Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Генетический анализ супернестабильных мутаций при наложении двух систем нестабильности у Drosophila melanogaster

ВАК РФ 03.00.15, Генетика

Автореферат диссертации по теме "Генетический анализ супернестабильных мутаций при наложении двух систем нестабильности у Drosophila melanogaster"

РОССИЙСКАЯ АКАДЕЫШ НАУК

ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ ш- В. А. ЭНГЕЖГАРДТА

на правах рукописи УДК 577.21

Елагин Вячеслав Александрович

ГЕНЕМЧЕСКИЙ АКДЛКЗ СОТЕЕНЕОТАБИШЖ МШЦПЙ ПРй ЕА1СШШ ДВУХ СКОта! НЕСТАБИЛЬНОСТИ

у ойозсршха ме!_&1,'схзазтее.

Генетика с 03-00.15 з

АЗТ0ЕЕ5ЕРАТ на соискание учвной степени кандидата биологические наук.

МОСКВА 133.2

Работа наполвана е Институте молекулярной биологии т. В. А. Энгельгардта РАН. г. Москва.

Научные руководители: доктор биологических наук

0. П. Самарина кандидат биологических наук П. Г. Георгиев

Официальные оппопантн: доктор медицинских наук

Л. II. Корочкин ■ кандидат биологических наук - Л-В. Матюнина

Ваддее учрекдение-. Иосковскеё Государствонвый: Университет им. М. В. Лшшспава

Защита диссертации состоится " Ю^^1993 г. в^-Тчас на ааседанш Сгоцяалазгфованного совета (Д 002.85.01) при Институте биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН по едресу: г. Ыосква, ул. Ванштава, д. 26.

С диссертации! кояно ознакомиться в библиотеке Института биологии рззЕзтия ш. Н. К.Кольцова Р1Н.

Автореферат разослан "_"_;_1992 г.

Ученый секретарь ^

Специализированного совета ¡¡(¿,//

кандидат биологических наук ' Е.М.Протопопове

/

ВВВДЕНИЕ.

Впершв супэрзэ стабильные мутации у Dr-o^ophila melanogaster бНЛИ описаны Демареком CDemar.?*, Х9275. Супернестабильннми нэзываит мутации, которые с частотой от одного до нескольких десятков процентов либо рзвэртирувт К ГОрМЭ, ЛИбО ДВЮТ СТЛИЧННЭ Ш фЗЕОТИПу мутации. Все хорошо изученные супэрне стабильные мутацшг оквзолись свяганззнми с инсарцияш! МОбЯЛЬШХ ЕЛ9М9НТОВ. Так, МуТаЦИЯ HnW В локусе singed КНДУЦИрОВВНИ зстройкой двух расположенных рядом копий Р- элемента. При этом о чвстотой, доотигаЕцой 0,9, происходит вырезание одной из двух копий cfioiha et. ai. . IS383. Нвдебно были описаны другие супэрнестабкльные мутации, ИНДУЦИрОВВЕЕЫЭ Р 8ЛВМ6ЕТОМ, В локусах yellow и singed CHawlpy ct. ai.. 1983; seyor et. ai., I2S83- К суперна стабильным M02H0 TEIO® ОТВЕСТИ нзкоторыз МУТЕЦИИ, ЕЫЗВЭБННЭ КОбИЛЬНИ£2 В1вМЭНТаМИ МДГ4 И hobo (Kevsl-Nlnio ft. al. . 1989; Slacken et. al. . 1937). ОДНСКО. СУЩЗСТВУЕТ сухгэрнестабклънна мутации, механизм зознакновензя которых пока не известен. Так, в результате инъекщш вирусной ДНК в омбряовы дрозодилы были получены мутации, которые в тачанке нвсколъках лат давали реверсии к Еоргэ или мутации с другим фэяотипом с частотой 1-5 х Ю-" (Набпрочкин и др., 1937). Несколько супаряестабильных мутаций неизвестной природы в локусах yellow и =lnged бШН ВВДБЛЭНЭ 23 ЦрпрОДЕЫХ ПОПУЛЯЦИЙ ДрОЗОфИЛН (Голубозгсшй и др., 1997; Голубсвсиий и др., Х9з7).

При скрещивании линий из сястены продлений нестабильности с иобчжьвнм Стайером с Р линией были получены кижвствовные мутзцкя, некоторые из которых сказались супернестабильшши (Георгиев п др. , 1990). В данной работе проведано исследование супБрнзствбильных мутаций в локусах yellow з o=einie9Q. s такзз зсслэдоавк сопутствующий иутзгэнзз в других локусах.

Цель и задачи гсследозачдя. Даль данной работы - исследование природы нестабильности и основных свойств супэрЕэстабжльЕкх мутаций, возникших хгрй соачэщании Р-М гибридного дисгвесзн и системы продленной неотабильпсстЕ, Ендуцироввнной ковшг мобильным элементом Сталкер.

Была поставлены следупцив конкретные задачи:

1) Определить основные"свойства супернестабальностл отлученных мутаций

В ЛОКУСаХ yellow Я oeelllless.

2) Получить новые сусарнастабильные мутации в других локусах, определить частоту их возникновения и изучить генетические характеристики суперна стабильности.

3) Сравнить основные закономерности происходящих"событий в локусах

.yellow, ocellileas И ДРУГИХ ЛОКуСЭХ. В КОТОрЫХ ПОЛУЧВЕЫ

супэрнвстабильные мутации.

4) Генетически картировать еозшпшыэ при сопутствупцем мутагенезе мутации в ранее нв вдвнтЕфщированных локусах.

Научная новизна- В результата проведанной работы выявлена новая системе генетической нестабильности. Обнаружено, что при индукции Р-М гибридного дпсгенвзз в линиях из систем продленной нестабильности, связанных с транспозициями нового мобильного элемента Отвлкер. с частотой около 2.2 х Ю-4 возникают супернестабильние мутации в различных локусах. В втих линиях в свою очередь возшкавт новые сушрнестабмьные нутация, при этом исходное сугорне стабильные системы сохраняют свои свойства.' Показано, что основные свойства полученных нами супврнастаОильннх нутаций отлияаазтся по характеру мутагенеза от всех описанных ранее систем супернестабильности.

В работа впервые показано, что мобильный элемент влияет на вкспрессив гена таким образом, что образуется плавный спектр изменений фенотипа от близкого к норме до экстремального, т. е. мобильный элемент тонко регулирует экспрессию гена.

