Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Интенсивность окислительно-восстановительных процессов в сперме, качество и оплодотворительная способность спермиев при скармливании быкам суульфата натрия

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Интенсивность окислительно-восстановительных процессов в сперме, качество и оплодотворительная способность спермиев при скармливании быкам суульфата натрия"

РГ$ од

УКРАЇНСЬКА АКАДЕМІЯ АГРАРНИХ НАУК

О А І|!ПЦ ^ІНЯ7ИТУТ ФІЗІОЛОГ» І БІОХІМІЇ ТВАРИН________________

На правах рукопису

ОСТАПІВ Дмитро Дмитрович

УДК 636.2: 591.463.1

ІНТЕНСИВНІСТЬ ОКИСНО-ВІДНОВНИХ ПРОЦЕСІВ У СПЕРМІ, ЯКІСТЬ І ЗАПЛІДНЮВАЛЬНА ЗДАТНІСТЬ СПЕРМІЇВ ПРИ ЗГОДОВУВАННІ БУГАЯМ СУЛЬФАТУ НАТРІЮ

03.00. ІЗ — фізіологія людини і тварин

Автореферат дисертації на здобуття вченого ступеня кандидата біологічних наук

Робота виконана в інституті землеробства і тваринництва західного регіону УААН.

Наукові керівники: доктор біологічних наук, професор ЧУХРІЙ Б. М„ доктор біологічних наук, про______________фесор СЛАБІЦЬКИй Я. 1.

О ф і ц ій н і опон е нти: іишторГТПолШ™

фесор РОЗГОНІ І. І., кандидат біологічних наук ШАЛОВИЛО С. Г.

Провідна установа: Інститут розведення і генетики

тварин УААН.

Захист відбудеться « 1993 р.

о /0 годині на засіданні спеціалізованої ради Д.020.14.01 в інституті фізіології і біохімії тварин за адресою 290034, м. Львів-34, вул. В. Стуса, 38.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці інституту фізіології і біохімії тварин.

Автореферат розіслано «,*// » Т/гЛ&гЛ 1993 р.

Вчений секретар спеціалізованої ради,

кандидат біологічних наук РОБАК

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКИ РОБОТО.

Актуальність теми. Б даний час для розмноження великої рогатої худоби застосовують, головним чином, метод штучного осіме-ніння, що забезпечуй інтенсивне використання високоцінних плідників, сприяє шзидкоцу поліпшенню племінних і продуктивних якостей тварин. Проте, максимальна ефективність його може бути досягнута при поглибленому вивченні закономірностей обміну речовин у спермі, ЩО Є ОСНОВ 00. для вдосконалення способів підвищення її ЯКОСТІ. • 1

Відомо, цо якісні показники і запліднювальна здатність статевих клітин бугаїв значною міроо визначаються інтенсивність оки-сно-відновнгас процесів у спермі / 0. ін. ,ІЗВо;^У%Лал

НЬі та ін. ,1986; Г.В.Зверева та хн. ,1909; Б.ІД.^ухрій, Л.0.1уієвєць'г ІіЬ'і/. їх рівень залежить від обміну речовин в організмі плідників, який, у свою чергу, обумовлений забезпеченням і співвідношенням у раціоні поливних, мінеральних і біологічно активних речовин І&Соц.С£ег,~і$Ьі>\[і.Со)*'а.сЬ ,ІІ)В7; В.И.Дорожкін.ІЗЗЗ/. -Серед мінеральних речовин великої уваги заслуговує забезпечення тварин сполуками сірки, оскільки в рослинних кормах, які є основними джерелом протеїну і енергії, не завжди міститься достатня кількість як сірковмісних амінокислот, твк і неорганічної сірки /З.С.Палкій, .4.1. Слаб іцький, 1931/.

Поповнити дефіцит коршвого раціону вказаним елементом ножна шлкхои згодовування його органічній або неорганічних сполук.

При цьоцу в організі/і тварин змійиється інтенсивність окисно-відновних процесів, :цо сприяє підвищення продуктивності тварин /А.ЗЛіорозоз, 197-2; Л.А.цубіна, 1937; Т.Г.Роюсіна, 1988/.

.■ета досліджень - вивчити оптимальний рівень інтенсивності ОК'/СНО-ВІДНОЕНИХ процесів / спермі бугаїв і розробити спосіб підвищення якості і залліднзвельної здатності сперміїв.

Для досягнення мети були поставлені такі завдання: -

- дослідити вміст сульфгідрильних груп, глутатіону, загаль-

ного білка, активність сукцинатдегідрогенози /СЛГ/ і цитахро-коксадеаа ^'*0/ в спермі бугаїв; • '

- вивчити вікову і сезонну динаміку вказаних показників д

якість сперміїв; ' .

- ВИВЧИТИ особливості ЗВ'ЯЗКІВ МІЖ біохімічнім І $Ц8І£Ш)г гічнкіги покгзжшвші сперчй;

-вивчити вшив сульфату натрію в раціоні бугаїв ма показники інтенсивності окисно-відновних процесів у спермі, якість і запліднювальну здатність сперміїв.

Наукова новизна. Вперше вивчено вплив окисно-відновних процесів в еякулятах на фізіологічні показники і запліднювальну здатність сперміїв. Встановлено оптимальні «.екі біохімічних показників, які забезпечують висок/ якість статевих клітин, та вивчено вплив згодовування сульфату натрію на біохімічні і фізіологічні показники сперми бугаїв. .

. Практична тіінніеть роботи. Встановлена оптимальна доза сульфату натрій Ё раціоні бугаїв, яка. забезпечуй підвищення кількісних і якісних характеристик еякулятів та запліднювальної здатності ' сперміїв: ' -

встановлені біохімічні критерії «кості еякуляту, які забезпечують високу заплідшзваність корів і телиць.

