Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Фенилаланин-аммиак-лиаза пигментных дрожжей

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Муши, Надежда Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 7

Глава I. НЕОКИСЛИТЕЛЬНОЕ ДЕЗАМИНИРОВАНИЕ АРОМАТИЧЕСКИХ АМИНОКИСЛОТ

Глава 2. СВОЙСТВА L-ФЕНИЛАЛАНИН-АММИАК-ЛИАЗЫ.Ю

Глава 3. БИОЛОГИЧЕСКАЯ РОЛЬ Ь-ФШИЛАЛАШН-АММИАК

-ЛИАЗЫ У РАСТЕНИЙ

Глава 4. РЕГУЛЯЦИЯ l-ФШИЛАЛАНИН-АШИАК-ЛИАЗНОЙ АКТИВНОСТИ У ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ.

Глава 5. Ь-ФЕНИЛАЛАНИН-ЖШК-ЛИАЗА ДРОЖЕЙ.

Глава б. ВОЗМОЖНОЕ ПРИМЕНЕНИЕ L-ФЕНИЛАЛАНИН-АММИАК

-ЛИАЗЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Фенилаланин-аммиак-лиаза пигментных дрожжей"

4 В В Е Д Е Н И Е Ферментная активность микроорганизмов используется в практической деятельности человека с давних времен. В нашей стране и за рубежом микробные ферменты применяются в различных областях народного хозяйства: в промышленности, в сельском хозяйстве, в медицине. Микроорганизгш в качестве источников ферментов имеют ряд преюлуществ по сравнению с растениями и животными. Использование микроорганизмов дешевле, кроме того, микроорганизмы обладают ферментами, отсутствующими у других организмов. В промьш1ленности и медицине в последнее время используются иммобилизованные ферменты микроорганизмов. Однако помимо ишлобилизации очищенных ферментов, эффективным является способ иммобилизации целых клеток микроорганизмов. В этом случае используемый фермент более стабилен, так как он защищен веществами клетки. Широкое применение ферментов в различных областях народного хозяйства делает актуальным поиски новык продуцентов среди микроорганизмов и установление условий максимального проявления ферментативной активности. Одним из ферментов, который может найти применение в медицине для лечения фенилкетонурии, подавления роста злокачественных клеток является ь-фенилаланин-аммиак-лиаза. Цель настоящей работы состояла в наховдении активного продуцента Ъ-фенилаланин-аммиак-лиазы среди пигментных дрожжей и подборе оптимальных условий для проявления активности фермента.Исходя из поставленной цели, были сформулированы следующие задачи: изучить распространение пигментных дрожжей; 2) подобрать синтетические среды для культивирования наиболее активного продуцента L-фенилаланин-аммиак-лиазы; L-фенилаланин-аммиак-лиазы у 3) получить иммобилизованные препараты клеток активного продуцента Ь-фенилаланин-амлиак-лиазы; Ъ-фенилаланин-аммиак-лиазы в свобод4) изучить свойства ных и и1лмобилизованных клетках дрожжей. НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ Из обследованных 116 штаммов пигментных дрожжей, прина,длежащих к различньм родам и видам, выявлено 54 продуцента L-фенилаланин-аммиак-лиазы. Найдены виды дрожжей с высокой L-фенилаланин-аммиак-лиазной активностью, о которых в литературе ранее не упоминалось: Rhodotorula pilimanae, Sporobolomyces holsaticus, Sporobolomyces odorus, Sporobolomyces salmonicolor Показано, что при разрушении клеток Sporobolomyces salmonicolor штамм 2557 L-фенилаланин-аммиак-лиаза обнаруживается в их растворимой фракции. Впервые получены, препараты иммобилизованньк в полиакриламидном геле клеток S.salmonicolor 2557, обла.цающих L-фенилаланин-аглмиак-лиазной и L-тирозин- -аммиак-лиазной активностью. Условия проявления L-фенилаланин-аммиак-лиазной активности у свободных и иммобилизованных luieTOK S.salmonicolor 2557 ванные клетки практически одинаковы. Иммобилизоразрушают L-фенилаланин S.salmonicolor 2557 так же интенсивно, как и свободные клетки. Стабильность L-фенилаланин-ам1лиак-лиазы ишлобилизованньк клеток 2557 Bbmie, чем свободньк. S.salmonicolor

11РА1СТИЧЕС1Ш1 ЦЕННОСТЬ РАБОТЫ Найденные дрожжи S.salmonicolor 2557 по L-фенилаланин- -аммиак-лиазной активности в 1,5-2,0 раза превосходят Rhodotorula texensis с которьши работали зарубежные исследователи (Kawaquchi et al,, I97I). Подобранные условия культивирования 2557, а таюке способ иммобилизации их клеток Ь-фенилаланин-аммиак- S.salmonicolor позволяют получить препараты с высокой -лиазной активностью, которая сохраняется в течение длительного времени (более 8 месяцев). Полученные результаты могли бы использоваться в медицине. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ кафедры микробиологии Биологического факультета МГУ (государственный регистрационный номер 0I8II004030) и включена в координационный план АН СССР (шифр координационного плана АН СССР 2-28-9-5 б

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Муши, Надежда Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. В результате проверки 116 штаммов пигментных дрожжей обнаружено 54, обладающих Ь-фенилаланин-аммиак-лиазной активностью.

2. Найдены новые виды дрожжей с высокой L-фенилаланин--аммиак-лиазной активностью: Rhodotorula pilimanae , Sporobolomyces holsaticus » Sporobolomyces odorus > Sporobolomyces salmonicolor . Наиболее активным продуцентом L-фенилала-нин-аммиак-лиазы является Sporobolomyces salmonicolor штамм 2557.

