Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Использование сурфагона для стимуляции овуляции в спонтанный и индуцированный эстрофаном эструс у молочных коров

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Использование сурфагона для стимуляции овуляции в спонтанный и индуцированный эстрофаном эструс у молочных коров"

ВСЕРОССИЙСКИЙ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА

(ВИЖ)

На правах рукописи УДК 612.646.02

А РЖА ЕВ Алексей Михайлович

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СУРФАГОНА ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ ОВУЛЯЦИИ В СПОНТАННЫЙ И ИНДУЦИРОВАННЫЙ ЭСТРОФАНОМ ЭСТРУС У МОЛОЧНЫХ КОРОВ

03.00.13,—ФИЗИОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА и животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

п. Дубровины Московской области 1992 г.

Диссертационная работа выполнена в отделе эндокринологии сельскохозяйственных животных Всероссийского научно-исследовательского института животноводства.

Научные руководители: доктор биологических наук

профессор Ю. Д. КЛИНСКИИ,

кандидат биологических наук В. Я. ЧЕРНЫХ

Официальные оппоненты: доктор биологических наук В. П. КОНОНОВ,

доктор биологических наук

м. и. клопов

Ведущее учреждение: Московская сельскохозяйственная академия им. К. А. Тимирязева (ТСХА)

О у . . у;

Защита диссертации состоится: «—» ¿-¿¿¿ту^т 1993 г.

/уу /

я—-- --часов на заседании специализированного совета Д.020.16.02

при Всероссийском научно-исследовательском институте животноводства.

Адрес шгститута: 142012, Московская обл., Подольский р-н, пос. Дубровицы.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института. Автореферат разослан « 1993 г.

Ученый секретарь специализированного совета кандидат биологических наук

И. И. шмыгин

ОБЩАН ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Благодаря успехам пептидного синтеза в настоящее время создано большое количество аналогов гипоталами-ческих либеринов, в том числе и лшлберияа, что позволяет контролировать регуляцию половой функции на уровне ЩС. Применение препаратов Гн-РВ делает возможным воздействие на синтез и циклическую секрецию гонадотропинов гипофиза в качестве индуцированного пика ЛГ/ФСГ. При парэнтеральном введении Гн-РГ или его синтетических аналогов в крови коров временно увеличивается концентрация ЛГ, в ряде случаев уже через 15 минут после инъекции препарата, и достигает'максимума через 2-3 часа. Многими исследователями отмечается положительное влияние введения Гн-РГ и его аналогов яа формирование и функционирование желтого тела после индуцированной овуляции. Полученный экспериментально индуцированный выброс ЛГ обеспечивает овуляцию у коров в период 24-27 часов с момента пика гонадотропина. Таким образом, аналоги Гн-РФ могут быть использованы в сельском хозяйстве для контроля овуляции.

В настоящее время не получено тацже достоверных данных при применении аналогов Гн-РГ в сочетании с препаратами ПП?аос ДО* стимуляции овуляции в синхронизированную охоту. Однако этот вопрос исследуют многие ученые. Возможность получить синхронную охоту с заданным временем овуляции выглядит достаточно заманчиво и может в значительной мере изменить технологию воспроизводства стада в животноводстве. Большинство авторов, проводивших подобные исследования считают, что наиболее благоприятный период для введения препаратов люлиберина коровам после второй /через II дней после первой/ обработки ПП?2о1. - 48-72 час. Более раннее

введение ДГ-ЕГ нежелательно, так как ведет к анормальному развитию желтых тел, нарушению гормонального профиля в лютеияовую фазу цикла и, со всей видимости, выходу в половые пути недозревших гамет. Это касается и осеменения в синхронизированную охоту и фронтального осеменения всех обработанных животных через 72-80 часов после инъекции ПЕР^а* Гаким образом, вопросы стимуляции овуляции и использования для этой дели синтетических аналогов Гн-ЕГ, в первую очередь отечественных, требуют дальнейшего изучения.

Цель исследования. Цель данной работы состояла в разработке методов повышения ошюдотворяеыосги у коров молочных пород на промышленных комплексах за счет профилактики ановуляторных состояний и использования синхронизации охоты астрофаном.

Основные задачи доследований.

1. Изучение ЛГ-стимулирувдего действия сурфагона в период начала охоты.

2. Определение оптимальной дозы сурфагона для стимуляции предовуляторного выброса ЛГ.

3. Определение оптимального времени введения сурфагона в период спонтанной охоты.

4. Определение оптимального периода времени для введения сурфагона после инъекнии эстрофана для стимуляции выброса ЛГ и овуляции.

5. Изучение возможностей промышленного использования стимуляции овуляции сурфагоном для повышения оплодотворяемости и сокращения числа осеменений до однократного.

6. Изучение возможностей Использования в молочном скотоводстве синхронизации охоты и овуляции- эстрофаном и сурфагоном, при осеменении как в индуцированную охоту, так и фронтально, без выявления признаков эсгруса у коров.

Научная новизна. В данной работе изучен механизм действия отечественного суперактивного аналога лалиберина сурфагона в различные сроки после начала эструса, определены оптимальные сроки и дозировки для коров с удоем выше 4000 кг молока, проведен анализ механизма стимуляции выделения ЛГ и овуляции при комплексном использовании сурфагона и аналога ПГБ^ - эстрофана. Показана возможность однократного осеменения коров и телок после стимуляции овуляции сурфагоном. Материалы представленной диссертации использовались при составлении постоянного наставления по применению сурфагона для лечения гинекологических заболеваний у коров.

