Изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта

Бывальцева, Татьяна Михайловна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта
ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта"

\ О;

©у £

На правах рукописи

Ьывальцона Татьяна Михайловна

ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНЫХ СВОЙСТВ ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИПНДОВ РШ КАК ОСНОВЫ ПИЩЕВОГО КОНСЕРВАНТА

03.00. 07 - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Владивосток - 1997

Работа выполнена в Тихоокеанском научно-исследовательском рыбохозяйственнсм центре (ТИНРО-центр)

Научные руководители:

Доктор биологических наук, Л.В.Шульгина

Кандидат технических наук, Ю.Г.Блинов

Официальные оппоненты: Доктор биологических наук, Кандидат медицинских наук,

профессор М.Ф. Дзадзиева Ю.Н. Бронниксз

Ведущая организация: Научно-исследовательский институт питания РАМН.

Защита диссертации состоится " / " _____1997 г на за-

седании Диссертационного совета К.084.24.01 при Владивостокском Государственном Медицинском Университете по адресу: 690600, ГСП, г. Владивосток, проспект Острякова,2, главный корпус.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Владивостокского Государственного Медицинского Университета.

Автореферат разослан СЬсс-^ 1997 г.

Ученый секретарь

Диссертационного Совета -

кандидат медицинских наук, доцент / Р.Н. Диго

ъ^Пг*

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

А^туадь110ст^п£д&жшу. Ежегодно за счёт микробной порчи теряется до 25% рыбного сырья и продукции из него. Наибольшую опаслссть в пищевых технологиях представляют микроорганизмы -возбудители перчи сырья и продукции, заболеваний человека, а также токсические продукты их жизнедеятельности. Негативному влиянию микроорганизмов подвержены те продукты, технологическая схема получения которых не обеспечивает гибели бактерий, конта-минирукщие выловленные промысловые объекты и полуфабрикаты в процессе обработки.

Основным консервирующим фактором в технологии указанных продуктов является хлорид натрия, который стабилизирует развитие наземных штаммов бактерий, но остается негативным в отношении морских гапотолерантных и галофи.пьшх форм. Перечень консервантов, обладающих выраженным антимикробным действием, также ограничен за счет строгих требований к веществам используемых в качестве добаБок при изготовлении рыбных продуктов.

Проблема использования эффективных консервантов в технологии рыбных продуктов была развита работами А. М. Тсплицкой (1967), Е.Н.Дутовой (1976), С.И.Ивановой (1956) и других исследователей. Изучено влияние различных'веществ на микробную обсемененность и качественные показатели продукции, рекомендованы действующие концентрации препаратов при изготовлении продуктов, определены сроки хранения.

Однако химическая природа многих консервантов, ограниченность их использования за счет токсичности, избирательность ин-гибированил бактерий, а также влияние на вкус, окраску, запах и консистенцию не позволяют широко использовать их в пищевых технологиях. Недостаточная изученкость природных материалов, как животного, так и растительного происхождения, в составе которых

присутствуют соединения с выраженным антимикробным действием, fie позволяет расширить круг использования лицевых консервантов з рыбоперерабатывающей промышленности.

Исследования гидробионтов в этом направлении, отдельных соединений в их органах и тканях крайне малочисленны и ограничиваются сведениями о бактерицидном действии жирных кислот. В этой связи, исследования липидных фракций с выраженным бактерицидным действием из морских рыб являются актуальными, представляют интерес для науки и практики, позволяют определить пути получения новых антисептических препаратов природного происхождения.

ЦЕЛЬЮ НАСТОЯЩЕЙ РАБОТЫ явилось изучение бактерицидного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта и обоснование возможности его использования в пищевых технологиях.

Для достижения цели б-ыли поставлена и решены основные задачи:

-• исследование микрофлоры морских рыб, полуфабрикатов и готовой продукции из них;

- выбор тест-микроорганизмов, свойственных морским гидроби-онтам, для оценки бактерицидного действия штисепгиков и новых препаратов в технологии рыбных продуктов;

- разработка способа получения водорастворимой фракции из рыбьего »яра с выраженным антимикробным действием;

- изучение антибактериальной активности водного экстракта из липидов рыб и основных его показателей;

- проведение сравнительной оценки ант:шикробной активности экстракта из липидов рыб с активностью традиционных пищевых консервантов;

- проведение медико-биологической оценки экстракта на безвредность и возможность применения в пищевых технологиях;

- изучение силы и спектра антимикробного действия экстракта.

НАУЧНАЯ НОВИЗНАРАБОТЫ. Впервые установлена возможность получения высокоэффективного бактерицидного экстракта из липидов рыб как основы для нового пищевого консерванта.

Определен количественный состав микрофлоры рыб, полуфабрикатов, пресервов, малосоленых и копченых рыбных продуктов. Установлены закономерности изменения микрофлоры при хранении продукции. Обоснована группа тест-микроорганизмов для оценки бактерицидного действия традиционных и новых консервантов.

Разработан способ получения бактерицидного препарата на основе липидов рыб с выраженным антимикробным эффектом.

Изучена биологическая активность экстракта из липидов рыб, уровень и спектр его действия на бактерии, свойственные морепродуктам.

Проведена сравнительная оценка антибактериальной активности бактерицидного экстракта с водорастворимыми фракциями липидов другой природы, а также с другими пищевыми консервантами, используемыми в технологии рыбных продуктов.

Установлена абсолютная безвредность бактерицидного экстракта при использовании в пищевых технологиях.

Экспериментально обоснованы перспективы применения водного экстракта из липидов рыб в пищевых технологиях.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. На основе анализа и обобщения результатов научных и экспериментальных исследований разработаны и предложены:

- способ получения нового консерванта на основе липидов рыб, техническое решение которого подтверждено патентом РФ на изобретение N 2043725 от 12.08.92 г. "Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и способ приготовления рыбных продуктов с его использованием";

- действующие концентрации бактерицидного экстракта на различные виды микроорганизмов;

- способ приготовления икорных продуктов с применением бактерицидного экстракта, техническое решение которого подтверждено патентом РФ на изобретение N 2031584 от 06.07.92 г. "Способ приготовления зернистой лососевой икры" и положительным решением о выдаче патента на изобретение по заявке N 94042348/13/042761 от 30.11.94 г. "Способ приготовления икры рыб".

ОСНОВНЫЕ П0Л0ЯЕНИЯ, ВЫН0С1МЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Обоснование тест-микроорганизмов, характеризующих чувствительность микрофлоры морских гидробионтов к антисептическим препаратам.

2. Оценка антимикробной активности и основных показателей водного экстракта из липидов рыб.

3. Рекомендации по использованию бактерицидного экстракта в качестве пищевого консервакга.

ВЫПОЛНЕНИЕ И АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Все научные экспериментальные работы были выполнены в ТИНРО и в производственных условиях на рыбообрабатывающих предприятиях Дальнего Востока.

По теме диссертации опубликовано 10 работ, получены 2 патента РФ на изобретения (Н 2031584 от 06.07.92 г., N 2043725 от 12.08.92 г.), и положительное решение о выдаче патента РФ на изобретение по заявке N 94042348/13/042761 от 30.11.94 г.. разработан комплект нормативно-технической документации ( ТИ по изготовлении антимикробного препарата N 36-20-96 от 21.06.96 г., ТУ N 9281-021-00472012-96 "Препарат антимикробный").

Результата настоящей работы бьши представлены и доложены на заселениях технической секции Ученого Совета ТИНРО. на Всесог-з-

ном совещании "Теория и практика регулирования качества соленой и копченой рыбной продукции" (Владивосток, 1989); юбилейной научной конференции "50 лет Дальрыбвтузу" (Владивосток, 1996); Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии" (Ставрополь, 1996).

СТРУКТУРА_И _0БЪЕМ_ РАБОТЫ. Диссертация включает введение, обзор литературы, методы, выводы, список литературы и приложения. Работа изложена на 168 стр., содержит 33 табл., 14 рис.,245 литературных источников. Приложения изложены на 15 стр., где приведено заключение о пригодности использования экстракта для пищевых целей, акт выпуска опытной партии препарата.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Во введении обоснована актуальность работы.

В первой главе "Обзор литературы" приведены результаты отечественных и иностранных исследователей по изучению микрофлоры при изготовлении отдельных видов продукции из объектов моря. Авторами достоверно показано, что продукты из морских гидробион-тов, технологическая схема получения которых исключает жесткие режимы обработки, характеризуются наличием остаточной микрофлоры. Сохранившиеся микроорганизмы в процессе хранения готовых продуктов нередко являются причиной их порчи. Для устранения негативного микробного влияния на качество рыбной продукции применяются пищевые консерванты. Основными критериями для оценки применения антисептических препаратов при изготовлении пищевых продуктов являются безвредность для человека, отсутствие негативного влияния на качество продукции и выраженное антимикробное действие. Не все пищевые консерванты соответствуют указанным требованиям. В этой связи, постоянно проводятся исследования по поиску новых антимикробных соединений.

В последние десятилетия появились сведения о выраженном антимикробном действии липидов, среди которых наиболее популярными являются жирные кислоты и их производные (С.Hederson. 1973; К.Larsson, В. Moren, 1975).

Бактерицидное действие липидов и отдельных их соединений авторами, как правило, изучались in vitro. Изучен механизм действия отдельных липидных соединений на микробные клетки, ингиби-рующие концентрации их и условия ингибирования (D. L. Marshal 1 et al, 1986). Сведения по изучению влияния различных липидных компонентов на микроорганизмы в пищевых субстратах отсутствуют.

Особый интерес в этом плане привлекает феномен антимикробной активности водной фазы из липидов рыб, описанный в работах Т. Б. Горгиева (i960) и Е.С. Горбуновой (1966) при создании ими аутовакцин. Выраженный антибактериальный эффект липидной фракции обусловлен накоплением водорастворимых низкомолекулярных продуктов гидролиза и окисления липидов с высокой реакционной способностью.

Во второй главе "Материал, направления и методы исследований" показано, что исследования проворились в 2 основных научных направлениях, а именно:

- изучение микрофлоры морских гидробионтов. продуктов из них и выбор тест - микрооранизмов для оценки влияния антисептических препаратов;

- получение бактерицидного экстракта как основы пищевого консерванта и сценка его биологической активности.

Материалом для исследований d первом направлении явились морские гидробионты (рыба, беспозвоночные), полуфабрикаты на различных этапах технологической обработки, готовые продукты из морских гидробионгов и в процессе хранения, а также выделенные .микроорганизмы из указанных объектов.

Материалом для проведения последующих исследований служили водные экстракты рыбьего жира, тест - микроорганизмы, характеризующие свойственную морским гидробионтам микрофлору, а также полуфабрикаты и готовые продукты из морских гидробионтов. обработанные бактерицидным экстрактом и известными антисептиками.

В работе использовали современные методы микробиологических, химических, биологических исследований.

Результаты исследований обработаны методами математической статистики.

Используемые в работе методы и объем исследований приведены о таблице 1.

В третьей главе "Микробиологическая оценка рыбного сырья, полуфабрикатов и готовых рыбных продуктов" приведены результаты скринкнгопых исследований по количественной и качественной оценке микрофлоры сырья и полуфабрикатов, а также обоснованы тест-микроорганизмы для оценки влияния противобактериальных и Фунгицпдных веществ при изготовлении рыбных продуктов.

Вместе с тем, анализ отечественной и иностранной литературы по вопросу изученности микрофлоры морских гидробионтов и её изменений при технологической обработке сырья показал, что все сведения носят выборочный характер и не дают полного представления о микробиологических процессах в объектах промысла от момента вылова до получения продукта и о закономерностях формирования в них остаточной микрофлоры.

С целью определения всех составляющих микробный фактор влияния при производстве продукции из морских гидробионтов была изучена микрофлора морских рыб. вылавливаемых в дальневосточных морях, и условий изготовления продуктов из них.

