Эймериоз кроликов в Республике Татарстан

Шиляева, Юлия Николаевна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Эймериоз кроликов в Республике Татарстан
ВАК РФ 03.00.19, Паразитология

Автореферат диссертации по теме "Эймериоз кроликов в Республике Татарстан"

На правах рукописи

Шиляева Юлия Николаевна

ЭЙМЕРИОЗ КРОЛИКОВ В РЕСПУБЛИКЕ ТАТАРСТАН (ЭПИЗООТОЛОГИЯ, МЕРЫ БОРЬБЫ)

Специальность 03.00.19 - паразитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Н. Новгород - 2004

Работа выполнена на кафедре паразитологии и инвазионных болезней

Федерального государственного образовательного учреждения высшего

профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»

Научный руководитель доктор ветеринарных наук,

профессор М.Х. Лутфуллин

Официальные оппоненты: Заслуженный деятель науки РФ,

д.в.н., профессор Э.Х. Даугалиева к.в.н., доцент О.Л. Куликова

Ведущая организация: ГУ Научно-исследовательский ветеринарный

Институт Нечерноземной зоны РФ (НИВИ НЗ РФ)

Защита диссертации состоится июня 2004 г. в ,/^.часов на заседании

диссертационного совета Д.220.047.02 в Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии (603107, Н. Новгород, проспект Гагарина, 97).

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Нижегородской государственной сельскохозяйственной академии.

Автореферат разослан « > мая 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного Совета, доктор биологических наук, профессор

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Важное значение для успешного развития кролиководства в России, помимо обеспечения хороших условий содержания, кормления и улучшения породности, приобретают ветеринарно-санитарные мероприятия по охране поголовья кроликов от различных болезней, в том числе и от такого опасного инвазионного заболевания как эймериоз.

Эймериоз животных является самой распространённой болезнью и причиняет огромный экономический ущерб хозяйствам.

Заражённость кроликов эймериозом может варьировать от 30 до 100% (Н.М. Лапшин, 1968; И.Ц. Дондуков, 1970; Н.А. Колабский, П.И. Пашкин, 1974; С.В. Леонтюк, 1974; С.А. Плешаков, 1999 и др.), падеж от числа заболевших достигает 85%. Однаког ущерб от данного заболевания не ограничивается падежом, больные животные отстают в росте и теряют от 12 до 30% своей живой массы. Кроме того, большое количество печени кроликов выбраковывается при ветеринарно-санитарной экспертизе, снижается питательная ценность мяса переболевших животных и большие расходы несут хозяйства на проведение лечебно-профилактических мероприятий.

Эпизоотологию эймериоза кроликов в зверохозяйствах Республики Татарстан и других регионов изучали многие исследователи (С.К. Мосина, Н.И. Григорьева, 1981; Д.В. Васильева, ГМ. Гадеева, 1992; В.А. Стрельчик, Е.А. Ушакова, 1998; Ж.Ф. Дзаумаммелуна, 2001 и др.). Однако, многие вопросы, связанные с региональными особенностями распространения, а также диагностикой этого заболевания требуют дальнейшего изучения.

Известно, что химиотерапия в настоящее время является самой эффективной и экономически результативной мерой борьбы с эймериозом кроликов. Разработкой методов химиотерапии и химиопрофилактики при эймериозе занимались многие исследователи (В. П. Рютова, 1985; К.И. Абуладзе, Н.В. Демидов, 1990; А.И. Ятусевич, Т.В. Медведская, 1998; А.М. Ермаков, 2000; М.Ш. Акбаев и др., 2000; К.Б. Эсубалеу, 2001; Huang Luyi, Chen Hua, 1990; S.K. Katiyar, 1994 и другие).

В настоящее время известно много химических веществ, действующих губительно на эймерий. Однако большинство из них обладают недостаточной эффективностью, высокой себестоимостью, большой токсичностью, способностью накапливаться в тканях или оказывают иммунодепрессивное действие. Поэтому проблема изыскания новых препаратов и схем их применения остаётся актуальной.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить эпизоотологическую ситуацию по эймериозу в зверохозяйствах Республики

Татарстан,, а также усовершенствовать диагностику и лечение этого заболевания.

Для выполнения поставленной, цели необходимо было решить следующие задачи:

Изучить распространение, возрастную и сезонную динамику, а также видовой состав эймерий в зверохозяйствах Республики Татарстан;

Усовершенствовать копрологическую диагностику эймериоза

кроликов;

Провести сравнительную терапевтическую оценку эффективности , некоторых препаратов при эймериозе кроликов;

- Изучить влияние йодхлорина, фуразолидоиа и вермитана 20%-ного гранулята на иммунологическую реактивность организма экспериментально зараженных эймериозом и здоровых кроликов.

Научная новизна. В специализированных звероводческих хозяйствах РТ изучено эпизоотическое проявление эймериоза кроликов, территориальные, временные и популяционные границы его эпизоотического процесса.

Усовершенствован копрологический метод исследований в 2,4-2,7 раза повышающий разрешающую способность существующих методов диагностики эймериоза кроликов.

Впервые установлена высокая лечебно-реабилитационная эффективность йодхлорина при эймериозе кроликов, разработана региональная научно обоснованная система противоэймериозных мероприятий.

Практическая цегоюсть. Доказано что экологическая, паразитарная система эймериозной инвазии в популяции кроликов — система управляемая. Разработан и рекомендован более эффективный метод диагностики эймериоза.

Для лечения кокцидиоза кроликов предложен препарат йодхлорин, обеспечивающий полное освобождение организма кроликов от ооцист эймерий, нормализующий кроветворную функцию организма и положительно влияющий на-клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Полученные новые данные имеют ценное научно-практическое значение для более детального выяснения пекоторых вопросов патогенеза при экспериментальном эймериозе кроликов, а также в процессе лечения их различными кокцидиостатиками.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Эймериоз широко распространен в популяции кроликов на территории, РТ с выраженной возрастной и сезонной неравномерностью эпизоотического проявления и преобладанием Е. $Ие<1ае в этиологической структуре инвазии;

2. Усовершенствованный метод копрологической диагностики эймериоза кроликов является востребованным и наиболее эффективным;

3. Йодхлорин. - высокоэффективный, препарат, обладающий кокцидиостатическим действием при эймериозе кроликов;

4. Применение йодхлорина при- экспериментальном эймериозе кроликов активизирует эритропоэз, восстанавливает показатели гомеостаза и неспецифической резистентности организма.

Внедрение результатов исследований. В 2000-2004 годах результаты исследований под авторским надзором с положительным эффектом внедрены в зверохозяйствах Республики Татарстан, Основные положения диссертационной работы вошли в «Методические рекомендации по диагностике и профилактике эймериоза кроликов», одобренные методической комиссией и Ученым Советом ФГОУ ВПО КГЛВМ.

Пути реализации. Результаты исследований, а также положения, сформулированные в диссертации используются при разработке противоэймериозных мероприятий в других регионах и в учебном процессе на кафедре паразитологии Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана».

Апробация работы. Основные результаты исследований доложены и обсуждены на республиканской научно-производственной конференции по актуальным проблемам, животноводства и ветеринарии (Казань, 1999); Международной научной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженерного факультета (Казань, 2000); Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); Международной научной конференции, посвященной 130-летию академии (Казань, 2003); на расширенном заседании профессорско-преподавательского состава кафедр паразитологии и инвазионных болезней, эпизоотологии, патологической анатомии, анатомии, гистологии, акушерства и патофизиологии (Казань, 2004).

Публикация. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ и получено удостоверение на рационализаторское предложение (№ 426-02 от 13 марта 2002 г.).

Объём и структура диссертации. Диссертация» изложена на 177 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 15 таблицами и 24 рисунками. Включает введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, заключение, выводы, практические предложения и приложения. Список использованной литературы включает 211 источников (в том числе 54 иностранных авторов).

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 1. Материалы и методы

Работа выполнена на кафедре паразитологии ФГОУ ВПО КГАВМ и в зверохозяйствах Республики Татарстан в 2000 - 2004 гг.

Изучение распространения эймериозов кроликов в РТ проводили с учётом эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов копрологических исследований. Количество ооцист эймерий подсчитывали в 5 полях зрения микроскопа.

Клинический осмотр и паразитологическое вскрытие животных проводили по общепринятым методам.

Для изучения видового состава возбудителей эймериоза кроликов в условиях Республики Татарстан от заведомо пораженных кроликов зверохозяйств «Бирюлинский», «Кощаковский» и «Берсутский» из прямой кишки животных брали свежий кал, который помещали в пробирку и увлажняли 2%-ным раствором двухромовокислого калия. Пробирки этикстировали и доставляли на кафедру паразитологии КГЛВМ. Материал перекладывали в бактериологические чашки и ставили для созревания ооцист в термостат с температурой 27-28°С на 12 дней. В течение этого времени материал ежедневно исследовали на обнаружение ооцист по разработанному нами методу и методу Фюллеборна. Всплывшие на поверхность флотационной жидкости ооцисты помещали на предметное стекло, поверх которого клали покровное и производили изучение видового состава ооцист (Об. х 40, ок. х 10). Для изучения видовой принадлежности эймерий пользовались определительной таблицей Е.М. Хейсина (1967). При рассмотрении каждого вида эймерий обращали внимание на форму и цвет оболочек, наличие в ооцисте и споре остаточных тел, вели наблюдение над процессом спорогонии. Размеры ооцист, спор, спорозоитов, толщину оболочек ооцист и величину шапочки определяли путем промеров по 150 ооцист каждого вида.

В целях усовершенствования предложенных методов копрологической диагностики кокцидиоза кроликов испытывали такие флотационные и комбинированные методы как Щербовича с нитратом натрия, с сульфатом магния и с тиосульфатом натрия, Веретты, Дарлинга, Котельникова-Хренова с нитратом аммония и с нитратом свинца, Котелышкова-Вареничева, Маллори, Вольфа, Демидова, Вишняускаса, Сафиуллина, Бреза и метод Фюллеборна. Собранные из кала больных кроликов ооцисты кокцидий в количестве 100 экземпляров закладывали в пробы фекалий здоровых кроликов и подсчитывали их сначала в одной капле, а затем в 1 мл флотационной жидкости.

При эпизоотологическом обследовании, а также для оценки эффективности кокцидиостатиков пользовались показателями - экстенсинва-

зированности (ЭИ), интенсинвазированности (ИИ), экстснсэффектишюсти (ЭЭ) и интенсэффективности (ИЭ).

Лечебную эффективность 13 антиэймериозных препаратов изучали в зверосовхозе «Бирюлинский» на 112 кроликах двухмесячного возраста, пород Белый великан и Шиншилла, спонтанно инвазированных кокцидиозом. Перед началом производственных опытов, животных подбирали по принципу аналогов (т.е. имеющих сходные клинические признаки, одинаковую живую массу и степень инвазии) и разделили их на 14 групп. Кроликам первой группы назначали норсульфазол (0,4 г/кг массы тела), второй — фуразолидон (20 мг/кг), третьей — метропидазол (40 мг/кг), четвёртой - вермитан 20%-ный гранулят (40 мг/кг), пятой и шестой группам - ветакокс и ампролиум соответственно (40 мг/кг), седьмой - йодхлорин (0,4 мг/кг), восьмой - кокцидиовит (40 мг/кг), девятой - клинакокс (30 мг/кг), десятой - кокцидин (40 мг/кг), одиннадцатой группе - фармкокцид-10 (35 мг/кг), двенадцатой - сульфадимезин в такой же дозе, тринадцатой - норсульфазол с фталазолом соответственно (0,4/0,1 г/кг массы тела).

Указанные препараты задавали с кормом групповым методом. Препараты, за исключением метронидазола и вермитана применяли двумя пятидневными курсами с интервалом в 3 дня. Обработку кроликов третьей группы проводили двумя шестидневными курсами с интервалом 3 дня. Животным четвертой группы задавали вермитан в дозе 40 мг/кг в течение пяти дней с кормом. Кроликам седьмой группы перорально при помощи шприца, соединенного с резиновым шлангом в течение 5 дней вводили йодхлорин в дозе 6 мл/гол, который перед применением разводили в 20 мл питьевой воды. Животные 14 группы служили контролем и обработку их против эймериоза не проводили. При проведении опытов учитывали клиническое состояние животных, количество ооцист кокцидий в поле зрения микроскопа до и через 7, 14 и 30 дней после лечения.

На экспериментально зараженных эймериозом кроликах изучали терапевтическую эффективность, а также гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели после введения йодхлорина, фуразолидона и вермитана 20%-ного гранулята.

Заражение животных проводили смешанной культурой спорулированных ооцист Eimeria stiedae, E. coecicola, E. intestinalis, E. irresidua, Е. piriformis, E. magna, E. perforans, E. media. Для этого исспорулированные ооцисты эймерий выделяли из фекалий по методу Фюллеборна и культивировали в чашках Петри в 2,5%-ном растворе бихромата калия в термостате при температуре 26*27°С. Суспензию ооцист отмывали 2 раза водопроводной водой центрифугированием и подсчитывали с помощью камеры

Горяева количество ооцист в 1 мл. Каждому животному с помощью резинового зонда и шприца перорально вводили по 50 тыс. ооцист эймерий.

Содержание гемоглобина определяли по Сали, количество эритроцитов и лейкоцитов - в камере Горяева (по общепринятой методике). Для определения лейкоцитарной формулы использовали мазки крови, окрашенные по Романовскому -Гимзе.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) исследовали по способу Панченкова (А. А. Кудрявцев, Л. А. Кудрявцева, 1974).

Количество общего белка определяли рефрактометром ИРФ-22, белковые фракции — рефрактометрическим методом, содержание сывороточного лизоцима - нефелометрическим методом по В.Г. Дорофейчуку (1968), количество сывороточного комплемента - согласно методике Л.С. Резниковой (1967) путём титрования комплемента по 50%-ному гемолизу.

Процент аттракции лейкоцитов, фагоцитарную активность лейкоцитов, фагоцитарный индекс и индекс переваривания определяли по методике Кост и Стснко (А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева, 1974).

Бактерицидную активность сыворотки крови исследовали методом фотонефелометрии по Мюшслю и Треффексу в модификации О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966).

Т-лимфоциты определяли методом спонтанного розеткообразоваиия с эритроцитами барана по Wybran et al. (1972). В-лимфоциты выявляли реакцией комплементарного розеткообразования с эритроцитами барана, образующими иммунные комплексы с противоэритроцитарными антителами и комплементом но Е.Ф. Чернушенко, Л.С. Когосовой (1981).

Лейкоцитарную взвесь для определения Т- и В-лимфоцитов получали согласно методике М.Х Лутфуллина и Н.А. Лутфуллиной (1996).

Статистическую обработку цифровых данных проводили с заданной надежностью (достоверностью) Р < 95% или уровне значимости г = 0,05 на ЭВМ «Электроника МК-56» по разработанным программам (Р.Х. Тукшаитов, ИХ. Нигматуллин, 1988).

2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1. Распространение, возрастная, сезонная дипамика и видовой состав эймерий в зверохозяйствах Республики Татарстан

Обследование 512 кроликов в трех зверохозяйствах Республики Татарстан показало, что эймериями иивазированы все возрастные группы животных. Наблюдения показали, что у кроликов кокцидиоз протекает в виде смешанной инвазии. У инвазированных кокцидиозом животных клинические признаки характеризовались общим угнетением, понижением аппетита или его

отсутствием, бледностью или желтушностью слизистых оболочек, жидкими испражнениями со слизью и нередко с кровью, наблюдались параличи конечностей и шейных мышц, а также судороги.

