Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Физиолого-биохимические изменения при стимуляции репродуктивной функции у свиноматок синтетическим тимогеном

ВАК РФ 03.03.01, Физиология

Автореферат диссертации по теме "Физиолого-биохимические изменения при стимуляции репродуктивной функции у свиноматок синтетическим тимогеном"

РОМАНЕНКО ВИКТОРИЯ НИКОЛАЕВНА

ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ СТИМУЛЯЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ У СВИНОМАТОК СИНТЕТИЧЕСКИМ ТИМОГЕНОМ

Специальность: 03.03.01 - физиология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

¿015

Белгород 2015

005561531

Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Белгородский ГАУ им. В .Я. Горина»

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор,

Бойко Иван Александрович

Официальные оппоненты: Сеин Олег Борисович,

доктор биологических наук, профессор кафедры терапии и акушерства ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА им. проф. И.И. Иванова»;

Крапивина Елена Владимировна,

доктор биологических наук, профессор, зав. кафедрой эпизоотологии, микробиологии, паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВО «Брянский ГАУ»

Ведущая организация: ФГБНУ Всероссийский НИИ физиологии,

биохимии и питания животных

Защита диссертации состоится 24 сентября 2015 г. в «13» часов 00 мин. на заседании диссертационного совета Д 220.004.01, при ФГБОУ ВО «Белгородский государственный аграрный университет им. В.Я. Горина», по адресу: 308503, Россия, Белгородская область, Белгородский район, пос. Майский, ул. Вавилова 1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВО «Белгородский государственный аграрный университет им. В.Я. Горина» и на сайте www.bsaa.edu.ru.

Автореферат разослан « г.

/

Ученый секретарь диссертационного совета

Литвинов Юрий Николаевич

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность. Для совершенствования технологических приемов и биотехнологических методов повышения сохранности и продуктивных показателей свиней в различные периоды выращивания предложено немало методов и средств, но изыскание новых, более эффективных и максимально экологических и физиологичных средств активизации обменных процессов при промышленном содержании животных в настоящее время остается весьма актуальным (Походня Г.С., 2002; Нарижный Г.А., 2005; Сеин О.Б., 2006; Топурия Л.Ю., 2006; Крапивина Е.В., 2007; Бояринцева Т., 2007; Гамко Л.А., 2008; Сердюков Е.И., 2009; Коваленко В.Ф., 2010; Рассолов С.Н., 2011; Буянтуева Д.Т., 2014).

Цель и задачи исследований. Целью исследований было комплексное изучение физиолого-биохимических изменений в тканях и определение эффективности действия синтетического биокорректора тимогена при стимуляции воспроизводительной функции и продуктивных показателей у свиноматок. В задачи исследований входило:

- определение гормональных изменений у свиноматок при использовании тимогена до и после родов;

- изучение степени активизации факторов неспецифического иммунитета у свиноматок;

- исследование морфо-биохимических изменений в общих показателях крови, характеризующих уровень обменных процессов у свиноматок;

- определение гистоструктурных изменений в тканях свиноматок после применения тимогена;

- определение эффективности применения тимогена для повышения воспроизводительной функции и продуктивных показателей свиноматок. Научная новизна. Впервые изучены особенности механизмов активизации обменных процессов, уровня неспецифического иммунитета и стимуляции воспроизводительной функции после применения свиноматкам до и после родов синтетического биокорректора тимогена. Комплексными исследованиями установлены физиолого-биохимические и гистоструктурные изменения в тканях животных после действия глутамил-триптофанового комплекса тимогена, характеризующие его биокорригирующие свойства по стимуляции нейро-эндокринно-иммунных взаимосвязей в организме.

Отличие исследований от других авторов. Представлено физиолого-биохимическое обоснование механизмов стимуляции синтетическим иммуно-модулятором тимогеном обменных процессов у свиноматок в период отъема поросят, позволяющее активизировать их воспроизводительную функцию.

Практическая значимость работы. На основании полученных результатов эффективности применения синтетического иммуномодулятора тимогена дано научное обоснование к его практическому применению в промышленном свиноводстве в качестве средства биотехнологических методов повышения воспроизводительной функции и продуктивных показателей животных.

Положения, выносимые на защиту.

1. Синтетический пептидный иммуномодулятор тимоген активизирует гормональную реакцию организма свиноматок в предродовой и послеродовой периоды.

2. Активизация тимогеном обменных процессов способствует повышению уровня естественной резистентности у свиноматок.

3. Морфо-биохимические изменения в крови свиноматок отражают био-корригирующую направленность действия тимогена.

4. Изменения гистоструктуры иммуннокомпетентных и репродуктивных органов подтверждают механизмы и эффективность применения иммуномодулятора тимогена в качестве средства активизации воспроизводительной функции и продуктивных показателей у свиноматок.