Таблица 1

Направления, методы и объем исследований

Направления Методы исследований 1 Объем | 1

1 . г 1 3 | 1

•.Выделение микроорга- 1.Бактериологические методы: 11990 опре- |

низмов из морских 1)Подсчет числа МАФАнМ; делений |

гидробионтов и готовых определение присутствия

продуктов 2)бактерий группы кишечных

палочек:

3)бактерий рода Proteus;

4)St. aureus;

5)сальмонелл;

6)мэзофильных клостридий

2.Идентификация выде- 1.Бактериологические методы 158 штаммов|

ленных штаммов (Shewan I.M. et al., 1960)

2.Световая микроскопия

3.Биохимические определения

на средах Гисса и в других

тестах (Лабинская A.C.1978

3.Конструирование мо- 1.Экспериментальный метод 56 серий |

дели бактерицидного

экстракта

4.Изучение антимикроб- 1.Бактериологические методы 335 опреде-|

ной активности извес (Дмитриева В. С., Семенов С.М лений |

тных антибиотиков, 1965)

антисептиков и вод- 1 t t

Продолжение таблицы 1

1 2 1 3 1

ного экстракта кз

липидов рыб in vitro

5. Изучение основных по 1.Химические методы: опреде- 130 опреде-|

казателей качества ление перекисного числа, сум лений |

бактерицидного экст- мы СЖК, формальдегида (ГОСТ

ракта 7636-85; Городниченко Л.В. и

др., 1979)

2. Бактериологические методы: 280 опреде-[

1)Подсчет числа МАФАнМ; лений |

2)определение присутствия

санитарно-показательных

и патогенных бактерий

3.Биологические методы 3 серии |

6.Изучение влияния бак 1.Бактериологические методы: 498 опре- |

терицндного экстрак- 1)Подсчет числа МАФАнМ; делений |

та из липидов рыб и 2)определение присутствия

известных консерван- санитарно-показательных,

тпв на микрофлору в патогенных и споровых

субстрате микроорганизмов 1 |

Результаты проведенных нами исследований по количественному составу микрофлоры морских гидробионтов совпадают с данными других исследователей. Численность бактерий на свежевыловленных гидробионтах колеблется в пределах от 1 х 10" до 1х 10' клеток на 1г.

В процессе технологической обработки на отдельных ее этапах

число микрофлоры на промысловых объектах возрастает.

Увеличению численности микроорганизмов в полуфабрикатах при обработке способствует высокая исходная бактериальная обсемеьсн-ность морских гидробионтов, многочисленные технологические операции. длительность производственного процесса и уровень санитарно-гигиенического состояния производства.

Разделка рыбы после дефростирования, мойки, посола и созревания рыбы способствуют постепенному увеличению общего числа микроорганизмов.

Процессы подкопчения рыбы на 90% и более снижают общую микробную обсемененность продукта и гарантируют полную инактивацию бактерий группы кишечной палочки. Дальнейшие этапы обработки, в том числе нарезка, фасование и упаковка готового продукта, как правило, сопровождаются увеличением численности бактерий за счет их пополнения с оборудования, инвентаря, рук рабочих.

Качественный состав наиболее массовых выделяемых форм бактерий, формирующих в основном микромир исследуемых объектов, представлен неспоровыми формами (табл. ?.).

Спорообразующие микроорганизмы представлены бактериями родов Bacillus и Sporolactobacillus, среди которых встречаются потенциальные возбудители порчи пищевых продуктов и заболеваний человека.

Среди аспорогенных бактерий встречаются представители родов Aeromonas, Vibrio, Pseudomonas и другие, являющиеся потенциальными возбудителями инфекционных заболеваний человека.

Для выбора тест-микроорганизмов, характеризующих всю свойственную морепродуктам микрофлору, нами рассмотрена избирательная способность бактерий к действию химических веществ.

Поскольку в основе индивидуальной чувствительности микроор-гаппомов к различным веществам, как известно, лежит их клеточная

Таблица 2

Родовая характеристика бактерий морских гидробионтов

Род I Число штаммов (в ü) I

1--ь -1

1 Bacillus 1 20,1+/-2, 7

1 Micrococcus 1 13,1+/-2,0

! Staphylococcus 1 11.4+/-4,1

1 Art'nrobacter 1 8, 3+/-4, 1

! Pseudomonas 1 5, 8+/-2.. 2

I Planococcus 1 2, 7+/-0, 4

1 Aeromonas 1 6, 5+/-3, 1

1 Photobacterium 1 2, 9+/-0, e

1 Escherichia 1 4, 4+/-1,3

1 Chroraobacterium 1 2, 9+/-0, Э

! Vibrio 1 3, 4+./-1, 7

: Sporoiactobaci11 us 1 3, 9+/-2, 5

1 Flavobacterimn i 1, 3+/-0, 4

1 Moraxella i 3, 2+/-1, 7

1 Halobacterium 1 0, 7+/-0, 4

1 Erysipelothrix 1 0, 5+/-0, 1

1 Aicaligenes 1 5, 6+/-3, 1

1 Azotobacter 1 0, 9+/-0, 7

1 Kurthia 1 0.3+/-0,1

1 Halococcus 1 0, 4+/-0,1

1 Flexithrix 1 0, 6+/-0, 2

1 Прочие ' 1 i i 0.6+/-0,3

структура, то все микроорганизмы, характеризующие микробные ценозы гидробионтов мы разделили на морфологические группы, учиты-

вая особенности строения их клеточной стенки (табл.3).

Исследования морских гидробионтов после вылова на присутствие грибковой микрофлоры показали отсутствие последней. Однако на этапах технологической обработки происходило дополнительное обсеменение плесневыми и дрожжеподобными грибами, которые в дальнейшем присутствовали и в готовой продукции.

В этой связи для оценки фунгицидного влияния изучаемых препаратов в качестве тест-микроорганизма был использован штачм дрожжеподобных грибов Candida albicans, вызывающий заболевания человека.

Таблица 3

Тест - бактерии для оценки антимикробного действия препаратов

1 i Группа бактерий 1 i i Тест - штамм 1

! 1 i - грамиегативные 1 Е.coli !

1 2 - грампозитивные 1 St.aureus 1

1 3 - спорообразующис 1 Вас.subtil is 1

1 4 i - микроскопические грибы 1 i Cand. albicans 1 i

Указанные тест-штаммы были использованы при оценке антимикробной активности традиционных антисептиков и разрабатываемого нами препарата как in vitro, так и in vivo.

В четвертой главе "Получение бактерицидного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта" приведены сведения о феномене высокой антимикробной активности водной фазы из липидов рыб, описанные d работах Т.Б. Горгиева (1960) и Е. С. Горбуновой (1966), явившиеся основной предпосылкой для изучения бактерицидных свойств экстрактов из рыбьего жира.

Известно, что при окислении и гидролиз? рыбного жира, характеризующегося высокой степенью иснасьнцеиности, происходит накопление низкомолокулярных продуктов дсгралачи:' лшшдоз с г.г«:о-кой подвижностью и реакционной способностью. Высокороакционнко короткоцепочечные продукты окисления и гидролиза липидов способны вызывать необратимые изменения в структуре клетки и обионо веществ у микроорганизмов, обуславливают гибель микробов или остановку их роста.

Знания различных механизмов. гибели микросном клетки под действием веществ с короткой цепью и наличием функциональных групп (Нрасильников А. П. и др.,1990) позволили нам прогнозировать высокую антимикробную активность водных экстрактов из рыбного жира.

В связи с этим были проведены исследования по получению экстракта с большим содержанием водорастворимых антисептических продуктов в результате окисления липидных эмульсий "жир в воде".

Экстракт получали при настаивании смеси рыбьего жира с водой, которую ежедневно перемешивали.

Для определения бактерицидного эффекта водорастворимой фракции применяли стандартные методы дисков, серийных разведений.

Появление антимикробного фактора водорастворимой фракции смеси "вода + рыбный жир" было установлено на 3-5 сутки выдержки при температуре +37°С и +55°С. На скорость нарастания бактерицидного эффекта в экстракте оказывало значительное влияние соотношение рыбного жира с водной фазой. Наибольшее антимикробное действие и его уровень отмечен был при соотношении жира и воды как 1 : 10. Наибольшей антисептической активностью обладал водный экстракт из окисленного рыбного жира, полученный при экстрагировании на питьевой воде в течение 15 - 20 суток при температуре +37°С при соотношении 1 : 10 (рис. 1).

1:Ь 1:4 1:3 1:2 1:1 исх.

I' /

±Д_/|__I

сутки

5 10 15 20

1 - +37°С,

2 - +55°С,

3 - +22° С.

5 10 15 20

1 - вода питьевая,

2 - физ. раствор,

3 •■ вода дистил.

5 10 15 20

Жир:

1 - из сельди иваси,

2 - из печени минтая,

3 - гидрированный,

Рис. 1. Изменение антимикробной активности водорастворимой фракции из липидов рыб в зависимости от температурь; и врэмекл экстрагирования (А), от используемого жира (Б) и водной фазы (В).

На рисунке 2 представлены результаты исследований по накоплению бактерицидного фактора в процессе экстрагирования липидной эмульсии "жир + вода", влияющего иг. разные группы микроорганизмов. Наиболее резистентны к действию экстракта, являются споро-образующие формы, наименее устойчивыми - гра?,¡негативные бактерии.

Рис.2. Действие экстракта на различные груп-

пы бактерий: граы-отрицательные па-—лочковидные (1),

кокковые (2), спо-зутки рообразующче (3)

Разведения 1:5 •

водорастоври .юй1:4 -

фракции 1:3 ■

1:2 -

1:1 -

исх •

5 10 15 20

Таким образом, изучая различимо модели бактерицидного экстракта из липидных эмульсий " жир в поде" мы составили рациональную схему его получения, состоящую из основных 3-х этапов (рис.3).

Рис. 3. Схема получения бактерицидного экстракта

I---т I---1

Iрыбный жир! I вода I

I водно - жировая смесь I

-I------Ч

1 +37°С 15-20 сут. I

I водный I I отработанный I

I экстракт I I жир 4 I

I__I I__I

В пятой главе "Оценка биологической активности водного экстракта из липидов рыб" приводятся результаты сравнения биологического действия экстракта с активностью известных антибиотиков-бензилпенициллина (БП), а также фунгицидного препарата - нистатина.

Для определения количественной характеристики биологической активности экстрактов из липидов при сравнении с таковой БП были использованы те же микробные штаммы различных морфологических групп. Наименьшая концентрация экстракта, при которой установлен бактерицидный эффект, была установлена при разведении его в соотношении 1:5 с физиологическим раствором (табл.4). Подобный эффект у БП проявлялся при концентрации его в 6, 5 тыс. БД. Полная гибель неспоровых клеток, в том числе кишечной и кокковой груп-

Характеристика бактерицидного действия экстракта из липидов рыб и известного антибиотика бензилпснициллина

Бензилпенициллин

Бактерицидный экстракт

Концентрация, ЕД/мл

Т()(Л' ИМ'.иММЫ

К. пп 1 ] М - 17

I Концентра-1

---1-----1 ция разве-Ь

Г>г..аипм!!)|Нлс.аи1Д1Пз| депия I

Тест - штаммы

в. со] 1 М -17

40000 ! - - - 1 исходная

20000 ! - - (- 1 1:1

13000 ! - - 1 1:2

10000 I - - + 1 1:3

8000 1 - + 1 1:4

6500 1 - + + 1 1:5

5500 ! + + + 1 1:6

ангсиц

Обозначения: ( - ) ( + )

роста бактерий не отмечено рост обнаружен

Таблица 4

Сас. .\;иЬ!.1 ] 1з

мы, обеспечивало действие экстракта в соотношении 1:4, что сопоставимо с действие!! БП в я, 0 тыс.ЕД. И^хппч из этого, расчетным путем установлено, что действие бактерицидного экстракта из липидов рыб в исходной нейк-чграции соответствовало влиянию 40,0 тыс.ЕД. Споровые микроорганизмы препарат из рыбного тара угнетал только в исходном состоянии.

Антигрибковую активность определяли по аналогичной схеме, используя тест-штамм Candida albicans. Наименьшая фунгицидная активность экстракта, приравненная к действию нистатина, составила 2,5 тыс. ЕД (табл.5). Расчетным путем было установлено, что фунгицидный эффект экстракта сопоставим г действием нистатина в 7,5тыс. ЕД.