При наружном осмотре трупов павших животных отмечали выраженное истощение организма, бледность и желтушность слизистых оболочек, а при вскрытии в желудочно-кишечном тракте обнаруживали набухание и покраснение, а также отслоение слизистых оболочек, покрытие их творожистыми наслоениями с примесями крови и присутствием сероватых точечных и очаговых пятен. Печень была увеличена, на поверхности и в паренхиме органа имелись округлые белого цвета очажки, заполненные сметанообразным содержимым.

Величина экстенсивности и интенсивности инвазии зависела от возраста кроликов. Так, кролики от 1 до 3-х месячного возраста были заражены эймериями в пределах 92,4-100% (в среднем 97,4%), а интенсинвазированность (ИИ) колебалась от 49 до 218 ооцист (в среднем 120,6 ооцист) в 5 полях зрения микроскопа. Кролики в возрасте от 3-х до 6-и месяцев были инвазированы эймериями намного меньше и экстенсинвазированность колебалась от 50 до 99,1% (в среднем 91,6%), при средней ИИ от единичных до 63 ооцист. Экстенсинвазировашюсть кроликов старше 6 мес. была в пределах от 52,4 до 97,2% (в среднем 77,3%), при средней ИИ от единичных до 46 ооцист.

Установлена также зависимость интенсивности инвазии от сезона года. Например, ИИ взрослых кроликов в летне-осенний период составила 32±1,4, осенне-зимний - 5±0,4, в зимний период отмечались лишь единичные ооцисты эймерий во всей капле пробы, а в весенний период ИИ составила 12± 1,1 ооцист в 5 полях зрения микроскопа.

Не выявлено достоверной разницы в интенсивности и экстенсивности инвазии у кроликов пород Белый великан, Шиншилла, Черно-бурой и Серебристой.

В исследованных нами зверохозяйствах у кроликов были обнаружены 8 видов возбудителей эймериозов: Eimeria stiedae (20,3%), Е. perforans (18,4%), Е. magna (12,8%), Е. piriformis (12,4%), Е. intestinalis (12,0%), Е. irresidua (11,7%), Е. media (6,8%), Е. coecicola (5,6%). Морфологические признаки обнаруженных видов эймерий согласуются с литературными данными.

2.2. Коирологическая диагностика эймериоза кроликов

Исследовали пробы фекалий от кроликов с заведомо известным количеством ооцист эймерий (100 экз.)

Результаты проведенных исследований показали, что комбинированными методами Котелышкова-Хренова с нитратом свинца и

Вишняускаса с сернокислым цинком ни в одном случае ооцист кокцидий не обнаружили.

Методом Фюллеборна и Дарлинга было выявлено соответственно 40,0±0,4 и 35,6± 1,1% ооцист кокцидий. С помощью метода Щербовича с сернокислым магнием было обнаружено 20,5±1,4%, с аммиачной селитрой 22,8±1,2% и тиосульфатом натрия - 28,8±2,2%. Диагностическая эффективность таких методов как Котельникова-Хренова с аммиачной селитрой, Вольфа и Демидова также была не высокая и составила 28,3±0,9%, 28,4±1,3% и 22,0±0,5% соответственно.

С помощью методов Котельникова-Вареничева, Верреты, Маллори и Бреза было выявлено 48,2±1,2, 64,4±3,1, 59,6±0,5 и 70,0±3,3% ооцист кокцидий соответственно.

Высокую диагностическую эффективность проявил флотационный метод Сафиуллина с комбинацией солей цинка хлорида и натрия хлорида. Этим методом было обнаружено 81,1 ±3,8% ооцист кокцидий.

Следующим этапом наших исследований являлось усовершенствование метода Сафиуллина, целью которого являлось повышение чувствительности метода.

При методе Сафиуллина соотношение раствора цинка хлорида и натрия составляет 1:2. Мы изменяли соотношения этих растворов как в сторону увеличения, так и в сторону уменьшения компонентов флотационной жидкости. Исследования показали, что при всех использованных комбинациях количество выявляемых ооцист кокцидий колебалось от 33,3± 1,5 до 62,6±4,1%. Методом Сафиуллина в этом опыте было обнаружено 79,1±0,8% ооцист.

Следовательно, путем изменения соотношения цинка хлорида и натрия хлорида нам не удалось повысить чувствительность метода Сафиуллина. Поэтому мы использовали флотационную жидкость, состоящую из грех компонентов (насыщенных растворов цинка хлорида, натрия хлорида и сахара). Диагностическая эффективность комбинированного метода с использованием трехкомпонентного ингредиента зависела также от соотношения входящих компонентов. Так, например, с помощью раствора, приготовленного из насыщенных растворов цинка хлорида, натрия хлорида и сахара в соотношении 1:1:1 было выявлено 34,1 ±2,8% заложенных ооцист, в то время как при соотношении этих же компонентов 1:2,5:0,5 обнаружили 95,1±5,8% ооцист.

Таким образом, разработанный нами копроскопический метод, основанный на использовании трехкомпонентного ингредиента, состоящего из насыщенного раствора цинка хлорида, натрия хлорида и сахара оказался более чувствительным, с помощью которого было обнаружено ооцист на 16% больше, чем методом Сафиуллина и соответственно на 75,1% и 69,5% больше, чем методами Фюллеборна и Дарлинга.

2.3. Сравнительная оценка терапевтической эффективности некоторых препаратов при эймериозе кроликов

Изучали сравнительную эффективность 13 препаратов (норсульфазол, фуразолидон, метронидазол, вермитан 20%-ный гранулят, встакокс, ампролиум, йодхлорин, кокцидиовит, клинакокс, кокцидин, фармкокцид-10, сульфадимезин, норсульфазол с фталазолом) при лечении спонтанно ипвазированных крольчат двухмесячного возраста в период когда отмечалось максимальное выделение ооцист эймерий.

В результате проведенных исследований было установлено, что через 7 дней после последнего применения использованных препаратов ИИ снижалась во всех опытных группах, а ИЭ колебалась от 44,6 до 97,5%. Наиболее высокой противоэймериозной эффективностью в этот период обладал йодхлорин (97,5%), далее ветакокс, кокцидиовит и норсульфазол с фталазолом, ИЭ которых составила 89,1 88,1 и 87,1% соответственно.

Через 14 дней после лечения в некоторых группах отмечали повышение ИИ, а в некоторых, наоборот, снижение.

Например, после применения клинакокса - 82,1% (против 70,2%), норсульфазола ИЭ составила 74,4% (против 65,6% через 7 дней), кокцидина — 68,3% (против 47,7%), сульфадимезина - 66,7% (против 61,5%). ИЭ фуразолидона, метронидазола, вермитана 20%-ого, ветакокса, ампролиума, клинакокса, фармкокцида, норсульфазола с фталазолом снизилась. Наиболее низкие показатели ИЭ были у метронидазола (19,7%), ампролиума (25%) и фармкокцида-10 (21,1%).

Через 30 дней после лечения норсульфазолом, фуразолидоном, ветакоксом, ампролиумом, кокцидиовитом и кокцидином произошло увеличение количества ооцист по сравнению с 14 днем. В группах, где использовали метронидазол, вермитан и норсульфазол с фталазолом отмечали дальнейшее снижение количества ооцист и ИЭ в этих группах составила соответственно 43,9, 25,0 и 66,7%. ИЭ йодхлорина составила 100%, при чем все 8 кроликов как на 14-ый, так и на 30 дни полностью освободились от ооцист и ЭЭ также составила 100%.

В контрольной группе, где лечение животных не проводили, ИИ через 7 дней составила 226±3,9, через 14 дней - 230±3,9 и через 30 дней - 252±4,0 ооцист, против 201 ±2,7 (фоновые исследования).

Следовательно, йодхлорин в дозе 6 мл/гол при пероральном применении в течение 5 дней, обладает выраженным кокцидиостатическим действием.

2.4. Изучение гематологических, биохимических, иммунобиологических показателей у кроликов зараженных кокцидиозом и леченных йодхлорином, фуразолидоном и вермитаном 20%-ным гранулятом

В опыте использовали 25 кроликов 1-3 месячного возраста с массой тела

I,7-3,0 кг, которых разделили на 5 групп (по 5 животных в каждой). Кроликов I,

II, Ш и IV групп иивазировали взвесью 50 тыс. проспорулированных ооцист эймерий, состоящей из 8 видов эймерий. Зараженным животным I группы, начиная с первого дня патентного периода (начало выделения ооцист эймерий) перорально, ежедневно в течение 5 дней в дозе 6 мл на голову задавали йодхлорин. Кроликам II группы давали фуразолидон из расчета 20 мг/кг живой массы 1 раз в день двумя пятидневными курсами с интервалом между ними 3 дня. Животных Ш группы лечили вермитаном из расчета 40 мг/кг массы животного одним пятидневным курсом. Зараженные кролики IV группы не подвергались лечению, животные V группы служили контролем (интактные). Пробы фекалий и кровь брали до заражения, до лечения (спустя 7 дней после заражения) и через 3,6,10,15 и 30 дней после введения препаратов.

Результаты копрологических исследований показали, что ИИ у экспериментально зараженных животных до лечения находилась в пределах 2201± 124,8 - 2253+50,1 ооцист в 5 полях зрения микроскопа. В этот же период у кроликов всех четырех групп были выявлены и клинические признаки острого эймериоза, характерными для которых являлось частое мочеиспускание и понос. В группе, где применяли йодхлорин, на 15 день после введения препарата ИЭ и ЭЭ составила 100%. После применения фуразолидона и вермитана ИЭ в этот период составила 47,5 и 37,5% соответственно. Улучшение общего состояния у кроликов отмечалось на 10 день в группах, леченных йодхлорином и фуразолидоном, на 12 сутки в группе, где применяли вермиган и на 20 сутки в группе зараженного контроля.

Первичное инвазирование кроликов эймериями вызвало уменьшение количества эритроцитов. После введения животным йодхлорина, фуразолидона, вермитана, а также в группе зараженного контроля наиболее выраженные изменения отмечали на 3 день терапии, что составляло 4,74+0,26, 4,82+0,2, 4,76+0,29, 43 + 0.17, против 6,8±0,17х10 /л в контроле. В последующем, в группе, леченной йодхлорином количество эритроцитов и гемоглобина повысилось на 28 и 27,8% соответственно, что связано с позитивным влиянием препарата на эритропоэз, а также на уничтожение негативных факторов, влияющих на кроветворную функцию организма (токсины ооцист эймерий), тогда как в группе, где задавали вермитан они до конца опыта оставались ниже уровня таковых у здоровых кроликов (слабая степень анемии). В группе, получавшей фуразолидон, эти показатели восстановились до физиологической нормы на 30 день опыта.

Ответная реакция организма на патогенное действие эймерий сопровождалась увеличением числа лейкоцитов у всех зараженных животных в пределах 1,5-2 раза на 3 день введения препаратов и нормализацией их на 15 день лечения йодхлорином и на 30 сутки лечения фуразолидоном и вермитапом. В группе зараженного контроля отмечалась лейкопения, связанная с функциональным истощением защитных сил организма.

На 3-ий день лечения было отмечено повышение уровня СОЭ, которое группах, леченных йодхлорином, фуразолидоном, вермитаном и зараженного контроля составило 6,38±0,96; 7,41±0,83; 6,82±0,95 и 10,1±О,72 мм/час, против 2,4±0,09 мм/час в контроле. Уровень СОЭ в группе, леченной йодхлорином, нормализовался на 15 сутки, в группах, леченных фуразолидоном и вермитаном - на 30 сутки. В группе зараженного контроля этот показатель к концу опыта был выше уровня таковых здоровых животных в 2,5 раза, что говорит о сохраняющемся воспалительном процессе в кишечнике, сопровождающимся выпотом экссудата в просвет и затруднением всасывания жидкости в организм кролика, что приводит к вязкости крови.

О подавлении иммунобиологической реакции организма кроликов в ответ на патогенное действие простейших в шизогональный период развития свидетельствовало снижение в 1,2-1,5 раза числа-лимфоцитов в группах зараженных животных, которые в последующем повысились до физиологической нормы у животных, которым применяли йодхлорин.

В этот период во всех четырех группах зараженных животных также произошел выброс в кровеносное русло эозинофилов, которые превышали показатели таковых здоровых животных соответственно на 4,7; 7,3; 5,9 и 6,8%. Следует отметить, что эозинофилия имела кратковременный характер и уже на 6 день лечения уровень эозинофилов нормализовался. Данное явление вполне объяснимо, т.к. эозинофилия является показателем и аллергии и защитной реакции организма, в силу того, что у всех клеток — эффекторов эозинофилы обладают наиболее мощной цитотоксичностью по отношению к кокцидиям.

Отмеченная динамика форменных элементов крови в начальный период инвазии носит защитный характер и объясняется стимулирующим воздействием антигенов паразитов и развитием воспалительного процесса, тогда как характер выявленных сдвигов показателей крови в последующем отражает частичную иммунодепрессию и угнетение естественной резистентности организма.

снижение. Однако на 15 сутки после введения йодхлорина содержание Т-клеток нормализовалось. У животных, получавших вермитан, а также зараженного контроля уровень этих клеток был ниже, чем у здоровых в течение всего опыта и находился в пределах 22,1±0,12 - 39,1±0,21% и 30,1±0,64 - 38,1±0,26%, которые к концу опыта так и не нормализовались.

Результаты идентификации В-лимфоцитов показали, что у кроликов группы зараженного контроля в течение 3-30 суток происходило снижение этого показателя по сравнению с исходными данными и к кошгу опыта уровень их был ниже фоновых показателей на 5,1%. Введение йодхлорина, наоборот, способствовало повышению ЕАС-лимфоцитов, которые нормализовались на 15 сутки, тогда как в других группах В-лимфоциты в течение всего периода были ниже уровня таковых здоровых кроликов.

контроля на 30-ый день опыта превышали фракции таковых в

группах, получавших йодхлорин, фуразолидон и вермитан соответственно на 24 и 9%, 32 и 14%, 25 и 13%. Очевидно, положительная динамика у-глобулинов доказывает развитие выраженных иммунобиологических реакций организма в ответ на антигенное воздействие эймерий.

Ведущая роль, при инвазионных заболеваниях принадлежит полиморфно-нуклеарным нейтрофилам, обладающим фагоцитарными и цитотоксическими свойствами. ФАН у контрольных животных на протяжении всего периода опыта находилась в пределах 64,6-68,3%. Однако, у зараженных животных отмечалось снижение этого показателя на 3-ий день после введения препаратов в пределах 1,6-2 раза от исходного, после чего в группе, получавшей йодхлорин ФАН нормализовался на 15 сутки, тогда как в группах, леченных фуразолидоном и вермитаном он так и не восстановился до физиологической нормы. В группе зараженного контроля ФАН к концу опыта составил 38,9+0,12%, против 68,3±1,9% в контроле.

