Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Характеристики вирусов гриппа серотипов А и В, циркулировавших на территории Казахской ССР в эпидемические и межэпидемические сезоны 1987-1990 гг.

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Автореферат диссертации по теме "Характеристики вирусов гриппа серотипов А и В, циркулировавших на территории Казахской ССР в эпидемические и межэпидемические сезоны 1987-1990 гг."

АКАДЕМИЯ НАУК КАЗАХСКОЙ ССР ИНСТИТУТ МИКРОБИОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ

На правах рукописи

КОЛЫВАНОВА Ирина Львовна

ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСОВ ГРИППА СЕРОТИПОВ АИВ, ЦИРКУЛИРОВАВШИХ НА ТЕРРИТОРИИ КАЗАХСКОЙ ССР В ЭПИДЕМИЧЕСКИЕ И МЕЖЭПИДЕМИЧЕСКИЕ СЕЗОНЫ 1987-1990 гг.

03.00.06 — рирусология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологичес"""

Алма-Ата, 1991 г.

Работа выполнена в Институте микробиологии и вирусологии АН

КазССРй КИЭМ МБ МЗ КаэСС НАУЧНЫЕ РУКОВОДИТЕЛИ

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

доктор биологических наук, профессор М. X. Саятов,

доктор медицинских наук А. Т. Исмагулов.

доктор медицинских наук, профессор А. Н. Слепушкин,

кандидат биологических наук А. П. Богоявленский.

ВЕДУЩЕЕ УЧРЕЖДЕНИЕ:

Киевский НИИ эпидемиологии и

инфекционных болезней

им. Л. В. Громашевского МЗУССР.

Защита состоится « И) » ^КуС^^Х ^99^ г в 54 чашв на заседании Специализированного совета (К 079.05.01) по защите диссертаций на соискание ученой степени кандидата биологических наук в Научно-исследовательском институте эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней МЗ Каз-ССР по адресу: 480002, Алма-Ата, ул. Пастора, 34.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан «

.1991 г.

Ученый секретарь Специализированного совета, кандидат медицинских наук

Н. М. НУРКИНА

сщлл шмттюшж шот

Грипп до иасгойцЭШ' lipöMSHE? остается одним аз сашвс кассовых явфекцйодашс ваболд^Нйй* наносящем огромный Бред здоровья людей и згачпгелышй экономический ущерб народному хозяйству. Наиболее иршшншм я НауЧШ обоснованным способом гфедупрегдекет it)!5iiöä ямйзгея октяглпй пшушзация тселакт с йзшщмз здш* ям ШИКтроваШШ МкЩН. Шззотду для поддержания высокой 3^^ekf:Efffioöfif йакШИаЦйй fpsßyeiM регулярная дадгоговка t? шяаченяо в чроиздадсгво тйуелшй: юкцгш-иых штатив. УказйНИоо обсгоягольстш, а гайко Колоссальная йнтн-генная вариабсльносгь гемагглигшш (ГА) ззйРУса гриНйэ дитпт нообходетым изучен йй его гонкой внйГбйШй ofpyitrypü tf ЁЗаимосвя-sofi у вфусов различных эпи:емйЧ9С1Ш сезонов, одо больше значзншз для дгсзгносгиш п правильного подбора вЗКЩИЯьйс ßlamos.

В перпод npetff^eöiBötmo sittoreiMoxti xspeftrspa р09И15гйЯ ЭПгт-демгтй актуальным лзл/югея щхдагозяровгшггз fix з?Юлода9бК»й профилей как в цалом яо CCCi» tan я в отдельных круяшй городах . или рогподав.

Казахстан' ййаег разнообразный клпмато-географиЧоскйЗ у&йШШЬ сходные d 'йяюшом Йга-Воогочноа Азия, огрокнув reppafoptw й об« щуй*-0ояш>Я дрогшшйоегя границу о Китаем, гяо часто шйййй-зд? ваша ййгйгощша cgjüjaata едусов гриппа, эпкшадт гряпаа в IfesasOKOi! CiC? яазяягсл эдеть» пддаого эпялсмйто'свзго процесса 8 .. 01РЗЙЭ. Ршй'йз пояааовяо пх -в эгом регионе дело основало пр'й" полоайй!» 4to Кйжксти 'я Средни» Дзвя ярляягсл однвм "S яаШ» них очагов, из Eotopow истдаогел.распространений завишв Ш сграш (Карпухги и ДР.Л579; Игшжпсос ¡т др*Д?33!. 3 йШ;! Bcocropoimsc язучэняв .атгешйй згр.уягури « сюйсгз сорусом, вдфкулярувщях из re^pn горле Казахской С(Л* пред-

■5гааияет особый интерес.

Ц^Ш^ШШЩШШ. Целью настоящей рабогы было выяснение особенностей расцрос ¡ранения вирусов'гриппа среди '-населения Казахской ССР* исследование антигенной структуры и биологических свойсгв эпидемических штаммов для изучения цроблещ изменчивости вирусов в естественных условиях.

Для достижения указанной цели предполагалось решение следующих задач:

1. Провести анализ заболеваемости гриппом населения Казахской ССР в эпидемические сезоны 1387-1390 гг.

2. Выявить вирусы гриппа, циркулирующие в эпидемические и межзпидемяческие периоды* определить значимость отдельных сера-подтипов вируса гриппа Л и серо типа В в эпидемиологии и этиологии вспышек,

3. Изучить в сравнительном аспекте антигенные и биологический свойства вирусов гриппа, изолированных а различных регионах-республики и установить степень гетерогенности природных популяций циркулируй их штатов.

