Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ФИТОТОКСИЧНОСТЬ ТРИАЗИНОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ, РОЛЬ ОРГАНИЧЕСКИХ ДОБАВОК И МИКРОФЛОРЫ ПОЧВЫ В ИХ РАЗЛОЖЕНИИ И ДЕТОКСИКАЦИИ

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "ФИТОТОКСИЧНОСТЬ ТРИАЗИНОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ, РОЛЬ ОРГАНИЧЕСКИХ ДОБАВОК И МИКРОФЛОРЫ ПОЧВЫ В ИХ РАЗЛОЖЕНИИ И ДЕТОКСИКАЦИИ"



МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ЛЕНИНА И ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ имени К. А. ТИМИРЯЗЕВА

На правах рукописи ТЛАС Фарзат Касем Сулейман

УДК 631.427.1:632.954

ФИТОТОКСИЧНОСТЬ ТРИАЗИНОВЫХ ГЕРБИЦИДОВ, РОЛЬ ОРГАНИЧЕСКИХ ДОБАВОК И МИКРОФЛОРЫ ПОЧВЫ В ИХ РАЗЛОЖЕНИИ И ДЕТОКСИКАЦИИ

Специальность 03.00.07 — микробиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

МОСКВА — 1983

w—

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОЮ • ХОЗЯЙСТВА СССР

МОТОВСКАЯ ОКША ЛЕНИНА И ОРДЕНА . ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ . СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ им. К.А.ТШШЗЕВА

На правах рукописи

ТЛАС. Фарзат Касем Сулейман

УДК 631,427,1:632„•954

ФИТОТОКСЖЧНОСТЬ ТШАЗИНОШХ ГЕРБИЦИДОВ, РОЛЬ ОРГАНИЧЕСКИХ ДОБАВОК И ЩКРОЭДОРЫ ПОЧВЫ В ИХ РАЗЛОЖЕНИИ И ДЕТОКСИКДЦИИ

Специальность 03..00.0? - микробиология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

А-т^Щ;:;...

Центральная Научная (Мзютею - .

Л- еа > V:. воньсклил^стггн." ЕЬСЛСЕН у • «■,'• К1' К- Т' «"яти'.

Москва - 1983

Работа выложена на кафедре хиетчесіях средств защиты растений и на кафедре микробиологии Московской сельскохозяйст~ венной академии им. К.А.те!.арязева.

Научные руководители: доктор с.-х. наук, профессор

С.С.Груздев;

доктор биологических наук, профессор В.Т.Емцев.

Официальные оппоненты: Д.Г.Звягинцев - доктор биологических наук, профессор.

А.К.Миненко - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник.

Ведущее предприятие - Всесоюзный научно-исследовательский институт охраны природы и заповедного дела МСХ СССР.

Защита диссертации состоится " <f " -tl-lû^f.Ç ІШ 3 г. в ^ °° ча0, на заседании Специализированного совета К-І20.35.01 в Московской сельскохозяйственной академии имени К.А.Тимирязева (127550, Москва, И-550, Тимирязевская ул., дом 47).

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ ТСХА. , Автореферат разослан сио ,Q 19&Jг.

Ученый секретарь Специализированного совета -кандидат сельскохозяйственных наук

Z'

Н.А.Гончарова

; шш хараетен'.стика работы

Актуальность теш. Как известно, одно из первых ьтест по объему производства гербицидов занимают триазикы (атразкн и симазин), ппроко прткешшцаеся при.вырацаванна кукурузы, сорго, проса, плодов и овощей. Остатки триазннов кягут довольно до;хо

(до 18 кос.) сохраняться в почве и причинять суцеетЕекшй вред ♦

иосдодукзпд культурам. В связи с этим необходимо изыскать путл ениженгя £нтотоксичпости, а такге разложения гербицидов, в том число и триазинов, в почве.

3 литературе указывается, что фатотовслчпость гербицидов значительно снижается при внесении различных органическая добавок (листьев и стеблей кукурузы, еолош," сидератов) в почву,

В литературе ккошея такне «ведения* об участки почвенных микроорганизмов в деградации гербицидов. Так, отмечается, что я разложении триазипов (симазина и атразнна) больсая роль пру-дадлеетт тагсм микроорганизмам, как микроскопические грибы, но-которю бактерии п актиношцеты, а такке микроскопические водоросли.

Однако многие вопроси, касающееся значения органических добавок п почветшх микроорганизмов в разложении и детокешхщки тр!азпновнх гербицидов, остаются недостаточно гзученнш.ш.

Цель л зоттотя ггег-лодорлвиа. Целью нагих исследований являлось изучение фптотоксичпосп; снмазина и атраьина я роли орга^ нических добавок и микроорганизмов почва в разложении и деток-^ сикахии гербицидов. В 'связа с этим ставились задачи изучить:

\ - длительность фитотоксичности снмазина и-атразана в дер-ново-нодзолистой.среднесугланистой почве;-' . : - способы: снижения ^итотоксичности симазина и атразина в

дэрново-подзолистой почве;

- влияние возрастающих доз спг-азина и атраззна на гсжро-. флору почвы;

- кикроорганязїн, разлагатае скілазии и атразин.. .