В' результате исследований получены мутации в трах ранее не

тгдвh'I'hiJmI ^шипттат ДОНУСВХ X— хрОЫОСОШ — pseudoseute, pseudobeadex. И cut. wing.

Научно практическое значение работы. Получена система супврнестабиль-ности, которая с успехом может использоваться для получения супернаствбильных нутаций в различных локусах X - хромосомы, и для получения мутаций в ранее не описанных локусах. К настоящему моменту локус осеППеза (осэ генетически изучен недостаточно, известны только несколько ое- мутаций. Наш была получена коллекция новых аллелей локуса oceiiiieaa, фанотишческое проявление которых плавно изменяется от увеличения угла казду оцедлярнши щетинками до сильной деформации лобной капсулы. Было получено около ВО новых аллелэй локуса yellow с плавным фенотипическим переходом от аллэля "дикого" типа (у*-) до полной инактивации гена (у^). при этом отбор производился го II зонам кутикулы, в катерах ген yellow вкспрессируется независимо.

Апробация работа. Основные научные результаты диссертации докладывались ва &-ом Всесоюзном совещании по" проблемам биологии и генетики дрозофила (Одесса. 1989) и на меклабораторпом семинаре в ИМБ PJH.

__Структура работы. Диссертация изложена на 137 стр.. вшшчая IG таблиц

и 5 рисунков и состоит из разделов: введение, обзор литературы., материалы и метода, результаты, обсуждение и вывода.

Результаты и обсуждение

В процессе изучения супернестабильности в лахусо осеииезз был получен широкий спектр мутантов с постепенными переходами фенотипического проявления. Почти всэ ос-аллели имели варьируюцую экспрессивность, что вызывало трудности в выявлении индивидуальных аллелей. Поэтому было выделано II хорошо различимых фенотипических классов с определенными границами степени экспрессивности.

Генетический анализ_исходного_звена суггврнестаОдльной_системы

о£пос!а<_> Основные свойства супериестабильной системы.

Исходная мутация ос была получена в третьем поколении после скрещивания самок линии у2зе+1М^*»а<3 с самцами линии я Она имела фенотип, идентичный оето,гь, и в течение перши, десяти поколений былв стабильной. В дальнейшем в линии появилось несколько самцов с. фенотипом ос1^". в потомстве одного такого самца были найдены 4 самца, имэщие фенотип ос3", и один - ос™15. Таким образом, был получен первый супернестабильннй аллель о=тейа1 (табл.1). В дальнейшем для обозначения аллелей с одинаковым фенотипом и различным происхождением мы будем использовать цифровые индексы. Из большого числа полученных вллелай выделялись только узловые аллели, которые были генетически наиболее хорошо изучены. Следует подчеркнуть, что гад аллэлем с определенным индексом нами обычно подразумевалась совокупность независимо полученных аллелей, имэгщих одинаковое цроисхояденив, фэнотзшчесное проявление и-характеристики нестабильности.

Исходный аллель остойа1 переходил в мутации с Солее экстремальным фенотипом с частотой 3,1*10~2 и к частичным реверсиям к норме - 6,4х1СГ2 (табл.1). При этом частота и направление нестабильности является характерной чертой данного аллеля в целом, что проявляется в похожем расщеплении потомства у отдельных самцов с одинаковы;.! аллалем ос. Так, при изучении потомства 37 самцов с аллелэк осП1С*1а1 было найдено от I до 10 самцов с аллвлем ос3'" у 35 родителей и от I до 4 самцов с аллелями, имещими экстремальное проявление фенотипа, - «т1' и осзЬ у 21 родителя. Так как нами анализировалась только малая доля всех гамет, продуцируемых половой системой свкцэ, • можно считать, что разброс в частоте возникновения новнх аллелей в потомстве самцов с одинаковым исходным аллелэм является следствием .анализа сравнительно малой выборки. Для всех остальных аллелей ое б:шг получены аналогичные результаты. Поэтому идентификацию индивидуальных аллелей проводили по двум прививкам: I) фенотипическое проявление2) частота и характер нестабильности.

Таблица I

Генетический анализ исходного звена сухгернествОильной

СИСТ8Ш В ЛОКУСВ осеПИезз.

Индекс род.

8ЛЛ0ЛЯ

Индекс вллеля

лю<3а1

шос1аЗ тос1&4 тойлЕИ тос1л212 аЬ21 тоНд?М 3 зЪ21

V пЬ

V тос1Ь

V то<1а

2*"

сам- хро-цов мосом

Индексы основных фенотипических классов

Р1

ЗЫ1 зЬ21 зЬ31 зЬ21

1-37 1669 34-112 5002 43-73 324.5 41-68 2680 1-17 350 1-34 1Е11 1-14 713 15-31 1063 35-88 £¡556 8-31 2145

64 38 38 34 23 54 40

той то<1 Ь

та тЬ за зЬ еа

15

0.0

22

7 12

2 5

22

8

2 £ 0.7

а

0

В Ц

7

1В 12.

го

Часто еь та 2 (Х1СГ 9.5

5.8

6.5

5.1 4.1

8.6 7.5

1.9 0.1

ю 1,3

зЬ11 тх!а1 8-ЕЭ 1405

зЬ21 шх1а2 20-94 2080

аЬЭ1 иоааЗ 4-12 302

иЬ тоал 21-129 6618 31

пос1Ь вЬ

тос1а2 3-27 4964 «СпкхЗа} 4-20 950

10 ВО

30

50 17 44 . а

4Х

Ш

340

290 270

0.1

31,0 33,9 32.а 4.8 7.0 39.4

V вЬ 12-21 1544

в« зЬ 34-72 6087

з» юоаа1 14-27 1868

9¥ тосЗа2 54-131 7690

ЗУ тэааЗ 10-26 1224

+3 тЪ 48-87 6464

+3 то(1Ь 15-19 1276

1.4 0.6

- 0.2 0.2 0.4 1

0,15

<0,1 1.9 0.2 2 0,4

2 0,3

3 0,4

1 ОЛ 5 1.2

- приведены индексы аялвлзй, из которых произоили изучаемые аллели;

**- слева от тире - число независимо полученных самцов с данным аллэлем,

справа - общее число проанализированных самцов;

общее число Х-^ромосом, проанализированных в потомстве самцов с изучаемым вллелем;

подчеркнуты аллели, которые дают в потомстве родительский фенотип.