Таблица 5

Характеристика фунгицидного действия водного экстракта

1 1 Экстракт из липидов рыб 1 Нистатин 1

1 1 1 Разведение |Рост тест-штамма I 1 I Активность, ЕД| Рост 1

I 1 1 Исходное 1 1 25000 1

11:1 - ! 5GGG 1 -

11:2 1 2500 1

11:3. 1 | 1 1000 1 + 1 j

Для сравнительной оценки антимикробного действия водного экстракта из липидов рыб нами изучен подобный эффект с традиционными антисептическими препаратами, в том числе сорбиновой кислотой, уротропином и бензойнокислым натрием. Приведенные в табл.6 результаты показывают, что бактерицидный экстракт по силе и спектру влияния на микроорганизмы но уступает антисептическому

Таблица б

Антимикробное действие консервантов при различных концентрациях

Концентрация антисептиков,%

Разбавление экстракта

0,5/ исх. 0,25/ 1:1 0.1/ 1:4 1:5

0,05/ 1:9 0,01

Сорбиновая кислота

Уротропин ! Бензойнокислый ! натрий

Рост тест-микроорганизмов

1 I 2 | 3 _1__!_

Т I Г Г I

II 2 13 111

_I__I_I---L

I + i + I + I

I +

i 4

+ +

Примечание: штаммы 1-Е. coli,

2 - St. aureus,

3 - Bac.subtilis ( + ) - отмечен рост тест-микробов, ( - ) - отсутствует рост

Бактерицидный экстракт

1 I 2

__I__

действию применяемых в технологии рыбной продукции консевантов.

Для определения бактерицидного действия экстракта в продукте, были проведены микробиологические исследования при изготовлении деликатесной малосоленой продукции из дальневосточных лососевых рыб, пробойной икры из минтая, а также при использовании "антимикробного льда" для сохранения свежести рыбы.

На примере результатов исследования, приведенных на рис. 4. следует, что экстракт проявляет более выраженное антимикробное действие на микрофлору соленой икры минтая, чек используемый в технологии рыбных продуктов консервант - бензойнокислый натрий (БКН).

Рис.4. Число бактерий в соленой икре из

Число бактерий в 1 г икры (%)

1С0

50 25

минтая, изготовленной с антисептическими препаратами

БКН

6% 3% 2% 1% Экстракт

Исследования на присутствие плесневых и дрожжелодобных грибов в образцах икры, обработанных экстрактом из липидов рыб, показали их отсутствие. В контрольных образцах продукта, содержащих БКН, грибковые микроорганизмы присутствовали.

Подтверждением выраженного бактерицидного влияния водорастворимой фракции липидов рыб на микроорганизмы, свойственные для морского сырья, являются также результаты исследований при хранении свежевыловленного минтая при хранении его в бактерицидном льду в течение 8 суток. Оргаколептичэские показатели рыбы при

этом соответствовали требованиям, предъявляемым к качеству свежей рыбы, а число микроорганизмов не превышало 1,0 х 10" клеток/г.

В шестой главе "Основные свойства бактерицидного экстракта из липидов рыб" представлены результаты исследований основных показателей качества бактерицидного экстракта из липидов рыб, его безвредности и возможности исполозовать как консервант в пищевых технологиях.

Для определения пригодности в пищевых технологиях бактерицидного экстракта из липидов рыб нами проведены исследования его основных показателей качества. Органолептические показатели включали характеристику внешнего вида, цвета, запаха и наличия посторонних примесей в препарате.

Изучение основных химических показателей сводилась к определению в экстракте содержания продуктов гидролиза и окисления липидов.

Перекисное число в готовом бактерицидном экстракте составляло 175,9 +/-%12, сумма СЖК (в пересчете на миристиновую кислоту) - 52,3 +/-2 мкг, содержание формальдегида - не превышало 10,2+/-1 мкг%.

Проведенные микробиологические исследования показали отсутствие в готовом бактерицидном экстракте всех исследуемых групп микроорганизмов.

В Институте питания РАМН проводились медико-биологические испытания на безвредность бактерицидного экстракта и пригодность его в пищевых технологиях. По результатам комплекса исследований экстракт соответствует "Медикобиологическим требованиям и санитарным нормам качества продовольственного сырья и пищевых продуктов".

Таким образом, результаты исследований бактерицидного экс-

тракта из липидов рыб свидетельствуют о том. что его следует рассматривать перспективным как основу для пищевого консерванта.

ВЫВОДЫ

1. Определен качественный состав микроорганизмов, свойственных для гидробионтов и продуктов из них.

Все микроорганизмы, характерные для морских гидробионтов, по устойчивости к антимикробному фактору разделены на 4 группы:

1 группа - не устойчивые бактерии;

2 группа - малоустойчивые бактерии;

3 группа - спорообразующих бактерий;

4 группа - плесневые и дрожжеподобные грибы.

2. Установлено, что для оценки антимикробного действия пищевых консервантов в технологии рыбных продуктов целесообразно применение в качестве тест-микробов штаммы E.coli, St.aureus. Вас.subtil is и Candida albicans, характеризующие все микроорганизмы, свойственные морским гидробионтам и продуктам из них.

3. Разработана схема получения бактерицидного экстракта из липидов рыб с выраженным антимикробным действием. Активность 1 мл экстракта, при сравнении с традиционными антибиотиками, составила 10 тыс.ЕД.

4. Изучена активность бактерицидного экстракта из липидов рыб при рыб при изготовлении пищевых продуктов. Установлено, что по силе и спектру действия препарат не уступает традиционным пищевым антисептическим консервантам.

5. Водный экстракт из липидов рыб ингибирует развитие аспо-рогенных и спорообразующих бактерий, а также плесневых и дрожже-подобных грибов.

6. Безвредность и техно-химические показатели экстракта позволяют рассматривать его перспективным для использования при изготовлении пищевых продуктов.

7. Бактерицидный экстракт рекомендован для применения г. качестве пищевого консерванта.

Основное содержание диссертации опубликовано в следующих работах:

1. Бывальцева 7. М., Шульгина Л. R., У^.^енина Н. И., Синыкооа 0. В. Микробиологическая характеристика сласосолен^й продукции из лососевых // Тез. докл. Бсес. сов. "Toupi-.-- практика регулирования качества соленой и копченой рыбной проекции". - Владивосток. -1889. - С. 8-9.

2. Шульгина Л.В., Блинов Ю.Г., Акулин В.Н., Бывальцева Т.М., Давлетшина Т.А.. Рыбин В.Г. Сравнительная оценка консервируешь -и действия антимикробного препарата и антисептиков, используемых в технологии рыбных продуктез // Изв. ТИНРО. - Владивосток. - 1S95. - т. 118. - С. 32-35.

3. Андреев Н.Г., Бывальцева Т.М., Миленина Н.И., Соловьева Г.Ф., Тимчишина Г. Н., ЧибирякЛ.М., Чумак А.Д. Влияние различных факторов на качество малосоленой продукции из лососевых // Изв. ТИНРО. Владивосток. - 1995. - т. 118. - С. 165-173.

4. Шульгина Л.В., Загородная Г.И., Шульгин Ю.П., Бывальцева Т.М., Галкина Л.М. Микрофлора дальневосточных морей и её влияние на продукцию из промысловых гидробионтов // Гигиена и санитария. 1995. - N 1. - С. 14-16.

5. Давлетшина Т.А., Бывальцева Т.М., Рыбин В.Н., Спатко С.В., Акулин В.Н. Использование нового пищевого консерванта при изготовлении пресервов специального посола из тихоокеанской сельди // Тез.докл.юбил. научной конференции "Рыбохозяйственные исследования океана" - Владивосток. - 1996. - С. 22-23.

6. Давлетшина Т. А., Рыбин В. Н., Блинов Ю. Г., Шульгина Л. В., Бывальцева Т.М., Акулин В.Н. Сравнительная оценка бактерицидного

действия водных экстрактов из липидов морских рыб // Тез. докл.юбил. научной конференции "Рыбохозяйственные исследования океан*" - Владивосток. - 1996. - С. 21-2?.

7. Давлетшина Т. А., Блинов ¡0. Г., Шульгина Л. В., Бывальцева Т , Получение нового антимикробного препарата на основе липи-."лв рыб // Тез.докл.конференции "Экология пищи:химичесиие взаимодействия в пищевых системах". - Ставрополь, 1936. - С. 119-120.

В. Бывальцева Т.М., Шульгина Л.3., Давлетшина Т.А., Блинов ¡0.Г.. Акулин В.Н. Сравнительное изучение действия нового пищевого консерванта и антисептиков рыбных продуктов // там же. С. 118-119.

9. Давлетаина Т. А., Шульгина Л.В., Блинов Ю.Г., Сватко С.Е., Бывальцева Т.И. Использование антимикробного препарата при изготовлении пресервов из мойвы (Ма11оиш уШозиэ) // там же. С. 116-117.

5 0. Давлетшина Т.А., Шульгина Л.В., Блинов Ю.Г., Бывальцева Т.М., Будаева Г.В. Использование нового пищевого консерванта при изготовлении соленой лососевой икры // там же. С. 117-118.

11. Горшкова М.М., Блинов Ю.Г., Шульгина Л.В., Бывальцева Т.М. Способ получения зернистой лососевой икры // Патент N 2031584.

12. Блинов ¡0. Г., Шульгина Л. В., Горшкова М. М., Акулин В. Н., Давлетшина Т.А., Бывальцева Т.М. Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и способ приготовления рыбных продуктов с его использованием // Патент N 2043725.

13. Пивненко Т.Н., ЭпштейнЛ.М., Шульгина Л.В., Блинов Ю.Г., Бывальцева Т.М., Давлетшина Т.А., Серых А.В. Способ приготовления икры рыб II Положительное решение о выдаче патента ,на изоб-

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Бывальцева, Татьяна Михайловна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Микроорганизмы морских гидробионтов и их влияние на качество морепродуктов.

1.2. Антисептические препараты и вещества в технологии рыбных продуктов

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ, НАПРАВЛЕНИЯ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Направления и материал для исследований.

2.2. Методы исследований.

ГЛАВА 3. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РЫБНОГО

СЫРЬЯ, ПОЛУФАБРИКАТОВ И ГОТОВЫХ

РЫБНЫХ ПРОДУКТОВ.

3.1. Санитарно-микробиологическая характеристика морских гидробионтов и продукции из них.

3.2. Родовой состав бактерий морских гидробионтов. Выбор тест-микроорганизмов для оценки влияния антимикробных веществ.

ГЛАВА 4. ПОЛУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИПИДОВ РЫБ КАК ОСНОВЫ ПИЩЕВОГО

КОНСЕРВАНТА.

ГЛАВА 5. ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

ВОДНОГО ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИПИДОВ РЫБ.

ГЛАВА 6. ОСНОВНЫЕ СВОЙСТВА БАКТЕРИЦИДНОГО

ЭКСТРАКТА ИЗ ЛИПИДОВ РЫБ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта"

Одним из основных критериев пищевых производств является безопасность выпускаемых продуктов. Наибольшую опасность в пищевых технологиях представляют микроорганизмы - возбудители порчи сырья и продукции, заболеваний человека, а также токсические продукты их жизнедеятельности.

В системе рыбного хозяйства за счет микробной порчи ежегодно теряется до 25% рыбного сырья и продукции из него. Негативному влиянию микроорганизмов наиболее подвержены те продукты, технологическая схема получения которых не обеспечивает гибели бактерий, контаминируемых выловленные промысловые объекты и полуфабрикаты, в процессе обработки. Это пресервы, икорные, малосоленые, копченые и фаршевые рыбные продукты.

Основным консервирующим фактором в технологии указанных продуктов является хлорид натрия, который стабилизирует развитие наземных штаммов бактерий, но остается негативным в отношении морских галотолерантных и галофильных форм. Перечень консервантов, обладающих выраженным антимикробным действием, также ограничен за счет строгих требований к использованию в качестве добавок при изготовлении пищевых рыбных продуктов.

Проблема использования эффективных консервантов в технологии рыбных продуктов была развита работами А.М.Теплицкой, Е.Н. Дутовой, Г.Б.Дубровой, С.И.Ивановой и других исследователей. Изучено влияние различных веществ на микробную обсемененность и качественные показатели продукции, рекомендованы действующие концентрации препаратов при изготовлении продуктов, определены сроки хранения.

Однако химическая природа используемых консервантов, ограниченность их использования за счет токсичности, избирательность ингибирования бактерий, а также влияние на вкус, окраску, запах и консистенцию не позволяют широко использовать их в пищевых технологиях. Недостаточная изученность природных материалов, как животного так и растительного происхождения, в составе которых присутствуют соединения с выраженным антимикробным действием, не позволяет расширить круг использования пищевых консервантов в рыбоперерабатывающей промышленности.

Скрининговые исследования гидробионтов в этом направлении, отдельных соединений в их органах и тканях крайне малочисленны и ограничиваются сведениями о бактерицидном действии жирных кислот. В этой связи, исследование липидных фракций с выраженным бактерицидным действием из морских рыб являются актуальными, представляют интерес для науки и практики, позволяют определить пути получения новых антисептических препаратов природного происхождения.