Нптчвая кор-лзнп работы. В данной работе впервые установлено, что по і.:еро повышения концентрация гербицидов в среде увеличивается относительное содеряание представителей автохтонной группы еткроорганизиов, ісшераяізретх гумусовые вещества -

, Nöcondia , Microтпо-nospora. j Becfod«1"« ■, Впервые в олективных условиях, используя метод гелевых пластан. Зппоградского, показано влияние" силазіша и атразина на образование ігикропейзахей автохтонной микрофлоры. Установлена потенциальная способность выделенных чистых культур A*Hiroß&cfar , Noctozdia л MicffOTntynospoini- использовать скыазпн н атразпн в качестве единственного источника углерода и азота.' Заявлена способность органических добавок стимулировать развитие яв только аамогенной, но п автохтотшй микрофлоры, активно разлагающей гербициды. Показано, что внесение органических добавок в дерново-подзолистую почву существенно ускоряет детоксикапию сиїлазина п атразина. * .

Практическая значимость. Полученные в работе данные когут быть использованы при разработке пражтаческгх'приецов интенсификации и регулирования ьякробиологичёского разложения и деток-, сикашга гербицидов (сшазина и атразина) в почва, а таиока двя , обоснования оптимальных способов их использования в сельском хозяйстве. ' ; - . .

Работа выполнена на кафедре микробиологии и кафедре хшш-ческих средств заняты растений ТСХА. , , ,

Апробпдая■ ■работы. Основные положения диссертации долоеєнн

і '

-•■а -

на научной конференции ТСХА в 1981 к 1982 годах.

Публикация работы. Основное содержание работы опубликовано в 4 статьях.

Объем работы. Диссертационная работа содержит 124 страшит ыапинописного текста, 33 таблицы, 8 рисунков. Список использованной литературы вклклает 179 работ; в том числе 81 зарубе-т-ных автокод. _

' . объекты и метод! исс£шзба131я

Налило огганпчестзпс добавок на сннг.онпо Фетотоккгчкости ■ста/лаяна я лттазкна и на чзпсро&лорт почвы. При изучении алияшш органических добавок на снижение.фитотоксического дсйстеня к токсического .влияния на ¡ликрофлору -сииазина я атразика был поставлен ВОГОТОЦИОШПЙ ОПЫТ с ДерНОБО-ПОДЗОЛЛСТОЙ почвой, взятой с Лесной опытной дачи ТСХА, но на фоне изеэсти и №К.

В качестве органических добавок использовали: гукат натрия (из тор£а),, порспок пз соломы и"стеблей кукурузы, порошок из з^ровосыш лиотьев, навоз, порошок из стеблей л листьев КуЗСуруЗЫ •и порошок из листьев древесных вносили пз расчета 2% сухой шеей от веса почвы; навоз - сухой классы от веса почвы. Гербициды (атразпн п сиглзин) вносили из расчета 2 глг/кг д.в. на ки-лограмл почвы.

Влажность почвы в опыте такае поддергивалась.на уровне 60^ от п:в., а биотестом служил я-влень сорта Московский 121. Через 15 дпой поме посева определяли: шеоту растений и сырой Бес проростков ячменя и проводргиш микробиологический анатиз почвы методой Коха'при посеве-почвенной суспензии на плотных средах

(кш. икаа) ': .' • . ■/-.■; ..V:

Отработка'оптимальных доз навоза.' способствующих интенсив-

ног"»' глзлп^ешп с?;'лпттна в нотве. Хдя установления оптимальных доз навоза, способстзуззц:іх интенсивному разложению симазина в почве, била поставлены лабораторний и полевой опыты.

3 лабораторном опыте попользовалась дерново-подзолистая среднесуглинистая почва с.обменной кислотностью (pH KCl) равной 5,4. 3 почву вносили минеральные удобрения ( NFK) из расчета NI50^I50KI50 к известь в дозе 2/3 от гидролитической кислотно- . сти. Симазин вносился в двухкратной дозе - 4 кг/га д.в. (1,3 мг/кг).

Биотестом служила кукуруза. Повторность опыта 3-кратная. Уролай снижали в стадии.молочной спелости початков..

Микробиологические анализы проводили на срезах ЇЯІА, КАА и КА. чорез 3, 25 и 90 дней после посева.

Одновременно с вегетационным опытом был заложен и полевой спит в совхозе "Память Ильича" Пушкинского района Московской области на дерново-подзолистой среднесугдинистой почве, где в течение 4-х лот выращивалась монокультура кукурузы. Ежегодно после посева в почву вносили симазин в дозе 2,5 кг/га д.в., а после уборки кукурузы - 60 т/га когаоста и минеральные удобрения

< tiI50PI00KI00) •

Опытное поле из-под кукурузы после внесения компоста, минеральных удобрений и пестицида разделили на 4 участка. Первый участок был обработан жидким навозом из расчета 300 т/га (содержание сухого вещества - 8%); на второй - 150 т/га, на третий -75 т/га. Четвертый участок слузил контролем. В него навоз не вкосился.

Влияние органических добавок на интенсивность разложения сп!'лаина ь-якроорганизмами. Для решения отого вопроса был заложен опыт на голевых пластинах. Гелевые пластины пропитывались 3 мл

минеральной среды без источников углерода и азота. Затек пластаны были шесены органические, добавки (гуг-ат натрия, лигнин, сслс;.-л

без добавления и с добавлением ситзина» Ловторность •систа пятикратная. .

Челки с генеральной средой и органическим!. добавкагли инапда-ровапв 1га почвенной суспензией, помешала"во' вяагау» каглзру п в .термостат при тешгературе 26-28°С.: и. шдерснвади в течение 6 месяцев. По окончании опыта определяла численность различных груш шкрооргапизков. .

