Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Иксодовые клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) у собак

ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Пустовит, Наталия Сергеевна

Введение

Глава 1. Обзор литературы. Клещевой боррелиоз Лайма у собак.

1.1. История вопроса переносчиков.

1.2. Морфологические, физиологические и антигенные свойства возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов

1.3. Циркуляция возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов в природе.

1.3.1. Переносчики и резервуарные хозяева боррелий.

1.3.2.Географическое распространение и зараженность основных

1.3.3. Болезнь Лайма на территории Московской области.

1.3.4. Распространение болезни Лайма среди собак.

1.4. Патогенез и клинические проявления болезни Лайма у собак.

1.5. Изучение системы «паразит хозяин» на модельных объектах.

1.6. Методы лабораторной диагностики болезни Лайма.

1.7. Микстинфекции у собак, передаваемые иксодовыми клещами.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Обследованные собаки и лабораторные животные.

2.2. Возбудители болезни Лайма.

2.3. Методы исследования сывороток крови собак.

2.4. Диагностика лептоспироза.

2.5. Обнаружение возбудителей бабезиоза и эрлихиоза в крови собак.

2.6. Биохимические и клинические исследования крови собак.

2.7. Методы статистической обработки полученных результатов.

Глава 3. Изучение системы «паразит хозяин» на модельных объектах.

3.1. Результаты культивирования возбудителей БЛ.

3.2. Иммунный ответ мышей, зараженных изолятом colic (B.garinii)

3.3. Иммунный ответ кроликов, зараженных изолятом П1 (В.burgdorferi).

Глава 4. Разработка серологических диагностических систем для выявления зараженности собак возбудителями болезни Лайма на территории Московской области.

4.1. Иммунологические методы диагностики как основа для проведения мониторинга выявления зараженных животных на территории Московской области.

4.2. Дифференциальная диагностика болезни Лайма у собак.

Глава 5. Серологическая верификация и изучение клинических проявлений болезни Лайма у собак на территории Москвы и Московской области.

5.1. Характеристика животных на ранней стадии болезни Лайма.

5.2. Микстинфекция болезни Лайма и бабезиоза

5.3. Характеристика животных с Лайм-артиртами.

5.4. Характеристика животных с Лайм-нефритом.

5.5. Патологии сердечно-сосудистой системы при болезни Лайма.

Глава. 6. Обсуждение полученных результатов. 126 Выводы. 137 Список литературы.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Иксодовые клещевые боррелиозы (болезнь Лайма) у собак"

Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) (синонимы: иксодовые клещевые боррелиозы; Лайм-боррелиоз) - трансмиссивные природноочаговые инфекционные заболевания бактериальной этиологии. Возбудители ИКБ относятся к роду Borrelia семейства Spirochaetaceae. Патогенные для человека и животных виды боррелий объединяют в комплекс Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l.). Переносчиками боррелий являются клещи рода Ixodes группы persulcatus.

Изучение боррелиозов в нашей стране было начато в 1984 году группой исследователей под руководством профессора Э.И.Коренберга. В 1985 году с помощью метода непрямой иммунофлуоресцении в СССР были верифицированы первые случаи клещевых боррелиозов у людей (Коренберг и др., 1986). На сегодняшний день в Российской Федерации случаи этой инфекции ежегодно регистрируют от Прибалтики до Южного Сахалина. Таким образом, в России находится значительная часть мирового ареала Borrelia burgdorferi s. I. (Коренберг и др., 19876, 1994, 1995).

На наиболее населенной в России территории Московской области преобладают смешанные очаги иксодовых клещевых боррелиозов, в которых обитают два вида основных переносчиков: I.ricinus и I.persulcatus, однако встречаются как чисто «рицинусные» так и «персулькатусные» (Алексеев и др., 1985; Кисленко, Короткое, 2002). На сегодняшний день в подмосковных очагах ИКБ обнаружены три патогенных вида боррелий: B.afzelii, B.garinii, В.burgdorferi sensu stricto (s.s.) (Васильева, Наумов, 1996, Буракова и др., 1997; Масузава и др., 2001). Степень зараженности переносчиков колеблется от 10 до 35% (Садыблекова 2001; Арумова и др., 2002; Кисленко, Короткое, 2002). Однако среднесезонная численность одного из основных переносчиков ИКБ на территории Московской области - I.ricinus ежегодно возрастает, и за последние четыре года число особей превысило показатели пятидесятых годов в 2 - 2,5 раза (Бабенко, 1956; Кисленко, Короткое, 2002). Потепление климата с увеличением количества осадков в летнее время (Абакумова и др., 1998) вызвало заметный сдвиг сезонного хода I.ricinus, и привело к установлению «двухвершинного» типа сезонной активности. В связи с этим, возрос риск инфицирования людей и животных на протяжении всего периода активности иксодовых клещей (Кисленко, Коротков, 2002).

Регистрируемая заболеваемость болезнью Лайма (БЛ) для многомиллионного населения Москвы и области невелика -до 250 человек в год (Лексикова и др., 2002). Однако известно, что помимо трудностей диагностики, болезни Лайма свойственны субклинические формы инфекции, что ведет к гиподиагностике этого заболевания (Лексикова и др., 2002). Судя по доле (до 22%) инфицированных возбудителями БЛ людей из категории профессиональных групп риска (лесники, охотники, биологи и др.), число больных людей значительно превышает официальные данные (Лобзин и др., 2000; Лексикова и др., 2002).

