Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иммунно-физиологическое состояние свиноматок и поросят при введении в организм соединений селена

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Иммунно-физиологическое состояние свиноматок и поросят при введении в организм соединений селена"

На правах рукописи

Старостина Надежда Сергеевна

Иммунно-физнологическое состояние свиноматок и поросят при введении в организм соединений селена

03.00.13 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Чебоксары 2005

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Пензенская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Боряев Геннадий Иванович

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Сергеева Валентина Ефремовна

кандидат ветеринарных наук, доцент Федянина Ирина Анатольевна

Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

Защита диссертации состоится марта 2005 г. в /О часов на заседании диссертационного совета К. 212.300.01 в ГОУ ВПО «Чувашский государственный педагогический университет им. И.Я.Яковлева» (428000, г. Чебоксары, ул. К. Маркса, 38, ЧГПУ)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО «ЧГПУ им. И Я. Яковлева»

Автореферат разослан /р февраля 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета канд. биол. наук, доцент

Александрова Л.А.

!.Общая характеристика работы

Я* 433*1 г

Актуальность темы исследования. Интенсивные технологии выращивания свиней предполагают иммунокоррекцию метаболических процессов в организме с целью устранения иммунодефицитных состояний и уменьшения негативных последствий различных стрессов. В силу биологической специфики у поросят к моменту рождения развитие иммунной системы не достигает полной функциональной зрелости. Поэтому в первые дни жизни лишь молозиво обеспечивает поддержание иммунного гомеостаза, и главную роль в этом играют иммуноглобулины. В связи с этим большой интерес проявляется к вопросам иммунно-физиологического состояния организма молодняка свиней, особенно в раннем постнатальном онтогенезе. Изучение закономерностей становления иммунных функций в ранний период обусловлено тем, что из-за неполноценного иммунного ответа и нарушения механизмов адаптации в постнатальном онтогенезе происходит значительная потеря поголовья. В свиноводстве около 80% от общего падежа приходится именно на ранний период жизни.

Поэтому на этом критическом этапе следует считать наиболее целесообразным поиск способов повышения иммунно-физиологического статуса молодняка с помощью иммуномодулирующих препаратов.

В качестве иммунокорректоров, обладающих одновременно адаптоген-ными и антиоксидантными свойствами, выступают соединения селена. Исследованиями многих ученых установлено, что иммуностимулирующее действие этих соединений реализуется через их антирадикальные свойства, способность регулировать интенсивность процессов свободнорадикального окисления в организме, защищая мембраны лимфоидных и других клеток, а также их структур от повреждающего действия свободных радикалов (Г.И. Боряев 2000, К.М. Вго\уп, ДА. АгЛуг, 2001).

В качестве донора селена в основном применяются неорганические соединения - селенит и селенат натрия и др. (ТоЪёП й а!., 1995,8.8. вхуескег й а1., Р.Т. А\уас1еЬ е1 а!., 1998, Н.М. Машковцев, 2001). Однако высокая токсичность всех неорганических селенсодержащих соединений является главным недостатком, препятствующим широкому использованию их в практике животноводства. Альтернативой селениту натрия может служить новое отечественное селенорганическое гетероциклическое соединение 9-фенил-симметричный ок-тагидроселеноксантен (селенопиран, СП-1), синтезированный А.Ф. Блинохва-товым (1983). Селенопиран отличается низкой токсичностью, жирорастворимо-стью, отсутствием любых проявлений генотоксичности и способностью влиять на развитие иммунных реакций организма молодняка сельскохозяйственных животных (В.А. Галочкин, 1998, Ю.Н. Федоров, Г.И. Боряев, А.Ф. Блинохватов, 1999, М.Н. Невитов, 1999).

Цель исследований - изучение особенностей иммунно-физиологической реакции организма свиноматок и поросят на воздействие

РОС. НАЦИОНАЛЬНАЯ »ЙГ>АИОТГ.КА С. Петербург

селенита натрия и селенопирана. Задачи исследований:

1. Определить концентрацию селена в молозиве подсосных свиноматок и в сыворотке крови полученных от них поросят при применении селенита натрия и селенопирана.

2. Выявить взаимосвязь между уровнем селена в молозиве свиноматок и иммунно-физиологическим состоянием поросят-сосунов.

3. Изучить влияние неорганического и органического соединений селена на клинико-физиологические и ростовые показатели поросят.

4. Оценить адаптогенные свойства испытуемых соединений селена в экспереметальных условиях.

Научная новизна. Впервые установлены онтогенетические закономерности содержания селена и иммуноглобулинов О-, М-, А- классов в молозиве свиноматок и в сыворотке крови поросят при назначение им селенита натрия и селенопирана. Изучены особенности влияния неорганического и органического соединений селена на Т-клеточное звено иммунитета, фагоцитарную активность нейтрофилов и антителообразующую функцию крови поросят. Экспериментально доказано, что иммунно-физиологические эффекты организма свиней при использовании селенопирана были рельефнее, чем таковые в условиях применения селенита натрия.

Практическая ценность. Проведена комплексная оценка физиологической целесообразности назначения свиномаггкам и полученным от них поросятам соединений селена и разработан способ повышения иммунобиологической реактивности их организма.

Реализация результатов исследования. Научные разработки и положения работы используются в производственной деятельности свиноводческих предприятий Пензенской области и в учебном процессе ФГОУ ВПО «Пензенская государственная сельскохозяйственная академия».

Работа выполнена в рамках Государственного контракта №43.050.11.1538 по ФЦНТП «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники на 2002-2006 гг.».

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы доложены на научной конференции молодых ученых, аспирантов и студентов (Пенза, 2002); международной научно-практической конференции «Агропромышленный комплекс: состояние, проблемы, перспективы» (Пенза, 2003); расширенном заседании кафедры биологии животных ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА».

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Между концентрацией селена в молозиве свиноматок и иммунно-физиологическими реакциями у поросят в раннем постнатальном онтогенезе существует причинно-следственная связь, обусловленная применением неорганического и органического соединений селена.

2. Введение супоросным свиноматкам селенита натрия и селенопирана повышает уровень иммуноглобулинов в-, М-классов в молозиве, что сопровождается адекватными иммунно-физиологическими эффектами полученных от

них поросят.

3. Селенопиран стимулирует гуморальное и клеточное звенья иммунной системы поросят и одновременно проявляет протекторный эффект по отношению к Т-лимфоцитам за счет реализации иммуномодулирующих и антиокси-дантных свойств.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 3 работы.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 103 страницах компьютерного текста, содержит 16 таблиц и 10 рисунков. Список литературы включает 133 источника, в том числе 91 зарубежный.

Работа включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждения результатов исследований, выводы, практические предложения, список литературы, приложения.

2. Собственные исследования 2.1. Материалы и методы исследований

Для решения поставленных задач в 2002-2003 гг. были проведены две серии научно-производственных опытов на супоросных свиноматках крупной белой породы и их потомстве, а также модельный эксперимент на мышах линии АбпЬ.

Эксперименты проведены на свиноферме учебно-опытного хозяйства и в виварии Пензенской ГСХА.

В первой серии экспериментов были сформированы пять групп супоросных свиноматок по методу пар-аналогов по 4 головы в каждой. Одна из групп служила контролем, четыре другие были опытными. За 14 дней до предполагаемого опороса свиноматкам опытных групп вводили внутримышечно селен-содержащие соединения (селенопиран, селенит натрия) в следующих дозах: первой опытной группе - стерильный водный раствор селенита натрия в дозе 0,1 мг Бе на 1 кг живой массы; второй - селенит натрия в дозе 0,05 мг Бе/кг живой массы; третьей - масляный раствор селенопирана в дозе 0,1 мг Бе на 1 кг живой массы; четвертой - селенопиран в дозе 0,05 мг Бе на 1 кг живой массы. Контрольной группе вводили стерильный физиологический раствор.

Все животные содержались в одинаковых условиях. Образцы крови для исследований брали у поросят на 3, 7, 28 и 45 сутки из хвостовой артерии. Пробы молока и молозива свиноматок отбирали в момент опороса и далее в течение пяти дней.

Во второй серии экспериментов во время отъема были сформированы пять групп поросят по шесть голов в каждой. Группы формировали из молодняка с живой массой, соответствующей средним значениям по группе. Препараты селена были введены поросятам в тех же дозах и по той же схеме, как и свиноматкам, соответственно группам. Образцы крови для исследований брались во время отъема, на 48, 52, 73, 105 сутки жизни (или на 3, 7, 28 и 60 сутки после отъема) из хвостовой артерии (схема экспериментов).