Практическая значимость работы. Представленные доказательства стимулирующего действия сурфагона создают возможности для его широкого использования в животноводстве, что позволит решить многие вопросы воспроизводства стада, связанные с нарушением гона-дотропной функции гипофиза. Профилактическое использование сурфагона позволит снизить количество ановуляторяых циклов и связанных с недостаточной продукцией ЛГ задержек овуляции, за счет чего может быть значительно повышена оплодогворяемость в стаде. Так же использование сурфагона в начале охоты дает возможность осеменить коров однократно, не проигрывая при этом в оплодотворяв-мости, что значительно сэкономит расход спермы. Использование комплексной обработки эстрофаном и сурфагоном позволит повысить оплодотворяемость в синхронизированную охоту и в значительной

мере снизить нагрузки на техника по искусственному осеменению, а применение однократного фронтального осеменения на телках возможно позволит по-новому организовать работу службы искусственного осеменения.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и получили положительную оценку на:

- УП Всесоюзном совещании эмбриологов,г.Москва, 1986г.,

- симпозиуме "Физиология пептидов", г.Ленинград, 1988г.,

- в Московском областном территориальном центре научно-технической информации и пропаганды, 1989г.

Внедрение. Материалы представленной диссертации использовались при составлении постоянного наставления по применению сур-фагона для лечения гинекологических заболеваний у коров.

Объем работы. Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, результатов и обсуждения собственных исследований, выводов и практических предложений. Содержит 25 таблиц , 3.рисунка. Список использованной литературы содержит 214 наименований, в том числе 177 иностранных.

Материалы и методы исследований.

Исследования проводились в хозяйствах Московской области: ГППЗ "Горки-2", колхозе им.Дзержинского, ГПЗ "Коммунарка" на коровах молочных пород со среднегодовым удоем 4,5 - 5 тыс.кг молока.

С целью выявления у коров спонтанной охоты за животными устанавливалось круглосуточное наблюдение. Началом охоты считали

время первого проявления рефлекса неподвижности. Время наступления овуляции определяли ректфьяо, обследуя животных каждые 2-3 часа, начиная с 15-го часа после начала охоты.

Образцы крови отбирали из яремной вены по 10 мл от кавдой коровы. Пробы консервировали гепарином. Сыворотку получали путем центрифугирования образцов со скоростью 2500 об/мин. Полученную сыворотку хранили до исследования при -20°С.

Определение концентрации ЛГ проводили в ШИЭК ВКНЦ по методике, предложенной Антоновым A.C. с соавт., 1977 и Никифоровой Г.П. с соавт., 1977.

В опытах использовали сурфагон в физиологическом растворе, в концентрации 5 мкг в I мл. Препарат вводили внутримышечно.

Для синхронизации эструса использовали аналог ПГР^- эст-рофан, производства ЧССР, в дозе 500 мкг клопростенола на животное. Введение препарата проводили внутримышечно в люгеальную фазу цикла при наличии в яичниках хорошо развитых желтых тел.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

Определение сроков наступления овуляции у коров относительно начала охоты. Изучали зависимость наступления овуляции от сроков начала проявления признаков охоты и предовуляторной волны ЛГ. У 66 коров круглосуточно выявляли момент начала проявления рефлекса неподвижности. Начиная с 15-го часа после начала охоты определили время наступления овуляции. 36 коров, используемых в опыте имели первую после отела охоту, у 30 животных учитываемая охота была повторной /2 и более неплодотворных циклов/. Результаты представлены в таблице I. Около 50$ овуляций происходит в период 20-üQ часов от начала охоты. Через 20-25 и 26-30 часов

ВРЕМЯ НАСТУПЛЕНИЕ ОВУЛЯЩИ У КОРОВ ОТНОСИТЕЛЬНО НАЧАЛА ОХОТЫ

Число Время наступления овуляции (чао)

Группа ж-х -—-—-— йеовУлй-

(гол) 20 20-25 26-30 31-35 36-40 41 и более ровало

Ср.время в Ср.время « Ср.время Ср.время * Ср.время а Ср.время <* Ср.время <*

овуляции * овуляции * овуляции " овуляции " овуляции * овуляции * овуляции *

5,5 23,5+ 30,5 28,3+ 22,2 32,6+ 16,7 38,2+ 8,3 49,8+ 8,3 - 8,3

0,43 0,23 0,69 1,01 3,п"

Много- 30 17,8+ 16,7 23,0+ 33,3 27,9+ 16,7 31,8+ 6,7 36,7+ 10,0 44,5+ 6,7 - 10,0

кратно 0,97 0,61 0,46 0,75 0,17 1,5

ос-е

Впервые 36 16,8+ осеме- 2,75

венные

Итого 66 17,5+ 10,6 23,2+ 31,8 28,1+ 19,7 32,4+ 12,1 37,4+ 9,1 47,7+ 7,6 - 9,1 0,92 0,36 0,22 0,54 0,57 2,2

в опыте зафиксировано у животных, имевших первую после отела охоту 30,5 и 22,2$ овуляций и у многократно циклирующих коров -33,3 и 16,7$ соответственно. В среднем по обеим группам'это составило соответственно за время 20-25 после начала охоты 31,8 и 26-30 - 19,7$. В 10,6$ случаев овуляция происходила до 20 часов от момента первого проявления рефлекса неподвижности. Около 30$ циклирующих коров имеют задержку овуляции более 36 часов и потенциально могут явиться животными, неоплодотворившимися в данный эструс в силу тех или иных причин - несвоевременного осеменения или ановуляции. Тоже касается и 10,6$ животных, овулированных до 20 часов. Увеличение количества таких животных во второй группе подтверждает предположение об асинхронности проявлений внешних признаков охоты и соответствующих им физиологических изменений у животных.в условиях промышленного комплекса.

