Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иммунохимическое изучение деструктивных процессов в нервной ткани при различной нервной патологии

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Абрамова, Оксана Сергеевна

Введение

Глава

Обзор литературы

1.1. Краткая история изучения аутоантител к нервной ткани

1.2. Роль и значение "естественных" аутоантител

1.3.1 Изучение аутоантител при наркологических заболеваниях

1.3.2 Болезнь Паркинсона

1.3.3 Эпилепсия 19 1.3.4. Рассеянный склероз 22 1.3.5 Боковой амиотрофический склероз

1.3.6. Травматическая болезнь головного мозга

1.3.7. Шизофрения 34 1.4 Заключение

Глава

Материалы и методы

2.1 Экспериментальный материал

2.2 Приготовление тканевых экстрактов и фракций из солюбилизированных мембран

2.3. Выделение и очистка белка 40 2.3.1 Выделение нейроростового фактора HB-GAM 40 2.3.2. Выделение белка SlOOb

2.4. Диск-электрофорез

2.4.1. Диск-электрофорез в полиакриломидном геле

2.4.2. Диск-электрофорез в ПААГ, содержащем додецил сульфат натрия

2.5. Иммунизация животных

2.6. Перекрестный иммуноэлектрофорез

2.7.Твердофазный иммуноферментный анализ

2.7.1. Твердофазный иммуноферментный анализ антигена

2.7.2. Твердофазный иммуноферментный анализ антител

Глава Выделение, идентификация и разработка метода очистки нейроспецифического кислого протеина как одного из аутоантител при деструктивных процессах.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Иммунохимическое изучение деструктивных процессов в нервной ткани при различной нервной патологии"

Согласно теории нобелевского лауреата Нильса Ерне иммунная система продуцирует в норме антитела не только к чужеродным, но и ко всем собственным антигенам организма, т.е. аутоантитела (а-АТ). Описано более сотни «естественных» а-АТ к различным антигенным структурам. На продукции а-АТ специализируются лимфоциты с поверхностным антигеном CD5, которые составляют 10-30 % всех В-клеток.

Согласно гипотезе Коэна, аутореактивные лимфоциты и а-АТ создают образ биохимической индивидуальности организма. Исходя из этого, можно сделать предположение о том, что указанные АГ-связывающие структуры не только «зеркально» отражают организм, но и представляют собою очень тонкую и всеохватывающую систему регуляции гомеостаза на молекулярном уровне, которая координирует различные процессы, взаимодействуя с соответствующими АГ-мишенями.

Ранее считали, что головной мозг является иммунопривилегированным «забарьерным» органом и в норме а-АТ к нему не продуцируются. А нормально функционирующий гемато-энцефалический барьер (ГЭБ) является непреодолимым для них препятствием. Однако в последние годы было показано, что ткань мозга не является исключением и в норме в сыворотке крови присутствует определенный уровень а-АТ к нейроантигенам, причем эти а-АТ по не вполне понятным механизмам проникают к своим мишеням практически через все гисто-гематические барьеры.

За последние годы получено много экспериментальных данных, свидетельствующих о многообразных нарушениях клеточного и гуморального иммунитета при различных нервных и психических заболеваниях (Чехонин, 1989; Dahlstrom et al., 1990; Bernard et al., 1992; Zeballos, McPherson, 1992; Amital, Shoenfeld, 1993; Banki etal., 1994; Banati etal., 1995, Vernino s, 2000), нарушений, которые можно было бы охарактеризовать как специфические для того или иного заболевания нервной системы. Однако аутоантител (а-АТ) определенной направленности, являющихся как бы «маркерами» этих заболеваний до сих пор не получено. Возможно, такие антигены-мишени существуют, однако наряду с этим происходит неспецифическая активация аутоиммунных реакций к широкому комплексу антигенов нервной ткани, что крайне затрудняет поиск тех, очевидно минорных антигенных компонентов нервной ткани, измененная реактивность к которым определяет нозологическую форму (за исключением, пожалуй, лишь миастении гравис, основным патогенетическим фактором которой является повышение титров а-АТ к ацетилхолиновым рецепторам (Bartoccioni et al., 1991). При этом а-АТ к нейроантигенам не только «свидетели», но и активные участники патологического процесса, уровень их часто коррелируют с клинической картиной заболевания ( Чехонин, 1989, Коржижановский с соавт., 1997, Amital,Shoenfeld, 1993, Ghirardello et al., 2000)

К настоящему времени получены (Banati et al., 1995, Vamino et al., 2000) убедительные доказательства того, что иммунная система продуцирует антитела не только к чужеродным, но и к собственным антигенам (АГ) организма, т.е. аутоантитела. Таким образом, естественные а-АТ являются нормальными физиологическими компонентами организма, наделенными множеством различных функций (Erne, 1974, Jonson et ai., 1986, Полетаев, 1987). В свете этого пересматриваются прежние взгляды на «иммунопривилегированность» ткани мозга (Shoenfeld,1993) исследование аутоантител к белкам ткани мозга в норме и при патологии, а также их физиологической или патофизиологической значимости приобретает особую актуальность (Штарк, 1995).

