Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иммобилизованные копиии ретротранспозонов МДГ1, Aurora и кластер генов Stellate в гетерохроматине Х хромосомы D. MELANOGASTER

ВАК РФ 03.00.30, Биология развития, эмбриология

Автореферат диссертации по теме "Иммобилизованные копиии ретротранспозонов МДГ1, Aurora и кластер генов Stellate в гетерохроматине Х хромосомы D. MELANOGASTER"

Til« J

i '.i . ,

4«) • •• /

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ни. М.В.ЛОМО НОСОВА БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

На правах рукописи УДК 575.577

ШЕВЕЛЁВ ЮРИЙ ЯСЕНОВИЧ

ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ КОПИИ РЕТРОТРАНСПОЗОНОВ МДГ1, AURORA И КЛАСТЕР ГЕНОВ STELLATE В ГЕТЕРОХРОМАТИНЕ X ХРОМОСОМЫ D. MELANOGASTER

03.00.30 - молекулярная биология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА-1992

Работа выполнена в Институте молекулярной генетики РАН Научный руководитель: доктор биологических наук, проф. Е А. Гвоздев

Официальные оппоненты: доктор биологических наук а 3. Тарантул

кандидат биологических наук Н. В. Лобомирс кая Ведущая организация: Московский государственный университет им. М. & Ломоносова

Зашита состоится "_" _1992 г. в_час на

заседании Специализированного ученого совета Д. 053.05.70 при Московском государственном университете им. М. Е Ломоносова

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологического факультета МГУ.

Автореферат разослан "_"_ 1992 г.

/ / • Ученый секретарь Совета / ■

кандидат химических наук / .х К Н. Каграманов

/

Актуальность тёмьГ Гетерохроматин представляет собой компонент генома зукариот, составляющий 20-507. ДНК. Основная масса гетерохроматина D. melanogaster локализована в прицентро-мерных районах хромосом, где он молот Сыть разделен на области, состоящие преимущественно из сателлитных последовательностей, и участки, представленные умеренными повторами (Сета-гетерохроматин). В гетерохроматине D. mal anegas ter локализованы на сегодняшний день лишь несколько генетических локу-сов (кластеры генов рРНК, гены фергильности самцов, локусы Responder, ABO, light и др.). обычна представляющих собой структуры из тандемных повторов. Такое своеоСразие молекулярной организации гетерохроматических локусов может быть связано со специфическими особенностями их функционирования или отражать определенные пути эволюции последовательностей ДНК в гетерохроматине. Исследование протяженных районов бота-гетерохроматина , которые а значительной степени сформированы из иммобилизованных копий некогда мобильны.* элементов, представляется необходимым для понимания механизмов эволюции подобных структур. Пополнение списка известных гетерохроматических генов новым - локусом Stellate, участвующим в нарушении спермио-гонеза у самцов XQ - возможно прольет свет на механизм их функционирования в гетерохроматине.

Задачи исследования. Целью настоящей работы явилось клонирование и изучение районов гетерохроматина X хромосомы D. melanogaster с последующим анализом организации и свойств рет-ротранспозонов ВДГ1, aurora и генов Stellate, составляющих эти районы.

Научная новизна результатов исследования. В клонированном районе гетерохроматина X хромосомы D. melanoeaster были выявлены два гена Stellate, один из которых содержал интегрированные копии ретротранспозонов МДПгет и aurora Показано, что элементы подсемейства МДПгет иммобилизованы в одинаковом для каждой копии гетерохроматическом окружении у ра..лых линий D. melanogaster. Обнаружено, что все копии aurora - нового семейства, по структурной организации относящегося к ретротранс-позонам, также иммобилизованы в гетерохроматине D.

melanogaster, и, в то же время, перемещаются (или еще недавно перемешались) в зухроматине у D. simulans.

