Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона

Суслянок, Георгий Михайлович

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона"

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПО ВЫСШЕМУ ОБРАЗОВАНИЮ

МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ПИЩЕВЫХ ПРОИЗВОДСТВ

На правах рукописи

СУСЛЯНОК ГЕОРГИЙ МИХАЙЛОВИЧ

УДК: 664.71-11:577.112.7(043.3)+ 664.644.53:577.112.7(043.3)

ФОРМИРОВАНИЕ БЕЛК0В0-ПР0ТЕИНАЗН0Г0 КОМПЛЕКСА И ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ДОСТОИНСТВ ПШЕНИЦЫ НА ОСНОВЕ НАПРАВЛЕННОГО ИЗМЕНЕНИЯ АГРОФОНА

Специальность 03.00.04 - биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 1996

Работа выполнена на кафедре биохимии и зерноведения Московской государственной академии пищевых производств

Научный руководитель: доктор технических наук,

профессор Карпиленко Г.П.

Научный консультант: кандидат биологических наук.

доцент Шатилова Т.И.

Официальные оппоненты: Доктор биологических наук,

профессор Мосолов В.В.

Кандидат биологических наук, доцент Шаненко Е.Ф.

Ведущая организация: Всероссийский центр по оценке

качества сортов сельскохозяйственных культур.

Защита состоится "13" июня 1996 г. в 10^ часов, ауд. 242 на заседании диссертационного Совета К.063.51.06 по защите диссертаций при Московской государственной академии пищевых производств по адресу: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, 11.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан " 13 " мая 1996 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета, к.б.н., доцент

Т.Г. Генералова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одна из сложных и ответственных задач современного растениеводства - обеспечение устойчивого наращивания производства высококачественного продовольственного зерна, являющегося важным сырьем для многих отраслей промышленности и занимающего большое место в пищевом балансе страны.

Биохимические особенности зерна, состояние его ферментного комплекса, а следовательно, технологические показатели качества сырья обусловлены целым рядом факторов и, прежде всего, уровнем почвенного плодородия и минерального питания выращиваемых культур. Известно, что применение минеральных удобрений влияет на плодородие почвы, приводя, как правило, к увеличению урожайности зерновых культур. При этом происходят биохимические изменения зерна, приводящие, в одних случаях, к улучшению его технологических достоинств, а в других случаях - к их ухудшению.

Проблема улучшения технологических достоинств и биохимических показателей качества весьма актуальна для зерна озимой пшеницы - основного сырья мукомольной и хлебопекарной промышленности.

Вследствие этого, большое значение для решения вопросов, связанных с получением зерна озимой пшеницы, отвечающего требованиям перерабатывающей промышленности, имеет изучение влияния степени окультуренности почвы, доз вносимых удобрений, на физические показатели качества выращиваемого зерна, а также исследование активности содержащихся в зерне протеолитических ферментов и их ингибиторов, оценка его мукомольных свойств и хлебопекарных достоинств.

Задача исследования возможностей направленного формирования биохимических показателей качества и технологических достоинств зерна озимой пшеницы особенно актуальна в зонах рико-ванного земледелия, к числу которых относится и зона российс-

кого Нечерноземья.

В последние годы решение этой задачи приобрело особую значимость, поскольку в зоне рискованного земледелия оказалась значительная часть посевных площадей, отведенных под зерновые культуры.

Цель и задачи исследования. Целью работы является изучение влияния степени окультуренности почвы, доз вносимых удобрений на биохимические свойства, белково-протеиназный комплекс и ингибиторы протеаз, а также на технологические показатели качества сортового зерна мягкой озимой пшеницы.

В соответствии с темой исследования были поставлены следующие задачи:

- исследование изменения активности нейтральных протеиназ и белковых ингибиторов собственных протеиназ и трипсина, выделенных из исследуемых образцов зерна озимой пшеницы, при выращивании на различных агрофонах;

- изучение белкового комплекса исследуемых образцов зерна пшеницы, в том числе, с использованием методов гель-хроматографии;

- изучение физических показателей качества зерна мягкой озимой пшеницы сорта "Мироновская 808", выращенного на различных агрофонах в условиях Нечерноземной зоны;

- исследование химического состава зерна озимой пшеницы;

- характеристика мукомольных свойств исследуемого зерна пшеницы;

- изучение изменений хлебопекарного достоинства зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах;

- исследование путей улучшения хлебопекарного достоинства муки, полученной из зерна озимой пшеницы при добавлении муки, а также вытяжки из муки амаранта.

Научная новизна. Проведено комплексное исследование влияния агрофонов на качество зерна мягкой озимой пшеницы урожаев 1992 и 1993 годов, в том числе, на физические показатели качества исследуемых образцов зерна, выращенного на почвах, раз-

личающихся степенью окультуренности и дозами вносимых удобрений.

Изучена зависимость химического состава исследуемых образцов зерна пшеницы от состояния агрофонов.

Исследована зависимость активности протеолитических ферментов озимой пшеницы урожаев 1992 и 1993 годов, а также белковых ингибиторов, выделенных из исследуемого зерна, от состояния агрофонов.

С помощью корреляционного анализа подтверждено наличие тесной взаимосвязи между активностью нейтральных протеиназ и их ингибиторов.

Выявлено влияние агрофонов на состояние белкового комплекса зерна озимой пшеницы. Исследован фракционный состав белков зерна озимой пшеницы. В ходе фракционирования проламинов исследуемых образцов зерна методом гель-хроматографии было установлено наличие трех белковых фракций, определены молекулярные массы полученных белков.

С помощью корреляционного анализа установлена взаимосвязь между накоплением в зерне проламиновой фракции с молекулярной массой > 65000 Д и качеством сырой клейковины зерна пшеницы.

Показано влияние добавления к пшеничной муке муки амаранта в пределах 5%, а также вытяжки из муки амаранта в пределах 15% на улучшение хлебопекарных качеств зерна озимой пшеницы.

Практическая значимость работы. Данные, полученные в ходе проведения экспериментов, имеют большое практическое значение. Они существенно расширяют представления о влиянии условий выращивания на состояние белково-протеиназного комплекса, а также на технологические показатели качества и хлебопекарные достоинства исследуемого зерна озимой пшеницы.

Результаты исследований раскрывают роль белково-протеи-назного комплекса муки амаранта при использовании ее в качестве улучшителя хлебопекарных достоинств пшеничной муки.

Полученные данные показывают пути формирования технологических свойств зерна озимой пшеницы, используя агротехнические

приемы. С помощью направленного воздействия на растения в период вегетации становится возможным получение зернового сырья требуемого качества.

Апробация работы. Материалы работы были доложены на расширенном заседании кафедры биохимии и зерноведения Московской Государственной Академии пищевых производств (1995) и IX Всемирном Конгрессе пищевых наук и технологий (Венгрия. 1995).

' Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 работы.

Структура и' объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов и библиографии.

Работа изложена на 169 страницах основного текста, содержит 36 таблиц и 28 рисунков. Список литературы включает 288 источников, в том числе 148 иностранных.

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнялась на кафедре биохимии и зерноведения Московской Государственной Академии пищевых производств, а также на кафедрах агрономической и биологической химии и сельскохозяйственной биотехнологии Московской сельскохозяйственной академии им. К.А. Тимирязева.

При проведении исследований в работе было использовано 16 образцов зерна мягкой озимой пшеницы сорта "Мироновская 808" урожаев 1992 и 1993 годов, выращенных на различных агрофонах.

Исследуемые образцы зерна озимой пшеницы возделывались на дерново-подзолистых почвах в учебно-опытном хозяйстве ТСХА "Михайловское" Подольского района Московской области в 7-поль-ном севообороте. Эти почвы различались по агрохимической характеристике, степени окультуренности и количеству вносимых удобрений. Характеристика используемых почв приведена в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Агрохимическая характеристика используемых почв

I Агрохимическая характеристика почвы

Степень |----------------------------------------------

окультурсшюсти! | гумус, I Р205, | К20,

ночг.ы I pli I % I мг/ЮОг почвы) мг/ЮОг почвы I |(по Тюрину)|(по Кирсанову)| (по Масловой)

Слабоокуль-туреипая

Среднеокуль-турениая

Хорошоокуль-турениая

.4,5 1.4

5.0

7,0-8,0

6.0 1,8 15,0 16,0 - 17,0

6,0 2.5 - 2,8 25,0 23,0 - 25,0

Таблица 2

Нормы внесения удобрений при выращивании пшеницы на почвах с различной степенью окультурениости

Рекомендуемая доза| Доза удобрений при | Доза удобрений при удобрений, кг/га |усвоении 2% ФАР, кг/га|усвоении 3% ФАР, кг/га

IJ | Pz05|Kz0| N | Pz05| К20 I N I Р205| К20 (Ш14П03)| | |(Ш4И03)| | |(NH4N03)| |

Сред неокуль туренная почва

45 | 45 |45 | 135 | 45 | 56 I 180 | 45 { 45

Хорошоо культурен нал почва

45 | 45 |45 | - 1-1 - I 180 | 45 I 45

Фосфорно-калийные удобрения ( калийная соль и двойной суперфосфат) вносились под основную вспашку, аммичная селитра полной нормой вносилась в фазе начала выхода растений в трубку. Навоз вносился под предшественник (вика-овес) в норме 35 т/га.

На слабоокультуренной почве выращивание осуществлялось без применения удобрений, известкования и гербицидов; на средне- 'и хорошоокультуренной почве - без удобрений и на фоне расчетных доз удобрений, спланированных на усвоение 2 и 3% фото-синтетически активной радиации (ФАР), приходящейся за весь вегетационный период, и обычной, рекомендованной дозе удобрений.

В исследуемых образцах пшеницы определяли массу 1000 зерен (ГОСТ 10842-89). натуру (ГОСТ 10840-64), стекловидность (ГОСТ 10987-76), влажность (ГОСТ 13586.5-85), содержание клейковины и ее качество (ГОСТ 13586.1-68), содержание белка (ГОСТ 10846-74), зольность (ГОСТ 10847-74), энергию прорастания и способность прорастания (ГОСТ 10968-88). а также крупность и содержание мелких зерен (ГОСТ 13586.2-81).

При исследовании химического состава проводили определение содержания в зерне озимой пшеницы фосфора (по методу Мерфи и Райли), калия (методом пламенной фотометрии), кальция, магния. железа и микроэлементов (методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии).

Содержание водорастворимого белка определяли по методу Лоури. Активность нейтральных протеаз определяли методом Ансо-на по начальной скорости гидролиза бычьего сывороточного альбумина. Все работы с ферментами проводились с учетом законов кинетики ферментативных реакций. Их активность определялась по начальной скорости реакции при насыщающей концентрации субстрата.

При определении активности ингибиторов в качестве нейтральных протеаз использовали ферментный препарат, выделенный из зерна пшеницы. В работе использовали трипсин фирмы "Спофа".

Выделение ингибиторов проводили по Аль-Рахмуну (1990) и Ибрагимову (1987).

Определяли фракционный состав белков, выделяя каждую фракцию соответствующим растворителем. Фракционирование спир-торастворимых белков проводили на колонке с сефадексом G-100. Элюируемые фракции собирали на коллекторе фракций "ULTR0RAC" фирмы LKB (Швеция) при температуре 4°С в холодильной камере "Colora". Регистрацию оптической плотности элюата осуществляли с помощью системы автоматической регистрации, состоящей из детектора ультрафиолетового излучения с длиной волны 280 нм "Uvicord-II", контролирующей части и шестиканального самописца производства фирмы LKB.

При математической обработке экспериментальных данных применялся метод корреляционного анализа.

Мукомольные свойства зерна оценивали по выходу муки, зольности (ГОСТ 10847-74), а также с помощью технологического показателя, представляющего собой отношение процента извлечения муки к ее зольности. Подготовленное зерно размалывали на лабораторной мельнице "Квадрумат Юниор".

Хлебопекарные качества зерна пшеницы оценивали по пробным лабораторным выпечкам, которые проводили и анализировали по ГОСТ 27669-88.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1. Влияние агрофона на качество зерна пшеницы

Данные по урожайности и характеристика зерна пшеницы приведены в таблицах 3 и 4.

Результаты исследований, представленные в таблице 3, свидетельствуют о том, что условия выращивания оказывают влияние не только на рост урожайности, но и непосредственно на показатели качества зерна. При повышении степени окультуренности

Физические показатели качества зерна пшеницы, выращенной на различных агрофонах

N И| окульту- | жай- |Круп- Iжанне 11000 |Нату- | вид-

I почвы | ц/га | % |зерен, | г | г/л | %

I . .1 I I % I I I

1992 Г.

1993 Г.

1. Слабоокуль-турениая, без удобрений

2. Среднеокуль-туренная, без удобрений

3. Среднеокуль-туреиная,реком. дозы удобрений

4. Среднеокуль-туренная,

2% ФАР

5. Сродпеокуль-туренаая.