ЙЗЙШМчШДШШ» Впервые на большом фактическом к: -"ериале система гизпровалы данные вирусологического исследования возбудителей хрипла в Казахстане за 1387-1950 гг. Показан постоянный уровень гетерогенности современной популяции вирусов гриппа в продолах типов, подтипов и шгаммов. Установлено частичное несоответствие антигенной структуры возбудителей эпидемии гриппа Л(НШХ) 1938-1233 гг. и Л(НЗ«2) эпидемического сезона 1930 г. актуальным эталонным вариантам, что обусловливает важность локального этиологического мониторинга и прогнозирования ,опидеи Впервые в составе казахстанских изолятов вируса л(нзМ2) Х95'< и 1990 гг. выявлена оригральная шташоопоцпфйчоскоя детерминанта.

Новизна изолированных пгаммов шдтверядена 3 положительными решениями (.Я 480X739/13 (029375), 1990 г.; № 4819444(047502), 1990 г.; >э 4899584 (001885), 1991 г.) Государственного Вэмитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР.

1. В период с 1987 по I9SQ гг. оказывалась помощь практическое адравоохраненио црп расшифровке этиологий гриппозных заболеваний п идентификации вкусов, циркулировавших га территория Казахской ССР.

2. В Государственную коллекции вирусов депонированы 4 и га ила вируса гриппа A(H3N2) .всшльзуешв для прйгоровлзния диагностических црепаратов и проведения фундаментальных шучных исследований (номера депозитов - ГКВ $ 21891 ГКВ ¡i 2190, ГКВ й 2253. ГКО й 2254).

3. Материалы диссертации по эпидемиологии и иммунологическому анализу вирусов гриппа включены в ежегодные огчзтн(1987-1990 rr.j Казахского республикансюго центра го гриппу и ОРЗ, Представляемые в региональный центр СССР{Санкт-IIeгорбург)я в ИЗ Казахской ССР.

4. Оформлено рацпредложение "Способ эксцресс-тданации вирусов гриппа" (от 17 июня 1908 г.).

1. Этиологическая структура воз будит ела 2 гриппа в КазахскоЗ ССР в 1987-1990 гг. характеризовалась резко выразешюй антигенной гетерогенностью.

2. Вирусы сероподтипа.АСнзиз) ,обусловишь этдамив гриппа 1387-1388 гг., обладали широким антигенным спектром ЕА и imfipa-мпнпдазы (НА).

3, Вирусы A(U5N2) 1990 г, ПРОЯВЛЯЛИ близкое родсгю с современными дрейф -вар нал ганя А/Снчугшь/2/87 ' и А/Гуавдонг/39/89 . и обладали шташлзспеця<$ичаско$ де?ерьшнаро0, одинаковой для-. двух неравнозначных ipyim вирусов, .

4. В эпидемию a(himi) 1989 г, в #а?ахскйй ССР Циркулировали гйфуси разновидности А/Та йшнь/1/85 и один из рашцтх дреЩ-вариантов вируса a(bini) - А/Бразилия/П/70.

5. Межэпидемическиб иэолягы вирусов гриппа a(hihï) 4вы-; деленные в 1987 г. в Алиа-Аге, иродегавдяди собой смесь двух неактуальных серовариш год A/CCCP/S0/77 и А/Бразилип/П/78. .„

ДДШ¿аЦ^ЛМХ&ЛИл.^ Материала диссертации доложены и обсуя -дены на: , .

1. Научно-практической конференции молоди ученых Института • микробиология и вирусологии-АН КазССР (ÏS39),

2. Биологической конференция молодых ученых Еоз1У. им, C.Î.I. Кирова (1991). * . .

3. Всесоюзной конференция "Мякробиологические и биотехнологические основы, интенсификации производства" (Алма-Ата, IS9I),

4. УШ Обьедивениом съезде гигиенистов, мякробиологов«эппдо-ыирлогов, паразитологов и и14окцяонис1Юв Белоруссии (МлнскЛ991)"»

5. У Объединенном съезде гигвенисгов, эпидемиологов,микробиологов, шразигологозвйнфевдйоивегов Казахстана (Длма-Агав1991),

В завершенном видо дяссвргавдошш работа доложена на совместной .заседания секции 'вирусологии Шсгвтуга микробиологии и вирусологии AII КазССР и овдо'ла вдеуоологки НИИ опцдвмдологяи» ■ микробиологии и «нфекциошцве болознеТВ fâ КазССР. (1991)

Основнцо положении диссертации огражопы л 10 иоучних patío- ,

Работа изложена на 150 страницах машинописного текста, иллюстрирована 5 рисунками, 36 таблицами и содержит приложение.состоящее из 9 наименований. Бяблио-■ графический'указатель включает 167 литературных источников (99 отечественных я 68 зарубежных). Диссертация состоит из введения, 4-х глав обзора литературы, 4-х глав экспериментальных исследо-ваттиЗ, обсздьениэ, выводов и списка цитированной литературы.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ШЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В работе выполнен анализ ежемесячных отчетов городских и областных СХ за период с 1937 по 1990 гг., приведены статистические показатели заболеваемости гриппом.

За период наблюдений исследовано 2000 носоглоточных смывов, 984 парных и 665 одиночных сывороток крови от стационарных,амбулаторных больных и доноров Алма-Аты; изучено 80 изолягов вируса гриппа, из которых 43 относились к сероподгипу а(нзнг) ,18 - к а(Н1Н1) и 19 - к серотипу В.

