Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Ферментативная активность содержимого рубца, сычуга и кишечника у телят в зависимости от расщепляемости белка в рубце
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Ферментативная активность содержимого рубца, сычуга и кишечника у телят в зависимости от расщепляемости белка в рубце"
ЗШШЕ ОТДЕЛЕНИЕ ВМЗХШ БЕЛОРУССКИЙ НАЭТГО-ЙСОЩОМТЕЯЬСШ»! ИНСТИТУТ ЖИВОТЕЮВОДСГВА.
На правах рукописи ТИМОФЕЕВ Диатрзй Федорович
Ш 636.22/. 23:612,32
.ФЕМНШИШЯ АШИШОСТЬ СОДЕЕШЛОГО . . РШ1А, СЫЧУГА И ШЕЧЕШ. 7 ТЕ2ЯТ В ЗА-ШСИШЯИ ОТ РШШИЕШГШ 5ЕШ В РШ1Е
03.00.13 - ёкзЕОлогЕЯ человека я яязотннх (физиология сатасэзгозяйстаэядш: -шеоткш:)
' - Ï О Р В-Ф 2 Р Д Т
диссертапЕЛ на соискаяпз учвЕэ* стапзни калдядаза бшмкигаооотк кзта
НЗДИ® - Í9S0
Работа вншдшеяа на кафедре нормальной и патологической физиологии Витебского ордеиа "Знак Почета" ветеринарного института да.Октябрьской револащш
Научянй руководитель - доктор биологических наук,
профессор В.Е.ГЛЖОВ
Официальной оппоненты: доктор биологических наук,
профессор ,И.К.СЛ2С:АРЕВ кавдндат биологических наук, старший паучкий сотрудник А.С.ЗЕНЪКОВ
Ведущее цредйряятез - Свердловский сельсгохозяйст£аянн£
институт
Защита состоится " 3 " 1990 г. в /0 часов
на заседании слецкаяизированного совета К 122.20,01 при Бе- -дорусскои научно-исследовательском институте нивотководства
Ддрвс института: 222160, Минская обл., г. Жодияо, ул. Фрунзе, IX, БелШйЕ.
С дисеертадаей шако ознакомиться в библиотеке Белорусского научно-исследовательского института животноводства
Автореферат разослан " £ " 19Э0 г.
Ученый секретарь
саодаалязироваиного совета, ——^
кандидат сельскохозяйствешу?г;'лаук^^^^ В.Н.ВШЙШФ
I. ОБЩАЯ ХАЕМСГЕЖ'ЙПа. РАБОТЫ
Актуальность темы. Решающим условием эффективного ведения животноводства является полноценное кормление. Вместе с тем, нормирование белкового, питания жвачных только по сырому и переваридаму протешу не учитывает его метаболические превращения в пищеварительном тракте, образование микробного протеина в преджелудках и его вклад в потребность животного. Тогда как эффективность использования азота корма жвачными животными зависит от целого ряда факторов, в частности от расщепляемости кормового белка рубцовой микрофлорой.
Подбор ингредиентов рациона по расщепдяешсти протеина затруднен как из-за ограниченного спектра азрдав, так и вследствие дефицита кормового белка. Этим объясняется многочисленные исследования по изыска нею способов улучшения использования азота жвачными при снижении расщепляемости протеина в преджелудках (И.К.Слеса-рев, Д.С.Аврамешсо, Н.В.Курилов, И.П.Духин, Н.А.Яцво, А.Тосев, Б.Стоянов, ^У.КаиГтапп, К.С-иНЬегте-е, К.1ои1есс, .Г.ВоШяв, ¿.Мап-вап) .
В качестве протекторов белка используются различные химические соединения и их комбинации: органические кислоты, таяниз, альдегиды. Наиболее широко из них применяется формальдегид.
Согласно данным литературы имеется значительное аэличесзтво работ по изучению пищеварительных процессов в преджелудках жвачных при скармливании протеина "защищенного" от распада в рубце. Однако, функции сычужных, килечных и "панкреатических желез у телят в условиях поступления коршвого протеина из преджелудков не изучены. Данные же о влиянии "защиценного" от расщепления кормового белка на секреция пищеварительных ферментов и усвоение азота телятами необходимы для обеспечения полноценного и рационального использования протеина молодняком жвачных животных.
Основным кормом жвачных животных являются грубые норма, содержащие значительное количество клетчатка. Данные литературы позволяют предположить активное участие клетчатки а пищеварительных процессах в полости гшяечника, Однако у жвачных животных эти вопросы практически не изучены, лть некоторые аспекты рассмотрены в работах ЕЛ.^едиЗ, А.А.Алиева.
Цель работы. Изучать ферментативную активность содержимого рубца, сычуга я кишечника у коров а телят. Выяснить влияние нативного а обработанного формальдегидом комбикорма аа актив-
вость пищеварительных ферментов у теля? и усвоение азота. Установить роль частиц корма в перераспределении шщеварятельник йериан-тов £ кишечнике жвачных.