Степень достоверности результатов исследований. Достоверность результатов обеспечивается проведением исследований на достаточном поголовье животных с использованием современных методов исследований, подвергнутых биометрической обработке, а выводы и предложения вытекают из достоверных результатов собственных исследований и согласуются с известными достижениями в этой области физиологии.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, из них 2 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 173 страницах компьютерного текста. Работа содержит 18 табл. и 17 рис. Список литературы — 450 источников, из них 131 на иностранных языках.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объект, схема, условия и объем проведенных исследований

Исследования по выявлению физиолого-биохимических изменений в тканях организма свиней после применения синтетического пептидного иммуномодулятора тимогена для стимуляции воспроизводительной функции были проведены в условиях свинокомплекса АОЗТ «Белгранкорм» производство «Шебекинская свинина» Белгородской области и ЗАО «Троицкое» Губкинского района Белгородской области в зимне-весенний период на поголовье свиноматок средней массой 180 кг, крупной белой породы подобранных в группы по

4

принципу групп-аналогов. В качестве средства стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок применяли синтетический иммуномодулятор тимо-ген. Глутамил-триптофановый комплекс представляет собой синтетическое соединение (С^Нго^ОзЫа), которое в концентрации 0,01% является действующим началом при производстве пептидного иммуномодулятора, выпускаемого под торговым наименованием Тимоген. На основании ранее проведенных комплексных исследований тимогена утверждены Ветеринарным Фармсоветом и Главветупром СССР Технические условия (ТУ 10.07. 169-91) от 1991 года и инструкция на его применение в качестве иммуномодулятора при иммунодефици-тах у животных. Основные лабораторные исследования крови и опыты по выявлению эффективности применения тимогена для стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок были проведены на кафедре зоогигиены и кормления ФГБОУ ВО Белгородский ГАУ им. В.Я.Горина, Белгородской областной ветеринарной лаборатории, вирусологической лаборатории Центра Госсанэпиднадзора Белгородской области, патологоанатомического отдела гор. больницы №2 г. Белгорода (рис.1). Запланированные исследования были распределены на два этапа (табл.1). На первом этапе (предварительный) было проведено две серии производственных исследований на (80 гол) свиноматках пород крупной белой+ландрас+дюрок. В первой серии опытов была изучена эффективность стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок при введении тимогена в различные сроки до родов, во второй серии аналогичные исследовании были проведены на животных после родов. Во втором этапе (основной), так же в двух сериях (до и после родов-200 гол) были проведены лабораторные исследования тканей свиноматок у групп, которые показали наилучшие результаты по воспроизводству в предварительном этапе исследований. Раствор тимогена 0,01% концентрации в опытных группах предварительного и основного этапов исследований вводили внутримышечно в дозе 20 мл/гол/сут в течение 6 сут. В контрольных группах препараты не применяли (интактные животные). Взятие крови для определения морфо-биохимических изменений в крови свиноматок основного этапа исследований осуществляли из хвостовой артерии четыре раза: до введения, в середине исследований и после применения тимогена, согласно схемы исследований. На первом, предварительном этапе исследований, где применяли различные по срокам варианты введения тимогена свиноматкам (до и после родов), была определена эффективность стимуляции половой цикличности и оплодотворяемости животных после отъема поросят, который в хозяйстве проводили на 21-е сут.

Рис.1 - Алгоритм исследований

Определение эффективности и механизмов действия биокорректора тимогена при стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок

Применение тимогена до опороса свиноматок

1- опытная группа 2 -(контроль) группа

Применение тимогена после опороса свиноматок

3-я опытная группа 4-я (контроль) группа

Таблица 1 - Схема исследований

Кол-во Время введения тимогена, сут Время взятия кро-

Группа живот- ви на исследова-

ных, до родов после родов ния, сут

гол

1. Предварительный этап исследований

1-я опытная 10 21-16 - -

2-я опытная 10 15-9 - -

3-я опытная 10 9-3 - -

4-я (контроль) 10 - - -

5-я опытная 10 - 1-6 -

6-я опытная 10 - 9-15 -

7-я опытная 10 - 16-21 -

8-я (контроль) 10 - - -

2. Основной этап исследований

1 -я опытная 50 21-16 - 22; 10; 5; 1

2-я (контроль) 50 - - 22; 10; 5; 1

3-я опытная 50 - 16-21 16; 22; 24; 26

4-я (контроль) 50 - - 16; 22; 24; 26

На втором основном этапе, кроме определения и подтверждения эффективности наилучшего варианта, выбранного по результатам предварительного этапа исследований, были проведены лабораторные морфо-биохимические исследования, согласно общепринятых методик, (Гуков Д.Д.,2001; Кондрахин И.П., 2004) тканей организма свиноматок по следующим показателям: в сыворотке крови - эстрадиола-17Р; прогестерона; кортизола; тироксина; холестерола (общий); триацилглицеролов; общего белка; альбуминов; глобулинов — а, Р, у; АсАТ (аспартатаминотрансферазы); АлАТ (аланинаминотрансферазы); ЩФ (щелочной фосфатазы); эритроцитов; гемоглобина; лейкограммы; БАСК (бактерицидную активность сыворотки крови); ЛАСК (лизоцимную активность сыворотки крови); ФАНК (фагоцитарную активность нейтрофилов крови) и в тканях органов - гистологию лимфоузлов, печени, селезенки, матки, яичников, яйцепроводов.

Полученный цифровой материал обработан статистически при определении достоверности разницы между показателями взятия крови внутри групп (последующие по сравнению с предыдущими) использовали аргумент Стью-дента.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Содержание гормонов

Полученные данные гормональных изменений при различных схемах стимуляции пептидным биокорректором воспроизводительной функции у свиноматок исследуемых групп показали (табл.2), что применение тимогена на 22-16-е сут перед родами (1-я группа) эффективно повышает уровень эстра-диола -17Р за 1 сут перед родами в 12,5 раз (контроль в 8,3 раза) с одновременным снижением концентрации прогестерона в 2,9 раза (контроль-без изменений).

