Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Гемофилезный полисерозит свиней

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Приходько, Сергей Михайлович

I. Введение.

И. Обзор литературы.

1.1 Общие сведения.

1.2. Эпизоотология и патогенез.

1.3 Клиническая картина и патологоанатомические изменения.

1.4. Лабораторная диагностика.

1.5. Культурально-морфологические и ферментативные свойства.

1.6. Серологические исследования.

1.7. Экспериментальный гемофилезный полисерозит.

1.8. Профилактика и лечение.

1.9. Специфическая профилактика и иммунитет.

1.10. Методы оценки напряженности иммунитета.

1:11. Прямые и косвенные методы оценки напряженности иммунитета; диагностика инфекционных заболеваний.

III. Собственные исследования.

1. Материалы и методы.

2. Результаты исследований.

2.1. Оптимизация питательной среды.

2.1.1. Подбор основ питательных сред.

2.1.2. Зависимость роста Н. parasuis от количественного содержания в среде НАД, дрожжевого экстракта - источника V- фактора роста и сыворотки крови.

2.2. Мониторинг инфекции Н. parasuis в свиноводческих хозяйствах России.

2.3. Бактериологическое исследование на гемофилезный полисерозит.

2.4. Культурапьно-морфологические свойства Н. parasuis.

2.5. Биохимические свойства Н. parasuis.

2.6. Определение чувствительности культур Н. parasuis к антибактериальным препаратам.

2.7. Определение вирулентных свойств Н. parasuis для лабораторных животных.

2.8. Серологические критерии подбора вакцинных штаммов.

2:9. Оптимизация режима подготовки посевного материала.

2.10. Глубинное культивирование производственных штаммов Н. parasuis.

2.11. Приготовление поливалентной формолвакцины ГОА против гемофилезного полисерозита свиней.

2.12. Определение оптимальной концентрации микробных клеток, сроков инактивации и иммуногенной активности поливалентной формолвакцины гидроокисьалюминиевой против гемофилезного полисерозита свиней в лабораторных условиях.

IV. Обсуждение результатов исследований.

V. Выводы.

VI. Практические предложения.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Гемофилезный полисерозит свиней"

Актуальность темы

В связи с существованием крупных свиноводческих комплексов промышленного типа инфекционные болезни свиней представляют особый интерес для ветеринарных специалистов.

Промышленная технология животноводства определяет характерные особенности кормления и содержания сельскохозяйственных животных в крупных хозяйствах. Постоянное наличие в поголовье животных разных возрастных групп, движение их по технологической цепочке, сопровождаемой перегруппировкой, гиподинамия маточного поголовья и врожденная агаммаглобулинемия молодняка, частое воздействие стрессовых факторов приводит к снижению резистентности животных. Все это способствует активизации инфекционных агентов.

Большая плотность животных сопряжена с возможностью взаимного перезаражения, возникают идеальные условия для циркуляции возбудителей заболеваний среди поголовья. В последнее время значительную роль в этиологии и патогенезе инфекционных болезней стали играть условно-патогенные микроорганизмы, которые до этого оставались за пределами внимания ветеринарных специалистов. К этой категории бактериозов можно отнести и гемофилезный полисерозит свиней (болезнь Глессера) (Hani et al., 1973; J.F. Baehler et al., 1974; H. N.L. Smart etal., 1989; H. Wolfetal., 1990).

Одним из слагаемых успешного развития свиноводства является эффективная борьба с инфекционными заболеваниями, значение которых не уменьшается, а ощутимые экономические потери заставляют обратить на них пристальное внимание и обязывают постоянно совершенствовать диагностику и профилактику.

Неблагополучная обстановка по гемофилезному полисерозиту свиней сложилась во многих свиноводческих хозяйствах нашей страны. При остром течении инфекции заболеваемость может достигать 20-25%, а смертность, несмотря на лечение 10% и более (К. Kostansky et al., 1960).

Поэтому разработка и совершенствование диагностики и средств специфической профилактики гемофилезного полисерозита свиней является актуальной задачей.

Цель и задачи исследования

Целью исследования является проведение эпизоотологических исследований по гемофилезному полисерозиту и усовершенствование специфической профилактики гемофилезного полисерозита свиней. Для достижения цели были поставлены следующие задачи: -провести мониторинг гемофилезной инфекции в свиноводческих хозяйствах Российской Федерации;

-получить провизорные сыворотки к эпизоотическим штаммам Н. parasuis и провести их серотипирование;

-провести отбор производственных и контрольных штаммов Н. parasuis;

-оптимизировать питательную среду для культивирования вакцинных штаммов Н. parasuis;

-разработать технологию производства вакцины против гемофилезного полисерозита свиней и нормативно-техническую документацию (технические условия, наставление по применению, лабораторный регламент по изготовлению и контролю) на производство препарата;

- изготовить экспериментальные серии данного вакцинного препарата и испытать его в лабораторных условиях.