На территории лесных массивов в формировании устойчивых очагов иксодовых клещевых боррелиозов участвуют, прежде всего, основные прокормители клещей: мелкие грызуны, ежи, зайцы, птицы нижнего яруса леса и другие животные. Принимая во внимание высокую численность собак, особенно бродячих, на территории Москвы и области (свыше 1,5 млн. домашних и десятки тысяч бездомных) (Балагула и др., 1999), эпизоотологами ставится вопрос об участии этих животных в поддержании природного очага ИБЛ на территории городов по следующим причинам:

1. Собаки чаще подвергаются укусам клещей, поэтому можно предположить более высокую инфицированность этих животных, по сравнению с людьми (Lindenmayer et al., 1991; Falco etal., 1993).

2. Собаки способны воспринимать и долгое время сохранять возбудителя при контакте как с взрослыми клещами, так и с нимфами (Лабзин 1985; Appel et al., 1993).

-63. Годовые и сезонные изменения заболеваемости БЛ собак совпадают с таковыми у людей. Поэтому собаки могут выступать как индикаторы эпидемиологической опасности очага (Lindenmayer et al., 1991)

Это значительно расширяет роль собак, особенно бродячих, в поддержании и расширении очагов ИКБ на территориях городов и других населенных пунктов (Falco et al., 1993).

Для ветеринарии актуальность изучения болезни Лайма определяется тем, что возбудители БЛ могут причинять значительный вред здоровью домашних животных, а иногда, например, в случае Лайм-нефритов, приводить и к летальному исходу (Dambach et al., 1997).

К сожалению, в России, несмотря на актуальность проблемы, до сих пор эпизоотологические и ветеринарные аспекты болезни Лайма у собак не изучали.

Цель настоящей работы - выявить зараженность собак возбудителями болезни Лайма; определить возможную роль этих животных в поддержании природного очага БЛ на территории Московского региона.

Исходя из цели работы, необходимо было решить следующие задачи:

1. Выделить из очага на территории Московской области и охарактеризовать изоляты возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов.

2. Изучить гуморальный ответ в системе «паразит хозяин» при экспериментальном боррелиозе у лабораторных животных (мыши и кролики).

3. На основании данных по специфичности иммунного ответа у модельных животных к изолятам боррелий разработать тест-системы для серологической диагностики иксодовых клещевых боррелиозов у собак.

4. Разработать схему выявления и обследования собак, подозрительных на зараженность боррелиями, описать клиническую картину иксодовых клещевых боррелиозов у собак

-75. Оценить возможность микстинфекций у собак и разработать схему дифференциальной диагностики.

Научная новизна. Впервые в России получено серологическое подтверждение заболеваемости собак клещевым боррелиозом.

Показана возможность диагностирования БЛ с помощью экспериментальных иммунохимических тест-систем на основе антигенов из подмосковных изолятов боррелий.

Выявлена корреляция между уровнем мочевины в крови животных, больных Лайм-нефритом, и титрами антител к возбудителям БЛ.

На территории Москвы и области обнаружены случаи заражения собак одновременно двумя трансмиссивными инфекциями: болезнью Лайма и бабезиозом. Практическое значение.

1. При исследовании 637 сывороток крови больных собак установлено, что в 15,7% случаев патологическое состояние животных вызвано возбудителями иксодовых клещевых боррелиозов - Borrelia burgdorferi sensu lato.

2. Выделены и генотипированы два изолята возбудителей ИКБ, циркулирующие в природных очагах на территории Москвы и Московской области.

3. Для серологической диагностики болезни Лайма у собак созданы экспериментальные отечественные тест-системы в форматах иммуноферментного анализа (ИФА) и иммуноблоттинга (ИБ).

4. Разработаны диагностические критерии выявления БЛ у собак и предложен алгоритм дифференциальной диагностики.

5. Предложены методы дифференциальной диагностики трансмиссивных микстинфекций у животных.

Апуобаиия работы: Материалы диссертации были доложены на научной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины мелких домашних животных на северном Кавказе» (Ростов-на-Дону, 1999), на УШ международной конференции «Lyme Borreliosis and other emerging tick-borne disease» (Германия, г. Мюнхен, 1999), на VIII, IX, X, XI Московских международных ветеринарных конгрессах (Москва, 2000, 2001, 2002, 2003) и научно-практической конференции «Клещевые боррелиозы» (Ижевск, 2002). Апробация диссертации проведена на заседании кафедры физиологии микроорганизмов МГУ им. М.В. Ломоносова.

Публикации: По теме диссертационной работы опубликовано 9 работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа написана по традиционному плану и состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения полученных результатов и выводов; содержит 160 страниц машинописного текста, иллюстрирована 58 рисунками и включает 34 таблицы. Список используемой литературы включает 170 источников, из них 127 зарубежных.

Заключение Диссертация по теме "Паразитология", Пустовит, Наталия Сергеевна

Выводы.

1. Из 637 собак, поступивших в ветеринарную клинику Москвы, 15,7% оказались инфицированы возбудителями болезни Лайма.

2. Уровень инфицированности позволяет рассматривать популяцию собак как один из дополнительных резервуаров боррелиозной инфекции на территории городов.

3. Установлено, что 16% собак с бабезиозной инфекцией коинфицированы возбудителями БЛ.

4. Выделены и охарактеризованы два подмосковных изолята боррелий: П1 (B.burgdorferi s.s.) и colic (B.garinii). Антигенный спектр полученных изолятов боррелий, позволяет использовать их для серологической диагностики боррелиозной инфекции.

5. Для серологической диагностики ранней стадии Лайм-боррелиоза предпочтительно использовать комбинацию антигенов из различных изолятов.