Апробація роботи. Основні положення роботи.викладені на: иауково-практичній.конференції шлодих вчених /Львів, І^Ьо/;

Уі Всесоюзній конференції ідлодих вчених /Ленінград, 1а67/; науково-теоретичній конференції молодих вчених і спеціалістів /йц\.''янець-11одільський, И&З/; обласній науково-виробничій конференції иолодих вчених /Дніпропетровськ, ІУ38/. '

Гі?/блікаіцї. Ііо течі дисертації опубліковано о наукових кршь. Обсяг роботи. Дисертація викладена на І <15 сторінках майно-писного тексту, містить 45 таблиць і складаються з вступу, огляду літератури, результатів власних досліджень, обговорення результатів досліджень, висновків, еропозицій виробництву і списка літератури, який вклвчаз 233 найменування.

МАТЕРІАЛ І' МЕТОДИКА ДОСЛІДОШЬ.

Для проведення дослідження були сформовані чотири групи бугаЇБ-аналогів /за породой,віком,'живою касою/; контрольна -

12 гол. і три дослідні по 8 гол. /схема досліду представлена в тьбл. і/. _ " ■

Годівля плідників івдивідуальна і відповідала нормам іЗІТа. підношення азоту до сірки в добовому раціоні при згодовуванні еульіату натрій /вміст сірки 9,9°?,/ змінювалось у залежності від дози і хивої каси плідників /табл.2/. Цульфат натрію згодовували два раси на добу відповідно до дози по 50 , 75 і 100 г

- з -

Таблиця І.

Схема дослід/

Групи тверин

ілількі- :

:оть тва-: Годівля :рин,гол.:

оідношєннй азот/ до сірки /середні дані і коливання/

понтрольца Пєраа дослідна Друга дослідна Третя дослідна

на одну даванку.

12

З

8

8

Основний раціон / СР / *

ОР +_с^льфат нат

ріп І Сі

ОР -ріо

ОР ■ ріа 2С<

14 : І ,

9,4:1 /10,6-8,4:1/

ОР + сульф; зіо 250 г

ОР + сильфа'

ат нат-

.т нат

8,2:1 /9,5-7,1:1/ 7,0:1 /8,3-5,9:1/

Таблиця 2.

і. поз С/ге.; б . яг

Відношення азоту до сірки в раціонах з добавкою

сульфату натрію. . •

Дослід-:Добо-:Ь'.ііст :Бміст :В:ліст :Вміст :Відноігения

ні гру-:в& дс:сірни :сірки в:сірки в:азоту іазот^ірка

іу/ Су- :за оу:в дозі :дооово-:раціоні:добово-:в раціоні гаїв :льфату:сульфа:ц/ раці:з до б а-: му раці: при огодову-:нагрію:ту, г :оні, г :вкох> су:оні, г :ваші суль-

: г : : :льфату : - :фату натрію

: : : :натрію,: : . •

: : : : : *.:__________________________________________

ІССО І ЮС 9,3 27,8 37,7 339,0 10,5

2 150 14,9 27,8 42,7 399,0 3,3

3 ' 2С0 19,9 27,8 47,7 399,0 3,4

‘ЗСС 1 100 9,3 20,1 '30,0 284,4 9,5

2 150 14,Э 20,1 35,0 284,4 3,1

3 200 19,9 20,1 40,0 284,4 . 7,1

ссо І 100 9,3 13,9 23,8 . 128,8 8,3

2 150 14,9 13,9 . 28,8 198,8 ‘ 6,9

3 200 19,9 23,9 * 33,8 193,8 5,9

Матеріалом дослідаень були сперма і сироватка крові плідників. Сперьу отримували на штучну вагіну з-режимом використання бугаїв - дуплетна садка два рази на тиздень. Про з відбирали з ярег.'ної вени. Сперму досліджували систематично з інтервалом 10-12 днів, а сироватку крові - кояні три місяці..

. - 4 -

У свікоотриманій спермі визначали: об”єм еякуляту /мл/, концентрацію сперціїа на фотоелектроколорикетрі /ьлрд/мл/, вижи- ' ваняя /хв/ при температурі 4£°С після розбавлення І:ІС І?,-ним розчином хлористого натрію до припинення прямолінійного посту-папьного руху, резистентність /тис./ за методико» І. Б.О-.ірновя,

В.1.Поставної /І37о/, процентне співвідношення живих і мертвих ' сперміїв підрахунком у мазках, зафарбованих еозия-нігрозиком за методикою Хенкова в кодифікації В.А.Лблонського /1962/. У спермі, розмноженій при 38-40°С з дотриманням вимог інструкції, визначали виживання сперміїв /хв/ при температурі 37°С і резис- . тентність /тис./.

окіст загального білка в плазмі сперми і сироватці крові визначали біуретовою реакцією /г&/, фракції білка -методом елект- . рофорезу в поліакриламідноьу гелі /В.М.Холод, 1383/, активність сукцинатдегідрогенези /СДГ:сукцинат: /акцептор/ - оксиредукта-за, .1.3.93,1/ - за методикою В.Г.Секакова в модифікації

Б.і.і.Ч/хрія, Л.О.Кпевець /1978/, цитохрококсвдази/ Ц0:цитохрок С : О2 - оксвдоредуктаза, Кз.І.3.3.1 / з використанням реактиву "нсді""/|Ш<*поп, ЙІІ/. Іімдентреція сульфгідрильних груп визначали методом аипєркетричного титрування /Е.І.Бітюков, В..і.. Прокопцев, 1370/,' глутатіоиу - за методико© й..С.Чулкової /цит. за О.В.Травіна, 1955/. •

Запліднювальну здатність сперміїв визначали за відсутністю статева циклів у корів і телиць після першого осіменіння протягом 50-30 днів, а в сумнівних випадках ректальним дослідженням. Цирровий матеріал оброблений методом варіаційної статистики /й.О.Плохінський, 1353/. ■ - - .

. РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛіДНІЕНЬ

• І. Біохімічні і фізіологічні показники сперми бугаїв

Дослідженнями встановлено, що сперма бугаїв характеризується високими значеннями показників, які обумовлюють інтенсивність окиіно-еідновних процесів. Так, концентрація сульфгідрильних груп стшовила 1,03+0, ІОі іжіл/мл, глутатісну загального 0,96 + 0,058 і.;г/;.л, відновленої форми 0,70 -г 0,105 кг/кл і окисленої 0,25 + 0,С4б кг/ьіл, активність СДГ - о4,7 + 3,25 од.і ЦО -

75,3 + 5,2с од., еу.іст загального білка в спермі становив 5,2 +

І 0,33 х%.. ' '

При порівняно високих значеннях показників виявлено їх велику мінливість. Так,у свіжоотриманих еякулятах істотно змінювалась концентрація сульфгідрильних груп Доливання 0,20 - 3,0 кк.-'Л'л; О- 4і,0%/, гдутатіону загального /0,сй-2,о7 мг/ідл;

СУ- А0,2ґ/, відновленої і окисленої форм, відповідно, 0,12-1,53 і 0,0сі-і,іо иг/мл; СУ- 54,-*, і 50, СУ» а також активність СДГ /10-ЕЮ од., (У- Виявлені коливання обумовлені індивіду-

- альндаи особливостями плідників, иінливістга значень показників у спермі при дослідженні її в різні дні, відмінністю у першому і другої^ еякулятах- При иьоцу, різниця за індивідуальними особливостями плідників для вмісту сульфгірильних груп і загального глутгтіону статистично вірогідна / В = 0,95/. За іншими показниками вона становила від 4,1 до 58,с# / 3 < 0,95/.

відмінності за фізіологішіго.и показниками енкулятів становили: за об"і’и;ок іб,??, концентрацією сперміїв 27,1$, кількістю :їипих 3,2*, и;ї-/.иЕ£Ннн!.« і резкстєнтністи у свіксіотрименій спорті, відповідно, 21,7 і ‘13,Я% після закородування 24,1 і іо,&%

/Ь = 0,95/. '

При дослідженні сперми того самого бугая в різні дні коливання значень біохічних показників були в ьежах £,5-7і,®. КеМільа значні коливання концентрації гяутатіону загального ій,4-63,Зй, відновленої і 'окисленої форм, відповідно, 50,о-7і,В і 46,7-Єі ,6Л. доливання оО'Чту еякуляту становили 0,0-73,75, кснг-ентраі’ії сперміїв 7,1-7^,-Й, кількості кивих - 6,7-36,1%.

Різніпія між значенними показників першого і другого еякулятів становила, в середньо»;/, для сульфгідрильних груп 18, &

/а = 0,99/, найбільша концентрація їх у першому еякуляті 1,13 +

-0,043 кф/мл, аналогічно, глутатіону загального II,2$, відновленої і окисленої форм,відповідно, 10,3 і 3,8*, активності СДГ 23,5^ і Д? 14,4% /3 і 0,2*3/. Зміст загального білка у другою еякуляті вищий на б,сК. З фізіологічних показників сперли ' значно вида концентрація статевих клітин у першому еякуляті /і,07- 0,045 млрд/ьш, 15,0??; іі =* и,^5/. -Різниця за об"ешм еякуляту і кількістю живих сперміїв незначна /3,8-4,0 ш і

71,0-72,0^/. _

Біохімічні і фізіологічні показники сперми в залежності від :езс;;у року змінювались неоднозначно /тебл.Ь/. '

Осінній період характеризувався високим значенням вмісту :ульргідрильнил груп /1,231 С,іОіі т^/'ля/, - концентрації спер-

- б -

Таблиця 3.

. Показники сперш бугаїв в залежності від сезону року

Досліджувані

показники

Сезони року

Осінь : Зима : Весна : Літо

а + т : к + т : & + т : іл +/п

Загальний білок,^ 0>24ххх 6,3+0,29 ' 6,2+0,50 6,9+0,51

$п1?ЕЖ!‘ и^С.Ж

Глутатіон, і!г/мл загалший 1,27+0,053

відновлений . 1,02+0,073

окислений 0,33+0,043

Активність ферментів, од.

ЩГ 55,3+2,38

Ц0 7Л,1+3,02

Сб"еи еякуляту, ’ ™

ш ■ 3,7+0,31х*

Концентрація ‘ .

сперміїв,

0,95+0,075 0,82+:0, ІіЗ** 1,0+0,101

1,15+0,056 0,67+0,(И30* 0,07+0,04г^3°

0,83+0,052 0,47+0, ОЗЗ^О, 45+0,053““

0,28+0,038' 0,20+0,020® 0,23+0,032

33,3^2,32

71,1+3,32

4,0+0,33

33,3+3,23 33,8+3,55

65,5+3,78 70,0+4,68 ,

4,'3+0,35

•1,5+0,38

шірд/іля . ' 0,93+0,067

Кількість живих ■

сперміїв, % 72,6+1,33

0,84+0,055 . 0,85+0,071 0,73+0,056х

68,3+І)47Х 74,0+1,45

71,5+2,65 ■

Виживання сперміїв у спермі, хв свіжоотриманій і 212,2+8,ОІ^гі^ІЗ-.гЗ30? 263,5+10,31 253,2+7,П .

звкорожено-

відтаяній 253,0x18,88 238,0+18,79 273,3+14,0 252,5+13,32а

Резистентність сперміїв,, тис.

свіжоотриманій 25,6+2,ГЗ 31,6+2,13 &£,6+2,-15** ■24,0+2,87

заморожено- «. '

відтаяній 8,1+0,6£Р 13,7+1,.01 14,3+1,25 б.А+О,?!**.

■ Примітка: різниця статистично вірогідна V

' х - В = 0,35; 301 - В - 0,99; ^ - В - 0,333.

уіїв /0,35+0,067 їздрд/ііл/, низьким: - вмісту загального білка /5,3 ± С,2І ті/ і об"еіу еякуляту /3,7 +С.ЗІ ал/. Для - '

осіннього і зимового періодів характерна високе концентрація глута-тісцу загального /1,27 _ 1,15 йг/ил/ і відновленої форми /І,СЯ -

С,03 мг/мл/, низьке виживання, сперміїв у свіжоотримадих еякулятах /212-217 хв/. .

У зимовий період встановлено високе виживання сперміїв у роз-

мороженій спермі /238,0 + 18,79 хв/ і резистентність у свікоот-риманіЛ /31,6 + 2,13 тис./* З зимовий і весняний періоди висока резистентність статевих клітин у розмороженій спермі /13,7 -

14,3 тис./. .