В работе использовали эталонные шгашы вирусов гриппа А и В и вирусы-рекомбинанга Р-За ( К1нз ), Х-31 ( Н1Н2), Р-72 СДС-Г8 (Н7Н2), Р-17 (Н7И2) и Р-19 (Н7К1 полученные из коллекции музеев Института вирусологии м, Д.И.ИваговскЬго АМН СССР (Москва) и института гриппа МЗ СССР (Санкт-Петербург).

Изоляции эпвдемя^сЕй® и мзжэпотемическгк штамг.юв вирусов гриппа проводили на 10-11 даевних куриных эмбрионах и перевиваемых клеточных культурах змбргока почек собак (ЩЮК).

Клонирование вирусной популяции осуществляли общепринятым методой предельных разведенгтй » техникой клонирования вирусов методом пляк на култ,туре кленок щсК.

Иммунные кроличьи сыворотки получали от взрослых нйвэтнщ; породы Шиншилла с использованием 2 схем, одна из которых занимала 3 недели и заключалась в 2-крагдам введении аихигвна.дау-гую осуществляли в те чей но 4-х недель.Крысиные иммунные сыворог-ки готовили путем 4-кратиой внутрибршинной иммунизация вирус-содерлвдей аллантоисной жидкостью с недельным интервалом.Сыворотки для реакции подавления нейраминдаазной активности (PffilA) получали ПО методу C.Paniker (1968).

Моноспецифические безынгибпгориые сыворотки готовили по методу П.Н.Косякова с соавт. (1976). Идентификацию гешгглютини-руювдх агентов проводили в реакции горшке имя т,агглютинации (РТГА), реакции ингибиции элюции (РИЭ), реакции непрямой гемаг-глютинации (РИГА) и РПНА. PITA ставили по методике, рекомендованной ЮЗ (1959). Р1ША выполняли по методу D.Aminoff (1961), H.Webster и н. Регеira.(1968). используя л качестве субстрата фетуин. РИЭ проводили по описанию Н.В.Тоцурия с соавт. (1979). РИГА агавили мцкромегодом на " и образных панелях микротитра-тора Гака ч : (Венгрия).

Анализ антигенного состава ГАХ эпидемических и ь. "■'эпидемических изолятов вирусов гриппа проводили в PITA и РГШЛ. с использованием набора полнило нальнш: крысиных референс-сыгорэток.шно-клонзлышх антител (МКА.Т) к вирусам A/íM/l/47, A/Texac/l/77, А/Ьразилия/11/78, Л/Бангкок/1/79, А/Англия/ЗЗЗ/80, Л/ФйДипвдны/2/8; а также кроличьих моноспецифичзских сывороток к отдельным антигенным детерминантам ГА вирусов гриппа.

Автор выражает искрошит благодарность канд. мед.наук ' Е.И.Иссошй и докторам мед.наук М.А.Яхно и С.С.Ямииковой за ценные научные консультации и любезное предоставление иммунореагентов

ИМмудаадсорбвдонннй анализ проводили по методу П.Н.Косякова с соавт. (1974).

Биологические свойства вирусов - гемагтлюпшцругадув.ней-раминндазную и этфкционнуп активность, способность к рецродукци" при различных условиях инкубация, чувствительность к дойсгшв ингибиторов сывороток нормальных жию тных, спектр гемагглютини-руйщей:активности, сорбцконно-десорбционные свойства - определяли общепринятыми методами.

Электрофорез.вирвоншя белков проводили при восстанавливающих условиях в пластине ПААГ по методу и. ЬаешгаН (1970).

При статистической обработке использовали следующие методы: бравнание серий по способам связанных и несвязанных выборок с ¿¿числением критерия достоверности, двухф'акторкый дисперсионный Йтлкз, частотный анализ.

РЕЗУЛЬТАТЫ' ИССЛЕДОВАНИЙ

д. ОСОБЕНШСТИ АШИГЕНШП) СОСТАВА И БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВИРУСОВ. ГРИППА Л(НЗМ2) И В.БЦДЕПНШХ В ЗШЩЕШШ IS87-I988 гг.

В 1987 г. заболеваег-рсть гриппом в Казахской ССР была зарегистрирована па 4б-оi! неделе в Алма-Ате и Актюбинске среди детей 3-6 и 7-14 лет. Вспышка била вызвана вирусом гриппа В.

2 изолята, ввделенще в этот период в Алма-Ате, утратили антигенные взаимосвязи с возбудителем предвддоЯ вспшки 1986 г. -З/Энн Арбор/1/86, слабо реагировали-" с современными дрейЗ-вэриан-ггзд В/СССР/4/87 п З/СССР/б/еЗ.

На этом фоне в январе 1988 г. в Алка-Аге на 4-2 неделе начался эпидемический подъем заболеваемости, обуеловяеннгй вирусам грггппа д(Н5К2) . Шгашы вируса гриппа A(HJH2) изолирован-

ныв в эпидемический период 1987-1968 гг. в Казахской ССР,нельзя бшю четко .дифференцировагь на определенные группы по характеру их взаимодействия с большим набором шгамшспецифических поли-клональннх крценных сывэроюк. Оказалось, что каждый из изолягов обладает свойственной его ГА антигенной характеристикой. Из II ■штаилов, ввделеиных в Алма-Ате, 2 штамма 1А/Алма-Ага/18б/88, А/Адю-Ата/212/88) имель- сходство с современным вариантом А/Сычуань/2/87. Подобным характером взаимодействия с ангисыворот-кой к этому эталону отличался и изоляе А/Алма-Ага/217/88, проявляя, кроме того, выраженное родсгиэ с дрейф-вариантом А/СССР/2/85. Группа штаммов (А/Алма-Ата/204/88, А/Алма-Ата/190/88, А/Алма-Ата/ 196/88, А/Алма-Ага/187/88) являлась промежуточной между эталонами А/Ленинград/360/86 и А/Сычуань/2/87. Изолят А/Алма-Ата/184/88 бил близок 1руппе штамшв 1984-1987 гг. и в то же время цроявлял отдаленное сходство с эталоном А/Сычуань/2/87.