6. Обследование больных животных с подозрением на Лайм-боррелиоз рекомендуется проводить в три этапа:

• выявление специфических антител в ИФА

• дополнительное исследование на лептоспирозную инфекцию в реакции микроагглютинации положительных сывороток

• Исследование спектра антител в иммуноблоттинге для исключения эрлихиозной инфекции

7. Установлена диагностическая ценность отдельных белков российских изолятов возбудителей БЛ: выявление антител против белков р39, 37, 34, 31, 23, 21,19, 14 кДа являются маркерами развития боррелиоза Лайма у собак.

138

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Пустовит, Наталия Сергеевна, Москва

1. Акабумова Г.М., Исаев А.А. и др. 1998. Тенденции изменений климата Москвы в конце двадцатого века.// Природа Москвы. М., С. 39-49.

2. Ананьева Л.П. 2000. дисс. докт. Москва. С. 230-26

3. Бабенко Л.В. 1956. К вопросу о сезонных явлениях в жизни клещей l.ricinus и I.persulcatus. // Мед.паразитол. № 4, С. 346-352.

4. Балагула Т.В, Акбаев М.Ш. 1999. К методике заражения собак возбудителем бабезиоза.// С.н.т. конгресс С. 134-138.

5. Балагула Т.В., Заболоцкий В.Т., Акбаев М.Ш. 1999. Эпизоотология бабезиоза собак в условиях Москвы и Московской области.// Сб. научн. трудов МГУПБ.С.29-31.

6. Буракова О.В. и др. 1999. Обнаружение спирохет Borrelia burgdorferi у мух-кровососок Lipoptena cervi L. (Diptera). РЭТ-инфо, № 3 стр. 14-19.

7. Васильева И. С., Наумов Р. Л. 1997. Паразитарная система болезни Лайма, состояное вопроса. // Acarina Т.4, №1-2. С.53-75.

8. Горелова Н. Б., Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Постик Д. 1999. Зараженность клеща Ixodes trianguliceps оазличными геновидами боррелий в приуралье.// VIII Акарол. Совещ. СПб., с.21-22.

9. Горелова Н.Б., Коренберг Э.И., Постик Д. 20016. Первая изоляция B.burgdorferi sensu stricto в России.// Журн. микроб, эпидемиол. иммунол. 3:10-12.

10. Григорьева Л.А. 1996. Землеройки как резервуар боррелий на Северо-Западе России.// Паразитология. 30(5):458-459.

11. Григорьева Л.А., Третьяков К.А. 1998. Особенности паразитарной системы иксодовые клещи мелкие млекопитающие на Северо-Западе России.// Паразитология. 32(5):422-430.

12. Дубинина Е.В., Алексеев А.Н. 1999. Динамика биоразнообразия возбудителей болезней, переносимых клещами рода Ixodes: анализ многолетних данных // Мед. паразитол.2.С. 13-19.

13. Кисленко Г.С., Короткое Ю.С. 2002. Лесной клещ Ixodes ricinus в очагах иксодовых клещевых боррелозов северо-запада Подмосковья.// Паразитология, 36(6):447-456.

14. Ковалевский Ю.В., Коренберг Э.И., Левин М.Л. Сезонная и годовая вариабельность зараженности клещей I.persulcatus и I.ricinus возбудителями БЛ.// Проблемы клещевых боррелиозов. М., С. 137-156.

15. Коренберг Э. И. Ковалевский Ю. В., Кузнецова Р. И. и др. 1988. Выявление и первые результаты изучения болезни Лайма на Северо-западе СССР. Мед. паразитол. №1 С. 111-113.

16. Коренберг Э. И., Кузнецова Р. И. Ковалевский Ю. В., и др. 1991. Основные черты эпидемиологии болезни Лайма на Северо-Западе СССР. // Мед. паразитол., №3 С. 14-17.

17. Коренберг Э. И. 1997. Резервуарные хозяева и переносчики боррелий-возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов в России.// Журнал микробиол. эпидем. и иммунол. 6:36-38.

18. Коренберг Э.И. 2001. Изучение и профилактика микстинфекций, передающихся иксодовыми клещами.//Москва. Вестник РАМН. №11.С.41-45.

19. Коренберг Э.И., Горелова Н.Б., Постик Д. и др. 1997. Резервуарные хозяева и переносчики боррелий-возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов в России. // Журн. Микробиол. эпидемиол. и иммунолог. №6.С.36-38

20. Коренберг Э.И., Крючечников В.Н., Деконенко Е.П. и др. 1986. Серологическое выявление болезни Лайма в СССР. Журнал микробиол., эмидемиол., иммунобиол. №6 С. 111-113.

21. Коренберг Э.И., Крючечников В.Н., Ковалевский Ю.В. и др. 1987а. Клещ Ixodes trianguliceps (Ixodidea) новый переносчик Borrelia burgdorferi. II ДАН СССР. Т. 297. С. 1268-1270.

22. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Захарычева Т.А. и др. 1989. Болезнь Лайма в Хабаровском крае.// Мед.паразитол. №5 С. 74-78.

23. Коренберг Э.И., Щербаков С.В., Крючечников В.Н. 1987(6). Материалы по распространению болезни Лайма в СССР// Мед. паразитол. №2. С. 71-73.

24. Корренберг Э.И., Крючечников В.Н., Ковалевский Ю.В. 1990. Первые итоги и задачи изучения болезни Лайма в СССР.// Вестник АМН СССР. Медицина.-С52-57.

25. Лобзин Ю.В., Усков А.Н. и др. 2000. Лайм-боррелиоз (иксодовые клещевые боррелиозы) СПб, 2000, стр.160.

26. Лабзин В.В. 1985. Паразитирование на млекопитающих.// Кн. «Таежный клещ I.persulcatus». Наука. С. 291-307.