У весняний період зменшувалась кількість кивих сперміїв /08,9 + 1,4Т’;/, їх резистентність у свіжоотриманій спермі •

/Я2.С + 2,45 тис./, концентрація сульфгідрильних груп / 0,82 +

+ О,і 19 им/мл/, окисленої форми глутатіону /С,2С + 0,020 мг/мл/

І збІЛЬауВаЕСЯ сб"см еякуляту /4,3 + 0,39 1-й/. У весняний і літній період;; максимальне вибивання сперміїв у свіжоотриманій . спс-р:..і /2і3,5-263,2 хв/, мінімальна концентрація глугатіону загального /0,67 + С,С40 мг/мл/ і відновленої форми /0,47-0,4^ мг/мл/. . . .

Літній період характеризувався високим вмістом в еякуляті загального Сілка /о,3 + С, Зі й/, живих сперміїв /74,С + 1,4®/ '

і низькими значенням:! концентрації статевих клітки /0,79 +

+ С,С5о млрд/мл/, їх вкривання у розмороженій спермі /252,5 +

♦ 13,32 хб/. З літній і осінній періоди встановлено максимальну концентрацію окисленої форми глутатіону /0,29-0,33 мг/мл/ і низьку резистентність статевих клітин у розмороженій спермі /8,4 + 0,63 тис./.

Вказані біохімічні показники сперми з віком плідників змінювалась незначно /2-17^; 3 С,95/, однак вміст загального білка

до £— ■ річного віку становив 3,С-о,І г$, у 7-9-річних збільшився на І ґ’- /6,7^; В - 0,99/. Встановлена тенденція до підвищення об"ему еякуляту з 2-3-річного віку /о,8 + 0,40 мл/ до 6-річного /1,7 + 0,33 і.л/. Аналогічно, загальна кількість сперміїв . в еякуляті зростала з 2-3-річного віку /3,3 + 0,2о млрд./ до 7-9-річного /4,2 + 0,3і млрд./. Кількість живи сперміїв, виживання і резистентність їх з віком; плідників не змінювались.

2. Кореляційні зв”язки мі» фізіологічнши і біохімічними -показниками якості еякулятів бугаїв

Значна залежність якості сперми від індивідуальних особливостей плідників, черговості'отримання еякулятів, інтервалу між одержанням їх у різні дні, сезонних і вікових факторів не дає

змоги визначити вплив кожного з біохімічних показників на якість статевих клітин. Для встановлення форми, сили і напряме/ кореляцій між досліджуваними показниками ми використали кореляційне відношення.

Так, із збільшенням вміст/ загального білка підвищувались виживання сперміїв у свіжоотриманих еякулятах і резистентність у розмороженій спермі / ~Ч= 0,20; Б = 0,35 і Т]= 0,2о; 3 = 0,339, тебл.4./; підвищення концентрації сульфгідрильних груп супроводжувалось збільшенням рензистентності сперміїв у свіжютриманій . спермі / *5» 0,24; В = 0,92/ і розмороженій Iі}- 0,25; В =

0,95/. Збільшення концентрації загального глутатіону, його відновленої форми зв"яовні з підвищенням кількості живих статевих кяітин / ^ » 0,22 і 0,21; В = 0,35/, зниження їх виживання у ■ свіжоотриманій спермі / » 0,34; Б * 0,330/ і резистентності

в розмороженій /7 = 0,33 і 0,34; Б * 0,999/. З підвищенням активності Цр збільщувалась резистентність сперміїв у свіжоотриманих еякулятах / у « 0,22; В = 0,95/.

Таким чином, високі значення виживання і резистентності сперміїв у свіжоотршаній спермі /235-250 хв і 26-30 тис./ і розмороженій /271-301 хв і 9-13 тис./, кількості живих сперміїв /71-73?/ встановлені при концентрації загального білка 4,0-0,0 ґ%, сульфгідрильних груп 0,60-1,40 мкаї/мл, глутатіону відновленої, окисленої форм і' загального, відповідно, 0,40-1,20 і 0,100,50 кг/мл і 0,60-1,40 мг/мл, активності СДГ 10-50 од. і ДО 40-80 од. . ’ .

Для уточнення вищевказаних даних і визначення оптимальних ь:еж біохімічних показників проведено аналіз їх взаємозв'язків, з якого випливає, що збільшення вмісту загального білка супроводжувалось достовірнії!., зниженням /В « 0,99-0,933/ концентрації глутатіону /загального $ = 0,30, відновленої і окисленої форм ^ = 0,27 і 0,28/, активності ЦО / у* 0,25/. З підвищенням концентрації сульфгідрильних груп достовірно знижувався вміст загального білка IV* 0,22; В = С,9Ь/ і підвищувалась концентрація гдутатіону. / ^ = 0,24; В » 0,35/, активниЛь СДГ і ЦО, Еідгсівіис), у= 0,45.і 0,47 /3 я 0,‘330/. Збільшення концентрації відновленої іескисленог форм," відповідно, у1 = 0,8.5 і 0,49 М - 0,999/, сульфгідрильних груп / 0,26; В = 0,33/, вк-

т;:гності -ДЦГ / ^ * 0,24; 3 = 0,3-3/ і ДО / ^ = 0,29; В => 0,999/ і значним зниженням змісту загального білка /^ = 0,35; 3 =0,'99§/..

Таблиця 4.

Кореляція між біохімічними показниками спері.и бугаїв і якістю статевих клітин

Суль^гід- :Глутатісн, кгДуі :цДГ, од.:ДС » од. Білок, іюкезники сгагті сперміїв .

