Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Характеристика пигментации волос каракульских ягнят при помощи спектрометрии электронного парамагнитного резонанса и электронной микроскопии

ВАК РФ 03.00.11, Эмбриология, гистология и цитология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Очилов, Куйли Долиевич

ВВЕДЕНИЕ

1. СОСТОЯНИЕ ИЗУЧЕННОСТИ ВОПРОСА

1.1. Гистофизиология и феногенетика пигментации шерсти

1.2. Биохимия меланинов

1.3. Пространственная организация пигмента в шерсти

1.4. Содержание меланина в шерсти

1.5. ЭПР-спектрометрия шерсти

1.6. Генетика окраски у овец

1.6.1. Основные гены окраски

1.6.2. Гены модификаторы

2. ОБОСНОВАНИЕ ВЫБРАННОГО НАПРАВЛЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ <

3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

3.1. Материал

3.2. Спектрометрия электронного парамагнитного резонанса

3.3. Метод химического выделения меланина

3.4. Светомикроскопическое исследование пигментации волос

3.5. Электронномикроскопические исследования распределения меланина в корнях волос

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ

4.1. ЭПР-спектрометрические исследования волоса каракульских ягнят разных окрасок,расцветок и оттенков

4.1.1. Форма ЭПР-сигналов волоса

4.1.2. Данные о некоторых количественных параметрах ЭПР-спектра образцов волоса

4.2. ЭПР-спектрометрия выделенного из волоса меланина 4.2.1. Форма ЭПР-сигналов меланина

4.2Д. Параметры ЭПР-сигналов образцов выделенного меланина

4.3. Изучение возможностей количественной оценки содержания феомеланина в образцах на основе ЭПР-спектрометрии волос 98 Светомикроскопические исследования пигментации волос

4.4.1. Окраски волос в зависимости от структуры меланина

4.5. Электронномикроскопические исследования пигментации корней волос

4.5.1. Общая форма и структура меланосом

4.5.2. Форма и размеры меланосом

5. ОБСУЖДЕНИЕ

5.1. Классификация окрасок каракульских ягнят по. особенностям ЭПР-сигнала волос и выделенного меланина

5.2. Об элементах структуры меланина в образцах волоса каракульских ягнят

5.3* Феомеланосомы и эумеланосомы каракульских плодов и ягнят

5.4. Некоторые спорные вопросы о природе разных окрасок каракульских овец в свете полученных нами материалов

6. В Ы В О Д Ы

7. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Характеристика пигментации волос каракульских ягнят при помощи спектрометрии электронного парамагнитного резонанса и электронной микроскопии"

Актуальность темы. Продовольственная программа СССР на период до 1990 года, выдвинутая майским (1982 г.) Пленумом ЦК КПСС, предусматривает резкое увеличение поголовья животных и птицы и повышение их продуктивности. Осуществление этих задач намечено, прежде всего, за счет дальнейшей интенсификации сельскохозяйственного производства, интеграции его с другими отраслями агропромышленного комплекса и предъявляет высокие требования к сельскохозяйственной и биологической наукам. Эти задачи должны решаться в тесном содружестве научных учреждений АН СССР и ВАСХНИЛ, что даст новый импульс реализации выдвинутой КПСС Продовольственной программы СССР. Современная биология с каждым шагом все успешнее проникает в самые глубины биологических процессов, в механизмы биологических явлений на молекулярном уровне.

В этой связи приобретает большую актуальность, по возможности, более раннее использование этих достижений биологии в прикладных сельскохозяйственных исследованиях, направленных на повышение эффективности селекционно-племенной работы.

Задача гибкого и эффективного селекционно-генетического управления производством цветных каракульских смушков разных окрасок в интересах удовлетворения меняющегося спроса на мировом рынке полностью не решена, в частности, из-за все еще недостаточной изученности генетики окрасок. Трудности изучения наследования окрасок связаны отчасти с отсутствием высокопроизводительных объективных методов надежной идентификации фенотипов по окраске.

В данной работе испытывались возможности решения этой проблемы с помощью применения перспективного биофизического метода ЭПРспектрометрии. Этот метод позволяет идентифицировать фенотип по окраске (в особенности коричневые тона, которые субъективно наиболее трудно различаются) путем установления типа и количества меланинов, определяющих окраску волоса каракуля.