В-.шалоние ьджро^дора; непост>едственно участвуигей в тппло-г.ешг,: атг-атна и спгдзтш. и влияние па них возпастакпщг доз гербкцякон. Лдя вшгвзения ьазкроорганизмов, участвующих в разло--яениа атразина-и скг-азина, п влияния на них возрастахетх доз гербицида были поставлены два лабораторных опыта. . В перге:.: опыте даялпостлровали почву с разными возрастаяхаилд доза:.я гербицида "(10-, 25-, 50-, 100-кратная производственная доза).

Почву, су.кишшув с разншк доз шля гербицида п увдсетониу» до.6С& от п.в. постоянной влодности компостировали в сосудах а точение 105 дней при 28°С. Микробиологические анализы проводила в день закладки опыта¿через 40 в 105 дней.

■ Второй опыт был залоген в трехкратной повторноста на геле-вых пластинах в элективных условиях среди по кетоду С.Н.Влпоград-ского (1252).. Отмытые от следов хлора гелевые пластины пропптыва-ласьЗ кя 'минеральной среды Випоградского .(без псточюшов углерода а азота). В качостве единственного источника углерода и азота были добавлены атразин или симазин в 10-, 25-,, 50- и 100-кратной производственной дозе. Чазка клишировалась почвенной суспензией, подсушивалась до эмалевой поверхности, после чего псие-адись ео влажную: камеру и в. терлостат при температуре 26-28°С.

После пестимесячной инкубации ошт па гелекос пластинах был ст:. Пород опредолоние:.: остаточного количества спмазина и атра-зина чалки просматривались под микроскопом при увеличении хЗО и хЗО, coate чего с одной из параллельных чеке к каздого варианта были сделаны реплики по методу Е.З.Теппср (Тендер и др., 1972).

Изучение потенциальной способности енделонных чистых культур ггпкрооргшшзмоп пос'.ягнллрогать птрпзик п езмазин.

Первый 0И1Т был поставлен в* щдкой среде только с симазяном. В колбу Зряепмейера емкостью 100 кд внесли по 30 мл минеральной . орода (Виноградского). 3 качестве единственного источника углерода к азота.в каядуя колбу вносила 9 мг химически частого Сх.ч.) спмазина и стерилизовали. После стерилизации среду инфицировали, суспензией чистой культуры макроорганизмов. Контролем слукнла стерильная среда без микроорганизмов. Период кшеубапип 9 мес.

Второй опит бил заложен в песке.

3 колбы Эрденмейера ешсостыэ 250 мл вносила 100 г промытого стерильного песка, 15 мл минеральной среды такого se состава, как к в предыдущем опыте, и 15 мг х.ч. спмазина или атразина. Влажность песка поддерживалась при 60% от полной его влагоеккости. Содержимое колбы стерилизовали при I атм 30 минут. Затем кахдую колбу инфицировали I мл суспензии соответствующей чистой культу- • ри микроорганизмов. Период инкубации 6 мес.

Изучений культурннх. морфологических я Физиологических опо-бештостеД нокардий. выделенных.ДР компостов с сямазяном п птразине». Для изучетш культуралышх и морфологических особенностей нокардяй использовала нитрмтпыЯ агар (ПА) и мясо-пептонный.агар (I.'JIA). •

При изучении Знзиолого-биохимических свойств исследуемых культур использовали "Практикум по микробиологии" (Егорова, 1976)

- 7 г

п работы отдельных исследователей (fro-idoti , 1974).

Идентификацию нокардиоподобннх микроорганизмов (НПО) проводила по "Краткому/определителю бактерий" (Берга, IS80) п по H.A. Красилышкову (1970).

- Катематсческоя обт&ботка экспетжментальнст гаытщ;. Определяли накменьаую существенную разницу вегетационных опытов по Доспехову, (Доспехов, 1979).

Содержание гербицидов. Определяла методой тонкослойной хро-ггатограали (Клисенко, 1977) и газожидкостной хроматогрк&д (Ле-ЕЗШСК2Я, IS8I). . .

.' РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕЙОБАК-К И Ж ОБСУЖДШЗ

• В.тпяшю органических веаеств на снижение feroтоксичности су.глзгяп я атразияа в почве, на боне "WPK и извести. Результаты перзого опыта показала, что" только в. вариант гербицид + гумат натрия ein зил фитотокезчность сиказина и атразина соответственно на 6,2 и I0JS, по сравнению с юрпанхама кехгтроль + симазпн п контроль +* отразил, -- •

BTcrjsffl дювторпнЗ опыт,', проведенный в тех го сосудах, сока-•ваг^ 'дто -вое проростков в контроле резко снизился по сравнению ••t> предыдущим опытом, а £птотоксячёское действие гербицидов несколько снизилось. Оргслзчесста добавка в отот период, особзнно - в вариантах с добавлением пороска из листьев и стеблей кукурузы, в вариантах с атразином и "добавлением гумата натрия, л в варианте с симазилом а добавлением навоза способствовали резкому снижению фитотоксачноста.гербицидов (на 40-50£ п более). Аналогичное" влияние" оргашгческиа добавки (порспок из листьев и стеблей кукурузы, гукаг натрия и в отдельных вариантах навоз) оказали п.на ичсоту растений.