Исхода из этого были поставлены следующие задача:
1. Определить количество формальдегида вступающего в реакцию с комбикормом. Изучить влияние -обработки на гшгробнуа загрязненность комбикорма и на расщепляешеть протеина в рубце телят.
2. Изучить активность пищеварительных ферментов в содержимом руб- . ца, сычуга, краниальной части тощей и ободочной кишок у коров и телят, а тааае усвоение азота телятами при скармливании нативного
и обработанного формальдегидом -комбикорма.
3. Выяснить роль клетчатки в перераспределении ферментов в кишечнике.
Научная новизна работы. Работа является фрагментом плановых исследований кафедры нормально! и патологической физиологии Витебского ветеринарного института. Номер государственной регистрации 81021096.
Новыми являются данные о ферментативной функции различных отделов пищеварительного тракта коров и телят 2,5-4,5-месячного возраста при включении в состав рационов обработанного формальдегидом комбикорма. Установлено, что обработка комбикорма из расчета I г формальдегида на 100 г сырого протеина снижает микробную загрязненность комбикорма, а также его расщешшемость в рубце телят на 13,6?. Скармливание такого комбикорма телятам вызывает увеличение ферментативной функции сычужных, поджелудочной и кишечных ке-дгез, улучшается усвоение азота корма.
Установлено, что клетчатка активно участвует в адсорбции и транспорте пищеварительных ферментов в кишечнике.
Практическая значимость работы. Данные исследований могут быть использованы при разработке вопросов, рационального протеинового питания молодняка жвачных животных. Производственная проверка использования обработанного формальдегидом .комбикорма в составе рационов телят проведена в колхозе "Октябрь" ВергнедЕЕнского района Витебской области.
Материалы об адсорбции пищеварительных ферментов на клетчатке е участие их в процессе гидролиза питательные веществ раскрывает- новые аспекты полостного пищеварения в кишечнике язачных.
Полученные результаты можно, лсаользовзть при чтении лекций и проведении практических занятий по разделан физиологии пищеварения и кормяеяия молодняка жвачных животных, а тарнэ в научно-исследовательской работе при изучении литания жвачных.
На защиту выносятся следующие положения.
1. Ферментативная функция рубца, сычуга и кишечника у коров и телят.
2. Влияние скармливания обработанного формальдегидом комбикорма на ферментативную функция рубца, сычуга и кишечника телят.
3. Содержание азота в различных отделах пищеварительного тракта телят при скармливании рационов с нативным и обработанным формальдегидом комбикормом.
4. Адсорбирование и транспорт пищеварительных ферментов на клетчатке грубых кормов в кишечнике жвачных животных. Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены:
1. На Всесоюзной конференции "Физиология продуктивных животных -решения Продовольственной программы СССР".-Тарту, 1989.
2. На научно-практической конференции "Ферментные препараты в ветеринарии и животноводстве".-Каунас, 1989.
3. На научных конференциях профессорско-преподавательского состава Витебского ветеринарного института.-Витебск, 1969, 1990 г.г.
4. На научной конференция студентов, аспирантов и молодых преподавателей БШ. -Витебск, 1990 г.
Объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, методики исследований и их обсуждения, выводов и предложения, списка литературы. Материалы диссертации представлены на .¿^¿страницах машинописного текста, содержат 2S таблиц, ¡8 рисунков. Список литературы включает ^¿источника, з том числе JnP на иностранных языках.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИСОЩОВАШЯ
2.1. Материалы и методика исследований
Экспериментальная часть работа выполнена а лаборатории кафедры нормальной и патологической физиологии, кафедре микробиологии и вирусологии Витебского ветеринарного института им. Октябрьской революции, в учебно-производственном хозяйстве "Подберезье" Витебского сайона, колхозе "Октябрь" Зерхкедзинского района Витебской области и на Витебском мясокомбинате. Работа выполнена в ISQ7-1990 г.г. В опытах использовались 37 коров, 8 полифистуяьных и 71 янтактных телят.
От только что убитых коров на Витебском мясокомбинате были взяты пробы содержимого рубца, сычуга, краниальной части топей л ободочной кисок, поджелудочной железы, слизистой оболочки краниальной части то'дей и ободочной кисок. 3 течение 20—30 мину? после зля-
б
тия пробы доставляли в лабораторию, где проводили исследования. Кроне того, готовили мазкк содержимого различных отделов пищеварительного тракта для определения измельчения корковых частиц.
Для выяснения вопросов гетерофазного пищеварения у жвачных химус краниальной части тощей кишки центрифугированием разделяли не жидкую, гелевую к плотную части, в которых определяли активность ферментов.
У интактных телят в возрасте от I недели до 4-х месяцев определяли количество инфузорий в рубцовой жидкости по методу E.ILTyp-кевич.
Были поставлены опыты на полифистульных телятах по изучению ферментативной активности содержимого рубца, сычуга и кишечника при скармливании рационов, содержащих протеин резличной распадае-мости в рубце. Для этого использовали бычков черно-пестрой породы, которым предварительно были сделаны операции по наложению фистул на рубец, сычуг, краниальную часть тоаей и ободочной кишок. Исследования начинали когда телята достигали возраста 2,5 месяца. Опыты состояли из контрольного и опытного периодов. Кормление животных ё опытный период отличалось только тем, что комбикорм, входящий р состав рациона был обработан формальдегидом.