Дели и задачи исследований. Целью исследований явилась попытка разработать методику ЭПР-спектрометрической диагностики разных типов меланина в волосе каракульских ягняФ разных окрасок и расцветок, а также изучение возможностей использования ЭПР-спектрометрии для количественной оценки содержания меланинов в цветном каракулеводстве.

На основе этих методов ставилась задача проанализировать типы и относительное количество меланина у цветных каракульских ягнят наиболее распространенных окрасок, а также неизученных по качественному составу меланина окрасок.

Вспомогательной задачей явилось параллельное с ЭИР-спектро-метрическим сравнительное электронномикроскопическое исследование меланосом в волосяных фолликулах ягнят тех же расцветок, для сопоставления особенностей ультраструктуры меланосом и типом меланина.

Предполагалось также внести вклад в наши знания о гистофи-зиологических механизмах действия генов, регулирующих окраску каракульских овец.

Научная новизна исследований. Впервые изучены ЭПР-сигналы таких образцов волоса цветных каракульских овец как сур золотистый, бронзовый, коричневый (камбар) светлый, средний, темный и красный оттенков каракульских ягнят и ягнят породы джайдара и образцов волоса красного степного скота. Показано существование различий между феомеланином и эумеланином в волосе каракульских ягI I нят по наличию, кроме основного, дополнительных пиков в феомела-нине, но концентрации парамагнитных центров, по характеру и степени асимметрии, по ширине и -фактору, сформулирована методика диагностики феомеланина и эумеланина без разрушения шерсти с помощью ЭПР-сигнала, защищенная авторским свидетельством "Способ качественного определения феомеланина в шерсти животных" № 896572.

Впервые показано, что феомеланины из разных образцов шерсти отличаются по степени и характеру асимметрии и выраженности добавочных пиков. Установлено, что ЭПР-сигнал шерсти животных окрасок сур золотистый и сур серебристый бухарского породного типа, разводимых в стадах на основе поглощения черных овец, сходен с таковым черной, а не коричневой (камбар) шерсти, что не позволяет рассматривать сур золотистый как окраску, в основе которой лежит коричневая окраска (камбар). Выделение феомеланинов из шерсти с помощью кислотного гидролиза изменяет число и распределение добавочных пиков на ВПР-сигнале феомеланина.

Практическая ценность. Разработан "Способ качественного определения феомеланина в шерсти животных", защищенный авторским свидетельством № 896572. Этот способ позволяет с помощью ЭПР-спектро-метрии проводить массовые селекционно-генетические исследования образцов шерсти с целью установления типа меланинов, входящих в их состав, когда по внешнему виду шерсти, объективная достоверная идентификация типа меланина невозможна.

Показана возможность количественной оценки содержания феомеланина на основе калибровки высокопроизводительного ЭПР-спектро-метрического метода оценки по результатам исследования небольшого числа образцов низкопроизводительным традиционным методом химического выделения меланина. Подтверждена близость природы типа меланина, обусловливающая окраску сура золотистого и серебристого,что будет способствовать более правильному пониманию природы окраски сур золотистый, а следовательно более правильному ведению племенной работы с овцами этой окраски.

Реализация результатов исследований. На основе разработанного способа качественного определения феомеланина в шерсти животных уточнены типы меланина волоса ряда окрасок, расцветок и оттенков цветного каракуля, в частности, у сура золотистого, а также у коричневых разных оттенков, бурых и розовых ягнят, бронзового, разных участков поверхности тех при неоднородной окраске халили. Этот способ, разработанный и внедренный сотрудниками ВНИИКаракулеводст-ва, был применен для исследований образцов волос каракульских ягнят, разработан и внедрен совместно с сотрудниками Института экспериментальной биологии.

Основные положения диссертациит которые выносятся на защиту. Разработан ЭПР-спектрометрический метод качественного анализа меланинов, который может быть использован в массовых селекционно-генетических исследованиях в каракулеводстве, для идентификации типов меланинов в волосе ягнят. Это позволит более объективно классифицировать фенотипы по окраске и расшифровать их связь с типом пигмента

Метод основан на отличиях в ЭПР-спектре феомеланина от ЭПР-спектра эумеланина, из которых наиболее очевидным является наличие кроме основного пика дополнительных пиков, а также большая ( » на 30%) ширина сигнала Д Н.