¡.'•икробиологичесяие анализы, проведенные в первом и втором опытах, показали, что симазин к атразин подаЕлдат рост микроорганизмов, учитываемых на !.'ЛА п КАА. Однако, внесение органических добавок (гумат натрия и листья яугуруэы) снимало токсический эффект гербнсидов на микроорганизмы.

Отработка оггтпгдлышх доз нпгоза. способствую^* интенсивному разложению симазина в почве. Результаты микробиологических анализов, проведенных в лабораторном опыте, показал::, что симазин незначительно снизил численность микроорганизмов, использухь еих минеральный и органический азот, однако пр! ?том наблюдалось возрастание доли споровых микроорганизмов, что говорят об их большей устойчивости к действию симазина. Незначительный ингяби-рузций оф^ект бил снят через 25 суток.

Применение навоза повыкало обсемененвость почвы микроорганизмами. Доза 100 т/га как гшдкого, так и подстилочного навоза, увеличивала численность микроорганизмов, а более высокая доза (300 т/га) чзрез 3 суток не повыпала численность по сравнению о дозой 100 т/га, что связано, по-видимому, с высокой концентрацией аммиака в навозе. В дальнейшем (через 90 суток) численность микроорганизмов резко возрастала в варианте 300 т/га навоза.

Анализ данных микробиологических посевов на НА показал, что симазин не снияал общей численности этой группы микроорганизмов, а в сочетании о навозом способствовал возрастанию численности группы автохтонной микрофлоры, минерализующей гумусовые вещества. Нарастание количества микроорганизмов происходило, главным образом, за счет родов ,

Результаты полевого опыта подтвердили результаты лабораторного опыта. Так, изучение влияния симазина на микрофлору, использующую органические формы аэота, показало, что вначале он

оказывает слабый ингибирующий эффект, который снимается на 25 сутки. Одновременно следует отметить, что симазин не угнетал развитие микроорганизмов автохтонной группы.

добавление к симазину навоза стимулировало раз ей тле микроорганизмов,' учитываемых на УЛА и КАА. В этом ~е варианте не увеличилась обгая численность микроорганизмов, учитываемых на НА, однако наблюдалась перегруппировка их родового состава: возросла численность родов А^то-ёлс-кт*. , Г\Іосслсії&. и М > сто тг> аполога

. Как уеидип ниае, они непосредственно принимают участие в деградации симазина. Установлено, что в полевых условиях симазин быстрое разлагается в варианте с добавлением 300 т/га навоза.

Нглтякиа органических добавок на интенсивность газлог-ення симпэтнта микроорганизмами.- Определение остаточных количеств симазина в гелевых пластинах показало, что такие органические добавки, как гумат натрия, навоз и особенно порошок из листьев кукурузы, способствовали более интенсивному его разложении.

Листья кукурузы и навоз стнцулировалз развитие автохтонной группы микроорганизмов, принимавшей участие в биодеградадии си-мазпна,

Т1г:ияш;о возрастающих доз снмазина и атразпка на численность различных гтттп микроорганизмов в почве. Результаты опытов показали, что через 40 дней инкубации-численность микроорганизмов, использутсих органячоокие форглі азота (учет на ИЛА) резко умень-Еизась как в варіанте с симазином, так и с атразинсм. Так при 10-кратной дозе симазина она составила 22^ от контроля, а в остальных вариаптах - от 7,5 до 6,9#. Близкие данные получены к в вариантах с атразином. При 10-кратной доза они составили 13£ от контроля, а в остальных случаях - П-Ю£,

В отом опыте.под воздействием гербицидов наблэдается такке

резкое снижение численности микроорганизмов, использующих минеральные £ор:.а азота (учет на КАА). При 10-кратной дозе симазина она составила лкпь 16% от контроля, а при 100-кратной - 8% от контроля. 3 вариантах с симазином снизилось и относительное содержание актпноілщетов. • •

В варианте с атразином, как. и с симазином, численность микроорганизмов, учитываемых на Ї.ША и КАА (табл.1), через 40. дней инкубации таете резко снизилась. При учете на ША их количество составило 13-10?) к контролю, а прп учете-на КАА в варианте с 10-кратной дозой -47*; в остальных вариантах - 7-12/2. Относительное содержание актиномицетов к контроля в опыте с атразином увеличилось, особенно в 10-кратной дозе. По мере увеличения дозы атразина повысилось и процентное содержание актиномицетов от общего числа микроорганизмов, учитываемых на КАА.

Через 105 дней инкубации общая численность микроорганизмов, учитываемых на ША и КАА в варианте о симазином увеличиласьот-. носительно контроля, по сравнению с предыдущим сроком, видимо, в результате частичной детоксикздии. При учете на ІДІЛ' численность последних составила уже 46-51* от контроля, а микроорга-. низмы,. учитываемые на КАА, составили ухе 58-69$. В этот период возрос и процент актиномицетов ' по сравнению с предыдущим сроком, В вариантах с атразином через Í05 дней инкубации , по сравнению с предыдущим сроком, еще более резко возросла численность микроорганизмов, учитываемых на І.5ПА. Число клеток их уже составило 76-90^ к контролю, а при 10-кратной дозе даже превысило . ого. в этот период в значительно меньшей мере относительно контроля изметілась численность микроорганизмов, учитываемых на КАА, составив 33-58$ к контролю. Отмечается также тенденция к увели-чеиию в этом варианте доли актиномицетов относительно контроля и