1

Исходный аллель ocmoda давал с частотой 0,9"1СГ2 производный аллель ое9Ь, который в свою очередь Еозвращался к первоначальному состоянию с частотой 28x10-2. Так была получена первая пара аллелей с минимальным (oemoda5 и максимальным (осзЬэ фенотипичвским проявлением, которые переходили друг в друга: ocmoda<r> осзЬ. в дальнейшем все аллели, для которых характерны взаимные переходы, мы будем называть парными; аллель с более сильным проявлением мутации ос в данной конкретной пара -максимальным вллелэм, а другой - минимальным аллвлвм. Кроме обратимых переходов, каждый из двух аллэлей пары дает другие производные. Так, в потомстве счмцов с аллелем ос"0114 с частотой " 1,Б"10~2 возникали самцы

mi} яЬ -

с аллелем ос , которые в отличие от ос на давали обратных переходов. В то же время аллель ос"15 составлял пару с другим аллелем - ocw. Другие редкие производные аллеля oemoda - ос"**115 и °cw также имевт новый тип

__________moda

расщепления и для них существует свои парные аллели, отличные от ос

Аналогичные классы возникают и при расщепление аллелей оезЬ, ос™13. ocw и

т.д. Все выше перечисленные аллели получили название смещенных по

отношению к паре oemoda-> оезЬ. Таким образом, при анализа исходной

• за

пары ос се.бз —> ос3 сзг.7> было выделено насколько смещенных пар:

33

ocWC1.95 ^ oc^A.ai; ocW СО.353 r~~> ocn"dhC7>; 99 37

100 Э1 oc С4..1 > -> ос C4.53; ое СВ.63 -> ос С24Э.

100 Э5

В скобках приведена частота нестабильности данного аллеля (xIO ). Цифры над и под стрелками обозначают, какой процент от общего числа нестабильных производных составляет: парные аллели. Как правило, степень нестабильности максимального аллеля в 2-3 раза выше, чем у минимального,, причем для максимального аллеля переход в минимальный аллель намного болев специфичен, чем обратный процесс.

Крокв- смещенных аллелей, для большинства аллзлей характерно возникновение' с высокой частотой (до 20Х1СГ2) производных со слабым проявлением фенотипа мутации (ое+3 и ocBW>. Так, при расщеплении аллелей ocmoda и осзЬ .возникают соответственно с частотой 4,3х10~2 и 4,1x10-2 аллели с фенотипическим проявлением oe3V, при расщеплении аллеля ос""12 -

ос+3сз.1х1о"гэ. Такие аллели были названы стабилизированными. Они отличаются относительно меньшей нестабильностью (менее 0,5'Ю-2) и при расщеплении дают обычно широкий спектр производных. Кроме того, для стабилизированных адлелей характерно расщепление в сторону образования стабильных аллелей «еЬ с максимальным проявлением мутантяого фенотипа.

Генетический анализ производных супедаэстабильных__систем_в

локусе осеИИезз.

В предыдущем разделе были описаны закономерности мутагенеза в супэрнестабильной системе при - изучении лишь пары 'аллелей ост°£1а >

аЬ

ос и ее наиболее характерных производных. Следующей нашей задачей была проверка полученных ваганомерностеЯ яа примере большого числа разных ос-аллелей. Для этого бани более подробно изучены некоторые аллели, которые вмели другой характер нестабильности го сравнению с аллелями из исходного звене супврнастаОильности. На рисунке I приведены схемы родословных изученных аллелей. Стабилизированные аллели ос3", полученные из вллеля ос™11, давали с частотой в среднем - 0,3*Ю-2 новые ^нестабильные аллели. Два из таких вллеля - ос^51 ' и ос"10^52 отличались от исходного вллеля остос1а только го частоте нестабильности, которая увеличилась в 2 рвза. Стабилизированный аллель ос3"1 .полученный из аспоаз31, такие расцеплялся с частотой в 3 раза выше, чем у исходного ос". Более подробно бнли изучены на нестабильность цепочки аллелей, полученные из аллелей ост°<1а51 и 0евЬ311. Цифры, находящиеся в индексе аллеля справа от тире (см. рисунок I), указывает на номер схемы, на которой отобрвженв родословная втого аллеля и его производных. Были

зЬ21 V

такга детально исовдоввнн некоторые производные аллеля ос ,- ос .

шос1а£11 сюс1а21£ ста ¿¿213 __м

ос .ос и ос . имещие другой характер

нестабильности, чем аллель ос"**13.

На рис.1 представлены результаты по анализу нестабильности для наиболее хорошо изученных аллелей. Для всех проанализированных классов мокно сделать - ряд общих выводов. Во-первых, о усилением мутантного фенотипа происходит снижение вкгивоемости самцов с соотвествувдим-аллелвм. При атом надо учитывать, что выживаемость самцов монет зависеть не только от мутации ос, но и сопутствующего мутагенеза, в том числе различных перестроек, которые происходят сравнительно часто. Однако в целом среднеарифметический коэффициент ндашаемости для каждого класса "аллелей отражает реально существующее снижение выживаемости с усилением мутантного фенотипа (см. табл.2). Во-вторых, наблюдается корреляция между усилением проявления мутантного фенотипа вллеля и увеличением

стенени'его нестабильности (см. табл.2). Исключением является стабильный

аллель оееЬ. Кроме того, отдельные аллели имеют частоту нестабильности в 2-3 раза большую, чем усредненная для втого фенотипического класса.

Рисунок I

эа-111 1-111 4 moda-111 8а-12

Д/ та-12

у/-2

\

О зЪ

I

тоба213 тос/а еа213(1,2)

зЬ-321 за-321 +—тос1а 3

^321 та-311-►и'-311

" 1 * 1

та-32 пюёа-31 за-311

| зуг-З |—-гтюбЬ-ЗЗ+ь-ш

+тос/а-51 Бв

I.

В-третьих, большинство хороню изученных аллелей, чвстота нестабильности которых выше 0,5х10-2, образуют пары. Лишь для аллелей -оееа не было найдено нар. В-четвертых, для аллелей одного класса существует достаточно разнообразный спектр производанх, которой сильно варьирует. В-пятых, кнз^ правило, аллели, принадлежащие к одному фенотипическому классу, образуит пары только с одним - двумя другими фе но типическими классами. Например, аллвли оеза и осэЬ составляют пары с ос1 и ос'°ос1а;

геЬ „ V т, __

с ос . кагвдую пару составляют аллели, которые сильно различаются по проявлению мутантного фенотипа. Единственным исклзчениен является пара ос131?—>осэа. Наконец, обычно самым представительным классом среди производных нестабильных аллелей от ое1 до ■ оера являются стабилизированные аллели с фенотипическим проявлением ос* и ос3".