Таблица 2 - Содержание гормонов в сыворотке крови свиноматок

Показатель Группа, п=5 Взятия крови, (сут)

До родов

1 (22-сут) 2 (10-е сут) 3 (5-е сут) 4(1 сут)

Эстрадиол-17р, нмоль/л 1-я опытная 10,1±0,63 11,2±0,82 р2-1 >0,05 98,2±5,94 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 <0,001 126,5±0,74 р4-1 <0,001 р4-2 <0,001 р4-3 <0,01

2-я (контроль) 13,5±1,20 23,9±6,13 р2-1 >0,05 61,2±19,72 рЗ-1 <0,05 рЗ-2 >0,05 113,1±19,7 р4-1 <0,01 р4-2 <0,01 р4-3 >0,05

Прогестерон, нмоль/л 1-я опытная 37,04±1,17 36,68±1,15 р2-1 >0,05 22,64±2,29 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 <0,001 12,9±0,76 р4-1 <0,001 р4-2 <0,001 р4-3 <0,01

2-я (контроль) 29,98±3,77 27,42±2,43 р2-1 >0,05 20,46±1,11 рЗ-1 <0,05 рЗ-2 <0,05 23,20±1,11 р4-1 >0,05 р4-2 >0,05 р4-3 >0,05

Кортизол, нмоль/л 1-я опытная 49,94±1,32 51,54±1,27 р2-1 >0,05 54,64±1,27 рЗ-1 <0,05 рЗ-2 >0,05 54,46±1,27 р4-1 <0,01 р4-2 >0,05 р4-3 >0,01

2-я (контроль) 50,48±0,76 47,98±0,97 р2-1 >0,05 42,44±0,89 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 <0,01 34,04±1,07 р4-1 <0,001 р4-2 <0,001 р4-3 <0,001

Тироксин, нмоль/л 1-я опытная 51,56±1,29 49,18±2,53 р2-1 >0,05 44,94±1,23 рЗ-1 <0,01 рЗ-2 >0,05 32,80±2,04 р4-1 <0,001 р4-2 <0,01 р4-3<0,001

2-я (контроль) 62,62±4,25 60,96±3,79 р2-1 >0,05 57,14±2,77 рЗ-1 >0,05 рЗ-2 >0,05 53,98±2,77 р4-1 >0,05 р4-2 >0,05 р4-3 >0,05

После родов

1 (16-сут) 2 (22-е сут) 3 (24-е сут) 4 (26-е сут)

Эстрадиол-17р, пг/мл 3-я опытная 12,60±4,68 65,77±17,3 р2-1 <0,05 55,20±6,60 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 >0,05 130,14±5,6 р4-1 <0,001 р4-2 <0,01 р4-3<0,001

4-я (контроль) 17,16±3,76 31,50±4,30 р2-1 р<0,05 63,94±4,03 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 <0,001 101,24±4,0 р4-1 <0,001 р4-2<0,001 р4-3<0,001

Прогестерон, нмоль/л 3-я опытная 48,64±0,54 56,00±0,39 р2-1 <0,001 110,56±10,2 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 <0,001 23,04±0,90 р4-1 <0,001 р4-2<0,001 р4-3<0,001

4-я (контроль) 43,24±1,81 47,48±2,60 р2-1 >0,05 32,70±1,28 рЗ-1 <0,01 рЗ-2 <0,001 28,24±1,28 р4-1 <0,001 р4-2<0,001 р4-3 <0,05

Кортизол, нмоль/л 3-я опытная 361,5±105,5 80,72±28,2 р2-1 <0,05 51,18±2,41 рЗ-1 <0,05 рЗ-2 >0,05 47,88±3,37 р4-1 <0,05 р4-2 >0,05 р4-3 >0,05

4-я (контроль) 193,8±45,5 170,0±37,4 р2-1 >0,05 98,4±18,0 рЗ-1 >0,05 рЗ-2 >0,05 73,6±18,0 р4-1 <0,05 р4-2 <0,05 р4-3 >0,05

Тироксин, нмоль/л 3-я опытная 90,90±0,87 55,16±6,59 р2-1 <0,001 47,52±4,97 рЗ-1 <0,001 рЗ-2 >0,05 50,62±1,81 р4-1 <0,001 р4-2 >0,05 р4-3 >0,05

4-я (контроль) 82,42±2,46 77,82±3,59 р2-1 >0,05 71,44±3,62 рЗ-1 <0,05 рЗ-2 >0,05 68,92±3,62 р4-1 <0,05 р4-2 >0,05 р4-3 >0,05

Снижение концентрации кортизола в крови свиноматок 2-й (контроль) группы к 1-м сут перед родами, по отношению к первоначальному уровню составило 32,6%, р<0,001, а в 1-й группе, наоборот, установлено незначительное повышение его на 8,3%, р<0,01. Снижение концентрации тироксина к моменту родов от первоначального значения на 22-е сут составило 36,4%, а во 2-й (контроль) группе 13,8%. В 3-й группе к 26-м сут после родов (5-е сут после отъема поросят) и введения тимогена повышение по отношению к первоначальному значению гормона (на 2-е сут) составило в 10,3 раза, р<0,001, а в 4-й (контроль) группе - в 5,9 раза, р<0,001 (в 2 раза меньше, чем в 3-й группе). Снижение количества кортизола к 5-м сут после отъема поросят (26-е сут после родов) по сравнению с исходным его значением на 16-е сут составило в 3-й группе 7,5 раза, р<0,05, а в 4-й (контроль) группе — в 2,6 раза, р <0,05, что на 65,4% меньше, чем в 3-й группе. Уровень снижения тироксина у свиноматок к 26-м сут после родов (5-сут после отъема поросят) составил в 3-й группе 44,4%, р <0,001, а в 4-й (контроль) группе — 16,4%, р<0,05, что было меньше на 28,0%, чем в 1-й группе. С повышением содержания в крови половых гормонов содержание тиреоидных гормонов снижается, что в наибольшей степени проявилось после родов у свиноматок 3-й группы, где применяли биокорректор тимоген.