Р'.ільііі гру:у.'., МКш/МЛ :оагаль:відііов:окиоле-: ; г?> кількість ;ВИЖИВСИНИ . хв резистентність, тис

:ний :лсний :ний : • живих, % : с в іх;о о три: п і с ли ро; с г ізко о т-:мала спер:аморожен:ркиана :ма :ня геперма :після роз-:морожєння

>0,0 7-і 21)0Х 2£Ш 24 10

>і,-.'0 >1,20 > ,50 >Ь0 5"00 - 71-7-іхх 2СЗ-2і2 •гл 3-^77 25-30 8-Ю

б,1-8,6 73 233 232 - 2о П

Ж ,01-1,‘і І.0І-І.-1 0,01-1,2 0,31-0,5 Зі-50 61-60 - 71-73 2СЬ^23а 272-301 . 26-30 11-12?““

4,0-6,0 ; 73 2';0 275ххх - 27 Іххх*

0,СС-І,0 0,00-1,0 0,-Ю-0,8 0,10-0,3 10-30 ^0-00 - 70-73 232-250ххх271-292 9-13

. 4,0< 72 220 ' . 229 25 6

0,С0<£ 0,60* С,‘Х* 0,І0< іс<£ ■;0^. - V . ббг-74 235-253 270-ЗОі іУ-2І 9-12

• Примітка : х _ різниця статистично вірогідна

х _ 0,95

XX - 0,99 і

XXX - 0,903 і

Підвищення конпьнтрації відновленої формі глутатіоііу в еякулятах супроводжувалось істотний /З = 0,333/ зниженням вмісту загального білка / у = 0,30/ і підвищення!.: сульфгідрильних груп .

/"<]■- 0,і:7; Б = 0,33/, глутатіону загального /у= 0,87; ь = С.ОлЗ/, окисленої форни / 7“ 0,23; Ь = 0,05/, активності СЦГ / 0,22;

В = 0,-95/. З високим вмістом окисленого глутатіону зростали концентрація його загальної і відновленої форм / <(= О,5о;

Б = 0,333 і 0,28; В = 0,32/, активність Іір / У - 0,<і7; із = 0,05/.

З підвищенням активності СДГ у спермі збільшувався вміст загально, го білка /7= 0,28; В = 0,99/, сульфгідрильних груп /Ц- 0,3о;

В = 0,933/, загального глутатіону / у* 0,26; В = 0,93/ і активність Цр / у » 0,61; В » 0,333/. З підвищенням активності Цр знгаувьься виіст загального білка / ^ = 0,33; В = 0,333/<5^і>сй глутатіону загального‘/^ = 0,28; В = 0,39/, відновленої форми / 0,21; 3 « 0,95/, активність СДГ / 0,63; В = 0,о99/. •

Отже, аналіз взазмозв"язків між біохімічними показниками сперми і їх впливу на фізіологічні якості статевих клітин /виживання, резистентність і кількість живих сперміїв/ свідчить,що оптимальна концентрація становить: сульфгідрильних груп 0,85 - І,і.4 їжиДіл глутатіону відновленої І окисленої форм, відповідно, 0,55-0,‘34 і 0,^3-С,£0 мг/мл, при загальному вмісті - 0,77-1,35 ьг/кл/відно-сієиня до загального гдутатіону вказаних Кого двох форм становить 1:0,71-0,70:0, і£-0,22/, загального білка 5,5 - 6,3і$, активність СДГ - 25,1-35,3 од. і ЦР - 60,1 - 80,4 од.

Аналізом зв"кзків між біохімічними і фізіологічними показниками сперки бугаїв встановлено пезитишу кореляцію об";му еякуляту з ваістоїД загального білка / Ь = 0,333; 4- 0,'ао/ і негато

ьну з вмістом сульфгідрильних груп / 4= 0,27; Ь = О.оЗо/, кон-ікнт.реді'"п загального глютатіону / '/ = 0,2'; Б = 0,933/, відновленої і окисленої форм, відповідно, у = 0,23 і 0,21 /л = 0,333 і 0,05/. Збільшеній в еякулятах концентрації сперлії супротодауЕалсоь достовірний /Ь = 0,303/ підвищенням вмісту сульфгідрильних груп / *] - 0, »0/, глутатіону загального / '/ - 0,-10/, Еі;;>:сглсної і ол’,:слбної фору*, /відповідно, - 0,3о і 0,Зі/,активності <ДГ і ЦО /у= 0,73 і 0,55/. З підвищення;.', кількості киаих сСГатевік клітин в еякуляті збільц/велясь конпентрагля глутатіону загального і відновленої 1ср;..і /'/= 0,23; ь - 0,35/.

- її - _ •

Результати досліджень свідчать, що вказані оптимальні значення біохімічних показників лроявилисн при об"цмі еякуляту 2,1-

0,0 м, концентрації сперміїв 0,60-і,-.0 мрд/киї і кількості живих спер.ліїв більше СіїҐ-.. З вказаними кежами об'єму і кількості живих статевих клітин виявлено 7к-іі'Ґ еякулятів і ої.,7% з концентрацією сперміїв 0,60-1,40 млрд/мл /табл.5/.

• Таблиця 5.

Фізіологічні 'показники сперми бугаїв

:Кількість:Проценти :Кількість :Проценти Показники :еякулятів: ’ :бугаїв :

Об"ем еякуляту, мл

>6,0 •28 10,3 і 2,Є

5,1-6,0 . 23 8,4 6 16,7

• 4,1-5,0 43 15,8 12 . о

3,1-4,0 ' 63 23,2 11 30,5

2,0-3,0 36,4 5- 13,9

2,0«* 16 5,3 1 2,8

Концентрація сперміїв, шірд/мд . .

>1,60 . 25 8,5 - • -

. 1,41-1,60 17 5,6 - -

1,21-1,40 ЗІ 10,1 . І ’ 2,8

1,01-1,20 ' §2 17,0 5 15,6

0,81-1,00 55 18,0 16 44,4

. 0,61-0,80 54 17,'й ІЗ 33,1

' 0,40-0,60 ' - 54 17,6 - ■ -

0,40 < 17 5,6 - ' -

Кількість живих сперміїв, >80,0 % . 41 15,3 .