В первые дни инвазии в результате активной циркуляции токсинов эймерий снижалась бактерицидная активность сыворотки крови. При этом снижение этого показателя заметно было в группе леченной вермитаном, где

БЛСК снизилась и составила 47,3±1,3, против 54,1±1,0 г% (исходные данные). К концу опыта этот показатель нормализовался.

Патогенное действие эймерий также отразилось и на активности лизоцима и уровня комплемента сыворотки крови во всех опытных группах, кроме контроля на 3 дет, лечения, где эти показатели снизились. Уровень лизоцима в этот период был в пределах 10,2+0,29 - 12,1+0,53, против 16,4+0,4 мкг/мл в контроле, а комплемента 10,5±0Г39 — 11,6±0,56 С'Н30/ш1, против 16,4±0,4 С'Н50/мл. На 6-е сутки после введения препаратов эти показатели активизировались и к концу опыта (30-ый день) нормализовались в I группе, тогда как во II и III не достигли исходного уровня.

Таким образом, можно констатировать, что у экспериментально инвазированных кокцидиозом кроликов наблюдается нестабильность в гуморальных и клеточных специфических и неспецифических факторах иммунологической защиты. Это происходит, по всей вероятности, в результате как иммунодепрессивного действия паразитарных антигенов, обычно в начальный период инвазии, так и иммуностимулирующего их воздействия в последующем. Однако, в группах, где применяли фуразолидон и вермитан, а также в группе зараженного контроля показатели неспецифической резистентности так и не пришли к таковым у здоровых, что свидетельствует о возможном развитии вторичного иммунодефицитного состояния, а также о негативном влиянии самих препаратов на иммунную систему организма кроликов. Следует отмстить, что в группе, где применяли йодхлорин, большинство изученных показателей нормализовалось на 15 сутки после введения препарата.

2.5. Изучение влияния йодхлорииа, фуразолидона и верминтана 20%-ного гранулята на гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели здоровых кроликов

С целью изучения влияния указанных препаратов на гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели организма здоровых животных нами был проведен опыт на 20 кроликах, 15 из которых получали йодхлорин, фуразолидон и вермитан (по 5 кроликов на препарат). Кровь для исследования брали до и через 3, 6,10,15 и 30 дней после введения препаратов. Установлено, что после применения йодхлорина и фуразолидона у здоровых кроликов отмечалось повышение эритроцитов и гемоглобина в течение всего опыта, в пределах 1,1-1,4 раза в сравнении с исходными данными. Это говорит о том, что препараты оказывают положительное влияние на эритропоэз. Наоборот, применение вермитана подавляло кроветворную функцию организма

кроликов, о чем свидетельствовало снижение эритроцитов и гемоглобина в этих группах в 1,4-1,5 раза, что статистически достоверно.

- Отмечающийся на 15 день после введения йодхлорина слабый лейкоцитоз (7,2+0,3, против 6,48+0,52х109/л в сравнении с фоном), говорит об активации клеточного фактора защиты. В группах, где использовали фуразолидон и вермитан, этот показатель прогрессивно снижался и составлял в этот же срок 5,6+0,28 и 5,5+0,12х109/л, против 6,28+0,39 и 6,14+0,24х109/л (фоновые данные),, а на 30 сутки эти показатели повысились на 6 и 5% соответственно.

На 10 день после введения йодхлорина отмечался лимфоцитоз, а при введении фуразолидона и вермитана установили достоверное угнетение лимфоцитопоэза, который восстановился до физиологической нормы к концу опыта в группе, где применяли фуразолидон.

Иммуннодепрессивная реакция на введение фуразолидона и вермитана подтверждалась также снижением Т- и В-лимфоцитов, которое наиболее характерно было выражено на 10 день введения препаратов. Йодхлорин у здоровых кроликов наряду с лимфоцитозом повышал уровень Т-лимфоцитов, достигающий наивысшего пика на 10 сутки (45,2+0,1, против 38,7+0,3% в исходных данных) и В- лимфоцитов на 15 день (31,О+О,8, против 25,411,24% в фоновом показателе). К кошту опыта в группах, получавших йодхлорин и фуразолидон, содержание этих клеток находилось на уровне таковых у контрольных кроликов. Несмотря на незначительное повышение количество Т-клеток у кроликов, получавших вермитан на 30 день опыта было ниже контрольной группы на 15,8%, а В-клеток - на 14,6%.

После применения йодхлорина и фуразолидона на 10 день была отмечена слабая гиперпротеинемия, за счет снижения уровней альбумина и а-глобулинов и повышения фракций и восстановление всех

фракций до физиологической нормы к концу опыта в обоих группах. Применение вермитана вызвало, наоборот, гипопротеинемию, связанную с понижением фракций к 10 дню опыта, сохраняющуюся так

до конца опыта. Кроме того, было установлено, что показатели БАСК и ФЛП у животных этой группы незначительно превышали таковые в контрольной группе и составляли 60,3+2,01 и 69,3+0,9 г%, против 64,6+1,4 и 64,6+1,4 г% в контроле. Однако в группе, где применяли фуразолидон показатели БАСК и ФАН уступали таковым контрольной группы па 15 день введения препарата и составляли 51,4+1,4 и 62,1 +1,62 г% соответственно, против 57,9+2,3 и 63,8+234 г% в исходных данных. После использования вермитана показатели БЛСК и ФАН в этот срок также были ниже исходных данных и составляли 49,8+1,34 и 58,4+1,74%, против 56,1+2,1 и 66,1+2,51 г%. На 30 день опыта эти показатели в группе, где применяли фуразолидон нормализовались.

Введение йодхлорина способствовало незначительному подъему уровня лизоцима на 10 день введения препарата, который составил 17,9+0,91, против 15,9+0,61 мкг/мл (фоновый показатель). Уровень комплемента при этом в течение всего опыта оставался в пределах нормы и составлял 15,7+0,8417,1 +0,1 мкг/мл. После введения кроликам фуразолидона и вермитана уровни лизоцима и комплемента снизились в пределах 7-10%, при чем они были более выраженными в группе, в которой применяли вермитан, где уровни лизоцима и комплемента составляли в этот день 14,2+0,31 мкг/мл и 14,8+0,52 СН50/мл, против 15,9+0,73 мкг/мл и 16,1 +0,92 СН50/мл соответственно по сравнению с фоном. Уровни этих показателей в последующем нормализовались в группе, где применяли фуразолидон и не восстановились до физиологической нормы при применении вермитана.

В конце опыта (через 30 дней) животных с каждой группы убивали и подвергали неполному гельминтологическому вскрытию. Исследования показали, что применение йодхлорина, фуразолидона и вермитана не вызывают на слизистой желудка и кишечника видимых патологоанатомических изменений.

Таким образом, введение кроликам йодхлорина позитивно сказывается на эритропоэзе, активизирует клеточные и , гуморальные, а также неспецифические факторы иммунитета, повышает иммунобиологическую реакцию организма. Фуразолидон активизирует, кроветворную функцию организма, увеличивает уровень общего белка сыворотки крови и незначительно снижает защитные факторы иммунитета, которые к концу опыта восстанавливаются до физиологической нормы. Однако применение вермитана негативно сказывается на кроветворной функции и угнетает защитную функцию организма.

ВЫВОДЫ

1. Эймериоз кроликов широкораспространен в зверохозяйствах РТ, с выраженной ЭИ от 36,7 до 100% (М=68,3+3,4%) и ИИ от 2,5 до 218,0 (М=110,3+5,5) ооцист в 5 полях зрения микроскопа. Протекает круглогодично, с выраженными сезонными эпизоотическими надбавками (август-сентябрь). В эпизоотическое проявление эймериоза вовлекаются все возрастные группы популяции, с преимущественным поражением крольчат до 3-х месячного возраста независимо от их породы.

2. В формировании этиологической структуры эймериоза кроликов в РТ в различной степени участвуют 8 видов эймерий: Eimeria stiedae (203%), Е. perforans (18,4%), Е. magna (12,8%), Е. piriformis (12,4%), Е. intestinalis (12,0%), Е. irresidua (11,7%), Е. media (6,8%), Е. coecicola (5,6%).

3. Манифестация экспериментального эймериоза у кроликов при презентации им по 50 тыс. ооцист на одну особь проявляется постепенным нарастанием до 10 дня показателей гомеостаза и снижением неспецифической резистентности их организма.

4. В контролируемых опытах по сравнительной оценке с использованием принципа «Placebo», метод Сафиуллина оказался наиболее эффективным с высокой разрешающей диагностической способностью, позволяющей выявлять в среднем 81,1 ±3,8 из 100 ооцист кокцидий в исследуемом материале.

5. Разрешающая способность предложенного нами флотационного метода копрологических исследований, основанного на использовании трех-компонентной смеси насыщенных растворов цинка хлорида, натрия хлорида и сахара в соотношении 1:2,5:0,5, превосходит в 2,4 раза метод Фюллеборна и в 2,7 - метод Дарлинга при диагностике эймериоза кроликов.

6. Из 13 химиопрепаратов, испытанных при спонтанном эймериозе кроликов кокцидиостатическим свойством обладает йодхлорин, при 5-ти дневном пероральном применении которого в дозе 6 мл на животное (0,039 г/кг живой массы по ДВ), достигается 100% интенс- и экстенсэффективность через 14 дней после начала применения, с восстановлением уровня гомеостаза и неспецифической резистентности.

7. Региональная научно-обоснованная система противоэймериозных мероприятий для звероводческих хозяйств РТ с применением усовершенствованного метода диагностики и йодхлорина с лечебно-рсабилитационной целью, оказалась высокоэффективной и востребованной. Внедрение системы в зверосовхозах «Кощаковский», «Бирюлинский» и «Берсутский» РТ позволила оздоровить их от эймериоза кроликов и поддерживать эпизоотическое благополучие.

РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ:

1. Усовершенствованный коирологический метод диагностики кокцидиоза кроликов (удостоверение на рационализаторское предложение №426-02 от 13.03.02.).

2. Методические рекомендации по диагностике и профилактике эймериоза кроликов, одобренные методической комиссией и Ученым Советом ФГОУ ВПО КГАВМ.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Ницак Ю.Н., Тимербаева P.P. Изыскание препаратов против кокцидиоза кроликов //Актуальные проблемы животноводства и ветеринарии. - Казань. -1999.-С. 34-35.

2. Лутфуллин М.Х., Шиляева Ю.Н. (Ницак Ю.Н.), Гоголев В.Б. Некоторые иммунологические показатели у кроликов при экспериментальном кокцидиозе //Инфекционные и инвазионные болезни животных. - Казань. -2000.-С. 86-87.

3. Лутфуллин М.Х., Шиляева Ю.Н., Корнишина М.Д., Угрюмова В.У. Т- и В-лимфоциты при кокцидиозе кроликов //Инфекционные и инвазионные болезни животных. - Казань. - 2000. - С. 87-88.

4. Корнишина М.Д., Матросова Л.Е., Шиляева Ю.Н. Сравнительная эффективность препаратов при эймериозе кроликов //Материалы Всероссийской научной производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. - Казань. - 2002. - Ч. 1. - С. 64-65.

5. Шиляева Ю.Н., Лутфуллин М.Х., Гайсина Л.А. Эффективность копрологических методов диагностики кокцидиоза кроликов //Материалы Всероссийской научной производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. - Казань. — 2002. - Ч. 1. - С. 141-142.

6. Шиляева Ю.Н. Диагностическая эффективность метода Щербовича с различными флотационными жидкостями при эймериозе кроликов //Материалы Всероссийской научной производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии. - Казань. — 2002. - Ч. 1. — С. 142-144.

7. Шиляева ЮЛЬ, Лутфуллин MX, Корнишина М.Д., Матросова Л.Е. Сравнительная оценка терапевтической эффективности некоторых препаратов при эймериозе кроликов //Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины. - 2003. - Т. 174. - С. 184-189.

8. Лутфуллин М.Х., Шиляева- Ю.Н., Корнишина М.Д. Эпизоотологическая ситуация по эймериозу кроликов в зверохозяйствах РТ //Материалы Международной научно-производственной конференции по актуальным проблемам агропромышленного комплекса. - Казань. - 2003. - 4.1. - С. 8688.

На правах рукописи

ШиляеваЮ.Н.

(ЭПИЗООТОЛОГИЯ, меры борьбы) 03.00.19 - паразитология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

компьютерная верстка Т. В. Овсюхно

Корректор О.Ф. Костина Лицензия ЛР № 0402284 от

Подписано в печать Формат 60/84 1/16. Печать офсетная. Бумага офсетная. Усл. печ. л. - 1,0. Тираж -100 экз. Заказ №///

Типография НГСХА, 603107, Н. Новгород, пр. Гагарина, 97.

»1107t

Содержание диссертации, кандидата ветеринарных наук, Шиляева, Юлия Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эпизоотология и диагностика эймериоза

1.1.1. Распространение кокцидиоза и видовой состав

1.1.2. Возрастная и сезонная динамика эймериоза

1.2. Диагностика кокцидиоза кроликов

1.2.1. Прижизненная диагностика

1.2.2. Посмертная диагностика

1.3. Патогенное влияние эймерий на организм животных

1.4. Лечебно-профилактические мероприятия при эймериозах

Глава II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы 3 6 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2. Распространение, возрастная, сезонная динамика и видовой состав эймерий в зверохозяйствах Ресублики Татарстан

2.2.1. Распространение, возрастная и сезонная динамика эймериоза кроликов

2.2.2. Видовой состав эймерий в РТ

2.3. Копрологическая диагностика эймериоза кроликов

2.4. Сравнительная оценка терапевтической эффективности некоторых препаратов при эймериозе кроликов

2.5. Изучение гематологических, биохимических и иммунобиологических показателей у кроликов, зараженных кокцидиозом и при лечении их йодхлорином, фуразолидоном и вермитаном 20%-ным гранулятом

2.6. Изучение влияния йодхлорина, фуразолидона и вермитана 20%-ного гранулята на гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели здоровых кроликов

Глава III. ЗАКЛЮЧЕНИЕ выводы

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение Диссертация по биологии, на тему "Эймериоз кроликов в Республике Татарстан"

Эймериоз животных является самой распространённой болезнью и причиняет огромный экономический ущерб хозяйствам. i

Заражённость кроликов эймериозом может варьировать от 30 до 100% (Н.М. Лапшин, 1968; И.Ц. Дондуков, 1970; Н.А. Колабский, П.И. Пашкин, 1974; С.В. Леонтюк, 1974; С.А. Плешаков, 1999 и др.), падёж от числа заболевших достигает 85%. Однако, ущерб от данного заболевания не ограничивается падежом, больные животные отстают в росте и теряют от 12 до 30% своей живой массы. Кроме того, большое количество печени кроликов выбраковывается при ветеринарно-санитарной экспертизе, снижается питательная ценность мяса переболевших животных и большие расходы несут хозяйства на проведение лечебно-профилактических мероприятий.

Эпизоотологию эймериоза кроликов в зверохозяйствах Республики Татарстан и других регионов изучали многие исследователи (С.К. Мосина, Н.И. Григорьева, 1981; Д.В. Васильева, Г.М. Гадеева, 1992; В.А. Стрельчик, Е.А. Ушакова, 1998; Ж.Ф. Дзаумаммелуна, 2001 и др.). Однако, многие вопросы, связанные с региональными особенностями распространения, а также диагностикой этого заболевания требуют дальнейшего изучения.