Таблица 2

Средняя величава коэффициента выживаемости и частоты нестабильности для аллелей, принадлежащих к одному фенатипическому классу.

©ёнотипиче ский Коэффициент класс выживаемости

+3

Частотв cxio аэ нестабильности

aodb

ос

я

ОС

ос осе

0,81 0.S1

0.84. 0.S

0,78 1.3

0,79 3,4

0.65 7.8

0.83 7.7

0.59 11.7

0,57 1S.2

0.54 20.7

0.43 19,9

0.27 . 25

0.16 стаб.

Примечание. Средние величину коэффициента выживаемости и частоты

нестабильности рассчитывали для всех аллелей данного класса, для которых было просмотрено не менее 200 хромосом.

В случав аллелей ocv этот класс производных часто отсутствует.

Изучение сушщыстаОильных мутаций в локусе - yeiiow у

DroBophila mclanogastar.

Линия, в которой была. получана супернестабильная система в локусе ooeiiilese, имела генотип у2 во+1Ы0 waG. В процассе изучения суперна стабильности в локусе ooellüese на 122X10 про анализлровнных хромосом было полу чинно 25 мутаций в локусе у ello*. Из них IQ имели фенотип аналогичны! мутации у2, но со "слабо-желтыми щетинками на груда и голове"- у2рв; одна - фенотип у1 (полная инактивация гена). Все выше перечисленные мутации вели себя - сравнительно стабильно (в квздом отдельном случае боло проанализированно в среднем около 500 хромосом). Однако шесть мутаций оказались супернестабильными и имели следующие фенотипы: у2Ье(1 мут.), у^О мут.), ^"(I мут.) и у+рв(1 мут.). В данной работе быв подробно изучена только одна супернестабильная

РЪп

система, которая возникла исходно из мутации у . Другие супврнестабильныв мутации имеют аналогичные свойства.

ос

ос

ос

Таблица 3

Классификация супорнестабильных аллелей в якусе yellow по фенотипическому проявлении.

Интенсивность окраски щатинок

Интенсивность окраски тела и крыльев и соответствующие пимяолы

грудных бршных символ 6+ 5+ 4+ 3+ 2+ +

+D + +т +1 d 2 1

5» 5+ - +D3 У +3 У +тз У +1з У ds У 2э У

гсэ>+ 4+ р +Dp3 У +рз У +трз У +1рэ У и dp9 У 2рз У

А-- п +13пэ У +ПЭ У +mns У +1пз У dna У 2пз У

1С2Э + 2СЗЭ + Ь - +Ьэ У +тЪэ У +1Ьз У dbs У 2Ьз У

л— V - " - - - - 2v3 У. У

- - i - - - - i! у

Интенсивность окраски тела < крыльев"

+wb3 ч-мкЬз +1ыЬз

У -у У

__ _ _ *

Окраску имеют толыю крылья

+W3

У

+mws +lwa У У

Примечания. Расшифровка смысла букв и цифр индекса: р—pale; n—notum;

b-body; v—variable; w—winga; D—Dark; m—midle; 1—light.; d-Нлгк; 3—My—

_* _ 2 _ _ _ _ _ _

Т8ции типа у ; i-мутации типа у . Интенсивность стражи: "5+" - окраска дикого типа, - окраска нулевого мутанта.

"окраска тела на одну единицу слабее окраски крыльев, которая, совпадает с соответствующей колонкой. ■"^Окрашены только крылья.

В процессе йзучания супврнестабильной системы в локусе yellow наш было выделено около 80 различных го фенотипу мутаций, которые имели рванул степень окраски определенных зон кутикула (тела, крыльев, грудных, бршных, Крыловых и ножных щетинок, рисунка на грудном отделе и головной капсуле, врист, второго членика антенн, полового гребешка, коготков ). С целью упрощения слоеной картины здесь мы приводим классификацию всех аллелей только по четырем основнвх признакам: степени окраски тела, крыльев, грудных и брпшых щетинок (си.Табл.3). Для всех изученных нами оллелэй характерна корреляция в окраске определенных зон

кутикулы. Во-первых, у большинства аллелей интенсивность окраски груди и брюшка совпадает. Во-вторых, за исключением нескольких стабильных аллелей степень окраски бршных щетинок была больше, чем у грудных щетинок. Интересно, что некоторые мутации имеют мозаичную окраску щетинок, т.е. часть-щетинок - желтые, другие - коричневые или черные. Поэтому интенсивность окраски щетинок для мозаичных мутаций определялась по соотношению коливствв желтых к черных щетинок.

Общие свойства стпернестабильной системы'в локусе yellow.

В ходе генетического анализа исходного у£Ьз аллеля на 575 просмотренных сагврв было получений 10 самцов, имеющих фенотип аналогичный музейной мутации у^у^э и 2 самца с фенотипом "слабо хелтне щетинки" на фоне нереальной окраски тела и крыльев ( у+рв) (см. рис. 2). Все 8 независимо подученных производных аллелей у2в были нестабильны и имели похожий характер мутационных изменений. В дальнейшем нами был проведен обширный го-семейный анализ характера расщепления наиболеее интересных аллелей.Кроме того, у всех без исключения аллелей изучалось фенотшгическое проявление при температуре ,>25° С. На рис.2 приведены результаты этого анализа. На нем оОъвденены данные ш ¿¿стабильности отдельных аллелей, если они имели похожий фенотип и характер расщепления. В потомстве самцов с аллодом были обнаружены самцы с нестабильными аллеями у^, у2рв, у2пв,угЬв,уТ8, которые, в свою очередь, с высокой частотой ревертировали к родительскому, аллалв у28, либо переходили друг в друга. Таким образом, была получена группа аллелей внутри которое происходили практически любые взаимные переходы. Наряду с нествбилышми аллелями часто возникали аллели у1в (полная инактивация гена), которые были сравнительно стабильны. Также, с низкой частотой (-5Ч0-4) появлялись стабильные аллели у+1Ъв, у+рв, у+в, у+Вв, которые имели феноэд близкий к норма. В общем была получена замкнутая система аллелей, названная суперна стабильной подсистемой, и она имеет следующие признаки-. I)существует набор из основных аллелей, которые с высокой частотой переходят друг в друга; 2)каждий из основных аллелей может расщепляться с образованием стабильных производных, к которым относятся в первую очередь аллели у1в, а также другие аллели, имепцие не характерный для этой подсистемы фенотип.