Большинство эпидемических изолятов А(нзнг) слабо - до.'' ' 1/4-1'16 гомологичного титра - взаимодействовали с эталонами 1973-1977 гг., в то время как с эталоном А/Филиппины/2/82 родство оказалось достаточно выраженным (рис,1). По характеру взаимодействия с серной МКАТ к этому эталону одни из изоляг т имели все эпитопи, узнаваемые большинством МКАТ и утратил и эпигоны штамма - предшественника л/Баншок/1/79, другие - являлись 'промежуточными ш:еду двумя эталонами, третьи - представляли собой дрейфсарианги вируса А/Банпсок/1/79» Эти данные свидетельствуют о продолжающемся дрейфе ГА НЗ. Интересен факт изоляция опидемичес-кого вируса А/Алма-Ата/18б/08Л который сохранил относительное родство с ранними штаммами А/Техас/1/77, А/Банткок/1/79 'и А/м * лиши- ни/2/82 и в то ¡¡со время нанялся сичуапоподоояш. В отру к-туре ГА этого изолягэ имелась антигенная детерминанта, общ^« с

г,:с.1 АШгааыа АНАЛИЗ тШТЛШЖША ЗДУСОВ ГРИППА АШЗК2) 1967-1988 ГГ. В РТГА С ШШШНАШШИ АНШТШШ

Ярусами А/Еангкок/х/ТЗ и Л/Фцлипшны/2/82, что служит ®д-ллрадошиш ангигепних взаимосвязей мевду ними.' Оригинальная детерминанта 03.16, присущая ГА рофероно-штаикй А/Сичуань/2/8'?, «¿«еловпла сходство штамма А/Алш-Ага/18б/88 -.с этим эталоном. А ггзолята - А/Чимкенг/151/88, А/Алма~Ага/215/88 • и А/Алма-Ата/ . j. 33/88 принадлежали к вирусам миссисяпской подгруппы, которая посильно отличалась хо.юм эволюционного развития от А/СССР/2/В5 - гйдобних вирусов (i»'данным Литвиновой, 1989). . Несмотря на розителышо отличив в -принадлежности-штаммов к различным антигенным групп(Грошсам, меаду ними.существуют определенные взаимосвязи, как например, можду достаточнообособленными группами вирусов (бангкоксюй и фдапгтнекой с.одной стороны-и А/СССР/2/ 86 - с другой). Другой 'чигясантский''изолят - А/Чимквнг/233/88 проявлял близкое родство с обоими актуальными в опидсезоя эталона?.« А/Лснг<нгрэд/Зб0/б6 и Л/Сичуяьъ/2/07 (нейтрализовался антисыворотками к ним до 1/2 гтплоги'шого тигра) и также был-огиссон к лромелугоадой хрупио.

Но »¡раглинидпзний конго цент эпидемячо ских вирусоп также пре-териол судсстадншй-Дройф,' поскольку энзимы представителей ис-сл'едуемой. группы вгфусов л значительной степени отличались от ферментов эталонов А/Тохэс/1/77 я А/Баитх/1/79, но биня родствен нк. »езду собой. Гзгорогашюсть' свозгепзолирогоннцх штаммов проявлялась также и науровно антигепних вариантов.Так,пирусц, да::;о отнссощшо по -антигенной характеристике к одной группе,обладали целш ибьшдексом окродолвшшх биологичзских с-юйсгв. •

П. ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСОВ ГРИШ Л(Н1Н1),Л(НЗН2)

и в, циркулировавших в эпвдшию 1988-1939 гг.

Подъем заболоваемзсга гриппом а Казахской ССР в 1989 г. начался в неделю 2-8 января в Нарзгааде и Джамбуле и в последующем эпидемия распространилась по другим городам.Изолировано 20 гемагглйгишрующих агентов, 6 из которых отнесены к вирусу гриппа а(И1Ш) , 5 - к вирусу В. 5 - к л(нзнг) ,4 иэолята оказались смесью сьровариантов вируса сероподтипа а(п1к1) шгамма л(нхк1) принадлежали к группе А/Тайванв/х/Об-подобных, что соответствовало <$акту циркуляции таких вирусов по строке.По было изолировано нн одного современного штамма,близкого ред'вронс--эталону А/Сычуань/4/88. 2 варианта оказались др9й$4оркамл вируса А/Бразвлия/11/78, вызвавшего эпидемии гриппа более чем десятилетие тому назад. Вероятно, з процессе поступательного дрейфа, сопровоздавдвгося появлением новых гаркав гов, характеризующихся постепенной утратой старых антигенных детерминант и отдален нем новых, сохраняются в вирусы с неактуальной антигенной структурой, которые могут принимать активное участие в чпидещ-ческом процессе.

Особый интерес представляет выделение в Казахской ССР смешанных стенотипических популяций вирусов одного подтипа в связи с их неясной ролью в эволюции вирусов гриппа. Следует отмэгигь определенные трудности изоляции и первичной■идентификации подобных ассоциаций. Коммерческие диагностические лошади.ло сыворотки на были способны определить подтип свежеизолировацных вирусов.В РТГА с применением крысиных и кроличьих иммунных сывороток штаммы проявляли "двуангагенные" свойства относительно эталонов подтипа А(Н1И) ц дго сероварцанга А(Нв»ДИ).

Широкий.спектр антигенной активности эпидемических вирусов

а(Н1ИХ) Х989 г, молено обьясить большим числом выявлемкх антигенных детерминант в составе ГА, либо выделением от больных гетерогенных вирусных популяций, неотселекционированных ''ои \ троекратном пассировании продельными разведениями. Клонирование вышеназванных вирусов методом пляк в культуре клеток ВДСК позволило разделить их на 2 сублопуляции..Одна из них, характерная для вирусов А/Алма-Ага/о/89, А/Алма-Ата/64/89. А/Алма-Ата/218/ВЭ, А/Алма-Ата'/62/89, после разделения по црофилю антигенных детерминант ГА совпадала с таковым вируса А/Бразилия/11/78. т.е. ГА отсалркциошрованного члона содержал 3 антигенные детерминанты: I) общую для подтипа а(нхК1) 4 2) групповую и 3) штаммоспвцифи-ческую детерминанту эталонного варианта А/Брозилия/11/78.Другой клон■изученных изолятов также содержал 3 антигенные детерминанты: типоспецифическуп, присущую вирусам подтипа л(нхгт) .групповую

- общув да.. 2 эталонов А/свинья/Айовз/15/30 и Л/В?/8/34, а также

- шгаммоспешк&ичаскую для классического свиного штамма А/свинья/ АШви/15/30. (табл.1). Таким образом, анализ состава антигенных детерминант ГА одной чз популяций Еируса, я^дяощойся составной частью дикого штамма, показал ее полную идентичность свиному варианту А/свинья/Акова/15/30 в неизменном виде, однако различия в биологических свойствах исследуемой .субпопуляции и ¿.талона указывают на происшедшие изменения в структуре штаммов, пассированных в организме человека и подвергшихся в процессе адаптации влиянию ею иммунной системы.

Случаи выделения от лодей реликтовых вирусов чрезвычайно важны и требуют тщательного анализаиаргументированного подтверждения в соответствии с рекомендациями ШЭ.

Одним из доказательств возможности циркуляции таких вирусов сред,; лвдей является фжт выделение снс лаборатории биохимии вирусов ШгВ АН Казахской СС? Э.В.Ким (1991) из сыворотки прок-

Таблица I

Антигенные детерминанты в составе гемагглвтинина популяций вирусов гриппа 1989 г...подученных клонированием методом, пляк

Штаммы» •

№ { бляшка ! 5 1 тс г 1 ( ГС : ШС • А/свинья/!А/сви-! Айова/15/, нья/Айо-!30 и }ва/30 : ШС ! А/РВ/8/ ! 34 1 1 ГС : ЩС А/СССР/77! А/СССР/ ! 1 77 ! 1 «л? •А/Бразя- !лия/ ,11/78 : ШС , А/Бра зи-¡лия/ц/"3

8 к 160 0 0 0 0 о 80 40

В •м 160 0 160 0 0 0 0 0

62 ' к 80 80 40 0 0 0 0 и

6?. м 40 0 0 0 0 0 40 80

64 к' 640 1280 80 0 0 0 0 0

64 О 1280 0 0 0 0 0 40 80

318 . к 16С 0 0 0 0 0 80 160

218 м 40 40 80 0 0 0 0 0

Примечание: м - мелкобляшечннй, с - среднебляавчный, к - крупнобляаечный варианты;

те- тилоснецифическзя, ГС - группоспецифическая, ШС - итаммоспецифическав детерминанты

гическт здоровой матери новорожденного ребенка, погибшего в перше дни жизни, штамма антигенно сходного с вирусом А/Алма-Аг."/8/89 и дреЩ-вариантом вируса сероподт-па А(НШ1), в том числе и АСНвдаПП:) . Косвеннши доказательствами циркуляции в Алма-Ате вируса гриппа свиней в исследуемый постэпвде-мический период являются документально подтвердивший.серокон-версии у 3 реконвалесцентов по о-чошени» к А(нит1) - серова-рианту а(н8\у1Ш) . в марте-апреле 1991 г. обнаружен 4-кратный прирост титров антител к этому вирусу - 5 заболевших молодых лвдей.

В сравнении с антигенной структурой ГА изолятов 1984 г., эпидемические "свиные" штаммы 198^ г. отличались лишь группоспе-ци^ичоской детермпиантой. Вполне вероятно, что циркулирующий в Алма-Аг- "свиноподобный" штамм может образовывать стенотипические смеси л ассоциации с другими дрей^-вариангоми вируса д(1ШИ).

Изоляты вируса гриппа В, выделенные в данный эпидемический сезон, относились к широко распросграненной разновидности .В/Виктория/2/87, активно циркулирующей в последние годы.Гетерогенность биологических свойств бшш менее выражена по сравнению с таковой у преде тавителей сероподгипа а(нз№). НА вирусов этого серотипа также оказалась менее подверженной дрейфу, чем ГА, поскольку из 5 изученных штаммов лишь у одного фермент был близок НА современного эталона В/Виктория/2/87, тогда как остальные проявляли родство с более рашгаш вариантами.