Обработку комбикорма производили из расчета I г формальдегиде на 100 г сырого протеина, так как эта доза, по мнению ряде исследователей, является оптимальной.
Комбикорм смевивали с 5?>-ным водным раствором формальдегида, после чего выдерживали в плотно закрытом полиэтиленовом пакете или эксикаторе двое суток. Удаление остатков несвязавсегося формальдегида проводили двумя способами:
1. рассыпали комбикорм на полиэтилен и проветривали при комнатной
температуре, периодически перемешивая!,
2. обработанный комбикорм помещали в сушильный шкаф при температуре +60°С»
Количество формальдегида в комбикорме определяли титрованием избытка йода гипосульфитом. '
Изучение влияний формальдегидной обработки на микробную загрязненность комбикорма в пробах нативного и обработанного комбикорма определяли количество микроорганизмов, количество E.coli , спор плесневых грибов и дрожжевых клеток.
Расаепляемость протеина в рубце телят определял» методом
In situ для чего навеску комбикорма в нейлоновом мешочке помещали в рубец через фистулу на 6 часов.
В пробах содержимого, шторке получали через фистулы утром до кормления ж через 2,5-3 часа после о проделали общую целлкшозо-литическуа активность рубцовой микрофлоры- на среде Хаягейта, насыщенной углехислкз газом. Результат учитывали по последнему разведению, з котором аабяадалось разложение фильтровальной бумаги. Количество инфузорий- з кзмерэ Горяева по методике Е.П.'ГХркевач.
Общий, барсовый д яабеяковый азот - методом Кьелвдаля.
Волячзну рН определяет рЯ-ыетрогл рН-121. Свободную, связанную соляную диалогу н общук> кнсяотностъ - титрометрячески.
•Протеолатическрэ .активность (нротеазн) исследуемого материала определяли по Ю.А.Щэрбаяэву» Г.Ф.Коротыга, аишголитическую ( ь -гкялаза) - ко Карзвеп з шднЯшадип, описанной в справочной литература, липолатическуга (ллпаза) - по Г.К.Шлыгину, Л.С.Фоминой, З.П.Павловой, фосфатазную (щелочная фосфатаза) - по Бодансгсому. Переваривание белка и крахмала - с использованием палочек Метта, заполненных-яичным белком и 20^-пвм раствором крахкала.
Дяя-изучения влияния скармялванш обработанного формальдегидом вомбшюрма на баланс азота и гематологические показатели бнд провэден опыт в колхоза "Октябрь" Верхнедвянского района Витебской области на телятах 2,5-3,5~изеячного возраста в течение 30 дней» -
Формировали двэ группы: контрольную и опытную по 20 голов в !£?здой. Животных подбирала по арщщяяу аналогов с учетом породы, возраста и гпзой кассы.
Рационы для телят опиткой и контрольной трупп били одияако-знмя и сбалансированы по содержанию кормовых единиц, пареваримого протепка, кальция, фосфора и каротина. Различия состояли в том, что для телят опнтнш! группы-комбикорм обрабатывала формальдегидом. Обработку комбикорма к удаление остатков формшгЕдепща провод гцщ при комнатной температура в течение двух суток в отдельном хорошо проветриваемом помещения. Прз проведении опыта изучали г.оедаевдеть кормов и фнззологятсскоо состояние животеых. В пробах ярош, полученных.пз яремной' вены, определяла количество эритроцитов, лейкоцитов а гемоглобина по общепринятым глзТодккшл.
Цифровой. материал обработан на ЭК.! с псдадьзоз-зЕяем методов БЛ.Меркурьвюй.
в
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Ферментативная аетшность содержимого различных отделов пищеварительного тракта у коров
У коров после 24-часового голодания рубцово© содержимое шэет близкую к нейтральной величину рН, общая целлэлозолитическая активность проявляется в 1еЗ- 5, содеркиюс рубца обладает ап-лолитической и протеолитической активностью (Табл. I).
Таблица I
Ферментативная активность содержимого различные отделов шсцевзрптшгького тракта торов (Ц+ о )
Показатели Т^йец | Сычуг
рН 7,06+0,04 4,06+0,14 6,43+0,15 7,90+0,15 Ашлолитическая
активность, г/ч. л 66,7+10,48 - 920,3+56,04 170,76+9,43 1илояитическая
активность, ед/шг - - 57,45+4,47 II,24^1,13 Протеолнтическая
активность, каз.ед. - - 82,87^2,74 17,79+0,79
Фосфатазная активность, ьколь/ч , л - - 2572,38+104,09 24,18^0,92
Переваривающая сила
на белок, ш 2,06+0,12 3,33+0,38 3,54+0,17
Переваривающая сила .