Возникновение вовых сутатяастабильных подсистем.

Независимо 6 раз вз аллеля у26 был получен аллель у*^, который давал производные аллели с новым фенотипическим проявлением (у+шв). Таким образом возникла вторая подсистема, в которой основными аллелями стали

ч.

Рисунок 2

шдосш* I

у*

Я ^

у+тя г.о у43

тг\ я\

ХГу^

уб$

шпзств'л з

шдаетыА г

у£з yds и у+тз в03М0ХН0> к основным аллелям можно отнести также у2*33, но для наго получено недостаточно данных по характеру нестабильности. Стабилизированными в данной подсистеме являются аллели y+ls и у13. Наконец, остальные аллели, как мы предполагаем, являются либо реверсиями к первой подсистеме, либо переходом к новым подсистемам, о чем будет говориться в следупцем разделе.

Наиболее хороша были изучены 3 и 4 подсистемы, возникшие из аллеля

акя

у . Третью подсистему образуют четыре клвсса основных аллелей (см. рис.2.): у+из. уйз. y2ps и у2*1? Ш характеру расщепления аллель у1э и часть аллелей y+Da и y+ls можно отнести к стабилизированным. Возникавшие в третьей подсистеме аллели у2ша и их производные имеют сравнительно низкую частоту расщепления и несколько иной характер нестабильности, поэтому их можно отнести к другой подсистеме. Кроме того из рис.2 видно, что все основные аллели 3 подсистемы часто расщепляются с образованием аллелей первой подсистемы (у110). Четвертая изученная нами подсистема имела три особенности. Во-первых, ее родоначальником стая аллель у+пв , который имеет новое фенотжшческое проявление: нормальная окраска тела и крыльев сочетается с желтыми щетинками на груди. Во вторых, ЗЗх производных аллеля у+пв являются полностью стабильные аллели класса имещие желтое тело и щетинки и В разной степени окрашенные крылья. В-третьих, все нестабильные производные аллеля у+пв можно разбить на две группы: вллели у^ и у23, зоющие сравнительно низкую частоту нестабильности; аллели у2в, которые по характеру расщепления можно отнести к 3 подсистеме. В общем, не был найден ни один производный аллель, который непосредственно расщеплялся бы с образованием родительского аллеля у+гш. Правда, из одного аллеля yde второй группы был получен аллель у*3, который при расщеплении дает исходный аллель у+п? При зтом надо отметить, что около 8QS6 всех производных аллеля у*а составляет аллель у+па. Поэтому отличительной особенностью четвертой подсистемы является отсутствие непосредственных взаимных переходов основных аллелей.

Таким образом большинство изученных нами нестабильных аллелей можно отнести к четырем описанным выше супернестабильннм подсистемам, между которыми происходят часто взаимные перехода друг в друга и существование замкнутой цепочки из трех различных по фенотипу аллелей.

Описание других супещестабильных подсистем в локусе yellow

'В процессе анализа нами были ныделены также аллели, которые можно отнести к другим супернастабильным подсистемам. Цри отборе таких аллелей • мы руководствовались тем, чтобы данный вллель отличался от ранее

Таблица 4

Генетический анвлиз производных подсистем локуса yellow.

Индекс Индекс 2 21 аллаля род. сам- гро-аллеля цов мосом

Изменение фенотипа (Индекс) и их

Частота (xICT2)

5 подсистема г —> 5 +Юв +в +ns +тв +1в ds 2в 2рв dps 1в

1 2Ъа +тв-2 1-31 1401 1 34 1 27 2 8 10 1 3 6,3

6 подсистема 1 2 -> 6

2 2Ьв йв-2 1-24 1085 1 22 30 40 21 10,5

7 подсистема 2 -> 7

3 Iva +таэ-2 1-18К 97SO 10 114 14 97 49 2.9

8 подсистема э -> 8 +в ■+тз +1в йв 2в рв цв 2Ъв ТВ 1в

4 +1в 2в 11-44 2??3 32 17 2.2

5 2в +юв-3 2-27 1419 41 1 2 3,1

9 подсистема з -> а

0 +DB 2в-3 1-29 1554 1 2 4 10 - 1 5 1 4 1.8

7 +шз +Гв 2-18 99? 1 4 2 0,7

8 2в +Ев 4-44 2570 5 2 1 0,3

9 VB +Do 1-17 9В6 4 2 0,6

10 подсистема 3 —> Ю +в +рв +тв +щрв +1пв +1Ъв 2в 2Ъв 1в

10. dps +шв-з 1-25 1136 1 10 4 _ 7 1.9

II подсистема 3 —> 11

11 +рз +ЮЭ-3 1-18 951 1 5 3 1 1

12 подсистема • 3-> 12

ia dns +шв-3 1-37 2081 . 2 2 1 0,2

13 подсистема з -> 13 +Do +рв +тв +шрв +1рв dpa 2в 2пв 2Ьв ' I в

13 +lbn +шв-3 1-26 1053, 1 49 28 26 2 7 2 1 4 11,:

14 +Врв +1Ьв 1-21 1208 4 о.

15 +рв +1Ьв 11-64 3814 2 4 3 1 6 о,

описанных основных аллелей парных четырех подсистем хотя бы по одному из сведущих признаков: I) более высокая частота нестабильности; 2) новое фенотипическов проявление аллеля; 3) . возникновение при расщеплении аллвля с достаточно высокой частотой новях по фенотипу аллелей, двже если последние являются стабильными.

По первому признаку »ипи выделены два аллеля у (5 и 6 подсистемы), которые бшш получены из второй подсистемы. Для них бала характерна частота нестабильности в 3-5 раз выше средней для атого класса аллелей (см. табл.4). Важно отметить, что ш окраске других зон кутикулы данные -аллели у2вЬ отличатся от аналогичных в других подсистемах. Исходные аллели подсистем 8 и 9 были выделены по второму признаку, так как к

+1в +Db

основным аллелям в них соответственно относятся у и у . Интересно, что при анализе производных аллеля y+Ds не было обнаружено реверсий к родительскому вллелю, что напоминает ситуацию в четвертой подсистеме. Исходные аллели 10-13 подсистем мы идентифицировали сразу по второму и третьему признакам. Наконец, аллель был выделен как исходный для 7 подсистемы только по третьему признаку.