Контроль (физиологический раствор)

Контроль (физиологический раствор)

Первая опытная группа(Ыа2&еОз в дозе 0,1 мг/!5е кг массы тела)

Первая опытная груплаО^агвеОз в дозе 0,1 мг/ве кг массы тела)

Схема экспериментов

Опыт первый

Свиноматки за 14 дней до опороса

Вторая опытная группа (МагвеОз в дозе 0,05 мг/ве кг массы тела)

Опыт второй

Поросята-отьемыиш

Вторая опытная группа (Ыа28еОз в дозе 0,05 мг/Бе кг массы тела)

Третья опытная группа (СП-1 в дозе 0,1 мг/8е кг массы тела) Четвертая опытная группа (СП-1 в дозе 0,05 мг/$е кг массы тела)

* < г

Третья опытная группа (СП-1 в дозе 0,1 мг/Бе кг массы тела)

Внедрение научных положений в:

Четвертая опытная группа (СП-1 в дозе 0,05 мг/Бе кг массы тела)

учебный процесс ПГСХА

свиноводческие предприятия Пензенской области

Селенопиран - 9-фенил-сим метр ичный октагндроселеноксантен (СП-1) представляет собой жирорастворимый порошок без запаха с температурой плавления 95-96°С и содержанием селена 24%.

В ходе исследований определялись следующие показатели:

Клинико-физиологические - живая масса; молочность свиноматок; сохранность поросят, температура тела, частота сердечных сокращений и дыхательных движений.

Биохимические - содержание селена в молозиве свиноматок и в сыворотке крови поросят; активность фермента антирадикальной системы защиты глутатионпероксидазы (ГПО); содержание общего белка и глюкозы в сыворотке крови.

Иммунологические - концентрация иммуноглобулинов G-, М- и А- классов в молозиве свиноматок и в сыворотке крови поросят; фагоцитарная активность нейтрофилов (HCT-тест); относительное и абсолютное количество Т-лимфоцитов в периферической крови.

Гематологические - лейкограмма; количество лейкоцитов в 1 литре крови; содержание гемоглобина.

Содержание селена в сыворотке крови определяли флуориметрическим методом в модификации В.А. Тутельяна, С.А. Хотимченко,Н.А. Голубкиной (1995) с использованием флюориметра «Флюорат-02-ЗМ»; содержание общего белка - рефрактометрическим методом; уровень иммуноглобулинов в молозиве свиноматок и сыворотке крови поросят - методом простой радиальной имму-нодиффузии с использованием моноспецифических антисывороток (Mancini G.et al, 1965); фагоцитарную активность нейтрофилов - с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия (HCT); количество Т-лимфоцитов - методом розеткообразования с эритроцитами барана (И.П. Кондрахин и др., 19S5).

Подсчет лейкоцитов производили по общепринятой методике в камере Го-ряева в 100 больших квадратах под малым увеличением микроскопа; определение гемоглобина крови - гемоглобин-цианидным методом (И.П. Кондрахин и др.,1985).

Определение активности глутатионпероксидазы (ГПО) проводилось по методу В.М. Моина (1986).

Клинико-физиологические показатели поросят определялись по общепринятым методикам.

С целью уточнения механизма действия селенопирана на иммунные реакции были проведены модельные эксперименты на мышах линии AsnL. Контрольной группе однократно вводили в перитонеальную полость физиологический раствор, а животным опытных групп - масляный раствор селенопирана в дозах 2,20 и 200 нг/мышь. Всем животным одновременно вводили взвесь эритроцитов барана (2x107 на мышь). На 5 день иммунизации определяли число ан-тителообразующих клеток (АОК) в селезенке и лимфатических узлах. Для выявления влияния селенопирана на экспрессию рецепторов лимфоцитов использовали следующие моноклональные анткгела к антигенам мыши: анти (а) -CD3 (общий антиген Т-лимфоцитов), <x-CD4 (распознают гликопротеин CD4 на тимоцитах и Т-хелперах/индукторах), a-CD8 (на цитотоксических Т-клетках, Т-

s

супрессорах, NK-клетках и тимоцитах), a-CD25 (распознают «-цепь рецептора интерлейкнна-2 на активированных Т- и В- лимфоцитах), a-CD95 (связывают антиген, который относится к семейству фактора некроза опухолей, является сигнальной молекулой апоптоза - запрограммированной гибели клетки). Функциональную активность фагоцитирующих клеток (нейтрофилов) оценивали по их особенности к окислительному метаболизму и фагоцитозу в тесте люминол-зависимой спонтанной и индуцированной зимозаном хемилюминисценции. Анализ проводили на хемилюминографе «Люцифер-Б».

Результаты исследований были статистически обработаны с использованием пакета анализа MS Excel, («Pentium-III-1266 МГц»).

2.2. Уровень селена в крови поросят при введении его соединений в организм свиноматок

Концентрация микроэлемента селена в тканях поросят в ранний постна-тальный период в значительной степени зависит от его содержания в молозиве и молоке матери. Уровень селена в молоке находится в прямой зависимости от уровня микроэлемента в рационе свиноматок, а также от формы поступления его в организм. Животные получают селен из природных компонентов рациона. Из растительных кормов - в виде селенометионина, а из кормов животного происхождения - селеноцистеина (R.A. Sunde, 1990).

Однако во многих регионах содержание селена в кормах недостаточно для нормального функционирования жизненно важных систем организма (H.A. Голубкина, 1999).

В наших исследованиях введение в организм свиноматок селенита натрия и селенопирана за 14 дней до опороса существенно повлияло на концентрацию селена в сыворотке крови родившихся поросят (рис.1).

180« 1601401201008060402003. сутки 7. 28.

Рис 1 Содержание селена в сыворотке крови поросят, мкг/л И Селенит натрия, 0,1мг Se/кг Ш Селенит натрия, 0,05 мгЭе/кг □СПИ, 0,1 MfSe/кг ШСЛ-1, 0,05мгSe/кг

■ Контроль

/

/ц

/

/

/ :::

/

/ Ш

На третьи сутки жизни количество микроэлемента в сыворотке крови молодняка всех опытных групп превышало контроль на 104, 73, 119 и 51% (Р<0,05), соответственно. Эти различия сохранились и к седьмым суткам после рождения. К двадцать восьмым суткам показатели содержания селена в сыворотке крови молодняка существенно не отличались между группами. Высокое содержание микроэлемента в сыворотке крови поросят, матери которых получали соединения селена, было обусловлено его высоким уровнем в молозиве свиноматок (табл.1.)

Табл. 1. Содержание селена в молозиве свиноматок, мкг/л

Сутки после опороса Опытные группы Контроль

первая 0,1 мг Se/кг ж.м. (Na2Se03) вторая 0,05 мг Se/кг ж.м .(NajSeCb) третья 0,1 мг Se/кг ж.м. (СП-1) четвертая 0,05 мг Se/кг ж.м.(СП-1)

1 348,8±35,4* 226,2±44,5 294,7+56,1* 282,6± 11,9* 150,9+44,2

3 143,2±6,9 127,9±12,7 168,9±7,4 109±5,4 66,1±5,03

Введение селенсодержащих препаратов в организм поросят перед их отъемом от матерей (в 45 - суточном возрасте) также способствовало повышению уровня селена в сыворотке крови молодняка.

На третьи сутки после отьема содержание селена достоверно повысилось у животных первой, третьей и четвертой опытных групп относительно контроля на 21, 17 и 41% (Р<0,05) соответственно. К 28 суткам показатели нивелировались.

Таким образом, введение в организм свиноматок за 14 дней до опороса селенита натрия или селенопирана способствовало увеличению содержания микроэлемента селена в молозиве, и как следствие этого, в сыворотке крови поросят в первые дни жизни. Аналогичное повышение наблюдалось и при введении в организм поросят соединений селена перед отъемом молодняка от матерей.

2.3. Влияние соединений селена на антиоксидантный статус поросят

Селен - один из важнейших эссенциапьных микроэлементов, являющийся кофактором Se-зависимой глутатионпероксидазы (ГПО). Он обеспечивает антиоксидантную защиту клеточных мембран, модулируя активность ферментов, участвующих в метаболизме ксенобиотиков (Olsson U.et al.,1993). Поэтому недостаток микроэлемента может приводить к нарушению клеточной целостности, изменению активности биотрансформирующих ферментов. Фермент глутатионпероксидаза может не только служить антиоксидантом, восстанавливая гидроперекиси в присутствии восстановленного глутатиона, но использоваться организмом как селеновое депо (R.A. Sunde, 1994).