Цель и задачи исследования

Целью данной работы являлось исследование уровней аутоантител к ряду нейроспецифических белков и создание иммуноферментной тест-системы, с помощью которой возможно оценить степень аутоиммунной агрессии к антигенам нервной ткани, что могло бы более объективно характеризовать тяжесть состояния больных и найти свое отражение в проводимой терапии. В соответствии с этим были поставлены следующие задачи: f>

1. Выделить из ткани мозга человека белковый антиген с выраженными иммуногенными свойствами и высокой степенью нейроспецифичности.

2. Идентифицировать данный антиген и изучить его основные физико-химические свойства.

3. Разработать иммуноферментные тест-системы для определения как самого данного антигена, так и антител к нему.

4. Провести широкую апробацию разработанной тест-системы для определения а-АТ к полученному антигену в клинической практике. Провести тестирование коллекций образцов сыворотки пациентов с различными НПЗ.

5. Для комплексного изучения аутоиммунных изменений, происходящих при НПЗ, разработать тест-системы для определения а-АТ к ряду известных белковых антигенов нервной ткани. Провести комплексное изучение результатов тестирования образцов сыворотки пациентов с различными НПЗ с помощью созданных тест-систем.

Научная новизна

В ткани мозга человека впервые идентифицирован ранее неописанный белок, что было подтверждено результатами изучения его аминокислотной последовательности. Белку было дано название нейроспецифический кислый протеин (НКП). Разработан метод его очистки, позволяющий получать препарат данного белка с высокой степенью чистоты. Получены моноспецифические антисыворотки к НКП. Изучены его основные физико-химичесие свойства. Установлена клеточная локализация НКП. Разработаны иммуноферментные тест-системы как для определения самого НКП, так и антител к нему. Проведена предварительная апробация разработанной тест-системы для определения антител к НКП на клиническом материале в комплексе с тест-системами для определения антител к белкам нервной ткани S100b и HB-GAM (р18). Проанализированы характер и специфические особенности изменений титров а-АТ к указанным белкам при различной патологии нервной системы.

Практическая значимость работы

Приготовлен стандарт высокоочищенного препарата НКП, к которому получены моноспецифические антисыворотки. Показана возможность применения разработанной иммуноферментной тест-системы для определения антител к НКП в клинике для оценки степени аутоиммунной агрессии с направленностью к нейроантигенам, а также контроля проводимой терапии. Предложен новый способ диагностики опийной наркомании, основанный на комплексном определении сывороточного уровня а-АТ к нейроростовому фактору HB-GAM (р18) и НКП, с помощью которого представляется возможным выявлять контингент лиц, находящихся в ремиссии (до 6 мес.).

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Абрамова, Оксана Сергеевна

Выводы

1. Под иммунохимическим контролем образцов сыворотки пациентов с черепно-мозговой травмой (период ранней компенсации) из экстракта ткани мозга человека получен белок (НКП - нейроспецифический кислый протеин), изучение аминокислотной последовательности которого позволило сделать вывод о том, что он является неописанным ранее.

2. Разработана схема очистки НКП из экстракта ткани мозга человека, включающая ионообменную и аффиннуюхроматографии, изохроматофокусиро-вание и препаративный диск-электрофорез. Реализация данной схемы очистки позволяет получить препарат НКП более 90% чистоты.

3. Разработана иммуноферментная тест-система для определения НКП в различных жидкостях. Тест-система была охарактеризована как специфичная, точная и надежная. Предел чувствительности системы составил 1,5 нг/мл. Установлено, что НКП является видонеспецифическим белком, содержание которого в ткани мозга человека, бька и крысы состовляет соответственно: 3200±1670 нг\г, 740+70 нг\г, 375±60 нг\г. Кроме ткани мозга;данный белок не был выявлен в каких-либо органах и тканях человека, быка и крысы,

4. НКП является сложным белком с углеводным компонентом, электрофорети-ческой подвижностью ос2-глобулинов, состоит из однойсубъединицы с молекулярной массой 67±3 «Да, обладает выраженными иммуногенными свойствами.

5. Разработаны иммуноферментные тест-системы для определения в биологических жидкостях антител к НКП, белкам нервной ткани S100b и HB-GAM (р 18), которые были охарактеризованы как специфичные, точные и надежные. Сыворотка здоровых людей содержит определенный уровень аутоан-тител к данным белкам, что было установлено с помощью данных тест-систем и подтверждено результатами диск-электрофореза с последущим иммунопроявлением.

6. С помощью разработанных тест-систем проанализированы образцы сыворотки пациентов с различными нервно-психическими заболеваниями.

6.1. Показана возможность применения созданных тест-систем для определения антител к НКП в клинике для оценки аутоиммунныхпроцессов к ан тигенам нервной ткани.

6.2. Для опийной наркомании характерно достоверное повышение уровней аутоантител к НКП и S100b, сочетающееся со снижением аутоантител к HB-GAM (р 18). Данные отличия становятся характерными для таких пациентов спустя 6 мес. после начала регулярного приема опиатов,и сохраняются не менее 6 мес. гТосле прекращения их приема. Аналогичные изменения иммунореактивности наблюдаюлись при тяжелой форме болезни Паркинсона.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Абрамова, Оксана Сергеевна, Москва

1. Беляев С.В., Куприяненко Т.И., Лысова Н.П., Полетаев А.Б. Физико-химические, антигенные и некоторые ферментативные свойства белков S100. // Биохимия. -1981. Т. 46. - N 12. - С. 2193-2201.