3. Sporobolomyces salmonicolor 2557 дезаминирует не только Ь-фенилаланин, но и L-тирозин, следовательно, обладает как ь-фенилаланин-аммиак-лиазной активностью, так и ь-тирозин-аммиак-лиазной активностью.

4. Подобрана синтетическая среда, на которой Sporobolomyces salmonicolor 2557 хорошо растет и обладает такой же высокой L-фенилаланин-аммиак-лиазной и L-тирозин-аммиак-лиазной активностью, как и на сусле.

5. L-Фенилаланин-аммиак-лиазная активность у Sporobolomyces salmonicolor 2557 увеличивается при добавлении к средам культивирования L- и DL-фенилаланина, L- и DL-тирозина.

6. Наибольшая L-фенилаланин-аммиак-лиазная и L-тирозин--аммиак-лиазная активность Sporobolomyces salmonicolor 2557 проявляется в начале стационарной фазы роста культур.

7. L-шенилаланин-аммиак-лиазная и L-тирозин-аммиак-лиаз-ная активность обнаруживается у Sporobolomyces salmonicolor 2557 только при разрушении клеток или при обработке веществами, увеличивающими их проницаемость.

8. При разрушении клеток L-фенилаланин-аммиак-лиаза Sporobolomyces salmonicolor 2557 в основном обнаруживается в растворимой фракции.

9. Впервые получены препараты иммобилизованных в поли-акриламидном геле клеток Sporobolomyces salmonicolor 2557, обладающие ь-фенилаланин-аммиак-лиазной и L-тирозин-аммиак--лиазной активностью.

10. Условия, при которых свободные и иммобилизованные клетки Sporobolomyces salmonicolor 2557 полностью разрушают 15-20 мкМ/мл (2,5-3,75 г/л) L-фенилаланина за 4-16 часов,практически одинаковы. Иммобилизованные клетки S.salmonicolor 2557 разрушают L-фенилаланин так же интенсивно, как и свободные. Стабильность L-фенилаланин-аммиак-лиазы иммобилизованных клеток выше, чем свободных.

Приношу глубокую благодарность моему руководителю - кандидату биологических наук, старшему научному сотруднику Куплетской Марии Борисовне за руководство и помощь при выполнении и оформлении работы. Выражаю глубокую признательность член-корреспонденту АН СССР, профессору Кондратьевой Елене Николаевне за постоянное внимание к работе и обсуждение полученных результатов, кандидату биологических наук, старшему научному сотруднику кафедры биологии почв факультета Почвоведения МГУ Бабьевой Инне Павловне за предоставление культур дрожжей, и всему коллективу кафедры микробиологии Биологического факультета МГУ во главе с профессором Егоровым Николаем Сергеевичем за возможность выполнения работы, помощь и поддержку.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Муши, Надежда Юрьевна, Москва

1. Запрометов М.Н., Колонкова С.В. 1967. О биосинтезе фенольных соединений в хлоропластах. Докл. АН СССР, 176, 470-473.

2. Запрометов М.Н., Шипилова С.В. 1972. Фенилаланин-аммонийлиаза и образование фенольных соединений в проростках кукурузы. Физиол. раст., 19, 3, 498-503.

3. Ыаргна у.В., Лаанест Л.Э., Маргна Э.Р., Вайнъярв Т.Р. 1983.

4. Темновое образование флавоноидов в проростках гречихи при введении в них экзогенных предшественников.- В кн.: Регуляция роста и метаболизма растений. Таллин, 54-65.

5. Муши Н.Ю., Куплетская М.Б., Бабьева И.П., Егоров Н.С. 1980.0 фенилаланин-аммиак-лиазе пигментных дрожжей. Микробиология, XIX, № 2, 269-273.

6. Муши Н.Ю., Куплетская М.Б. 1981. Условия образования L-фенилаланин-аммиак-лиазы дрожжами Sporobolomyces salmonicolor штамм 2557. Прикл.биох. и микр., т. ХУП, вып. I, I07-II2.

7. Полякова Л.В. 1979. Изменение содержания фенольных соединений в проростках горца Забайкальского при низкой'температуре. Физиол.раст., 26, 3, 638-640.

8. Шипилова С.В., Запрометов М.Н. 1977. Фенилаланин-аммиак-лиаза и образование катехинов в чайном растении. Физиол. раст., 24, 4, 803-809.

9. Шипилова С.В., Запрометов М.Н. 1979. Фенилаланин-аммиак-лиаза в хлоропластах чайного растения. Докл. АН СССР,246, I, 239-242.

10. Шипилова С.В., Запрометов М.Н. 1980. Локализация фенилаланин-аммиак-лиазы в хлоропластах кукурузы (Zea mays L.). Физиол.раст., 27, I, 67-73.

11. Яковлева В.И., Малофеева И.В., Зуева Н.Н., Аццреева А.П.,

12. Губницкий Л.С., Щербакова В.Н., Верезин И.В. 1979. Синтез L-аспарагиновой кислоты изфумарата аммония свободными и иммобилизованными клетками Escherichia coli . Прикл.биох. и микр., т. ХУ, вып. 3, 328-336.

13. Abell C.W., Hodgins D.S., Stith W.J. 1973. In in vivo evaluation of the chemotherapeutic potency of phenylalanine ammonia-lyase. Cancer Research, 33. 4, 2529-2532.

14. Abell C.W., Stith W.J., Hodgins D.S. 1972. The effects ofphenylalanine ammonia-lyase on leukemic lymphocytes in vitro. Cancer Research, 22, 285-290.