27. Лексикова Л.В., Наумов Р.Л., Гутова В.П., Ершова А.С., Арумова Е.А. 2002. Болезнь Лайма в Московской области.// РЭТ-инфо №2, с. 19-22.

28. Маршалл В.Д. 2000. Клиническая биохимия.// Санкт-Петербург, «Невский диалект», стр.71-74.

29. Масузава Т., Наумов Р.Л., Кудекен М., Харитоненков И.Г. 2001. Обнаружение Bjrrelia burgdorferi sensu stricto в Московской области, Россия. // Мед.паразитол. №2, с. 52.

30. Матущенко А.А., Венедиктов B.C. и др. 1996. Роль мелких млекопитающих в циркуляции боррелий в природных очагах клещевого боррелиоза на Юго-Западе Сибири.// Журн.инфек.паталогии. 3:37-39.

31. Назаренко Г.И., Кишкун А.А. 2000. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований.// Москва, «Медицина», стр.129-133.

32. Наумов Р.Л. 1985. Трофические связи// Таежный клещ Ixodes persulcatus. Л.: Наука. с.277-312.

33. Никольский П.В. 1896. Демонстрация случая atrophia cutis maculata // Дневник VI съезда русских врачей в память Н.И.Пирогова. №12.С. 89.

34. Поспелов А. И. 1906. Два случая самостоятельной атрофии кожи у взрослых // Мед. обзор.№ 26, С. 565-574.

35. Пустовит Н.С., Баранова Е.В., Штанников А.В., Бикетов С.Ф. 2002 Разработка критериев серодиагностики и оценка возможной этиологической роли Болезни Лайма в патологии у собак.// XX Московский международный ветеринарный конгресс, Москва 2002.

36. Садыкбекова Р.К. 2001. Изучение антигенной структуры поверхностного белка А (OspA) спирохеты Borrelia burgdorferi как основа для разработки новых иммунохимических методов диагностики болезни Лайма.// Автореф.дисс.канд. Москва.

37. Токаревич Н.К., Стоянова Н.А., Вертинский Б.В. и др. Иксодовые клещевые боррелиозы на Европейском севере и в Северо-Западном регионе.// Пробл.клещевых и перезитарных заболеваний. Материалы 6 Российско-Итал. конференции, С.-Г., С. 46-61.

38. Филиппова Н. А. 1990. Таксономические аспекты переноса возбудителей болезни Лайма.// Паразитология. 24(4):257-267.

39. Филиппова Н.А. 1977. Иксодовые клещи подсем. Ixodidae.// Л.: Наука, 396 с.

40. Филиппова Н.А. 1999. Симпатрия близкородственных видов иксодовых клещей и ее возможная роль в паразитарных системах природных очагов трансмиссивных болезней.// Паразитология. 33(3):223-241.

41. Andeson J.F Magnarelli L.A. et al. 1997. Antibodies to tick-borne pathogens of babesiosis, ehrlichiosis and Lyme borreliosis in white-footed mice.// J.Wildl Dis.33(3):466-73.

42. Angelov L.L., Arnaudov D.A. et.al. 1996. Epidemiology of Dermacentor marginatus-borne Lyme borreliosis.// VII Int. Congr. Lyme Borreliosis. San. Francisco. California. Abstracts. P. 110.

43. Ano H, Makimura S. 2001. Detection of babesia species from infected dog blood by polymerase chain reaction. J.// Vet. Med. Sci. 63(1) 111-3

44. Appel M.J., Allan S., Jacobson R.H. et al. 1993. Experimental Lyme disease in dogs produced arthritis and persistent infection.// J. Infect. Dis. 167:651-64.

45. Artsob H., I. Barker et al., 1993. Serological studies on the infection of dogs in Ontario with Borrelia burgdorferi, the etiological agent of Lyme disease.// Can. Vet J.34:543-548.

46. Azuma Y., Kawamura K. et al. 1993. Neurologic abnormalities in two dogs suspected Lyme disease.// Microbiol. Immunol., 37(4), 325-329.

47. Baneth G, Breitschwerdt E.B et al. 1998. A survey of tick-borne bacteria and protozoa in naturally exposed dogs from Israel.//Vet. Parasitology. 31,74(2-4):133-42

48. Banjerjee S., Stephen C. et al. 1996. Evaluation of dogs as seroindicators of the geographic distribution of Lyme borreliosis in British Columbia.// Can. Vet. J.37:168-169.

49. Baranton G., Postic D et al. 1992. Delination of Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia garinii sp.nov, and group VS461 assosiated with Lyme borreliosis.// Int. J. Syst. Bacteriol. 42:378-383.

50. Barthold S.,Levy S., Firkrig E et al. 1995. Serologic responses of dogs naturally exposed to or vaccinated against Borrelia burgdorferi infection.// J. Am. Vet. Med. Ass. 207(11): 14351440.

51. Barthold S.W., Beck D.S. et al. 1990. Lyme borreliosis in selected strains and ages of laboratory mice.//J. Infect. Dis. 162:133-138.

52. Barthold S.W., Bockenstedt L.K. et al. 1993. Passive immunizing activiti of sera from mice infected with Borrelia burgdorferi.!/ Infection and Immuniti. 61(11):4696-4702.

53. Barthold S.W., Persing D.H. et al. 1991.// Am. J. Pathol. 139:273-273.

54. Bauerfeind R., Kreis U. et al. 1998. Detection of Borrelia burgdorferi in urine specimens from dogs by a nested polymerase chain reaction. Zentralbl Bakteriol. 287(4):347-361.