Активность основного фермента антиоксидантной системы (ГПО) у животных в значительной степени зависит от формы поступления селенсодержа-щего препарата. В наших исследованиях введение селенита натрия или селено-пирана в организм свиноматок за 14 дней до предполагаемого опороса неоднозначно повлияло на активность глутатионпероксидазы в сыворотке крови родившихся поросят (рис. 2).

90« 8070600 50« 40 • 3020100 1 I I I-1

3. 7. сутки 28. 45.

Рис.2. Активность глутатионпероксидазы в сыворотке крови поросят-сосунов, Е/гНЬ

• Селенит натрия. 0,1 мг Se/кг ^•"Селенит натрия, 0,06 мгЗДкг 5Й-СП-1.0.1 MrSe/KT 0,05 мг Se/кг

"»»"Контроль

На третьи сутки после рождения наибольшая активность ГПО наблюдалась у поросят, матери которых получали селенит натрия в дозе 0,05 мг Se/кг живой массы. Этот показатель превысил контроль на 11%. В третьей и четвертой опытных группах при введении свиноматкам органической формы селена в виде СП-1 наблюдалась обратная закономерность. Так, в группе, где животные получали селенопиран в дозе 0,1 мг Se/кг ж.м., произошло снижение активности ГПО на 63% (Р<0,05) по сравнению с контролем, а в четвертой опытной группе - на 62% (Р<0,05). Аналогичная закономерность наблюдалась и на седьмые сутки эксперимента в группе с наивысшей дозой препарата (0,1 мг Se/кг живой массы). Снижение активности ГПО, вероятно, связано с тем, что селенопиран переходит в молозиво свиноматок, а затем и в организм поросят-сосунов в неизменном виде. Обладая глутагтионпероксидазной активностью, препарат снизил количество свободных радикалов, являющихся субстратом для ГПО. В результате этого, вероятно, и произошло снижение активности фермен-

та. При использовании неорганической формы селена (селенита натрия) активность ГПО не отличалась от таковой у контрольных животных, несмотря на то, что и в молозиве, и в сыворотке крови поросят-сосунов содержание микроэлемента было выше. Возможно, селен включился в селенсодержащие белки, не связанные с антиоксидантной системой. На двадцать восьмые сутки в опытных группах достоверных различий в активности ГПО по сравнению с контролем не наблюдалось.

Исследования последних десятилетий показали, что при действии на организм различных (прессовых факторов в клетках происходит неспецифическое усиление свободнорадикальных процессов (А.И. Журавлев, 1982, Ф.З. Меерсон, 1981). Таким стрессовым фактором является отъем поросят от свиноматок. Введение поросятам перед отъемом (45 сутки) селенсодержаших соединений повлекло за собой изменение активности глутатионпероксидазы в послеотьем-ный период.

На третьи сутки после отьема в первой опытной группе наблюдалось увеличение активности ГПО на 21% (Р<0,05) по сравнению с контролем, а во второй - на 23%. При использовании селенопирана активация фермента произошла лишь к 28-м суткам после отьема. Увеличение активности фермента под воздействием селенопирана в более поздние сроки по сравнению с неорганической формой подтверждает то, что органическая молекула сначала подвергается метаболизации с высвобождением элемента селена, который впоследствии встраивается в активный центр ГПО и усиливает его функционирование. К 62-м суткам после отьема различия между группами были недостоверны.

Таким образом, введение соединений селена в организм свиноматок до опороса и поросятам перед отъемом способствует стабилизации работы ферментативной системы антиоксидантной защиты как поросят-сосунов, так и оть-емышей.

2.4. Реакция Т-клеточного звена иммунной системы организма поросят на введение соединений селена

Клеточные иммунные реакции в онтогенезе свиней развиваются значительно раньше гуморальных. Как известно, к моменту рождения поросенка самой высокой дифференциации достигает лимфоидная ткань тимуса, где сосредоточено более 80% всех лимфоцитов новорожденного, подавляющее большинство среди которых Т-клетки (Я.В. Алаотс, 1983). Лимфатические узлы и селезенка в этот период почти повсеместно заселены Т-лимфоцитами (И.М. Карпуть,1980).

Введение селенсодержащих препаратов свиноматкам повлияло на клеточное звено иммунной системы поросят.

На третьи сутки после рождения у поросят, матери которых получали селенсодержащие соединения, процент Т-лимфоцитов был выше, чем в контроле. Наиболее высокий показатель наблюдался у поросят 2-й и 3-й опытных групп. Превышение от контроля составило 31% и 40% (Р<0,05) соответственно Ана-

логичная картина наблюдалась на седьмые и двадцать восьмые сутки после рождения.

Динамика изменения содержания Т-клеток по группам указывает, что соединения селена не оказывают стимулирующего влияния на концентрацию Т-лимфоцитов. Более высокий уровень Т-лимфоцитов в периферической крови поросят-сосунов опытных групп, вероятно, связан с протекторным эффектом микроэлемента селена. Известно, что Т-лимфоциты более чувствительны к воздействию свободных радикалов, чем другие клетки, так как их клеточная мембрана более насыщена лип идами и более восприимчива к окислению (J.A. March et.al, 1986). В первые дни жизни, в период адаптации к новым условиям существования, активность свободнорадикального окисления выше, на что указывают показатели активности ГПО - основного фермента антиокси-дантной системы организма поросят. Вероятно, соединения селена способствуют снижению количества свободных радикалов, тем самым, уменьшая их отрицательное воздействие на Т-клегки.

Примечательно отметить, что аналогичная картина наблюдалась при пересчете количества Т-лимфоцитов в абсолютные значения (рис.3).

Зч

Рис. 3. Количество Т-лимфоцитов в периферической крови поросят, тыс/мкл

0 Селенит натрия, 0,1 мг ве/кг Ш Селенит натрия, 0,05 мгве/кг О СП-1,0,1 мгве/кг В СП-1, 0,05 мг Бе/кг

■ Контроль

Введение селенсодержащих соединений в организм поросят перед отъемом на 45-е сутки не повлекло за собой существенных изменений процентного содержания Т-лимфоцитов. Наиболее ярко послеотьемный стресс проявил себя на 7-е сутки. В этот период наблюдался спад процентного содержания Т-

лимфоцитов в периферической крови как у контрольных, так и у опытных животных.

Однако введение соединений селена перед отъемом поросят от матерей снизило отрицательное воздействие стресса. Наибольший эффект наблюдался при использовании органической формы селена - селенопирана. Так, если в контроле на седьмые сутки после отъема снижение процента Т-лимфоцитов по сравнению с третьими сутками составило 46%, то в группе молодняка, получавших селенопиран в дозе 0,05 мг Бе/кг ж.м. (четвертая опытная) - 30%, а в дозе 0,1 мг Бе/кг - всего лишь 27%. При использовании неорганической формы селена эффект был значительно слабее.

Таким образом, наблюдаемые изменения процентного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов в периферической крови поросят после отъема подтверждают протекторный эффект соединений селена. Наибольшим эффектом обладала его органическая форма.

В отличие от селенита натрия введение свиноматкам за 14 дней до предполагаемого опороса селенорганического соединения СП-1 повлияло на фагоцитарную активность нейтрофилов у поросят-сосунов.

Под действием селенопирана на третьи сутки жизни поросят в третьей опытной группе индуцированная реакция фагоцитоза превысила контроль на 11%, а в четвертой группе - на 12% (Р<0,05). Такая же тенденция сохранилась и на седьмые сутки жизни.

2.5. Влияние селенсодержящнх препаратов на гуморальное звено иммунной системы поросят

Успешность адаптации новорожденного к новым условиям существования в значительной степени зависит от состояния его иммунной системы. У новорожденных большинства видов млекопитающих иммунная система не развита в достаточной степени. Гуморальная иммунная защита является пассивной и обеспечивается иммуноглобулинами, поступающими от матери.

Введение селенсодержащих препаратов свиноматкам за 14 дней до предполагаемого опороса оказало влияние на показатели гуморального звена иммунитета поросят.

На третьи сутки жизни наблюдалось повышение уровня ДО во всех опытных группах по сравнению с контролем. Так, в первой опытной группе, где свиноматки получали селенит натрия в дозе 0,1 мг ве/кг живой массы, этот показатель превышал контроль на 22% (Р<0,05), во второй группе наблюдалась тенденция к увеличению уровня 1§С. В третьей и четвертой опытных группах, где свиноматки получали селенопиран в разных дозах, этот показатель достоверно превышал контроль на 20% и 24%, соответственно. Аналогичная картина наблюдалась и на седьмые сутки жизни поросят. Во всех опытных группах уровень иммуноглобулинов в-класса был выше, чем в контроле и находился в пределах физиологической нормы (табл.2).