на крахмал, ш 8,32^,18 - 6,75+0,13
Количество кнфузо-
рий, Юб/л 223,53+16,31 -
Содержимое сычуга имеет сгабтыше показатели, что связано с достаточно однородным поступлением корковых касс из предавлуд-ков. Обцая кислотность составляет 43,3+4,1 од. титра, при высоком содерЕацаи связанной соляной кяслоты.
Химус краниальной части тощей кашки икс от слабокнелуэ реакция, за счет поступления содершкого из сычуга. Активность ь -амилазы в 9,8 раза ижо, чем з рубцовой нздкостк и в 5,4 раза пользе
амилолитичаской активности содерлшгдаго ободочной кишки. В тонком кишечнике довольно высокая протеолитическая и фосфатазная активность. В ободочной кишке активность щелочной фосфатазы в 106,4 раза меньпе, чем в тощей.
В приготовленных мазках из содержимого рубца, сычуга и краниальной части тощей и ободочной кета к под микроскопом с измерительным. окуляром определяли размер частиц.
У коров через 24 часа после кормления э рубцовом содержимом частицы корма крупные, а некоторые кз н;к достигают 10 сантиметров, то эсть ноизыельченное сено. Размер частиц содержимого сычуга, тонкого и толстого кишечника не преетзает 3 мм. Наибольшее количество частиц мелкие - 0,1-0,3 мм. Тати частиц о ободочной ккнке на бальзе, чем в тощей и сычуге (Рис. I).
Посла центрифугирования химус краниальной частя тощей кишки разделяется на йядку», гелевуо и плотпуэ фак;. Результаты определений активности ферментов в различных фазах кишечного содержимого позволяют сделать вывод, что частицы корма активно участвует з пищеварителышх процессах. Если учесть, что гидкая часть составляет 51,Зй, плотная - 37,93, гелевая - 13,6^, то удельная активность ферментов на единицу обгеыа в плотной и гелавой частях выше, чем в еидкой. Так, в плотной фазе удельная активность щелочной фосфатазы - в 5,9, амилазы - в 4,9, липазы - в 6,4 и протеаз - в 3,6 раза выше по сравнения с геидкой фазой. Удельная активность ферментов в гелевой фазе несколько жепз, чем в плотной, но выше, чгм в гэдкоЯ.
2.2.2. Становление рубцовой фауны в телят в возрастном аспекте
Опыты по определении количества инфузорий в рубцовом содер-гзшом телят проведены в колхозе "Октябрь" Верхнедаинского района я учебно-производственном хозяйстве "Подберезье" на 35 телятах. Сэдсринюе получали утром до кормления через резиновый соид.
Установлено, что ранней приучит телят к поедашта грубого корма способствует появления инфуооруЯ уг.з ко второй неделе жизни. В дальйс?.ссм галичзство инфузорий уплачиваемся к двухмесячному возрасту достигает уровня взрослых мвэтных (Рис. 2).'
У телят, не получавших грубый корм, единичные инфузории появляется только к концу первого мэсяца жизни. Введение в рацион теля? с 1,5-месячного возраста сена способствует резкому увеличении количества инфузория в рубцосой яидкости к к 3-4 - месячному возрасту достигает уровня короэ. Эти данные свидетельствуют
Рис. I. Фотограмма, хараетркзущая величину частиц ■ в содеркЕыш А - сычуга
Б - краниальной частя тощей «шпки В - ободочной кишки По оси абсцисс ~ размер частиц. т; йо оси ординат — аолотостзо частиц
7 14
ВОЗРАСТ ТЕНЯТ (га.)
Рис. 2. Количество знфузоркй з рубцовой авдкостя телят
---- Прд приучении к грубому иорму с первых
дней акзни
---при даче груо'хвс кормов с 1,5-месячкого
возраста
о том, что наличие инфузорий в рубце телят зависит от скармливания грубого корма.
2.2.3. Динамика удаления яесвязавшегося формальдегцда из комбикорма поело обработки
Результата проведенных исследований показали, что пра обра. ботке комбикорма из расчета I г формальдегида на 100 г сырого протеина в реакциях с 'белкаш участвует 74,1% внесенного форшлвде- ' года. Несвазавшшся формальдегид удаляется из комбикорма при комнатной температуре в течение двух суток, а при температуре +Б0°С-в течение двух часов. Обработка формальдегидом уменьшает микробную загрязненность комбикорма. Так, общее количество микробов сразу после обработки снижалось на 53,6$, количество Б-„о<ш- на" 60,6$, спор плесневых грибов и дрожжевых клеток - на 71,2$. В дальнейшем эти показатели оставались .на низком уровне.
Для определения расщепляемосги протеина пагнвного я обработанного формальдегидом комбикорма в рубце телят применяли котод нейлоновых мешочков. Установлено, что протеин комбикорма, обработанный формальдегидом за весть часов в рубце телят расщепляется в среднем да 63,2^, тогда как протеин нативного хадмбккорма - на 82,8$. Необходимо отметить, что гидролиз "защищенного" протеши в рубце телят не зависит от способа удаления несвязашогося формальдегида ез комбикорма: при комнатной температуре пли при температуре +60°С.