55. Baumgarten B.U., Rollinghoff M. et al. 1999. Prevalence of Borrelia burgdorferi and granulocytic and monocytic ehrlichiae in Ixodes ricinus ticks from southern Germany.// J. Clin. Microbiol. 1999 Nov:37(l 1):3448-51

56. Bogaard van den A., Nohlmans M. et al. 1990. Lyme borreliosis in domestic animals; the situation in the Netherlands.//Ned. Tijdschr. Diergeneesk. 115:56S-58S.

57. Bosler E., Cohen D. et al.1990. Host responses to Borrelia burgdorferi in dogs and horses.// Ann NY Acad Sci:221234.

58. Brown C.R., Reiner S.L. et al. 1999. Experimental Lyme Arthritis in the absence of interleukin-4 or gamma interferon.// Infection and immunity, 67(7):3329-3333.

59. Burgdorfer W., Barbour A. et al. 1982. Lyme disease a tick-borne spirochetosis?// Science. 216:1317-1319.

60. Burgdorfer W., Barbour A. et al. 1983. Erythema chronicum mugrans a tick-borne spirochetosis.// Acta Tropica. 40:79-83.

61. Burgdorfer W., Anderson J.E., et.al. 1991. Relationship of borrelia burgdorferi to its arthropod vectors.// Scand.J.Infect.Dis.Suppl. 77:35-40.

62. Callister S., Jobe D. et al. 1996. Sensitivity and specificity of the borreliacidal-antibody test during early Lyme disease: a "gold standard"?// Clin. Diagn. Lab. Immun. 3:399-402.

63. Callister S., Schell R. et al. 1993. Characterization of the borreliacidal antibody response to Borrelia burgdorferi in humans: a Serodiagnostic test.// J. Infect. Dis. 167:158-164.

64. Carreiro M.M., Laux D.C., Nelson D.R., et al. 1990. Characterization of the Heat shock response and identification of heat shock antigens of Borrelia burgdorferi.!/ Infect. Immun. 58:2186-2191.

65. Centers for Disease Control and Prevention. 2001. Lyme Disease United States 1999.// Morb. Mort. Wkly. Rep. 44:590.

66. Chang Y., Appel M., Jacobson R„ Shin S„ et al. 1995. Recombinant OspA Protects Dogs against infection and disease caused by Borrelia burgdorferi.// J. Infect.Immun. 63(9):3543-3549.

67. Clark KL, Oliver JH Jr, James AM, Durden LA, Banks CW. 2002. Prevalence of borrelia burgdorferi sensu lato infection among rodents and host-seeking ticks in South Carolina.// J Med Entomol 2002 Jan;39(l): 198-206.

68. Dam A.P., H. Kuiper. et al. 1993. Different genospecies of Borrelia burgdorferi are associated with distinct clinical manifestation in Lyme borreliosis.// J. Clin. Infect. Dis. 17:707717.

69. Daniels Т., Fish D. et al. 1993. Canine exposure to Borrelia burgdorferi and prevalence of Ixodes damini on deer as a measure of Lyme disease risk in Northeastern United States.// J. Med. Entomol. 30:171-178.

70. Das S., Barthold S., Giles S., Montgomery R, Telford S., Fikrig E. 1997. Temporal Pattern of Borrelia burgdorferi p21 expression in ticks and mammalian host.// J. Clin. Investig. 99:987-995.

71. Delgado S., Carmenes P. et al. 1995. Seroepidemiological survey for Borrelia burgdorferi in dogs from northwestern of Spain.// Europ. Epidemiol.:321-324.

72. Dressier, F., Whalen J.A. et al.1993. Western blotting in the serodiagnosis of Lyme disease.// J. Infect. Dis. 167:392-400.

73. Egenvall A, Bonnett B.N. et al. 2000. Sero-prevalence of granulocynic Ehrlichia sp. and Borrelia burgdorferi sensu lato in Swedish dogs 1991 -94.// Scan J Infect Dis :32( 1): 19-25

74. Eng Т., M.Wilson, et al.1988. Greater risk of Borrelia burgdorferi infection in dogs than in people.//J. Inf. Dis. 158:1410-1411.

75. Falco R., H.D. Smith et al. 1993. The distribution of canine exposure to Borrelia burgdorferi in a Lyme disease endemic area. // Am. J. Publ. Health. 83:1305-1310.

76. Fawcett P.T., Gibney K.M. et al. 1991. Adsorption with a soluble E.coli antigen fraction improves the specificity of ELISA tests for Lyme disease.// J. Rheumatology 18:5:705-708.

77. Fikrig E., Berland R. et al. 1993. Serologic response to the Borrelia burgdorferi flagellin demonstrates an epitope common to a neuroblastoma cell line.// Proc. Nalt. Acad. Sci. USA. 90:183-187.

78. Garcia-Monco J.C., Benach J.I. 1997. Mechanism of injury in Lyme neuroborreliosis.// Sem. Neurol. 17:57-62.

79. Gauthier D.T., Mansfield L.S. et al. 1999. Western immunoblot analysis for distinguishing vaccination infection status with Borrelia burgdorferi (Lyme disease) in dogs.// J. Vet. Diagn. Invest. ll(3):259-65.

80. Giambartolomei G.H., Dennis V.A. et al. 1999. Induction of pro- and anti-inflammatory cytokines by Borrelia burgdorferi lipoproteins in monocytes is mediated by CD 14.

81. Girons S., Gern L., Gray G., et al., 1998. Identification of Borrelia burgdorferi sensu lato species in Europe.//Zentr. Bl. Bakteriol. Hyg.287:190-195.1

82. Girschick H.J., Huppertz H.I. et al. 1996. Intracellular persistence of Borrelia burgdorferi in human synovial cells.// Reumatol. Int. 16:125-132.

