Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ИММУНОТРОФИЧЕСКАЯ ФУНКЦИЯ В РЕГУЛЯЦИИ НОРМАЛЬНОГО ЭМБРИОГЕНЕЗА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ИММУНОТРОФИЧЕСКАЯ ФУНКЦИЯ В РЕГУЛЯЦИИ НОРМАЛЬНОГО ЭМБРИОГЕНЕЗА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА"



- Д« правах румяней БОГДАНОВА Ниш Влядяиярокяа

■ Иммунотрофнчоск&я функция в регуляции нормального эмбриогенеза у крупного рогатого скот« ■

Сйм>м»т 0J.00.13 • фапомгяя чеимяем к ясяяотяых

Автореферат ' 1.

яяссертяяя« » сояскиве учеяо! сторем* яяядядягябвоаогячес«! яяуя

я Дубр01«»и. Моско»смй о б даст я

2000 г. ■..■;.

* ^ео - ~ о^^гкГ г ?-

Дяссертаинонняя раб он аыполвена на кафедр яленеияого дела, биотохиологии я биологии воспроизведения с.-х. животных Госсяйсной авапеивя менеджментав животноводстве.

Научны! руководите: доктор б во логических наук В. П. Радчеяко».

Официальные оваоневты: - Заслуженный деятель науки Российской Федерааин, доктор биологических наук* профессор Ю.Д. Клинок*) •кандидат биологических я «у к В.Я. Черных

Ведущая организация -

Всероссийская илучио-ясследовательский институт племенного дел* (ВМИИнлем)

Эашгга состоится г. в 10 часов, на заседая»

диссертационного совета ад020.16.02 »о Всероссийском в «учло-исследователь скоп в и статуте животноводства.

Адрес института:

142132 Московская обл., Подолъсзяй район, . вое, Д^ровяпы.

С диссертацией 1- '«омвться * библиотеке В ИХ а.

. Автореферат ^ у^^/^/гООО Т^

Ученый секретарь диссертяч-яашдидят биологических яжцъ

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

г АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ. В нарушении «сороимодвтельной функция у крупного рогатого сита, по-прежнему, «едущее несто залам ают - эмбрпойальвыепотери.Помвогочвслеивыы д&ввым как отечественвых.таги , . зарубежных исследователей, у крупного рогатого скогв о и яо дон оря ем ость ■-. V ' " со ста» ля ет 90-95 «.тогда хах до рождеви доживают лишь 50-55 % -зародыше! (Миловавов В.К., е1 а1.1998;0ата$Ь А.О.'Л'а].,-

1999; Хв 2.г, еЫ„ 1999). . - -

Несмотря на длительный пер «од изучения причин эк врио шальныхпотерь, до сих пор не разработаны эффективные и практически приемлемые методы - «х вр г дот» ращен ля. ■ '..! : *

Значительные успехи и изучении эидокряваых факторов в нормальной и. нарушенном змбряональвом развитии были достигнуты отечественными, учевымя А.Л. Падучсаой.Ю.Д. Клинскям.М.И.Прокофьевыми *

. В начале 70-* годов началось ввтевсвавое изучение роля икмунвых. факторов в нормальном-и-внушением преиатальном развитии. Крупны!: у вклад» выявлении язмсневи& иммунного статуса у крупного рогатого енота во время стельности были сделаны отечественными учеными И.И. Соколовской, Н.М: Решетниковой Я А.В. БровсюЯ.

К концу 8(/-х то до» было установлено, что усамо* с те моэвд отел вольным • типом плаценты 'угнетение яммунной: системы ; вызывает снижение ■ эмбриональной выживаемости, которое предотвращается иммунизацией таких самок лейкоцитами ~ посторонних „доноров ялн ! ( обработкой иммуномодуляторамя. Это обнаружевнв " иеобходиь^ств '' распознавания ^ иммунной стемой.'с&мки'«чужеродных» антигенов зародыша послужило основой формирования воюй теории - иммупотрофической,. пришедшей ни-'

• смену иммуносупрессивной. ' ; , ' ..

В то же время, хотя иммунизации самок с вервячнимн или вторичными

• I мм у во дефицитам и предупреждает снижение эм врио налы ой выживаемости, длительное время ве- была язасства; конкретная популяция .»втервисжвх лимфоцитов,; участвующих в . распозвааовви «чужеродных» антвгеноа

: ' зародыша я формировании икмувотрофической функция-в . нормальном эмбриогенезе..Недавно было показано, что у само* с гемээадотелнальвым типом владея ты эту функцию. осуществляют не ар\-а т8*Т-лимфойЯШ Л 'г НеуЬогаеЕ.е1 в1,1994). ■ Л - Ч'-■ V.

■ У крупного рогатого скрта, имеющего си яде см о хор ноль яый тви плаценты, как в у других визой млекопитающих, во время стельвости (особенно в 'период, пладевтяпив) происходят изменение, клеточных и \ ■ гуморальных иммуишх реакций.г Следовательно, вполне вероятно, что, у: крупного рогатого скота, как я у самок, сгемоэндотеллальной плацентой, , : существует . им мунотро-фяческое взаимодействие а системе «самка^ародыш». .- Изучение этого возможного яммулотрофвческого взаимодействия во время

. центральная ; НАУЧНАЯ £Й5ЛИОТЕКА- ■

тжыи

стедьвостя у хоров, с одно! стороны, углубляет во1аанне фвзвологвческит вродессов, о$еспечява»швх.течение' яориалшой стулья осте, с друге! ♦ открывает перспективы рмрабоп« иетоло» повышения преватадьво! -выжвваемоста. ■ ■'"'""''■'* /' - ' /

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЙ » Определять возможвость существования у крупного рогатого -схот» вмыувотрофического - ыавиоде4ств»я в свстеме

• «самка>зародыш»,я также выяснятьвозможность повышен вя эмврвональво! выживаемости посредствомкоррекцив этоюф апологического процесса.

Для до стаже яви дан во в целв был* воет левыследующие задач»;

1. Определить вдияиме иа эмбрвоянльвую выживаемость дополнвтельвой сенсибилизации коров антигенами сиьрииев в субоптинальпо! дозе. .

2. Выяснить оптимальное* практически дрвемлемое время ныиуаизации коров сиермияма быгоа с целью поаышевя* эмбриональной аыживвеиости.

- 3. Установить ■ аелкчиву " эмбриональных потерь, обусловленных в вруше «вейимиуяяых взаимоотношений в системе «еамхя-эар»дыш>. ^

4. Итучвть чвслеивость Е-РОК в периферической кров в у " юра»,

* янмунизлроввнвых . * невмму ивзвровавных: епермичмв бы ко»-про изводит елей. • ; - - .. ".- ■ •" ■■ .. •' •*. \

5. Определять уровеньаятиспермальаых антител у коров, дополввтельво се ас ибнлязяро в ал аых в яесенсиби лязяр «веяв их ватаге век ж спер киев.

