Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ЭНТОМОПАТОГЕННЫЕ ДЕЙТЕРОМИЦЕТЫ СОСНОВЫХ МОЛОДНЯКОВ ПОДЗОНЫ СРЕДНЕЙ ТАЙГИ ЕВРОПЕЙСКОГО СЕВЕРО-ВОСТОКА

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "ЭНТОМОПАТОГЕННЫЕ ДЕЙТЕРОМИЦЕТЫ СОСНОВЫХ МОЛОДНЯКОВ ПОДЗОНЫ СРЕДНЕЙ ТАЙГИ ЕВРОПЕЙСКОГО СЕВЕРО-ВОСТОКА"

Л-2ШІ

На правах рукописи

Моледки на Нина Николаевна

ЭНТОМОПАТОГЕННЫЕ ДЕЙТЕРОМИЦЕТЫ

сосновых молодняков

ПОДЗОНЫ СРЕДНЕЙ ТАЙГИ ЕВРОПЕЙСКОГО СЕВЕРО-ВОСТОКА

03.00.16 - экология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

і

Сыктывкар, 2003

УДК 579.69 : 582.472.4 (1-924.82) (470,13)

Работа выполнена на кафедре ботаники химико-биологического факультета Сыктывкарского государственного университета

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Тарбаева В.М.

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Соловьев В.А.

доктор биологических наук, Мельник В А.

Ведущая организация:

Московский государственный институт леса

Защита диссертации состоится 29 октября 2003 г. в 15°° на заседании диссертационного совета Д 004.007.01 в Институте биологии Коми научного центра УрО РАН по адресу: 167982 г Сыктывкар, ГСП-2, ул. Коммунистическая, 26. Факс: (8212)24-01-63, е-таИ: dissovet@lb.komisc.nj

С диссертацией можно оэнаком." .я в библиотеке Коми научного центра УрО РАН по адресу: 167982 г. Сыкты.; ,1 гС1"!-2, угт Коммунистическая, 24.

Автореферат раэосм?1

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор биологических наук

А.Г. Кудяшева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из насущных проблем в Республике Коми яв-' ляется восстановление лесного фонда, которое долгое время осуществлялось, за счет естественного, стихийного воспроизводства. Хвойные молодняки в ус-' ловиях Севера в значительной степени подвержены влиянию различных патологических факторов: болезней и насекомых-вредителей (Николин, 1967; Вол? кова, 1930; Юркина, 1985; 1992; 1993).'Применение химических веществ для ухода за молодняками не привело к положительным результатам. Поэтому всё чаще стали применять биологический метод борьбы'с вредными организмами, в частности, с насекомыми-дендрофагоми {Суитмен,'1964; Борисов, 1987; Борисов, Гальвидис, 1990). ^ ">.■

Для успешного использования этого метода необходим поиск новых й более глубокое изучение уже известных биоагентов. Энтомопатогенные грибы являются перспективными объектами для регуляции численности популяции . вредных насекомых. Препараты на основе грибов принципиально отличаются от других микробиологических средств" наличием контактного и перорального действия, что позволяет применять их против широкого спектра насекомых. Кроме того, они безопасны для здоровья человека, животных, растений и ос-, тальных сочленов биоценоза (Штерншис, 2001). Несмотря на значительные успехи, достигнутые в исследовании отношений между патогеном и их_ хозяином, предсказуемость",'надежность и эффективность энтомоцидных препаратов остается на низком уровне. Наиболее слабо изучены особенности жиэне-; деятельности энтомопатогенн'ых грибов в природе, сохранение их в биоценозах, закономерности возникновения эпизоотмй и влияние на эти процессы^ условий окружающей сред ы( Алеши на, 1980).' ...

До настоящего времени исследования возбудителей микозов насекомых оставались малочисленными, и крайне фрагментарными; особенно это касалось обширной территории Европейского Севера, в частности Республики Коми. Изучение энтомофильной микобиоты нарушенных биоценозов практически не проводилось. Это и определило'необходимость и значимость изучения энто-мофильных грибов,' в' частности энтомопатогенных видов, ограничивающих численность на секо мых-де нд рофа го в в условиях разновозрастных искусственных насаждений сосны. .. .

Целью настоящей работы является установление видового состава, выделение и изучение биологии и экологии возбудителей микозов особо опасных вредителей сосновых малодняков в подзоне средней тайгм Республики Коми,

В задачи исследования входило: .. , ' ' '

- проведение скрининга энтомофильной микобиоты основных вредителей шишек и побегов и уточнение'приуроченности грибов к насекомым; .

- исследование влияния абиотических фа^оров среды на экстенсивность инвазий в популяциях насекомых-бластофагов в условиях разновозрастных искусственных насаждений сосны; '

- изучение изолятов грибов с цепью уточнения их биоморфологических характеристик й физиолого-биохимических свойств на различных питательных средах; "... , ■ "/■'.''■

- определение влияния фунгистазиса почв на прорастание спор и формирование колоний грибов-знтомофипоя и культуре и в естественных фитоцено-зах подзоны средней тайги. " . ЦНБ МСХА ■ " '

■ - ••• фонд научной литературы 1 ' 1

• раяШТ . .

Научная новизна. Впервые проведено изучение энтомофильных грибов о условиях разновозрастных искусственных насаждений на основных вредителях сосновых молодняков, таких как сосновая побеговая огнепка (Dioryctria mutnteUa Fuchs,), побеговьюн-смолевщик (Petrova resinelta L.), почковый noGe-говьюн (Blastosthla turionetlo L.) Выявлена систематическая структура грибов и их встречаемость на различных водах ни соком ых- бластофагов и на разных фазах развития. Составлен аннотированный список видов грибов-энтомофи-' лов, включающий 23 вида из 10 родов. Изучены б иоморфо л отческие характеристики полученных изолятов в культуре, выявлены особенности спороноше-ния и формирования колоний. Определены физиолого-биохимическио свойства изолятов; комплекс синтезируемых гидролитических ферментов, влияние на их активность различных факторов культивирования. Впервые показаны особенности проявления активности ферментов у изолятов энтомолатoreнных видов грибов из различных классов! Выявлено влияние водных экстрактов лишайников на прорастание спор грибов. Изучена биология прорастания спор и формирования колоний выделенных изолятов в почвах природных экосистем подзоны средней тайги Республики Коми,; ' * , . 1

Практическая значимость работы. Проведенные исследования пополнили сведения о видовом составо и численности энтомофильных |рибов в условиях разновозрастных искусственных насаждений сосны в подзоне средней тайги; зараженности грибами наиболее опасных насекомых-бпастофагое и сроках массовой гибели от микозов. Результаты работы будут использованы для создания интегрированной защиты лесных молодняков'от насекомых-вредителей. Установление влияния фунгйстазиса почв на прорастание спор и. формирование репродуктивного мицелия грибов в почвах различных фитоценозов позволяет подойти к выяснению критериев сохранения и развития энтомопа-тоге нных грибов в межэпизотический период. Созданная коллекция высоковирулентных энтомопатогенных изолятов грибов и изучение их физиолого-биохи-мических особенностей в условиях глубинного'культивирования может послу: жить базой для получения биопрепаратов энтомоцидного действия. Данные по биоморфологии представляют дополнительный материал для определения видовой принадлежности дейтеромицетов, . , * '