ЦЕЛЬЮ настоящей работы явилось изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб и обоснование возможности его использования в пищевых технологиях.

Для достижения цели были поставлены и решены основные задачи:

- исследование микрофлоры морских рыб, полуфабрикатов и готовой продукции из них;

- выбор тест-микроорганизмов, свойственных морским гидро-бионтам, для оценки бактерицидного действия антисептиков и новых препаратов в технологии рыбных продуктов;

- разработка способа получения водорастворимой фракции из рыбного жира с выраженным антимикробным действием;

- изучение антибактериальной активности водного экстракта и основных его показателей;

- проведение сравнительной оценки антимикробной активности экстракта из липидов рыб и препаратов из липидов животного и растительного происхождения, а также с активностью традиционных пищевых консервантов;

- медико-биологическая оценка экстракта на безвредность и возможность применения в пищевых технологиях;

- изучение силы и спектра антимикробного действия экстракта из липидов рыб.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ.

Впервые установлена возможность получения высокоэффективного бактерицидного экстракта из липидов рыб как основы для нового пищевого консерванта.

Разработан способ получения бактерицидного препарата на основе липидов рыб с выраженным антимикробным эффектом. Новизна разработки подтверждена патентом РФ N 2043725 от 12.08.92 г. "Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и способ приготовления рыбных продуктов с его использованием".

Установлена абсолютная безвредность бактерицидного экстракта при использовании в пищевых технологиях.

Экспериментально обоснованы перспективы применения водного экстракта из липидов рыб в пищевых технологиях.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

На основе анализа и обобщения результатов научных и экспериментальных исследований разработаны и предложены:

- способ получения нового консерванта на основе липидов рыб, техническое решение которого подтверждено патентом РФ на изобретение N 2043725 от 12.08. 92 г."Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и способ приготовления рыбных продуктов с его использованием";

- действующие концентрации бактерицидного экстракта на различные виды микроорганизмов;

- способ приготовления икорных продуктов с применением бактерицидного экстракта, техническое решение которого подтверждено патентом РФ на изобретение N 2031584 от 06.07.92 г. "Способ приготовления зернистой лососевой икры" и положительным решением о выдаче патента на изобретение по заявке N 94042348/13/042761 от 30.11. 94 г. "Способ приготовления икры рыб".

Выполнение и апробация работы. Все научные экспериментальные работы были выполнены в ТИНРО и в производственных условиях на рыбообрабатывающих предприятиях Дальнего Востока.

По теме диссертации опубликовано 10 работ, получено 2 патента РФ на изобретения (N2031584 от 06.07.92 г., N 2043725 от 12.08.92 г.), получено положительное решение о выдаче патента на изобретение по заявке N 94042348/13/042761 от 30.11.94 г. и разработан комплект нормативно-технической документации (Тй по изготовлению антимикробного препарата N

36-20-96 от 21.06.96 г., ТУ N 9281-021-00472012-96 "Препарат антимикробный").

Результаты настоящей работы были представлены и доложены на заседаниях Технической секции ученого совета ТИНРО, на Всесоюзном совещании "Теория и практика регулирования качества соленой и копченой рыбной продукции" (Владивосток, 1989); юбилейной научной конференции "50 лет Дальрыбвтузу" (Владивосток, 1996); Всероссийской конференции "Современные достижения биотехнологии" (Ставрополь, 1996).

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

2. Оценка антимикробной активности и основных показателей водного экстракта из липидов рыб.

3. Рекомендации по использованию бактерицидного экстракта в качестве пищевого консерванта.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Бывальцева, Татьяна Михайловна

выводы

1. Определен качественный состав микроорганизмов, свойственных для гидробионтов и продуктов из них.

Все микроорганизмы, характерные для морских гидробионтов по устойчивости к антимикробному фактору разделены на 4 группы:

1 группа - не устойчивые бактерии

2 группа - малоустойчивые бактерии

3 группа - спорообразующих бактерий

4 группа - плесневые и дрожжеподобные грибы

2. Установлено, что для оценки антимкробного действия пищевых консервантов в технологии рыбных продуктов целесообразно применение в качестве тест-микробов штаммы Е.coli М-17, St.aureus, Bac.subtilis и Candida albicans, характеризующие все микроорганизмы, свойственные морским гидробионтам и продуктам из них.

4. Изучена активность бактерицидного экстракта из липидов рыб при изготовлении пищевых продуктов. Установлено, что по силе и спектру действия препарат не уступает традиционным пищевым антисептическим консервантам.

5. Водный экстракт продуктов окисления липидов рыб ингибирует развитие аспорогенных и спорообразующих бактерий, а также плесневых и дрожжеподобных грибов.

6. Безвредность и технохимические показатели экстракта позволяют рассматривать его перспективным для использования в пищевых технологиях.

7. Бактерицидный экстракт рекомендован для использования в качестве консерванта в пищевых технологиях.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Микробный фактор в пищевых технологиях является основной причиной значительных потерь морского промыслового сырья и продуктов из него. Учитывая это, в технологии рыбных продуктов на протяжении многих десятилетий остро стоит проблема сохранности и качества выпускаемой продукции.

Проведен анализ литературных сведений отечественных и иностранных исследователей по вопросам микробной контаминации различных промысловых объектов Дальневосточных морей, различных морепродуктов, по способам сохранения готовой рыбной продукции и предотвращения ее от микробной порчи, по изменению количественного и качественного состава микрофлоры в процессе изготовления и хранения продуктов.

Обзор литературы позволил сделать вывод о том, что все готовые продукты из морских объектов, за исключением стерилизованных консервов, обсеменены в той или иной степени микроорганизмами, которые сохранились в полуфабрикатах на всех этапах обработки, а также дополнительно внесенными с оборудования и инвентаря.

Вместе с тем, анализируя данные литературы, установлено, что накопленные знания по указанным разделам носят случайный выборочный характер, не дают полного представления о микробиологических процессах в объектах промысла от момента вылова до получения готового продукта и о закономерностях формирования в них остаточной микрофлоры.

В этой связи нами были проведены комплексные исследования микрофлоры морских гидробионтов, полуфабрикатов по этапам технологической обработки и выпускаемых из них продуктов. Выполнение указанных работ позволило определить микробные ценозы морских гидробионтов и рыбной продукции, выявить основные массовые виды бактерий, на которые должны оказывать ингибирующее действие все пищевые консерванты, применяемые в производстве рыбопродукции.

Выполнение первого этапа работ включало санитарно-микробиологическую оценку гидробионтов и полуфабрикатов при изготовлении продуктов.

Быстрое замораживание выловленных объектов, их длительное хранение при температуре минус 18°С и ниже способствует постоянному отмиранию микроорганизмов. Результаты исследований в процессе шестимесячного хранения рыбного фарша из минтая и горбуши при температуре минус 18°С и ниже показали, что бактериальная обсемененность снизилась более чем в 100 раз, а оставшаяся микрофлора была представлена споровыми формами.

Значительному увеличению численности микроорганизмов способствует высокая начальная бактериальная контаминация морских объектов, многочисленность технологических операций, длительность производственного процесса и уровень санитарно-микробиологического состояния производства. Бактериальная обсемененность полуфабрикатов значительно увеличивается по мере перехода от одной операции к другой по схеме.

Изучение результатов бактериальной обсемененности вареной продукции из краба в процессе хранения при различных температурных режимах показало, что варка крабовых конечностей обеспечивает гибель основной части микроорганизмов. Среди остаточной микрофлоры отмечались только бактерии рода Bacillus.При температурах хранения от 0°С и до минус 6°С микробное число быстро увеличивалось, а при температуре минус 18°С - отмечалась тенденция к отмиранию бактерий.

Исследования микрофлоры при изготовлении малосоленой деликатесной продукции из дальневосточных лососевых, полуфабриката из них показали, что обсемененность увеличивается, так как технологический процесс изготовления продукции не включает в себя жесткие режимы обработки.

При получении продукции холодного копчения из сельди тихоокеанской каждая технологическая операция сопровождается увеличением численности микроорганизмов, начиная с сырья и до процесса копчения. Процесс копчения значительно снижает количество МАФАнМ (на 2 логарифмических порядка), полностью ингибирует бактерии группы кишечной палочки и другие патогенные бактерии.

Изучение микробного состояния минтая холодного копчения при хранении, приготовленного с использованием ароматизаторов, ферментов и антисептиков, показало, что в образцах содержащих антимикробные добавки, происходит медленное отмирание микроорганизмов, а в образцах, не содержащих антибактериальных веществ, число микроорганизмов увеличивалось.

Приготовление лососевой икры и соленой пробойной икры из минтая сопровождается увеличением числа бактерий. Полуфабрикат обсеменяется бактериями группы кишечной палочки, появляются плесневые и дрожжеподобные грибы. Посол икры снижает общее число бактерий. Однако после внесения пищевых добавок и фасования микробное число составляет в среднем 6,3х103+/-0,8x10^ клеток/г. В процессе хранения при температуре минус 3°С до 6°С в образцах икры без антисептических препаратов (0,1% сорбиновой кислоты + 0,1% уротропина), бактериологическая обсемененность и число плесневых и дрожжеподобных грибов увеличивалось, отмечались и бактерии группы кишечной палочки. В образцах икры с антисептиками после хранения в течение 7 суток отмечалось ингибирование бактерий группы кишечной палочки, плесневых и дрожжеподобных грибов, значительно снижалось и общее микробное число.

Таким образом, было установлено, что при получении продукции из объектов моря основные технологические операции способствуют увеличению бактериальной обсемененности конечных продуктов.

Микроорганизмы воды и гидробионтов обладают температурным оптимумом роста, приближенным к температуре транспортировки промыслового рыбного сырья, этапам технологической обработки, в силу чего они быстро размножаются на гидробионтах и в их мясе. В результате этого в сырье, возможно, накопление различных продуктов метаболизма бактерий - аммиака, сероводорода и других соединений, влияющих на качество рыбы и продукции из нее.

Исследования ферментативной активности наиболее часто выделяемых микроорганизмов из морских гидробионтов и полуфабрикатов из них позволили установить высокую способность бактерий разрушать органические субстраты, что обусловливает снижение качества готовой рыбной продукции.

Для оценки преобладающей на морских объектах и остаточной микрофлоры в рыбной продукции была проведена идентификация наиболее часто выделяемых микроорганизмов из морепродуктов.

Изучая качественный состав микрофлоры морских гидробионтов было установлено, что преобладающая часть ее представлена аспорогенными бактериями, среди которых нередко встречаются бактерии родов Arthrobacter (8,8%), Aeromonas (6,5%), Pseudomonas (5,7%), Alcaligenes (5,1%). Спорообразую-щие микроорганизмы представлены, в основном, бактериями рода Bacillis (20,2%) и Sporolactobaci1lus (3,8%), среди которых встречаются потенциальные возбудители бомбажной порчи консервированных и колбасных продуктов, в том числе Bac.macerans, Вас.polymyxa, а также возбудителей заболеваний человека - Bac.cereus.

Поскольку известно, что в основе индивидуальной чувствительности микроорганизмов к различным препаратам лежит их морфологическая и клеточная структура, в связи с этим все все идентифицированные нами микробные штаммы, наиболее часто выделяемые из морских гидробионтов, были условно разделены на 4 группы, для каждой из которых был обоснован тест-штамм.

Более чувствительной к влиянию химических факторов является группа неспоровых грамнегативных палочковидных бактерий, которую представляет тест-штамм E.coli.

Вторую группу составляют грамположительные бактерии, характеризующиеся повышенной устойчивостью по сравнению с грамотрицательными формами, обусловленной повышенным содержанием пептидогликана в клеточной стенке . В качестве тест-микроорганизма, характеризующего эту группу бактерий, был выбран стандартный штамм St.aureus.

Значительной резистентностью к химическим веществам обладают бактерии рода Bacillis и другие спорообразующие виды, которые и составляют третью группу микроорганизмов. Для характеристики резистентности этой группы был выбран тест-штамм Вас.subti1 is.

Для оценки фунгицидного влияния изучаемых препаратов нами был использован тест-штамм из дрожжеподобных грибов - Candida albicans.

Таким образом, проведенные комплексные исследования позволили нам установить основные микробные ценозы морепродуктов, выбрать и обосновать тест-штаммы для оценки ингибирующего действия консерванта на микроорганизмы, свойственные морским гидробионтам.