Основной нашей задачей при выделении новых подсистем было получение как можно большего числа аллелей, различавшихся по фенотшшческому проявлении.

Изучение новнх супепнестабильных мутации о исходной супернвстабильностью В ЛОКУСЭ ocelllleaa.

Данные, ■ характеризующие сопутствующий мутагенез в линиях с пу11йрияптяг1и7гт.тщми мутациями В локусо ocellllesa прИЕВДвНЫ В табл.5 - ОНИ объединении в три грушш. i - суммарные данные по мутагенезу в семействе су I 1Щ1нйптяг^тпт.ннт ос-мутаций, и - мутагенез в трех независимо возникших производных ос-линиях, каждая из которых произошла от одного самца, ш - возникновение нутаций в семействе линий, в которых к суперна стабильной ос- мутации добавилась суиврнестабильная мутация в локусе yellow, эти производные линии также получены исходно из одного самцв.

Из табл.5 видно, что во всех сериях опытов шел активный сопутствующий мутагенез с частотой равной (1.5-2) X Ю-3, причем он имел выраженную специфичность: наиболее часто мутации возникали в локусах

yellow, white, singed. КОТОрЫв ЯВЛЯЮТСЯ ИЗЛЭбЛВНЕЫМК МИШВНЯМИ При

транспозициях как Р- элемента, так и Сталкера [Kidweii, I98G: Георгиев, 1988; Герасимова, 1990]. Кроме того, часто наблюдали появление мутаций в трех ранее не идентифицированных локусах Х-хромосамы - pseudoscute.

paeudobeadex И cut wing. МуТШДИИ В 1ШЦНУГГ ДЗУХ ЛОКУСЗХ ПО

фенотипическому проявлению напоминают соответсвенно ас- и вх-мутации сLindaiey]. Наконец, были получены интересные мутации в других локусах Х-хрсмосомы,- I) доминантная мутация, изменяет морфологию груди (у 30«

Таблица 5

Мутагенез в Х-хрсмосоме, содержащей сутарнвстабильяне мутации в

локусе oeelliless

Локус и индекс аллеля Номер группы опытов и число проанализированных Х-хромосо.м I XI III 73940 48170 150233 общее чао- супер- общее час- супер- общее час- суперчисло тога нестаб. число тота нестаб. число тота нестаб, "У1- (XIO-4) мут.(х10-45 мут. мут. вдо-4, мут.

yellow у 16 2.2 1 9 1.9 5 N и

AS—С Hw - - - 1 0.2 - 12 0, ,8 -

, , , su while w 15 2.0 - . 11 2,3 - 91 е, ,0 -

^ysu 11 1 .5 5 24 5.0 - Зв 2, ,4 15

• wlyau w^" 1 0.1 — 2 Э 0,4 0.6 3 13 5 0, 0, ,9 ,3 5

wMU aRau w 1 O.I — 2 5 0.4 1.0 _ 32 1 2, 0, ,1 .1 1

pseudo-scute СрэсЭ 3 0,4 3 1 0.2 1 3 0. 2 3

singed Csn3 58 7,8 4 22 4.6 - 82 5, ,5 3

cut wlng Ccwí — - - 1 0,2 1 3 0, ,2 3

pseudo-beadex СрЬхЭ mleroehatae С пеЭ в 0,5 - 4 0.S - 8 11 О. 0. 5 .7

Всего

109 14.7 13

Частота супернестабильных. - - 1.8 мутаций, xIO

у. супернестабильных мута- - - и.э ций от общего числа

85 17.S 10 297 19.7 ЭО 2.0 - - 2.0

11.8

10,1

У исходных линия была супернестабильная мутация в локусе yellow.

особей возникает глубокая борозда, которая делит грудь на две чвсти); происходит редукция дорзоцентральвых щетинок; появляются лишние щетинки на боковых отделах груди; 2) рецесивная мутация приводит к фенотипу "темное тело, появление неглубокой борозды мекду щитком и грудью" и ведет себя как супернестабильная, давая реверсии к норме и аллельные переходы.

Характерной особенностью мутагенеза явилось получение большого числа сухгарнестабильных мутаций в различных локусах Х-хромосомы, при атом исходные сулврнестабильные системы в локусах yellow и oceiuiess сохраняли свои свойства. Так были получены производные супернестабильные системы В ЛОКуСаХ yellow, white, pseudoscute, singed и cut wing. В ЦВЛОМ

в нашей системе супернестабильные мутации составляют 10* от чирла всех, возникших в Х-зромосоме мутаций (табл.5). Этот процент внив, чем в обычном Р-Н гибридном дисгенезе. Кроме того, супернествбильше мутации, полученные в нашей системе, и при обычном гибридном дисгенезе различаются ш целому ряду свойств.

Таблица "6

АтуЯ-Шд НЭСТабИЛЬНОСТИ В локусе paeudoseute Индекс Происхок- Индексы февотипических классов. Частота Схема

Е (Х10~^_

EU3-i + i-ia 45 г 410 1-ю

+U3-1 IBU3-1 1Й-17 840 - 3 - - 0.3

WU3-1 mus-l г-11 16 4S5 4 - г 4,2

тиз-1 +us-l 3-16 27 - 345 - - 7.8

дение самцов +

+ 1-12 45

IBU3-1 12-17 840

Cl из -1 2-11 16

+U3-1 3-16 27

mua-1 1-8 17

wua-l 2-Ю 4

+ 1-11 18

+ 1-10 12

+ 1-5 6

•75 + 3-15 28

рэс . рас

пи< ♦

рае <—. рас Î1

sua-l mus-l 1-8 17 - 4 280 - 7,5 '»а

рзс

eua-1 wua-l 2-10 4 - - - 210 1,0

таи-2 + 1-11 16 - 310 - - 5,2

wau-З + 1-10 12 405 - - l" 3.2

тзи-4 + 1-5 6 121 - - 5,0

340 - - 8.2

Примечание. <<+» - индекс у вллеля с нормальным фенотипическпм проявлением

Мутации в локусе paeudoacute приводят к фенотипу "тонкие щетинки" и редукции щетинок и волосков на груди и голове. С помощью рекомбинационного картирования локус pseudoseute был локализован между -локусами гиььу ci-7,si и eut сi-го.оз, приблизительно в районе от10,8 до

. Il,5 вд. карты. Фенотип мутаций рзе имеет широкие границы вкспрасивности, но несмотря на вто, было выделено четыре разных по

_ ______W3U mau эзи

фенотяпическому проявлении класса вллвля: рае . р ас , рзе

еэи

рзе

Все семь независимо полученных мутаций рзе были супернвстабильными ( табл.6). Одна из них - раетиз1 была изучена более детально. Широкие границы экспрессивности каждого отдельного аллеля вносили некоторую неопределенность в количественную оценку результатов, хотя и не влияли на основные выводи. Исходный мутант pscmual при расщеплении давал производные с трвия различными фенотипами: рзе . p9cw. рзе , в потомстве которых в свою очэредь появлялись аллели с исходным фенотипическим проявлением и характером нестабильности, т.е. происходило образование пар аллелей, которые переходили друг в друга. Наиболее стабильным, как и в большинстве других супернествбильных систем, были аллели соответственно с максимальным и минимальным фенотипическим проявлением

, eau „ +su ч (рае И рзе 5.

Супернвстабильнне мутации были получены также в пока не идентифицированном локусе cut wing (обрезанные крылья). О помощью

Таблице 7

АНЯЛИЯ ЕеСТабИЛЬНОСТИ В ЛОКуСе eut wing

Индекс Происхон 2Г Индексы фенотипических классов Частота Схема аллеля дение самцов + w • m в (io-2)

nau-l + 1-14 24 12 328 7 11.6 cww

и

+au—1 mau-1 12-15 780 _ 1 _ 0.1

wsu-1 mau-1 7-3 <1 270 2 4 3.6

eau-l mau-l 7-7 7 S 1 190 6.8

rftsu-2 ' + 1-е 4 _ 170 2.3

mau-3 + . Î-IO 15 1 £90 2.0

irau-i -v 1-9 4. & 320 1.8

ew <л."

рекомбинационного картирования одна из мутаций с»юи1 была локализована между мутациями д с1-44,4> и г С1-56.7Э, но из-за сниженной на порядок частоты рекомбинации более точной локализации мутации провести не удалось. С помощью генетического анализа было выделено три аллеля, имеющих различное фенотипическое проявление: сот маленькой выемки на вершине крыла до большой вырезки с внутренней стороны крыла); с»"1 сот большой вырезки с внутренней стороны крыла до сильно обрезанного с двух

сторон крыла); с»с сот сильно обрезанного крыла до крыла, имеющего вид лопасти и напоминащего крыло при мутации Оуэ. Изучение нестабильности затруднялось, как и в предыдущем случае, широкими границами акспрессивности фенотишчвского проявления аллелей см. все четыре независимо полученных мутации с» оквзались супернестабильными. Одна из мутаций с*ми1 была исследована более подробно. Как видно из табл.75, были получены взаимные аллельные переходы, наиболее стабильными оказались аллели с диким фенотипом.

Локус рзеийоьеааех оыл локализован с помощью рэкомбинационного картирования мевду мутациями д (1-44,4) и г (1-55,7) в районе 50,7 ед. карты. Стенотипическое проявление аллелей рЬх - обрезанные крылья, что напоминает мутации в локусе Веайех. Самцн с ыутацзлыи рЬх" и рЬхт при температуре 25°0 имеют небольшие вырезки по всему крав крыла, а при температуре 18°С крало у 90« особей не изменено.

Таблица а

Дня тага нестабильности В локусе раеис1оЬеа<±2х

Индекс Происхои- 2Г Индексы фенотишческкх классов Частота

аллеля дение самцов + V т в е ( Ю-2)

+аи-1 + 1-22 1327 4. 4 1 0,7

+аи-2 + 1-78 4260 1 4 13 1 0.4

+аи-3 1-51 3124 2 1 В - 0,3

+аи-4 1-134 8105 4 - 1 г - 0.2

+зи-5 + 1-50 3340 3 г 5 1 0,3

+эи—6 + 1-81 4458 - 1 5 - 0.1

уои +зи-с1-е: ге-зв 18 6 - 2610 - 0.9

тзи << •8-2Э 2 - 1462 - - 0,1

ази << 9-11 _ 675 4 - - 0.6

Фенотип мутаций с более сильным проявлением рЬх3 (редуцирована большая часть крыла, которое имеет вид узкой.короткой голоски) и рЬхе (крыло в зачаточном состоянии) не зависит от температуры. Самым нестабильным классом аллелей яелявтся рьх*3", который имеет дикий фенотип. При расщеплении аллелей рЬх*53 возникают производные с различным фвнотипическим проявлением; они в сеов очередь ведут себя сравнительно стабильно. В локусе рзеиаоьеаагх не было получение супернестабильных мутвций.

При исследовании супврнестабильных мутаций в локусах yellow, ocelliless И ДРУГИХ. ПОЛуЧвННЫХ При СОПУТСТВУЩЭМ МуТВГеНВЗВ.

установлены следующие общие свойства: опрвделяпцая роль Р - элемента-, из полученных в сушрнестабшгьной системе аллелей мокно построить ряд, в котором происходит плавное изменение фэнотипа от близкого к норме до экстремального; для каядого аллэля характерна, помимо особого фенотипа, своя определенная частота и специфичность нестабильности; одинаковые по фэнотипичесхо.му проявлению аллели могут иметь различный спектр и частоту расщепления-, больная часть нестабильных аллелей образует пары, для которых характерны взаимные переходы.

Ранее ГолубоЕсжин бшш Ендалеш из природных популяций супернестабильные мутации в локусе singed, которые тзкев имели ряд сходных черт tГолубовскии. 1977 ¡1937]. С помощью гибридизации in situ Голубовский показал, что его супврнестабильные мутации не связаны с Р-влэмзнтом. В нашем случае сулврнестабильность прямо зависит от активности фермента транспозазн с Георгиев. 19903. В настоящее время описано несколько супернастабильных мутаций в локусах ysiiow и singed, которые индуцзровавы инсврцкей двух копий Р-ЭЛВМЭНТа CHawley, lsea Rol ha, 1989; 3. Эти суотрнестабильные мутации отличаются от описанных нвми по двум или одному из следующих признаков: I) среди производаых имеется большой процент стабильных мутаций; 2)фенотипа супернестабильных мутаций и их производных не образуют плавного спектра.