Полученные результаты используются в учебном процессе для студентов химико-биологического факультета СыктГУ и УНЦ по физико-химической'биологии. " .[■'. . ' .'■ ; '

Диссертационная работа выполнялась как самостоятельный раздел темы НИР межкафедральной лаборатории СыктГУ «Экология Севера» (§ 53) «Экологические основы охраны и использования биогеоценозов Севера», с 1990. 2000 гг. — в рамках Российской Программы «Динамика биологических систем в. условиях промышленного освоения Европейского Севера» и темы «Энтомопа-тогенныё грибы таёжных экосистем как агенты биологической борьбы с вредными организмами в лесном и сельском хозяйстве» в рамках программы «Университеты России».(1993). , V . " '

Апробация работы. Основные положения диссертации были доложены и обсуждены на Молодежных научных конференциях (Сыктывкар, 1993-1995); на Школе-семинаре молодых ученых.факультета почвоведения МГУ «Современные проблемы экологии и почвоведения» (Красновидово,1993); на II и III Международных конференциях «Освоение Севера и проблемы рекультивации» (Сыктывкар, 1994; £ он кт-Петербург, 1996); на II Международной научно-прак-■ тической конференции «Экология и охрана пчелиных» (Саранск; 1998); на Меж-

дунэродной конференции «Экология таежных лесов» (Сыктывкар, 1998); на Международной научной конференции «Бпоразнообразнейазеыных и почвенных беспозвоночных на Севере» (Сыктывкар,-1999; 2003); на VI) Молодежной конференции ботаников (Санкт-Петербург, 2000 г); на Международной конференции «Биоразнообразие Европейского Севера» (Петрозаводск, 2001); на I съезде микологов России (Москва, 2002); на'Между но родной конференции «Экологическая ботаника; наука, образование, прикладные аспекты» (Сыктывкар, 2002); на «Февральских чтениях» в СыктГУ (Сыктывкар,' 1997,2000-2002).

Публикации.-Основные положения и материалы диссертации отражены в С статьях и 14 тезисах, представлены в ежегодных аннотированных отчетах и двух пятилетних отчетах межкафедральной лаборатории Сыктывкарского го-суниаерситето «Экология Севера». • * ■ •

Основные положения, выносимые на защиту. '

- представлен видовой состав энтомофильных грибов, который складывается в зависимости от насекомого-хозяина и фазы его развития; определено влияние на распространение инвазии в популяциях насекомых-бластофагов среднемесячных температур и относительной влажности воздуха;

- изоляты энтомопатогенных видов грибов из разных классов существенно различаются по харэктеру'протекания ферментативных гидролитических процессов, реализующихся в результате жизнедеятельности;' . '

- фунгистазис почв оказывает заметно© влияние на процессы прорастания спор и формирование репродуктивного мицелия грибов-энтомопатогенов в ыежзпизотический период, • , ' * '

Структура и объем диссертации: Диссертация изложена на 165 страницах печатного текста, состоит из введения, 6 глав, выводов, списка литературы, включающего 297 источников, из них — на иностранном языке 57; 10 таблиц, 13 рисунков, 7 микрофотографий и приложения.

Автор выражает благодарность к.б.н. Юркиной Елене Вениаминовне за помощь в сборе и определении энтомологического материала, д.б.к. Андросову Геннадию Константиновичу за'помощь в определении видовой принадлежности грибов, Борисову Борису Александровичу, куратору «Коллекции микро-организмов-потенциальных продуцентов биопестицидов» за методическую помощь и ценные советы в подготовке и написании диссертационной работы; студентам кафедры ботаники СыктГУ, которые участвовали в сборе и обработке исследуемого материала.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ' - ;

Глава 1. Место и роль энтомопатогенных грибов в экосистемах (обзор литературы)

В данной главе приводятся общие сведения об энтомопатогенных грибах на насекомых и их систематический обзор.'Особое внимание уделено роли энтомопатогенных грибов'в экосистемах, отмечены типы консортивных отношений энтомофагов. Обсуждены вопросы развития энтомопатогенных'грибов в естественных и искусственно созданных биоценозах, причины, вызывающие микозы насекомых. Показана слабая изученность особенностей жизнедеятельности грибов в природе в межэпизотический период, структуры природных популяций патогенных грибов.' ■ ' " ''■'/■

Глава 2. Характеристика природных условий, . -'растительности и биологии н асе ко мых-бла сто фагов , , района исследования Ï

** - * .. * -, , * р ■ - г.

. Дана краткая физико-географическая и климатическая характеристика подзоны средней тайги Республики Коми. Показаны особенности растительности лесосеменных плантаций района исследования и специфический комплекс дендробионтов, который формируется за счет инвазии из естественных фито-ценозов. Наиболее подробно освещены вопросы биологии на секомых-бласто-фагов: сосновой побеговой огневки {Dioryçtria mvtatelta Fuchs.). побеговьюна-

смолевщика (Petrova resinelta 1__>, почкового побеговьюна {Blastesthio turío-

nella L.), которые были доминантами и наносили значительный вред сосновым молодняком в исследуемый период.

, ( .'* Глава 3, Материалы и методика .

Материалом для исследований послужили возбудители микозов основных насекомых-бластофагов, обнаруженные на протяжении 1993-1997 гг. на четырех пробных площадях л есосеме hi гай плантации Сыктывкарского лесхоза сред-нетаежной подзоны Республики Коми. Выло собрано более 2692 больных и погибших особей, 767 из которых имели признаки микозов. Было выделено 802 изолята грибов. Выделение грибов из гусениц, куколок и имаго проводили классическим методом (Методы экспериментальной микологии, 1982) и по методу Э.З. Коваль (1974). :

При определении грибов использовали: Определитель энтомофильных грибов СССР (Коваль, 1974), Определитель низших растений {1954; 1956); The genus Aspergillus (Raper, Fennel; 1965); Определитель микроскопических почвенных грибов (Литвинов, 1967); Л manual of PeniciUa (Raper et àl., 1968); Микрофлора насекомых (Полтев, 1969); Пенициллин (Пцдопличко, 1972); Энтомо-патогенные грибы (Евлахова, 1974); Manual and atlas of the .Peniciltia (Ramirez, 1902);.Alias of entomopathogenic fungi (1988). а также отдельные работы Jl.H. Егоровой: Почвенные грибы Магаданской области (1984); Почвенные грибы. Дальнего Востока (1986). Сведения о систематическом положении грибов приводятся в соответствии со схемой, принятой в Словаре грибов (Hawksworth et al.. 1983).

Выращивание грибов проводили на агаризованных питательных средах Чапока-Докса, Сабуро, картофельно-декстрозном агоре (Семенов, 1990), Фи-зиолого-биохимические исследования включали изучение синтеза биомассы и определение активности внеклеточных гидролитических ферментов (липазы и щелочной протеиназы) в условиях глубинного культивирования на различных питательных средах и при разных темпера турах., Биомассу определяли гравиметрическим методом. Определение активности липазы проводили титрованием жирных кислот, образующихся при гидролизе растительного масла, 0.05 N раствором гидроксида натрия с 2-3 каплями тимопфталеина. Определение активности щелочной протеиназы - методом Лейлян-Фольгарда в модификации (Рухлядева, Полыгалина, 1981). . . -

Морфологию прорастания спор грибов исследовали методом выращивания грибов в тонком слое агара на стекле (Milner et al., 1991). Изучение влияния влажности окружающей среды на прорастание спор проводили в зксикато-

рах по методу. Studdert, Kaya (1990), Исследование влияния вещных экстрактов высших рзстений и лишайников производили на твердой агаризованной питательной среде с добавлением вытяжек из растений в концентрации 5% от объема питательной среды (контролем служила исходная питательная среда с добавлением дистиллированной воды). При исследовании влияния фунгистази-са различных типов пемв использовали метод почвенных камер (диапозитивные рамки, закрытые стеклотканью) (Муромцев и др.;. 1977);.

Полученные результаты во всех экспериментах статистически обрабатывались (Ппохинский, 1978; Песенко, 1932). Оценку достоверности разницы средних, а также разницы с контролем и между вариантами опытов осуществляли по критерию Стъюдента (Лакин, 1990). Для характеристики заражения насекомых использовали экстенсивность инвазии (Федоров, 1981).

Глава 4. Распространение эктомофилъных грибов * на основных вредителях сосновых молодняков

Наши исследования продолжили начатые еще в конце 1980-х гг. исследования энтомофильных. организмов: долгоносиков, щелкунов, листоедов, усачей и других групп насекомых. В тех работах сборы насекомых носили случайный характер и имели целью установление видового состава энтомофильной. микобиоты таежных экосистем Европейского Северо-Востока (Андросов, 1992), Из исследованных 2692 больных и погибших насекомых на разных стадиях развития только 767 имели признаки поражения трибами, что составило* 28.5% от всех погибших особей. Из них было выделено 802 изолята. Обнаруженные на 3-х видах насекомых, обитающих в сосновых молодняках Сыктывкарского лесхоза, энтомофильные грибы относятся к подотделу Deûteromycotina, отделу Deuteromycota, классу Hyphomyceles, порядку Moniliafes, 2 семействам, 10 родам и 23 видам (см. табл.), что значительно меньше (90 видов) исследованных ранее грибов, найденных в естественных биоценозах среднетаежной подзоны Республики Коми. Энтомофильная микобиота разновозрастных сосновых насаждений объединяет виды грибов-дейтеромицетов с широким .спектром хозяев, среди которых практически нет облигатных паразитов насекомых. Выявленное обеднение видового разнообразия возбудителей микозов насекомых сосновых молодняков обусловлено не богатым видовым составом насекомых-хозяев, в отличие от естественных биоценозов. .,-*.■. . ,

Наиболее восприимчивыми к поражению грибами оказались насекомые на стадии гусеницы. Особенно это характерно для стадии гусеницы 4-5 возрастов, только некоторые насекомые погибали на стадии гусениц 2-3 возрастов. Из гусениц было выделено более 585 (73%) изопятов грибов. Значительно меньше пораженных насекомых встретилось на стадии имаго, из них было выделено 176 (22%), на стадии куколки —40 (5%) изолятов. Именно на стадии гусеницы происходит непосредственный контакт с энтомофильной микобио-^ той и, в частности, с энгомопатогенными грибами. На стадии куколки в основ-' ном обнаружены грибы из родов Aspergiilus Midi. и Pénicillium Link. На имаго находили грибы из родов Aspergiilus, Pénicillium, Beauveria Vuillemin, Melarhizium Sorokin, Poecillomyces Bainîer, виды Trichoderma viride (Tode) Harz, Botrytis cinerea Pers. Весь спектр энтомофильных грибов встречался у насекомых на разных стадиях гусеницы. После зимовки на погибших особях часто встречали виды из родов Aspergiilus. и Trichoderma Persoon на -побеговьюнах; Pénicillium,

Видовой состав и встречаемость антомофильных грибов не вредителях почек ипобегов хвойных

Количество выделенных чао пятов

Виды грибов Сосновая ' , побеговая . огневка ■ Побегов ыон ' смолеещик Почковый * побег овьюн

• . • Deuteromycotina пор. MonWales

р. Altemorto Nees

.1. A. aKemafa (Fries) Keissier. ■ * ' 8 ' , .. - .

p. Aspergillus Mich.\ ■■ • , * . * * .г 4 К

2. A, niger van Tleghem * '. , , .' 46. . Г.' 35 27

3. A. repens (Cda) Do Вагу 15 25 20

4. A. terreus Thorn ' 10 5 5

5. A. parasiticus Speare -. , ( - 10 15

6. A flows Link. , ' " 35 11 ;'.* *' ' — ' 25

7. A. nidutons (Eidam) Wint * ' -¡ _. 10

8. Aspergillus sp. 2 1 5

p. Beouveria Vuiilemin ' - ,*■•■

9. B. bassiana (Bals.) Vuill. - 32 ' 18 ; * 21 -

10. B, bmngniartii (Sacc.) Peteh 10 * 14

. p. Botrytis Mich. • - ' * *

11;B, cinerea Pers.' . ■.),' 3 . 2 * •

p. Mctorbizium Sor. • 1 * i i . »J»

-.12. M. onisoptia (Metsch.) Sor, . . 35 i..- 27, , , ч 24

p. Poealomyces• Balnier- . ' \ t ♦ _ + Ш t ' "> *

13. P. räribif/Ba inter • . . 10. ,

p. Penicillium Link ~ , - 4 ■ , ■ ' * -

14.' P.janthlneltum Biourge- . 5, ..

15. P. chrysogenum Thorn 34 20 37

16. P. mebagrinum Biourge .. .22 ... 12

17." P. commune Thorn . 16 15

18. P. gronulotum Bain; 2

19. P. tanosum Westl. ' "21 5

20. Penicillium ip. : * 2. ■ 3 4 •

pi Sporutbrix Hektoen et C.F.Perkins * ■ _ * <\ * * •" *.

21. S. otiVQceum Fr. • ■ ' ■ 35 . • - 15 • •

p. Trichoderma Perso'oo , • . * .

22.fr. viride (Tode) Harz. - 7 5 '

• p. Verticii'ium Nees ; ■ ; ' ' * ■

23. V. album (Preuss) Pidoplieko 10: . _

i Всего видов / изолятов ,-16/311 14/219 19/272 , .

• , .< • ■ i: ■ Alternaría Nees. - на сосновой побеговой огневке. Их выделяли/главным обрз-

зом, обследуя насекомых, собранных весной (май - начало июня). Поражение ! грибами из рода Beauveria. Metarbizium,- Poecillomyces.-Sporothrix. Hektoenet C.F.Perklns,* Botrytis Mich., Vertidllium Nees. чаще всего происходило в летний период. Иэоляты этих видов выделяли,-обследуя насекомых, собранных летом и в начале осени. ,-;з ' ... «... .. v, - t •■

Наибольшее количество изолятов (311) было выделено иа трупиков сосновой побеговой огневки, наименьшее (219) — из трупиков побеговьюна-смо-левщика. Видовой состав грибов на разных насекомых отличался незначитель- ■

no. На почковом побеговьюне обнаружено 19 видов грибов,- на сосновой побеговой огневке —" 16; на побеговьюне-смопевщике -14. ^

Ядро видов составили роды Aspcrgülus и РвпІсіШиті. которые оказались на «бол со часто встречающимися и многочисленными для всех трех вішов насекомых. Следующие позиции в энтомофильном ценозе составили: для сосновой побеговой огневки представители р, Beauveria (13,5%), MetarhiziuiV {11.3%), Paccilomyccs (3.2%); Alternaría (3.2%), Verticitlium (2.6%); для побеговьюна-смо-. левщика - р. Sporoth'ríx (16.0%), MctarhUiumb2.3%) и' Beauvoría (8.2%),, Tríciiodermo (3.2%) и Botrytis (1.4%); для почкового побеговьюна- р. Boauveria' (12.9%), Metnrhizium (8.8%), PaQcilomyces (5.5%), Sporothrix (5.5%); p. Tríchodorma (1:8%) i\.Botrytis (0.7%). Обнаружены грибы/имеющие одного хозяина. У сосновой побеговой огневки - 3 вида: РспісіШит janthlnetlum, Vcrticiltium álbum, Altomaríaalternata; у, побеговьюна' почкового - 2* вида: РспісіШит gmnulatum, Aspergillus nidúlans, у - лобеговьюна-смопевщика таких видов не отмечено. ' ' " ,■ _ - (■-.-'

В состав энтомофильной микобиоты входят виды, которые относятся к энтомопатогенным и в действительности являются причиной возникновения микозов. Это Boauveria bassipno, Boauveria brongniartii, Metarhizium onisopliae, Pacctlomyces variotii, Sporothrix olivoceum, Verticillium álbum! Они составляют 28-43% от всего'количества антомофильных грибов. Все остальные виды являются деструкторами хитина в почве и'поселяются 'уже на мертвых насекомых. Однако это деление весьма уел овію,'так как в природных популяциях наблюдается гетерогенность по признаку вирулентности. Не всегда можно провести четкую границу между энтомофипьными и энтомопатогенным и грибами в силу многообразия их трофических связей. Отнесение того'или.иного вида к какой-либо группе необосновано без предварительного теста на вирулентность относительно насекомых или растений (Борисов, 2001). В результате исследований энтомопатогенных грибов на сосновой'побеговой огневке'отмечено 5 видов (97 изопятов), на побеговьюне-одолевщике - 3 віща (80 изопятов), на почковом побеговьюне — 5 видов (80 изопятов). Доминировали 2 вида Metarhizium апііорНа, Beauveria bass/ano, относящихся к "факультативным паразитам. Численность Beauveria bassiaria составила 13.5% на сосновой побеговой огневке; 12,9% - на почковом побеговьюне; 8.2% - на побеговьюне-смолевщике. Численность Metarhizium onisopliae составила,11.3% на сосновой побеговой огневке; 8.8% на почковом побеговьюне; 12.3% на побеговьюне-смолевщике. В целом доля'энтомопатогенных видов достигала 33% на'сосновой побеговой огнёвке в 1994 г., 43% —на побеговьюне-смопевщике в 1997 г., 41% — на почковом побеговьюне в 1994 г. ' ' ' ' '

Зараженность насекомых разными видами грибов варьировала по годам (рис. 1). месяцам на разных исследуемых площадях.

Максимальное количество изопятов наблюдали в 1995 г., а большое разнообразие'видов приходилось на*влажные и теплые годы (1994-1996 гг.). В. 1995 г, выделили максимальное количество энтомофильных йзолятов на всех насекомых, а для энтомопатогенных видов наблюдали некоторые различия в максимумах: для сосновой побеговой огнёвки 1995 г., для побеговьюнов -1994 г. Для побеговьюна-смолевщика характерна выровненность в количественном отношении изопятов по годам. Это связано с двухгодовой генерацией этого насекомого в условиях среди етаежной зоны по сравнению с другими насекомыми.

t1, ... • ■ - t, Рис.1. Распространение грибов на насекомых-бпэстофагак по годам.

А - энтомофильнзя михобиота; Б - энтомопатогенная микобиота {по оси абсцисс: количество юолятоа. шт.); 1 - побег овьюн-смолевщик; 2 — побегоеьюн почковый; 3 — сосновая побеговзя огноока. . , .. .. .....

, . ' ...» . ч* « . % ' ^ ■ " . * . tll

В природе часто отмечаются смешанные инфекции (Беспятова, 1995; Огар; ков,'Огарков а, 1997). За 5 лег был отмечен 31 случай такого .типа. Чаще всего' они происходили в сентябре (9 случаев) и в нюне (7. случаев), Характерно, что в это жо время наблюдалось снижение экстенсивности заражения.'На каждый год приходилось по5-6 насекомых,, поражаемых двумя видами грибов, исключение составил 1997 г.; когда наблюдали 5 случаев двойного и 4 случая тройного, инфицирования; Эуо объясняется уменьшением численности насекомых в популяциях в связи с их гибелью. ... , ' ' 1 .

Многолетниеисследования экстенсивности инвазии насекомых в сосновых молодняках Сыктывкарского лесхоза позволили установить влияние температуры, относительной влажности воздуха на экстенсивность инвазии а популяциях насекомых. Из рисунка 2 видно, что изменения среднемесячных температур в'основном определяют изменение в динамико инвазии, если атому не препятствует понижение относительной влажности воздуха (1997 г.). Среднесуточные температуры воздуха (>+10"С) и повышение относительной влажности стабилизирует процессы заражения на уровне популяции, какэто произошло.' в 1995 г, при всех изменениях, происходящих в популяциях насекомых.' Стабильные температуры в течение летнего сезона и постепенное увеличение относительной влажности воздуха усредняют значения экстенсивности инвазии на всех исследуемых площадках к концу сентября.,На'процессе заражения насекомых в 1995 г. сказалось еще и то, что в начале мая были высокие среднемесячные, температуры. Май был очень теплым (+13*С),'. поэтому количег ство насекомых в популяциях было максимально высоким. Метеорологические условия в 1997 г. сложились неблагоприятно. Резкое повышение температуры и понижение относительной влажности воздуха привело к понижению экстенсивности инвазии. Вообще, повышение относительной влажности воздуха в летний период незначительно сказывается на изменении экстенсивности инвазии, однако при понижении ее происходит уменьшение фона заражения насекомых.' _ 1 ..'" ; ( '' ■ ..,' , '

VI VII . VIII IX

Рис. 2. Влияние.температуры и относительной влажности воздуха на экстенсивность инеаэиинасекомых. 1,— влажность (%); 2-экстенсивностьинвазии (%); 3 - температура (*С),-у-1Х - месяцы.

1Г

Глава 5, Культурально-морфологические . и физиолого-биохимические характеристики грибов

КУДЫУ РО П УН?- M Я£Г ЩЦВЩ9.§

Морфологические характеристик» являются основными критериями видового ранга (Хохрякова, 1980; Черепанова, 1981). В настоящее время приняты ' две системы классификации несовершенных грибов: по П. Саккардо (1886) и А.А. Потебне (1953) (циг. по Кириленко, 1977). Некоторые микологи (Тубаки, 1963; Субраманиан, 1971; Ваггоп, 1980) деляг несовершенные трибы по типу спорогенеза: Aieuriosporae, Arthrosporao, 'Anneltosporac, Blastosporae, Botryoblastosporae, Sympodutospome, Porosporoe, Pltialosporae. Эта новая система находится в стадии разработки, т.к. охватывает далеко не все известные сейчас дейтеромицеты (Горленко, 1990). Разделение грибов по'типу слороге-неза на уровне секций дано в «Атласе родов почвенных грибов» Т.С. Кириленко (1977). В связи с тем, что многие энтомопатогенные грибы проводят часть своего жизненного цикла в почве, мы применили систему Т.С. Кириленко (1977) в цепях разделения исследуемых грибов по типу спорогенеза. Согласно ей; изучаемые нами изоляты отдельных видов энтомофильных грибов, относятся к пяти секциям; Aleuriospome, Sympodutospome, Botryoblastosporae, Porosporoe, Phiotospome, .-, -

К секции ботриобпастослоровых грибов (Botryoblastosporae) относится род Botrytis, вид Botiytis сіпєгва. К секции алевроспоровых фибов (Alouriosporae) относится род Sporothrix, вид Sporothrix olîvoceum. К секции симподулоспоро-вых грибов (Sympodutospome) - род Boauverlo., виды Beouvoria bassiana. Beau vería brongnlortil, К секции порослоровых грибов (Porosporoe) — род Alternaría, вид Alternarla altémata. Секция фиалоспоровых фибов (Phialosporae) включает самое большое количество родов грибов: Pénicillium.,. Aspergillus, Paecitomyces.MûlarhizIum, Tríchoderma, Verticillium. '■•

Образование колоний фибов на искусственных питательных средах различалось по времени формирования, и зависело от состава среды. В конечном счете, все ¿ти различия сводились к внутривидовым особенностям культур грибов. Анализируя полученные данные в результате исследований, можно выделить: • " ; \ * „ "'*'■'

- быстро растущие изоляты грибов на всех типах агаризованных сред: Aspergillus niger. Pénicillium chrysogenum, Poecilomyces variotli, Sporothrix olîvoceum: Beauveria bassiana показывала стабильный рост на всех средах с некоторыми морфологическими изменениям характера колоний; ...

- хорошо растущие на одних питательных средах и медленно - на других.'. Среди таких изолятов можно выделить быстро растущие на агаризованных питательных средах Чапека и Сабуро и медленно растущие на картофельно-' декстрозной среде (это изоляты таких видов, как Alternarla alternóla, Verticillium album)', и наоборот, быстро растущие на каргофельно-дектрозной среде и медленно на двух других средах (Botrytis cinerea, Tríchoderma viride, Metarhizium onisopliae); ' *

- медленно растущие со слабым спорообразованием: Verticillium album, Botrytis cinerea. ... .^ - ~ .-

. Физиолою-биохимические характеристики вилов :' ■ Паразитическому и сапрофитному образу жизни грибов соответствуют их физиопого-биохимические свойства. Дейтеромицеты обладают ярко выражен-

ной адаптивной способностью к быстро меняющимся условиям жизни (Успенская, 1980). Это связано со спецификой их ферментных систем. Грибы способны выделять в окружающую среду экзоферменты и изменять в зависимости от условий среды качественный и количественный состав синтезируемого ими комплекса ферментов (Веккер, 1988)

. В результате анализа литературы и предварительного эксперимента на синтез внеклеточных ферментов у различных изолятов грибов, нами были отобраны изоляты 3-х видов: Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Sporothrix olivaceum, Они относятся к отделу Deutemmycota, классу Hyphomycetes, порядку Moniliales, считаются факультативными паразитами.' Metarhizium anisoplioo является одним из наиболее изученных видов антомопатогенных грибов в связи с разнообразием круга хозяев и широким географическим распространением. Не менее известный представитель этого класса Beauveria bassiana, на его основе созданы различные биопрепараты для борьбы с вредными насекомыми. Sporothrix olivaceum не имеет такого широко распространения,'и его изучение представляет для нас определенный интерес в связи с тем, что он относительно часто выделялся с трупиков погибших побеговьюнов наряду с выше обозначенными представителями. Для сравнения синтеза биомассы и активности экзоцеллюлларных гидролаз в жидкой культуре у изучаемых штаммов мы использовали штамм 80 Entomophthora thaxteriana, полученный из ВИЗРа (г. Санкт-Петербург). Этот представитель относится котделу Zygomycete, классу Zygomycetes, порядку Entomophthorales. no литературным данным, он известен кзк широко распространенный обпигатный паразит тлей и клещей.

Выше указанные изоЛяты и штаммы культивировали на жидких питательных средах методом глубинного культивирования и исследовали динамику накопления биомассы и активность внеклеточных гидролаз (щелочной протеина-зы и липазы), влияние на эти характеристики различных факторов (температуры, состава питательной среды, добавления индуктора - растительного мае-ла); ' "

Наиболее активным ростом в условиях глубинного культивирования отличались изоляты: Metarhisium anisopliae и Beauveria bassiana. Благоприятной средой оказалась среда Сабуро с добавлением растительного масла и температура +20*С. Характер роста биомассы грибов представляет характерную логистическую кривую, растянутую во времени с отсутствием розких границ между фазами роста. При добавлении в среду для культивирования растительного масла экспоненциальный характер роста культур грибов изменялся на волнообразный с различными по времени пиками накопления биомассы.

*■Сравнивая характер изменений активностей липазы при культивировании исследуемых грибов, можно выделить следующие общие черты и особенности, которые касаются определенных видов грибов. > . • -

1.Динамика активности ферментов у изолятов трех видов - Beauveria bassiana, Sporothrix olivaceum, Metarhizium anisopliae — описывается волнообразными кривыми с одним или двумя пиками активности липазы, в отличие от штамма; у которого данные графики больше схожи с экспоненциальными кривыми: * ' ' _ 1

2.Эффекты температуры на характер и величину активности фермента различны.'У Beauveria bassiana, Metarhlzium anisopliae увеличение темлерату-ры;приводит к уменьшению величины активности липазы, для Sporothrix olivaceum, Entomophthora thaxteriana - наоборот. * '

'. Занесение и ницу кто рз липазы в виде растительного масла в питательные: среды приводло к смещению проявления активности фермента на более ранние сроки, что указывает,на.индуцибельность этого фермента растительным маслом.- В отношении увеличения активности фермента таких аналогий не про. слеживается. . t . . .4;Культивирование грибов 8езш/епэbassiana и Entomophthora thaxteriana на минеральной среде с добавлением хитина стимулирует активность липазьь весьма значительно, в'отличие от двух других видов/ . ■ > . ■- , Анализ динамики активности щелочной протеиназы исследуемых изопя-. тов показал следующие характерные особенности.- ■ • . ■ .

І.Динамика активности ферментов-у; видов Sporothrix oliveceum? Metarhizium, anisopliae - л редста в ля етсобо й волнообразные кривые с: различным количеством пиков: Динамика активности протеиназ Beauvena bassiana и -Entomophthora thaxteriana.no своему .характеру приближается к экспоненци-'

■ апьной кривой, . , ■. ,., ■ ..

. * -2. Влияние температуры на активность ферментов видослецифично,

, 3.-Внесение индуктора л и пазы, оказывает в большинстве случаев тормозящее действие на активность протеиназы или сдвигает проявление активности на более поздние срокам , ' . v ч

' 4. Минеральная среда с хитином.насекомых оказывает стимулирующее-действие на активность- протеиназы .только- y ßöat/i/er/a öass/ana,-для Entomophthora thaxteriana — предпочтительнее среда Сабуро, для Metarhisium • anisopliae и Sporothrix olivaceum — Сабуро с добавлением растительного маслам. . . ,, . -. . . ,".-■■■ -.-■. . .. •:. * ,, ,

>'„.-. . ■ Глава 6; Влияние различных факторов*>■. • • і.., на прорастание спор и формирование колоний грибов »

В ходе эволюции основными структурами, способными сохранять жизнеспособность в течение длител'ьных отрезков времени, становятся споры грибов. Форма, способы образования и распространения спор достигают у грибов большого разнообразия (Черепанова, 1981). '_„>■'*.

, В результате проведенных исследований по.влиянию влажности воздуха на прорастание спор можно отметить, что конидии всех исследуемых видов успешно прорастают при высокой относительной влажности воздуха (90-100%). В течение первых суток происходит прорастание спор небольшими ростовыми гифами. Для изолятов некоторых видов характерно монополярное прорастание (рис. ЗА). Такое прорастание спор наблюдается у Beauveria bassiana, Botrytis cinerea, Sporothrix olivaceum, Altemaria altemata, Aspergillus niger, -

Другие виды (Metarhizium anisopliae, Paecitomyces variotii, PeniciHium

■ chrysogenum. Trichoderma viride,■ Verticitlium album) прорастают биполярно, причем одна ростовая трубочка длиннее,-чем другая (рис.-36). Короткая ростовая гифа имеет округленное окончание. а длинная- заостренное. В последующем, одна из ростовых трубочек может прекратить рост и не участвовать в дальнейшем формировании мицелия.' ^

■" ■. , При прорастании заметно значительное увеличение конидии в объеме за счет активного поступления внутрь воды (набухания(.Однако увеличение спор . у разных видов грибов происходит неодинаково.'Так,- например, у грибов, rtpo-' pa стающих монополяр но, увеличение споры в объеме происходит более чем в

10 раз. тогда как при биполярном прорастании только в 3-5 раз. Исключение составляют изоляты А$регдШи$ п/дсг, которые прорастают монопопярно, с набуханием спор в 5 раз больше от первоначального объема.

Рис, 3. Прорэстанио спор энтомопа тоге иных грибов.(фото автора, ув, >600): а — спора, б -ростоеыо трубочки. А- прорастание споры Веот/еп,! Ьо$$1зпа (одна росто&ая трубка); Б - прорастание споры Мв1лЫг<ит огагорЬов (две ростовые трубки).

Прорастание спор резко замедляется при понижении относительной влажности воздуха (85%), Установлено, что в интервале температур 5-15'С, оптимальных для большинства видов грибов северных таежных лесов, на 2-3 сутки прорастает от 60% до 70% спор у иэолят оо Altemaria altemota, Trichodermo viride, PaecHomyces variotii, 'Beauvcrla bassiana, Botrytis cinerea; от 50% до 60% - у изолятов РспюШит chrysogenum, Vertlciltium atbum, Sporotprix olii/acoum; до 50% — у изолятов Metarhlzium onisopiae', и около 20% у изолятов Aspergillus niger,

В результате исследований по влиянию экстрактов сосудистых растений и напочвенных лишайников изучаемых сосновых моподняков на прорастание спор удалось установить общие особенности в развитии спорового материала грибов, выделенных с насекомых-бластофагов. Во-первых, экстракты корневых частей растений сильнее угнетают прорастание спор грибов и ((юрмирование жизнеспособных проростков, чем экстракты побегов растений. Во-вторых, экстракты хвойных пород, в основном, тормозят развитие спор энгомофильных грибов, а экстракты травянистых форм растений не оказывают негативного влияния на прорастание спор. В-третьих, значительное влияние на прорастание спор и развитие мицелия грибов-энтомофилов оказывают экстрактивные вещества лишайников. В-четвертых, споры грибов, вызывающих мускардино-зы насекомых, Вeauveria bassiana, Melarhizium onisopllaei Paecilomyces variotii,

угнетаются о процессе прорастания а большей степени экстрактами корневых систем высших растений и лишайников. */ ш ■

, Всо знтомофильныо грибы в той или иной степени связаны с почвой и почвообразовательными процессами,*участвуют в деструкции хитинсодержа-.. щих субстратов (Коваль и др., 1083). Многие возбудители микозов насекомых, в том числе мускардиновыо грибы, - почвообигающие факультативные паразиты. Попадая в почву, они испытывают на себе влияние разнообразных факторов широко распространенного феномена подавления прорастания грибных спор в естественной почво при благоприятных для них условиях температуры и влажности, так называемого' фунгистазиса (микостаэиса) (Кальвиш, 1980). ,

Анализ динамики прорастания спорна разных почвах (дерново-слабоподзолистой супесчаной; дерново-подзолистой суглинистой и торфянистой) пока- ' зал, что у большинства видов грибов с большей или меньшей скоростью про-' исходит суммарное увеличение количества проросших спор. К11слотность почвенного раствора составила 4.56-5.78. На дерново-слабоподзолистой супесчаной почве складываются наиболее благоприятные условия для прорастания спор по сравнению с дерново-подзолистой суглинистой почвой. Суглинистые почвы.по сравнению с супесчаными оказывали заметный;фунгистатический эффект на процессы прорастания спор у различных видов грибов и сдвигали. формирование мицелия по крайней мере на сутки, снижали энергию прорастания спор почти у всех изолятов грибов. Положительное влияние на процесс прорастания спор выявили только у изолятов двух видов Botrytis cineroa и VerticilHum album, Изоляты грибов Aspergillus niger, Penlciülum chrysogonum и Botrytis cinerea формировали жизнеспособный мицелий раньше друтх видов на сутки.

Большую приспособленность к торфяному типу/субстрата наблюдали у изолятов VerticilHum a/bum,' Penicillium chrysogenum и Botrytis cinerea; процент проросших спор на первые сутки у них оказался наибольшим'на этой почве по сравнению с другими. Фунгистатическое влияние торфянистой почвы на процессы п рора стан ия - спор по сравнению с супесчаной почвой незначительно отличалось у изолятов Beauveria bassiana','Atternaria attemata, Paedtomyces variotü, Trichodcrma viride, Metarhizium anisopiiae', Aspergillus nigcr и Sporothrix . ofivoceum. Оно выражалось в незначительном понижении или повышении процента проросших спор у разных видов, ■ **■' • .*.• ' Заметные различия наблюдали в длине формировавшихся ростовых тру: бок. На всех типах исследуемых почв максимальное удлинение ростовых тру, бок наблюдали у Penicillium chrysogonum (45.6 мкм — на супесчаной; 33.3 мкм -на суглинистой; 22.3 мкм - на" торф я ни стой), а минимальное - у Botrytis cinerea (на супесчаной — 5.6 мкм и торфянистой - 4,С мкм). На суглинистой минимальная длина ростовых трубок была"у Metarhizium anisopiiae (5.2 мкм). Наиболее

* благоприятные условия для формирования ростовых трубок складывались на дер но в о-подзол и стой супесчаной почве, наименее благоприятные - на торфяной., ••' - * ■'. ■ "• • " •. '' 4

■ ■ После'определения скорости удлинения ростовых трубок грибов на су-

• песчаной почве наиболее быстрым ростом отличались Metarhizium anisopiiae -7.8 мкм/сут. и Botrytis cinerea — 6.18 мкм/сут. Самым медленно растущим на этой почве были изоляты Trichoderma viride (i.O мкм/сут.). На суглинистой почве изоляты этого вида оказались самыми быстро растущими (7.3 мкм/сут.), а медленно удлинялись ростовые трубки у изолятов Beauveria bassiana( 1.13 мкм/ сут.). На торфянистой почве скорость роста ростовых трубок, как и прораста-*

ния спор, была очень низкой и колебалась ог 5.12 мкм/сут. (Paealomyces votiotii) до 1,08 мкм/сут. (Metarhizium anisopliae), Более стабильно растущими на всех типах почв оказались изоляты Paecilomyces variotü (3.58 мкм/сут. — на супесчаной; 3.2 мкм/сут.-на суглинистой; 5.1 мкм/сут. - на торфяной); Vertlcillium album (2.85 мкм/сут. — на супесчаной; 1.54 мкм/сут. — на суглинистой; 2.28 мкм/суг. -на торфяной); Botrytis cinerea (6.13 мкм/сут. г на супесчаной; 5.95 мкм/сут. - на суглинистой; 4.72 мкм/сут. — на торфяной); Altemaria atterriata (4.13 мкм/сут. — на супесчаной; 4.18 мкм/сут. - на суглинистой; 2,63 мкм/сут. - на торфяной).

Фунгистатический аффект'зависел от таксономической принадлежности гриба и от типа почвы.

Полученные данные по прорастанию спор грибов в почвах естественных биоценозов (лесном (сосново-лишайниковая ассоциация); луговом (злаково-разнотравная); болотном (морошково-багульниково-сфагновая)) имеют значительные отличия от результатов лабораторных опытов. Это указывает на немаловажное значение комплексного влияния различных факторов естественной природной среды. Эксперименты с прорастанием спор и развитием мицелия в почвах растительных ассоциаций выявили распределение исследуемых видов на три группы (рис. 4):

— с активным прорастанием спор и формированием разветвленного репродуктивного мицелия на 3 сутки. 5 эту группу попали виды; Aspergillus niger, Pentcillium chrysogenum;

— с более или менее активным прорастанием спор и формированием мицелия (с начальными стадиями образования органов спороношения) на 4-5 сутки у грибов Verticillium album, Tnchoderma viride, Altemaria alternate; (без органов спороношения) у грибов Sporothrix olivaceum, Beauveria basslana',

• ■ - с низкой энергией прорастания спор и формированием мицелия без реп-'родуктивных органов Paeci/omyce-s variotii, Metarhizium anisopliae, '■

В почве естественных фитоценозов у всех~видов грибов формировалась у споры только одна ростовая трубка. Но образовывались проростки двух типов: длинные без ветвлений и короткие разветвленные. У энтомопатогенных видов на концах проростков и боковых веточек формировались споры. Грибы, растущие в почве, имели укороченный тип развития. Если'на искусственных средах вначале формировалась колония с разветвленным мицелием и дифференцированными конидиеносцами,-на которых в дальнейшем образовывались споры,™ в почве спорообразование начиналось почти сразу после появления ростовых трубочек. Спорогенез очень скудный с мелкими спорами.

ВЫВОДЫ

1, Видовой состав энтомофильной микобиоты основных вредителей-бла-стофагов сосновых моподняков в подзоне средней тайги представлен 23 видами из Ю родов, 2 семейств, относящихся к поізядкуМопШаІеБ, классу НурЬотусеїез, отделу Оеиіеготусоїа. Значительный вклад вносят монотипные -роды (70%). Энтомопатогенные грибы представлены факультативными паразитами. •

2. Наибольшая частота встречаемости по количеству выделенных изоля-тов характерна для грибов на сосновой побеговой огневке (311 изолятов), наименьшая — для грибов на побеговьюне-смолевщике (219 изолятов). Наибольшая частота встречаемости по количеству видов характерна для грибов на

О---Г

I I ' ' ; J ' 4 ■ * .і" ' '6

( «pcvllïym) ■ 1

' Wîv . "" . ' ■

— Beauveria bassiana .•«•••• Metarhizium anisopiiae

— - • — Paecilimyces variotil 1 ' ' ) ; Spórofftnx o/ívaceum ; —*■— Vörttc/Wumatoum V) • ■ ■ .—»■:"..'Altemariaalnemata

A , TWcfxxferma wVkíe,* " _ * - — — — Aspergillus підег , К Pénicillium chrysigenum

... время (сутки)

■' ■ Рис. 4. Динамика прорастания спор и формирования мицелия грибов в почвах различных фигоценоэоа. А — луговой фитоценоз (злако во-разнотравна я ассоциация); Б -болошый фитоценоз (морошково-багульниксао-сфагнооая ассоциация); С - лосной фитоценоз (соснооо-пишапниковая ассоциация).

почковом побеговьюне (19 видов), наименьшая - для грибов на побеговьюне-смолевщике (14 видов). Обнаружены грибы, имеющие одного хозяина. У сосновой побеговой огневки - 3 вида {Ponlcillium janthinellum, Vertlcillium álbum, Alternaría altérnala), у побеговьюна почкового - 2 вида (Penlcillium granutatum, Aspergillus nidulans). •

3.Наиболее восприимчивы к поражению грибами оказались насекомые в стадии гусеницы - 585 изолятов (73%), наименее в стадий куколки — 40 изоля-тов (5%), Экстенсионость инвазии насекомых зависела от колебаний среднемесячных температур и относительной влажности воздуха.

4.Все изоляты исследуемых видов хорошо культивируются на искусственных агаризованных средах и дают жизнеспособные конидии. Внутривидовые морфологические различия незначительны и касаются в основном размеров конидий, диаметра мицелия, а также динамических характеристик культуры грибов - скорости роста, сроков конидиогенеза, и обусловлены различием в составе питательных сред. ■ '

• 5. Изоляты энтомопатогенных грибов хорошо растут в условиях глубинного культивирования; Metarhizium anisoptíae и Spomthrix olivaceum на средах Сабуро и Сабуро с добавлением растительного масла, Entomophthora thaxteriana — на среде Сабуро, a Beauvería bassiana — на минеральной среде с хитином насекомых. Оптимальная температура для культивирования для грибов из порядка Monillates - 20°С, а для Entomophthora thaxteriana - 25'С. *

6. Показано, что изоляты энтомопатогенных грибов способны синтезировать! гидролитические ферменты — липазу и щелочную протеиназу. Характер проявления активности ферментов видоспецифичен и зависит от состава питательных сред и режима культивирования. Кривые активности ферменгов у видов из порядка Monilialos носят волнообразный характер с одним или двумя пиками; У штамма Entomophthora thaxteriana - экспоненциальные, с четко выраженными фазами роста культуры. Культивирование энтомопатогенных ви-

дов на минеральной' сред о с хитином насекомых стимулировало активность липазы. Проявление активности протеинаэы видоспецифично и зависело от состава купьтуральной среды.:.-; - .. " * .....

7.В условиях искусственного культивирования характерно два типа прорастания спор - монополярное и биполярное. Значительное влияние на прорастание спор оказывает влажность воздуха (больше' 85%)'. Температурный интервал для прорастания спор у грибов северных таежных лесов составляет

' 5-15еС. Энтомопатогенные грибы, развивающиеся из спор в почвах, формиру-, гот одну ростковую трубочку с образованием проростков двух типов: длинные без ветвлений и короткие разветвленные. Они имеют укороченный тип развития без формирования органоо спороношения, со скудным спорогенезом и мелкими спорами. '"■..."

8.Выявлено, что экстракты корневых частой растений сильнее угнетали прорастание спор грибов, чемэкстракты побегов растений. Экстракты хвойных растений и лишайников оказывали негативное слияние на прорастание спор. Прорастание спор трибов," вызывающих мускардинозы насекомых: Beauveria bassiana. Afetarhizium onisopltao,. Paocilomyces variotii, угнетались наиболее сильно. „*,,'.. . ... , „

9. Oyнгистатический эффект почвы зависел от таксономической принадлежности гриба и типа почвы. Фунгистззис у дерново-подзолистой суглинистой почвы проявлялся в снижении количества прорастающих спор, а у торфянистой - в снижении скорости роста ростовых трубочек. Наиболее благоприятна дерново-подзопистая супесчаная почва. Почвы, сформированные под лесными и луговыми фитоценозами, наиболее благоприятны для жизнеобитания грибов. ФунгистотическиЙ эффект.на болотных почвах выражается но только в подавлении прорастания спор грибов, но и в угнетении роста и реализации их репродуктивной способности. Мускардиновые грибы в;почвах естественных фитоценозов угнетены в наибольшей степени.;

. :" СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

■ 1, Шергина H.H. (Молодкина H.H.), Юрки на Ё.В., Андросов Г.К. Микофло-ра насекомых-вредителей почек и побегов хвойных пород в Коми республике // Современные проблемы экологии и почвоведения: тез. докл. школы-семинара молодых ученых фак-та почвоведения МГУ, Красновидово, 1993. - С. 100.

.. 2. Шергина Н.Н; (Молодкина H.H.); Юрки на Е.В., Андросоо Г.К. Микофло-ра на се комы х-вредителей почек и побегов хвойных пород в Коми республике Я "Рациональное использование и воспроизводство природных ресурсов: тез. матер. II молод, науч. конф. Сыктывкар, .1993..- С. 90,

; 3. Шергина H.H. (Молодкииа:Н.Н.) К вопросу об экологии энтомофиль-ных грибов на вредителях сосновых молодняков в Коми республике// Тез. докл. XII Коми республ. молод, науч. конф! Сыктывкар, 1994,—С. 79, , .<. 4,,Юркина Е.5., Шергина Н.Н; (Молодкина H.H.) Стратешя защиты со. сновых культур на рекультивируемых/территориях // Освоение Севера и проблемы рекультивации: сб. докл. II междунэр. конф. Сыктывкар, 1994.— С. 229238.- ;. • • . ■.. ... ■ • • • . ... •

* 5. Yurkina E.,SherginaN. (MolodkinaN.) The strategy of the protection of pine cultures on recidivated territories // Освоение Севера и проблемы рекульти-. вации: тез, докл. II междунар. конф. Сыктывкар, 1994. — С. 489.

6.'Шергина H.H. (Молодкина H.H.), Мишарина ЕЛ. Изучение динамики синтеза экзогцдропаз {липаза, протеаза) у Entomophthoro thaxteríana и Boauvcría bassiana in vitro // Тез. докл. Ш молод, научн. конф. Института биологии.' Сыктывкар, 1095. - С. 44. .

7. Юр кипа Е.В., Шергина H.H. {Молодки на H.H.) Вторичные биоценозы на рекультивируемых землях // Освоение. Се вера и проблемы рекультивации; тез. докл. Ill между нар, конф. Санкт-Петербург, 28-31 мая 1996. Сыктывкар, 1996 - С. 231-232.

8: Yurkina Е„ Sherglna N. (MolodkinaN.) Secondary biocenoses on the recultivated place// The Development of the North and Problems of Recurvation: .abstract III International Conference. Sânkt-Petersburg, Russa, 28-31 May,-1996. Сыктывкар, 1996. - С. 233.

9. Андросов Г.К., Юркина Е.В., Шергина H.H. {Молодкина H.H.) Биоти-. ческие взаимоотношений в популяциях насекомых вредителей// Сб. науч. труд. „ «Успехи знтомопогии на Урале». Екатеринбург, 1997. — С, 144-147.

" 10. Юркина Е.В., Шергина H.H. {Молодкина H.H.) Вторичные биоценозы на рекультивируемых землях// Освоение Севера и проблемы рекультивации: сб. докл. Ш междунар, конф. Санкт-Петербург, 2В-Э1 мая 1996..Сыктывкар,.' 1997.-С. 225-230.

11. Yurkina Е., Shergfna N. (Molodkina N.) Secondary biocenoses on the reactivated place // The Development of tho North and Problems of Recultivation: Сб. докл. Ill International Conference. Sankt-Petersburg, Russa, 28-31 May, 1996. Сыктывкар, 1997. '- С. 231-236.

' 12. Юркина E.B., Шергина H.H. (Моподкина H.H.) Л есоэнтом о логический мониторинг в антропогенно трансформированных экосистемах И Экология и охрана пчелиных: сб. науч. докл. II междунар. науч.-пракгич. конф. 1998. Саранск, 1998. - С. 263-269.

- '13. Юркина Е.В., Молодки на H.H. Антропогенные лесные экосистемы и роль насекомых в их формировании и развитии // Экология таежных лесов; тез. докл. междунар. конф. Сыктывкар, 1998.— С. 157-158 (рус,), С. 158 (англ.).

14. Юркина Е.В., Моподкина H.H. Роль естественных врагов в популяциях насекомых-дендрофагов // Биоразнообразие наземных и почвенных беспозвоночных на Севере: тез. докл. междунар. научн, конф. Сыктывкар, 1999.-С. 219220 {рус.), С. 220-221 (ангп.).

• 15. Моподкина H.H. Энтомопатогенныа дейтеромицеты как компоненты почвенных биоценозов// Тез. VII Молод, конф. ботаников. Санкт-Петербург, 2000.-С. 72.

-•16. Моподкина H.H. Впияние почв на прорастание спор, рост и развитие энтомопатогенных дейтеромицетов // Биоразнообразие Европейского Севера. ■Теоретические основы изучения, социально-право вые аспекты использования и охраны: тез. докл. междунар. конф. Петрозаводск, 2001. — С. 115-116.

17. Моподкина H.H. Сравнительный анализ активностей экзогидролаз энтомопатогенных грибов // Микология России: тез. докл. I съезда микологов России. Москва, 2002. - С. 165-166.

18. Моподкина H.H. Биоценотические аспекты применения микромице-тов как основы для получения энтомоцидных препаратов // Экологическая ботаника: наука, образование, прикладные аспекты: тез. докл. междунар. научн. конф. Сыктывкар, 2002. - С. 165-166.

*.','- 19. Молодкина Н.Н:, Юркина Е.В. Распространение э нтом оп атоге нн ы х фибов на насекомых-бластофагах в сосняках Республики Коми Н Раэнообра-зие:беспозвоночных животных на Севере: тез. докл. П междунар.конф. Сык~* тывкар, 2003. - С. 58 (рус.), С. 131-132 (англ.). г .

. ■ 20. Молодки на Н.Н;, Тарбаева В.М.Особенности распространения и биологии энтомофильных фибов сосновых молодняков РК // Объединенный науч-ныйжурнал.2-3(60-61).Москва.2003.-С,*75-79;

»156 82

Лицензия Nt 19-32 от 26.11.96 г. KP 0033 от 03.03.97

Тираж 100 Заказ 28(03)

Информационно-издательская группа Института биологии Коми научного центра Уральского отделения РАН 167982, г. Сыктывкар, ул. Коммунистическая, д. 28

Отпечатано в ИПО СыктГУ. Заказ В-110.