Волосы черных ягнят, ягнят окрасок сур серебристый и сур золотистый (в том числе дистальные концы волос) имеют типичный для эумеланина ЭПР-спектр. Волосы светло-коричневых, коричневых и красных (красно-коричневых, или рыжих), а также розовых ягнят имеют

ПР-сигнал, характерный для феомеланина. Волосы бурых и темно-коричневых ягнят имеют ЭПР-сигнал переходного типа со слабо выраженным дополнительным пиком, а волосы дополнительно изученных для сравнения некоторых особей окраски сур бронзовый имеют феомеланин в дистальных участках волос. Меланосомы из волосяных фолликулов разных ягнят с феомеланином отличаются от эумеланосом менее вытянутой почти изодиаметрической формой и большим количеством незрелых (не до конца заполненных меланосом) форм, неправильными фестончатыми краями.

Высокий коэффициент корреляции между ЭПР-сигналом шерсти фео-меланиновых образцов и химической оценкой содержания в них феомеланина свидетельствует о возможности количественного анализа феомеланина на основе ЭПР-спектрометрии.

I. СОСТОЯНИЕ ИЗУЧЕННОСТИ ВОПРОСА

Заключение Диссертация по теме "Эмбриология, гистология и цитология", Очилов, Куйли Долиевич

б. В ы В о д ы

1. По параметрам ЭПР-спектра образцы волос от каракульских ягнят разных окрасок подразделяются на два основных типа. 1-й тип, к которому относятся волосы от ягнят окрасок черная, сур серебристый и сур золотистый и 2-й тип, к которому относятся волосы коричневых ягнят светлого, среднего и красноватого оттенка, а также розовой окраски. 2-й тип отличается от первого наличием добавочных максимумов в ЭПР-спектре, большей шириной ( А Н) и значением д-фактора, большей изменчивостью асимметрии и более низкими значениями концентрации парамагнитных центров. Различия между типами связаны с тем, что 1-й содержит эумеланин, 2-й феомеланин.

2. Определить тип меланина в волосе каракульских овец и ягнят в генетико-селекционных исследованиях можно на основе высокопроизводительного ЭПР-спектрометрического метода, используя в качестве критерия наличие добавочных максимумов ЭПР-сигнала (на эту методику получено авторское свидетельство Госкомизобретений).

3. Количественно оценивать относительное содержание пигмента в волосе при массовых генетико-селекционных исследованиях можно по силе ЭПР-сигналов для эу- и феомеланиновых образцов.

ЭПР-спектрометрическим различиям образцов 1-го и 2-го типа соответствуют и различия в ультраструктуре меланосом. Феомела-носомы отличаются от эумеланосом почти изодиаметрической формой, меньшей электронно-оптической плотностью, а главное, высоким процентом этих органелл, которые лишь частично заполнены меланином.

5. Темно-коричневые и бурые образцы волоса каракульских ягнят, а также часть образцов окраски сур бронзовый имеют ЭПР-сигнал, переходный между 1-м и 2-м типами, что обусловлено присутствием обоих типов меланина или переходным характером самого меланина.

6. Клетки коркового слоя волоса каракульских ягнят по количеству и распределению меланина можно классифицировать на 6 типов: от клеток без меланосом или содержащих редкую россыпь одиночных меланосом, до клеток, включающих одно или несколько плотных скоплений меланосом, размерами в десятки микрометров. Частоты встречаемости разных типов клеток у ягнят разных окрасок резко различаются.

7. ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для повышения надежности идентификации окрасок, расцветок и оттенков волосяного покрова каракульских ягнят и получения объективной характеристику типа меланина предлагается использовать при массовых селекционно-генетических обследованиях качественный анализ меланинов на основе разработанной ЭПР-спектроиетри-ческой методики, особенно в тех случаях, когда органолептически идентификация затруднительна (разные оттенки коричневых, бурых окрасок и некоторых суров).

2. Объективно оценивать относительное количество содержания меланина в разных образцах шерсти каракульских ягнят предлагается по силе ЭПР-сигналов волоса, собранных и хранящихся одинаковое время и в одинаковых условиях, причем оценку образцов с феомела-нином и эумеланином проводить отдельно, так как концентрация парамагнитных центров в феомеланине в 3 раза ниже, чем в эумеланине.

3. Объективно оценивать абсолютное содержание меланина в волосе предлагается по силе ЭПР-сигнала после градуировки его на основе традиционной химической методики оценки содержания меланина в небольшом числе образцов.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Очилов, Куйли Долиевич, Самарканд

1. Основные направления экономического и социального развития СССР на I98I-I985 года и на период до 1990 года. В кн.: Материалы ХХУ1 съезда КПСС. М., 1981, с.163-166.