Табл. 2. Концентрация иммуноглобулинов С-класса, мг/мл

Возраст, сут Опытные группы Контроль

первая 0,1 мг Бе/кг ж.м. Ша28еОз) вторая 0,05 мг Бе/кг ж м. ОЧагБеОз) третья 0,1 мг Бе/кг ж.м. (СП-1) четвертая 0,05 мг Эе/кг жм. (СП-1)

в сыворотке крови поросят

3 23,7±1,1* 21,8±2,4 23,3 ±0,2* 24,0±0,5* 19,3 ±0,8

7 18,3±0,9* 17,6+1,9 16,3±2,1 16,8+0,8 14,3+1,8

^ в молозиве свиноматок

через 20 ч после опороса 40,4±2,5* 39,0±5,1 48,0±7,5* 50,5 ±6,2* 33,1±2,3

Преобладающим классом иммуноглобулинов в сыворотке крови является

На его долю приходится около 90% иммуноглобулинов (Федоров Ю.Н., 1985). Известно, что существует прямая зависимость между содержанием иммуноглобулинов в молозиве первых суток и их содержанием в сыворотке крови животных, потреблявших это молозиво (Ю.Н.Федоров,1983). Эффективность колострального иммунитета зависит в первую очередь от количества абсорбированных в кишечнике материнских антител. Поэтому высокую ценность имеет молозиво первых часов лактации, когда концентрация иммуноглобулинов в нем максимальна.

В наших исследованиях введение в организм свиноматок соединений селена способствовало увеличению содержания иммуноглобулинов С-класса в молозиве.

Наибольшее количество наблюдалось в третьей и четвертой опытных группах, где свиноматки получали селенопиран. Показатели в этих группах превышали контроль на 45% и 52% (Р<0,05) соответственно. В первой опытной группе это различие составило 22% (Р<0,05).

Иммуноглобулины класса М являются самыми древними в эволюционном аспекте. Они раньше других иммуноглобулинов возникают в ответ на антигенный стимул и играют важную роль в гуморальной защите организма. Причем уровень 1§М в крови и живая масса животного возрастают пропорционально (Марзанов Н.С., 1991).

Введение селенсодержащих соединений супоросным свиноматкам способствовало увеличению количества в сыворотке крови поросят четвертой опытной группы. Повышение составило 37% (Р<0,05). В первой и второй опытных группах, где свиноматки получили инъекцию селенита натрия, этот показатель был выше контроля на 25%, однако различия были недостоверны. При этом содержание иммуноглобулинов М-класса в молозиве свиноматок достоверно превышало контроль во всех опытных группах, но наибольшее увеличение от-

мечается в четвертой группе, где этот показатель превышает контроль на 136% (Р<0,05) (табл.3).

Табл. 3. Концентрация иммуноглобулинов М-класса, мг/мл

Возраст, сут Опытные группы Контроль

первая 0,1 мг Se/кг Ж.М. (NajSeOj) вторая 0,05 мг Se/кг ж.м. (NajSeOj) треть* 0,1 мг Se/кг ж.м. (СП-1) четвертая 0,05 мг Se/кг ж.м. (СП-1)

IgM в сыворотке крови поросят

3 1,0±0,3 1,0±0,2 0,8±0,02 1,1±0,1* 0,8±0,1

7 0,2±0,03 0,3+0,1 0,4+0,05* 0,4+0,03* 0,2±0,05

IgM в молозиве свиноматок

через 20 ч после опороса 3,1+0,4* 4,4±0,5* 4,4±0,5* 5,2+0,8* 2,2+0,1

На седьмые сутки жизни у поросят, матери которых получали селенопиран, концентрация IgM в сыворотке крови составила 0,4 мг/мл (Р<0,05) в обеих группах, против 0,2 мг/мл в контроле.

Третьим важным классом иммуноглобулинов является А-изотип. Количество IgA в сыворотке крови поросят колеблется в пределах от 0,9 до 2,1 мг/мл (Porter, 1969, Zascellis, 1974, Klobasa, 1981).

На третьи сутки жизни поросят в группах, где матери получали селенопиран в разных дозах, количество IgA в сыворотке крови превышало контроль на 20% (Р<0,05). На 7-е сутки различия между группами были недостоверны.

Селенопиран, вероятно, не только способствует сохранению уровня IgA в сыворотке крови, но и стимулирует его выработку.

2.6. Влияние селенопирана на субпопуляции Т-лимфоцитов и антителооб-разующие клетки (модельный эксперимент на мышах)

Результаты модельного эксперимента позволили уточнить механизм действия селенопирана на Т-клеточное звено иммунитета. Селенопиран не оказал значимого влияния на содержание общего количества Т-лимфоцитов, однако отмечен незначительный стимулирующий эффект на Т-хелперы в лимфоузлах и на экспрессию рецептора интерлейкина-2 на клетках селезенки и тимуса. Также была установлена тенденция к повышению уровня спонтанного фагоцитоза макрофагов на вторые сутки после внутрибрюшинного введения препарата и достоверные различия между опытной группой и контролем по индуцированному фагоцитозу на пятые сутки эксперимента. Нами обнаружен факт снижения процента апоптозных (запрограмированных на гибель) клеток тимуса при использовании селенопирана. Препарат уменьшал процент апоптозных клеток в

тимусе по сравнению с контролем. Было установлено, что применение селено-пирана на фоне введения рекомбинантного фактора некроза опухолей в организм мышей нивелировало его негативное воздействие на количество апоптоз-ных клеток тимуса.

Таким образом, селенорганическое соединение в большей степени оказывает не стимулирующий эффект на Т-лимфоциты, а протекторный, предотвращая превдевременную гибель Т-лимфоцитов и тем самым сохраняя их количество.

*

2.7. Влияние соединений селена на продуктивность и сохранность

молодняка «

На протяжении всего эксперимента температура тела, частота дыхательных движений и сердечных сокращений у опытных и контрольных животных находились на уровне физиологической нормы.

Табл. 4. Показатели молочности свиноматок и сохранности поросят

Опытные группы Контроль

первая 0,1 мг Эе/кг ж.м (ЫагЗеОз) вторая третья 0,05 мг Бе/кг 0,1мг ве/кг ж.м (ЫагвеОз) I ж.м (СП-1) четвертая 0,05 мг Эе/кг ж.м.(СП-1)

молочность свиноматок

30,8±1,6 30±1,1 34,2±2,2* 33,8±0,9* 25,4±2,3

процент сохранности поросят к отьему

77,7±3,9 74,1+4,8 86,4±3,7* 87,5±5,3* 69,4+4,9

Стимуляция колостральных факторов иммунитета под воздействием се-ленсодержащих соединений способствовала более полной реализации генетического потенциала скорости роста поросят. На протяжении всего эксперимента живая масса поросят опытных групп превышала живую массу поросят контрольной группы. Сохранность поросят и молочность свиноматок в опытных группах была выше, чем в контроле. К моменту отъема сохранность молодняка в третьей и четвертой опытных группах, в которых использовалась органическая форма селена, превышала контроль на 24%(Р<0,05) и 26% (Р<0,05), соответственно. Молочность свиноматок в этих группах достоверно превышала контроль на 34% (Р<0,05) и 33% (Р<0,05) соответственно (табл.4).

Таким образом, селенсодержащие соединения способствовали более полной реализации генетического потенциала скорости роста и сохранности молодняка за счет повышения уровня иммунной защиты в первый месяц жизни. Наибольшим эффектом обладала органическая форма селена - селенопиран.

3. Выводы

1. Выявлено наличие причинно-следственной связи между уровнем иммуноглобулинов й-, М-классов в молозиве подсосных свиноматок и имунно-физиологическим статусом полученных от них поросят, что обусловлено применением соединений селена органической и неогранической природы.

2. Установлено, что в молозиве концентрация иммуноглобулинов этих классов под воздействием селенопирана повышалась соответственно на 52 и 136%, а селенита натрия - на 22 и 100% (Р<0,05).

3. Поросята опытных групп в ранние периоды постнатального онтогенеза превосходили иитактных животных по концентрации селена и содержанию иммуноглобулинов в-, М-, А- классов в сыворотке крови, соответственно на 78 и 20-24% (Р<0,01), а также количеству лимфоцитов, фагоцитарной активности нейтрофилов в крови, массе тела и сохранности на 7-26%

(Р<0,05).

