Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Исследование одного из механизмов адаптации байкальских рыб к условиям существования

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Исследование одного из механизмов адаптации байкальских рыб к условиям существования"

На правах рукописи

ггь од

' . • ... Р

I « ¿..^

КОЛЕСНЮТЕНКО

Любовь Евгеньевна сг----*

ИССЛЕДОВАНИЕ ОДНОГО ИЗ МЕХАНИЗМОВ АДАПТАЦИИ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ К УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ

03.00.16 - экология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации па соискание ученой степени кандидата биологических наук

Иркутск - 2000 г.

Диссертация выполнена в лаборатории нейробиологии Научно-исследовательск( института биологии при Иркутском государственном университете Научные руководители: доктор биологических наук,

профессор 'р.М. Кожова; кандидат биологических наук, с.н.с. JI.C. Каткова Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор,

член-корреспондент РАМН, М.Ф. Савченков; кандидат биологических наук, с.н.с. Л.В. Зубина. Ведущее учреждение: Институт общей и

экспериментальной биологии СО РАН

Защита диссертации состоится «¿<5" » anftg,..^ 2000 г. в Iо --часов заседании диссертационного совета Д 063.32.06 при Иркутском государствен! университете по адресу: г.Иркутск, ул.Сухэ-Батора, 5, Байкальский музей проф. М.М. Кожова.

Почтовый адрес: 664003, Иркутск, ул.Ленина, 3, а/я 24, НИИ биологии при ИГУ С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Иркутского госуниверситета

Автореферат разослан «_»________2000 г.

Ученый секретарь

М-

диссертационного совета: J^V"0- Купчинская li.C.

ОБ1ЦАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Индивидуальная и генотипическая адаптации как способ выживания ганизма в разных экологических условиях изучен на разных уровнях »логической организации (Шмальгаузен, 1963; Тимофеев-Ресовский, Воронцов, Злоков, 1977; Строганов, 1956; Ушаков, 1963; Шульман, 1972; Озершок, 1992). почевая роль центральной нервной системы в процессах адаптации животных кже известна (Введенский, Ухтомский, 1950; Павлов, 1950; Сеченов, 1961; еерсон, 1981). Вместе с тем биохимические механизмы адаптации к условиям Шествования, реализующиеся на уровне мозга, оказались изученными :ачительно меньше.

Актуальность данного исследования определяется тем, что оно шравлепо на изучение одного из механизмов адаптации байкальских рыб на ювне мозга - регуляции активности фермента, обеспечивающего >ансмембранный транспорт ионов и определение места этого процесса в minatimt организма к условиям существования.

Ключевым вопросом при исследовании механизма центрального ;Пстиия адаптации является вопрос об участии в этом процессе мембран шаптических окончаний мозга и NaK-АТФэзы - фермента, обеспечивающего энно-осмотический гомеостаз клетки и формирование электрического этенциала на мембране. Активность этого фермента регулируется множеством акторов: составом и физико-химическими свойствами липидов синаптических <ончапий, конформацией самого белка, наличием изоформ и особенностями их ункционирования (Meyer, Cooper, 1981; Renzis, Bomancin, 1984; Болдырев, 1977, Э81, 1995). Разнообразие значимых факторов позволяет разными путями ггулировать работу Ыа,К-АТФазы в зависимости от условий, в которых аходится организм. При этом особый интерес представляет исследование етерминированных генетически и закрепленных эволзоционно адаптивных зменений работы ферментной системы в зависимости от образа жизни и среды битания организма.

Синапсы в мозге служат местом временных или постоянны: трансформаций при хранении информации и при ответах на внешние стимулы,: том числе при адаптации и привыкании (Меерсон, 1981, 1984; Хухо, 1990). 1 качестве модели сипаптического окончания используют синадтосомы, которы подробно изучены на уровне биохимии и физиологии (Whittaker, 1969; Meyei Cooper, 1981; Walker, Agoston, 1987; Jensen at all., 1990).

Уникальность условий обитания рыб в озере Байкал нредполагас возможность существования специфических механизмов адаптации, что i определило выбор объекта данного исследования. Разнообразие организмов, в rof числе, эндемичной ихтиофауны, живущих в уникальных условиях Байкале позволяет исследовать особенности функционирования потенциалобразующег фермента окончаний нервных клеток головного мозга - Ма.К-АТФазы - у видо рыб, адаптированных к разным условиям существования.

Целью работы явилось исследование особешгостей функционированц ферментной системы 1Ма,К-АТФазы окончаний нервных клеток головного мозг экологически различных видов байкальских рыб. В соответствии с поставленно! целыо были определены следующие задачи: 1 - разработать метод выделени синаптосом из мозга рыб; 2 - оценить синаптосомальную фракции биохимическим и электронно-микроскопическим методами; 3 - исследоват активность и 4 - сравнить механизмы регуляции ферменшой системы Na,К АТФазы синаптосом мозга рыб из различных экологических зон.

Новизна исследования определяется следующими результатами.

Установлено, что одним из биохимических механизмов, опредсляющи адаптационные возможности рыб, обитающих в разных условиях существованш является регуляция активности потенциалобразующей ферментной системы Na,К АТФазы синапсов мозга.

Впервые показано, что максимальная активность Ыа,К-АТФазы синаптосо! различна у рыб, обитающих в разных условиях существования. Первая группа ры - омуль (Coregonus autumnalis migratorius, Georgi), хариус (Thymallus aretieu baicalensis, Dyb ), елец (Leuciscus leuciscus, Dyb.), обитающие в условия

юокой локомоторной подвижности с резкой сменой температур, давления, ловий освещения и т.д., имеют максимальную активность в 2 и более раз выше, м у рыб второй группы - большой голомянки (СотерЬогш Ьаюа1егш$, ОуЬ.) и льшеголовой широколобки (Ва^асИосоНия Ьа1са1мшя, БуЬ.).

Установлено, что температура биохимического оптимума Ма,К-АТФазы нагггосом у рыб первой группы находится в диапазоне 39-41°С, что ачительно выше, чем у рыб второй группы (31-33°С).

Впервые показано, что термостабильность ферментной системы Ыа,К-ГФазы синаптосом рыб первой группы выше, чем у рыб второй группы.

Выявлено, что ферментная система Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга йкальских рыб первой группы обладает меньшим сродством фермента к бстрату.

Установлено, что ферментная система Ма,К-АТФазы синаптосом мозга у 16 первой группы по сравненшо со второй обладает низкой степенью висимости от температуры за счет низкой энергии активации процесса.

Сделано предположение, что функционировать Ыа,К-АТФазы синаптосом ззга изученных видов байкальских рыб определяет их адаптационные (Зможности и, как следствие, направление эволюционирования.

Установлено, что механизмами биохимической адаптации при (вершенствовании возможностей индивидуальной адаптации, могут быть, в 1стн0сти, низкая величина энергии активации ферментной системы ЫаД-ТФазы, ее повышенная термостабилыюсть и высокая удельная активность. При шергентном пути эволюционирования видов возможными биохимическими гханизмами адантационш.1Х процессов могут быть, в частности, повышенная 1ергия активации ферментной системы ЫаДОАТФазы синаптосом мозга, ее 1зкая удельная активность и низкая термостабилыюсть.

Такие характеристики функционирования системы Ыа,К-АТФазы шаптосом мозга как температура максимальной активности фермента, аксимальная активность фермента, энергия активации и степень сродства ермента к субстрату могут являться критерием устойчивости вида к смене

экологических факторов, в том числе к антропогенным нагрузкам. Частшлы случаем данного заключения может быть возможность использование перечисленных характеристик для оценки степени эндемизма рыб.

Теоретическое значение. Установлены особенности функционировать ферментной системы Ыа,К-АТФазы окончаний нервных клеток головного мозгг байкальских рыб, различающихся по экологическим условиям обитания: С аи1итпаНх 1ш^а1огш5, Т. агсйсиБ Ьака1с1Ш5, Ь. кис^сия., С. baicalensis I В. Ьаюа1е1Ш5.

Практическое значение. Разработанный метод выделения синантосом и: мозга рыб может быть использован для исследований в различных областям биологии. Исследование особенностей функционирования Ыа,К-АТФазь синаптосом мозга разных видов рыб имеет немаловажное практическое значение < точки зрения оценки потенциальных возможностей обитания их в различны) водоемах, а также устойчивости вида к экстремальным, в том числ< антропогенным, нагрузкам.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены: на 4-: Международных конференциях (Иркутск, 1993; Иркутск, 1995; Томск, 1995 Рязань, 1998); на XI конференции молодых ученых (Иркутск, 1990); на 2-: Всероссийских конференциях (Калуга, 1994; Иркутск, 1997); на Международно» симпозиуме «Экологически эквивалентные виды гидробионтов в Великих озера: мира» (Улан-Удэ, 1997); на I конгрессе ихтиологов России (Астрахань, 1997).

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 120 страницах ] состоит из введения, обзора литературы, описания использованных методов, 7 гла исследований с обсуждением полученных результатов и выводов. Списо: использованной литературы содержит 182 источника, из которых 136 российских ] 46 иностранных авторов. Результаты обобщены в 13 таблицах и иллюстрированы ' рисунками.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Данная глава отражает освещение концептуальных вопросов теории аптации в литературных источниках, а также описывает конкретные примеры следования механизмов биохимической адаптации в экологии. ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В качестве объекта исследования были выбраны 5 видов рыб, обитающих в зличных экологических нишах озера Байкал: С. autumnalis migratorius, arcticus baicalensis, L. lcuciscus, C. baicalensis и В. baicalensis.

Отлов рыб производили ставными сетями с ячеей 16-32 мм в весенний, :тний и осенний сезоны с глубины 5 - 250 м в районе Южного Байкала. Отбор ггериала производили непосредственно после вылова живой рыбы: черепную >робку вскрывали ножницами, мозг извлекали и замораживали в жидком азоте 196°С), при этом стандартизировали по условиям изъятия и хранения.

Для выделения синаптосом из мозга байкальских рыб был разработан метод, ;повой для которого явился метод Hajos, используемый для выделения шаптосом из мозга крыс (Hajos, 1975; Каткова и др., 1990). Для электронно-икроскопических исследований синаптосом использовались разные варианты иксации (Уикли, 1975; Карупу, 1984). Препараты просматривались и этографировались в электронных микроскопах ЭМВ-ЮОЛ (СЗЭМ, СССР) и iM-lOOC (JEOL, Япония). Для определения активности фермента использовали шевые смеси с соотношением Na'/K+-3/2 (Болдырев, 1977). Инкубация шаптосом (15 мкг белка в 100 мкл суспензии) проводилась в среде следующего )става: NaCl - 150 mM, KCl - 100 mM, MgCl - 3 тМ, АТФ - 3 мМ, имидазол - 35 М в термостатируемом шейкере в течение 5 минуг, затем реакция запускалась збавлением субстрата - АТФ (3 мМ). Количество неорганического фосфата феделялось по методу Ратбуна-Бетлах в кислой среде (pH 3.6) (цит. по элдырев и др., 1983). Измерение экстинкции раствора проводилось при длине шны 660 нм. Энергия активации №,К-АТФазы синаптосом мозга рассчитывалась

по формуле: Ea=-tga R для каждого вида исследованных рыб, где a - угол наклона прямой в координатах Ink от 1/Т, а R= 1.986 кал/град моль.

Полученные экспериментальные данные были обработаны статистически с использованием коэффициента Стьюдента (Малета, Тарасов, 1981; Лакин, 1990).

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ВЫДЕЛЕНИЯ СИНАПТОСОМ ИЗ МОЗГА РЫБ

В качестве базового метода выделения синаптосом был выбран метод Hajos (Hajos, 1975), разработанный для выделения синаптосом из мозга крыс. Для полугения синаптосом из мозга байкальских рыб были определены качественно и подобраны количественно компоненты среды выделения, а также скорости центрифугирования.

Модифицированный метод выделения синаптосом из мозга рыб, представляет следующую последовательность действий. Головной мозг рыб (1 г сырого веса) диспергировали в 10 мл среды выделения в стеклянном гомогенизаторе с тефлоновым пестиком, затем центрифугировали при 1600g в течение 10 мин. Осадок ресуспендировали в исходном объеме среды выделения и повторяли центрифугирование. Объединенные супернатанты центрифугировали при 9500g 20 мин. Осадок, полученный в результате центрифугирования, диспергировали в 2,5 мл среды выделения, наслаивали на 10 мл 0,8 М сахарозы и центрифугировали при 9500g 25 мин. Затем слой с синаптосомальной фракцией отбирали, разводили 30 мМ трис-HCl (pH 7,4) в 2,5 раза и центрифугировали при 16000g 20 мин. Полученный осадок ресуспендировали в 2 мл среды выделения, суспензию использовали для дальнейшей работы.

Выделенные синаптосомы исследовали биохимически и морфологически с целью идентификации фракции, оценки целостности синаптосом и чистоты фракции.

ГЛАВА 4. БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СУБКЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЙ МОЗГА РЫБ

Биохимическую оценку фракций проводили по активности маркере плазматических мембран - Na.K-АТФазы (Whittaker, 1969; Болдырев, Мельгунов

-985). Активность данного фермента была измерена на каждом из юмежуточных этапов выделения синаптосом: в сунернатанте I, полученном юле 1-го центрифугирования гомогената ткани (8,8 мкМ фосфата на мг белка в с); в супсрнатанте II, полученном после 2-го центрифугирования гомогената ани (9,9 мкМ фосфата на мг белка в час); в супернатанте III, полученном после го центрифугирования гомогената ткани (0,8 мкМ фосфата на мг белка в час); i фракции митохондрий (8,8 мкМ фосфата на мг белка в час); во фракции шаптосом (15,2 мкМ фосфата на мг белка в час) и в супернатанте, содержащем «сросомы (20,0 мкМ фосфата на мг белка в час). Высокая активность шаптосомальной фракции подтвердила правомерность использования дагаюй ракции для решения поставленных задач.

ГЛАВА 5. ЭЛЕКТРОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ИНАПТОСОМ МОЗГА РЫБ

Метод ультратонких срезов позволил оценить целостность выделенных гааптосом и чистоту синаптосомальной фракции; количество синаптосом ютавило (91 ± 2.3) %, а митохондрий - (9 ± 0.5) % (Каткова и др., 1992). олучено 100 фотоснимков и проанализировано 30 фотографий с электронного икроскопа. Расчет относительного содержания синаптосом и свободных итохондрий показал, что чистота фракции синаптосом, выделенных по одифицированному методу Hajos, соответствует стандартной (Whittaker, 1969; ajos, 1975) и, синаптосомы могут быть использованы для дальнейших ^следований.

ГЛАВА 6. ТЕРМО ЛАБИЛЬНОСТЬ №,К-АТФАЗЫ СИНАПТОСОМ ГОЗГА РАЗНЫХ ВИДОВ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ

Получены кривые термолабильности для следующих видов рыб: С. itumnalis migratorius, Т. arcticus baicalensis, L. leuciscus, С. baicalensis и . baicalensis. Для всех исследованных видов рыб характерны 2 стадии изменения ктивности фермента под действием температуры (рис.1):

1 - возрастание активности при повышении температуры (термоактивация ли термоиндуцированная активация фермента);

-102 - снижение активности ферментной системы при дальнейшем повышении температуры (процесс термоинакггивации), оканчивающееся полной инактивацией фермента.

■• -1-*- -2-Е- -3-е- - 4-е- -5

Рис. 1. Влияние температуры на активность Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга рыб: 1-С. Ьшсакг^э, 2-В. ЬаюакгшБ, 3-С. аиНтшаНБпнцгаЮгшБ, 4 - Т. агсПсиБ ЬакакшБ, 5 - Ь. 1сис1зси8.

ГЛАВА 7. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПАРАМЕТРОЕ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ ФЕРМЕНТНОЙ СИСТЕМЫ ЫаД-АТФАЗЬ СИНАПТОСОМ МОЗГА ЭКОЛОГИЧЕКИ РАЗЛИЧНЫХ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ

В интервале физиологических температур достоверных различий 1 параметрах функционирования ЫаД-АТФазы синаптосом разных видо) байкальских рыб не выявлено. Различия в исследуемых параметрах выявляютс: при температурах выше 15°С.

По полученным результатам исследованные виды рыб можно разделить на 1 группы: 1 - виды рыб, ИаДС-АТФаза синантосом мозга которых обладает боле высокой активностью и термостабильностью (С. аи^тпаНэ пидга1огшя, Т ат^сив Ьака1еш1з, Ь. 1еис1зсш,); 2 - виды рыб, Ка.К-АТФаза синаптосом мозг

оторых обладает низкой активностью и термостабильностыо (С. Ьака1спяк и В. аюа^шйя). ЫаДОАТФаза синаптосом мозга рыб первой 1руипы: С. аиКштаНх пд^опш, Т. агсйсш Ьа1са1егш$, Ь. 1еиаясиз, обладает высокой максимальной ктивностыо (89,29 ± 8,41; 102,93 ± 10,14; 121,30 ± 11,89 мкМ Рн / мг белка в ч оответственно) (табл.1). Максимальная активность Ыа,К-АТФазы синаптосом юзга рыб второй группы: С. Ьакакпз^ и В. ЬакакпБ]^ составляет 31,51 ± 3,05 и 3,80 ± 2,10 мкМ неорганического фосфата / мг белка в ч соответственно (табл.1).

Таблица 1

Параметры работы Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга байкальских рыб разных

видов

Параметр

№ (I) Максимальная (II) Температура (III) Температура

н/п Вид рыб активность максимальной термоинактивации

КаД-АТФазы активности фермента, (°С) +

(мкМ Рн/мг белка в ч) фермента, (°С) ± га*, пА

± т*, пА д А т , п

1 С. autumnalis 89,29 ± 8,41 39.7 ± 0.7 57.3 + 1.5

migratorius (п = 48) (п = 48) (п = 21)

2 Т. arcticus 102,93 + 10,14 41.2 ± 0.8 56.0 + 1.4

baicalensis (п - 48) (п ~ 43) (п = 21)

3 L. leuciscus 121,30 + 11,89 41.0+ 1.0 53.3 + 2.1

(п = 36) (п - 36) (п = 21)

4 С. baicalensis 31,51+3,05 31,07+ 0,5 42,37 ± 0,7

(п - 45) (п = 45) (п = 21)

5 В. baicalensis 43,80 ± 2,10 33.3 + 1 8 44.2 ± 1.1

(п = 45) (п — 45) (п = 21)

m - ошибка средней арифметической; пА - количество экспериментов;

Параметр Достоверность различий средних

(1) Ры< 0,001 Р 1,5 <0,001 Р2,4 <0,001 Р 2,5 <0,001 Р 3,4 <0,001 Р3 5 <0,001

(И) ^ Р 1.4< 0,01 Р 1,5 <0,01 Р 2,4 <0,01 Р 2.5 <0,01 Р 3,4 <0,01 Рз,5 <0,01

(III) Р 1,4< 0,01 Р 1,5 <0,05 Р 2.4 <0,05 Р 2,5 <0,05 1'3,4 <0,05 Рз,5 <0,05

.) - Р 1,з <0,05; (П), (П1) - Р1-2; Р1-3; Р Р 4,5- различия недостоверны

Виды рыб первой группы обладают ферментом с высокой термоустойчивостыо, доказательством чего являются два параметра: достижение максимальной активности ферментной системы и температура полной инактивации фермента. Так, активность ферментной системы Ыа,К-АТФазы синатосом С. аиШтпаНБ п^гаНтив, Т. агсНсив ЬаюакпБ^Б, Г. кшлБсш, достигает максимума гфи 40-41°С, а полная инактивация наступает при 57°С, 63°С, 60"С соответственно (табл.1). Активность ферментной системы Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга большой голомянки и большеголовой широколобки достигает максимальной величины при более низкой (по сравнению с первой группой) температуре - 31-32°С (табл. 1), полная инакгавация фермента наступает также при более низкой температуре: 42°С и 44°С соответственно.

Выявлены различия в процессах термоактивации и термоинактивации ферментной системы №,К-АТФазы двух групп видов рыб. Данные различил выражаются в более широких интервалах температур терм о активации и термоинактивации для рыб первой группы рыб по сравнению со второй группой.

При сравнении результатов, полученных для двух групп, очевидно, чте ферментная система Ыа,К-АТФазы видов первой группы характеризуете* высокой активностью и повышешюй устойчивостью к температурным нагрузкам по сравнению с ферментной системой видов второй группы.

Учитывая все вышесказанное, и то, что индивидуальная адашацш организмов происходит путем выработки комплексов условных рефлексов I осуществляется на уровне центральной нервной системы, мозга (Павлов, 1950) констатируется, что виды рыб первой группы обладают более высоким! способностями индивидуальной адаптации по сравнению с рыбами второй группы ГЛАВА 8. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ РЕГУЛЯЦИИ ЫаД АТФАЗЫ СИНАПТОСОМ МОЗГА ИССЛЕДОВАННЫХ ВИДОВ

Характеристикой состояния фермента являются такие параметры ка: энергия активации (Еа) и сродство фермента к субстрату. Эксперименты показали что у С. ЬакакгшБ и В. Ьаюа1е1шз энергия активации (Еа) Ка,К-АТФаз1 синаптосом мозга равна 18,86 ± 2,71 ккал/моль и 17,51 ± 2,21 ккал/мол

оответствснно. Значение данного параметра для фермента синаптосом мозга С. иШтпаШ пидгаШпиБ, Т. arcticus ЬашакпБ^з, Ь. 1е1КЛ5си.ч значительно ниже и оставляет 10,69 ± 0,79 ккат/моль, 12,87 ± 0,12 ккал/моль и 12,98 ± 2,04 ккал/моль :оответственно (таблица 2).

Ферментная система Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга байкальских рыб (торой группы имеет меньшую константу Михаэлиса, следовательно, обладает 5олыпим сродством фермента к субстрату по сравнетпо с ферментной системой мшалтосом мозга рыб первой группы. Данное свойство позволяет развивать лаксимальпуго скорость реакции при минимальных концентрациях АТФ, однако 1ри этом не позволяет осуществлять регуляцию скорости трансмембраипого тереноса путем изменения концентрации субстрата (таблица 3).

Выявленные различия величин энергии активации и сродства фермента к :убстрату подтверждают проведенное в предыдущей главе деление изученных шдов байкальских рыб на 2 группы. Первая группа включает Ь. Ьиаясия, Г. агсИсич Ьаюа1еп$15, С. аШитпаНБ пп^гга(опиз. Вторая - С. Ьа1са1е1шз и baicalensis.

Таблица 2

Энергия активации ИаД-АТФазы синаптосом мозга байкальских рыб

№ п/п Вид рыб ± т*, пА Энергия активации ± т

1 С. аиШтнаНэ гт§га1опш 5,38 ± 0,40 (п=17) 10,69 ± 0,79

2 Т. агсйсш Ьакакг^э 6,48 ± 0,16 (п =17) 12,87 ± 0,32

3 Ь. кис^сш 6,53 ± 1,03 (п =15) 12,98 ± 2,04

4 С. Ьа1са1епз15 9,49 ± 1,36(п=21) 18,86 + 2,71

5 В. Ьа1са1сп51я 8,81 ± 1,11 (г1=19) 17,51 ±2,21

*т - ошибка средней арифметической; пА- количество экспериментов

Достоверность различий средних: Р Р и, Рг,з, Р4,5 - различия недостоверны

Р 1,4 < 0,001 Р1>5< 0,001 Р2>4<0,01 Р 2,5 <0,01 Р 3,4 <0,01 Р 3,5 <0,01

Для видов первой группы характерны низкие энергии активации и сниженное сродство фермента к субстрату, что свидетельствует о меньших

энергетических затратах па формирование фермент-субстратного комплекса. Низкие величины энергии активации свидетельствуют о слабой зависимости функционирования ферментной системы Ыа,К-АТФазы стгаптосом мозга от температуры. Возможно, данное свойство расширяет как диапазон температур обитания видов рыб первой группы, гак и потенциальные возможности адаптации к другим факторам среды. Способность регулировать скорость реакции путем изменения концентрации субстрага подтверждает большие потенциальные возможности регуляции активности ферментной системы НаДС-АТФазы видов первой группы (по сравнению с видами второй группы).

Таблица 3

Константа Михаэлиса-Ментен ферментной системы ТЧа,К-АТФазы синаптосом

мозга исследованных видов байкальских рыб

№ Вид рыб Значение Кт_ Мм п

1 С. аиШтпаНБ гг^гаШпш 0.163 ±0.019 45

2 Т. агсЦсия Ьа1са1сгшз 0.150 + 0.004 45

3 С. Ьа1са1етш5 0.073 ±0.005 51

4 В. Ьаюа1с1шз 0.093 ± 0.002 36

Достоверность различий средних: Р1-2 -различиянедостоверны

Р 1.3 <0,001 Рм< 0,001 Р2.з< 0,001 Р 2,4 <0,001 Р 3,4 <0,01

Таким образом, полученные результаты позволяют считать закрепленные эволюционно: изменение энергии активации и способность регулировать активность ферментной системы Ыа,К-АТФазы путем изменения концентрации АТФ механизмами биохимической адаптации к условиям существования на уровне мозга у байкальских рыб.

ГЛАВА 9. МЕХАНИЗМ АДАПТАЦИИ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ К УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ

Исторически сложившиеся абиотические условия озера Байкал способствовали как сохранению представителей общесибирского и сибирско-байкальского фаунистических комплексов, так и формированию своеобразной эндемичной байкальской флоры и фауны (Верещагин, 1940). Используя

лассификашпо ландшафтов дна озера Байкал как результат анализа заимозависимости всего комплекса экологических факторов, можно отнести все зученные виды байкальских рыб к обитателям 3 ландшафтов: прибрежно-соровой опы (елец), мелководной платформы (омуль, хариус, большеголовая шроколобка), глубинной зоны (большая голомянка).

Прибрежно-соровая зона характеризуется обособленностью от Байкала, что пределяет ее специфические условия, среди которых па первом месте стоят 1Собый температурный режим и затрудненный водообмен с открытым Байкалом Карабанов и др., 1990). Мелководная платформа характеризуется .временным [епостоянством уровепного режима, температурных и световых условий, лубинная зона характеризуется относительно стабильными условиями: фактически постоянными температурами, спижешшм содержанием кислорода, галным отсутствием света и малыми скоростями водообмена.

По результатам данного исследования изученные виды байкальских рыб южно разделить на две группы: в первую группу включены виды рыб, »тносящиеся к сибирско-байкальскому и общесибирскому эколого-эаунистическим комплексам (Верещагин, 1940). Вторую группу составляют виды >айкальского эколого-фаунистического комплекса, являющиеся эндемиками Байкала.

Представители первой группы (Ь. 1ешл5сш, Т. агсйсиэ Ьакакггаз, аиГитпаНБ пп^а1огш5) способны к длительным нагульным, температурным и юрестовым миграциям, во время которых они испытывают на себе воздействие юлъшого количества изменяющихся значимых экологических факторов, ребующих быстрого адекватного ответа (Смирнов, 1969; Смирнов, Шумилов, .974; Тугарина, 1981, 1997; Егоров, 1988). Эволюция видов первой группы фоходит по пути усовершенствования индивидуальных приспособлений -механизмов индивидуальной адаптации. Обладая высокими адаптивными шособностями, такие виды осваивают широкие экологические пиши, сарактеризуются широкими пределами толерантности и устойчивостью к вменениям экологических условий.

Представители второй группы (В. Ьака1еш1Б и С. Ьа1са1еп51з) ведут малоактивный образ жизни. Эти виды характеризуются высокой степенью специализации и низкой локомоторной активностью. С. ЬаюакгшБ отличает высокая степень морфологической, физиологической и биохимической специализации к пелагическому образу жизни, которая заключается в большом развитии спинных, грудных и анального плавников, высоком содержании липидов (до 44%), уменьшении минерализации скелета (зольность ок. 2%), редукции брюшных плавников, планктоноядности и деторождении (Стариков, 1977; Швец, Юфалин, 1986; Сиделева и др., 1992; Смирнова, 1994). В. ЬакакнБ^ относится к донным прибрежным СоНшсЫ (Сиделева, 1993), представители которых ведут малоактивный образ жизни, выжидают добычу, затаившись между камнями. Эволюция видов второй группы проходит по пути дивергенции видов (Талиев, 1955; Сиделева, 1993). Так, В. Ьакакх^в - представитель семейства СоШс1ае, которое характеризуется исключительным видовым разнообразием: 8 видов.

Таким образом, особенности функционирования Ш,К-АТФазы синаптосом мозга изученных видов байкальских рыб позволяют определить их адаптационные возможности и, как следствие, направление эволюционирования.

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что одним из биохимических механизмов, определяющих адаптациошше возможности рыб, обитающих в разных условиях существования, является функционирование потенциалобразующей ферментной системы ИаД-АТФазы синапсов мозга.

2. Максимальная активность Ыа,К-АТФазы синаптосом различна у байкальских рыб, адаптированных в разным условиям существования. Первая группа рыб: омуль (С. аиШотаНэ пи£,гаиэпия), хариус (Т. агсйсш baicalensis), елец (Ь. кшлБсиз), обитающие в условиях высокой локомоторной подвижности с резкой сменой температур, давления, условий освещения и т.д., имеют максимальную активность в 2 и более раз выше, чем у рыб второй группы -большой голомянки (С. Ьаюа1еш15) и большеголовой широколобки (В. Ьаюа1е1Ш5).

Термостабилыюсгь ферментной системы №,К-АТФазы синаптосом рыб перпой группы выше, чем у рыб второй группы. Температура биохимического оптимума Ыа,К-АТФазы синаптосом у рыб первой группы находится в диапазоне 39-41°С, что значительно выше, чем у рыб второй группы (31-33°С). Ферментная система Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга байкальских рыб первой группы обладает меньшим сродством фермента к субстрату. Константа Михаолиса для фермента первой группы рыб равна 0,16 и 0,15 мМ, что в 2 раза больше, чем у рыб второй группы 0,07 и 0,09 мМ.

Ферментная система №,К-АТФазы синаптосом мозга у рыб первой группы по сравнению со второй обладает низкой степенью зависимости от температуры за счет низкой энергии активации процесса.

Функционирование №,К-АТФазы синаптосом мозга изученных видов байкальских рыб определяет их адаптационные возможности. Виды рыб (С. аийшшаИв 1ш'§га1опш, Т. агсИсиь Ьаша1еш15, Ь. [еиаБсш), ЫаД-АТФаза синаптосом мозга которых обладает высокой максимальной активностью, устойчивостью к изменениям температуры, обладают высокими способностями индивидуальной адаптации. Эволюционирование данных видов рыб идет по пути совершенствования возможностей индивидуальной адаптации. Виды рыб (С. ЬакакЕ^Б и В. ЬакаЬг^), характеризующиеся низкой максимальной активностью и низкой устойчивостью к воздействию температур, эволюционируют по пути дивергенции.

Результаты исследования функционирования потенциалобразующей ферментной системы Ыа.К-АТФазм нервных окончаний мозга байкальских рыб показали, что механизмами биохимической адаптации по пути совершенствования индивидуальной адаптации могут бьпъ низкая величина энергии активации ферментной системы Ыа,К-АТФазы, ее повышенная термостабилыюсть и высокая удельная активность. При дивергентном пути эволюционирования видов возможными биохимическими механизмами адаптационных процессов могуг быть, в частности, повышенная энергия

активации ферментной системы Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга, ее низкая удельная активность и низкая термостабильность.

8. Такие характеристики функционирования системы №г,К-АТФазы синаптосом мозга как температура максимальной активности фермента, максимальная активность фермента, энергия активации и степень сродства фермента к '. субстрату могут являться критерием устойчивости вида к смене экологических факторов, в том числе к антропогенным нагрузкам. Частным случаем данного вывода может быть возможность использования перечисленных характеристик для оценки степени эндемизма рыб.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Методические особенности изучения синаптосом // Региональные эколого-географические проблемы: Материалы XI конференции молодых географов,- Иркутск, 1990,- С.61 - 63.

2. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е., Либе М.Л. Влияние адаптации байкальских рыб к различным условиям обитания на активность Ыа,К-АТФазь: синаптосом из мозга // Биологические науки (Biological sciences).- 1992. - N 6-С.78-84.: .

3. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Исследование механизмов нейротропны> влияний среды - поиск путей выживания в экстремальных экологических г социальных условиях// СибЭко- 93. Междунар. конф. по экологии Сибири Тез. докл., Ч.П., Иркутск, 1993,- Иркутск: Изд-во Иркут. политех. ин-та 1993.-С. 75.

4. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Влияние адаптации к эстремальны\ воздействиям на активность ИаД-АТФазы синаптосом мозга животных / Антропогенные воздействия и здоровье человека: Тез. докл. Всерос. науч. практ. конф., Калуга, 1994,- Калуга, 1994,- С.19.

5. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Биохимическая адаптация байкальских ры< к разным условиям существования: способы исследования // Фундаментальны! и прикладные проблемы охраны окружающей среды. Биоэкология: Гез

докладов между нар. копф., Томск, 12-16 сент. 1995,- Томск: Изд-во Томского ун-та .- Т.2.- С.57.

. Каткова Л.С., Колссниченко Л.Е., Хантагаев С.Б. Исследование синаптосом животных методом криоскалывания (электронная микроскопия) // Природные ресурсы, экология и социальная среда Прибайкалья: Сб. науч. тр. / Прогр. "Унты России".-Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1995.- Т.2,- С.85-91.

. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Механизмы экологической адаптации гидробионтов // Проблемы экологии. Чтения памяти профессора М.М.Кожова.: Материалы V Междунар. копф./ Науч. ред. проф. О.М.Кожова .Новосибирск: ВО Наука, 1995,- Т.2.- С.104-113.

. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Сравнительное исследование байкальских рыб разных видов: в том числе эндемиков//Экологически эквивалентные виды гидробионтов в Великих озерах мира: Тез. докладов междунар. симпозиума, Улан-Удэ, 2-4 сентября. 1997 г.- Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 1997,- С.90. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Исследование механизмов адаптации байкальских рыб к условиям существования// Первый кошресс ихтиологов России: Тез. докл.- Астрахань, 1997г.- М.: Изд-во ВНИРО, 1997,- С.220.

0.Каткова J1.С., Колесниченко Л.Е. Биохимические механизмы филогенетической адаптации байкальских рыб// Экология и охрана окружающей среды. IV Международная VII Всероссийская научно-практическая конференция: Тез. Докл.-Рязань, 1998,- С.42-43.

1.Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Биохимическая регуляция взаимодействия рыб с окружающей средой как экологический механизм// Проблемы сохранения биоразнообразия.: Чтения памяти профессора М.М.Кожова,.- Новосибирск: Наука, 1998,- С.79-80.

2.Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е., Хантагаев С.Б., Клименков И.В. Использование методов электронной микроскопии для оценки состояния синаптосом мозга животных,- Известия РАН. Серия биологическая,- в печати.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Колесниченко, Любовь Евгеньевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Понятие адаптация и приспособительная эволюция животных.

1.2. Биохимические механизмы адаптации рыб к условиям среды.

1.3. Экология и биохимические характеристики байкальских рыб.

1.4. Синаптосомы как модель синаптического окончания и роль №,К-АТФазы в процессах адаптации к условиям существования.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект исследования.

2.2. Метод дифференциального центрифугирования.

2.3. Метод просвечивающей электронной микроскопии.

2.4. Количественный метод определения белка.

2.5. Определение активности ЫаД-АТФазы.

2.6. Количественное определение неорганического фосфата.

2.7 Определение влияния концентрации АТФ на активность Ш,К-АТФазы.

2.8. Определение величины энергии активации ИаД-АТФазы синаптосом мозга рыб.

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ВЫДЕЛЕНИЯ СИНАПТОСОМ ИЗ МОЗГА РЫБ.

ГЛАВА 4. БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ СУБКЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЙ МОЗГА РЫБ.

ГЛАВА 5. ЭЛЕКТРОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СИНАПТОСОМ МОЗГА РЫБ.

ГЛАВА 6. ТЕРМОЛАБИЛЬНОСТЬ ИаД-АТФазы СИНАПТОСОМ МОЗГА РАЗНЫХ ВИДОВ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ.

6.1. Термолабильность №,К-АТФазы синаптосом мозга С. Ьаюа1егшз.

6.2. Термолабильность Ка,К-АТФазы синаптосом мозга В. Ьаюа1егшз.

-36.3. Термолабильность ИаД-АТФазы синаптосом мозга С. аиШтпаНБ гш^аШпш.

6.4. Термолабильность ШД-АТФазы синаптосом мозга Т. агсйсш Ьздса^шдо.

6.5. Термолабильность ИаД-АТФазы синаптосом мозга Ь. кишБсиБ.

ГЛАВА 7. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ПАРАМЕТРОВ ФУНКЦИОНИРОВАНИЯФЕРМЕНТНОЙ СИСТЕМЫ Ыа,К-АТФАЗЫ СИНАПТОСОМ МОЗГА БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ, АДАПТИРОВАННЫХ К РАЗНЫМ УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ.

ГЛАВА 8. ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМОВ РЕГУЛЯЦИИ ФЕРМЕНТНОЙ СИСТЕМЫ ЫаД-АТФАЗЫ СИНАПТОСОМ МОЗГА БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ, АДАПТИРОВАННЫХ К РАЗНЫМ УСЛОВИЯМ СУЩЕСТВОВАНИЯ.

8.1. Энергетический аспект биохимического механизма адаптации разных видов байкальских рыб.

8.2. Сродство фермента Ш,К-АТФазы к аденозинтрифосфату.

ГЛАВА 9. МЕХАНИЗМ АДАПТАЦИИ БАЙКАЛЬСКИХ РЫБ К ЭКОЛОГИЧЕСКИМ УСЛОВИЯМ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Исследование одного из механизмов адаптации байкальских рыб к условиям существования"

В настоящее время большое внимание уделяется проблеме существования живых организмов в разных экологических условиях, которое обусловлено возможностью их адаптации к разнообразным, порой экстремальным условиям среды, к условиям разных экологических ниш. Такого рода адаптация происходит в организмах на всех уровнях и представляет собой комплекс изменений, происходящих практически во всех органах и тканях организма.

Предполагается, что адаптация, как генерализованная реакция организма на внешнее воздействие, может регулироваться на уровне центральной нервной системы. Ключевым вопросом при исследовании механизма центрального действия адаптации является вопрос об участии в этом процессе мембран синаптических окончаний мозга и КаК-АТФазы -фермента, обеспечивающего ионно-осмотический гомеостаз в клетке и формирование электрического потенциала на мембране. Активность этого фермента регулируется множеством факторов: составом и физико-химическими свойствами липидов синаптических окончаний, конформацией самого белка, наличием изоформ и особенностями их функционирования. Разнообразие значимых факторов позволяет разными путями регулировать работу ИаД-АТФазы в зависимости от условий, в которых находится организм. Исследование механизмов изменения активности этого фермента является, поэтому, актуальным для решения вопроса о способах регуляции работы клетки. При этом особый интерес представляет исследование детерминированных генетически и закрепленных эволюционно адаптивных изменений работы ферментной системы в зависимости от образа жизни и среды обитания организма.

Синапсы в мозге служат местом временных или постоянных трансформаций при хранении информации и при ответах на внешние стимулы, в том числе при адаптации и привыкании (Меерсон, 1981, 1984; Хухо, 1990). В качестве модели синаптического окончания используют синаптосомы, которые довольно подробно изучены на уровне биохимии и физиологии (Whittaker, 1969; Meyer, Cooper, 1981; Walker, Agoston, 1987; Jensen at all., 1990). Предполагается, что биохимические механизмы регуляции активности ферментной системы Na,K-AT<J>a3bi обеспечивают потенциальные возможности вида как соответствовать настоящим условиям среды, так и изменяться в процессе эволюции. Уникальность условий обитания рыб в озере Байкал предполагает возможность существования специфических механизмов адаптации любого уровня, что и определило выбор объекта данного исследования. Разнообразие организмов, в том числе, эндемичной ихтиофауны, живущих в уникальных условиях Байкала, позволяет исследовать особенности функционирования потенциалобразующего фермента окончаний нервных клеток головного мозга - Na,K-ATOa3bi - у видов рыб, адаптированных к разным условиям существования. Для исследования были выбраны 5 видов байкальских рыб, относящихся к разным эколого-фаунистическим комплексам: Coregonus autumnalis migratorius, Georgi; Thymallus arcticus baicalensis, Dyb.; Leuciscus leuciscus, Dyb.; Comephorus baicalensis, Dyb.; Batrachocottus baicalensis, Dyb.

Цель и задачи исследования.

Целью данной работы явилось исследование особенностей функционирования ферментной системы ИаД-АТФазы окончаний нервных клеток головного мозга рыб, различающихся по экологическим условиям обитания.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

1 - разработать метод выделения синаптосом из мозга рыб; 2 -оценить синаптосомальную фракцию биохимическим и электронно-микроскопическим методами; 3 - исследовать активность ферментной системы Na,K-ATOa3bi синаптосом мозга байкальских рыб, адаптированных к различным экологическим условиям, 4 - сравнить механизмы регуляции ЫаД-АТФазы синалтосом мозга рыб, адаптированных к разным экологическим условиям.

Новизна исследования определяется следующими результатами.

Разработан метод выделения синаптосом из мозга рыб.

Впервые в качестве важнейшего биохимического механизма адаптации рассматрен механизм регуляции активности потенциалобразующей ферментной системы (Ыа,К-АТФазы) синапсов мозга рыб. По результатам работы исследованные виды байкальских рыб разделены на 2 группы:

1 - С. аийгшпаНз гм§га1:огш8, Т. агсйсш Ьаюа1егш8, Ь. киаБсиБ.

2 - С. Ьаюа1еш1з и В. Ьаюа1егш8.

Установлены различия в максимальной активности данного фермента синаптосом байкальских рыб, которые коррелируют с различиями в условиях среды их обитания.

Установлено, что и температура биохимического оптимума АТФазы синаптосом у рыб первой группы заметно выше (39-41°С), чем у рыб второй группы (31-33°С).

Показано, что термостабильность ферментной системы Ыа,К-АТФазы синаптосом рыб первой группы выше, чем у рыб второй группы.

Выявлено, что ферментная система Ма,К-АТФазы синаптосом мозга байкальских рыб первой группы обладает меньшим сродством фермента к субстрату.

Установлено, что ферментная система Ма,К-АТФазы синаптосом мозга у рыб первой группы по сравнению со второй обладает низкой степенью зависимости от температуры за счет низкой энергии активации процесса.

Виды рыб (С. аиШтпаНБ пи^аШпш, Т. агсйсш Ьаюакгшэ, Ь. 1ешл8сиз), Ыа,К-АТФаза синаптосом мозга которых обладает высокой максимальной активностью, устойчивостью к изменениям температуры, обладают высокими способностями индивидуальной адаптации.

Эволюционирование этих видов рыб идет по пути совершенствования механизма индивидуальной адаптации. Виды рыб (С. Ьаюакгшз и В. Ьаюа1ег^8), характеризующиеся низкой максимальной активностью и низкой устойчивостью к воздействию температур, эволюционируют по пути дивергенции.

Результаты исследования функционирования потенциалобразующей ферментной системы ЫаД-АТФазы нервных окончаний мозга байкальских рыб позволили установить, что механизмами совершенствования индивидуальной адаптации могут быть, в частности, снижение величины энергии активации ферментной системы ИаД-АТФазы, повышение ее термостабильности и удельной активности. При дивергентном пути эволюционирования видов возможными биохимическими механизмами адаптационных процессов могут быть, в частности, повышенная энергия активации ферментной системы Ка,К-АТФазы синаптосом мозга, ее низкая удельная активность и низкая термостабильность.

Сделано заключение, что такие характеристики функционирования системы Ыа,К-АТФазы синаптосом мозга как температура максимальной активности фермента, максимальная активность фермента, энергия активации и степень сродства фермента к субстрату могут являться критерием устойчивости вида к смене экологических факторов, в том числе к антропогенным нагрузкам. Частным случаем данного заключения может быть возможность использования перечисленных характеристик для оценки степени эндемизма рыб.

Практическое значение работы. Разработанный метод выделения синаптосом из мозга рыб может быть использован для исследований в различных областях биологии. Исследование особенностей функционирования ЫаД-АТФазы синаптосом мозга разных видов рыб имеет немаловажное практическое значение с точки зрения оценки потенциальных возможностей обитания их в различных водоемах, а также устойчивости вида к экстремальным, в том числе антропогенным, нагрузкам.

Благодарности. Автор выражает благодарность научным руководителям: доктору биологических наук, профессору [О.М.Кожовой] и кандидату биологических наук, старшему научному сотруднику Л.С.Катковой.

Автор искренне благодарен д.б.н., профессору Г.В. Гречаному, к.б.н. Б.К. Павлову и к.б.н. Э.А. Максимовой за ценные замечания по содержанию работы.

Автор признателен члену Союза Журналистов РФ В.С.Сбитневу за помощь в совершенствовании стиля изложения основных положений работы. За предоставление приборной базы выражаю благодарность зав. лабораторией микробиологии Э.А. Максимовой. Автор искренне благодарен команде научно-исследовательского судна НИИ биологии за помощь в сборе материала, а также сотрудникам Байкальской биологической станции за помощь в практической работе.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Колесниченко, Любовь Евгеньевна

7. Результаты исследования функционирования потенциалобразующей ферментной системы Ыа,К-АТФазы нервных окончаний мозга байкальских рыб показали, что механизмами биохимической адаптации по пути совершенствования индивидуальной адаптации могут быть низкая величина энергии активации ферментной системы Ка,К-АТФазы, ее повышенная термостабильность и высокая удельная активность. При дивергентном пути эволюционирования видов возможными биохимическими механизмами адаптационных процессов могут быть, в частности, повышенная энергия активации ферментной системы №,К-АТФазы синаптосом мозга, ее низкая удельная активность и низкая термостабильность.

8. Такие характеристики функционирования системы ИаД-АТФазы синаптосом мозга как температура максимальной активности фермента, максимальная активность фермента, энергия активации и степень сродства фермента к субстрату могут являться критерием устойчивости вида к смене экологических факторов, в том числе к антропогенным нагрузкам. Частным случаем данного вывода может быть возможность использования перечисленных характеристик для оценки степени эндемизма рыб.

- 101

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Колесниченко, Любовь Евгеньевна, Иркутск

1. Александров В.Я. Клетки, макромолекулы и температура.- М.: Наука, 1975.- 254 с.

2. Александровский Ю.А., Поюровский М.В., Незнамов Г.Г. Неврозы и перекисное окисление липидов / Отв. ред. д-р. мед. наук Л.С.Евсеенко,-М.: Наука, 1991.- 139 с.

3. Башаров Н.С., Башарова Н.И. Байкальский омуль (Coregonus autumnalis migratorius Georgi) в Братском водохранилище// Гидробиологические и ихтиологические исследования в Восточной Сибири: чтения памяти проф. М.М.Кожова.- Иркутск, 1978.- С.151-157.

4. Бельченко Л.А. Сравнительный эколого-физиологический анализ картины крови у двух популяций серебряного и золотого карася//У Всесоюзная конференция по экологической физиологии и биохимии рыб: Тез. докл. Киев, 1982.- С.21-22.

5. Биохимическая эволюция,- Л.: Наука, 1973,- 215 с.

6. Биохимия мембран /Под ред. А.А.Болдырева.- Кн. 5: Кинетика мембранных транспортных ферментов. Кометиани З.П., Векуа М.Г.-М.: Высш. шк., 1988,- 111 с.

7. Биохимия мембран /Под ред. А.А.Болдырева.- Кн. 1: Болдырев A.A. Введение в биохимию мембран. -М.: Высш. шк., 1986,- 112 с.

8. Болдырев A.A. №,К-зависимая АТФаза (обзор)// Успехи физиологических наук .-1981,- N 2.- С. 67-104.

9. Болдырев A.A. Биохимические аспекты электромеханического сопряжения.- М.: Изд-во МГУ, 1977,- 207 с.-102

10. Болдырев A.A. Роль липидов в функционировании Na,IC-активируемой аденозинтрифосфатазы// Биологические науки.- 1979,- N3,-С.5-17.

11. Болдырев A.A., Лопина О.Д. и др. Биохимия активного транспорта ионов и транспортные АТФазы.- М.: Изд-во МГУ, 1983,- 126 с.

12. Болдырев A.A., Рубцов A.M. Кооперативные свойства транспортных АТФаз// Функциональная активность ферментов и пути ее регуляции.- М., 1981.- С.82-96.

13. Болдырев A.A., Ко-Чже-Чжун. Влияние холестерина на активность Ма,К-активируемой аденозинтрифосфатазы //Бюлл. эксперимент, биологии и медицины.- 1977.- Т. 12.- С.672-675.

14. Болдырев A.A., Курелла Е.Г., Тюлина О.В. Окислительная устойчивость Na, К-АТФазы // Доклады РАН.- 1995,- Т.342, N 4.- С. 546 -548.

15. Болдырев A.A., Мельгунов В.И. Транспортные АТФазы // Итоги науки и техники. Биофизика.- М., 1985.- Т.17,- С. 5-222.

16. Болдырев A.A., Швец В.И. Значение олигомерной организации для функционирования транспортных АТФаз//Биологические науки.- 1981.-N2.- С.21-31.

17. Брусованик В.И. Влияние экзогенных фосфолипаз на структурно-функциональные параметры синаптосом, выделенных из головного мозга крыс. Автореф. канд. дис.- М., 1988. 23 с.

18. Введение в биомембранологию / Под ред. А.А.Болдырева.- М.: Изд-во МГУ, 1990.- 207 с.- 103

19. Введенский Н.Е., Ухтомский A.A. Учение о координационной деятельности нервной системы.- М.: 1950

20. Верещагин Г.Ю. Происхождение Байкала, его фауны и флоры// Тр. Байкал. Лимнол. Ст.- М.:Л., 1940.- Вып. 10,- С.72-240.

21. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах.- М.:Наука, 1972,- 252 с.

22. Волерман И.Б. Характер питания и использование кормовой базы голомянками Байкала//Динамика продуцирования рыб Байкала.-Новосибирск, 1983,- С.63-66.

23. Волерман И.Б., Конторин В.В. Биологические сообщества рыб и нерпы в Байкале / Отв. ред. д.б.н. проф. А.Г.Егоров.- Новосибирск: Наука, 1983,- 247 с.

24. Волкова Л.А. Скорость переваривания пищи у байкальского омуля и бычка-желтокрылки//Продуктивность Байкала и антропогенные изменения его природы.- Иркутск, 1974.- С.245-261.

25. Волкова Л.А. Особенности группового поведения рыбЮкологические исследования озера Байкал и Прибайкалья.- Иркутск, 1984,- С.73-84.

26. Высоцкая Р.У., Руколайнен Т.Р. Биохимическая адаптация к температуре у разных видов рыб//Физиология и биохимия гидробионтов.-Ярославль, 1987,- С.6-12.

27. Дарвин Ч. Происхождение видов,- М.: Сельхозгиз, 1952,- 484 с.

28. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты,- М.:Мир, 1966.- 814 с.

29. Дремина Е.С., Шаров B.C. Кинетика Fe2+ индуцированного перекисного окисления липидов в липосомах в присутствии аскорбиновой- 104кислоты. Концентрированные эффекты ионов Fe // Биофизика.- 1995.-Т.40, Вып. 2,-С. 335 -340.

30. Дубур Г.Я., Велена А.К. Влияние физиологически активных соединений на системы перекисного окисления липидов в биологических мембранах// Биомембраны. Структура. Функции. Медицинские аспекты.-Рига, 1981.- С.257-277.

31. Егоров А.Г. Рыбы водоемов Юга Восточной Сибири (карпообразные, трескообразные, окунеобразные).- Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1988.328 с.

32. Егоров А.Г. Рыбы водоемов Юга Восточной Сибири (миноговые, осетровые, лососевые, сиговые, хариусовые, щуковые).- Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1985.- 361 с.

33. Загорских О.М., Сидоров B.C. Липидный состав органов леща в конце зимовки// Биохимия экто- и эндотермных организмов,-Петрозаводск, 1989.-С.13-19.

34. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологических мембран,- М.: Наука, 1982.- 224 с.

35. Кагава Я. Биомембраны.- М.: Высш. Школа, 1985,- 303 с.

36. Капля A.A., Кравцов A.B., Кравцова В.В. Чувствительность изоформ каталитической субъединицы №,К-Атфазы мозга крысы к Ds-да/Биохимия,- 1995.- Т.60, Вып.6.- С.970 -975.-105

37. Карупу В.Я. Электронная микроскопия.- Киев: Высш. школа, 1984.208 с.

38. Каткова Л.С. О месте проблемы адаптации в экологических исследованиях // Экологические исследования Байкала и байкальского региона. 4.1 / Под ред. О.М.Кожовой.- Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1992,- С. 64-68.

39. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Механизмы экологической адаптации гидробионтов // Проблемы экологии. Чтения памяти профессора М.М.Кожова.: Материалы V Междунар. конф./ Науч. ред. проф. О.М.Кожова.- Новосибирск: ВО Наука, 1995,- Т.2.- С. 104-113.

40. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Влияние адаптации к экстремальным воздействиям на активность К-АТФазы синаптосом мозга животных // Антропогенные воздействия и здоровье человека: Тез. докл. Всерос. науч.- практ. конф., Калуга, 1994,- Калуга, 1994. С. 19.

41. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Методические особенности изучения синаптосом // Региональные эколого-географические проблемы:- 106

42. Материалы XI конференции молодых географов.- Иркутск, 1990.- С.61 -63.

43. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е., Либе М.Л. Влияние адаптации байкальских рыб к различным условиям обитания на активность Na,K-АТФазы синаптосом из мозга // Биологические науки,- 1992. N 6,- С.78-84.

44. Каткова Л.С., Колесниченко Л.Е. Биохимические механизмы филогенетической адаптации байкальских рыб// Экология и охрана окружающей среды. IV Международная VII Всероссийская научно-практическая конференция: Тез. Докл.-Рязань, 1998.- С.42-43.

45. Кинетические различия лактатдегидрогеназы из мышц рыб при температурной адаптации/ Клячко О.С., Полосухина Е.С., Персиков A.B., Озернюк Н.Д.// Биофизика.- 1995.- Т.40, Вып. 3,- С. 513 517.

46. Клячко О.С., Полосухина Е.С., Озернюк Н.Д. Температура вызывает структурные и функциональные изменения лактатдегидрогеназы из скелетных мышц рыб//Биофизика.- 1993.- Т.38, вып.4,- С.596-601.- 107

47. Клячко О.С., Полосухина Е.С., Персиков A.B., Озернюк Н.Д. Кинетические различия лактатдегидрогеназы из мышц рыб при температурной адаптации// Биофизика.- 1995,- Т.40, вып.З.- С.513-517.

48. Кожов М.М. Становление и пути эволюции фауны озера Байкал// Проблемы эволюции.- Новосибирск, 1973,- Т.З.- С.5-30.

49. Козлова Т.А. Динамика общего химического состава и липидов приддонно-пелагических Cottoidei озера байкал в связи с их годовыми циклами. Автореф. дисс. к.б.н,-Владивосток, 1993.-23 с.

50. Козлова Н.И. Температурный фактор в экологии молоди сиговых рыб// Экологические исследования Байкала и байкальского региона. Часть 1/ Под ред. О.М.Кожовой.- Иркутск, 1992.- С.201 205.

51. Комиссарчик Я.Ю., Миронов A.A. Электронная микроскопия клеток и тканей.- JL: Наука, 1990.- 124 с.

52. Корниш-Боуден Э. Основы ферментативной кинетики / Пер. с англ. и предисл. д.х.н. Б.И.Курганова.- М.: Мир, 1979.- 272 е.- Cornish-Bowden. Principles of Enzyme Kinetics: Lecturer in Biochemistry.-Butterworth, 1976.

53. Коряков E.A. Пелагические бычковые Байкала.- M.: Наука, 1972.155 с.

54. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран. Л.: Наука, 1981,- 398 с.

55. Кулик В.А., Чиркина В.В., Бурда Т.И. Тканевой обмен белков и липидов у карпа при повышении температуры водной среды/ЯУ Всесоюзная конференция по экологической физиологии и биохимии рыб: Тез. докл.- Вильнюс, 1985,- С.108-109.- 108

56. Кусакина A.A. Термоустойчивость альдолазы и холинэстеразы у близких видов пойкилотермных животных// Изменчивость теплоустойчивости клеток животных в онто- и филогенезе.- Ленинград, 1967.- С.142-148.

57. Лав A.M. Химическая биология рыб.- М.:Наука, 1976,- 346.с.

58. Лакин Г.Ф. Биометрия.- М.:Высш. Шк., 1990,- с. 349.

59. Ламарк Ж.Б. Философия зоологии/ Пер. с франц. С.В.Сапожникова.-М.-Л.: Гос. изд-во биол. и мед. лит-ры, 1937.- 483 с.

60. Лапина H.H. Влияние температуры на некоторые стороны липидного обмена молоди плотвы/ЯУ Всесоюзная конференция по экологической физиологии и биохимии рыб: Тез. докл.- Вильнюс, 1985,-С.112-113

61. Лапкин В.В. Особенности физиолого-биохимических показателей рыб в зоне избираемых температур//1У Всесоюзная конференция по экологической физиологии и биохимии рыб: Тез. докл.- Вильнюс, 1985,-С.114-115

62. Лапкин В.В., Поддубный А.Г., Свирский A.M., Голованов В.К. Типы адаптации рыб к температуре//1У Всесоюзная конференция по экологической физиологии и биохимии рыб: Тез. докл.- Вильнюс, 1985,- С. 115-116.

63. Лизенко Е.И., Нефедова З.А., Сидоров B.C. Экологическая характеристика липидного состава икры некоторых видов рыб//Биохимия пресноводных рыб Карелии.- Петрозаводск, 1980.-С.6-15.

64. Лукьяненко В.И. Экологическая биохимия рыб: предмет, задачи и пути их решения //Экологическая физиология и биохимия рыб.- Вильнюс, 1985,-С. 125-128.- 109

65. Лызлова С.Н. и др. Сравнительное изучение креатинкиназ из мышц низших позвоночных // Сравнительная биохимия позвоночных,- Л., 1983.-С. 40-45.

66. Малета Ю.С., Тарасов В.В. Математические методы статистического анализа в биологии и медицине.- М.: Изд-во МГУ, 1982,- с. 175.

67. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических болезней сердца,- М.: Медицина, 1984.- 456 с.

68. Меерсон Ф.З. Теория индивидуальной адаптации к среде и профилактика стрессорных повреждений сердца.- М.:Изд-во Ун-та им.Патриса Лумумбы, 1981.- 47с.

69. Мирахмедов А.К., Джураева М.М., Хамидов Д.Х. Реакция биологических мембран на факторы внешнего воздействия.- Ташкент: Изд-во "ФАН" УзССР, 1988.- 124 с.

70. Мишарин К.И. Промысел и воспроизводство рыб на Байкале.-Иркутск, 1949,- 55 с.

71. Мишарин К.И. Рыбы и рыбный промысел в Иркутской области,-Иркутск, 1950,- 51 с.

72. Мишарин К.И. Байкальский омуль// Рыбы и рыбное хозяйство в бассейне озера Байкал.- Иркутск, 1958,- С. 130-287.-110

73. Нефедова З.А. Изменение связанных жирных кислот в раннем онтогенезе некоторых видов рыб//Биохимия экто- и энддотермных организмов.- Петрозаводск, 1989,- С.25-30.

74. Никольский Г.В. Экология рыб.- М.: Высш. Шк., 1974.- 367 с.

75. Новиков Г.Г., Карпов А.К., Андреева А.П. О некоторых механизмах адаптаций у рыб//Изв. Рос. АН. Сер. Биол,- 1994,-N 4.-С. 535-542.

76. Об "адаптивной специализации" состава и конформационных состояний жирных кислот в мембранных липидах жабр рыб/ Забелинский С.А., Чеботарева М.А., Бровцына Н.Б., Кривченко А.И.//Журнал эволюционной биохимии и физиологии.- 1995,- Т.31, N1.- С. 29 36.

77. Павлов Б.К. Возможны ли адаптации биоценотического уровня?//Оценка состояния водных и наземных экологических систем. Экологические проблемы Прибайкалья,- Новосибирск, 1994.- С. 155 159.

78. Павлов И.П. Избранные труды по физиологии высшей нервной деятельности,- М.:Учпедиздат, 1950.- 264 с.

79. Пианки Э. Эволюционная экология.- М.:Мир, 1981,- 399 с.

80. Пономарев В.И. Влияние температуры на активность протеолитических ферментов желудочно-кишечного тракта у рыб СевераЮкология,- 1995, №1.- С.86-89.

81. Пономарев В.И. Соотношение активности гидролаз, обеспечивающих процессы полостного и мембранного пищеварения у рыб северных широт//Вопросы ихтиологии,- 1993.-Т.33, №4.- С.728-732.

82. Проссер JL, Браун Ф. Сравнительная физиология животных -М.:Мир, 1967,- 766 с.- Ill

83. Романенко В.Д., Арсан О.М., Соломатина В.Д. Механизмы температурной акклимации рыб.- Киев: Наукова думка, 1991.- 192 с.

84. Россолимо JI.JI. Байкал.- М.: Наука, 1966,- 164 с.

85. Рыбы и рыбное хозяйство в бассейне озера Байкал/ Под ред. Кожова М.М., Мишарина К.И.- Иркутск, 1958.- 746 с.

86. Сазонтова Т.Г. Стресс-индуцируемые повреждения ШД-АТФазы миокарда и пути их предупреждения. Автореф. дисс. к.б.н.- Москва, 1987.23 с.

87. Световидов А.Н. Материалы к систематике и биологии хариуса оз. Байкал//Труды Байкальской лимнол. Станции АН СССР.- 1931.- Т.1.- С. 19199.

88. Северцов А.Н. Главные направления эволюционного процесса.-M.:JI.: Биомедгиз, 1934,- 150 с.

89. Северцов А.Н. Морфологические закономерности эволюции,- М.:Л.: Изд-во АН СССР, 1939,- 610 с.

90. Сеченов И.М. Рефлексы головного мозга.- М.:Изд-во АН СССР, 1961.- 100 с.

91. Сиделева В.Г. Сейсмосенсорная система и экология байкальских подкаменщиковых рыб (Cottoidei).-Новосибирск: Наука, 1982.-146 с.

92. Сиделева В.Г. Происхождение и современное состояние эндемичной ихтиофауны озера Байкал// Байкал природная лаборатория для исследования изменений окружающей среды и климата: Тез. докл. Иркутск, Россия,11-17 мая 1994.- Иркутск, 1994,- С.71-72.

93. Сиделева В.Г. Эндемичная ихтиофауна Байкала, ее происхождение и условия существования . Автореф. дисс. д.б.н,- С-Пт., 1993.-112

94. Сиделева В.Г., Фиалков В.А., Новицкий A.JI. Плавательное поведение и его связь с внешним строением у вторичнопелагических коттоидныхрыб (Cottoidei) оз. Байкал// Вопр. ихтиологии,- 1992,- Т.32, Вып.6.- С.138-143.

95. Сидоров B.C. Экологическая биохимия рыб: Липиды,- Л.:Наука, 1983,- 240 с.

96. Симпсон Дж. Темпы и формы эволюции.- М.: Изд-во иностр. лит., 1948,-358 с.

97. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах.- М.: Наука, 1972.-203 с.

98. Скулачев В.П. Энергетика биологических мембран,- М.:Наука, 1989,- 564 с.

99. Слоним А.Д. Температура среды обитания и эволюция гомеостаза// Физиология терморегуляции,- Л.:Наука, 1984,- С.378-440.

100. Слоним А.Д. Учение о физиологических адаптациях// Экологическая физиология животных.- Л.:Наука, 1979.- 4.1.- С.79-182.

101. Смирнов В.В. Возрастная изменчивость байкальского омуля Coregonus autumnalis migratorius (Georgi).- Вопр. Ихтиологии .- 1969,- Т.9, Вып.З (56).- С.508 515.

102. Смирнов В.В., Шумилов И.П. Омули Байкала.- Новосибирск: Наука, 1974,- 160 с.

103. Смирнова О.Г. Строение сетчатки у байкальских голомянковых рыб эндемичного семейства Comephoridae // Вопр. ихтиологии,- 1994,- Т.34, №6.- С. 816-819- 113

104. Соболь К.В., Наследов Г.А. Температурная зависимость параметров сокращения поперечно-полосатой мышцы миноги Lampetra fluviatilis// Биофизика.- 1996.- 41, №1.- С.103-109.

105. Сорокин В.Н., Сорокина Ф.Ф. Адаптивные механизмы рыб Средней Волги и гидростроительство// Экол. Пробл. Бассейнов крупных рек:Тез. междунар. Конф., Тольятти, 6-10 сент., 1993.- Тольятти, 1993,- С.148-149.

106. Стариков Г.В. Голомянки Байкала.- Новосибирск: Наука, 1977,- 94с.

107. Стоблов А.Я., Ставицкая E.H., Шульман Г.Е. Потребление кислорода и экскреция азота у черноморских рыб различной экологической специализации при гипоксических режимах//Гидробиол. Ж,- 1995.-Т.31,№1.- С.73-78.

108. Стойда JI.B., Емельянов Е.В. Применимость интегральной формы уравнения Михаэлиса-Ментен для кинетического исследования транспортных АТФаз Бюлл. экспер. биол. и мед.- 1980.- №8.- С.160-163.

109. Строганов H.A. Физиологическая приспособляемость рыб к температурным условиям среды.- М.: Изд-во АН СССР, 1956.-152 с.

110. Талиев Д.Н. Бычки-подкаменщики Байкала (Cottoidei).- JI-M.: Изд-во АН СССР, 1955,- 603 с.

111. Тугарина П.Я. Хариусы Байкала.- Новосибирск: Наука, 1981.- 280 с.

112. Тугарина П.Я. Thymallidae крупнейших озер Центральной Азии// Экологически эквивалентные виды гидробионтов в Великих Озерах Мира: Материалы Междунар. Симп., Улан-Удэ, Республика Бурятия, 2-4 сентября 1997г.- Улан-Удэ, 1997,- С.42-46.-114

113. Тютрина Л.И. Некоторые биохимические показатели байкальского омуля в период покатной миграции // Экологические исследования Байкала и байкальского региона. Часть 1/ Под ред. О.М.Кожовой.-Иркутск, 1992.- С. 205-215.

114. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих.- М.:Мир, 1975,- с.324.

115. Уильяме В., Уильяме X. Физическая химия для биологов/Пер. с англ. К.ф.-м.н. В.В.Борисова, к.х.н. С.М.Дудкина, к.ф-м.н. А.И.Полетаева,-М.:Мир, 1976.- 601 с.

116. Ушаков Б.П. О классификации приспособлений животных и растений и о роли цитоэкологии в разработке проблемы адаптации //Проблемы цитоэкологии животных,- М.-Л.Д963,- с.5 -20.

117. Ушаков В.Б. Теплоустойчивость возбудимой и сократимой систем мышечного волокна// Теплоустойчивость клеток животных,- М., 1965.-С. 45- 62.

118. Философские проблемы теории адаптации/Под ред. Г.И.Царегородцева.- М.:Мысль.- 1975.- 276 с.

119. Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация / Пер. с англ. канд. мед. наук Алипова H.H., Крюковой Е.П., канд. биол. наук Матвеевой Н.П.; Под ред. чл.-корр. АМН СССР Збарского И.Б.-М.:Мир, 1988,- 568 с.

120. Хухо Ф. Нейрохимия: Основы и принципы /Пер. с англ. На рус. яз. Гришин Е.В., Оноприенко В.В.- М.: Мир, 1990.- 354 с.

121. Чернокожева И. С. Характер и диапазон изменений теплоустойчивости мышц и их сократительных белков в связи с ролстом,- 115 сезоном и при тепловой акклимации лягушек// Структура, функция и реактивность клеток.- JL, 1973.- С.106 108.

122. Шатуновский М.И. О межпопуляционной изменчивости белкового и липидного обмена рыб//Первый симпозиум по экологической биохимии рыб: Тез. докл.-Ярославль, 1987.- С.212-214.

123. Шварц С.С. Экологические закономерности эволюции,- М.Наука, 1980,- 276 с.

124. Швец Е.В., Юфалин Е.Н. Анализ липидного состава Comephorus baicalensis, Comephorus с1уЬо\У8кп//Четвертая межвузовская конференция молодых ученых: Тез. докл.- Иркутск, 1986,- Ч.П.- С. 130.

125. Шкорбатов Г.Л. К построению общей теории адаптации // Журнал общей биологии.- 1982,- Т. 43, N 6.- С. 775-788.

126. Шмальгаузен И.И. Пути и закономерности эволюционного процесса.- М.:Наука, 1983,- 359с.

127. Шульман Г.Е. Физиолого-биохимические особенности годовых циклов рыб.- М.: Изд-во "Пищевая пром-сть", 1972.- 367 с.

128. Шульман Г.Е., Юнева Т.В. Функциональная роль докозагексаеновой кислоты в адаптации рыб//Первый симпозиум по экологической биохимии рыб:Тез. докл.-Ярославль, 1987,- С.219-222.

129. Шульман Г.Е., Яковлева К.К. Гексаеновая кислота и естественная подвижность рыб//Журн. общ. Биологии.- 1983,- Т.44, № 4.- С.529-540.

130. Элементы физиологии и биохимии общего и активного обмена у рыб/Под ред. Г.Е.Шульмана.- Киев: Изд-во "Наукова Думка",- 1978.- 202 с.-116

131. Эмеретли И.В. Зависимость активности ферментов энергетического обмена черноморских рыб от температуры в различные периоды годового цикла // Вопр. ихтиологии,- 1994,- Т. 34, N 3,- С. 395-399.

132. Aittaleb М., Hubner R., Lamotte B.J. Cold adaptation parameters derived from cDNA sequencing and molecular modelling of elastase from Antarctic fish Notothenia ntglecta// Protein Engineering.- 1997.- Vol. 10 (5).- pp. 475-477.

133. Arystarkhova E, Sweadner KJ. Tissue-specific expression of the Na,K-ATPase beta 3 subunit The presence of beta 3 in lung and liver addresses the problem of the missing subunit.- Journal of Biological Chemistry, 1997. -Vol 272, Iss 36.- pp. 22405-22408.

134. Balestrino A., Cupello A., Morelli A., Musante L., Panfoli I.// Measurements of (Na+,K+)ATPase after in vitro hypoxia and reoxygenation are affected by methods of membrane preparation.- Journal of Neuroscience Methods.- 1998.- Vol 79.- pp. 201-206.

135. Bass W. Type A behaviorer and coronary heart disease// Brain Research.-1981.-V 1, N 20.- P.1147-1150.

136. Boldyrev A.A., Ruuge E.K, Smirnova I.N., Tabak M. Na,K-ATPase the role of lipids and Mg-ions in the activity regulation// FEBS Letters.- 1977, V.80.- N2.- P.303-307.

137. Boldyrev A.A., Ruuge E.K., Shcheglova M.B. Cooperativity of brain Na,K-ATPase//Biochemistry International.-1981. -N2.-P.137-144.

138. Dennis A. Powers. Fish as Model Systems// Science.- 1989,- Vol.246.-P.352-358.

139. Emelyanov S.A., Tunitskaya V.L., Boldyrev A.A. Adenosine-5(p-Fluorosulfonylphenilphosphate) as a tool for investigation of cooperative properties of Na,K-ATPase// FEBS letters.- 1980, Vol. 114,-N2,-P.334-338.- 117

140. Gohnston D.W. Behavioral treatment in the reduction of coronary risk factors: Type A behavior and blood pressure // British Journal Clinical Psichology.- 1982.- N 21.- P.281-294.

141. Grillner S., Deliagina T., Ekebeg O., El Manira A., Hill R.H., Lansner A., Orlovskj G.N., Wallen P. Neural nttworks that co-ordinate locomotion and body orientation in lamprey//Trends Neurosci.- 1995.- 18, №6.- P.270-279.

142. Hajos F. An improved method for the preparation of synaptosomal fractions in high purity // Brain Research.- 1975.- V 93, N 3.- P. 485-489.

143. Hylland P, Milton S, Pek M, Nilsson GE, Lutz PL. Brain Na+/K+

144. ATPase activity in two anoxia tolerant vertebrates: crucian carp and freshwater turtle.- Neuroscience Letters, 1997, Vol 235, Iss 1-2, pp 89-92.

145. Jensen J., Lynch G., Baudry M. Regional differences in the activation of synaptosomal mitochondrial Ca uptake by spermine in rat brain// Brain Research.- 1990, 523.- P.313-315.

146. Jerald J.B. Anatomy and physiology of the central nervous system// Fish Physiology.- Academic Press.- 1970,- Vol. 4,- P. 1-90.

147. Johansson Dan, Nilsson Goran E. Roles of energy status, KATP channels and channel arrest in fish brain K Gradient dissipation during anoxia//J. Exp. Biol.- 1995,- 198, №12.- P.2575-2580.

148. Johnson Timothy P., Bennett Albert F. //The thermal acclimation of burst escope performance in fish: An integrated study of molecular and cellular physiology and organismal performance// J. Exp. Biol.- 1995.- 198, №10.-P.2165-2175.

149. Johnson T. P., Bennett A. F., Mclister J.D. Thermal dependence and acclimation of fast start locomotion and its physiological basis in Rainbow trout- 118

150. Oncorhynchus mykiss)// Physiological Zoology.- 1996.- Vol.69(2).- pp.276292.

151. Meyer E.M., Cooper J.R. Correlations between Na,K-ATPase activity and acetylcholine release in rat cortical synaptosomes// J. Neurochem.- 1981, 36,-N2.-P.467-475.

152. Miranda Estuardo J., Hazel Jefferey R. Temperature-induced changes in the transbilayer distribution of phosphatidylethanolamine in mitoplasts of rainbow trout (Onchorhynchus mykiss) liver// J. Exp. Zool.- 1996,- 274, №1,- P. 23-32.

153. Moulion N., Morot Gandary-Talarmoin J., Israel M. Spontaneous release of acetylcholine from Torpedo synaptosoms: effect of cetiodil and its analogue MR 16728// G. Neurochem.- 1994,- 62, №1,- P.113-118.

154. Muhlethaler K., Jay F. Electron microscopy of biological membane/ N.Y. and London: Plenum Press& 1985,- V.l: Membrane structure and dynamics.- P. 1-28.

155. Nilsson Goran E. Brain and body oxygen requirements of Gnathonemus petersii a fish with an exceptionally large brain// J. Exp. Biol.- 1996,- 199, №3.-P.603-607.-119

156. Renzis G., Boraancin M. Ion transport and gill ATPases// Fish Physiology.- Academic Press.- 1984,- Vol. 10B.- P. 65-104.

157. Richard E. P. The brain and neurohormones in teleost reproduction// Fish Physiology.- Academic Press.- 1983.- Vol. 9,- P. 97-135.

158. Sebert P., Meskar A., Simon B., Barthélémy L. Pressure acclimation of the ctl and liver membrane composition.- Experientia.- 1994,- 50, №2,- P.121-123.

159. Segal J.A., Crawford D.L. LDH-B enzyme expression: the mechanisms of altered gene expression in acclimation and evolutionary adaptation// Amer. J.Physiol.- 1994,- 267, №4, Pt.2.- P.R1150-R1153.

160. Smirnov V.V. Intraspecific structure of Baikal omul Coregonus autumnalis migratorius (Georgi)/ Pol. Arch. Hidrobiol.- 1992,- V.39, №3-4,- P. 325-333.

161. Spector T. Refinement of the Coomassie blue method of protein quantitation. A simple and linear spectrophotometric assay for 0.5 to 50 g of protein // Analytical Biochemistry.- 1978,- V 86, N 1,- P. 142-146.

162. Speth V.,Vunderlich F. Membranes of Tetrahynema 2. Direct visualization of reversible transitions in biomembrane structure induced by temperature// Biochim. Biophys.Acta.- 1973,-V.291, N3,-P. 621-628.

163. Stam W.W., Beintema J.J., Avino R.D., Tamburrini M. Molecular evolution of hemoglobins of Antarctic fishes (Notothenoidei)// Journal of Molecular Evolution.- 1997,- Vol.45 (4).-pp.437-445.

164. Sutphen V.H, Cornwell D.G. Some studies on lipids peroxidation in monomolecular and bimolecular lipid films.- J. Membrane Biol.- 1973.- V.13.-P.79-88.- 120

165. Tang Ming, Boisclalz Daniel. Relationship between respiration, rote of juvenile brook trout (Salvelinus fontinalis), water temperature and swimming characteristics// Can. J. Fish and Aquat. Sci.- 1995.- 52, №10,- p.2138-2145.

166. Urano A., Kubokawa K., Hiraoka S. Expression of the vasotocin and isotocin gene family in fish// Fish Physiology.- Academic Press.- 1994,- Vol. 13.-P.101-131.

167. Walker J.H., Agoston D.V. The synaptic vesicle and the cytoskeleton//J. Biochem.- 1987,- Vol.247.- P.249-258.

168. Ward R., Blandon Ivonne R., King Tim L., Baitinger Thomas L. Comporisons of critical thermal maxima and minima of juvenile red drum (Sciaenops ocellatus) from Texas and North Carolina// Northeast Gulf Sci.-1993.- 13, №1,- C.23-28.

169. Whittaker V.P. The Synaptosome. Handbook of Neurochemistry. Vol.2: Plenum Press.- New York, 1969,- S. 327-364.