В дистальной части гетерохроматина X хромосомы обнаружено скопление генов и псевдогенов Stellate, локализованных ранее

лишь в эухроматическом сайте 1ZE X хромосомы. Предполагается их экспрессия и участие в нарушении спермиогенеза у самцов ХО.

Практическая ценность. Предполагаемая экспрессия генов Stellate в гетерохромагине дрозофилы позволяет научать особенности регуляторных элементов генов, функционирующих в гетерох-роматине. Это может Сыть полезно при создании трансгенных организмов в случае интеграции соответствующих генов в гетерохроматинизированные участки хромосом или при необходимости проводить трансгеноз гетерохроматическими генами.

Апробация работы. Результаты работы были представлены на V Всесоюзном биохимическом с'езде (Москва, 1985), VI Всесоюзном симпозиуме "Молекулярные механизмы генетических процессов" (Москва. 1987), V с'езде ВОРиС (Москва, 1987), VI Всесоюзном совещании по структуре и функциям хромосом (Пущино, 1988), VI Всесоюзном совещании по проблемам биологии и генетики дрозофилы (Одесса, 1989), П симпозиуме СССР-США "Структура зукарио-тического генома и регуляция экспрессии" (Тбилиси, 1989), XII Европейской конференции по дрозофиле (Mainz, 1991) и на I Всесоюзной конференция по генетике насекомых (Москва, 1991).

Объем диссертации. Материал диссертации изложен на _

страницах машинописного текста, содержит _ рисунков и _

таблиц. Список цитированной литературы состоит из _работ.

Основные результаты получены автором самостоятельно. Сек-венирование ДКЛ aurora выполнено совместно с НЕ. Беловой. Результаты по гибридизации in situ получены совместно с Е.Сп. Беляевой.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Традиционные манипуляции с нуклеиновыми кислотами (клонирование в космидах, субклонирование, введение радиоактивной метки в ДНК. определение нуклеотидной последовательности и др.) проводили по общепринятым методикам (Sambrook et al., 1989) с модификациями.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ 1. Клонирование участка гетерохроматина X хромосомы, содержащего гены Stellate с интегрированными ретротранспозонами МДР1 и aurora.

Для изучения районов генома, содержащих интегрированные копии ретротранспозона МДГ1, была сконструирована геномная

библиотека из ДНК мух линии 171 (Пасюкова и др. 1984) в кос-мидном Еееторе рДО, и иа нее на зонд №1 отобрано 27 клонов; некоторые характеристики 22 из них приведены в табл. 1.

Таблица 1. Характеристика космид, отобранных на ЦДЛ иа библиотеки генов линии 171.

N клона Гибри- Мощный Гибридизация Гибридизация Предпола-

дизация сайт при зонда 2 (рис с Ste-зонда- гаемый

in situ гибриди- 1) с <1рагме- МИ (РИС. 1) сайт кло-

с хромо- зации нтами > 0.26 1 4 нирования

центром in situ т. п. и.

р171- 1 + 3. 0; 1.3 + + хц

- г + 850 3.0 - 85D?

- 4 + нет - хц?

- 5 + 2.95 ; ю - хц?

- 7 - 93EF нет - 93EF

- 8 1.3 + хц

- 9 - 51CD 3.0; 1.8 - 51CD

-12 + 86D нет - 86D?

-14 +■ 3.0; 1,3 + + хц

-15 - 49F нет - 49F

-18 3.0 +■ ХЦ

-19 нет -

-20 кет -

-22 + 42А нет - 42А?

-25 3.0; 1.3 + + ХЦ

-26 3.0; 10 - хц

-27 + - - хц?

-28

-29 1. 3 + хц

-30 + 3. 0; 20 - хц

-31 + 3. 0; 1.3 + + хц

-32 2.5; 2.8; 8 - хц?