4. Ростосгимулирующий и иммунно-физиологический эффекты при назначении животным селенопирана были более выразительными по сравнению с таковыми в условиях применения селенита натрия.

5. Использование селенопирана в системе мать-плод способствовало усилению как гуморального, так и клеточного звеньев иммунитета и оптимизации соотношения интенсивности свободнорадикального окисления и антиокси-дантного потенциала в организме супоросных свиноматок и поросят-сосунов.

4. Практические предложения

1.Физиологически обоснована целесообразность внутримышечного введения селеноорганического антиоксиданта «Селенопиран» свиноматкам за 14 дней до предполагаемого опороса и поросятам-сосунам в дозе 0,05 мг Бе/кг живой массы.

2. Результаты и выводы диссертации используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА» и внедрены в свиноводческие предприятия различных типов и форм собственности Пензенской области.

5. Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Шведова Н.С., Старостин Д.А. Состояние иммунной системы поросят в подсосный период в зависимости от введения соединений селена в организм их матерей // АПК комплекс: состояние, проблемы, перспективы. - Сб. материалов Международной научно-практической конференции. - Пенза-Нейнбраденбург., 2003 - С. 66-67.

2. Боряев Г.И, Федоров Ю.Н., Невитов М.Н., Шведова Н.С. Влияние соединений селена на иммунную систему поросят в подсосный период // Селекция, кормление, содержание с.х. животных и технология производства продуктов животноводства. - Моск. обл., Лесные поляны, 2004. —Т.2. - Вып №16. -С. 73-75.

3. Кравченко Ю.В., Боряев Г.И., Шведова Н.С., Пономарева Е.Е, Ря-бинина Т.В. Сравнительная оценка гепаггопротекторных свойств композиций на основе расторопши пятнистой // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - Москва, 2004. №1. - С. 81-82.

Подписано в печать 17.02.2005г.Формат 60x84 1/16 Бумага писчая. Печать оперативная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ №

Отпечатано на участке оперативной полиграфии ГОУ ВПО «Чувашский государственный педагогический университет им.

И.Я.Яковлева» 428000, г. Чебоксары, ул. К. Маркса,38

А i

I

I !

!

*

РНБ Русский фонд

2005-4 45028

- Е56

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Старостина, Надежда Сергеевна

Общая характеристика работы

1 .Обзор литературы

1.1. Роль селена в антиоксидантной системе

1.2. Биохимические функции селена

1.3. Роль селена в иммунной системе

1.4. Использование селенсодержащих соединений для повышения продуктивности молодняка

2. Собственные исследования

2.1. Материалы и методы исследования

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Уровень микроэлемента селена в крови поросят при введении соединений селена в организм их матерей

2.2.2. Влияние соединений селена на антиоксидантный статус поросят

2.2.3. Реакция Т-клеточной системы организма поросят на введение соединений селена

2.2.4. Влияние селенсодержащих препаратов на гуморальную систему иммунитета

2.2.5. Влияние селенопирана на субпопуляции Т-лимфоцитов и антителообразующие клетки (модельный эксперимент на мышах)

2.2.6. Биохимические и гематологические показатели крови поросят при введении в их организм соединений селена

2.2.7. Влияние соединений селена на продуктивность и сохранность молодняка

Введение Диссертация по биологии, на тему "Иммунно-физиологическое состояние свиноматок и поросят при введении в организм соединений селена"

Актуальность темы исследования. Интенсивные технологии выращивания свиней предполагают иммунокоррекцию метаболических процессов в организме с целью устранения иммунодефицитных состояний и уменьшения негативных последствий различных стрессов. В силу биологической специфики у поросят к моменту рождения развитие иммунной системы не достигает полной функциональной зрелости. Поэтому в первые дни жизни лишь молозиво обеспечивает поддержание иммунного гомеостаза и главную роль в этом играют иммуноглобулины. В связи с этим большой интерес проявляется к вопросам иммунно-физиологического состояния организма молодняка свиней, особенно в раннем постнатальном онтогенезе. Изучение закономерностей становления иммунных функций в ранний период обусловлено тем, что из-за неполноценного иммунного ответа и нарушения механизмов адаптации в постнатальном онтогенезе происходит значительная потеря поголовья именно в этот возрастной период. В свиноводстве около 80% от общего падежа приходиться именно на ранний период жизни.

Поэтому на этом критическом этапе следует считать наиболее целесообразным поиск способов повышения иммунно-физиологического статуса молодняка с помощью иммуномодулирующих препаратов.

В качестве иммуннокоректоров, обладающими одновременно адаптогенными и антиоксидантными свойствами, являются соединения селена. Исследованиями многих ученых установлено, что иммуностимулирующее действие этих соединений реализуется через их антирадикальные свойства, способность регулировать интенсивность процессов свободнорадикального окисления в организме, защищая мембраны лимфоидных и других клеток, а также их структур от повреждающего действия свободных радикалов (Г.И. Боряев 2000, К.М. Brown, J.R. Arthyr, 2001).

В качестве донора селена в основном применяются неорганические соединения - селенит и селенат натрия и др (Zobell et al., 1995, S.S. Swecker et al., F.T. Awadeh et al., 1998, H.M. Машковцев,2001). Однако высокая токсичность всех неорганических селенсодержащих соединений, является главным недостатком, что и препятствует широкому использованию их в практике животноводства. Альтернативой селениту натрия может служить новое отечественное селеноорганическое гетероциклическое соединение 9-фенил-симметричный октагидроселеноксантент (селенопиран, СП-1), синтезированный А.Ф. Блинохватовым (1983). Селенопиран отличается низкой токсичностью, жирорастворимостью, отсутствием любых проявлений генотоксичности и способностью влиять на развитие иммунных реакций организма молодняка сельскохозяйственных животных (В.А. Галочкин, 1998, Ю.Н. Федоров, Г.И. Боряев, А.Ф. Блинохватов, 1999, М.Н. Невитов, 1999).

Цель исследований - изучение особенностей иммунно-физиологической реакции организма свиноматок и поросят на воздействие селенита натрия и селенопирана. Задачи исследований:

1. Определить концентрацию селена в молозиве подсосных свиноматок и в сыворотке крови полученных от них поросят при применении селенита натрия и селенопирана.

2. Выявить взаимосвязь между уровнем селена в молозиве свиноматок и иммунно-физиологическим состоянием поросят-сосунов.

3. Изучить влияние неорганического и органического соединений селена на клинико-физиологические и ростовые показатели поросят.

4. Оценить адаптогенные свойства испытуемых соединений селена в экспериментальных условиях.

Научная новизна. Впервые установлены онтогенетические закономерности содержания селена и иммуноглобулинов G-, М-, А- классов в молозиве свиноматок и в сыворотке крови поросят при назначении им селенита натрия и селенопирана. Изучены особенности влияния неорганического и органического соединений селена на Т-клеточное звено иммунитета, фагоцитарную активность нейтрофилов и антителообразующую функцию крови поросят. Экспериментально доказано, что иммунно-физиологические эффекты организма свиней при использовании селенопирана были рельефнее, чем таковые в условиях применения селенита натрия.

Практическая ценность. Проведена комплексная оценка физиологической целесообразности назначения свиноматкам и полученным от них поросятам соединений селена и разработан способ повышения иммунобиологической реактивности их организма.

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Между концентрацией селена в молозиве свиноматок и иммунно-физиологическими реакциями у поросят в раннем постнатальном онтогенезе существует причинно-следственная связь, обусловленная применением неорганического и органического соединениий селена.

2. Введение супоросным свиноматкам селенита натрия и селенопирана повышает уровень иммуноглобулинов G-, М-классов в молозиве, что сопровождается адекватными иммунно-физиологическими эффектами полученных от них поросят.

3. Селенопиран стимулирует гуморальное и клеточное звенья иммунной системы поросят и одновременно проявляет протекторный эффект по отношению к Т-лимфоцитам за счет реализации иммуномодулирующих и антиоксидантных свойств.

1. Обзор литературы

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Старостина, Надежда Сергеевна

4. Выводы

1. Выявлено наличие причинно-следственной связи между уровнем иммуноглобулинов G-, М-классов в молозиве подсосных свиноматок и иммунно-физиологическим статусом полученных от них поросят, что обусловлено применением соединений селена органической и неогранической природы.