Ермаков, 2000; М.Ш. Акбаев и др., 2000; К.Б. Эсубалеу, 2001; Huang Luyi, Chen Hua, 1990; S.K. Katiyar, 1994 и другие).

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить эпизоотологическую ситуацию по эймериозу в зверохозяйствах Республики Татарстан, а также усовершенствовать диагностику и лечение этого заболевания.

Для выполнения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

Усовершенствовать копрологическую диагностику эймериоза кроликов;

Провести сравнительную терапевтическую оценку эффективности некоторых препаратов при эймериозе кроликов;

- Изучить влияние йодхлорина, фуразолидона и вермитана 20%-ного гранулята на иммунологическую реактивность организма экспериментально зараженных эймериозом и здоровых кроликов.

Практическая ценность. Доказано, что экологическая паразитарная система эймериозной инвазии в популяции кроликов - система управляемая. Разработан и рекомендован более эффективный метод диагностики эймериоза.

Для лечения кокцидиоза кроликов предложен препарат йодхлорин, обеспечивающий полное освобождение организма кроликов от ооцист эймерий, нормализующий кроветворную функцию организма и положительно влияющий на клеточные и гуморальные факторы иммунитета. Полученные новые данные имеют ценное научно-практическое значение для более детального выяснения некоторых вопросов патогенеза при экспериментальном эймериозе кроликов, а также в процессе лечения их различными кокцидиостатиками.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Эймериоз широко распространен в популяции кроликов на территории с выраженной возрастной и сезонной неравномерностью эпизоотического проявления и преобладанием Е. stiedae в этиологической структуре инвазии;

2. Усовершенствованный метод копро логической диагностики эймериоза кроликов является востребованным и наиболее эффективным;

3. Йодхлорин - высокоэффективный препарат, обладающий кокцидиостатическим действием при эймериозе кроликов;

4. Применение йодхлорина при экспериментальном эймериозе кроликов активизирует эритропоэз, восстанавливает показатели гомеостаза и неспецифической резистентности организма.

Внедрение результатов исследований. В 2000-2004 годах результаты исследований под авторским надзором с положительным эффектом внедрены в зверохозяйствах Республики Татарстан. Основные положения диссертационной работы вошли в «Методические рекомендации по диагностике и профилактике эймериоза кроликов», одобренные методической комиссией и Ученым Советом ФГОУВПОКГАВМ.

Апробация работы. Основные результаты исследований доложены и обсуждены на республиканской научно-производственной конференции по актуальным проблемам животноводства и ветеринарии (Казань, 1999); Международной научной конференции, посвященной 70-летию образования зооинженерного факультета (Казань, 2000); Всероссийской научно-производственной конференции по актуальным проблемам ветеринарии и зоотехнии (Казань, 2002); Международной научной конференции, посвященной 130-летию академии (Казань, 2003); на расширенном заседании профессорско-преподавательского состава кафедр паразитологии и инвазионных болезней, эпизоотологии, патологической анатомии, анатомии, гистологии, акушерства и патофизиологии (Казань, 2004).

Заключение Диссертация по теме "Паразитология", Шиляева, Юлия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Эймериоз кроликов широкораспространен в зверохозяйствах РТ, с выраженной ЭИ от 36,7 до 100% (М=68,3±3,4%) и ИИ от 2,5 до 218,0

М=110,3±5,5) ооцист в 5 полях зрения микроскопа. Протекает круглогодично, с выраженными сезонными эпизоотическими надбавками (август-сентябрь). В эпизоотическое проявление эймериоза вовлекаются все возрастные группы популяции, с преимущественным поражением крольчат до 3-х месячного возраста независимо от их породы.

2. В формировании этиологической структуры эймериоза кроликов в РТ в различной степени участвуют 8 видов эймерий: Eimeria stiedae (20,3%), Е. perforans (18,4%), Е. magna (12,8%), Е. piriformis (12,4%), Е. intestinalis (12,0%), Е. irresidua (11,7%), Е. media (6,8%), Е. coecicola (5,6%).

3. Манифистация экспериментального эймериоза у кроликов при презентации им по 50 тыс. ооцист на одну особь проявляется постепенным нарастанием до 10 дня показателей гомеостаза и снижением неспецифической резистентности их организма.

4. В контролируемых опытах по сравнительной оценке с использованием принципа «Placebo», метод Сафиуллина оказался наиболее эффективным с высокой разрешающей диагностической способностью, позволяющей выявлять в среднем 81,1±3,8 из 100 ооцист кокцидий в исследуемом материале.

6. Из 13 химиопрепаратов, испытанных при спонтанном эймериозе кроликов кокцидиостатическим свойством обладает йодхлорин, при 5-ти дневном пероральном применении которого в дозе 6 мл на животное (0,039 г/кг живой массы по ДВ), достигается 100% интенс- и экстенсэффективностью через 14 дней после начала применения, с восстановлением уровня гомеостаза и неспецифической резистентности.

7. Региональная научно-обоснованная система противоэймериозных мероприятий для звероводческих хозяйств РТ с применением усовершенствованного метода диагностики и йодхлорина с лечебно-реабилитационной целью, оказалась высокоэффективной и востребованной. Внедрение . системы в зверосовхозах «Кощаковский», «Бирюлинский» и «Берсутский» РТ позволила оздоровить их от эймериоза кроликов и поддерживать эпизоотическое благополучие.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Разработанный нами копрологический метод рекомендуется использовать в республиканских, межрайонных и районных лабораториях при диагностике эймериоза кроликов.

Для профилактически и лечения эймериоза кроликов предлагается новый препарат йодхлорин в дозе 6 мл на голову, перорально в течение 5 дней.

Материалы диссертации вошли в «Методические рекомендации по * диагностике и профилактике эймериоза кроликов», одобренные методической комиссией, а также Ученым Советом ФГОУ ВПО КГАВМ.

Глава III. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Имеющиеся литературные данные и результаты собственных исследований свидетельствуют о широком распространении эймериоза в кролиководческих хозяйствах Республики Татарстан.

Наблюдения, проведенные в хозяйствах показывают, что у кроликов кокцидиоз протекает в виде смешанной формы. У инвазированных кокцидиозом животных клинические признаки характеризовались общим угнетением, понижением аппетита или его отсутствием, бледностью или желтушностью слизистых оболочек, жидкими испражнениями со слизью и нередко с кровью, полиурией, наблюдались параличи конечностей и шейных мышц, а также судороги.

При наружном осмотре трупов павших животных отмечали выраженное истощение организма, бледность и желтушность слизистых оболочек, при вскрытии в желудочно-кишечном тракте обнаруживали набухание и покраснение, а также отслоение слизистых оболочек, покрытие их творожистыми наслоениями с примесями крови и присутствием сероватых точечных и очаговых пятен. Печень была увеличена, на поверхности и в паренхиме органа имелись округлые белого цвета очажки, заполненные сметанообразным содержимым.

Изучение эпизоотологической ситуации в зверохозяйствах РТ показало, что экстенсивность эймериозной инвазии колеблется от 36,7% (зимний период) до 100% (в другие сезоны года). В процессе обследования зверохозяйств и проведения экспериментальных работ мы выявляли нарушение технологии содержания кроликов (содержание в одной клетке кроликов разных возрастных групп), несвоевременное и некачественное проведение очистки и дезинвазии клеток, кормушек, поилок, недостаточно высокий уровень ведения кролиководства и несоблюдение ветеринарно-санитарных требований. Интенсивность эймериозной инвазии во многом зависела от возраста кроликов и времени года. Наиболее высокая зараженность отмечалась у крольчат с 1 до

3-х месячного возраста, независимо от времени года. Например, в зверосовхозе «Бирюлинский» среднее количество ооцист у крольчат 1-3 месячного возраста в летне-осенний период составило 218±3,4, в осенне-зимний период 56±2,01 и весенний период 109±2,31, в то время как у крольчат 3-6месячного возраста было обнаружено 63±2,02, 18±1,62 и 35±0,84 ооцист соответственно. Степень инвазии у взрослых кроликов при эймериозе была намного меньше, чем у крольчат. При этом ИИ в летне-осенний период составила 32±1,4, осенне-зимний - 5±0,4, в зимний период отмечались лишь единичные ооцисты * эймерии во всей капле пробы, а в весенний период ИИ составила 12±1,02 ооцист в 5 полях зрения микроскопа.

Изменение ИИ в зависимости от времени года объясняется тем, что при температуре ниже 0°С и в анаэробных условиях споруляция ооцист не происходит, при минусе 15°С часть их погибает, попеременное замораживание и оттаивание губительно действует на них.

Таким образом, интенсивность эймериозной инвазии зависит в одинаковой степени как от возраста животных, так и от времени года. Ш Полученные нами данные в отношении возрастной динамики согласуются с данными других исследователей (С.А. Плешаков, 1997; В.А. Стрельчик, Е.А. Ушакова, 1998).

При изучении эпизоотологии эймериоза кроликов мы проводили также определение видового состава этих простейших.

При рассмотрении каждого вида эймерий обращали внимание на форму и цвет микропиле, полярную шапочку, строение оболочек, наличие в ооцисте и споре остаточных тел, вели наблюдение над процессом спорогонии.

Исследования показали, что в обследованных зверохозяйствах были выявлены 8 видов возбудителей эймериоза из рода Eimeria: Е. intestinalis, Е. magna, Е. perforans, Е. coecicola, E.stiedae, Е. piriformis, Е. irresidua и Е. media, ф Наиболее широко распространенным видом оказался Eimeria stiedae

20,3%). Все эти виды подробно изучены многими исследователями (И.Ц.

Дондуков, 1969; С.К. Сванбаев, 1977; И.И. Вершинин, 2001) и наши данные в основном согласуются с данными других исследователей за исключением некоторых. Например, по данным Н.П. Орлова (1956) размер ооцист E.stiedae составляет 37,5x21,5 мкм, по Е.М. Хейсину (1967) - 30-40x16-25 мкм, по Н.Ф. Колабскому и П.И. Пашкину (1974) величина ооцисты составляет 30-48x16-25 мкм.

Наши данные, касающиеся величины ооцист E.stiedae, наиболее близки к данным Н.П. Орлова (1956). Имеющиеся в литературе сообщения о длительности споруляции E.stiedae немного противоречивы. По Н.П. Орлову(1956) она протекает за 60-70 часов. По Е.М. Хейсину (1967) в ооцисте споруляция протекает 3-4 дня, имеется остаточное тело, состоящее из нескольких светопреломляющих гранул, расположенных между спорами. По Н.Ф. Колабскому и П.И. Пашкину (1974) после спорогонии в ооцисте и спорах образуются остаточные тела. Спорогония длится максимально 3-4 дня. Наши данные согласуются с исследованиями Н.П. Орлова (1956), который указывает на короткие сроки споруляции ооцист.

Выше мы уже отмечали, что ИИ у взрослых кроликов независимо от сезона года бывает ниже, чем у взрослых, что было установлено во всех 3-х исследованных хозяйствах. Поэтому в таких случаях возникает необходимость использования более чувствительных копроовоскопических методов прижизненной диагностики эймериоза.

По литературным данным (А.Н. Пономаренко, 1980; Б.А. Тимофеев и др., 1982; В. А. Герасимчик, 2003) для копрологической диагностики кокцидиоза, в основном, используются 2 метода - Фюллеборна и Дарлинга, а данных по эффективности других методов отсутствуют. Поэтому, перед нами была поставлена задача - изучить диагностическую эффективность следующих 15 овоскопических методов: Фюллеборна, Дарлинга, Котельникова-Хренова с аммиачной селитрой и азотнокислым свинцом, Щербовича с азотнокислым натрием, сернокислым магнием и сернистым натрием, Веретты, Вольфа,

Маллори, Котельникова-Вареничева, Демидова, Вишняускаса, Бреза, Сафиуллина.

Исследовали пробы фекалий от кроликов с заведомо известным количеством ооцист кокцидий (100 экз.)

Результаты проведенных исследований показали, что комбинированными методами Котельникова-Хренова с нитратом свинца и Вишняускаса с сернокислым цинком ни в одном случае ооцист кокцидий не обнаружили.

Методом Фюллеборна и Дарлинга было выявлено соответственно 20,0±0,4 и 25,6±1,1% ооцист кокцидий. С помощью метода Щербовича с сернокислым магнием обнаружено 20,5±1,4%, с амиачной селитрой 22,8±1,2 и тиосульфатом натрия - 28,8±2,2%. Диагностическая эффективность таких методов как Котельникова-Хренова с амиачной селитрой, Вольфа и Демидова также была не высокая и составила 28,3±0,9, 28,4±1,3 и 22,0±0,5% соответственно.

Несколько выше была диагностическая эффективность методов Котельникова-Вареничева, Верреты, Маллори и Бреза с помощью которых было выявлено 48,2±1,2, 64,4±3,1, 59,6±0,5 и 70,0±3,3% ооцист кокцидий соответственно.

Высокую диагностическую эффективность проявил флотационный метод Сафиуллина с комбинацией солей хлористого цинка и хлористого натрия. Этим методом было обнаружено 81,1±3,8% ооцист кокцидий.

При методе Сафиуллина соотношение раствора хлористого цинка и хлористого натрия составляет 1:2. Мы изменяли соотношения этих растворов как в сторону увеличения, так и в сторону уменьшения компонентов флотационной жидкости. Исследования показали, что при всех использованных комбинациях количество выявляемых ооцист кокцидий колебалось от 33,3±1,5 до 62,6±4,1%. Методом Сафиуллина в этом опыте было обнаружено 79,1±0,8% ооцист.

Следовательно, путем изменения соотношения хлористого цинка и хлористого натрия не удалось повысить чувствительность метода Сафиуллина. Поэтому мы использовали флотационную жидкость, состоящую из трех компонентов (насыщенных растворов хлорида цинка, хлорида натрия и сахара). Диагностическая эффективность комбинированного метода с использованием трехкомпонентного ингредиента зависела также от соотношения входящих компонентов. Так, например, с помощью раствора, приготовленного из насыщенных растворов хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 1:1:1 было выявлено 34,1 ±2,8% заложенных ооцист, в соотношении 0,3:1:2 -54,2±3,2% ооцист кокцидий, в соотношении 0,5:3:2 - 63,55±4,1% ооцист. Комбинация этих же растворов в соотношениях 0,7:2:0,5, 0,9:1:0,5, 1:2:0,5 и 1:1:1 дало возможность выявить соответственно 65,6±4,3, 70,8±5,2, 68,3±4,7 и 34,1±2,8% ооцист кокцидий, в то время как при соотношении этих же компонентов 1:2,5:0,5 было выявлено 95,1±5,8%.

Таким образом, разработанный нами метод выявления ооцист кокцидий, основанный на использовании трехкомпонентного ингредиента, состоящего из насыщенного раствора хлорида цинка, хлорида натрия и сахара оказался наиболее чувствительным, с помощью которого было обнаружено ооцист на 16% больше, чем методом Сафиуллина и соответственно на 50,7 и 56,1% больше, чем методом Фюллеборна и Дарлинга.