Штаммы сероподгипа 1989 г. А/Кокчетав/78/90 и

А/Кокчетав/90/89 были наиболее близки современному эталону А/Сычуань/2/87. Неожиданноегью оказалось ¿¿¡деление в этот период в Алыа-А.тб вярусов.подобных штамму А/Бангкок/1/79,чго свидетель-

отдавало о частичном возврате антигенной структуры их ГА к пробило вариантов 1979-1982 гг. О .«.Литвинова (1989) предположила, что вирусам, "относящимся к варианту А/Бангаок/1/79, присущи определеннао свойства», которые способствуют их длительному сохранению в человеческой популяции. Эту гипотезу гюдтверкдапт и наши исследования.

И. ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСОВ'ГРИППА а(нзя2). , '

ЩРШИРОВАВШЙХ В КАЗАХСКОЙ ССР В ПКРИОД ЭПЩЕМИИ 1989-1990 гг. .

В 1990 г. в Казахской ССР эпидемический подъем заболеваемости впервые зарегистрирован на I неделе (1-7 января) одновременно в нескольких городах - Караганде, -Джамбуле« Джезказгане,Йэкче-таве. Дальнейшей распространение вспышки проходило быст!»,уровень заболвваодости; бил ттревшен сразу в 7 городах и через 3 недели эпидемией были охвачены все остальные города республики.

За период эпидемии изолировано 34 ш-гамма вируса. А(НЗМ2) .

Црн сравнении изолятов Л(НЗН2) 13В7-1988 и 1989-1990 гт. в РТГА.о: использованием ЖАТ к "вирусу А/ФиЛтшшпш/2/82 били ■ выявлены- характерные черты : антигеиногЬ'. дрейфа современных вирусов. Так, псе штамма 1988 г, Проявляли- родс.тпо преимущественно по отношению к указанному'эталону,1 в то время как уже в 1990 г» голы» П0Л0РИЖ1 исследовании* • изолятов реагировало с ?,ИАТ к этому вирусу, проявляя- сходство по роакгишости с современным ре^орснс-эталонт Л/Гуандонг/39/89. Оказалось, что "у вариантов эпидемического созона 1990 г. ппагогш-№ 10, 16, 19 , 20 , 29 и 13 ¡Юл- . , иостью измснони. ■ • •

Йополъзосашс шиорсцопгорных сыиорогок еще раз подтвердило Факт умспьЕоии» 'вцрзжятюсг'и одних антигенов одновременно с по-ягдангт'см других,■ Ток, ГА нсследуомнх' изолагов имели-более низкую

концентрацию общей детерминанты НЗ.Ю по сравнении с вирусами-предшественниками (габл.2). Об этом свидетельствуют весьма низкие титры антител к общей подгидаспецифической детерщнанге,когорая входила в состав ГА вирусов 1979-1980 гг. выделения и появилась вновь у шташов 1983 г. 4 штамма, (А/Алма-Ата/168/90, А/Алма-Ата/ 433/90, А/Тйлды-Курган/48б/901 изолированные в 2 городах Казахстана, гоказали наличие антигенной детерминанты ГО.7, присущей как вирусу А/Банхкок/1/79, так и А/Техас/1/77 в небольшом количественном содержании. Факт обнаружения детерминанты, характеризующей своеобразие штамма А/Техас/Х/77 у эпидемических штаммов 1990 г., подчеркивает высказанное ранее положение (Петров и др.,1986) о накоплении в структуре ГА вирусов згриппа a(H3N2) реверсий к более ранним вариантам. В то же время антигенные маркеры H3.I0 и H3.I6 были представлены в большем количество по сравнении с ИЗ.7. Штаммы А/Чимкенг/48/90 и А/Чимкент/бб/90 по качественному содержаний антигешнх детерминант в ГА являлась более современными вариантами, поскольку, утратив в процессе дрей£з детерминанту ШЛО» они приобрели два новые » H3.I4 и Н3.16,общие с вирусом А/Сычуань/ 2/87. Тем не менее ти1ры взаимодействия в РТГА с субпопуляциями ангигел , комплементарных к этим антигенам, были невысоки. По згоц причине чимкентские вирусы нельзя считать идентичными эталону А/Сычуань/2/87 , а лишь подобными ему.

Представление об антигенном составе детерминант сравниваемых шгаш-вариантов было дополнено данными пшдуноадсорбциоиного анализа гиперишлуь^ых сывороток к ним. Оказалось,что в антигенной структуре каждого изолята имеется шгом,»специфическая детерминанта, одинаковая для.двух неравнозначных групп вирусов, представ-лясцих собой 2 современные дреЩ-^ормы этанона а/Сычузнь/2/87. Возможно, детерминанта, находящаяся в составе га штаммов а/чим-

Таблица 2

Антигенный состав гемаггл юг инина вирусов гриппа A(H3N2) 1990 г.

Штаммы : Моно специфические антитела к антигенным 'ê^l1™,!!!!!^ ^ „ me¡wндаад ты врц1йро-

: КЗ.7 :Н3.8:Н3.10:Н3.14: Н3.16:Ш.18 : H3.I9 :вом обозна-

168 20 0 640 0 320 0 0 7 J 10. 16

438 80 0 640 0 80 0 0 п, 10, 16

486 80 0 640 0 160 0 0 7, 10, 16

630 80 0 640 0 160 0 0 7, 10, 16

48 0 0 0 80 40 40 0 14, 16, 18

66 . 0 0 0 80 40 80 0 14, 16, 18

86 0 0 40 0 320 80 0 10, 16, 18

108 0 0 160 0 640 80 0 10, 16, 18

НО 0 0 80 0 2560 40 0 10, 16, 18

I 0 0 80 0 160 40 0 10, 16, 18

2 0 0 80 . 0 20 40 0 10, 16, В'