Таблица I

Влияние возрастающих доз симазина и атрезкна на численность микроорганизмов, учитываемых на ГЛА и КАА (через 40 дней компостирования)

'I' 1' 1 |

иякроорганиз-{Общая числен{ Обсая численность, ¡тсть,^!.! учит, на КААк)

!э тыо.}$ от }в тас.}£ от \% актинсмпц. в i г }конт-{в i г |конт-| от общего • » абс. {роля { абс. ¡роля {количества Вариант {сухой » {сухой } {в варианте . опыта_ {почвы {. {почвы [ | _

Контроль (без симазина) 18354 100 ' 16758 1330 100 100 8

10-кратная доза симазина . 3979 22 26Св 129 15 10 5

20-кратная доза симазина 1269 6,9 6210 810 37 61 •13

50-кратная доза.симазина 1377 7,5 9720 270 ЕВ 20 3

100-кратная доза симазина 1214 7 1399 449 8 34 32

Контроль (без атразина) 12784 100 484.2 02 100 100 2

10-кратная доза атразина 1659 13 226 Ж 400 14

20-кратная доза атразина 1357 II 479 133 Л2 163 28

50-кратная доза атразина ; 1356 II ■ ■ 80 12 98 14

100-кратная доза атразина 1290 10 361 129 7 157 36

В числителе - обаая численность в вариантах, • ,/ .» знаменателе - чиоленность актиномицетови относительное содержание их от контроля и в % от общего числа в вариантах оццта.

- 12 - ' общей численности в вариантах с гербицидом.

Следует отметать высокое содержание спороносных форм в опыте с симазином. Последнее, возмогло, связано с тем,, что оставшиеся через 40 дней жизнеспособные зародили, в основном, представляли собой спороносные £ормы в состоянии спор. По мере де детоксикацки к отому сроку (через 105 дней) общая численность их возросла. •. .

Обцая численность.микроорганизмов автохтонной группы через 40 дней инкубации в компостах с симазином и атразипсм (табл.2) также снизилась по сравнению с контролем; но не в строгом соответствии с увеличением их доз, как при учете наІДІА и КАА. Тая, при 10-кратно;! дозо симазина об-дая численность микроорганизмов на НА составила лпль 24£ к контроле, а в вариантах с 25- и 50-кратными дозами - 58£., Аналогичное влияние на обдуа численность микроорганизмов, учитываемых на НА, наблюдалось з в опыте с ат-разином, Такое действие препаратов, видимо, обусловлено неодинаковым влиянием ах доз на состав микроорганизмов этой группы. Так численность Мусо€ьс;'етіи<т по мере увеличения дозы сима-

зина сіпізилась до 15-5£ против 8$ в контроле, а' содержание , А-5Йлпэ€ас1с.гг возросло до 50% протпв І,3£ в контроле. Группа Носліг«ііа- в контрольном варианте отсутствовала, а в компостах -с симазином при 50- а 100-кратпых дозах она составила 17-20£ от об;;ей численности соответствующих вариантов. При высоких дозах симазина были выявлены и микромоноспоры, которыо такш отсутствовали в контроле. ; ■ '..

В ксмпостах с атразшшк через 40'дней инкубации на НА клетки Мусо^ооІетіЦ'т ■ в контрольном варианте составили 49^, а в вариантах с нарастатгсгдаяг дозами' атразина снизилось содержание их ¿о~22-П%. Микроорганизмы рода в контроле

Таблица 2

Влияние возрастаниях доз атразина и симазика па микрофлору, учитываемую на нитратном агаре (НА) (через 40 дней после ксіліосгяровакпя)

Т—-г- ■ ■ I-

Общее KOJDI-jMycogo^tiu'm ÍRíHwSadw чество , ' і

Группа шкрооргаяиз-мов

Т і

"І r

¡b tuc.

}на I r ; абс. сухой

j ПОЧЕП

i Nocüidio. І

% от jB тис.} % от в гас.І % от ;в тис.) % от конт-иіа І гі обц. {на І гі сбщ. jua І т\ обд. роля { абс. ,колич.} абс. іколич.¡ абс. {колич. ;сухой {в ва- {сухой {в ва- ісухой ¡в ва-jпочеп ¡рааите'почш іріанте|почБИ ¡ранте

в тис. на І г абс. сухой почш j рпанте

% от общ. колія, в ва-

Контроль (без симазина) I9S20 100 17099 86 261 1.3 - - - -

ІО-кратная доза стіазина 4057 24 3751 77 501 10 8 0,2 . - -

25- - " -• - и - ІІ45В 58 4936 . 43 1586 14 264 2 - -

ÍQ- - " - « " _ 114 58 58 1762 15 2997 26 1939 Г7 264 2

100- - " - ' - " - 2891 15 ' 159 5 1437 50 590 20 155 4

Контроль (без аг разила) 32612 100 І5В65 49 37Г0 12 2027 6 264 0,8

ІО-кратная доза атразина 118 98 36 2644 22 G258 53 1675 14 881 7

25- - " - 3691 II 256 7 1820 49 1146 ЗІ 264 7

50- - " - 16306 50 2468 15 І0І36 62 1234 8 1763 10"

100- - « - _ " _ ІІ960 36 1381 12 7078 59 1058 9 1627 14

і

а

r' ' .•;.. i4 -

составила 1Z%, а а вариантах ó возрастающая дозами атразина ' • соответственно ЧИСЛО;их повысилось уже ДО 49-62$. . ' :

Прі Ю- и 25-кратной дозах препарата резко.возросло и со--дерканпв: N©c<mdle.:.-." •- до 14 а 31%, .против б£ в ковтролё.-По мере увеличения доз атразина соответственно возрастает содержа-' яае іаифоконоспор до 7-14^ против 0 ,. в контроле і'

В коклостах с более низкими концентрациями сиказгна.права-даровали Мусо^сс-іепито ■ t 'образующие -выпуклые,' розоватые ко- ' ' лснии с резко очерченным краем, а в компостах о более высокая * дозами препарата преобладай представителя рода А^Нітобасіел Из группы N&ccwjdío. в вариантах с симазином преобладав: сероватые колоіши с хорссо вырггенкоЗ кицелгальной зоной по пэрп;ерпя. ІЛикромоноспорн, выявленные в вариантах о симазином, образовали '. на ПА. колонии, мицелла которых врастал в агар, а слизистые обра- : • зования в вида комочков со спорами желто-бурого цвета располага-' . лась на поверхности агара в центре л кольцеобразно вокруг последнего. - - ■ ; ■ . ' ■ •

' В коклостах о атразином, наряду <с -кютоешся f^brosaxrfcn. выявленными в опыте о сгілаззноа, были обаарушш и боло о мелкие £ормы - белые л хэлтоватые Masyszeca'колонии'с'мелЕО!Дцегдплт.гадл . ободком. В отих псмпоетах преобдададв.'почта босцветпыо слизистой консастеидал да .

культура-"Ып5л признакам от локардий в шриаптах о симашшом. - , Преобладав с колонии мнкромоносдор такгоотллчались от варган-" тов с симазином темно-бурой, почта •'чертой'окраской слизистых об- . ,". раэований (комочков)^со спорами.-,' .;•.• г."' . .;• .\Г

Через105 дней инкубации в результатеУвядага, детоксикацип гербицидов общая: чи сленпость микрооргализмов, учитываемых на КА * ■ в вариантах с гербицидами^ резко , возросла относительно коптроля,.

- 15 -

особенно в опыте с симазином.

В опытах с симазином к атразином за этот период повысилось п относительное содержание млкобактерий по всем дозам гербицидов, в то время как через 40 дней инкубации они оказались, как и бактерии, учитываемые на І.ІПА и КАА, чувствительными к высоким дозам гербицидов. В этот re період (через 105 дней) инкубации при возрастании доз сзмазина и атразина несколько сшіжалась численность бактерій родов т , п особенно нокардий

в микромоноспор от сбзей их численности. Последнее, возмогло, объясняется антагонистическими свойствами спороносных £орм бактерий и актипомицетов, вторые увеличились относительно контроля через 105 дней инкубации. Такое влияние последних групп микроорганизмов к нокардаям и близким к ним микроорганизмам показано в работе Е.З.Теппер (1976). 4

?.!икро^лора, выявляемая в микробных пейппяах, в опытах на . . голевых пластинах с разными дозами спмазина и атразина. При просмотре под микроскопом (увеличение хЗб и jSO) чагек с разнили ісонцентроцшімп симазина и атразина в вариантах с 2 и 5 № и очень редко с 10 мг гербицида на поверхности геля отмечались едва заметные колонии в виде келтоватых и буроватых налетов. При ронцентрации 20 мг симазина и атразина наблюдались только г-елто-вато-бурые п темно-бурые компактные колонии микромоноспор.

Изучение микробных пейзажей показало, что в парках с симазином в концентрации 2 мг и 5 мг очень часто встречаются <їраг-ментированные гифц, палочковидные и колбовидіше фрагменты нокардийскоплония палочек кокков и заіделкявазхзіхся (З-пол-'і-пд.)

клеток , а также неспороносные палочки,

расположенные в один слой клеток, соединенных в пленку - рода l3ncfo ck*Z.Tn ex.

' - 16 - .■.

Однако при ^концентрации 5 мг, симазина обсемененность ука-' занными.микроорганизмами -несколько, ниге , чем при дозе 2 ,мг симазина. - .' -'■•'> . •'...•' \ .

3 мшфовноя пейзаге тгз чашки с 10-мг симазина в основном . просматригаэтся очень.мелкие споры кикромоноспор п изредка фраг-ментированные ги£ы нокардий. В чайках о 20 мг препарата просматривается только разбросанные;очень мелкие споры (едва заметные) еткрсмоноспор» или послеянае*. соеашвеннве'--сяпзь» в конгломерата.

При изучения:уахдроЗных. nefiaeseü на гелевых „пластинах с ai-, разином получена аналогичная картина^ ; ,. :

Итак, просмотр под-микроскопом гелевых пластин с триазинам после G-кесячной инкубации и изучение микробных пейзагей в четках с разнЕКЯ'коицеитрадоая• симазина и атразина показал:!,. что те £в-ГРУППЫ МПКрООрГаНПЗМОВ (^iriWfecte*, WoCwidíOu и 'ГЛс.'вото'я'абропж-), которые сктивпзировались в почвенных ксмпос-: тах с триазина\:п в влективных условиях среды на гелевых пластинах (где таяге обпаруг.о!Ш бактерии рода ) проявили себя наиболее конкурентоспособными прп использования изученных гербицидов. ' , ; .''V--' 1 Возмогло, что наиболее эффективное действие органической добавка в виде гумата.натрия связано с активадивй автохтонной' группы, разлагаасой гумусовые вещества, которые тагсео причастны к разложении атразина и симазина.', ... . ■

Потенциальная способность чистых культур ( Nocc-aü/o., -faHiragaa -ftrt Mic-m^'^nr^spotfa. u Myr.o^o-cfgrfuin») асси?.дляроватт- ста'лзяп как источник углерода п азота (модельный опыт с мялкой питательной средой). Результат^ опыта приведены'в»табл.3.■ ',

Из этой таблицы-видно,"что чистые х^гльтуры представителей родов ■fr^freo&'etea.-; f {vJÓcoidJ а. >' и M^cwwifnoepro.

- 17 -

выделенные из ксмлостов о гербицидами, оказались способішгсі ассл-' мялировать симазин как единственна источник углеродного л азотного питання. При этом культуры, выделенные из компостов с симазином, как правою, более идтексзвно разлагали его, чем культура, выделенные из компостов с атразинсм. Активно разлагали симазин и нокардки, взятке из коллекции (N.MuerrtcoUa , шт. 60 и

Ылги^тго* , шт. 16).

Таблица 3

Остаточное количество симазина после 9 месяцев инкубации чистых культур микроорганизмов

Наименование культурмикроорганизмов J СуГсре дый" Контроль (К)

Среда, неинфицированная микроорганизмами К + Ыос-ojxdlft. Sip К -t-і о- Sp -г3«) К + N . Wnicol-o. go

ЕТ. І б

К + ft-fHrrofeacVta _ I

К + JWttto&i-cit*- - 2 аелтый

К _ J

К + М і стоетдов брот-е^ «j-р _ 2

Примечание: - I - культура выделена ЛЗ-компоста с си-

7,08 0,55 3,50

0,80 1,05 1,50 0,91 0,72 3,00

Потенциальная способность чистых культур микроорганизмов ( Nocon.A'ft. , frtlgOTOnoorjQ&poya. и )

ассимилировать симазин и атразин (модельный опыт с песком). Как

.видно из таблицы 4, на среде с симазином и атразином, за исклю-

- 18 - -• : -

чєниєм Мусс6&с4є.уїи% -і{образующие розовые колония), резко . увеличилась -численность микроорганизмов и при этом соответственно снизилось содержаниесимазина и атразйна. Все ото указывает на потенциальную способность этих микроорганизмов ассимилировать испытанные гербициды.;. ^ '

' • -. - '' ' '. "* ' Таблица 4

Остаточное количество симазина и атразипа и численность микроорганизмов, использующих симазин в атразпн в качестве источника азота и углерода; в I-г абсолютно сухого лешса

Опыты Г С симазином.. •■ ' I С атразинсм

• --I- " І' „-1-

. '. | численность Ісодер-і численность їСОДер-. ;" ¡клеток в І.г ігашіе {клеток в І г ¡гапге . і,абс.сухого ісиглзпі абс.сухого »симази Накмено- ' ■' ¡песка, в млн. іна п ¡песка, в млн. { на в

ванне іуль- • і--,-{мг/ІСОі—-1-і ї^г/ІОО

тури мпкро- . • ¡псход-}конеч-і г {исход-; кснеч-г г организмов • і нал., | ная ¡песка ; пая { пая | песка

Контроль (К) . : - : 5,43 ' - . 14,20

К+К;<ігс-тсіпс5рсГ^ 0,8 .7„3 0,87 0,8 3,2 10,0 ор-1 . ;

К + М0С£--г4іа'йр-Я ■ 1^3-■ 5*3/ *.3,66 1,3 2,6 7,50 К + Ывсслв«'^ .14,0 15,0 3,66-V14,0 28,0 П,30

К + А*1Ь>о&с1е*4г| • \>0,7.'.у7,6.'<3,60 -.'0,7 10,4 4,60

Из таблзщы 4 тшже следует/ что культуры, выделенные из ксмпостов с симазином," получили большее.развитие' а использовали большее количество симазина, чем вварл антах с атразином, а ^осапАїл Єр -2, выделенные из.компостов'с атразином, лучпе , развивались в варианте '.с. атразипом; I .'.пкроорганизмн рода Мусо- .

не получили''развития:' на в, вариантах с симазином, • • ни с атразином^. Это тоя.верэдш«рвашшеі. пааучешше • ііря*¿сследо^ • ваяш • ^смшроая-»шіч^оі»аш8ііов-;.на МЛтосае 40 дней компости-' рования почвы с: возрастагощш . дозашігербшдщов. Эта группа -'

микрооргакизмов оказалась чувствительной к высоким дозам симози-на а отразила.

Таким образом, опыты с чистыми культурами нокардий, артро-бактер п микромоноспорамп в гидкой среде и в песчаной культуре проявили потенциальную способность ассимилировать симазин и ат-разин. Это подтверг^ет их участие в деструкции соответствующих гербицидов в условиях почвы и в элективных условиях средн.

Культ,'талыше. мотологические и пит:олого-бноутглгчесп;е особенности покарзяй. выделенных из комггостоп с спгдзяном и аттпунг.м. На о снова! пи морфологических и физиолого-биохкм:1Чес-ких свойств №эсопс$гв. -{ , выделенная из юмдостов с симаЗИНОМ, ОТНОСИТСЯ КО П-Й группе П бЛЕЗКЦ к Мосав-А'Л. соусЛ^тю. • Месс«4,ои вр -2, внделешшя из ксмпостов с атразином, относится к 1-й морфологической группе п близка к Г\|с>сспс1|'а. сд1 слуал.

в й в о д ы :

1. Еегетадаошше опыты, проведенные с дерново-подзолистой среднесутлинистой почвой, показали, что фатотоксическое действие симазияа и атразина, Енесенных в почву в рекомендуемых производственных дозах, проявляется в основном в слое глубиной 0-5 см п сохраняется до 7 месяцев. При этом более сильное фятотоксяческое влияние оказывает симазин. ...

2. В случав использования гербицидов в четырехкратных дозах симазин быстрее проникал в ниаележа^ае слои почвы л соответственно оказывал более сильное и более длительное фнтотоксичеокое действие по сравнению с атразином.

3. Установлено» что внесение органических добавок в дерцово-подзолисту» почву снижает фятотоксическое действие симазпна я атразина. Особенно аффективно добавление гумата натрия и измельчен-

- 20 — ' , ■ ІШХ Листьев И стеблей кукурузы.

Б опытах с саназином добавление гуката натрия снизило фито токсичность в отнесении ячменя на 43%а размолотых листьев и -стеблей кукурузы - на 21%; в опытах. с атразйнои гукат натрия снизил фдтотоксэтносгь на 35%, а разкалоте листья и* стебли кукурузы - на IG%. _ ^

Ка фоне извести и NPK через 1,5 кесяца после внесения си улзпна, атразина п органических добавок, гуг.ат натрия снизил тотогскчнссть отих гербицидов на І7-І0£, а размолотил листья и стебли кукурузы -.на 50£. . - ' .

Л. Определение остаточных количеств атразила и ск-іазина в почве показало, что резкое сниг.екие содержания внесенных гербя-цпдоз происходят только з іацпиавкг с добавлением изг-ельчешшх листьев и стеблей куі¡згрузи,

5. Поглзано, что внесение подстилочного или босподстилоч» ного назоза в дерново-подзоллстузэ почву в'дозо 100 т/га в условиях лабораторних опытов способствовало белее быстрому сш*-яспию количества сикззина и "атразина в почво. В лозовых опытах более эффективной в этом отнесении оказалась доза гидкого навоза в ЗСО т/га. ' ' '

G. Выявлено, что"по коре увеличения доз сиглзина и атразина, вноенпус в почву, резко подавляются группы кикроорганизшв, учитываете на 1'ЛА и КАА (в том .числе и.ахстипсгяцеты). К высо-13*.« доза:.і гербицидов оказались чувствительные и представители рода f.l/coíüc-jcTsSuTYi учитываемые на НА.

7. Впервые установлено, что" под' влиянием возрастахшх доз сиь'-азина и атразина агтивизируатся' микроорганизма автохтонной . группы, іяшерализующие гумусовые' вещества почвы,.' представители родов пгіїггговьсіе*, МосаяЖ е., МГсздітаупвАрйікх. н &вс^е^екТЧ^

- 21 -

8. Использование метода гелевых пластин Зиноградского впервые позволило в элективных условиях выявить влияние симазина и атразина на образование микропейзаяей автохтонной і.тл:ро?лор^.

9. Установлена потенциальная способность выделенных частиц культур йзНгот&сЬг .¡-ІостАїсі-. а

использовать симазин и атразин в качестве единственного источника углерода и азота.

10. Показано, что культуры микроорганизмов, выделенные из компостов с симазином, белее активно разлагают его, чем культуры, выделенные из компостов с атразином, и наоборот, культуры, выделенные из компосгов с атразином, более активно разлагазт атразин, чем симазин.

11. Опыты по изучения культуральных, морфологических и зиолого-биохимических свойств активно разлагающих гербициды но-кардий, выделенных из компостов с симазином, позволили отности

Косатг-сК -I к ЕидуНоссяхІїа.ссггаІ'то, а -2.

выделенную из компостов с атразином, отнести к виду моилбга ссісаурл.

Список опубликованных работ

1. Тлас Фарзат К.С. О некоторых способах снижения фитотоксично-сти гербицидов в почве.- Реф.ж. "Борьба с сорняками", 1932, .»£4, 0.28 .

2. Тлас Оарзат К.С, 0 некоторых способах снижения фатотоксичности

• гербицидов (симазина л атразина) в почве на фоне ИРК и мзвес-

• ти.- В сб.: Защита растений в условиях интенсивной химизации сельского хозяйства. У.., 1982, с.58-62.

3. Ьахев В.Т., Теппер'Е.З., Тлас Фарзат К.С., Максимова Е.Н. Микроорганизмы, участвующие в разложении гербицидов, производных симм-триазинов, в дерново-подзолистой почве,- Известия

-22. ТСХА,1982, £5, С. 102-109.

4. Емцев З.Т.; Теппёр 3.3., Тлас Фарзат К.С., Максимова. Е;Н. Микроорганизмы, участвующие в разложении триазинов в почве. В кн.: Микроорганизмы как компонент биогеоценоза. Тезисы. Материалы Всесоюзного симпозиума. Алма-Ата, 1982, с.241-242

Объем Г/5~п$.

Заказ IZ 6/

- Тираж ЮО

Типография Московской с.-х. академии им. К. А. Тимирязева >27550, Москва И-550, Тимирязевская ул., 44