Анализ 14 космид методом гибридизации in situ на политен-ных хромосомах выявил неожиданно много клонов (10 из 14), ко-

торые, помимо сайтов МДГ1 и ряда дополнительных сайтов, дают интенсивную гибридизацию с хромоцентром. Лишь б космид (43Г) более интенсивно, чом сайты ЩГ1, метили какой-либо единственный зухротттестй сайт, который, вероятно, является сайтом клонирования (табл. 1). Несмотря на то. что ранее при исследовании локализации ВДГ1 на политенньос хромосомах не было отмечено заметной гибридизации . этого элемента с хромоценгром (Ananiev et al. 1978), мы предположили, что по крайней мере некоторые из отобранных космид содержат копии №1 из прицент-ромерного гетерохроматина, а их интенсивная гибридизация с хромоцентром обусловлена присутствием а этих клонах высокопов-торяицихся гетерохроматических элементов.

Принадлежность клонированного в р171-31 фрагмента к гете-рохроматину была показана при сравнении Саузерн-блотов геномной ДНК, выделенной из слюнных желез личинок дрозофилы, содержащих политенные хромосомы, и из' мух, ткани которых в основном не политенизироваяы. При этом использовалось известное свойство гетерохроматина подверга?ься сильной недорепликации относительно эухроматина при образовании политенных хромосом. Количество эухроматической части генома, судя по гибридизации с геном алкогольдегидрогеназы, уравнено в обоих препаратах ДНК (рис.2). Гибридизация с зондом 1 (см. рис. 1) показывает, что этот фрагмент, расположенный около МДГ1, относится к геномным повторам (рис. 2а). Большинство рестриктов, гибридизувдихся с зондом 1 в ДНК мух, отсутствует в ДНК политенных хромосом. 1.3 т. п. н. EcoRI фрагмент из космиды р171-31 Í рис. 1), содержащий ДКП и прилегающий к нему повтор, также исчеаает при по-литенизации, что указывает на принадлежность копии МДГ1 и самого района из этой космиды к гетерохроматической части генома

Секвеннрование и молекулярный анализ выявили в этом районе гетерохроматина (рис.1) две копии генов Stellate, одна из которых прервана внедрившимися в нее ретротранспозонами МДГ1гет и aurora Слева',, по данным Д. Я Нурминского, гены Stellate оборваны премыкающим к ним тандемом инсерций 1 типа в гены pPHK (jakubczak et al. 1990), а справа - по-видимому рет-ротранспозоном GATE (Di Nocera et al. 1986). Совокупность имеющихся данных указывает на принадлежность этого района к гете-рохроматину X хромосомы. Во-первых, как уже говорилось, EcoRI фрагмент из этого района размером 1.3" т. п. н. , подвергается

___i___

Ш>

GRGR

R КЯ

rm-at,

и

P171-1

D171-16

Щ1-Н

1)171-29,

Р171-Й i

Рис. 1. Структурная организация и рестриктная карта клонированного в коемвдах района гетерохроматина X хромосомы D. malanogaster.

Ретротранспозоны МДИгет и aurora (их ДКП указаны стрелками) интегрированы в один из двух генов Stellate (область Stellate на рисунке закрашена черным, Ste2-Komra с интегрированными ретротранепозонами. и нааапо Ste3-KonHH, оборванной GATE, не подписаны). Слева к ним премыкает инсерция I типа в гены рРНК. справа - элемент GATE. Сверху приведен вариант копии МДГ1, клонированной из культуры клеток (Ильин и др. 1981); 1-6 - гибридизационные зонды, использованные в работе; снизу указаны границы перекрывающихся космид, содерападах данный район; представлена структура вставки МДГ1, интегрированной в ВДПгет, которая выявлена в клонах р171-1, -8, -14, -18, -29, и экзон-интронная структура гена Stellate, взятая из (Livak 1990); обозначения рестриктаз: R, EcoRl, Н, Hindi 11. В, ВапШ. G, BglII, X. Xbal, Р, Pvull, С, Clal; сайты Bfrlll, Clal, Xbal и Pvu 11 представлены выборочно.