2. Березин В. А. Специфические белки нервной ткани. // "Наукова думка", 1990.

3. Бредбери М. Концепция гемато-энцефалического барьера. // М., "Мир", 1983.

4. Бурбаева Г.Ш. Нейроспецифические белки мозга человека в норме и при психической патологии: Автореф.дис. д-ра биол.наук. М.,1989. - 31 с.

5. Вартанян М.Е., Коляскина Г.И. Новые подходы к изучению иммуногистологии первичной шизофрении. // Иммунология нервных и психических заболеваний. -М„ 1974. С. 131-132.

6. Васильева Т.Г., Алексеева Л.А., Вальберг А.Ю. Клиника, диагностика и комплексное лечение больных с черепномозговой травмой. Л., 1984. - С. 53-59.

7. Викторов И.В., Бунина Т.Л. О цитотоксическом влиянии сыворотки крови больных боковым амиотрофическим склерозом на мотонейроны спинного мозга в культуре ткани. // Журн. невропат, и психиат. им. С.С. Корсакова. 1979. - Т.79 , N 2,- С.169-171.

8. Вилков Г.А., Коваленко В., Миноранская А.П. и др. Тестирование нейроцитоток-сической активности биологических жидкостей больных нервно-психическими заболеваниями. // Тез.докл. 1-го съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. - С. 79-80.

9. Волошин П.В., Коняева Н.И., Мищенко Т.С. и др. Определение аутоантител к белку S-100 и энцефалитогенному белку в сыворотке крови больных энцефалопатией различной этиологии. // Тез.докл. 1-го съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. - С. 88-89.

10. Гамалея Н.Б. Иммунологическая диагностика опийной наркомании и ее осложнений. // Вопр. наркологии. 1995. - N 2. - С. 36-44.

11. Ганнушкина И.В. Сравнительная характеристика цитотоксических свойств сывороток неврологических больных при их внутрицеребральном введении животным. // Иммунология нервных и психических заболеваний. М., 1974. - С. 316-319.

12. Давыдова Т.В., Фомина В.Г. Антитела к катехоламинам и серотонину при алкогольной интоксикации и у животных с различной предрасположенностью к развитию экспериментального алкоголизма. // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1987. - N 12. - С. 672-673.

13. Дамбинова С.А. Нейрорецепторы глутамата. JL: Наука, 1989. - 145 с.

14. Дарбре А. Практическая химия белка. // М., "Мир", 1989.

15. Детерман Г. Гель-хроматография. //М., "Мир", 1971.

16. Детлаев И.Э. Реактивность организма больных с черепномозговой травмой: Автореф. дис. .д-ра мед.наук. Рига, 1983. - 40 с.

17. Домашнева И.В., Цыганков Б.Д. В-клеточный иммунитет при фибриальной шизофрении (функциональные особенности В-лимфоцитов). // Современные методы биологической терапии психических заболеваний памяти Г.Я. Авруцкого: Тез.конф. -М., 1994. С. 22.

18. Ерениев С.И., Степанов С.С. Содержание сывороточных антител к антигенам экстракта мозга при аудиогенных судорожных стимуляциях. // Стресс и иммунитет: Тез.докл. Всесоюз. конф. Л., 1989. - С. 16.

19. Изыкенова Г.А., Сиренко В.В., Дамбинова С.А. Выявление аугоантител к далар-гин-связывающим белкам в крови больных наркоманией. // Вопр. наркологии. -1995. -N1.-C. 45-49.

20. Калашников В.В. Раково-эмбриональные белки человека. // Дисс. докт. мед. наук. -Москва, 1986.

21. Клюшник Т.П. Нейротрофические факторы как возможное эффекторное звено при терапии с использованием фетальных клеток и тканей. // В сб.: Трансплантация фетальных тканей и клеток человека. Под ред. Г.Т. Сухих, А.Н. Ерина. М., "Полинор-М", 1996.

22. Ковалев И.Е., Полевая О.Ю. Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным химическим соединениям. //М., "Наука", 1985.

23. Козловский А.Д. Определение антител к структурным элементам нейронов у больных боковым амиотрофическим склерозом и их родственников. // Здравоохр. Туркменистана. 1989. -N2. - С. 17-18.

24. Коляскина Г.И., Бурбаева Г.Ш. Современные подходы к изучению иммунитета при шизофрении. // Вестн. АМН СССР. 1979. - N 7. - С.76-84.

25. Команденко Н.И., Алифирова В.М. Патогенетические механизмы развития экспериментального аллергического полирадиколоневрита. // Журн. невропат, и психи-ат. им. С.С. Корсакова 1995. - N 2. - С. 41-45.

26. Кроль Д. Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. // М., "Мир", 1977. С. 78-88.

27. Крыжановский Г.Н. Детерминантные структуры в патологии нервной системы: Генераторные механизмы нейропатологических синдромов. М.: Медицина, 1980. - 190 с.

28. Крыжановский Г.Н., Евсеев В. А., Магаева С.В. и др. //Журн. невропат, и психиат. им. С.С. Корсакова. 1991. - N 11. - С. 470-472.

29. Крыжановский Г.Н., Маньковский Н.Б., Карабаньин И.Н. Антитела к серотонину и их возможная роль при паркинсонизме. //Журн. невропат, и психиат. им. С.С. Корсакова. 1994. - N 5. - С. 21-26.

30. Кукк Э.Л., Уйбо P.M. Аутоантитела к энзимам ключ к более специфической диагностике аутоиммунных заболеваний. // Терапевт, архив. - 1995. - N 4. - С. 62-64.

31. Кумарина Г.Л. Клиническое значение иммунобиохимических показателей в патогенезе и диагностике паркинсонизма: Автореф.дис. . канд.мед.наук. М., 1988. -21 с.

32. Кущ А.А., Белявский А.В., Шумай Е.П., Тугизов Ш.М., Овчаренко А.В. // Докл. АН СССР. 1988. - Т. 300. - N 4. - С. 968-971.

33. Кэтти Д. и Райкундалия Ч. Иммунодиффузия в геле, иммуноэлектрофорез и методы иммунохимического окрашивания. IIВ кн.: Антитела. Методы. Д. Кэтти (ред.). М„ "Мир", 1991. - Т. 1. - С. 230-237.

34. Лебедев К.А., Понякина И.Д. // Итоги науки и техники. 1988. - Т. 22: Иммунология. -С. 147-170.

35. ЛисяныйН.И. //Нейрохирургия. Киев, 1989. - Вып.22. - С. 13-16.

36. Магаева С.В., Атаджанов М.А., Башарова Л.А., Ветрилэ Л.А. Моделирование пар-кинсонического синдрома с помощью антител к дофамину. // Нарушение механизмов регуляции и их коррекция: Тез.докл. 4-го Всесоюз.съезда патофизиологов. -М., 1989. С. 34.

37. Морозов Г.В., Боголепов Н.Н. Морфинизм. М., Медицина, 1984.

38. Несвижский Ю.В., Воробьев А.А. Факторы изменчивости уровней аутоантител в человеческой популяции. // Вестн. Рос. Акад. Мед. наук. 1996. - N 8. - С. 3-9.

39. Никифорова О.А. Некоторые показатели иммунного статуса при шизофрении. // Стресс и иммунитет: Тез. докл. Всесоюз. конф. Л., 1989. - С. 244.

40. Осетров А.С. Социальная адаптация больных с последствиями черепномозговой травмы. // Журн. невропат, и психиат. им. С.С. Корсакова. 1994. - N 3. - С. 74-77.

41. Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. // М., "Наука", 1985.

42. Петров Р.В. Иммунология. //М., "Медицина", 1987.

43. Пивоварова Л.П., Кузнецов С.И., Тарасов М.И. и др. Аутоиммунные реакции у пострадавших с черепномозговой травмой. // Тез. докл. 1-го съезда иммунологов России. Новосибирск, 1992. - С. 363-364.

44. Полетаев А.Б. Мозгоспецифические белки группы S-100, их эндогенные акцепторы и лиганды и регуляция метаболических процессов в нервной ткани: Дисс. . д-ра мед.наук. М., 1987.

45. Полетаев А.Б. Регуляторные аутоангитела. // В сб. Моноклональные антитела в нейробиологии. (Ред. М.Б. Штарк, М.В. Старостина), Новосибирск, "Офсет", 1995. - С. 36-45.

46. Потапов А.А. Патогенез и дифференцированное лечение очаговых и диффузных повреждений головного мозга: Автореф.дис. . д-ра мед.наук. Киев, 1989. - 42 с.

47. Ройт А. Основы иммунологии. //М., "Мир", 1991.

48. Семенов С.Ф., Семенова К. А. Иммунобиологические основы патогенеза нервных и психических заболеваний. // Ташкент, "Медицина", 1984.

49. Туркова Я. Аффинная хроматография. IIМ. "Мир", 1978.

50. Турсунова Ю.Д., Клюшник Т.П., Бурбаева Г.Ш. Сравнительная характеристика уровней водорастворимого глиофибриллярного белка в мозге человека в норме и при шизофрении. // Журн. Невропат. Психиат. им. С.С. Корсакова. 1989. - N 5. -С. 105-108.

51. Хиден X., Ланге П.В. Синтез кислых белков в нервных клетках при формировании нового поведения. // Журн. эволюц. биох. и физиол. 1969. - Т. 5. - N 12. - С. 145-157.

52. Чекнев С.Б., Ашманова Я.Г., Бабаева Е.Е. Бласгтрансформация лимфоцитов и активность естественных киллеров в присутствии гамма-глобулинов in vitro. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1994. - N 12. - С. 625-630

53. Крехнов Б.В. Теор. и прикладн. аспекты совр. методов молек. диагностики. // М.,1990. С. 131-140. - Деп. в ВИНИТИ 13.02.90, N 816-В90.

54. Чехонин В.П. Специфические белки нервной ткани человека и животных (идентификация, выделение, физико-химическая характеристика и клинико-лабораторные исследования). // Докт. дисс., М., 1989.

55. Шанина Н.А., Свейката А.П., Завалишин И.А. Анализ сывороточных антител к антигенам нервной ткани у больных боковым амиотрофическим склерозом. // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1993. -N2. - С. 169-172.

56. Штарк М.Б. Мозгоспецифические белки и функции нейрона. // М., "Медицина", 1985.-С. 313,319.

57. Штарк М.Б., Старостина М.В. Моноклональные антитела в нейробиологии. -Новосибирск: Офсет, 1995.

58. Шустер А.М., Гололобов Г.В., Квашук О.А., Габибов А.Г. // Докл. АН СССР.1991. Т. 318. - N 5. - С. 1262-1264.

59. Aarli J. A., Fontana A. Immunological aspects of epilepsy. // Epilepsia. 1980. - V.21. - N 5. - P. 451-457.

60. Ahokas A. A psychoneuroimmunological approach to acute psychatric disorders. Helsinki, 1989. - 60 p.

61. Alexander R, Lyte M., Ganguli R., Rabin В. // Fed. Proc. 1986. - V.45. - N 3. - P.31.

62. Amital H., Shoenfeld Y. Autoimmunity and schizophrenia: an epiphenomenon or an etiology? // Israel J. med. sci. 1993. - V.29. - N 9. - P. 593-597.

63. Arnason B.G. Neuroimmunology. // New Engl. J. Med. 1987. - V. 316. - N 7. - P.406-408.

64. Baekkeskov S., Aanstoot H-J., Christgau S., Reetz A, Solimena M., Cascalho M., Folli F., Richter-OUeson H., De Camilli P. // Nature. 1990. - V. 347. - P. 1990.

65. Bahmanyar S., Moreau-Dubois M.C., Brown P., Cathala F. and Gajdusek D.S. Serum antibodies to neurofilament antigens in patients with neurological and other diseases and in healthy controls. II J. Neuroimmunol. 1983. - N 5. - P. 191-196.

66. Banati R.B., Germann J., Kellner M. Antibodies against microglia/ brain macrophages in the CSF of a patient with acute amyotrophic lateral sclerosis and presenile dementia. // Clin. Neuropathol. 1995. - V.14. -N4. - P. 197-200.

67. Banki K., Colombo E., Sia F. Oligodendrocyte-specific expression and autoantigenicity of transaldolase in multiple sclerosis. // J. Exp. Med. 1994. - V. 180. - N 5. - P. 16491663.

68. Bartoccioni E., Scuderi F., Provenzano C. et al. Humoral autoimmunity in myasthenia gravis. // Acta Med. Rom. 1991. - V. 29. - N 1-2. - P. 161-169.

69. Becker Y. Multiple sclerosis autoantibodies and antibodies in AIDS may deplete a brain peptide hormone. //Med. Hypotheses. 1988. - V. 26. - N 2. - P. 145-147.

70. Brunello N. New insights into the biology of schizophrenia through the mechanism of action clozapine. // Neuropsychopharmacology. 1995. - V. 13. - N 3. - P. 177-213.

71. Casali P., Notkins A.L. // Immunol. Today. 1989. - V. 10. - N11. - P. 364-368.

72. Chou Y.K., Bourdette D.N., Offiier H. et al. Frequency of T cells specific for myelin basic protein and myelin proteolipid protein in blood and cerebrospinal fluid in multiple sclerosis. // J. Neuroimmunol. 1992. - V. 38. - N 1-2. - P. 105-114.

73. Clementi F., Tronconi B.C., Fumigalli G., Pedretti D., Brigonzi S. // Pharmacol. Res. Comm. 1980. - V. 12. - N 6. - P. 611-617.

74. Cote J, Simar D, Nucleic Acids Res. !999. Jun 15(27)12, 2529-37.1. HO

75. Coutinho A. Immune or autoimmune? // Clin. Exp. Immunol. 1995. - V. 101. - N 1, Suppl. - P. 3-5.

76. Dahlstrom A., Wigander A., Lundmark K. et al. Investigations on auto-antibodies in Alzheimer's and Parkinson's diseases, using defined neuronal cultures. // J. Neural. Trans-miss. 1990, Suppl. 29. - P. 195-206.

77. Davis B.J. Disc-electrophoresis. Method and application to human serum proteins. // Ann N.Y. Acad. Sci. 1964. - V. 121. - P. 404-412.

78. DeLisi L.E., Goodman S., Neckers L.M., Wyatt R.J. //Biol. Psychat. 1982. - V.17. -N 9. -P. 1003-1009.

79. Donato R. Perspectives in S100 protein biology. // Cell Calcium. 1991. - N 12. - P. 713726.

80. Eng L.F. Astrocytic responce to injury. // In: P.J. Reier, R.P. Bunge and F.S. Seil (Eds.). Neurology. - 1988. - V. 48, A.R. Liss, New York, N.Y. - P. 247-255.

81. Eng L.F. The glial fibrillary acidic protein: The major protein constituent of glial filaments. // Scand. J. Immunology. 1982. - V. 15, Suppl. 9. - P. 41-51.

82. Eng L.F., Bigbee J.M. Immunohistochemistry of nervous system-specific antigens. // In: Agranoff B.W., Aprison M.H. (Eds.). Advances in Neurochemistiy, Plenum Press, New York. 1978. -V. 3. - P. 43-98.

83. Eng L.F., Lee Y.L., Fukayama G. Isolation of glial fibrillary acidic (GFA) protein from bovine spinal cord. // Trans. Amer. Soc. Neurochem. 1979. - V. 10. - P. 126.

84. Eng L.F., Smith M.E., De Velles Т., Scoff R.P. Recent studies of the glial fibrillary acidic protein. In: Intermediate filaments. // Ann. of the New York Acad, of Sci. 1985. -V. 455. - P. 527-537.