Поиск новых антисептических препаратов морского происхождения проводился с анализа литературных сведений.

Среди веществ, обладающих антимикробным действием, и выделяемых из морских гидробионтов, наибольшее внимание исследователей привлекают липиды морских рыб, представляющие собой комплекс потенциальных бактерицидных соединений. Известны многочисленные работы по изучению ингибирующего влияния на бактерии различных липидных соединений, в том числе жирных кислот, фосфолипидов, эфиров, спиртов и других.

Наибольший интерес для нас привлек феномен антимикробной активности водной фазы из липидов рыб, описанный в работах Горгиева Т.Б. при создании им аутовакцин.

По нашему мнению этот феномен обусловлен накоплением водорастворимых низкомолекулярных продуктов гидролиза и окисления липидов с высокой реакционной способностью.

Знания различных механизмов гибели микробной клетки под действием веществ с короткой цепью и наличием функциональных групп позволили нам прогнозировать высокую антимикробную активность водных экстрактов из рыбного жира.

В этой связи, мы провели исследования по получению экстракта с большим содержанием водорастворимых антисептических продуктов в результате окисления липидных эмульсий "жир в воде".

Экстракт получали при настаивании смеси рыбного жира с питьевой водой, которую ежедневно перемешивали.

Для определения бактерицидного эффекта водорастворимой фракции применяли стндартные методы серийных разведений. В качестве тест-микроорганизмов были использованы вышеперечисленные тест-культуры.

По истечению 3-5 суток выдержки смеси "жир+вода" при температуре 37°С проявлялся антимикробный эффект, наивысшего значения который достигал через 15 - 20 суток экстрагирования. Экспериментально установлено, что наиболее рациональной фазой для экстрагирования жира является питьевая вода в соотношении с жиром как 10:1.

Следующим этапом исследований явилась оценка антимикробной активности водного экстракта из липидов рыб. Количественную характеристику бактерицидного действия экстракта определяли методом сравнения с известными амтимикробными веществами: бензилпенициллином и нистатином.

Наименьшая концентрация экстракта, при которой установлен бактерицидный эффект, бактерий была при разведении его с физиологическим раствором в соотношении 1:5. Подобное действие соответствовало наименьшей концентрации бензилпенициллина -6500 ЕД. Исходя из этого расчетным путем определено, что антимикробное действие водного экстракта из липидов рыб в исходном его состоянии соответстуют влиянию 40,0 тыс. Е.Д.

В результате изучения биологической активности бактерицидного экстракта и сравнения его действия со стандартными антимикробными веществами - бензилпенициллином и нистатином была установлена сила антимикробного действия.

Антигрибковую активность определяли по аналогичной схеме, используя тест-штамм Cand. albicans. Расчетным путем установлено, что фунгицидный эффект экстракта сопоставим с действием нистатина в 7,5 тыс. Е.Д.

Техническое решение способа получения бактерицидного экстракта из липидов рыб как перспективного антисептического препарата подтверждено патентом РФ на изобретение N 2043725 от 12.08.92 г. "Способ получения пищевого консерванта из природного сырья и способ приготовления рыбных продуктов с его использованием".

Экспериментальным путем был определен процент гибели каждой группы микроорганизмов в зависимости от концентрации бактерицидного экстракта, как in vitro, так и in vivo.

Бактерицидный экстракт представляет собой бесцветную жидкость соломенного цвета со слабым запахом окисленного рыбного жира. Перекисное число его составляет (75,9 +/- 5,0%), сумма СЖК (в пересчете на миристиновую кислоту) составляет 52,3 +/- 2, содержание формальдегида - 10,2 +/- 1 мкг%.

Изучение антимикробного действия экстракта в продукте было проведено на примере влияния на микрофлору икры минтая и малосоленой продукции полученной из дальневосточных лососевых в процессе их хранения, а также на микрофлору свежего минтая, хранившегося в "антимикробном льду".

Результаты исследований явились основой для составления 2 заявок на изобретения, на которые получены патент N 2031584 от 06.07.92 г. "Способ приготовления зернистой лососевой икры" и положительное решение о выдаче патента РФ по заявке N 94042348 /13/042761 от 30.11.94 г. "Способ приготовления икры рыб".

Хранение экстракта в течение 1 года в условиях бытового холодильника не утрачивает его антимикробной активности.

Изучение влияния различных способов обработки бактерицидного экстракта (замораживание, кипячение,сублимация) оказало, что изменения антимикробной активности и органолепти-ческих показателей происходит только после сублимирования.

Медико-биологические исследования на безвредность для человека были проведены в Научно-исследовательском институте питания РАМН. Получено заключение о пригодности использования бактерицидного экстракта в пищевых технологиях.

Таким образом, комплекс проведенных исследований позволил нам разработать новый экологически чистый антимикробный препарат рыбного происхождения. Перспективность его использования в качестве консерванта обусловлена выраженной антимикробной активностью, не уступающей по силе и спектру действия химическим реагентам, безвредностью для организма человека, простотой и доступностью при его получении.

На основании проведенных исследований были разработаны и утверждены Технологическая инструкция по изготовлению антимикробного препарата N 36-20-96 от 21.06.96 г. и Технические условия N 9281-021-00472012-96 "Препарат антимикробный".

Для. проведения исследований по использованию препарата при изготовлении рыбных продуктов была выпущена опытно-производственная партия его в производственных условиях на БАТМ "Бородино" в 1995 г.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Бывальцева, Татьяна Михайловна, Владивосток

1. Отечественная литература.

2. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные вещества.- Ленинград: Наука, 1985.1. С. 230.

3. Андрусенко П.И. Технология обработки рыбы на судах. М.:Пищ.пром сть, 1979 - 155 с.

4. Арапова И.Р., Мрочков К.А. Применение нового консерванта при изготовлении зернистой икры осетровых // Рыбн.хоз-во, 1975 N5., С. 71 - 72.

5. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз.,1961. - 180 с.

6. Баль В.В. Технология рыбных продуктов. М.: Пищ. пром-сть.- 1980 - С. 234.

7. Беленева И.А., Быстрова А.Н. Сравнительное изучение биохимических свойств Listeria monocytogenes при разных температурах культивирования // Экология патогенных бактерий. -Новосибирск, 1994.- С. 164-171.

8. Беленева И.А. Психрофильность Listeria monocytogenes и ее эколого-эпидемиологическое значение. Автореф. дисс. на соиск.учен.степ.канд.биол.наук.- Владивосток, 1996.- 29 с.

9. Беленева И.А., Сомов Г.П., Тимченко Н.Ф., Дзадзиева М.Ф., Бузолева Л. С. Психрофильность патогенных бактерий

10. Эколого-эпидемическое значение // Вестник ДВО РАН.-Владивосток: Изд. ДВО РАН, 1996.- N1.- С 35-39.

11. Бойко А.В., Погорелова Н.П., Журавлева Л.А., Ларцева Л.В. Микробная обсемененность икры рыб осетровых пород // Гиг. и сан., 1993. N11. - С. 30-31.

12. И. Борисочкина Л.И. Антиокислители, консерванты, стабилизаторы, красители, вкусовые и ароматические вещества в рыбной промышленности.- М.: Пищ.пром-сть, 1976.- 182 с.

13. Борисочкина Л.И., Гудович А.В. Производство рыбных кулинарных изделий.- М.: Агропромиздат, 1989 312 с.

14. Борисочкина Л.И. Меры предотвращения ботулизма и сальмонеллеза рыбных продуктов.- М.: ВНИЭРХ.- 30 с.

15. Борисочкина Л.И. Современное производство пищевой продукции из сельдевых рыб // Рыб.хоз-во, 1996. N4.- С. 53 -56.

16. Бусалов А.А. Антисептики // Руководство по хирургии.-М.: Медицина, 1962.- т.1- С. 175-190.

17. Быкова А.В., Судьина Н.М. Санитария и гигиена рыбообрабатывающего производства. М.: ДНИИТЭИРХ, 1986.-Вып.2.- 55 с.

18. Венецкий И.Г., Кильдышев Г.С. Основы теории вероятности и математической статистики. М.: Статистика, 1968. - 360 с.

19. Верхотурова Ф.И. Производство продукции горячего копчения из мелких океанических рыб // Рыбн.хоз-во,1983 N3-С.74-76.

20. Верхотурова Ф.И., Биденко М.С., Одинцова Т.С. Оценка и состав некоторых конбинированных продуктов // Рыбн. хоз-во, 1995.- N10.- С. 61-63.

21. Вербина Н.М. Гидробиология с основами общей микробиологии.-М.: Пшц.пром-сть, 1980. 288 с.

22. Воробьев А.А., Быкова А.С., Пашков Е.П., Рыбакова A.M. Микробиология.- М.: Медицина, 1994. 287 с.

23. Воскресенский Н.А. Посол, копчение и сушка рыбы. -М.: Пищ. пром-сть, 1966.- 562 с.

24. Галицкий А.Б. Антисептика. М.: Медицина, 1975.- 38 с.

25. Головкин Н.А., Маслова Г.В., Скоморовская И.Р. Рыба глубокого охлаждения.- М.: ЦНИИТЭИРХ.- 1972.- 62 с.

26. Гончар В.И., Шульгина Л.В. Микробиологические исследования районов промысла лососевых и рыбопродукции из них // Биологические ресурсы шельфа, их рациональное использование и охрана. Владивосток: ТИНРО, 1983. - С. 21 - 22.

27. Гончаров A.M., Дьяков A.M. Совершенствование технологии посола при изготовлении рыбы горячего копчения // Исследования по технологии рыбных продуктов.- М.: Изд.ВНИРО, 1986.- с.36-38.

28. Горбунова Е.С. Исследование эффективности различных дизентерийных вакцин и стимулирующего влияния ацетоксана на дизентерийный иммуногенез. // Автореф. канд.дис.на соиск. учен, степ.- канд.мед.наук. Владивосток, 1966. - 15 с.

29. Горгиев Т.Б. К усовершенствованию методов изготовления аутовакцин. // Термические и практические вопросы иммунологии. Киев.: Здоровье, 1958. - С. 309.

30. Горгиев Т. Б. О пригодности аутовакцин с применением бактерицидных факторов рыбьего жира // Лаб.дело, 1960. -С. 43-44.

31. Городниченко Л.В., Байдалинова Л.С., Биденко М.С. и др., Определение формальдегида в мышечной ткани рыбы какпоказатель ее качества // Изд.АтлантНИРО, Исследования по технологии рыбных продуктов. Калининград.- 1979 - С. 8 - 15.

32. Григорьев Ю.И., Янишевский А.С., Пшеничнов В.А., Шульгин Ю.П. Некоторые аспекты санитарно-микробиологических исследований производства консервов из мяса криля // Исследования по технологии новых объектов промысла. Владивосток: ТИНРО, 1980.- С.85-90.

33. Григорьев Ю.И., Гончар В.И., Шульгина Л.В., Галкина Л.М., Коростелев Ю.С., Шульгин Ю.П. Санитарно-микробиологичес-кие исследования лососевых рыб и воды в районах промысла на Камчатке // Гиг. и сан., 1985. N2. - С. 65 - 67.

34. Григорьев Ю.И. Санитарно бактериологические исследования рыбной полукопченой колбасы. // Гиг.питания, 1991.-С. 27

35. Гудкова Е.И., Красильников А.П. Контроль за микробной контаминацией антисептиков и дезинфектантов // Лабор. дело, 1991.- N 1.- С. 59-61.

36. Гудович А.В. Контрольные установки рыбной промышленности.- М.: ЦНИИТЭИРХ, 1972.- сер.4. вып.З.

37. Дмитриева B.C., Семенов С.М. Микробиологический контроль активности антибиотических препаратов.- М.:Медицина, 1965.- С. 20-75.

38. Долбиш Г.А., Носкова В.И. Замораживание океанической рыбы горячего копчения. // Рыбное хоз-во, 1971.- N6.- С 64-65.

39. Дутова Е.Н., Гофтарш М.М. Сравнительная характеристика микрофлоры сельди, упакованной в жестяные и полиэтиленовые банки // Труды НИКИМРП. Л.:Изд.НИКИМРП, 1971. - т.6. - С. 133-136.

40. Дутова Е.Н., Гофтарш М.М. Эффект от внесения стерильных (облученных) специй в пресервы из кильки. Материалы рыбохозяйственных исследований Северного бассейна. Мурманск. :Изд.ПИНР0, 1972.- С. 84-94.

