Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Интенсификация воспроизводства крупного рогатого скота мясных пород на основе биотехнологических методов
ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Интенсификация воспроизводства крупного рогатого скота мясных пород на основе биотехнологических методов"

V Сг-

^ г

. V V

^Ч-" На правах рукопит

\

САМОДЕЛКИН АЛЕКСАНДР ГЕННАДЬЕВИЧ

ИНТЕНСИФИКАЦИЯ ВОСПРОИЗВОДСТВА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА МЯСНЫХ ПОРОД НА ОСНОВЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ

03.00.13 - Физиология человека и животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

п. Дубровицы Московской области 1998 г.

Диссертация выполнена во Всероссийском научно - исследовательском институте животноводства (ВИЖ).

Научный консультант : доктор биологических наук, профессор, лауреат премии Совета Министров СССР, заслуженный деятель науки Российской Федерации, академик Академии естественных наук Республики Казахстан Н.И.Сергеев.

Официальные ошшкнты:

- академик РАСХН, доктор сельскохозяйственных наук, профессор А. В. Черекасв

- доктор биологических наук, профессор

Ю. П. Фомичев • доктор биологических наук, профессор Н. М. Решетникова

Ведущее учреждение • Всероссийский научно-исследовательский институт физиологии, биохимии и питания сельскохозяйственных животных (ВШШФБиП с.-х. животных).

итР

Защита диссертации состоится ""ЕС/" 1998 г. в 10 часов на

заседании диссертационного совета Д 020.16.02 при Всероссийском научна исследовательском институте животноводства.

Адрес института: 142012, Московская область, Подольский район,

пос. Дубровицы. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВИЖа.

Автореферат разослан Мй^ 1998 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор сельскохозяйственных наук

Н.В.Груздеш

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

з

Первостепенной задачей современного животноводства является увеличение производства мяса и прежде всего говядины, как наиболее полноценного продукта питания.

Доля говядины в общем производстве мяса составляет не более 45%, что далексг не достаточно для покрытия нужд народонаселения страны высококалорийными про-. дуктами животного происхождения. '

Дальнейшее увеличение производства продуктов животноводства, в том числе мяса, возможно только на основе современных эффективных технологий сельскохозяйственного производства, более полного использования биологических возможностей мясного скота по трансформированию кормов в мясную продукцию, современных достижений науки в области биологии размножения сельскохозяйственных животных и биотехнологии. Основной прирост производства говядины возможен за счет интенсификации отрасли, внедрения прогрессивных технологий в организации труда и форм собственности, повышения продуктивности скота на-основе сбалансированного кормления и создания оптимальных условий содержания животных.

Одной из важных причин ограничения рентабельности мясного скотоводства являются низкие темпы размножения животных. Повышение интенсивности воспро-изнодства стада является основным путем роста поголовья мясного скота, увеличения производства мяса и рентабельности отрасли в целом. Достичь более высоких результатов по расширенному воспроизводству маточного поголовья возможно при организации полноценного кормления, целенаправленной селекционной работы и четкого зоотехнического учета, стимуляции половой охоты и своевременного выбора животных в охоте, эффективном осеменении самок в оптимальные сроки, диспансеризации коров и своевременной лечебно-профилактической работе.

На основе усовершенствования существующих и разработки новых теоретических и практических подходов к решению проблемы интенсификации воспроизводства крупного рогатого скота возможно достичь высоких результатов по увеличению производства продуктов животноводства.

Среди наиболее важных достижений в области сельскохозяйственной науки является использование биотехнологии в процессе воспроизводства стада. Для более полного использования огромного генетического потенциала высокоценного маточного поголовья сельскохозяйственных животных был разработан и применен метод . трансплантации ранних эмбрионов от выдающихся матерей.

Метод трансплантации открывает огромные возможности в разведении и воспроизводстве крупного рогатого скота, как с точки зрения повышения эффективности племенной работы, так и увеличения воспроизводства мясного скота. В области селекции трансплантация эмбрионов обеспечивает более интенсивное размножение животных с высокой генетической ценностью, сокращает генерационный интервал, позволяет проводить более строгую селекцию матерей быков и др.

Определенный рост экономической эффективности мясного скотоводства можно достичь за счет увеличения количества двойневых отелов. Путем пересадки двух эмбрионов или подсадки одного эмбриона ранее осемененным животным можно увеличить выход телят на 30-50% и рентабельность стада - на 25-30%. Исследователи ведут поиск оптимальных вариантов технологий по получению двоен в мясном скотоводстве с тем, чтобы обеспечить высокий уровень воспроизводства стада и рентабельность отрасли,

В мясном скотоводстве эффективность производства продукции в решающей степени определяется уровнем воспроизводства стада и сохранностью полученного молодняка. Дальнейшее развитие мясного скотоводства в значительной степени сдерживается несовершенством технологии воспроизводства и ьсвысокой его экономической эффективностью. Существующие формы организации воспроизводства стада не отвечают в полной мере требованиям технологии мясного скотоводства. До последнего времени не определены оптимальные сроки физиологической половозрело-сти телок мясных пород и параметры осеменения коров после отела и в период охоты, нет эффективных и современных схем стимуляции половой функции и профилактики послеотельных осложнений у мясных животных.

Дальнейшие исследования по усовершенствованию технологии сельскохозяйственного производства путем более полного использования биологических возможностей мясного скота, разработки прогрессивных форм организации воспроизводства стада и применения новейших достижений науки в области биотехнологии позволят поднять на более высокий уровень рентабельность мясного скотоводства и обеспечить население страны высокоценными продуктами питания.

Цель и задачи исследований. На основе использования достижений современной науки и международного производственного опыта разработать методы и дать биотехнологическое обоснование интенсивного воспроизводства крупного рогатого скота мясных пород.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи:

- Оптимизировать существующие и разработать новые методы организации воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения, естественного спаривания и трансплантации ранних эмбрионов.

- Разработать теоретические и практические основы гормонального стимулирования охоты, суперовуляции, оценки качества н пересадки эмбрионов у Мясного скота.

- Усовершенствовать технологию получения двоен на основе метода трансплантации и совершенствование техники ее проведения при межпородной пересадке эмбрионов.

^ На основе анализа собственных исследовании установить эндогенные и экзогенные факторы, определяющие высокий процент стельности и жизнеспособности эмбрионов при искусственном осеменении и пересадке.

- Усовершенствовать технологию глубокого заморажнвания, длительного хранения эмбрионов, оттаивания и пересадки их в условиях ферм. Сконструировать специальные приспособления для этих целей.

- Одной из методических задач было усовершенствование, применительно к конкретным условиям, метода трансплантации эмбрионов у мясного скота с использованием отечественных реактивов, питательных сред, приборов и приспособлений.

Поставленные задачи решались в длительном эксперименте на высокопродуктивном и генетически ценном маточном поголовье мясного скота в племзаводах "Красный Октябрь" и "Парижская Коммуна" Волгоградской области, КСХП "Россия" и а'ф "Толмачево" Нижегородской области. Лабораторную часть исследований проводили в ВИЖе, в зооветеринарной лаборатории г. Котово Нижегородской области и Нижегородской сельскохозяйственной акадегПии.

Научная новтиа. Усовершенствованы и обоснованы биотехнологические подходы решения проблемы расширенного воспроизводства мясного скота с целью повышения его репродуктивных качеств и мясной продукции в целом. Разработаны оптимальные нормы организации воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения и трансплантации эмбрионов, теоретические и практические основы гормонального стимулирования охоты, суперовуляции, оценки качества и пересадки эмбрионов. Изучены эндогенные и экзогенные факторы, влияющие на интенсивность воспроизводства и эффективность использования трансплантации эмбрионов при ускоренном размножении высокопродуктивных животных и получении двоен. Разработан более простой и экономичный метод ускоренного замораживания эмбрионов.

Практическая ценность работы. Показано, что оптимизация организации воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения и

трансплантации ранних эмбрионов дает возможность увеличить выход телят до 97 на 100 коров, повысить число двойневых отелов до 50% при пересадке 2-х эмбрионов. Содержание мясного скота на пастбищах, помещениях облегченного типа в боксах без привязи снижает число трудных отелов на 6,7% и повышает оплодотворяемость животных от первого осеменения до 67,4%.

Охарактеризовано биологическое действие белковосодержащего препарата "белотин" и премикса П-60-3 на активизацию воспроизводительных функций коров. Включение в рацион животных указанных препаратов сокращает сервис-период до 69 дней, повышает оплодотворяемость от первого осеменения до 67,1% и реакцию доноров эмбрионов суперовуляцией до 76%.

Применение УВЧ сокращает продолжительность инволюции матки на 9 дней и сроки прихода коров в охоту на 18 дней, повышает их оплодотворяемость на 14%.

Двукратное введение иростагландина (утром и вечером) обеспечивает синхронизацию охоты у 94,5%. Интенсивное выращивание телок способствует их раннему созреванию (15-17 мес.), высокой оплодотворяемости (89,8%) и получению жизнеспособных телят (98,4%).

Оптимальным вариантом получения двойневой стельности является подсадка эмбриона ранее осемененным животным в противоположный рог матки от желтого тела, что позволяет подучить 57% отелов двойнями.

Предложена простая, высокоэффективная и доступная для производственных условий методика замораживания эмбрионов методом "витрификации" и механического деления зародышей без сложных и дорогостоящих микроманипуляторов.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- Влияние условий кормления и содержания на воспроизводительные возможности коров и телок мясных пород.

- Эффективность стимуляции половой функции у коров и телок, профилактика порлеродовых осложнений, сроки половозрелости и оплодотворения телок, кратность и сроки осеменения коров после отела.

- Оптимизация воспроизводства мясного скота при искусственном осеменении, естественном спаривании и трансплантации ранних эмбрионов; факторы, влияющие на эффективность воспроизводства.- Теоретические и практические основы синхронизации охоты и стимуляции

полиовуляции у коров-доноров и телок-реципиентов, эндогенные и экзогенные факторы, определяющие эффективность гормональной стимуляции множественной овуляции, оплодотворяемость яйцеклеток и качество эмбрионов.

- Получение, оценка качества, замораживание, оттаивание и пересадка эмбрионов.

- Теоретические и практические основы деления эмбрионов, эффективность пересадки разделенных зародышей.

■ Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференциях:

- Нетрадиционные методы лечения животных с незаразной патологией в практической ветеринарии. Н.Новгород, 1993 г.

- Использование научного потенциала в животноводстве агрофирмы "Толмачено". Н.Новгород, 1994 г.

- Мясное скотоводство в условиях Нижегородской области. Н.Новгород, 1995 г.

- Ветеринария и биология сельскохозяйственного производства. Н.Новгород, 1995 г.

- Внедрение современных научных разработок - основа повышения эффективности ветеринарных мероприятий по профилактике болезней сельскохозяйственных животных. Волгоград, 1996 г.

- Совершенствование научного обеспечения афопромышленного комплекса Нижегородской области в рыночных условиях. Н.Новюрод, 1997 г.

- Состояние и перспективы развития мясного скотоводства России. Москва, 1997 г. 2-я международная научно-практическая конференция.

- Актуальные проблемы ветеринарно-сашггарного контроля сельскохозяйственной прод)кцин. Москва, 1997 г.

- Актуальные и перспективные задачи в разведении и использовании сельскохозяйственных животных. Словакия, 1997 г.

- На годичном собрании отделения зоотехнии РАСХН. Дубровицы, Московской области, 1997 г.

По материалам диссертации опубликовано 36 научных работ, в т.ч. две методические рекомендации н две монографии.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на^-у У~ страницах машинописного текста, содержщ- 53 таблицы, 14 рисунков, 6 приложений, состоит из введения, обзора литературы, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений. Список литературы включает 256 источников, из них 138 иностранных.

II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы исследований. Научные исследования проводили на маточном поголовье крупного рогатого скота мясных пород: герефордская, абердин-ангусская и казахская белоголовая.

В эксперименте по изучению влияння уровня кормления и условий содержания на воспроизводительные функции мясных коров были использованы клинически здоровые животные с нормальным половым циклом в возрасте от 2,5 до 10 лет. Подопытные животные содержались на привязи, беспривязно в боксах и на выпасах. Уровень кормления и сбалансированность рационов контролировали путем определения качества кормов и их фактической поедаемости. Определение биохимии крови в различные периоды года проводили по следующим показателям: общий белок, альбумин, общие лниидь:, фосфолиниды, холестерин, триглицерин, креагинин, щелочная фосфа-таза, каротин и витамин А.