2. Продовольственная программа СССР на период до 1990 года и меры по ее реализации: Материалы майского Пленума ЦК КПСС 1982 г.-М.: Правда, 1982. ± II2 с.

3. Сельскохозяйственную биологию на уровень задач Продовольственной программы СССР. Сельхоз.биол. 1983, Jfc I, с. 3-13в

4. Ажипа Я.И. " Медико-биологические аспекты црименения метода электронного парамагнитного резонанса. -М.: Наука, 1983. -523 с»

5. Аллен Б., Инграм Д. Свободные радикалы в биологических системах. ЧЛ.: Изд-во иностр.лит., 1963. 350 с.

6. Блюменфельд Л.А., Воеводский В.В., Семенов А.Г. Применение электронного парамагнитного резонанса в химии. Новосибирск: Наука, 1962. - 234 с,

7. Борг Г. Применение электронного парамагнитного резонанса в биологии. В кн.: Свободные радикалы в биологии. - М., 1979,т.2, с.88-177.

8. Васин Б.Н., Васина-Попова Е.Т. и др. Рувоводство по каракулеводству. М.: Колос, 197I. - 190 с.

9. Васин Б.Н. Эволюция шерстного покрова овец. Новосибирск: Наука, 1969. - 220 с.

10. Воробьевский А.П., Всеволодов Э.Б. и др. ЭДР-спектрометричес-кая оценка содержания меланина в шерсти каракульских ягнят и овец. Сельхоз.биол. 1980, т.15, № 4, с.617-620.

11. Всеволодов Э.Б., Латыпов И.Ф., Рябикин Ф.А. Изучение пигментации шерсти методом ЭДР-спектрометрии. Сельхоз.биол., 1974, т.9, 2, с.295-301.

12. Всеволодов Э.Б., Латыпов И.Ф. Концентрация свободных радикалов в белой и содержащей меланин шерсти и ее изменение под влиянием некоторых динамических и химических факторов. Тр. Ин-та экспер.биол. АН КазССР, 1978, т.13, с.91-105.

13. Всеволодов Э.Б. Отчет лаборатории биофизики Института экспериментальной биологии АН КазССР, 1975, с.20.

14. Всеволодов Э.Б. Волосяные фолликулы. Алма-Ата: Кайнар, 1979. - 180 с.

15. Всеволодов Э.Б. Отчет лаборатории биофизики Института экспериментальной биологии АН КазССР, 1980, с.14.

16. Всеволодов Э.Б., Очилов К.Д., Воробьевский А.П., Федосеенко В. Взаимоотношения клеток наружного корневого влагалища волосяного фолликула. Арх.анат.,гист.,эмбриол., 1983, вый.5,с.64-69.

17. Всеволодов Э.Б., Очилов К.Д., Воробьевский А.П., Латыдов И.Ф, Применение ЭПР-спектрометрии шерсти в генетике и селекции овец. В кн.: I Все ооюз.биофиз. съезд: Тез ¿докл. стендовых сообщ. М., 1982, прил. к т.4, с.7.

18. Гигинешившш Н.С. Племенная работа в цветном каракулеводстве М.: Колос. 1976. 190 с.

19. Дьячков И.Н., Валиев Р.Г., Иноятов А. Содержание меланина и свойства волоса черных каракульских ягнят. Овцеводство, 1980, № 7, с.32.

20. Жилякова B.C. Селекция цветных каракульских овец. -Алма-Ата:1. Кайнар, 1981. 150 с.

21. Завойский Е.К. Парамагнитная абсорбция в перпендикулярныхи параллельных шлях для солей, растворов и металлов. Дис. д-ра физ.-мат.наук. - Казань, 1944 •

22. Зверева Л.П., Беляев Д.К. Феногенетический анализ пигментации у мутантов американской норки. Сообщение I. Эффект мутаций стальной, голубой, серебристо-голубой и их компаунда на распределение пигмента в волосе. Генетика, 1976, т.12,2, с.97-103.

23. Инграм Д. Электронный парамагнитный резонанс в биологии. -М.: top, 1972. 296 с.

24. Каратун T.M., Арсланова M.X., Федорова Г.Н. Гистологическое исследование пигментации волос каракульских ягнят разной кровности по суру. В кн.: Органогенез сельскохозяйственных животных. М., 197I, с.99.