83. Glaser B, Gothe R. et al. 1998. Imported arthropod-borne parasites and parasitic arthropods in dogs. Species spectrum and epidemiologic analysis of the cases diagnosed in 1995/96.// Tierarztl Prax Ausg К Klientiere Heimtiere.26(l):40-6)

84. Gondolf K.B., Mihatsch M. et al. 1994. Induction of experimental allergic arthritis with outer surface proteins of borrelia burgdorferi.!/ Arthr. Rheumat. 37(7): 1070-1078.

85. Grauer G., Burgess A. et al. 1988. Renal lesions associated with Lyme borreliosis in a dog. J. Am. Vet. Med. Assoc. 193:237-239.

86. Greene R. 1990. An update on the serodiagnosis of canine Lyme Borreliosis.// J Vet Intern Med 4:167-171.

87. Greene R., Levine J. et al. 1988. Antibodies to Borrelia burgdorferi in dogs in North Carolina.// Am J Vet Res.49:473-476.

88. Guo B.P., Norris S.J., Rossenberg L.C. 1995. Adherence of Borrelia burgdorferi to the proteoglican decorin.// Infect.Immunol. 63:3467-3472.

89. Hagman K.E., Lahdenne P., Popova T.G. 1998. Decorin-binding protein of Borelia burgdorferi is encoded within a two-gene operon and is protective in the murine model of Lyme disease.

90. Hansen K., Dietz H. et al. 1989. Serosurvey for antibodies to Borrelia burgdorferi in Danish dogs//. APMIS. 97:281-285.

91. Helmby H., Kullberg M. et al. 1998 Altered immune responses in mice with concomitant Schistosoma mansoni and. Plasmodium chabaudi infections.//Infect. Immun. 66:5167-5174.

92. Hovius K.E., Beijer B. et al. 1998. Identification of four Borrelia burgdorferi sensu lato species m Ixodes ricinus ticks collected from Dutch dogs.// Yet. Quart. 20:143-145.

93. Ни С.М., Humair P.F. et al. 1994. Analysis of Borrelia burgdorferi isolates from rodens and free living ticks from endemic area in Switzerland.// VI Intern. Conf. Lyme Borreliosis. Bologna, Italy, June 19-22.

94. Inokuma H., Ohno K. et al. 2001. Detection of erlichial infection by PCR in dogs from Yamaguchi and Okinawa Prefectures, Japan.// J Vet.Med.Sci.63(7):815-7).

95. Jacobson R., Chang Y. et al. 1996. Lyme disease: laboratory diagnosis of infected and vaccinated symptomatic dogs.// Seminars Vet Med Surg. 11:172-182.

96. Johnson R., Schmid G.P. et al. 1984. Borrelia burgdorferi sp. nov.: etiological agent of Lyme disease.// Int. J. Sys. Bacteriol. 34:496-497.

97. Kawabata H., Masuzawa Т., Yanagihara Y. 1993. Genomic analysis of Borrelia japonica sp. nov. isolated from Ixodes ovatus in Japan.// Micribiol. Immunol. 37:843-848.

98. Kawabata, H., F. Myouga, et al. 1998. Genetic and immunological analyses of Vis (VMP-like sequences) of Borrelia burgdorferi.II Microb. Pathog. 24:155-166.

99. Klempner M.S., Noring R., et.al. 1994. Subversion of the host fibrinolitic pathway for invasion by the Lyme disease spirochete, Borrelia burgdorferi.// Societa Editrice Esculapio. Bologna (Itali), 97-100.

100. Korenberg E.I. 1994. Comparative ecology and epidemiology of Lyme disease and tick-borne encephalitis in the former Soviet Union.// Parasitology Today. 10(4): 157-160.

101. Korenberg E.I., Kovalevskii Y.V. 1999. Main features of tick-borne encephalitis ecoepidemiology in Russia.//Zbl. Bacteriol. 289:525-539.

102. Kornblatt A., Urband P. et al. 1985. Arthritis caused by Borrelia burgdorferi in dogs.// J. Am. Vet. Med. Assoc. 186:960-964.

103. Korrenberg E.I. 1995. Ixodid tick-borne borreliosis, infections of Lyme borrelioses group, in Russia: country report. 1995. Report of WHO Workshop on Lyme Borreliosis Diagnosis and Surveillance.// WHO/ CDC/VPH/95.141-1, Warsaw:Sanitati, p. 128-136.

104. Laemmli U.K. 1970. Cleavage of structurae proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.//Nature 227:680-685.

105. Lane R.S. Burgdorfer W. 1988. Spirochetes in mammals and ticks from a focus of Lyme boireliosis in California.//J. Wildl. Dis. 24:1-9.

106. Lane RS, Foley JE, Eisen L, Lennette ET, Peot MA. 2001. Acarologic risk of exposure to emerging tick-borne bacterial pathogens in a semirural community in northern California.// Vector Borne Zoonotic Dis 2001 Fall; 1(3): 197-210.

107. Liang F.T., Jacobson R.H., Straubinger R.K. et al. 2000. Characterization of a Borrelia burgdorferi VlsE Invariable Region useful in canine Lyme disease serodiagnosis by enzyme-linked Immunosorbent assay.// J Clin Microbiol. 4160-4166.Vol38.No. 11.

108. Liang, F. Т., Aberer E. et al. 2000. Antigenic conservation of an immunodominant invariable region of the VlsE lipoprotein among European Pathogenic genospecies of Borrelia burgdorferi SL.// J. Infect. Dis. 182:1455-1462.