70,1-80,0 112 41,8 50 83,3

60,1-70,0 . 81 30,2 'б 10,7

50,0-60,0 ЗІ 11,6 - -

. 50,0-і _ 3 1,1 - -

Гаким чином, одержані дані дозволяють стверджувати, що ефективну роботу племпідпризметв масна забезпечити за умов одержання еякулятів таких фізіологічних показників: об"ом 2,І-5,С мд, концентрація сперміїв 0,6-1,4 млрд/мл, яількість живих сперміїв

більше ОСЙ. Ііри цьому в еякулятах встановлено оптимальний вкіст сульфгідрильних груп /0,85-1,14 ин..і/мл/, гд/тггіон/ загального /С,77-х,ЗЬ иг/мл/, відновленої і окисленої форм, відповідно,

С,Ь5-0,94 і 0,23-0,30 іт/чл/ при відношенні останніх до загального глутатіону 1:С,71-0,70:0,о0-0,Щ/, легального білха /5,5-3,о г?/, активність ОДГ /£5,1-35,3 од./ і ДС /60,Т-80,4од./ значений яких забезпечить високі показники в:к;:ьсніія і резистентності сперміїв у свікоотриі-аніЯ сперлі ДЗЗ-£50 хь, 24-а9т;гс./ і розмороженій /сТ^'І'іЬ хв.; £,5-13,1 тис./,а текок кількість ки-вік статевих клітин 53,5 -73,?^,

£нкуляти, з відмінними від иптп.альнкх фізіологічних показні:- • ків, характеризуьалжадисСвлансо!.. окисно-відновних проносів, і:>о обумовлювало знижеш* виживашл або резистентності слсрип. '• Отже, при оцінці якості свіжоотркі.анкх н'.розбціілс:г.х сякуля-тів нема: підстав надавати перевагу г.слл;с:« оС”с..:аі; /більше ■

6,0 мл/ і концентрації сперміїв /бі.іьпіз 1,4 іілрдЛл/, оскільки ь них фізіологічні показники статеві!х клітин і запліднювальна здатність нижчі.

3. Вплив згодовування Сугякм сульфату натрію на якість сперии.

Проведеними дослідженнями встановлено, 1*0 ЗГОДОВ^ВГ-ЧН.Ч бугм-.и сульфату натрію в складі раїйоку позитивно впливало на якість . спсрі-и. / дослідних плідників, які отримували в раціоні на доьу ІОО г сульфату натрій, оСом еякуляту збільшився ка 0,3 мл /о, їй/ і становив 4,0 - О.Зліл. При цьоку, він однаковий /3,6-3,6 мг./ у бугаїв контрольної і дослідної груп з кі:еоп к.есов де Ш0 кг, а від 600 до ІСЮО кг б і л ьппїП на С,7 ил/17,92/. Згодовування бугая:.:

150 г сульфату натрій сприяло збільшення оС"«.:■/ еякуляту, в середньо^, на 0,8 ил І<1,6%/. У плідникіь з >::;ео:з і-.сссз до с^Скг він підвищився на 0,5 іія /14,3^/, а з хивою і:аооз 800 - ІОСС кг на 1,5 »іл / В = 0,09/. У плідкикіь, які отрю-узали 200 г

сульфату натрію, порівняно з контрольний, оСл-: еякуляту зоіль-ш:;вся на І мл /27,ОЙ/. Значення показника не залежало від кнвої иаси бугаїв і становило 4,6-4,7 мл.

Згодовування бугая» сульфату натрію впливало на загальну кількість статевих клітш в еякулятах, яка, б порівнянні до контроль, у першіГ. дослідній групі нижча на 0,25 клрд.,у другі." і третій

- вкца, відповідно, на 0,45 мрд. Д2,2Й/ і 0,10 клрд. /2,Д/,

- ІЗ - •

/ бугаїв з живою иаеою до 800 кг значення показника, у порівнянні з контрольними аналогами, однакове в першій групі /3,іЗ млод.•, виде у другій на- 23,0^ /В = 0,35/, треті Я - на 15, Г*. У бугаїв з живою масою більше 800 кг загальна кількість сперміїв в еякулятах третьої групи гака оаі.;а, як і в контрольних /3, 33 млрд./, у другої дослідної групи, порівняно з контрольними, більша на

0,23 млрд. /7,3^/ і в першій дослідній групі нижча на 0,47 млрд. /І3,«/. .

Згодовування бугаям 150 і 200 г сульфату натрію сприяло підвищенню загальної кількості живих статевих клітин у еякулятах, відповідно, до 2,0710,217 і' 2,73І0,2/'.2 илрд., -до вице від контролю на 0,37 і 0,13 шірд. /14,5? і 5,0*/. Отже, незале:яно від живої маси плідників, найвище значення показника /2,<32-3,і3алрд./ було в спермі плідників, які отримували в раціоні 150 г сульфату натрію.

Дослідженнями встановлено, що вміст загального білка в плазмі сперми бутаїв контрольних і дослідних груп відрізнявся незнач- . но /5,9^0,27 - 5,5-0,36 ґ?>/, проте, змінювалось співвіднесення окремих білкових фракцій. У бугаїв, які отримували 100 і 200 г сульфату натрію, вміст фракцій,цо за рухливості відповідали альбумінам крові,, збільшився порівняло до контроля на 3'1,-3 і 43,4% алуїа-глобулінів на 27,9 і 5-і,7^, а бет.а-і гаша-глоб/лінів знизився, відповідно на 13,4 і ЗІ,І*; 75,8'і 65, (Ґ.. Б спермі плідників другої дослідної групи вміст альбумінів знаходився на рівні контрольних /І,29І0,28о ґ£/, альра-і бет а-г лобу лінів збільшився на 1С,І і 15,235, а гаша-глобулінів знизився на 10,5*. •

/ сироватці крові бугаїв в^іст загального білка не змінювався і становив у контрольних і дослідних тварин 9,0-9, Зг7*. Проте, вміст фракцій білка різний - альбумінів нижчий у бугаїв другої групи на 10,Ом, в першій, і третій - на 5,С!5, а вміст ельфа-гло-булінів вищий у пєриій і другій на 25,5Й і третій-на 12,

Вміст бета-і гаима-глобулінів не змінювався і становив,відпевід-. но, і,0-і,і гЗ і 2,9-3,0 і<5. '

. Концентрація сульфгідрильні® груп в еякулятах бугаїв /контролі них і дослідних/, в середньому найяе однакова і знаходилася з межах 0,36-1,08 м£і.і/мл. Проте,у плідників контрольної групи з живою' масою менше 800 кг, вміст сульфгідрильних груп мехедоаль-ниЯ /1,20^0,033 шл/ілл/ і нижчий в першій дослідній групі на І7,б&

другій на 7,1е; і треті? на 26,'S’, / Ь = 0,^5/. игГжс таи результати отримані при дослідженні еякулятів бугаїв з ;.:ивою ь-.&гси більше 600 кг. Різнити між показниками в сперлі лонтрольної, первої, др/гої і третьої груп становила, відповідно, 15,0';

24,'It і 10, ІҐ.

Концентрація загального гл}гтитісиу t спер;..і бугяїв «і нтроль-ної і другої дослідної гр>п становила 0,97 і.т/:.л, а в еякулятах плідників першої і третьої досліди:» груп вида - 1,16-0,127 мгД'л /1-3,6%/ і. І,і4- 0,144/17,СГ'/.

лналогічна різниця виявлема у слор.-.:і лліднлліа з ?:::вол масою більше 800 кг, у яких в контрольній і другій дослідні? групах значення досліджуваного покизшиа 0,^2 мг/і.л, а в гора і Г і трс-тіЕ на 43,0 і Ьк.,7% вкце і стачовило, відповідно, Т,33^0,142

і 1,42-0,211 v.r/uJi.y Су гаї в контрольної, псрсої і другої груп з живою масою менше 600 кг конгентршйк г.утатісну б еякулятах uaTUu однакова /0,97-1,00 чг/ил/, с б треті!* групі нсте нг. •

II,5-21,/0,87ІС’,С73 ЬіГ/к'л/. Аналогічно з.Лня-.-?ьсй кояг*<і?ра-иіп відновленої форми глутатіоку: в контрольнії" і другіГ: дослідній групах вона становить 0,70-0,7<і іт/лл,' а ь пераіГ. і третій вище на і.3,3 і 00,0". іончентрилія окисленої форки глутгітіс.-іу у бугаїв контрольно; .другої і третьої дослідних груп i.-.aht.t однакова /0,20- 0,27 мг/ия/, а е еякулятах плідників першої дослідної групи 0,ЗІ± 0,008 :-гДл. Г.рк сг.івстявлсіїні віднесень де загальної концентрації г-утатіону відновленої і с<і;:ол-:чсї ?ор... ВСТ8НОЕЛЄНО, цо в спермі бугаїв контрольної і першої дослідної груп воно однакове /і:С,7і::0,2£/, у другії; групі з(.ілі._:::::есь концентрація відновленої :рор:лі: глутптіо ну Д:0,75:0,2.5/ і в третій - при збільшенні відновленої jop:..l! ЗНИЗИЛаСЬ концентрацій окисленої /i:0,7d:0,2I/.

Незалежно від дози сульфату натріз г-ктквність ■;ер:-ентіБ СДГ

і 4Р в спермі бугаїв, в середньо.*./ по групах ,;.-.«Лг.е однакова ї становить,відповідно, Зо-Зо од. і 71,0-77,1 од. Одна.*, в епкуля-тах дослідних плідників другої групи з живсп кєгов до &СО кг ■ виявлено максимальне значення активності {ер^.ентіз /СЦГ 37,4- •

-2,05 од. і ф 63,9-5,35од./.По відноаеннс до контрольна різниця становить,відповідно 15,4 і І7,іГ..

Із зміною показ них і Ь окисно-віднобн;ос процесів у спсрі-і по-краіувадись фізіологічні характеристики статев;к клітин /табл.с/.

іаолиця о.

Фізіологічні показники сперміїв при згодовуванні оульфату натрію

ГШШ-

Показники * контрольна : дослідні

.. . . • : перша : друга : третя

: п і м + т :п :Н+*гі •: п : й + : п : М + т '

Виживання сперміїв в еякулятох, хв .

св^ж^отриманих /теинература 232 227,5 + 12757 159 240,0 + 10,02 217 • 244,2 і 10,23 166 227,8 + ІіТво

|>од морожених /температура ■V 197 268,6 + 22723 - 115 283,0 + 2І77І ІЬ7 285,9 + 18,07 135 277,4 + 15766

Резистентність сперміїв в

еякулятах, тю. . •

свіжоотриманих 204 22,7 + з;ог 130 25,9 + і,22 181 27,0 + 2,о2 “ 147 26,5 + 3,9о

розморожених , 192 9,1 і 1,24 124 іо.з + . .іТ29 160 11,7 + 1,22“ 119 10,4 + 1,32

сл

І

Так, у багаїв дослідних груп, порівняно з контрольними, віадівви-ня статевих клітин у свіжоотриманій спермі підницув&лсоь на ІС-15 хв /А,5-7,3?/» у розмороженій на 0,8-17,о хв /2,2-6,4%%. Резистентність сперміїв у свіжоотриіишкх еякулятгх підвк:іувалась на 2,2-<,3 тис. /14,1-13,91/, у розморожених на і,2-2,6 тис.

/ІЗ,2-28,с$/. Отже, у бугаїв, які отримували 150 г сульфату натрію, незалежно від живої і-аси, вкривання і резистентність сперміїв максимально високі: у свіксотриканих еякулятах <2-10,3-250,7 хв і 26,0-27,2 тис., розморожених - £8 ‘-268 хв і 10,9-12,2 тис. .

Аналіз результатів дослід-кень свідчить, ідо від плідників, яким згодовурал'.і сульфат натрію, отримано більше, повноцінної сперми у порівнянні з контрольними. Так, у другій дослідній групі за рік отримано повноцінних еякулятів 121, в контролі ІОІ, відповідно, об"й'.л сперми 650,3 і 444,7 <лл. Вибракувало еякулятів у досліді їх,2^., контролі - 18, Й, Від загального об'єму одер:.;гнох сперми вибракувало в контрольній і досліднії! групах, відповідне,

3.0 і 4,о[5. Від плідників першої і третьої дослідних груп отримано повноцінних еякулятів, відповідно, 84 і 94, загальний об”ем

283.0 і "'12,4 мл. Кількість і об”см вибракувань еякулятів сдна- . ■

кові /15,0 і 7,СҐ./. При вартості сперу-одсзи 1 крб. /утаєно/,' чистий прибуток від одного плідника другої групи становить 35С5 карбованців. ' '

При використанні сперми бугаїв сонтрольної групи запліднилось після першого осіиеніння 57,в*, корів /коливання 54,0-6/ ,2р/, першої дослідної - 61,35 /58,3-64,ЇЙ/, другої - 62,2% /59,3-'60,8»/, і третьої - 59,5&/55,8-65,85/. Таким чином, при використанні сперми плідників другої дослідної групи зпліднвваність корів після осіменіння Віща від контрольної групи на 4,4%, перигеї і третьої, відповідно,-на 0,9 і 1,23.

ВИСНОВКИ:

І. В спермі бугаїв чорно-рябої породи встановлено вміст загального білка 1,2-10,5 і*~, сульфгідрильних груп 0,20-2,00 •

мкії/ил, глутатхону загального 0,36-2^57 иг/мл, відновленої форки .0,12-1,53 мг/ш:, окисленої С,06-1,16 кг/гл; активність ЩГ

10,0-80,0 од., ф І0,0-1'10,0 од. ' •

\ Величина досліджваних показників залежить від індивідуаль- -них особливостей плідників, .віку, ЕІДкІННОСТЄЙ першого і другого

.. - 17 -

еякулятів, сезону року.

2. Високі значення фізіологічних показників.сперміїв /кількість кивих, виживання, резистентність/ встановлені в еякулятах з вмістом загального білка 5,5-о,3 сульфгідрильних груп 0,8о-І,ї4 шиї/мл, г.т/тйтіану загального 0,77-1,35 мг/кл, відновленої і окисленої форм, відповідно, 0,55-0,95 і 0,23-0,50 ;и.г/мл, активності ОДГ 25-35 од., ДО 60-80 од. При цьому, об”пи еякуляту становив 2,0-6,0 мл, концентрація сперміїв 0,60-1,40 млрд/мл

І КІЛЬКІСТЬ ЖИВИХ сперміїв більше СС?п.

3. Використання сульфату натрію в дозі І5Сі?гой./добу забез-

печує в раціоні бугаїв з живою масою 6CG, 80С і ІССО кг відношення езоту до оірки, відповідно, 6,9; 8,1 і 9,3:1, що позитивно впливаз на кількісні і якісні показники сперми. ■

-і. Під впливом згодовування сульфату натрій /доза І5Сг/ максимально підвищується об"с:м еякуляту /0,8 &л; 21,6V» загальна кількість сперміїв в еякуляті /0,45 млрд.; 12,23/, кількість живих сперміїв /6,37 млрд; 14,2”?/. Вживання і резистентність статевих клітин збільшились, відповідно, у свіжоотриманіЯ спермі на Іо,7 хв /7,3!?/ і 4,3 тис.. /16,95?/, після з а. .орожув ення на 17,3 хв /о,4%/ і 2,6 тис. /28,6?,/. Кількість вибракуваних еякулятів зменшилась на 7,35. •

5. Згодовування 150 г сульфату Натрів забезпечує в еякулятах бугаїв оптимальну концентрацію загального білка, сульфгідрильних груп, гдутатіону, активність (ДГ і Цр.

6. За рахунок збільшення об'єму еякуляту і підвищення фізіологічних показників сперміїв від кожного плідника, яким згодовували за добу пр 150 г сульфату натрію, на протязі року отрима-

ио 3590 сперыодоз. При вартості спєрмодози, умовно І крб., економічна ефективність становить 3505 крб. . .

При використанні сперш бугаїв, які отримали за добу ІЕЗО г сульфату натрію, залліднюваність корів і телиць виїда від контрольних на 4t4$. '

‘ ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ • " .

І. З метою підвищення якості і кількості спермопролуіІ’ЛЇ; 1 запліднювальної здатності сперміїв необхідно балансувати раціони бугаїв за вмістом азоту і сірки.' Для цього доцільно використовувати сульфат натрію в дозі 150 г на голову за добу, на дві да-

вачки по 75 г, 40 забезпечує відношення езоту до сірки в раціоні плідників. 6,9 - 9,3 ; І.

СПИСОК •

праць, оцублікованих по темі дисертації

2. ОСТАПИВ Д.Д. Содержание общей серы и свободных сульфгідрильних групп В сперме быков // Тез .докл.науч.ч. -практ. конф.молодых ученых "Вклад молодых учених в интенсификацию с.-х.производства в свете требований ХХУП сьезда КПСС / 14-16 у.ея 1960 г./. Львов, 2985 - с.02..

2. ОСЛ’АПИБ Д.Д. Содержание гдутатиона в сперме быков // Тез. докл.научн.-теор.конф.по итогам ШР за І987 г./ Часть I/. Ка-«енец-Подольский, 1988 - с.95.

3. ЧЛСРЙй Б.Н., СПАБИДКИй Я.й., КЯЕВЬДЛ.А., ОСГАПЯВ Д.Д. • Окислительно-восстановительные процессы в еякулятах и качество спермиев при скармливании быкам сульфата натрия // Нвуч.техн. бвлл.ЛйШиБ с.-х. животных. Львов, 1э88 - вып.1С/3, с.4-1—.й.

4. Способ повышения качества сперлої. /СЛАБіЦМій Ь.іі., КЛЫБ2Д Л.А., ИРАЕЕЦ іа.С., О СТАЛИВ Д.Д. // Информ. листок Львов, ЦКТІ1 -Я 63 - 020. - вып.2. - 4 с.

5. ЧАйГОВСКАЬ А.И., ’ОСТАПИВ Д.Д. Генетические маркеры и сульф-гидрильные грушы спермы быковтпроизводителей // Тез.докл.начун.г произв.конф.молодых ученых /ноябрь 1988 г./. Днепропетровск -

с. .77.

6. Осталив Д.Д. Сезонные особенности содержания сульфгідрильних групп в сперке быков // Тез.докл.научн.-произв.конф.молодых ученых /ноябрь 1988 г./. Днепропетровск - с.73.