2. Установлено, что в молозиве концентрация иммуноглобулинов этих классов под воздействием селенопирана повышалась соответственно на 52 и 136%, а селенита натрия - на 22 и 100% (Р<0,05).

3. Поросята опытных групп в ранние периоды постнатального онтогенеза превосходили интактных животных по концентрации селена и содержанию иммуноглобулинов G-, М-, А- классов в сыворотке крови, соответственно на 78 и 20-24% (Р<0,01), а также количеству лимфоцитов, фагоцитарной активности нейтрофилов в крови, массе тела и сохранности на 7-26% (Р<0,05).

4. Ростостимулирующий и иммунно-физиологический эффекты при назначении животным селенопирана были более выразительными по сравнению с таковыми в условиях применения селенита натрия.

5. Использование селенопирана в системе мать-плод способствовало усилению как гуморального, так и клеточного звеньев иммунитета и оптимизации соотношения интенсивности свободнорадикального окисления и антиоксидантного потенциала в организме супоросных свиноматок и поросят-сосунов.

5. Практические предложения

1 .Физиологически обоснована целесообразность внутримышечного введения селеноорганического антиоксиданта «Селенопиран» свиноматкам за 14 дней до предполагаемого опороса и поросятам-сосунам в дозе 0,05 мг Se/кг живой массы.

2. Результаты и выводы диссертации используются в учебном процессе ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА» и внедрены в свиноводческие предприятия различных типов и форм собственности Пензенской области.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Старостина, Надежда Сергеевна, Пенза

1. Алаотс Я.В. Офило-и онтогенетическом аспекте иммунитета //Тр. Эст. с.-х. академии.-1983.-№ 141.- С. 11 -12.

2. Анакина Ю.Г. Селен в кормлении животных // Овцеводство. 1990. - №2. С. 44-45.

3. Боряев Г.И. Биохимический и иммунологический статус молодняка сельскохозяйственных животных и птицы и его коррекция препаратами селена.: Автореф. докт. диссерт-М., 2000.-43 с.

4. Галочкин В.А., и др. Селенопиран новый высокоэффективный антиок-сидант// У Международная конференция «Биоантиоксидант». Москва 1820 ноября 1998г.

5. Голубкина Н.А. Исследования роли лекарственных растений в формировании селенового статуса населения России.: Автореф. докт. диссерт.-М.,1999.- 47 с.

6. Дьяченко И.С., Левинский В.А. Балансирование рационов маток по микроэлементам // Овцеводство.-1991.- №5.-С.12.

7. Дьяченко И.С., Лысенко В.Ф. Селен в рационах высокопродуктивных коров // Зоотехния.-1989.-№6.- С.15.

8. Ермаков В.В., Ковальский В.В. Биологическое значение селена.- М.: Наука, 1974.-300 с.

9. Журавлев А.И. Развитие идей Тарусова Б.Н. о роли цепных процессов в биологии//Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и пато-логии.-М.: 1982.-С. 3-36.

10. Журавлев А.И., Мяльдзин А.Р., Баранов А.В. Методы регистрации сво-боднорадикального окисления липидов в сыворотке, плазме и мембранах клеток крови.: Метод. Указ. М.: MB А, 1989. - 12 с.

11. Карпуть И.М. Иммунная реактивность и устойчивость организма свиней к заболеваниям// Вет. Наука- пр-ву. Минск, 1985.- №23.-С.28-35.

12. Карпуть И.М., Пивовар JI.M. Клеточные иммунные явления в процессе лактации у свиней// 2-й Всес. Симпоз. по иммунол. Воспроизв: Тез. докл.-М., 1980.,-С.61.

13. Касумов С.Н. Биологическое значение селена для жвачных животных-М., 1979. 47 с.

14. Касумов С.Н. Основы применения селена в кормлении сельскохозяйственной птицы. Обзор информ. ВНИИТЭИСХ.- М., 1981.- 61 с.

15. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное изд./ Кондрахин И.П. и др. М.: Агропромиздат, 1985.- 287 с.

16. Ковалева И.Е., Полевая О.Ю. Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным химическим соединениям. М.: Наука, 1985.

17. Кокорев В.А., Сушков B.C., Симбирский Е.С. Влияние селена на продуктивность свиней// Зоотехния.- 2000.-№2. С. 24-27. - Рус.

18. КокоревВ.А., Сушков B.C., Спутников М.В. Интенсивность роста молодняка свиней на откорме получавших в составе рациона селенит натрия// Физиол. и биол. основы высок, продуктив. ;животных/ Морд. гос. ун-т, Аграр. ин-т. -Саранск, 1997.-С. 208-209.- Рус.

19. Крапивина Е.В., Иванов В.П. Влияние селена на защитные сиситемы ор ганизма свиней // Ветеринария 1999.- №5.- С. 44-48.- Рус.; рез. Англ.

20. Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонков А.А., Скальная М.Г., Громова О.А. Иммунофармокология микроэлементов / Москва: изд-во КМК, 2000

21. Кудрявцев А.П. Профилактика селеновой недостаточности у животных птицы.- М., 1979.- 86 с.

22. Кудрявцева JI.A. Действие селена и витамина Е на животных.: Автореф. дисс. канд. вет. наук.- М., 1967.- 19 с.

23. Кузнецова Т.С., и др. Влияние селена на гематологические показатели и продуктивность свиней // Зоотехния. 2000.- N 9.- с.18-22.

24. Лаптенок В.Н. Формирование естественной резистентности в антенатальный и ранний постнатальный период развития свиней и способы ее повышения// Автореф. канд. дисс.-1986.

25. Максимова Н.И. Использование соединений антиоксидантного действия в кормлении коров.: Автореф. канд. диссерт.-Евлага.-1985.-17 с.

26. Машковцев Н.М. Влияние селена на продуктивность крупного рогатого скота// Лечение и профилактика незаразных болезней в промышленных животноводческих комплексах. Казань, 1984.- С. 11 - 14.

27. Машковцев Н.М. Профилактика и терапия селеновой недостаточности у сельскохозяйственных животных в биогеохимической зоне дефицитноц по йоду, кобальту, меди, цинку.: Автореф. докт. Диссерт Казань., 2001.

28. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. -М., 1981.-227с.

29. Методы исследования Т-системы иммунитета в диагностике вторичных иммунодефицитов при заболеваниях и повреждениях / Лозовой В.П. и др.- Томск, 1986.- 275 с.

30. Минина А.А. Биологическая роль селена при токсической дистрофии печени и беломышечной болезни у кур.: Автор.канд. диссерт. 1970.-13 с.

31. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах// Лаб. Дело.- 1986.- №12.- С.724-727.

32. Перунова Е.В. Физиолого-биохимические и продуктивные показатели свиней в зависимости от доз и способов введения в организм селена// Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. биолог, наук., Ульяновск, гос. с.-х. академ., 2000.-е. 23.

33. Решетник JI.A., Парфенова Е.О. Биогеохимическое и клиническое значение селена для здоровья человека. Микроэлементы в медицине // 2000. Том 2, Вып. 2.

34. Сергеев П.В. и др. Биохимическая фармакология: Учеб. Пособие для вузов. М.: Высшая школа, 1982.- 343 с.

35. Симбирский Е.С. Влияние селена на воспроизводительные способности свиней // Физиол. и биол. основы высок, продуктив. животных/ Морд. гос. ун-т, Аграр. ин-т.- Саранск, 1997.-С. 212-214. Рус.

36. Тутельян В.А., Княжев В.А., Хотимченко С.А. Селен в организме человека. Метаболизм. Антиоксидантные свойства. Роль в канцерогенезе. М: изд-во РАМН,2002

37. Федоров Ю.Н., Горбунова М.Ю., Солодовников В.Л. Механизмы иммунологической защиты у новорожденных животных // Пробл. вет. Имму-нол., Тр. ВИЭВ,- 1983.- Вып. 57.- С. 61-64.

38. Федоров Ю.Н., Феактистова Т.А., Кадыров С.О. Количественное определение иммуноглобулина G в сыворотке крови свиней иммуноферментным методом // Бюлл. ВИЭВ, 1985.-Вып.58.- С. 36-38.

39. Фесенко И.Д. Иммунобиологическая характеристика системы мать-плод-новорожденный у свиней // Бюлл. ВИЭВ, -1981. Вып-44.-С. 53-55.

40. Харитонова И.Г. Влияние органического селена на активность ферментов антирадикальной защиты и фагоцитоз в постнатальном онтогенезе поросят // Бюлл. ВНИИФБиП с.-х. животных. Боровск, 1991.-Вып. 1 (100). С. 60-64.