Положения, выносимые на защиту

1 .Питательная среда для культивирования вакцинных штаммов на основе панкреатических гидролизатов рыбной муки, крови, казеина, оптимального содержания дрожжевого экстракта и сыворотки обеспечивает стабильные результаты по накоплению бактериальной массы, не уступающие результатам, получаемым на средах из мясных переваров.

2.Поливалентная формолвакцина гидроокисьалюминиевая против гемофилезного полисерозита свиней формирует специфический иммунитет к возбудителям гемофилезного полисерозита.

Научная новизна

Получены новые данные о роли Н. parasuis в развитии эпизоотической ситуации, складывающейся в неблагополучных по гемофилезному полисерозиту свиноводческих хозяйствах.

Экспериментально обоснована и создана новая питательная среда из недефицитного сырья для культивирования вакцинных штаммов Н. parasuis.

Разработаны технология производства, а также методы контроля и применения поливалентной формолвакцины гидроокисьалюминиевой против гемофилезного полисерозита свиней.

Практическая значимость работы

На основании проведенных исследований предложена для производства в биологической промышленности и использования в ветеринарной практике "Поливалентная формолвакцина гидроокисьалюминиевая против гемофилезного полисерозита свиней".

Разработаны на поливалентную формолвакцину гидроокисьалюминиевую против гемофилезного полисерозита свиней временные технические условия, наставление по применению и лабораторный регламент по изготовлению и контролю.

Создана питательная среда для культивирования вакцинных штаммов Н. parasuis на основе панкреатических гидролизатов рыбной муки, крови, казеина и оптимального соотношения, стимулирующих рост добавок, позволяющая значительно снизить себестоимость вакцинных препаратов, получаемых на средах из мясных переваров.

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены на международных научных конференциях: "Проблемы биологической и экологической безопасности", Оболенск, 22-24 мая, 2000 г., "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов", Щелково, 5-6 июня, 2001 г., "Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера", Новосибирск, Россия, 29-31 мая 2002 г. По материалам диссертации опубликованы 5 научных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 120 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и приложений. Диссертация содержит 10 таблиц и 12 рисунков. Список литературы содержит 148 источников, в том числе 37 отечественных и 111 зарубежных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Приходько, Сергей Михайлович

V. Выводы

1. Обследовано 13 крупных свиноводческих хозяйств в десяти регионах России, исследовано 1925 образца патологического материала от 385 павших и вынуждено убитых поросят 1-4 месячного возраста. Из 54 образцов от 18 голов поросят (что составило 2,81% от числа всех исследованных образцов и 4,68% от числа голов) выделен и изучен 121 изолят гемофил, которые по культурально -морфологическим и биохимическим свойствам отнесены к виду Haemophilus parasuis.

2. Общий процент выделения возбудителя гемофилезного полисерозита составил 4,68%) от числа исследованных голов, но при вспышке инфекции отход поросят от гемофилезного полисерозита достигал 22,8% к общему числу павших поросят отъемного возраста.

3.Установлены оптимальное соотношение панкреатических гидролизатов рыбной муки, казеина, крови в питательной среде и определена оптимальная концентрация дрожжевого экстракта и сыворотки крупного рогатого скота для культивирования вакцинных штаммов H.parasuis. Предложенная питательная среда дешевле традиционных питательных сред на основе мясных переваров и обеспечивает аналогичные выходы по накоплению бактериальной массы.

4.Получены провизорные сыворотки к эпизоотическим штаммам H.parasuis и проведено их серотипирование.

5.Подобрана композиция вакцинных штаммов в поливалентной формолвакцине гидроокисьалюминиевой против гемофилезного полисерозита свиней. Установлены оптимальные иммунизирующие дозы вакцины для морских свинок. Отработанны методы контроля безвредности и иммуногенности.

6. Разработан технологический процесс производства поливалентной формолвакцины гидроокисьалюминиевой против гемофилезного полисерозита свиней. Отработаны режимы приготовления посевного материала, глубинного культивирования вакцинных штаммов H.parasuis и концентрирования бактериальной массы.

7.На поливалентную формолвакцину гидроокисьалюминиевую против гемофилезного полисерозита свиней разработаны проекты технических условий, наставление по применению, лабораторный регламент по изготовлению и контролю.