' V _ 6. 0 предел вть «елвчану. эмбрвовальвой . »ыжав&емости у -коров, нмму визированных спер ива к в"..' быков-про изводите л ей , врв закладке нескольких сте ль ноет ей подряд.

НОВИЗНА ПОЛОЖЕНИЙ ДИССЕРТАЦИИ. Вяервие устаа'овлеио, чю иммувизация коров субоптимальной дозой слермиев быков повышает эибрковалъяую аыживасмость; несмотря в» то, что анмуиааацяя действуй кок. стрессовый, фактор, дополнительная севсвбялязвцщя коров «ятя ге вам я сперянеа в пераые сутки после осеменены, так же как я во вторые, вроваляет зм б р во протест и в вы Й эффект; ' иммуянз&ияя спермиянн коров - после осеменения везввясимо от числа (первая, вторая идя третья) охот в течения одного сер» и е-о ер иода повышает . вре катальную »ыжвваемость; дополнительная севсвбвлвзяявя коров антигенами соермвев в теченяя закладки нескольких стельностей подряд ве только *е снижает эмбриональную выживаемость, во даже значительно ее повышает;, у коров, осемевенных несколько раз безрезультатно в течении одного полового цикла, по сравнению с коровами осемевеявымя в одну охоту; уровень антисперм ильных антител выше. .Инмупязапия. таких, коров свермияни. быков-яронзводителей' в опт в мальвой • дозе увеличивает этот показатель тогда., как аналогичная обработка в су б оптимально! дозе-не.влияет не уровень автвевер мальвы* аятятея. • Вто же время.,, данное увеличение твтра антв. спгрмальаыхактител не оказывает/ ' отрицательноговлияния '.на .

эибряональяую выживаемость; уровень аятвевгрмвлъныхантвтел у коров, дополвительио севсхйилвзироваегных яятвгеквмк спер и к г в быков, прк -»кладке предыдущих егельвостеЯ-увел&чнввется значительно пвтевеввнее, вежелв у жввотяых, обработанных ввалогячныияитвгевамводивраз. В га ж« крепя это воле» лвтевсивпое вовшпеяяе титре ввтясиермальных автвтея во оказывает эмСряодеструкт явного действия; у воров уже вв равяях этим стельяостя провс*едят язмёпевке клеточного в ы му ы итет а,пр о яв ля ееся в увеличения ч вслем я о етн \Е-Р О К (СС2*) в • пери^ерячесно!' «ров л. Им м у в из ваяя воров спермявмя быков в опте мальв о* дозе повышает количество этвх лямфодятоа, а в субоптвмальвоЁ практпчесхя ве влаяет ва дяивы! показатель;. степень сов л плев я я реякцяиЭСЭ у коров, дополвятельно севсвбилязировавяых антигенами сперыяев быков, выше по ерюненвю с веобработаввимв. жввотнымв, что иязаво с увеличением . препатаяьвоб выживаемости у коров, имкувиэироваввш соермяямв быков-производителей, .

, ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Разработав вот! подход к взученвю методов повышена* змйриовлльвой выжвв&емостяу коров с нарушением, иммунотрофнчёской функция .в ореиятальном ртнтви. Этот в ода о л основывается ва возможяоетя профилактика эмбряопальпих потерь посредством пммуяпшшв воров в первые суткв после осемеяелйя антвгевшн спер мне», имеющих обгаяе детермяванты с антягеявмя зародышей. Дан вал разработка может быть использовав» "как' для совершенствования предложенного метода , ямяуноорофвлактякв эмбриональных потерь посредством дополпагельпоб севсябялвз&анв коров антвгеваив спершее быков, так . я для разработка левых методов вовишеввя. оренатвльио! выжяввемоств. ■'

АПРОБАЦИЯ.. Основ вне результаты работ« быля доложены ва научно-практической конференция . «Повышение < ко в кур елто сп осо (я ост в -жввотяоводства я задача кадрового обеспечения» (1-3 вюня 1993 г.," в,1'Быково); яа _ ваучпо-пракгяческой ковферевпвя «Повышепвв^ конкурентоспособности животноводства я задача кадрового обеспечения» "(3-4 нюня г., п. Быково);'ва ввучвой'конференции отдела бвологяв воспроизведения ВКЖа «59 лот Открыт в я возможно«« заморажяваяяя « получения потомства от замороженного семевв» (23*24 октября 1997 т., п. Быково). .*" '" . '.."■■'■* '

• ПУБЛИКАЦИИ.. Мат ер в алы диссертации ооублнковавы ' в' 3 .-Л^.'' статьях. ... - . ' ' . . ; '• ' ' ' ';;

ОБЪЕМ РАБОТЫ.. Диссертация. изложена ' в*'; 108 стран» пах машвиописвого текста. состоят.» »»едеим.обзора литературы, ли ер »ала в; методах исследований,. результатов, обсуждении результатов я выводов, содержат 13 таблиц, 8 граф в кок. Список' литературы , включмт 167 источников,втом числе 140 вностраанш. ......"

• ' «

.-'¡^VÍ " V . 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ. ■'}■ :

• . Лабораторные исследования были про»едены * Российской академии .; ; кеяеджмтаажнвэтноводстаеьНШэпидпмиологии я микробиология имени ; почётного академика И.ф. Гамалеи РАМН. ;

Шучио-пронзводственвые 'исследования выли ' проведены в совхозе . .• «Повадянсхкй» Домодедовского. района. Московской области. ■ Всего ■ -экспериментах было задействовало 419 коров черно-пестрой породы, опытные V ' и контрольные группы были подобраны во принципу аналоге »(«ем а 1),

■ Суспензию спермие^ быков-производителей для иммуннзацвв коров: ' готовили jio способу предложенному Радченковым В.П. к Стояновым ВХ, : '199S; Для получения антвгеяа был взят эякулят от 4-х быков>пронэ1одителей : (принадлежащих ЦСИО сельскохозяйственных животных). Концентрация - . спер мат озо ндов была подсчитана традиционным методой с использованием камеры- Горяева. После подсчета концентрации сиермнев Чуспензия была ■ • '- '"V разбавлена (физ. раствором NaCI) до конечной концентрации 0,5-1,0x10', *-: 2хЮт,. 2x10 спермнев на ' мл. В: полученную суспензию был добавлен ■ ; мертнолат яатрня из расчета0,01%. \ ■

- .Стерильность суспензии была . определена трдцицноявым методом, : . посредством высева на МПА, МПБ. . - :

'Приготовленной суспензией спермнев быков-производителей, иммунизировал* виутрикожно (и несколько-точек) коров опытных тупо в первые или вторые сутки после осеменения в дозах \ 0,5-1,0x10', 2x10 , 2x107 \ клеток. Животных контрольных групп также вяутрякожпо (в/к) обрабатывали, плацебо, в качестве которого использовали физиологический раствор хлорида , натрия, содержащий Ó,01S нертнолатаяатрня.