85. Engelhardt J.I., Appel S.H. IgG reactivity in the spinal cord motor cortex in amyotrophic lateral sclerosis. // Arch. Neurol. 1990. - V. 47. - N 11. - P. 1210-1216.

86. Finkelman F. Relationships among antigen presentation, cytokines, immune deviation, and autoimmune disease. // J. Exp. Med. 1995. - V. 182. -N2.-P. 279-282.

87. Firer M., Sirota P., Schild K. Anticardiolipin antibodies are elevated in drug-free, multiply affected families with schizophrenia. // J. Clin. Immunol. 1994. - V. 14. - N 1. - P. 73-78.

88. Fischer В., Schmoll H., Bauer J. Complement Clq and C3 mRNA expression on the frontal cortex of Alzheimer patients. //J. Mol. Med. 1995. - V. 73. - P. 456-471.

89. Forster M.-J., Lai H. Autoimmunity and cognktive disease. // Psychoneuroimmunology, 2nd ed., 709-748. / Eds. R.Ader, N.Cohen// Acad.Press,l991. San Diego a.o.

90. Foster J.W. Possible maternal auto-immune component in the etiology of fetal alcohol syndrome. // Develop. Med. Child Neurol. 1986. - V. 28. - P. 654-656.

91. Fritzler M.J. et al. Antibodies to fibrin bound tissue type plasminogen activator in systemic sclerosis. // J. Rheumatol. 1995. - V. 22. - N 9. - P. 1688-1693.

92. Fusconi M., Cassani F., Ballardini G., Lenzi M., Caselli A., Zauli D. // Fegato. 1988. -V. 34. -N2. - P. 189-201.

93. Ganguli R., Rabin В., Belle S.H. // Biol. Psychiat. 1989. - V. 26. - P. 427-430.

94. Ganguli R., Rabin В., Kelly R. // Interactions among CNS. Neuroendocrine and Immune systems. / Eds. J. Hadden et al./ Rome; Milan: Pythugora Press, 1989. - P.365-384.

95. Ganguli R., Rabin В., Raghu U., Ulrich R.S. // Viruses, Immunity and Mental Disorders (Eds. E.Kurstak et al.) New York; London: Plenem Med. Book Сотр., 1987. - P. 321326.

96. Grimaldi L.M., Martino G., Furlan R. Heterogeneity of antoantibodies in stiff-man syndrome. // Ann. Neurol. 1993. - V. 34. - N 1. - P. 57-64.

97. Habib M., Smith R.G., Alexlanu M.K. et al. Serum immunoglobulins from patients with amyotrophic lateral sclerosis (ALS) kill motoneuron-hybrid cells by apoptosis. // Soc. Neurosci. Abstr. 1994. - V. 20. - Pt 1. - P. 619.

98. Haid A., SuissaM. // In: Methods in Enzymology. Fleischer S. and Fleischer B. (Eds.). -Academic Press, New York, 1983. V. 96. - P. 192.

99. Heath R.G., McCarron K.L., O'Neil C.E. Antiseptal brain antibody in IgG of schizophrenic patients. //Biol. Psychiat. 1989. - V. 25. -N6. - P. 725-733.

100. Hefti F. and Weiner W.J. Nerve Growth Factor and Alzheimer's Disease. // Ann. Neurol. -1986. V. 20.-P. 275-281.

101. Henneberg A.E., Boger P., Dumke H.O. Antibrain antibodies in alcoholic patients. // J. Alcohol. 1993. - V. 28. - N 2. - P. 181-187.

102. Henneberg A.E., Horter S., Ruffert S. Increased prevalence of antibrain antibodies in the sera from schizophrenic patients. // Schizophr. Res. 1994. - V. 14. - N 1. - P. 15-22.

103. Henneberg A. Additional therapies in Parkinson's disease patients: useful tools for the improvement of the quality of life or senseseless loss of resources? // J Neurol 1998 May; 245 Suppl 1 :s23-7

104. Honnorat J., Antoine J.C. Interet de la recherche des autoanticorps antisysteme nerve dans les syndromes paraneoplastiques. // Rev. Med. Int. 1994. - V. 15. - N 2. - P. 124133.

105. Hughes R.A. Pathogenesis of multiple sclerosis. // J. Roy Soc. Med. 1992. - V. 85. - N 7.-P. 375-376.

106. Hyden H. Membrane activity of a brain-specific proteins. // Сотр. Biochem. Physiol. -1980. У. B67. - N 3. - P. 413-422.

107. Ierne N.K. // Ann. Immunol. (Paris). 1974. - V. 125C. - P. 373-389.

108. Igarashi S., TanakaK., Yamazaki M. A case of paraneoplastic cerebellar degeneration-success in early detection of cancer by anti-Purkinje cell antibody. // Rinsho Shinkeigaku. 1992. - V. 32. - N 3. - P. 309-313.

109. Inrelberg R, Carasso R L, Schechtman E, A comparison of dophamine agonists.// Clin Neuropharmacol. 2000 Sep-Oct; 23(5): 262-6.

110. Inuzuka Т., Sato S., Yanagisawa, MIyataka T. Serum antibodies to spinal cord proteins in motor neuron disease. // Neurochem. Res. 1988. - V. 13. - N 11. - P. 1104.