3% ФАР

6. Хорошоокуль-туренная, без удобрений

7. Хорошоокуль-туреплая, реком. дозы удобрений

8. Хорошоокуль-туренная,

3% ФАР

21.3 85.2 3.2 11,5 68,4 9,1

26.9 93.1 1.4

28,9 68,9 9,6

45.1 95.7 0.7 52,8 81,9 4,0

41.5 94.1 1.2

52.8 76,9 5,5

53.5 94.8 0.9

63.2 80,3 3,4

31.6 94.7 0.8, 34,1 78,2 5,5

40.4 95.1 1.2

53.5 72.7 6, О

55.3 94.8 0.8

45.9 70,8 6.8

32.9 779 65

32.2 772 62

38.3 820 53

34.2 766 69

41.0 823 21

38.3 795 75

39.0 819 91

34.8 794 70

40.4 817. М

38.1 797 74

39.7 824 91

37.2 787 72

40.2 826 97.

34.9 786 74

39.8 820 72.

33.3 781 75

почвы и применении удобрений на среднеокультуренной почве наблюдается увеличение крупности зерна и снижение содержания мелких зерен, увеличение массы 1000 зерен, натуры и стекловиднос-ти зерна.

В таблице 4 приведены данные о влиянии агрофона на химические показатели качества пшеницы, из которых видно, что на накопление белка в зерне определяющее влияние оказывают вносимые' в почву удобрения. Внесение удобрений и повышение степени окультуренности почвы способствовало росту содержания клейковины в зерне. Повышение зольности с улучшением агрофона связано, по-видимому, с внесением возрастающих доз удобрений при одновременном повышении степени окультуренности почвы.

Содержание фосфора в зерне колебалось в пределах 0,86 -1,04% в 1992 и 0,91-1,02% в 1993 году, калия - в пределах 0,26 - 0,29% и 0,48-0,53%, соответственно. Содержание микроэлементов (Мп, Zn, Си, РЬ, Сб. Со, N1. Сг) в зерне не превышало ПДК, установленных для хлебных и зерновых продуктов (Медико-биологические требования и санитарные нормы качества продовольственного сырья и пищевых продуктов, 1990).

2.2. Нейтральные протеиназы. ингибиторы трипсина и нейтральных протеиназ зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах

Проведенные исследования влияния степени окультуренности почвы и доз вносимых удобрений на технологические показатели качества зерна выращиваемой пшеницы показали, что применение различных агрофонов оказывает существенное влияние на все показатели качества исследуемого зерна. Поэтому, было проведено более детальное изучение технологической роли белково-протеи-назного комплекса, как одного из факторов, определяющих хлебопекарное достоинство зерна пшеницы.

Во всех исследуемых образцах зерна было проведено сопос-

Химические показатели качества зерна пшеницы, выращенной на различных агрофонах

I Степень |Содер-|Выход реформация ежа|Выход |

и/п\- ренности Iбелка, |клей- |--------------|клей- |ность,

I • .1 | % |шкалы |кач-ва| % |

1992 г.

1993 Г.

1. Слабоокуль- 11.4 12 80 Н-уд. сл 4.4 1.64

туренная, без 12,9 29 60 1-хор. 10,1 1,84

удобрений

2. Сродцеокуль- 12.9 23 22 Н-уд. сл 8.3 1.90

туренная, без 13,2 29 70 1-хор. 10,3 1.92

удобрений

3. Срсдиеокуль- 13.2 29 90 11-уд.сл 10.2 1.84

туренпая, реком. 13,5 32 70 1-хор. 11,5 1,85

дозы удобрений

4. Средиеокуль- 13.6 32 Й5 П-уд. сл И. 1 1.88

турепная, 14,0 32 75 1-хор. 12.3 1.82

2% ФАР

5. Сродноокуль- ,14. 8 М 90 П-уд. сл 11.8 1.91

туренная. 14,1 34 75 1-хор. 13,1 1,86

3% ФАР

6. Хорошоокуль- 12. 1 32 95 П-уд. сл 11.3 1.85

туреаная. без 13,2 29 60 1-хор. 10,4 1,80

удобрений

7. Хорошоокуль- 16.4 28 90 П-УД.сл 9.7 1.83

туренная.реком. 13,8 33 65 1-хор. 11,7 1,83

дозы удобрений

8. Хорошоокуль- 13.6 24 90 П-уд. сл 8,6 1,81

туренная. 14,2 34 70 1-хор. 12,1 1,86

3% ФАР

тавление активности нейтральных протеиназ, ингибиторов I (по Аль-Рахмуну) и II (по Ибрагимову) нейтральных протеиназ и трипсина, а также автолитической способности по накоплению водорастворимого белка. Результаты исследований представлены в таблице 5.

Методом корреляционного анализа была показана удовлетворительная зависимость активности нейтральных протеиназ и активности ингибитора I по отношению к нейтральным протеиназам (г=0,73±0,060). С повышением протеолитической активности одновременно возрастает мощность этого ингибитора. Коэффициент корреляции между активностью ингибиторов I и II по отношению к трипсину составил 0,77±0,053. Слабая корреляционная зависимость была установлена между активностью нейтральных протеиназ и ингибитора II по отношению к нейтральным протеиназам (г=0,43±0,105).

Была установлена прямая зависимость автолитической способности от активности нейтральных протеиназ (г=0. 76±0,055), что подтверждает выводы, сделанные Шаненко (1990) об определенной роли нейтральных протеиназ в автолитических процессах в зерновой суспензии и в тесте.

Таким образом, подтверждается существование единой системы "протеиназы - ингибиторы протеиназ", определяющей стабильность протеиназного комплекса и действие протеолитических ферментов в технологии хлебопечения.

2.3. Фракционный состав белков зерна пшеницы.

Фракционирование проламинов на сефадексе G-100

Степень окультуренности почвы, дозы вносимых удобрений оказывают влияние на содержание общего белка (таблица 4). а также на содержание отдельных белковых фракций в зерне пшеницы (таблица 6). Выявленные количественные изменения, вероятно, сопровождаются и качественными изменениями белков, относящих-

Водорастворимые белки, нейтральные протеиназы, ингибиторы трип-сииа и протеиназ пшеницы, выращенной на различных агрофонах

I Степень |Содер-]Актив-IИнгибирующая ¡Ингибирующая

N N1 окульту- |жание |ность Способность Способность

п/н| рснности |белка,|нейтр.Iингибитора 1,% |ингибитора II,%

I почвы | (по Ло|протеи|-------------- |---------------

I | ■ ¡шкалы ¡псин ¡протеин.¡псин ¡протеин.

1992 г.

1993 г.

1. Слабоокуль-туренная, без удобрений

2. Среднеокуль-турепная, без удобрений

3. Срсдпеокуль-туренная,реком. дозы удобрений

4. Сроднеокуль-туренная,

2% ФАР

5. Средпеокуль-туренная,

3% ФАР

6. Хорошоокуль-туренная, без удобрений

7. Хорошоокуль-туренная,реком. дозы удобрений

■ 8. Хорошоокуль-туреиная, 3% ФАР

0.23 0,28

0.177 0,187

И 35

14 16

39 36

35 23

0.22 0,25

0.197 0,126

28 27

II 10

20 63

0.22 0. 23

0,200 О, 063

28 31

_7 14

39 37

37 12

О, 22 0,22

0.155 0,074

36 40

13 6

43 42

0.20 0.21

0.165 0,150

А5 39

19 15

32 54

ЗД 17

0.22 0,2.1

0.190 0.116

21 33

22 18

2й 39

21 28

0.25 0,28

0.305 0,084

¿0 45

29 15

44 34

зз 21

0.23 0,23

0.105 0,174

48 58

18 14

М 52

20 31

Фракционный состав белков зерна пшеницы урожая 1993 года

Степень |Небел-IАльбу-1 Проламины,% I

N И| икульту- |ковый |мины +1----------------------|Глюте-

п/и| ренпости |азот. |глобу-|с молекулярной массой:I липы.

почвы | % |лины, I----------------------1 %

I | % |>65000Д|65000- |<6000Д|

I. I I 16000 Д | |

1. Слабоокуль-

туреппая, без 7,5 23,1 6,8 17,4 8,0 37,2 удобрений

2. Среднеокуль-

туренная, без 6,5 24,1 6,9 16,3 8.1 38.1 удобрений

3. Среднеокуль-

туренная.реком. 6.8 22,2 8,0 15,7 9,7 37,6 дозы удобрений

4. Средиеокуль-

туренная, 7,0 25,0 8.8 14,6 10,5 34,1

2% ФАР

5. Среднеокуль-

туренпая, 6,3 25,0 8.6 13,0 10,1 37,0

3% ФАР 0. Хорошоокуль-

туренная. без 6,3 27,8 7,1 16,7 8,4 33,7 удобрений

7. Хорошоокуль-

•гуренная, реком. 7,0. 25,0 7,8 13,9 9.3 37,0 дозы удобрений

8. Хорошоокуль-

турешш. 6,8 29,6 8,1 12,4 9,7 33,4

3% ФАР

ся, в том числе и к спирторастворимой фракции.

Методом гель-хроматографии на колонке с сефадексом (М00 проламины зерна пшеницы урожая 1993 года были разделены на три фракции, различающиеся по молекулярным массам.

Наиболее высокомолекулярная проламиновая фракция, имеющая молекулярную массу >65000 Д. составила 21-27% от общего содержания проламинов. Основную массу проламинов (41-54%) составила фракция с молекулярной массой 65000-6000 Д. Фракция пептидов с молекулярной массой <6000 Д составила 25-32% от общего содержания проламинов:

Повышение степени окультуренности почвы и увеличение доз вносимых удобрений приводило к росту содержания в выращиваемом зерне пшеницы спирторастворимых фракций с молекулярными массами >65000 Д и <6000 Д; доля же фракции с молекулярной массой 65000-6000 Д снижалась.

Методом корреляционного анализа была установлена тесная взаимосвязь между содержанием фракции проламинов с молекулярной массой >65000 Д и качеством клейковины зерна пшеницы (г=0, 80±0,046). Чем более высоким оказывалось содержание этой фракции проламинов в исследуемых образцах зерна пшеницы, тем слабее оказывалась клейковина при определении её качества на ИДК-1 (таблица 4).

2.4. Технологическая характеристика зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах

2.4.1. Характеристика мукомольных свойств зерна пшеницы

Мукомольная ценность зерна выявляется в полной мере при его размоле. Поэтому, с целью изучения влияния степени окультуренности почвы и доз применяемых удобрений на формирование мукомольных свойств исследуемого зерна пшеницы были проведены лабораторные помолы.

Полученные в результате помолов смеси муки, крупок и отрубей просеивали на лабораторном рассеве. Сходом сита N 27 получили отруби, проходом сита N 38 - муку 1 и сходом сита N 38 - муку 2.

Результаты проведенных помолов приведены в таблице 7. Наблюдения за изменением мукомольных свойств зерна пшеницы, выращиваемого на различных агрофонах, подтверждают тесную взаимосвязь между условиями выращивания и мукомольными свойствами, а именно: по мере повышения степени окультуренности почвы мукомольные свойства зерна значительно улучшаются.

2.4.2. Оценка хлебопекарного достоинства зерна пшеницы

Хлебопекарное достоинство исследуемого зерна пшеницы оценивали по результатам пробных выпечек. Результаты исследований представлены в таблице 8.

Низкими хлебопекарными свойствами обладали образцы пшеницы, выращенные на слабоокультуренной почве без применения удобрений. Выпеченный хлеб имел минимальные балловые оценки.

Наиболее высокими хлебопекарными достоинствами обладали образцы хлеба из муки пшениц, выращенных на среднеокультурен-ной и хорошоокультуренной почвах с применением рекомендованных доз удобрений. Внесение дополнительных доз удобрений, спланированных на усвоение 2% и 3% ФАР при выращивании пшеницы, не дает достаточно высоких результатов и существенно не сказывается на улучшении хлебопекарных достоинств зерна.

2.4.3. Улучшение хлебопекарного достоинства муки пшеницы, выращенной на различных агрофонах

В ряде отечественных и зарубежных исследований обосновано использование муки из амаранта для улучшения хлебопекарных достоинств пшеничной муки пониженного качества (Матвеева и

Характеристика мукомольных свойств продуктов помола исследуемого

зерна пшеницы

I Степень | Фракции зерна по | |Золь-|Техно-

N N1 окульту- | крупности, % I Выход|ность|логи-

п/п\ ренности |-----------------------|муки, |муки, |ческий

I |сход 27|прох. 38|сход 381 I |тель.К

1992 г.

1993 г.

1. Слабоокуль- 24.4 58.7 16.9 75.6 0. 68 111

туреиная, без 23,8 59,1 17,1 76,2 0,59 129

удобрений

2. Средпеокуль- 25.1 51.5 23.4. 74.9 0.60 125

туренная, без 29,5 49,7 20,8 70,5 0,59 119

удобрений

3. Среднеокуль- 26.1 49,3 24.6 73.9 0.55 Ж

туренная,реком. 24,6 57.8 17,6 75,4 0,58 130

дозы удобрений

4. Сроднеокуль- 29.5 51.6 18.9 70.5 0.51 138

туренная. 25,5 56,4 18.1 74,5 0,50 149

2% ФАР

5. Среднеокуль- 25.4 56.1 18.6 74.6 0.50 149

туренная. 25,5 48,7 25,8 74.5 0,54 138

3% ФАР

6. Хорошоокуль- 29.6 48.9 21.5 ЖА 121

туренная, без 28,3 47,0 24.1 71,7 0,55 130

удобрений

7. Хорошоокуль- 26.8 51.3 21.9 73.2 0.52 141

туренная,реком. 25,5 59,5 15.0 74.5 0.52 143

дозы удобрений

8. Хорошоокуль- 28.4 51.1 20.5 71.6 0.51 140

туреиная. 23,9 49,6 26.5 76,1 0.55 138

3% ФАР

Таблица 8

Показатели качества хлеба из образцов пшеницы урожая 1992 - 1993 годов

1 Удель-|Формо-|Структурно- | По- I Кис- Бал-

и и 1 Степень пый 1устой- 1механические! рис-] лот- ловая

П/111 окультурои- объём 1 чи- I свойства мя-| тость, |ность, оцен-

|иостл почвы хлеба. |вость. |киша хлеба, | % 1 9 и 1 ка.

1 1 1 ед. АП-4/2 | 1 1 баллы

1 см3 1 и/и |----- -------1 1 1

ЮОг 1 1 дНсж|дН„л| 1 1

1. Слабоокуль-

турспиан без 258 0.44 42 21 73 2.0

удобрений 310 0,31 63 45 77 2.0 69

Средисокуль-

туроппая:

2. без 310 0,51 52 36 ш 1.5 76

удобрении 313 0,30 72 51 76 2,0 73

3. рекой.дозы 301. 0,41 56 21 80 1.5 Ш

удобрений 335 0,34 63 46 76 1.5 76

4. 2% ФАР 332 0,42 52 31 77 1.0 76

327 0,37 70 48 77 1.5 79

5. 3% ФАР 382 0, 30 £3 13 Ш 1.5 79

300 0, 36 7 С 56 77 1.5 77

Хорошоокуль-

турепная:

6. без 345 0,46 &а аа 2а 1.5 Ш

удобрении 314 0,31 67 47 76 1.5 74

7. реком.дозы 342 0,42 55 31 29 1.5 22

удобрении 329 0,37 74 52 77 1.5 78

336 0,41 7Д 48 22 1,5 79

8. 3% ФАР 341 0,29 72 50 79 1.5 75

др., 1991; Пучкова и др., 1993; Lorenz, 1981; Парада, 1991). Преимущество этой культуры заключается в ее высокой биологической ценности. Белки амаранта лучше, чем пшеничные сбалансированы по содержанию незаменимых аминокислот, по количеству лизина они значительно превосходят пшеничные. Применение амаранта позволяет улучшить качество хлеба, ускорить тестоприго-товление. Однако, в опубликованных работах недостаточно раскрыты технологические возможности амаранта при использовании пшеничной муки разного хлебопекарного достоинства.

При изучении путей улучшения хлебопекарного достоинства муки, проводили пробные лабораторные выпечки с заменой 5% пшеничной муки на муку из семян амаранта, а также с добавлением к пшеничной муке при замесе теста вытяжки из муки семян амаранта. составляющей 15% от массы взятой для выпечки муки пшеницы.

Хлеб с добавками муки и вытяжки из муки амаранта выпекали и анализировали аналогично хлебу из пшеничной муки без добавок, который использовали в качестве контроля.

Показатели качества хлеба с добавками муки амаранта приведены в таблице 9.

Наибольшее положительное влияние добавок амаранта проявлялось при выпечке хлеба из пшениц, выращенных на среднеокуль-туренной почве с применением удобрений. Балловая оценка этих образцов хлеба была наиболее высокой и составляла 80-85 баллов, что на 2-7 баллов выше контроля. Слабее влияние амаранта проявилось при использовании муки из пшеницы, выращенной на слабоокультуренной почве. При выпечке хлеба из пшениц, выращенных на хорошоокультуренной почве, положительный эффект от внесения муки амаранта был наименьшим.

Качественные характеристики пшеничного хлеба зависят, в первую очередь, от силы муки, от структуры и свойств клейковины, образуемой белковыми соединениями муки. Из литературных данных (Парада, 1991) известно, что белки семян амаранта клейковину не образуют. Поэтому установив, что результат добавле-

Таблица 9

Показатели качества хлеба из образцов пшеницы урожая 1992 - 1993 годов с добавлением 5% муки амаранта

1Удель- Формо-1 Структур!! 0- По- Кис- Бал-

N N| Степень 1 ный устой- 1механические рис- лот- ловая

п/п окультурии- |объём чи- I свойства мя- тость, ность, оцен-

постп почвы I хлеба. вость. [киша хлеба. % °н ка.

1 ед. АП -4/2 баллы

1 см3 H/D ------- ----- \

I 100Г Д"«1 А

1. Слабоокуль-

туропнан без 293 0,34 45 20 22 2.0 69

удобрений 310 0.30 79 56 76 2,0 71

Среднеокуль-

туреппая:

2. без 373 0,43 60 38 70 2.5 80

удобрении 326 0,32 87 64 77 2.0 74

3. рскон.дозы 410 0,45 21 50 82 1.5 85

удобрений 342 0.35 85 64 77 1.5 83

4. 2% ФАР 361 0,30 66 39 80 1.5 80

335 0,40 79 59 76 1.5 83

5. г% фар 305 0,40 00 40 до 1,5 81

313 0,36 84 63 78 2,0 80

Хорошоокуль-

туренпая:

С. без 305 0.37 Ш 2а 2Д

удобрений 325 0,33 80 G2 77 2.0 81

7. роком.дозы 369 0,33 65 41 ш ' 1Л 28

удобрений 332 0,33 71 50 75 2,0 77

358 0,31 59 35 79 2.5 13.

8. 3% ФАР 344 0,40 75 53 77 1.5 81

ния муки амаранта при выпечке хлеба зависит от исходных свойств пшеничной муки, далее исследовали влияние муки амаранта на образование клейковины в тесте из пшеницы разного качества.

Анализ образцов клейковины показывает, что добавление муки амаранта к размолотому зерну пшеницы не оказывало сколько-нибудь значительного влияния на выход сырой клейковины, зато качество клейковины улучшается. Почти все образцы с добавлением амаранта по показаниям ИДК-1 были отнесены к I группе -хорошей. Из полученных результатов следует, что мука амаранта оказывает укрепляющее действие на белки пшеничной клейковины.

В то же время, некоторые органолептические характеристики хлеба, выпеченного из такого теста (цвет мякиша, состояние поверхности корки) несколько ухудшаются. Поэтому, в дальнейших исследованиях при замесе теста к пшеничной муке добавляли вытяжку муки амаранта. Хлебопекарные свойства образцов пшеничной муки с добавлением вытяжки из муки амаранта приведены в таблице 10.

Балловая оценка качества хлеба опытных образцов увеличилась на 6-11 баллов по сравнению с контрольными и на 3-10 баллов по сравнению с хлебом, выпеченным из смеси муки пшеницы и амаранта. Исключение составил образец хлеба, полученный из пшеницы, выращенной на хорошоокультуренной почве с применением рекомендованных доз удобрений. В этом случае добавление к пшеничной муке муки или вытяжки из муки амаранта не приводило к улучшению хлебопекарных качеств образца.

Добавление к пшеничной муке вытяжки из муки амаранта оказывает существенное положительное влияние на улучшение хлебопекарных достоинств муки пшеницы; причем, максимальный эффект наблюдается у образцов пшеницы, выращенных на слабоокультурен-ной и среднеокультуренной почвах без применения удобрений.

Таблица 10

Показатели качества хлеба из образцов пшепицы урожая 1992 -1993 годов с добавлением вытяжки из муки амаранта

1 Удель- Формо- Структурно- По- Кис- Бал-

У И| Сгииииь ный устой- механические рис- лот- ловая

[1/п|о1!.ультуриа- объем чи- свойства мя- тость,! ность, оцен-

| нисти иочвы хлеба. вость, киша хлеба. % °Н ка.

1 ед. АП-4/2 баллы

1 см3 П/Б

1 ЮОг дНсж| ¿Нцл

1. Слабоокуль-

туреиная без 343 0, 35 90 64 79 2,0 80

удобрений

Среднеокуль-

туреппая:

2. без 369 0,36 96 69 81 2,0 82

удобрений

3. реком.дозы 303 0,35 97 71 80 2,0 84

удобрении

4. г% ФАР 360 0,45 86 57 79 2.0 86

5. 3% ФАР 350 0, 33 103 72 82 2, 0 84

Хорошоокуль-

туренпая:

6. без 361 0.38 93 62 81 2,0 83

удобрений

7. реком.дозы 340 0,33 76 49 78 2.0 77

удобрений

8. 3% ФАР 352 0.40 90 60 81 2,0 84

ВЫВОДЫ

1. Исследования технологических показателей качества зерна озимой пшеницы, выращенной на различных агрофонах показали, что повышение степени окультуренности почвы и внесение возрастающих доз удобрений увеличивает натуру, стекловидность, крупность, выравненность. массу 1000 зерен, а также содержание клейковины в зерне пшеницы.

2. В ходе исследования влияния агрофонов на активность протеиназ озимой пшеницы выявлено, что повышение степени окультуренности почвы и внесение дополнительных доз удобрений вызывает в исследуемом зерне существенные различия в их активности.

3. С помощью корреляционного анализа была выявлена тесная положительная корреляция (г=0.76±0.055) между активностью нейтральных протеиназ и содержанием водорастворимого белка в исследуемом зерне пшеницы, определяемого по методу Лоури.

4. При проведении исследований активности ингибиторов нейтральных протеиназ и трипсина, выделенных из зерна озимой пшеницы, было установлено, что выращивание пшеницы на различных агрофонах приводит к существенным различиям в активности белковых ингибиторов собственных протеиназ и трипсина.

5. С помощью корреляционного анализа было установлено, что для образцов пшеницы, выращенных на различных агрофонах, имеет место зависимость между активностями ингибиторов трипсина. выделенных по различным схемам (г=0,77±0,053), а также между активностью нейтральных протеиназ и их ингибиторов, выделенных по схеме Аль-Рахмуна (г=0,73±0,060). При этом, определяющим фактором в формировании уравновешенной системы "про-теиназы - ингибиторы протеиназ" является степень окультуренности почвы.

6. При фракционировании проламинов зерна пшеницы на колонке с сефадексом G-100 было установлено наличие трех белко-

вых фракций с молекулярными массами <6000 Д, 6000-65000 Д и >65000 Д.

7. Методом корреляционного анализа была установлена тесная взаимосвязь между содержанием фракции проламинов с молекулярной массой >65000 Д и качеством клейковины зерна пшеницы (г=0.80±0,046). Накопление фракции проламинов с молекулярной массой >65000 Д происходит при повышении доз вносимых азотных удобрений.

8. При проведении оценки технологических достоинств исследуемого зерна пшеницы было установлено, что повышение степени окультуренности почвы в сочетании с внесением рекомендованных доз удобрений приводит к максимальному улучшению мукомольных свойств исследуемого зерна; причем, дальнейшее увеличение доз вносимых удобрений, как правило, не оказывает существенного влияния на мукомольные свойства зерна озимой пшеницы.

9. В ходе проведения оценки хлебопекарного достоинства зерна озимой пшеницы было установлено, что хлеб из муки пшеницы, выращенной на среднеокультуренной почве, обладает, как правило, более высоким качеством.

10. При добавлении муки амаранта в пределах 5% к муке пшеницы максимальное повышение хлебопекарного достоинства было установлено для пшеничной муки, полученной из зерна, выращенного на среднеокультуренной почве. Укрепление клейковины при добавлении 5% муки амаранта отмечено для всех исследуемых образцов зерна пшеницы.

11. При добавлении к пшеничной муке при замесе теста вытяжки из муки амаранта было установлено существенное улучшение ее хлебопекарного достоинства. При этом, максимальный положительный эффект наблюдался для зерна пшеницы, выращенного на слабоокультуренной и среднеокультуренной почвах без применения удобрений.

12. Полученные результаты определения основных показателей качества зерна пшеницы свидетельствуют о преимуществе вы-

ращивания озимой мягкой пшеницы в условиях Нечерноземной зоны России на среднеокультуренных почвах с дозами удобрений не ниже рекомендованных.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Карпиленко Г. П., Щеголева И.Д., Суслянок Г.М. Изучение хлебопекарных свойств пшеницы, выращенной на разных агрофо-нах. //Инф.сб. ЦНИИТЭИ хлебопродуктов. 1994. в.2, с. 3-9.

2. Карпиленко Г.П., Щеголева И. Д., Суслянок Г. М., Шатилова Т.И. Влияние амаранта на хлебопекарные свойства пшеничной муки.//Известия вузов, Пищевая технология. 1994, в.3-4, с.23-25.

3. Карпиленко Г.П., Шатилова Т.И.. Суслянок Г.М. Хлебопекарные качества зерна пшеницы в зависимости от условий выращивания. //Инф. сб. ЦНИИТЭИ "Хлебпродинформ", 1995, в. 4, с.12-14.

4. Suslyanok G.M. Formation of protein-proteinase complex and technology merits of brewing barley and wheat.//IUFOST Student Symposium. - Budapest, 1995, July 29-30, P.16.

5. Карпиленко Г.П., Суслянок Г.М., Шатилова Т.И. Влияние агрофона на физические показатели качества зерна пшеницы. //Инф. сб. ЦНИИТЭИ "Хлебпродинформ". (В печати).

6. Карпиленко Г.П., Суслянок Г.М., Шатилова Т.И. Состояние комплекса собственных протеаз зерна пшеницы, а также их ингибиторов в зависимости от условий выращивания.//Инф.сб. ЦНИИТЭИ "Хлебпродинформ". (В печати).

ANNOTATION

Complex investigations of the phlsiologo-biochemlcal processes depending on the agricultural backgrounds, used for growing of soft winter wheat, were made to find out their correlation with the technological merits of grain.

Influence of agricultural backgrounds on proteinases activity and activity of.inhibitors of trypsin and neutral proteinases, extracted from wheat grain was Investigated. There were revealled differences in molecular masses of researched protein fractions using the gel-chromatography method.

Evaluation of flour-mllllng and bread-baking merits of grain was made. The ways of their improvement by addition of amarant flour and its extract in wheat flour were researched.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Суслянок, Георгий Михайлович

ВЕЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1-. Общая характеристика протеолитических ферментов.

1.2. Протеолитические ферменты растений.

1.3. Протеолитические ферменты семян растений.

1.4. Протеолитические ферменты пшеницы.

1.5. Белковые ингибиторы протеаз растений.

1.6. Белковые ингибиторы протеаз пшеницы.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ИС СЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Агрохимическая характеристика почв.

2.2. Характеристика исследуемых образцов зерна.

2.3. Определение содержания белка и активности протеиназ.

2.3.1. Подготовка образцов к исследованию.

2. 3. 2. Определение белка по методу Лоури.

2.3.3. Определение активности протеиназ по методу

Ансона.

2.4. Определение активности ингибиторов протеиназ

2.4.1. Выделение белковых ингибиторов протеиназ.

2.4.2. Определение активности ингибиторов трипсина.

2.4.3. Выделение ферментных препаратов нейтральных протеиназ.

2.4.4. Определение активности ингибиторов нейтральных протеиназ.

2.5. Определение фракционного состава белков.

2.6: Определение молекулярных масс белковых фракций зерна пшеницы методом гель-хроматографии на сефадексе G-100.

2.7. Анализ мукомольных и хлебопекарных свойств зерна озимой пшеницы.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1. Формирование технологических достоинств зерна пшеницы на основе направленного изменения агрофона.

3.1.1. Влияние агрофона на физические показатели качества зерна озимой пшеницы.

3.1.2. Влияние агрофона на химические показатели качества зерна озимой пшеницы.

3.2. Влияние агрофона на формирование белковопротеиназного комплекса зерна озимой пшеницы

3.2.1. Активность нейтральных протеиназ, автолити-ческая способность, активность ингибиторов трипсина и нейтральных протеиназ зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах.

3.2.2. Фракционный состав белков зерна озимой пшеницы, выращенного на различных агрофонах. 104 3.3. Технологическая характеристика зерна озимой пшеницы, выращенного на различных агрофонах

3.3.1. Характеристика мукомольных свойств исследуемого зерна пшеницы.

3.3.2. Оценка хлебопекарного достоинства муки из исследуемого зерна пшеницы.

3.3.3. Улучшение хлебопекарного достоинства муки из зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона"

В соответствии с темой исследования были поставлены следующие задачи:

- исследование химического состава зерна озимой пшеницы;

- характеристика мукомольных свойств исследуемого зерна пшеницы;

- изучение изменений хлебопекарного достоинства зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах;

Научная новизна. Проведено комплексное' исследование влияния агрофонов на качество зерна мягкой озимой пшеницы урожаев 1992 и 1993 годов, в том числе, на физические показатели качества исследуемых образцов зерна, выращенного на почвах, различающихся степенью окультуренности и дозами вносимых удобрений.

Изучена зависимость химического состава исследуемых образцов зерна пшеницы от состояния агрофонов.

Полученные данные показывают пути формирования технологических свойств зерна озимой пшеницы, используя агротехнические приемы. С помощью направленного воздействия на растения в период вегетации становится возможным получение зернового сырья требуемого качества.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 работы.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

До настоящего времени исследованиям, посвященным влиянию агрофонов на формирование ферментной системы зерновых культур, уделялось незначительное внимание. Имеющиеся в литературе сведения, в основном, посвящены изучению влияния агрофонов на урожайность зерновых культур, содержание в зерне белка (Кидин, Замараев, Дмитриев, 1991; Головко, Черкашина, 1983).

Положительное влияние окультуренности почвы и азотных удобрений на урожайность озимой пшеницы в различных климатических зонах страны отмечено в работе Панникова и Минеева (1977). Установлено, что хорошоокультуренным почвам свойственны лучшие агрохимические и агрофизические свойства, способствующие повышению эффективности удобрений (Федосеев, 1982).

Проанализированы взаимосвязи показателей фотосинтетической деятельности растений пшеницы с урожаем зерна. Установлено, что наиболее тесная связь наблюдается между урожаем и фотосинтетическим потенциалом (Шатилов и др., 1987). Основная часть продуктов фотосинтеза (до 80%), синтезированных в листьях, затрачивается на рост других органов. За счет фотосинтеза колоса формируется 1/5 часть урожая зерна (Шатилов и др., 1989).

В литературе также имеются обширные сведения о влиянии на качество зерна климатических условий, то есть тех факторов, которые необходимо учитывать, но нельзя регулировать. Однако, практически полностью отсутствуют данные о взаимосвязи состояния агрофонов и ферментных систем зерна и, в первую очередь, белково-протеиназного комплекса, в значительной степени определяющего технологические достоинства и хлебопекарные качества зерна пшеницы.

1.1. Общая характеристика протеолитических ферментов

Протеолитические ферменты по современной классификации относятся к классу гидролаз, в составе которого образуют особый- подкласс педтидгидролаз (Н.Ф. 3.4). Пептидгидролазы катализируют реакции расщепления пептидных связей в белках и пептидах. Многие ферменты этой группы, наряду с реакциями гидролиза пептидных связей, катализируют реакции расщепления эфирных связей, а также реакции переноса аминокислотных остатков на другие акцепторы, так называемые реакции трансэтерификации и транспептидации (Мосолов, 1971; Антонов, 1983).

В соответствии с классификацией Бергмана протеазы делятся на пептидазы (экзопептидазы), действующие на концах полипептидной цепи, и протеиназы (эндопептидазы), действующие на центральных участках. В основу их деления на подклассы положена специфичность и особенности механизма катализа (Ден, 1981).

Экзопептидазы, включающие подподклассы 3.4.11-3.4.17, подразделяются на основании положения расщепляемой связи в пептидной цепи. Эндопептидазы разделены на четыре подподкласса (3.4.21-3.4.24), в первую очередь на основании особенностей строения их каталитических центров. В подподкласс 3.4.99 включены протеиназы с неизвестным механизмом каталитического действия. Протеиназы - наиболее изученные и легко поддающиеся кинетическим и структурным исследованиям ферменты. Механизмы каталитического действия некоторых протеиназ изучены достаточно

- и полно, другие исследованы в общих чертах (Фёршт, 1980; Клёсов, Березин, 1980, 1984).

СЕРИНОВЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ (Н.Ф.3.4.21) - наиболее изученная группа ферментов. К ней относятся ферменты животных и человека (трипсин, химотрипсин, эластаза, тромбин, плазмин и другие), некоторых растений и микроорганизмов (субтилизин). Ферменты этой группы обладают, как правило, максимальной активностью при' нейтральных,значениях рН. В состав их активного центра входит остаток серина. Для этих ферментов характерно наличие цепи переноса заряда, образованной гидроксильной группой серина, имидазольным кольцом гистидина и карбоксильной группой ас-парагиновой кислоты (Фёршт, 1980; Антонов, 1983).

ТИОЛОВЫЕ, или ЦИСТЕИНОВЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ (Н.Ф.3.4.22) широко распространены в природе. К ним относятся ферменты папаин, бромелаин, фицин и ряд других эндопептидаз, для которых характерен общий тип специфичности, зависящий от аминокислотного остатка, удаленного на один остаток от атакуемой пептидной связи. Активность тиоловых протеиназ повышается в присутствии восстанавливающих веществ, содержащих HS-группу (цистеин, глю-татион, 2-меркаптоэтанол и др.), и подавляется веществами, специфически блокирующими HS-группы в белках (Мосолов, 1971).

КИСЛЫЕ, или КАРБОКСИЛЬНЫЕ ПРОТЕИНАЗЫ (Н.Ф.3.4.23) представлены эндопептидазами, содержащими в каталитическом центре, по крайней мере, две карбоксильные реакционноспособные группы (Фёршт, 1980). Одна из них специфически блокируется ингибиторами с диазоацетильной группой, другая, вероятно, избирательно реагирует с эпоксисоединениями. Применение этих типов ингибиторов значительно облегчает идентификацию кислых протеиназ

Антонов, 1983). Наиболее изученными ферментами этого подподк-ласса, проявляющими свою активность в кислой и слабокислой среде, являются пепсин, реннин, катепсин Д, кислые протеиназы лизосом (Мосолов, 1971; Кретович, 1986).

МЕТАЛЛ0ПР0ТЕИНАЗЫ (Н.Ф.3.4.24) имеют некоторое сходство с другими протеиназами по механизму действия. Однако, для ферментов этой группы характерна существенная особенность, заключающаяся в том,. что все они содержат ион металла, необходимый для каталитической активности (Степанов, 1973; Фёршт, 1980).

Большинство металлопротеиназ представлено ферментами микробного происхождения. Растительные металлопротеиназы были выделены из маиса (Антонов, 1983), из семян фасоли (Витол, Попов, 1986). Цинкеодержащая протеиназа обнаружена в семенах гречихи (Воскобойникова, Дунаевский, Белозерский и др., 1989).

Протеиназы играют важную роль в физиологических процессах. В случае деградации белковых молекул, они определяют скорость распада белков в организме и участвуют в регуляции их кругооборота. Они также осуществляют удаление "ненормальных" белков из организма, образующихся в результате мутаций, ошибок биосинтеза (Локшина, 1979; Элпидина, Воскобойникова и др., 1990).

Протеолитические ферменты выполняют регуляторную роль в процессе активации зимогенов предшественников (Кретович, 1986; Коэн, 1986), контролируют концентрацию биорегуляторов, определяющих характер метаболизма (Мосолов, 1971; Локшина, 1979; Moore, Free, 1985; Munts, Bassuner, 1985), участвуют в расщеплении биологически активных белков с удалением сигнальных аминокислот и пептидов (Ленинджер, 1976).

Успехи в изучении протеолитических ферментов особенно значительны в последние годы. Важным стимулом при изучении протеолитических ферментов является большая их физиологическая роль и широкие перспективы их практического применения в различных технологических процессах (Грачева, 1987; Taufel, 1990; Ducastaing, Adrian, 1990).

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Суслянок, Георгий Михайлович

ВЫВОДЫ

1. Исследования технологических показателей качества зерна озимой пшеницы, выращенной на различных агрофонах показали, что повышение степени окультуренности почвы и внесение возрастающих доз удобрений увеличивает натуру, стекловидность, крупность, выравненность, массу 1000 зерен, а также содержание клейковины в зерне пшеницы.

3. С помощью корреляционного анализа была выявлена тесная положительная корреляция (г=0,76±0,055) между активностью нейтральных протеиназ и содержанием водорастворимого белка в исследуемом зерне пшеницы, определяемого по методу Лоури.

5. С помощью корреляционного анализа было установлено, что для образцов пшеницы, выращенных на различных агрофонах, имеет место зависимость между активностями ингибиторов трипсина, выделенных по различным схемам (г=0,77±0,053), а также между активностью нейтральных протеиназ и их ингибиторов, выделенных по схеме Аль-Рахмуна (г=0,73±0, 060). При этом, определяющим фактором в формировании уравновешенной системы "протеиназы - ингибиторы протеиназ" является степень окультурен-ности почвы.

6. При фракционировании проламинов зерна пшеницы на колонке с сефадексом G-100 было установлено наличие трех белковых фракций с молекулярными массами <6000 Д, 6000-65000 Д и >65000 Д.

7. Методом корреляционного анализа была установлена тесная взаимосвязь между содержанием фракции проламинов с молекулярной массой >65000 Д и качеством клейковины зерна пшеницы (г=0,80±0,046). Накопление фракции проламинов с молекулярной массой >65000 Д происходит при повышении доз вносимых азотных удобрений.

И. При добавлении к пшеничной муке при замесе теста вытяжки из муки амаранта было установлено существенное улучшение ее хлебопекарного достоинства. При этом, максимальный положительный эффект наблюдался для зерна пшеницы, выращенного на слабоокультуренной и среднеокультуренной почвах без применения удобрений.

12. Полученные результаты определения основных показателей качества зерна пшеницы свидетельствуют о преимуществе выращивания озимой мягкой пшеницы в условиях Нечерноземной зоны России на среднеокультуренных почвах с дозами удобрений не ниже рекомендованных.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Суслянок, Георгий Михайлович, Москва

1. Абрамова Е.П., Черников М.П. Содержание ингибиторов протеиназ в семенах некоторых бобовых. Вопросы питания, т.23, N 4, 1964, с.13-18.

2. Авсенева Т. В., Федуркина Н. В., Мосолов В. В. Изменение активности протеиназы и ее ингибитора при прорастании семян 'Кукурузы. -. Физиология растений, 1988, т. 35, Вып. I, с. 106-112.

3. Аль-Рахмун А. Протеолитические ферменты зародыша пшеницы.-Дисс.канд.б.н. М., МТИПП, 1990, 114 с.

4. Антонов В.К. Химия протеолиза. М., Наука, 1983, 386 с.

5. Асмаева З.И., Осадчая Н.Т., Снесарева 0.В., Михайлова Е.О. Зависимость качества муки и хлеба от технологии возделывания пшеницы. Хлебопродукты, 1990, N 8, с.38-39.

6. Ауэрман Л.Я. Технология хлебопекарного производства, (пере-раб. и доп.) М., Легкая и пищевая промышленность, 1984, 415 с.

7. Бах А.Н., Опарин А.И. Об образовании ферментов в прорастающих зернах. Сб.избранных трудов акад. А.Н.Баха, Л., Изд. АН СССР, 1937, 461 с.

8. Бах А.Н., Опарин А.И., Венер Р.А. Количественные изменения ферментов в зреющих, покоящихся и прорастающих зернах пшеницы. Труды хим.ин-та им. Л.Я.Карпова, 1926, 62 с.

9. Белозерский М.А. Свойства и физиологическая роль протеиназ и их ингибиторов в семенах некоторых высших растений. Ав-тореф.дисс.на соиск.учен.степ.докт. биол. наук. - М., 1983, 44 с.

10. И. Белозерский М.А., Дунаевский Я. Г., Руденская Г. Н., Степанов В. М. Карбоксильные протеиназы из семян гречихи. Биохимия, '1984, т. 49, вып. 3, с. 479-485.

11. Бенкен И.И., Буданова В.И. Ингибиторы трипсина в семенах фасоли. Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции, т. 56, вып. 3, 1976, с. 67-73.

12. Береш И.Д. Исследование протеолитических ферментов проросшего зерна пшеницы. Дисс.канд.б. н. М., ВНИИЗ, 1972, 217 с.

13. Береш И.Д. О протеолизе клейковины при прорастании пшеницы.- Труды ВНИИЗ, 1969, Вып.66, III, с.35-43.

14. Благовещенский А.В., Колобкова Е. В., Кудряшева Н.А. Изменение активности и качества ферментов при прорастании семян.- Труды Гл.Бот.сада АН СССР, 1951, т. 2, 73 с.

15. Благовещенский А.В., Соседов Н.И. О растворяющем клейковину ферменте семян пшеницы и ячменя. Труды ВНИИЗ, М., 1934, вып. 13, 8 с.

16. Вайнтрауб И.А., Ропот Е.С. Цистеиновая протеиназа из прорастающих семян подсолнечника. Частичная очистка и действие на запасной 11S белок. Биохимия, 1988, т.53, вып.5, с.776-778.

17. Витол И.С. Протеолитические ферменты семян фасоли. -Дисс.канд.б.н. М., МТИПП, 1986, 212 с.

18. Витол И.С., Попов М.П. Протеолитические ферменты семян фасоли. Прикладная биохимия и микробиология, М., 1986, т. XXII, вып. 6, с. 778.

19. Вовчук С.В., Волчевская А.В., Бабаянц Л.Т., Левицкий А.П. Изменение активности пептидгидролаз в проростках озимой пшеницы при заражении мучнистой росой. Физиол. и биохимия культурных растений. 1991, т. 23, N2, с. 169-172.

20. Вовчук С.В., Левицкий А.П., Вовчук И.Л. Активность пептид-тидролаз в созревшем зерне пшеницы. Прикладная биохимия и микробиология, 1989, т. 25, вып.2, с.220-225.

21. Воскобойникова Н.Е., Дунаевский Я.Е., Белозерский М.А., Ма-шанов-Голиков А. В., Вольфсон А.Д. Цинкосодержащая протеиназа из покоящихся семян гречихи. Биохимия, 1989, т.54, N 12, с.1965-1973.

22. Головко A.M., Черкашина Н.Ф., Влияние азотных удобрений на урожай и качество озимой пшеницы в зависимости от влагоо-беспеченности и плодородия дерново-подзолистой почвы. Агрохимия, М., 1983, N 7, с.10-15.

23. Грачева И.М. Технология ферментных препаратов. М., Агроп-ромиздат, 1987, 320 с.

24. Ден Р. Процессы распада клетки. М., Мир, 1981, 548 с.

25. Детерман Г. Гель-хроматография. М., Мир, 1970, 602 с.

26. Диаби И.К. Особенности белково-протеиназного комплекса пивоваренного ячменя, выращенного на различных агрофонах. Дисс. канд.б.н. М., МГАПП, 1994, 102 с.

27. Долежалова А., Вртелова В. Технология переработки ячменя с высоким содержанием белка. В кн.: Достижения в технологии солода и пива. - М., Пищевая промышленность. Прага, СНТЛ Издательство технической литературы, 1980, с.18-20.

28. Дунаевский Я.Е., Белозерский М.А., Элпидина Е.Н. Протеиназа семян гречихи, гидролизующая главный запасной белок этих семян. Биохимия, 1983, N 48, с.572-576.

29. Егоров Г.А., Мельников В.М., Максимчук Б.М. Технология муки, крупы и комбикормов. М., Колос, 1984, 375 с.

30. Зелинский В.Г., Малиновский В.А. Аффинная хроматография и электрофорез ингибиторов трипсина и химотрипсина из зерна ячменя разных сортов. В кн.: Протеолитические ферменты и их ингибиторы в семенах зерновых и зернобобовых культур. Одесса, 1982, с.42-50.

31. Зимачева А.В., Иевлева Е.В., Мосолов В.В. Выделение и характеристика ингибиторов цистеиновых протеиназ из клубней картофеля. Биохимия, 1984, т.49, N 7, с. 1153-1158.

32. Зимачева А.В., Иевлева Е.В., Мосолов В.В. Ингибитор цистеиновых протеиназ из семян бобовых. Биохимия, 1988, т.53, с.740-746.

33. Зимачева А.В., Иевлева Е.В., Фунг Хоа Хуан, Во Хонг Нянь, Мосолов В.В. Протеиназа из пролиферирующей верхушки плода ананаса (Ananas comosus L.). Прикл. биохим. и микробиология, 1994, т. 30, вып. 2, с. 215-222.

34. Ибрагимов Р.И. Изучение активности и гетерогенности ингибиторов у злаковых. Дисс.канд.б.н. М., 1987, 140 с.

35. Ибрагимов Р.И., Ахмедов P.P. Гетерогенность и активность протеолитических ферментов и их ингибиторов у гетерогенных гибридов кукурузы. Материалы 2 Всесоюзн. совещ. "Генетика развития". Ташкент, 1990, т. 1, 4.1, с.60-61.

36. Иванова Э.А., Давлетова Р.Г. Активность трипсиноподобных протеиназ и их ингибиторов в клеточных ядрах проростков озимой и яровой пшеницы /Экологические аспекты гомеостаза в -биогеоценозе./- Уфа, 1986, с. 34-43.

37. Исханова Д.X. Ферментативная активность пшеничной клейковины. Автореф. дисс.канд. б.н. М., МТИПП, 1985, 23 с.

38. Казаков Е.Д. Зерноведение с основами растениеводства. М. : Колос, 1983, 352 с.

39. Казаков Е.Д., Кретович В.Л. Биохимия зерна и продуктов его переработки. М., Агропромиздат, 1989, 368 с.

40. Карпиленко Г.П. Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пивоваренного ячменя и пшеницы на основе направленного изменения агрофона. Дисс. докт.техн. наук. М., 1994, 322 с.

41. Кидин В.В., Замараев А.Г., Диалло А. Влияние окультуренности почвы и норм азота на урожайность и качество зерна. -М., Изв. ТСХА, 1986, вып. 3, с. 80-84.

42. Кидин В.В., Замараев А.Г., Дмитриев Н.Н. Влияние окультуренности почвы и внесения удобрений на урожай и качество зерна озимой пшеницы. Изв. ТСХА, вып.4, 1991, с.12-16.

43. Кидин В.В., Смирнов П.М. Урожайность сельскохозяйственных культур и баланс азота в зависимости от норм и срока применения азотных удобрений. М., Изв. ТСХА, 1985, вып.3, с.79-86.

44. Кладницкая Г. В., Валуева Т. А., ДомашВ.И., Новикова JI. М., Мосолов В.В. Экзопротеиназы гриба Fusarium sambucinum Fuck и их взаимодействие с ингибиторами. Прикладная биохимия и микробиология, 1994, т.30, вып.1, с.21-28.

45. Клесов А.А., Березин И.В. Ферментативный катализ. М., МГУ, 1980, т. I, 264 с.

46. Клесов А.А., Березин И.В. Ферментативный катализ. М., •МГУ, 1984, т. 2, 270 с.

47. Козьмина Н.П. Биохимия зерна и продуктов его переработки. -М., Колос, 1976, 375 с.

48. Козьмина Н.П. Биохимия хлебопечения. М., Пищевая промышленность, 1978, 278 с.

49. Козьмина Н.П., Резниченко М.С. Дезагрегирующие белки и ферменты пшеницы и ячменя. Биохимия, 1937, т. 2, Вып.4, с.630-637.

50. Колеснов А.Ю. Протеолитические ферменты ячменя.- Дисс.канд. б.н. М., МТИПП, 1987, 186 с.

51. Конарев А.В. Взаимосвязь и изменчивость ингибиторов протеиназ и ^-амилаз у пшеницы и родственных ей злаков. Сельскохозяйственная биология, 1986, N 3, с. 46-52.

52. Конарев А.В. Ингибиторы гидролаз в изучении генофонда пшеницы и родственных ей злаков. Сб.научн.трудов по прикладной ботанике, генетике и селекции. 1987, т.114, с.34-47.

53. Конарев А.В., Фомичева Ю.В. Перекрестный анализ компонентов ос-амилаз и протеиназ насекомых с белковыми ингибиторами из эндосперма пшеницы. -Биохимия, 1991, М., Наука, т.56, вып.4, с.628-638.

54. Кондратьев М.И., Камалова Т.Г. Протеазы листьев в онтогенезе растений. Физиология и биохимия культурных растений. 1983, Т. 15, N 3, с. 107-115.

55. Королева Т.Н. Идентификация протеаз семян вики, участвующих в распаде белков при прорастании. Автореф.дисс. канд.б.н. Кишинев, 1973, 16 с.

56. Кортунова Е.Ю. Исследование биологически активных веществ картофельного сока с целью их утилизации. Автореф.дисс. ■канд. б.н. М., 1985, 23 с.

57. Костромичева А.П. Ингибиторы протеиназ семян бобовых растений, их выделение и некоторые свойства. Бюлл. НТИ ВНИИ зернобобовых и крупяных культур. 1978, т.23, с.53-57.

58. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. М., Изд. Высшая школа, 1980, 271 с.

59. Коэн Ф. Регуляция ферментативной активности. М., Мир, 1986, 144 с.

60. Кретович В.Л. Биохимия зерна. М., Наука, 1981, 130 с.

61. Кретович В.Л. Биохимия зерна и хлеба. М., Наука, 1991, 130 с.

62. Кретович В.Л. Биохимия растений. М. Высшая школа, 1986, 502 с.

63. Кретович В.Л. Введение в энзимологию. М., Наука, 1986, 336 с.

64. Кретович В.Л., Токарева P.P. Природа и диагностика повреждения клопом-черепашкой. Мукомольное и элеваторно-складс-кое хозяйство. 1947, N 7-8, с.29-30.

65. Левицкий А.П. Классификация, номенклатура и биохимические свойства протеолитических ферментов зерна пшеницы и ячменя. Сб.: Протеолитические ферменты и их ингибиторы в семенахзерновых и зернобобовых культур. Одесса, 1982, с.7-8.

66. Левицкий А.П., Вовчук С.В. Биохимические и селекционно-генетические аспекты исследования ингибиторов протеиназ семян. в кн.: Материалы V Всесоюзн.биох.съезда. М., Наука, 1986, т.3, с.213-214.

67. Ленинджер А. Биохимия. М., Мир, 1976, с.798-799.

68. Ли Е.В. Особенности белково-протеиназного комплекса пшеницы, выращенной на различных агрофонах. Диссерт.канд. б.н. М., МТИПП, 1992, 232 с.

69. Линер Н.Э. Токсичные соединения бобовых. В кн.: Химия и биохимия бобовых растений. М., Агропромиздат, 1986, с.213--248.

70. Локшина Л.А. Регуляторная роль протеолитических ферментов.-Молекулярная биология, 1979, т.13, N 6, с. 1205-1229.

71. Максименко А.В., Надирашвили Л.А., Абрамова В.В. и др. Комплекс протеиназ папайи в нативном и модифицированном виде. Исследования устойчивости в различных условиях. Биотехнология, 1990, N 6, с. 56-60.

72. Матвеева И.В., Парада Д., Пучкова Л.И., Юдина Т.А. Использование муки из зерна амаранта в хлебопекарной промышленности. В сб."Научно-технические достижения и передовой опыт в отрасли хлебопродуктов". ЦНИИТЭИ хлебопродуктов, 1991, вып. 9, с. 12-15.

73. Медико-биологические требования и санитарные нормы качества продовольственного сырья и пищевых продуктов. М.:Издательство стандартов, 1990, с.185.

74. Межлумьян Л.Г., Юлдашев П.X. Протеаза А и ее ингибитор из семян хлопчатника. Всесоюзн.симп."Химия белков". - Пущино, 1990, с. 63.

75. Мельникова И.0. Методы экстракции ингибиторов трипсина и химотрипсина из семян гороха. В кн.: Протеолитические ферменты и их ингибиторы в семенах зерновых и зернобобовых культур. - Одесса, 1982, с.42-50.

76. Миколо Й., Сиуро Й., Микола Л. Роль аспартатпротеиназы в начале разложения запасного белка в прорастающем зерне ячменя и пшеницы. Cereal and bread Congr. Lousanne, Sumn-Sarnen, 1988, т.30, с.142-143.

77. Михалик И., Петовских П. Влияние условий выращивания и сорта на активность oc-амилазной эндопротеиназы в зерне озимой пшеницы. Cereal and Bread Congr. Lousanne, Sumn-Sarnen, 1988, T.30, c.122-123.

78. Мироненко А.В., Домаш В.И., Чехова А.И. и др. Содержание и динамика активности белков-ингибиторов протеиназ люпина. -Физиолого-биохимические основы регулирования роста и обмена веществ растений. Минск, 1981, с.11-19.

79. Мосолов В.В. Белки-ингибиторы протеаз ис^амилаз у растений (Обзор). Прикл. биохим. и микробиология, 1995, т.31, N 1, с.5-10.

80. Мосолов В.В. Белковые ингибиторы протеолитических ферментов. Автореф.дисс.докт.б.н. М., 1979, 43 с.

81. Мосолов В.В. Выделение и изучение свойств ингибиторов протеиназ из клубней картофеля. В кн.: Тезисы секционных сообщений, 2 Всесоюзн.биох.съезд. Ташкент: ФАН, 1969, с.138-139.

82. Мосолов В.В. Ингибиторы протеаз как регуляторы процессов протеолиза. М., Наука, 1983, 40 с.

83. Мосолов В.В. Природные ингибиторы протеолитических ферментов. Успехи биологической химии. 1982, т.22, с.110-118.

84. Мосолов В.В. Протеазы растений и их ингибиторы. Тезисы Всесоюзн.симп."Азотный и белковый обмен растений". Тбилиси, 1978, с.21-23.

85. Мосолов В.В. Протеолитические ферменты. М., Наука, 1971, 414 с.

86. Мосолов В.В., Валуева Т.А. Растительные белковые ингибиторы протеолитических ферментов. М., Ин-т биохимии им.А.Н.Баха РАН, 1993, 207 с.

87. Мосолов В.В., Шульгин М. Н., Соколова Е.В., Ливенская 0.А. Белки растений ингибиторы протеолитических ферментов микроорганизмов. - в кн.: Материалы V Всесоюзн. биохим.съезда. М., Наука, 1986, т. 2, с. 53-54.

88. Нарцисс Л. Технология солода. М., Пищевая промышленность. 1980, 503 с.

89. Нестеренко М.В., Хлуднев Д.В., Мосолов В.В. Определение бифункционального ингибитора ос-амилазы и протеиназ из семян пшеницы иммуноферментным анализом. Прикл. биохимия и микробиология, 1989, т.XXV, вып.5, с.595-598.

90. Номенклатура ферментов. М., ВИНИТИ, 1979, 321 с.

91. Нортроп Д., Кунитц М., Херриот Р. Кристаллические ферменты. М., Иностранная литература, 1950, 346 с.

92. Нигмонов М. Электрофоретическое поведение ингибиторов протеиназ семян некоторых сортов сои. Докл. АН Тадж.ССР, 1985, т. 28, N 11, с. 667-670.

93. Нигмонов М., Шибнев В.А., Наймов С. Содержание белка и активность ингибиторов протеиназ в семенах хлорофилльных мутантов гороха. Докл. АН Тадж. ССР, 1986, т. 29, N 12, с. 758-761.

94. Огий С.А., Янгшипольский В.В., Тертых В.А. Свойства папаи-на, иммобилизованного на органокремнеземе., Украинок.биохим. журнал, 1990, N 6, с. 48-52.

95. Опарин А.И., Балабуха И.В. Определение активности протеолитических ферментов муки в связи с ее хлебопекарными свойствами. Советское мукомолье и хлебопечение, 1933, N 5, с. 22.

96. Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. -М., Наука, 1985, 536 с.

97. Парада Д. Применение амаранта и продуктов его переработки в технологии хлебопекарного производства. Дисс.канд.т.н., МТИПП, 1991, 207 с.

98. Плешков А.С., Плешков Б.П., Баренцев Ю.А. и др. Разделение протеолитических ферментов зерна озимой пшеницы на сефадек-се G-100. Изв. ТСХА, 1976, N 1, с.184-188.

99. Плешков Б.П. Биохимия сельскохозяйственных растений. М.: Агропромиздат, 1987, 494 с.

100. Практикум по агрохимии/Под ред. Ягодина Б.А. М.:Агропромиздат, 1987, 511 с.

101. Проскуряков Н.И., Бундель А. А. Протеолиз пшеничной муки. -Сб. Биохимия хлебопечения, 1938, N 1, с.75-106.

102. Проскуряков Н.И., Бундель А.А., Бухарина Е.В. Изменение протеазно-белкового комплекса в прорастающем и созревающем зерне пшеницы. Биохимия, 1941, N 6, с.347.

103. Проскуряков М.Т., Туманьян Н.Г., Онивош О.П. и др. Изоэ-лектрическое фокусирование протеолитических ферментов и ихингибиторов семян риса Orisa satlva и Orisa glaberrima. -Прикл.биохимия и микробиология, 1987, т. 23, вып.2, с.266-269.

104. Пучкова Л.И. Лабораторный практикум по технологии хлебопекарного производства. М., Легкая и пищевая промышленность, 1982, 232 с.

105. РевинаТ.А., Чередникова Т.В. Иммунологическое изучение ингибиторов протеиназ из клубней картофеля. Докл. ВАСХНИЛ, 1987, N 2, с.9-11.

106. Россинский В.И. Культура папайи в Гагре и отечественный протеолитический фермент папайи. Бюлл. Гл. бот. сада АН СССР, 1978, вып. 107, с. 8-12.

107. Руденская Г.Н., Степанова В.М., Захарова Ю.А. и др. Тиолза-висимая сериновая протеиназа из листьев подсолнечника -близкий аналог сериновых протеиназ бактерий. Биохимия, 1987, Т.52, N 10, с.1753-1755.

108. Сарбаканова Ш.Т., Белозерский М.А., Дунаевский Я.Е. О наличии аспаратильной протеиназы в семенах пшеницы, выделение и характеристика фермента . Биохимия, 1988, Т.53, вып.5, с. 768-775.

109. ИЗ. Сафонова М.П. Изменение белков и протеолитических ферментов зерновки пшеницы при созревании и прорастании. Дисс. канд.б.н. М., Ин-т физиологии растений им. К.А.Тимирязева АН1. СССР, 1966, с.84-93.

110. Скоупс Р. Методы очистки белков. М., Мир, 1985, 358 с.

111. Степанов В.М. Эволюция структуры и функции протеолитических ферментов. Сб.: Химия протеолитических ферментов. Вильнюс, 1973, с.11-17.

112. Сухинин В.Н. Пониделок Н.В., Сахаров И.Ю. Свойства ингибитора трипсина из листьев люцерны, выделенного хроматофоку-сированием. М., Прикл. биохимия и микробиология, 1988, т. 26, вып.4, с.500-503.

113. Таха Лабаш-Абазид. Сравнительное изучение протеолитических ферментов зерна пшеницы нормальной и пораженной клопом-черепашкой. Дисс.канд.б.н. М., МТИПП, 1978, 118 с.

114. Тер-Мовсесян А.Ж. Нейтральные протеиназы зерна ржи и их белковые ингибиторы. Автореф.дисс.канд.б.н. М., МТИПП, 1981, 24 с.

115. Типисева И.А. Протеолитические ферменты семян сои. Автореф. дисс. канд. б. н. - М., 1984, 21 с.

116. Туманьян Н.Г., Алешин Е.П. Некоторые свойства ингибиторов протеаз семян риса. Деп. в ВНИИТЭИагропром, 1988, N 108, 10 с.

117. Уоринг Ф., Филипс И. Рост растений и дифференцировка. М.,1. Мир, 1984, 512 с.

118. Федосеев А.П. Эффективность минеральных удобрений в зависимости от окультуренности почвы и погодных условий. Агрохимия, 1982, N 9, с. 52-53.

119. Фершт Э. Структура и механизм действия ферментов. М., Мир, 1980, 432 с.

120. Фурсов О.В. Выделение и изучение системы "протеаза-ингиби-тор" зерна пшеницы. Химия природных соединений, 1975, N 5, с.642-645.

121. Хефтман Э. Хроматография. Практическое приложение метода. М., Мир, 1986, т. 1, 336 с.

122. Чебан А.Н. Множественные формы ингибиторов сериновых протеиназ фасоли (Phaseolus vulgaris).- Автореф.дисс.канд.б.н. -М., 1982, 21 с.

123. Черников М.П. Ингибиторы протеиназ семян некоторых растений, их свойства и влияние на усвоение белков. Вестник АМН СССР, 1966, т.10, с.98-107.

124. Шаненко Е.Ф. Нейтральные протеазы пшеницы и их белковые ингибиторы. Дисс.канд. б.н. - М., МТИПП, 1980, 124с.

125. Шатилов И.С., Силин А.Д., Полев Н.А., Шаров А.Ф. Значение фотосинтетической продуктивности и оттока пластических веществ из разных органов для формирования урожая озимой пшеницы. Известия ТСХА, вып.2, 1989, с.17-27.

126. Шатилов И.С., Шаров А.Ф., Татусова Л. А. Фотосинтетическая деятельность и продуктивность посевов озимой пшеницы в центральном районе Нечерноземной зоны РСФСР. Известия ТСХА, ВЫП. 1, 1987, с. 3-13.

127. Шмидер В., Цабель С., Кениг В. Влияние азотных удобрений нахлебопекарные свойства пшеницы. Мин. питание сельскохозяйственных культур, урожай и качество продукции, 1990, с. 42-50.

128. Шульгин М.И. Ингибиторы протеиназ микроорганизмов в семенах пшеницы, ржи, тритикале.- Автореф. дисс.канд.б.н.- М., 1985,21 с.

129. Шульмина А.И., Черняк В.Я., Магратова Н.Н., МаловаЕ.Л., Дронова Л.А., Мосолов В.В. Изучение физико-химических свойств белка-ингибитора сериновых протеиназ из картофеля. Биохимия, 1976, т.41, вып.7, с.1229-1234.

130. Шутов А.Д. Протеолиз запасных белков в прорастающих семенах бобовых. Автореф.дисс.докт.б.н. - М., 1983, 40 с.

131. Шутов А.Д., Бульмага В.П., Болдт Э.К., Вайнтрауб И.А. Исследование модификации запасных белков семян вики при прорастании и ограниченном протеолизе. Биохимия, 1981, N 46, с.841-850.

132. Шутов А.Д., До Нгок Лань, Вайнтрауб И.А. Очистка и частичная характеристика протеиназы В из прорастающих семян вики.- Биохимия, 1982, N 47, с.814-821.

133. Элпидина Е.Н., Воскобойникова Н.Е., Белозерский М.А., Дунаевский Я.Е. Обнаружение в белковых телах семян гречихи ме-таллопротеиназы и ее ингибитора. Биохимия, 1990, N 4, с.737-744.

134. Ямалаев A.M., Мухсионов У.Х., Исаев Р.Ф., Ямалаева А. А., Кривченко В.И. Активность ингибиторов протеиназ и устойчивость различных сортов пшеницы к Tilletia caries. Сельскохозяйственная биология, 1980, N 15, с. 143-144.

135. Abe К., Arai S. Purification of a cysteine proteinase inhibltor from rice. Orjza sativa L. japonica. Agric. and Biol. Chem., 1985, v. 49, P. 3349-3350.

136. Abe K., Arai S., Kato H., Fujimaki M. Thiol-protease inhibitor occuring in endosperm of corn. Agric. and Biol. Chem., 1980, v.44, P.685-686.

137. Adams C.A. Novelle L. Acid hidrolases and autolytic properties of protein bodies and spherosomes isolated from inger-minated seeds of sorghum bicolor. Plant Physiol., 1975, v. 55, N 1, P. 7-11.

138. Adams C.A., Novelle L., Liebenberg W. Biochemical properties and ultrastrueture of protein bodies isolated from selected cereals. Cereal Chem., 1976, v.53, N 1, P.1-12.

139. Anson M.L. The estimation of pepsin, trypsin, papain and catepsin with hemoglobin. -J. Gen. Physiol., 1938, v.22, P.79-82.

140. Ashton F.M. Mobilisation of storage proteins of seeds. -Ann. Rev. Plant Physiol., 1976, v.27, P.95-117.

141. Ashton F.M., Dahmen W.J. A partial purification and characterization of two aminopeptidases from Cucurbita maxima cotyledons. Phytochemistry, 1967, v. 6, P. 641.

142. Baesa G., Carrea D., Salas C. Proteolytic enzymes in Carica candamarcensis. V. Scien. Food and Agr., 1990, v.51, N I, P.1-9.

143. Balland A. Alternations que prouvent les farines en vieil-lissant. Ann. chem. phys., 1884, ser.6, P. 533-534.

144. Baraniak B., Bubicz M. Wplyw konserwantow na aktywnosc pro-teolityczna enzymow w sokach otzymanych z zielonych czesci roslin. Ann. Univ. Mariae Curie-Sklodowska. Sect. E.,1994, V.49, P.203-207.

145. Baumgartner В., Chrispeels M.J. Partial characterisation of a protease inhibitor which inhibits the major endopeptidase present in the cotyledons of mung bean. Plant Physiol., 1976, v. 56, N 1, P. 1-6.

146. Bethke P. C., Jones R.L. Characterization of an aspartic protease associated with storage protein vacuoles of barley -aleurone. Plant Physiol., 1994, 105, N 1, P. 167.

147. Birk Y. Purification and some properties of a highly active inhibitor of trypsin and chymotrypsin from soya-beas. Bi-ochem. and Biophys. Acta, 1961, v.54, P.378-382.

148. Birk Y., Applebaum S.W. Effect of soya-bean trypsin inhibitors on the development and midgert proteolytic activity of Tribolium castaneum larvae. Enzymologia, 1960, v. 22, P.318-326.

149. Birk Y., Gertler A., Khalef S. Separation of a Tribolium protease inhibitor from soya-beans on a calcium phosphate column. Biochem. and Biophys. Acta, 1963, v.67, P.326--328.

150. Boisen S. Characterization of the endospermal trypsin inhibitor of barley. Phytochem., 1976, v. 15, P. 641.

151. Boisen S. Comparative physico-chemical studies on purified trypsin inhibitor from the endosperm of barley, rye and wheat. Zeitsch. Lebensmittel Unters. Forsch., 1983, Bd. 176, P. 369-381.

152. Bolsen S., DJurtoft R. Protease Inhibitor from barley embryo inhibiting trypsin and trypsln-like microbial proteases. Purification and characterization of two Isoforms. -Jour. Sclen. Food Agric., 1982, v.33, P.431-440.

153. Bolsen S., DJurtoft R. Trypsin Inhibitor from rye endosperm. Purification and properties. Cereal Chem., 1981, V.58, P.194-198.

154. Boiler Т., Vogeli U. Vacuolar localisation of ethylenindu-sed chitinase in bear leaves. Plant Physiol., 1984, v.84, N 2, P.442-444.

155. Bowman D.E. Differentiation of soya-bean antitryptic factors. Proc. of Sos. Exptl. Biol, and Med., 1946, v.63, P.547.

156. Bowman D.E. Fractions derived from soya-beans and nevy beans which retard tryptic digestion of casein. Proc. of Soc. Exptl. Biol, and Med., 1944, v.57, P.139.

157. Burger W.C. The proteases of barley and malt: recent research. Cereal Scien. Today, 1966, v.11, P.19-23, 31-32.

158. Burger W.C., Prentice N., Kastenschmidt J., Huddle J.D. The proteases separated from germinated barley: abstract of last research. Cereal Chem., 1966, v. 43, P. 546-555.

159. Burger W. С., Prentice N. Kastenschmidt J., Moeller M. Partial purification and characterization of barley peptide hydrolases. Phytochem., 1968, v. 7, N 8, P.1261.

160. Burger W.C., Prentice N., Moeller M. Peptidase Hydrolase С in germinating barley. Plant Physiol., 1970, v.46, P.860.

161. Burger W.C. Prentice N. Moeller M., Robbins G.S. Stabilization, partial purification and characterization of peptidil 1970peptid hydrolases from germinated barley. Phytochem., v. 9, N 1, P.49.

162. Dryjanski M., Otlewski J., Wilusz. Serine proteinase from Cucurbita ficifolia seeds. Acta biochem., 1990, v.37, N 1, F.169-172.

163. Dubin A.A. A polyvalent proteinase inhibitor from horseblo-od-leucocyte cytosol. Isolation, purification and some molecular parametres. Eur.J.Biochem., 1977, v.73, N2,1. P. 423-435.

164. Ducastaing A., Adrian J. Les enzymes en technologie aliman-taire. Sclen. alim., 1990, v. 10, N2, P. 231-254.

165. El-Farra A.A., Galal A.M.S., Mervut. Effect of enzyme supplement from different sources on balady. J.Food Sclen., 1989, v. 17, N 1-2, P. 161-173.

166. Emmermann M., Schmitz U. The cytochrome's reductase Integrated processing peptidase from potato mitochondria belongs to a new class of metalloendoproteases. Plant Physiol., 1993, v. 103, N 2, P.615-620.

167. Enari T.-M. Basic and applied research on barley proteins and enzymes. Wallerstein Labor.Comm., 1967, v.XXX, P. 5-14.

168. Enari T.-M., Mikola J. Endopeptidases of germinating barley. EBC, Congress Proc., 1967, P.9-16.

169. Enari T.-M., Puputti E., Mikola J. Fractionation of the proteolytic enzymes of barley and malt. EBC, Congress Proc., 1963, P.37-44.

170. Engel C., Heins J. The distribution of enzymes in resting cereals. J.Biochim.Biophys. Acta, 1947,N 1, P.190-196.

171. Filcho J.X. Trypsin inhibitors in sorghum grain. J. of Food Scien., 1974, v.39, P.422-423.

172. Friedman M., Brandon D.L. Comparison of commercial soyabean cultivar and an isoline lasking the Kunitz trypsin and inhibitor: composition, nutritional value, and effects of heating. J.Agr. and F. Chem., 1991, v. 39, N 2, P. 327-335.

173. Gard G.K., Virupakscha Т.К. Acid protease from germineted sorghum. I. Purification and Characterization of the enzyгае. Eur. J.Biochem., 1970, v. 17, N 1, P. 4-12.

174. Gennis L.C., Cantor C.R. Double-headed protease inhibitors from Black eyed Peas. I. Purification of two new protease inhibitors and the endogenous protease by affinity chromatography. J. Biol. Chem., 1976, v. 251, P. 734-740.

175. Gennis L.C., Cantor C.R. Double-headed protease inhibitors from Black eyed Peas. II. Structural studies by optical absorption and circular dichroism. J. Biol. Chem., 1976, v.251, P.741-746.

176. Goodfellow V.J., Solomonson L.P., Oaks A. Characterization of a maize root proteinase. Plant Physiol., 1993, v.101, N 2, P.415-419.

177. Greenberg D.M. Plant proteolytic enzymes. In "Methods in Enzymology", New York, Acad. Press, 1955, v.2, P.54.

178. Guo Yan Lin, Roux S.J. Partial purification and characterisation of a Ca2+-dependent proteinkinase from the green alga Dunaliella salina. Plant Physiol., 1990, v.94, N 1, P.143-150.

179. Hass G.M., Ryan C.A. Carboxypeptidase inhibitor from ripened tomatoes. Purification and properties. Phytochemist-ry, 1980, v. 19, N7, P. 1329-1333.

180. Hirashiki J., Odata F., Jashida N., Makisumi F., Ito S. Purification and complex formation analysis of a cysteine proteinase inhibitor (cystatin) from seeds of Wisterria flori bunde. J.Biochem., 1990, v. 108, N4, P. 604-608.

181. Hochstrasser K., Illchmann K., Werle E. Die Aminosauresequ-enz des spezifischen Tripsin-Inhibitors aus Maissamen. Character isierung als Polymers. Hoppe-Seyler's Zeitsch. Physiol. Chem., 1970, Bd.351, S.721-728.

182. Hochstrasser K., Illchmann K., Werle E. Reindarstellung der Trypsin-Inhibitoren aus Keinem von Weizen und Roggensamen, Lokallesierung der aktlven Selten. Hoppe-Seyler's Zeit-sch. Physiol.Chem., 1969, Bd.350, S.249-254.

183. Ikeda K., Kusano T. Isolation and some properties of a trypsin inhibitor from buckwheat grain. Agric.Biol.Chem., 1978, V.42, P.309-314.

184. Ikenaka T., Odani S. Regulatory proteolyc enzymes and the inhibitors. Proc. 11th FEBS. Meet. - Oxford: Pergamon Press, 1978, P.207-216.

185. Jacobsen J.V., Varner J.E. Gibberellic acid-induced synthesis of protease by isolated aleurone layers of barley. -Plant Phisiol., 1967, v. 42, P. 1596.

186. Jang J.F., Malek L., Purification of a caseinolytic enzyme from dry pea seeds. Plant Physiol., 1990, v.79, N 2, P. 15.

187. Jansen E.F., Jang R., Balls A.K. Citrus aminopeptidases. -Arch.Biochem.Biophys., 1958, v.76, P.461.

188. Jones R.L. Gibberellic acid and the fine structure of barley aleurone cells. II. Changes during the synthesis and secretion of oc-amilase. Planta, 1969, v. 88, P. 73.

189. Jones G. Moore S., Stein W.H. Properties of chromatograp-hically purified trypsin inhibitors from lima beans. Bi-ochem., 1963, v. 2, P. 66.

190. J0rgensen H. Further investigations into the nature of the action of bromates and ascorbic acid on the baking strength of wheat flour. Cereal Chem., 1939, v.16, N 1, P.51.

191. J0rgensen H. On the existance of powerful but latent proteolytic enzymes in wheat flour. Cereal Chem., 1936, v.12, N 3, P. 346.

192. Jjzfrgensen H. Studies on the nature of the bromate effect. -London, Oxford Univ.Press, 1945, P.435.

193. Kaminsky E., Bushuk. W. Detection of multiple forms of proteolytic enzymes by starch gel-electrophoresis. Can.J.Bi-ochem., 1968, v.46, P.1317.

194. Kaminsky E., Bushuk W. Wheat Proteases. I. Separation and Detection by Starch Gel-Electrophoresis. Cereal Chem., 1969, v. 46, N 3, P. 317.

195. Keilova H., Tomasek V. Isolation and some properties cat-hepsin D inhibitor from potatoes. Collist.Chem. Communs., 1976, V.42, N 2, P.489-497.

196. Kirsi M. Formation of proteinase inhibitors in developing barley grain. Physiol.Plantarum, 1973, v.29, fasc.2, P.141-144.

197. Koehler S.M., Ho Tuan-Hua D. A major gibberellic acid induced barley aleuron cystein proteinase which digests horde-in. Purification and characterisation. Plant Physiol., 1990, V.94, N 1, P.251-258.

198. Kolehmainen L., Mikola J. Partial purification and enzymatic properties of a aminopeptidase from barley. Arch.Bi-ochem., 1971, v. 145, P. 633.

199. Kortte A.A., Jermya M.A. Acacia proteinase inhibitors. Purification and properties of the trypsin inhibitors from Acacia elata seed. Europ. J.Biochem., 1981, v.115, N 3, P.551-557.

200. Kopitor M., Lebez D. Intracellular distribution of neutral proteinase and inhibitors in pig leycocytes. Isolation of two inhibitors of neutral proteinases. Eur. J.Biochem., 1975, V. 56, N 2, P. 571-581.

201. Kruger J.E., Preston K. The distribution of carboxypeptida-ses in anatomical tissue of developing and germinating wheat Kernels. Cereal Chem., 1977, v.54, N 1 P. 167-174.

202. Kuboi R., Wang W., Kamasawa J. Effect of contaminating proteins on the separation and purification of papain from papaya latex using aqueous two-phase extraction. Karaky ka-raky pomvyncio., 1990, v.16, N4, P.772-779.

203. Kumar P.M.H., Virupaksha Т. K., Vithayathil P.J. Sorghum proteinase inhibitors. Purification and some biochemical properties. Inst.Jour.Peptide and Protein Res., 1978, v. 12, P.185-196.

204. Kumar P.M.H., Virupaksha Т.К. Vithayathil P.J. Sorghum proteinase inhibitors. 2. Mode of interaction with serine proteinases. Inst. Jour. Peptide and Protein Res., 1979, v. 13, P. 153-160.

205. Laskowski M., Kato J. Protein inhibitors of proteinases. -Ann. Rew. Biochem., 1980, v.49, P.593-596.

206. Lipke H., Fraenkel G.S., Liener I.E. Effect of soya-bean1.hibitors on growths of Tribolium confusum. Jour.Agric. Food Chem., 1954, V.2, P.410-414.

207. Lorenz K. Amaranths hyprchondriacus-characterlstics of the starch and baking potential of the flour. Starke. 1881, v. 33, P.149-153.

208. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A. L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J.Biol. Chem., 1951, .v. 193, P.265-275.

209. Madl R.L., Tsen C.C. Trypsin and chymotrypsin Inhibitors of triticale. In: Triticale: First manmade cereal. - St. Paul, M.N.:Americ. Assoc. Cereal Chemists, 1974, P. 190.

210. Maitre J.P., Tarenghi E. Leucine-aminopeptidase des limbes de trofle violet (Trifolium protease L.) ge'netique formalle d'un locus. C. r. Acad. Scien. Ser.3, 1990, v. 310, N 11, P.485-488.

211. Martino-Ferrer M., Ferier A. Trypsin inhibitor from bambara pea. Phytochemistry, 1983, v. 22, N 4, P. 813-816.

212. Matikkala E.J., Virtanen A.I. ^-glutamylpeptidase (glutami-nase) in germinating seeds of chive (Allium schoenoprasum). Acta Chem.Scand., 1965, v.19, P. 1258.

213. Melville I.e., Ryan C.A. Chymotrypsin inhibitor 1 from potatoes. J.Biol.Chem., 1972, v.247, N 7, P. 3445-3453.

214. Melville I.e., Scandalios I.e. Maize endopeptidase: genetic control, chemical characterisation and relationship to endogenous trypsin inhibitor. Biochem.Genet., 1972, v.7, N 1, P.15-31.

215. MichalikJ., Bridza J., Petovski P. Geneticka podmiemnast aktivity trypsin-inhibitorov v Line ozimnej psenica.

216. Polsk. hospodarstvo, 1988, v.34, N 11, L.969-977.

217. Mikola J. Triticum aestivum L. Acid carboxypeptidases in grains and leaves. Plant Physiol., 1986, v.81, P.823-829.

218. Mikola J., Kalkkinen N., Kervinen J. Structure and put at the processing of barley aspartic proteinases. Physiol. Plant., 1990, v. 79, N2, P. 2-15.

219. Mikola J., Kirsi M. Differences between endospermal and 'embryonal trypsin inhibitors in barley, wheat and rye. -Acta Chem.Scan., 1972, v.26, P.787-795.

220. Mikola J., Kolehmeinen L. Localization and Activity of Various Peptidases in Germinating Barley. Planta, 1972, v. 104, N 2, P. 167.

221. Mikola J., Pietila K., Enari T.-M. Activities of various peptidases in barley, green malt and malt. Jour, of Inst. Brewing, 1972, v.78, P.388-391.

222. Mikola J., Pietila K., Enari T.-M. The role of malt carboxypeptidases in the liberation of amino acids in mashing. -Europ.Brew.Conv.Proc. 13th Congr., 1971, Amsterdam, P.21.

223. Mikola J., Suolina E.M. Purification and properties of a trypsin inhibitor from barley. Eur.Jour, of Biochem., 1969, V.9, P.555-560.

224. Mikola J., Suolina E.M. Purification and properties of an inhibitor of microbial alkaline proteinases from barley. -Arch. Biochem.Blophys., 1971, v.144, P.566-575.

225. Mitsunaga T. Isolation and characterisation of trypsin inhibitors from wheat germ. Jour. Nutr. Scien. Vitaminol., 1979, V. 25, P. 43-52.

226. Mitsunaga T. Some properties of protease inhibitors in wheat grain. Jour. Nutr. Scien. Vitamlnol., 1974, v.20, P.153-159.

227. Mitsunaga Т., Klmura Y., Shimusi M. Isolation and partial characterization of a trypsin inhibitor from wheat endosperm. Jour.Nutr.Scien. Vitaminol., 1982, v.28, P.419-429.

228. Moeller M., Robbins G.S., Burger W. S., Prentice N. A carbo-xypeptidase from germinated barley and its action on casein. J.Agr.Food Chem., 1970, v. 18, P. 889.

229. Moore B.R., Free S.J. Protein modification and its biological role. Inst. J.Biochem., 1985, v.27, N 3, P.283-289.

230. Morris C.F., Mueller D.D., Faubian J.M., Paulsen. Identification of L-tryptophan as an endogenous inhibitor of embryo germination in white wheat. Plant Physiol., 1988, v.88, N 2, P. 435-440.

231. Mosser G., Skupin J. Isolation and identification of trypsin inhibitors from wheat grain Beta variety. Physiol, plant, 1990, V. 34, N2, P. 115-123.

232. Mosser G., Skupin J., Romanovska B. Pflanzliche Inhibitoren proteolytischen Enzyme. Nahrung, 1984, N 1, S. 93-112.

233. Mounfield J.O. The proteolytic enzimes of spoted wheat. -Biochem. J., 1939, v.30, P.549-557.

234. Munts K., Bassuner R. Proteolytic ellevages of storage proteins during embriogenesis and germination of legume seeds. Physiol. Veg., 1985, v.23, N 1, P.75-94.

235. Nighikata M., Makoto. Inhibition studies of soya-bean trypsin like enzymes. Jour, of Biochem.(Tokyo), 1985, v.97, P. 1541-1549.

236. Nikolova A., Dencheva A. Characterization of acid protease1.olated from the endosperm of germinating corn seeds. -Fiziol.Rast. (Sofia), 1985, N3, S. 32-37.

237. Odani J., Koide Т., Ono T. The complete sequence of barley trypsin inhibitor. J.Biol.Chem., 1983, v.258, N 12, P.7990-8003.

238. Ota S., Moore S., Stein W.H. Preparation and Chemical properties of purified stem and fruit bromelains. Biochemistry, 1964, N 3, P. 180.

239. Ota S., Fu T.N., Hirohata H. Studies on bromelain. II. Its activation and fractionation. J.Biochem., 1961, v.49, P.532.

240. Otchere E.O., Gyong F.H., Imbeasche M. Amino acid composition and trypsin inhibitor activity in the seeds of Gruffa-nia simlicufolia. J.Anim.Prod., 1988, v.8, N 1, P. 63-68.

241. Petrucci Т., Tomasi M., Cantagalli P., Silano V. Comparisi-on of wheat albumin inhibitors of <x:-amylase and trypsin. -Phytochem., 1974, v.13, P.2487-2495.

242. Pladys D., Vance C.P. Proteolysis during development and senescence of effective and plant gene-controlled ineffective alfalfa nodules. Plant Physiol., 1993, v. 103, N 2, P. 379-384.

243. Polanowski A. Trypsin inhibitor from starchy endosperm of rye seeds. Acta Soc. Bot.Rol., 1974, v. 18, N 1, P. 27-37.

244. Puzstai A. Metabolism of trypsin-inhibitory proteins in the germinating seeds of kidney bean (Ph. Vulgaris). Planta, 1972, v. 107, N 2, P. 121-129.

245. RamP.C., Srivastava K. N., LodhaM.L., Metha S.L. Purification of proteolytic enzymes from normal and opaque-2 zeamays L. developing endosperms. Jour, of Biosci., 1968, v. 10, P. 257-266.

246. Rancour J.M., Ryan C.A. The carboxypeptidase inhibitor activity from ripened tomatoes. Arch. Biochem.Biophys., 1968, v.125, N 2, P.380-384.

247. Reddy M.N., Keim P.C. Primary structural analysis of sulf-hudryl protease inhibitor from pineapple stem. J.Biol. Chem., 1975,.v.250, N 5, P.1741-1750.

248. Richardson M. The proteinase inhibitors of plants and microorganisms. Phytochemistry, 1977, v.16, N 2, P.159-169.

249. Rowan A.D., Buttol D.J., Barrett A.I. The cystein proteinases of the pineapple plant. Biochem.J., 1990, v.226, N 3, P.869-875.

250. Runeberg-Roos P., Kervinen J., Kovaleva V., Raikhel N.V., Gal S. The aspartic proteinase of barley as a vacuolar enzyme that processes probarley lectin in vitro. Plant Physiol., 1994, V. 105, N 1, P. 321-329.

251. Royeer A., Miege M., Grange A. Inhibiteurs antitrypsine eit activite's prote'olytiques etes albumines de graine de Vigna unguimlate. Planta, 1979, v.119, P.1-16.

252. Ryan C.A. Proteolytic enzymes and their inhibitors in plants. Ann.Rev.Plant Physiol., 1973, v.24, P. 173-196.

253. Sacato K., Hozumi Т., Misava M. Broad-Specifity proteinase inhibitors in Scopila Japonica (Solanaceae) cultured cells. Eur. J. Biochem., 1975, v. 55, N 1, P. 211-219.

254. Schwartz M.J., Mitchell H.I., Cox D.J., Reeck G.R. Isolation and characterization of trypsin inhibitors from opaque-2 corn seeds. Jour. of Biol.Chem., 1977, v.252,1. P.8105-8107.

255. Segundo В.S., Casacuberta J.M., Puigdomenech P. Sequential expression and differential hormonal regulation of proteolytic activities during germination in Lea menys L. Plan-ta, 1990, v. 181, N4, P. 467-474.

256. Shamanthaki S.M.C., Murrey D.R. The contribution of trypsin inhibitors to the nutritional value of chick pea seed protein. J. Sci. Food and Agr., 1987, v. 40, N 3, P. 253-261.

257. Shibata H., Hara S., Ikenata Т., Abe J. Purification and characterization of proteinase inhibitors from winged bean seeds. -Jour, of Biochem.(Tokyo), 1986, v.99, P.1174-1155.

258. Svendsen I., Boisen S., Hejgaard J. Amino acid sequence of serine protease inhibitor CI-1 from barley. Homology with barley inhibitor CI-2, potato inhibitor I and leech eglin. Carlsberg Res.Comm., 1982, v.47, N 1, P.45-53.

259. Tan Wilson, Ana L. Differential expression of Kunitz and Bowman-Birk soya-bean inhibitor in plants and callus tissue. Plant Physiol., 1985, v.78, P.310-314.

260. Taufel A. Der Einsatz von Enzymen auf dem Backeera rensek-tor. Wiss.Z.Humboldt-Uniw.Berlin. R. Agrar.-Wiss., 1990, Bd.39, N 1, S. 68-72.

261. Thayer S.S., Choi H.T., Rousser S., Huffaker R.C. Characterization and subcellular localization of aminopeptidases in senescing barley leaves. Plant Physiol., 1990, v.87, N 4, P.894-897.

262. Tipton K.F. Agavain: a new plant proteinase. Biochem.bi-ophys. Acta, 1964, v. 92, P. 341.

263. Uchikova Т., Horita H., Kaneda M. Proteases from the sarcocarp yellow snaka gourd. Phytochemistry, 1990, v.29, N 6, P.1879-1881.

264. Van der Valk H. C.P.M., Van Bentum M. J. A., Van Loon L.C. Proteolytic enzymes In developing leaves of oats. (Avena Sativa L.). J. Plant Physiol., 1989, v.135, N 4, P.489-494.

265. Veerabhadrappa P.S., Manjunath N.H., Virupaksha Т.К. Proteinase inhibitors of finger millet. J.Scien.Food Agric., 1978, v.29, P.353-358.

266. Visuri K., Mikola J., Enari T.-M. Isolation and partial characterization of a carboxypeptidases from barley. -Егор. J. Biochem., 1969, v. 7, N2, P. 193.

267. Vodkin L. Isolation and characterization of messenger RNA for seed lectin and Kunitz trypsin inhibitor in soya-bean. Plant Physiol., 1981, v.68, P.766-771.

268. Wang C.C., Grant D.R. The proteolytic Enzymes in Wheat Flour. Cer.Chem., 1969, v. 46, N 5, P. 537.

269. Warchalewski J.R., Skupin J. Isolation and properties of trypsin and chymotrypsin inhibitors from barley grits after storage. Jour.Scien.F.Agric., 1973, v.24, P.995- 1009.

270. Wells J.R.E. Purification and properties of a proteolytic enzymes from freanch beans. -Biochem.J., 1965, v.97, P. 228.

271. Willstatter R., Grassman W., Ambros 0. Blausaure-Aktivie-rung und Hemmung Pflanzlicher Proteasen. Z.physiol.Chem., 1926, v.151, P.286.

272. Wilson K.A., Laskowski M.Sr. The partial linear sequence of garden bean inhibitor and location of protease reactive sites. Bayer-Symp."Proteinase inhibitors"., 1975, Berlin e. a., P. 286-290.

273. Wu C., Whitaker J.R. Purification and partial characterization of four trypsin/chymotrypsin inhibitors from red kidney beans (Phaseolus vulgaris, Var.Linden). J.Agr. and Food Chem., 1990, v.38, N7, P.1523-1529.

274. Xu Zhi-giang, Xu Feng-cai, Li Ming-qi. Purification and partial properties of a proteolytic enzymes from Agave si-salana. Zhiwu xuebao. Acta Bot. Sin., 1993, v.35, N 3, P.171-178.

275. Zuber H. Purification and properties of a new carboxypepti-dase from citrus fruit. Nature, 1964, v.201, P.613.

Информация о работе

Суслянок, Георгий Михайлович
кандидата биологических наук
Москва, 1996
ВАК 03.00.04

Диссертация

Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона - тема автореферата по биологии, скачайте бесплатно автореферат диссертации

Похожие работы