Зоотехнический анализ кормов проводили в зональной зооветлаборатории г. Котово Нижегородской области, биохимические исследования крови - в соответствующей лаборатории Нижегородской сельскохозяйственной Академии и в ВИЖе. Одновременно с этим у подопытных животных определяли продолжительность по-слеотельного периода, сервис-периода, оплодотворяемость коров от 1-го осеменения и индекс осеменения.

Для балансирования рационов и стимуляции воспроизводительных функций в рацион животных включали белковый препарат "белотин" в дозе 250 г и премикс П-^ 60-3 в дозе 30 г в сутки на голову и однократно вводили 20 мл тетравита внутримышечно.

Для стимуляции половой функции у коров и телок использовали метод однократного или двукратного введения с интервалом 10-12 дней аналогов простагланди-на: эстуфалан, суперфан и анипрост отечественного производства в дозе 500 мкг в сочетании с ГСЖК в дозе 1000 ИЕ.

В анэстральный период и при овариальной гипофункции использовали гестаге-ны в имплантантах. Имплантанты ("Интервет") с 3 мг норгестомета вводили под кожу корня уха на 10 дней при одновременном внутримышечном введении 5 мг эстрадиол-валерата. При удалении имплантантов на 9-й день обработки животным, дополнительно вводили 600 ИЕ ГСЖК. При гормональном индуцировании полиовуляции у коров и телок-доноров использовали ФСГ (Берне Байотик, США) и супер-ФСГ отечественного производства. На предпоследний 4 или 5 день обработки животным вводили простаглаидин в дозе 500 мкг.

На 14-15 и 25-27 день после отела проводили ректальный контроль состояния и степени завершения инволюции матки. При этом обращали внимание на характер истечений из влагалища и время закрытия шейки матки.

С целью профилактики и лечеция осложнений в послеотельный период использовали медикаментозные средства для внутриматочного введения: фуразолидоновые палочки, раствор Люголя, йодосол. Для усиления моторики матки применяли внутримышечно 0,1% раствор карбохолина и 0,5% раствор прозерина, для общей стимуляции организма - АСД 2 фракция на тривитамине.

СХЕМА И ОБЪЕМ ИССЛЕДОВАНИЙ

Обзор отечественной и зарубежной литературы

Изучение влияния условий содержания и кормления мясных животных на их воспроизводительные функции (568 голов) Разработка оптимальных норм организации воспроизводства мясного скота при искусственном и естественном осеменении (512 коров и телок) .

Разработка теоретических и практических основ гормонального индуцирования охоты и полиовуляцни (472 коровы и телки) . Замораживание и оттаивание эмбрионов мясных пород . (600 эмбрионов)

Получение телят-двоен и одинцов (800 эмбрионов) Разработка Теоретических основ и методов микроманипуляций с эмбрионами мясных пород (100 эмбрионов)

Для профилактики и лечения эндометритов использовали устройство ЛГЗ-1 УВЧ при выходной мощности генератора 30 Вт и экспозиции 10 минут с применени-ем.частных методик,

' ю

В период запуска и- перед отелом подопытных животных обрабатывали витамином тетравит в лозе 15-20 мл внутримышечно. _„ •■ *

Получение эмбрионов и оценку их качества проводили по^методикам ВИЖа. Поиск и морфологическую оценку эмбрионов проводили под стереомикроскопом при увеличении в 100 раз.

Для замораживания ислсмьзовялй эмбрионы хорошего и отличного качества по пятибалльной оценке. Замораживание эмбрионов проводили на программных замо-раживателях УОП-1, Планер И-204, ЗЭМ-3 и методом витрификации без применения криогенной техники. В качестве криопротекторов использовали 1,4 М раствор глицерина, 1:5 М - этиленгликоля. Насыщение эмбрионов криопротектором проводили по одно- и четырехступенчатой схеме. Замораживание эмбрионов в автоматическом режиме проводили от +20°С до -7°С со скоростью 1°С в минуту, эквилибрация 3-4 минуты, от -7°С до -36°С со скоростью 0,3°С в минуту, 10 минут стабилизации при -Зб°С, затем погружали в жидкий азот для хранения. "Витрификацию" эмбрионов осуществляли путем их плавного насыщения 5,6М раствором глицерина или смесью криопротекторов, состоящих из 2,8М глицерина и 2,8М 1,2 - пропандиола; 2,8М глицерина и 2,8М этиленгликоля. Замораживание эмбрионов проводки в газообразном азоте в течение 20 минут. Эмбрионы оттаивали при температуре +37°С. Эффективность режимов замораживания и оттаивания оценивали по качеству эмбрионов после размораживания и приживляемосги после пересадки.

Микроманипуляции с эмбрионами на стадии ранней или поздней морулы проводили специальным ножом в чашке Петри, заполненной обогащенной средой Дюль-бекко на предметном столике етереомикроскопа при увеличении в 100 раз. ^

Нехирургическая пересадка эмбрионов и их половинок проводилась коровам и телкам-реципиентам молочных и мясных пород с применением специальных приборов фирмы "Нойлпвдг-Айш" и отечественного производства.

Для предотвращения бактериальной контаминации эмбрионов применяли санирующие препараты "Спермасан" ППК в дозе 200 ед/мд и ГАМП из расчета 1 см3 рабочего раствора на 500 мл Среды. Обработку эмбрионов санирующими препаратами проводили непосредственно перед их пересадкой.

Результаты эмбриопересадок оценивали на 60-90. день ректальным путем. Статистическую обработку экспериментальных Данных проводили по методике Е.К.Мсркурьсвой (1970) с использованием компьютерной техники.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Влияние условий содержания и кормления иа воспроизводительные функции коров мясных пород

Из обзора научной литературы установлено, что современные экономические и ветеринарно-зоотехнические аспекты интенсификации воспроизводства скота не использованы в полной мере. Существует ряд положений, научная разработка которых позволит ускорить процесс воспроизводства наиболее ценной части маточного поголовья, увеличить выход телят и экономику мясного скота за счет увеличения производства говядины, как наиболее ценного продукта питания.

В результате проведенных исследований установлено, что способ содержания мясного скота оказывает заметное влияние на воспроизводительные возможности маточного поголовья.

При привязном содержании число трудных отелов (родовспоможения) достигает 29,2% от числа отелившихся животных (табл.1). В послеотельный период у 45,3% коров наблюдались осложнения в виде эндометритов, цервнцнтов, порывов шейки матки и др.

Таблица /

Влияние условий содержания на воспроизводительные функции коров

Показатель Содержание коров

привязное бсспрнвязио-боксовос стонлово-пастбищное

Отелилось коров 106 129 99

Число трудных отелов 31 20 6

Процент 29,2 ± 4,4 15,5 ±3,1 6,1 ±2,5

Число коров с осложнениями в послеотельный период 48 24 12

Процент 45,3 ± 4,8 18,6 ±3,4 12,1 ±3,9

Средняя продолжительность послеотельного периода (дн.) 98 ±2,8** 65 ±1,7 ■ 41 ± 1,2**

Сервис-период (дн.) 116 ±3,4 85 ± 2,2 68 ± 4,7

Стельность от 1-го осеменения 49,7 ±4,8* 52,1 ±4,4 67,4 ±4,7

Индекс осеменения 2,9 ±0,2 2,3 ±0,1 1,8 ±0,1

*-Р<0,05; ** -Р<0,01

Продолжительность послеотельного периода достигала 98 дней, а сервис-период 116 дней. Стельность короа от 1-го осеменения не превышала 49,7% при индексе осеменения 2, 9. Подобное состояние воспроизводительной функции у животных можно объяснить тем, что отсутствие активного моциона способствует развитию атонии половых органов, нарушению обменных процессов и горхюнального статуса в организме маток. Кроме того, на ограниченном пространстве хшвотноводческого помещения создается неблагоприятный микроклимат, повышается контаминация микрофлорой, что в итоге, по-видимому, приводит к усугублению послеотельных осложнений.

При беспривязном содержании животных в боксах, когда имеется определенная свобода в перемещениях, число трудных отелов снизилось до 15,5%, а коров с осложнениями в послеотельный период до 18,6. Стельность животных от 1-го осеменения составила 52,1% при индексе осеменения 2,3.

При стойлово-пастбищном содержании коров число трудных отелов не превышало 6,1% при 12,1% осложнений в послеотельный период. Стельность животных от 1-го осеменения в данной подопытной группе достигала 67,4% при индексе осеменения 1,8.

Из полученных результатов следует, что наиболее оптимальным вариантом содержания мясного скота является стойлово-пастбищный, когда основное время животные находятся на выпасах. Вне пастбищного периода мясных коров желательно содержать беспривязно в боксах.

.Было изучено влияние биологически активных препаратов белотина и премикса П-60-3 на воспроизводительные функции коров в послеотельный период.

Установлено, что дополнительное скармливание белотина и премикса в виде добавки к основному рациону животных оказывает существенное влияние на воспроизводительные функции коров. Из 88 отелившихся только 7 коров трудно отелились и 17% животных имели послеотельные осложнения (табл.2).

Продолжительность послеотельного периода у коров не превышала 51,1 дня, а сервис-период был равен 69 дням. Общая стельность животных достигала 88,6%, в т.ч. от 1-го осеменения 67,1%. Отсутствие добавок увеличивало число трудных отелов до 17,1 и 39,7% коров имели осложнения в послеотельный период.

Проведены исследования по изучению оплодотворяемости коров и телок в за. виснмости от условий их осеменения. Осеменение подопытных животных проводили в условиях животноводческого комплекса, на привязи, в стационарных условиях пункта, в боксах и на пастбищах.

Таблица 2

Влияние биологически активных веществ на воспроизводительные функции коров

Показатель Кормление животных

основной рацион (контроль) добавка к основному рациону

белотнн премнке П-60-3 белотнн+ премнке П-60-3

Отелилось коров 111 71 , 64 88

Число коров с трудными отелами 19 9 9 7

Процент 17,1 ±3,6* 12,6 ±3,9 14,1 ±4,3 7,9 ±2,9*

Число коров с осложнениями в послеотельный период 44 24 19 15

Процент 39,7 ± 4,6 33,8 ± 5,6 29,7 ± 5,7 17,0 ±4,0

Средняя продолжительность послеотелыюго периода (дн.) 67,6 ± 1,9 61,0 ±2,2 63,0 ±2,4 51,1 ± 1,6

Сервис-период (дн.) 89,9 ±2,6*** 86,0 ±3,1 84,1 ±3,2 69,0 ±2,2***

Стельных животных 83 54 49 7 6

Процент 74,9 ±4,1 76,1 ± 5,6 76,6 ±5,3 88,6 ±3,4

В т.ч. от 1-го осеменения, % 48,0 ±4,7 54,5 ± 5,9 53,7 ±6,2 67,1 ±5,1

Индекс осеменения 2,6 ± 0,2 2,1 ±0,17 2,2 ±0,18 1,8 ±0,14

* - Р<0,01; ***-Р <0,001

Установлено, что осеменение животных в условиях пункта искусственного осеменения наиболее эффективно (табл.3).

Из числа осемененных животных 89,5% оказались стельными, причем стельность от 1-го осеменения достигала 61,8% при индексе осеменения 1,8. Результаты

>

искусственного осеменения коров и телок в условиях привязного содержания были значительно ниже. Стельность животных на привязи не превышала 69,1% и от 1-го осеменения не более 46,8%. При осеменении животных в боксах эти показатели составили 71,2% и 55,0, соответственно. Разницу в оплодотворхемости животных можно объяснить условиями проведения искусственного осеменения.

Вариабельность оплодотворяемости животных мясных пород во многом зависит от типа нервной системы маток. У животных с повышенной возбудимостью опло-

дотворяемость яйцеклеток может быть значительно понижена за счет стрессовых ситуаций, которые могут возникнуть при искусственном осеменении.