109. Liang, F. Т., Alvarez A. L. et al. 1999. An immunodominant conserved region within the variable domain of VlsE, the variable surface antigen of Borrelia burgdorferi J I J. Immunol. 163:5566-5573.

110. Liang, F. Т., Philipp M. T. et al. 1999. Analysis of antibody response to invariable region of VlsE, the variable surface antigen of borrelia burgdorferi.!/ Infect. Immun. 67:6702-6706.

111. Lindenmayer J.M., Marshall D., Onderdonk A.B. 1991. Dogs as sentinels for Lyme disease in Massachusets.// Am.J.Publ.Health. 81 (11): 1448-1455.

112. Lissman В., Bosler E. et al. 1984. Spirocheteassociated arthritis (Lyme disease) in a dog.//J. Am. Vet. Med. Assoc. 185:219-220.

113. Liveris D. 1996. Lyme disease and ehrlichiosis.// Clin Podiatr Med Surg.l3(4):595-634

114. Liveris D., Varde S., Iyer R., Koenig S., Bittker S., Cooper D., et al., 1999. Genetic diversity of Borrelia burgdorferi in Lime disease patients as determined by culture versus direct PCR with clinical specimens.// J. Clin. Microbiol. 37(3):565-569.

115. Luft B.J., Jiang W., Munos P. 1989. Biochemical and immunological characterization of the surface proteins of Borrelia burgdorferi.// Infect. Immun. 57:3637-3645.

116. Ma Y., Weis J.J. 1993. Borrelia burgdorferi outer surface lipoproteins OspA and OspB posses B-cell mitogenic and cytokine stimulatory properties.// Infect. Immun. 61:3843-3853.

117. Macintire D.K., Boudreaux M.K. et al. 2002. Babesia gibsoni infection among dogs in the southeastern United States.// J Am Vet Med Assoc 1220(3): 325-9.

118. Magnarelli L.A., Anderson J.F., Fish D. 1988. Ticks and bitting insects infected with etiologic agent of Lyme disease Borrelia burgdorferi.// J. Clin. Microbiol. 26(8): 1482-1486.

119. Magnarelli L.A., Steven A.L., et al. 2001 Reactivity of dog sera to whole-cell or recombinant antigens of Borrelia burgdorferi by ELISA and inimunoblot analysis.// J. Med. Microbiol.- Vol. 50 (2001), 889-895.

120. Mather T.N., Telfold S.R.III. et.al. 1990. Borrelia burgdorferi and Babesia microti: efficiency of transmission from reservoirs to vector ticks.// Exp. Parasitol. 70(1):55-61.

121. Matthewman L.A., Kelli P.J. et al. 1993. Infections with Babesia canis and Ehrlichia canis in dogs in Zimbabwe.// Vet Rec. 2133(14):344-6.

122. Melski J.W., Reed K. D. et al.l993. Primary and secondary erythema migrans in central Wisconsin.// Arch. Dermatol. 129:709-716.

123. Mitchell P. D., Reed D. et al. 1993. Isolation of Borrelia burgdorferi from skin biopsy specimens of patients with erythema migrans.// Am. J. Clin. Pathol. 99:104-107.

124. Nadelman, R. В., Wormser G.P. et al. 1998. Lyme borrelios.// Lancet 352:557-565.

125. Philipp M. Т., Bowers L. C. et al. 2001. Antibody response to IRe , a conserved immunodominant region of the VlsE lipoprotein, wanes rapidly after antibiotic treatment of

126. Borrelia burgdorferi infection in experimental animals and in humans.// J. Infect. Dis. 184:870878.

127. Piesman J. 1989. Transmission of Lyme disease spirochetes.// Esp.Appl. Acarol. 7(1):71-80.

128. Piesman J. 1991. Experimental acquisition of the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi by larvae I.dammini during partial blood meal.// J.Med.Entomol. 28(2):259-262.

129. Piesman J. 1992. Vector competence of ticks for the Lyme disease spirochete.// Int. Conf. Tick-Borne Pathogens at the Host-Vector Interface: An Agenda for Research. Proc. And Abstracts.// Saint Paul. Minnesota. USA. 130-134.

130. Pichon B, Mousson L, Figureau C, Rodhain F, Perez-Eid C. 1999. Density of deer in relation to the prevalence of Borrelia burgdorferi s.l. in Ixodes ricinus nymphs in Rambouillet forest, France.// Exp Appl Acarol 1999 Mar;23(3):267-75.

131. Plessis J.L., Fourie N. et al.l990. Concurrent babesiosis and ehrlichiosis in the dog: blood smear examination supplemented by the IF test, using Cowdria ruminantium as antigens.// Onderstepoort J Vet Res 57(3):151-5

132. Postic D., Assous M.V., Crimont P.A. et.al. 1994. Diversity of Borrelia burgdorferi sensu lato evidenced by restriction fragment length polymorphism of rrf (5S) rrl(23S) intergenic spacer amplicons.// Int. J. Syst. Bacteriol. 44(4):743-752.

133. Postic D., Korenberg E.I., Gorelova N.B. 1998. Borrelia burgdorferi sensu lato in Russia and neighbouring countries:high incidence of mixed isolates.// Res. Microbiol. 148:691-702.

134. Reusch C., Hoerauf A., Lechner J., Kirsch M., et al. 1994. A new familial glomerunephropathy in Bernese mountain dogs. Vet. Rec. 134(16):411-415.

135. Rosa P.A. 1997. Microbiologia of Borrelia burgdorferi.// Sem. Neurol. 17:5-10.

136. Santiago H.C., Oliveira M.A. et al. 1999. Coinfection with Toxoplasma gondii inhibits antigen-specific Th2 immune responses, tissue inflammation, and parasitism in BALB/c mice infected with Leishmania major JI Infect. Immun. 67:4939-4944.