Для объяснения характерных особенностей супернестабильности мы предположили, что ее индуцируют одновременно два мобильных влвмента, причем- Р-вламэнт встроен в другой пока неидантифяцированный мобильный элемент. Причиной супврнв стабильности в таком случае- как мы предполагаем, являются разрывы, индуцируемые транспозазой на концах Р -элемента. в результате которых происходит активация процессов рекомбинации и-конверсии мвяду двумя копиями мобильного влвмента. Таким образом, могут происходить изменения в регуляторной области мобильного влеманта. что в свои очерадь приведет к измэнвнию его влияеия на вкспрессию гена - мишени и'соответственно к новому характеру экспрессии последнего. В пользу этой гипотезы говорит факт существования 80 различных аллелей локуса yellow, которые легче всего можко объяснить влиянием модулей внхансвра мобильного элемента на экспрассию гена.

Ранее было описано явление моды на мутацию в природных популяциях дрозофилы [Ввгд. 1965; Иванов. 1977; Захаров. 198зз. С точки зрения

приспособительной реакции нельзя объяснить резкое повышение концентрации одной вредной ели даже нейтральной мутации одновременно у больного количества особей дрозофила. Твкжа маловероятно существование мобильного элемента, который вызывал бы мутации только в одном оцределнном лскусе -обычно при транспозициях мобильного элемента происходит мутагенез хотя бы в нескольких локусах. С нашей точем зрения, наиболее вероятной является модель, по которой мобильный элемент, находясь рядом с важны;« для дрозофилы геном,, кокет с помощью своих регулятсрных последовательностей "улучшить" его екопрессию ( при stçm кзменэнзге фенотипа у дрозофилы кокет не происходить ), что в свою очередь приводит к распространению такого аллеля по популяциям. Далее коСяльекй элемент »¿окат либо индуцировать нестабильность в втом районе (двлзцш, инвэрсш), что приводит к фанотипически ведшим мутациям; либо в силу ряда структурных сеойсте хромосош перемещаться с помощью конверсии только в определенный другой локус. В нашей сзстеме такими свойствами обладают аллели рьх+и= и v^3, которые отличаются от исходных аллелей только повышенной нестабильностью. То кв бшю показано в одной из супернестабильвых систем в. локусэ singsd [Ладпшцэнко, 1S90], где получен сгоцвфичвнй побочный мутагенез по лоху су eut, что бшю связано с существованием фэнотишсчески нз дроявляюцойся Енсзрции пока не здэнтВЕЦироввпаого коОзльного злеыэн'ГЕ в локусв cut, который, вырезаясь, образует дэлецне, приводящие к мутациям.

Bbshhm свойством всех подученных наш; суперна стайкльпих систем является плавный спектр Езкенаний фенотипа от близкого к норка до ¡экстремального. Встраиваясь в какой либо участок хромосомы мобильный элемент кокет не только "улучшить" экспрессию гена, но и в результате активации процессов рекомбинации и конверсии мевду дзуыя ногтями мобильного элемента "подобрать" оптимальный набор енхансзрвых последовательностей али переориентировать экспрессию гена к мвняззцимся условиям окружапцей среды. Такой процесс шкет являться одним из возможных механизмов эволюции.

вывода

1. Показано, что в супврнвстабильшт системах локусов yellow и ooeliiiess каждый аллоль имеет свою определенную частоту и спецзфшшость (спектр производных аллелей) нестабильности. Нестабильность - аллелей характеризуется рядом общих закономерностей: еллелк, частота

пдстабкльпсстп г.сторых еышэ 0,5 х 10 образуют пары, для которых характерны взаимные перехода; аллели, принадлежащие к одному фэнотгатческому классу, образуют пары только с одним-дзумя аллелями других Фэеотшшчвских классов; у Евстабилысх аллелей самым представительным классом по числу потомков является стабилизироввншм (частота нестабильности монеа 0,5 х 1СГ^) аллели.

2. Нэки обнаружено, что по крайней мере в II зонах кутикулы ген yellow мокэт шэть независимую вкспрессаю. Билл получены аллели у которых экспроссия гена yellow независимо измэнялась в разных чвстлх тела от суперэксггресс5!и гена до полной ого кпвктивацяи.

3. Показано, что в докусв ooellilesa аллели образует плавный спектр изменения фенотипа от близкого к иорме до вкстрзтгзльного; с усиление?« проявления мутЕЕТного фзнотипа аллвля увеличяяавтся стошнь эго нестабильности я одЕОвромзнно происходит спипеякв выЕсшаемости самцов СООТВВТСТЕУЕЗЩЭГО адлэля.

4. Показано, что в лишал, с исходной суперна стабильность!] в локусэ ocHiiiiess с. частотой 1,9 х Ю-4 возникают ноше супврнв стабильные мутация в других лонусах, что составляет ID* от всех вговь полученных мутаций. Новые супернвстзбильЕыа мутации имэевт сеоёствэ, аналогичные супорнествбЕЛЫШм системам локуссв yellow и ooellileea.

5. Сопутствукциа гдутпгэнев в линиях, содврнзз?их супвряэствбильнне мутации yellow и ooelliless имеет вирпзеииуи специфичность: наиболее часто мутецяя нопникали в локусах yellow, while, singed 2 в двух других, ранее

нв опиоанннх лскусвх.

Список работ, • опубликовании: по теме дгссэртацяи. I- Георгиев ' П. Г.. БуфЕ S. М.. Елагин В. А-. Ладвицэнко А. Б. Суперпэстабалыше системы у d. meianogaater. ss G-e Всесоюзное соввщенив по проблемам биологии и генетики дрозофилы. Тезисы докл. Одесса. 1983-

■2? Георгиев П.Г.. Елагин В.А. Супврнествбильныэ системы у сгозорЬПа melanogaster: аНЭЛЕЗ МутаЦЗЙ В ЛОКуСв ocsllllma.// ГвНеТИКВ. 1990- Т- 26. Ив. ß. I4I6-I426.

•3. Гэоргивв П. Г-. •-Елагйн В. А. Возникновение нозых супврнвстабильных

МуТаЦйЗ В ЛИНИЯХ Dposophlla mslanogaster ' С ИСХОДНОЙ СуПЭрП9СТабИЛЬЕОСТЫ)

в локусе,осе11Иезз.^ Генетика. I9S0- т. 26. JS9- С. I5G4-I572.

4. Георгиев - П- Г. > Елагин В. А., Буф±> F.. М. . Колягин Н. П. Свойства супернестабильннх мутаций В локусе yellow у DröBophila melanogaß-ter. Генетика. 19Э2. т.28. 3S4. С.98-107.