Высокую степень заражения кроликов эймериозом в обследованных хозяйствах мы также объясняем отсутствием надежных химиопрофилактических средств при кокцидиозе. Известно, что химиотерапия в настоящее время является самой действенной и результативной мерой борьбы с эймериозом кроликов. Разработкой методов химиотерапии и химиопрофилактики при эймериозе кроликов занимались многие исследователи (В.Ф. Новинская и др., 1988; В.Ф. Абрамова, П.П. Райлян, 1991; С.А. Плешаков, 1997; В.А. Стрельчик, Е.А. Ушакова, 1998 и др.; Ж.Ф. Дзаумаммелуна, 2000, 2001). Однако у эймерий при длительном применении одних и тех же препаратов сравнительно быстро может выработаться адаптация к ним, в результате чего они становятся не эффективными. Поэтому одной из задач наших исследований было изыскание новых противоэймериозных препаратов.

Изучали сравнительную эффективность 13 препаратов (норсульфазол, фуразолидон, метронидазол, вермитан 20%-ный гранулят, ветакокс, ампролиум, йодхлорин, кокцидиовит, клинакокс, кокцидин, фармкокцид-10, сульфадимезин, норсульфазол с фталазолом) при лечении спонтанно-инвазироваанных крольчат двухмесячного возраста в период когда отмечалось максимальное выделение ооцист эймерий.

В результате проведенных исследований было установлено, что через 7 дней после последнего применения использованных препаратов ИИ снижалась во всех опытных группах, а ИЭ колебалась от 44,6 до 97,5%. Наиболее высокой противоэймериозной эффективностью в этот период обладал йодхлорин (97,5%), далее ветакокс, кокцидиовит и норсульфазол с фталазолом, ИЭ которых составляла 89,1 88,1 и 87,1% соответственно.

При исследовании через 14 дней после введения препаратов в некоторых группах отмечали повышение ИИ, а в некоторых, наоборот, снижение.

Например, после применения норсульфазола ИЭ составила 74,4% (против 65,6% через 7 дней), клинакокса - 82,1% (против 70,2%), кокцидина -68,3% (против 47,7%), сульфадимезина - 66,7% (против 61,5% через 7 дней). ИЭ фуразолидона, метронидазола, вермитана 20%-ного, ветакокса, ампролиума, клинакокса, фармкокцида, норсульфазола с фталазолом снизилась. Наиболее низкие показатели ИЭ были у ампролиума (25%), фармкокцида-10 (21,1%) и метронидазола (19,7%).

Через 30 дней после лечения норсульфазолом, фуразолидоном, ветакоксом, ампролиумом, кокцидиовитом и кокцидином произошло увеличение количества ооцист по сравнению с 14 днем, следовательно, ИЭ имела отрицательное значение. В группах, где использовали метронидазол, вермитан и норсульфазол с фталазолом отмечали дальнейшее снижение количества ооцист и ИЭ в этих группах составила соответственно 43,9, 25,0 и 66,7%. ИЭ йодхлорина составила 100%, причем все 8 кроликов как на 14-ый, так и на 30 день полностью освободились от ооцист и ЭЭ также составила 100%.

В контрольной группе, где лечение животных не проводили, ИИ через 7 дней составила 226±3,9, через 14 дней - 230±3,9 и через 30 дней - 252±4,0 (против 201±2,7, фоновые исследования).

Следовательно, йодхлорин в дозе 6 мл/гол при применении в течение 5 дней обладает выраженным кокцидиостатическим действием.

Эффективность любых противопаразитарных препаратов, в том числе и кокцидиостатиков нельзя оценивать только на основании изучения экстенс- и интенсэффективности. При этом важно знать патогенное влияние препаратов после введения их в организм как здоровых, так и больных животных.

Поэтому одной из задач наших исследований являлось изучение гематологических, биохимических, иммунобиологических показателей у кроликов, экспериментально зараженных эймериозом кроликов после введения им химиотерапевтических препаратов. Одновременно с этим мы проводили исследования проб фекалий от этих животных.

С этой целью провели опыт на 25 кроликах 1-3-месячного возраста, которых разделили на 5 групп. Четыре группы животных заразили ооцистами эймерий в количестве 50000 ооцист/гол, одну группу оставили в качестве незараженного контроля. Первой группе вводили йодхлорин, второй-фуразолидон, третьей - вермитан 20%-ный гранулят. Одновременно вели наблюдение за клиническими признаками. Пробы фекалий брали до заражения, до лечения (спустя 7 дней после заражения) и через 3, 6, 10, 15и30 дней после введения препаратов.

Результаты копрологических исследований показали, что ИИ у экспериментально зараженных животных до лечения находилась в пределах 2201± 124,8 - 2253±50,1 ооцист в 5 полях зрения микроскопа. В этот же период у кроликов всех четырех групп были выявлены и клинические признаки острого эймериоза, характерными для которых являлось частое мочеиспускание и понос. Аналогичные клинические признаки при экспериментальном кокцидиозе отмечали А.Ф.Манжос (1975), В.П. Рютова (1985), М.Ш. Акбаев (2000). В группе, где применяли йодхлорин на 15 день после введения препарата ИЭ и ЭЭ составляла 100%. После применения фуразолидона и вермитана ИЭ в этот период составила 47,5 и 37,5% соответственно. Улучшение общего состояния у кроликов отмечалось на 10 день в группах, леченных йодхлорином и фуразолидоном, на 12 сутки в группе, где применяли вермитан и на 20 сутки в группе зараженного контроля. По данным И.И. Вершинина (2001) эймериозная инвазия является самоограниченной, поскольку бесполое размножение (мерогония) определяется количеством генераций меронтов, поэтому, если исключить супер- и реинвазии, возможен лишь один цикл развития паразита и организм хозяина сам освобождается от инвазии. Наши результаты согласуются с данными автора, т.к. в группе зараженного контроля отмечалось снижение ИИ по дням и к 30 дню оно составило 1071±58,4 ооцист, против 2253±50,1 (фоновые данные).

В дни взятия проб фекалий одновременно брали кровь и проводили гематологические, биохимические и иммунобиологические исследования животных.

I группе в 1,25, II - 1,43, в III - 1,35 и IV - 1,48 раза по сравнению с фоновыми показателями, а уровня гемоглобина соответственно в 1,37; 1,32; 1,28 и 1,29 раза.

Следовательно, в этот период у кроликов отмечали сильную степень анемии, которая наиболее была выражена в IV группе (зараженный контроль).

К концу опыта, в группе, леченной йодхлорином количество эритроцитов и гемоглобина повысилось на 28 и 27,8% соответственно, что связано с позитивным влиянием препарата на эритропоэз, а также уничтожением негативных факторов, влияющих на кроветворную функцию организма (токсины ооцист эймерий), тогда как в группе, где задавали вермитан они до конца опыта оставалось ниже уровня таковых у здоровых кроликов (слабая степень анемии). В группе, получавшей фуразолидон, эти показатели восстанавливались до физиологической нормы на 30 день опыта.

Ответная реакция организма на патогенное действие эймерий сопровождалась увеличением числа лейкоцитов у всех зараженных животных в пределах 1,5-2 раза на 3 день введения препаратов и нормализацией их на 15 день лечения йодхлорином и на 30 сутки лечения фуразолидоном и вермитаном. В группе зараженного контроля отмечалась лейкопения, связанная с функциональным истощением защитных сил организма.

На 3-ий день лечения было отмечено повышение уровня СОЭ, которое в группах, леченных йодхлорином, фуразолидоном, вермитаном и группе зараженного контроля составило 6,38±0,96; 7,41±0,83; 6,82±0,95 и 10,1±0,72 мм/час, против 2,4±0,09 мм/час в контроле. Уровень СОЭ в группе, леченной йодхлорином, нормализовался на 15 сутки, в группах, леченных фуразолидоном и вермитаном - на 30 сутки. В группе зараженного контроля показатель СОЭ к концу опыта был выше уроня СОЭ здоровых животных в 2,5 раза, что говорит о сохраняющемся воспалительном процессе в кишечнике, сопровождающимся выпотом экссудата в просвет и затруднением всасывания жидкости в организм кролика, что приводит к вязкости крови. Эти данные согласуются с результатами исследований К.И. Абуладзе и др. (1982), О.Е. Яблоновской и др. (2001).

О подавлении иммунобиологической реакции организма кроликов в ответ на патогенное действие простейших в шизогональный период развития свидетельствовало уменьшение лимфоцитов в 1,2-1,5 раза в группах зараженных животных, которые в последующем повысились до нормативных показателей у животных, которым применяли йодхлорин.

Также в этот период во всех четырех группах зараженных животных произошел выброс в кровеносное русло эозинофилов, которые превышали показатели таковых здоровых животных на 4,7; 7,3; 5,9 и 6,8%. Следует отметить, что эозинофилия имела кратковременный характер и уже на 6 день лечения уровень их нормализовался. Как считает О.Е. Мазур (2001), данное явление вполне объяснимо, т.к. эозинофилия является показателем и аллергии и защитной реакциии организма, в силу того, что у всех клеток - эффекторов эозинофилы обладают наиболее мощной цитотоксичностью по отношению к кокцидиям.

Отмеченная динамика форменных элементов крови в начальный период инвазии несет защитный характер и объясняется стимулирующим воздействием антигенов паразитов и развитием воспалительного процесса, тогда как характер выявленных сдвигов показателей крови в последующем отражает частичную иммунодепрессию и угнетение естественной резистентности организма.

Как полагают М.А. Мусаев и др. (1996) каждая стадия развития паразита (ооцисты хозяина) со своим специфическим антигенным набором вызывает образование соответствующих Т-лимфоцитов, выполняющих как функцию разрушения паразитов (киллерная активность, так и вспомогательную функцию (хелперная активность). Последняя функция, в свою очередь, способствует клонированию антителообразующих В-клеток. С этой целью мы решили Ц провести исследования Т- и В-лимфоцитов при эймериозной инвазии кроликов.

У зараженных эймериозом кроликов количество Т-лимфоцитов было незначительно ниже и колебалось от 35,1±0,21 до 36,2±0,22%, против 40,0±0,4% в контроле. Через 3 дня после введения препаратов содержание этих клеток в группе леченной йодхлорином равнялось 35,9±0,44%, фуразолидоном — 33,8±0,24%, вермитаном - 31,2±0,42% и в группе зараженного контроля -33,1 ±0,2%, против 41,3±0,1% в контроле, т.е. произошло дальнейшее снижение. Однако на 15 сутки после введения йодхлорина содержание Т-клеток нормализовалось. У животных, получавших вермитан, а также группы зараженного контроля уровень этих клеток был ниже, чем у здоровых в течение всего опыта и находился в пределах 22,1±0,12 - 39,1±0,21% и 30,1±0,64 -38,1±0,26%, которые к концу опыта так и не нормализовались.

Результаты идентификации В-лимфоцитов показали, что у кроликов группы зараженного контроля в течение 3-30 суток происходило снижение этого показателя по сравнению с исходными данными и к концу опыта уровень их был ниже фоновых показателей на 5,1%. Введение йодхлорина, наоборот, способствовало повышению ЕАС-лимфоцитов, которые нормализовались на 15 сутки, тогда как в других группах, В-лимфоциты в течение всего периода были ниже уровня таковых здоровых кроликов.

Таким образом, результаты изучения содержания Т- и В-лимфоцитов в крови зараженных кокцидиозом кроликов показали, что в разгар инвазионного процесса дефицит Т-системы отражается и на В-системе лимфоцитов, возможно в результате нарушения дифференцировки лимфоидных стволовых клеток или это может быть связано с циркуляцией растворимых антигенов, иммунных комплексов и лимфоцитотоксинов. Наши данные совпадают с результатами исследований Е.Ф. Чернушенко, Л.С. Когосовой (1981), Э.Х. Даугалиевой, К.Г. Курочкиной (1996), A. Dasgurta, В. Shikol, A. Bandopadhyaya (1978). Однако Л.И. Иргашева (1985) при малой дозе заражения кроликов ■ф ооцистами кокцидий отмечала увеличение Т- и В-лимфоцитов в период обострения болезни и нормализацию их на 30 день опыта, что не согласуется с нашими данными.

Об активной гуморальной реакции в организме зараженных эймериями кроликов говорят значительные сдвиги в распределении белковых фракций. Достоверное увеличение содержания общего белка в сыворотке крови отмечалось на 3 день введения препаратов на 30-35% во всех группах зараженных животных, более выраженное в группе зараженного контроля (12,1±0,38, против 6,47±0,54 г% в контроле). Во фракциях белка у животных всех четырех зараженных групп зафиксирована диспротеинемия, характеризующаяся снижением как количества альбуминов, так и а-глобулинов и повышением (3- и у-глобулинов, сохраняющаяся до конца опыта во всех группах зараженных животных, кроме той, где применяли йодхлорин. В этой группе показатели белка восстановились до физиологической нормы, что статистически достоверно. В группе зараженного контроля (3- и у-глобулины превышали фракции таковых в группах, получавших йодхлорин, фуразолидон и вермитан соответственно на 24 и 9%, 32 и 14%, 25 и 13%. Очевидно, положительная динамика у-глобулинов доказывает развитие выраженных иммунобиологических реакций организма в ответ на антигенное воздействие эймерий, что согласуется с данными О.Е. Мазур и др. (2003).

Ведущая роль при инвазионных заболеваниях принадлежит полиморфно-нуклеарным нейтрофилам (Э.Х. Даугалиева, В.В. Филиппов, 1991), обладающих фагоцитарными и цитотоксическими свойствами. ФАН у контрольных животных на протяжении всего периода опыта находилась в пределах 64,6-68,3%. Однако, у зараженных животных отмечалось снижение этого показателя на 3-ий день после введения препаратов в пределах 1,6-2 раза от исходного, после чего в группе, получавшей йодхлорин ФАН нормализовался на 15 сутки, тогда как в группах, леченных фуразолидоном и вермитаном он так и не восстановился до физиологической нормы. В группе зараженного контроля ФАН к концу опыта не нормализовался и составлял 38,9±0,12%, против 68,3±1,9% в контроле (р<0,05).

Характер изменений ФА лейкоцитов в начале инвазии, по-видимому, говорит о супрессии неспецифических факторов клеточной защиты организма. Снижение ее на 3 день лечения, возможно связано с уменьшением количества нейтрофилов, способных к фагоцитозу в результате интоксикации метаболитами эймерий, и, по-видимому, инокулируемой микрофлоры.

В первые дни инвазии в результате активной циркуляции токсинов эймерий снижались БАСК у всех зараженных животных. Показатель БАСК в течение 6-15 суток прогрессирующе возрастал и нормализовался в I группе на 15 день лечения, тогда как во II и III группах так и не восстановился до физиологической нормы. В IV группе наблюдалось прогрессирующее снижение этого показателя, которое к 30-му дню было ниже исходного на 9% по сравнению с контролем.

В результате патогенного действия эймерий в первые дни инвазии, значительно угнеталась активность лизоцима сыворотки крови во всех опытных группах, которая на 3 день лечения снизилась на 21%. Затем к 15-му дню отмечалось достоверное ее увеличение, которое в I группе составило 17,2±0,62 мкг/мл, против 17,3±0,8 мкг/мл в контроле, а на 30 сутки - снижение до 16,1 ±0,62 мкг/мл, против 17,5± 0,9 мкг/мл в контроле, а во II, III и IV группах на 30-й день опыта уровень лизоцима также прогрессирующе возрастал и составил 15,9±0,81, 15,0±0,73, 9±0,07 мкг/мл, против 17,5±0,9 мкг/мл в контроле (р<0,05), то есть был ниже уровня здоровых животных.