Определение времени проявления предовуляторной волны ЛГ у спонтанно циклирующих коров. В опыте у 16 коров отбирали образцы крови для определения концентрации ЛГ в течение 16 час. после начала охоты и определяли наступление овуляции.

Из результатов таблицы 2 видно, что 8 голов имели выраженный предовуляторный подъем ЛГ. в исследуемый период, что составляет от общего числа животных 50$, у остальных 50$ выброс гона-дотропина не зафиксирован, что, принимая во внимание отмеченную при этом овуляцию, свидетельствует о том, что у этих коров пик ■ЛГ возможно проявился до начала охоты. Из 16 исследуемых животных 18,8$ /22,2 и 14,3$ соответственно у первых и многократно осеменяемых после отела/ имели выброс ЛГ к началу охоты. 12,5$ /11,1 и 14,3 - проявили пик через 2 часа после ее начала. .Через

Время наступления выброса Ж"

Группа Число Число животных с выбросом ЛГ в различные сроки ж-х после начала охоты

(гол) -1-,-,-1-,-

0!2!3 4 6 7и более

% % гол. % гол'. % гол. % гол. %

Впервые осемененные 9 22,2 ИД I ИД - I ИД 4 44,4

Многократно перегулив. 7 14,3 14,3 I 14,3 - '4 57,1

Итого 16 18,8 12,5 I 6,3 I 6,3 I 6,3 8 50,0

3,4 и 6 часов выброс гонадотропина был отмечен у 6,3 коров в каждом из данных периодов времени. Таким образом, после проявления охоты и в течение последующих 6 часов предовуляторный подъем ЛГ наблюдался у 50,0$ подопытных животных в среднем - через 1,9*0,81 и за период 7-16 часов выброс ЛГ не наблюдался, а число животных не проявивших его в исследуемый период составило 8 голов, т.е. 50$. Все животные имели овуляцию через 26,2+2,36 и 20,4+0,80 час. соответственно для случаев проявления лика ЛГ и его отсутствия.

У 6 из 8 коров не имевши к началу опыта и в последующе часы повышения уровня ЛГ, отмечалось однако достоверное /р<0,01/ его снижение через 2-4 часа после начала эксперимента. Две дру-

гие коровы в исследуемый период не имели каких-либо изменений в динамике ЛГ. Принимая во внимание время наступления овуляции /см.таблицу 3/ у животных этих групп можно предполагать, что. в момент начала отбора проб крови у коров второй группы мы наблюдали спад волны гонадотропинов, а у коров Ш группы предовулятор-ный пик произошел еще раньше, до начала эксперимента. Таким образом, 50$ коров имели выброс ЛГ в течение первых 6 часов после начала охоты, 37,5% коров - незадолго до ее начала и 12,5$ не проявили пика ЛГ в исследуемый период.

Таблица 3

Изменение концентрации ЛГ у коров с различным его уровнем в начале охоты

Группа Число животных Время Уровень ЛГ, нг/мл - проявле- в М0Менг через ¿¡-4 ния пика пика иди часа после ЛГ от на- в о час. начала чала охоты Время наступления овуляции от начала охоты

Животные, проявившие пик ЛГ в начале охоты 8 1,9+0,81 15,8+2,06 5,6+1,01 26,2+2,36

.йивотные, имевшие снижение уровня ЛГ в исследу емый период 6 0,3+0,33 5,0+0,46 1,6+0,42 21,9+0,78

Животные, не имевшие изменений концентрации ЛГ 2 — 4,1+1,17 3,2+1,12 18,5+1,01

Таким рбразом, исходя из результатов этих двух опытов можно

о

утверждать, что у приблизительно 30$ коров овуляция происходит в сроки более поздние, чем 30 часов от начала охоты. Время наступления овуляции относительно проявления пика ЛГ составляет 24,5+2,36 час., в пределах от 20,5 до 38,0. часов, что относительно начала охоты составляет 26,2+2,36 и 21,0-38,0 соответственно. В период охоты предовуляторный подъем ЛГ наблюдался лишь у половины исследуемых животных.

Индуцирование предовуляторного пика ЛГ сурфагоном.