Таблица 3

Оплодотворяемость коров и телок в зависимости от условий . их осеменения

Показатель Условия искусственного осеменения

на привязи в боксах па пункге

Число осемененных коров и телок 68 73 76

Стельных животных 47 52 68

Процент 69,1 ± 5,6** 71,2 ±5,3 89,5 ± 3,5*

В т.ч. от 1тГ0 осеменения, % 46,8 ±6,1* 55,0 ±5,8 61,8 ±3,9*

Индекс осеменения 2,7 ±0,22*** 2,1 ±0,17 1,8 ± 0,15***

Не оплодотворил ось животных 21 21 8

Процент 30,9 ±5,6 28,8 ±5,3 .0,5 ±3,5

* - Р<0,05; ** -Р<0,01; *** - Р<0,001

Нами была изучена оплодотворяемость коров пород герефордская, казахская белоголовая и абердин-ангусская при искусственном и естественном осеменении (табл.4).

В результате проведенных исследований установлены различия в оплодотворяемое™ коров абердин-ангусской породы при искусственном и естественном осеменении. При осеменении коров рекго-церпикальным способом общая оплодотворяемость животных не превышала 60,0% и 49,4% от 1-го осеменения. При естественном ' осеменении аналогичной группы коров оплодотворяемость их увеличилась до 78,4%, т.е. на 18,4% (Р<0,05). Общая оплодотворяемоегь коров герефордской и казахской белоголовой пород как при искусственном, так и при естественном осеменении была в пределах 79,6 - 85,5%. Подобную разницу в оплодогворяемоьти масных коров возможно объяснить различиями нервной системы у подопытных животных. Животные аберднн-ангусской породы, обладающие повышенной возбудимостью в большей степени реагируют на все манипуляции при искусственном осеменснии. Подобные вмешательства стимулируют выделение в организм животных окситоцина, который вызывает усиленное сокращение матки, что приводит, к изгнанию спермы из половых путей самок и снижению их оплодотворяемости. При естественном осеменении, когда

создаются более физиологически обоснованные условия для оплодотворения, снижается окситоциновый фактор и результаты покрытия значительно возрастают.

Таблица 4

Оплодотворяемость мясных коров разных пород при искусственном осеменении н естественном спарнванин

Осеменение искусственное/естественное

Показатель Порода

герефордская казахская белоголовая аберднн-ангусская

Число осемененных 76 51 85

коров 49 50 37

Оплодотворилось 61,8 ±5,6 58.5 ±6.8 49.4 ± 5.4

от 1-го осеменения и 61,2 ±6,9 62,0 ± 6,8 54,1 ± 8,2

спаривания, %

Число стельных ко-

ров от нескольких 65 42 51

осеменений и 39 40 29

спаривания

Процент 85.5 ± 4,0* 79.2 ± 5.6 60.0 ± 5.3*

стельности 79,6 ±5,8 80,0 ± 5,6 78,4 ± 6,7

Индекс осеменения 1,6 ± 0,14** 1,8 ±0,18 2,7 ±0,18**

*-Р<0,05; **-Р<0,01

Для снижения негативного влияния внешних факторов на результаты осеменения мясного скота были применены мышечные и маточные релакса)ггы (табл.5).

Таблица 5

Влияние релаксантов на оплодотворяемость мясных коров

Показатель Контроль Препараты

рампу II мнорелак-сант рампун+мно релаксант

Число осемененных коров 61 55 49 71

Стельных животных 36 40 33 58

Процент 52,0 ±6,4** 72,7 ± 6,1 67,3 ±6,7 ' 81,7 ±4,6**

В т.ч. от 1 -го осеменения, % 45,9 ±6,4 56,4 ± 6,7 55,1 ±7,3 62,0 ±5,7

Индекс осеменения 2,4 ± 0,2 1,8 ±0,18 1,9 ±0,2 1,5 ±0,14

Не оплодотворилось животных (п-%) 25-41,0 15-27,3 16 - 32,7 13 -18,3

**- Р < 0,01

Комплексное применение маточного релаксанта и раствора "Рампун" увеличивает оплодотворяемость коров на 29,7% по сравнению с контрольной группой (Р<0,01).

Использование препаратов миорелаксант и рампун каждого в отдельности не позволяет достичь желаемых результатов, т.к. маточный релаксант оказывает расслабляющее действие только на матку, а рампун на двигательные мышцы животных.

3.2. Стимуляция половой функции у коров н телок. Профилактика послеотельных осложнений

Своевременная профилактика и лечение послеотельных осложнений с последующей стимуляцией половой функции маток, позволяют значительно улучшить результаты воспроизводства стада.

Основываясь на способности УВЧ-терапии стимулировать сократительную способность матки, мы применили устройство ЛГЗ-1 УВЧ для профилактики и лечения послеотельных осложнений у коров.

В результате проведенных исследований установлено, что инволюция матки у животных первой группы завершилась через 28 дней, у второй - через 24 дня, в то же время у контрольных животных инволюция матки завершилась через 39 дней (табл.6).

Число коров с осложнениями в послеотельный период не превышало 6,9% и сервис-период был в пределе 53-69 дней. В контрольной группе 26,1% животных-имели послеотельные осложнения, что способствовало увеличению сервис-периода до 82 дней. Оплодотворяемость коров от 1-го осеменения первой и второй группы

а*

находилась в пределе 54,6-59,1%, оплодотворяемость третьей группы животных не превышала 44,6%, что на 10,0% и 14,5% меньше, чем в двух предшествующих группах животных. Общая стельность первой, второй и третьей (контроль) группах составила 79,3; 84,4 и 69,6%,'соответственно.

Таким образом, применение электромагнитного поля УВЧ профилактирует развитие у животных послеотельных осложнений, что способствует сокращению продолжительности сервис-периода на 13-29 дней и повышает оплодотворяемость на 1015%.

Таблица в

Эффективность применения УВЧ для профилактики н стимулирования воспроизводительной функции у коров

Показатель Группы животных

I 2 3 (контроль)

Отелилось коров 29 32 23

Из них с осложнениями в послеотельный период 2 1 6

Процент 6,9 ± 0,3 3,1 ±0,3 26,1 ±8,6

Продолжительность инволюции матки (дн.) 28 ±2,6 24 ±1,7 39 ±4,1

Срок прихода в охоту после отела (дн.) 48 ± 2,9 33 ±2,3 61 ±3,8

Сервис-период (дн.) 69 ± 4,2 53 ± 3,6 82 ± 5,2 ■

Общее число стельных животных 23 27 16

Процент 79,3 ± 7,5 84,4 ± 6,4 69,6 ± 9,6

В т.ч. от 1-го осеменения 54,6 ±9,2 59,1 ±8,7 44,6 ± 10,4

Индекс осеменения 2,1 ±0,3 1,7 ±0,2 2,4 ± 0,3

Стимулирование половой функции с применением гормональных препаратов является одним из вариантов решения проблемы воспроизводства мясного стада. Для преодоления гипофункции яичников и стимуляции воспроизводительной функции животных были применены гормональные препараты: ГСЖК, грофоллон, фоллитро-пин, супер-ФСГ в сочетании с простаглашшном анипрост (табл.7).

Обработка животных с применением ФСГ-супер и анипроста - 500 мкг, наиболее эффективна. Из 69 обработанных коров 55 или 79,7% пришли в охоту. Общая стельность животных после нескольких покрытий достигала 85,5%. Во второй группе подопытных животных при стимуляции половой функции с использованием грофол-лоиа и анипроста были получены более низкие показатели. Из числа обработанных только 65% животных проявили признаки охоты, причем из них 48,7% пришли в охоту повторно после 1-го осеменения. Общая стельность животных составила 58,3% при индексе осеменения 2,9 и сервис-периоде 49 дн. При использовании фоллитропина в сочетании с хориогонином 500 ИЕ и ГСЖК с анипростом получены идентичные результаты. Около 70% животных проявили признаки охоты и общая стельность коров была в пределе 65,8-70,0% при равнозначном индексе осеменения 2,9.

и '

Таблица 7

Сравнительная эффективность применения гормональных препаратов при гипофункции яичников

Показатель Группы коров и доза

ФСГ-супер 10 мг анинрост Грофоллон 200 ИЕ анипрост фоллигропин 500 ИЕ хориогонни ГСЖК 1000 ИЕ анипрост

Обработано коров 69 60 76 72

Проявили признаки охоты 55 39 51 51

Процент 79,7 ± 4,8 . 65,0 ±6,2 67,1 ± 5,4 72,2 ± 5,3

Пришли повторно в охоту после 1-го осеменения, % 63,6 ±5,8 48,7 ± 6,0 49,0 ±5,7 57,7 ±5,8

Стельных коров 59 35 50 51

Процент 85,5 ±2,2 58,3 ± 6,4 65,8 ±5,4 70,8 ± 5,3

Индекс осеменения 1,7± 0,16 2,9 ±0,22 2,9 ± 0,16 2,0 ±0,19

Интервал от обработки до плодотворного осеменения (дн.) 26,5 ± 0,9* 49,0±2,0*** 33,0 ±1,2 32,9 ± 1,2

Р < 0,01; *** - Р< 0,001

В сравнительных исследованиях по стимуляции половой функции у коров и телок мясных пород применяли простагландин эстуфалаи, суперфан и анипрост в дозе 500 мкг по клопростенолу. При наличии активного желтого тела яичника животных обрабатывали однократно, при отсутствии - двукратно с интервалом между обработками 12 дней. Наиболее высокие показатели по стимуляции половой охоты у коров и 1

телок были получены при использовании анипроста (табл.8).

Из числа обработанных животных пришло в охоту 69,9% при однократном и 84,0% при двукратном введении препарата, причем около 70% коров проявили признаки охоты через 48 часов после инъекции препарата. Стельность коров и телок от 1-го осеменения достигала 69% при индексе осеменения 1,6. Общая стельность подопытных животных находилась в пределах от 80,6 до 85,1%.

В период овариальной гипофункции и анэструса у мясного скота применение простагланоинов неприемлемо, в этот период целесообразно использовать гестагены.

Нами была изучена эффективность стимуляции половой функции у коров и телок в анэстральный период с помощью гертагенов (норгестамег, эстрадиолвалерат) и фоллнтрогшна в сочетании с простагландином.

Таблица 8

Стимуляция половой функции у коров и телок с помощью простагландннов

Показатель Препараты

эстуфалан суперфан аннпрост

кратность обработки

1 2 1 2 1 г

Обработано коров 91 87 79 89 103 94

Из них проявили признаки охоты 54 57 48 61 72 79

Процент 59,3±5,1 б5,5±5,1 60,8±5,5 68,5±4,9 69,9±4,5 84,0±3,8

В т.ч. через 48 часов 38 40 33 40 50 51

Процент 70,4±6,2 75,5±5,1 68,8±6,6 70,1±5,8 69,4±5,4 72,9±5,0

72 часа 16 13 15 17 22 19

Процент 29,6±6,2 24,5±5,7 31,2±6,6 29,9±5,8 30,6±5,4 27,1±5,0

Стельных животных 62 61 58 70 83 80

Процент 68,1 ±4,8 70,1 ±4,9 73,4±4,9 78,0±4,3 80,6±3,9 85,1±3,7

В т.ч. от 1-го осеменения (%) 44,0±5,2 48,5±5,3 56,1±5,5 56,9±5,2 65,4±4,6 69,0±4,7

Индекс осеменения 2,4±0,16 2,1±0,16 2,0±0,16 1,9±0,15 1,8±0,13 1,6±0,30

В результате проведенных исследований установлено, что наиболее эффективным оказалось применение норгестамета в сочетании с эстрадиолвалератом. От числа обработанных 70,8% коров и 73,3% телок пришли в охоту, причем около 70% животных проявили признаки охоты через 48 часов после последней инъекции.

Стельность коров й телок от 1-го осеменения составила 61,0 и 64,8% и общая стельность после нескольких осеменений достигла 75,6% и 78,1%, соответственно. Заметно ниже результаты по стимуляции охоты у коров и телок были получены при обработке их фоллитропином в сочетании с анипростом. Не более 50% коров и 62,7% телок реагировали признаками охоты, что на 14,5% и 20,8% ниже, по сравненшо с животными, обработанными норгесгаметом в сочетании с эстрадиолвалератом и эта разница достоверна.

Общая стельность животных первой и второй группы не превышача 63,9-65,5% при высоком индексе осеменения 2,9 и 2,6.

3.3. Сроки полоао^релости и оплодотворения мясных телок

Нами были проведены эксперименты по изучению влияния возраста и живой массы мясных телок на результаты ошюдотворяемости.

Установлено, что общая оплодотворясмость телок, выращенных в интенсивном режиме, превышает оплодотворяемость животных на обычных рационах в среднем на 12,2 и 20,7%, в том числе от первого осеменения на 13,0 и 23,5%. В группе телок старшего возраста (20-22 мес.) общая оплодотворяемость составила 69,1%, т.е. более 30% животных остались яловыми. Оплодотворяемость телок данной группы от 1-го осеменения едва достигала 47,7% при максимальном индексе осеменения 2,8, что, ко-видимому, можно объяснить наличием проблем с воспроизводительными функциями у животных данного возрастного периода (табл.9).

Таблица 9

Влияние возраста н массы тела на результаты оплодотворяемое™ телок

Показатель Возраст телок (исс.)

15-17 (опыт) 17,5 - 19,5 20-22

Осеменено телок 69 64 55

Средняя живая масса телек (кг) 356,0 ±12,8 404,0 ± 15,2 438,0 ±17,7

Оплодотворяемость телок от 1-го осеменения.% 70,9 ± 5,7* , 60,4 ±6,7 47,4 ±8.1«

Оплодотворилось телок от нескольких осеменений 62 52 38

Процент от общего числа осемененных телок 89,8 ± 3,6** 81,3 ±4,9 69,1 ± 6,2**

Индекс осеменения 1,7 ±0,16 . 1,9 ±0,17 2,8 ± 0,22

Получено телят 61 33

Процент от общего числа стельных телок 98,4 ± 1,5 92,3 ±3,3 86,8 ±4,5

Р < 0,01; ** ..- Р < 0,05

В группе телок от 17,5 до 19,5 месяцев получены вполне допустимые показатели по оплодотворяемости. Общая стельность животных составила 81,3% при доста-' точно высоком показателе оплодотворяемости от 1-го осеменения (60,4%).

Из полученных данных следует, что интенсивный режим выращивания телок способствует раннему их созреванию и достижению вполне достаточной массы для плодотворного осеменения. Это позволяет сократить время выращивания телок на 5-6

месяцев и ввести в оборот стада животное в более раннем возрасте при сохранении его здоровья и получении жизнеспособного потомства.

4. Отбор коров-доноров и быков-производителей в программе селекции мясного скота

Экономическая эффективность метода трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота во многом зависит от целенаправленного отбора высокоценных в племенном и продуктивном отношении коров-доноров, способных реагировать иолиову-ляцией на введение экзогенных гонадотропинов и давать необходимое количество полноценных эмбрионов дня замораживания и эмбриоперссадок. Не менее важное значение в деле повышения эффгктивкости метода трансплантации эмбрионов имеют быки-пронззодителч, спермой которых осеменяют доноров в индуцированную охоту.

Нами было изучено влияние племенных качеств коров-докоров на результаты суперовуляции и получение эмбрионов.

Из числа коров, входящих в селекционную группу стада, суперовуляцией реагировало 90,3% животных и в среднем на донора получено 5,4 качественных эмбрионов, что составляет 60,7% от числа извлечений (табл.10).

Таблица 10

Влияние племенной ценности коров-доноров на результаты полиовуляции а качество эмбрионов

Показатель Группа коров

племядро селекционная группа быкопроизво-дящие

Обработано животных 26 31 17

Доноров с полиовуляцией 20 29 15

Процент 76,9 ± 7,8** 90,3 ± 5,3** 88,_+ 5,7

Среднее число овуляций на донора 8,1 ±0,4 11,2 ±0,6 10,5 ±0,7

Получено в среднем на донора эмбрионов и неоплодотво-ренных яйцеклеток • 7,2 ± 0,4 8,9 ± 0,5 8,1 ±0,6

В т.ч. нормальных эмбрионов 3,6 ±0,3* 5,4 ±0,5* 3,5 ± 0,4*

Процент 50,0 ± 0,26 60,7 ± 0,29 43,2 ± 0,39

Оплодотворяемость яйцеклеток 77,8 ± 7,7 77,5 ± 7,5 75,3 ± 10,4

*- Р < 0,01; ** - Р < 0,05

В группе быкопроизводящих коров, число доноров с полиовуляцией достигало 88,2%, выход морфологически нормальных эмбрионов не превышал 43,2%. Более низкие показатели полновуляции были получены у доноров племенного ядра (76,9%), но выход качественных эмбрионов был несколько выше (50,0%). Подобную разницу в результатах по индуцированию полиовуляции можно объяснить только физиологическими и продуктивными качествами подопытных животных.

Возраст и живая масса животных являются определяющими факторами результативности воспроизводства маточного поголовья мясного скота методом трансплан-• тации эмбрионов.

Установлено, что живая масса коров оказывает большое влияние на результаты гормонального индуцирования полновуляции у доноров, чем их возраст (табл.11).

Таблица 11

Влиянне возраста н живой массы доноров на результаты индуцирования полновуляции

Показатель Возраст коров-доноров, лет

2,5-5 5,1-9

Живая масса, кг

400-500 501-600 400-500 501-600

Обработано животных 31 44 25 18

Из них реагировали по-лиовушшисй 19 36 !£ 14

Процент 61,2 ±8,7 81,8 ±5,8 64,0 ±9,6 77,8 ±9,8

Среднее число овуляций на донора 7,2 ±0,3 9,0 ±0,4 7,6 ±0,5 8,9 ± 0,6

Получено в среднем на донора эмбрионов и не-оплодотворенных яйцеклеток 7,1 ±0,4 7,0 ± 0,3 6,8 ±0,4 6,7 ± 0,5

В т.ч. нормальных эмбрионов 3,8 ±0,3 4,9 ±0,2 3,9 ± 0,4 5,1 ±0,3

Процент 53,5 70,0 57,4 76,1

Оплодотворяемость яйцеклеток , % 71,8 ±8,1 85,7 ±5,3 79,4 ±6.1 91,0 ±6,7

От 77,8 до 81,8% коров живой массой от 501 до 600 кг реагировали полиовуляцией и выход, качественных эмбрионов в среднем на донора составил 4,9 н 5,1 или 70,0 - 76,1% от числа извлеченных. В группе коров с живой массой менее 500 кг от

61,2 до 64,0% реагировали полиовуляцией и выход качественных эмбрионов не превышал 3,9 в среднем на донора.

Разница в показателях по числу животных, реагирующих полиовуляцией и выходу нормальных эмбрионов у доноров в возрасте от 2,5 - 5 лет и 5,1 - 9 лет была минимальной.

Гормональный фон организма животных варьирует в определенных пределах и, отражая его проявление в различные функциональные стадии полового цикла, может служить критерием отбора доноров эмбрионов.

Экспериментальные исследования показали, что вариабельность гормонального фона в организме животных, отобранных для использования в качестве доноров эмбрионов, незначительная (табл.12). Концентрация прогестерона находится в пределах 0,62-0,85 при среднем показателе 0,74 иг/мл, эстрадиола - от 13,91 до 14,82 при среднем выражении - 14,36 пг/мл. Подобные показатели концентрации гормонов возможно объяснить однородным подбором доноров. Перед началом обработки доноров, вариабельность концентрации гормонов в крови несколько возрастает, что, по-видимому, связано с качеством желтого тела и активностью яичников в целом. В день извлечения эмбрионов концентрация гормонов прогестерона и эстрадиола в крови доноров возрастает в 1,5-2 раза, что взаимосвязано со степенью проявления суперову-ляторной реакции яичннков у животных. Колебания концентрации гормона картизола на всех этапах подготовки доноров к суперовуляции было незначительным и недостоверным (Р<0,5).

Таблица 12

Вариабельность концентрации половых гормонов в крови жнвотных-доСоров

Взятие проб крови Число доноров Концентрация гормонов

прогестерон (нг/ил) эстраднол (п/мл) картизол (иг/мл)

При отборе доноров 74 0,74 ±0,10 14,36.± 0,50 10,36 ±0,36

Перед гормональной обработкой 70 1,61 ±0,(5 14,17 ±0,51 10,45 ±0,34

В день извлечения эмбрионов 62 2,55 ±0,20 23,75 ±0,90 11,44 ± 0,44

. В последующих экспериментах была установлена зависимость между уровнем полиовуляции, числом извлеченных эмбрионов и концентрацией гормонов в крови доноров (табл.13). При минимальном числе овуляций и полученных эмбрионов (0-3)

концентрация прогестерона не превышала 0,7 кг/мл, а эстрадиола не более 11,6 пг/мл, что достоверно ниже (Р<0,01), по сравнению с остальными группами животных. При высокой овуляции и количестве полученных эмбрионов, концентрация прогестерона и эстрадиола в крови доноров была максимальной (3,15 нг/мл и 19,4 пг/мл). Содержание картизола в крови животных не отражало уровня овуляции и числа извлеченных эмбрионов.

Таблица 13

Влияние гормонального фоня в крови доноров на результаты полновулицнн н выход эмбрионов

Число Гормоны

овуляций эмбрионов прогестерон (нг/мл) эстрадиел (пг/мл) картизол (нг/мл)

0-3 0-3 0,7 ±0,2** 11,6 ±1,0« 12,8 ± 1,1

4-7 4-6 1,8 ± 0,3 20,1 ±1,2 12,0 ± 0,7

8-10 7-9 2,35 ±0,3 22,5 ± 1,5 11,65 ±0,7

11-15 10-14 3,15 ±0,82 ** 19,4 ±3,1 12,5 ± 1,7

*-Р<0,001;**-Р<0,01

Таким образом, путем изучения вариабельности концентрации гормонов в крови животных, возможно произвести качественный отбор доноров с прогнозированием результатов полиовуляции и числа извлекаемых эмбрионов.

.5, Синхронизация охоты у коров-доноров и телок-реципиентов

мясных пород

Путем синхронизации охоты у маточного поголовья крупного рогатого скота достигается стимуляция воспроизводительных функций у животных и планирование работ по трансплантации эмбрионов.

В экспериментах по изучению эффективности однократной и двукратной обработке подопытных животных с целью синхронизации охоты использовали эстуфалан -И ашшрост в суммарной дозе 500 мкг по клопросгенолу.

Наиболее высокие показатели по синхронизации охоты получены при дробном (утро-вечер) введении животным анипроста. Более 94% коров и телок проявили признаки эструса, причем из них 75,4% пришли в охоту через 48 часов после обработки препаратом (табл.14).

Таблица 14

Сннхропизяция охоты у доноров с помощью однократной обработки простагландином при одномоментном и дробном введении препарата

Показатель Простагландии н режим обработки

эсту< >алан анипрост

однократно дважды в день однократно дважлы в день

Обработано доноров 38 51 57 73

Пришли в охоту, всего 24 40 38 69

Процент 63,2 ± 7,8 78,4 ± 5,7 66,7 ± 6,2 94,5 ±2,7

В том числе проявили признаки охоты через:

48 часов, % 58,3 ± 10,1 75,0 ± 6,8 60,5 ± 7,9 75,4 ± 5,2

72 часа, % 33,3 ± 9,6 20,0 ± 3,4 31,6 ±7,5 23,2 ± 5,1

96 часов, % 8,4 ± 5,6 5,0 ± 3,4 7,9 ± 4,4 1,4 ± 1,4

При однократной обработке животных эстуфаланом 63,2% коров и телок от числа обработанных проявили признаки >т>гы. из них 58,3% проявили зструс через 48 часов посте введения препарата. Около 40% животных не реагировали признаками охоты и не могли быть использованы для дальнейшей работы. Разница по резулькпам обработки животных однократно и двукратно препаратом эстуфалан составляет 15,2% и препаратом анипросг - 27,8%. Эта разница достоверна (Р<0,005). Увеличение числа животных, проявивших признаки охоты после двукратной обработки простагландн-нами, достигается за счет регрессии большего числа желтых тел яичников на разных стадиях их развития.

Не установлено достоверной разницы в результатах синхронизации охоты у коров и телок с помощью препаратов эстуфалан и анипросг при двукратном их введении.

6. Результаты стимуляция полновуляцнн у коров-доноров разными

гонадотролннамн

Гормональное вызывание полиовуляции у коров и телок-доноров является одним из сложных, дорогостоящих и непредсказуемых этапов технологии трансплантации эмбрионов. До последнего времени не изучена в полной мере степень воздействия сывороточных и гипофизгрных гонад отрОпинов на организм животных при и иду-

цировании полиовуляции, не определены наиболее оптимальные и экономически оправданные схемы обработок доноров, их влияние на качество извлекаемых эмбрионов.