VI. Практические предложения

Рекомендовать для производства биологической промышленностью и использования для специфической профилактики поливалентную формолвакцину гидроокисьалюминиевую против гемофилезного полисерозита свиней (ТУ на опытную партию).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Приходько, Сергей Михайлович, Оболенск

1. Александров Н.И., Гефен Н.Е. Активная специфическая профилактика инфекционных заболеваний и пути ее усовершенствования. В книге ассоциированные вакцины. М. 1962.

2. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. М. 1962.

3. Беккер М.Е., Дамберг Б.Э., Раппорт А.И. Анабиоз микроорганизмов. Рига.1981.

4. Борисович Ю.Ф., Кирилов Л. В. Под. ред. Осидзе Д.Ф. Инфекционные болезни животных: справочник. М.: Агропромиздат, 1987, 288с.б.Беляков В.Д., Семененко Т.А. Вакцинология и эпидемиология в их историческом развитии. Журн. микробиол. 1996, № 5, с. 114-117.

5. Бургасов П.Н., Рожков Г.И. Сибиреязвенная инфекция. М. Медицина.1980.

6. Бургасов П.Н. Итоги выполнения рекомендаций XVI всесоюзного съезда микробиологов и эпидемиологов и очередные задачи в области борьбы синфекционными заболеваниями в СССР. Журн. микробиол. 1984, № 7, с.4-16.

7. Галь Э., Медьеши Г., Верецкеи JI. Электрофорез в разделении биологических макромолекул. Перевод с английского Розенгардта В.И. М. Мир. 1982.

8. Голубинский Е.П., Осипенко И.И., Солодун Ю.В. Оценка вакцинального иммуноморфогенеза пероксидазным методом. Журн. микробиол. 1986, № 12, с.59-62.

9. Ю.Гумбатов Ю.Н. Биохимические свойства гемофильных бактерий, выделенных от поросят, больных полисерозитом. Докл. ВАСХНИЛ, 1977, № 5.

10. ЬГумбатов Ю.Н. Изучение биологических свойств гемофильных бактерий. Ветеринария. 1978, № 3, с. 49-50.

11. Дзагуров С.Г., Кравченко А.Т. Очередные задачи стандартизации и применения биологических препаратов. Журн. микробиол. 1978, № 8, с.26-29.

12. Дзагуров С.Г., Быченко Б.Д. Термины и определения, относящиеся к стандартным образцам биологических препаратов, используемых в медицине. Сборник трудов ГИСК им. Тарасевича и Московской НИИВиС. М. 1982, с. 1-6.

13. Н.Ефимцева О.В., Мирясова Л.В., Баснакьян И.А. Использование реакции торможения пассивной гемагглютинации для предварительной оценки антигенной активности клебсиелезной вакцины. Журн. микробиол. 1991, № 11, с.9.

14. Каральник Б.В., Исина Х.М., Ващенко Г.М. Серологический метод определения стафилококкового белка А. Метод, рекомендации. Алма-Ата, 1977.

15. Ковалев В.Ф., Волков И.Б., Виолин Б.В. и др. Антибиотики, скльфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии: Справочник. М.: ВО "Агропромиздат", 1988.

16. Коляков Я.Е. Ветеринарная иммунология. М. Агропромиздат. 1986.

17. Кузьмина J1.A., Козлова Н.Н. Экспериментальное изучение гуморальных факторов иммунитета при иммунизации бесклеточной стафилококковой вакциной. Журн. микробиол. 1995, № 6, с.44-45.

18. Лосева Т.В. Серологические и иммунологические типы Haemophilus parasuis возбудителя полисерозита поросят: Дисс. канд. биол. наук. М., 1980, 131с.

19. Михайлов В.В., Воробьев А.А., Махлай А.А. Экспериментальное изучение иммуногенных свойств штамма М- 44 Coxiella burneti и живой энтеральной вакцины против лихорадки КУ. Журн. микробиол. 1996, № 1, с.38-42.

20. Паутов В.Н., Чичерин Ю.В., Евстигнеев В.И. Протективные свойства фракции чумного микроба в эксперименте. Журн. микробиол. 1979, № 10, с.37-42.

21. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. М. Медицина. 1999.

22. Пшеничнов В.А., Семенов Б.Ф., Зезеров Е.Г. Стандартизация методов вирусологических исследований. М. 1974.

23. Радчук Н.А., Дунаев Г.В., Колычев Н.М., Смирнова Н.И. Ветеринарная микробиология и иммунология, М.: ВО "Агропромиздат", 1991.

24. Роит А. Основы иммунологии. Перевод с английского Василова Р.Г., Киркина А.Ф. М. Мир. 1991.

25. Селиванов А.В., Кирилов Л.В., Борисович Ю.Ф. Требования к штаммам микроорганизмов для приготовления биопрепаратов. Ветеринария. 1980, № 4, с.33.

26. Семенов Б.Ф., Онищенко ГГ., Наркевич М.И., Ганзенко В.П. Расширенная программа иммунизации: итоги, перспективы, новые проблемы. Журн. мкробиол. 1996, № 5, с.110-113.

27. Сергиев В.П., Дзагуров С.Г. Актуальные проблемы иммунопрофилактики инфекционных болезней и стандартизации медицинских иммунологических препаратов. Журн. микробиол. 1984, № 7, с.29- 33.

28. Сидоров М.А. Гемофилезная плевропневмония. Справочник: Инфекционные болезни животных М.: Агропромиздат, 1987, с.242-243.

29. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б., Определитель зоопатогенных микроорганизмов: справочник. М.: Колос, 1995, 319с.

30. Скородумов Д.И. Актинобациллезная (гемофилезная) плевропневмония и гемофилезный полисерозит свиней: Дисс. докт. ветер, наук. М., 1997, 411с.

31. Сохин А.А. Парадокс инфекционного иммунитета. Журн. микробиол. 1988, № 1, с.73-80.

32. Сумароков А.А. Краткие итоги иммунопрофилактики, научно методические принципы совершенствования вакцинно-сывороточных идиагностических препаратов. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. Под ред. Бургасова П.Н. М. Медицина. 1978, с.386- 425.

33. Тарасенок Н.И., Сидоров М.А., Чернецкий В.М. Сывороточный иммунитет против гемофилезного полисерозита поросят. Докл. ВАСХНИЛ, 1982, №1, с.32-33.

34. Хейфец А.Б. Теоретические и методические основы оценки эффективности специфической профилактики. М. Медицина. 1968.

35. Хоулт Дж., Криг Н., Снит П., Стейли Дж., Уильяме С. Определитель бактерий Бержи. В 2-х т. М. Мир. 1997.

36. Чернов С.М., Цетлин Е.М., Ботвинкин А.Д., Романова Л.Н. Результаты использования прямого твердофазного иммуноферментного анализа для оценки специфической активности антирабических вакцин журн. микробиол. 1991. № 5. с.30-33.

37. Alcolado R.F., Deben F.T., Roeriguez D.S. Poliserositis hemofilica porcina (enfermedad de Glasser) por Haemophilus parainfluenzae Rivers, 1922,- Rev. cub. Cienc. veter., 1982, vol. 13, N2, p. 143-151.

38. Amano H., Kajio N., TsuchiyaM. et. al. Bacteriological and serological survey for Haemophilus parasuis in conventional and SPF pig farms. J. Japan Veter. Med. Assn., 1993, Vol. 46, N 11, p.913-916.

39. Amano H., Kajio N., Shibata M. et. al. An occurence of Glasser's disease in SPF pigs. J. Japan Veter. Med. Assn., 1993, Vol. 46, N 2, p.99-102.

40. Amano H., Shibata M., Kajio N., Morozumi T. Pathologic observations of pigs intranasally inoculated with serovar 1, and 5 of Haemophilus parasuis using immunoperoxidase method. J Vet Med Sci 1994 Aug; 56, 4:639-644.

41. Amano H., Shibata M., Kajio N., Morozumi T. Pathogenicity of Haemophilus parasuis serovars 4 and 5 in contact-exposed pigs. J Vet Med Sci 1996 Jun; 58, 6:559561.

42. Amano H., Shibata M., Takahashi K., Sasaki Y. Effects on endotoxin pathogenicity in pigs with acute septicemia of Haemophilus parasuis infection. J Vet Med Sci 1997 Jun; 59, 6:451-455.

43. Baehler J.F., Burgisser H., de Meuron P.A., Nicolet J. Haemophilus parasuis infection in swine. Schweiz Arch Tierheilkd 1974 Apr; 116:183-188.

44. Bakos K. Studien uber Haemophilus suis, mit besondererberucksichtigung der serologischen differenzierung seiner stamme. Thesis, Uppsala university, 1955.

45. Bakos K., Nielson A., Thai E. Untersuchungen uber Haemophilus suis.- Nord. Vet. Med., 1952, 4,-p. 241- 255.

46. Berned M., Flatla J.L., Noen undersoklser over Haemophilus suis. Nord. Vet. Med., 1954, 6, 269- 280.

47. Biberstein E.L., White D.C. A proposal for the establishment of two new Haemophilus species. Med. Microbiol., 1969, 2, 75- 78.

48. Blackall P.J., Rapp-Gabrielson V.J., Hampson D.J., Serological characterization of Haemophilus parasuis isolates fro Australian pigs. Aust Vet J 1996 Mar; 73, 3:93-95.

49. Blackall P.J., Pahoff J.L. Characterization of porcine haemophili isolated from Australian pigs between 1988 and 1992. Aust Vet J 1995 Jan; 72, 1:18-21.

50. Blackall P.J., Trott D.J., Rapp-Gabrielson .V., Hampson D.J. Analysis of Haemophilus parasuis by multilocus enzyme electrophoresis. Vet Microbiol 1997 May; 56, 1-2:125-34.

51. Clark K., Hill M.A., Kniffen T.S., et. al., An evaluation of the components of medicated early weaning. Swine Health Prod 1994; 2; 5-11.

52. Clark W.A., Feary D.H. The story of the American tupe culture collection. Adv.in microbiol. 1974. v. 17. p.295-309.

53. Calsamiglia M., Pijoan C., Solano G., Rapp-Gabrielson V., Development of an oligonucleotide-specific capture plate hybridization assay for detection of Haemophilus parasuis. J Vet Diagn Invest 1999 Mar; 11, 2:140-145.

54. Callan R.J., Hartmann F.A., West S.E., Hinshaw V.S. Cleavage of influenza A virus HI hemagglutinin by swine respirator bacterial protease's. J Virol 1997 Oct; 71, 10:7579-7585.

55. Davis D.J. The accessory factors in bacterial growth. IV The "satellite" or symbiosis phenomenon of Pieiffer's bacillus (B. iniluenzae).-Iniect. Dis., 1921, 29, 178186.

56. Delbeck F., Tegeler R., Ganter M. Bronchoalveolar lavage on pig breeding farms. Dtsch Tierarztl Wochenschr 1997 Sep; 104, 9:374-378.

57. Domansky F., Prispevek K. etiologii fibrinozniho zanetu kloubu a seroz selat. Veterinarstvi, 1959, r. 9, с. 11, s. 422- 426.

58. Done S.H., Paton D.J. Porcine reproductive and respiratory syndrome: clinical disease, pathology and immunosuppression. Vet Rec 1995 Jan 14; 136, 2:32-35.

59. Eaves L.E., Blackall P.J., Fegan M. Characterization and antimicrobial sensitivity of haemophili isolated from pigs. Aust Vet J 1989 Jan; 66, 1:1-4.

60. Glasser K. Untersuchunger uber die Frage "Gibtes eine von der Schweinepest unabangige schweinesencge ". Deut. Tieza rstl. Wochschr., 1910, 48, 717- 722.

61. Glasser K. Die fibrinose serosen- und Celenkentzundung der Ferkel.- in : Die krankheiten des Schwienes. M. H. Schaper. Hannover, 1912, 122- 126.

62. Gram Т., Ahrens P., Nielsen J.P., Evaluation of a PCR for detection of Actinobacillus pleuropneumoniae in mixed bacterial cultures from tonsils. Vet Microbiol 1996 Jul; 5, 1-2:95-104.

63. Gualandi G. L. Contributo alio studio eziologiko della Polisierosite fibrinosa die swinetti, 1955, 6, 891- 898.

64. Hani H., Konig H., Nikolet J. u. a. Zur Haemophilus Pleuropneumoniae beim Swein. VI. Pathogenese.- Schueiz. Arch. Tierhk., 1973, 1 15, 205- 212.

65. Hirasawa H. An occurence of Haemophilus parasuis infection in swine. J. Japan. Veter. Med. Assn., 1985, Vol. 38, N 12, p.802-805.

66. Hirasawa H. Glassers disease in piglets.- J. Japan Veter. Med. Assn., 1986, p. 648-651.

67. Hirasawa H., Satho V., Morozumi K. et. al. An occurence of swine Haemophilus parasuis infection associated with purulent fibrinous meningitidis.- J. Japan. Veter. Med. Assn., 1987, Vol. 40, N 7, p.519-522.

68. НШ B.D., Corney B.G., Wagner T.M. Importance of Staphylococcus hyicus ssp hyicus as a cause of arthritis in pigs up to 12 weeks of age. Aust Vet J 1996 May; 73, 5:179-181.

69. Hjarre A., Wramby G. Ueber die fibrinose Serosa Gelen- kenentzunaung (Glasser) beim schwein.- Z. Infektionskrnkh. Hygiene Haustiere, 1942, 60, 37- 64.

70. Hjarre A. Glassers Kranheit.- Arch, fur exper. Vet. Med., 1957, 11, 1,3- 8.

71. Horn M. Kasuistischer Beitrag zur Therapie der fibrinosen Serosenentzunaung der Ferkel.- Dtsch. tierarztl. Wschr., 1957, 336.

72. Hutyra F., Marek J., Manninger R. Special pathology and trerapeuticy of the domestic animals. Baillerg Tundell Cox, 1946, 3 vols., p. XII + 962, XI+ 704+XI+762.

73. Jubb K.V., Kennedy P.C. Porcine contagiose pleuropneumomia. In: Pathology of Domestic Animals, 2nr Edition, v. 1, p. 250. New York Academic Press, 1970.

74. Kaige N., Sigiyma A., Yamanaka S., Saski O., Sugiyma M., Isoda M. Posterios parlysis in pigs due to haemophilus pleuropneumoniae infection. J.J.V. et. Sci. 1983,45, 2,215-254.

75. Karlovis M., Leljko M., Pras A. Enzootska pojava Glas- serove bolesti u nasim sviniogojskim farmama. Veter. Glasnik., 1967, 8, 677- 681.

76. Kielstein P., Rosner H., Rassbach A. Die Glassersche Krankheit als Enzootie in Scweinergrossbestanden und Bedeutung bestimmer biologischer Eigenschaften von Haemophilus parasuis fur den Krankheitsverlauf. Mh. Veter. Med., 1992, Ig. 47, H.10, s.539-544.

77. Kielstein P., Rassbach A. Serologische Typisierung und Nachweis immunogenes Kreuzreaktionen von Haemophilus parasuis. Mh. Veter.- Med., 1991, Ig. 46, H. 16, S.586-589.

78. Kielstein P., Rosner H., Muller W. Typing of heat-stable soluble Haemophilus parasuis antigen by means of agargel precipitation and the dot-blot procedure. Zentralbl Veterinarmed B. 1991 Jun; 38, 4:315-320.

79. Kielstein P., Rapp-Gabrielson V.J. Designation of 15 serovars of Haemophilus parasuis on the basis of immunodiffusion using heat-stable antigen extracts. J Clin Microbiol 1992 Apr; 30, 4:862-865.

80. Kielstein P., Leirer R. Zur Glasserschen Krankheit desSchweines -Atiologischepizootiologische untersuchungen zum Erregerspektrum. Mh. Veter. Med., 1990, Lg. 45, H. 16, S. 577-582.

81. Kilian M. A taxonomie stude of a new species. J. Gen. Microbiol., 1976, 93,9.62.

82. King S.J. Porcine polyserositis and arthritis with particular reference to mycoplasmosis and Glasser's disease.- Austr. Veter. V., 1968, 44, 227- 230.

83. Kirchenbauer H. Die Stellung des Bact. influenzae suis im system der hamoglobinophilen Bakterien und sein Verkonmen bei Schwein, Schaf und Rind. Z. Infekt. Haust., 1934, 45, 273- 293.

84. Kofer J., Hinterdorfer F., Awad-Masalmeh M. Occurrence and drug resistance of bacteria pathogenic to the lungs fro autopsy material of swine. Tierarztl Prax 1992 Dec; 20, 6:600-604.

85. Kostansky K., Trunkat J. Prispevek к specificke prevenci a terapii fibrinozniho zanetu kloubu a seros selat.- Veterinarstvi., 1960, R. 10, 15- 20.

86. Lecce J.G., Justice W.H., Elliott G.C. porcine polyserositis with arthritis. J. Am. Veter. Med. Assn., 1960, 137,N6, 345-377.

87. Lecce J. G. Porcine polyserosite with arthritis: isolation of a fastidious pleuropneumonia- like organism and Haemophilus influenzae suis. Am. New York Acad. Sci., 1960, 79, 670- 676.

88. Lewis R.A., Shope R.E., Swine influenzae 11. A Haemophilic bacillus from the respiratory tract of infected swine. J. Exp. Med., 1931, 54, 361- 371.

89. Lichtensteiger C.A., Vimr E.R. Neuraminidase (sialidase) activity of Haemophilus parasuis. FEMS Microbiol Lett 1997 Jul 15; 1 52, 2:269-274.

90. Little T. W. A. Haemophilus infection in pigs. Veter. Rec., 1970, 87, 399402.

91. Little T.W.A., Harding J.D.I. The comparative pathogenicity of two porcine Haemophilus speciales. Veter. Rek., 1971, 88, 21, 540- 545.

92. Mac Daniels Т., Cairns R. Haemophilus parasuis and its role in swine disease.-Agri-Pract., 1990, Vol.11, N 4, p. 24-26.

93. MacInnes J.I., Desrosiers R., Agents of the "suis-ide diseases" of swine: Actinobacillus suis, Haemophilus parasuis, and Streptococcus suis. Can J Vet Res 1999 Apr; 63, 2:83-89.