111. Isobe Т., Ishioka N and Okuyama T. Structural relation of two S100 proteins in bovine brain: subunit composition of SI00a protein. // Eur. J. Biochem. 1981. - N 115. - P. 469-474.

112. Jankovic B.D. and Djordjijevic D. Differential appearance of autoantibodies to human brain SI00 protein, neuron specific enolase and myelin basic protein in psychiatric patients. // Int. J. Neurosci. 1991. - V. 60. - P. 119-127.

113. Jankovic J, Parkinson's disease therapy: tailoring choices for ealy and late disesase, young and old patients. //Clin Neuropharmacol. 200 Sep-Oct; 23(5): 252-61.

114. JohnsonK., Connoly J.A., KooyD. //BrainRes. 1986. -V. 385. -N 1. - P. 38-45.

115. Kadiysky D., Zaprianova E., Trendafilova L. Antibodies to gangliosides Gml in patients with multiple sclerosis. // Докл.Бълг. AH. 1992. - T. 45. - N 10. - C. 131-133

116. Kharchenko N.K., Effect of acetalaldehyde on the formation of alcohol depence in animal experiments. // WMJ. 1998 Sep-Oct; 70(5): 122-8. Russia.

117. Kharchenko N.K., Disturbances in catecholamine metabolism during formatiion and development of chronicalcoholism., WMJ. 1998Nov-Des; 70(6) 120-5. Ukrainia.

118. Kligman D. and Marshak D.R. Purification and characterization of a neurite extension factor from bovine brain. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87. 1985. - P. 7136-7139.

119. Knight J.G., Knight A., Menkes D.B., Mullon P.E. Autoantibodies against brain septal region antigens specific to unmedicated schizophrenia? //Biol. Psychiat. 1990. - V. 28. -N 6. - P. 467-474.

120. Roller W.C., Levodopa in the treament of Parkinson's disease. //Neurology 2000; 55 (11 supl 4) Sr-7; disaussion S8-12.

121. Korhuber J., Kaiserauer C.H., Kornhuber A.W., Kornhuber M.E. Alcohol consumption and blood-cerebrospinal fluid barrier dysfunction in man. // Neuroschince Lett. 1987. -V. 79. - P. 218-222.

122. Lassman H. Immune surveillanse of central nervous system. // Clin. Neuropathol. -1992. V.ll. -N5.-P. 262-263.

123. Lawrence, Friedman. Sourse book of substance abuse and addiction. //Williams and Wilkins. A waverly company, 1998.

124. Laurell C.B. Antigen antibody crossed electrophoresis. // Anal. Biochem. 1965. - Y. 10. - P. 358-362.

125. McRae Degueurce A., Gottfries C.-G., Karlsson I., Syenneholm L. Antibodies in the CSF of a Parkinson patient recognizes neurons in rat mesencephalic reguins. // Acta Physiol. Scand. 1986. - V. 126. - N 2. - P. 313-315.

126. Mendel I., Keriero de Rosbo N., Ben-Nun A. A myelin oligodendrosyte glycoprotein peptide induces typical chronic experimental autoimmune encephalomyelitis in H-2b mice. // Eur. J. Immunol. 1995. - V. 25. - N 7. - P. 1951-1959.

127. Comparison of the effects of dopaminergic and serotoenergic activiti in the CNS on the activity of the immune sistem. // Jornal ofNeroimmunology 101; 2 1999, 201-204

128. Moiser R.G., Smith O., Delbono S.H. Effect of als immunoglobulins on calcium currents in hybrid neuroblastoma cells. U Soc. Neurosurg. -1993. V. 19. - N 1. - P. 196.

129. Moore B.W. A soluble protein characteristic of the nervous system. // Biochem. Bio-phys. Res. Commun. 1965. - V. 19. - P. 739-744.

130. Mori Т., Morimoto K., Hayarawa Т., Uschio A., Mogami N., Sekiguchi K. Radioimmunoassay of astroprotein (as astrocyte-specific cerebroprotein) in cerebrospinal fluid and its clinical significance. //Neurol. Med. Chir. (Tokyo). 1978. - V. 18. - P. 25.

131. Mourelatos L., Adler H. //Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1979. - V. 76. - P. 4350-4354.

132. Muller N. Psychoneuroimmunologie psychiatrischer Erkrankungen untersuchungen bei Schizophrenic und affektischen Psychosen. Berlin: Springer, 1995. - 170 S.

133. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labelled antibody. A new method of conjugation. // Histochem. Cytochem. 1974. - V. 22. - P. 1084-1091.

134. Nandy R. Antibodies to brain tissues. // Progr. Brain Res. 1983. - V. 40. - N 2. - P. 437-454.

135. Olanow C.W., Obeso J.A., Pulsatile stimulation of dopamine receptors.//Neurolody. 2000; 55 (11 suppl4): S72-7; ddiscussionS78-81.

136. Ouchterlony О. Diffusion in gel methods for immunological analysis. // Progr. Allerg. -1958.-V. l.-P. 1-78.

137. Pahwa R.N. // Pediat. Infect. Dis. J. 1988. - V. 7. - N 5. - P. 34-36.

138. Panchenko L.F. et all. Metabolism of enkepholins in vavious functional and pathological states of the body. // Vopr. Med. Kgim. 1999 Jul-Aug; 45(4): 277-89.

