignor, K.Mifune, T.Motohaski// Intervirology. 1977. - V. 8. -P 92-99.

195. Sureu, P. Epidemiologic analysis of antigenic variations of street rabies virus. Detection by monoclonal antibodies /P.Sureu, P.Rollin, T.J, Wiktor//Amer. J. Epidem. 1983. -V. 117. -№ 5. - P. 605-609.

196. Thraenhart, 0. Aktueller Stand der Epidemioloqie, Diagnostik und Pravention der Tollwut. /0. Thraenhart// Prakt. Tierarzt. 1996. - V. 77. - № 5. -S. 433-442.

197. Tierkel, E.S. Reaped microscopic examination for Negri bodies and preparation of specimens for biological test /E.S.Tierkel// In: Laboratory Techniques in Rabies. Kaplan M.M. and Koprowski H. Eds. WHO. - Zeneva. -1973.-P.41.

198. Tsiang, H. Current concept in rabies /Tsiang H.// Adv. Virus. Res. -1995.-V. 2. P. 2-4.

199. Webster, L. Early diagnosis of rabies by mouse inoculation. Measurement of humeral immunity to rabies by mouse protection test /L.T.Webster, I.R.Dawson// Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1935. - V. 32. - P. 570.

200. Webster, W.A. Miyor antigenic groups of rabies Virus in Canada determined by anty-nuoleocapsid monoclonal antibodies /W.A.Webster, A.Caseyc, K.M.Charlton// Сотр. Immunol, monoclonal antibodies. Microbiol, infect. Dis. 1986. - V. 9. - № 1. - P. 59-69.

201. Weemen, B.K. Immunoassay using antigen enzyme conjugate /B.K.Weemen, A.H.W.H. Schnurs// TEES letters.- 1971. -V.15.-P.232-236.

202. Weemen, S.K.V. ELISA: Nighlights of the present state of the art. /S.K.V. Weemen//J.Virol. Meth. -1985. -V.10 -№4. -P. 371-378.

203. Wiktor, T.J. Radioimmunoassay procedure for rabies binding antibodies /T.J.Wiktor, H.Kaprowsky, P.Dixen// J. Immunol. - 1972. - № 109. -P. 404-407.

204. Wiktor, T.J. Monoclonal antibodies against rabies virus produced by somatic cell hybridization: detection of antigenic variants /T.J.Wiktor, H.Koprowski// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978. V. 75. - P. 3938-3942.

205. Wiktor, T.J. Use of monoclonal antibodies in diagnosis of rabies virus infection and differentiation of rabies and rabies-related viruses /T.J.Wiktor, A.Flamand, H.Koprowski// J. Virol. Meth. 1980. - V. 1. - № 1. - P. 33-46.

206. Wiktor, T.J. Antigenic variations of rabies virus "Replication Negative Strand Viruses Proc. 4th Int. Symp., Saint Thomas. US Virgin Islands /T.J.Wiktor// Oct. 26- Now. 1. - 1980. - New York e.a. - 1981. - P. 943-945.

207. Yolken, R.H. Investigation of enzyme immunoassay time courses development of rapid assay systems /R.H.Yolken, P.J.Leister// J. Clin. Microbiol. -1981,-V. 13,-№4.-P. 738-241.

208. Zimmermann, Th. Zur Brauchbarkeit des Cornea-Testes bei der Tollwutdiagnose /Th. Zimmermann// Berl. Munch, tierarztl. Eschr. 1971. -V. 84. -N9.-P. 172-174.

Информация о работе

Савицкая, Татьяна Александровна
кандидата биологических наук
Казань, 2007
ВАК 03.00.07

Диссертация

Изучение иммунобиологических свойств изолятов рабического вируса и совершенствование эпизоотолого-эпидемиологического надзора за бешенством в Республике Татарстан - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы