Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Физиолого-биохимические изменения у коров при использовании в качестве стимулятора воспроизводительной функции биокорректора тимоген

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Физиолого-биохимические изменения у коров при использовании в качестве стимулятора воспроизводительной функции биокорректора тимоген"

На правах рукописи

ЛОПИНА Евгения Олеговна

ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ У КОРОВ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В КАЧЕСТВЕ СТИМУЛЯТОРА ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ БИОКОРРЕКТОРА ТИМОГЕН

03 00 13 - физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

ООЗ162307

Белгород 2007

003162307

Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный руководитель Заслуженный ветеринарный врач РФ, доктор биологических наук, профессор Безбородое Николай Васильевич

Официальные оппоненты доктор биологических наук, профессор

Семенютин Владимир Владимирович,

кандидат биологических наук, профессор Липунова Елена Андреевна

Ведущая организация ФГОУ ВПО «Орловский государственный

аграрный университет»

Защита состоится « » у, с -¿л^ «-С. 2007 г, в (Ъ часов на заседании диссертационного совета Д 220 004 01 в ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу 308503, Россия, Белгородская р-н, пос Майский, ул Вавилова 1

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белгородской государственной сельскохозяйственной академии

Автореферат разослан « ^ » {и^ ^ У>-2007 г

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук

Ю Н Литвинов

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. При промышленном ведении животноводства основным технологическим вопросом является воспроизводство стада, интенсификация которого предусматривает, прежде всего, максимальное использование биологических особенностей коров путем создания для них оптимальных условий кормления и содержания Вместе с тем, интенсивному развитию молочного животноводства препятствует ряд факторов, обусловленных нарушениями работы репродуктивной системы самок Ветеринарная практика в настоящее время располагает значительным арсеналом средств фармакопро-филактики и лечения основных заболеваний воспроизводительных органов сельскохозяйственных животных, но изучение физиологии воспроизводства, причин, снижающих оплодотворяемость, и на их основе изыскание и внедрение новых средств борьбы с бесплодием и яловостью коров, является весьма актуальной проблемой животноводства Эффективным и физиологически оправданным за последнее время, при активизации воспроизводительной функции у самок, следует считать применение различных биологически активных средств(биокорректоров)

Подобный подход основан на использовании существующей в организме универсальной системы биорегуляции, действующей посредством клеточных медиаторов, представляющих собой относительно короткие аминокислотные последовательности (Арион В Я, 1981, Загородняя Э Д 1990, Гомаз-ков О А , 1992, Жоголев К Д , 1992, Гречко А Т , 1998, Забродский П Ф , 1999, Смирнов В С , 2004) Основной функцией этих молекул в последующем является селективная передача информации при взаимодействии клеток иммунной, нервной и эндокринной систем

Цель и задачи исследований.

Целью работы было определение механизмов активизации функциональных связей органов нейроэндокринной регуляции половой цикличности у коров глутамил-триптофаном и эффективности его применения для повышения воспроизводительной функции

Для достижения цели были поставлены следующие задачи

- определить динамику стероидных гормонов в крови коров с гипофункцией яичников до и после введения дипептида глутамил-триптофана (тимоген),

- изучить влияние дипептида глутамил-триптофана на морфологические и биохимические показатели крови подопытных коров,

- выявить характер гистоморфологических изменений в половых и вторичных иммунокомпетентных органах у подопытных животных,

- определить динамику показателей естественной резистентности до и после применения тимогена,

- определить эффективность применения тимогена, как биотехнологического метода повышения оплодотворяемости коров с функциональной недостаточностью яичников

Научная новизна работы. Впервые комплексными исследованиями гематологического, гормонального и иммунологического статуса установлена иммуно-гормональная активность пептидного биокорректора тимоген, способствующая стимуляции гипофизарно-гонадальных связей в системе нейро-эндокринной регуляции половой цикличности у коров Определена степень и направленность действия глутамил-триптофанового комплекса, способствующая опосредованной индукции кортикостероидов и дальнейшей стимуляции воспроизводительной функции

Теоретическая и практическая значимость работы.

В работе дано научное и практическое обоснование к использованию в ветеринарной практике биотехнологического метода стимуляции половой функции у коров с гипофункцией яичников на фоне стимулирующего действия глутамил-триптофанового комплекса Результаты проведенных исследований расширяют существующие представления о механизмах иммунно-гормональной регуляции половой цикличности пептидными регуляторами, как имеющих максимально физиологическую направленность действия и являющихся экологически чистыми для организма животных

Предложенные производству способы стимуляции половой цикличности и повышения оплодотворяемости, при недостаточной функции яичников препаратом тимоген, обеспечивают повышение рентабельности молочного скотоводства и рекомендуются к применению во время проведения акушер-ско-гинекологической диспансеризации животных

Положения, выносимые на защиту.

1 Глутамил-триптофан (тимоген) обладает глюкокортикоидной активностью, индуцирующей нейроэндокринные связи половой цикличности у коров с гипогонадотропной гипофункцией яичников

2 Активизация процессов метаболизма под воздействием тимогена, способствует повышению уровня естественной резистентности и запуску нейро-эндокринной регуляции половой цикличности у коров

3 Картина гистоструктурных изменений в тканях половых и вторичных иммунокомпетентных органах коров с пониженной гипофизарно-гонадальной активностью свидетельствует о выраженном биокорригирующем влиянии дипептида тимоген

4 Применение тимогена коровам с гипофункцией яичников способствует индукции половой цикличности и последующей оплодотворяемости

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на научно-производственной международной конференции Белгородской ГСХА «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения», 2007 г, Всероссийской научно-практической конференции Карачаево-Черкесской ГТА «Молочное и мясное скотоводство состояние и перспективы в Южном Федеральном округе», 2007 г, Первом съезде ветеринарных фармакологов России, ГНУ ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, г Воронеж, 2007 г

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 4 работы

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 156 страницах печатного текста Список литературы включает 258 отечественных и 60 зарубежных источников Работа иллюстрирована 26 таблицами и 20 рисунками

1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Научно-производственные опыты и основные исследования на коровах черно-пестрой породы проведены в ОАО «Агро-Стрелецкое» Белгородского района на поголовье с годовым удоем 4800 кг, находящихся в условиях МТФ на привязи в зимний период года и с выгоном на летний период в открытые прифермские загоны Рацион кормления животных был не всегда сбалансирован по основным питательным компонентам Формирование опытных групп коров осуществляли на основе данных зоотехнического учета их физиологического состояния и после клинического и гинекологического обследования по принципу пар-аналогов

Группы формировали из числа коров, находящихся в состоянии анаф-родизии (через 60 суток после отела), по причине гипофункции яичников Наличие данной дисфункции определяли на основании ректальных исследований (отсутствии фолликулов и желтых тел в яичнике) половых органов и данных учета техника-осеменатора на ферме В качестве средства активизации гипофизарно-гонадальной взаимосвязи у коров использовали синтетический биокорректор тимоген (ТУ 10 07 169-91), который представляет собой

дипептид, являющийся индивидуальным иммуноактивным компонентом препаратов тимуса В его состав входят глутаминовая кислота и триптофан В качестве сравниваемого средства активизации гипофизарно-гонадальных связей использовали базисно применяемый препарат сурфагон

Основные лабораторные исследования проведены на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии ФГОУ ВПО БелГСХА, в Белгородской областной ветеринарной лаборатории, вирусологической лаборатории Центра Госсанэпиднадзора Белгородской области и паталогоанато-мической лаборатории гор больницы №2 г Белгорода

Всего в опытах было использовано 107 коров, на которых были проведены исследования по следующей схеме (рис 1)

1 Для выявления физиолого-биохимических изменений, происходящих в организме коров, были подобраны 4 группы животных Коровам с гипофункцией яичников 1-й опытной группы (п=5), вводили внутримышечно ти-моген 0,01% раствор, в дозе 20 мл/гол/сут, в течение 10 суток, 2-й опытной группе (п=5) вводили тимоген в аналогичной дозе и сурфагон - 50 мкг/гол, внутримышечно, однократно на 9-й день обработки, 3-й (п=5) группе (контроль) вводили один сурфагон в аналогичной дозе, а животные 4-й (п=5) группы (контроль) с гипофункцией яичников были интактные В периферической крови коров по общепринятым методикам исследовали эстрадно л-17/3, прогестерон, кортизол, общий белок, альбумины, глобулины а, р, у, иммуноглобулины, триглицеролы, р— липопротеиды, холестерол, АсАТ (аспарта-таминотрансферазу), АлАТ (аланинаминотрансферазу), ЩФ (щелочную фос-фатазу), гемоглобин, эритроциты, лейкоцитарную формулу, бактерицидную, лизоцимную активности и фагоцитарную активность нейтрофилов Кровь на исследование отбирали из яремной вены до начала введения препаратов, на 5-е, 10-е и 18-е сутки

2 Изучение гистоструктурных изменений в половых и вторичных им-мунокомпетентных органах проводили после забоя на гистопрепаратах девяти коров, имеющих гипофункцию яичников и подвергнутых обработке препаратами Первой группе (п=3) коров вводили тимоген в дозе 20 мл/гол/сут, внутримышечно — 10 суток Второй группе (п=3) животных вводили сурфагон внутримышечно, в дозе 50 мкг/гол, однократно (контроль) Третья группа (п=3) - интактные коровы

Были исследованы органы яичники, матка, селезенка, печень

Рис 1 - Алгоритм исследований

Консервацию отобранного патматериала производили 10%-ным раствором нейтрального формалина Окрашивание гистосрезов осуществляли гематоксилин-эозином согласно методам классической гистотехники Микроскопическое исследование, фотодокументирование материалов проводили на микроскопе ЛОМО Микмед-2 при помощи компьютерной программы «Видео Тест-Мастер морфология»

3 Изучение эффективности применения препарата тимоген как самостоятельно, так и в комплексе с базисно применяемыми средствами для активизации половой цикличности у коров с гипофункцией яичников, проводили на шести группах коров Первой группе (п=15) вводили тимоген в дозе 10 мл/гол/сут, внутримышечно — 10 суток, второй группе (п=12) вводили тимоген в дозе 20 мл/гол/сут, внутримышечно - 10 суток, третьей группе (п=12) вводили тимоген в дозе 30 мл/гол/сут, внутримышечно — 10 суток Коровам четвертой (п=14), пятой (п=12) и шестой (п=13) групп вводили тимоген в соответственно аналогичных дозах совместно с сурфагоном на 9-е сутки Согласно общепринятым методикам клинического исследования у коров определяли появление признаков половой цикличности, индекс осеменения и наличие стельности после введения стимулирующих препаратов 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 Биохимические и морфологические показатели крови после введения глутамил-триптофанового комплекса Полученные данные по динамике стероидных гормонов в крови коров до и после введения глутамил-триптофанового комплекса (1-я группа) свидетельствуют о наличии определенных изменений за период исследований 18 суток(табл 1)

Тенденция повышения уровня кортизола к 5-м суткам после введения глутамил-триптофанового комплекса с одновременным снижением уровня прогестерона в крови коров свидетельствует об активизации гипофизарно-надпочечникового звена нейро-эндокринной регуляции репродуктивной функции Учитывая то, что регуляция функции коры надпочечников осуще-

ствляется адренокортикотропным гормоном (АКТГ), а его секреция в свою очередь стимулируется релизинг-гормоном (РГ) гипоталамуса, то действие глутамил-триптофанового комплекса, очевидно, начинается с верхних этажей гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси регуляции половой цикличности Снижение концентрации кортизола на 10-е сутки после введения ти-могена связано с увеличением продукции АКТГ (обратная связь), который в свою очередь увеличивает синтез и высвобождение кортизола В дальнейшем кортизол, активируя, как известно, аденилатциклазу и цАМФ, способствует усилению активности протеинкиназы А и посредством фосфорилирования активирует холестерилэстергидролазу, участвующую в синтезе стероидных гормонов

Таблица 1 - Содержание стероидных гормонов в

крови коров после введения тимогена

№ п/п Исследуемые показатели, п=5 Время исследования

До обработки Через 5 сут Через 10 сут Через 18 сут

1 Эстрад иол-17/?, нмоль/л 0,279±0,05 0,228±0,02 0,226±0,02 0,29±0,07

2 Прогестерон, нмоль/л 2,74±1,12 1,37±0,34 1,59±0,18 1,86±0,45

3 Кортизол, нмоль/л 70,5±5,03 104,7±34,64 59,12±4,81* 61,41±0,25

* - достоверно при р<0,01,

** — при р<0,001

Учитывая то, что прогестерон секретируется яичниками и корковым веществом надпочечников, следует полагать, что индуцированные тимогеном гонадотропины вызывают по прямой связи секрецию прогестерона Высокий уровень последнего тормозит (обратная связь) дальнейший выброс гонадо-тропных гормонов Гиперреакция к 5-м суткам гестагенных органов у коров

1-й группы после введения глутамил-триптофанового комплекса, повышение у коров 2-й группы и практически неизменное содержание прогестерона у животных контрольной группы, очевидно, связано с секрецией фолликуло-стимулирующего и лютеинизирующего гормонов гипофизом Возможно у коров контрольной группы, набор специфических рецепторов, характерный для белковых и пептидных рецепторов отсутствовал, а это обуславливало неизменное содержание прогестерона на протяжении 18 суток исследований

Исследования показателей белкового обмена в крови коров 1-й группы показало, что до начала введения глутамил-триптофана содержание общего белка было 76,42±0,64 г/л, альбуминов - 38,38±2,6%, а-глобулинов -10,88±1,78%, /?-глобулинов - 23,08±0,85% и ^-глобулинов - 27,68±-1,17%, что соответствовало нижней границе физиологических значений На 5-е сутки исследований отмечено достоверное повышение (на 10%) количества общего белка до 84,04±1,3 г/л, уровень альбуминов остался без изменений -38,3±1,98%, от-глобулины имели тенденцию повышения (на 27,4%) и составили 13,76±1,25%, ¡3-глобулины наоборот снизились (на 22,2%) и были равны 17,9±1,13%, р<0,001, а уровень ^-глобулинов повысился незначительно (на 8,6%) и составил 30,04±1,71% Содержание иммуноглобулинов находилось в пределах 18,36±1,1 ед, что было меньше предыдущего показателя на 6,4% Изменения показателей белкового обмена к 10-м суткам исследований характеризовались практически неизменным уровнем общего белка -85,16±1,3 г/л Количество альбуминов составило 41,8±2,1% Уровень глобу-линовых фракций был равен а- 13,84±1,45%, р- 20,1±1,5%, (увеличение на 11,7%), и г-24,26±0,5%, р<0,05 (снижение на 19,2%) Содержание иммуноглобулинов не изменилось - 18,11±0,46 ед. На 18-е сутки исследований картина белкового обмена изменилась следующим образом общий белок -84,56±0,8 г/л, альбумины - 38,12±1,46% (снижение на 9,0%), а-глобулины -11,0± 1,41 % (снижение на 20,6%), /?-22,06±1,3%, ^-глобулины -28,82±1,08%, р<0,05% (повышение на 19,0%) Количество иммуноглобулинов составило 17,94±0,6 ед

Отмеченные изменения биохимических показателей крови характеризуют иммуномодулирующий характер действия тимогена, который выражается в достоверном снижении ^-глобулинов на 5-е сутки исследований, /глобулинов на 10-е сутки и последующим повышением последних к 18-м суткам Повышение /?-глобулинов отмечено у коров 2-й группы и в контроле, но уже к 18 сут, а иммуноглобулины были без изменений Такие изменения, очевидно, связаны с наличием во фракции р -глобулинов липопротеи-дов, которые в это время достоверно повышаются в крови коров этой группы почти в два раза Увеличение уровня /-глобулинов связано с иммунотроп-ными свойствами тимогена В связи с тем, что глобулины трансформируют липиды, каротиноиды, стероидные гормоны, жирорастворимые витамины, ферменты и другие вещества, следует считать, что тимоген обладает выраженной иммунотропной активностью с проявляющимся иммуномодулирую-щим эффектом

Изменения показателей липидного обмена у коров 1-й группы отражены в таблице 2

Таблица 2 - Содержание липидных компонентов в крови коров после введения тимогена

№ п/п Исследуемые показатели, п=5 Время исследования

До обработки Через 5 сут Через 10 сут Через 18 сут

1 /?-липопротеиды, г/л 1,42±0,07 2,16±0,11* 1,62±0,15* 1,52±0,27

2 Триглицеролы, м моль/л 0,12±0,002 0,15±0,007 0,19±0,01" 0,15±0,004*

3 Холестерол, м моль/л 4,82±0,21 5,4±0,02* 4,39±0,22* 4,9±0,33

Полученные данные изменения уровня липидов в крови коров после введения глутамил-триптофанового комплекса характеризовались достовер-

ными изменениями по большинству показателей Наиболее характерные изменения так же отмечены на 5-10-е сутки исследований Аналогичная динамика показателей отмечена у коров 2-й, 3-й и 4-й групп

Показатели активности индикаторных ферментов крови у коров 1-й группы до начала введения глутамил-триптофана составили ЩФ -127,4± 17,66 и/Ь, АсАТ - 80,36± 4,55 и/Ь и АлАТ - 30,18±2,59 и/Ь На 5-е сутки соответственно ЩФ - 136,8±14,4 и/Ь, АсАТ - 85,9± 3,11 и/Ь и АлАТ без изменений — 30,72±2,1 Ы/Ь Через 10 суток значения показателей были следующими ЩФ - 134,8±16,2 и/Ь, АсАТ - 86,02± 5,93 и/Ь и АлАТ -28,28±2,33 и/Ь Через 18 суток изменения активности составили ЩФ — 116,9±7,03 и/Ь, АсАТ - 21,24± 10,1 и/Ь, р<0,001 (снижение на 75,4%) и АлАТ - 30,28±2,48 и/Ь

Таким образом, достоверное снижение уровня АсАТ в сыворотке крови к 18-м суткам исследований после введения глутамил-триптофанового комплекса свидетельствует, очевидно, о снижении процессов проницаемости клеточных мембран и биокорригирующих свойствах глутамил-триптофанового комплекса У коров 2-й группы уровень АсАТ оставался неизменным, а АлАТ наоборот повышался к 5-м сут В 3-й и 4-й группах активность АсАТ и АлАТ оставалась на протяжении периода исследований практически без изменений

Гематологические показатели у коров после введения тимогена отражены в таблице 3

Пониженный изначально в 2 раза процент эозинофилов от физиологического значения после введения глутамил-триптофанового комплекса возрастает к 5-м суткам достоверно в 3,7 раза (эозинофилия) Таким образом создаются предпосылки для активного фагоцитоза этими клетками Кроме того индуцируется при этом нейтрализация гистамина, который накапливается при анафродизии из-за гипофункции яичников Немаловажную роль в этом плане играет и накопление гистамина вследствие возникновения аллергической реакции на длительные алиментарные факторы, приводящие в основном

к гипогонадотропной гипофункции яичников у коров при несбалансированных рационах и других нарушениях технологии содержания Таким образом, очевидно эозинофилы переносят продукты распада белков, обладающих антигенными свойствами, предупреждая тем самым накопление агентов в большом количестве Следовательно, адаптационно-метаболические изменения, вызванные тимогеном, носят биокоррегирующий характер и способствуют развитию окислительно-восстановительных процессов и тканевой регенерации, в том числе и в репродуктивных органах У коров 3-й и 4-й групп уровень эозинофилов колеблется без особых изменений в течение исследуемого периода, а во 2-й группе животных процент эозинофилов меняется так же, как и в 1-й группе, что указывает на влияние тимогена

Исследования бактерицидной, лизоцимной и фагоцитарной активности сыворотки крови после введения глутамил-триптгофана, свидетельствуют о достаточно выраженной иммунокорригирующей активности препарата Так, до начала обработки уровень бактерицидной активности сыворотки крови был равен 8,09±2,98%, лизоцимной активности - 15,37±1,6% и фагоцитарной активности нейтрофилов 56,8±1,85% На 5-е сутки после начала введения тимогена бактерицидная активность составила 9,58±3,41%, лизоцимная -1,86±0,64%, р<0,001 и фагоцитарная - 62,8±3,07% На 10-е сутки исследований бактерицидная активность была равной 12,53±4,28%, лизоцимная -6,91±2,28% и фагоцитарная активность - 74,8±1,62%, р<0,01 На 18-е сутки изменения показателей были следующими бактерицидная активность — 22,27±5,47%, лизоцимная - 6,19±2,55% и фагоцитарная активность -72,0±4,56%

Учитывая то, что снижение лизоцимной активности сыворотки крови у коров опытной группы происходит при определенной тенденции повышения к 18-м суткам уровня бактерицидной и фагоцитарной активности нейтрофилов, в противоположность показателям за этот период у животных контрольной группы, то, очевидно, следует считать, что это происходит вследствие активизации глутамил-триптофановым комплексом связывания лизоцима со

структурами бактериальной стенки микроорганизмов репродуктивных органов и последующему лизису их клеточных стенок У коров 2-й группы изменение лизоцимной активности было незначительно, а в 3-й и 4-й ее уровень наоборот повышался в течение исследований Бактерицидная активность так же имела противоположную направленность изменений у коров 2-й, 3-й и 4-й групп Фагоцитарная активность у животных 2-й группы так же достоверно повышалась, начиная с 5-х сут исследований, в противоположность показателям у коров 3-й и 4-й групп, где изменений не отмечено

Гистоморфологические исследования половых и вторичных иммуно-компетентных органов исследуемых коров показали, что в яичниках всех животных имеются первичные, малые и большие зреющие фолликулы, и отсутствуют желтые тела Слизистая матки у коров 1-й группы имеет набухший железистый эпителий, высокий цилиндрический с овальными ядрами, что практически отсутствует у коров 2-й группы и нет у коров 3-й группы Отмеченная картина изменений в матке коров 1 -й группы характерна для прегра-видарного состояния животных Селезенка у коров всех групп имеет хорошо различимую белую и красную пульпу с характерными этому органу образованиями, которые соответствуют его физиологическому состоянию Печень у всех исследуемых животных имеет четкий рисунок долек, балок и центральных вен Имеющиеся малокровие печени, гидратическая и баллонная дистрофия гепатоцитов, отражают нарушение белково-водно-электролитного обмена, ведущее к изменению коллоидно-осмотического давления в клетке, что, очевидно, является следствием несбалансированности рационов и нарушений технологии содержания животных, приведших, в том числе, и к возникновению гипогонадотропной гипофункции яичников

Показатели воспроизводительной функции у коров с гипофункцией яичников после ее активизации биокорректором тимоген характеризовались наименьшим индексом осеменения и лучшей оплодотворяемостью при обработке в дозе 20 мл/гол/сут, в течение 10 суток Время наступления половой цикличности так же было наименьшим в этой группе коров В опытах, где

применяли комплексную обработку животных тимогеном и сурфагоном, были получены лучшие результаты оплодотворяемости коров при введении ти-могена в той же дозе - 20 мл/гол/сут , в течение 10 суток - 75% Индекс осеменения так же был наименьшим в этой группе - 1,2, а появление половой цикличности было в те же сроки, что и у коров в первой серии опытов, где применяли один тимоген

Таблица 3 Гематологические показатели у коров после введения тимогена

№ п/п Исследуемые показатели, п=5 Время исследования

До обработки Через 5 сут Через 10 сут Через 18 сут

1 Гемоглобин, г/л 119,0±12 89 113,9,0±9,0 114,2±6,72 116,0±5,81

2 Эритроциты 3,6х10|2±0,37 3,43х 10'2±0,25 3,36х 1012±0,17 3,48х 1012±0,17

3 Лейкоциты 5,8 х 109±0,8 6,1 х 109±0,25 6,3х 109±0,9 6,0 х 109±0,07

Лейкоцитарная формула

4 базофилы, % 0 0 0 0

5 эозинофилы, % 1,6±0,68 6,0±0,95" 3,6±0,75 1,8±0,86

6 лимфоциты, % 47,2±8,85 43,2±4,51 47,0±3,44 38,4±2,09

7 моноциты,% 8,2±0,86 9,6±0,93 8,4±2,09 5,4±1,5

Нейтрофилы

8 миелоциты,% 0 0 0 0

9 юные, % 0 0 0 0

10 палочкоядер-ные, % 0 1,0±0,45 2,8±1,16 1,2±0,49

11 сегментоя-дерные, % 43,0*7,92 40,2±4,32 38,2±5,31 52,8±3,64

Исходя из вышеприведенных результатов лабораторных и клинических методов исследования физиологического состояния органов и систем, после

воздействия глутамил-триптофаиового комплекса на коров с гипофункцией яичников, можно заключить, что дипептидный биокорректор тимоген способен активизировать гипофизарно-гонадальные связи при нейро-эндокринной регуляции половой цикличности Этому способствует уровень обмена веществ в организме, определяющим который будет гормональный баланс, степень протекания его реакций, а так же формирование иммуно-гормонапьных взаимоотношений при этом

По своей направленности действия влияние тимогена на процессы метаболизма было нормализующим, что так же характеризует глутамил-триптофановый комплекс препарата, как регуляторный дипептид Возможно, разнообразные эффекты этого дипептида объясняются не его непосредственным действием, а модуляцией эффектов нервной и гуморальной регуляции, что требует дальнейшего изучения, но регуляторные пептиды и сопряженные с их функцией ферменты следует рассматривать, как сложную систему организма, определяющую реализацию приспособительных реакций на всех уровнях ее интеграции

ВЫВОДЫ

1. Глутамил-триптофан (тимоген) обладает иммуно-гормональной активностью, способствует активизации нейро-эндокринных связей и стимуляции половой цикличности у коров

2. Гормонокоррегирующее действие дипептида глутамил-триптофана, при введении коровам с гипогонадотропной гипофункцией яичников в дозе 20 мл/гол/сут - 10 суток, проявилось на 5-е сутки исследований тенденцией снижения уровня прогестерона в 2 раза и повышения кортизола на 49,5%, с последующим достоверным снижением концентрации кортизола к 10-м суткам на 16,2% от изначального уровня, против повышения этих показателей в контроле

3. Динамика белковых показателей в крови коров после введения глу-тамил-триптофанового комплекса характеризовалась

а) на 5-е сутки тенденцией повышения а-, ^-глобулинов, общего белка и достоверным снижением (на 22,2%) р -глобулинов,

б) на 10-е сутки тенденцией повышения альбуминов, р-глобулинов и достоверным снижением (на 20,0%) у-глобулинов,

в) на 18-е сутки тенденцией повышения у?-глобулинов, достоверным увеличением (на 19,0%) /-глобулинов и снижением а-глобулинов и альбуминов

4 Уровень липидных показателей после введения глутамил-триптофа-нового комплекса составил

а) на 5-е сутки достоверное повышение /(-липопротеидов, триацилглице-ролов и холестерола на 52,1, 25,0 и 12,5% соответственно

б) на 10-е сутки достоверное снижение р -липопротеидов и холестерола (на 25,0 и 18,7%), а так же повышение триацилглицеролов (на 26,6%),

в) на 18-е сутки достоверное снижение триацилглицеролов (на 21,1%) и неизменное состояние р -липопротеидов и холестерола

5 Ферментативная активность крови коров после курса обработки глу-тамил-триптофановым комплексом характеризовалась достоверным снижением к 18-м суткам уровня АсАТ от изначального в 3,7 раза

6 Активизация гипофизарно-гонадальных связей глутамил-триптофа-новым комплексом способствовала достоверному повышению к 5-м суткам содержания в крови количества эозинофилов в 3,7 раза, тенденции повышения к 18-м суткам уровня нейтрофилов сегментоядерных на 22,7%, нейтро-филов палочкоядерных в 1,2 раза и снижения содержания лимфоцитов на 18,7%, при противоположных изменениях этих показателей у коров контрольной группы

7. Изменения гуморальных показателей неспецифической резистентности коров, после введения глутамил-триптофанового комплекса составили

а) достоверное снижение к 5-м суткам лизоцимной активности в 8,2 раза и тенденцией подъема ее к 18-м суткам до значения, составляющего 40,4% от изначального уровня,

б) тенденции равномерного повышения к 18-м суткам уровня бактерицидной и фагоцитарной активности соответственно в 2,7 раза и 26,7%, против снижения или неизменного состояния этих показателей у коров контрольной группы

8 Гистологическая картина половых и вторичных иммунокомпетент-ных органов коров после введения глутамил-триптофанового комплекса характеризовалась процессами активизации фолликулогенеза в яичниках, активности маточных желез и морфофункциональными изменениями в тканях, отражающими иммунотропную активность органов

9 Эффективность применения глутамил-триптофанового комплекса (тимоген) в качестве средства, стимулирующего гипофизарно-гонадальные связи нейро-эндокринной регуляции полового цикла у бесплодных коров с гипофункцией яичников составила

а) при введении 20 мл/гол/сут, внутримышечно, в течение 10 суток — 66,6% оплодотворений через 18 суток, при индексе осеменения 1,2,

б) при введении 20 мл/гол/сут, внутримышечно, в течение 10 суток совместно с введением сурфагона на 9-е сутки, в дозе 50 мкг/гол, внутримышечно, однократно — 75,0% оплодотворений, через 16 суток, при индексе осеменения 1,2

10 Экономическая эффективность применения тимогена в качестве стимулирующего половую цикличность средства составила 11,78 рубля на 1 рубль затрат

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Биокорректор тимоген рекомендуется в качестве стимулирующего половую цикличность средства у коров с гипогонадотропной гипофункцией яичников, в дозе 20 мл/гол/сут, внутримышечно, в течение 10 суток само-

стоятельно или в комплексе с сурфагоном на 9-е сутки, в дозе 50 мкг/гол, внутримышечно, однократно

Список опубликованных работ

1 Черепченко Е О (Лопина Е О ) Оценка биологической активности тимогена при восстановлении половой цикличности у коров с гипофункцией яичников / Е О Черепченко, Н В Безбородое // Ж Ветеринарный врач - Казань, 2007 - С 65-67

2 Черепченко Е О (Лопина Е О ) Некоторые иммунологические тесты сыворотки крови с гипофункцией яичников после применения иммунокор-ректора тимоген / Е О Черепченко, Н В Безбородое // Мат Всерос науч конференции - Черкесск, 2007 - С 258

3 Черепченко Е О (Лопина Е О ) Влияние сурфагона на показатели естественной резистентности у коров с гипофункцией яичников / Е О Черепченко, Н В Безбородое // Мат XI межд конференции - Белгород, 2007 — С 145

4 Черепченко Е О (Лопина Е О ) Адаптационно-компенсаторные механизмы запуска половой цикличности у коров с гипофункцией яичников, после введения иммунокорректора тимоген / Е О Черепченко, Н В Безбородое // 1-й съезд фармакологов, ВНИВИПФиТ- Воронеж, 2007 -С 622-628.

Формат 60x84, 1/16 Уел печ л 1,0 Заказ № 1172 Тираж 100 экз Типография БВЦ

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Лопина, Евгения Олеговна

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы.

Цель и задачи исследований.

Научная новизна работы.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Публикации.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Нейрогуморальная регуляция полового цикла.

1.2. Процессы метаболизма и показатели иммунологической реактивности организма коров в основные периоды репродуктивной функции.

1.3. Адаптационно-иммунные факторы снижения уровня нейроэндо-кринной регуляции половой цикличности.

1.4. Методы и средства активизации иммунногормональных связей овариального цикла у самок.

1.4.1 Механизмы пептидной регуляции гомеостаза.

1.4.2 Гормональные и другие биологически активные средства повышения воспроизводительной функции.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Физиолого-биохимические изменения у коров при использовании в качестве стимулятора воспроизводительной функции биокорректора тимоген"

Актуальность темы. При промышленном ведении животноводства, основным технологическим вопросом является воспроизводство стада, интенсификация которого предусматривает, прежде всего, максимальное использование биологических особенностей коров путем создания для них оптимальных условий кормления и содержания. Вместе с тем, интенсивному развитию молочного скотоводства препятствует ряд факторов, обусловленных болезнями половых органов самок. Ветеринарная практика в настоящее время располагает значительным арсеналом средств фармакопрофилактики и лечения основных заболеваний воспроизводительных органов сельскохозяйственных животных, но изучение физиологии воспроизводства, причин, снижающих оплодотворяемость и на их основе изыскание и внедрение новых средств борьбы с бесплодием и яловостью самок, является весьма актуальной проблемой животноводства. Наиболее надежным и физиологически оправданным за последнее время, следует, например, считать применение с целью активизации половой цикличности пептидного биокорректора тимо-ген, который обладает выраженными иммуностимулирующими свойствами (Арион В.Я., 1981; Загородняя Э.Д., 1990; Гомазков О.А., 1992; Жоголев К.Д., 1992; Гречко А.Т., 1998; Забродский П.Ф., 1999; Смирнов B.C., 2004).

Подобный подход основан на использовании существующей в организме универсальной системы биорегуляции, действующей посредством клеточных медиаторов, представляющих собой относительно короткие аминокислотные последовательности. Основной функцией этих молекул в последующем, является селективная передача информации при взаимодействии клеток иммунной, нервной и эндокринной систем.

Цель и задачи исследований. Целью работы было определение механизмов активизации функциональных связей органов нейро-эндокринной регуляции половой цикличности у коров глутамил-триптофаном и эффективности его применения для повышения воспроизводительной функции.

Для достижения цели были поставлены на разрешение следующие задачи:

- определить динамику стероидных гормонов в крови коров с гипофункцией яичников, до и после введения дипептида глутамил-триптофан (тимоген);

- изучить влияние дипептида глутамил-триптофана на морфологические и биохимические показатели крови подопытных коров;

- выявление характера гистоморфологических изменений в половых и вторичных иммунокомпетентных органах у подопытных животных;

- определение показателей естественной резистентности, до и после применения тимогена;

- определение эффективности применения тимогена, как биотехнологического метода повышения оплодотворяемости коров с функциональной недостаточностью яичников.

Научная новизна работы. Впервые комплексными исследованиями гематологического, гормонального и иммунологического статуса установлена иммуно-гормональная активность пептидного биокорректора тимоген, способствующая стимуляции гипофизарно-гонадальных связей в системе нейро-эндокринной регуляции половой цикличности у коров. Определена степень и направленность действия глутамил-триптофанового комплекса, способствующая опосредованной индукции кортистероидов и дальнейшей стимуляции воспроизводительной функции.

Теоретическая и практическая значимость работы. В работе дано научное и практическое обоснование к использованию в ветеринарной практике биотехнологического метода стимуляции половой функции у коров с гипофункцией яичников на фоне стимулирующего действия глутамил-триптофанового комплекса. Результаты проведенных исследований расширяют существующие представления о механизмах иммунно-гормональной регуляции половой цикличности пептидными регуляторами, как имеющих максимально физиологическую направленность действия и являющихся экологически чистыми для организма животных.

Предложенные производству способы стимуляции половой цикличности и повышения оплодотворяемости, при недостаточной функции яичников синтетическим препаратом тимоген, обеспечивают повышение рентабельности молочного скотоводства и рекомендуются к применению во время проведения акушерско-гинекологической диспансеризации животных.

Положения, выносимые на защиту.

1. Глутамил-триптофан (тимоген) обладает глюкокортикоидной активностью, индуцирующей нейроэндокринные связи половой цикличности у коров с гипофункцией яичников.

2. Активизация процессов метаболизма под воздействием глутамил-триптофанового комплекса, способствует повышению уровня естественной резистентности и запуску половой цикличности у коров.

3. Картина гистоструктурных изменений в тканях половых и вторичных иммунокомпетентных органах коров с пониженной гипофизарно-гонадальной активностью, свидетельствует о выраженном биокорригирую-щем влиянии дипептида тимоген.

4. Применение биокорректора тимоген коровам с гипофункцией яичников, способствует индукции половой цикличности и последующей оплодотворяемости.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены: на научно-производственной международной конференции Белгородской ГСХА «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения», 2007 г.; Всероссийской научно-практической конференции Карачаево-Черкесской ГТА «Молочное и мясное скотоводство: состояние и перспективы в Южном Федеральном округе», 2007; Первом съезде ветеринарных фармакологов России, ГНУ ВНИВИ патологии, фармакологии и терапии, г. Воронеж, 2007 г.

Публикации.

1. Черепченко Е.О. (Лопина Е.О.) Оценка биологической активности тимогена при восстановлении половой цикличности у коров с гипофункцией яичников / Е.О. Черепченко, Н.В. Безбородов // Ж. Ветеринарный врач. -Казань, 2007.-С.65-67.

2. Черепченко Е.О. (Лопина Е.О.) Влияние сурфагона на показатели естественной резистентности у коров с гипофункцией яичников / Е.О. Черепченко, Н.В. Безбородов // Мат. XI межд. конференции. - Белгород, 2007. -С. 145.

3. Черепченко Е.О. (Лопина Е.О.) Некоторые иммунологические тесты сыворотки крови с гипофункцией яичников после применения иммунокор-ректора тимоген / Е.О. Черепченко, Н.В. Безбородов // Мат. Всерос. науч. конференции. - Черкесск, 2007. - С. 258.

4. Черепченко Е.О. (Лопина Е.О.) Адаптационно-компенсаторные механизмы запуска половой цикличности у коров с гипофункцией яичников, после введения иммунокорректора тимоген / Е.О. Черепченко, Н.В. Безбородов // 1-й съезд фармакологов, ВНИВИПФиТ - Воронеж, 2007. - С. 622628.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Физиология", Лопина, Евгения Олеговна

ВЫВОДЫ

1. Глутамил-триптофан (тимоген) обладает иммуно-гормональной активностью, способствует активизации нейро-эндокринпых связей и стимуляции половой цикличности у коров.

2. Гормонокорригирующее действие дипептида глутамил-триптофан, при введении коровам с гипогонадотропной гипофункцией яичников в дозе 20 мл/гол/сут. - 10 суток, проявилось на 5-е сутки исследований тенденцией снижения уровня прогестерона в 2 раза и повышения кортизола на 49,5%, с последующим достоверным снижением концентрации кортизола к 10-м суткам на 16,2% от изначального уровня, против повышения этих показателей в контроле.

3. Динамика белковых показателей в крови коров после введения глу-тамил-триптафанового комплекса характеризовалась: а), на 5-е сутки, тенденцией повышения а/-глобулинов, общего белка и достоверным снижением (на 22,2%) р-глобулинов; б), на 10-е сутки, тенденцией повышения альбуминов, р-глобулинов и достоверным снижением (на 20,0%) /-глобулинов; в), на 18-е сутки, тенденцией повышения р-глобулинов, достоверным увеличением (на 19,0%) /-глобулинов и снижением а -глобулинов и альбуминов.

4. Уровень липидных показателей, после введения глутамил- трипто-фанового комплекса составил: а), на 5-е сутки, достоверное повышение /?-липопротеидов, триацилгли-церолов и холестерола на 52,1; 25,0 и 12,5% соответственно. б), на 10-е сутки, достоверное снижение /?-липопротеидов и холестерола (на 25,0 и 18,7%), а так же повышение триацилглицеролов (на 26,6%); в), на 18-е сутки, достоверное снижение триацилглицеролов (на 21,1%) и неизменное состояние /?-липопротеидов и холестерола.

5. Ферментативная активность крови коров после курса обработки глутамил-трилтофановым комплексом, характеризовалась достоверным снижением к 18-м суткам уровня АсАТ от изначального в 3,7 раза.

6. Активизация гипофизарно-гонадальных связей глутамил-триптофановым комплексом, способствовала достоверному повышению к 5-м суткам содержания в крови количества эозинофилов в 3,7 раза, тенденции повышения к 18-м суткам уровня нейтрофилов сегментоядерных на 22,7%, нейтрофилов палочкоядерных в 1,2 раза и снижения содержания лимфоцитов на 18,7%, при противоположных изменениях этих показателей у коров контрольной группы.

7. Изменения, гуморальных показателей неспецифической резистентности коров, после введения глутамил-триптофановош комплекса составили: а), достоверное снижение к 5-м суткам лизоцимной активности в 8,2 раза и тенденцией подъема ее к 18-м суткам до значения составляющего 40,4% от изначального уровня; б), тенденции равномерного повышения к 18-м суткам уровня бактерицидной и фагоцитарной активности соответственно в 2,7 раза и 26,7%, против снижения или неизменного состояния этих показателей у коров контрольной группы.

8. Гистологическая картина половых и вторичных иммунокомпетент-ных органов коров после введения глутамил-триптофанового комплекса характеризовалась процессами активизации фолликулогенеза в яичниках, активности маточных желез и морфофункциональными изменениями в тканях отражающими иммунотропную активность органов.

9. Эффективность применения глутамил-триптофанового комплекса (тимоген), в качестве средства стимулирующего гипофизарно-гонадальные связи нейро-эндокринной регуляции полового цикла у бесплодных коров с гипофункцией яичников составила: а). при введении 20 мл/гол/сут., внутримышечно, в течение 10 суток -66,6% оплодотворений через 18 суток, при индексе осеменения 1,2; б), при введении 20 мл/гол/сут., внутримышечно, в течение 10 суток совместно с введением сурфагона на 9-е сутки, в дозе 50 мкг/гол., внутримышечно, однократно - 75,0% оплодотворений, через 16 суток, при индексе осеменения 1,2.

10. Эффективность применения тимогена в качестве стимулирующего половую цикличность средства, составила 11,78 рубля на 1 рубль затрат.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Биокорректор тимоген рекомендуется в качестве стимулирующего половую цикличность у коров с гипофункцией яичников средства, в дозе 20 мл/гол/сут., внутримышечно, в течение 10 суток самостоятельно или в комплексе с сурфагоном на 9-е сутки, в дозе 50 мкг/гол., внутримышечно, однократно.

Заключение

Как отмечено, репродуктивная функция самок животных представляет собой сложную систему взаимоотношений между всеми органами организма, которая в наибольшей степени активизируется в период половой цикличности. Основой этих связей, как известно, является нейроэндокринная регуляция, которая формирует и контролирует по системе прямых и обратных связей характер и степень сложных биохимических реакций во всем организме самок от одной стадии возбуждения до другой.

Изучение и раскрытие механизмов нейро-эндокринной регуляции воепроизводительной функции у самок животных, равно как изучение и внедрение методов стимуляции и коррекции протекания половой цикличности с последующей оплодотворяемостью, является весьма актуальной проблемой животноводства.

Формирование концепции пептидной регуляции биологических функций организма, позволило наряду с известными и распространенными методами стимуляции и коррекции функции репродуктивной системы самок, рекомендовать к применению препараты на основе регуляторных пептидов. В результате исследований показано, что дипептиды, например, не обладая, какой-то определенной специфичностью, способны восстанавливать нарушенный гомеостаз организма, а, следовательно, и создавать весьма благоприятные условия для физиологической коррекции и индукции половой цикличности.

Предложенный к применению тимоген, является дипептидом Glu -Тгр, который обладает выраженной иммунобиологической активностью и позволяет на основе имеющейся в организме универсальной системы биорегуляции, действующей посредством клеточных медиаторов состоящих из коротких аминокислотных последовательностей, осуществлять селективную передачу информации при взаимодействии клеток иммунной, нервной и эндокринной систем.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Научно-производственные опыты и основные исследования проведены на коровах черно-пестрой породы в ОАО «Агро-Стрелецкое» Белгородского района на поголовье с годовым удоем 4800 кг, находящихся в условиях МТФ на привязи в зимний период года, и с выгоном на летний период в открытые прифермские загоны. Рацион кормления животных был не всегда сбалансирован по основным питательным компонентам. Хозяйство благополучно по инфекционным и инвазионным заболеваниям.

Формирование опытных групп животных осуществляли на основе данных зоотехнического учета их физиологического состояния и после клинического и гинекологического обследования. В сравниваемых группах подбирали пары-аналоги коров по породной принадлежности, возрасту, предшествующей продуктивности, живой массе, стадиям полового цикла.

Группы формировали из числа коров, находящихся в состоянии анаф-родизии по причине гипогонадотропной гипофункции яичников (Дедов И.И., Мельниченко Г.А., 2006). Наличие данной дисфункции яичников определяли на основании ректальных исследований репродуктивных органов и данных техника-осеменатора на ферме. Коров в состоянии половой охоты выявляли визуально по рефлексу неподвижности, и при проявлении всех феноменов присущих стадии полового возбуждения у самок. В опыты по изучению влияния различных схем обработки на восстановление половой цикличности и оплодотворяемости, отбирали животных, не пришедших в состояние половой охоты (анафродизия) по истечении не менее 60 суток после отела. Осеменение опытных коров проводили маноцервикальным методом двукратно (с 12 часовым интервалом). Стельность после проведенной обработки коров определяли ректальным исследованием комиссионно через 3 месяца после осеменения.

В качестве средства для восстановления воспроизводительной функции у коров с недостаточностью гипофизарно-гонадальной взаимосвязи (гипофункция яичников), использовали синтетический биокорректор тимоген.

Тимоген, представляет собой дипептид являющийся индивидуальным иммуноактивным компонентом препаратов тимуса. В его состав входят глу-таминовая кислота и триптофан (рис. 1).

NH ОН

NH

Рис. 1. Структурная формула L-глутамил-Ь-триптофана (тимоген).

Исследования иммуномодулирующих свойств тимогена показало высокое сродство дипептида с мембранными рецепторами тимоцитов. Имму-номодулирующие свойства дипептида реализуются путем трансляции содержащегося в нем сигнала через систему вторичных посредников, часть из которых также имеет пептидную природу. Именно эти качества глутамил-триптофана обуславливают широкий спектр биокоррегирующих свойств и эффективность применения этого комплекса в разных областях ветеринарии.

На основании результатов предварительно проведенного, комплексного изучения эффективности препарата тимогена на различных экспериментальных животных, в 1991 году Главным управлением ветеринарии с государственной ветеринарной инспекцией Государственного АПК СССР были утверждены Технические условия и наставления на применение его в ветеринарии (ТУ 10.07.169-91).

В качестве сравниваемого средства активизации гипофизарно-гонадальных связей у коров был использован препарат сурфагон (аналог Гн-РГ), который применяется в настоящее время в качестве базисного отечественного препарата при устранении бесплодия у коров с дисфункцией яичников.

Основные лабораторные исследования проведены на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии Белгородской ГСХА, в Белгородской областной ветеринарной лаборатории, вирусологической лаборатории Центра Госсанэпиднадзора Белгородской области и паталого-анатомической лаборатории гор. больницы №2 г. Белгорода.

Всего в опытах было использовано 107 коров, на которых были проведены исследования по следующей схеме (рис. 2).

Для изучения морфо-биохимических показателей крови были подобраны четыре группы коров (п=24), которые имели гипогонадотропную (ректальные исследования) гипофункцию яичников.

Первой опытной группе коров (п=5) коров вводили тимоген в дозе 20/мл/гол/сут. 0,01% ра-ра, внутримышечно в течение 10 сут. Второй опытной группе (п=6) вводили тимоген в аналогичной дозе и сурфагон - 50 мкг/гол однократно внутримышечно, на 9-е сутки. Третьей группе (п=6) животных вводили один сурфагон в той же дозе. Четвертая группа (п=6) - контрольная с наличием гипогонадотропной гипофункции яичников (препараты не вводили).

Рис. 2. Алгоритм исследований

Кровь на исследования отбирали у коров четыре раза: до введения препаратов; на 5-е; 10-е и 18-е сутки.

1. Исследования содержания половых стероидов в крови.

Количественные определения в сыворотке крови таких стероидных гормонов вырабатываемых в яичнике, как прогестерон и эстрадиол-17/7, а также производимых в надпочечниках - кортизол, проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (Инструкция Департамента государственного контроля качества, эффективности безопасности лекарственных средств и медицинской техники МЗ РФ от 05.01.2001 г., а также методики ООО «Хемамедико», 2000 г.). Данные измерения основаны на показаниях спектрофотометра оптической плотности связанных гормонов со специфическими антителами, фиксированными в твердой фазе, с последующим расчетом их концентрации по калибровочной кривой.

2. Определение биохимических показателей в крови подопытных животных.

Определение общего белка проводили по методике, основанной на взаимодействии белков с ионами меди в щелочной среде (окраска синего цвета). Фотометрическое определение интенсивности окраски давало результат соответствующей концентрации общего белка в пробе.

Триацилглицерол определяли путем катализирования липазной реакции гидролиза триацилглицерола с образованием жирных кислот и эквимо-лярного количества глицерина. Глицерин при наличии АТФ гексокиназы и глицерофофсфатоксидазы окислялся кислородом воздуха с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Пероксидаза катализировала окисление хромогенных субстратов перекисью водорода в присутствии хлорфенола с образованием окрашенного продукта, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации триацилглицерола в пробе, что измерялось фотометрически.

Для определения холестерола использовали методику гидролиза эфиров холестерола холестеринэстеразой. Образовавшийся в результате гидролиза и имеющийся в пробе холестерол, окислялся кислородом воздуха под действием холестериноксидазы с образованием эквимолярных количеств перекиси водорода. В свою очередь, под действием пероксидазы перекись водорода окисляла хромогенные субстраты с образованием окрашенного соединения, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации холестерола в пробе, что также измерялось фотометрически.

Определение альбуминов, а,р,/-глобулинов в сыворотке крови проводили методом электрофореза на бумаге. Принцип метода состоит в том, что смесь белков под воздействием постоянного электрического поля при определенном градиенте потенциалов и рН среде разделялась на фракции. Число и величина фракций выявлялась обработкой бумажных полос красками, окрашивающими белки, с последующим количественным определением белковых фракций методом элюирования краски.

Определение иммуноглобулинов проводили нефелометрически. Метод основывался на измерении степени помутнения осадка, образующегося при взаимодействии иммуноглобулина с сульфатом цинка.

Определение /?-липопротеидов проводили турбидиметрическим методом.

Для определения активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) использовали унифицированный метод Райтмана-Френкеля. Аланинами-нотрансфераза катализировала в присутствии а -кетоглутарата переамини-рование L-аланина с образованием пирувата. Его содержание в пробе определяли фотометрически.

Активность аспартатаминотрансферазы также определяли унифицированным методом Райтмана-Френкеля. АсАТ катализировала в присутствии а -кетоглутората переаминирование L-аспартата с образованием окса-лоацетата. Его содержание в пробе измерялось фотометрически.

Для определения активности щелочной фосфатазы (ЩФ), применяли унифицированный метод по «конечной точке». Щелочная фосфатаза катализирует реакцию гидролиза n-нитрофенилфосфата с образованием экви-молярного количества n-нитрофенола и фосфата. Скорость образования п-нитрофенола прямо пропорциональна активности ЩФ и измерялась фотометрически.

Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроко-лометрическим методом в модификации отдела зоогигиены УНИИЭВ (1979) с применением суточной культуры Micrococcus lysodeiticus, содержащей 500 млн. микробных тел в 1 мл. Непрямая количественная реакция лизоцима основана на его способности вызывать лизис бактерий.

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли фотонефе-лометрическим методом по методике отдела зоогигиены УНИИЭВ (1979) с использованием суточной агаровой культуры Е. Coli, содержащей 2 млрд. микробных тел в 1 мл. Метод заключается в учете изменений оптической плотности среды, содержащей микробную взвесь и сыворотку крови, вследствие угнетения размножения тест микроба испытуемой сывороткой.

Определение фагоцитарной активности нейтрофилов осуществляли по методу В.М. Бермана, Е.М. Славской (1958). Метод основан на учете числа бактерий, захваченных нейтрофилами в процессе их совместного инкубирования в термостате.

Подсчет количества эритроцитов проводили колориметрированием на ФЭК-56 М, смешивая 3% раствор хлорида натрия и пробы крови.

Дифференциальный подсчет лейкоцитов (лейкограмму) проводили согласно их способности по-разному окрашиваться под воздействием красителя Романовского-Гимза и последующей дифференциации их форм под микроскопом с иммерсионной системой.

Гемоглобин определяли путем измерения оптической плотности гемо-лизированного раствора исследуемой пробы крови на аппарате ФЭК-М.

3. Изучение гистоструктурных изменений в половых и вторичных иммунокомпетентных органах.

Исследования проводили на гистопрепаратах органов коров с гипого-надотропной гипофункцией яичников подобранных в три группы. Первой группе (п=3) животных вводили тимоген в дозе 20 мл/гол/сут., внутримышечно - 10 суток. Второй группе (п=3) вводили тимоген в аналоговой дозе и сурфагон в дозе 50 мкг/гол, внутримышечно однократно на 9-е сутки. Третья группа животных (п=3) контрольная (препараты не вводили).

У всех животных спустя 4 суток после окончания курса введения препаратов и последующего забоя производили отбор патматериала (яичники, матка, селезенка, печень) для приготовления гистопрепаратов. Консервацию отобранного патматериала производили 10%-ным раствором нейтрального формалина. Окрашивание гистосрезов проводили гематоксилин-эозином согласно методам классической гистотехники. Микроскопическое исследование, фотодокументирование материалов проводили на микроскопе JIOMO Микмед-2 при помощи компьютерной программы «Видео Тест-Мастер морфология».

Полученный цифровой материал обработан статистически. При определении достоверности разницы между показателями контрольных и опытных групп использовали аргумент Стъюдента и таблицу Фишера-Снедока по вычислению критерия достоверности. Результаты рассматривались как достовернее начиная со значения р<0,05.

4. Для определения эффективности применения биокорректора тимоген в качестве средства активизации половой цикличности у коров с гипого-надотропной гипофункцией яичников были подобраны 6 групп коров. 1-й (п=15), 2-й (п=12), 3-й (п=12) группам животных вводили внутримышечно тимоген 0,01% раствор, в дозе 10, 20 и 30 мл/гол/сут. соответственно, в течение 10 суток. Коровам 4-й (п=14), 5-й (п=12) и 6-й (п=13) групп, к аналогичным дозам тимогена, дополнительно на 9-е сутки вводили, внутримышечно, сурфагон (базово применяемый препарат) в дозе 50 мкг/гол., однократно. Учет эффективности контролировали в течение 30 суток после курса обработки, по показателям времени наступления половой цикличности, количеству осеменений, проценту оплодотворенных животных и индексу осеменения.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 Биохимические и морфологические показатели крови после введении глутамил-триптофана (тимоген)

Полученные данные по динамике стероидных гормонов в крови коров до и после введения глутамил-триптофанового комплекса тимогена в дозе 20 мл/гол/сут. - 10 суток (1-я группа), свидетельствует о наличии малодостоверных изменений у большинства показателей (табл. 1).

Так содержание эстрадиола-17/?, прогестерона и кортизола, до начала введения тимогена у коров с гипогонадотрогшой гипофункцией яичников составило 0,279±0,05; 2,74±1,12 и 70,5±25,03 нмоль/л, что соответствовало нижней границе физиологических показателей этих гормонов у коров в сервис-периоде.

На 5-е сутки исследований, количество эстрадиола-17/? практически не изменилось - 0,228±0,029 нмоль/л, прогестерон составил 1,37±,034 нмоль/л (снижение на 50%) и кортизол - 104,7±34,64 нмоль/л (повышение на 48,5%).

На 10-е сутки исследований, содержание эстрадиола-17/? и прогестерона практически не измеиилось, а кортизола достоверно (р<0,001) снизилось в 1,7 раза от предыдущего значения, и составило 59,12±4,81 нмоль/л.

К 18-м суткам исследований уровень эстрадиола-17/? остался прежним - 0,29±0,07 нмоль/л, прогестерон также не изменился - 1,86±0,4 нмоль/л, а кортизол имел тенденцию незначительного повышения (на 3,8%) и был равен 61,41 ±20,25 нмоль/л.

Исследование показателей белкового обмена в крови коров 1-й группы показало (табл. 2), что до начала введения тимогена содержание общего белка было 76,42±0,64 г/л, альбуминов - 38,38±2,6% а-глобулинов -10,88±1,78%, глобулинов — 23,08±0,85% и ^-глобулинов - 27,68±1,17%. Уровень иммуноглобулинов составил 19,68±0,43 ед. Содержание альбуминов, а -глобулинов и ^-глобулинов находилось в пределах нижней границы физиологических значений.

На 5-е сутки исследований было отмечено достоверное повышение (на 10%) количества общего белка до 84,04±1,3 г/л, уровень альбуминов остался без изменений - 38,3±1,98%, а-глобулины имели тенденцию повышения (на 27,4%) и составили 13,76±1,25%, р-глобулины наоборот снизились (на 22,2%) и были равны 17,9±1,13%, р<0,001, а уровень /-глобулины повысился незначительно (на 8,6%) и составил 30,04±1,71%. Содержание иммуноглобулинов находилось в пределах 18,36±1,1 ед., что было меньше предыдущего показателя на 6,4%.

Изменения показателей белкового обмена в крови коров к 10-м суткам исследований характеризовались практически неизменным уровнем общего белка - 85,16±1,3 г/л. Количество альбуминов составило 41,8±2,1%, что на 9,1% больше предыдущего показателя. Глобулиновые фракции белка соста

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Лопина, Евгения Олеговна, Белгород

1. Аббасов Б.К. Физиологические основы гормональной регуляции функций воспроизводства у коров: автореф. дис. . канд. биол. наук / Б.К. Аббасов. Алма-Ата, 1982.

2. Агаджанян Н.А. Организм и газовая среда обитания / Н.А. Агаджанян. М.: Медицина, 1972. - 247 с.

3. Админ Е.И. Адаптация коров к режимам доения и содержания в условиях промышленной технологии / Е.И. Админ // Проблемы технологии при интенсификации производства молока. Тарту, 1984. - С. 1618.

4. Айламазян Э.К. Акушерство / Э.К. Айламазян // Сиб.: Спец. лит., 2002. 536 с.

5. Айламазян Э.К. Морфофункциональные особенности амниона при нормальной и патологической беременности / Э.К. Айламазян, Е.П. Калашникова, А.И. Танаков // Акушерство и гинекология. 1993. - № 5.-С. 3-6.

6. Алиев А.А. Динамика концентрации ЛГ, прогестерона и эстрадиола М-р в крови, в период полового цикла и начальных стадий стельности / А.А. Алиев, Г.Е. Петров, А.Н. Григорьев // Докл. ВАСХНИЛ. -1991.-№ 9.- С. 36-39.

7. Аргунов М.Н. Разработка применение новых экологически безопасных фосфатов в животноводстве и ветеринарии / М.Н. Аргунов, Л.Б. Сафонова // Мат. науч. конф. ВГАУ // Воронеж, 1997. Ч. 2. - С. 1112.

8. Арион В.Я. Иммунологически активные факторы тимуса // Иммунология / ВИТИНИ. М., 1981. Т. 9. - С. 10-50.

9. Артемов М.Н. Разработка и применение новых экологически безопасных фосфатов в животноводстве и ветеринарии / М.Н. Артемов, Л.И.

10. Ефанова, В.И. Дынин // Иммунодефициты с.-х. животных. Тез. докладов.-М.: 1994.-С. 23-24.

11. Асоев П. Применение гонадотропных препаратов в послеродовом периоде с целью повышения воспроизводительной функции у коров / П. Асоев, А. Ниятбеков // 1-й съезд вет. фармакологов. Воронеж. 2007. -С. 99-100.

12. Афанасьев И.Н. Морфологические и биохимические показатели крови и эндометрия у бесплодных коров бурой латвийской породы: авто-реф. дис. докт.вет.наук / И.Н. Афанасьев. Львов, 1972. - 40 с.

13. Ашмарин И.П. Регулярные пептиды, резикционально-непрерывная совокупность / И.П. Ашмарин, М.Ф. Обухова // Биохимия. 1986. - Т. 51.-№4.-С. 531-545.

14. Бабичев В.Н. Нейрогормональная регуляция овариального цикла / В.Н. Бабичев. М.: Медицина, 1984. - 237 с.

15. Багламонов М.А. Некоторые морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови коров до и после родов / М.А. Багламонов, Р.Н. Мухаметгалиев // Мат. межд. конф., Казань, 2001. 4.2. -С. 11-12.

16. Банков Н. Современни проблеми на регулирането и интензифицира-нето на размножителния процесс при селекостопанските животни / Н. Банков // София. 1983. - № 7. - С. 41-46.

17. Баранников В.Д. Действие некоторых стресс-факторов на организм телят / В.Д. Баранников, Г.К. Волков, Н.С. Маковлева и др. // Ветеринария. 1997. - № 10. - С. 28-29.

18. Безбородое Н.В. Приемы повышения оплодотворяемости в молочном скотоводстве / Н.В. Безбородое, М.Ю. Пальчиков, А.В. Никулан // Методическое пособие // Белгород, 2004. 37 с.

19. Беклемишев Н.Д. Иммунология и иммунорегуляция / Н.Д. Беклемишев. М.: Медицина, 1990. - С. 528.

20. Бельков Г.И. Сравнительное действие аминазина и ромпуна на снижение потерь живой массы крупного рогатого скота при транспортировке / Г.И. Бельков Н.В. Курцев, Н.С. Жуков // Науч. труды ВНИИ мясного животноводства. 1978. - Т. 23. - 4.1. - С. 145-148.

21. Белокрылов Г.А. Сходство иммунофагоцитозстимулирующих и антитоксических свойств дипептидов и составляющих их аминокислот / Г.А. Белокрылов, О .Я. Попова, Е.И. Сорочинская // Бюлл. эксперим. биол. мед., 1999. Т. 127. - № 6, - С. 674-676.

22. Беляев В.И. Иммунодефицит телят, обусловленный нарушением технологии содержания и кормления стельных коров // Иммунодефицита с.-х. животных: Тез. докл. 1-й Всеросс. науч. конф. М.: 1994. - С. 4667.

23. Битюков И.П. Содержание глюкозы в крови коров в послеродовой период / И.П. Битюков // Тр. ВИЭВ. М., 1970. - Т. 37. - С. 226-230.

24. Боа Антонио Педро Стероидопродуцирующая функция у нетелей при естественном и искусственном осеменение: автореф. дис. . канд. вет. наук / А.П. Боа. Воронеж, 1996. - 23 с.

25. Бодяжина В.И. Акушерство / В.И. Бодяжина, К.Н. Жмакин, А.П. Ки-рющенко. Курск, 1995. - 496 с.

26. Болотников И.А. Стресс и иммунитет у птиц / И.А. Болотников, B.C. Михкиева, Е.К. Олейник. JL: Наука, 1983. - 118 с.

27. Бузлама B.C. Влияние тимогена на гомеостаз глюкозы при проокси-дантной нагрузке / B.C. Бузлама, И.В. Трутаев //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007. - С. 158-163.

28. Бурлаков И.В. Функциональная активность надпочечников свинок в связи со стадией полового цикла / И.А. Бурков, Т.В. Трубицына // Науч. тр. ВНИИФБиП, 1983. Т. 27. - С. 91-97.

29. Бурлакова Е.Б. Воздействие химических агентов в сверхмалых дозах на биологические объекты / Е.Б. Бурлакова, А.А. Конрадов, И.В. Худ-лков // Изв. АНСССР. Сер. биол. - 1990. - № 2. - С. 184-193.

30. Буянов А.А. Рекомендации по диагностике, гормональной дисфункции и терапии у коров // А.А. Буянов. JL, 1984. - С. 8-9.

31. Буянов А.А. Патофизиологическое обоснование новых принципов применения гормональных препаратов при функциональных расстройствах яичников у коров // Вет. обеспечение крупных животноводческих комплексов на промыш. основе. Л., 1982. - С. 43-44.

32. Бэйрд Д.Т. Яичник // Гормональная регуляция размножения у млекопитающих / Д.Т. Бэйрд // М.: Мир, 1987. Гл. 5. - С. 118-144.

33. Васильев М.Ф. Иммунологические основы лечения больных кетозом и родившихся от них телят: автореф. дис. . д-ра вет. наук / М.Ф. Васильев. СПб., 1996.-35 с.

34. Васильев P.M. Иммунологический статус коров до и после родов / P.M. Васильев // Мат. науч. конф. Казань, 2001. 4.2. - С. 20-22.

35. Введение в перинатальную медицину / H.JI. Гармащева и др.. М.: Медицина, 1978.-84 с.

36. Власов С.А. Гормональный профиль коров с фетоплацентарной недостаточностью / С.А. Власов, А.С. Лободин, Т.А. Пикалова, B.C. Сапожников // Ветеринария. 1993. -№ 10. - С. 33-34.

37. Вольф Й. Чтобы из теленка выросла хорошая корова / Й. Вольф, Б. Янки, Б. Лозанд // Новое сельское хозяйство. 2001. - № 1. - С. 30-33.

38. Волосков П.А. Основы борьбы с бесплодием крупного рогатого скота / П.А. Волосков // М.: Сельхозиз., 1960. 208 с.

39. Воробьев Н.Н. Профилактика эмбриональной смертности приплода / Н.Н. Воробьев // Животноводство. 1980. - № 7. - С. 33-35.

40. Воронин Е.С. Иммунология / Е.С.Воронин, A.M. Петров, М.М. Серых, Д.А. Девришов. М.: Колос, 2002. - 408 с.

41. Галактионов В.Г. Иммунология / В.Г. Галактионов. М.: МГУ, 1998. - 480 с.

42. Говырин В.А. Лиганд-рецепторные взаимодействия в молекулярной физиологии / В.А. Говырин, Б.С. Жоров. СПб.: Наука, 1994. - 240 с.

43. Гомазков О.А. Функциональная биохимия регуляторных пептидов / О.А. Гомазков. М.: Наука, 1992. - 160 с.

44. Горизонтов П.Д. Резистентность и поражение: Вопросы общей патологии / П.Д. Горизонтов // Патологическая физиология экстремальных состояний. М.: Медицина, 1973. - С. 7-35.

45. Горизонтов К.Д. Стресс: система крови в механизме гомеостаза / К.Д. Горизонтов. М.: Медицина, 1978. - 84 с.

46. Горин B.C. Белки амниотической жидкости при физиологической беременности / B.C. Горин, P.M. Зорина // Акушерство и гинекология. -1987.-№6.-С. 85-91.

47. Гордон А. Контроль воспроизводства сельскохозяйственных животных: Пер. с англ. / А. Гордон. М.: Агропромиздат, 1988. - 237 с.

48. Горышина Е.Н. Сравнительная гистология тканей внутренней среды с основами иммунологии / Е.Н. Горышина, О.Ю. Чага. Л., 1990. -320 с.

49. Григорьева Т.Е. Обмен веществ у коров больных эндометритом / Т.Е. Григорьева, Л.Е. Леонтьев // Ветеринария. 1987. - № 9. - С. 47.

50. Григорьева Т.Е. Профилактика алиментарного и симптоматического бесплодия у коров, обусловленного минеральной недостаточностью: автореф. дис. . докт. вет. наук / Т.И. Григорьева. Воронеж, 1994. -46 с.

51. Грин Н. Биология: в 3 Т.; Пер. с англ. / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлер. -М.: Мир, 1990. Т. 2. 209-223 с.

52. Гречко А. Контроль воспроизводства сельскохозяйственных животных: Пер. с англ. / А. Гречко. М.: Агропромиздат, 1988. -237 с.

53. Губаревич Я.Г. Влияние некоторых медикаментозных средств на сократительную деятельность матки коров / Я.Г. Губаревич, В.М. Вос-кобытников // Ученые записки Витебского вет. ин-та. Минск: Урад-жай, 1970.-Т. 22-С. 85-91.

54. Гугушвили Н.Н. Коррекция иммунного статуса организма коров фитопрепаратами / Н.Н. Гугущвили // Современные вопросы вет. мед. и биол. / Мат. науч. конф. Уфа, 2000. - С. 108-111.

55. Дашукаева К.Г. Эндокринные аспекты фетоплацентарной недостаточности у коров в связи с гипофункцией половых желез и ее профилактика / К.Г. Дашукаева: автореф. дис. докт. вет. наук / К.Г. Дашукаева. Воронеж, 1997. - 291 с.

56. Дашукаева К.Г. Гормональные изменения в системе мать-плод у высокопродуктивных коров при разном уровне их плодовитости и времени оплодотворения / К.Г. Дашукаева: автореф. дис. . канд. вет. наук /К.Г. Дашукаева. Воронеж, 1992. - 20 с.

57. Джамбулатов М.М. Белково-углеводный статус организма коров при включении в их рацион биологически активного препарата мекцин / М.М. Джамбулатов, А.А. Алиев, З.М. Ханбабаева //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007. - С. 241-245.

58. Дедов Ю.М. Применение гонадотропин-рилизинг-гормона (сурфагон) для повышения оплодотворяемости молочных коров // Биотехнология размножения с.-х. животных. ВИЖ. 1989. - Вып. 95. - С. 22-24.

59. Дедов И.И. Рациональная фармакотерапия заболеваний эндокринной системы и нарушений обмена веществ / И.И. Дедов, Г.А. Мельниченко. М.: Литерра, 2006. - 1080 с.

60. Демидов С.В. Влияние препаратов тимуса и противотуберкулезных средств на иммунологическую реактивность и течение туберкулезного процесса у экспериментальных животных // Пробл. туберкулеза. -1991.-№12.-С. 52-54.

61. Денисенко В.Н. Влияние сезонности на естественную резистентность коров матерей и приплода / В.Н. Денисенко, О.Н. Грызлова, Г.Н. Печникова, П.А. Емельяненко // Ветеринария. - 1987. - № 1. - С. 5356.

62. Деряна Н.Р. Экологические особенности Севера и Крайнего Севера / Н.Р. Деряна, З.И. Барбашова, Н.П. Неверова // Экологическая физиология человека. Л.: Наука, 1980. - С. 7-18.

63. Дойчев С. Промени в серумните белтьци кравата пред различните пе-риоди на размножителиня процесс / С. Дойчев // Ветер. Мед. науки, 1974.-11,2.-С. 35-42.

64. Долженков В.М. Влияние различных гормональных обработок на воспроизводительную способность и гормональный статус у коров с гипофункцией яичников // Сб. науч. трудов. Боровск, 1983. - Т. 27. - С. 44-52.

65. Држевецкая И.А. Основы физиологии обмена веществ и эндокринной системы / И.А. Држевецкая // 3-е изд. М.: Высшая школа, 1994. -256 с.

66. Ельганов В.В. Проблемы физиологии и патологии репродуктивной функции коров / В.В. Ельганинов, В.П. Белоножкин, Ш.Н. Насибов // М.: Щербинская тин., 1997.-291 с.

67. Емельяненко П.А. Иммунология животных в период внутриутробного развития / П.А. Емельяненко. М.: Агропромиздат, 1987. - 215 с.

68. Ермольева Е.В. Стимуляция неспецифической резистентности организма и бактериальные полисахариды / Е.В. Ермольева, Г.Е. Вейсберг. -М., 1976.-С. 186.

69. Ерощенко Т.М. Каскадные эффекты регуляторных пептидов / Т.М. Ерощенко, С.А. Титов, JI.JI. Лукьянова // Физиология человека и животных / ВНИИТИ. М, 1991. - 204 с.

70. Жебровский Л.С. Селекционная работа в условиях интенсификации животноводства / Л.С. Жебровский. Л., 1987. - 246 с.

71. Жирков О.Г. Диагностика эструса и повышение оплодотворяемости коров // Биотехнология размножения с.-х. животных. ВИЖ. - 1989. -Вып. 95.-С. 26-27.

72. Жоголев К.Д. Препараты тимуса в комплексной терапии инфекционных больных / К.Д. Жоголев, И.Н. Бойко, Ю.Н. Буланьков, В.Ю. Никитин // Пептидные биорегуляторы цитомедины. - Сиб, 1992. - С. 56-57.

73. Жуков В.В. Биохимические механизмы иммунорегулирующего действия пептидов тимуса: автореф. дис. . канд. мед. наук / В.В. Жуков. -СПб, 1991.-20 с.

74. Забродский П.Ф. Влияние тимогена на постинтоксикационное имму-нодефицитное состояние, вызванное острым отравлением ацетонит-рилом // Эксперим. клинич. фармакол. 1999, т. 62. - № 3. - С. 48-49.

75. Загородняя Э.Д. Применение иммунорегуляторных полипептидов в акушерстве и гинекологии / Э.Д. Загородняя и др. // Тез. Докл. науч. симпоз. Пущино, 1990. - С. 60.

76. Завертяев Б.П. Биотехнология в воспроизводстве и селекции крупного рогатого скота / Б.П. Завертяев. Д.: Агропромиздат. Ленингр. отд.-ние, 1989.-225 с.

77. Завадовский М.М. О взаимопротиворечивом взаимодействии органов в теле животного / М.М. Завадовский. Труды по диагностике развития, 1939, т. 11.-С. 313-318.

78. Завадовский Б.М. Теория гонадостимуляторов и проблема управления процессами размножения животных / Б.М. Завадовский // Успехи совр. биологии. 1946. - Т. 22. - № 3 (6). - С. 301-318.

79. Зверева Г.В. Гинекологические болезни коров / Г.В. Зверева, С.П. Хомин // Киев: Урожай, 1976. 152 с.

80. Замятин А.А. Общие функциональные особенности эндогенных регуляторных олигопептидов / А.А. Замятин // Физиологический журнал. -1992, т. 78.-№9.-С. 39-51.

81. Замятин А.А. Физико-химические особенности олигопептидов, обладающих морфологической активностью / А.А. Замятин // Онтогенез. -1988, т. 16.-№5.-С. 593.

82. Зюбин И.Н. Этиологическая роль условно-патогенной микрофлоры в возникновении метритов у коров: автореф. дис. . докт. вет. наук / И.Н. Зюбин. Чита, 1998. - 48 с.

83. Ильина Е.А. показатели липидного обмена у коров черно-пестрой породы в период стельности: автореф. дис. . канд. биол. наук / Е.А. Ильина. Москва, 1992. - 16 с.

84. Итан М. Макрофаги и другие вспомогательные клетки / М. Итан, А. Шевак // Иммунология: в 3 т. М.: Мир, 1987. - Т. 1: пер. с англ.: - С. 115-172.

85. Л. Иегер Клиническая иммунология и аллергология. Т. 1: Пер. с нем./под ред. Л. Йегера. М.: Медицина, 1990. - 528 с.

86. Ибрагимова А.Х. Эффективность применения жирорастворимых витаминов А, Д, Е для профилактики родовых и послеродовых заболеваний у коров: автореф. дис. . канд. вет. наук / А.Х. Ибрагимова. -Воронеж, 1993. 27 с.

87. Кабыш А.А. Микроэлементы и эндемические болезни животных / А.А. Кабыш // X Всесоюз. науч. конф. Чебоксары, 1986. - С. 167.

88. Казначеев В.П. Современные аспекты адаптации / В.П. Казначеев. -Новосибирск: Наука, 1980. 191 с.

89. Камано М.Ф. Влияние витамина А на иммунореактивность и оплодо-творяемость коров / М.Ф. Камано, Ю.Л. Максимов // Тезисы докл. науч. конф.-Горки, 1991.-С. 31-32.

90. Карпова О.С. Адаптивные особенности симменталов Поволжья с учетом дифференциации их типа / О.С. Карпова, Е.Р. Гостева // Мат. межд. науч. конф. Черкесск, 2007. - С. 15-18.

91. Карш Ф.Д. Гипоталамус и передняя доля гипофиза / Ф.Д. Карш // М.: Мир, 1987.-Гл. 1.-8-32 с.

92. Ковалева Т.П. Биохимические показатели крови и молока первотелок Разных пород в условиях Центрального Предкавказья / Т.П. Ковалева, М.И. Семонова // Матер. Науч. конф. Черкесск, 2007. - С. 20-24.

93. Ковзов В.В Изменения показателей биохимического статуса у высокопродуктивных коров в конце стойлового периода содержания // Мат. межд. конф. Белгород, 2007. - С. 88.

94. Кетлинский С.А. Иммунология для врача / С.А. Кетлинский, Н.М. Калинина. СПб.: Наука, 1998. - 156 с.

95. Кожемякин Л.А. Биохимические механизмы биорегуляторных эффектов экзогенных пептидов / Пептидные биорегуляторы цитомедины / Л.А.Кожемякин. - СПб.: Наука, 1992. - 77-78 с.

96. Клегг П. Гормоны, клетки, организм. Роль гормонов у млекопитающих / П. Клегг, А. Клегг. М.: Мир, 1971. - С. 79, 280.

97. Кленов В.А. Применение витаминно-минеральных препаратов при гипофункции яичников у коров / В.А. Кленов // Тез. докл. науч. конф. -Харьков, 1991.-С. 88-89.

98. Кленов В.А. Лечение коров при задержании последа у коров / В.А. Кленов // Ветеринария. 1980. -№ 2. - С. 44-45.

99. Клинский Ю.Д. Гонадотропин-рилизинг гормон и регуляция половой функции у животных / Ю.Д. Клинский, С.Д. Бутоко, А.Н. Алексе-енко // С.- х. за рубежом. 1978. - № 1. С. 41-45.

100. Клинский Ю.Д. Эндокринология и трансплантация зародышей с. -х. животных / Ю.Д. Клинский, A.M. Чомоев // ВИЖ. Дубровицы, 1983.-С. 39-41.

101. Колгушкина Т.Н. Актуальные вопросы гинекологии / Т.Н. Колгуш кина. Мн.: Выш. шк., 2000. - 332 с.

102. Колгушкина Т.Н. Практическая гинекология / Т.Н. Колгушкина. -Минск: Выш. шк., 2004. 335 с.

103. Коваленко Я.Р. Влияние факторов внешней среды на резистентность организма и иммуногенез / Я.Р. Коваленко. Труды ВАСХНИЛ, 1973. -С. 22-41.

104. Кокорина Э.П. Влияние стрессорного воздействия на поведение, мо-локоотдачу коров // Бюлл. ВНИИРГЖ. Л., 1978. - С. 12-20.

105. Коломыльцев А.А. Значение стрессов в развитии отечной болезни / А.А. Коломыльцев, Ю.Ф. Калантаенко, С.Б. Лукьянов, В.П. Плюснин / Ветеринарный консультант. 2002. - № 1. - С. 7-9.

106. Копанев В.И. Невесомость как проблема антропоэкологии // Прогноз антропоэкологической ситуации с помощью космических средств. -Л.: Наука, 1982.-С. 49-58.

107. Красов В.М. Электрофоретическое исследование белков крови животных / В.М. Красов. Алма-Ата: Наука, 1969. - 235 с.

108. Кремнев О.В. Некоторые биохимические и иммунобиологические показатели крови коров до и после родов / О.В. Кремнев // Мат. науч. конф. Волгоград, 2002. - Т. 2 - С. 65-67.

109. Косенко М.В. Диспансеризация в системе профилактики бесплодия и контроля воспроизводительной функции крупного рогатого скота / М.В. Косенко. Киев: Урожай, 1989. - 248 с.

110. Костин А.П. Физиология с.-х. животных / А. П. Костин, Ф.А. Мещеряков, А.А. Сысоев. М.: Колос, 1974. -480 с.

111. Котлинский С.А. Иммунология для врача / С.А. Котлинский, Н.М. Калинина. СПб, 1998. - 156 с.

112. Коркач В.И. Роль АКТГ и глюкокортикоидов в регуляции энергетического обмена / В.И. Коркач. Киев, 1979. - 218 с.

113. Корнева Е.А. Гормоны и иммунная система / Е.А. Корнева, Э.К. Шхинек. Л.: Наука, 1988. - 251 с.

114. Крыжановский Г.Н. Биоритмы и закон структурно-функциональной временной дискретности биологических процессов // Биологические ритмы в механизмах компенсации нарушенных функций. М., 1974. -С. 20-35.

115. Кузнецов Н.И. Применение витаминно-минеральных препаратов при гипофункции яичников у коров Н.И. // Тезисы докл. науч. конф. -Харьков, 1991.-С. 88-89.

116. Кузник Б.И. Цитомедины: 25-летний опыт экспериментальных и Клинических исследований / Б.И. Кузник, В.Г. Морозов, В.Х. Хавин сон. СПб.: Наука, 1998. - 310 с.

117. Кукушкин Н.Б. Иммунологический контроль лечения коров при эндометритах / Н.Б. Кукушкин, О.М. Саидова, А.Д. Ярушин, М.Ш. Шакуров, В.В. Новиков // Ветеринария. 1999. - № 12. - С. 28-32.

118. Лазерева Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е.К. Алехин. М.: Медицина, 1985. - 256 с.

119. Лебедев А.Г. Гипофизарно-гонадальные взаимоотношения в цикле воспроизводства крупного рогатого скота: автореф. дис. канд. биол. наук / А.Г. Лебедева. Л., 1982. - 17 с.

120. Лизогуб Ю.П. Стимуляция моторной функции матки при введении гормона гипофиза (окситоцина) / Ю.П. Лизогуб // Профилактика нарушения обмена веществ. Одесса, 1981. - С. 74-76.

121. Лиленко А.В. Гормональные показатели крови телок и интенсификация воспроизводства в зоне йодной недостаточности: автореф. дис. . канд. вет. наук / А.В. Лиленко. Воронеж, 1989.

122. Линкольн Д.А. Эпифиз. Гормональная регуляция размножения у млекопитающих / Д.А. Линкольн. М.: Мир, 1987. - Гл. 3. - С. 71-99.

123. Лободин А.С. Уровень эстрона в крови и функциональное состояние воспроизводительной системы у коров / А.С. Лободин, Т.С. Бунина // Использование новых методов диагностики. // Воронеж, 1993. С. 44-46.

124. Малинин В.В. Механизмы пептидной регуляции гомеостаза / В.В. Малинин, В.Г. Морозов // Клиническая фармакология тимогена. М., 2004.-Гл. 1.-С. 7-18.

125. Манасян А.О. Некоторые показатели белкового обмена у коров при половом цикле и персистентном желтом теле / А.О. Манасян, Г.В. Барсиян, Н.А. Гркатерян // Матер. Межвуз. науч. конф. М., 1971. - С. 154-155.

126. Мацинович А.А. Субклинические полимикроэлементозы крупного рогатого скота в условиях Республики Беларусь / А.А. Мациновиц // Матер, межд. конференции. Белгород. - 2007. - С. 99.

127. Маянский А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск: Наука, 1983. - 256 с.

128. Мегкова М.А. Выявление естественных антител против вазопресси-на при системной красной волчанке М.А. Мегкова // Клиническая лабораторная диагностика. 1999. - № 4. - С. 3-6.

129. Медведев В.И. О проблеме адаптации / В.И. Медведев // Компоненты адаптивного процесса. Л.: Наука, 1984. - С. 3-16.

130. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика / Ф.З. Меерсон. -М.: Наука, 1981.-278 с.

131. Мечников И.И. Вопросы иммунитета / И.И. Мечников. М., 1951.

132. Мингазов Т.А. Оплодотворение коров при использовании гормональных препаратов / Т.А. Мингазов, Л.В. Бабышева // Зоотехния. -1994.-№5.- С. 29-30.

133. Мисайлов В.Д. Меры борьбы с бесплодием и яловостью коров / В.Д. Мисайлов. Бурятское кн. Изд-во: Улан-Уде, 1976. - 77 с.

134. Митрофанов И.А. Изменение показателей иммунитета в течение нормального цикла / И.А. Митрофанов // Акушерство и гинекология. -1984. -№3.- С. 8-9.

135. Миррахимов М.М.Адаптация человека к экстремальной природной среде и ее возможное значение для клиники внутренних болезней / М.М. Миррахимов // Терапевт, арх. 1986. - № 5. - С. 3-10.

136. Михайленко Е.Т. Биохимия родового акта и его регуляция / Е.Т. Ми-хайленко, М.Д. Курский, В.В. Чуб. Киев: Здоровье, 1980. - 184 с.

137. Мозжерии В.П. Эффективность применения транквилизатора аминазина при перевозке скота /В.П. Мозжерин, Н.Н. Луговых // Племенное дело в животноводстве. -Ульяновск, 1976. С. 79-85.

138. Молоканова И.В. Влияние стрессовой чувствительности на собственную продуктивность и репродуктивные качества свиноматок: авто-реф. дис. . канд. вет. наук. / И.В. Молоканова. Ставрополь, 2002. -19 с.

139. Морозов В.Г. Молекулярные механизмы биорегуляции генетической активности и клеточного метаболизма / В.Г. Морозов // Тез. докл. -М.: Медицина, 1981.-Т. 1.-С. 78-80.

140. Морозов В.В. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины / В.В. Морозов, В.Х. Хавинсон // Успехи современной биологии. - 1983. - Т. 96. - № 3. - С. 339-346.

141. Морозов В.В. Пептидные биорегуляторы / В.В. Морозов, В.Х. Хавинсон. СПб.: Наука, 1996. - 74 с.

142. Морозов В.В. Пептидные тимомиметики / В.В. Морозов, В.Х. Хавинсон, В.В. Малинин. СПб.: Наука, 2000. - 158 с.

143. Моцкалюнас Р.Ч. Неспецифический иммунитет коров и воспаление матки в послеродовом периоде / Р.Ч. Моцкалюнас // Научные основы профилактики и лечения патологии воспроизводительной функции сельскохозяйственных животных. Воронеж, 1988. - С. 76.

144. Науменков А.Г. Способ стимуляции репродуктивной функции коров //Авт. свид-во 1666101 СССР. 1991.-Б.И.-№ 28.

145. Нежданов А.Г. Гормональная функция яичников в течение полового цикла / А.Г. Нежданов, Н.А. Соловьев // Ветеринария. 1986. - № 1.

146. Нежданов А.Г. Рациональные пути применения гормональных препаратов для коррекции воспроизводительной функции животных /

147. А.Г. Нежданов, К.А, Лободин //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007.-С. 454-459.

148. Нежданов А.Г. Общая неспецифическая резистентность и воспроизводительная функция коров / А.Г. Нежданов // Проблемы патологии обмена веществ в современном животноводстве. Воронеж, 1981. - С. 53-55.

149. Нежданов А.Г. Акушерско-гинекологические болезни коров / А.Г. Нежданов, В.П. Иноземцев // Ветеринария. 1996. - № 9. - С. 5-9.

150. Нежданов А.Г. Профилактика и лечение послеродовых заболеваний у коров / А.Г. Нежданов // Биологические основы и технолог, приемы .//Воронеж, 1990.-С. 104.

151. Нежданов А.Г. Доклиническая диагностика акушерской патологии у коров / А.Г. Нежданов, К.Г. Дашукаева // Матер, всеросс. конф. Воронеж, 1994.-С. 104.

152. Нежданов А.Г. Гормональные и витаминные препараты для повышения оплодотворяемости и профилактики бесплодия у коров // Болезни органов воспроизв. системы и новорожд. молодняка. Воронеж, 1979. - Т. 3.-С. 24-27.

153. Никишев Н.В. Половой цикл у коров красной степной породы / Н.В. Никишев // Ветеринария. 1974. - № 3. - С. 70-71.

154. Носков М.М. Стресс-факторы дойных коров / М.М. Носков // Механизмы повреждений, резистентности, адаптации и компенсации. -Таллин, 1976.-Т. 2.-С. 771.

155. Опарина Т.И. Антиоксидантные и антиагрегационные свойства синтетических пептидов / Т.И. Опарина, В.М. Прокопенко, А.В. Арутю-нян // Тезисы докл. Биохимического общества. СПб., 2002. - С. 555.

156. Осетров А.А. Система показаний и противопоказаний для восстановления, стимуляции и синхронизации воспроизводительной функции коров и телок / А.А. Осетров //Науч. конф. Казань, 1984. - С. 6263.

157. Остышко Ф.И. Воспроизведение стада в промышленном скотоводстве / Ф.И. Осташко и др.. Киев: Урожай, 1982. - 186 с.

158. Павлов В.А. Физиология воспроизводства крупного рогатого скота / В.А. Павлов. М.: Россельхозиздат, 1984. - 207 с.

159. Падугева A.JI. Гормональные продукты в животноводстве / A.JI. Па-дугева. М.: Россельхозиздат, 1979. - 229 с.

160. Паршин П.А. Показатели обмена липидов, характеризующие резистентность коров в послеотельный период / П.А. Паршин // Тез. докл. науч. конф. Воронеж, 1988. - С. 83-84.

161. Петров Р.В. Иммунология / Р.В. Петров. М.: Медицина, 1987. - 416 с. 163.

162. Петров П.Р. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, P.M. Хаитов. М.: Медицина, 1981. - 312 с.

163. Петленко В.П. Философские основы теории адаптации в медицине / В.П. Петленко, И.А. Сапов // Воен.-мед. журн. 1980. - № 6. - С. 1217.

164. Пигарева Г.П. Применение метавита и сернокислого цинка для коррекции метаболизма у беременных коров и профилактики родовых и после родовых заболеваний: дис. . канд. вет. наук / Г.П. Пигарева. -Воронеж, 1998.- 193 с.

165. Пикарева Т.А. Морфологические показатели крови беременных коров в норме и при акушерской патологии / Т.А. Пикалова, Т.С. Бунина, А.Г. Не- Жданов // Науч. основы проф. и леч. патологии воспр. функции. Воронеж, 1988.-С. 113-114.

166. Плецитный Д.Ф. Лизоцим как фактор естественной резистентности // Биологическая роль лизоцима и его лечебное применение. Караганда, 1972.-С. 146-148.

167. Плешкина К.И. Проявление и нормализация репродуктивной функции и у коров после отела и ранний период стельности: автореф. дис..канд. биол. наук / К.И. Плешкина. Боровск, 1982.

168. Полянцев Н.И. Акушерско-гинекологическая диспансеризация на молочных фермах, 2-е изд. / Н.И. Полянцев, А.Н. Синявин. М.: Рос-агропромиздат, 1989. -176 с.

169. Полянцев Н.И. Причины и разновидности бесплодия сельскохозяйственных животных / Н.И. Полянцев // Животноводство. 1972. - № 1.-С. 73-76.

170. Поляк А.И. Гипосенсибилизирующие эффекты тимогена / А.И. Поляк, Л.М. Румбешт, Т.И. Гусарова // Пептидные биорегуляторы ци-томедины. - СПб., 1992. - 118 с.

171. Постовой С.Г. Утеромоторные препаратов ПгФ 2-альфа и результаты их клинического применения для профилактики послеродовых заболеваний у коров / С.Г. Постовой, А.Г. Нежданов //1 съезд вет. фар макологов. Воронеж, 2007. - С. 504-508.

172. Преображенский О.Н. Стресс и патология размножения животных / О.Н. Преображенский // Ветеринария. 1993. - № 4. - С. 38-41.

173. Прозорова Е.С. Влияние магнитных бурь на организм лактирующих коров / Е.С. Прозорова, М.М. Перун // Тезисы докл. конф. Львов, 1994.-С. 72-73.

174. Прокофьев М.И. Гормональный контроль сроков овуляции у коров / М.И. Прокофьев, А.С. Бикулов, П.И. Леднев // Проблемы эндокринологии с.-х. животных.-Л., Пушкин, 1975.-С. 19-20.

175. Прокофьев М.И. Регуляция размножения сельскохозяйственных животных / М.И. Прокофьев. М.: Наука, 1983. - 141-142 с.

176. Прыгунова Е.В. Показатели липидного обмена при эндометритах коров / Е.В. Прыгунова, К.Г. Жирнова // Сб. науч. тр. М., 1998. - С. 68-71.

177. Пурэвжавын Энхтула Стояние репродуктивной функции и обмена веществ у коров в условиях молочных ферм Монголии и рациональные методы их коррекции: дис. .докт. вет. наук / Энхтула Пурэвжавын. Улан-Батор, Воронеж, 2000. - 224 с.

178. Пучковский А.И. Динамика общего белка, белковых фракций и сахара в крови коров в связи со стадиями и фазами полового цикла / А.И. Пучковский, Э.В. Шурупова // Матер, докл. Всесоюзн. науч. конф.-Казань, 1967.-С. 137-138.

179. Пучковский А.И. Белки сыворотки крови у коров в различные периоды воспроизводительной функции и при бесплодии на почве гипо-протеинемии / А.И. Пучковский // Матер, доклад. Всесоюз. науч. конф. Казань, 1967.-Т. 2.-С. 137-138.

180. Пучковский А.И. Белковый спектр крови у коров в различные периоды воспроизводительной функции и патогенез бесплодия при ги-по- и диспротеинемии / А.И. Пучковский // Матер, доклад. Всесоюз. науч. конф. Казань, 1974. Т. 2. - С. 43-45.

181. Равилов М.Н. Применение простагландинов для повышения оплодо-творяемости / М.Н. Равилов. М.: Моск. гос. акад. вет. мед. и био-техн., 1994.-76-79 с.

182. Рассадников С.А. Гонадотропин-рилизинг гормон (гонадотропин) -как фактор повышения прогестагенной активности яичников у самок КРС / С.А. Рассадников // Проблемы профилактики и терапии незаразных болезней.-Л., 1985. С. 64-67.

183. Решетников Н.М. Особенности процесса воспроизведения у коров в условиях промышленной технологии производства молока / Н.М. Решетников // Повышение производит. КРС молочных пород. М., 1981. -С. 54-52.

184. Розен В.Б. Основы эндокринологии / В.Б. Розен. М.: Высшая школа, 1980.-343 с.

185. Савченко О.Н. Половые железы / О.Н. Савченко // Физиология эндокринной системы.-Л., 1979.-С. 341-371.

186. Савченко О.Н. Гонадотропины, эстрогены и прегнендиол в нормальном менструальном цикле / О.Н. Савченко, Г.С. Степанов // Проблемы эндокринологии и гормонотерапии. 1964. - Т. 10. -№ 4. - С. 7-13.

187. Сазонов Л.В. Действие сверхмалых доз биологически активных веществ: общие закономерности, особенности и возможные механизмы / Л.А. Сазонов, С.В.Зайцев // Биохимия. 1992. - Т. 57. - Вып. 10. - С. 1443-1460.

188. Самохин В.Т. Техногенные микроэлементозы в животноводстве / В.Т. Самохин, Ю.Н. Кондратьев, В.И. Шушлебин, П.Е. Петров // Ветеринария. 1996. - № 7. - С. 43-46.

189. Сапожников B.C. Применение дипровита и липамида при профилактике задержания последа и послеродового эндометрита у коров: автореф. дис. .канд. вет. наук / B.C. Сапожников. Воронеж, 1995. - 29 с.

190. Сергеев Н.И. Некоторые проблемы пересадки эмбрионов крупного рогатого скота / Н.И. Сергеев // Бюл. науч. работ / ВНИИ животноводства. 1991.-№ 104.-С. 3-6.

191. Сергиенко А.И. Профилактика бесплодия крупного рогатого скота / А.И. Сергиенко. -М.: Колос, 1984. 188 с.

192. Семенютина С.А. Воспроизводительные функции и содержание витаминов в крови при инъекциях в сухостойный период аскорбиновой кислоты и селенита натрия / С.А. Семенютина с соавт. // Мат. межд. конф. Черкесск, 2007. - С. 50-55.

193. Семенюта А.Т. Влияние промышленной технологии на резистентность организма животных / А.Т. Семенюта // Биол. ВИЭВ, 1981. Т. 44.-С. 14

194. Селиванов А.В. Окружающая среда и иммунологическая реактивность организма / А.В. Селиванов, Э.В. Ивановский, Ю.Ф. Борисович // Ветеринария. 1984. - № 3. - С. 33-34.

195. Селье Г. Стресс без дистресса: Пер. с англ. / Г. Селье. М.: Прогресс, 1982.- 128 с.

196. Сеин О.Б. Применение препарата фуранолл для лечения эндометрита у коров / О.Б. Сеин, Ю.В. Фурман, М.В. Беседин и др. // Мат. ко-орд. совещ. Воронеж, 1995. - С. 240-242.

197. Серебряков Ю.М. Разработка препарата из последа коров / Ю.М. Серебряков, Е.Ю. Поливодина //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007.-С. 554-558.

198. Скопец Б.Г. Эффективность воспроизведения коров в связи с состоянием иммунной системы в период, предшествующий осеменению / Б.Г. Скопец // Профилактика незаразных болезней у коров. Таллин, 1988.-С. 129-127.

199. Слободяник В.И. Иммунологические аспекты патогенеза, новые принципы и средства лечения и профилактики мастита у коров: дис. . докт. вет. наук / В.И. Слободяник. Воронеж, 1994. - 243 с.

200. Слободяник В.И. Иммунологический статус у коров при различном функциональном состоянии молочной железы / В.И. Слободяник, Н.А. Сапожникова, Л.В, Смирнова // Сб. науч. Тр.; ВНИВИПФиТ, 1992. -С. 99- 103.

201. Слоним А.Д. Учение о физиологических адаптациях / А.Д. Слоним // Экологическая физиология животных. Т. 1. - Л.: Наука, 1979. - С. 79-182.

202. Смирнова Л.В. Перекисное окисление и антиокислительная способность липидов при различных функциональных состояниях молочной железы у коров / Л.В. Смирнова // Сб. науч. Тр.; ВНИВИПФиТ, 1992. -С. 103-107.

203. Смирнов B.C. Клиническая фармакология тимогена / Ред. B.C. Смирнов. Сиб.: ФАР Миндекс, 2004. - 172 с.

204. Соболь М.А. Прогнозирование и профилактика послеродовых заболеваний у коров с использованием метода электропунктуры: дис. . .канд. вет. наук / М.А. Соболь. Воронеж, 2000. - 136 с.

205. Соколовская И.И. Иммунология воспроизведения / И.И. Соколовская, В.К. Милованов. М.: Колос, 1982. - 363 с.

206. Соловьев Н.А. Гормональная регуляция полового цикла у коров: ав-тореф. дис. . канд. вет. наук / Н.А. Соловьев. Персианова, 1989. -21 с.

207. Сороко С.И. Нейрофизиологические механизмы индивидуальной адаптации человека в Антарктиде / С.И. Сороко. JL: Наука, 1984. -152 с.

208. Сочнев В.Н. Рекомендации по выращиванию телят раннего возраста / В.Н. Сочнев. Горький, 1985. - 18 с.

209. Степанов Г.С. Ранняя гормональная диагностика беременности у крупного рогатого скота / Г.С. Степанов // В кн. Физиология воспроизведения с.-х. животных. Харьков, 1977. - С. 162-168.

210. Степанов Г.С. Стероидопродуцирующая активность яичников у телок высокой продуктивности с.-х. животных / Г.С. Степанов, В.Б. Дмитриев, А.Г. Лебедев. Л.: Наука, 1983. - С. 193-195.

211. Стравский Я.С. Влияние условий внешней среды на оплодотворение коров / Я.С. Стравский // Ветеринария. 1999. - № 9. - С. 39-42.

212. Студенцов А.П. Физиология размножения сельскохозяйственных животных / А.П. Студенцов // Советская зоотехния. 1953. - № 4. - С. 69-78.

213. Студенцов А.П. Ветеринарная акушерство и гинекология / А.П. Студенцов. -М.: Колос, 1980.-241 с.

214. Сухих Г.Т. Подавление активности нормальных киллеров при эмоционально-болевом стрессе / Г.Т. Сухих, Ф.З. Меерсон // Бюлл. Экс-пер. биол. 1983. - № 11. - С. 84.

215. Сысоев А.А. Повышение воспроизводства и продуктивности животных / А.А. Сысоев, М.Г. Рязанский. Воронеж, 1968. - 135 с.

216. Сысоев А.А. Физиологические способности воспроизводительной функции коров / А.А.Сысоев, М.П. Рязанский. М.:Колос, 1971. -352 с.

217. Сысоев А.А. Физиология размножения сельскохозяйственных животных / А.А. Сысоев. М.: Колос, 1978. - 360 с.

218. Сысоев А.А. Повышение воспроизводства и продуктивности животных / А.А. Сысоев, М.Г. Рязанский. Воронеж, 1968. - 135 с.

219. Тимошенко JI.B. Некоторые показатели клеточного иммунитета при не осложненной беременности и при угрозе прерывания / JI.B. Тимошенко, М.А. Базарнова, Л.П. Аксененко // Акушерство и гинекология. 1989. -№ 6. - С. 27-29.

220. Топарская В.Н. Физиология и патология углеводного, липидного и белкового обмена. 2-е изд. / В.Н. Топарская. М., 1970.

221. Топурия Л.Ю. Лечебно-профилактическая эффективность и иммун-ностимулирующая активность препарата РИБАВ / Л.Ю. Топурия, Г.М. Топурия //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007. - С. 591-596.

222. Третьяков С.В. Иммунологическая реактивность и воспроизводительная способность коров: дис. .канд. вет. наук / С.В. Третьяков. -Воронеж, 1999,-163 с.

223. Турков В.Г. Эндокринные аспекты программированного воспроизводства крупного рогатого скота с использованием гонадолиберина и простагландина Ф2 а: автореф. дис. . докт. вет. наук / В.Г. Турков. -Воронеж, 1996. -36 с.

224. Тюрев Г.В. Эффективность выращивания телят в секционных профилакториях на открытом воздухе / Г.В. Тюрев, В.А. Химина. Омск, 1989.-С. 59-61.

225. Ужахов М.И. Иммунобиологическая реактивность помесей гол-штинской породы в стадах черно-пестрой и красного степного скота на Северном Кавказе / М.И. Ужахов, М.М. Долгиев, О.О. Гетоков // Мат. науч. конф. Черкесск, 2007. - С. 65-68.

226. Устинов А.П. Влияние прогестерона на эмбриональную смертность у коров / А.П. Устинов // Тр. ВНИИ мясного скотоводства. 1979. -Вып. 15.- С. 279-284.

227. Устинов Д.А. Стресс-факторы в промышленном животноводстве / Д.А. Устинов. М.: Россельхозиздат, 1976. - 166 с.

228. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / И.С. Фрейд-лин. М.: Медицина, 1984. - 272 с.

229. Хазинов Н.З. Хелаты биогенных металлов в животноводстве / Н.З. Хазинов, Г.П. Логвинов // Мат. науч. конф. ВГАУ. Воронеж, 1997. С. 33-34.

230. Хаитов P.M. Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения / P.M. Хаитов, Б.В. Пенегин // Иммунология. № 5. -2000.-С. 4-7.

231. Хаитов P.M. Иммуномодуляторы и некоторые аспекты их клинического применения/ P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин. Клинич. мед. - 1999. -№ 8.-С. 7-12.

232. Харитонов В.В. Естественная резистентность новорожденных телят при разном уровне минерального питания их матерей /В.В. Харитонов // Тезисы докладов. Иваново, 1990. - С. 92.

233. Хилькевич Н.М. Причины и способ профилактики бесплодия коров / Н.М. Хилькевич, JI.A. Мучниева, Ч.В. Карацев // Вестник ветеринарии.-1997.-№6.-С. 23-27.

234. Цыганков П.Б. Совершенствование продуктивных и племенных качеств крупного рогатого скота / П.Б. Цыганков. Дон. с.-х. институт, 1992.-С. 73-76.

235. Чевелев С.Ф. Макрофаги в системе иммунитета / С.Ф. Чевелев, И.А. Бакулов, В.В. Макаров // Ветеринария. Ветеринария. - 1983. - № 6. -С. 27-30.

236. Черемисинов Г.А. Изыскание оптимальных доз отечественных про-стагландинов и гравогормона для регуляции половой функции каракульских овец / Г.А. Черемисинов // ВНИИПФиТ. Воронеж, 1992. -С. 117-122.

237. Чомаев A.M. Направленная стимуляция воспроизводительной функции коров с учетом механизма формирования полового цикла / A.M. Чомаев //1 съезд вет. фармакологов. Воронеж, 2007. - С. 634-638.

238. Чомаев A.M. Влияние тироксина на воспроизводительную функцию коров красно-пестрой и черно-пестрой голштинской пород / A.M. Чомаев, Ю.Д. Клинский, К.Н. Сейранов // Мат. всероссийск. конф. -Черкесск, 2007.-С. 70-73.

239. Чомаев A.M. Стимуляция овуляции у телок разными простагланди-нами / A.M. Чомаев, Р.И. Куксова, В.А. Анзоров, В.А. Дедов // Биотехнология в животноводстве. ВИЖ, 1987. - С. 58-59.

240. Чохатариди Г.Н. Выявление состава рациона кормления коров разного генотипа на их воспроизводительную способность / Г.Н. Чохатариди, Т.З. Мильдзихов // Мат. межд. конф. Черкесск, 2007. - С. 7880.

241. Чипенс Г.И. Применение некоторых принципов системного анализа в исследовании структур и функций пептидных лигандов // Структура и функции низкомолекулярных пептидов. Рига, 1980. - С. 11-124.

242. Шабалин В.Н. Клиническая иммуногематология / В.Н. Шабалин, Л.Д. Серова. Л.: Медицина, 1988. - 312 с.

243. Шахов А.Г. Иммуноферон новый биологический препарат для животных / А.Г. Шахов, Л.Е. Баяринов, К.Н. Груздев. - Воронеж, 1999. -С. 97- 99.

244. Шевченко С.А. Использование аутокрови для коррекции воспроизводительной функции коров / С.А. Шевченко, А.И. Шевченко // Вестн. Кемер. с.-х. ин-та. Кемерово, 1995. - С. 37-38.

245. Шевякова И.Н. Половой цикл у телок в зимний период и время их осеменения: автореф. дис. . канд. вет. наук / И.Н. Шевякова. Воронеж, 1982.- 13 с.

246. Шейкин В.Н. Гормональный статус у коров с нормальным и патологическим отелом / В,Н. Шейкин // Тез. докл. Всесоюзной науч.-практ. конф. -М., 1988.-С. 29-30.

247. Шейкин В.Н. Поиск способов, повышающих резистентность осеменений / В,Н. Шейкин, Н.А. Бойко // Эндокринология и трансплантация зигот с.-х. животных. М., 1982. - С. 174-175.

248. Шляхов Э.Н. Иммунология / Э.Н. Шляхов, Л.П. Андриеш. Кишинев, 1985.-278 с.

249. Шипилов B.C. Физиологические основы профилактики бесплодия на ранних этапах стельности // Физиолого-биохимические основы коров / B.C. Шипилов. М.: Колос, 1977. - 335 с.

250. Шубин А.А. Применение сурфагона и биостимуляторов для регуляции воспроизводительной функции высокопродуктивных коров / А.А. Шубин // Ветеринария. 1996. - № 7. - С. 35-38.

251. Щедрин E.J1. Прогнозирование интерфероноподобной активности стимуляторов резистентности / Е.Л. Щедрин, Ю.Х. Креймер, Б.И. Трубицын // Сельскохозяйственная биология. 1988. - № 6. - С. 38.

252. Щедрин Е.Л. Иммуномодулирующее действие на организм цыплят аэрозолей пептидов и ксантинов, выделенных из автолизата селезенки быка / Е.Л. Щедрин, С.П. Петухов, Т.В. Булгарин // Сельскохозяйственная биология. 1989. - № 6. - С. 39.

253. Щедрин Е.Л. Анаболические факторы тканевых препаратов и участие ферментов аденилатциклазной системы в передаче их фармакологического действия / Е.Л. Щедрин // Тканевая терапия. Одесса, 1983.-С. 45-47.

254. Эйснер Ф.Ф., Резниченко Л.П. Ас. 684442 СССР. Способ выявления будущей плодовитости животных. - 1979.

255. Юдаев Н.А. Рецепция половых гормонов в эндометрии человека при нормальной и патологической беременности / Н.А. Юдаев, М.К. Ас-рибекова // Проблемы эндокринологии. 1976. - Т. 22. - № 3. - С. 3639.

256. Afiefe Monier М. Climatic factors and seasonal variations in fertility of buffaloes and cattle in Egypt / Monier M. Afiefe // Fortpflanz Besam, and Aufzucht Haustiere. 1970. - № 6. - V.4. - P. 353.

257. Attita W.Y. Thymosin stimulates interleukin-6 production from rat spleen cell sin in vitro / W.Y. Attita, M. Bodamchian et al. // Immunopharmacol-ogy.- 1993.-Vol. 26.-№2.

258. Ballieux R Immunozegulatory T-cell subpopulations in men: Dissection by monoclonal antibodies / R. Ballieux, C. Heijnen // Immunological Rev. 1983. -V. 77.-P. 5-28.

259. Bertrand M. Les facteurs de la sterilite animal / M. Bertland, J. Descha-mel // Revue de medicine veterinaire. France. 1970. - V. 121. - № 6. - P. 561-575.

260. Burk F. Radioimmunologishe Bestimmung des Ostrogcmgchaltes imм

261. Blutlasma von Rindern der Rasse "Deutsche schuvars Zbunte WahzendMder jetz ten funt Frachtigkeitsmonate: Inaugural rines "Doctor Medicinae Veterinariae / F. Burk // Haunover, 1984. 55 s.

262. Chaining C. Secredion des steroids in vivo et in vitro par les differents types de l'ovaire, ches l'forme et le signs / C. Chagnning, A. Colson Wents, G. Segar Ionce // Rev. franc. Endocrinol. Clin. Nutr. Et metabol, 1976. -V. 17.-№ 5.-P. 416-417.

263. Chudola-Drozdouska B. Sesonowe nahania poziomu fosforu nicorganic-znego w surawicy kzwi krow rasy NCB / B. Chudola-Drozdouska // Zo-otechnica Wroclaw, 1984. 26. - S. 119-124.

264. Coleman D.L. Regulation of macrophage phagocytosis.- Europ. J / D.L. Coleman//Clin. Microbiol.-1986.-V. 5.-№ l.-P. 1-5.

265. Coomsa I. The thymic hormones /1. Coomsa // Hormones. 1971. - Vol. 2.-№4.-P. 226-225.

266. Currlewis J.D. Effect of hypothalamic infusion of a dopamine D, receptor an tagonist on prolaction secretion in the ewe // J.D. Currlewis et al. // Brein Res. 1995. - 697. - № 2. - P. 48-525.

267. Diszfalusy E. Endocrine function of the human fetoplacental unit Ted / E.

268. Diszfalusy // Proc. 1964. - V. 23. - № 4. - P. 1. - P. 791-798.

269. Downey B. Regulation of oestrus cycle in domestic animal: a review // B. Downey // Canad. Veter. J. 1980. - 21. -№ 11. - P. 301-305.

270. Downing J.A. The effects of N-methyl-D. L-aspartic acid and aspartic acid on the plasma concentration of gonad otrophins, LH and prolactin in the ewe / J.A. Downing // J. Endocrinol. - 1996. - 149. - № 1. - P. 301305.

271. Eger S. Conception rates of daisy cows in relation to stage of estrus at in semination / S. Eger, I. Kaddori, A. Ozer. H. Schindeer // I. Anim. Sci. Suppl., 1956.-587 p.

272. Ford E.I. Glukose utilization in pregnant sheep / E.I. Ford // Biochem J. -1963.-V. 88.-P. 427-435.

273. Fortune I.E. Ovarian follicular grouth and development in mammals / I. E. Fortune // Biol. Reprad. -1994. 50. - № 2. - P. 225-232.

274. Greco D.S. Immuniti and the endocrine system / D.S. Greco, L.M. Har-pold // Vet. Clin, of North Am., Small Anim. Drak., 1994. P. 768- 782.

275. Haag W. Vitamin C. beim Rind: Vorkommen Wirkungen / W. Haag // Dt. Tierarztl Wschr. 1987. - V. 94. - № 3. - S. 181-186.

276. Hachman H.A. Changes of pheral plasma before end after parturition / H.A. Hachman, Y.M. Strenata // Yndian J. Amin. Sci., 1982. V. 52. -P. 1173-1176.

277. Hansel W. Pgysiologi of oestrus cycle / W. Hansel, E. Convey //1. Anim. Sci. suppl. 1983. -V. 57. -№ 2. - P. 404-424.

278. Haraszti J. Effect of periparturient lipid mobilization on serum total caro-bene and vitamin A concentrations in cattle / J.Haraszti // Aefa vet. hung. -1984.-V. 32.-№3-4.-P. 193-203.

279. Hileman Stenley M. Effect of anterior hypothalamic analegions on photo-period-induced shifts in reproductive activiti of the ewe / M. Stenley Hileman et al. // Tndocrinology. 1994. - 135. - № 5. - P. 1816-1823.

280. Ivanov V.T. Hemoglobin as a sourse of endogenous bioactive peptides: the concept of tissue specific peptide pool / V.T. Ivanov, A.A. Karelin, M.M. Philippova//Biopolymers.- 1997.-Vol. 43.-№2.-P. 171-188.

281. Jadhav S. Variabious in the serum cholesterol levels of zebu cows during pregnaney, parturition and puerperium / S. Jadhav et al. // Indian Vet., 1977.-54.-P. 536-540.

282. Kaltenbach C.C. Release of FSH and LH in beef heifers by synthetic gonadotropin releasing hormone / C.C. Kaltenbach // J. Anim. Sci. 1974. -38. -№ 2.-P. 357-362.

283. Karelin A.A. A novel system of peptidergic regulation / A.A. Karelin, E.Y. Blishchenko, V.T. Ivanov // FEBS Lett. 1998. - Vol. 428. - № 1-2.-P. 7-12.

284. Kent J.E. The effect of transportation on the blood constituents and behaviour of calves / J.E. Kent, R. Ewbank // Brit. Vet. J. 1983. - V. 139. -№ 3. - P. 228-235.

285. Kovalcikova M. Adaptacia a stress v chone hospodarskych zvierat / M. Kovalcikova, K. Kovalcik. Prirodsa-vydavatetelstvo Kuik a casopisov: Bratislava, 1974.-271 p.

286. Ladewing J. Edocrine aspect of stress: evalution of stress reactions in farm animals / J. Ladewing // Current topics veterinary medicine and animal science. 1987. - № 42. - P. 13-25.

287. Lamothe P. Le glucose sand et des secretions endonutriales cher deux groupes de fencelles bovines dout l'un est atbeing d'infertilite siue material /

288. P. Lamothe et al. // Canad. Veter. J. 1972. - V. 13. -№ 2. - P. 29-32.

289. Lunenfeld B. Stimulation, de l'ovulation: unenouvelle approche basee sur des dounees physiologiques recentes. Perspective d'avenir / B. Lunenfeld // Contracept-fertile-sex. 1993. - 21. - № 4. - suppl. - P. 1-7.

290. Matsuo H. Structure of the porcine LH and FSH releasing hormone. 1. The proposed animo acid seguence / H. Matsuo // Biochem. Biophys. Res Commun. - 1971. - 43. - P. 1334-1339.

291. Martini L. Gonadotropin releasing factors: recent physiological findings // Resent progress in reproductive endocrinology / Ed. P.G. Grosingnani, V.N.T. James. London, New York, 1974. - 295-321 p.

292. Markus R. Lohgidinalstudile uder zirkulierende Immunkomplexe bei Vi-rushepatitis Тур В / R. Markus. Dtsch. Gesund - Wes., 1983. - Bd 38458 s.

293. Moor R.M. Sintes of steroid production in ovine Graatian follicles in culture / R.M. Moor //1. Endocrinology. 1976. - V. 73. - № 1. - P. 143145.

294. Murihy T. Blood cholesterol profiles in different reproductive phases of graded Murrchbuffeloes / T. Murihy, A. Pao // Yndian Veter. J. 1981. -V. 58.-№ 10.-P. 771-773.

295. Nesson G.K. Relationship of peripheral estrogens and testosterone concentrations to sexual behaviour in normal and systic cows / G.K. Nesson, G.J. King // Can. Vet. I. 1988. - V. 22. - № 1. - P. 9-11.

296. Orgizek A. Animal nutrition and Fertility / A. Orgizek, I. Smalali // The 41 International Congress of Animal Husbandry // M.: 1957. P. 132138.

297. Pahwa R. Thymic function in man / R. Pahwa, S. Ikehava, S. Pahwa, R.A. Good // Thymus. 1979. - Vol. 50. -№ 1-2. - P. 27-58.

298. Peters A.R. Regulation of ovarian function in the post partum cow; An endocrine model / A.R. Peters, G.E. Lemming // Vet. Rec. 1986. - V. 118.-№9. -P. 236-239.

299. Rakha A.M. Changes in levels of follicle stimulating hormone in the bovine pituitary gland at ovulation / A.M. Rakha, H.A. Robertson // J. En-docr. 1965. -№ 31. - V. 3. - P. 245-249.

300. Raudel R.D. Reproductive steroids in the bovin / R.D. Raudel // J. Anim. Sci. 1971. -№ 33. -V. l.-P. 104-114.

301. Reibman I. Transforming growth factor 1, a potent chemoattractant for human neutrophils, by passes classic signal transduction pathways / I. Reibman // Proc. Natl. Acad, Sci. USA. - 1991. - Vol. 88. - № 15. - P. 6805-6809.

302. Riisgaard S. In vitro studies on normal, stimulated and immunologically activated mouse macrophages / S. Riisgaard, J. Bennedsen, J. Rhodes // Acta microbial/ scand. Sec. 1977. - Vol. 5. - № 4. - P. 233-238.

303. Roberts S.J. Veterineri obstetrics and genital diseases / S.J. Roberts // New-York state Veterinary College. Ithaca. - N.Y., 1956. - P. 256-254.

304. Roche S.F. Turnover of dominant follicles in cattle of different repro-ducetive state / S.F. Roche, M.P. Bolland // Theriogenology. 1991. - 35. -№ l.-P. 81-90.

305. Rowlands G. The relationship between blood composition and conception rale in dairy cows / G. Rowlands et al. // J. Dairy Res. 1977. - V. 44. -№ l.-P. 1-7.

306. Romero A. Number of small Follicles in ovaries affect superovulation re spouse in cattle / A. Romero, I. Albert et al. // Theriogenology. 1991. — 35.-№ 1. -P. 265.

307. Salfen B.E. Effects of the presence of a dominant follicle and exogenous oestradiol on the du ration of the luteal phase of the bovine oestrous cycle /

308. B.E. Salfen, S.R. Cresswell et al. // J. Reprod and Fert. 1999. - 115. -№ l.-p. 15-21.

309. Schams D. Protiles of LH, FSH and progesterone in post-partum dairy cows and their relationship to the commencement of cyclic functions / D. Schfms, E. Schallenberger, Ch. Heurer et al. // Tieriogenology. V. 10. -№6.-P. 453-468.

310. Schallenberger E. Gonadotrophins and ovarian ster oids in cattle // Pulsatile changes of concentrations in the ingular vein thoughout pregnance / E. Schallenberger, J. Rampp, D.Walters // Acta endocrinol., 1985. 108. -Ife3.-P. 330-332.

311. Sher H.I. Randomized trial of combined modality therapy with and with out thymosin fraction V the treatment of small cell lung cancer / H.I. Sher, B. Shank et al. // Cacer Res. 1988. - Vol. 48. -№ 6. - P. 1663-1670.

312. Seguin B. Comparative luteolytic activity of estradiol cyclopentylpropi-onate and prostaglandin F2 alpha in diestrous cow / B. Seguin // Therio-genology. 979. - 11. - № 6. - P. 445-452.

313. Seratte S.A. Modulation of natural koller cell cytotoxic activity, lum phokine, production and interleukin-2 receptor expression by thymic hormones / S.A. Seratte, R.S. Schulof, L. Leondaridis //1. Immunol. 1987. -Vol. 139. - № 7. - P. 2238-2343.

314. Selye H. Stress in Health and Disease / H. Selye. Boston, 1976. - 712720 p.

315. Smith J.F. Plasma hormone lewels in the cow / J.F. Smith, R.J. Fair clough, E.Payhe, A.R. Reterson // N.Z.J. Agr. Res., 1975. V. 18. - № 2. -P. 123-129.

316. Swanson L.V. LH and prolaction in blood serum from estrus to ovulation in Holstein heifers / L.V. Swfnson // J. Anim. Sci. 1971. - 33. - P. 10381041.

317. Wu J.N. Effects of oestrogen and progesterone on the development, ovi-ductal transport and in hypophysectomized pregnaut rats / J.N. Wu // J. Endocrinol. 1971. - 51. - P. 569-574.