41. Дутова Е.Н., Гофтарш М.М., Призренова И.И., Сазонова А.С. Техническая микробиология рыбных продуктов.-М.:Пищ.пром.-сть, 1976.- 272 с.

42. Егоров Н.С. Микробы-антогонисты и биологические методы определения антибиотической активности. М.: Высшая школа, 1965.- 367 с.

43. Егоров Н.С. Основы учения об антибиотиках. М.: Высшая школа, 1979.- 455 с.

44. Ермольева З.В., Буяновская И.С. Ароматообразующие микробы сельди и тузлука //Вопр.питания, 1934.- N3. С. 8-12.

45. Емельянова В. А. Применение биомицинового и сульфити-рованного льда для сохранения качества свежей рыбы // "Рыбные ресурсы водоемов Казахстана и их использование".- Алма-Ата, 1972.- вып.7.- С.187-191.

46. Жадин В.И., Родина А.Г. Биологические основы водоснабжения и очистки вод // Жизнь пресных вод. М.: Изд. АН СССР, 1950. - т. 3. - С. 779-804.

47. Исполатовская М.В., Шапошникова Г.М. Клеточные стенки бактерий //Ж. МЭЙ, 1973.- N8.- С.103-108.

48. Иванова С.И. Микробиологические исследования пресер-вов//Микробиология, 1940.- т.9.- вып. 7-8. С. 151-153.

49. Иванова С.И. О простом методе оценки баночных пресервов//Рыбн. хоз-во, 1953. N4. - С. 17-19.

50. Иванова С. И. О бомбаже рыбных баночных пресервов и газообразующих процессах в них // Рыбн.хоз-во, 1956.- N10.-С.18-21.

51. Иванова С. И. Активность микрофлоры в пресервах при различных условиях хранения // Научно-технический бюллетень.-Л.:НИ-КИМРП, 1956.- N1. С.21-26.

52. Иванова С.И. Анализ микрофлоры рыбных продуктов в связи с технологией их изготовления. Автореф. дисс. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. - Ленинград, 1959. 23 с.

53. Иванова С.И., Гофтарш М.М. Методы микробиологического исследования соленых сельдевых. // Рыбн. хоз-во, 1965. N4. С. 57 - 58.

54. Игнатьев А.Д. О гигиенических свойствах некоторых пищевых консервантов //Вопр.питания, 1964. N5. - С. 6 - 12.

55. Казаков A.M. Микробиология мяса.- М.: Пищепромиздат. 1952. - 207 с.

56. Калаковский Э. Технология рыбного фарша. М.: Агропромиздат, 1991. - 220 с.

57. Калантарова М.В., Волгушева З.П., Головченко В.Н., Черемина Е.П. Применение консервантов при изготовления зернистой баночной икры осетровых // Тр. Касп.НИРХ. М.: Пищ.пром-сть. - 1968. - т.24. С. 222 - 233.

58. Калина Г.П. Рациональная схема идентификации Pseudo-monas aeruginosa при массовых исследованиях объектов окружающей среды // Гиг. и сан., 1983. N11 - С. 58 - 63.

59. Кардашев К.П. Нормирования муравьиной кислоты в консервированных продуктах // Изв.НИИ пищ. и вкус, пром.-сть Наркомснаба СССР. М.: Снабтехиздат, 1932. - С. 27-31.

60. Квитницкая Н.М., Костовецкий Я.И., Путилина Н.Т. Микробный метод обесфеноливания сточных вод. Киев: Здоров'я, 1964. - 86 с.

61. Кейтс М. Техника липидологии. (перевод с англ. д.х.н. Вавера В.А.). М.: Мир, 1975. - 322 с.

62. Кизеветтер И.В., Макарова Т.И., Зайцев В.П., Миндлер Л.П., Подсевалов В.Н., Лагунова Л. Л. Технология обработки водного сырья //Изд. 2-е перераб. и допол.- М.: Пищ.пром-сть, 1976.- 695 с.

63. Ким Э.Н. Сушка, вяление и копчение рыбы // Владивосток, Изд-во Дальрыбвтуз, 1989. С. 64 - 88.

64. Клевакин В.М., Карцев В.В. Санитарная микробиология лицевых продуктов. Л.: Медицина, 1986. - 286 с.

65. Кондратьева С.И. К оценке метода дифференциации грам-положительных и грамотрицательных бактерий при помощи 3% раствора КОН // Лаб. дело, 1982. N.1. - С. 54 - 55.

66. Копняева Е.Б., Еременко Т.Я., Лашин И.И., Базилевич В. И. Микрофлора пресервов из моллюска трубача // Рыбн. хоз-во, 1994. N2.- С. 51 - 52.

67. Копыленко Л.Р., Громова В.А., Курлапова Л.Д., Ширманов Н.А., Леонтьев К.А., Камачкова Р.А. // Рыбн. хоз-во, 1994.- N5.- 53 С.

68. Красильников Н.А. Определитель бактерий и актино-мицетов.- Л.: Изд во АН СССР, 1949. - 827 с.

69. Красильников А.П., Адарченко А.А. Индекс активности антисептиков // Лабор. дело, 1989.- N2.- С. 63-66.

70. Красильников А.П., Адарченко А.А. Клиническое значение и методические подходы к определению чувствительности-устойчивости бактерий к антисептикам // Антибиотики и химиотерапия, 1991.- N9. С. 39-44.

71. Красильников А.П., АдарченкоА. А., Собещук О.П. Сопоставление показателей антибактериальной активности антибиотиков и антисептиков // Госпитальные инфекции и лекарственная устойчивость микроорганизмов.- М.:Медицина, 1992. С. 72-74.

72. Красильников А.П., Гудкова Е.И. Лекарственные инфекции // Акт. вопр. микробиологии, эпидемиологии и клиники инфекционных болезней.- Харьков, 1993. 194 с.

73. Красильников А.П. Справочник по антисептике.- М.: Выш. шк., 1995. 367 с.

74. Краткий определитель бактерий Берги. М.: Мир, 1980,- 496 с.

75. Крисс А.Е. Морская микробиология (глубоководная). -М.: Изд. АН СССР, 1959. 462 с.

76. Крисс А.Е. Микробное население Мирового океана М.: Изд. АН СССР, 1964. - 276 с.

77. Куликов А.Н. Микрофлора зернистой икры осетровых ее изменения при пастеризации // Тр. ВНИРО.- М.:Изд.ВНИР0, 1952, т.23,- С. 29 37.

78. Курко В.И., Петрова А.В. Бактерицидные свойства коптильных компонентов древесного дыма. // Тр. ВНИИМПИ.-М.:Изд.ВНИИМПИ, 1962.- N11.- С. 119 127.

79. Курко В. И. Химия копчения. М.: Пищ.пром-сть, 1969.-343 с.

80. Лабинская А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1978.- 394 с.

81. Леванидов И.П., Базилевич В.И., Колгина В.Ф. Технология формованных вяленых рыбных продуктов// Исследования по технологии новых объектов промысла.- Владивосток: ТИНРО, 1980.- 77 с.

82. Леванидов И.П., Ионас Г.П., Слуцкая Т.Н. Технология соленых, копченых и вяленых рыбных продуктов. М.: Агропромиздат, 1987. 160 с.

83. Лбова Е.И., Волгушева З.П., Черемина Е.П. Применение антисептиков при консервировании икры осетровых // Сборник статей по технике добычи и технологии обработки рыб Каспийского моря.- Астрахань:Изд. КаспНИРО, 1963. С. 49-52.

84. Левиева Л.С. Хранение баночных пресервов, изготовленных из кильки в условиях регулируемых температур // Бюллетень по обмену опытом и новой техники.-Л.:Изд. НИКИМРП, 1956. N 6/7. - С. 15 - 18.

85. Левиева Л. С. Влияние различных концентраций соли на созревание и стойкость баночных пресервов// Научно-технический бюллетень НИКИМРП.- Л.:Изд. НИКИМРП, 1956. N2. - С. 17 -20.

86. Левиева Л.С.,Иванова С.И. Влияние различных дозировок сахара на созревание и стойкость пресервов. // Рыбн. хоз-во, 1960 N5. С. 36 - 38.

87. Левиева Л.С., Иванова С.И. Влияние антисептика на созревание и стоцкость баночных пресервов //Научно-техническийбюллетень НИКИМПРП. -JI.: Изд.НИКИМРП, 1961. N 9 - 10. -С. 17-19.

88. Лемешек-Ходоровская К. Химические консерванты для пищевых продуктов.- М.: Пищ. пром-сть, 1969. - 104 с.

89. Либерман С.Г., Петровский В.П. Справочник по производству пищевых животных жиров.- М.: Пищ.пром-сть, -1972. 487 с.

90. Макарова Т.И. Пастеризация икры осетровых рыб // Тр. ВНИРО. М.: Изд. ВНИРО, 1952. - т. 23. - С. 15 - 18.

91. Макарова Т. И. Усовершенствование процесса приготовления пастеризованной зернистой икры // Рыбн. хоз-во, 1952. -N7. С. 16 - 18.

92. Макарова Т.И. Характеристика рыбы как промышленного сырья // Технология рыбных продуктов.- М.: Изд.ВНИРО, 1965. -С. 7 97.

93. Макарова Т. И. Консервирование зернистой икры осетровых рыб с применением уротропина и фосфатов // Тр. ВНИРО. М. : Изд. ВНИРО, 1972.- т. 88.- С. 14-23.

94. Мезенова О.Я., Титова И.М., Бессмертная И.А. Пресервы // Рыбн. хоз-во, 1992. N4. - С. 31 - 32.

95. Михалева В.Ф., Миленина Н.И. и др. Созревание пресервов из сельди иваси при различной температуре хранения // Рыбн. хоз-во, 1983. - N4. - С. 67 - 70.

96. Михалева В.Ф., Бояркина Л.Г., Ярочкин А.П., Пименова М.А. Режимы осадки и созревания полукопченых колбас // Рыбн. хоз-во, 1987. N1. - С. 65 - 67.

97. Михалева В.Ф., Бояркина Л.Г., Якуш Е.В., Косой В.Д. Производство сыровяленых колбас из минтая // Рыбн. хоз-во, 1994. N6. - С. 49 - 51.

98. Митропольский А. К. Техника статистических вычислений. М.: Наука. 1971. - 576 с.

99. Москаленко Т.М. К вопросу о выборе антисептиков для санации краборазделочного оборудования// Тез.докл. научной конф. "Наука и технический прогресс в рыбной промышленности".- Владивосток:Изд.Дальрыбвтуз, 1973. С. 17-18.

100. Москаленко Т.М.Исследование изменений качества крабового мяса в процессе производства консервов "Крабы в собственном соку".- Автореф. дисс, на соиск.учен.степ, канд.техн.наук.- М., 1976.- 25 с.

101. Мудрецова Висс К.А., Чистякова Ф.М. Микробиология.- М.: Экономика, 1971. 263 с.

102. Мухина Л. Б. Микробиологический контроль основа выполнения современных требований к качеству пищевой продукции //Рыбн. хоз-во, 1996. - N3. - 58 - 59.

103. Наместников А.Ф. Химия в консервной промышленности.- М.: Пищ. пром-сть, 1965. 260 с.

104. Наседкина Е.А., Теплицкая A.M. Применение нового антисептика для сохранения качества соленой лососевой икры //Рыбн.хоз-во, 1967. N2. - С. 51 - 53.

105. Никитин В.М. Справочник методов биохимической экспрессиндикации микробов.- Кишинев.: Картя Молодовеняскэ,1986.- 296 с.

106. Никитин Д.И., Никитина Э.С. Процессы самоочищения окружающей среды и паразиты бактерий ( род Bdellovibrio). -М.: Наука, 1978. 203 с.

107. Овчарова Т.П. Применение сорбиновой кислоты в пищевой промышленности. М.: Пищ.пром-сть, 1966. - 110 с.

108. Овчарова Т.П., Масленникова Н.М. Антибиотики в пищевой промышленности. М.: Пищ. пром-сть, 1969. - 99 с.

109. Пат. 4832972 США. МКИ 54 0 А 23 В 4/08. Process for preservation of fish /Toledo Flores Luis Y., Zall Robert R. (США). - N178096. - Заявлено 06,04.88; Опубл. 23.05.89.

110. ИЗ. Пат. N 60-48354 МКИ А 01 35/00, А 23 В 7/14. Антимикробный агент и его изготовление. Инаминэ Сигэо, Асама Касэй К.К. (Япония). Заявлено 13.03.85; Опубл. 13.09.86.

111. Пивоваров Ю.П., Зиневич Л.С., Грачева М.Н. Микрофлора мясных и рыбных продуктов // Гиг. и сан. 1988. -N8. - С. 18-21.

112. Плетнев М.Ю. Косметико-гигиенические моющие средства М.: Химия, 1990. - 272 с.

113. Призренова И.И., Оникиенко А.Я. Микрофлора трески при холодильном хранении // Материалы рыбохозяйственных исследований Северного бассейна. Мурманск: Изд. ПИНРО.-1972. - вып. 20.- С. 68 - 73.

114. Призренова И.И., Школьникова С.С., Микрофлора рыбного фарша.- М.:Изд. ВНИРО, 1975. 32 с.

115. Петрова Е.К.Микробиология пастеризованной икры // За социалистическое рыбное хоз-во, 1931.- N7. С. 61 - 64.

116. Равич-Щербо Ю.А., Иванова С. И. Практическое руководство по микробиологии производства рыбных консервов и пресервов. М.: Пищ.пром-сть, 1967. - 85 с.

117. Разумов А. С. Микробный планктон // Тр. Всес. гидробиол. общ. М.: 1962. - т. 12. - С. 60 - 190.

118. Рей М. Молочнокислые бактериальные культуры при производстве сыровяленых колбас //Мясная индустрия СССР, 1970. N1.- С. 36 -39.

119. Рей М., Кирикал В. и др. Применение концентрированных заквасок при производстве сырокопченых колбас // Мясная индустрия СССР, 1978. -N7.- С. 28 - 30.

120. Ржавская Ф.М. Жиры рыб и морских млекопитающих. -М.: Пищепромиздат, 1976. 470 с.

121. Роберте Г.П., Март Э.Х., Сталс В.Д., Монро А.К., Шарбоно С.М., Ролике Д.В., Полаид А.Е., Доулл Д. Безвредность пищевых продуктов (перевод с анг.) М.:Агропромиздат, 1986.287 с.

122. Родина А. Г. Люминесцентный анализ детрита озер //Докл. АН СССР. М.:Изд.АН СССР, 1963. - т. 149. -С. 434-437.

123. Росивал Л., Энгст Р., Соколай А. Посторонние вещества и пищевые добавки в продуктах. М.: Легк. и пищ. пром-сть. - 1982. - 264 с.

124. Сазыкин Ю.О. Биохимические основы действия антибиотиков на микробную клетку. М.: Наука. - 1965.

125. Слуцкая Т.Н., Миленина Н.И., Ломако И,А. Созревание пресервов из разделанной и нёразделанной мелкой сардины иваси //Рыбн. хоз-во, 1987. N1. - С. 65 - 67.-156130. Слуцкая Т.Н. Созревание соленых рыб // Рыбн. хоз-во,1991. N7. - С. 75-78.

126. Смотряева Е.А., Быкова В.М., Школьникова С. С. Результаты хранения копченой сельди в пленочной упаковке // Рыбн. хоз-во. 1970. - N2. - С. 62-64.

127. Сорокин Ю.И. Численность и продукция бактерий в толще воды центральной части Тихого оекана // Океанол., 1971. т.11. - N1. - С. 105 - 116.

128. Сорокин Ю.И. Бактериальная продукция водоемов // Гидробиол. 1973. - т. 1. - С. 47 -101.

129. Сорокин Ю.И. Роль бактерий в жизни водоемов //М.:Из-во "Знание", 1974, N3. 464 с.

130. Стопский B.C., Ключкин В.В., Андреев Н.В. Химия жиров и продуктов переработки жирового сырья.- М.: "Колос",1992. 285 с.

131. Строкова ,Л.В., Бояркина Л.Г. и др. Химические и реологические показатели колбасных смесей из мяса моржа // Рыб. хоз-во, 1990. N2. - С. 83 - 84.

132. Судьина Н.М. Отечественный и зарубежный опыт разработки продукции из криля: Сер. Обработка рыбы и морепродуктов. М.: ЦНИИТЕИРХ, 1990. - Вып. 3. - 28 с.

133. Теплицкая A.M. Микрофлора соленой лососевой икры // Изв. ТИНРО.- Владивосток: Изд. ТИНРО, 1951.- т. 34.- С. 21-24.

134. Теплицкая A.M. Микрофлора дальневосточной скумбрии // Изв. ТИНРО.- Владивосток: Изд. ТИНРО, 1954.- т. 12.-С. 19-21.

135. Теплицкая A.M., Мякишева А.К., Решетняк М.С. О хранении слабосоленых и копченых рыбопродуктов в полимерных пакетах // Рыбн. хоз-во,- 1969.- N 4.- С. 67-68.

136. Теплицкая A.M., Решетняк М.С. Микрофлора мороженого рыбного фарша // Тр. ТИНРО.- Владивосток: Изд. ТИНРО, 1972.-вып. 3.- 123 с.

137. Томасян Х.М. Контроль на качество на рибате и рибните продукта (пер.) София: Державн. изд. техн., 1984. -288 с.

138. Уерман С. и др. Новое в зарубежной пищевой промышленности.- М.: Пищ. пром-сть, 1966. - 106 с.

139. Уитон Ф.У., Лосон Т.Б. Производство продуктов питания из океанических ресурсов. М.: ВО "Агропромиздат", 1989. - 415 с.

140. Ушаков Р.Ф. Влияние низина (английского) на микрофлору икры осетровых рыб // Тр. ВНИРО.- М.:Изд.ВНИР0, 1972. т. 38. - С. 24 - 32.

141. Уэно Т., Миядзаки Т., Инатакэ Н. Препарат на основе сорбиновой кислоты для добавления в рыбные продукты. Японский пат. кл. 34.0,4 N14104. заявл. 27.03.67., опубл. 20.05.1970.

142. Хван Е.А. Обработка рыбы копчением.- М.: Пищ. про-сть, 1976.- 112 с.

143. Черногорцев А.Н. Влияние температуры и дозы соли на продолжительность созревания каспийской кильки пряного посола //Рыбн. хоз-во, 1953. N9. - С. 41 - 44.

144. Черногорцев А.Н. Влияние сахара на процесс созревания кильки пряного посола // Известия вузов СССР.- М.: Пищ.технология, 1958. N3. - с. 38 - 42.

145. Чиликина Н.С. Условно-патогенная микрофлора бакте-рионейстона. В сб.:" Материалы Всесоюз. симпозиума по изученности Черного и Средиземного морей, использованию и охране ресурсов". Ч. 4.- Киев, 1973.- с. 129 - 132.

146. Чистяков Ф.М., Мудрецов Висс К.А. Микробиология. М.: Госторгиздат, 1957. - 256 с.

147. Шевченко М.Г., Шиллингер Ю.И, Штенберг А.И. Добавки к прищевым продуктам.- М.: Медгиз, 1969. 164 с.

148. Школьникова С. С. Микробиологические исследования кулинарных и копченых рыбных продуктов.- М.: Пищ. пром-сть, 1972. 83 с.

149. Школьникова С. С. Психрофильная микрофлора рыбы беспозвоночных.- М.: ЦНИИТЭИРХ, 1974.- сер. 3.- вып. 2. 49 с.

150. Школьникова С.С. Микрофлора промысловых беспозвоночных.- М.: Пищ. про-сть, 1981. 96 с.

151. Штенберг А.И., Шиллингер Ю.И., Шевченко М.Г. Добавка к пищевым продуктам. М.: Медицина , 1969. - 94 с.

152. Шульгин Ю.П., Григорьев Ю.И., Шульгина JI.B. О микрофлоре морской воды и некоторых промысловых рыб северо-западной части Тихого Океана // Исследования по технологии новых объектов промысла.- Владивосток:Изд.ТИНРО, 1980.- С. 58-62.

153. Шульгин Ю.П., Галкина JI.M., Шульгина JI.B., Плюснин В.В. Микробиологические исследования сырья сниженного качества из тихоокеанских лососей // Вопр.питания.- 1989.-N2.- С. 57-59.

154. Шульгина Л.В., Григорьев Ю.И., Шульгин Ю.П. Галофильная микрофлора морской воды и промысловых объектов залива Петра Великого // Исследования по технологии рыбных продуктов. Владивосток: Изд.ТИНРО, 1979. - вып. 9.1. С. 25-28.

155. Шульгина Л.В., Попова М.А., Григорьев Ю.И., Шульгин Ю.П. Термофильные микроорганизмы как возбудители порчи консервов из крабов // Рыбн. хоз-во. 1980. - N7.- С. 71-72.

156. Шульгина Л.В., Шульгин Ю.П., Гончар В.И. Состояние микрофлоры фона залива Петра *Великого // Биологические ресурсы шельфа, их рациональное использование и охрана.- Владивосток: Изд.ТИНРО, 1981. С. 178 - 179.

157. Шульгина Л. В. Микрофлора кишечника трепанга морской воды и детрита в заливе Петра Великого // Экология и условия воспроизводства рыб и беспозвоночных дальневосточных морей и западной части Тихого океана.- Владивосток: Изд.ТИНРО, 1982. -С. 152 156.

158. Шульгина Л. В. Исследование микрофлоры трепанга и среды его обитания // Проблемы марикультуры.- Владивосток: Изд.ТИНРО, 1983. С. 205 - 206.

159. Шульгина Л.В. Оценка микрофлоры дальневосточного трепанга Stichopus japonicus Selenka и среды его обитания.-Автореферат канд. диссер. на соискание учен, степени канд. биолог, наук.- Ленинград, 1984. 20 с.

160. Шульгина Л.В. Некоторые данные по микробному пейзажу морской воды в местах обитания трепанга // Вопр.гидрометериологии и изучения загрязнения природной среды. -Л.: Гидрометиздат, 1986.- вып. 114. С. - 33 - 367.

161. Шульгина Л.В., Попова М.А., Шульгин Ю.П. Термофильные аэробные и факультативно анаэробные бактерии возбудители плоского скисания крабовых консервов // Вопр. питания, 1988.- N3.- С. 56 - 58.

162. Шульгина Л.В.,Михалева В.Ф.,Бояркина Л.Г., Галкина Л.М. Оценка качества и сроков хранения рыбных вареных колбасных изделий по микробиологическим показателям // Гиг. и сан., 1991.- N7. С. 41-43.

163. Шульгина Л.В., Бывальцева Т.М., Галкина Л.М., Загородная Г.И. Микробиологическая оценка производства консервов "Крабы в собственном соку" // Изв. ТИНРО. Владивосток, 1992.- т.114.- С.- 180 184.

164. Шульгина Л.В. Научное обоснование летальности процессов стерилизации консервов из морских гидробионтов: Автореф. дисс. на соиск. учен.степ.докт.биол. наук. М., 1995. - 42 с.

165. Ярочкин А.П., Бойцова Т.М., Михалева В.Ф., Коростелев С.М. Пищевой фарш // Рыбн. хоз-во, 1986. N5. - С. 64 - 66.1. Иностранная литература

166. Ababouch L., Chaibi A.t Busta F.F. Inhibition of Bacterial Spore Growth by Fatty-Acids and Their Sodium-Salts //J.OF Food Protection,- 1992. 55 (12). P. 980 - 984.

167. Alderman G.G., Ring G.J.6 Sugijama H. Factors in survival of Clostridium botulinum type E spores through the fish smoking process // J. Milk Food Technology, 1972. N.3. - P. 163 - 166.

168. Bain., Hodgkiss and Shewan J.M. The bacteriology of brines used in smoke curing of fish // The Microbiology of Fish and Weat Curing Brines London, 1957. - P. 103 - 116.

169. Batra A., Bokadia M.M., Mehta B.K. Centratherum Anthelminticum Identification of the Fatty - Acid Composition and Anti - Microbial Activity of the Oil // FETTE SEIFEN ANSTRICHMITTEL, 1983. - 85(6).- P. 230 - 232.

170. Bern Zarisa Erwunschte und unerwunschte Wirkungen beider Raucherung von Fleischerzeugnissen // Fleischerei,-1994.- N. 12.- P. 67-73.

171. Bliss C.F. Retative potency as applied to the Assay of Penicillin Scienct. 1944. - 100. 2608. P. 577-578.

172. Bowles B.L., Miller A.J. Cafeic acid activity against Clostridium botylinum spores // J.Food Sci., 1994.-V.59.-N4.- P.905-908.

173. Buchanan R.E.,Gibbons N.E.,Gowan S.T. Bergey's manual of determinative bacteriology.- BaltimoreiThe Williams and wilkins Co., 1974. 1268 p.

174. Campello F. Bacteriologic des prodults de la mercon+eles // Rev. generale troid., 1970.- 61.-N 11.-P.1445 1459.

175. Castell C.N. Spoilage hrodlems in fresh fish production //"Fish.res.Bd.Can.Bulltin", 1954,- N 100.

176. Castell C.H.,Maccallum W.A.,Power H.E. Spoilage of fish in the vessels at sea //J.Fish Res.Bd.Can., 1956.-13.21 p.

177. Cauthier M.I., Shewan I.M., Cibson D.M., Lee I.Y. Taxonomic position and seosonal varietions in marine neretic. Environment OF somegram-negative antibiotic producing bacteria i. gen //J.MICROBIOL.,1975.- Y.87.-P. 211-218.

178. Chapman K.W.,Sagi I.,Hwag K.T.,Regenstein J.M. Extra-cold storage of hake and mackerel fillets and mince// J.Food Sci., 1993.- V.58.- N6.- P.1208-1211.

179. Christiansen L. et al. Survival and outgrowth of Clostridium botulinum type E spores in smoked fish//Appl.Microbiol., 1968.- V.16.- N.l.

180. Conzales R. Microbiologia de los productos marinos.-Cuba: La Habana., 1978.- 750p.

181. Cooper, S.F.; Battat, A.; Marsot, P.; Sylvestre,M.; Laliberte, C. Identification of Antibacterial Fatty-Acids from Phatidactylum-Tricornutum Grown in Dialysis Culture //J.MICR0BI0S.- 1985- 42 (167).- P. 27-36.

182. Corner T.R. Synergism in the Inhibition of Bacillus-Subtil is by Combinations of Lipophilic Weak Acids and Fatty Alcohols//J.Antimicrobial agents and chemotherapy.,1981.-19(6).-P. 1082-1085.

183. Crespo M.E., Jimenez J.,Gomis E.,Navarro C. Antibacterial Activity of the Essential Oil of Thymus

184. Serpylloides Subspecies Gadorensis.-J.MICROBIOS.,1990.-61(248). -P.181-184.

185. Cruz T.,Cabo M.M., Jimenez J.,Cabo J.,Ruiz C. In vitro Antibacterial Effect of the Essential Oil of Thymus-Longi florus Boiss//J.MICROBIOS.,1989.-60(242).- P. 59-61.

186. Eilers J.R. Extends fish shelf life // J.Food Proces.-1992.- Dec.- 52 p. 21. Galbraith H.,Miller T.B. Effect of metal cations and pH on the antibacterial activity and uptake of long chain fatty acids //J.Appl.Bacterial., 1973.-36(4) P. 635-646.

187. Georgala D.L. Changes in the skin flore of cod after washing and icing// J.Appl.bacteriology.- 1957.- Y.20.-N 1.

188. Gergis V.,Spiliotis V.,Poulos C. Antimicrobial Activity of Essential Oils from Greek Sideritis Species // PHARMAZIE., 1990.- 45(1).- P. 70-70.

189. Gonzales M.D., Moreno E., Quevedosarmiento J., Ramoscormenzana A. Studies on Antibacterial Activity of Waste-Waters from Olive Oil Mills (Alpechin)- Inhibitory Activity of Phenolic and Fatty-Acids // CHEMOSPHERE., 1990.- 20(3-4).- P. 423-432.

190. Gregerson T. The method for differentiation of gram-positive and gram-negative bacteria with the use of 3% KOH solution// Europ. J. Appl.Microbiol., 1978.- V.5.- P.-123-127.

191. Haska G.tNoren B.,Odham G. Effect of fatty acids on the activity bacteriolytic enzymes // Physiol. Plant., 1972.-27(2).- P. 187-194.

192. Henderson C. Effect of fatty acids on pure cultures of rumen bacteria // J. Agr. Sci., 1973.- 81(1).- P. 107-112.

193. Himejima M.,Kubo I. Antibacterial agents from the cashew anacardium-occidentale (Anacardiaceae) nut shell oil //J. OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, 1991.-39(2).-P. 418-421.

194. Hoechst A.G. Sorbic acid as a preservative // London.- I960.- 286p.

195. Isaacs C.E. Antiviral and Antibacterial Lipids in Human-Milk and Infant Formula//Archives of disease in childhood.,1991.- 66(2).- P.-273-275.

196. Isaacs C.E., Litov R.E.,Thormar H. Inactivation of Enveloped Viruses and Pathogenic Bacteria by Antimicrobial Lipids Added to Infant Formulas //FASEB J., 1993.- 7(4).-P. 742-742.

197. James M.A. Listeria monocytogenes another conspicuons food pathongen in marine seafoods // Seafood Export J., 1989.- V.21.- N 4.- P. 13-17.

198. Kabara, J.J. Antimicrobial Agents Derived from Fatty-Acids // JOURNAL OF THE AMERICAN OIL CHEMISTS SOCIETY, 1984,- 61(2): P 397-403.

199. Kabara, J.J. Fatty-Acids and Esters As Antimicrobial Insecticidal Agents// ACS SYMPOSIUM SERIES, 1987.- P. 220-238.

200. Knobloch K., Weigand H., Weis N. Mechanism of Antimicrobial Activity of Essential Oils //PLANTA MEDICA., 1986,- (6).- P. 556 556.

201. Larsson K.,Noren В., Odham G. Antimicrobial effect of simple lipids and the effect of pH and positive ion. Antimicrob // Agents and Chemother.,1975.-8(6).- P. 733-736.

202. Leber G. Genetische Grundlagen der Resisten Lentwicklung von Mirroogranismen gegenuber, Antiseptika // Handbuch der Antiseptik. Berlin, 1981.- Bd. 1/2. P. 170-186.

203. Lemos T.L.G.,Matos F.J.A.,Alencar J.W.,Craveiro A. A.,Clark A.M.,Mcchesney J.D. Antimicrobial Activity of Essential Oils of Brazilian Plants // PHYTOTHERAPY RESEARCH., 1990.-4(2).- P. 82-84.

204. Liston J. Microbial hazards of seafood consumption // Food., 1990.- Dec.- P.- 56,58-62.

205. Lohne P. Experiments on preservation of capelin in tanks //Word Fish.Abstr., 1969.- 20.- P.29-30.

206. Lopezgarcia R.E.,Hernandezperez M.,Rabanal Rabanal R.M.,Darias V.,Martinherrera D.,Arias A.,Sanz J. Essential Oils and Antimicrobial Activity of 2 Varieties of Cedronella -Canariensis (L) W Et B.//J.of ETHNOPHARMACOLOGY, 1992.-36(3).- P. 207-211.

207. Lower E.S. Chemical manufacture via ozonization reaction production of fatty oils, fatty acids,and fatty acid esters fnd related materials // Riv. ital. sistanzt grasse., 1995. -72, N 6. P. 273-277.

208. Maksimova I.V.,Malakhovskaya 0.0.,Pryadilshchikova E.G. Antibacterial Activity of Diatoms .1. Lipids of

209. Nitzschia-Ovalis and Their Antibacterial Activity // SOVIET PLANT PHYSIOLOGY, 1984.- 31(5).- P. 745-751.

210. Marshall D.L.,Bullerman L.B. Antimicrobial Activity of Sucrose Fatty-Acid Ester Emulsifiers // J.Of food science., 1986.- 51(2).- P. 468-470.

211. Mazur P., Schmidt L. Unteractions of cooling velocity,temperature and warming velocity on the survival of frozen and thawed yeast // Cryobiology., 1968.- 5.-N.1.-P. 1-17.

212. Mckellar R.C.,Paquet A.,Ma C.Y. Antimicrobial Activity of Fatty N-Acylamino Acids Against Gram-Positive Foodborne Pathogens // Food MICROBIOLOGY., 1992.- 9(1).-P. 67-76.

213. Meyer U. Zur frage der Schonung durch hexamethylentetramin bei der herstellung von marinaden aus abfallender rohware // Lebensmittel untersuch und Forch., 1964.- 123.-N6.- P. 416-418.

214. Moreno E., Martinez J., Perez J., Ramoscormenzana A. Antimicrobial Effect of Waste-Water from olive oil Extraction Plants Selectiong Soil Bacteria After Incubation with Diluted waste // MICROBIIOS, 1987.- 51(208).- P. 169-174.

215. Morris C. Natural preservative through biotechnology // Food Engng., 1989.- V.61.-N7.- P. 44-46.

216. Ponce de Leon Sara Jsabal // Studies for preservation of sardine in brine //Mem. Fac. Fish./Hokkaido Univ., 1994.- 41.- N2.- P. 1-21,97-104.

217. Prohaszka L. Antibacterial Mechanism of Volatile Fatty-Acids in the Intestinal Tract of Pigs Agains Escheric hia-Coli// J. of Veterinary Medicine Series B-Infectious Diseases Immunology Food Hygiene Veterinary Public Health

218. Zentralblatt Fur Veterinarmedizin Reihe В., 1986.- 33(3). P. 166-173.

219. Ravindranathan N.A. Preservation process for ready to cook fish portions at room temperature // Seafood Export J., 1990.- N 7-8.- P.45-47.

220. Rhoma S. Suljites and food. A scientific review and regulatory update // Manuf.Confect., 1985.- V.65.- N11.-P. 45-55.

221. Rosell K.G., Srivastava L.M. Fatty-Acids as antimicrobial Substances in Brown-Algae // HYDROBIOLOGIA, 1987.-15KSEP).- P. 471-475.

222. Sieburth J.McN. Sea Microbes.- N.N: Oxford Univ. Park, 1979. 491 p.

223. Sidorova 0.A.,Maksimova I.V. Effect of Acidity of Medium on Light-Dependent Antibacterial Activity of Fatty-Acids //MICROBIOLOGY, 1989.-58(6).-P.799-803.

224. Shewan J.M.,Hobbs J.,Hodgriss W. A determinative Shemefor the identification of certain genero of gram-negative bacteria. With special referense to the Pseudomonadaceae //J. Appl.Bacterid, I960.- V.23.- P.379-390.

225. Spreekens B.,Bloemsma B. Microbiologische aspecten van kanagerookte verse haring // J.Conserva,- 1968.-N17,N3.

226. Sumner J.,Boyd N.,Wilson N. Bacterial standards //Comm. Fish, 1974.-13,N8.-P.5,7,9,11,13.

227. Thampuran N.,Gopakumar K. Freezing temperature and freezing menstruum on the survival of selected marine bacteria // Fish. Techno 1., 1993.-V30.-N2.-P.139-146.

228. Tompkin R.B., Christiansen L.M. Clostridium botulinum // Food Microbiology: Public Heath and Spoilage Aspects, AVI, Westport,Conn., 1976.- P.156-169.

229. Troller J.A. Sanitation in food in processing // Acad.Press. Food.Sci and Technol., 1983.- P. 56-59.

230. Varma P.R.G.tIyer T.S.G.,Joseph A. Studies on the incidence of Vibrio cholerae in fishery products //J.Food Sci.Technol., 1989.- V.26.-N6.-P.341-342.

231. Ved H.S.,Gustow E.,Pieringer R.A. Synergism Between Penicillin-G and the Antimicrobial Ether Lipid,Rac-1-Dodecylglycerol,Acting Below Its Critical Micelle Concentration // LIPIDS, 1990.-25(2).-P.119-121.

232. Villar A.,Recio M.C.,Rios J.L.,Zafrapolo M.C. Antimicrobial Activity of Essential Oil from Sideritis Species //PHARMAZIE, 1986.- 41(4)&- P.298-299.

233. Wedricha B. Sulphur dioxide in foods.-Chemical interactions // BNF Nutr.Bull., 1984.- V.9.-N3.-P.155-164.

234. Windsor M. Fish meal //J.Torry Advisery Note, 1971.-N 49.- P. 4-6.

235. Zacherl D.,Harris R.,Macias E., Modrzakowski M.,Blazyk J. Effect of Fatty-Acid Composition of Membrane-Lipids on the Antimicrobial Activity of Synthetic Magainins Against Acholeplasma-Laidlawii // J.BIOPHYSICAL, 1990.-57(2).-P. 262-262.

Информация о работе

Бывальцева, Татьяна Михайловна
кандидата биологических наук
Владивосток, 1997
ВАК 03.00.07

Диссертация

Изучение бактерицидных свойств водного экстракта из липидов рыб как основы пищевого консерванта - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы