Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Изучение факторов, повышающих резистентность клеток к вирусу иммунодефицита человека

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Киселева, Ирина Алексеевна

Введение

Часть 1.

Глава 1.

Глава 2.

Глава 3.

Глава 4.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Общие сведения о проблеме СПИДа Характеристика вируса иммунодефицита человека

Патогенез ВИЧ-инфекции Терапия ВИЧ-инфекции и СПИДа

Часть 2 . СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 1. Материалы и ^ет.оды . ( Выделение й .^изучение" изолятов ВИЧ

Глава

2.1. Изучение факторов, повышающих эффективность изоляции ВИЧ

2.2. Изучение биологических свойств изолятов ВИЧ

2.3. Изучение генетических свойств изолятов ВИЧ

Глава 3. Исследование факторов, влияющих на эффективность консервации и деконсервации клеток

3.1. Изучение криопротекторов и режимов криоконсервации

3.2. Изучение факторов, повышающих жизнеспособность клеток в процессе деконсервации

3.2.1. Изучение влияния препарата деринат на процесс деконсервации клеток

3.2.2. Изучение влияния аппликатора ММ на процесс деконсервации клеток

3.2.2.1. Изучение действия аппликатора ММ на перевиваемую клеточную линию МТ

3.2.2.2. Изучение действия аппликатора ММ на ВИЧ-инфицированные лимфоциты периферической крови

3.2.2.3. Изучение действия аппликатора ММ на клеточные культуры при изменении условий внешней среды

Глава 4. Изучение противовирусной активности препаратов

4.1. Исследование противовирусного действия пептида-Т в отношении ВИЧ

4.2. Исследование противовирусной активности препарата нитрата галлия

4.3. Исследование противовирусной активности препарата гамма-плант

4.4. Исследование комбинированного применения препаратов активных в отношении ВИЧ

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ВЫВОДЫ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение факторов, повышающих резистентность клеток к вирусу иммунодефицита человека"

Актуальность проблемы.

Проблема ВИЧ-инфекции и СПИДа является одной из наиболее драматичных проблем медицины и человечества наших дней. Количество ВИЧ-инфицированных лиц в мире уже исчисляется десятками миллионов (2 5).Болезнь, к нашему огромному сожалению, становится все более актуальной и для нашей страны, где началось резкое увеличение числа людей, зараженных вирусом иммунодефицита человека. На конец 2000 года в России зарегистрировано 68511 ВИЧ-инфицированных лиц.

Лидирующее место заняли жители крупнейших городов страны: Москвы и Московской области, Санкт-Петербурга, Екатеринбурга, Калининграда и других. Только в Москве число зараженных за 1999 год выросло в 12,3 раза (с 437 до 5336 человек). Однако, это только вершина «айсберга», т.к. по данным ШАЮБ на одного зарегистрированного ВИЧ-инфицированного человека приходится 5-7 незарегистрированных (34).

За короткий срок были созданы новые препараты активные в отношении ВИЧ, однако сложная природа вируса, позволяет ему различными способами адаптироваться к действию лекарств. Появляются резистентные штаммы вирусов, что требует увеличения доз препаратов, а это, соответственно, увеличивает их токсичность для организма человека. Немаловажным 5 моментом является цена и доступность препаратов для широких слоев населения. В настоящее время для подавляющего большинства больных (более 90%) во всем мире препараты Западных фармацевтических фирм совершенно недоступны.

В связи с этим актуальным является проведение исследований по изучению подходов к повышению резистентности клеток человека к заражению ВИЧ.

Настоящая работа выполнена в плане научно-исследовательских разработок НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН и является частью заданий, выполненных в рамках государственной научно-технической программы «Борьба с наиболее распространенными болезнями» по проблеме СПИД (темы № 16, 116, 3 65, 556).

Цель и задачи исследования

Целью настоящего исследования было изучение факторов, повышающих резистентность клеток к вирусу иммунодефицита человека. В соответствии с этим были поставлены следующие задачи:

1. Выделение изолятов ВИЧ от ВИЧ-инфицированных лиц и больных СПИДом из различных очагов на территории России.

2. Сравнительная молекулярно-биологическая характеристика изолятов ВИЧ. 6

3. Определение оптимального режима консервации полученных изолятов ВИЧ и клеток человека, инфицированных ВИЧ и чувствительных к инфицированию ВИЧ.

4. Исследование противовирусной активности ряда препаратов в отношении различных штаммов ВИЧ.

Научная новизна работы:

Впервые изучено действие in vitro новой группы антивирусных средств повышающих резистентность клеточной системы к вирусной инфекции, а именно: гамма-планта и нитрата галлия.

Показан аддитивный эффект комбинированного действия противовирусных препаратов различной природы и различного механизма действия, таких как ферровир, ретровир и ронколейкин.

Практическая ценность работы

По материалам диссертационной работы подготовлены: «Каталог перевиваемых клеточных линий, чувствительных к инфицированию вирусами иммунодефицита человека» (Д.Н.Носик, М.Н.Корнеева, Б.В.Гущин, Р.В.Свирска, И.А.Киселева и др.).

Утвержден Ученым Советом НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН 2 0.11.1989.

Методические рекомендации по выделению вирусов иммунодефицита человека от ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом» (Д.Н.Носик, Л.Б.Калнина, А.Ю.Злобин,

Н.В.Кузнецова, И.А.Киселева, М.С.Петрова, Е.А.Гущина и др. ) . Утверждены Ученым Советом НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН 17.06.1991, апробированы и используются в Институте микробиологии им.А.Кирхенштейна АН Латвии, в Республиканском Центре особоопасных вирусных инфекций Грузии.

Коллекция штаммов ВИЧ дополнена новыми изолятами вируса.

Разработана оптимальная программа криоконсервации и применены новые стимуляторы для повышения жизнеспособности клеточных систем в процессе деконсервации.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Проведено выделение изолятов ВИЧ от ВИЧ-инфицированных лиц и больных СПИДом из различных регионов Российской Федерации и СНГ. Установлена выраженная гетерогенность фенотипических и генетических свойств выделенных изолятов ВИЧ.

2. Показано, что программируемое замораживание клеток увеличивает их жизнеспособность и пролиферативную активность после деконсервации. 8

3. Обнаружено, что отечественные противовирусные препараты: гамма-плант и нитрат галлия повышают резистентность клеток к заражению вирусом иммунодефицита человека.

4. Показано, что комбинированное применение препаратов ферровир, ретровир и ронколейкин вызывает аддитивный противовирусный эффект в отношении ВИЧ.

Апробация работы

Основные экспериментальные материалы и положения диссертации доложены и обсуждены на VI, VII, XIII международных конференциях по проблемам СПИДа (Сан-Франциско, 1990; Флоренция, 1991; Амстердам, 1992; Дурбан, 2000), на юбилейной научно-практической конференции Института Пастера (С.Петербург, 1993); на 3-м международном симпозиуме по проблемам СПИДа стран Юго-Восточной Азии и Тихоокеанского региона (Чиангмай, 1995).

Диссертация апробирована 24 апреля 2001г. на заседании Экспертного Совета по предварительной экспертизе диссертационных работ при НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН. 9

Публикация результатов исследования

Основные положения диссертации отражены в 16 научных работах.

Работа выполнена в плане исследований НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН (Директор Академик РАМН Д.К.Львов) на базе лаборатории вирусов иммунодефицита. Некоторые разделы исследований были выполнены в соавторстве с сотрудниками Института вирусологии проф. H.H. Носиком, проф. В.М.Стахановой,. М.Н.Корнеевой, JI.Б.Калниной, О.А.Лобач, М.С.Бочковой, Е.А.Гущиной,Л.А.Глуховой, проф. A.A.Кущ, проф. Р.Я.Подчерняевой, которым выражаю глубокую благодарность. Отдельные фрагменты работы выполнены совместно с сотрудниками Российского Центра профилактики и борьбы со СПИДом: акад. В.В.Покровским, А.В.Кравченко; руководителем НФП «Гемма-Б»

Л.А.Чекановской, ведущим научным сотрудником Института генетики им. Н.И.Вавилова РАН В.Н.Поздняковым; проф.Ш.Сато, Медицинский Университет Иватэ, Япония, которым выражаю искреннюю признательность.

10

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Киселева, Ирина Алексеевна

104 ВЫВОДЫ

1. Проведено выделение изолятов ВИЧ от ВИЧ-инфицированных лиц и больных СПИДом, из различных эпидемических очагов Российской федерации и СНГ. Показана выраженная гетерогенность фенотипических и генетических свойств выделенных вирусов.

2 . Установлено, что программируемое замораживание клеток увеличивает их жизнеспособность и пролиферативную активность после деконсервации.

3. Показано, что использование после деконсервации клеток препарата деринат и дискового аппликатора повышает их жизнеспособность.

4. Впервые установлено, что отечественные противовирусные препараты: имуномодулятор гамма-плант и нитрат галлия повышают резистентность клеток к вирусу иммунодефицита человека.

5. Впервые показано, что комбинированное применение препаратов ферровир, ронколейкин и ретровир вызывают аддитивный противовирусный (анти-ВИЧ) эффект.

105

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Киселева, Ирина Алексеевна, Москва

1. Анджапаридзе О.Г., Мацевич Г.Р., Маренникова С. С. Иммуноферментный анализ для выявления антигенов ВИЧ (применение, возможности, ограничения) // Вопр.вирусол.-М.-1991.-N3.-С.18 0-182

2. Велозеров Е.С. Принципы терапии больных ВИЧ/ СПИД // Военно-медицинские аспекты ВИЧ-инфекции.-СПб.-1999.-С.8-11

3. Бобков А.Ф., Селимова JI.M., Покровский А.Ф. и др. Генотипирование и филогенетический анализ изолятов ВИЧ-1, циркулирующих в России // Вопр.вирусол.-М.-1997.-N1,-С.13-16

4. Власов H.H. и др. ВИЧ-инфекция. Основы комбинированной противовирусной терапии // СПб.-19 98.-С.1-40

5. Волянский Ю.Л., Телепнева Л.Г., Васильев Н.В. ВИЧ-инфекция. Факты и гипотезы // Харьков.-19 93

6. Вудли М. , Уэлан А. Терапевтический справочник Вашингтонского университета // Практика.-М.-1995.-С.832

7. Галегов Г. А. Синтетические ингибиторы протеиназы ВИЧ и новые возмлжности лекарственной терапии ВИЧ-инфекции и СПИДа // Вопр.вирусол.-М-1997.-N 6.-С.284-286

8. Змушко Е.М., Белозеров Е.С. ВИЧ-инфекция. Руководство для врачей // СПб.-2000.-С.1-318106

9. Калнина Jl. Б. Поиск и изучение препаратов, активных в отношении ВИЧ, на модели изолятов ВИЧ // Автореферат дисс.канд.биол.наук.-М.-1999.-С.1-30

10. Кузнецова Н.В. Консервация вирусов иммунодефицита человека и чувствительность к антивирусным препаратам // Автореферат дисс.канд.наук.-M.-19 94.-С.1-30

11. Леви Д. А. Вирус иммунодефицита человека // Иммунология.-198 8.-N 4.-.14-2 0

12. Лобзин Ю.В., Казанцев А.П. Руководство по инфекционным болезням // Сб.Феникс.-1997.-с.736

13. Лысенко А.Я., Турьянов М.Х., Лавдовская М.В., Подольский В.М. ВИЧ-инфекция СПИД-ассоциируемые заболевания // ТОО »Рарогъ».-М.-1996.-С.624

14. Маренникова С.С., Степанова Л.Г., Носик М.Н., Рытик П. Г. и др. О штаммовых особенностях, циркулирующего в СССР ВИЧ-1, по данным изучения его свойств в клеточных культурах // Вопр. Вирусол.-М.-1991.-N5.-С.356-360

15. Мацевич Г.Р., Старов А.И., Маренникова С.С., Анджапаридзе O.P. Иммуноферментные тест-системы для выявления антигена ВИЧ и попытка их использования при обследовании ВИЧ-инфицированных лиц // Вопр.вирусол.-М.-1991.-N6.-С.444-446

16. Новохатский A.C. Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) // Итоги науки и техники. ВИНИТИ (Сер. Вирусология).-М.-1987.-Т.14.-С.1-80107

17. Новохатский A.C., Дрынов И.С., Сергиев В. П. Синдром приобретенного иммунодефицита // ВИНИТИ.-М.-1987.-С.1-180

18. Новохатский A.C., Хлябич Н.Г. Теория и практика лабораторной диагностики синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД) // ВИНИТИ.- М.-1992.-С.1-221

19. Носик Д.Н. Вирусы иммунодефицита человека и животных // Инфекционные и паразитарные болезни.-М.-1989.-Вып.10.-С.1-15.

20. Носик Д.Н. Создание коллекции вирусов иммунодефицита человека, циркулирующих на территории Российской Федерации // Автореферат дисс.докт.мед.наук.-М.-1992.-С.1-79.

21. Носик Д.Н., Калнина Л. Б., Злобин А.Ю. и др. Характеристика штаммов вируса иммунодефицита человека, выделенных от ВИЧ-инфицированных лиц на территории СССР // Вопр.вирусол.-1992.-N1.-С.24-27

22. Носик Д.Н., Подчерняева Р.Я., Киселева И.А., Лобач O.A., Майорова С.Н. Консервация клеток, инфицированных вирусом иммунодефицита человека / / Цитология.-С.Пб.-2 001

23. Персина И. С. Клетки Ларгенганса-структура, функция, роль в патологии // Архив патол.-1985.-N47.-Вып.2.-С.8 б-93

24. Петров Р. В. // Иммунология.-М.-Медицина.-1987.-С.1-416108

25. Пиот П. Доклад UNAIDS в рамках Всемирной кампании борьбы со СПИДом,2 3 апреля 19 98 г.

26. Подчерняева Р. Я. и др. Усиление пролиферации клеток человека и животных с помощью аппликатора // Вопр. Вирусол.-М.-1997.-N9-10

27. Подчерняева Р.Я., Петрачев А., Киселева И. А., Лобач O.A. Криоконсервация клеток, чувствительных к инфицированию вирусом иммунодефицита человека // Тезисы конференции «Биология клетки».-Пущино.-19 94

28. Покровский В. В. Эпидемиология инфекции, вызываемой вирусом иммунодефицита человека // Автореферат дисс.докт.мед.наук.-1990.-С.1-218

29. Покровский В. В. // Эпидемиология и профилактика ВИЧ-инфекции и СПИД.-М.-Медицина.-199 6.-С. 1-248

30. Покровский В.И., Покровский В.В. // Синдром приобретенного иммунодефицита. -М.-Медицина.-1988.-С. 1-48

31. Покровский В.И., Потекаев Н., Покровский В. В. и др. ВИЧ-инфекция: венерологические аспекты проблемы // Терапевт.архив.-1989.-N10.-С.73-7 б

32. Пол У. // Иммунология. В 3-х т. Пер. с англ. М.-Мир.-1987-198 9.-С.1-3 60

33. Сапин М.Р., Энтиген JI.E. // Иммунная система человека.-М.-Мир.-1996.-С.1-304

34. Статистические данные // СПИД Инфосвязь.-М.-2000.-N6.-С.46-47109

35. Сэнфорд Дж., Гилберт Д., Гербердинг Дж. , Сэнде М. // Антимикробня терапия.-М.-Практика.-1996.-С.1-224

36. Тамм И. //Стратегия химиотерапии. Пер. с англ. М.-1996.-С.210-245

37. Фонталин H.JI., Певницкий JI.A. // Иммуно логическая толерантность.-М.-1978.-С.11-15

38. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А. СПИД // Издание Народной академии культурных и общечеловеческих ценностей.-М.-1992.-С.1-352

39. Чайка Н.А. СПИД за рубежом // СПИД. Экспресс-информация.-М.-1992.-Вып.1-3.-С.1-3 6

40. Чекановская JI.A. Гамма-плант как новый нетоксичный индуктор интерферона // Вопр.вирусологии.-M.-1997.-N 3.-С.123-126

41. Чекановская JI.A., Гуминюк Н.В., Малинникова С.Ю. Применение нового лекарства гамма-плант для лечения острых вирусных гепатитов // Руководство для врачей.-М.-1999.-49.-С.1-8

42. Чекановская Л.А., Генералов А.В. Выделение и характеристика препарата гамма-плант из растения Solanum tuberosum // Химико-фармацевтический журнал.-2000.-N 3.-С.51-56

43. Чижов Н.П., Ершов Ф.И., Индулен М.К. // Основы экспериментальной терапии вирусных инфекций.-Рига.-1988110

44. Шатров П.И. Лекарственное средство для профилактики и лечения ВИЧ-инфекции // Патент РФ . -N 2020942.-1994

45. Abrains D.I., Goldman A.i., Launer С. et al. Comparative trial of didanozine or zalcitabine after treatment with zidovudine in patients with Human Immunodeficiency Virus Infection // J.N.Engl.Med.-1994.-330.-P.657-662

46. Acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) among blaks and Hispanics United States // JAMA.-1986.-V.261.-N 20.-P.2799-2800

47. Adachi A., Koenig S., Gendelman H. Productive, persistent infection of human colorectal cell with human immunodeficiency virus // J. of Virology.-1987.-Vol.61.-P.209-213

48. Albert J., Fenyo E. Simple, sensitive and specific detection of human immunodeficiency virus type 1 in clinical specimens by polymerase chain reactions with nested primers // J. of Clin. Microb.-1990.-Vol.28.-N7.-P.15 60-15 64

49. Asjo В., Albert J., Karlsson A. Replicative capacity of human immnodeficiency virus from patients with varying severity of HIV infection // Lancet.-198 6.-Vol.2.-P.660-662

50. Asjo В., Albert J., Chiodi F., Fenyo E. Improved tissues culture technique for provirus strains // J. Virol. Methods.-1988.-N19.-P.191-1961.l

51. Barre-Sinoussi F., Mugeyre M., Dauguet C. Isolation of a T-lymphotropic retroviruses from a patient at risk for AIDS // Science.-1983.-Vol.220 . -P.868-871

52. Barre-Sinoussi F. HIV target cells: effect by HIV on the pathogenesis of AIDS // Lymphology.-1988.-21.-P.11-14

53. Baum R.M. Researchers probe structure and genetics of HIV in effort to understand virus how it causes AIDS and weaknesses that might lead to therapies // Chem. and genet, engineer, news. -1987.-Vol.23.-P.14-26

54. Bayliss G.J., Jesson W.J., Mortimer P.P. et al. Cultivation of human immunodeficiency virus from whole blood: effect of anticoagulant and inoculum size on virus growth // J.Med.Virol.-1990.-31.-P.161-164

55. Carlson J.R. Antigen detection for human immunodeficiency virus // Clin.Microbiol.Rev.-1989.-2.-N 3.-P.241-249

56. Carpenter C.C., Fischl M.A., Hammer S.M. et al. Antiretroviral Terapy for HIV infection in 1996: recommendations of an international panel // JAMA.-1996.-276.-P.146-154

57. Carpenter C.C., Fischl M.A., Hammer S.M. et al. Antiretroviral Terapy for HIV infection in 1997: updated recommendations of the International AIDS Sosaity // USA Panel.-JAMA.-1997.-P.1962-1969

58. Centers for Desease Control. Pneumocystis pneumonia // Centers for desease control. Pneumocystis pneumonia. Los Angelos. - Morb.Mortal Wkly Rep.(MMWR).-1981.-30.-P.250-252

59. Cheng-Mayer C., Seto D. , Tateno M., Levy J.A. Biological features of HIV-1 that correlate with virulence in the host // Science.-1988.-Vol.240 .-P.80-82

60. Cheng-Mayer C., Shiodo t., Levy J.A. Host range, replicative and cytopathic properties of human immunodeficiency virus type 1 are determined by very few aminoacid change in tat and gp 120 // J. Virol.-1991.-65.-P.6931-6941

61. Clerici M., Sarin A., Coffman R.L. et al. Typel/type2 cytokine modulation of T-cell programmed cell deth as a model for human immunodeficiency virus pathogenesis // Proc.Nat.Acad.Sci.-USA.-1994.-91.-P. 11811-11815

62. Clerici M., Bevilacqua M., Vago t., Villa M.L., Shearer G.M., Norbiato G. An immuiendocrinological hypothesis of HIV infection // Lancet.-1996.-343.-P.1552-1553113

63. Coffin J.M., Haase A., Levy J.A., Montagnier L., Oroszlan L., Teich N. Human immunodeficiency viruses // Science.-1928.-Vol.232.-P.697-700

64. Coffin J.M. Structure and classification of retroviruses // In the retroviridae. Levy J. A. (Ed.) Plenum Press.-1992.-P.19-49

65. Collier A.C. Coombs R.W., Schoenfeld D.A. et al. Treatment of human immunodeficiency virus infection with saquinavir, zidovudine and zalcitabine // N.Engl.J.Med.-1996.-334.-P.1011-1017

66. Condra J.H., Schleif W.A., Blahy O.M. et al. In vivo emergence of HIV-1 variants resistant to multiple protease inhibitors // Nature.-1995.-374.-P.569-571

67. Daniel M.D., Naidu Y.M., Lii Y. Simian immunodeficiency virus from African green monkeys // J.Virology.-1988.-Vol.62.-N 11.-P.4123-4128

68. De Clercq E. Chemotherapeutic approach to the treatment of the acquired immunodeficiency syndrome AIDS // J.Med.Chem.-1986.-29.-P.1561-1569

69. Di Piro J.T. Cytokine network with infection: Mycobacterial infections, Leishmaniosis,114

70. Human Immunodeficiency Virus infection and Sepsis // Pharmacotherapy.-1997.-17(2).-P.205-223

71. Eigen M. The AIDS debate // Naturwissenschaf ten . -198 9 . -7 6 . -P . 341-350

72. Fauci A.S. The HIV: infectivity and mechanisms of pathogenesis // Science.-1988.-Vol.239.-P.617-622

73. Fauci A.S. Host factors and the pathogenesis of HIV-induced deseases // Nature.-1996.-Vol.384.-P.529-534

74. Fauvel M. , Ozanne G. Immunofluorescence assay for human immunodeficiency virus antibody: investigation of cell fixation for virus inactivation and antigen presentation // J.Clin.Microbiol.-1989. -27.-N 8.-P.1813-1820

75. Fenyo E.M., Morfeldt Manson L., Chiodi F., Lind B. et al. Distinct replicative and cytopathic characterictics of human immunideficiency vrus isolates // J.Virol.-1988.-62.-P.4414-4419

76. Fenyo E.M., Albert J. Replicative characterictics of HIV isolates // Biotech-94: AIDS from Basic Science to Prevention Diagnosis and Therapy.-Vol.9.-N 2.-P.4 8

77. Folks T.M., Lustement J., Kinter A. Cytokine -induced expression of HIV-1 in a chronically infected promonocyte cell line // Science.-1987.-Vol.238 .-P.800-802

78. Gallo R.C. The AIDS virus // Scientifics American.-198 7.-Vol.256.-N 1.-P.39-48

79. Gallo R.C., Montagnier L. AIDS in 1988 // J. of Scien. America.-1988.-Vol.259.-P.41-48

80. Gao F., Morrison S.G., Robertson D.L. et al. Molecular cloning and Analusis of functional envelope genes from Human Immunodeficiency Virus Type 1 Sequence Subtypes A through G // J.Virology.-1996.-70. -P. 1651-1667

81. Gessani S., Borghi P., Fantuzzi L. et al. Induction of cytokines by HIV-1 and its gp 120 protein in human peropheral blood monocyte/macrophages and modulation of cytokine response during differentiation // J.Leukoc. Biol.-1997.-Vol.62.-P.49-53

82. Gulick R., Mellors J., Havlir D. et al. Potent and systained antiretroviral activity of indinavir (IND), zidovudine (ZDV) and lamivudine (3TC) // In: Abstracts of the Xl-th International Conference on AIDS.-Vancouver.-1996.- Abstract Th.B.931

83. Gust I., Maskill W.Z. Diagnostic tests for the human immunidefiiency virus // Med.J.Australia.-1989.-151.-P.57-58116

84. Harada S., Koyaanagi Y., Yamamoto N. Infection of HTLV-III/LAV in HTLV-1 earring cells MT-2 and MT-4 application in piaque assay // Science.-1986.-Vol.229.-P.563-566

85. Haseltine W.A., Wong-Staale F. Molecular biology of AIDS virus // J. of Scientific America.-1988.-Vol.259.-N 4.-P.20-29

86. Haseltine W.A. Molecular biology of AIDS virus: ten years of discovery-hope for the future // Science challinging AIDS.-1992.-P.71-106

87. Haynes B.F., Pantaleo G., Fauci A. Towards an Understsnding of the Correlates of Protective Immunity to HIV Infection // Science.-1996.-271.-P.324-327

88. Ho D.D., Neumann A.U., Perlson A.S. et al. Rapid turover of plasma virions and CD4 lymphocytes in HIV-1 infection // Nature.-1995.-373.-P.123-126

89. Korber B., Mildoon M. r Theiler J. et al. Timing the Ancestor of the HIV-1 Pandemic Strains // Science.-2000.-Vol.288.-N 9.-P.178 9-1796

90. Kampinga G.A. HIV-1 Variation and Transmission // Ed. Dr„Thesis„University of Amsterdam.-Amsterdam.-The Netherlands.-1996117

91. Kieny M.P. Structure and regulation of the human AIDS virus // J.Ac.Imm.Det.Syndromes.-1990.-Vol.3.-P.395-402

92. Kitchin P., Almond N. The polymerase chain reaction // Advances in gene technology.-1991.-Vol.2.-P.61-67

93. Klatzmann D., Barre-Sinoussi F., Nugeyre N.T., Montangnier L. Selective tropism of lymphadenopathy associated virus (LAV) for helper-inducer T-lymphocytes // Science.-1984.-Vol.225.-P.59-63

94. Kraevsky A., Galegov G.A, Tarusova N., Khorlin A., Korneyeva M., Nosik D. et al. // Europaisches patentamt. N 901341.1. Priorität 20.12.1988

95. L'age-Stehr J. AIDS research // Immunol. Today.-Vol.10.-N 8.-P.S41-S44

96. Lane H.C. Novel Therapies-Immune-Based Therapies, Vaccines, Cytokines and Gene Therapies // Proc. 10th Int.Conf. on AIDS.-Yokohama.-P.17-21

97. Larcher C., Schulz T.F., Hofbauer J. et al. Expression of the C3d/EBV receptor and of other cell membrane surface markers is altered upon HIV-1 infection of myeloid, T and B cells // J. AIDS.-1990.-N 3.-P.103-108

98. Larder B.A., Darby C., Richman D.D. HIV with reduced sensivity to zidovudine (AZT) isolated during prolong therapy // Science.-1989.-243.-P.1731-1734118

99. Lasky L.A., Nakamura G.S., Shimasaki C., Patzer E. Delineation of a region of the human immunodeficiency virus type 1 gpl20 glycoprotein clinical for interaction with the CD4 receptor // Cell.-1987.-Vol.5 0.-P.975-985

100. Levy J.A., Hoffman A.D., Kramer S.M. Isolation of lyrnphocytopathic retroviruses from San Francisco patients with AIDS // Science.-1984 . -Vol.225.-P.840-842

101. Levy J.A., Kaminsky L.S., Morrow W.J. Infection by the retrovirus associated with the immunodeficiency syndrom // Ann . Intern.Medicine.-1985.-Vol.103-P.694-695

102. Levy J.A., Shimabukuro J., McHugh T. AIDS -associated retroviruses (ARV) can productively infect other human T helper cells // Virology.-1985.-Vol.147.-P. 4 41-448

103. Levy J. A. The multifaceted retrovirus // Cancer Res.-1986.-Vol.46.-N 11.-P.5457-5468

104. Levy J.A. Immunodeficiency viruses and pathogenesis of AIDS // Jama.-1989.-Vol.261.-N 20.-P.2997-3006

105. Levy J.A. HIV heterogeneity in transmission and pathogenesis // AIDS in the World.-1994.Vol.2.-P.1-24

106. Levy J.A. HIV and the Pathogenesis of AIDS // Washington.-1994.-P.247119

107. Levy J.A.r Mackewicz C.E., Barker E. et al. Controlling HIV pathogenesis: the role of the noncytoxic anti-HIV response of Cd8+ T-cells // Immunol.Today.-1996.-17.-P.217-224

108. Lifson J.D., Engleman E.G. Role of CD4 in normal immunity and HIV infection // Nature.-1989.-Vol.323.-P.93-117

109. Lifson A.R., Stanely M., Pane J. Detection of human immunodeficiency virus DNA using the polymerase chain reaction in a well-characterized group of homosexual and bisexual men // J.Infect. Dis.-1990.-Vol.161.-P.436-439

110. Liles W.C., Van Voorhis W.C. Review: Nomenclature and Biolgical Significance of Cytokines Involved in Inflammation and the Host Immune Response // J.Infec.Dis.-1995.-Vol.172.-P.15 73-15 8 0

111. Lipski J.J. Zalcitabine and didanozine // Lancet.-1993.-341.-P.3 0-32

112. Luciw P.A., Potter S.J., Steimer K. , Levy J.A. Molecular cloning of AIDS-associated retrovirus // Nature.-1984.-Vol.312.-P.760-763

113. Lvov D.K., Pokrovsky V.V., Nosik D.N., Stachanova V.M., Sato S., Kavana R. HIV-infection in Russia // Clinical Virology.(Japan) .-1994.-Vol.22.-N 2.-P.41

114. Mackewicz C.E., Ortega H., Levy J. Effect of Cytokines on HIV Replication in CD4+ Lymphocytes: Lack120of Identity with the CD8+ Cell Antiviral Factor // Cell Immunol.-1993.-153.-P.329-34 3

115. Mann D.L., Brains J., Gilbert D.A. Origin of the HIV susceptible CD4 cell line H9 // AIDS Res. and Human Retroviruses.-1985.-Vol.5.-P.253-255

116. Markowitz M. , Cao Y., Hurley A. et al. Triple therapy with AZT, 3TC and ritonavir in 12 subjects newly infected with HIV-1 // In: Abstracts of the XIth International Conference on AIDS.-Vancouver.-1996.-Abstract Th2EB.933

117. Martin M. r Weiss R.A. Virology. Overview // AIDS.-1989.-N 3.-P.S3-S4

118. Martin P.W., Burger D.R., Ccaouette S. et al. Importance of confirmatory tests after strongly positive HTLV-III screening test // N.Engl.J.Med.-1986.-314.-P.1577

119. Mellors R.C. Pathogenesis of HIV Infection and AIDS // Data on file, Medline, Cornell Univ.Med. College.-1997

120. Montagnier L., Gruest J., Chamaref S. Adaption of lymphadenopathy-associated virus (LAV) to replication in EBV-transformed B-lymphoblastoid cell lines // Science.-1984.-Vol.225.-P.63-66

121. Montefiori D.S., Robinson W.E., Mitchell W.M. In vitro evaluation of mismatched double-stranded RNA (ampligen) for combination therapy in the treatment of AIDS // AIDS Res. Human Retrovir„-1989.-Vol.5.-N.2.-P.193-203121

122. Nossik D.N.,Lvov D.K. Human immunodeficiency viruses circulating in Russian territory // Sov.Sei.Rev.E.Virology.-1994.-Vol.5.-P.113-14 0

123. Pantaleo G., Graziosi C., Fauci A. The Immunopathogenesis of Human Immunodeficiency Virus Infection // N. Engl. J. Med. -1995. -Vol.328.-N 5.-P. 327-335

124. Pauwels R., De Clercq E., Desmyter J. et al. Sensitive and rapid assay on MT-4 cells for detectionof122antiviral compaunds against of the AIDS virus // J.Virol.Methods.-1987.-16.-P.171-185

125. Pert C.B., Hill J., Ruff M.R. // Proc.Natl. Acad.Sci.-1986.-Vol.83.-N 2 3.-P.925 4-925 8

126. Peter J.B., Yuong K.K. Detection of HIV infection in infants by polymerase chain reaction // J.Cell.Biochem.-1989.-Suppl.13E.-P.300-302

127. Piot P., Laga M., Ryder R. et al. The global epidemiology of HIV infection: Continuity, heterogenity and change // J.AIDS.-1990.-Vol.3.-N 4.-P.403-412

128. Popovic M., Saragadharan M.G., Gallo R.C. Detection, isolation and continuous production cytopathic retroviruses (HTLV -III) from patients with AIDS and pre AIDS // Science.-1984.-Vol.244.-P.497-500

129. Puro V., Ranchino M., Profili F. Ocupationals exposures to blood and risk of HIV transmission in a general hospital (1986-1988) // Eur.J.Epidemiol.-1990.-V0I.6.-N 1.-P.67-70

130. Rabson A.B., Koenig S., Daugherty D.F. Molecular pathogenesis of human immunodeficiency virus infection // Gene Anal. Technology.-1988.-Vol.5-P.41-53123

131. Rather L., Haseltine W., Pataca K. et al. Complets nucleotide sequence of the AIDS virus, HTLV-III // Nature.-1985.-Vol.313 .-N 6001.-P.277-284

132. Robinson W.E., Montefiori D.C., Mitchell W.M. Complement mediated antibody - dependent enhancement of HIV-1 infection requires CD4 and comlement receptors // Virology.-1990.-Vol.175.-N 2.-P.600-604

133. Rubsamen-Waigman H. Molecular epidemiology of HIV in Europe and worldwide // Biotech:94.-Vol.9.-N 2.-P. 64

134. Saag M.S. Evolving Understanding of the Immunopathogenesis of HIV // AIDS Res.Hum.Retrovirus.-1994.-Vol.10.-N 8.-P.887-892

135. Saiki P.K., Gelfand D.H., Stoffel S. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA-polymerase // Science.-1988.-Vol.239.-P.481-491

136. Schild G.C., Minor P.D. Human immuno deficiency virus and AIDS: challenges and progres // Lancet.-1990.-335.-P.1081-1084

137. Schneider J.,Hunsmann G. Simian lentiviruses the SIV group // J.of AIDS.-1988.-Vol.2.-P.1-9

138. Schneweis K.E., Ackerman A., Friedrich A. et al. Comparision of different methods for detecting human immunodeficiency virus in HIV-seropositive hemophiliacs // J.Med.Virol.-1989.-9.-P.94-101

139. Shaw G.M., Hahn B.H., Arya S.K., Gallo R. et al. Molecular characterization of human T-cell leukemia (lymphotropic) virus type III in the AIDS // Science.-1985.-Vol.22 6.-N 4 67 9.-P.1165-1171

140. Smith B.A., Gartner S., Viling Liu., Perelson A.S. et al. Persistence of Infectious HIV on Follicular Dendritic Cells // J.Immunol.-2001.-166.-P.690-696

141. Sonnerborg A., Abens J., Johansson B. Detection of human immunodeficiency virus-1 by polymerase chain reaction and virus cultivation // J. of Virology.-1990.-Vol.31.-P.234-24 0

142. Starsich B., Rather L., Josephe S.T. et al. Characterization of long terminal repeat sequences of HTLV-III // Science.-1985.-Vol.227.-P.538-540

143. Sundstrom C., Nilsson K. Establishment and characterization of a human histiocytie lymphome cell lines (U-937) // Int.J.Cancer.-1976.-17.-P.565-577

144. Takahashi I. , Takama M., Ladnoff A.M. Envelope structure model of human immunodeficiency virus type 1 // J. of AIDS.-1989.-Vol.2.-P.136-140

145. Tateno M., Lavy J.A. MT-4 plaque formation can distinguish cytopatic subtypes of the HIV // Virology.-1988.-Vol.299.-P.299-301

146. Tokars J.I., Mareus R., Culver D.H. et al. Surveilance of HIV infection and zidovudine use among health care workers after occupational exposure to HIV-infected blood // Ann.Intern.Med.-1990.-118.-P.913-919

147. Weber J. The story of AIDS // Adelphi Communic.Ltd.-BoHington.UK.-1993.-P.24

148. Wong Staal F., Shaw G.M., Hahn B.H., Salahuddin S.Z., Popovic M., Markham P., Redfield R., Gallo R.C. Genomic diversity of human T-lymphotropic virus type III (HTLV-III) // Science.-1985.-229.-P.759-762

149. World Health Organization (WHO) // Guidelines on AIDS in Europe.-Copengagen.-1985.-P.57

150. World Health Organization (WHO) // The HIV/AIDS Pandemic.Overview.-Copengagen.-1993.-P.1-10