42 0 0 80 0 320 40 0 10, 16, 18

163 0 0 80 0 640 40 0 10, 16, 18

Ï66 0 0 20 0 80 40 0 10, 16, 18

205 0 0 40 0 80 80 0 10, 16, 18

206 0 0 ВО 0 80 40 0 10, 16, 19

'.226 0 0 40 0 320 0 40 10, 16, 18

231 0 0 80 0 1280 60 0 10, 16, 18

400 0 0 80 0 320 0 40 10, 16« 19

401 0 0 80 0 320 80 0 10, 16, 19

487 0 0 640 0 640 40 0 10, 16, 18

"488 0 0 320 п 320 0 40 10, 36, 19

381 0 0 80 0 1280 80 0 10, 16, 18

384 0 0 80 0 320 80 0 10, 16, 18

388 0 0 160 0 160 80 0 10, 16, 18

390 0 0 80 . 0 1280 80 0 10, 16, 18

391 0 0 80 0 160 80 0 Ю, 16, 18

394 0 0 160 0 2560 80 0 10, 16, 18

395 0 0 80 0 40 40 0 10. 16, 18

398 0 0 00 0 640 40 0 Ю, 16, 18

Окончание таблицы 2

Z Ar Z I .Л- i у j, ^ X Л >

А/Баиг-

кок/1/79 320 320 1280 0 0 0 . 0 7. 8, 10 А/Миссиси-

пи/П/85 80 0 160 320 О О О 7,10, 14 А/Сычу-

ань/2/87. 0 80 160 160 320 О О 8.14,16

А/Гуан-, донг/39/

89 О О О 0 160 О 640 15, 16, 19

кент/43/90, А/Чимкент/бб/90 и других изолягов, антигеннородствен-ньк им, явится прототилной для целого ряда штаммов предстоящих опадемий гриппа A(H3N2) .Такое заключение можно вывести,исходя из достаточной обособленности исследуемой группы вариантов от всех использованных эталонов. Сравнение биологических свойств вирусов, отнесенных к-двум разным подгруппам по антигенной специфичности ГА, не позволило выявить корреляции меиду принадлежностью вирусов к определенной группе и свойственными им биологическими особенностями. Так, штаммы обеих разновидностей имели как термостойкий, так и гершлабильный ГА, Чувствительность к старогочным ингибиторам также не зависела ог антигенных свойств вирусов: среди них были выявлены изолягы, чувствительные к термолабильдам и тер-шстабкльннм ингибиторам. Лйпь 4 штамма оказались резистентными к неспецифическим ингибиторам сывороток различных видов животных, тогда как вирусы, изолированные, повсеместно на территории Советского Союза, в основном являлись терморезистентнши.

IУ. ИЗУЧЕНИЕ МтапдаЛЙЧЕШК ВИРУСОВ Л(НЗК2) И

a(hïmi) .ЩРШИРОБШШХ В КАЗАХСКОЙ ССР В 1939 гг.

В литература часто указывается на огносптельно малую изученность ..пиного вопроса и вэяноогь таких исследований для решения

вопроса взаимосвязи межэпидемических штаммов с возбудителями предвдущих и предстоящих эпидемий гриппа. Для вирусов гриппа В показано воспроизведение свойств межэпидемических шгашов у возбудителей блгжайщей эпидемии (Банников, 1987). Межэпидемичес-. кие штаммы а(Н1НТ) в основном сохраняют антигенные особенности вирусов предыдущей эпидемии. О.А1.Лигвинова (1989) на основании изучения 13 межэпидемических изолятов а(нзмг) ,близких эталону А/Бангкок/1/79, делает вывод об особенностях этого варианта, ко горне способствуют длительному сохранению его в популяции.

Штаммы А(нзн2) ,изолированные в Ал?,и-агинснэм доме ребенка' в феврале 1987 г., по хронологии выделения глокно отнести к пред-эпидемическгтм, поскольку предыдущая эпидемия 1986 г. была этиологически связана о вирусами сероподтипа л(Н1Н1) - вариантагзг А/Тайвань/1/86 и А/Сингапур/6/86. Последующая эпидемия 1937-1938 гг. была вызвана 3 основными группами вирусов гриппа а(нзЫ2) подобными эталонам А/Ленинград/360/86, А/Снчуань/2/87 и вирусами, проявляющими родство с несколькими эталонами. Эпидемические штаммы а(изМ2) 1985 г. показали родство с вирусом А/Филиппины/2/82. Таким образом, плма-атинскио изолягы от."ичалпсь как от возбудителей прошлой, так и последующей эпидемий. а(Н5Н2) , что вероятно связано с особенностями циркуляции вирусов гриппа в закрытых коллективах, Однако это предположение не опровергает возможности сохранения среди ладей вирусов неактуальной антигенной структуры.

Мвязпидемически.е щгашц л(Н1И1) »выделенные л сентябре 1989г. оказались гетерогенной смесью двух вариантов этого серогодгипа. Клонирование исходных изолятов методом пляк позволило разделить их на два субпопуляции, одаа из которых обладала игамшспецифической двтормтюнтой огалониого вируса'А/СССР/90/77,другая - А/Бра-зилия/Ц/78.

Таким образом, в период отсутствия эпидемий гриппа, кроме изолятов, относящихся к одному из ранее доминировавших вариантов эпидемических вирусов, либо возбудителей предстоящих опиде-мий, могут появляться также и дрейф-варианты протогипных штаммов, циркулировавших в хронологически овдаленный отрезок времени.