2.2.4. Ферментативная активность содержимого рубца и сычуга у телят при скармливании в составе рациона ыатйаного и обработанного формальдегидом комбикорма
Проведеияпми исследованиями установлено, что рубцовая микрофлора телят 2,57-4,5-мееячнаго возраста активно участвует в гидролизе кормов. Так, в руо'цовой жадхоохи высока ашлолатнческая и целлзлозолитцческая активность. Количество инфузорий соответствует уровню взроалнх йивотннх'(Табл. 2).
Даяние ферментативной активности рубцового содержимого телят до II после приема 1сорг.-а пр;иерцо одинаковы. Однако резкое укеличо-ипэ объеш содержимого в рубце поело прпел-га корма дают лам основание считать, что формаптатишая активность чорез 2,5-3 часа поело коршения значительно возшается,
В опытный пориод, когда в состав« рацкош телята получали
обработанная формальдегидом комбикорм, ферментативная охтипость рубцового содержкогс не иэ?/енялась.
Таблица 2
Ферментативная активность содерзгамого рубца телят при скармливании нагивного и обработанного формальдегидом комбикорма +п )
Показатели ! Нативннй ! коубиковм ! Обработанный ! комбикорм
Амияэлитическая активность,
г/ч.л . 159,15+9,07 160,69+6,77
Целлюлоэолитическая актив-
ность, 18 3-5 3-5
Переваривающая сила:
- на белок, им 2,35+0,12 . 2,26+0,16
на крахмал, ьм 7,43+0,02' 7,64+0,13
рн ■ 6,97+0,14 . 7,04+0,16
Количество инфузорий, . Ю°/л 197,34+3,43 191,72+3,19
Сычулное содержимое у телят, полученное утром до кормления имеет кислуо реакцию и высокую переваривавщув силу на белок. Значения общей кислотности находились в пределах 28,3-59,3 ед.татра, переваривающая'сила ив белок - 3,2-3,9 мл.
Значительное влияние на сскреции соляной кислоте з сычуге оказывает-прием корма. Так, у теленка !.' 7 через 3 часа после кормления общая кислотность увеличилась на 63,содержанке свободной соляной кислоте - на 11,6, а связанной - на 35^. У других- ^и-естнкх прясм коруэ такие увеличивает общуп-кислотность, хотя дан-кке были иенее зырзя-ены. '
У телят получавкях в составе 'рациона, обработаны": формальдегидом комбикорм, общая кислотность сычукного содеркккого была гкше на 44 1, о псрсверйшоасяся сила из белок - на-38,3,*, чем у телят, получавших ¡:еобрз6отакпый комбикорм (?<0,СЬ).
Увеличение показателей при скармливают "зеизаденнэго" протеина происходит гслодстейс поияевия поетупяипи исрасчСП!!з::згося кортт-ого белка в сычуг. Количество свободной :: связанной соляной кислоты в оба периода опыте не различалось.
2.2.5. Активность пищеварительных ферментов в содержимом краниальной части тощей и ободочной кишок-.
Химус краниальной части тощей кишки тзлят обладает высокой ферментативной активностью: активность ь -амилазы находится в пределах 305,6 - 479,3 г/ч.л, липазы - 14,2-35,4 ед/мл, протеаз -48,5-88,4 каз.ед. Что касается фосфатазной активности, то у разных животных она колебалась в довольно значительных пределах.
Прием корма телятами стимулирует ферментативную функцию поджелудочной келезы и кишечника, о чем свддетельстиуат данные активности ферментов содержавшихся в химусе.
При скармливании в составе рациона обработанного формальдегидом комбикорма активность дщаварителышх ферментов в химусе значительно повышалась. Так, активность протеаз- увеличивалась в среднем в 1,5, а переваривающая сила на белок - в 1,2 раза. ■
Например, в химусе краниальной части тощей кишки теленка $ 7 после 12-14 часового голодания на рационах с натквным комбикормом величина рН составила 7,6+0,05,.протеолитктеская активность -88,8±4,05 каз.ед., переваривающая сила на белок - 4,6+0,1 ш. В олитник период величина рН возрастала до 7,84+0,04, дротеодитичес-кая активность - до 127,93+6,47, переваривающая 'сила на белок -до 5,6^0,1 1аг(Р<0,01)^,
При скармливании тедягаи обработанного Формадьдеуддоа комбикорма в.химусе, полученной натощак, возрастала нз толка активность протеаз, до и-других .шцошритедьных-ферментов». Так у теленка 'й I наряду с увеличением цротеолитической активности на 73&, возросла фосфатазная - на 76Й, переваривающая сила: да белой - на 20&, Еа крахмал. - .на Пл. Ащуюгичное увеличение ферыэнтаишкой аягивяостЕ происходило и у -других подопытных животных при скараш-ваши обработанного §орг,5ИГЬдехвдом комбикорма как утром до кораяа-еия тек ш через 2,5-3 часа юане -наго. Это связано с поступданнем в КЕШЭЧЕДК большего кодЕ^ества нарасщепившаг-ося белка, ищхышз которого в рубца заканш в результата обработка формальдегидов.
Учитывая, что содариаюз толстого кишечника имеет плотщэ консистенцию его пзр-эд определением активности ферментов гоюгенп-зировашх.
Установлено, что у- телят как до- кормления, так ж после призма кориа-содаркЕцэо кэдат щелочную реакцию. рН изменяется мало - 8,28,3. Активность ферментов содоранного ободочной кишки после 12-14 часового голодадка низкая. Кормление' мало влияет на измеяешэ рК
содержимого, лишлзшгаескую л фосфатазнуэ активность. Что касается ашлсиштической и лротеолдтическо! активности, то после приема корма она увеличились. Так, активность х-амолазы увеличивалась з среднем с 76,1,до 105,3 г/ч.л, о'протез - с 17, Э до 21,7 яаз.ед.
При сравнении ферментативной-активности содержимого тонкого и толстого кишечника видно, что активность ь-амллазн в хшдусэ тощей шякз в 5,2 раза вгае чем з ободочной, протеолитгчеевая - в 3,2, а фосфатазнгя - в 7,3 раза.
Аналогичный характер изменений ферментативной активности содержимого тонкого и толстого кашечаика наблюдается а у взрослых животных.
Перевод телят на рацион содержащий обработанный формальдегидов комбикорм увеличивает ферментативную активность содержимого толстого кишечника на 37-56$ (Р<0,05)' (Табл. 3),
Таблица 3
Ферментативная активность содержимого ободочпоЗ кишки •
телят (Иди ) ' .
Показатели
1 .;'. ^шсиолн' ~
'контрольным !
опытный'"
Ашлоллтическая активность г/ч.л 76,14+7,17 123,07+19,4х
Липолнтическая активность, "ед/ыл 14,84+1,83 23,17+1,892
Фосфатазная активность,кмолъ/ч.л . 61,57+9,69 91,48+29,343
Протеолитическая активность,хсаз.ед. 17,93+1,96 • 23,38+3,78х
рН 8,2+0;03 8,35+0,02х
х - Различия статистически достоверны.
Такио же изменения активности ферментоз наблюдались и в пробах, полученных через 2,5-3 часа после приема корма.
Увеличение ферментативной активности содержимого ободочной кишки в опытный период, вероятно, связано с большим поступлением ферментов из тонкого кишечника а уменьшением их зшаетивацвп. .
2.2.6. Количество азота в содержимом различных отделов пищеварительного тракта
В результате проведенных исследований усталовлено, что прз скармливания телятам натявнох*) воибшазрма в содержа»« рубца до
кормления-количество общего азота находилось в пределах от 166,4 до 210,3 ыг$, небелкового азота, в среднем, 57,3$ от общего. Прием корма значительно изменял содержание азота. Так, через 3 часа после приеме корма количество общего езота увеличивалось, б среднем, на 15,7$. Причем содержание белкового азота увеличивалось на 26,ЭЙ, тогда как небелкового - лишь на 12$„ .
Перевод телят на рацион, содергадиЯ обработанный формальдегидом комбикорм до кормления увеличивает только содержание белкового азота на 25,3$, а после приема корма возрастает количество общего азота в среднем с 235,3 до 252,6 мг$ и белкового - с 105 до 146,6 мг$, тогда как небелкового - снижалось ка 17,8$. (Р<0,05).
Б сычуяноы содержимом телят, полученном до кормления количество общего азота составляет I64-I9I мг$, 70,45? которого приходится иа небелковый. Такое соотношение общего к небелкового азота в содержимом енчуга сохраняется к после кормления. При скармливании телятам комбикорма, обработанного формальдегидом содержание общего азота увеличивается, в среднем, на 11% за счет пропорционального повышения белкового к воболкового азота.
В химусе краниальной части тощей кишки- до кормления обкй азот составляет II8-I70 мг$, а белковый - 53-81 мг$. После приема корма количзстео общего азота возрастает на %, при атом изменяется соотношение белкового и небелкового азота; если количество небелкового увеличивалось, в среднем, на -27,8$, со содержание белкового - уменьшилось на 17$. Перевод телят на рацион, содеркаауй обработанный формальдегидом комбикорм до кормления увеличивает в 'химусе краниальной части тощей кишки только содержание белкового азота, тогда как после кормления увеличивается общего и белкового и спивается -небелкового азота.
2.2.7. Адсорбция пищзвзритадьшх ферментов.на клетчатке грубых кормов
Адсорбция пищеварительных ферментов на клетчатка изучена в 2-х сериях опытов in vitro»Б первой серии рубцовое содержимое получали через фистулу, фильтровали через морлз. Твердую часть' содержимого (клетчатку) отмывали в течение 20 минут, перемеривал на магнитной мешалке и центрифугировали. Затем отбирали 2 г плотной части и помешали -в 8 мл химуса краниальной части тощей-низки с предварительно определенной ферментативной активностьэ и ставили в водяную бона на 1 час при 37°С. ГЬелч центрифугирования определяли активность пищеварительных ферментов в гоиогенато плот-
ной и жидкой частях.
Установлено, что при смешивании отмытой клетчатки, подученной из рубца с химусом происходит адсорбирование фер;,;гнтов на клетчатке: амилазы - 80,6«, щелочной фосфатазы - 63,7*, протеаз - 65,55? и липазы - 50%, соответственно покидается активность ферментов в жидкой фазе химуса.
Во второй серии опытов после инкубации в химусе измельченного до I мм сена, предварительно выдержанного в течение ч. в бу-
ферном растворе (рК-4,4), плотная фаза адсорбирует из яидкой около 5055 ферментов. Тогда как, частицы сена из раствора с нейтральной реакцией среди (рН 7,0) после »инкубации имеют: 71,4% амклолиткче-ской и 52$ фэсфатаэиой. Активность липази и протеаз распределяется поровну. •
При этом необходимо учитывать, что плот-нал фаза составляет 1/4 часть от жидкой, поэтому удельная ферментативная активность клетчатки выяе, чем з жидкой фазе. Причем, наибольшую активность имеет клетчатка, извлеченная из рубца, несколько ниже - клетчатка выдержанная в нейтральном растворе и (•¡(¡■'•те в кислом.
Итак, клетчатка способна адсорбировать значительное количество ферментов из химуса. Причем на адсорбционную емкость-клетчатки оказывает величина рН.
Кроне того, клетчатка, подвергается частичному гидролизу в рубце хвачных, способна адсорбировать большее количество ферментов, чем нативная.
В рубце на клетчатку действуя*? кислота, щелочи, микроорганизмы и другие факторы, которые по-видкмому увеличивают ее пористость и адсорбционше свойства. Влияние других факторов на адсорбционные свойства 1.'ц не отрицаем.
2,2.0. Баланс азота я гематологические показатели телят
Опыта били проведены з колхозе "Октябрь" Еерхнадвкнского района Витебской области из 'двух группах животных по 20 голов в каждой, подобранных по принципу аналогов возрастом 2,5-4,5 месяца, дивотн'.'е контрольной группы получали следуэцЕЙ суточный рацион: ко:>:б::корм - I кг, сено - 2 кг, свекла кормовая - 1,5 кг, обрат -4,5 л, что составляет 3,2 я.ед., 480-500 г сирого протеина. Кроме того, рацион бмя сбалансирован по содержат» кальция, фосфора а каротина.
Кивотные отг.'тноП группы получзли аналогичный рацион, ко ком-
бккори обрабатывали формальдегидом. Продолжительность опыта составляла 30 дней.
Гематологические показатели животных контрольной и опытной групп были примерно"одинаковы и находились в пределах физиологической кормы. Так, количество гемоглобина - 127,4-133 г/л, оритро-цитов - 7,25-7,4 . 10к/л, лейкоцитов - 3,9-9,15 . М9/л.
Баланс азота у животных обеих групп был положительным. У телят контрольной группы количество усвоенного азота составляет 10,85 г, а при скармливании обработанного формальдегидом комбикорма - 13,14 г (Табл. 4). .....
. Таблица 4
Среднесуточный'баланс азота у телят, г (Ы + ш )
• Показателе ■ !____
__, ; контролпнаяГ, опытная;
Принято с кормом ' 68,12+0,66 63,35+1,03
Выделено: с калом . 31,78+0,37 33,2410,63
с мочой ' £5,49+0,91 20,98-0,45х
Усвоено 10,85+0,51 13,14+0,47х
Усвоено в % от принятого 15,9 19,5
х - Различия а сравнении с дзшши контрольной группы статистически достоверны.'
Кроме того,.'в опытной группе Еаделокие азота с мочой шксе на 17,% чем в контрольной, при .скармливании обработанного формальдегидом комбикорма усвоение азота ка 3,6$ повышаете«.
¡Итак, изучена акпшюеть • ферментов содерапу.аго рубца, га, тонкого к толстого .кназчника и подиулудочной ееязэы у коров к тздят.
Установлено, что характера для взрослых кивотгих тид ш£де~ варения,устанавливается у телят к 3-х месячному возрасту.
Выяснено влияние приема кораа на оицзварительныз процессы. Скармливание обработанного формальдегидом комбикорма телятам усиливает фушщизз сычукких, вдзючгйпе и панкреатических &адаз. Увели-Ч1«.вае? использование азота корма. Изучена роль клетчатки в адсорбции шяцзЕарителышх формантов-" в полости кишечника.
3. ВЫВОДЫ
1. 7 взрослого крупного рогатого скота пищеварительные процессы в рубце протекает на высоком уровне: деллаяозолитическая активность проявляется в ig3 - ig5, переваривавшая сила на крах-кал - 8,3+0,2 ми. В сычуге общая .кислотность - 41,3+4,1 ед.титра, Химус тощей кишки обладает высокой ферментативной активностьи: амилолитичессая - 920,3+56,04 г/ч.л, липолитическая - 57,5+4,5ед/ме, фосфатазная - 257?, 4+104,1 ююлъ/ч,л, протеолитичеСяая - 82,3+
2,7 каз.ед. Активность пищеварительных ферментов в содержимом ободочной юшки низкая.
2. Приучение телят к поеданию грубого корма с первых дней етзяи способствует появлению инфузории а двухнедельном возрасте, а к двум месяцам количество инфузорий достигает уровня взрослых животнкх. Ферментативная активность содержимого рубца, сычуга и кишачника у телят достигает уровня взрослых животних к 2,5-3-месячному возрасту.
3. При обработке протеина комбикорма формальдегидом в реакциях присоединения участвует 74,7$ внесенного формальдегида. Полное удаление остатков несвязавшегося фораалвдегдда нз ломбвкорма происходит во время перемешивания при комнатной температуре в течение 48 часов, а при температуре 6С°С в течение 2 часов.
Формаяздегидная обработка снижает общее количество микроорганизмов на 54$, количество E.coli- на 61%, спор плесневнх грибов и дрожжевых клеток в; комбикорме - на 71%.
Расщепляемость в рубце телят обработанного формальдегидом комбикорма на 13,6« меньше, чем нативяого.
4. Включение з состав рациона обработанного формальдегидом комбикорма не оказывает заметного влияния на гематологические показатели, количество инфузорий и ферлентативную активность Рубцове го содертамого. В сычуге повышается общая кислотность и перэва-' риващая сила на белок. Поступление азота в кишечник увеличивается на 11-13%.
В химусе тонкого кишечника увеличивается ферментативная активность: протеолитическая - на 45,8^, амилолитическая - на T7,Z% и фосфатазная на 10,3.1. В содержимом ободочной кишки ферментативная активность возрастает на 37-56?.
5. гфаниальной части тощей киякя крупного рогатого скота состоит на 51,5$? из жидкой,■ 37 , 95? - плотной а 13;6% гелевей фаз.
В полости тонкого кашечпика фермента адсорбируются как на
слизистой оболочке, так и на частицах изрма. Транспорт длщевари- ■ тельных ферментов осуществляет^ жвдкой и плотной фазами хиыуса. Адсорбционная емкость клетчатки "повышается после ее обработка в рубце.
6. При скармливании телятам в составе рационов обработанного формальдегидом комбикорма количество усваиваемого азота увеличивается на 19,
4. ПРАКПНВСЫШ ШГЭДОАЕГЕЯ
С целью улучшения использования азота корма телятами необходимо разработать технологию промышленной обработки комбикорма из расчета I г формальдегида на 100 г сырого протеина.
При обработке небольшого количества комбикорма формальдегидом з хозяйстве необходимо соблюдать меры предосторожности, то есть обработку проводить в отдельном хорошо проветриваемом помещении. Скармливать обработанный комбикорм мояно не ранее чем через двое суток после проветривания при комнатной температура или двухчасового при температуре +60°С.
5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ГО ТЕЛЕ ДИССЕРТАЦИЙ
1. Гусаков Б.К., Тимофеев Д.Ф., Полазили II.В. и др. Ферменты пищеварительного тракта у телят //Ферментные препараты ь ветеринара и аивотноЕодстве.-Тезисн докладов научно-практической конференции.-Вильшс, 1989.-С. 24-25.
2. Гусаков В.К., Тимофеев Д.у. Ферментативная активность содержимого пищеварительного тракта крупного рогатого ската//4и-ЗИОЛ. И бИОХИМ. ОСНОВЫ ПОВШеНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ С.-Х.ЖИВОТНКХ,
птиц и нушнкх зверей.-Сб.н.тр. JE3K.-Ленинград, I989.-JÊ98.-C.I25-I28,
3. Тимофеев Ферментативная активность содержимого рубца, сычуга и кипечнкка телят при различном уровне расвадаемости протеина кормов в рубце //Известия АКБССР.-Сер. с.-х. наук.-1990.
4. Гусаков В.К., Тимофеев Д.Ф., Новикова C.B. Распределение
и транспорт пищеварительных ферментов, в яелуцочно-швечном тракте • крупного рогатого скота /Известия АН БССР.- Сер.с.-х.наук.-1990.
5. Гусаков В.-К., Тимофеев Д.Ф. Повышение усвояемости комбикормов, обработанных формальдегидом /Д1я|>ормадионшг;й листок Витебского МОТЦНТИиП. -Минск, 1990.-4с. -
- Тимофеев, Дмитрий Федорович
- кандидата биологических наук
- Жодино, 1990
- ВАК 03.00.13
- ВОЗРАСТНЫЕ И ВИДОВЫЕ ОСОБЕННОСТИ АКТИВНОСТИ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ У ЖВАЧНЫХ ЖИВОТНЫХ
- Влияние рационов с разным качеством протеина на процессы рубцового пищеварения и эффективность использования питательных веществ бычками-кастратами при интенсивном выращивании
- Переваримость нерасщепляемого в рубце протеина различных кормов в кишечнике растущих бычков
- Научные и практические подходы рационального использования кормового протеина в рационах мясного скота с учетом особенностей его метаболизма
- Особенности пищеварения и биологическое обоснование питания телят в связи с разработкой и использованием ЗЦМ