3.2. Белок и белковые фракции

Повышение после применения тимогена (1-я группа) к 1-м сут перед родами количества общего белка на 13,0% (контроль - на 3,2%), альбуминов на 22,6%, (контроль - 11,1%), Р -глобулинов в 1,7 раза (контроль - 1,4 раза), характеризует его способность стимулировать белоксинтезирующую функцию печени, а тенденция снижения в крови у-глобулиновой фракции к 1-м сут перед родами связана с накоплением их в молочной железе в виде иммунных глобулинов молозива, что важно для сохранности поросят на подсосе. Снижение к 5-м сут после отъема поросят по сравнению с первоначальным значением (на 2-е сут после родов) у-глобулиновой фракции на 26,0% у свиноматок 3-й группы (контроль — повышение в 1,2 раза), свидетельствует о снижении уровня возможных воспалительных процессов в подсосном периоде.

3.3. Липидные показатели

У свиноматок 1-й группы к 1-м сут перед родами повышение уровня триацилглицеролов по сравнению с изначальным их количеством до применения тимогена (22-е сут) составило в 1,3 раза, а во 2-й (контроль) группе, наоборот, отмечена тенденция снижения триацилглицеролов ко 2-м сут на 20,7%. Повышение в крови свиноматок 1-й группы ко 2-м сут перед родами Р-липопротеидов по сравнению с их уровнем до применения тимогена (22-е сут) составило в 1,7 раза, р<0,001, а во 2-й (контроль) группе на 30,0%, р<0,05. Установлено повышение концентрации холестерола к 1-м сут перед родами в 1,4 раза, р<0,01 по сравнению с уровнем до введения препарата (на 22-е сут), а во 2-й (контроль) группе такое повышение было незначительным - 7,4%. Повышение к 26-м сут после применения тимогена количества Р-липопротеидов в крови по отношению к изначальному состоянию до введения биокорректора, составило у свиноматок 3-й группы 73,5%, р<0,001, а в 4-й (контроль) группе -50,0%, р<0,05, что меньше на 23,5%. Учитывая то, что ЛПНП транспортируют триацилглицеролы, холестерол и фосфолипиды от печени к тканям, повышение их уровня содержания обеспечивает интенсивность обменных процессов и образование половых стероидов необходимых для индукции полового цикла у свиноматок в послеотъемный период. Повышение количества холестерола к 26-м сут после родов у свиноматок 3-й группы составило в 1,7 раза, р<0,001, а в 4-й (контроль) группе - на 43,5%, р<0,001. В связи с тем, что восстановлению полноценных половых циклов предшествует повышение количества общего холестерола в крови самок животных в послеродовом периоде, увеличение содержания холестерола в крови свиноматок 3-й группы является фактором улучшения направленности и уровня метаболических реакций при смене физиологического состояния беременности на послеродовой период и восстановления половой цикличности у свиноматок.

3.4. Ферментативная активность в крови свиноматок

Снижение активности фермента АлАТ ко 2-м сут перед родами в 1-й группе свиноматок составило 17,5%, р<0,05,(до 22,68±0,60 нмоль/с*л), а во 2-й (контроль) группе - 11,0%, р<0,05, (до 27,92±1,01 нмоль/с*л ), что меньше на 6,5%. Полученные результаты активности АсАТ ко 2-м сут перед родами в 1-й группе свиноматок по сравнению с изначальными его значениями до введения тимогена (22-е сут) характеризовались повышением на 33,3%, р<0,05, а во 2-й группе — в 1,8 раза, р<0,001, что больше на 50,2%. Отмеченные изменения активности АсАТ в обеих группах находились в пределах физиологически нормальных значений. Учитывая то, что активность аминотрансфераз повышается

при наличии интоксикации организма (особенно при беременности) и напряже-

ю

нии детоксикационной функции печени при этом, сниженный уровень активности АлАТ и АсАТ в 1-й группе по сравнению со 2-й (контроль) группой свидетельствует о наличии снижающих фето-плацентарную недостаточность и усиливающих гепатопротекторную активность свойств у тимогена. В 3-й группе животных после применения тимогена активность АсАТ к 26-м сут имела тенденцию незначительного повышения (на 15,4%) по сравнению с активностью на 16-е сут, а у свиноматок 4-й (контроль) группы повышение составило 59,1%, что больше значения в 3-й группе на 43,7%. Повышение к 5-м сут (26-е сут) после отъема поросят фермента ЩФ у свиноматок 4-й группы на 15,0%, р<0,01 (до 33,50±0,48 ед/л), против неизменного состояния фермента в 3-й группе (27,28±0,78 ед/л), отражает положительное биокорегирующее влияние тимогена.