25. Колмонсон А.Э. О природе и роли свободных радикалов в биологических процессах. Дис. д-ра биол.наук. - M., 1976.

26. В надзаг.: Ин-т вирусологии АМН СССР.

27. Казанцев Э.Ф. Использование метода ЭПР в генетике (обзор).- В кн.: Все союз. симп/Магнитный резонанс в биологии и медицине". Черноголовка, 1977, с.169.

28. Лях С.П., Рубан Е.Л. Микробные меланины. М.: Наука, 1972.181 с.

29. Латипов И.ф., Всеволодов Э.Б. »Голиченков В.А. Снижение выхода индуцированных рентгеновским облучением долгоживущих парамагнитных центров в шерсти яри наличии в ней меланина. Радиобиология, 1979, т.19, вып.2, c.Ï89-I93.

30. Мухамвдов К. Характер наследования окраски сур у каракульских овец. Генетика, 1976, т. 12, №2, с.88-96.

31. Никольский Н.Ф., Одинцова Е.В. Опыт метизации курдючных и афганских овец каракулем. За реконструкцию сельского хозяйства. 19 , № 5, с.99-108.

32. Одинцова Е.В. Происховдение и развитие каракульской породы овец. Науч.тр. ВНИИК, 1968, т.6, с.35-58.

33. Пюльман Б.К., Бюльман А. Квантовая биохимия. M., 1965. -654 с.

34. Родионов В.А., Рязанцев Э.Г. Долгоживущие радикалы. М.: Наука, 1972. - 198 с.

35. Ролдугина Н.П. Смушковые качества каракульских ягнят разных окрасок в связи с интенсивностью пигментации волосяного покрова: Автореф.дисс. канд.с.-х.наук. Балашиха, 1964. - 12 с.

36. Ролдугина Н.П. Зависимость окраоки волосяного покрова каракульских ягнят от количества и характера распределения пигмента. Б кн.: Формообразование каракульского завитка и смушка Ташкент, 1966, с.139-151.

37. Ролдугина Н.П. Особенности пигментации волосяного покрова каракульских ягнят различных окрасок. Тр.Всесоюз.НИИКаракуле-водства, 1968, т.13, с.191.

38. Ролдугина Н.П. Ультраструктура волос каракульских ягнят разных окрасок. Науч.-тех.бкш. Укр.НШ физиол. и биох. селышзживотных. Львов, 1974, внп.2, с.60-61.

39. Роквдкий Н.Ф. Биологическая статистика. 2-е изд., испр.-Минск: Вышэйш.школа, 1967. - 327 с.

40. У шиш. Электронный микроскоп для начинающих. М.: Изд-во иностр.лит., 1975.

41. Фищенко О.П., Дьячков И.Н., Риш М.А. Исследование пигментов волосяного покрова каракульских ягнят в связи с их наследованием. Генетика, 1968, т.4, с.ШО-1116,

42. Фищенко О.П. Изучение пигментации волосяного покрова каракульских ягнят в связи с наследованием окрасок: Автореф. дис. канд.биол.наук. Фрунзе, 1968. 18 с,

43. Birbeck M.S.O., Bamicot H.A. Electronemicroscope studies on pigment formation in human hair follicles. In: Pigment cell- j » /biology / Ed. by Cordon. Hew York, 1959, p. 549-562.• t , I

44. Berge S. Inheritance of colour in Karaculs. Norsk Pels-dirbe, 1957, v.8.4 ft ' 4 1 ' i ) J

45. Blois M.S., Zahlam A.B., Maling J.E. Electron spin reso' г inanse studies on melanin. Biophys. J., 1964, v.5, p. 471.7 J 4 * 4 4 i ■ * J

46. Brooker M.G., Dolling C.H.S. Pigment wool in Merino.1. Л 4 4 ' * # • ■ / J

47. Austr. J. Agric. Res., 1965, v. ?6, H 2, p. 219-228.4 9 4 ,4 4 0 . •

48. Chase H.B. Growth of Hair. Physiol. Rev., 1954, v.34,4 / 9p.113-126.1.У * 4 4 • V f * 0

49. Chedeckel M.R., Post P.W., Deibel R.M., Kalus M. Research* •note photodestruction of phalomelanin. Photochem. and Photobiol.,• ) • , * . . t1977, v. 26, p. 651-653.1..

50. Drochmans P. Ultrastrucrture of melanin granules. In:. . , j . , .

51. Biology of skin. V. 8, The pignentary system. Oxford etc., 1969,- * / jp. 169-177.t . i■ i

52. Pitzpatric T.B., Brunet P., Kukita A. The nature of hair• • - ■ i i j •pigments. In: The biology of hair growth / Ed. by W.Montagna,» i • . • ■ i < . i

53. R.A.Ellis. New York, 1958, p. 255-303.1. J . > • . ■ jj

54. Jimbow IT., Takeuchi K. Ultrastructural comparison of phaeo- > / * »and eumelanins in melanogenesis in animal. In: Pigment cell., • » j

55. Baseli 1979, v. 4, p. 308-317*t , , . ,

56. Kikkawa H. Relation between hair colours and metal in hu, . , i • . . • . - ' >man hair. Hum. biol., 1957, v. 28, p. 59-66.j * < / ■

57. Kidd F. Other animal fibres. In: Chemistry of naturalprotein fibres. New York; London, 1977, p. 371-407.* j

58. Lukiewiczh. S. The biologycal role of melanin. Hew concerts, metodical approches. Folia Histochemica et Cytochemica, 1972,» ■ -» j ' Jv. 10, N 1, p. 93-107.y i ' St*'''. /

59. Mason H.S., Ingram D.J.E., Allen B. The free radical proi 4 / tperty of melanins. Arch. Biochem. and Biophys., 1960, v.86,- * ' . >p. 225-230.< > , t ■ »

60. Mason H.S. The structure of melanin. Adv.Biol.Skin, 1967*- > . . * jv. 8, p. 293-312.

61. Mc Grath E.P., Quevedo W.C. Genetic regulation of melanocyte function during hair growth in the mouse: cellular eventsleading to "pigment clumping" within developing hairs. In: Bio> , »logy of the skin and hair groth. Sydney, 1965, p. 727-746.

62. Uel D.A. Genetic studies in karakul sheep. Ann.7j > ' i67» Ohtaki N. Degradation of melanosomes by lisosomes. J.i i • >1.vestig. Dermatol., 1971, v. 57, N 1, p. 1-5., , .

63. Parakkal P.P. Transfer of premelanosomes into keratinyzing- ■ • I , < .; — j • >cells of albino hair follicle. J.Cell.Biol., 1967, v. 35, N 2,-» .• < }p. 473-477.> > , - ~

64. Pathak M.A. Photobiology of melanogenesis biophysical aspects. Adv.Biol.Skin, 1967, v. 8, p. 73.1.- t J ' >

65. Poole T.W., Silvers W.K. Recombinant methods for studying• ■ ■ • / / ' ythe coat colour determinants of Mice. In: The skin of vertebra! ■ . t , , . . " . •-}./ Itess Linnean Soc. Symp. Ser. N 9• London, 1980, p.235-246*i J . • t J f 4

66. Ryder M.L., Stephenson S.K. Wool Growth. London; Hew> >

67. York: Acad. Press, 1968.-722 p.■ ■ - , - / ■ V > • /

68. Swan G.A. Current knowlege of melanin structure. In:- • ■ ■ 1 ~ ! / >

69. Pigment Cell, Basel, 1973, v. 1, p. 151-157.i / . • i i .

70. Singh L.S., Singh O.H. Inheritance of colour in chocla/ '» > j •'.'•■ s • i / Iand crossbred sheep. Ind. Vet. J., 1971, v. 48, p. 260-266.j /j . , . .

71. Snell R.S. An electron microscopic study of melanin in the-- i / , ■ t J • . ■ • i . •hair and follicles. J.Investig.Dexmatol., 1972, v.59, IT 2,p. 144-152.i < > ■ > ■ > >

72. Short B.P., Wilson P.A., Schinkel P.G. Proliferation of follicle matrix cells in relation to wool growth.- In:Biology of theri ■ . • . » skin and hair growth. Sydney, 1965» p« 409«i j

73. Seiji M. Subcellular particles and melanin formation in-■--■-■- » / . .,, ., . ,melanosomes. In: Biology of pigmentary skin. The pigmentary system«} > -1 • ' J

74. Oxford etc. 1976, v. 8, p. 189-220., . t . , . > '

75. Wolff K., Honigamann H. Are melanosomes complex lysosomes? •i . 1 ' l - • - i 1

76. J. Investig. Dermatol., 1972, v. 59, N 2, p. 170.