Уровень комплемента резко понизился до лечения во всех 4-х группах зараженных животных и был в пределах 9,6±12,3 - 12,4±0,73, против 15,1±0,73-16,0±0,63 С'Н50/мл исходного уровня. На 3 день эти показатели были еще ниже и равнялись в первой группе 10,5±0,39; во второй - 11,6±0,56; в третьей -11,4±0,5; в четвертой - 10,9±0,41 С'Н50/мл, против 16,0±0,63; 15,1±0,73; 15,6±0,92; 15,3±0,64 С'Н50/мл фоновых показателей, что статистически достоверно. К концу опыта показатели комплемента в I группе нормализовались, а во II , III и IV группах они так и не восстановились до исходного уровня.

По-видимому, это происходит вследствии антигенного раздражения макрофагальной системы, в результате которого повышается количество клеток-продуцентов фермента.

Таким образом, можно констатировать, что у экспериментально инвазированных кокцидиозом кроликов наблюдается нестабильность в гуморальных и клеточных специфических и неспецифических факторах иммунологической защиты. Это происходит, по всей вероятности, в результате как иммунодепрессивного действия паразитарных антигенов, обычно в начальный период инвазии, так и иммуностимулирующего их воздействия в последующем. Однако, в группах, где применяли фуразолидон и вермитан, а также в группе зараженного контроля показатели неспецифической резистентности так и не пришли к таковым у здоровых, что свидетельствует о возможном развитии вторичного иммунодефицитного состояния, а также о негативном влиянии самих препаратов на иммунную систему организма кроликов. Следует отметить, что в группе, где применяли йодхлорин, большинство изученных показателей нормализовалось на 15 сутки после введения препарата.

С целью изучения влияния испытуемых препаратов на гематологические, биохимические и иммунобиологические показатели организма здоровых животных нами был проведен опыт на 20 кроликах, 15 из которых получали йодхлорин, фуразолидон и вермитан (по 5 кроликов на препарат). При применении йодхлорина и фуразолидона у здоровых кроликов отмечалось повышение эритроцитов и гемоглобина в течение всего опыта, в пределах 1,1-1,4 раза в сравнении с исходными данными. Это говорит о том, что препараты оказывают положительное влияние на эритропоэз. Наоборот, применение вермитана подавляло кроветворную функцию организма кроликов, о чем свидетельствовало снижение эритроцитов и гемоглобина в этих группах в 1,4-1,5 раза, что статистически достоверно.

Отмечающийся на 15 день после введения йодхлорина слабый лейкоцитоз (7,2±0,3, против 6,48±0,52х109/л в сравнении с фоном), говорит об активации клеточного фактора защиты. В группах, где использовали фуразолидон и вермитан, этот показатель прогрессивно снижался, и составлял в этот же срок 5,6±0,28 и 5,5±0,12х109/л, против 6,28±0,39 и 6,14±0,24х109/л (фоновые данные), на 30 сутки эти показатели повысились на 6 и 5% соответственно.

Иммуннодепрессивная реакция на введение фуразолидона и вермитана подтверждалась также снижением Т- и В-лимфоцитов, которое наиболее характерно было выражено на 10 день введения препаратов. Йодхлорин у здоровых кроликов наряду с лимфоцитозом повышал уровень Т-лимфоцитов, достигающий наивысшего пика на 10 сутки (45,2±0,1, против 38,7±0,3% исходных данных) и В- лимфоцитов на 15 день (31,0±0,8, против 25,4±1,24% в фоновом показателе). К концу опыта в группах, получавших йодхлорин и фуразолидон, содержание этих клеток находилось на уровне таковых у контрольных кроликов. Несмотря на незначительное повышение, количество Т-клеток в группах у кроликов, получавших вермитан на 30 день опыта было ниже контрольной группы на 15,8%, а В-клеток - на 14,6%.

После применения йодхлорина и фуразолидона на 10 день была отмечена слабая гиперпротеинемия, за счет снижения уровней альбумина и а-глобулинов и повышения (3-й у-глобулиновых фракций и восстановление всех фракций до физиологической нормы к концу опыта в обоих группах. Применение вермитана вызвало, наоборот, гипопротеинемию, связанную с понижением (3- и у-глобулиновых фракций к 10 дню опыта, сохраняющуюся так до конца опыта. Кроме того, было установлено, что показатели БАСК и ФАН у животных этой группы незначительно превышали таковые в контрольной группе и составляли 60,3±2,01 и 69,3±0,9 г%, против 64,6±1,4 и 64,6±1,4 г% в контроле. Однако в группе, где применяли фуразолидон показатели БАСК и ФАН уступали таковым контрольной группы на 15 день введения препарата и составляли 51,4±1,4 и 62,1±1,62 г% соответственно, против 57,9±2,3 и 63,8±2,34 г% в исходных данных. После использования вермитана показатели БАСК и ФАН в этот срок также были ниже исходных данных и составляли 49,8±1,34 и 58,4±1,74%, против 56,1±2,1 и 66,1 ±2,51 г%. На 30 день опыта эти показатели в группе, где применяли фуразолидон нормализовались.

Введение йодхлорина способствовало незначительному подъему уровня лизоцима на 10 день введения препарата, который составил 17,9±0,91, против 15,9=1=0,61 мкг/мл (фоновый показатель). Уровень комплемента при этом в течение всего опыта оставался в пределах нормы и составлял 15,7±0,84-17,1 ±0,1 мкг/мл. После введения кроликам фуразолидона и вермитана уровни лизоцима и комплемента снизились в пределах 7-10%, при чем они были более выраженными в группе, в которой применяли вермитан, где уровени лизоцима и комплемента составляли в этот день 14,2±0,31 мкг/мл и 14,8±0,52 СН50/мл, против 15,9±0,73 мкг/мл и 16,1 ±0,92 СН50/мл соответственно по сравнению с фоном. Уровни этих показателей в последующем нормализовались в группе, где применяли фуразолидон и не восстановились до физиологической нормы при применении вермитана.

В конце опыта (через 30 дней) животных с каждой группы убивали и подвергали неполному гельминтологическому вскрытию. Исследования показали, что применение йодхлорина, фуразолидона и вермитана не вызывают на слизистой желудка и кишечника видимых паталогоанатомических изменений.

Таким образом, введение кроликам йодхлорина позитивно сказывается на эритропоэзе, активизирует клеточные и гуморальные, а также неспецифические факторы иммунитета, повышает иммунобиологическую реакцию организма. Фуразолидон активизирует кроветворную функцию организма, увеличивает уровень общего белка сыворотки крови и незначительно снижает защитные факторы иммунитета, которые к концу опыта восстанавливаются до физиологической нормы. Однако, применение вермитана негативно сказывается на кроветворной функции и угнетает защитную функцию организма.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата ветеринарных наук, Шиляева, Юлия Николаевна, Казань

1. Абрамова В.Ф., Караре М.В. Эффективные препараты при эймериозе кроликов //Ж. «Ветеринария». №6. - М. - 1983. - С. 41.

2. Абрамова В.Ф., Райлян Л.Л. Для профилактики эймериоза кроликов //Ж. «Кролиководство и звероводство». №5. - М. - 1991. - С. 28.

3. Абуладзе К.И., Демидов Н.В., Колабский Н.А. и др. Паразитология и инвазионные болезни сельскохозяйственных животных. М.: Колос. - 1975. -472 с.

4. Агаев К.Х., Елчив Я.Я. Изменение количества Т- и В-лимфоцитов в лимфоидных органах цыплят, зараженных Eimeria acervulina //Цитология, -Т.34.-№4.-1992.-С. 15.

5. Акбаев М.Ш., Водянов А.А., Косминков Н.Е. и др. Паразитология и инвазионные болезни животных. М.: Колос, - 2000. - 744 с.

6. Александров В.А. Приусадебное хозяйство. Разведение кроликов и нутрий. М.: ЭКСМО-Пресс - 2001. - 245 с.

7. Ахаев Г.Н., Рахматуллин А.А., Колесова Л.Е. Профилактика кокцидиоза кур фармкокцидом и кокцидином //Дагестанский НИВИ. (Рукопись дел. во ВНИИТЭИСХ 10.06.1982 г., №144-82 Дел.). Махачкала. - 1982. - 9 с.

8. Ахаев Г.Н., Рахматуллин А.А., Колесова Л.Е. Совместное применение химкокцида с сульгином-25 при экспериментальном кокуидиозе цыплят //Дагестанский НИВИ. (Рукопись дел. во ВНИИТЭИСХ 10.06.1982 г., №144-82 Дел.). Махачкала. - 1982. - 8 с.

9. Ахаев Г.Н., Рахматуллин А.А., Колесова Л.Е. Применение химкокцида с дайметоном при кокцидиозе кур //Дагестанский НИВИ. (Рукопись дел. во ВНИИТЭИСХ 10.06.1982 г., №144-82 Дел.). Махачкала. -1982.-8 с.

10. Баженов В.Н. Опыт терапии кокцидиоза кроликов фенотиазином //Сб. научных трудов студентов, вып. 3. Омск. - 1960. - С. 139-141.

11. Бакшеев П.Д., Наймитенко Е.П. Поточное производство мяса кроликов. М.: «Колос», 1980. С 110-114.

12. Бейер Т.В. Иммунитет при кокцидиозе кроликов //«Зоологический журнал», т.39, вып. 5 1962. - С. 641-647.

13. Бессонов А.С. Резистентность к паразитоцидам и пути её преодоления //Ж. «Ветеринария». №7. - 2002. - С. 24-28.

14. Бессонов А.С. Резистентность к паразитоцидам: система интегрированного управления развитием паразитов //Ж. «Ветеринария». №2 -2003.-С. 29-32.

15. Бурлаков С.В. Ампролиум Мериал идеальный выбор //Ж. «Ветеринария». - №4. - 2002. - С. 13.

16. Васильев B.C., Комар В.М. и др. Медицинская паразитология и паразитарные болезни. М., 1985. - С. 34-36.

17. Васильева Д.В., Гадеева Г.М. Распространение эймериоза в хозяйствах Татарстана //Респуб. научно-производ. конф. «Актуальные вопросы ветеринарии и зоотехнии». Казань. - 1992. - С. 12.

18. Вершинин И.И. К филогении цистообразующих эймериидных кокцидий //Тр. Свердловского НИВС, вып. 9. Свердловск, 1987. - С. 79-87.

19. Вершинин И.И. Идентификация видов рода Sarcocystis, Lankester, 1882 (Coccidia, Sporozoa, Apicomplexa) //Veterinar Meditsiin, Tartu, 1995. - C. 69-82.

20. Вершинин И.И. Дифференциация тканевых цистообразующих кокцидий //Teadustoode Kodymic Collected studies. Prof. Kaarde 100. Tartu, 1996. -C. 52-80.

21. Вершинин И.И. Кокцидиозы животных и их дифференциальная диагностика. Екатеринбург. - 1996. - С. 23-28.

22. Вершинин И.И. Атлас основных кокцидий животных и их морфобиологическая характеристика. Уральская Госсельхозакадемия. -Екатеринбург, 2001. 95 с.

23. Гадеева Г.М., Васильева Д.В. Действие ЭХАР на ооцисты эймерий //Респуб. научно-производ. конф. «Актуальные вопросы ветеринарии и зоотехнии». Казань. - 1992. - С. 14.

24. Герасимчик В.А. Сравнительная эффективность копроскопических методов исследования при эймериозах плотоядных //Ж. «Ветеринария». №7. -2003. - С. 27-30.

25. Гобзем В.Р. Кокцидии и кокцидиозы домашних жвачных на территории БССР и меры борьбы с этими заболеваниями //Автореф. дисс. . канд. вет. наук. Витебск. - 1965. - 23 с.

26. Гобзем В.Р. Сезонная динамика кокцидиоза крупного рогатого скота //Инфекционные и инвазионные заболевания животных и птиц. Минск. -1965.-С. 167-170.

27. Гобзем В.Р. Кокцидиоз телят. Минск: «Урожай». — 1972. - 321 с.

28. Голиков Н.Н. Иммунитет и неспецифичность возбудителей кокцидиозов кроликов и птицы //Ж. «Ветеринария». №5. - 1941. - С. 57-28.

29. Давронов О.Д., Бобоназаров Г.Н. Зараженность кокцидиями домашних животных на юге Узбекистана в зависимости от их возраста //Ж. «Возбудители и переносчики паразитов и меры борьбы с ними». №8. — 1988. -С. 58.

30. Даугалиева Э.Х., Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельскохозяйственных животных животных. М.: Агропромиздат. - 1991. - 190 с.

31. Даугалиева Э.Х., Курочкина К.Г. Иммуносупрессия при гельминтозах// Тр. ВИГИС. М. - 1996. - Т. 32. - С. 31-36.

32. Дзаумамелуна Ж.Ф., Степанов А.В. Изучение лечебной эффективности некоторых препаратов при экспериментальном эймериозе кроликов //Ж. «Аспирант и соискатель», №1 М., 2000. - С. 203-204.

33. Дзаумамелуна Ж.Ф., Степанов А.В. Терапевтическая эффективность нитрофурановых препаратов (фуракрилина и фуразонала) приэймериозе кроликов // Ж. «Аспирант и соискатель», №1. М., 2000. - С. 205206.

34. Дондуков И.Ц. Развитие ооцист кокцидий кролика в естественных условиях в разное время года //Ж. «Кролиководство и звероводство». №2. -1969.-С. 12-25.

35. Дондуков И.Ц. Сравнительная оценка некоторых препаратов при кокцидиозе кроликов //Ж. «Вестник науки». №2. - 1969. - С. 32-33.

36. Дондуков И.Ц. Эффективность сульфадиметоксина и норсульфазола с фталазолом при кокцидиозе кроликов //Ж. «Ветеринария». -№1.-1969.-С. 21-22.

37. Дондуков И.Ц. Влияние разных конструкций пола на заражённость кроликов кокцидиозом // Ж. «Кролиководство и звероводство». №3. - 1970. -С. 14-15.

38. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом //Лабораторное дело. №1. - 1968. - С. 28.

39. Евтушенко А.Ф. Болезни кроликов. Киев.: Урожай. - 1992. - 252с.

40. Елчиев Я.Я., Мусаев М.А., Агаев К.Х., Мадатов Р.И. Изучение антигенного состава ооцист Eimeria tenella и Е. acervulina //Цитология. Т.34. -№4.-1992.-С. 58.

41. Ермаков A.M. Байкокс при кокцидиозе собак, нутрий и кроликов, //www. veterinary, ru. 2000.

42. Иргашев И.Х., Кабулов Б.Д., Сысоев И.В., и др. Испытание пролонгированного химкокцида при эймериозах кур //Ж. «Возбудители и переносчики паразитов и меры борьбы с ними». №5. - 1988 - С. 83.

43. Иргашева Л.И. Клинические признаки и картина крови при кокцидиозе кроликов //Материалы 9 научно-практической конференции по вопросам интенсификации сельского хозяйства в свете реализации Продовольственной программы СССР. М., 1985. - С. 39-43.

44. Камалетдинова Г.М., Романова Е.М. Изучение паразитоценозовжелудочно-кишечного тракта свиней в хозяйствах Ульяновской области// Сб.: Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе. МГАВМ им. Скрябина, 1999. - С. 56.