41. Ющак I., Бугаевський В., Наконечний I. Селен в рационах свиней// Тва-ринництво Укрши.-1999.- №1-2.- С. 22-23. -Укр.

42. Aleksandrovicz J. et al. Effect of food enrichment with various doses of sodium selenite on some immune responses in laboratory animals. Rocz. Nauk. Zootech. 4. 113. 1977.

43. Amberg R., Mizutani N. Wu X.Q., Gross-H.J. Selenocysteine synthesis in mammalia: an identity switch from tRNA (Ser) to TRNA (Sec) // J.Mol. Biol.-1996.- V. 263, N 1.- P.8-19.

44. Andreesen J.R., Zjungdahl Z.G. Format degydrogenase of Clostridium ther-moaceficum: incorporation of Se and the effects of selenite, molybdate and tungstate on the enzyme. J. Bacteriol., 166.1973, 867.

45. Andersen O, Nielsen J. 1994. Effect of simultaneous low-level dietary supplementation with inorganic and organic selenium on whole-body, blood, and organ levels of toxic metals in mice. Environ. Health Perspect. 102 (Suppl.3).

46. Arthur J.R., Bermano G., Mitchell J.H., Hesketh J.E. Regulation of selenoprotein gene expression and thyroxine hormone metabolism. Biochem. Soc. Trans. 24. 1996. 384-388.

47. Baker S.S., and Cohen H.G. Increases sensivity to H2O2 in glutathione peroxidase deficient rat granulocytes., J. Nutr., 114, 2003, 1984.

48. Behne D. et al. Studies on the distribution and characteristics of new mammalian selenium-contaiming proteins. Analyst. 120.1995.p 823-825.

49. Behne, D. et al. Evidence of specific selenium target tissues and new biologically important selenoproteins. Biochim. Biophys. Acta. 966: 12-21. 1988.

50. Berenshstein T.F. Effect of selenium and vitamin E on antibody formation in rabbits, Zdra Wookhr. Boloruss, 18, 34, 1972.

51. Berry M, Larsen P. 1992. The role of selenium in thyroid hormone action. En-docr. Rev. 13.

52. Bielstein M.A., Whanger P.D. Deposition of dietary organik and inorganic selenium in rat erythrocyte proteins // J. Nutr.-1986.-V. 116, N9.-P. 1701-1710.

53. Bourne F.J. Immunity in the pig. Vet. Brno.-1976.-C.-449-501.

54. Boyne R., and Arthtur J.R. Alterations of neutrophil function in selenium-deficient cattle, Journal of Comparative Pathology., 1979, 89, 151.

55. Boyne R., Mann S.O., Arthur J.R. Effect of salmonella thyphimurium infection on selenium-deficient rats. Microbios Letters.V.27. p.83-87., 1984.

56. Brigelius-Flohe R., Fridrichs В., Maurer S., Streicher R. Determinants of PHGPx expression in a cultured endothelial cell line // Biomed. Environ. Sci.-2001.-V. 10, N2-3.-P. 163-167.

57. Brown K.M., Arthur J.R. Selenium, selenoproteins and human heallth: review, Public Health Nutr., 2001. P.593-599.

58. Burck, R.F. & Hill, K.E. Regulation of selenoproteins. Annu. Rev. Nutr. 13: 65-81, 1993.

59. Burck R.F. & Correia M.A., Selenium and hepatic heme metabolism, in Selenium in Biology and Medicine, Spallholz J.E., eds., Avi Pub. Co., Westport, Conn., 1981, 86.• is

60. Burck R.F. & Gregory P.E., Some characteristics of Se-P, a selenoprotein found in rat liver and plasma, and comparison of it with seleno-glutathione peroxidase, Arch. Biochem. Biophys., 213, 73, 1982.

61. Buckman T.D., Sutphin M.S., Eskhert E.D. A comparison of the efects of dietary selenium on selenoprotein expression in rat brain and liver. Biochimica et Biophysica Acta. 1993, Vol 1163, Iss 2, pp 176-184.

62. Butler J.A., Beilstein M.A., Whanger P.D. Influence of dietary methionine on the metabolism of selenomethionine in rats // J. Nutr.-1989.-V. 119, N7.-P. 1001-1009.

63. Chen, J.S. et al., Effects of dietary selenium and vitamin E on hepatic mixed-function oxidase activities and in vivo covalent binding of aflatoxin Bi in rats, J. Nutr., 112,324, 1982.

64. Chu F, Doroshow J, Esworthy R. 1993. Expression, characterization and tissue distribution of a new cellular Se-dependent glutathione peroxidase, GSHPX-GI. J.Biol.Chem. 268.

65. Clausen, J. & Tranum J., Kinetics of selenite uptake by mononuclear cells from peripheral human blood, Biol. Trace Elem. Res., 4, 245, 1982.

66. Combs G.F. et al, Food-Based Approaches to Preventing Micronutrient Malnutrition: an International Research Agenda, ppl-68. Cornell. Internat. Inst. For Food, Agr., and Development, Cornell University, Ithaca, NY, 1996.

67. Czyrski J.A., Jnglot A.D. Mitogenic activity of selenoorganic compouds in human peripheral-blood leukocytes // Experientia. 1991.Vol. 47, №l.p.95-97.

68. Evenson, J.K. & Sunde, R.A. Selenium incorporation into selenoproteins in the Se-adequate and Se-deficient rat. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 187: 169-180, 1988.

69. Florence T.M. The role of free radicals in diseas. Australian and New Zealand Journal of Ophtalmology 1995, Vol 23, Iss 1, pp 3-7.

70. Frenyo V. L., Pethes G., Antae Т., Szabo I. Changes in colostral and serum IgG content in swine in relation to time// Vet. Res. Commun.-1980-1981.-4,№4.- C. 275-282.

71. Hayes J.D. et al. Redulation of rat alpha glutathione S-transferases and the contribution of GST/C2, to resistance to alfatoxin Bl. Jn. Glutathione S-Transferases:Structure Function nand Clinical Implications, pp.73-78.1996.

72. Hill K.E. et al, The DNA for rat selenoprotein-P contains 10 TGA codons in the open reading frame, J. Biochem., 1991, V. 266., Iss 16., pp 50-53.

73. Hoekstra W. G. Biochemical Function of selenium and its relation to vitamin E. Fed. Proc. 34: 2083-2089. 1975.

74. Hurley, WL 219-48-4790 Noble, M.S. and W.L. Hurley. 1999. Effects of secretion removal on bovine mammary gland function following an extended milk stasis. J. Dairy Sci. 82:1723-1730.

75. Janghorbani M., Lynch N.E., Mooers C.S., Ting B.T. Cjmparison of the magnitude of the selenite exchahgeable pool and whole body selenium in adult rats // J. Nutr.-1990.-V. 120, N2.-P.190-199.

76. Janghorbani M., Martin R.F., Kasper L.J., e.a. The selenite-exchangeable me-tabolik pool in humans: a new cjncept for the assessment of selenium status // Amer. J. Clin. Nutr.- 1990.- V. 51.- P.670-677.

77. Janghorbani M., Mooers C.S., Smith M.A., e.a. Correlation between the size of the selenite-exchangeable metabolic pool and total body or liver selenium in rats //J. Nutr.-1991.-V. 121.-P.345-354.

78. Karle J.A. et al. Uptake of Selenium-75 by PHA-stimulated lymphocytes. Effect on glutathione-peroxidase. Biol. Trace Elem. Res., 5, 17, 1983.

79. Kim Y.B., Bradley S.G. and Watson D.W. Ontogeny og the immune responce. 2. Characterisation of 19s gamma-G and 7s gamma-G immunoglobulins in the true primary and secondary responses in piglets// J. Ummunol.-1966.-97.- С 189-195.

80. Kiremidjian-Schumacher L., Roy M., Wishe H. et al.,1998, Regulation of cellular immune response by selenium, Biol. Trace Elem. Res., P. 23-35.

81. Klobasa F., Werhahn E. and Butler J.E. Regulation of humoral immunity in the piglet by immynoglobulins of mathernal origin// Res. In Vet, Sci.-1981.-31, №1.-C.l 95-206.

82. Klobasa F., Werhahn E. Untersushungen uber das abwehrsystem bei ferkeln// Land. Volhenrode.- 1981.-31, №2.-C.76-85.

83. Knigth D.A. The effect of selenium supplementation on the humoral antibody response in the equine. Ph. D. Thesis, Ohio State Univ., Columbus Ohio, 87 p. 1984.