" Определение численности E-РОК в периферической крови -крупного , рогатого скота проводили по методу Соколовской И.И. и др., 1984. ■ , ' Уровень аятнепермальвых антител' а периферической крови коров . , ' контрольных я опытных групп осуществляли по методу Пегг C.J. el. al.,' 1986 в . ' модификации МЖ tander, - P.J. llantén, M/'Drosl, 1990. Для v этого, до • ' . постановки реакция 96 луночные планшеты обрабатывали спермиями Сыкапрон и о дне ля, используемого для осеменения в данном хозяйстве. Эякулят быка, после; его получения, был три раза отмыт в ЗФР с рН-7,2. После ;

подсчета концентрации спермнев полученная суспензия была доаедева до конечной концентрации ЗФР содержащим PMSF (антнпротеаза) с рН-7,2. По : 100. мкл полученной суспензии было . внесено в жажд у ю лунку планшета. >. ; Планшеты были поставлеяы а термостат на 24 часа яря 37 . После в нвкубаянн ■ : - 1 в термостате, планшеты былн обработаны стабилизируют им раствором, содержащим :, 10% сахарозы я ' 4 ПВП (полввнннлпнролидона) в . диоиязн^ованиой воде. Приготовленные планшеты хранились прн '4® до : ^использования. 'V /■'■'■'■■ ..■.■■■ ''

СХЕМА ЭКСПЕРИМЕНТА.

Опыт Л Г,

Обработка коров яосле осеменения (на 2 сути)

Определение урожня снт я с пер малыш*

Контроль" ПЛАЦЕБО.

Обработка коров о о ело осеменения (яа 2 суткн^

Повторная обработке коров после отела в осемсвевня

Третья обработка коров после отела I осеменения

-)пределен*е уровш{ |1овторвая Автиспер мальвы* антител

обработке коров досле отела ш осеменения

> пределе мне урот> ант я с пер м апь и их

шш.

Третьв обработка • коров после отела а ■ ДЦЯЯ^НВЗ,

Определен» реэульгатмвяоетя осеиенсняя полов торным орнжодеь' ' коров в охоту Жданным ректальных исследований /

Реакцию ЭСЭ ставили понетолу Соколовской И.Н. и Мнловаяоаа В.К., 1981, В качестве антктеиа хспользовалн ткани 25-30 суточных эмбрионов крупного рогатого скота.

- Эмбриональные потери определяли косвенным мезодом ло повторению течки с запозданием (перегулам), /

Статистическая обработха давних проволилась по общепринятым методикам. , ■.■-'..

9. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.,

1.1, Результативность осеменения и состояние клеточных и гуморальных иммунных реакций у коров, дополнительно сенсибилизированных антигенами слермисв быков-производителей.

3.1.1, Влияние на результативность осеменения дополнительной сенсибилизации коров антигенами спермиев.

• Ранее (Радченковым В.П„ Стояновым В.К., 1995) било по наган о, что дополнительная сенсибилизация коров аптигенами спермнев (в дозе 0,5-1x10* спермьев на одну внутрикожиук> иммунизацию) повышает результативность осеменения на 20-25%. В то же время известно, что использующаяся при искусственной осеменении коров глубока замороженным семенем доза спермиев составляет от 4-5х107до 2,5х107(в зависимости от числа спермнев с прямолинейно-поступательным движением), которая оплодотворяет практически асе яйцеклетки а также стимулирует специфическую сенсибилизацию иммунной системы коров к - антигенным детерминантам,-общих дли спермиеи и зародышей. В связи с этим, иа первом этапе экспериментальных исследований была изучена возможность снижения дозы спермиев, использующейся для дополнительной сенсибилизации коров. Для : этих - целей ., коров на вторые сутки после осеменения дополнительно сенсибилизировали различными дозами сие]) ми ев бы ко в -про взводи геле I, Результат*эксперимента представлены в таблице 1. Как видно и данных, предсттленных а таблице. 1, по сравнению с контролем, дополнительная сенсибилизация коров антигенами спермиев повысила результативность от первичного осеменения,, снизила индекс .осеменения и время от обработки до плодотворного осеменения (при статистически достоверной разнице с контролем, по всем исследованным показателям*). Это увеличение результативности осеменения в опытных группах, по сравнению с контрольной, не было вызвано* разницей и онлодотворяемости или выживаемости зародышей ва самых равнял этапах рреяатаяьвого развития, так как после обработки число животных, пришедших и охоту и течении первого полового цикла во всех группах было аражтичееки одинаково. . . '

Табпвца 1

Результативность осемевеввя корок, ямыупиэвроквнных различными дозами спсрияе» быков-вроимозятелеЯ.

Обработка сп«рмнл-ы« а дом Осеивн(ио корй» ч Индекс оссмеясвня В|кия1п о6|>вб01КИ " до ПЛОДОТЮр- яого осеменения ' (».сутмх)

•сего . стала стмъными от первичного осмиен^ннд повторили ояоту а 1-й оьлраоЛ, ЦНКЛ,^.:' поаторнлв . течку с . мло»далнш, ■ %.

0,5-1*1 2x10? 2*101 24 21 23 63,6*10,2 68,019,3 1 ¿¿±6,7 9,1 ±6,1 8,0*5,4 17,1 ±9,5" 24,&18,51 1,41 ±0,18** 1,4510,14* 1,44 ±0,15* 17.316.9"* 19,816,7* 18,816,1*

шишебо Ммп. Р-р ) 2« эл;719.0 7.Ш.9 37,119.2. 2,0710,20 50,919.9

»•обработка (вммуяят&ция, либо яньекцмя плацебо); *-Р<0,05; зи)-■ Р<0'01 " ' ■ '

Пэвитеяяе результативности осемеяенш) я группы воров, яммувязяроаавмых соермяямя, по сраяяевию с контрольньшн жваотяимк было обусдоалеяо снижение и (я& статвстнческя достоверную величину по сравнению с контролем) числа серо» ■ оптнштруппах,.повторявших течку С ипотдаявеи. ,*■• ■...V;

В связи с тем,чтя у осемеасавык самок аовторенне течкя с запозданием,

• как правело, свидетельствует о оренаталыгых потеря*, «1' результатов, ере петая леЪяык - » таблице 1, можно сделмь вывод; чго » дяаао и

• яксверямевте уаеммеяя* -результативности осемененвя. у коров, .', якмувязнров&няих спериняыг бияов-произаояителе!, .произошло' я: • результат» сииже-якя пуеяятальнык дотерьл, 'V'■"*-;

Давние, приставлен вые я тавльце 1,также показал«, что дош сперм вея ■ (0,5-1.0x10*; 2Й0*). яснользоваашяеся дли до во лейте ль но! сев«вАяд*мцив„ обладала арактчмая одявакоаык'эмбряопротектяявым ^феятои ^азнвц» -между труппами стятиетяческк ведосте*ерна).Исход* язэтихрезуяьтатоа я . ; дяльн«1ше> рв^отгяш1 кммунпапяя мроя; яскользовмя дозу 2я10* еперчмеа ва одву обработку.

. а. 1.2. Гуморальные и клеточные иммунные реакции у коров, дополнительно ■ сенсибилизированных спермиями быков-проиаводителей.

Известно, что сенсибилизация коров к антигенам сперм нев как ори экспериментальной и мм у инталия, - так и. при искусственном или при естественном осеменения, сопровождается изменением в организме ' гуморальных в клеточных иммунных реакций/В связи с этим в следующем эксвернмеите нами было изучено изменение иммунных реакций у коров, нмкуннзнроваяных и невммуяпзнрованаых антигенами спер мн ев.

Результаты исследосакий уровня антител у коров с дополнительной сенсибилизацией антигенами сперм пев и без нее показаны в таблице 2.

Как вндпе из дан вых. представлении* я таблице 2, при разведении сыворотки, крови в диапазоне от 1: 30 до 1:120 уровень он тис пер мольных . антител на 10-е сутки после осеменения, по сред не и ню со вторыми сутками аналогичного периода, во всех трех группах повысился,на стагнстячески достоверную величину (р<0,05; р<0,01). Резкое повышение уровня онтиспермальяых антител во всех трех группах животных, по-видимому, обусловлено тем, что у исследуемых животных иммунный ответ к акт «генам слермисв происходит по вторичному типу, так как все жшмтвые, использованные в опыте, имели ранее одну или две стельности, Известно, что уже во время первой стельности к особенно после родов происходит сенсибилизация организма самок к антигеном эмбрионов, имеющих общие детерминанты с антигенами спермиея. ..'■'■.-'

Из данных, представ ленных в таблице 2, также видно, что повышение уровня внтиспермакьных антител при разведения сыворотки в диапазоне от 1:30 до 1:90 произошло у коров, иммунизированных спермнямя быков-производителей в дозе 0,5-1x10 по сражению с контрольными (стельными, «¿иммунизированными), розница между группами* статистически достоверно (р<0,05). . ..

Иммунизация коров спермнямя в дозе 2x10* практически ие повлияла на уровень антител, индуцированный эндогенной сенсибилизацией животных к антигенам спермяев (разница статистически недостоверна), в то же время . согласно данным, представленным в таблице .1, дополнительная сенсибилизация животных сдермяями в дозе 2x10*, также как-н в дозе 0,5-1x10', повысила результативность от первичного осеменения на статистически достоверную величину.

По-видимому, данная розница между эмбрнооротектияным действием и стимуляцией специфического антителогевезо спермнямя я дозе 2x10* (па сравнению с дозой 0,5-1x10*) обусловлена, тем, что не антв спер мольные а антитела осуществляют ведущую роль в становлении иммуиотрофического ' взаимодействия в системе «самка-зародыш».

Дготамгаса уровня агаиспершяышх алтогел у горе®, неиымунктроеанных кш иммунизированных '; . ' . различными дозами спермигв бык®-лроговодиталей

' Иммунгааия '' спермкмя» JW* Сутхявшкя tpOIHW 0ШОШСЯКЮ юкрсиеяк , чхю^смырст '' соолюшент

. 130 1:60 ' 1:90 1:130 1340

■ . O.M.OxlO8 доюшункидая - 10 ■ , V ■ . 2 ' С.Т6110.054 1Д93±0,1«в 0,543tO.m 0,571±0,124* 0.371±0.042 Си75±0,0№ 0j2»±0,043 ■ 0^91±0,Ш 0,271 ±0,035

. .2x10' до кшуюлацин 10 2 J ,087», 104* " 0.7 Ii»,09 0Л2±С1,102* 0J13Í0.047 о^яут1 OJJi+O.048 0,4300,044' OJC4Í0.031 <U44±0,057 0JÍJ±0,037

л&оаеунгагфон . 4- 10 ' < ' ■ 3 1 1,07240,093' 0.743±0.0í 0,814»,001* 0,МШ.Ш 0,503t0,041* ' 0.Ш±0,037 0,417*0,05? 0Д57М.031 0^1210,047 0Л? ±0,038

Ранее Соколовской И И. идр. бил разработав метод раннего определения . стельности в реакция ЭСЭ. Метод основал ва- определенна наличия » сыворотке крови мтн эмбриональных антител, В. отличии от нммунофермсвтвого анализа, дыаый метод имеет меньшую разрешающую способность в о пределен ни уровня антител. Но в то же время ои позволяет ' достаточно обьектявво определить пороговый уровень нптнэмбриональных антител, совпадающий с течением плаце втацнин дальнейшим нормальным вренатальным развитием.. По давным этих авторов степень совпадения результатов, полученных методом ЭСЭ, с данными ректальных исследований при постановке реакции на 15-18. либо на 31-45 сутки после- осеменения,/ соответственно совпадает на75-100%. V

В связи с этим, в следующем экснернменте нами было изучено влияние дополнительной сенсибилизация коров различными дозами сперм нее на показания реакции ЭСЭ. Кровь для исследования брали у животных на 17-18 'сутки после ссемененяя..Результаты эксперимента представлеим а таблице J.

-■'.;./" Таблица}'_■ . Реакция ЭСЭ у хоров иснимунвзнрованиых или иммунизированных . различными лозами спер ни ев бы ков-про изводите лей/__

Иммунизация короа сиермояма вдазе. Всего животных. Коровы. . имевшие положит шя>-чум ревкцнк» ЭСЭ.' Стельность подпержденная рвктпьно Швторшщ течку с эышдаяяеи Совпадай* ; данных ЭСЭ с. данными . . рекгальяых исследований..

ЧИСЛО ЧИСЛО . н ЧИСЛО Н

"= гхи»1 неиммуаиз. .24 25 28 18 2018 7S,Ot8,8 «ММЛ.О 64,»8,8 1« 17 W 66,6±%6 6S,0±f,3 ; 33,7*9,0 3 . 6 ' ■М 20,8±8,3 24,0±8^ 37,Ш,2 . 75,0±8,8 . ■ 80,0±8,0 64,318.8

Как видно вз данных, представленных в таблице Э, степень совпадения результатов реакции ЭСЭ с данными ректальных/ исследований у ' иммунизированных коров до сравнению с веиммуяизированными ; быяа выше. .■>■■.: -."'.. . /; , '■

' Известно, чтоповишевме степени совпадения метода ЭСЭ с данными ректальных, исследований связано со снижением эмбряпнялыгыг . потерь, садовательно, из результатов эксперимента, представленных таблице 3, можно сделать вывод о том, что повышение результативности осеменения у '■. животных, нммуинзировадпых слернвями быков-производителей, по >-.сравнению -с. неииму визированными, .обусловлена повышением /эмбриональнойвыживаемости. ■/. "

Известно, чю нормальная к нарушенная. стельность сопровождается изменением не только гуморальных, во и клеточных иммунных реакций. В частности, в начале 80-х годов.былв установлено, что у крупного рогатого

гкота,» отличяя от других «идо» млекопитающих, а период плааентации увеличивается числеиносп Е-РОК а периферическое крови. Известно, что Б-РОК соответствует CD2 аятлгеп. У крупного рогатого скота (в отличии от других аядов млеко натают их) суйпопуляции • Т-лямфоцито» в периферической крови представлены WCt*CD2'y5* - 30-75 % (в зависимости от возраста). WCl'CDiVs* • 3*5 %, aß - 0 -25 К, причем среди последней лишь веболшое .число экспресс «руст CD 2. В то же время у этого вида животных, как я у других видов млскопвтающях,'0своввая масса CD2*y5*;T-клеток сосредоточена в селезенке - 40 V*, от общего числа лямфоднтоа (Davis VI,С. et ftl.,1998). Известно,'чю .увелвпепие чпслй Е-РОК в периферической кроки крупного рогатого скота может быть вызвано миграцией этих лимфоцитов из селезенки в периферическую кровь (Xn Z.Z. et. а!.; 1999).

В связи с этим" в следующем эксперименте вами была изучена численность Е-РОК в периферической крови хоров, вейм'мувнзнроввнвых клл иммуятировавны! антигенами спгрмвев быков-производнтеле!. '■ -

Известно, что у млекопитающих во время беремепвостя CD2*y8 Т-клетки мифируют из селезенки в ткав в матки, преимущестаевио в пладенту, причем в селезенке их 'относительное количество (по отношению ко всем спленоцнтам) снижается вдвое, соответственно в тканях матки и плаценты их относительная величина (ко всем лпмфоцятам) возрастает вдвое, а абсолютная в SO раз. В тканях ллацеяты эти клетки синтезируют цнгокявы (ИЛ-10. ТФР*^ ЙЛ-1, ИЛ-3, ГМ-КСФ, КСФ), которые способствуют росту м развитию зародыша (HeyЬогое K.D. et al.,, 1994). Ранее было показано, что число Е-РОК в аернферическоА кровя крупного рогатого скота определяется главным образом количеством СD2*у5Т-клеток, : ' . ;

4 Результаты эксперимента представлены в таблице 4. ; ' * J i

V".' ■(.■:' Таблица 4

Численность Е-РОК в Периферической крови коров, иммунизированных

Сугкяазятвя . крови 110 ' отимлеввю■ Имиунаптяя -■ . спернимяа Дозе Исследовано . ; проб кради Всего подсчитало лимфоцитов

ко времени осемеввишг ... ... ■,

- . ■ ^V' число ■з ни* Е-РОК а среднем в* одно живот яое

. г ■■ 16-18 .г ■ ■:■ -16-1« 0 0,J-l,0xltf - 2 * 10* контроль 11000 . 11000 ПООО 111)00 : 11«00 11000 2J.Ö±0' " 7,711.6 ■Steltf

. х-Р<0,03

м

■ Тмни овразои hi результатов, представленных в таблице 4, можно 'сделать. tire од о ток, что у хоров я начальный вер иод формировав** / дладеяш, увеличение чясла Е-РОК в периферической крови связано с увеличением в ней CD2*^3 Т-лнмфоцитов, мигрирующих из селезенки к месту • плвцеятацви. Дополнительная сенсибилизации коров антигенами спермвев, увеличивает эту миграцию.

3.1.3. Результативность осамамения у коров, иммунизированных антигенами спврмиев и рагличные сроки после осеменения,'

Иммунизация животных антигенами спермиев бы ко в-про изводите лей (с цгзью повышения результативности осеменения) па вторые сутки после осеменения имеет значительные технологические недостатки. Эти недостатки, могут быть существенно снижены посредством проведения иммунизация сразу же после осеменения. О то же время известно, что иммунизация может действовать как стрессовый фактор, а стрессовые факторы, как считают, могут быть причиной нарушения оплодотворяем ости н эмбрионального развития. Ранее было показало, что первые сутхн после осеменения являются периодом преяатального развития наиболее чувствительным к действию таких факторов.

В связи с этим, и,, следующем эксперименте нами была изучена результативность осеменения у коров, иммунизированных спермиями быков-производителей па вторые или первые сутки после осеменения. Результаты эксперимента представлены в таблице 5. '

■'.'•:. . - Таблица}

Влияние иа результативность осеменения коров дополнительной * сенсибилизации их антигенами спермвев в первые иди вторые сутки после

■■■■ 1 •_. ..; осеменения. '_.■ ■ " • ' ■" -"' ■

Сутки ; обработан по отвошевню ко времени осеменения Обработка Осеменено коров* Индекс ■ осеменения Время от : обработки до ■ плодотяорвого осеменения

* всего . из на* стало стельными от первичного осеменения. ■ ч (а сутках);

• " ' - s . . . - Числе г %

i 1 ■ 3'- еяермнямя 'вяацвбо ; 16 15 13 10 . 12 7 64,7±12Д 75,8±10,8 46,6±12,8 1.4Э±0,1б 1,J7±0,17 ■ 1,80±0,17 17,3 ±5,6 28,8111,4 ."

Дав вые, представленные в таблице 5 показывают, что результат явность осеменения в первую охоту, индекс осемевевни и время от обработки до плодотворного ' осеменения в группах коров, дополнительно севснбилизврованных спермиями производителе! на первые или вторые сутки после осеменения были практически одинаковы (разница между группами статистически недостоверна).

- Таким образом, результаты этого эксперимента показали, что иммунизация коров в первые сутки после осеменения аптнгевани спермнев ие только не оказывает отрицательно t о влияния на результат по сть осеменения, по также как и иммунизация па вторые сутки (аналогичного периода) повышает ее по сравнению с контролем. Исходя из полученных в этом эксперименте результатов а дальнейшей работе дополнительную сенсибилизацию коров о сущее! в ля л в только и первые сутки после осеменения.

Э.2. Пренатальнал выживаемость, клеточные «4 гуморальные иммунны* реакции у коров, дополнительно сенсибилизированных спсрмиямн м раэио» время сервис-периоде.

S.2.1. Результативность осьмененяя у коров, иммунизированных сперммлмм ' ■ в первую, вторую или третью охоту.

Существует мнение, чго с увеличением числа осеменений увеличивается сенсибилизация самок к антигенам спермнев, которая может быть причиной снижения оплодотворяемостн н пренатальной выживаемости.

В связи с этим в следующем эксперименте нами было изучено влияние на результативность осеменения хоров чвсленности нх осеменений, связанных с осеменением в первую, вторую и'третью охоту. Также, задачей эюго эксперимента было выяснение оптимального -времени проведена* дополнительной сеясвбнлизапни коров антигенами спермнев с ■ пелью повышения результативности осеменения.

Для этих целей нами было отобрано шесть трупа животных, три опытных и три контрольных; В первую опытную группу были взяты животные,-пришедшие в первую охоту и пронмиувнзнровапные спермиями быков-; производителей. Во вторую овытву» груаву вошли животные, осемененные в • первую охоту, но пришедшие вновь в охоту в течении полового цикла после -первого осеменения. Эти коровы после повтор во го прохода в охоту, были > вновь осеменены н дополнительно сспснбнлнзпроааны спермиями. В третью' опытную группу были взяты животные, осемененные б «результат а о в первою' и вторую охоты. После третьего прихода в охоту эти коровы были вновь осеменены я про иммунизированы антигенами спермнев - быков-: производителей, В контрольные группы былн взяты аналогичные животные.;

' Результаты эксперимента представлены в таблице б . л

к

■ ■..'." Таблица6

Результативность осеменения коров, нммувизироаанвых слернняня ' бы ко а-производителе! после'первой, вторр1_нлн третьей охоты.

Охота' Обработ-. к» Осененепо коров Ивдекс: осемеяе-НИИ* : Время ОТ ямиунязацяя до ■

■ . ■■ ' . ЙЛОДСгМОрИО- го оеем*в»вня

всего. Повторила течку С 11Па:ДО>Н»М ■ Стаяк . ' стельным» от (а сутках)

Йф»ИЧНОГО вевиепення.

ЯИС ЧИС %

яо ло

1 2- Иммупнэ. Пладебо Нниучиэ. Плацебо Иммумнз, Плацебо 71 63 31 19 1« 12 17 - 31 Я 49,Ш,2 43 24 1» 61.Ш.6* 38,016,1 1,4110,ОТ 1,9810,13 1,4510,12 18,6±3,7* 4<,1±6,9 23,417,5 '

3 8 3 3 42,1±Н,3 , 16,618,7 25,0112,5 8 15 8 42.Ш1.Э 83,318,7 «5,«13.6 1,78*0,22 1,33±0,19-1,43*0,19 31,4110,1 13,1 ±9,0 21.7111,9

- *-'- х)-И»дексосемевеияяучн1ывадся со аремеви обработки; х-Р<0,01;хх-Р<0,00] • ..' ,

Как видно из дай пых, представленных в таблице б, с увеличением числа осеменений наметалась тендевпия повышения результат явности осеменений.. Во всех опытных труппах дополните лье ая сенсибилизация спермиямн бы но в -■.- производителей повысила результат явность осеменения и снизила число - . животных, повторивших течку с запозданием. ..,'.

• Таким образам, результаты этого эксперимента показали, "что . .' дополнительная сенсибилизация антигенами спермяев быков-производителей коров, имеющих-эндогенную сенсибилизацию .(яызаааную осеменением . животных) я этим антигенам не только не повышает преватальвые потери, но наоборот, снижает их. В наибольшейистеки дай пая тенденция проявилась в группе животных^ нроиммувизироканнмх спермяями после прихода в первую ' охогу., ..'."■"

■ 3.2.2. Урон «ж» интисл»рмалкных антит»л у горо«, дополнительно сенсибилизированных антигенами спермиеэ ■ равные сроки сервис-периода.

■ V- Известно, что» но го кратное осемекевяе хоров вриводкт к повышению у. вях в периферической крови титра антиспермальных антител. В саязя с этим нами было изучено мзмеяенве уроаля. ант вел ер мальвы* антител у коров дополнительно сенсибилизированных антигенами слермвев в первую в пи треп» охоту4 Результаты эксперимента представлены в таблице ?. •

■ ' Уромяь ангиспермальшх антител у горев, нммунгопровэннъгс спермиямн . : выгов-пронзаодптелеЯв первую нпл третью охоту.

Охота Супсн ïiznu rpOIH по оповдедою ко , аременн осеиенмпв ОщнчестаивюгоосгыгрЕстсстоснраэйищеяпх '. ■. шюропхкравнхсоФшошекнн

■1:30 1:60 150 1:130 1:240 -

терм* лерше - 0,7ÉI±0,0M' «75+0,01У 0.17ɱ0,015

• деопые 0,055x0.1 M* 0.432»,032 «,»9^02? 0JW1J

трепа первые 1^о±одбз* лшади1 U№0,094* 0^13*0.055' \ 0,371±0,ÓC

s awaraœ 1 ' IÄS±0.t5I* U4firt.05Û* ' 0.76310,1 Î1 омш.т

х- Р<0,01

, Как видно и данных, представленных в таблице 7, у коров, ставшях /стельными в третью охоту, по' сравнению с коровамн плодотворно - осемевевиымн в. первую , охоту, уровень иггжсаермальвых вывтел, прк разведение сывороток в диапазоне с 1:30 до 1:110, был выше на статистически . достоверную величину. Ото же время, согласно данным,1 представлен в ьщ в табпяпе б, повышение уровня пнх антител в« повлияло яа результативность осеменения. Дополнительная сенсибилизация антигенана сперм век коров обек* групп практически не повлияла на уровень данных антвгел. . . -

Нами был» также изучены показания реакции ЭСЭ у коров,* дополнительно се вен бил» про ванных в первую вли третью охоту. Кровь брал я • от животных в первые сутки пдн ва 16-18 после иммунизации. Результаты эксперимента представлены в тдбляпе 8.'

- . . ' . ■ ■ ■ ~ Таблице 8 Реакция ЭСЭ у коров иммунизированных спермиямв в первую вли ________ третью охоту'

Охо- Время - Чяело Дшя Стельность\ Совпидеан»

та ■ ВЗЯТИЯ ' крови по отношению жя»от- поаожктельмую реякцню оо ЭСЭ ректаиьно • . Данных реакции ЭСЭ о 1 донники

ко времени обработки ■ ректальных исследований. («)

число 14 - - число 14

нгермаямк 1-ые 15-1* . плацебо 23 28 4 22* 78.Ш.8 17 60.7М2 77,2*7,» ,'

1-ые 15-18; зо, 30 9 22 14,7±6,8 71,Э±3,1 11 43,349,1 43,Э±>,0

3 - свермяяча 1-ые . 15-18 ■ плацебо 18 18 8-. 17 ■ * ' 44,«±11,7 ,М,4±М .. 15 . 83,3*3,7 88,2±7,б

.1-ые ; 15-18- 12 ■12 6 : 10 '' 50,0114,4 «¿±10,7 ; :8 «,61)3.« 80.0±11,5 ;

.--*.. ~ Как видно вэ данных; представлен них в таблице 8,у коров осемененных в: -'■■■'первую охоту, по сравнению. с животными, осемененными в третью^ охоту, • 1;. уровень оптяэмбрмональяых антвтеа в периферической, крови : был значительно. ннже.В обеих опытных. труооах коров■■уровень этих антител.. повысятся к 15-1$ суткам после осенепевия. - ; : '"'■[•'

Повышение уровня &нтиэмбриоиальвмх аатвтел у животных не оказало . отрицательного влияния на результативность осеменения. Более того, степень: , ' совпаленая реакции ЭСЭ!у коров; 'иммунизированных спермвяни быков-

яро «водителей, била выше по сравнению с контроль вымя животными. что является косвенным признаком снижения эмбриональных потерь у животных опытных групп.

З.Х Влкппи» дополнительной сенсивм л и»ации корок антигенами «чермиев на эакладку последующих емльностей и уровень актиспермальных ",

антител.

3.3.1 Пронаталькая выживаемость у коров, мммуниэированньгх при «акладквк нескольких етельнс>стей.

Существует мнение, что эндогенная сенсибилизация коров к гатягенам спермиев (имеющих общие детерминанты к аитвгепам эмбрвовов), ' происходящая во время стельно«и. а также во время родов, может оказывать' отрицательное влияние иаоплодотворяемость я пренатальное развитие.

; В наших Экспериментах данная эадоипнал сенсибилизации коров и этим / антигенам могла усиливаться в результате экзогенной обработки животных антигенам и спермиев при закладке предыдущей стельности. В связи с этим, в следующем экслернменте нам* было изучено влияние дополи «тельной сенсибилизация коров антигенами спермиев (осуществленной при закладке предыдущих стсльвостей) на результативность осеменения в препатальвое 'ч развитие у животных, вновь иммунизированных данными апгигенамн. Для этих целей о (бирали порог, ранее не-обработанных антигенами спермиев, обработанных во время за гладки первой или второй стельности. Животных всех трех групп им му визировали свермияин быков-производителей. Животные контрольных групп ямелн такое же число стельностей, во ранее не были иммувизированы антигенами спермиев. Результаты эксперимента „ представлены в таблице 9, ■'-',■■ .

" \ ; ■'..■'-■■' . ; Таблица? ' Влияние дополнительной сенсибилизации корой антигенам и спермиев па -" ■_ закладку последующей стельности. :

Обработка Коровы Число жниот-. пыж. Результате» ностье? первичного осеменения, <«> Ловтораяч течкус опоадамшм > ¡1 суток, Г*) Иадаво осемевення Время с г . обработки до плодотворного ■ осеменения,' (тки)

сперм нами /ыыДебо ОбрчбОТМ!-нив 1 р*7 • 44 42 ' 72.7*6,5 34.7*7,3 27,2*6,7 42.8*7,6 1.36*0,10 1,69*0,13 19,7*3.6 40.1*8.7

сперм тми плацебо Обработай-им 2 роза* 43 30 82,2*3,3* 50,0*9,1 13,313,1 40,0д8,9 1,4010,16 1.76*0,17 11,1*8,4 37.7*9,2

сперммямн 'плацебо Обработав-вые 3 раза™ 21 19 85,7*7,6* ■42,1*11,4 9.5±6.<1 . 31,Ш0,4 1,38*0,12 1,78*0,22 . 20,4*8,7 .32.4*10,1

Г х- Обработанные после первой стельности: хх- обработанные после • второй стельвости; х)- Р<0,01 ' .-'.ч■ ■ ' '

Как видно и! данных,, представленных в гоблине 9, дополнительная севсибилязацпя коров яо всех опытных группа* аогысиля результативность от первичного осеменения, Хотя в грувае. коров пгрвый раз обработанных антигенами спермиев. это увеличение я было статистически недостоверным, но развила между опытной и контрольной труппами была близка я достоверной ((¿-1,81), что свидетельствует е налички тенденция повышения результативности осеменения у коров дополнительно сенсибилнзировавных антигенами спермиев. ^ ■

В то же время, у ранее сенсибилизировав пых к этим антигенам коров во время закладки второй или . третьей стельности дополнительная севсвбилизация к автягеиаи спермиев повысила результативность от иервичпого осекеяевия ва сташстнчески достоверную величину (р<0,01). Это

■ увеличение результативности осеменения в группах животных, ям му визированных спермкямя бы ко а-про изводите лей, ..было вызвано.

■ снижением среди них, числа коров, повтор нищ в* течку с запозданием, что свидетельствует о эмбриопротсктивном действии дополиятельной 'сенсибилизация внтвгенаии спермиев.

Таким образом результаты, полученные я этой эксперименте, показали, ' -. что до полни гель пая сенсибилизация коров антигенами спермиев в течении закладок нескольких стельностей подряд «с оказывает отрицательного влияния варезулыатяаноеть осемевеиия.

Известно, ^что иммунизация коров сперниямя быков-про изводит елей повышает уровень ант я с пер мольных анттел в периферической крови. В скязи - . с этим нами было изучено изменение уровня этих * антител у коров, иммунизированных антигенами спермиев однократно или трехкратно (при закладке трех, стельно стейподряд). Результаты эксо ер имен тя вред ставлены и таблицею...'-' -■-" ....','.■.■-..".■.'■

Как видно из данных, представленных в табляпе 10, однократная иммунизация коров; сперм няня бы ков-произвол «теле а повысила уровень ; янтиспермапьвых.антител ■ периферической кровн,. хотя это повышение я ' . было статистически недостоверным, но я разведения 1:30 оно било близко х достоверному. В то же, время у жмвоУнмх, .трехкратно иммунизированных - / этими антигенами, уровевь антвенермыьвых антител (а диапазоне разведения' ' , . ■ ■ сыворотки с 1:30 до 1:120) повысился как по отношению к уроввю данкык-явтятсл в первые сутки после кмиуаимнви, тпк и: к уровню антител у , > одвократво дополнительно >сенсибилизированных: коров, ив статистически ■■'-.',- .

\ Достоверную величину (р<0,05 и р<0,01). "У, .*.' - ;

, ^ '■:. Таким ; обр «ом, результаты этого эксперимента показали*', что . ■' иммунизация коров- спёрмяями быков-проязвовктелей: при /закладке'трех:/: : 'I стсльвостеи подряд хотяи: повышает уровень антислернальвых антител в;- , ;

периферической', крови;, но, в' то же" время не .оказывает отрицатель ног» ■■:,*влияния на результятивность осеменения,У"л/ -" ,■' •, ' '. *.'. -*' ■.'—.';

Таблица 10

; Динамика аягатертльных шпггел у коров, иммугааировгшых одно- или трехкратно спершими быков-'

■ производителей

" Кнмутаввдк* ■ акрккякк (гршюетъ) Сутки ьшня грош ко времеия осеиокянк Огаячеята тшогноси прн <п№енн рдабалдгнет сигор^чьи грося в состшопжкня

1:30 1:60 1«) 1:110 1:240 *

• Однвжрмнв» -10 1,19410,»3 0,754±0,Ц7 ' 0,391*0,062 О.ВШЛ.ОЗЗ

■ .'. 2 ' ' <ДО2±0,«1 0,58810,076 0,33б±0,042 0,22710,026 о,ш±о,оп

трсираощя1^ »0 ; [,??6±0Д43\ 1,45810,114° 1,139±0,О91в 0,663±0,065в О^зн.0,060

2' 1,145+0.179 0,8бй*0.пг 0,345±0,114 0Л2(Ш).О7[ 0,1 ?! ±0.051

\х>Имы}тшированылрт закладке 3-х сташюсгеИ подряд * Х- Р0,05; XX- Р0,01 ■

Также намя были изучены показания реакции ЭСЭ у.коров одно* или . трехкратно (при закладка 3-х стельвостей подряд) сенсибилизированных антягенами спермвев быков-про изводит еле Л. Кровь брали от животных па 1618 сутки после осеменения.

Результаты этого эксперимента показали^ что степень совпадения реакции ЭСЭ с данными ректальных исследований была выше в группах коров, иммунизированных одно- или трехкратно а в тм генами спермиев быхоа-производителсй, Это повышение степени совпадения данных реакции ЭСЭ С данными ректальных исследований в группе короа» иммунизированных одно кр аз во спермииин было близко X статистически достоверной величине (1^*1,82). В то же время, в труппе коров, 3-х кратно дополнительно сев сн б ил а знр о ванных антигенами спермвев, по сравнении с животными 3-х кратно обработанных, плацебо, степень совпадения этих показателей повысилась на статистически достоверную величину (Р<0,05).

. 5.4ч Научно-производственные исследования результативности осеменения у коров, дополнительно сенсибилизированных антигенами спермиев быков-

проюводитепей.

В предыдущих исследованиях вами было установлено, что иммунизация коров и первые сутки после осеменения сперм мял и бы ко »-производителей в дозе 2x10*. повышает результат явность осеменения. Эти нсследоаавня были . продолжены в научно-производственном эксперименте: Результаты этого, эксперимента представлены в таблице 12.

/■■" Таблица 12

Научно-производственные исследования результативности осеменения у ■ коров дополнительно сенсибадизироюяных антигенами свермнеи быков-• : производителей. ■ ■• •

Обработка ; ЧНСЛО . коро* . Сталн первыми от. ' ВС}'»ИЧИОГО - осененелня. ■ Инде ко осеи*»вяя Время от обработки До плодотворного осемененни

число ■ % ' («угок)

сперм икни 182 ' 137 «¿±3,2' 1,39±0,0б" ; ■ ]8,6±3,01"

плацебо 138 73 53,0*4.2' 1,6540.08 10,7*4,11"

" х-Р<0.01;хх-Р<0,05

Квк видно из данных," представленных я таблице 12, обработка коров , антигенами спсрмнев повысила стельность от первичного осеменения,а также снизила - индекс осеменении и: время от -«бработкн до плодотворного осеменения, по; сравнению с контрольными животными на статистически достоверную величину. /

--- V , выводы.;. ■ -

•1- У хруоного рогатого скот» распознавание иммунвой системой емки' «уж сродных» антигенов зародыша приводят во к формированию реахца! отторжения,, а /наоборот к становлению нммувотрофической функции по -отношению к зародышу, ' V

2. Нарушение имиунотрофвческой фувкдвв в схсгсие «самха-заролыш» врвводат к снижению „преиатальаой выживаемости. Это свлжевве. вреватальяой выживаемости предотвращается' внутрвкожной иммунизацией/ коров вптигенами сперм иев быков-пропзводитслей. , ~ V.

' ;. 3. У крупного рогатого скота эмбриональные потери, обусловленные '> нарушением яммунотрофическото взаимодействия ■} в системе «амка-звродыш», состаэляют 10 У», от числа оплодотворенных яйцеклеток, или около \ 40%. от общего количеств в этих потерь.

4.Уже на ранвих этапах стельности, особей во и период формирования плаценты, в периферической крови увеличивается численность E-РОК (CD1*). > Это увеличевяе. по-видимому, связано: с миграцией (как у особей с гемоэндотелвальвым н гемохорнальным типом v плаце втыУ CD2* 1% ' лимфоциту» из селезенки к месту формирование плаценты.

5. У коров, уже на ранних этапах стельности, и периферической крови увеличивается уровень антнепермальных антител,» естьир о всходит развитие вторичного иммунного otbcih к этим антигенам. Следовательно, укрупвого г рогатого скота (как и у. особей с гемоэндотелвальвым и гемохорнальным-типами плаценты) антигены сдермиен'являются перанчяымп Нндукторамя .. становления, нммуяотрофнческого в зав м оде й ставя в системе «самк»-звродьш». \ : ; " ■ ' ■ .-. ■ ■ ■

6. Во время стельвости происходит увеличение уровня внтневермалькых ; ант а тел в нервфервческой кроав, Дополнительная сенсибилизация' хоров - f антигенами, еяермвеа в оптимальной дозе'.повысяла уровевь этих антител. Д. аналогячиая обработка а суб оптимальней дозе, практически не повлияла я а величину данного показателя. Повышенна уровня аптнепермальяых антител, во время стельности, не оказало отрицательного влияния на пренатакьву» выживаемость. .

. 7. Несмотря на то, что иммунизация выступает как стрессовый фактор, ; дополнительная сенсибилизация коров (в дозе 2х 10* сперм в ta) ве только на -вторые сутки после, осеменения, но я в первые сутки пропадает эмбриопротектианоодействие. '/ : v ' -

- 8. У коро» с увеличением числа осемененвй, в течеяяя одного сервис. • периода, повышается уровевь автв спер мяльных антител. , В то же время л • увеличение этого показатели не оказывает отрицательного влвяямя на/ преватальвую выживаемость. . Иммунизация тахвх коров - свермяямв

; вроазвсдятеле! (i до« 2 i 10*) практкчесха ве во»явила на тиеневве уровня аятисп ер мальвы* антител, во повысила результативность осеменения.

.; С увеличением количества стельиосте! происходит возрастание уровня " ' ' еятвсп«рмалшых антител. Дополнительная севсибилизадня такнхкорон (api захдадхе нескольких. стельно ci ей подряд) не то лью ее оказывает отри- . вательвоговлкяния на ореиатальную выжкваеиость, во даже повышает ее. -

10. У коров, иммунизированных сперкяяки.по сраяневжю с невм ну- '* визированным*, степень совпадения реакнив ЭСЭ сданными ректальных исследований выше, что связано ^повышением эмбрионально! выживаемости i в группах животных . дополнительно севснбияизврованвых- антигенами спермнев. ]■[.': ■■'-■'"•-.;--_'.-.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Богданова НО., Махай лев г о Е.В., Радченко» В.П. Результативность " осеменения коров, ннмувизированных спермиямя быков.//Зоотехнии. • 1999. № 7. - С.23-23. ■ ; " ... ' , /

I. Богданова ; Н.В. Иммунопрофилактика эмбриональных потерь-у , крупного '- рогатого скота." Я Повышение конкурентоспособности животноводства я задачи кадрового обеспечения (1-3 яюв)г1?РК г) / п. Быково, Московская обл.- С. 127-128.

X Богдавова Н.В. Автвсвермалъвые антитела я преяатвльяая выживаемость у коров, обработанных несколько раз антигенами жнвчиков. Ц Повышение конкурентоспособности животноводства в задачи - кадровой) - обеспечения (1-4 июня 1999 г) /п. Быково, Московская обл.- С. 56-57. -