15. Agrawal P., Mahadevan A. 1981. Do phytopathogenic and symbiotic bacteria contain phenylalanine ammonia lyase? Curr. Sci., 50, 23, 1043-Ю48. 14» Ambrus C.M., Ambrus J.Z., Horvath C., Pedersen H.,

16. Sharma S., Kant C., Mirand E., Guthrie R., Paul T. 1978. Phenylalanine depletion for the management of phenylketonurias use of enzyme reactors with immobilized enzymes. Science, 201. 1, 837-839.

17. Amrhein N., Gerhardt J. 1979. Superinduction of PAL ingherkin hypocotyls caused by the inhibitor, L-el-aminooxy-f-phenylpropionic acid. Biochem. et Biophys.1. Acta, ^82, 4, 434-442.

18. Amrhein N., Goedeke K. 1977. ^-Aminooxy-jUphenylpropionicacid- a potent inhibitor of L-phenylalanine ammonia-lyase in vitro and in vivo. Plant Sci. Lett., 8, 4» 313-317.

19. Amrhein N., Zenk M.H. 1970. Activity of phenylalanine ammonia-lyase (PAL) and accumulation of phenylpropanoid compounds during the germination of buckwheat (Fago-pyrum exculentum Moench) in the dark. Z.Pflanzenphy-siol., 62, 4, 384-388.

20. Attridge H., Smith H. 1973- Evidence for a pool of inactive phenylalanine ammonialyase in Cucumis sativus seedlings. Photochemistry, 12, 7, 1569-1574.

21. Bandoni R.J., Moore K., Subba Rao P.V., Towers G.H.N. 1968.

22. Phenylalanine and tyrosine ammonia-lyase activity in some Basidiomycetes. Phytochemistry, 7, 2, 205-207.

23. Bellini E., Hillman W.S. 1971. Red and far-red effects onphenylalanine ammonia-lyase in Raphanus and Sinapis seedlings do not correlate with phytochrome spectrophotometry. Plant Physiol., £7, 5, 668-671.

24. Bellini E., M. van Poucke. 1970. Distribution of phenylalanine ammonia-lyase in etiolated and far-red irradiated radish seedlings. Planta, 22* 1» 60-70.

25. Biehn W.L., Kuc J., Williams E.B. 1968. Accumulation ofphenolic in resistant plant-fungi interactions. Phytopathol., 58, 9, 1255-1260.

26. Billet E.E.,. Smith H. 1980. Control of phenylalanineammonia-lyase and cirmamic acid 4-hydroxylase in gherkin tissues. Phytobiochem., Ij}., 1035-1041.

27. Billett E., Wallace W., Smith H. 1978. A specific andreversible macromolecular inhibitor of phenylalanine ammonia-lyase and cinnamic acid-4-hydroxylase ingherkins. Biochim. Biophys. Acta, 524. 219-230.

28. Boerner H., Grisebach H. 1982. Enzyme induction in soybeaninfected by Phytophtora megasperma f. sp. glycinea. Arch. Biochem. Biophys., 217. 1, 65-71.

29. Bopp M., Murach K.F. 1980. L-Phenylalanine ammonia-lyaseactivity during germination of immature embryos of Sinapis alba L. Z. Pflanzenphysiol;, 100. 1, 91-94.

30. Brueske G.H. 1980. Phenylalanine ammonia lyase activity intomato roots infected and resistant to the root-knot nematode, Meloidogine incognita. Physiol. Plant Pathol., 16, 3» 409-414.

31. Bufler G., Bangerth P. 1982. UV-induced peroxidase andphenylalanine ammonia-lyase activity and phaseollin accumulation in leaves of Phaseolus vulgaris L. in relation to ethylene. Plant Sci. Lett., 2, 227-237.

32. Burrell M.M., T.Rees. 1974. Metabolism of phenylalanineand tyrosine by rice leaves infected by Piricularia orysae. Physiol. Plant Pathol., 4, 497-508.

33. Camm E.L., Towers G.H.N. 1969. Phenylalanine and tyrosineammonia lyase activity in Sporobolomyces roseus. Phytochemistry, 8, 5, 1407-1413.

34. Camm E.L., Towers G.H.N. 1973a. Is cinnamic acid 4-hydroxylase of potato a light-induced enzyme? Can. J. Bot., 51, 4, 824-825.

35. Camm E.L., Towers G.H.N. 1973b. Riview article phenylalanine ammonia lyase. Phytochemistry, 1j2, 5, 961-973.

36. Creasy L.L. 1968. The increase in phenylalanine ammonialyase activity in stawberry leaf disks and its correlation with flavonoid synthesis. Phytochemistry, 3, 441-446.

37. Creasy L.L., Zucker M., V/ong P.P. 1974. Anomalous effectsof cycloheximide on phenylalanine ammonia-lyase: role of synthesis and inactivation in leaf disks on Helian-thus annuus. Phytochemistry, 12* 10, 2117-2124»

38. Daines R.J., Minocha S.C. 1983. Regulation of phenylalanine ammonia-lyase in germinating lettuce seeds (Lactuca sativa L. cv Grand Rapids): effects of ab-scisic acid and water stress. Z. Pflanzenphysiol., 110. 1, 69-76.

39. Dhandapani M., Antony A., Subba Rao P.V. 1977. Biosynthesis of phenolic compounds in hypocotyl callus cultures of fenugreek (Trigonella foenum graecum L.). Indian J. Exp. Biol., 3, 204-207.

40. Dixon R.A., Browne Т., Ward M. 1980. Modulation of1.phenylalanine ammonia-lyase by pathway intermediates in cell suspension cultures of dwarf french bean (Phaseolus vulgaris L.). Planta, 150. 7, 279-285.

41. Duchesne M., Fritig В., Hirth L. 1977. Phenylalanineammonia-lyase in tobacco mosaic virus-infected hypersensitive tobacco. Density-labeling evidence of de novo synthesis. SBiochim. Biophys. Acta, 485t 2, : 465-481.

42. Duke S.O., Hoagland R.E., Elmore C.D. 1980. Effect of glyphosate on metabolism of phenolic compounds. V. L-X-aminooxy-^-phenylpropionic acid and glyphosate effects on phenylalanine-ammonialyase in soybean seedlings. Plant Physiol., 6£, 1, 17-21.

43. Emes A.V., Vining Z.S. 1970. Partial purification andproperties of L-PAL from Streptomyces verticillatus. Can. J. Biochem., 48, 5, 613-622.

44. Engelsma G. 1967a. Photoinduction of phenylalanine deaminase in gherkin seedlings. I. Effect of blue light. Planta, 7£, 3, 207-219.

45. Engelsma G. 1967b. Photoinduction of phenylalanine deaminase in gherkin seedlings. II. Effect of red and far> red light. Planta, 1967b, 77, 1, 49-57.

46. Engelsma G. 1968a. Photoinduction of phenylalanine deaminase in gherkin seedlings. III. Effects of excision and irradion on enzyme development in hypocotyl segments. Planta, 82, 3, 355-360.

47. Engelsma G. 19б8Ъ. The influence of light of differentspectral regions on the synthesis of phenolic compounds in gherkin seedling, in relation to photo-morphogenesis. IV. Mechanism of far-red action. Acta Botanica Neerlandica, 12» 2, 85-92.

48. Engelsma G. 1968c. The influence of light of differentspectral regions on the synthesis of phenolic compounds in gherkin seedlings, in relation to photo-morphogenesis. V. The temperature dependence. Acta Botanica Neerlandica, 12» 6, 499-505.

49. Engelsma G. 1970a. Photoinduction of phenylalanine deaminase in gherkin seedlings. IV. The role of the temperature. Planta, £0, 2, 133-141.

50. Engelsma G. 1970b. Low-temperature effects on phenylalanine ammonia-lyase activity in gherkin seedlings. Planta, 21» 3, 246-254.

51. Engelsma G. 1974. On the mechanism of the changes in phenylalanine ammonia-lyase activity induced by ultraviolet and blue light in gherkin hypocotyls. Plant Physiol., Si, 5, 702-705.

52. Fritsch H., Grisebach H. 1975. Biosynthesis of cyanidinin cell cultures of Haplopappus gracilis. Phytoche-mistry, Н» 11» 2437-2442.

53. Gilbert H.J., Jack G.W. 1981. The effect of proteinaseson phenylalanine ammonia-lyase from the yeast Rhodotorula glutinis. Biochem. J., 199. 4, 715-723.

54. Gilbert H.J., Stephenson J.B., Tully M. 1983. Control ofsynthesis of functional m RNA coding for phenylalanine ammonia-lyase from Rhodosporidium toruloides. J. Bacteriol., 1£3, 3, 1147-1154.

55. Gilbert H.J., Tully M. 1982. Synthesis and degradation ofphenylalanine ammonia-lyase of Rhodosporidium toruloides. J. Bacteriol., ^O, 2, 498-505.

56. Gimenez C., Benavides J., Sanchez-Rubiales M., Valdivieso

57. F., Major F. 1977. Experimental phenylketonuria: metabolic studies in rat liver. Molecular and cellular biochemistry, 1j3, 1, 9-16.

58. Gupta S., Acton G.J. 1979. Purification to homogeneityand some properties of L-phenylalanine ammonia-lyase of irradiated mustard (Sunapis alba L.) cotyledons. Biochim. Biophys. Acta, 570. 187-197.

59. Hadwiger L.A., Schwochau M.E. 1971. Specificity of deoxyribonucleic acid intercalating compounds in the control of phenylalanine ammonia-lyase and pisatin levels. Plant Physiol., £7, 3, 346-351.

60. Hahlbrock K. 1976. Regulation of phenylalanine ammonialyase activity in cell-suspension cultures of Petro-selinum hortense. Apparent rates of enzyme synthesis and degradation. J. Biochem., 6J3, 2, 137-145.

61. Hahlbrock K., Wellmann E. 1970. Light-induced flavone biosynthesis and activity of phenylalanine ammonia-lyase and UDP-apiose synthesis in cell suspension cultures of Petroselinum hortense. Planta, 21» 3, 236-239.

62. Hanson K.R., Havir E.A. 1970. L-Phenylalanine ammonialyase. Evidence that the prosthetic group contains a dehydroalanyl residue and mechanism of action. Arch. Biochem. Biophys., 141. 1, 1-17.

63. Havir E.A., Hanson K.R. 1968a. L-Phenylalanine ammonialyase. I. Purification and molecular size of the enzyme from potato tubers. Biochem., 5, 1896-1903*

64. Havir E.A., Hanson K.R. 1968b. L-Phenylalanine ammonialyase. II. Mechanism and kinetic properties of the enzyme from potato tubers. Biochem., 7, 5, 1904-1914.

65. Havir E.A., Hanson K.R. 1975. L-Phenylalanine ammonialyase (maize, potato and Rhodotorula glutinis). Studies of the prosthetic group with Nitromethanet Biochem., Ц,18, 1620-1626.