84. Kolb E., Grun E. Role of vitamin E and selenium for the bovine immune system with special consideration of udder health. Praktische Tier-arzt.l 995,76:9.p.749-756.

85. Koller L.D., Whitbeck G.A., South P.I. Transplacental transfers and colostral concentration of selenium in buf cattle. Amer. J. Vet. Res. 1984. №45.p.2507-2510.

86. Kumar S, Bjornstedt M, Hamberg M, Holmgren A, Jilyan X. 1995. Human Thioredoxin reductase directly reduces lipid hydroperoxides by NADPH and selenocystine strongly stimulates the reaction via catalytically generated se-lenols. J.Biol.Chem. 270.

87. Larsen et al. Influence of selenium on antibody production in sheep. Research in Veterinary Science 45 : 4-10, 1988.

88. Larsen et al. Influence of selenium on sheep lymphocyte responses to mitogens. Research in Veterinary Science 45 : 11-15, 1988.

89. Luthman M, Holmgren A. 1982. Rat liver thioredoxin and thioredoxin reductase: purification and characterization. Biochemistry. 21.

90. Mahan Ponald C. Selenium nutrition in swine: The emerging value of organic Selenium// Spec. Circ./ Ohio State Univ. Ohio Agr. Res. And Dev.Cent.-1999.-№ 167. -C. 35-44.

91. Mancini G., Carbonara A.O., Heremans J.F. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion, Immunochemistry, 2, 235-254 (1965).

92. Marsh J. A., Combs M.E., et al. Effect of selenium and vitamin E dietary deficiencies on chick lymphoid organ development. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine 182: 1986, 425-436.

93. Martin J.L., Spallholz J.E. Selenium in the immune response. Proc. Symp. Se-Te Environ. P. 204. 1976.

94. May J, Cobb C, Mendiratta S, Hill K, Raymond F. 1998. Reduction of the Ascorbyl Free Radical to Ascorbate by Thioredoxin Reductase. J.Biol. Chem. 273.

95. Musik I., Koziol-Montewka M.,Tos-Luty S. et al., 1999, Immunomodulatory effect of selenosemicarbazides and selenium inorganik compounds, distribution in organs after selenium sumpplementation. Biometals, P. 369-374.

96. Nockels C.F. Immunoenhancing vitamins for cattle. Agri. Proctice. 1988.9:2,10-13.

97. Nockels C.F. Antioxidants improve cattle immunity following stress. Animal feed science and technology 1996, Vol 62, Issl , pp 59-68.

98. Ognjaanovic B. et al. The effect of selenium on the antioxidant defense system in the liver of rats exposed to cadmium. Physiological Research. 1995., V.44., Iss 5., pp 293-300.

99. Olsson U., Lundgren В., Segura-Aguila., Messing-Eriksson A., Andersson K., Becedas L., Pierre J.W. 1993. Effects of selenium deficiency on xenobiotic-metabolizing and other enzymes in rat liver // Int. J. Vit. Nutr. Res. Vol.63. P.31-37.

100. Parnham M.J. et al. Macrophage, lymphocytes and chronic inflammatory responses in selenium-deficient rodents. Association with decreased glutathione peroxidase activity, Int. J. Immunopharmacol., 5, 455, 1983.

101. Pence B.C. Dietary selenium and antioxidant status toxis effects of 1, 2-dimethylhydrasine in rats, J. Nutr., 1991, Vol 121., Iss I., pp 138-144.

102. Porter P. And Hill I.R. Serological changes in IgG, IgA and IgM and E. Coli antibodies in the youhg pig// Immunol.- 1970.- 18,№4.- C. 565-574.

103. Reinhold U. et al. Class- specific of selenium on PWD-driven human antibody synthesis in vitro // Biol. Trace Elem. Res. 1989.-№l-2.-s.45-58.

104. Roger G. et al. Physical, hematologic, biochemical and immunologic effects of supranutritional supplementation with dietary selenium in Holstein cows. A. J. V. R. Vol.58. №7.1997.p.760-764.

105. Roos D. et al. Protection of human neutrophils by endogenous catalase., J. Clin. Invest., 65, 1515, 1980.

106. Rotruk J, Pope A, Ganther H, Swanson A, Hafeman D, Hoekstra W. 1973. Se: biochemical role as component of glutathione peroxidase. Science. 179.

107. Sayato Y., Nakamuro K., Hasegawa T. Selenium methylation and toxicity mechanism of selenocystine // Yakugaku Zasshi.- 1997.- V. 117, N 10-11.-P.665-672.

108. Schwarz K., Foltz C.M. Selenium as an integral part of Factor 3 against dietary necrotic liver generation. J. Amer. Chem. Soc.,79. 1957. P. 3292.

109. Sheffy, B.E., Schults, R.D., Influence of vitamin E and selenium on immune response mechanisms, Cornell Vet., Suppl. 7, 89, 1978.

110. Spallholz J.E. et al. Immunological responses of mice fed diets supplement-edwith sodium selenate, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 143, 685, 1973.

111. Spallholz J.E., Stewart J.R., Advances in the role of minerals in immunology. Biol. Trace Elem. Res. 1989.- 19, №3.- pp 129-151.

112. Stabel J., Reffet S.J.W., Brown T.T. and Brake J. Selenium effects on glutathione peroxidase and the immune response of stressed calves challenged with pausterells hemolytica//Anim. Sci. 1991.-67, №2. p 557-564.

113. Sun, Q, Wu Y, Zappacosta F, Jeang K, Lee B, Hatfield D, Gladyshev V. 1999. Redox Regulation of cell signalling by selenocysteini in mammalian Thioredoxin reductases. J.Biol.Chem. 274.

114. Sunde R.A. Intracellular glutathione peroxidases: Structure, regulation, and function // Selenium in biology and human health / Ed. R.F.Burk. N.Y.: Springer-Verlag, 1994. P. 146-177.

115. Sunde R.A. Molecular biology of selenoproteins // Annu. Rev. Nutr.- 1990.-V.10.- P. 451-474.

116. Swain В., Johri Т., Majumbar S., 2000, Effect of samplementation of vitamin E, selenium and their different combination on the performance and immune responce of broilers, Br. Poult. Sci., 41(3): 287-292.

117. Swecker W.S. et al. Effect of selenium supplementation on colostral Ig G concentration in cows grazing selenium-deficient pastures and on postsuckle serum Ig G concentration in their calves. Am. J. Vet. Res., 1995, V.56,№4.-p.450-453.

118. Takahashi K, Avissar N, Whitin J, Cohen H. 1987. Purification and characterization of human plasma glutathione peroxidase: a selenoglycoprotein distinct from the known cellular enzyme Arch.Biochem.Biophys. 256.

119. Taylor E.W. Selenium and cellular immunity: evidence that selenoproteins may be encode in the +1 reading frame everlapping the human CD 4, CD 8 and HLA-DR genus. Biological Trace Element Research., 1995, 49, pp 85-95.

120. Turner R.J., Wheatley L.E., Beck N.F.G., Stimulatory effects of selenium on mitogen responses in lambs. Vet. Immunol. Immunopathol., 8, 119-124., 1985.

121. Ursini F, Maiorino M, Gregolin C. 1985. The selenoenzyme phospholipid hydroperoxide peroxidase. Biochim.Biophys.Acta. 839.

122. Wang J.D., Hung J.P. Effect of intensive administration of Selenium on calves. Atti della Societa Italiana di Buiatria 1993., 25:591-595; 16 ref.

123. Waschulewski I.N., Sunde R.A. Effect of dietary methionine on tissue selenium and glutatione peroxidase activity in rats given selenometeonine// Brit.J.Nutr.-1988.-V. 60, N1.-P.57-68.

124. Waschulewski I.N., Sunde R.A. Effect of dietary methionine on utilization of tissue selenium from dietary selenomethionine for glutathione peroxidase activity in the rat // J. Nutr.-1988.-V. 118, N3.-P.367-374.

125. Whanger P.D., Butler J.A. Effects of various dietary levels of selenium as selenite or selenomethionine on tissue selenium levels and glutathione peroxidase activity in rats // J. Nutr.-1988.-V. 118, N7.-P.846-852.

126. Wu Z. et al. Altered selenium-binding protein levels associated with selenium- 2824 resistance. Carcinogenesis. 16., 1995., 2819 2824.

127. Yabiki Т., Kashiwazaki M., Namioka S. Quantitative analysis of three classes of immunoglobulins in serum of newborn pigs and milk of sowws// Amer.J.Vet. Res.- 1974.- 35,№12.-C. 1483-1489.