94. Mannheim W. Limitierende in Mischkulturen eines obligaten Aerobiers (Achromobacter metalcaligenes) mit Haemophilus influenzae resp. mit Anaerobien. Pathol. Microbiol., 1966, 29, 341- 365.

95. Mayerhofer V. Beitrag zur fibrionosen Serosen und Gelenkenzunaung der Ferkel. Wien. tierarztl. Mh., 1935, 22, 634- 636.

96. Miniats O.P., Smart N.L., Ewert E. Vaccination of gnotobiotic primary specific pathogen-free pigs against Haemophilus parasuis. Can J Vet Res 1991 Jan; 55, 1:33-36.

97. Miniats O.P., Smart N.L., Rosendal S. Cross protection among Haemophilus parasuis strains in immunized gnotobiotic pigs. Can J Vet Res 1991 Jan; 55, 1:37-41.

98. Moller К., Andersen L.V., Christensen G., Kilian M. Optimalization of the detection of НАД dependent Pasteurellaceae from the respiratory tract of slaughterhouse pigs. Vet Microbiol 1993 Sep; 36, 3-4:261-271.

99. Morikoshi Т., ICobayashi K., Kamino Т., Owaki S., Hayashi S., Hirano S. Characterization of Haemophilus parasuis isolated in Japan. Nippon Juigaku Zasshi 1990 Jun; 52, 3:667-669.

100. Morozumi Т., Hiramune Т., Kobayashi K. Experimental infections of mice and guinea pigs with Haemophilus parasuis. Natl Inst Anim Health Q (Tokyo) 1982 Spring; 22, 1:23-31.

101. Morozumi Т., Hiramune Т., Kobayashi К. Glasser's disease in piglets produced by intraperitoneal inoculation with Haemophilus parasuis. Natl Inst Anim Health Q (Tokyo) 1981 Fall; 21, 3:121-128.

102. Morozumi Т., Nicolet J. Some antigenic properties of Haemophilus parasuis and a proposal for serological classification. J Clin Microbiol 1986 Jun; 23, 6:10221025.

103. Morozumi Т., Nicolet J. Morphological variations of Haemophilus parasuis strains. J Clin Microbiol 1986, 23, 138-142.

104. Nielsen R. Pathogenicity and immunity studies of Haemophilus parasuis serotypes. Acta Vet Scand 1993; 34, 2:193-198.

105. Nielsen R., Danilsen V. An outbreak Glasser's disease. Studies on etiology, serology and the effect of vaccination. Nord. Vet. Med., 1975, 27, 20-25.

106. Nielsen N.C., Bille N., Riising H.J., Dam A. Polyserositis in pigs due to generalized Escherichia coli infection. СаНАД. J. сотр. Med., 1975, 39, 4, 421-426.

107. Nicolet J., Krawincler M. Polyakrylamide gel electrophoresis, a possible taxonomic tool for Haemophilus, in: eds. Kilian M., Frederiksen W. Haemophilus, Pasteurella and Actinobacillus. Academic Press, New York, 1981, pp. 205-212.

108. Peet R.L., Fry J., Lloyd J., Henderson J., Curran J., Moir D. Haemophilus parasuis septicaemia in pigs. Aust Vet J 1983 Jun; 60, 6:187.

109. Palvarini A. La polisierosite fibrinosa dei suinetti. Clin. Veter., 1934, 9, 755759.

110. Rafiee M., Вага M., Stephens C.P., Blackall P.J., Application of ERIC-PCR for the comparison of isolates of Haemophilus. Aust Vet J 2000 Dec; 78, 12:846-849.

111. Rafiee M., Blackall P.J., Establishment, validation and use of the Kielstein-Rapp-Gabrielson serotyping scheme for Haemophilus parasuis. Aust Vet J 2000 Mar; 78, 3:172-174.

112. Rapp V.J., Ross R.F., Nicolet J. Characterization of the outer membrane proteins of Haemophilus parasuis. Proc. 11 th Int. Vet. Soc. Congr. 1986. p. 262.

113. Rapp-Gabrielson V.J., Gabrielson D.A., Schamber G.J. Comparative virulence of Haemophilus parasuis serovars 1 to 7 in guinea pigs. Am J Vet Res 1992 Jun; 53, 6:987-994.

114. Rapp-Gabrielson V.J., Gabrielson D.A. Prevalence of Haemophilus parasuis serovars among isolates from swine. Am J Vet Res 1992 May; 53, 5:659-664.

115. Rapp-Gabrielson V.J., Gabrielson D.A., Musser J.M. Phenotypic diversity of Haemophilus parasuis. Proc. 12 th Int. Pig Vet. Congr., 1992. p. 334.

116. Rassbach A. Biochemische und serologische Typisierung von Haemophilus parasuis. Mh. Veter. Med., 1992, Ig. 47, H. 12, S. 637-641.

117. Renault L., Perrault C., Maire c.l. et. al. L/Hemophilose du pore existet-elle en France? A propos d'un cas de la maledie de Glasser. Ball. Acad. Veter.Fr., 1974, 47, 6, 283-288.

118. Riising H.J. Vaccination of swine against Glasser's disease. Vaccination of grise mod Glassers syndrom. Dansk. Veterinaertidsskrift, 1979, 62, 4, 171-174.

119. Riising H.J. Prevention of Glasser's disease through immunity to Haemophilus parasuis. Zentralbl Veterinarmed B. 1981; 28, 8:630-638.

120. Riley M.G., Russell E.G., Callinan R.B. Haemophilus parasuis infection in swine. J Am Vet Med Assoc 1977 Oct 1; 171, 7:649-651.

121. Rosendal S. Boyd D.A., Gilbride K.A. Comparative virulence of porcine Haemophilus bacteria. Can J Comp Med 1985 Jan; 49, 1:68-74.

122. Rosner H., Kielstein P., Muller W., Rohrmann B. Relationship between serotype, virulence and SDS-PAGE protein patterns of Haemophilus parasuis. Dtsch Tierarztl Wochenschr 1991 Sep; 98, 9:327-330.

123. Rubies X., Kielstein P., Costa L., Riera P., Artigas C., Espuna E. Prevalence of Haemophilus parasuis serovars isolated in Spain from 1993 to 1997. Vet Microbiol 1999 Apr 19; 66, 3:245-248.

124. Segales J., Domingo M., Solano G.I., Pijoan C. Porcine reproductive and respiratory syndrome virus and Haemophilus parasuis antigen distribution in dually infected pigs. Vet Microbiol 1999 Feb 12; 64, 4:287-297.

125. Schermer S., Ehrlich R. Die fibrinose serosen und Gelenkentzundung der Ferkel. Dtsch. tierarztl. Wschr., 1922, 13, 167- 170.

126. Shanks P.L. Acute arthritis.- Veter. Rec., 1939, 51, 783.

127. Shope R.E. Swine influenzae. II Filtration experiments and etiology. J. Exp. Med., 1931, 54, 373- 385.

128. Smart N.L., Miniats O.P. Preliminary assessment of a Haemophilus parasuis bacterin for use in specific pathogen free swine. Can J Vet Res 1989 Oct; 53, 4:390-393.

129. Solano-Aguilar G.I., Pijoan C., Rapp-Gabrielson V., Collins J., Carvalho L.F., Winkelman N., Protective role of maternal antibodies against Haemophilus parasuis infection. Am J Vet Res 1999 Jan; 60, 1:81-87.

130. Sutherland А.К., Simmons С.С. Glasser's Disease in Swine.- Aust. Vet. Journ., 1947, 23, 4.

131. Stutzle A. Polyarthritis serofibrinosa acuta infolge hacheiliger Transporteinflusse. Diss. Freiburg i Br. 1913.

132. Vahle J.L., Haynes J.S., Andrews J.J. Experimental reproduction of Haemophilus parasuis infection in swine: clinical, bacteriological, and morphologic findings. J Vet Diagn Invest 1995 Oct; 7, 4:476-480.

133. Vahle J.L., Haynes J.S., Andrews J.J., Interaction of Haemophilus parasuis with nasal and tracheal mucosa following intranasal inoculation of cesarean derived colostrum deprived (CDCD) swine. Can J Vet Res 1997 Jul; 61, 3:200-206.

134. Von Altrock A. Occurrence of bacterial infectious agents in pathologically/anatomically altered lungs of pigs and compilation of resistance spectra. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 1998 May; 111, 5:164-172.

135. Wolf H., Engel H.G., Umlauft K.D. u.a. Herstellung und Einsatz einer bestandsspezifischen Haemophilus parasuis- Vakzine. Mh. Veter. Med., 1990, Ig. 45, H. 2, S. 45-47.1.l

136. Zimmerman J.J., Yoon K.J., Wills R.W., Swenson S.L. General overview of PRRSV: a perspective from the United States. Vet Microbiol 1997 Apr; 55, 1-4:187196.

137. Zucker В., Kruger M., Rehak E., Horsch F. The lipopolysaccharide structure of Haemophilus parasuis strains in SDS-PAGE. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 1994 Mar; 107, 3:78-81.