Были проведены исследования по изучению возможностей повышения эффективности индуцирования полиовуляции у коров и телок-доноров мясных пород с применением сывороточных и гипофизарных гонадотропинов.

По результатам исследований установлено, что число дрноров с полиовуляцией находилось в пределах от 59,4% до 65,4%, т.е. было практически одинаковым, что указывает на равнозначность активности препаратов фоллигона, премагона и СЖК (табл.15).

Таблица 15

Результаты полиовуляции и эмбриопродукция у доноров при использовании сывороточных гонадотропинов

Показатель Гоиадотропнны

фоллигон премагон СЖК

Обработано коров 41 V. 26

Число доноров с полиовуляцией 26 19 17

Процент от числа обработанных 63,4 ± 7,5 59,4 £ 8,7 65,4 ± 9,3

Число овуляций на донора 8,0 ±0,37 6,0 ±0,32 6,0 ±0,35

Получено эмбрионов и яйцеклеток на донора .5,4 ±0,25 5,2 ±0,29 5,8 £0,34

Из них нормальных 3,3 ± 0,28 2,9 ±0,15 3,2 ±0,13

Процент от общего числа зародышей 61,1 55,7 55,1

Оплодотворилось яйцеклеток 83,3 ±5,8 88,4 ± 5,7 82,7 ± 7,4

В группе животных, обработанных фоллигоном, наблюдается тенденция увеличения выхода нормальных эмбрионов (61,1%) в среднем на донора.

По остальным труппам подопытных животных этот показатель не превышал 55,7%.

Использование гипофизарных гонадотропинов для индуцирования полиовуляции у коров и телок позволило получить более высокие показатели по числу овуляций и выходу нормальных эмбрионов на донора (табл.16).

/

Таблица 16

Результаты индуцирования полновуляцип у доноров с помощью гнпофизарных гонадотропиноэ

Показатель Гипофизарные гонадотропины

фоллнтропин ФСГ супер-ФСГ

Обработано животных 29 54 43

Число доноров с полиовуляцией 20 40 32

Процент 68,9 ± 8,6 74,0 ± 5,9 74,4 ± 6,6

Овуляций на донора 8,0 ±0,4 9,0 ± 0,3 11,0 ±0,5

Получено эмбрионов и яйцеклеток 7,0 ±0,4 6,8 ± 0,3 7,0 ±0,3 .

Из них нормальных эмбрионов 4,9 ± 0,27 5,4 ± 0,22 5,2 ±0,24

Процент 70,0 79,4 74,3

Оплодотворяемость яйцеклеток (%) 84,3 ±6,7 92,6 ±3,5 82,8 ± 5,3

От 68,9% до 74,4% животных реагировали полиовуляцией при среднем числе овуляций на донора от 8 до 11. В группе доноров, обработанных ФСГ, выход качественных эмбрионов составил 79,4%. Аналогичные показатели были получены у животных, обработанных отечественным препаратом супер-ФСГ. Поли овуляторная реакция яичников наблюдалась у 74,4% животных и средний выход морфологически нормальных эмбрионов на донора составил 5,2 или 74,3% от числа извлеченных. Оп-лодотворяемость яйцеклеток у подопытных животных колебалась от 82,8 до 92,6%.

В ходе экспериментов по индуцированию полиовуляции усл. овлены оптимальные дозы для препаратов фоллигон и ФСГ, которые составили 2500 ИЕ и 32 мг на обработку одного донора. При этом получены достаточно высокие результаты по индуцированию полиовуляции (65,0 и 69,6%) и выходу нормальных эмбрионов (59,3 и 64,1%). Экономия дорогостоящих препаратов составляет от 17,0 до 36,0%.

7. Факторы, влияющие на эффективность гормонального индуцирования полновуляцнн, оплодотворяемость яйцеклеток н качество эмбрионов

В эксперименте по гормональному вызыванию полиовуляции у доноров мясных пород были получены более высокие показатели по числу овуляций и качеству

эмбрионов при отгонно-пастбищном содержании животных. Более 75% доноров реагировали полиовуляцией и выход качественных эмбрионов достигал 78,5%, при общей оплодотворяемости яйцеклеток равной 87,7%.

В то же время, при привязном содержании не более 60,9% животных реагировали полиовуляцией на введение гонадотропных препаратов. При среднем числе овуляций на донора 6:5, выход качественных эмбрионов не превышал 3,8 или 64,4% от числа извлеченных. Общая оплодотворяемость яйцеклеток была на 16,5% ниже, чем у доноров при отгонно-пастбищном содержании. При содержании доноров в боксах беспривязно, показатели по индуцированию полиовуляции на 17% и по числу эмбрионов на 34% были выше, чем у животных на привязи.

Нами были изучены возможности повышения результатов индуцирования полиовуляции у коров и телок-доноров биологически активными веществами и гормональными препаратами.

Высокие показатели по индуцированию полиовуляции с помощью гонадотро-пинов' получены при обработке подопытных животных комплексом витаминов (тетравит), прсмиксом П 60-3 и белогином. При максимальном числе овуляций (8,9) в среднем на донора получено 4,8 морфологически нормальных эмбрионов, что составляет 68,6% от числа извлеченных (табл.17).

Таблица 17

Влияние биологически активных вещества на результаты стимуляции суперовуляции у коров герефоряской породы

Показатель Группы

тетравит (контроль) тетравит + белотнн тетравит + премикс тетравит + белотин + премикс

Число коров 39 45 42 29

Реагировали суперовуляцией 23 29 27 22

Процент от числа обработанных 59,0 ± 7,9 64,4 ± 7,1 64,3 ± 7,4 75,9 ±7,9

Овуляций на донора 6,7 ±0,3« 6,8 ±0,3 7,0 ±0,3 8,9 ±0,2*

Получено зародышей 6,7 ±0,3 6,3 ±0,2 6,8 ± 0,3 7,0 ±0,4

Из них нормальных эмбрионов 3,1 ±0,2 3,4 ±0,2 3,8 ±0,3 4,8 ±0,2

Процент от числа зародышей 46,3*» 54,0 55,9 68,6**

* -Р<0,01; **-Р<0,001

Значительно ниже эти показатели были в контрольной группе животных, обра/

ботку которых проводили только "тетравитом". При среднем числе овуляций 6,7 на донора получено 46,3% нормальных эмбрионов, что является низким показателем. При раздельном применении премикса и белотина выход нормальных эмбрионов у доноров был несколько выше (54,0-55,9%).

Таким образом, комплексная обработка подопытных животных витаминами (тетравит) и введение в рацион премикса П60-3 и белковосодержащего препарата "белотин" позволило повысить результаты гормонального индуцирования полиовуляции у доноров на 16,9%, число овуляций - на 28,1 % и выход качественных эмбрионов на 22:3%.

Совместное содержание коров матерей и телят на подсосе является мощным фактором, влияющим на результаты индуцирования полиовуляции и выход качественных эмбрионов у доноров.

Нами была изучена степень влияния регламентированного содержания коров и телят на подсосе на результаты полиовуляции и качественный состав извлекаемых эмбрионов.

Высокие показатели по индуцированию полиовуляции получены в группе коров, которые содержались без телят в период гормональных обработок и осеменения доноров. Более 83,3% животных реагировали полиовуляцией и выход качественных эмбрионов достигал 70,6 (табл.18). Общая оплодотворяемость яйцеклеток составила 82,4%. В группе коров-матерей, постоянно находившихся с телятами на подсосе (контроль), среднее число овуляций на донора не превышало 6,2, а выход качественных эмбрионов едва достигал 2,6, что составило 52% от числа извлеченных.

Как один из вариантов преодоления отрицательного воздействия подсоса на результаты вызывания полиовуляции у доноров был применен кратковременный отьем телят от матерей на 24 и 48 часов перед началом гормональных обработок и осеменением коров в индуцированную охоту, в обоих случаях были получены идентичные показатели по числу' овуляций и качественных эмбрионов, в среднем на донора получено от 6,9 до 7.0 овуляций и выход морфологически нормальных эмбрионов достигал 68,4% от числа извлеченных, при равнозначной оплодотворяемости яйцеклеток. По-видимому, даже кратковременный отьем телят от матерей на 24 или 48 часов стабилизирует содержание ЛГ в крови коров-доноров и ограничивает действие гормонов, выделяющихся при сосании вымени.

Таблица 18

Результаты индуцирования полиовуляции у доноров при регламентированном содержания коров и телят на подсосе

Содержание коров

Показатель с телятами без ' Огьем (час.)

(контроль) телят 24 48

Число коров 31 24 19 20

Реагировали суперовуляцией 19 20 14 14

Процент 61,5 ±8,7 83,3» ±8,1 73,7 ± 10,1 70,0 ± 10,2

Число овуляций на донора 6,2 ±0,3 7,4 ±0,4 6,9 ± 0,5 7,0 ±0,5

Получено эмбрионов на донора 5,0 ±0,2 6,8 ±0,4 6,0 ±0,4 5,7 ± 0,3

В т. ч. нормальных-, 2,6*» ±0,29 4,8** ± 0,29 4,1 ± 0,28 3,9 ±0,2

Процент 52,0 70,6 68,3 68,4

Оплодотворяемое», яйцеклеток 70,0 82,4 86,6 86,0

* -Р<0,01; ♦♦ -Р<0,001

Однако при отъеме телят от матерей на 48 часов возникают проблемы с сохранностью молодняка. Более 70% телят переваливают расстройством желудочно-кишечного тракта. Поэтому допустимо проводить отъем телят от матерей не более суток, что позволяет получить высокие результаты по индуцированию полиовуляции у доноров и сохранить родившееся потомство.

8. Получение н оценка качества эмбрионов

Нехирургический метод извлечения эмбрионов должен быть безопасным для здоровья животных, простым в исполнении н эффективным по вымыванию зародышей.

Учитывая повышенную регидность матки у мясного скота и возможное перераспределение зародышей в ней, нами было изучено влияние расположения прибора роге на результаты извлечения эмбрионов.

Высокие результаты по извлечению 7-дневных эмбрионов были получены при расположении фиксационного пузырька в середине рога. Извлечено 91% зародышей от числа овуляций, из них 71,4% оказались морфологически нормальными, при расположении фиксационного пузырька катетера в начале рога показатель извлечения

эмбрионов снижался на 10%, что , по-видимому, связано с определенной трудностью.

/

вымывания эмбрионов, расположенных в верхней части рога матки.

При вымывании 8-9 дневных эмбрионов и расположении фиксационного пузырька в середине рога, получено 71,2% зародышей от числа овуляций, что на 18,8% меньше, чем при расположении пузырька катетера у основания рога. Вероятно, это связано с тем, что часть эмбрионов, при расположении фиксационного пузырька при-, бора в середине рога, не попадают в зону их вымывания, что приводит к недополучению зародышей.

Установлено, что однократное промывание рогов матки обеспечивает 93,8% извлечений зародышей от числа овуляций, при повторном промывании рогов матки этот показатель увеличивался до 97,3%, т.е. практически оставался на одном уровне при одинаковом выходе нормальных эмбрионов. Дальнейшее увеличение кратности промывания рогов матки не повышает эффективность извлечения эмбрионов у доноров (97,1%). По-видимому, процент извлекаемости в большей степени зависит от квалификации оператора, чем от кратности промывания матки. Повторное промывание рогов матки необходимо лишь в том случае, когда число полученных эмбрионов и яйцеклеток не соответствует общему числу овуляций.

Одновременно с этим было определено, что для промывания одного рога матки донора герефордской породы вполне достаточно 250 мл промывной жидкости, что обеспечивает высокие результаты извлечения эмбрионов (95,9%).

Поиск и оценка качества эмбрионов являются важными звеньями в технологии трансплантации эмбрионов. Нами были проведены сравнительные исследования по эффективности поиска эмбрионов по общепринятой методике (контроль) с использованием Канадского фильтра и специального устройства.

В результате проведенных исследований установлено, что общепринятая методика обеспечивает обнаружение 85,5% эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток от общего числа овуляций. При этом общие затраты времени на поиск эмбрионов от одного донора в среднем составляет -48,6 минут. При использовании Канадского фильтра затраты времени на поиск эмбрионов сокращаются до 20,9 минут, но увеличиваются потери эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток на 9,1%. Это происходит в связи с тем что через Канадский фильтр пропускается вся масса промывной жидкости, чс отделяя от нее комочки слизи и другие включения. Поэтому дальнейший поиск эмбрионов под микроскопом затруднен из-за наличия этих примесей. Использование фильтра конструкции ВИЖа позволяет извлекать из промывной жидкости до 94,3% эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток и экономить время на этой операции на 36,2 минут по сравнению с общепринятой методикой.