Изучалась возможность получения индуцированного сурфагоном предовуляторного пика ЛГ у коров. Инъекцию сурфагона проводили коровам, имевшим признаки течки и наличие зрелых фолликулов и полового возбуждения, но до начала проявления рефлекса неподвижности. Животные были разделены на четыре группы, по три головы в каждой. Коровы I, П, Ш, 1У группы получали соответственно 5, 10, 15 и 20 мкг/гол. сурфагона. Реакцию гипофиза оценивали по концентрации ЛГ в плазме крови до и после введения препарата /0,3 и 5 час./. На рис.1 представлена динамика изменения концентрации ЛГ в зависимости от дозы препарата. Видно, что во П, Ш, 1У группах получен одинаковый по уровню выброс, а у животных I группы индуцированный пик почти в два раза ниже, чем у трех других групп. Концентрация ЛГ через 3 часа после инъекции сурфагона составила соответственно у коров I, П, Ш и 1У групп 19,0+5,6; 29,4+5,00; 28,4+1,46; 27,8+2,57 нг/мл. Превышение концентрации ЛГ через 3 часа по сравнению с базальным уровнем составила в I группе - на 139,3$, во П - на 33?7,6$, в Ш - на 265,3$ и в 1У -на 253,6$. Таким образом, оптимальной дозой для стимуляции ЛГ-активности гипофиза является доза 10 мкг.

24.

22

20

18

16

IV

12

Ю

ш

О 3

А

0 5б 5

Зв 5 0 3 5 В|емя. час.

Рис. 1. Индуадия. предов удягорного пика ЛГ сурфагоно*. А - 5 мкг, Б - 10 мкг, 3 - .15 мкг, Г - 20 мкг

Определение времени наступления овуляции и выброса ЛГ гипофизом коров в ответ на введение сурфагона в разные сроки относительно начала охоты. Изучали оптимальное время введения сурфагона относительно начала охоты. 12 коров были разделены на 3 группы и по мере проявления охоты им вводили сурфагон в дозе 10 мкг I - в момент начала охоты, во П - через 6 часов и в Ш - через 12 часов после начала охоты. Результаты представлены в таблицах 4 и 5. Концентрация ЛГ /см.таблицу 4/ повышалась через 3 часа после введения сурфагона лишь у коров I группы.

Таблица 4'

Изменение концентрации ЛГ в плазме крови у коров после введения сурфагона в различные сроки от начала охоты

Группа Бремя Доза введе- сурфа-ния гона, сурфа- мкг гона, час от начала охоты

Уровень ЛГ в.плазме, нг/мл

I 0 ю 4 33,7+5,85 35,8+5,61 24,2+1,71

п е ю 4 18,2+1,91 21,6+1,00 16,4+3,29

ш 12 10 4 17,0*1,71 21,7+2,56 15,6+2,34

Значительно более высокий уровень ЛГ в 0 час. по сравнению с другими группами в первой группе объясняется тем, что в момент начала охоты,-когда проводилась инъекция сурфагона, у части жи-

вотяых /2 гол./ происходил естественный выброс ЛГ. Коровы П и Ш групп не имели выраженных изменений в концентрации гонадотропина до и после введения сурфагона. Время наступления овуляции у животных всех групп не имело достоверных различий. Овуляция происходила соответственно для I, П, Ш групп в пределах 21-25, 21-25 и 22-32 час. и имела средние значения 23,1+1,08; 23,1+1,26 и 26,3+2,24.

Таблица 5

Время наступления овз?ляции после введения сурфагона в различные сроки от начала охоты

Группа Доза сурфа- Время Время наступления овуляции, час.

гона, мкг/гол.

введе-

|агона^~ 0г начала охоты

от яача- Ср. время

ла охоты, мин. макс.

час

I 10 0 4 21,0 25,0 23,1+1,08

п 10 6 4 21,0 26,0 23,1+1,26

ш 10 12 4 22,0 32,0 26,3+2,24

Индуцирование выброса ДГ и овуляпии сурфагоном в синхронизированный эогрофаяом эструс. Исследовались различные сроки введения сурфагона для получения индуцированного выброса ЛГ после синхронизации охоты эстрофаном. Коровам I группы сурфагон вводили через 60 часов после инъекции эстрофана, во П группе -через 70, в Ш - через 75, в 1У - через 80 и в У - через 90 часов.

Соответствующим обработкам были подвергнуты 62 коровы, у 28 из которых отбирали пробы крови для контроля уровня ЛГ. Результаты анализов представлены в таблице 6.

Таблица 6

Изменение концентрации ЛГ в плазме крови коров после введения сурфагона в различные сроки от инъекции эстрофана

Группа Время Уровень ЛГ в плазме

введе--1---

ния оурфа-

гова 0 3

от инъекции

вг/мл % нг/мл. % нг/мл %

час.'

I 60 2,3*0,43 • 100,0 10,5+1,32 456,5 5,0+0,62 217,4

П 70 1,440,27 11,4+3,46 814,3 3,9+1,01 278,6

Ш 80 2,1+1,48 5,9+2,15 280,9 2,9+0,84 138,1

1У 90 3,3+1,78 4,3+1,60 129,7 2,8+0,83 84,8

В I и П группах, при введении сурфагона через 60 и 70 часов, после инъекции эстрофана зафиксировано повышение уровня ЛГ с 2,3+0,43 и 1,4+0,27 до 10,5+1,32 и 11,4+3,46 нг/мл соответственно. Через 3 часа после инъекции сурфагона, таким образом, концентрация гонадотропива в плазме крови увеличилась на 456,5$ в первой груше и на 814,352 во второй, что говорит о высокой гона-дотропной активности гипофиза у коров в этот период. При введе-

юш сурфагона через 80 часов пбсле применения простагландина повышение уровня ЛГ составило 280,9$; что в 1,6 и 2,9 раз ниже, чем аналогичные показатели в I и П группах.