3.5. Изменення показателен общего гематологического анализа

Отмеченный уровень содержания эритроцитов в крови свиноматок 1-й группы ко 2-м сут перед родами соответствовал нижней границе нормы (6,00±0,08*1012/л), а во 2-й группе был ниже ее на 2,4%, то есть применение тимогена в 1-й группе свиноматок способствовало более лучшей обеспеченности процессов метаболизма в родовой период. Повышение количества лейкоцитов у свиноматок 1-й группы (до 14,44±0,61 *Ю9/л) ко 2-м сут перед родами, по сравнению с изначальным их содержанием на 22-е сут составило 10,4%, а во 2-й группе - 17,7%, (15,96±0,19*109/л, р<0,001). В 1-й группе свиноматок снижение СОЭ к 1-м сут перед родами, по отношению к первоначальному значению составило в 3,9 раза, р<0,05, а во 2-й (контроль) группе - в 1,8 раза, р<0,05. В обеих группах СОЭ ко 2-м сут соответствовала нижней границе физиологической нормы, но в 1-й группе динамика снижения СОЭ была в 2,1 раза быстрее, чем во 2-й (контроль) группе, что очевидно связано с активизацией тимогеном обменных процессов в организме свиноматок перед родами. В 3-й и 4-й группах содержание эритроцитов и лейкоцитов практически не менялось к 5-м сут после отъема поросят (26-е сут). Снижение к 26-м сут от изначального состояния на 16-е сут (до введения тимогена) уровня СОЭ у свиноматок 3-й группы составило 47,4%, р<0,05, а в 4-й (контроль) группе - 10,0%. СОЭ в 3-й группе свиноматок на 26-е сут составила 2,00±0,00 мм/ч, а в 4-й (контроль) группе -3,60±0,24 мм/ч, что на 44,5% больше, чем в 3-й (контроль) группе. Учитывая то, что ускорению оседания эритроцитов способствуют глобулины, которые после родов в 4-й группе суммарно составили 63,62% (у-глобулины - 33,64%), а в 3-й группе - 53,64% (у-глобулины -20,58%), применение после родов тимогена свиноматкам 3-й группы способствует повышению защитных сил и снижению уровня морфофункциональных нарушений в репродуктивных органах.

11

3.6. Лейкограмма свиноматок

Дифференциальный подсчет лейкоцитов у свиноматок исследуемых групп показал, что у животных 1-й группы установлено повышение количества эозинофилов на 28,0%, р<0,01 к 1-м сут перед родами (до 4,61±0,24%), по отношению к изначальному уровню, что соответствовало нижней границе нормы, а во 2-й группе, наоборот, отмечено снижение их уровня на 5,9% (до 3,20±0,40%), что ниже нормы на 6,0%. Подъем к 1-м сут перед родами уровня содержания эозинофилов до нормальных значений в 1-й группе свиноматок, очевидно, характеризует стимуляцию тимогеном фагоцитарной реакции организма, которая мало выражена у животных 2-й (контроль) группы. Превышение количества моноцитов в 1-й группе к периоду родов, по отношению к первоначальному значению до применения тимогена составило в 1,5 раза, р<0,01, а во 2-й группе - 40,7%, р<0,01. Отмеченный моноцитоз в 1-й и 2-й (контроль) группах составил, соответственно, 68,0 и 52,0%. Увеличение количества моноцитов, очевидно, связано с повышением защитных сил организма по фагоцитированию микробных тел, клеточных остатков и различных токсических продуктов и недостаточности фето-плацентарного комплекса перед родами, которое в наибольшей степени было выражено у свиноматок 1-й группы после применения тимогена. Снижение количества нейтрофилов палочкоядерных к 1-м сут перед родами по отношению к 22-м сут в 1-й группе составило 40,0%, р<0,001, а во 2-й (контроль) группе — 44,5%, р<0,001. В 1-й группе к 1-м сут перед родами количество нейтрофилов палочкоядерных было на 40,0% меньше от нормы, а во 2-й группе — на 33,4%. Наличие большего (на 6,6%) количества нейтрофилов палочкоядерных к 1-м сут перед родами в крови свиноматок 2-й (контроль) группы, чем в 1-й группе, так же свидетельствует о повышенной защитной (фагоцитарной и лизоцимной) реакции организма на возможную фето-плацентарную недостаточность. В 1-й группе свиноматок отмечено повышение к 1-м сут количества нейтрофилов сегментоядерных по отношению к 22-м сут (до применения тимогена) на 27,3%, р<0,05, а во 2-й (контроль) группе повышение было незначительным — 2,9%. Превышение от нормы (нейтрофилез) к концу исследований в 1-й группе составило 54,2%, во 2-й (контроль) группе -21,7%. Отмеченные изменения характеризуют повышение защитных сил организма к интоксикации в предродовом периоде, которые в 1-й группе стимулируются тимогеном. Снижение к 26-м сут после родов количества нейтрофилов сегментоядерных по сравнению с первоначальным их уровнем на 16-е сут составило в 3-й группе 23,2%, р<0,05, а в 4-й (контроль) группе - 16,9%, р<0,05. Повышенное от нормы содержание нейтрофилов сегментоядерных на 16-е сут после родов в обеих группах (нейтрофилез), очевидно, связано с активизацией

защитных сил организма свиноматок к наличию послеродовой интоксикации в организме, а более интенсивное восстановление их к нормальным значениям после родов (к 26-м сут) в 3-й группе характеризует биокорригирующие свойства тимогена. Изменения количества остальных видов лейкоцитов после применения тимогена на 16-21-е сут после родов не имели достоверных изменений к 5-м сут после отъема поросят.

3.7. Динамика показателен естественной резистентностн

Отмеченные изменения в динамике показателей естественной рези-стетности у свиноматок исследуемых групп (табл.3) показали, что после применения биокорректора тимогена свиноматкам за 21-16 сут до родов, суммарное повышение активности показателей естественной резистетности к 1-м сут перед родами, по сравнению с исходным уровнем составило 8,8%, р<0,001, в контрольной группе - 6,2%. После применения тимогена на 16-21-е сут после родов суммарное превышение к 26-м сут после родов (5-е сут после отъема) было 16,0%, а в контрольной группе - 2,1%.

Таблица 3 - Показатели естественной резистентности

Показатель Группа, п=5 Взятия крови, сут

До родов

1 (22-сут) 2 (10-е сут) 3 (5-е сут) 4 (1-е сут)

БАСК, % 1-я Опытная 65,23±1,80 66,92±1,66 р2-1 р>0,05 68,55±1,53 рЗ-1 р>0,05 рЗ-2 р>0,05 72,77±0,55 р4-1 р<0,001 р4-2 р<0,01 р4-3 р<0,05

2-я (контроль) 6530±1,54 67,32±1,47 р2-1 р>0,05 67,16±0,84 рЗ-1 р>0,05 рЗ-2 р>0,05 68,80±0,74 р4-1 р>0,05 р4-2 р>0,05 р4-3 р>0,05

ЛАСК, % 1-я Опытная 20,81±0,41 22,19±037 р2-1 р<0,05 22,57±0,32 рЗ-1 р<0,01 рЗ-2 р>0,05 22,85±0,32 р4-1 р<0,001 р4-2 р>0,05 р4-3 р>0,05

2-я (контроль) 21,63±0,18 22,17±0,15 р2-1 р<0,05 22,63±0,10 рЗ-1 р<0,001 рЗ-2 р<0,05 22,13±0,10 р4-1 р<0,001 р4-2 р<0,001 р4-3 р<0,01

ФАНК, % 1-я Опытная 66,61±0,73 67,59±0,65 р2-1 р>0,05 69,06±0,43 рЗ-1 р<0,01 рЗ-2 р>0,05 70,48±0,24 р4-1 р<0,001 р4-2 р<0,001 р4-3 р<0,05

2-я (контроль) 66,44±0,46 67,86±0,36 р2-1 р<0,05 69,13±0,31 рЗ-1 р<0,001 рЗ-2 р<0,05 70,91 ±0,30 р4-1 р<0,001 р4-2р<0,001 р4-3 р<0,001

После родов

1 (16-сут) 2 (22-е сут) 3 (24-е сут) 4 (26-е сут)

БАСК, % 3-я опытная 64,09±1,60 69,37±0,73 р2-1 р<0,01 73,30±0,49 рЗ-1 р<0,001 рЗ-2 р<0,001 78,17±8,25 р4-1 р>0,05 р4-2 р>0,05 р4-3 р>0,05

4-я (контроль) 65,59±1,52 67,9± 1,36 р2-1 р>0,05 66,94±1,38 рЗ-1 р>0,05 рЗ-2 р>0,05 65,99±1,36 р4-1 р>0,05 р4-2 р>0,05 р4-3 р>0,05

ЛАСК, % 3-я опытная 21,99±0,30 22,96±0,22 р2-1 р<0,05 23,95±0,10 рЗ-1 р<0,001 рЗ-2 р<0,001 25,31±0,16 р4-1 р<0,001 р4-2 р<0,001 р4-3 р<0,001

4-я (контроль) 21,9±0,17 22,34±0,18 р2-1 р>0,05 22,92±0,20 рЗ-1 р<0,01 рЗ-2 р<0,01 23,70±0,08 р4-1 р<0,001 р4-2 р<0,001 _р4-3 р<0,01

ФАНК, % 3-я опытная 66,92±0,39 69,95±0,33 р2-1 р<0,001 71,37±0,31 рЗ-1 р<0,001 рЗ-2 р<0,01 74,00±0,30 р4-1 р<0,001 р4-2р<0,001 р4-3 р<0,001

4-я (контроль) 65,49±0,40 67,88±0,40 р2-1 р<0,001 66,23±0,70 рЗ-1 р>0,05 рЗ-2 р>0,05 66,68±1,46 р4-1 р>0,05 р4-2 р>0,05 р4-3 р>0,05

Отмеченный характер иммуностимулирующих механизмов аминокислот, составляющих дипептидный комплекс тимогена, наиболее полно проявился в активизации факторов естественной резистентности к 5-м сут после отъема поросят после применения тимогена на 21-16-е сут перед родами.

3.8. Гистоморфологические изменения в половых и вторичных иммунокомпетентных органах

Гистологические исследования половых и вторичных иммунокомпетентных органов свиноматок исследуемых групп показали, что при различных вариантах стимуляции репродуктивной функции имеются характерные для процессов восстановления гистоморфологические изменения в тканях и органах. Гистологические изменения в тканях исследуемых органов свиноматок 4-й (контроль) группы показали развитие изменений характерных для начальной стадии хронического гепатита, оофорита, сальпингита, а изменения в лимфатическом узле и селезенке соответствуют признакам иммунодефицитного синдрома. У свиноматок 3-й группы выраженных признаков морфофункциональ-ных нарушений в исследуемых органах не отмечено и в сравнении с животными 4-й группы отмеченные гистоструктурные изменения свидетельствуют о соответствующих нормальным физиологическим изменениям в защитно-

приспособительных реакциях в организме после отъема поросят и становлении у них своевременной половой цикличности.

3.9. Эффективность стимуляции воспроизводительной функции

По совокупности установленных изменений физиологического состояния свиноматок и новорожденных поросят можно отметить (табл.4), что наилучшим вариантом применения тимогена по сравнению с контрольными группами в предварительном этапе следует считать его введение в дозе 20 мл/гол/сут на 21-16-е сут перед родами (оплодотоворилось свиноматок больше на 14,2%, масса новорожденных поросят больше на 7,6% и наличие ММ А у свиноматок меньше на 33,4%) и в аналогичной дозе на 16—21 сут после родов (оплодотоворилось свиноматок больше на 14,2%).

Таблица 4 Показатели воспроизводительной и продуктивной функции

Груп- Кол- Время Проявило Оплодотв- Гипотроф- Масса Наличие

па во, введения половую орилось, иков, гол., ново- ММА,гол.

гол тимогена, цикличн- гол., (%) (%) рожден- (%)

сут. ость, гол., ных по-

%. росят,кг

1. Предварительный этап исследований

Введение тимогена до родов

1 10 21-16 8(80,0) 8(80,0) 2 (20,0) 1,4 2(20,0)

2 10 15-9 7(70,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 2(20,0)

3 10 9-3 8(80,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 2(20,0)

4к 10 - 7(70,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 3(30,0)

Введение тимогена после родов

5 10 1-6 7 (70,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 3(30,0)

6 10 9-15 8 (80,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 3(30,0)

7 10 16-21 8(80,0) 8 (80,0) 2 (20,0) 1,3 3(30,0)

8к 10 - 7 (70,0) 7 (70,0) 2 (20,0) 1,3 3(30,0)

2. Основной этап исследовании

Введение тимогена до родов

1 50 21-16 43 (86,0) 40 (80,0) 7(14,0) 1,4 5 (10,0)

2к 50 - 38 (76,0) 36 (72,0) 10(20,0) 1,3 12(24,0)

Введение тимогена после родов

3 50 16-21 48 (96,0) 48 (96,0) 10(20,0) 1,3 12(24,0)

4к 50 - 38 (76,0) 36 (72,0) 10(20,0) 1,3 12(24,0)

Применение тимогена до родов свиноматкам 1-й группы в основном этапе исследований показало, что после его введения (п=50) на 21-16-е сут, проявили в дальнейшем половую цикличность 86,0%, а оплодотворились 80,0% свиноматок. Количество поросят гипотрофиков в группе составило 14,0%, а масса поросят в среднем по группе была 1,4 кг. Наличие ММА отмечено у 10,0% свиноматок. Во 2-й (контроль) группе половая цикличность установлена

у 76,0%, а оплодотворяемость у 72,0% свиноматок. При этом количество поросят гипотрофиков составило 20,0%, а средняя масса новорожденных поросят в группе —1,3 кг. Количество свиноматок, проявивших синдром ММА, было 24,0%. После родов количество поросят гипотрофиков в 3-й группе составляло так же 20,0% при средней массе новорожденных 1,3 кг. Количество свиноматок с ММА было 24,0%. Введение тимогена свиноматкам 3-й группы (п=50) на 1621-е сут после родов способствовало проявлению половой цикличности и оплодотворению 96,0% животных на 5-е сут после отъема поросят. В 4-й (контроль) группе количество гипотрофиков так же составляло 20,0% при средней массе новорожденных 1,3 кг. Количество свиноматок с ММА было 24,0%. Проявило половую цикличность к концу исследований (26-сут после родов) 76,0%, а плодотворно осеменились 72,0% свиноматок. Получено поросят в среднем на одну свиноматку в 1 - 3-й группах 11 гол, в 4-й (контроль) 10 гол. Таким образом, после применения тимогена перед родами в сравнении с контрольной группой превышение по оплодотворяемости составило 11,1%, снижение по количеству поросят гипотрофиков на 30,0% и количества свиноматок с ММА -на 58,4%. После применения тимогена после родов оплодотоворяемость в 3-й группе свиноматок по сравнению с 4-й (контроль) группой была больше на 33,3%, а остальные показатели были одинаковыми.

Экономическая эффективность в расчете на 1 рубль затрат после применения тимогена до родов составила 6,50 рубля.

ВЫВОДЫ

1. Стимулирующее воспроизводительную функцию действие синтетического иммуномодулятора тимогена проявляется в активизации иммунно-эндокринных взаимосвязей в организме свиноматок.

2. Гормонокорригирующие свойства биокорректора тимогена характеризовались:

а) применение перед родами:

— повышением к 1-м сут перед родами в крови эстрадиола-17р в 12,5 раз, кортизола на 9,0% ;

— снижением прогестерона - в 2,9 раза и тироксина на 36,4%;

б) применение после родов:

- повышением к 5-м сут после отъема поросят эстрадиола -17Р в 10,3

раза;

— снижением прогестерона в 2,1 раза, кортизола в 7,5 раза и тироксина на 44,4%.

3.Стимулирующее обменные процессы действие тимогена проявилось:

а) применение перед родами:

- повышением к 1-м сут перед родами в крови общего белка на 13,0%, альбуминов на 22,6%, р -глобулинов в 1,7 раза, Р-липопротеидов в 1,7 раза, холестерина в 1,4 раза, АсАТ на 33,3%, эозинофилов на 28,0%, моноцитов в 1,5 раза, нейтрофилов сегментоядерных на 27,3%, суммарно БАСК, ЛАСК и ФАНК на 8,8%;

- снижением АлАТ на 17,5%, СОЭ - в 3,9 раза, количество лейкоцитов - без изменений, нейтрофилов палочкоядерных в 1,6 раза;

б) применение после родов:

- повышением к 5-м сут после отъема поросят общего белка на 19,4%, альбумины — без изменений, Р-липопротеидов в 1,7 раза, холестерина в 1,7 раза, АсАТ и ЩФ - без изменений, суммарно БАСК, ЛАСК и ФАНК на 16,0%;

- снижением у-глобулинов на 26,0%, триглицеридов в 2,1 раза, лейкоцитов на 14,0%, СОЭ - в 1,9 раза, нейтрофилов сегментоядерных на 23,2%.

4. Гистоморфологические изменения в иммунокомпетентных и репродуктивных органах свиноматок после применения тимогена в послеродовом периоде свидетельствуют о наличии более выраженных защитно-приспособительных изменений после отъема поросят, характеризующихся отсутствием начальной стадии хронического гепатита, оофорита, сальпингита и признаков иммунодефицитного синдрома в лимфоузлах и селезенке, имеющихся у интактных животных в контроле.

5. Применение тимогена свиноматкам в дозе 20 мл/гол/сут в/мышечно:

а) в течение 21-16 сут перед родами стимулировало половую цикличность у 86,0%, а оплодотворение - 80,0% свиноматок. Средняя масса поросят при рождении составила 1,4 кг, а количество поросят гипотрофиков -14,0%. Наличие ММА отмечено у 10,0% свиноматок. В контроле: половая цикличность отмечена у 76,0%; оплодотворяемость - 72,0%; масса новорожденных -1,3кг; количество гипотрофиков -20,0%; свиноматок с ММА - 24,0%;

б) в течение 16-21 сут после родов стимулировало появление половой цикличности и оплодотворяемости на 5-е сут после отъема поросят у 96,0% свиноматок.

в) получено поросят в среднем на одну свиноматку в 1 - 3-й группах 11 гол, в 4-й (контроль) -10 гол.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для стимуляции продуктивных показателей и воспроизводительной функции у свиноматок после отъема поросят рекомендуем применять внутримышечно 0,01% раствора синтетического иммуномодулятора тимогена на 2116-е сут перед родами в дозе 20 мл/гол/сут.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ОТРАЖЕНЫ В СЛЕДУЮЩИХ ПУБЛИКАЦИЯХ Статьи, опубликованные в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных Перечнем ВАК Минобрнауки РФ

1.Романенко В.Н. Гормонокорригирующие свойства синтетического ти-могена при стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок /В.Н.Романенко, H.A. Бойко//Вестник Красноярский ГАУ, Красноярск, 2015.-№4,- С. 144-149.

2. Романенко В.Н. Влияние синтетического тимогена на белковые показатели крови при стимуляции обменных процессов у свиноматок/ В.Н.Романенко, И.А. Бойко//Известия Оренбургского ГАУ, Оренбург, №3,(53), 2015.- С. 194198.

Публикации в журналах, сборниках научных трудов и материалах конференций

3. Романенко В.Н. Эффективность применения синтетического иммуномо-дулятора тимогена для стимуляции воспроизводительной функции у свиноматок/В.Н. Романенко, И.А. Бойко//Мат. межд. конф. «Теория и практика устойчивому развитию АПК», Т.2, 17-20 февраля, 2015,Ижевская ГСХА, Ижевск.-С.41-44.

4. Романенко В.Н. Влияние синтетического иммуномодулятора тимогена на липидные компоненты крови свиноматок /В.Н. Романенко, И.А. Бойко//Мат. межд. конф. «Современные научно-практические достижения в ветеринарии» Вып.6, 9-10 апреля, 2015, Вятская ГСХА, Киров,- С.42-46.

5. Романенко В.Н. Влияние синтетического тимогена на отдельные виды лейкоцитов при стимуляции обменных процессов у свиноматок/ В.Н. Романенко, И.А. Бойко//Мат. межд. конф. «Развитие АПК:теория, практика, перспективы.16-17 апреля, 2015. Великолукская ГСХА, Великие Луки.- С.61-67.

6. Романенко В.Н. Применение синтетического тимогена для стимуляции естественной резистентности у свиноматок/ В.Н. Романенко, И.А. Бойко, В.Н. Позднякова//Мат межд. конф., «Инновационные пути импортозамещения продукции АПК» 23-24 апреля 2015, Донской ГАУ, пос. Персиановский.- С.58-62.

РОМАНЕНКО ВИКТОРИЯ НИКОЛАЕВНА

ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ СТИМУЛЯЦИИ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ У СВИНОМАТОК СИНТЕТИЧЕСКИМ ТИМОГЕНОМ

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Сдано в набор 6 июля 2015 г. Подписано в печать 1 июля 2015 г. Формат 60x84 '/|й. Бумага Снегурочка. Объем 1,0 усл. п. л. Тираж 100 экз. Заказ 25

Издательство Белгородского ГАУ. Отпечатано в типографии Белгородского ГАУ. 308503, пос. Майский, Белгородской области