Высокие результаты по обнаружению эмбрионов и неоплодотворекных яйцеклеток с использованием фильтра (ВИЖ) получены в силу конструктивных особенностей данного устройства. Наличие двух фильтров с ячейками 300 мк и 150 мк позволяют отделять комочки слизи и другие включения от эмбрионов, что ускоряет их дальнейший поиск. Кроме того, общий объём промывной жидкости, подлежащий осмотру в сборной чашке фильтра конструкции ВИЖа, не превышает 2 мл, что также способствует ускорению поиска эмбрионов под микроскопом.

Отмечены некоторые особенности плодовитости и качественного состава эмбрионов у доноров различных возрастных групп. Установлено, что наиболее высокие показатели по выходу качественных эмбрионов были получены у доноров старшего возраста. Из 338 извлеченных 256 или 75,5% эмбрионов были морфологически нормальными. Число дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток не превышало 11,8 и 12,5% соответственно, средний выход нормальных эмбрионов на корову-донора составил 5,1.

- У коров первого отела число нормальных эмбрионов не превышает 55,6%, а число дегенерированных эмбрионов возрастало до 25,2%. У телок-доноров показатель по выходу качественных эмбрионов снижается до 49,5%, а число дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток увеличивалось до 24,2 и 26,3%. Выход нормальных эмбрионов в среднем на телку-донора не превышал 3,2, что на 1,9 эмбриона меньше по сравнению с коровами старшего возраста. Оплодотворяемость яйцеклеток у коров и первотелок, телок-доноров составила 87,3; 80,8 и 73,7% соответственно.

Качественный анализ эмбрионов герефордской породы показал, что семидневные зародыши находятся на разных стадиях развития, до 74% из них составляют мо-рулы. У молочного скота этот показатель не превышает 36,0%. У мясного скота на стадии ранней морулы низкий процент (37,5%) эмбрионов хорошего и отличного качества (Р<0,05) н относительно высокое число (62,5%) удовлетворительных зароды-' шей (Р<0,01). Эмбрионы на стадии ранней и поздней бластоциты более высокого качества и число удовлетворительных зародышей минимальное.

8.1. Замораживание, хранение и оттаивание эмбрионов

Криоконсервирование эмбрионов крупного рогатого скота обеспечивает проведение плановых работ по эмбриопересадкам в наиболее оптимальное время, позволя-

ет транспортировать зародыши на дальние расстояния, производить обмен генофондом и сохранять их длительное время при низких температурах. '

Установлено, что четырехступенчатое насыщение эмбрионов 1,4М раствором глицерина является оптимальным, после оттаивания 82,7% эмбрионов были морфологически нормальными. Одноступенчатое насыщение зародышей 1,4М раствором глицерина снижало их качество после оттаивания на 12,3%.

Более высокие показатели были получены при использовании однократного насыщения эмбрионов этиленгликолем в 1,5М концентрации и быстрого метода замораживания. После отганвания 75,8% эмбрионов были морфологически нормальными, и приживляемость их составила 53,7%. использование белее медленного 2-х этапного режима замораживания снижало морфологические качества эмбрионов после оттаивания на 18,4% н приживляемость на 13,3% (Р<0,01).

Были проведены поисковые исследования по замораживанию эмбрионов мясных пород методой "витрификации".

Установлено, что при использовании смеси крнопротекторов, состоящей из 2,8М раствора глицерина и 2,8М раствора 1,2-пропандиола при 4-х ступенчатом насыщении эмбрионов, позволяет сохранить морфологические качества у 70,8% эмбрионов. Одноступенчатое насыщение зародышей аналогичной смесью криопротек-торов снижает сохранность их на 18,4%.

В последующих экспериментах были сделаны попытки повысить жизнеспособность эмбрионов путем включения в состав Среды сахарозы, внедрение которой раствор уменьшает или предотвращает соматический шок прн удалении криопротектора. Использование сахарозы при замораживании позволило повысить сохранность эмбрионов до 71,4% и приживляемость до 56,7%. Оттаивание эмбрионов без сахарозы незначительно снижает их морфологические качества (4,7), но приживляемость зародышей не превышала 44,4%, что на 12,3% ниже, чем при использовании сахарозы.

8.2. Переездка свежеполученных и замороженно-оттаянных эмбрионов с целью получения телят-одннцов и двоен

Технологические аспекты нехирургического метода пересадки эмбрионов позволяют проводить пересадку как свежеполученных, так и замороженно-отгаянных эмбрионов в рог матки с использованием специальных приборов, предназначенных для этих целей, результативность эмбриопересадок зависит от многих факторов, степень изученности которых недостаточна.

На маточном поголовье крупного рогатого скота были проведены исследования по изучению эффективности пересадок свежеполученных и замороженно-оттаянных эмбрионов с целью получения телят - одинцов и двоен. По результатам опытов установлено, что прижйвляемость свежеполученных и замороженно-оттаянных эмбрионов была практически одинаковой. От пересадки свежеполученных и замороженно-оотаянных эмбрионов 50,5 и 44,8% реципиентов оказались стельными.

Было изучено влияние качества, стадии развития и места пересадки эмбрионов на их прижйвляемость. Нехирургическая пересадка хороших и отличных эмбрионов позволила получить от 46,4 до 57,8% стельности у реципиентов, причем более высокие показатели по приживляемости получены при пересадке бластощгт (57,8%).

При пересадке эмбрионов в левый рог матки их прижйвляемость составила 46,1%, при правосторннем расположении зародышей стельность рециппешов была равна 48,6%. По-видимому, на приживляемость эмбрионов в большей степени оказывают влияние другие факторы, в том числе качество зародышей, активность желтого тела яичников, общее состояние животных-реципиентов, уровень проведения опера-, цин и др.

Основываясь на различиях плодовитости животных разных пород, нами проведены исследования по изучению приживляемости эмбрионов при межпородной пересадке. В эксперименте семидневные эмбрионы гсрефордской породы были пересажены телкам-реципиентам молочного и мясного .направления. Из 179 телок черно-пестрой породы, которым были пересажены мясные эмбрионы, 49,2% оказались стельными.

Стельность реципиентов герефордской породы после пересадки им эмбрионов аналогичной породы составила 50,9%. в обоих случаях стельность реципиентов, число абортов и полученных живых телят были практически одинаковыми.

Из результатов проведенных исследований следует, что пересадка одного эмбриона обеспечивает в среднем 48,2% стельности реципиентов (табл. 19).

Пересадка одного эмбриона ранее осемененным животным увеличивает этот показатель до 64,7%.. При пересадке двух эмбрионов в оба рога матки стельность реципиентов равна 50,0%, причем общее число абортов достигает 11,1%, что в 2-3 раза больше, чем при пересадке или подсадке одного эмбриона животным-реципиентам. Подсадка одного эмбриона обеспечивает 57,1% двойневых отелов, а подсадка двух -40%.

Таблица 19

Результаты эмбриопересадок с целью получения телят-одннцов и двоен

Псрссадка

Показатель подсадка одного двух

одного эмбриона осе- эмбрионов

эмбриона мененному ре- в оба рога

ципиенту

Число реципиентов 112 68 54

Пересажено эмбрионов 112 68 108

Стельных реципиентов 54 44 27

Процент стельности 48,2* ±4,7 64,7* ± 5,5 50.0 ± 6,8

Число абортов, всего 2 2 2

в т.ч. двоиневых - 2 2

Отелилось реципиентов, всего 52 42 25

в т.ч. двойневых - 24 10

Процент олинцовых отелов 96,3 ± 2,5 42,9 ± 76 60,0 ± 9,8

- "- двойневых - " - - 57,1 ±7,6 40,0 ± 9,8

Получено телят 52 66 38

9. Предотвращение бактериальной контаминации эмбрионов при получении и пересадке

Имеются сообщения о возможности деконтаминации эмбрионов от патогенной и условнопатогенной микрофлоры, что позволяет получить достаточное количество качественных зародышей и повысить их сопротивляемость, при этом используются ряд санирующих препаратов различной активности и спектра действия, в наших исследованиях при извлечении и подготовке эмбрионов к пересадке были I .пользованы : спермасан ППК в дозе 200 ЕД/см3, гентамицин - 12 мкг/ см3 в сочетании с пенициллином 100 ЕД/ см3, ГАМП - 100 мкг/ см3.

В результате проведенных исследований установлено, что введение санирующих препаратов в Среды, предназначенные для вымывания эмбрионов, способствует получению и сохранению достаточного количества морфологически нормальных эмбрионов. Более высокие показатели по выходу полноценных эмбрионов были получены при использовании в средах ГАМП (70,9%) и гентамицина в сочетании с пенициллином (72,5%). Несколько ниже этот показатель был при использовании спермасана ППК. Около 61% эмбрионов от числа извлеченных были морфолгическн нормальными. Число дегенерироианных эмбрионов достигало 38,1%. В контрольной группе, где

не использовались санирующие препараты, выход качественных эмбрионов не превышал 48,7%, а число дегенерированных зародышей было равно 51,3%.

Нельзя не исключить отрицательного влияния патогенной и условнопатогенной микрофлоры на жизнеспособность и приживляемость эмбрионов у реципиентов, так как пересадку их проводят в лютеальиую фазу полового цикла, когда иммунобиологическая резистентность животных заметно понижена.

Приживляемость эмбрионов, которые были непосредственно перед пересадкой деконтаминироваиы от микрофлоры санирующими средствами, спермасан ППК, ген-тамицин в сочетании с пенициллином, ГАМГТ составила, соответственно, 41,5, 56,2 % и 53,2%, тогда как в контроле, без использования препаратов, лишь 38,9% (табл. 20).

Таблица 20

Влияине санирующих препаратов на результаты эмбриопересодок

• Препараты

спермасан гентамицнн + пенициллин ГАМП контроль

Число реципиентов 135 121 109 95

Пересажено эмбрионов 135 125 109 98

Стельных реципиентов 56 68 , 58 37

Процент стельности 41,5* ±4,2 56,2* ±4,5 53,2* ±4,7 38,9 ± 5,0

♦ - Р<0,05

10. Усовершенствование мнкроманнпуляцнй с эмбрионами мясных пород

Трансплантация эмбрионов развивается достаточно быстрыми темпами и в сочетании с мнкромашпуляцней по рассечению зародышей может быть дополнительным резервом в повышении эффективности воспроизводства сельскохозяйственных животных.

Современные методики микроманипуляций с эмбрионами сельскохозяйственных животных весьма сложны и для этих целей необходимо специальное оборудование и микроинструменты.

Нами была сделана попытка по усовершенствованию и упрощению методики рассечения эмбрионов на половинки в условиях, приближенных к производству. Усовершенствованная нами методика обеспечивает качественное рассечение эмбриона на

две равнозначные половинки без использования точного, но дорогостоящего оборудования. Проведение микроманипуляции с эмбрионами возможно в условиях обычного пункта по искусственному осеменению крупного рогатого скота на фермах.

Качество рассечения эмбрионов было проверено в сравнительных исследованиях по изучению прнживляемости половинок и целых эмбрионов (табл. 21).

Таблица 21

Прнживляемость половинок и целых эмбрионов -

Показатель Эмбрионы

целые половинки

Число реципиентов 123 76

Стельных реципиентов 57 31

Процент стельности 46,3 ± 4,5 40,8 ± 5,6

Из полученных данных следует, что прнживляемость половинок (40,8%) и целых (46,3%) эмбрионов практически одинаковая. Следовательно, предлагаемая методика рассечения эмбрионов на две половинки не нарушает в значительной степени структуру эмбриона и не снижает их прижинляемости.

ВЫВОДЫ

1. Оптимальным вариантом содержания мясного скота является отгонно-пастбищный и вне пастбищного периода - в помещениях облегченного типа в боксах беспривязно. Это позволяет снизить число трудных отелов до 6,7% и повысить опло-дотворяемость животных от 1-ого осеменения до 67,4%.

2. Включение в рацион коров белковосодержащего препарата "белотин", пре-микса П60-3 и тетравита способствует сокращению сервис-периода до 69 дней, повышает оплодогворенность коров от 1-ого осеменения до 67,1% и результаты гормонального индуцирования поли'овуляции до 75,9%.

3. Использование УВЧ позволяет сократить продолжительность инволюции матки на 9 дней, ускорить приход животного в охоту на 18 дней и увеличтт. общую оплодотворяемость маток на 14,8%.

Дробное введение простагландина обеспечивает синхронизацию охоты у 94,5% животных за счет регрессии желтых тел на различных стадиях их развития.

В анэстралъный период наиболее эффективное стимулирование половой функции животных достигается путем применения 3 мг норгестамета в сочетании с 5 мг эстрадиолвалерата.

4. Интенсивное выращивание телок способствует их раннему половому и хозяйственному созреванию (15-17 мес.), высокой оплодотворяемости (89,8%) и получению жизнеспособного потомства (98,4%). Высокие показатели оплодотворяемости коров (79,6 - 86,2%) можно получить при осеменении их в период от 31 до 60 дней после отела.

5. Сезон рождения телок оказывает определенное влияние на возраст отела и воспроизводительные возможности коров. Животные, рожденные осенью, имеют минимальный возраст отела - 921,5 дней, сервис-период 59, и стельность их достигает 85,4%. Оплодотворясмость коров и телок зависит от условий их осеменения. Разработанные варианты стационарного и лешего пунктов способствует повышению оплодотворяемости животных до 92,7%.

6. Установлена прямая зависимость между сезоном года, продолжительностью светового дня и результатами индуцирования множественной овуляции. Более высокие показатели по выходу нормальных эмбрионов поручены осенью (80,6%).

7. Возраст и живая масса мясных животных являются определяющими факторами результативности индуцирования полиовуляции у коров-доноров. От 77,8 до 81,8% корой с живой массой 501-600 кг и возрастом от 2,5 до 9 лег, pcanipotia.ni полиовуляцией, и выход качественных эмбрионов составил 76,1%.

8. Использование гипофизариых гонадотропинов по сравнению с сывороточными увеличивает число доноров с полиовуляцией на 15% и выход качественных эмбрионов на 24,3%. Усовершенствованная методика нехирургического извлечения эмбрионов позволяет повысить ее эффективность до 74,6%.

9. Установлена определенная закономерность в развитии эмбрионов мясных пород. Из числа семидневных эмбрионов до 74% из них составляют морулы. Ранние и поздние бластоциты обладают более высокой устойчивостью к перепад)' низких температур, чем морулы.

10. Перспективным методом замораживания эмбрионов является метод "витрификации", не требующий дорогостоящего оборудования и энсргоресурсов. После оттаивания более 70% эмбрионов сохраняют свои морфологические качества. Включение в среду сахарозы при замораживании и оттаивании эмбрионов позволяет увеличить их сохранность до 71,4% и приживлясмость до 56,7%.

11. Межпородная пересадка эмбрионов позволяет ускорить воспроизводство менее распространенных пород крупного рогатого скота.

• 12. Наиболее оптимальный вариант получения двойневых отелов'является подсадка эмбриона ранее осемененным животным. Это позволяет получить 57% двойневых отелов.

. 13. Деконтаминация эмбрионов от патогенной и условнопатогенной микрофлоры повышает выход нормальных эмбрионов до 72,5% и их приживляемость до 56,2%.

14. Усовершенствованная методика микроманипуляции с эмбрионами позволяет получить равнозначную приживляемость половинок и целых зародышей.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Разработанные варианты воспроизводства мясного скота в пастбищный и стойловый периоды рекомендуются для использования в регионах средней России.

2. Для активизации воспроизводительных функций животных мясных пород необходимо дополнительно вводить в рацион белковосодержащие ("Белотин") и биологически активные вещества ("Премикс П - 60 -3 "Тетравит") в сочетании с простаг-ландинами и гормональными препаратами.

3. Для замораживания эмбрионов коров мясных пород в условиях ферм предлагается простой и менее энергоемкий метод "витрификации", который обеспечивает сохранение их жизнеспособности после оттаивания до 70% и с приживляемостыо после пересадки до 50%.

4. Предлагается разработанный вариант межпородной пересадки эмбрионов мясных пород животным другого направления для ускорения воспроизводства менее распространенных и более ценных пород животных, а также усовершенствованной методики разделения эмбрионов, повышающей эффективность использования генетически ценного материала в 1,5 раза.

Список опубликованных работ

1. Хидькевич С.Н., Самоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Расчет эффективности методов селекции в'стаде с помощью программного комплекса // Достижения науки и техники. - 1993. - № 2. - С.20-21.

2. Хилькевич С.Н., Самоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Синхронизация половых циклов коров в программе трансплантации эмбрионов. // Зоотехния. - 1993. -№4. - С.24-25.

3.Душкин В. А., Мочкаев В.И., Самоделкин А.Г. Опыт борьбы с яловостью коров. // Зоотехния. - 1994. - № 8. - С.30-32.

4. Лопарев П.И., Самоделкин А.Г. Прогнозирование при отборе коров реципиентов для успешной имплантации эмбрионов. //Сборник научных материалов. Воронеж. - 1994. - С.168-170.

5. Хилькевнч С.Н., Самоделкин А.Г. Тепловой стресс у коров доноров и его влияние на суперовуляторную реакцию. // Сборник научных материалов. Воронеж. - 1994. - С.200.

6. Хилькевич С.Н., Самоделкин А.Г. Влияние синтетического аналога гона-долиберина на гормональные профили суперовулированных коров . // Сборник научных материалов. Воронеж. - 1994. - С.201.

7. Самоделкин А.И., Балковой И.И. УВЧ - излучение - экологически чистый метод лечения органов воспроизводства животных . // Сборник научных материалов. Воронеж. - 1994. - С.237-238.

8. Хилькевич С.Н., Самоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Гормональный профиль у коров при суперовуляцин. II Доклады российской академии сельскохозяйственных наук. - 1995. - № 3. - С. 24-28.

9. Сергеев Н.И., Лебедев В.И., Самоделкин А.Г. Эффективность применения метода трансплантации эмбрионов в животноводстве. // Сельскохозяйственная наука Северо-Востока Европейской части России. Сборник научных трудов, г. Киров. -1995. - Т. 111.-С. 65-69.

Ю.Балковой И.И. , Самоделкин А.Г., Сочнев В.В., Иноземцев В.П. Влияние электромагнитных волн УВЧ на организм и воспроизводительную функцию коров. // Ветеринария. - 1995. - Jfe 12. - С. 36-39.

И.Самоделкин А.Г., Калягин А.А., Гавриков A.M. Трансплантация эмбрионов в мясном скотоводстве. // Молочное и мясное скотоводство. - 1996. - № 67. - С.35-39.

12Лрахов Л.П., Самоделкин А.Г., Тяпугин Е.А. Герефорды агрофирмы "Толмачево". // Зоотехния. - 1996. -№ 4. - С. 9-11.

13.Самоделкин А.Г., Гавриков A.M., Сергеев Н.И. Трансплантация эмбрионов в мясном скотоводстве. // Монография. - М.: АОЗТ "Зоосалон". - 1996. -6,25усл.печ.л. . .. " ^

И.Самоделкин А.Г., Сочнев В.В.Душкин В. А. Ветеринарное обеспечение биотехнологии воспроизводства крупного рогатого скота на примере агропромышленного комплекса,"Толмачево". // Сборник материалов научно-производственной, конференции. -.Волгоград. - 1996. - С.62-6.

15.Самоделкнн А.Г. Создание биоцентра по воспроизводству скота в агрофирме "Толмачево" // Достижения науки и передовой практики. Сборник научных материалов . Нижний Новгород. - 1996. - С.24.

16. Гавриков A.M., Самоделкнн А.Г., Дряглов В.П. Влияние содержания и уровня кормления мясного скота на индуцирование полновуляции. // Молочное и мясное скотоводство. - 1997. - № 4. - С. 32-35.

17.Самоделкин А.Г., Дряглов В.П., Гавриков A.M. Усовершенствование режимов замораживания эмбрионов мясных пород. // Молочное и мясное скотоводство. - 1997. -№ 5. - С. 6-8.

18.Самоделкин А.Г. Биотехнология в мясном скотоводстве Нижегородчины. Н Зоотехния. - 1997. - №9. -С. 25-28.

19.Гавриков A.M., Самоделкин А.Г., Калягин A.A. Сезонность воспроизводительной функции у мясных коров. // Зоотехния. - 1997. - № 2. - С.25-26.

20.Сергеев Н.И., Лепнова H.A., Ефремова М.Н., Смыслова Н.И., Самоделкин А.Г. Гибель замороженно-отгаянных и культивированных вне организма эмбрионов после пересадки.// Зоотехния. - 1996. - № 12. - С.23-25.

21.Тяпугин Е.А., Самоделкин А.Г., Калягин A.A., Гавриков A.M. Приживляемость замороженно-оттаянных эмбрионов у телок с индуцированной охотой . // Молочное и мясное скотоводство. - 1996. - №4. - С.24-27-.

22.Самоделкин А.Г., Гавриков A.M. Биотехнологические методы борьбы с бесплодием мясного скота,//Ветеринария. - 1997. 11.-С. 32-35.

23.Самоделкин А.Г. Герефорды агрофирмы "Толмачево", экологическая биотехнология их содержания и производства. //Монография. - М.: "Идеал". - 1998. - 10,4 усл.печ.л.

24.Самоделкин А.Г., Гавриков A.M., Сергеев Н.И., Дряглов В.П., Калягин A.A. Методические рекомендации получение двойновостн у мясного скота. //Дубровицы. ВИЖ. - 1998. - С. 1-26.

25.Самоделкин А.Г., Куклин А.Д., Снсягин П.Н. Методические рекомендации по контролю за состоянием обмена веществ и воспроизводительной функции коров. - Нижний Новгород..- 1997. - 20 с.

Текст научной работыДиссертация по биологии, доктора биологических наук, Самоделкин, Александр Геннадьевич, Дубровицы

и -з/яр-у

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ

ЖИВОТНОВОДСТВА (ВИЖ)

На правах рукописи

САМОДЕЛКИН Александр Геннадьевич

ИНТЕНСИФИКАЦИЯ ВОСПРОИЗВОДСТВА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА МЯСНЫХ ПОРОД НА ОСНОВЕ БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ

МЕТОДОВ

03.00. 13. - физиология человек/и животных

Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук

С

Научный консультант-

Лауреат премии Совета Министров СССР, заслуженный деятель науки Российской Федерации, доктор биологических наук, профессор, академик Академии естественных наук Республики Казахстан

СЕРГЕЕВ Н.И.

Дубровицы - Московская область 1998 г.

Содержание

1. ВВЕДЕНИЕ............................................................................................... 4

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ .................................. 12

3. ЭКОНОМИЧЕСКИЕ И ЗООВЕТЕРИНАРНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ИНТЕНСИФИКАЦИИ ВОСПРОИЗВОДСТВА В МЯСНОМ СКОТОВОДСТВЕ.................................................................................... 16

3.1 Влияние условий содержания и кормления на воспроизводительные функции коров мясных пород........................................... 38

3.2 Стимуляция половой функции у коров и телок и профилактика

57

послеотельных осложнении.............................................................

3.3 Сроки половозрелости и оплодотворения мясных телок...................................................................................................... 68

3.4 Кратность и сроки осеменения коров после отела....................... 69

3.5 Влияние некоторых факторов на воспроизводительные возможности коров................................................................................ 71

Заключение....................................................................................... 73

4. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ГОРМОНАЛЬНОЙ СИНХРОНИЗАЦИИ ОХОТЫ И СТИМУЛЯЦИИ ОВУЛЯЦИИ У КОРОВ-ДОНОРОВ И ТЕЛОК РЕЦИПИЕНТОВ МЯСНЫХ ПОРОД................................................................................... 77

4.1. Отбор коров-доноров и быков-производителей в программе

юо

трансплантации эмбрионов у мясного скота.................................

4.2. Синхронизация охоты у коров-доноров и телок-реципиентов

110

мясных пород....................................................................................

4.3. Результаты стимуляции полиовуляции у коров-доноров разны-

113

ми гонадотропинами........................................................................

4.4. Факторы, влияющие на эффективность гормонального стимулирования полиовуляции, оплодотворяемость яйцеклеток и

качество эмбрионов.......................................................................... 117

Заключение....................................................................................... 127

5. ПОЛУЧЕНИЕ, ОЦЕНКА КАЧЕСТВА, КРИОКОНСЕРВИРОВА-

НИЕ И ПЕРЕСАДКА ЭМБРИОНОВ.................................................... 130

5.1. Получение и оценка качества эмбрионов...................................... 152

5.2. Процесс замораживания, хранения и оттаивание эмбрионов..... 165

5.3. Криотехника для замораживания эмбрионов................................ 172

5.4. Пересадка свежеполученных и замороженно-оттаянных эм-

* 174

брионов с целью получения телят-одинцов и двоен.....................

5.5. Предотвращение бактериальной контаминации эмбрионов при

181

получении и пересадках...................................................................

Заключение........................................................................................ 184

6. ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ И МЕТОДЫ МИКРОМАНИПУЛЯ-

1 87

ЦИИ С ЭМБРИОНАМИ ЖИВОТНЫХ................................................

6.1. Усовершенствование микроманипуляции с эмбрионами мест-

191

ных пород..........................................................................................

Заключение........................................................................................ 192

7. ОБСУЖДЕНИЕ....................................................................................... 193

ВЫВОДЫ...........................................................................................................................................................................................213

ПРЕДЛОЖЕНИЯ........................................................................................................................................................................215

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..........................................................................................................................................216

ПРИЛОЖЕНИЯ..........................................................................................................................................................................241

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальной проблемой современного животноводства является увеличение производства мяса и прежде всего говядины, как наиболее полноценного продукта питания.

Доля говядины в общем производстве мяса составляет не более 45%, что далеко недостаточно для покрытия нужд народонаселения страны высококалорийными продуктами животного происхождения.

Дальнейшее увеличение производства продуктов животноводства, в том числе, мяса, возможно только на основе современных эффективных технологий сельскохозяйственного производства, более полного использования биологических возможностей мясного скота по трансформированию кормов в мясную продукцию, современных достижений науки в области биологии размножения сельскохозяйственных животных и биотехнологии. Основной прирост производства говядины возможен за счет интенсификации отрасли, внедрения прогрессивных технологий в организации труда и форм собственности, повышения продуктивности скота на основе сбалансированного кормления и создания оптимальных условий содержания животных.

Биология сельскохозяйственных животных при определенных условиях может изменяться в необходимую сторону. Знание закономерностей роста и развития организма животных позволяет в хозяйственной деятельности получать крупный рогатый скот с желательными признаками. При этом эффективность его использования связана с плодовитостью, устойчивостью к неблагоприятным внешним факторам, интенсивным использованием кормов и реализацией их в продукцию.

Одной из важных причин ограничения рентабельности мясного скотоводства являются низкие темпы размножения животных. Повышение интенсивности воспроизводства стада является основой роста поголовья мясного скота, увеличения производства мяса и рентабельности отрасли в целом. Достичь более высоких результатов по расширенному воспроизводству маточного поголовья возможно при организации

хороших условий содержания и полноценного кормления животных, целенаправленной селекционной работы, четкого зоотехнического учета, стимуляции половых циклов и своевременного выбора животных в охоте, эффективного осеменения самок в оптимальные сроки, диспансеризации коров и лечебно-профилактических мероприятий.

На основе усовершенствования существующих и разработки новых теоретических и практических подходов к решению проблемы интенсификации воспроизводства крупного рогатого скота возможно достичь высоких результатов по увеличению производства продуктов животноводства.

Среди наиболее важных достижений в области сельскохозяйственной науки является использование биотехнологии в процессе воспроизводства стада. Для более полного использования огромного генетического потенциала высокоценного маточного поголовья сельскохозяйственных животных был разработан и применяется метод трансплантации ранних эмбрионов от выдающихся матерей животных реципиентам, но с низкой племенной ценностью.

Метод трансплантации эмбрионов открывает огромные возможности в разведении и воспроизводстве крупного рогатого скота как с точки зрения повышения эффективности племенной работы, так и увеличения поголовья мясного скота. В области селекции трансплантация эмбрионов обеспечивает более интенсивное размножение животных с высокой генетической ценностью, сокращает генерационный интервал, позволяет проводить более строгую селекцию матерей быков.

Практическое применение метода трансплантации эмбрионов в мясном скотоводстве основывается на интенсификации воспроизводства наиболее ценной части маточного поголовья, получении быков-производителей от выдающихся матерей, ускоренной проверки быков по качеству потомства.

Определенный рост экономической эффективности мясного скотоводства можно достичь за счет увеличения количества двойневых отелов. Путем пересадки двух

эмбрионов или подсадки одного эмбриона ранее осемененным животным можно увеличить выход телят на 30-50% и повысить рентабельность стада на 25-30%.

В мясном скотоводстве эффективность производства продукции в решающей степени определяется уровнем воспроизводства стада и сохранностью полученного молодняка. Дальнейшее развитие мясного скотоводства в значительной степени сдерживается несовершенством технологии воспроизводства и невысокой его экономической эффективностью. Существующие формы организации воспроизводства стада не отвечают требованиям технологии мясного скотоводства. До последнего времени не определены оптимальные сроки физиологической половозрелости телок мясных пород и параметры осеменения коров после отела и в период охоты, нет достаточно эффективных и Совершенных схем стимуляции половой функции и профилактики по-слеотельных осложнений у мясных животных. Нет четких биотехнологических и экономических обоснований получения двойневых отелов у мясного скота при использовании пересадки двух эмбрионов, одного осемененному реципиенту, двух демиэм-брионов.

Вместе с тем вопросы интенсификации этой отрасли нельзя решить без четкой высокоэффективной системы организации воспроизведения и улучшения животных. На любом уровне развития животноводства процесс воспроизведения популяции животных неотделим от процесса ее улучшения. Более того, последний является функцией первого. Если это условие нарушается, то отрасль становится экономически неэффективной, так как при этом в хозяйствах не может быть достигнут необходимый уровень стад, а следовательно и производительность труда. Поэтому вопрос генетического улучшения животных является основным звеном цепи мясного скотоводства, к которому и следует прежде всего прилагать усилия.

Дальнейшие исследования по усовершенствованию технологии сельскохозяйственного производства путем более полного использования биологических возможностей мясного скота, разработки прогрессивных форм организации воспроизводства стада и применения новейших достижений науки в области биотехнологии позволяют

поднять на более высокий уровень рентабельность мясного скотоводства. Несмотря на огромные затраты по организации и проведению искусственного осеменения и трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота, главная его цель - увеличение темпов повышения продуктивности мясного стада за счет генетической селекции быков и коров - еще не достигнута.

Цель и задачи исследований. На основе использования достижений современной науки и международного производственного опыта разработаны методы и дано биотехнологическое обоснование интенсивного воспроизводства крупного рогатого скота мясных пород.

Для реализации указанной цели были поставлены следующие задачи :

- оптимизировать существующие и разработать новые методы организации воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения, естественного спаривания и трансплантации ранних эмбрионов;

- разработать теоретические и практические основы гормонального стимулирования охоты, суперовуляции, оценки качества и пересадки эмбрионов у мясного скота;

- усовершенствовать технологию получения двоен на основе метода трансплантации и совершенствование техники ее проведения при межпородной пересадке эмбрионов;

- на основе анализа собственных исследований определить эндогенные и экзогенные факторы, определяющие высокий процент стельности и жизнеспособности эмбрионов при искусственном осеменении и пересадке;

- усовершенствовать технологию глубокого замораживания, длительного хранения эмбрионов, оттаивания и пересадки их в условиях ферм; сконструировать специальные приспособления для этих целей.

Одной из методических задач было усовершенствование, применительно к конкретным условиям, метода трансплантации эмбрионов у мясного скота с использованием отечественных реактивов, питательных сред, приборов и приспособлений.

Поставленные задачи решались в длительном эксперименте на высокопродуктивном и генетически ценном маточном поголовье мясного скота в племзаводах "Красный Октябрь" и "Парижская Коммуна" Волгоградской области, КСХП "Россия" и а/ф "Толмачево" Нижегородской области. Лабораторную часть исследований проводили в ВИЖе, в зооветеринарной лаборатории (г. Котово Нижегородской области) и Нижегородской сельскохозяйственной академии (г. Нижний Новгород).

Научная новизна. Усовершенствованы и обоснованы биотехнологические подходы к решению проблемы расширенного воспроизводства мясного скота с целью повышения его репродуктивных качеств и мясной продукции в целом. Разработаны оптимальные нормы организации воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения, естественного спаривания и трансплантации эмбрионов, теоретические и практические основы гормональной стимуляции охоты, суперовуляции, оценки качества и пересадки эмбрионов у скота мясных пород, изучены эндогенные и экзогенные факторы, влияющие на интенсивность воспроизводства и эффективность использования трансплантации эмбрионов при ускоренном размножении высокопродуктивных животных и получении двоен. Разработан новый простой и более экономичный метод ускоренного замораживания и получения деэмбрионов с высокой долей успеха.

Практическая ценность работы. Показано, что оптимизация воспроизводства мясного скота с использованием искусственного осеменения и трансплантации ранних эмбрионов даст возможность увеличить выход телят до 97 на 100 коров, повысить число двойневых отелов до 50% при пересадке 2-х эмбрионов. Содержание мясного скота на пастбищах и в помещениях облегченного типа в боксах без привязи снижает число трудных отелов на 6,7% и повышает оплодотворяемость животных от 1-го осеменения до 67,4%.

Охарактеризовано биологическое действие белковосодержащего препарата "белотин" и премикса П60-3 на способность активизировать воспроизводительную функцию коров. Включение в рацион коров белотина и премикса сокращает сервис-

период до 69 дней, повышает оплодотворяемость от 1-го осеменения до 67,1% и реакцию доноров эмбрионов на гонадотропин суперовуляцией до 76%.

Применение УВЧ сокращает продолжительность инволюции матки на 9 дней, приход коров в охоту на 18 дней, повышает их оплодотворяемость на 14%. Двукратное введение простагландина (утром и вечером) обеспечивает синхронизацию охоты у 94,5% коров. Интенсивное выращивание телок способствует их раннему созреванию (15-17 мес.), высокой оплодотворяемости при осеменении (89,8%) и получению жизнеспособных телят (98,4%). Установлена прямая зависимость между сезоном года, продолжительностью светового дня и реакцией яичников на гонадотропин. Выход нормальных эмбрионов был самым высоким (80,65%) осенью. Оптимальным вариантом получения двойневой стельности является подсадка эмбриона в противоположный рог матки от желтого тела в яичнике осемененному реципиенту, которая позволяет получить 57% отелов двойнями, предложена простая, высокоэффективная, доступная в условиях производства методика замораживания эмбрионов путем "витрификации", а также механический способ деления эмбрионов без сложных и дорогостоящих манипуляторов. Реализация научных разработок расширенного воспроизводства мясного скота осуществляется а племзаводах "Красный Октябрь" и "Парижская Коммуна" Волгоградской области, а/ф "Толмачево" и КСХП "Россия" Нижегородской области.

По материалам диссертации опубликовано 36 научных работ, две Методические рекомендации и две монографии.

Основные вопросы, выносимые на защиту.

♦ Влияние условий кормления и содержания на воспроизводительную способность коров и телок мясных пород.

♦ Эффективность стимуляции половой функции у коров и телок, профилактика послеродовых осложнений, сроки половозрелости и оплодотворения телок, кратность и сроки осеменения коров после отела.

♦ Оптимизация организации воспроизводства мясного скота при искусственном осеменении, естественном спаривании и трансплантации ранних эмбрионов. Факторы, влияющие на эффективность воспроизводства.

♦ Теоретические и практические основы синхронизации охоты и стимуляции полиовуляции у коров-доноров и телок. Эндогенные и экзогенные факторы, определяющие эффективность гормональной стимуляции овуляции, оплодотворяемость яйцеклеток и качество эмбрионов.

♦ Получение, оценка качества , замораживание, оттаивание и пересадка свежеполу-ченных и замороженно-оттаянных эмбрионов.

♦ Теоретические и практические основы деления эмбрионов и эффективность их пересадки.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на конференциях :

0 "Нетрадиционные методы лечения животных с незаразной патологией в практической ветеринарии", г. Н. Новгород, 1993г.;

О "Использование научного потенциала в животноводстве агрофирмы "Толмачево", г. Н.Новгород, 1994 г.;

0 "Мясное скотоводство в условиях Нижегородской области", г. Н. Новгород, 1995г.;

О "Ветеринарная и биологическая наука - сельскохозяйственному производст