ВЫВОДЫ

I. Б период с 1987 по 1990 гг. на территории Казахской ССР отмечено 3 эпидемических подъема заболеваемости, обусловленных вирусами гриппа a(H3N2) в 1987 и 1990 гг. и a(hihi) и В в 1989 г. Особенностью эпидемий было преимущественное поражение дег-ского контингента. Возбудители эпидемий характеризовались реако выраженной гетерогенностью антигенных и биологических свойств.

2. вирусы ipnmra a(H3N2) . изолированные в Казахской ССР

в 1987-1988 гг. принадлежали к нескольким антигенным разновидностям и обладали более Еирокпм антигенным спектром ГА и НА по орав-нению с вирусами, вдркулкровавшими в этот период в СССР.

3. Выявлено неполное соответствие антигенной структуры казахстанских изолятов А(нзн2) 1990 г. международным эталонам

A/teaнхай/Н'в? и А/Сычуань/2/87, Местные эпидемические штаммы содержали в составе ГА шгамшспевдфическую детерминанту, идентичную для двух неравнозначных групп вирусов.

4. Установлено, что эпидемия гриппа a(hihi) 1989 г. была обусловлена как современным дрейф-вдриантом а/Тайвань/1/85, так и ранним про го т ипным шгэшом а/Еравилия/п/78, «то явилось одной из особенностей этиологии денной вспышки, Внутриэшдемическив вариации, кроме того, включали и смешанные стенотипические миксты двух серовариантов вирусов неактуальной антигенной структуры - А/Бра-зилия/Ц/78 и А/свиньп/Айова/15/30.

5, Стпудеккчвскяе вирусы гриппа a(hiki) 1387-1990 гг.

лвлгпгся гогогипичасхой скасьв двух: штатов, относящихся к ранее

эпидемически активным ангогашш вариантам А/Еразвяия/п/78 я

А/СССР/90/77. .

б. Установлена .возможность реверси? мозайидвмяческих штаммов вируса xptmro л(1ШГ2) IS67 г. к антигенному профилю вирусов

1984 Д977 гг. циркуляции.

СПИООК ОПУБЖЙВАНШХ РАБОТ, ОТРАЛАЩ!« С0ДЕЕ?А131Е ДИССЕРТАЦИИ

I. Шеткалиева <J„A», Исмагулов А„Т.„ Укбаева Т,Д, и др.Характе-рнстжсз эт«де?дачаскях вспшек гриппа в и a(hihi) в г.Алш-Ата, //Обзор республ.центра по гриппу и ОРЗ за Ï986-ISQ9 гг.-Алма-Ата «,-1989,- С.6-7.

?.. Колаванова И.Л.-Характеристика штатов вируса гриппа а(н*Ы2), изолированных в neptîOfl эпидемии 1987-1988 гг. в Алма-Ате // Обзор республ.центра по гриппу и ОРЗ за 1986-1939 гг.-Алш»Ата,-1989.- С.8-9. '

3. Поливанова Я.Л. Сравнительный гаимудалоптчвский.анализ штаммов вируса гриппа ¿(113112) .ввделзиных в Казахстане в 1990 гг.//

, Воосоюзн.коиф. "1,![«роб!тол. и бпохехиол.оспОЕм ннгенс!т|,ттро!зз» водсТБа".Алка-Ата.-1990„- С<,48.

4. Коливанова И.Л., Яхно М.А... Саятов М.Х., Булгакова O.P. Антигенная харакгорпатика вирусов гриппа л(НЗШ>) .изолировании*

. э Казахской СО5 в 1987-ISS3 гг. // Вести.АН Нп с-ССР,- IS9I.-й 10,- С,63-б7„

5. Колшадою И »Л., йояовэ H.SU, Бзйсеибаовл Р.У, я до «Антигенная структура пярусоп гриппа л(изкг) ,изолированных в Кпаохской ССР л 1990 г. // Изв. АН НазССР,- Сср.биол,- 1991.- К 2.-С. <12-46.

Кслыванова ИЛ., Нумагов К.Х., Бейсамбаева Р.У. я др.Гете-рогенность современных эпидемических шташов вирусов гриппа, циркулировавших в 1937-Т988 гг. на территории Казахстана// Эйр.Казахстана;- 1991.- » 3,- С.43-45.

7. Саягов М.Х., Кйлыванова ИЛ., Жуттов К.Х. и др. Изменчивость возбудителя гриппа АСнзиг) в Казахстане // Актуальные дацр. гигиены и эпидемиол. в Белоруссии.Мат-лы УШобьедин. съезда гигиен^лй1сробиол.,апццем. и паразигол,- Минск,-1991.-С.78-79.

8. Саягов М.Х., Колыванова ИЛ.» Дгматов К.Х. и др. Особенности антигенной комдааиции эпидемических птамлов А(нзнг) «изолированных в 1988 г. в гДлш-Ате // Мат-лы У Объединен, съезда гигиен., зпидемиол.,ыйкробиол.апаразягол; и ин^екц. Казахстана.- Алма-Ата.- 1991.- С.160-162. •

9. Бейсембаева Р.У., Колыванова ИЛ.. Няагкалиева С.А. и Др. Характеристика вирусов гриппа А(ИЗН2) »выделенных в Алма-Ате и Кокчетаве в 1989 г. // Биология вирусов гриппа человека я животных.- Алма-Ата.- 199Г.- С.78-83.

10. 1{олыванова Й.1., Бейсембаева Р.У., Исаева Е.И., Саягов М.Х. Особенности антигенной вэмда&ишш эпгоемичэскях штаммов А(н;н2),изолированных на территории Казахстана // Вестн. АЛ КазССР.- 1991,- # 5.- С.32-36.