45. Качанова С.П. Гистохимическая характеристика Eimeria tenella и некоторых тканей хозяина при кокцидиозе //Автореф. дисс. . канд. вет. наук. -М., 1969.-19 с.

46. Колабский Н.А., Дубовой Б.Л., Вергеренко Л.В. Эффективность сульфахлорпиразина при кокцидиозе кроликов //Ж. «Ветеринария». №4.1973.-С. 21.

47. Колабский Н.А., Пашкин П.И. Кокцидиозы сельхозживотных. Л.: «Колос», 1974.-160 с.

48. Колабский Н.А., Манжос А.Ф. Терапия и профилактика кокцидиоза кроликов //Ж. «Кролиководство и звероводство», №2. 1979. - С. 29.

49. Колабский Н.А. Сравнительная эффективность некоторых кокцидиостатиков при эймериозе кроликов //Ж. «Ветеринария». №5. - 1983. -С. 34.

50. Кондрахин И.П., Курилов Н.В., Малахов А.Г., и др. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии. М.: Агропромиздат. - 1985. - 287 с.

51. Кост Е.А., Стенко М.И. Определение фагоцитарной активностилейкоцитов //Методическое пособие к лабораториям занятиям по основам научных исследований. Саратов. - 1984. - С. 98.

52. Котельников Г.А. Проблемы диагностики гельминтозов //Ж. «Ветеринария». -№11. -М., 1970. С. 28-30.

53. Котельников Г.А., Хренов В.М. Сравнительная оценка методов диагностики аскаридоза свиней //Ж. «Ветеринария». №10. - М., 1972. - С. 8789.

54. Котельников Г.А., Хренов В.М. Усовершенствование методов диагностики трихоцефалеза //Ж. «Ветеринария». №1. - 1973. - С. 65-66.

55. Котельников Г.А. Диагностика гельминтозов животных. М.: Колос, 1974.-С. 240.

56. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. М.: Колос. - 1984. - С. 207.

57. Кочеганов Х.Е. Клинико-морфологические исследования развития патологоанатомического процесса при экспериментальном кокцидиозе кроликов //Автореф. дис. канд. вет. наук. Алма-Ата. - 1954. - 19 с.

58. Кудрявцев А.А., Кудрявцева JI.A. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974. - 399 с.

59. Лапшин Н.М. Сравнительная оценка различных методов терапии кокцидиоза кроликов //Ж. «Вестник сельскохозяйственной науки». №1. -Киев. - 1962. - С. 78.

60. Лапшин Н.М. Из ветеринарной практики //Ж. «Животноводство». -№2. Украина, 1964. - С. 59.

61. Лапшин Н.М. Фауна взбудителей и распространение кокцидиоза кроликов в условиях Харьковской области //Ж. «Ветеринария». №3. - Киев, 1968.-С. 51-53.

62. Лапшин Н.М. Методы терапии и химиопрофилактики кокцидиоза кроликов //Автореф. дис. канд. вет. наук. Л. - 1969. - 18 с.

63. Лапшин Н.М. Кокцидиозы сельскохозяйственных животных на Украине //9-ая конференция Украинского паразитологического общества. Ч. 3.-Киев.- 1980.-С. 6-7.

64. Леонтюк С.В. Лечение кроликов от кокцидиоза //Ж. «Каракулеводство и звероводство». №4. - 1953. - С.25-26.

65. Леонтюк С.В. Кокцидиоз кроликов //Болезни кроликов. М., 1959. С. 48-52.

66. Леонтюк С.В. Болезни кроликов. М.: «Колос». - 1974. - С. 74-81.

67. Литвинский Я.П. Морфологическая картина крови телят при эймериозе //10-я конф. Укр. о-ва паразитологов: материалы. 4.1. Киев. - 1986. -С. 348.

68. Лутфуллин М.Х., Корнишина М.Д., Шакурова Ф.М., Волков А.Х., Васильева Д.В. Паразитологическая ситуация в хозяйствах РТ// Мат-лы научно-производственной конференции по проблемам ветеринарии и животноводства. Казань, 1994.-С. 36-37.

69. Лутфуллин М.Х., Лутфуллина Н.А. Усовершенствование методики определения количества Т- и В-лимфоцитов в крови крупного рогатого скота //Метод, указания. Казань. ВНИВИ. - 1996. - 11 с.

70. Мадатов Р.И., Елчиев Я.Я. Определение количества Т- и Влимфоцитов в лимфоидных органах цыплят при заражении и иммунизации Eimeria tenella //Цитология. Т. 34. - №4. - 1992. - С. 90.

71. Майоров А.И. Паразитарные заболевания и меры борьбы с ними //Ж. «Кролиководство и звероводство», №2, 1982. - С. 31.

72. Майоров А.И., Лупанов М.Т. Профилактика и лечение кокцидиоза //Ж. «Кролиководство и звероводство». №5. - М., 1982. - С. 32.

73. Майоров А.И. Профилактика и лечение кокцидиоза //Ж. «Кролиководство и звероводство». №2. - М., 1985. - С. 24.

74. Мазур О.Е. (Яблоновская О.Е.), Антухаев И.К., Шабаев В.А. Динамика Т- и В-лимфоцитов в крови овец при смешанной инвазии //Высшее с.-х. образование, аграрная наука и техника развитию АПК Байкальского

75. Ф региона: Мат. междунар. Науч.-практ. Конф., посвящ. 70-летию академии. -Улан-Удэ: БГСХА, 2002. С. 25-26.

76. Манжос А.Ф., Колабский Н.А. О профилактике кокцидиоза кроликов в хозяйствах, развивающихся на промышленной основе //Тезисы докладов 8 научной конференции паразитологов Украины. Вып. 1. - Киев.1974.-С. 124-125.

77. Манжос А.Ф., Конопатов Ю.В. Показатели крови кроликов при кокцидиозе //Ж. «Ветеринария». №12. - JL, 1974. - С. 68-69.

78. Манжос А.Ф. Кокцидиоз кроликов в крупных кролиководческих хозяйствах, его лечение и профилактика //Автореф. дис. . канд. вет наук. JI.,1975.-21 с.

79. Манжос А.Ф., Колабский Н.А. Химиотерапия и химиопрофилактика кокцидиоза кроликов. ЦНТИ. - Л., 1975. - С. 229-275.

80. Марков А.А. Методы исследований кокцидий в ветеринарии. М., Т. 1.-1953.-42 с.

81. Мачинский А.П., Орехов B.C. Динамика общего белка и белковых фракций сыворотки крови цыплят при экспериментальном остром кокцидиозе. //«Учёные записки Мордовского гос. ун-та. Серия вет. и мед. наук», вып. 75. - Саранск, 1968. - С. 42-44.

82. Меликян Е.Л. Длительность сохраняемости кокцидий во внешней среде //Ж. «Ветеринария». №5. - М., 1954. - С. 36.

83. Метёлкин А.И. Современные достижения в изучении кокцидиоза кроликов //«Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии». -Вып.З, Т.16.-1936.-С. 156.

84. Метёлкин А.И. Кокцидийные инвазии кролика и меры борьбы с ними //Автореф. дисс. канд. вет. наук. М.,1944. - 25 с.

85. Метёлкин А.И. О патогенезе кокцидиоза //Ж. «Каракулеводство и звероводство». №2. - М., 1948. - С. 35.

86. Мосина С.К., Григорьева Н.И. Кокцидиоз кроликов и организация лечебно-профилактических мероприятий в хозяйствах //Метод, указания. -Казань. 1981.- 12 с.

87. Мусаев М.А., Елчиев Я.Я. Изменение белкового состава сыворотки крови при экспериментальных кокцидиозах //Ж. «Паразитология». №4, 5. -М., 1970.-С. 494-500.

88. Мусаев М.А., Суркова A.M. Изменения активности кишечных фосфатаз при экспериментальных кокцидиозах (Е. tenella, Е. mitins) //Ж. «Паразитология». №1. - М., 1972. - С. 411-415.

89. Мусаев М.А., Елчиев Я.Я., Мадатов Р.И. Состояние Т-и В-систем иммунитета при эймериозе (Eimeria tenella) домашних кур //Ж. «Паразитология». Т.30. - №4. - С.-П., 1996. - С. 336-342.

90. Несмашная В.Г. К вопросу терапии и профилактики кокцидиоза кроликов //Ж. «Вестник сельскохозяйственной науки». Алма-ата. - №6. 1964. -С. 83-85.

91. Несмашная В.Г. Влияние кокцидий на реактивность организма кроликов и её изменение на фоне некоторых химиопрепаратов //Автореф. дисс. .канд. вет. наук. Алма-Ата. - 1969. - 22 с.

92. Новинская В.Ф., Давыдов Ю.М., Красников Ю.В. Испытание некоторых химиотерапевтических препаратов при кокцидиозе кроликов //Ж. «Ветеринария». №7. - 1983. - С. 49-50.

93. Нукербаева К.К. Протозойные болезни ферменных пушных зверей. Алма-Ата: Наука. - 1981. - С.167.

94. Орлов Н.П. О кокцидиях кроликов в Казахстане и их некоторых биологических свойствах //Тр. Казахского филиала наук СССР. Вып. 2. -1937.-С. 258-261.

95. Орлов Н.П. Переспективы медикаментозного лечения при кокцидиозе //Тр. Алма-Атинского зооветеринарного института Т. 3. М., 1940. -С. 148-176.

96. Орлов Н.П. Кокцидиозы сельскохозяйственных животных. М.: Сельхозгид. - 1956. - С. 46-95.

97. Орлов Н.П. Биологические основы лечения и профилактики паразитарных заболеваний. М.: Сельхозгиз. 1961. - С. 256-260.

98. Петров В.А., Никонов Н.Н. Кокцидиоз крупного скота. М., 1964.147 с.

99. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика. М.: Медицина. -1976.-338 с.

100. Петров Р.В., Хаитов P.M., Атауллаханов Р.И. Иммуногенетика и искусственные антигены. М.: Медицина. 1983. - 254 с.

101. Пеффген Д., Винтер Р. Сакокс кокцидиостатик нового поколения //Ж. «Ветеринария». - №4. - 1995. - С. 14-16.

102. Плешаков С.А., Ларионов С.В., Розовенко М.В. Эффективность фуракрилина и фуразонала при эймериозе кроликов //Ж. «Ветеринария». №8. - Саратов, 1997. - С.28-30.

103. Плешаков С.А. Опыт применения «Фуравикола» и «Виткофана» при эймериозе кроликов //Информац. листок №5-98. Саратов. - 1998.

104. Плешаков С.А. Научные основы применения комплексных препаратов на базе нитрофуранов при эймериозе кроликов //Автореф. дисс. . канд. вет наук. Саратов. - 1999. - 18 с.

105. Пономаренко В.Я. К вопросу о химиопрофилактике кокцидиоза кроликов //Мат-лы 8-ой научой конференции паразитологов УССР. 4.2. -Киев. - 1975. - С. 115-116.

106. Пономаренко А.Н. Химиопрофилактика и терапия пастереллёза и кокцидиоза кроликов на крупных фермах //Информац. листок №139-76. -Симферополь, ЦНТИ. -1976.

107. Пономаренко А.Н., Карташов М.В. Химиопрофилактика кокцидиоза кроликов //Ж. «Ветеринария». №1. - М.: Колос. - 1976. - С.68-69.

108. Пономаренко А.Н. Эпизоотология, терапия и химиопрофилактика кокцидиоза кроликов в крупных хозяйствах Крыма //Автореф. дисс. . канд. вет. наук. Л., 1980.-232 с.

109. Пономаренко Н.В. Химиопрофилактика при кокцидиозе кроликов //Ж. «Ветеринария». Вып.4. - М., 1981. - С. 42.

110. Попов М.А., Кубранова Р.Ф. Испытание фенотиазина при профилактике и терапии кокцидиоза кроликов //«Сборник научных работ Омского государственного института». Вып. 3. - 1960. - С. 93-95.

111. Рахимжанов Б.А. Выделение ооцист эймерий при применении клирамина //Ж. «Ветеринария». 1995. - №2. - С. 40.

112. Рахимов Т.Х., Садыкова С.Б., Иргашева Л.Н. Эффективность некоторых препаратов при экспериментальном кокцидиозе кроликов //Тр. УзНИВИ Болезни сельхозживотных. Т. 30. - Ч. 2. - 1981. - С. 79-82.

113. Рахимов Т.Х., Садыкова С.Б. Изучение лечебной эффективности некоторых препаратов при кокцидиозе кроликов //10 конф. Укр. о-ва паразитологов: Киев. Ч. 2. - 1986. - С. 157.

114. Рахманов А.И. Домашняя звероферма. Содержание и разведение кроликов и пушных зверей на приусадебном участке. М.: Аквариум ЛТД, 2000. - 256 с.

115. Резникова Л.С. Комплемент и его значение в иммунологических реакциях //М.: Медицина. 1967. - 300 с.

116. Решетняк В.З., Бартонов B.C., Рубанов А.А. Трихопол -эффективное средство при кокцидиозах кроликов //Ж. «Ветеринария». №3. -1970.-С. 75.

117. Рютова В.П. Болезни кроликов, М.: «Россельхозиздат», 1985. С.74.81.

118. Рютова В.П. Кокцидиоз кроликов //Ж. «Кролиководство и звероводство», №5. 1990. - С. 22.

119. Сафиуллин Р.Т. Сравнительная эффективность копроскопических методов диагностики гельминтозов свиней и их усовершенствование на основа стандартизации //Тр. Всерос. Ин-та гельминтол. Т.37. 2001. - С.149-159.

120. Сафиуллин Р.Т., Горюнова Т.А., Забапгга A.JI. Монлар 20%-ный при эймериозе цыплят //Ж. «Ветеринария». №9. - 2001. - С. 27-30.

121. Сванбаев С.К., Горбунова З.И. Материалы по биохимическим и морфологическим изменениям крови при экспериментальном кокцидиозе овец //«Труды ин-та зоологии АН КазССР», 1967, т.28.

122. Сванбаев С.К., Горбунова З.И. К вопросу о биохимических и морфологических изменениях состава крови при экспериментальном кокцидиозе крупного рогатого скота. «Известия АН КазССР. Серия биол.», 1968. -№3.- С. 38-41.

123. Сванбаев С.К. Рекомендации по борьбе с кокцидиозом овец, Алма-Ата, 1974.-22 с.

124. Сванбаев С.К. Кокцидиозы сельскохозяйственных животных, Алма-Ата: Издательство «Наука», 1977. С. 139-154.

125. Сидоркин В.А. Справочник по диагностике и терапии гельминтозов животных и птиц. М.: Аквариум ЛТД, 2001. - 356 с.

126. Смирнова О.В., Кузьминова Т.А. Определение бактериальной активности сыворотки крови методом фотонефелометрии //ЖМЭИ. 1966. -№4.-С. 8-11.

127. Согомонян А.С., Бояджян М.М., Абрамян Г.Э. Влияние гомогената тимуса на кроликов при спонтанном кокцидиозе //Зоол. Сб. Ан Арм ССР. -Ереван. Институт зоологии. - 1987. - С. 153.

128. Соколов В.Д. Теория и практика использования иммуномодуляторов в ветеринарии //Тез. докл. 1-й межвуз. научно-практич. конф. «Новые фармакологические средства в ветеринарии». JL — 1989. - С. 4344.

129. Соколов В.Д., Андреева H.JL, Соколов А.В. Иммуностимуляторы в ветеринарии //Ветеринария. №7 - 1992. - С. 49-50.

130. Стрельчик В.А., Ушакова E.JI. Видовой состав эймерий кроликов в некотрых регионах Западной Сибири и опыт химиотерапии //Материалы Международной научной конференции, посвященной 125-летию академии-Казань, 1998.-Ч. 1.-С. 146-147.

131. Теретьева З.Х., Христианский П.И. Инвазионные болезни коз оренбургской пуховой породы //Пути увеличения производства и повышения качества сельскохозяйственной продукции. Тез. докл. X научно-практич. конф. молодых ученых и спец.: Оренбург, 1991. С. 11.

132. Тимофеев Б.А., Коблова И.А. Шалова JI.M. Методы лабораторной диагностики кокцидиоза. М.: «Издательство стандартов». 1982.- 7 с.

133. Тимофеев Б.А. Профилактика протозойных заболеваний сельскохозяйственных животных. М.: «Россельхозиздат». 1986. - С. 143.

134. Тукшаитов Р.Х., Нигматуллин Н.Р. Математическая обработка экспериментального материала на программируемых микрокалькуляторах типа «Электроника» МК-56. -М.:ВАСХНИЛ, 1988. 28 с.

135. Ушакова E.JL, Стрельчик В.А. Эпизоотология эймериоза и эймериозно-гельминтозных инвазий овец Омской области //Мат, Межрегиональной научно-практической конференции, посвященной памяти проф. Волкова Ф.А. Новосибирск, 2002. - С. 119-123.

136. Ушакова Е.Л., Стрельчик В.А. Эпизоотология эймериоза и эймериозно-гельминтозных инвазий овец Омской области //Мат. Межрегиональной научно-практич. конф., посвященной памяти проф. Волкова Ф.А. Новосибирск, 2002. - С. 119-123.

137. Хабибулов М.А. Гигиена в промышленном кролиководстве. М.: Росагропромиздат, 1989.-С. 154-159.

138. Халиков Ф.Р. Биохимические показатели крови и мышечной ткани при цекальном кокцидиозе кур //Автореф. дисс. . канд. вет. наук. Куйбышев. -1969.-145 с.

139. Хейсин Е.М. Кокцидии кишечника кролика //Учёные записки Ленинградского государственного педегогического института имени Герцена. -Т. 55.-1947.-229 с.

140. Хейсин Е.М. Развитие двух кишечных кокцидий кролика Е. piriformis и Е. intestinalis //Учёные записки Карело-Финнского университета. -Вып. 3.-Т.3.-1948.-356 с.

141. Хейсин Е.М. Жизненные циклы кокцидий домашних животных. -Л.: «Наука». 1967. - 194 с.

142. Хованских А.Е., Илюшечкин Ю.П., Кириллов А.И. Кокцидиоз сельско-хозяйственной птицы. Л.: Агропромиздат. - 1990. - С. 152.

143. Черепанов А.А. Паразитарный комплекс решение проблемы профилактики паразитозов //Ж. «Ветеринария». -№10. - М. - 2001. - С. 23-26.

144. Чернуха В.Н., Логвинов А.П. Испытание эффективности некоторых препаратов при кокцидиозе кроликов //Сб. научных трудов Харьковского СХИ. Харьков. - 1979. - С.64-67.

145. Чернушенко Е.Ф., Когосова Л.С. Иммунология и иммунопатология заболеваний легких. Киев: Здоровье, 1981. - 208 с.

146. Шакурова Ф.М., Корнишина М.Д., Васильева Д.В. Действие электрохимически активированных растворов солей натрия и калия (ЭХАР)при эймериозе кроликов //Респуб. научно-производ. конф. «Актуальные вопросы ветеринарии и зоотехнии». Казань. - 1994. - С. 40.

147. Шевченко А.А., Шевченко JI.B. Вирусные болезни кроликов. М.: Аквариум ЛТД, 2000. - 125 с.

148. Шишков В.П., Бакулов Н.А. Большой энциклопедический словарь «Ветеринария». М.: Издательство «Большая Российская энциклопедия». -1998.-552 с.

149. Эсубалеу К.Б. Кокцидиоз кроликов //Ж. «Кролиководство и звероводство». №4. - М. - 2001. - С. 22.

150. Ятусевич А.И., Никулин Т.Г., Стародубцева У.Е., Мандрусов С.А., Никонов А.Р., Щемелев М.Г. Ассоциативное течение кокцидиоза и пастереллеза кроликов //Ж. «Кролиководство извероводство», №1. 1982. - С. 32.

151. Ятусевич А.И., Гиско В.Н. Профилактика и терапия эймериоза куриных птиц //Вестник ветеринарии. №7. - Ч. 1. - 1998. - С. 71-73.

152. Ятусевич А.И., Медведская Т.В. //Учён, записки Витеб. гос. акад. вет. медицины. -Т.34. 1998.- С. 191-192.

153. Ятусевич А.И., Рачковская И.В., Каплич В.М. Ветеринарная и медицинская паразитология //Энциклопедический справочник, М.: ООО «Мед. литература», 2001. 320 с.

154. Augustine P., Vetterling J.M. Eimeria tenella. Effect of A-binding sites on invasion of cultured cell by . Eimeria tenella sporozoites //Proc. Helminthol. Soc. Wash. 1984.-Vol. 51.-№1-P. 171-172.

155. Augustine P.,Danforth H.D., Mc Andrew S.J. Monoclonal antibodies reveal antigenicdifferences in refractile bodies in avian Eimeria sporozoites //J. Parasitol. 1988.Vol. 74, №4 P. 653-659.

156. Bach M., Bach J. //Int. J. Immunopharmacol. 1983. - №3. - P. 296274.

157. Carvalho J.C.M. The coccidia of wild rabbits Iowa. II. Experimental studies with Eimeria neoleporis Carvalho, 1942. «Iowa Sta. Coll. J. Sci.», 1944, p. 18.

158. Cerna Z. The specificity of serum antibodies in coccidioses //Folia parasitol. 1970, Vol. 17, №2-P. 135-140.

159. Cerna Z., Zalmanova Z. An attempt to analies antigens from sexual and asexual stages of coccidia by the inderect fluorescense antibody reaction //Fol ia parasitol. 1972.Vol. 19, №2-P. 179-181.

160. Danforth H.D. Use of monoclonal antibodies directed against Eimeria tenella sporozoites to determine stage specificity and in vitro effect on parasite penetration and development //Amer. J. Vet. Res. 1983, Vol.44, №9, p. 1722-1728.

161. Dasgurta A., Shikol В., Bandopadhyaya A. Assian congr. of parasit. Abstr. -Bobey, 23-26 Februfiy, 1978. P. 67.

162. Doran D.J. Cultivation of coccidia in avian embryos and celf culture //The coccidia: Eimeria, Izospora, Toxoplasma, and related genera /Eds. D.M. Hammond, P.L. Long. Baltimore, 1973, p. 183-252.

163. Dougald D.S. Coccidiosis control with ionophorous antibiotics -Zootecn internat., 1980, №3. P. 31-34.

164. Drouet F.-Viard. 6 th world rabbit congress, Toulouse, 1996. P. 15-19.

165. Gill B.S., Ray H.N. The coccidia of the domestic rabbit and the common field hare of India. «Proc. Zool. Soc. Calcutta», 1960, p. 13.

166. Gerasimchik V.A., Jatusevich A.I. //Bulletin of the Scandinavian Society for parasitology. Bornholm. - 1997. - Vol. 7. - №1.- P. 42-45.

167. Gringoli G. Quessada A., Coppola C. Diffusione dei coccidi negli allevamenti cunicoli campani. «Proc. Zool. Soc. Calcutta», 1987, p.16.

168. Haberkorn A.S. Experimental chemotherapy of mammalian coccidiosis with Bay g. 7183 HZh\. Bacteriol. I. Reihe A, 1981. Vol. 250. - P. 260-267.

169. Hollands I., Sigarvoa A., Pimienta R. Variabilidad de la coccidiosis del conejo con relacion a periodos del climatodicas del с zno //Rev. cub. Cienc. Veter. 1988, Vol.19, №3 P. 193-197.

170. Huang Luyi, Chen Hua Inhibitory effect of chemicals on the development of rabbit coccidial oocysts //J. Fujian Agr. College, 1990, №19 P. 7176.

171. John N.V., Zea M.E.R., Kawano Т., Omata Y., Saito A., Toyda Y., Mikami T. Identification of carbohydrates on E.stiedae sporozoites and their role in the incasion of cultured cells in vitro //Veter. Parasitol. 1999. - Vol. 81. - №2. - P. 99-105.

172. Kasim A.A., Shawa Y.R. Coccidia in rabbits (Qryctolagus cuniculus) in Saudi Arabia // Veter. Parasitol. 1987. - Vol. 64. - №5. - P. 84-93.

173. Katiyar S.K., Gordon V.R., Mc Laudhlin G.L., Edlind T.D. Fntiprotozoal activities of benzimidazoles and correlations with betatubulin sequence //Antinicrob. Agents chemother/ 1994 - Vol. 38, №9. - P. 2086-2090.

174. Kintzel P., Hasslinger M.-A. Wirksamkeit und Vertraglichkeit von Robenidine und Diclazuril bei der Bekampfung der Kokzidien des kaninchheens //Prakt. Tierarrzt. 1995. Jg. 76, №3. - P. 250-256.

175. Lajac A.M. The role of gastrointestinal immuniti in parasitic infections of small animals //Seminars in veter. Med. Surg, (small animal). 1987, №2 - P. 4.

176. Lineburg A. Eimeria stiedae: Badania hematologiczne i diochemiczne w przebiegu doswiadczainej inwazji u krolikow //J. «Med. weter.». 1987. - №9. — P. 564-567.

177. Lodge N.J. The safe ionophore anticococcidial //Feed Comrounder. 1985.-№5.-P. 20-25.

178. Long P.L., Jeffers Т.К. Control of chicken coccidiosis //J. «Parasitol. Today». 1986. - №2 - P. 9.

179. Lund E.E. Aspects in the control of intestinal coccidiosis in commercial rabbitries by the use of phthalylsulfathiazole. «J. Parasitol.», 1945, p. 31.

180. Mahmoud A.Z., Ibrahim M.K. Granulomatous hepatitis in balady rabbits associated with coccidial infection //Assiut veter. Med. J. 1989.Vol.21, №42 P. 5559.

181. Meshkov S.N. Проучванне на кокцидиозата при домашните зайци //Veter. Sb. Bolgariy. 1982. - Vol. 80. - №1. - P. 24-25.

182. Mestin G.M., Bellamy L.E. Immunogenicity of the different stages of Eimeria falciformis var. Pragensis //Vet. Parasitol. 1980.Vol.7, №2 P. 87-93.

183. McDougald L.N. Anticoccidial efficacy of salinomycin (ahr-3096C) and compatability with roxarsone in fioor-pen experiments with broileers. Poultry Sc., 1981, Vol. 60 - P. 2416-2422.

184. Mc Dougald L.N. New drugs for coccidiosis control. Poultry Guide, 1981.-Vol. 18.-P. 23-25.

185. Nayak D.C., Rai P. Serum protein profiles in experimental coccidiosis in chicken //J. Indian veter 1986, №2 . - P. 63.

186. Niedzwiadek S. Kokcydioza a zagospodarowania naworu kroliczego //Hodowca drobn. Inwent. — 1989, №37(7/8). P. 17-18.

187. Nogradis S., Sinkovics G., Pascar J. Examinations of the effectiveness of salinomycin administering in different ways in rabbits. Congr. Of the world rabbit science accoiatin. - Proc. Vol. 3, 1988, p. 481-491.

188. Padmavathi P., Muralidharam S.R.G., Krishnaswamy S. A study of the effect of immunosuppression with cyclophosphamide on experimental Eimeria tenella infection //Indian Vet. J. 1988.Vol. 65, №9 P. 775-778.

189. Peeters S.E. et al. Synergistic anicoccidial acbinty of mebichorpidolad methyllenzoquatein in rabbits //Ann. Med. Vet. 1979, p. 745-749.

190. Peeters S.E., Halen P.H. Fieldrial with the coccidiostatics methchlorpinndol and robenidine in a rabbit farm //Ann. Rech. veter. 1980, №11 P. 10.

191. Pellerdy L.P. Die Differentialdiagnose der Gefiugelkokzidiose. -«Angew. Parasitol.», 1965, p. 5.

192. Pellerdy L.P. Coccidia and coccidiosis. Akademia kiado. Budapest, 1974, p. 245-252.

193. Ramisz A. Profilaktyka i zwalczanie Kokcydiozy u zwierzat //Wiad. Parazytol., 1989, №34-P. 551-555.

194. Ray H.N., Banik D. C. On a new coccidium, Eimeria oryctolagi n. sp., from the domestic rabbit, Oryctolagus (Lepus) cuniculus. «Ind. J. Anim. Health», 1965, p. 4.

195. Reduker D.W., Speer C.A. Antigens of in vitro-produced firstgeneration merozoites of Eimeria bovis (Apicomplexa) //J. Parasitol. 1986. Vol. 72, №5 P. 782785.

196. Rose M.E. Infection with Eimeria maxima and E. acervulina in the fowl. Effect previous infection with the heterologous organism on oosyst production //Parasitology.1975.Vol. 70, №2 -P. 263-271.

197. Rose M.E. Immunity to coccidia //Zootecn. Intern. 1985. - №3. - P.53.54.

198. Rose M.E. Immunity to eimeria infections //J. «Veter. Immunol. Immunopathol.». 1987. -№17 - P. 333-343.

199. San Martin-Nuner B.V., Ordonez-Escudero D.T., Alunda J.M. Preventive treeeatment of rabbit coccidiosis with (a)-difluoromethyloornithine //Veter. Parasitol. 1988. - №30. - P. 1-10.

200. Sambeth W.H. Salinomycin for prevention of coccidiosis in rabbits. -Proc. 2d World's Rabbit Congr. Barcelona, 1980, Vol. 2, p. 293-296.

201. Soulsby E., Khoury P. 3 int. Cong. Parasitol., Munchen, 1974. P. 152156.

202. Tsunoda K. Eimeria masubayashii sp. Nov., a new species of rabbit coccidium. «Exp. Rep. Govt. Exp. Anim. Hyg.». Tokyo, 1952, p. 25.

203. Vanparis O., Hermans L., Vander Flaesl, Marsboom R. Efficacy of diclazuril in the prevention and cure intestinal and nepabic coccidiosis in rabbits //J. «Parasitology», 1979,№7-P. 40-44.

204. Vovos G., Barna S. Congr. of the world rabbit science association //Budapest. 1988, №10 - P. 10-14.

205. Wisher M.H. Indentification of the sporozoite antigens of Eimeria tenella //Mol. Biochem. Parasitol. 1986. Vol.21, №1 P. 7-15.

Информация о работе

Шиляева, Юлия Николаевна
кандидата ветеринарных наук
Казань, 2004
ВАК 03.00.19

Диссертация

Эймериоз кроликов в Республике Татарстан - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно