Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Эпизоотологические особенности, диагностика, лечение и профилактика псевдомоноза и энтерококкоза нутрий

ВАК РФ 06.02.02, Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов

Автореферат диссертации по теме "Эпизоотологические особенности, диагностика, лечение и профилактика псевдомоноза и энтерококкоза нутрий"

005531903

На правах рукописи

Баженова Екатерина Анатольевна

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА ПСЕВДОМОНОЗА И ЭНТЕРОКОККОЗА НУТРИЙ

06.02.02. - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

- 8 АВГ 2013

Краснодар - 2013

005531903

Работа выполнена на кафедрах микробиологии, эпизоотологии и вирусологии; паразитологии, ветсанэкспертизы и зоогигиены ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»

Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор

кафедры паразитологии, ветсанэкспертизы и зоогигиены ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» Шевченко Людмила Васильевна

Официальные онноненты: доктор ветеринарных наук, заведующая

лабораторией терапии ГНУ «Краснодарский научно-исследовательский ветеринарный институт РАСХН» Басова Наталья Юрьевна

кандидат ветеринарных наук, заведующая отделом ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБУ «Краснодарская межобластная ветеринарная лаборатория» Марченко Татьяна Витальевна

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Донской государственный

аграрный университет»

Защита диссертации состоится «29» августа 2013 г. в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.038.07 при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» по адресу: 350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» (350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13).

Автореферат размещен на официальном сайте ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ» — http://www.kubsau.ru «26» июля 2013 г. и официальном сайте ВАК РФ — http://www.vak.ed.gov.ru. '

Автореферат разослан «29» июля 2013 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

И.А. Родин

1. Общая характеристика работы

Актуальность темы. Нутриеводство - перспективная отрасль пушного звероводства. От нутрий получают вкусное диетическое мясо, ценные шкурки различных расцветок. Мясо нутрий сочное, нежное и по вкусовым свойствам лучше мяса птицы и кроликов, а по количеству белка превосходит говядину, баранину и свинину, так как содержит относительно мало жира. В мясе мало холестерина. Поэтому его рекомендуют детям, беременным женщинам и кормящим матерям, а также людям с сердечно-сосудистыми заболеваниями (В.Ф. Кладовщиков, 2002; H.A. Балакирев, 2012; М.В. Петров, 2013).

Разведением нутрий в России занимаются в различных климатических зонах государственные, фермерские хозяйства и нутриеводы-любители, но преимущественно в южных регионах (Г.А. Кузнецов, Е.Г. Сергеев, О.И. Федоров, 2003; И.А. Плотников, 2003). Стабильному развитию нутриеводства препятствуют бактериальные болезни: колибактериоз, псевдомоноз, энтерококкоз, стрептококкоз, сальмонеллез, пастереллез, стафилококкоз. Они регистрируются во многих развитых странах мира, в том числе и в России, наносят значительный экономический ущерб отрасли и протекают в последние годы преимущественно ассоциативно (Л.П. Миронова, 1999, 2000, 2001; В.Н. Александров, 2002; С.Н. Треглазов, JI.A. Малышева, 2003).

Надежной защитой нутрий от инфекционных болезней является специфическая профилактика. Применение ассоциированных вакцин в звероводстве, включающих несколько антигенов, позволяет снизить стрессовые ситуации у прививаемых животных, уменьшить трудозатраты и создать напряженный иммунитет в сжатые сроки (И.А. Плотников, О.Ю. Беспятых, 2003; В.А. Есепенок и соавт., 2005). По мнению многих ученых, инактивированные вакцины, изготовленные из штаммов возбудителей инфекционных болезней, выделенных в период эпизоотии, обладают более высокими антигенными и иммуногенными свойствами и способствуют созданию иммунитета1 достаточной напряженности (Р.Т. Маннапова, 1998; H.H. Шульга, 2006).

Учитывая сложную эпизоотическую обстановку, обусловленную совместным действием различных возбудителей, терапия заболеваний и разработка новых ассоциированных вакцин является одним из важнейших современных направлений в области инфекционной патологии животных.

Цель н задачи исследований. Цель исследований - изучить особенности эпизоотического процесса, идентифицировать возбудители и разработать систему лечебных и профилактических мероприятий при псевдомонозе и энтеро-коккозе нутрий.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи: • изучить эпизоотическую ситуацию по инфекционным болезням нутрий и особенности эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерококкозе: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфологические изменения;

• провести индикацию и идентификацию культур Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) и Enterococcus faecalis (E. faecalis), циркулирующих у нутрий;

• разработать технологию изготовления и изучить иммунобиологические свойства новых моно- и ассоциированной гидроокисьалюминиевых формол-вакцин (ГОА-формолвакцин) против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий;

• изучить лечебное действие антибактериальных препаратов при псев-домонозе и энтерококкозе нутрий;

• разработать мероприятия по профилактике и ликвидации псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Научная новизна. Впервые изучены особенности эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфологические изменения.

Впервые проведена разработка технологии изготовления и изучены иммунобиологические свойства новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в экспериментальных и производственных условиях.

Определена чувствительность выделенных культур к антимикробным препаратам, P. aeruginosa: цефотаксиму, амикацину, энрофлоксацину, стрептомицину, ампициллину, рифампицину, гентамицину, неомицину; Е. faecalis: цефотаксиму, цефалексину, энрофлоксацину, амоксициллину, рифампицину, ле-вомицетину. Препараты цефосин и энроксил 5% впервые применены для терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Апробирована и внедрена в ветеринарную практику высокоэффективная комплексная система мероприятий по профилактике и терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. Материалы диссертационной работы использованы при подготовке «Рекомендаций по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

Научная новизна диссертационной работы подтверждена шестью патентами РФ на изобретение: № 2288002 «Способ изготовления вакцины против эн-терококковой инфекции нутрий», № 2288003 «Вакцина против энтерококковой инфекции нутрий», № 2388487 «Способ изготовления вакцины против псевдомоноза нутрий», № 2388488 «Вакцина против псевдомоноза нутрий», № 2388489 «Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий», № 2389505 «Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий».

Теоретическая и практическая значимость диссертационной работы. Результаты проведенных исследований послужили теоретическим обоснованием для разработки и внедрения в производство новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий из эпизоотических штаммов P. aeruginosa и Е. faecalis. Для лечения псевдомоноза и энтерококкоза нутрий предложены эффективные антибактериальные препараты цефосин и энроксил 5 %. Разработана комплексная высокоэффективная система

мероприятий по профилактике и терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

• результаты изучения эпизоотической ситуации по инфекционным болезням нутрий и особенностей эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфологические изменения;

• результаты исследований по индикации и идентификации культур P. aeruginosa и Е. faecalis, циркулирующих у нутрий;

• результаты разработки технологии изготовления и методов контроля новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий;

• результаты изучения иммунобиологических свойств и эффективности новых инактивированных моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в экспериментальных и производственных условиях;

• результаты изучения эффективности антибактериальных препаратов при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий;

• комплексная высокоэффективная система мероприятий по профилактике и терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследований диссертационной работы были доложены и одобрены на 3-ей Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (г. Краснодар, 2009 г.); на заседаниях ученого совета Кубанского государственного аграрного университета (г. Краснодар, 2009 - 2013 гг.); на научных конференциях сотрудников и аспирантов факультета ветеринарной медицины КубГАУ (г. Краснодар, 2010 — 2013 гг.); на 5-ой международной научно-практической конференции молодых ученых (г. Краснодар, 2011 г.); на 2-ой международной научно-практической конференции «Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения» (г.Краснодар, 2011г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 5 в журналах, рецензируемых ВАК РФ, а также «Рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 161 странице текста компьютерного исполнения, включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, предложения производству, список использованной литературы, приложения. Текст диссертационной работы иллюстрирован 49 рисунками и 17 таблицами. Список литературы содержит 179 источников, из числа которых 35 иностранных.

2. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период с 2008 по 2012 гг. на базе кафедр микробиологии, эпизоотологии и вирусологии; паразитологии, ветсанэкспертизы и зоогигиены ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет» в соответствии с темой, государственный регистрационный № 01.2.00606830, ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория», в индивидуальных подсобных хозяйствах Краснодарского края.

При выполнении диссертационной работы было проведено: 1437 клинических исследований нутрий, из них больных 231; 87 патологоанатомических вскрытий, изготовлено 437 гистологических препаратов; 398 бактериологических и 398 биохимических исследований, выделено 315 культур P. aeruginosa и Е. faecalis; на чувствительность к антибактериальным препаратам исследовано 590 культур (165 культур P. aeruginosa; 424 культуры Е. faecalis).

Эпизоотические особенности псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в хозяйствах Краснодарского края изучали, анализируя статистические данные отчетности государственного управления ветеринарии Краснодарского края и ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория», и результаты собственных исследований за последние 5 лет (2008-2012 гг).

Для определения патогенности возбудителей, испытаний вакцин на безвредность, реактогенность, иммуногенность, пассажей и титрования возбудителей использовали 697 белых беспородных мышей (Murius) массой 17-22 г, нутрий (Myocastor coypus) различного возраста и окраса — 1435 голов. Нутрии были клинически здоровы. Животные были подобраны по принципу параналогов (по породной принадлежности, возрасту, физиологическому состоянию, упитанности). Рационы животных соответствовали нормам, разработанным в НИИ пушного звероводства и кролиководства им. В. А. Афанасьева (1966).

В работе использовали чистые культуры возбудителей псевдомоноза (P. aeruginosa) и энтерококкоза (Е. faecalis), выделенные от вынужденно убитых и павших нутрий в Краснодарском крае.

Бактериологические посевы проводили из легких, печени, брыжеечных лимфоузлов, почек, сердца, содержимого кишечника, крови, головного мозга от вынужденно убитых и павших нутрий.

Культуральные свойства бактериальных культур оценивали по характеру роста на мясо-пептонном агаре (МПА), мясо-пептонном бульоне (МПБ) с 1% глюкозы, ЭДДС (энтерококковая дифференциально-диагностическая среда), среде с теллуритом калия, ЦПХ-агаре, кровяном агаре (5 % эритроцитов барана).

Идентификацию выделенных бактериальных культур осуществляли по культуральным, морфологическим, тинкториальным свойствам в соответствии с нормативными документами: «Методические указания по лабораторным исследованиям на псевдомоноз животных и птиц», рекомендованные ГУВ МСХ

СССР № 432 - 3 от 14. 11. 1988 г., «Методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных», утвержденные 25 сентября 1990 г., «Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псев-домоноза сельскохозяйственных животных», рекомендованные отделением ветеринарной медицины РАСХН в 2003 г.

Биохимическую активность выделенных бактериальных культур оценивали на микробиологическом анализаторе Мультискан с программным обеспечением «Система микробиологического мониторинга «Микроб-Автомат», а также тест-систем «НЕФЕРМтест24» и «ЭН-коккус тест» фирмы PLIVA-Lachema Diagnostika, Чехия.

Патогенные свойства псевдомонад и энтерококков определяли внутри-брюшинным заражением беспородных белых мышей массой 17-22 г. Культуру считали патогенной, если в течение 5 дней из 3-х инфицированных мышей выживало не более одной.

Безвредность моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий оценивали на белых беспородных мышах массой 17-22 г, нутриях в возрасте 40-60 дней путем соответственно подкожного и внутримышечного введения им вакцины в 3-5-кратной иммунизирующей дозе, выявляемой опытным путем на белых мышах, нутриях.

Иммуногенность вакцинных препаратов оценивали по проценту выживаемости (защиты) привитых нутрий (белых мышей) после заражения их вирулентными возбудителями псевдомоноза (P. aeruginosa) и энтерококкоза (E.faecalis) в летальных дозах, определяемых предварительным титрованием на нутриях и белых мышах.

Патоморфологические исследования проводили по общепринятым методикам (Г. А. Меркулов, 1969). Во время вскрытия трупов нутрий отбирали кусочки пораженных органов: печени, почек, селезенки, сердца, легких, кишечника, лимфоузлов, фиксировали в 10 % нормальном растворе формалина, изготавливали парафиновые срезы толщиной 6-8 ц, окрашивали гематоксилином и эозином и при помощи микроскопа МБИ-15 с цифровой камерой изучали и фотографировали их.

Определение чувствительности выделенных штаммов P. aeruginosa и Е. faecalis к антибактериальным препаратам проводили методом диффузии в агар с применением дисков согласно методическим указаниям по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных (М.,1972), рекомендаций по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (А.В. Скориков, 2005).

Серологическую типизацию выделенных штаммов P. aeruginosa определяли в реакции агглютинации (РА) со специфическими сыворотками (Д.И. Скородумов, 2005).

Экономический ущерб и эффективность лечебно-профилактических мероприятий определяли по утвержденному Главветупром СССР документу: «Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий» (М., 1982 г.).

Для обработки цифровых данных применяли компьютер с использованием стандартных прикладных программ «Microsoft Word», «Microsoft Excel» и «Adbe PhotoShop».

3. Результаты собственных исследований

3.1 Эпизоотическая ситуация по инфекционным болезням нутрий в Краснодарском крае

Для изучения эпизоотической ситуации по инфекционным болезням нутрий провели анализ уровня заболеваемости и падежа нутрий от инфекционных болезней в Краснодарском крае в сравнительном аспекте и динамике. За основу были взяты ветеринарная отчетность по инфекционной патологии нутрий в этом регионе за 2008-2012 гг. и результаты собственных исследований - количество и видовой состав выделенных культур возбудителей. Установили, что в течение последних пяти лет (2008-2012 гг.) заболеваемость и падеж нутрий в Краснодарском крае регистрируются ежегодно от различных бактериальных болезней: колибактериоза, псевдомоноза, энтерококкоза, стрептококкоза, ста-филококкоза, сальмонеллеза, пастереллеза, анаэробной дизентерии, листериоза. Доминируют среди них колибактериоз, псевдомоноз, энтерококкоз.

В нозологическом профиле инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае в данный период колибактериоз составил 31 %, псевдомоноз -21 %, стрептококкоз и энтерококкоз по - 11%, стафилококкоз — 8 %, сальмо-неллез - 7 %, пастереллез - 6 %, анаэробная энтеротоксемия - 3 %, листериоз — 2 % (рис. 1).

сал ьмонеллез

пастереллез

6%

колибактериоз. 31%

стафилококков _стррптококкоч 8%

листериоч анаэробная энтеротоксемия 3%

энтерококкоз 11%

Рисунок 1 - Нозологический профиль инфекционных болезней нутрий в Краснодарском крае (2008 - 2012 гг.)

При изучении удельного веса энтерококкоза в течение срока наблюдения (2008 — 2012 гг.) выявили динамичный рост энтерококкоза нутрий в нозологическом профиле инфекционных болезней нутрий в Краснодарском крае от 11 % (2008 г.) до 26% (2012 г.).

Удельный вес псевдомоноза в инфекционной патологии нутрий в течение последних пяти лет (2008 - 2012 гг.) колебался от 15 до 27 %.

Таким образом, псевдомоноз и энтерококкоз в инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае играют важную роль и наносят нутриеводству значительный экономический ущерб.

3.2 Диагностика, клинические признаки, иатоморфологические изменения при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий

Диагностику псевдомоноза и энтерококкоза нутрий проводили на основании эпизоотологических данных, клинических симптомов, патолого-морфологических изменений и лабораторных исследований - бактериологического исследования патологического материала от вынужденно убитых и павших нутрий. Оно включало:

• обнаружение в исходном материале возбудителя при помощи светового микроскопа (световая микроскопия),

• выделение чистой культуры посевом на питательные среды или методом биопробы,

• идентификацию возбудителя по морфологическим, тинкториальным, культуральным, серологическим, патогенным признакам и биохимической активности с использованием микробиологического анализатора Мультискан.

Лабораторные исследования по диагностике псевдомоноза и энтерококкоза нутрий проводили на базе ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория».

При изучении клинического проявления псевдомоноза нутрий установили, что псевдомонозом чаще болеет молодняк, начиная с первых дней жизни, но наиболее восприимчивы щенки в возрасте от 45-50 дней до 3-х месяцев. Течение болезни острое. Отмечается потеря аппетита, вялость, повышение температуры (39,5 - 40,5 °С). Нутрии чихают. В дальнейшем у нутрий развивается понос, серозно-гнойные истечения из носовых отверстий, которые в дальнейшем формируют корки. Перед гибелью дыхание учащается и становится напряженным.

Беременные самки абортируют или рождают мертвых щенков, отмечаются маститы и эндометриты. Болезнь у новорожденных протекает сверх остро без явных симптомов и с летальным исходом.

При патологоанатомическом вскрытии щенков нутрий в 39 % случаев на плевре и брюшине, под капсулой почек и селезенки отмечали ярко выраженный геморрагический диатез, в 31 % выявляли серозно-катаральную или сероз-но-геморрагическую бронхопневмонию, в 15 % отмечали альтеративный гепатит, в 10 % определяли альтеративный нефрит и в 5 % - альтеративный миокардит.

При патогистологическом исследовании у большинства животных в легких отмечали серозно-катаральную или серозно-геморрагическую бронхопневмонию, у нескольких животных - некротическую бронхопневмонию, которая

характеризовалась некрозом воздухопроводящего и респираторного отдела легких. В почках у большинства животных регистрировали зернистую или жировую дистрофию эпителия канальцев. Зернистая дистрофия характеризовалась неравномерным окрашиванием цитоплазмы и увеличением объема эпителиоци-тов. В отдельных канальцах отмечали некроз, который сопровождался пикно-зом, лизисом или рексисом ядер. В печени в большинстве случаев выявляли зернистую дистрофию, которая характеризовалась нарушением балочной структуры в виде искривления и дискомплексации балок, а также увеличением размера гепатоцитов, приобретением округлой формы и неравномерной окраской цитоплазмы. В сердце отмечали зернистую дистрофию и атрофию миокарда, которая характеризовалась истончением кардиомиоцитов, неплотным прилеганием их друг к другу.

К энтерококкозу восприимчивы нутрии всех возрастов, но чаще всего заболевали беременные самки и щенки в возрасте от 1 до 3-х месяцев. Заболевание возникало в период массового щенения самок, при отсадке потомства и формировании групп для косячной случки. В основном энтерококкоз нутрий протекал остро. У больных животных отмечали повышение температуры до 41 °С, выделение кровянистой жидкости из носовых ходов, поносы с примесью крови, снижение и отсутствие аппетита, парез задних конечностей. Больные животные погибали в течение 3-5 суток.

У больных самок рождались недоразвитые или мертворожденные щенки, а также происходили массовые аборты во второй половине беременности. В некоторых случаях болезнь заканчивалась гибелью беременных самок.

При патологоанатом ическом исследовании у абортированных плодов и мертворожденных щенков в 37 % случаев отмечали катарально-геморрагический или серозно-геморрагический гастроэнтероколит, в 26 % -белковую и жировую дистрофию печени и миокарда, в 23 % - геморрагический диатез на плевре, брюшине, под капсулой почек и селезенки, в 6 % - продуктивный или геморрагический спленит, в 4 % - серозно-катаральную бронхопневмонию и в 4 % - интерстициальный продуктивный нефрит.

При гистологическом исследовании в желудке и кишечнике выявляли острое серозно-геморрагическое воспаление, которое характеризовалось слизистой дистрофией желудочных желез и кишечных ворсинок, некрозом и десква-мацией эпителия, гиперемией сосудов и геморрагиями. В сердце отмечали зернистую дистрофию и атрофию кардиомиоцитов, гиперемию сосудов и геморрагии. В печени отмечали зернистую и жировую дистрофию, кариолизис и карио-пикноз гепатоцитов, дискомплексацию балок и пролиферацию лейкоцитов, преимущественно нейтрофильного и лимфотического ряда. В желудочных, брыжеечных и портальных лимфатических узлах в фолликулах отмечали увеличение количества малых и средних лимфоцитов, а также гиперемию синусов. В почках определяли острый диффузный интерстициальный нефрит, который характеризовался пролиферацией клеток соединительной ткани с преобладанием в пролиферате полибластов и эпителиоидных клеток.

3.3 Разработка технологии изготовления и контроля инактивированных моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий

Коммерческие вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в России не выпускаются. Эпизоотическая ситуация по инфекционной патологии нутрий в Краснодарском крае за последние пять лет (2008-2012 гг.) свидетельствует о необходимости специфической профилактики псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. Поэтому на следующем этапе исследований нами была отработана технология изготовления новых моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. С этой целью изучили биологические свойства 315 культур P. aeruginosa и Е. faecalis, выделенных от нутрий.

Основываясь на проведенных исследованиях по иммуногенности, анти-генности, стабильности подобрали штаммы P. aeruginosa (018), Е. faecalis для изготовления вакцин. Накопление бактериальной массы культур P. aeruginosa и Е. faecalis, отобранных для производства вакцин, изучали на питательных средах: МПБ с 1 % глюкозы, глюкозо-сывороточном бульоне, бульоне Хоттингера с 1 % глюкозы. Наиболее доступным и дешевым является МПБ с глюкозой, который и был взят нами для получения бактериального сырья для производства вакцин. Применение МПБ дает возможность достичь необходимой концентрации микробных клеток - 4-8 млрд м.к./см3.

Штаммы P. aeruginosa, Е. faecalis для изготовления опытных образцов ГОА-формолвакцин освежали в МПБ с 1% глюкозы, рН 7,4 - 7,6, при 37 °С, в течение 18-20 ч. Культуры контролировали на чистоту роста на питательных средах: МПА, МПБ, агаре и бульоне Сабуро, среде Китта-Тароцци, микроскопией мазков, окрашенных по Граму.

Во флаконах объемом 250 мл отдельно нарабатывали матровую расплод-ку культур P. aeruginosa, Е. faecalis. В каждый флакон вносили 80-100 мл МПБ с 1% глюкозы, рН 7,4 - 7,6 и 1-2 мл освеженной культуры P. aeruginosa или Е. faecalis концентрацией 4-8 млрд м.к./см3. Посевы инкубировали при 37 °С в течение 18-24 ч с последующей проверкой на чистоту роста на вышеуказанных питательных средах, микроскопией мазков, окрашенных по Граму.

В 3-5-литровых ёмкостях нарабатывали биологическую массу P. aeruginosa, Е. faecalis. В каждую из них вносили МПБ с 1 % глюкозы и 5-10 % матровой расплодки культуры от объема питательной среды. Посевы инкубировали при 37 °С в течение 18-24 ч, рН 7,7 - 7,8. Культуры проверяли на чистоту роста на вышеуказанных питательных средах, микроскопией мазков, окрашенных по Граму.

Инактивацию бактериального сырья с концентрацией P. aeruginosa, Е. faecalis 4—8 млрд м. к./см3 проводили отдельно путем внесения 0,4 % формалина в конечной концентрации при температуре 37 "С продолжительностью 48-96 ч. Проверяли полноту инактивации посевом на МПА, МПБ, среду Эндо, агар и бульон Сабуро, среду Китта-Тароцци. При наличии роста проводили

контроль безвредности на белых мышах и наблюдали за их клиническим состоянием в течение 10 дней.

В процессе исследований разработали наиболее оптимальные режимы инактивации для P. aeruginosa и Е. faecalis нутрий, основанные на действии 0,4 % формалина при температуре 37±3 °С. Это позволило существенно - в 4 раза уменьшить время инактивации микроорганизмов в отличие от традиционной технологии.

Инактивированную бактериальную массу стандартизировали путем доведения до концентрации 4 млрд м.к./см3 и внесения адъюванта - 6 %-ного гидрата окиси алюминия до 10; 20; 30 % к объему и выдерживания с ним при температуре 20-25 °С 12-24 ч.

На основании полученных данных в процессе исследований нами разработано схематическое представление технологии производства инактивирован-ной ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

3.4 Исследование иммунобиологических свойств моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в опытных условиях

На основе вирулентных штаммов P. aeruginosa и Е. faecalis по разработанной нами технологии были изготовлены экспериментальные образцы инак-тивированных моновакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий: серия № 1 - гидроокисьалюминиевая формолвакцина (ГОА-формолвакцина); серия № 2 - формолвакцина с масляным адъювантом; серия № 3 - формолвакцина без адъюванта.

При изучении иммуногенности и безвредности серий вакцин на нутриях в возрасте 45-60 дней установили, что после однократной внутримышечной прививки зверей одной из ГОА-формолвакцин в дозе 0,5 см3 у животных через 14 суток формируется напряженный иммунитет, обеспечивающий 80 % защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции. У нутрий, иммунизированных формолвакцинами с масляным адъювантом и формолвакцинами без адъюванта, защита животных от возбудителя соответствующей инфекции составила 60%.

При определении иммунобиологических свойств ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий после двукратной внутримышечной прививки (первая доза - 0,5 см3, вторая - 1,0 см3 с интервалом 10 суток) у животных не наблюдали поствакцинальных осложнений, через 14 суток после ревакцинации у привитых зверей формировался напряжённый иммунитет, обеспечивающий 100%-ную защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции.

Таким образом, разработанные нами и испытанные в лабораторных условиях ГОА-формолвакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий были безвредными и высокоиммуногенными, обеспечивали после одно- и двукрат-

ной иммунизации соответственно 80 и 100 %-ную защиту животных от возбудителя соответствующей инфекции.

Учитывая широкое распространение псевдомоноза и энтерококкоза в нутриеводческих хозяйствах Краснодарского края и их ассоциативное течение, а также отсутствие коммерческой ассоциированной вакцины против данных болезней нутрий, по разработанной нами технологии на основе выделенных и изученных штаммов P. aeruginosa и Е. faecalis накапливали раздельно бактериальное сырье. После инактивации его раствором формалина в 0,4 % концентрации при температуре 37±3 °С и проверки полноты инактивации компоненты смешивали в разных соотношениях (1:1; 1:2; 1:3), добавляли 10, 20, 30 % гидрата окиси алюминия, перемешивали, выдерживали в течение суток при температуре 19-25 °С, фасовали во флаконы с последующей укупоркой и оценивали качество по разработанным нами методам контроля.

Иммуногенность вакцины оценивали на белых мышах массой 17- 22 г, предварительно определив для них иммунизирующую дозу антигенов псевдомоноза и энтерококкоза, а также соответствующие дозы для заражения данными вирулентными возбудителями. Исследования показали, что через 14 суток после однократной подкожной прививки ассоциированной вакциной против псевдомоноза и энтерококкоза в дозе 0,5 см3 у белых мышей формировался напряженный иммунитет, обеспечивающий соответственно 80 и 90 %-ную защиту лабораторных животных от P. aeruginosa и Е. faecalis. Поствакцинальных осложнений у белых мышей не отмечали.

Учитывая, что иммуногенная активность ассоциированных вакцин во многом зависит от правильного подбора их компонентов, мы изучили влияние соотношения антигенов и компонентов в ассоциированной вакцине против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий на ее иммуногенную активность. Выявлено, что при соотношении антигенов псевдомоноза и энтерококкоза 1:1 и 20 % гидрата окиси алюминия ассоциированная вакцина через 14 суток после двукратной иммунизации белых мышей подкожно с интервалом 10 суток в дозе 0,5 см3 обеспечивала соответственно 80 и 90 %-ную защиту лабораторных животных от P. aeruginosa и Е. faecalis. Поствакцинальных осложнений у животных не отмечали.

На следующем этапе исследований определили оптимальную иммунизирующую дозу ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза для нутрий. Для этого брали по 4 животных в возрасте 1,5-2 месяца на каждую дозу биопрепарата (0,25; 0,5; 1,0; 2,0 млрд микробных клеток) и прививали однократно внутримышечно в область бедра. Установили, что оптимальной иммунизирующей дозой ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза для нутрий является 1,0 млрд микробных клеток каждого вида. Такая доза обеспечивает 100 %-ную защиту вакцинированных нутрий от вирулентных возбудителей псевдомоноза и энтерококкоза при 100 %-ных заболевании и гибели невакцинированных животных (контроль).

Иммуногенность и безвредность ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза оценивали на 5 нутриях в возрасте 1,5-2 месяца.

Биопрепарат вводили внутримышечно однократно в дозе 1,0 см3. Через 14 суток после вакцинации заражали иммунизированных и не привитых нутрий P. aeruginosa (2 млрд м.к./см3) и Е. faecalis (2 млрд м.к./см3). У нутрий через 14 суток после однократной внутримышечной прививки ассоциированной вакциной в дозе 1,0 см3 формировался напряженный иммунитет, обеспечивающий соответственно 80 и 100 %-ную зашиту животных от P. aeruginosa и Е. faecalis. Поствакцинальных осложнений у животных не отмечали.

На следующем этапе исследований изучили влияние различных доз и схем иммунизации нутрий ассоциированной вакциной против псевдомоноза и энтерококкоза. Для этого пушных зверей в возрасте 1,5-2 месяца иммунизировали внутримышечно двукратно с интервалом 7 суток (первая доза — 0,5 см3, вторая - 1,0 см3) и 10 суток (первая доза - 1,0 см3, вторая - 1,5 см3) и через 14 суток после ревакцинации привитых животных вместе с контрольными (не вакцинированными) реинфицировапи P. aeruginosa и Е. faecalis. За нутриями вели наблюдение в течение 30 дней. Установили, что у нутрий после иммунизации ассоциированной вакциной двукратно с интервалом 7 суток формировался иммунитет, обеспечивающий 100 %-ную защиту животных от P. aeruginosa и 60 %-ную защиту нутрий от Е. faecalis, с интервалом 10 суток - 100 %-ную защиту пушных зверей от P. aeruginosa и Е. faecalis (таб. 1).

3.5 Исследование иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в производственных условиях

Производственные испытания ассоциированной вакцины проводили в ЛПХ Кавказского и Тбилисского районов Краснодарского края. С этой целью по ранее разработанной нами технологии были изготовлены две серии ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий и проверены на безвредность и иммуногенность на нутриях. Иммунизации было подвергнуто 500 голов нутрий в возрасте 1,5-2 месяца. Животных вакцинировали внутримышечно в дозе 1,0 см3 в область бедра. Повторную прививку проводили через 10 суток в дозе 1,5 см3. За иммунизированными животными вели наблюдение в течение 9 месяцев.

Для оценки напряженности иммунитета у привитых нутрий нами было изучено накопление специфических антител. У щенков контрольной и опытной групп до прививки и в течение 9 месяцев с интервалом в 30 суток после иммунизации перед кормлением из боковой вены хвоста брали кровь. Уровень антител в сыворотке крови вакцинированных нутрий определяли выборочно (у 6 % животных) в РА к P. aeruginosa, в РП - к Е. faecalis. Серологические реакции ставили по общепринятым методикам.

Установили, что у нутрий, привитых ассоциированной вакциной против псевдомоноза и энтерококкоза двукратно, отклонений от физиологической нормы не было, через 14 суток после ревакцинации нутрий формировался напряженный иммунитет. Уровень специфических антител в сыворотке крови

Таблица 1 - Эффективность различных доз и схем иммунизации нутрий ассоциированной вакциной против

псевдомоноза и энтерококкоза

Вакцина Интервал между прививками, дни Объем вакцины, см3 Результаты реинфицирования нутрий через 14 суток

P. aeruginosa Е. faecalis

Кол-во животных, гол. пало выжило Кол-во животных, гол. пало выжило

Кол-во животных, гол. % Кол-во животных, гол % Кол-во животных, гол. % Кол-во животных, гол. %

Ассоциированная вакцина против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий* 7 первая доза-0,5; вторая доза - 1,0 5 0 0 5 100 5 2 40 3 60

10 первая доза - 1,0; вторая доза -1,5 5 0 0 5 100 5 0 0 5 100

Контроль (невакцинированые) 5 5 100 0 0 5 5 100 0 0

♦безвредна

вакцинированных нутрий через 30 суток к P. aeruginosa и Е. faecalis составил соответственно 28,80±5,34 и 33,07±5,46, а через 9 месяцев наблюдения -15,47±1,45 и 18,40±4,66, обеспечивающий 95,3 %-ную защиту иммунизированных животных от вирулентных возбудителей псевдомоноза и энтерококкоза.

Таким образом, испытания в производственных условиях ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий показали, что новая вакцина безвредна и высокоиммуногенна. Получено два патента РФ: № 2388489 «Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий», № 2389505 «Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий».

Разработанные нами методы контроля моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза на безвредность и иммуногенную активность (белые мыши и нутрии), реактогенность (нутрии), стерильность позволяют выпускать безопасные, стерильные и высокоиммуногенные вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

3.6 Разработка лечения при псевдомонозе п энтерококкозе нутрий

Чувствительность P. aeruginosa к антимикробным препаратам изучали на 165 эпизоотических культурах, выделенных от пушных зверей, сельскохозяйственных животных и птиц методом диффузии в агар с использованием стандартных коммерческих дисков. Культуры были проверены на чувствительность к наиболее часто применяемым антибиотикам: амоксициллину, эритромицину, тетрациклину, стрептомицину, неомицину, цефазолину, канамицину, лево-мицетину, полимиксину, амикацину, цефотаксиму, карбенициллину, цефалек-сину, гентамицину, энрофлоксацину, ципрофлоксацину, фуразолидону, азло-циллину, ампициллину, доксициклину, рифампицину, оксациллину, клиндами-цину, окситетрациклину, зинаприму, польодоксину, триметоприм+сульфа, док-сипрексу, сизомицину, офлоксацину, нетилмицину, пенициллину, меропенему, цефтазидиму, цефалотину - всего 35 препаратов.

Установили, что изоляты P. aeruginosa наиболее чувствительны к цефотаксиму - 98 % (163 культуры), амикацину - 94 % (156 культур), энрофлоксацину - 88,5 % (147 культур), стрептомицину - 72,9 % (121 культура), ампициллину - 71,1 % (118 культур), рифампицину - 69,3 % (115 культур), гентамицину - 69,3 % (115 культур), неомицину - 66,3 % (110 культур) (рис. 2).

Изоляты P. aeruginosa были устойчивы к клиндамицину, нетилмицину, зинаприму, окситетрациклину, офлоксацину, оксациллину, польодоксину, цефалотину, триметоприму+сульфа, пенициллину, меропенему.

Таким образом, нами установлено, что наиболее эффективными антибактериальными препаратами при псевдомонозе являются: цефотаксим, амикацин, энрофлоксацин, стрептомицин, ампициллин, рифампицин, гентамицин, неоми-цин, это позволяет рекомендовать их для лечения заболеваний, вызванных P. aeruginosa у пушных зверей, сельскохозяйственных животных и птиц.

Алликацин 94%

Цефотаксим 98%

Стрелтоллицин 72,9%

Неомицин 66,3%

Ампициллин 71,1%

Рисунок 2 - Чувствительность изолятов P. aeruginosa к антибиотикам

Чувствительность Е. faecalis к антимикробным препаратам изучали на 424 эпизоотических культурах, выделенных от пушных зверей, сельскохозяйственных животных и птиц методом диффузии в агар с использованием стандартных коммерческих дисков. Культуры были проверены на чувствительность к наиболее часто применяемым антибиотикам: амоксициллину, эритромицину, тетрациклину, стрептомицину, неомицину, цефазолину, канамицину, лево-мицетину, полимиксину, амикацину, цефотаксиму, карбенициллину, цефалек-сину, гентамицину, энрофлоксацину, ципрофлоксацину, фуразолидону, азло-циллину, ампициллину, доксициклину, рифампицину, оксациллину, клиндами-цину, окситетрациклину, зинаприму, польодоксину, триметоприм+сульфа, док-сипрексу, сизомицину, офлоксацину, нетилмицину, пенициллину — всего 32 препарата.

Установили, что изоляты Е. faecalis наиболее чувствительны к цефотаксиму - 90,3 % (383 культуры), цефалексину - 70,3 % (298 культур), энрофлоксацину - 68,9 % (292 культуры), амоксициллину - 68,2 % (289 культур), рифампицину - 65,8 % (279 культур), левомицетину - 60,8 % (258 культур) (рис. 3).

Цефалексин 70,3%

Рифампицин 65,8%

Амсжсициллин 68,2%

Цефотаксим 90,3%

Энрофлоксацин 68,9%

Левомицетин 60,8%

Рисунок 3 - Чувствительность изолятов Е. faecalis к антибиотикам

Установили устойчивость изолятов Е. ГаесаНв к триметоприму+сульфа, зинаприму, польодоксину, окситетрациклину, клиндамицину, оксациллину, карбенициллину, пенициллину, доксипрексу.

Таким образом, нами установлено, что наиболее эффективными антибактериальными препаратами при энтерококкозе являются: цефотаксим, цефалек-син, энрофлоксацин, амоксициллин, рифампицин, левомицетин, что позволяет рекомендовать их для лечения энтерококкоза пушных зверей, сельскохозяйственных животных и птиц.

Для испытаний в производственных условиях отобрали антибиотики, которые обладают бактерицидным действием к исследуемым культурам: цефос-ин, энроксил 5 % в сравнении с биофузолом. Терапевтическую эффективность лечебных препаратов определяли на нутриях в возрасте 40-50 дней при псевдо-монозе и энтерококкозе нутрий в ЛПХ. Испытание каждого препарата проводили на 80 больных нутриях, которым давали препараты в соответствии с инструкцией по применению: биофузол с кормом по 0,5 г препарата на одно животное на протяжении 12 дней, энроксил 5 % вводили внутримышечно в дозе 0,1 мл на 1 кг массы тела 1 раз в день в течение 7 дней, цефосин вводили внутримышечно в дозе 50 мг на 1 кг массы (разбавителем служил лидокаин) в течение 3-х дней. Результаты исследований представлены в таблице 2.

Таблица 2 — Терапевтическая эффективность антибиотиков при лечении псевдомоноза и энтерококкоза нутрий

Животные Препараты Дни терапии Р. аепщнкка Е. Гаеса1к

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 Э 1 1 1 2 Выздоровело Пало Выздоровело Пало

гол % гол. % гол. % гол %

Больные нутрии Цефосин + + + 77 96,25 3 3,75 79 98,75 1 1,25

Энроксил + + + + + + + 75 93,75 5 6,25 76 95 4 5

Биофузол + + + + + + + + + + + + 54 67,5 26 32,5 58 72,5 22 27,5

Таким образом, в производственных условиях при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий высокую терапевтическую эффективность показали цефосин

(96,25-98,75 %) и энроксил 5 % (93,75-95,0 %), что позволяет рекомендовать их для терапии данных заболеваний.

Экономическая эффективность применения ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в звероводческих хозяйствах Краснодарского края составила 30,9 руб. на 1 руб. затрат, терапевтическая экономическая эффективность использования цефосина при псевдомонозе и энте-рококкозе нутрий - 8,15 руб. на 1 руб. затрат.

3.7 Разработка мероприятий по профилактике и ликвидации псевдомоноза и энтерококкоза нутрий

Комплексная система диагностики, профилактики и лечения энтерококкоза нутрий была разработана Черных О.Ю., Шевченко A.A., Шевченко Л.В. в 2008 г. и выпущены рекомендации. Сотрудники Краснодарского НИВИ (Терехов В.И., Шипицин А.Г., Болоцкий И.А., Пруцаков C.B. и соавт., 2003) разработали и опубликовали «Методические рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза сельскохозяйственных животных». Однако мероприятий по профилактике, лечению и ликвидации псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае не разработано. Поэтому нами были разработаны «Рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

Мероприятия по профилактике псевдомоноза нутрий. Для профилактики псевдомоноза необходимо проводить комплекс мероприятий, который направлен на снижение загрязнения патогенными микроорганизмами помещений, где содержатся нутрии, кормов, которыми кормят нутрий, а именно необходимо соблюдать технологию заготовки и хранения кормов, проводить в соответствии с требованиями дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию.

С целью предупреждения возникновения псевдомоноза новорожденных нутрий необходимо вакцинировать беременных и молодых нутрий соответствующими биопрепаратами в дозах и в сроки, которые указаны в рекомендациях по их использованию.

Помимо вакцин необходимо применять:

а) в соответствии с инструкцией вместе с вакциной иммуномодуляторы (риботан, вестин, левамизол, гамавит, ронколейтин и др.);

б) согласно инструкции бактериофаг и поливалентную гипериммунную сыворотку против псевдомоноза нутрий;

в) вводить подкожно в рекомендованной дозе (0,7 мл/кг) один раз в день на протяжении 2-3-х дней нормальные глобулины сывороток крови животных;

г) согласно инструкции в профилактической дозе пробиотики (ветом - 1.1, споробактерин, флорентин, зоонорм, бифидумбактерин, бифацидобактерин).

Для предупреждения псевдомоноза в коллективных и в индивидуальных нутриеводческих хозяйствах необходимо соблюдать ветеринарно-санитарные правила при транспортировке и переработке сырья и мяса нутрий. Обязанность ветеринарных специалистов - это обеспечение систематического наблюдения за

общим состоянием нутрий, а также плановое проведение профилактической вакцинации против псевдомоноза нутрий.

Мероприятия по ликвидации псевдомоноза. После того как установлен диагноз на псевдомоноз, администрация города или района по подтверждению главного ветеринарного врача выносит постановление и устанавливает ограничения, а также признает ферму, хозяйство, населенный пункт или его самостоятельную часть неблагополучной в порядке, который предусмотрен Ветеринарным уставом Российской Федерации. В этом постановлении указываются четкие границы эпизоотического очага и прописываются мероприятия, направленные на ликвидацию болезни и профилактику в угрожаемой зоне. В неблагополучном хозяйстве (пункте) запрещают:

1. Ввоз и вывоз нутрий, продуктов их убоя, шкурок, инвентаря и кормов.

2. Перегруппировку нутрий.

3. Мероприятия, связанные со скоплением нутрий.

4. Продажу или обмен нутрий, мяса и шкурок.

5. Заготовку кормов из мест предположительного нахождения больных или трупов нутрий.

В неблагополучном хозяйстве (пункте) обязательно проводят:

1. Учет всех нутрий.

2. Применяют специфическую сыворотку против псевдомоноза нутрий согласно инструкции по применению и через 10-14 дней вакцинируют животных.

3. Дезинфекцию и уборку ферм, а также выгульных дворов, оборудования, помещений, в которых находятся нутрии.

4. Дезинфекции подвергают шкурки нутрий из неблагополучных пунктов или хозяйств непосредственно на перерабатывающем предприятии согласно действующей инструкции.

Мероприятия, проводимые в зоне, которая подвергается угрозе заносу возбудителя. Угрожаемая зона - это территория с населенными пунктами и хозяйствами, которые непосредственно прилегают к неблагополучному по псевдомонозу нутрий пункту; хозяйства, контактирующие с неблагополучным пунктом по ввозу нутрий, кормов и др. В угрожаемой зоне проводят:

1. Ветеринарно-санитарные и хозяйственные мероприятия, а именно подвергают вакцинации против псевдомоноза все восприимчивое поголовье.

2. Ограничивают хозяйственные связи с неблагополучными по псевдомонозу хозяйствами и населенными пунктами.

3. Строго контролируют ветеринарно-санитарные мероприятия, кормление и содержание нутрий.

4. Устанавливают запрет на ввоз и вывоз нутрий из угрожаемой зоны, а также реализацию и торговлю нутриями, их мясом и шкурками.

5. Закрепляют транспорт и обслуживающий персонал для обслуживания нут-риеводческой фермы.

6. Оповещают население об угрозе распространения псевдомоноза и установленных в связи с этим ограничениях.

7. Строго контролируют рынки, мясокомбинаты, заготавливающие и перерабатывающие предприятия.

8. Массово разъясняют населению как не допустить распространение псевдо-моноза.

Снятие ограничений. После проведения вакцинации нутрий и заключительных ветеринарно-санитарных мероприятий хозяйство или ферму объявляют благополучной спустя 15 дней. Ввозить нутрий в неблагополучный пункт или угрожаемую зону после снятия ограничений разрешено только после вакцинации их против псевдомоноза в хозяйствах-поставщиках и при наличии соответствующей отметки в ветеринарном сопроводительном документе.

Выводы

1. Установлено, что инфекционная патология нутрий в Краснодарском крае в течение последних пяти лет (2008-2012 гг.) формировалась в основном из девяти нозологических единиц: колибактериоза, псевдомоноза, энтерококко-за, стрептококкоза, стафилококкоза, сальмонеллеза, пастереллеза, анаэробной дизентерии, листериоза. Доля псевдомоноза в ней составила 21 %, энтерококко-за-11 %.

2. Из патматериапа от вынужденно убитых и павших нутрий P. aeruginosa выделяли в 25,5 % случаев, серотип 018 в 17,5 % случаев; Е. faecalis - в 27,5 % случаев. Изучены антигенные, биологические свойства, вирулентность культур.

3. Псевдомоноз у нутрий протекает остро, проявляется лихорадкой (39,5-40,5 °С), септицемией со смертельным исходом у молодняка с первого дня жизни и 2-3-х месячных щенков в период отсадки их от матерей, абортами или мертворождением, а также маститами и эндометритами. Основные патоморфо-логические изменения у нутрий при псевдомонозе: ярко выраженный геморрагический диатез (39 %), серозно-катаральная или серозно-геморрагическая бронхопневмония (31 %), альтеративный гепатит (15 %), альтеративный нефрит (10 %) и альтеративный миокардит (5 %).

4. Энтерококкоз у нутрий протекает в острой и хронической форме и сопровождается лихорадкой (40,2-41,1 °С), диареей, бронхопневмонией, абортами и рождением недоразвитых или полуразложившихся щенков. Основные пато-морфологические изменения у щенков нутрий: катарально-геморрагический или серозно-геморрагический гастроэнтероколит (37 %), белковая и жировая дистрофия печени и миокарда (26 %), геморрагический диатез на плевре, брюшине, под капсулой почек и селезенки (23 %), продуктивный или геморрагический спленит (6 %), серозно-катаральная бронхопневмония (4 %), интерстици-альный продуктивный нефрит (4 %).

5. Разработана технология изготовления моно- и новой ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий. Отработаны параметры оценки качества биопрепаратов по стерильности, безвредности, им-муногенности. В экспериментальных и производственных условиях все вакцины безвредны и высокоиммуногенны, после одно- и двукратной иммунизации

обеспечивают не менее 80 % защиту от соответствующих возбудителей, что соответствует требованиям, предъявляемым к инактивированным вакцинам.

6. Новая ассоциированная ГОА-формолвакцина против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий антигенноактивна, стимулирует к обоим антигенам синтез специфических антител, сохраняющихся на протяжении 9 месяцев (1:8-1:32) и обеспечивающих в производственных условиях 95,3 %-ную защиту животных от P. aeruginosa и Е. faecalis. На фермах и в индивидуальных подсобных хозяйствах вакцину вводят щенкам в 35-дневном возрасте двукратно с интервалом 10 дней внутримышечно: первая доза- 1см3, ревакцинация в дозе 1,5 см3.

7. Наибольшая чувствительность выделенных изолятов P. aeruginosa отмечена к цефотаксиму (98 %), амикацину (94 %), энрофлоксацину (88,5 %), стрептомицину (72,9 %), ампициллину (71,1 %), рифампицину (69,3 %), гента-мицину (69,3 %), неомицину (66,3 %). Изоляты P. aeruginosa резистентны к клиндамицину, нетилмицину, зинаприму, окситетрациклину, офлоксацину, ок-сациллину, польодоксину, цефалотину, триметоприму+сульфа, пенициллину, меропенему.

8. Изоляты Е. faecalis чувствительны к цефотаксиму (90,3 %), цефалекси-ну (70,3 %), энрофлоксацину (68,9 %), амоксициллину (68,2 %), рифампицину (65,8 %), левомицетину (60,8 %) и резистентны к триметоприму+сульфа, зинаприму, польодоксину, окситетрациклину, клиндамицину, оксациллину, кар-бенициллину, пенициллину, доксипрексу.

9. В производственных условиях высокая терапевтическая эффективность при лечении нутрий, больных псевдомонозом и энтерококкозом, установлена у цефосина (96,25-98,75 %) и энроксила 5% (93,75-95,0 %).

10. Экономическая эффективность применения ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в звероводческих хозяйствах Краснодарского края составила 30,9 руб. на 1 руб. затрат, терапевтическая экономическая эффективность использования цефосина при псевдомонозе и энте-рококкозе нутрий - 8,15 руб. на 1 руб. затрат.

Практические предложения

1. Для специфической профилактики псевдомоноза и энтерококкоза нутрий предложена новая ассоциированная ГОА-формолвакцина, производство освоено в ФГУП «Армавирская биофабрика».

2. Для лечения псевдомоноза и энтерококкоза нутрий предложена комплексная высокоэффективная система лечебно-профилактических мероприятий с использованием цефосина и энроксила 5%.

3. На основе результатов исследований разработаны и изданы «Рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

4. Результаты исследований могут быть использованы в учебном процессе, при планировании противоэпизоотических мероприятий и ФПК зооветеринарных специалистов.

Список опубликованных работ по теме диссертации

1. Патент 2288003 РФ, МПК А61К 39/108, А61Р 31/04. Вакцина против эн-терококковой инфекции нутрий / А. А. Шевченко, JI. В. Шевченко, Е. А. Баженова; заяв. 14.06.05 г.; опубл. 27.11.06 г., Бюл. 033 (1 ч). - 6 с.

2. Шевченко, Л. В. Инфекционные болезни нутрий в Краснодарском крае / JI. В. Шевченко, Е. А. Баженова // Мат. 3-й Всероссийской науч.-практ. конф. молод, ученых. - Краснодар: КубГАУ, 2009. - С. 274 - 275.

3. Шевченко, А. А. Совершенствование специфической профилактики и лечение псевдомоноза нутрий / А. А. Шевченко, Л. В. Шевченко, Е. А. Баженова, Р. О. Брилев, А. А. Филиппская // Тр. / КубГАУ. - 2009. -№ 1 (ч. 1). - С. 125 - 127.

4. Шевченко, Л. В. Специфическая профилактика ассоциативных инфекционных болезней нутрий / Л. В. Шевченко, А. А. Шевченко, Е. А. Баженова, О. Ю. Черных // Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения: материалы 2-ой Междунар. науч.-практ. конф. / КубГАУ. - Краснодар, 2011. - С. 137-139.

5. Баженова, Е. А. Клинико-эпизоотологическая характеристика энтерокок-ковой инфекции нутрий / Е. А. Баженова // Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения: материалы 2-ой Междунар. науч.-практ. конф. / КубГАУ. - Краснодар, 2011.-С. 50-52.

6. Баженова, Е. А. Идентификация энтерококков по тинкториальным, куль-турально-морфологическим признакам и биохимической активности / Е. А. Баженова, Ш. М. Бадеева // Научное обеспечение агропромышленного комплекса: материалы 5-ой Междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых / КубГАУ. -Краснодар, 2011. - С. 329 - 330.

7. Баженова, Е. А. Эффективность гидроокисьалюминиевой формолвакцины против энтерококковой инфекции нутрий / Е. А. Баженова // Научное обеспечение агропромышленного комплекса: материалы 5-ой Междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых / КубГАУ. - Краснодар, 2011. - С. 330 - 332.

8. Баженова, Е. А. Чувствительность изолятов P. aeruginosa, выделенных от сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц к антибиотикам / Е. А. Баженова // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 6. - С. 8 - 10.

9. Шевченко, JI. В. Определение чувствительности энтерококков к антибиотикам / Л. В. Шевченко, Е. А. Баженова, Ш. М. Бадеева // Тр. / КубГАУ. - 2012. - № 3 (ч. 36). - С. 268 - 271.

10. Бадеева, Ш. М. Лабораторная диагностика энтерококков / Ш. М. Бадеева, Е. А. Баженова, Л. В. Шевченко // Студенчество и наука. - 2012. - С. 87 - 89.

П.Баженова, Е. А. Определение чувствительности изолятов Pseudomonas aeruginosa, выделенных из патматериала от нутрий, к антибиотикам / Е. А. Баженова, Ш. М. Бадеева, Л. В. Шевченко // Студенчество и наука. - 2012. -С. 90-93.

iO

12. Баженова, Е. А. Иммунобиологические свойства ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий / Е. А. Баженова, Л. В. Шевченко, А. А. Шевченко, О. Ю. Черных // Тр. / КубГАУ. - 2013. - № 1 (40). - С. 132 - 135.

13. Баженова, Е. А. Технология изготовления ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий / Е. А. Баженова, Л. В. Шевченко, А. А. Шевченко, О. Ю. Черных // Тр. / КубГАУ. -2013. -№ 1(40).-С. 140-143.

14. Рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае / Л. В. Шевченко, Е. А. Баженова, А. А. Шевченко, О. Ю. Черных, А. В. Скориков, Е. В. Якубенко. - Краснодар: КубГАУ, 2013. -32 с.

Подписано в печать 28.07.2013г. Формат А5 60x84 1/16 Печать цифровая Усл. печ. л. 1,0 Заказ № 1670

бумага офсетная

тираж 100 экз.

Типография «Световод» 350004, г. Краснодар ул. Калинина 134/2

Текст научной работыДиссертация по сельскому хозяйству, кандидата ветеринарных наук, Баженова, Екатерина Анатольевна, Краснодар

Кубанский государственный аграрный университет

На правах рукописи

БАЖЕНОВА ЕКАТЕРИНА АНАТОЛЬЕВНА

ЭПИЗООТОЛОГНЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ, ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА ПСЕВДОМОНОЗА И ЭНТЕРОКОККОЗА НУТРИЙ

06.02.02. - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

ДИССЕРТАЦИЯ

ф) на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Л со

<0

СЧ|

со °

Научный руководитель: доктор О ^ ветеринарных наук, профессор

СМ £2 Шевченко Людмила Васильевна

^ °

г. Краснодар, 2013 г.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ........................................................................... 4

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ......................................................... 9

1.1 Эпизоотология псевдомоноза животных.................................... 9

1.2 Эпизоотология энтерококкоза животных.................................. 14

1.3 Лечение псевдомоноза животных............................................. 22

1.4 Лечение энтерококкоза животных............................................ 25

1.5 Специфическая профилактика инфекционных болезней пушных зверей..................................................................................... 27

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ....................... 31

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ................ 35

3.1 Эпизоотическая ситуация по инфекционным болезням нутрий в Краснодарском крае................................................................... 35

3.1.1 Нозологический профиль и роль псевдомоноза и энтерококкоза в инфекционной патологии нутрий.................................................... 36

3.2 Диагностика, клинические признаки, патоморфологические изменения при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий............................. 39

3.2.1 Диагностика и выделение возбудителя псевдомоноза - Pseudomonas aeruginosa из патологического материала от нутрий.................... 39

3.2.2 Диагностика и выделение возбудителя энтерококкоза -Enterococcus faecalis из патологического материала от нутрий............... 52

3.2.3 Изучение клинического проявления, патоморфологических изменений при псевдомонозе нутрий.................................................. 61

3.2.4 Изучение клинического проявления и патоморфологических изменений при энтерококкозе нутрий............................................. 69

3.3 Разработка технологии изготовления и контроля инактивирован-ных моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий................................................................................ 73

3.3.1 Разработка и изучение режима инактивации возбудителя псев-домоноза - P. aeruginosa и энтерококкоза - Е. faecalis нутрий............. 75

3.3.2 Исследование иммунобиологических свойств моно- и ассоциированной вакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в опытных и производственных условиях.............................................. 82

3.3.2.1 Исследование иммунобиологических свойств вакцины против псевдомоноза нутрий в опытных условиях....................................... 82

3.3.2.2 Исследование иммунобиологических свойств вакцины против энтерококкоза нутрий в опытных условиях...................................... 87

3.3.2.3 Исследование иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в опытных условиях.................................................................................. 92

3.3.2.4 Исследование иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в производственных условиях....................................................................... 100

3.4 Разработка лечения при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий....... 103

3.5 Разработка мероприятий по профилактике и ликвидации псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.................................................. 110

3.6 Экономическая эффективность применения ассоциированной вакцины против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий......................... 114

3.7 Экономическая эффективность лечения псевдомоноза и энтерококкоза нутрий............................................................................. 121

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ................ 128

5. ВЫВОДЫ........................................................................... 139

6. ПРЕДЛОЖЕНИЯ ПРОИЗВОДСТВУ........................................ 142

7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ..................... 143

8. ПРИЛОЖЕНИЯ.................................................................... 161

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Одной из важных отраслей животноводства России является пушное звероводство, в частности нутриеводство, которое приносит значительную часть дохода данной отрасли (М.В. Петров, 2013). Нутрия - это источник диетического мяса, которое по своим качествам, в частности по количеству белка превосходит свинину, говядину и баранину, а по вкусовым свойствам - мясо кролика и птицы. Мясо нутрий содержит в своем составе мало жира, что так же является неоспоримым качеством. Убойный выход - 52-55 % живой массы. Уварка мяса при кулинарии - 34-35 %. Кости вместе с головой составляют 12-15 % (свиньи, КРС - 18-20 %). В мясе нутрий с костями содержится в среднем (%): воды 66,3, белка 20,7, жира 6,5-9,5 и углеводов 0,7. Энергетическая ценность 100г мяса - 203 ккал. Небелковые азотистые вещества 4-5 %. Температура плавления жира 27-28°С, усвояемость 90-93 %. Количество мышечного гемоглобина 800-1000 мг % (е.- х. животные 150 - 200 мг %).

Мясо нутрий также содержит в своем составе мало холестерина, что позволяет рекомендовать его в качестве питания для детей, людей с заболеваниями сердечно-сосудистой системы, беременных и кормящих матерей.

Помимо мяса у нутрий цен [-гая шкурка, которая используется для изготовления меховых изделий, пользующихся спросом у населения. Разведением нутрий в России занимаются повсеместно. Развитие технологий по содержанию и разведению нутрий в стране позволяет создавать нутриеводческие фермы (В.П. Рютова, 1991; В.Г. Кузнецов, 1993; В.Ф. Кладовщиков, В.Н. Александров, 2002; H.A. Балакирев, 2006, 2012).

В основном разведением нутрий занимаются коллективные хозяйства и частные предприниматели в южных регионах России, в частности в Краснодарском крае (В.И. Вачугов, 1989; H.A. Цепкова, В.А. Карпухин, 1991; H.A. Балакирев, В.Ф. Кладовщиков, 2002; Г.А. Кузнецов, Е.Г. Сергеев, О.И. Федоров, 2003; И.А. Плотников, О.Ю. Беспятых, 2003).

Успешному развитию данной отрасли препятствуют инфекционные болезни, а именно псевдомоноз и энтерококкоз, которые наносят значительный ущерб отрасли (В.А. Есепенок, 1997; А.Н. Панин, 1997; Л.П. Миронова, 2000; Л.П. Миронова, 1999, 2000, 2001; С.Н. Треглазов, Л.А. Малышева, 2003).

Актуальной проблемой в ветеринарии является сложность диагностики и отсутствие рациональной терапии данных болезней, которые были вызваны патогенными культурами P. aeruginosa и Е. faecalis (А.К. Васильев, 2003; Н. К. Седов, 1985; В. Т. Больных с соавт.,1987; О. Б. Литвинов, 1999).

Для надежной защиты нутрий от данных болезней рекомендуется применять вакцины. Использование ассоциированных вакцин, которые содержат в своем составе несколько антигенов, позволяет свести к минимуму стресс-фактор, снизить затраты труда и создать в короткие сроки напряженный иммунитет (A.M. Ахмедов, 1983; В.И. Вачугов, 1989; И.А. Плотников, О.Ю. Беспятых, 2003; В.А. Есепенок и соавт., 2005).

Мнение многих ученых основывается на том, что инактивированные вакцины, которые готовят из штаммов возбудителей, выделенных в период эпизоотии, способствуют созданию напряженного иммунитета, за счет высоких антигенных и иммуногенных свойств (Р.А. Кадымов, 1990; Р.Т. Манна-пова, 1998; Н.Н. Шульга, 2006).

Учитывая сложную эпизоотическую обстановку, обусловленную совместным действием различных возбудителей, терапия заболеваний и разработка новых ассоциированных вакцин является одним из важнейших современных направлений в области инфекционной патологии животных.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - изучить особенности эпизоотического процесса, идентифицировать возбудители и разработать систему лечебных и профилактических мероприятий при псевдомонозе и эн-терококкозе нутрий.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

• изучить эпизоотическую ситуацию по инфекционным болезням нутрий и особенности эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерокок-козе: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфоло-гические изменения;

• провести индикацию и идентификацию культур Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) и Enterococcus faecalis (E. faecalis), циркулирующих у нутрий;

• разработать технологию изготовления и изучить иммунобиологические свойства новых моно- и ассоциированной гидроокисьалюминиевых формолвакцин (ГОА-формолвакцин) против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий;

• изучить лечебное действие антибактериальных препаратов при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий;

• разработать мероприятия по профилактике и ликвидации псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Научная новизна. Впервые изучены особенности эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфологические изменения.

Впервые проведена разработка технологии изготовления и изучены иммунобиологические свойства новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в экспериментальных и производственных условиях.

Определена чувствительность выделенных культур к антимикробным препаратам, P. aeruginosa: цефотаксиму, амикацину, энрофлоксацину, стрептомицину, ампициллину, рифампицину, гентамицину, неомицину; Е. faecalis: цефотаксиму, цефалексину, энрофлоксацину, амоксициллину, рифампицину, левомицетину. Препараты цефосин и энроксил 5% впервые применены для терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Апробирована и внедрена в ветеринарную практику высокоэффективная комплексная система мероприятий по профилактике и терапии псевдо-

6

моноза и энтерококкоза нутрий. Материалы диссертационной работы использованы при подготовке «Рекомендаций по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

Научная новизна диссертационной работы подтверждена шестью патентами РФ на изобретение: № 2288002 «Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий», № 2288003 «Вакцина против энтеро-кокковой инфекции нутрий», № 2388487 «Способ изготовления вакцины против псевдомоноза нутрий», № 2388488 «Вакцина против псевдомоноза нутрий», № 2388489 «Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий», № 2389505 «Вакцина ассоциированная против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий».

Теоретическая и практическая значимость. Результаты проведенных исследований послужили теоретическим обоснованием для разработки и внедрения в производство новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий из эпизоотических штаммов P. aeruginosa и Е. faecalis. Для лечения псевдомоноза и энтерококкоза нутрий предложены эффективные антибактериальные препараты це-фосин и энроксил 5 %. Разработана комплексная высокоэффективная система мероприятий по профилактике и терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

• результаты изучения эпизоотической ситуации по инфекционным болезням нутрий и особенностей эпизоотического процесса при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий: этиология, возрастная динамика, клинические признаки, патоморфологические изменения;

• результаты исследований по индикации и идентификации культур P. aeruginosa и Е. faecalis, циркулирующих у нутрий;

• результаты разработки технологии изготовления и методов контроля новых моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий;

• результаты изучения иммунобиологических свойств и эффективности новых инактивированных моно- и ассоциированной ГОА-формолвакцин против псевдомоноза и энтерококкоза нутрий в экспериментальных и производственных условиях;

• результаты изучения эффективности антибактериальных препаратов при псевдомонозе и энтерококкозе нутрий;

• комплексная высокоэффективная система мероприятий по профилактике и терапии псевдомоноза и энтерококкоза нутрий.

Апробация работы. Основные положения и результаты исследований диссертационной работы были доложены и одобрены на 3-ей Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых (г. Краснодар, 2009 г.); на заседаниях ученого совета Кубанского государственного аграрного университета (г. Краснодар, 2009 - 2013 гг.); на научных конференциях сотрудников и аспирантов факультета ветеринарной медицины КубГАУ (г. Краснодар, 2010-2013 гг.); на 5-ой международной научно-практической конференции молодых ученых (г. Краснодар, 2011 г.); на 2-ой международной научно-практической конференции «Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения» (г. Краснодар, 2011 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 5 в журналах, рецензируемых ВАК РФ, а также «Рекомендации по диагностике, профилактике и лечению псевдомоноза нутрий в Краснодарском крае».

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 161 странице текста компьютерного исполнения, включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, предложения производству, список использованной литературы, приложения. Текст диссертационной работы иллюстрирован 49 рисунками и 17 таблицами. Список литературы содержит 179 источников, из числа которых 35 иностранных.

8

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 ЭПИЗООТОЛОГИЯ ПСЕВДОМОНОЗА ЖИВОТНЫХ

Псевдомоноз - инфекционное заболевание преимущественно молодняка сельскохозяйственных животных, пушных зверей и птиц, проявляющееся диареей, ринитами, конъюнктивитами, а также сопровождается токсемией и септицемией.

Возбудителем псевдомоноза является Pseudomonas aeruginosa или называемая ранее Bacillus pyocyaneaus (синегнойная палочка). Впервые её обнаружил у человека в 1862 г. А. Lücke, который заметил при смене повязки сине-зеленое её окрашивание. Позднее, в 1882 г. С. Gessard была выделена чистая культура возбудителя псевдомоноза - Р. aeruginosa, которую он назвал В. руосуапеа, или палочка синего гноя. В 1887 г. в отделяемом из слухового прохода ее обнаружил G.Gruber. В 1889 г. A.Charrin показал, что Р.aeruginosa патогенна и для животных. По предложению Migula (1895) Номенклатурный комитет Международного общества микробиологов в 1952 г. утвердил род Вас. pyocyaneaus как Pseudomonas aeruginosa.

По определителю бактерий Берджи (1997) вид Р. aeruginosa входит в отдел Gracillicutes, группу 4, семейство Pseudomonadaceae, род Pseudomonas.

Pseudomonas aeruginosa является условно патогенным микроорганизмом. Распространение его в окружающей среде очень велико, т. к. с трудом можно найти такой объект, который не имел бы обсемененность этим микроорганизмом (Т. В. Марченко, 2006).

М. Васильев, А. Доценко (1976) обследовав 1795 проб установили, что наибольший процент обсемененности имеет подземная питьевая вода (292 пробы), вода из открытых водоемов (188 проб), каловые массы человека (169 проб), пищевые продукты (72 пробы).

Ученые также подтвердили (Т.Н. Alms, I. А. Bass, 1975; Т.И. Сорокина,

1978), что существование Р. aeruginosa уходит далеко в прошлое, об этом

9

свидетельствуют данные о ее присутствии в толще ледников Антарктиды, возраст которых составил 2110-2510 лет.

До недавнего времени псездомоноз животных, птиц и пушных зверей не выделяли в самостоятельную нозологическую единицу, ветеринары считали, что P. aeruginosa только осложняет инфекционные и воспалительные процессы, которые происходят в организме во время болезни. К такому выводу подталкивает то, что при бактериологическом исследовании патологического материала P. aeruginosa встречается очень часто наряду с другими микроорганизмами (Н.Н. Grimm, 1983; Н.Н. Шульга, 2006).

Доказательством проявления псевдомоноза у пушных зверей явилось то, что в 1970 г. причиной острой гемморагической пневмонии у норок являлась P. aeruginosa. Это также послужило основательным толчком к разработке средств специфической профилактики и эффективного лечения болезней, вызванных P. aeruginosa (Е.П. Данилов, 1974).

Pseudomonas aeruginosa является госпитальной инфекцией. Ученые доказали, что возникновение псевдомоноза учащается в том случае, когда снижаются функции иммунной системы (И. А. Гришина с соавт., 1984).

Исследования отечественных ученых позволяют отнести к общей пио-генной инфекции P. aeruginosa, которая является очень опасным микроорганизмом как для животных, так и для человека (И.С Петропавловская, Т.И. Осокина, Н.С. Акатова, 1978).

В процентном соотношении наиболее часто возбудителя псевдомоноза выделяют из абсцессов (43%), пролежней (33%), ожоговых поражений (17%), ран (9%).

В 50-е годы прошлого столетия псевдомоноз становится проблемой в области ветеринарии (А. К. Акатова, 1975). P. aeruginosa регистрировали у свиней, крупного рогатого скота, лошадей, птиц, овец и растений. Чаще всего из пушных зверей поражались норки, а в последующем лисы и песцы. Существует мнение, что попадая в организм P. aeruginosa может провоцировать

заболевание, а так же протекать вместе с ним.

10

Многие ученые полагают, что осложняющим или основным этиологическим фактором в заболевании молодняка крупного рогатого скота на Кубани является P. aeruginosa (А. Г. Шипицын, В. И. Терехов, Н. Ю. Басова, 1986). Она обладает высокой приспособляемост