139. Paul S„ Said S.I. //Life Sci. 1988. - V. 43. -N 13. - P. 1079-1084.

140. Sudakov S.K., Positire and negatire reinforcement. Its correction by narcotics. //Vestn. Ross Akad. Med. Nauk. 1997; (12)52-6.

141. Qu Z.P. Auto-cholinergic synapse dysfunction in patients with generalized epileptic seizures. // Chung hua shen ching shen ко tsa chih. 1991. - V. 24. - N 3. - P. 160-189.

142. Raulo E., Julkunen I., Merenmies J., Pihlaskari R. and Rauvala H. Secretion and Biological Activities of Heparin-binding Growth-associated Molecule. // J. Biol. Chem. -1992. V. 267. - N 16. - P. 11408-11416.

143. Rauvala H. and Pihlaskari R. Isolation and Some Characteristics of an Adhesive Factor of Brain That Enhances Neurite Outgrowth in Central Neurons. // J. Biol. Chem. 1987,-V. 262. - N 34. - P. 16625-16635.

144. Rauvala H. Heparin-binding Proteins of Brain that Regulate Axon Growth. // In book: Institute of Biotechnology University of Helsinki 1991-1992 (Ed. M. Saarma). Helsinki, 1992. - P. 74-81.

145. Roberts M., Willison H., Vincent A. Serum factor in Miller-Fisher variant of Guillain-Barre syndrome and neurotransmitter release. // Lancet. 1994. - N 8895. - P. 454-455.

146. Rudin D.O. The Choroid plexus snd system disease in mental iliness. I. A new brain attack mechanism via the second blood-brain barrier. // Biol. Psychiat. 1980. - V. 15. - N 4. - P. 517-539.

147. Sandyk R., Iacono R.P., Bamford C.R The hypothalamus in Parkinson disease. // Ital. J. Neurol. Sci. 1987. - V. 8. - N 3. - P. 227-234.

148. Sante-Marie G. A paraffin embedding technique for studies emplosing immunofluorescence. //Physicochem. Cytochem. 1962. - V. 10. - P. 250-256.

149. Saoudi A., Simmonds S., Huitinga I. Prevention of experimental allergic encephalomyelitis in rats by targeting autoantigen to В cells. // J. Exp. Med. -1995. V. 182. - N 2. - P. 335-344.

150. Saresella M., Grope A., Speciale L. Evidence for a missed signal to the CD8+ in CSF of multiple sclerosis patients. // Ital. J. Neurol. Sci. -1995. V. 16. - N 7. - P. 479-483.

151. Schwyzer R.U. Multiple sclerosis. Prevention of serious illness vision of a desired future for newly ascertained patients. // Med. Hypotheses. - 1992. - V. 37. - N 2. - P. 115118.

152. Selinfreund R.H., Borger S.W., Pledger W.J. and Van Eldik L.J. Neurotrophic protein SlOOb stimulates glial cell proliferation. II Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88. 1991. - P. 3554-3558.

153. Sirota P. Is schizophrenia an autoimmune disease ? // Isr. J. Med. Sci. 1990. - V. 26. -P. 694-697.

154. Steck A. J. Auto-antibodies in neuroligical diseases. // Acta Neurol. Belg. -1994. V. 94. -N2.-P. 116-119.

155. Steinberg A.D., Krieg A.M., Gourley M.F., Klinman D.M. // Immunol. Rev. 1990. -V. 118. - P. 129-163.

156. Stelzig Y, Hochhaus W, Gall V, Henneberg A.// Laryngorhinnootologie 1999 Oct; 78(10):544-51

157. Tan FK, Arnett FC. Genetic Factoris in the etiology of systemic sclerosis and Raynaud phenomenon. // Curr Opin Rheumatol. 2000 Nov; 12(6):511-9.

158. ThoenenH. The changing scene of neurotrophic factors. // TINS. 1991. - V. 14. - N 5. -P. 165-170.

159. Vadot E. // Biochimie. 1987. - V. 69. - N 4. - P. 371-377.

160. Vernino S, Low PA, Fealey RD, Stenvard JD, Farrugia G, Lennon VA. Autoantibodies to ganglionic acetylcholine reseptors in autoimmune autonomic neuropathies. // N Engl J Med 2000 Sep 21; 343 (12):847-55

161. Voller A., Bidwell D.E., Bartlett A. Enzyme immunoassays in diagnostic medcine: Theory and practice. //Bull. WHO. 1976. - V. 53. - P. 55-65.

162. Weilbach F.X., Hartung H.P., Physical trauma and multiple salerosis.// Nervenairt. 1997 Dec; 68 (12); 940-4.

163. Weng N.P., Yu-Lee L.Y., Sanz I. Structure and specificities of anti-ganglioside autoantibodies associated with motor neuronopathies. // J. Immunol. 1992. - V. 149. - N 7. -P. 2518-2529.

164. Willison H.J., Chancellor A.M., Paterson G. Antiglycolipid antibodies and paraproteins in motor neuron disease. // J. Neurol. Sci. 1993. - V. 114. - N 2. - P. 209-215.

165. Yoshino H. Immunological aspects of amyotrophic lateral sclerosis. // Nippon Rinsho. -1994. V. 52. - N 11. - P. 2984-2989.