Рис. 2. Эксперименты по Саузерн-анализу, показывающие иммобилизацию МДПгег копий в гетерохроматине D. melanogaster.

1 - ДНК из мух gt wa, Z - ДНК из слюнных желез личинок gt >Л OR - Oregon RC. SV - Swedish b, CA - Canton S, GT - et w°, и 171 - см. (Пасккова и др. 1084); ДНК обработаны EcoRI и прогибридиэованы а - с зондом 1, внизу - с геном алкогольде-гидрогеназы, б, г - с зондом 2, в - с зондом 3 (см. рис. 1); стрелкам!! отмечены фрагменты, выявляемые во всех линиях (их интенсивность варьирует от линии к линии в зависимости от количества нанесенной ДНК и степени копийноети Фрагмента в геноме) ; указаны размеры фрагментов в т. п. и.

сильной недорепликации в ДНК политенкых хромосом, выделенной из слюнных желез личинок дрозофилы (рис. 2а), что является одним из характерных свойств пряцентромерного гетерохроматина (см. обзор Miklos and Cotsell, 1990). Во-вторых, район происходит из половых хромосом дрозофилы, поскольку К.Ливак (1984) продемонстрировал лишь в них существование Stellate гомологичных последовательностей у D. melanogaster. В-третьих, гибриди-аационный сигнал 1.3 т. п. н. EcoRI фрагмента из этого района примерно в два раза интенсивнее в ДНК самок, чем самцов, и, следовательно, изучаемый район иа X, а не из Y хромосомы. В-четвертых, в линии 171, из ДНК иух которой была сконструирована космидная библиотека, по данным гибридизации in situ МДГ1 отсутствует в сайте Í2E (Ласюкова и др. 1684). Все зто исключает происхождение исследуемого района из ранее известного для Stellate генов зухромзтического сайта 12Е и доказывает его Х-гетерохроматическую природу.

Саузерн-анализ ДНК 21 клона, проведенный с использованием в качестве гибридизационных зондов фрагментов гена Stellate из Р171-31, выявил их присутствие еще в 6 космидах (табл. 1). Построение частичных рестриктнык карг этих космид обнаружило их близкое сходство с р171-31 (рис. 1). Однако в рестриктных картах имелись и явные различия, позволяющие считать, что в этих космидах клонированы сходные по структуре, но разные участки гетерохроматина. Так в клопах pi71-1, -8, -14, -18, -29 ЫДПгет копия содержит вставку другой копии МДГ1, утратившей вероятно в результате рекомбинации около 2 т. п. н. на 3'-конце. Как и в pi71-31, эта вставка отсутствует в р171-25 клоне. Обнаружен также рестриктный полиморфизм между pl?l-l и р171-14 клонами. Эти данные указывают на существование в геноме по крайней мере грех районов со сходной структурой. Количественное титрование числа копий 1.3 т.п.«. EcoRI фрагмента позволило заключить, что в геноме линии 171 данный район гетерохроматина повторен около 5 раз.

Шжно предполагать, что в ходе эволюции D. melanog-aster произошло формирование изучаемого района в результате перенесения генов Stellate к элементам кластера генов рРНК, расположенных в гетерохроматине X хромосомы,, с последующей интеграцией в них ретротранспозонов МДПгет и aurora. Амплификация района и накопление рестрикционного полиморфизма, вызванного но-

выми инсерциями/делециями и иуклеотидными заменами, привела к образованию имеющейся на сегодняшний день структуры, составляющей по данным Л. И. Нурмииского около 10Х дистального гетерох-роматина X хромосомы дрозофилы.

2. Все копии ретротранспоаона ЦДЛ, относящиеся к подсемейству МДГ1гет,_иммобилизованы в гетерохроматине у Р.

ше1апо(га51ег.

Окружение ЧИП и структура его ДКП были подробно исследованы в космиде р171-31. ДКП этой и ряда других копий отличались от ранее описанных отсутствием одного из двух сайтов рестрикции БсоЯ! (рис.1). Как было показано ранее, в геноме 0. тв1апога5Ьег наблюдается заметная структурная гетерогенность копий НИЛ. причем около трети всех копий содержат ЕсоГ?1-рест-рикт размером 3.0 т. п. и. вместо 2.8 т. п. н. (Балакирева и др. 1084). Рестриктные карты клонированных копий МДР1 и частичное секвенирование ДКП из р171-31 показывают, что такой полиморфизм об'ясняется утратой ЕсоЯЬсайта в ДКП этих копий в результате 37 п. н. делеции. Секвенирование 2.5 т. п. н. из района ОРС такой копии позволило Д. И. Нурминскоыу отнести ее к подсемейству МШЧ. названному КДПгет.

Гибридизация с зондом 2, представляющим собой внутренний фрагмент ДКП С си. рис. 1), выявляет 0.26 т. п. н. рестрикт, соответствующий зонду, а также те фрагменты генома, которые содержат ДКП ИДИ, лишенные одного или обоих ЕсоК1 сайтов, как в случае копии из р171-31. В ДНК мух обнаруживается ряд полос гибридизации с зондом 2, что подтверждает присутствие в геноме разных структурных вариантов МДГ1 (рис. 26,г). Эти же рестрик-ты обнаруживаются к среди копий МДГ1, клонированных в космидах (табл. 1). Больинкство гибридизующихся фрагментов пропадает или ослабевает в ДНК из политенных хромосом (рис. 26). Это указывает на локализацию копий МДПгет подсемейства в гетерохроматине. Гибридизация зонда 3 (см. рис. 1) с ДНК из мух и из слюнных желез подтверждает этот вывод (рис. 2в). Видно, что практически все копии ЫДГ1, имеющие а 0 т. п. н. ЕсоЖ фрагмент, отсутствуют в ДНК из слюнных желез, т. е. располагаются в гетерохроматине. Отметим, что ряд копий НДГ1, сохранивших оба сайта Есо(?1 в ДКП, вероятно также находится в гетерохроматине, поскольку интенсивность сигнала гибридизации зонда 2 с 0.26 т. п. н. фрагментом, а также зонда 3 с 2.8 т. п. н. фрагментом ос-

4 - 13 -

о ч

•ч

ш

§

S fc, (ь, .

и. а о о

о Of о о

•fe?

ИБО 950

еоо

Рис. 4. Эксперименты по Саугерн-анализу, демонстрирующие локализацию генов Stellate размером 1150 п. н. в гетерохромати-не X хромосомы.

а - примерно одинаковое количество ДНК из слюнных желез и из мух линии 171. б - ДНК, выделенная для каждой дорожки из 8 самок указанных на рисунке генотипов, были обработаны рестрик-тазой Hhal и после электрофореза в 17. агарозном геле и блот-тиига прогибридизованы со Ste-зондом (смесь зондов 1 и б на рис. 1); размеры указанных мажорных фрагментов из (Llvak 1084).

в - структура гетерохрошгяна X хромосомы D. melanogaster. Указаны цитологически выявляемые блоки гетерохроматина (hA-hD), центромера (с), локус гША и протяженность делеции Df(l)X-l.

примерно б две раза слабее у гибридов, несущих одну X хромосому 0. m&lanoísster, чем у контрольных самок D, melanogaster с двумя X хромосомами. В то же время, 1150 п. н. Cfoí фрагмент генов Stellate, происходящих предположительно из гетерохрома-тина X хромосомы, примерно в 10 раз слабее у самок-гибридов с делецией по И-терохроматину, чем в контроле (рис. 46).

Можно огмэтить присутствие в гетерохроматине X хромосомы ряда Ste-последоватедьностей другой структуры нежели 1150 п. н. повтор, судя по «шорным фрагментам, ослабленным или отсутствующим у гибридных саюк с делецией. К ним относится, например, 1100 п. и. Cfoí рестрикт, расположенный на дорогие чуть нижэ 1150 п. к. фрагмента (рис. 4а,б).

Дата ответа ка вопрос, не являются ли гетерохроматические ste-последовательности псевдогенами Stellate генов, было проведено с свекирование двух копий Stellate -(Stol и Ste2) из клонированного в космидах р171-31, pl?l-14 оайона и их сравнение с определенной К Ливаном (1990) последовательностью Stellate кДНК (кДНК4). Как и ожидалось, гетерохроматические копии Stellate соответствуют 11БО п. н. варианту, фи сравнении видн , что Stel отличается ог кДНК4 лишь одной нуклеотидной заменой в 5' некодирующей области (рис. 5), в то время как Ste2 копия, "испорченная" внедрившимися ЦДГ1 и aurora, отличается от кДНК4 восемью нуклеотидами и одной микровставкой. Тем не менее, ни одна из замен не нарушает ОРС Ste генов. Последовательность Stel копии практически тождественна трем Ste-кДНК из шести, для которых она была определена (Livak 1990). Предполагая, что отбор кДНК был случайным и отражает представленность Ste-транскрипгов в их общем пуле, можно заключить, что примерно половина всех X-Ste тракскриптов приходится на 1150 п.н. вариант Stellate генов. Представляется однако маловероятным, что транскрипция нескольких гипотетических 1150 п. н. эух-роматических копий была бы сравнима с тотальным уровнем транскрипции многих десятков копий 1250 п.н. Stellate геноЕ из 12Е сайта. Необходимо отметить, что в гетерохроматине X хромосомы находится множество копий Stellate генов, о чем свидетельствуют рис. 2 и 4, а также имевшийся гетерохроматический YAG-клон, содержащий тандем из примерно десятка 1150 п. н. Ste-копий (данные Г. Л. Коган). Кажется вероятным, что эти гетерохроматические Stellate 'гены размером 1150 п.н. транскрибируются в

1..............1.......с------------1-------т----------------------------------------------------------а-----------------

г...........с..........с....................i-----------------------------------------------------------------------»-

41Шстц1Ш1пй[жлтв1жт^ 2«,

1-------------------------------с------------------1-—I-----------------------------------------------------------

2................................С---------WtOi—I-----J................................................................

. . .1Ы1

4 сштшшпш»ттишбссшси»шшшшттшпш sso

1...................................-1-й--------------------------------------------------------------------------------

2.......................................мм-—СС-------------------------------------------------------------------

4 шаитишшшстттшсттшсгснт «о

1--------------------1-----------------J..........................á------------------------------СС....................

2 --«------------------------------к........................К..............Т------------------------С-...................

4 ------------------шиишишшшшишшиши

». . . . .

i...........-............................................................................................................

2..................................................................-......С--------------*.....................-.......

4 titiiiMimttttti------------------------------------------------------------------------------------------------------

к с1шстгсш4та«м5ш(шс<жтсшсс^ по

1.......................................................-5--Í-............С-А............................................

2..............т...................С.....................5............................................................

4........................................................G--6-............М............................................

1 с1тсшм<шйсштшишссшшшге^^ «о

1 .......G................................................................................................................

2...............................................1------------------------------------------------------------------------

(.......5..............................................—------------------------------------------------------------

i юхссшпшсяшйттскташшишт^ w

1.....-..................................................................................................................

2..........-...................-----------------------------------------------------------------------------------------

1...................* !........."i i ' " Г "eroi"." "i.

i саотссаштштсссатшса^ losn

1...............................................................................................с-----------------------

2 ..............................................................................................С------------------------

t .......................................ШШМИИШИМПШШНШШШШШШШШШШ!.....................

< сгсшсайатесшсипсассшп^

i.......................Á........................."»««------------------

2.......................»...........................и-------------------

4 .......................».......-.................I»"»«--------------Sil

Рис. 5. Сравнение последовательностей гетерохроматических Stel и Ste2 копий из р171-31 и р171-14 космид со Stellate геном из pSX83. 4 клона и Stellate КДНК4 (Llvak 1990).

Последовательность Stel от начала до Bsrlll сайта в положении 861 определена из р171-14 клока, остаток Stel и Ste2 •• из pl7l-31 клона; черточка означает то жэ основание, что и в р5Х83. 4, звездочка - делеция основания; символы MDG1 и AUR0R показывают, соответственно, 4 и 5 оснований, дуплицированных после инсерций МДМ и aurora; РКК старт, иницкаторный Met кодом, донорный (D) и акцепторный (А) сайты сплайсинга взяты из работы Лииака (1990).

первичных спериающпах самцов D. malanogaster и, наряду со Stellate генами из 12Е сайта, при отсутствии у самцов Su(Ste) локуса Y хромосомы, играют заметную роль в нарушении спермио-генеэа

выводы

1. Клонирован протяженный (около 70 т. п.н.) район гетерохроматина X хромосомы D. irelanogaster в составе перекрьтаю-цихся космид. Часть района представлена таядемнэй дупликацией генов Stellate, участвующих в процессах спершзгенеза у самцов. В одну из копий Stellate интегрированы ретротранспозоны ВДЧгет и aurora Данный участок генома повторен в гетерохроматине около 5 раз. Обнаруженный структурный полиморфизм, выявляемый при исследовании перекрывающихся косющ, позволяет считать, к;о в ходе эволюции генома D. nelanogaster происходила ешлификащвг исследуемого района с нослед'тгоиш инсерциями мобильных элементов.

2. Копни подсемейства ВДГЧгет ретротранспозона ЦДГ1 сосредоточены в гетерохроматине. Каждая копия сохраняется, в силу своей немобильности, в одинаковом окрузкании у разных линий D. ш 1 anegas ter.

3. Элементы нового ретротранспозона aurora иммобилизованы в гетерохроматине у D. melanogaster и в то же время, судя по данным гибридизации in situ, перемещаются в эухроматине у вида -двойника D. siwulans.

4. В дистальноы гетерохроматине X хромосомы обнаружен кластер генов и псевдогенов Stellate. Секвенирование двух ге,-терохроматических копий Stellate выявило в одной из них сохранение ОРС и почти полную идентичность ее последовательности ряду секвенированных ранее Stellate кДНК. Это позволяет предполагать экспрессию генов Stellate в гетерохроматине X хромосомы.

Список работ, опубликованных то теш диссертации.

1. Шэвелез И Я. , Балакирева М.Д., Гвоздев В. А. Неизменное расположение копий мобильного элемента ВДГ 1 в гетерохроматических районах хромосом разных линий Drosophila melanograster. ДАН, 1987, т. 297, стр. 1243-1246.

2. Балакирева )L Д., Шэвелев Ю. Я., Гвоздев Е А. Новое семейство повторяющихся последовательностей в гетерохроматических районах генома Drosophila melanogaster. ДАН, 1988, т. 299, стр. 231-236.

3. Shovelyov УЛ., Balaklreva М. D., Gvozdev V. А. Heterochroroatic regions in different Drosophila u»lano?aster stocks contain similar arrangements of moderate repeats with Inserted copia-llke elements 0MDG1). Chrotrosoma. 1989, v. 98, p. 117-122.

4. Nurminsky D. 1., Shevelyov V. Y.. Gvozdev V. A. Tht structure of distal X hsterochromatic region of D. nslanognster. 12th European Drosophila Conference, Mainz. 1991, Abstract book,

. p. 273.

5. Нурминский Д. И. и Шевелев О. Я Иммобилизованные копии рет-ротранспозонов МДГ1гет и aurora в гетерохроматине D. rrolanogaster. Генетика, 1992, в печати.