Из данных представленных в таблице 7 видно, что у коров, обработанных сурфагодом через 60 часов после инъекции, овуляция наступала в период 28-43,5 часа после инъекции лвлиберина. Среднее время ее проявления составило 33,7+1,58 час. В других группах эти показатели уменьшаются и во второй группе составляют 16,0-32,5, в среднем 23,4±2,00 часа, что на 10,3 часа меньше, чем в первой группе /р<0,01/.

Таблица 7

Время наступления овуляции у коров после введения сурфагова в различные сроки относительно инъекции эстрофана

Группа Время Время наступления овуляции

введе- ---

ния относительно введения относительно введения

сурфа- сурфагона эстрофана

гона __

п пределы ср. время пределы ср. время

I 60 13 28-43,5 33,7+1,58 88-103,5 93,7+1,58

п 70 12 16,0-32,5 23,4+2,00 86-102,5 93,4+2,00

111 75 10 1,5-29,0 16,8+2,85 76,5-104 91,8+2,85

1У 80 14 7,0-25,5 16,3+1,89 87-105,5 96,3+1,89

У 90 13 1,0-31,0 15,6+2,67 84,0-114 102,9+2,62

Время наступления овуляции, исчисляемое от момента обработки сурфагоном у животных I и П групп достоверно отличается ор та-

ковых группах /р<0,001 и 0,05, соответственно/. Динамика изменения среднего времени наступления овуляции в зависимости от периода обработки сурфагоном, является показателем степени синхронизации у обследуемых животных. Это подтверждается также данными. предыдущих исследований концентрации ЛГ в плазме крови животных соответствующих групп. У части животных, обрабатываемых в более позднее чем 70 часов сроки наблюдается спонтанный выброс гонадотропинов, что обусловливает и более раннюю овуляцию у таких коров. Причем возможность контролирования овуляции таким способом снижается с увеличением срока обработки люлиберином относительно введения ПП?2е£ Это приводит к тому, что у отдельных животных, обработанных сурфагоном через 90 часов после инъекции эстрофана, овуляция происходит уже через I час после последнего введения, а у других - через 28-31, что указывает на отсутствие у первых синхронной реакции на введение сурфагона вследствие более раннего пика гонадотропинов, и, напротив, наличие индуцированного выброса у вторых.

Более наглядно это представлено в таблице 8,'где видно, что более сжатые сроки наступления овуляции отмечаются у животных первых трех групп, в то время как 14,3 и 46,2% животных в 1У и У группах соответственно овулируют в более поздние чем 100 и 104 часа сроки. Наиболее растянуто овуляция происходит у коров У группы, причем наибольшее число овуляций происходит несинхронно, в период с 80 до 109 часов. Но, в то же время," 38,5$ реагируют проявлением овуляции на обработку сурфагоном, что указывает на потенциальную возможность и более поздней задержки овуляции, либо, ановуляторного состояния.

Результаты.синхронизации овуляции сурфагоном в синхронизированный эстрофаном эструс

Груша Время Число опыта введе- жив-х ния 7

сурфа-гона

Период времени от обработки эстрофаном (час)

-г

-г

т

со

А

со

ст> со

I

ю

оо

а> со

СП о> . I

1Л 0>

3

т

8

% отмеченных овуляций

I 60 13

п 70 12

ш 75 10 20,0

1У 80 14

У 90' 13

7,7

30,8 38,5 7,7 23,1 11,7 16,6 41,7 30,0 20,0 20,0 10,0 28,6 14,3 7,1 35,7 14,3

15,4 7,7 23,0 7,7 38,5

Принимая во внимание все выше изложенные материалы по этому эксперименту можно утверждать, что наиболее приемлшое время для получения индуцированного выброса ЛГ и последующей синхронной овуляции - 70 часов после инъекции ПП^^. Период 60 часов для части животных возможно физиологически менее обоснован. Увеличение времени введения сурфагона более 80 час. также не желательно в связи со спонтанными проявлениями овуляции до ожидаемого периода у 50 и более процентов коров. Однократное же осеменение коров II, Ш и 1У групп в соответствующее время через 10-14 час после введения сурфагона, на наш взгляд, вполне реально, не зависимо от того, была ли овуляция провоцированной или же произошла спонтанно.

Влияние стимуляции овуляции оурфагоном на оплодотворяемость коров

Группа опыта Число Плодотворно осеменилось Индекс Сервио-период

животных гол. Всего от I ос-я от П ос-е - осеменяемо- /ДН./

гол. % гол. % гол. %

Опыт Впервые после отела осеменяемые 47 41 87,2 30 63,8 7 14,9 2,12 76,3^5,65 *

Многократно перегуливающие 56 43 76,8 31 55,4 9 16,1 2,32 125,0+9,69

Контроль Впервые после отела осеменяемые 49 36 73,5 22 44,9 9 18,4 2,61 97,5+12,58

Многократно перегуливающие 63 42 66,7 23 36,5 9 14,3 2,76 134,6+10,93

Итого Опыт 103 84 81,6х 61 59,2^ 16 15,3 2,23 102,4+6,33

Контроль 112 78 69,6х 45 40,2х* 18 . 16,1 2,69 116,6+8,23

х !><■ 0,05 ** р<0,05

Применение сурфагона для повышения оплодотво ряемости в спонтанную охоту. В опыте использовалось 215 коров, 103 из которых были в начале охоты обработаны сурфагоноы ДОыкг/гол./, 112 голов служили контролем. Осеменение животных обеих групп проводили двукратно в соответствии с действующей инструкцией по искусственному осеменению коров и телок. Всего за период эксперимента в опытной группе оплодотворилось 81,6? животных, что превышает этот показатель в контроле на 125?. Стельность от 1-го осеменения у опытных животных на 19,0? выше, чем у контрольных. Повышение оп-лодотворяемости в первую после обработки охоту способствовало сокращению сервис-периода на 14,2 да. В целом не установлено позитивного влияния сурфагояа на нормализацию половых циклов я оп-лодотворяемость от второго после обработки осеменения. Ошюдог-воряемость при этом была достаточно низкой и практически не отличалась от таковой в контроле. Индекс осеменяемости в опытной группе был ниже на 0,46.

Таким образом, в результате этого эсперимента показана возможность стимуляции. овуляции и профилактики ановуляторных состояний у молочных коров с удоем выше 4,5 тыс.кг молока.

Использование стимуляции овуляции«сурфагоном для однократного осеменения коров. 50 коровам в начале охоты вводили 10мкг сурфагона с целью стимуляции выброса ЛГ и 40 ед. окситошна. Осеменение проводили через 12-16 час. после инъекции. Контрольных • коров осеменяли двукратно. Результаты представлены в таблице 10.

З.а период эксперимента из 5 гол. опытной группы плодотворно осеменилось 82,0? коров, в то время как в контрольной группе при двукратном осеменении этот показатель был ниже на 3,2?. Таким же

Влияние стимуляции овуляции сурфагоном на оплодотворяемость коров при однократном осеменении

Группа Крат. Число Плодотворно осеменилось Индекс Сервис-пе-

опыта ос-я кив-х-осеме- риод

всего от 1ос-я от 2ос-я няемо-

--з-з-гг С1И

гол. % гол. % гол. %

Опыт I 50 41 82,0 27 54,0 4 8,0 , 2,19 101+11,4

Конт- 2 52 41 78,8 21 40,4 10 19,0 2,63 108+8,99 роль ~

образом повышается и стельность от 1-го осеменения. У коров опытной группы этот показатель был выше аналогичных значений в контрольной группе на 13,6$. Оплодотворяемость во вторую охоту была ниже в 2,4 раза по сравнению с контролем. Индекс осеменяемости в опытной группе был ниже на 0,44 сервис-период на 7,0 дней короче, чем в контрольной.

При этом в опытной группе из 22 впервые осеменяемых после отела коров за период опыта оплодотворяемость составила 95,5$ /см.таблицу II/. В первый после отела эструс оплодотворилось 59,1$. Многократно до этого циклирующие коровы имели более низкие показатели - 71,4$ за весь период опыта.и 50,0$ от 1-го /учитываемого/ осеменения. У впервые осеменяемых после отела коров опытной группы оплодотворяемость за период эксперимента была выше по сравнению с контрольной на 14,0$, а показатель стельности от 1-го осеменения на 22,1$. Животные, имевшие на начало опыта несколько неплодотворных-осеменений в целом за исследуемый период

Таблица II

Влияние применения сурфагона на оплодотворяемость впервые после отела осеменяемых и "проблемных" коров при однократном.осеменении

Группа Кратность Наличие Число Плодотворно осеменилось осеменения осеменен живот-.

ний на ных, всего от I ос-я от 2 ос-я няемости

начало гол. -

опыта гол. % гол. % гол. %

Индекс Сервис-осеме- период

Опыт I Впервые пос- 22 ле отела осеменяемые 21 95,5 13 59,1 I 4,5 1,95 .81,4+14,97

Многократно 28 перегуливающие 20 71,4 14х 50,0 3 10,7 2,05 121,8+16,45

Конт- 2 роль Впервые пос- 27 ле отела осеменяемые 22 81,5 10 37,0 5 18,5 2,18 91,5+10,77

Многократно. 25 перегуливающие 19 76,0 IIх 44,0 5 20,0 3,16 127,2+13,86

х У животных, имевших до начала опыта несколько неплодотворных осеменений, 1-м считалось учитываемое на начало эксперимента.

имели близкий процент оплодотворяемости - 71,4$ в опытной и 76,0$ в контрольной группах, а стельность от 1-го /учитываемого/ осеменения в опытной груше была выше на 6,0$. Индекс осеменяе-мости в опытной группе в обеих случаях был ниже чем в контроле на 0,23 и 1,11 соответственно для впервые и многократно осеменяемых коров. Сервис-период также короче у коров обеих групп опыта по сравнению с контрольными животными на 10,1 и 5,4 дн. Таким образом, при использовании однократного осеменения и комплексной гормональной обработки оплодотворяемость повысилась в ср. на 13,6$. В то же время результаты однократного осеменения полностью соответствуют данным, полученным в предыдущем эксперименте, при использовании двукратного осеменения.

Стимуляция овуляции у коров в синхронизированную эстрофаном охоту. В опыте использовалось 206 коров, 65 из которых были обработаны эстрофаном и в период охоты получали 10 мкг сурфагона. 76 гол. были обработаны золько эстрофаном и 65 коровам никаких обработок не проводилось и они служили контролем. Результаты представлены в таблице 12. Оплодотворяемость у коров, обработанных эстрофаном и осемененных в спонтанную охоту практически не различалась - 43,4 и 46,1$. В тоже время при использовании сурфагона в начале охоты, индуцированной эстрофаном, оплодотворяемость от 1-го осеменения составила 52,3$, что на 8,9$ больше, чем при использовании только эстрофана. Сервис-период также был короче у коров 1-й группы на 15 дн. по сравнению с животными, осеменяемыми спонтанно и на 6,3 дн. по сравнению с животными, получавшими только эстрофан. Тоже касается и индекса осеменяемости. Наиболее низкий показатель /2,02/ у коров, подвергшихся комплексной гор-

Влияние сурфагона на оплодотворяемость коров в синхронизированную эстрофаном охоту

Группа Число Оплодотворилось Индекс Сервис-период

ных от 1го гол. ос-я от Пго % гол. ос-я % мости

Эстро- 65 фан сурфа-гон 34 52,3 31 17,0 2,02 92,9+7,26

Эстро- 76 фав 33 43,4 13 17,1 2,13 99,2+12,39

Без об- 65' работки 30 46,1 8 12,3 2,65 107,9110,67

мональной обработке, в то время как в контроле показатель составляет 2,65.

Возможность фронтального осеменения коров после стимуляции охоты и овуляции эстрофаном и сурфагоном. Животных обрабатывали в лютеиновую фазу полового цикла эстрофаном. Коров, имевших в яичниках после обработки эстрофаном зрелые фолликулы, обрабатывали через 70-80 часов после введения эсгрофана сурфагоном /опытная груша - Л = 26 гол./ или без обработки сурфагоном /контроль 1у = Ю гол/ и осеменяли фронтально, без учета проявлений клинических признаков охоты. Результаты представлены в таблице 13. Стельность осеменяемых в охоту коров незначительно различается. Из 26 голов I группы, обработанных сурфагоном через 70-80 часов после обработки эстрофаном и осемененных фронтально, без выявления признаков охоты, стало стельными 38,5$ животных.

Влияние сурфагона на оплодотворяемость при фронтальном осеменении коров в синхронизированный эстрофаном э.струс

Группа Число жив—X Оплодотворилось Различия по $ опло-дотворяемости

гол. $

Эстрофан Сурфагон 26 10 38,5 + 8,9

Эстрофан 27 8 29,6

Во П контрольной группе оплодотворяемость была несколько ниже /на 8,9$/. В тоже время при использовании сурфагона после обработки эстрофаном и осеменении их в охоту в предыдущем эксперименте оплодотворяемость по -сравнению с использованием только эстрофана повышалась также на 8,9$.

Таким образом, применение сурфагона в комплексе с эстрофаном способствует повышению ошшдотворяемости как при осеменении коров в охоту, так и при фронтальном, без выявления признаков охоты, осеменении в фиксированное время. Инъекцию сурфагона при этом необходимо проводить за 12-16 часов до первого осеменения и при этом не позже 70-80 часов после обработки эстрофаном.

Применение комплексной обработки эстрофаном и суоФагоном для стимуляции охоты и овуляции у телок и возможные перспективы однократного осеменения. Совместно с работниками колхозно-совхозного кооператива по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных Притобольного района Курганской области в ноябре-дбкабре 1988 года были проведены исследования на телках черно-

пестрой породы по изучению возможности получения синхронной половой охоты и овуляции и последующего однократного осеменения животных за счет комбинированной обработки эстрофаном и'сурфаго-ном. В опыте использовалось 95 телок со средней живой массой 345 кг в возрасте 20-22 мес. Животных обрабатывали эстрофаном двукратно с интервалом в II дней. Через 58 часов после второй обработки телкам вводили сурфагон в дозе 10 мкг. Осеменяли животных однократно через 14 часов после обработки сурфагоном.

Таблица 14

Использование сурфагона при фронтальном однократном осеменении телок, обрабатываемых эстрофаном.

Схема обработки Период от предыдущей обработки Число животных Оплодотворилось гол. %

Эстрофан II дн.

Сурфагон 58 час. 95 74 77,9х.

Осеменение 14 час.

Эстрофан Осеменение II дн. 72 час. НО 56 50,9х

р< 0,001

Из осемененных Зо голов опытной группы оплодотворилось 74-77,9?, что превышает показатель контрольной группы на 21%. Различия высокодостоверны /}> <0,001/.

В период с октября по июнь 1990-91гг. была проведена производственная проверка результатов предыдущего опыта. По описанной выше схеме в хозяйствах района была обработана 581 гол. т&пок

х

черно-пестрой порода. Результаты представлены в таблице 15.

Таблица 15

Ji№ Наименование пп хозяйства Всего животных Плодотворно осемененн гол. $

I. К-з "Сибирь" 72 68 94,4

2. К-з им.Кравченко 115 72 62,6

3. К-з "Красное Знамя" 172 114 66,3

4. К-з "Труд" 40 25 62,5

5; К-з "Звезда" 64 51 79,7

6. К-з им.фрунзе 118 92 72,7

Итого: 581 422 72,6

Оплодогворяемость в различных стадах варьировала от 62,5 до 94,4$. В среднем из 581 гол. оплодотворилось 422, что составляет 72,6$. Таким образом, используя данную схему гормональной стимуляции, можно осеменять телок однократно без выявления признаков половой охоты. В настоящее время сотрудники Притобольного колхозно-сов-*-хозного кооператива активно используют этот метод в работе, осе-мен&я в год около 2,5 тыс.гол.телок в хозяйствах района.

ВЫВОДЫ

I. По нашим исследованиям задержки или отсутствие овуляции более 36 ч после начала охоты составляли около 30$ из всех исследованных половых циклов, что является одной из основных причин низкой продуктивности искусственного осеменения.

2. С целью профилактики задержки овуляции у коров нами предлагается использовать аналог гонадотропного рилизинг-гормона сурфагон в стимулирующей ЛГ-активяость гипофиза дозе 10 мкг/гол.

Для синхронизации выброса ЛГ и овуляции сурфагон необходимо вводить в начале охоты, при появлении рефлекса неподвижности. Для профилактики ановуляторных состояний в производственных условиях сурфагон необходимо вводить в течение первых 6 час. после начала охоты.

4. Использование сурфагона в первые 6 час. охоты способствует повышению оплодотворяемости ари двукратном осеменении на 19,0$.

5. При применении сурфагона в начале охоты рекомендуется однократное осеменение коров, при этом результативность искусственного осеменения была выше на 13,6$ по сравнению со спонтанно овулировавшими, осеменяемыми двукратно, контрольными коровами.

6. При использовании комплексной гормональной обработки эстрофаном и сурфагоном для синхронизации охоты и овуляции оптимальным временем для введения сурфагона в дозе 10 мкг/гол. является период 70 час. после инъекции эсгрофана.

7. Стимуляция овуляции сурфагоном'у коров способствует повышению оплодотворяемости в синхронизированную охоту на 8,9$ по сравнению с использованием только эстрофана.

8. При фронтальном осеменении коров после комплексной обработки эстрофаном и сурфагоном оплодотворяемость повышается на 8,9$ по сравнению с использованием только эстрофана.

9. В научно-производственных опытах на телках получена оплодотворяемость 72,6$ при однократном фронтальном осеменении после обработки сурфагоном через 58 ч после введения им эстрофана.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ШВДОЖШИЯ

Для профилактики ановуляторных состояний и задержки овуляции у коров с удоем вше 4,5 тыс.кг молока в год целесообразно использовать сурфагон в дозе 10 мкг/гол в течение первых 6 ч охоты. Осеменение при этом рекомендуется проводить однократно через 12-16 ч после инъекции сурфагона. Для синхронизации охоты и овуляции у коров рекомендуется следующая последовательность обработок: введение эстрофана в середине люгеальной фазы полового цикла, введение сурфагона через 70 ч после инъекции эстрофана и осеменение фронтально, без учета признаков охоты, всех обработанных животных через 12-16 ч после введения сурфагона. У телок рекомендуется синхронизацию охоты и овуляции проводить по следующей схеме: введение эстрофана в середине лютеальной фазы, либо двущияно, с интервалом в II дней,•инъекцию сурфагона проводить через 58 ч после последней инъекции эотрофана. Осеменять обработанных по этой схеме тзлок рекомендуется однократно через 14 ч пооле введения сурфагона.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Использование сурфагона в сочетании с'простагландином для синхронизации овуляции у.телок/Мезина М.И., Черных В.Я.,

Аржаев A.M. и др. // Мат. УП Всесоюзного сов.эмбриологов.-1986.~

с

С,59.

2. Использование сурфагона для синхронизации овуляции у коров в спонтанный и индуцированный эструс. / Кривошеев О.Г., Авдеева И.А., Аржаев A.M., Дрлженков В.М. // Мат.симпозиума "Физиология пептидов".-I988.-C. 9-10.

3. Аналог ЛГ-ЕГ сурфагон: 'перспективы клинического применения/ Кривошеев O.P., Набатчикова A.A., Черных В.Я., Аржаев A.M. // Вестник АМН CCCP.-I989.-JÊ 4,-С. 9.

4. Применение сурфагона для профилактики послеродового периода у коров./Ткачев В.К., Мирпшн Ю.Н.,. Черных В.Я., Аржаев А.М. // Московский областной территориальный центр научн.-техн.информации

и пропаганды. Инф.листок, I2.I.I989.

5. Повышение воспроизводительной функции у коров.-/ Ткачев В.К. Миршин Ю.Н., Черных В.Я., Аржаев A.M. // Моск.обл.терр.центр научн.-технич. информации и пропаганды. Инф.листок. 12.I.1989.

6. Индукция охоты ж овуляции эсгрофаном и сурфагоном у коров./ Аржаев А.М., Хрисгиановский 11.И., Салин C.B., Кожанова Т..М.//Зоотехния, -1990,-të 5.-С. 71-73.

7. Профилактика бесплодия у коров. / Аржаев А. "М., Анксеев А.П. //Молочное и мясное скотоводство ,-1930.-Jê 4.-С. 36-37.