137. Schauer, D.B., McCathey S.N. et al. 1998. Proliferative enterocolitis associated with dual infection with enteropathogenic Escherichia coli and Lawsonia intracellularis in rabbit.// J. Clin. Microbiol. 36:1700-1703.

138. Schwan Т., Piesman J. et al. 1995. Induction of an outer surface protein on Borrelia burgdorferi during tick feeding.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 92(2909-1913).

139. Schwan T.G., Karstens R.H. et al. 1991. Changes in antigenic reactivity of Borrelia burgdorferi, the Lyme disease spirochete, during persistent infection in mice.// Can. J. Microbiol. 37:450-454.

140. Shanafelt V., Hindersson P., Soderberg C., et al., 1991. T-cells and antibody reactivity with Borrelia burgdorferi 60-kd heat shock protein in Lyme arthritis.// J. Immunol. 146:39853992.

141. Shanafelt V., Anzola J., Soderberg C., et al., 1992. Epitopes on the outer surface protein A of the Borrelia burgdorferi recognized by antibodies and T-cells of patients with Lyme disease.// J. Immunol. 148:218—224.

142. Sheet J.T., Rossi C.A., Kearney B.J. 2000. Evaluation of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay of Borrelia burgdorferi exposure in dogs.// J Am Vet Med Assoc l;216(9):1418-22.

143. Shich C.M., Pollack R.J. et.al. 1992. Dalayed dissemination of Lyme disease spirochetes from the deposition in the skin of mice.// J. Infect. Dis. 166(4): 827-831.

144. Shin S.J., Chang Y.F. et al.1993. Cross-reactiviti between B.burgdorferi and other spirochetes affects specificity of serotests for detection of antibodies to the Lyme disease agent in dogs.// Vet Microbiol. 36(1-2): 161-74.

145. Shoberg R., Jonsson M. et al. 1994. Identification of a higly cross-reactive geographic isolates of Borrelia sp. Causing Lyme disease.// J. Clin. Microbiol. 32:489-450.

146. Sonnesyn S.W., Manivel J.C. et al. 1993. A Guinea pig model for Lyme disease.// Infection and Immunity, 61(11):4777-4784.

147. Speck S., Failing K., Reiner B. 2002. Evaluation of different media and a BGM cell culture assay for isolation of Borrelia burgdorferi sensu lato from ticks and dog.

148. Speck S., Reiner B. et al. 2001. Isolation of Borrelia afzelii from a dog.// Vet Rec.7; 149(1): 19-20.

149. Stafford C., Massung R.F., Magnarelli L.A. 1999. // J. Clin. Microbiol.Vol. 37, N 9. P. 2887-2892.

150. Steer A.C., Malawista S.E., Snydman D.R., etal. 1977. Lyme arthritis: an epidemic of oligoarthicular arthritis in children and adults in three Connecticut communities.// Arthr. Rheum. 20:7-17.

151. Steer A.C. 2001. Lyme disease.// N. Engl. J. Med. 345:115-125.

152. Stich R. W., Rikihisa Y. et al. 2002. Detection of Ehrlichia canis in Canine Carrier Blood and in Individual Experimentally Infected Ticks with a p30-Basad PCR Assay.// J. Clin.Mic. Vol.40, №2 p.540-546

153. Straubinger R.K., Summers В., Chang Y., Appel M. 19976. Persistens of Borrelia burgdorferi in experimentally infected dogs after antibiotic treatment. J. Clin. Microbiol. 35:111116.

154. Stromdahl E.Y., Evans S.R. et al.2001.// J. Med. Entomol.Vol 38, N 1, P. 67-74.

155. Szczepanski A., Furie M.B. et al. 1990.//J. Clin. Invest. 85:1637-1647.

156. Talking J., Nickell S.P. et al. 1999. Borrelia burgdorferi spirochetes induce mast cell activation and cytokine release.// Infection and immunity, 67(3): 1107-1115.

157. Thomas V., Anguita J. et al. 2001. Coinfection with Borrelia burgdorferi and the Agent of Human Granulocytic Ehrlichiosis Alters Murine Immune Respons, Pathogen burden, and Severity of Lyme Arthritis.// Infection and Immunity. P. 3359-3371.

158. Tilton R.C., Rayan R.W. et al. 1993. The laboratory diagnosis of the Lyme disease.// J. Clin. Immunoassay. 16(208-214).

159. Towbin H., Staehlin T. 1979. Electrophoretic transfer of proteins from rolyacrilamide gels to nitrocellulose sheet: Procedure and some applications.// Proc. Natl.Asad.Sci. USA 76:4350-4354.

160. Varde S., Beckley J., Schwartz I. 1998. Prevalence of tick-borne pathogens in Ixodes scapularis in a rural New Jersey County.// Emerg Infect Dis Jan-Mar;4(l):97-9.

161. Vlay S.C. 1993. Cardiac manifestations.// In: P. Coyle, ed. Lyme disease. Mosby- Year Book p.86-92.

162. Wilske В., Preac-Mursic V, Schierz. 1985. Antigenic heterogeneity of European Borrelia burgdorferi strains isolated from patients and ticks hancet, 1:1099.

163. Wilske В., Preac-Mursic V. et al. 1993. Immunological and molecular polymorphisms of OspC an immunodominant major outer surface protein of Borrelia burgdorferi.!! Infect. Immun. 61:2182-2191.

164. Wittenbrink M. M., Failing K. et al. 1996. Enzyme-linked immunosorbent assay and immunoblot analysis for detection antibodies to Borrelia burgdorferi in dogs. The impact of