66. Havir E.A., Reid P.D., Marsh H.V. 1971. L-Phenylalanineammonia-lyase (maize). Evidence for a common catalytic site for L-phenylalanine and L-tyrosine. Plant Physiol., £8, 2, 130-136.

67. Heinzmann U., Seitz U. 1977. Sythesis of phenylalanineammonia-lyase in anthocyanin-containing and anthocya-nin-free callus cells of Daucus carota L. Planta, 135. 1, 63-67.

68. Henderson S.J., Preind J. 1979. Increase in PAL andlignin-like compounds as race-specific responses in potato tubers to Phytophthora infestans. Phytopatol., 21» 4, 323-334.

69. Hillis W.E., Ishikura N. 1970. The biosynthesis of polyphenols in tissues with low phenylalanine ammonia-lyase activity. Phytochemistry, % 7, 1517-1528.

70. Hino P., Okazaki M., Miuro Y. 1982. Effects of kinetin onformation of scopoletin and scopolin in tobacco tissue cultures. Agric. Biol. Chem., 46, 9, 2195-2202.

71. Hrazdina G., Creasy L.L. 1979. Light induced changes inanthocyanin concentration activity of phenylalanine ammonia-lyase and flavonone synthase and some of their properties in Brassica oleracea. Phytochemis-try, 18, 4, 581-584.

72. Huault C. 1974. Phytochrome regulation of phenylalanineammonia-lyase (PAL) activity in radish cotyledons: a threshold mechanism. Plant Sci. Lett., 2» 3» 149-155.

73. Hyodo H., Pa Yang S. 1974. The effect of ethylene on thedevelopment of phenylalanine ammonia-lyase in potato tuber disks. Z. Pflanzenphysiol., 71., 1, 76-79.

74. Hyodo H., Kuroda H., Pa Yang S. 1978. Induction of phenylalanine ammonia-lyase and increase in phenolic in lettuce leaves in relation to the development of russet spoting caused by ethylene. Plant Physiol., 62, 1, 31-35.

75. Imaseki H., Uchiyama M., Uritani I. 1968. Effect of ethylene on the inductive increase in metabolic activities in sliced sweed potato roots. Agr. Biol. Chem., j32, 3, 387-389.

76. Innerarity L.T., Smith E.C., Wender S.H. 1972. Indolaceticacid inhibition of a phenylalanine ammonia-lyase preparation from suspension cultures of WR-132 tobacco. Phytochemistry, 1.2, 9, 2145-2154.

77. Iredale S.E., Smith H. 1973. Density-labbeling studies onthe photocontrol of phenylalanine ammonia-lyase levels in Cucumis satuvus. Phytochemistry, 12, 9, 2145-2154.

78. James D.J., DavidBon A.W. 1977. Phytochrome control ofphenylalanine ammonia-lyase levels and the regulation of cell division in artichoke callus cultures. Ann. Bot., 41» 174, 873-877.

79. Jones D.H. 1984. Phenylalanine ammonia-lyase: regulationof its induction, and its role in plant development. Phytochemistry, 7, 1349-1359.

80. Jones D.H., Northcote D.H. 1981. Induction by hormones ofphenylalanine ammonia-lyase in bean-cell suspension cultures. Inhibition and superinduction by actino-mycin D. Eur. J. Biochem., 116. 3, 117-125.

81. Kalghatgi K.K., Subba Rao P.V. 1975. Microbial L-phenylalanine ammonia-lyase. Purification, subunit structure and kinetic properties ofthe enzyme from Rhi-zoctonia solani. Biochem. J., 149. 1, 65-72.

82. Kawaquchi К., Yzumitani Т., Tani Y., Yamada H., Ogata K.1971. Enzymatic elimination of L-phenylalanine from amino acid mixtures by acetone-dried cells in Rhodotorula texensis. An application of L-PAL. J. Ferment. Technol., £9, 3, 222-229.

83. Kindl H. 1970. The regulation of the L-tyrosine ammonialyase activity by phenolic compounds. Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Ghem., 351. 7, 792-798.

84. Klein-Eude D., Rollin P., Huault C. 1974. Effects of sometranslation and transcription inhibition on the development of the phenylalanine ammonia-lyase activity induced by light in radish cotyledons. Plant. Sci. Lett., 2, 1, 1-8.

85. Knobloch K.H. 1982. Uptake of phosphate and its effect ofphenylalanine ammonia-lyase activity and cinnamoyl putrescine accumulation in cell suspension cultures of Nicotiana tobacum. Plant Cell Rep., 1, 3, 128-130.

86. Knogge W., Beulen C., Weissenbock G. 1981. Distributionof phenylalanine ammonia-iyase and 4-coumarate: CoA ligase in oat primary leaf tissues. Z. Uaturforch., 389-395.

87. Kopp M., Pritig В., Hirth L. 1977. Phenylalanine ammonialyase activity of protoplasts: in vitro inhibition by mannitol and sorbitol. Phytochemistry, Ijj, 6,895.898.

88. Koukol J., Conn E.E. 1961. The metabolism of aromaticcompounds in higher plants. J. Biol. Chem., 236, 10, 2692-2698.

89. Lamb C.J. 1977. Phenylalanine ammonia-lyase and cinnamicacid 4-hydroxylase: characterisation of the concomitant changes in enzyme activites in illuminated potato tuber discs. Planta, 135. 2, 169-175.

90. Lamb C.J. 1982. Effects of competitive inhibitors of phenylalanine ammonia-lyase on the levels of phenylpro-panoid enzyme in Solanum tuberosum. Plant, Cell Envir., 6, 471-475.

91. Lamb C.J., Lawton M.A., Shields S.E. 1981. Density labelling characterisation of the effects of cordycepin and cycloheximide on the turnover of phenylalanine ammonia-lyase. Biochim. et Biophys. Acta, 675» 1» 1-8.

92. Lamb C.J., Merritt Т.К. 1979. Density labelling studiesof the photocontrol of L-phenylalanine ammonia-lyase in discs of potato (Solanum tuberosum) tuber paren-chyme. Biochim. et Biophys. Acta, 588. 1, 1-11.

93. Law Jiu-Lam, Scheld H.W., Cowles I.R. 1980. Phenylalanineammonia-lyase activity in callus cultures of Pinus elliotii. Physiol. Plantarum, £2, 3, 299-303.

94. Lawton M.A., Dixon R.A., Hahlbrock K., Lamb C.J. 1983a.

95. Rapid induction of the synthesis of phenylalanine ammonia-lyase and chalcone synthase in elicitor-treated plant cells. Eur. J. Biochem., 129, 3, 593-601.

96. Lawton M.A., Dixon R.A., Hahlbrock K., Lamb C.J. 1983b.

97. Lodder J. 1970. The yeasts. A taxonomic study. 2-nd ed.

98. North-Holland Publ Co., Amsterdam-London.

99. Loffelhardt W., Ludwig В., Kindl H. 1973. Thylakoidgebunden L-phenylalanin ammoniak-lyase. Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem., 354» 8, 1006-1012.

100. Lowry O.H., Rosebrough N.F., Farr A.L., Randall R.T. 1951.

101. Protein measurement with the Folin-phenol reagent. J. Biol. Chem. .193. 265-268.

102. Mahadevan A., Saraswathy R. 1980. Phenylalanine ammonialyase in ground nut (arachis hypogaea). Indian J. Plant Physiol., 2J3, 3, 288-291.

103. Maier V.P., Hasegawa H. 1970. L-Phenylalanine ammonialyase activity and naringenin glycoside accumulation in developing grapefruit. Phytochemistry, 1, 139-144.

104. Marconi W., Bartoli F., Gianna R., Morisi F. 1980. Phenylalanine ammonia-lyase entrapped in fibers. Biochi-mie, 62, 8-9, 575-580.

105. Margna U., Margna E. 1978. Differential biosynthesis ofbuckwheat flavonoids from endogenous and exogenous substrates. Biochem.Physiol.Pflanzen.,173«4«347-354.

106. Marsh H.V., Havir E.A., Hanson K.R. 1968. L-Phenylalanineammonia-lyase. III. Properties of the enzyme from maize seedlings. Biochem. J., Jf 5, 1915-1918.

107. Marusich W.C., Jensen R.A., Zamir L.O. 1981. Induction of1.phenylalanine ammonia-lyase during utilization of phenylalanine as a carbon or nitrogen source in Rhodotorula glutinis. J. Bacterid., 146. 3» 10131019.

108. McClure J.W. 1974. Action spectra for phenylalanine ammonia-lyase in Hordeum vulgare. Phytochemistry, 1^3» 7, 1071-1073.

109. Melin C., Moulet A., Dupin P., Hartmann C. 1977. Phenylalanine -ammoniaque lyase et composes phenoliques au cours de la maturation de la cerise. Phytochemistry, 16, 1, 75-78.

110. Minamikawa T. 1965. Phenylalanine ammonia-lyase in slicedsweet potato roots. Biochem. J., £1, 5» 678-688.

111. Minamikawa Т., Uritani I. 1969. Phenylalanine deaminaseand tyrosine deaminase in sliced or black rot-infected sweet potato roots. Arch. Biochem. Biophys., 108. 573-574.

112. Moore K., Subba Rao P.V., Towers G.H.N. 1968. Degradationof phenylalanine and tyrosine by Sporobolomyces ro-seus. Biochem. J., 106, 2, 507-514.

113. Murphy J.B., Murphy J.В., Uoland T.L. 1980. Activity of1.phenylalanine ammonia-lyase during stratification and germination of sugar pine seeds. Z. Pflanzenphy-siol., 27, 2, 161-170.

114. Nagaiah К., Kumar M., Mahadewan S. 1977. L-Phenylalanineammonia lyase from the lignified and non-lign^fied regions of Cuscuta chinensis. Phytochemistry, 1j>, 6, 667-671.

115. Neish A.C. 1961. Formation of m- and p-coumaric acids byenzymatic deamination of the corresponding isomers of tyrosine. Phytochemistry, 1., 1, 1-24.

116. Uemec P., Zelinka J. 1981. Phenylalanine ammonia-lyase in

117. Streptomyces aureofaciens. Biologia (Bratislava), 26, 3, 215-219.

118. Nishizawa A.N., Wolosiuk R.A., Buchanan B.B. 1979. Chloroplast phenylalanine ammonia-lyase from spinach levels. Planta, 145, 1, 7-12.

119. Hoe W., Langebartels C., Seitz H. 1980. Anthocyanin accumulation and PAL activity in suspension culture of Daucus carota L. Planta, 149. 3, 283-287.

120. Noe W., Seitz H.U. 1982. Induction of m RHA activity forphenylalanine ammonia-lyase (PAL) by L-^-aminooxy-j^--pheny.lpropionic cultures of Daucus carota L. FEBS Lett., t£6, 1, 52-54.

121. Noe W., Seitz H. 1983. Studies on the regulatory role oftrans-cirniamic acid on the activity of the phenylalanine ammonia-lyase (PAL) in suspension cultures of Daucus carota L. Z. Naturforsch., ^8C (5-6), 408-412.

122. Ogata K., Uchiyama K., Yamada H., Tochikura T. 1967a. Metabolism of aromatic amino acid in microorganisms. Part I. Formation of cinnamic acid from PA. Agric. Biol. Chem., 21» 2» 200-206.

123. Ogata К., Uchiyama К., Yamada H., Tochikura Т. 1967b.

124. Metabolism of aromatic amino acid in microorganisms. Part II. Properties of PAL of Rhodotorula. Agric. Biol. Chem., 21, 5, бОО-бОб.

125. Parkhurst J.R., Hodgins D.S. 1971. Phenylalanine and tyrosine ammonia-lyase activity in Sporobolomyces para-roseus. Phytochemistry, 10, 11, 2997-3000.

126. Parkhurst J.R., Hodgins D.S. 1972. Yeast phenylalanineammonia-lyase. Properties of the enzyme from Sporobolomyces pararoseus and its catalytic site. Arch. Biochem. a. Biophys., 152. 2, 597-605.

127. Paynot M., Melin D., Martin C. 1971. Existence d'un gradient d'activite phenylalanine-ammoniac lyase chez Nicotiana tobacum var. Xanti n.c. et Periploca graeca L. Compt. Rend., 273D. 8, 749-751.

128. Pecket R.C., Bassim T.A. 1974. The effect of kinetin inrelation to photocontrol of anthocyanine biosynthesis in Brassica oleracea. Phytochemistry, 1,3» 8, 1385-1394.

129. Pedersen H., Horvath C., Ambrus C.M. 1978. Preparationof immobilized L-phenylalanine ammonia-lyase in tubular from for depletion of L-phenylalanine. Res. Commun. Chem. Pathol, a. Pharmacol., 20, 3, 559-569.

130. Poulton J.E., McRee D.E., Conn E.E. 1980a. Intracellularlocalization of two enzymes involved in coumarin biosynthesis in Melilotus alba. Plant Physiol., 6£, 2, 171-175.

131. Poulton J.E., McRee D., Conn E.E., Saunders J., Blume D.E.,

132. McClure J.W. 1980b. Reapplaisal of the inhibitory effect of certain sugars used as osmotica of phenylalanine ammonia-lyase activity. Phytochemistry, 19. 8, 775-777.

133. Power D.M., Towers G.H.N., Neish A.C. 1965. Biosynthesisof phenolic acids by certain wood-destroying Basidio-mycetes. Can. J. Biochem., £3, 1397-1407.

134. Ragg H., Schroeder J., Hahlbrock K. 1977. Translation ofpoly(A)-containing and poly(A)-free messenger RNA for phenylalanine ammonia-lyase, a plant-specific protein in a reticulocyte lysate. Biochim. et Biophys. Acta, 474. 2, 226-233.

135. Rhodes M.J.C., Wooltorton L.S.C. 1971. The effect ofethylene on the respiration and on the activity of phenylalanine ammonia lyase in swede and parsnip root tissue. Phytochemistry, 10, 9, 1989-1997.

136. Rubery P.H., Fosket D.E. 1969. Changes in phenylalanineammonia-lyase activity during xylem differentiation in coleus and soybean. Planta, 8£, 1/2, 54-62.

137. Rubery P.H., Korthcote D.H. 1968. Site of phenylalanineammonia-lyase activity and synthesis of lignin during xylem differention. Nature, 219. 1230-1234.

138. Ruis H., Kindl H. 1971. Formation of l,f--unsaturatedcarboxylic acids from amino acids in plant peroxisomes. Phytochemistry, 1С)» 11, 2627-2631.

139. Sander C., Hadwiger L.A. 1979. L-Phenylalanine ammonialyase and pisatin induction by 5-bromodeoxyuridine in Pisum sativum. Biochim. et Biophys. Acta, 563. 9, 278-292.

140. Sato Т., Kiuchi F., Sankawa U. 1982. Inhibition of phenylalanine ammonia-lyase by cinnamic acid derivatives and related compounds. Phytochemistry, 21, 4, 845850.

141. Saunders J.A., McClure J.W. 1972. Q?he localization offlavonoids and phenolic enzymes in barley plastids. Amer. J. Bot., 5, 673-679.

142. Saunders J.A., McClure J.W. 1975. Phytochrome controlledphenylalanine ammonia-lyase in Hordeum vulgare plastids. Phytochemistry, 1Д, 12, 1285-1289.

143. Sawada S., Kumagai H., Yamada H., Hill R., Mugibayasih Y.,

144. Ogata K. 1973. Stereochemistry of ammonia elimination from L-tyrosine with L-phenylalanine ammonia-lyase. Biochim. et Biophys. Acta, 211» 3, 204-207.

145. Schere H., Zenk M.H. 1967. The influence of light onflavonoid synthesis and enzyme-induction in buckwheat (Fagopyrum esculentum Moench). Z. Pflanzenphysiol., 5, 401-408.

146. Schopfer P., Hock B. 1971. Demonstration of phytochromemediated de novo synthesis of phenylalanine ammonia-lyase (PAL, E.C.4.3.1.5) in seedlings of Sinapis alba L. by density labeling with deuterium. Planta, 2£, 3, 248-253.

147. Schroder J. 1977. Light-induced increase of messenger

148. RITA for phenylalanine ammonia-lyase in cell suspension cultures of Petroselinum hortense. Arch. Biochem. Biophys., 182, 2, 488-496.

149. Schroder J., Betz В., Hahlbrock K. 1977. Messenger RNAcontrolled increase of phenylalanine ammonia-lyase activity in parsley. Plant Physiol., 60, 3» 440-445.

150. Shen R., Abell C.W. 1977. Phenylketonuria: A new methodfor the simultaneous determination of plasma phenylalanine and tyrosine. Science, 127, 8, 665-667.

151. Shields S.E., Wingate V.P., Lamb C.J. 1982. Dual controlphenylalanine ammonia-lyase production and removal by its product cinnamic acid. Eur. J. Biochem., 123. 2, 389-395.

152. Shirsat S.G., Hair P.M. ,1976. The requirement of oxygenfor the induction of PAL in potatoes by light of gamma irradiation. Biochem. Pood Technol., 16. 1, 59-63.

153. Shirsat S.G., Hair P.M. 1981. Biochemical mechanism forthe inhibition of phenylalanine ammonia-lyase induction in the absence of oxygen in potato tuber tissue. Phytochemistry, 20, 10, 2315-2318.

154. Sikora L.A., Marzluf G.A. 1982. Regulation of L-phenylalanine ammonia-lyase by L-phenylalanine and nitrogen in Neurospora crassa. J. Bacteriol., 150. 3, 1287-1291.

155. Smith H., Attridge Т.Н. 1970. Increased phenylalanineammonia-lyase activity due to light treatment and its significance for the mode of action of phytochrome. Phytochemistry, % 3, 487-495.

156. Smith H., Harper D.B. 1970. The effects of short- andlong-term irradiation on the flavonoid complement of the terminal buds of Pisum sativum var. Alaska. Phytochemistry, % 3, 477-485.

157. Stafford H.A. 1971. Changes in phenolic compounds and related enzymes in young plants of Sorghum. Phytochemistry, 8, 4, 743-752.

158. Stith W.J., Hodgins D.S., Abell C.W. 1973. Effects ofphenylalanine ammonia-lyase and phenylalanine deprivation on murine leukemic lymphoblasts in vitro. Cancer Research, 22» 8» 966-971.

159. Subba Rao P.V., Moore K., Towers G.H.N. 1967. Degradationof aromatic amino acids by fungi. II. Purification and properties of phenylalanine ammonia-lyase from Ustilago hordei. Can. J. Biochem., 1863-1872.

160. Subba Rao P.V., Towers G.H.N. 1970. L-Phenylalanine ammonia-lyase (Ustilago hordei). Methods in Enzymology, II, 6, 581-585.

161. Tanaka Y., Uritani I. 1977. Purification and propertiesof phenylalanine ammonia-lyase in cut-injured sweet potato. J. Biochem., 81, 4, 963-970.

162. Tome P., Bellini E. 1974. Phenylalanine ammonia-lyaseactivity in excised radish cotyledons: effects of water availability, fusicoccin and kinetin. Plant Sci. Lett., 6, 413-418.

163. Tome P., Campedelli L., Bellini E. 1975. Distribution ofphenylalanine transaminase and phenylalanine ammonia-lyase activities in etiolated and light irradiated radish seedlings (Raphanus sativus L.). Phytochemistry, 1j>, 10, 1119-1121.

164. Tong W.T., Schopfer P. 1978. Absence of Pfr destruction inthe modulation of phenylalanine ammonia-lyase synthesis of mustard cotyledons. Plant Physiol., 61, 1, 59-61.

165. Vance C.P., Bandoni R.J., Towers G.H.N. 1975. Purther observations on phenylalanine ammonia-lyase in fungi. Phytochemistry, Ц, 7, 1513-1514.

166. Weissenbock G., Sachs G. 1977. On the localization of enzymes related to flavonoid metabolism in sections and tissues of oat primary leaves. Planta, 137. 1, 49-52.

167. Wellmann E., Baron D. 1974» Phytochrome control of enzymes involved in flavonoid synthesis in cell suspension cultures of parsley (Petroselinum hortense Hoffm.). Planta, 119. 2, 161-164.

168. Wellmann E., Schopfer P. 1975» Phytochrome-mediated de novo synthesis of phenylalanine ammonia-lyase in cell suspension cultures of parsley. Plant Physiol., 55. 5, 822-827.

169. Wick J.P., Willis J.E. 1982. Phenylalanine-dependent denovo synthesis of phenylalanine ammonia-lyase from Rhodotorula glutinis. Arch. Biochem. a. Biophys., 216. 2, 385-391.

170. Wieder K.J., Palczuk N.C., Theo van Es, Davis P.P. 1979.

171. Some properties of polyethylene glycol: phenylalanine ammonia-lyase adducts. J. Biol. Chem., 254, 24, 12579-12587.

172. Yamada S., Nabe K,, Yzuo N., Nakamichi K., Chibata J.1981. Production of Ъ-phenylalanine from trans-cinna-mic acid with Rhodotorula glutinis containing L-phe-nylalanine ammonia-lyase activity. Appl. a. Environmental Microbiology, 42, 5, 773-778.

173. Young M.R., Neish A.C. 1966. Properties of the ammonialyases deaminating phenylalanine and related compounds in Triticum aestivum and Pteridium aquilinum. Phytochemistry, 9, 1121-1132.

174. Young M.R., Towers G.H., Neish A.C. 1966. Taxonomic distribution of ammonia-lyases for L-phenylalanine and L-tyrosine in relation to lignification. Can, J. Botany, 4£, 3, 341-349.

175. Zucker M. 1965. Induction of phenylalanine deaminase bylight and its relation to chlorogenic acid synthesis in potato tuber tissue. Plant Physiol., 40, 10, 779-784.

176. Zucker M. 1968. Sequential induction of phenylalanineammonia-lyase and lyase-inactivating system in potato tuber disks. Plant Physiol., £3, 3, 365-374.