Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

β-Эндорфинподобный пептид иммунорфин: свойства и механизм действия

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Малкова, Наталья Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

СОДЕРЖАНИЕ.

ВВЕДЕНИЕ.

ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Биологически активные пептиды иммуноглобулинового происхождения.

1.1. Тафцин, его свойства и синтетические аналоги.

1.2. Ригин и его свойства.

1.3. Fc-пептиды и их свойства.

1.4. Иммунокортин и его свойства.

2. Биологически активные пептиды - фрагменты гемоглобина.

2.1. Геморфины и их свойства.

2.2. Неокиоторфин и его свойства.

3. Биологически активные пептиды, выделенные из альбумина.

Введение Диссертация по биологии, на тему "β-Эндорфинподобный пептид иммунорфин: свойства и механизм действия"

Актуальность проблемы. Известно, что эндогенные пептиды участвуют в регуляции функций эндокринной, нервной, иммунной, сердечно-сосудистой и других систем организма человека и животных. Большинство пептидных гормонов образуются в результате процессинга неактивных белковых предшественников в клетках эндокринных желез и секретируются в кровеносное русло. В то же время, последовательности ряда эндогенных регуляторных пептидов обнаружены в составе биологически активных белков: иммуноглобулине G (тафцин и р23), гемоглобине (геморфины и киоторфины), казеине (казоморфины), альбумине (кинетензин) и некоторых других белках. В отличие от классических пептидных гормонов, эти пептиды образуются в результате специфического ферментативного расщепления родительских белковых молекул вблизи рецепторов клеток-мишеней и, вероятно, их основная функция состоит в передаче сигнала на клеточном уровне. В этой связи детальная характеристика свойств и механизма действия неизвестного ранее (3-эндорфинподобного пептида иммунорфина - фрагмента тяжелой цепи иммуноглобулина G человека, важна и актуальна.

В последние годы при разработке дизайна структур новых лекарственных препаратов именно природные пептидные гормоны и их аналоги привлекают наибольшее внимание химиков и фармакологов. Несомненными достоинствами пептидов являются высокая активность, быстрая реакция организма на их введение, практически полное отсутствие токсичности и иммуногенности. С этих позиций изучение спектра биологической активности и механизма действия иммунорфина также является актуальным исследованием, результаты которого могут быть использованы на практике при создании новых лекарственных препаратов.

Цели и задачи исследования.

Цель настоящей работы - изучение свойств и механизма действия (3-эндорфинподобного пептида иммунорфина. Основные задачи исследования:

1. Изучение влияния иммунорфина, его фрагментов и аналогов на активность иммунокомпетентных клеток человека и мыши m v/'/ro и in vivo.

2. Исследование рецепции иммунорфина и его фрагментов иммунокомпетентными клетками человека и мыши.

3. Изучение влияния иммунорфина на рост лейкемических клеточных линий человека in vitro;

4. Изучение влияния иммунорфина на доимплантационное развитие зародышей мыши in vitro.

Работа выполнена в лаборатории "Клеточной инженерии" Института молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН и лаборатории "Химии белка" Филиала Института биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН в соответствии с планом научно-исследовательских работ.

Научная новизна. Представленные в настоящей работе результаты являются первым эксперментальным доказательством того, что [3-эндорфинподобный пептид иммунорфин, соответствующий аминокислотной последовательности 364-373 тяжелой цепи IgG человека, обладает иммуностимулирующими свойствами. Установлено, что иммунорфин увеличивает пролиферацию стимулированных конканавалином А Т-лимфоцитов и Т-лимфобластных лейкемических линий человека Jurkat и МТ-4. Показано, что это действие опосредовано через налоксон-нечувствительный (неопиоидный) рецептор (3-эндорфина. Также обнаружено, что иммунорфин и его фрагмент 6-10 повышают функциональную активность макрофагов мыши in vitro: адгезию, распластывание, миграцию и переваривание бактерий вирулентного штамма Salmonella typhimurium 415. Впервые изучено влияния иммунорфина(6-10) на активность клеток иммунной системы in vivo. Показано, что внутрибрюшинное введение пептида мышам, приводит к стимуляции перитонеальных макрофагов, а также Т- и В-лимфоцитов селезенки.

125

Приоритетными являются результаты исследования с помощью 1-меченого иммунорфина налоксон-нечувствительного рецептора p-эндорфина на мембранах мозга крысы.

Впервые показано, что иммунорфин стимулирует деление бластомеров и ускоряет развитие доимплантационных зародышей мыши на ранних стадиях.

Практическая ценность результатов работы. В настоящее время биологически активные пептиды, производные природных пептидов и белков, рассматривают как потенциальные лекарственные средства нового класса, поэтому такие свойства иммунорфина как способность увеличивать бактерицидную активность макрофагов и стимулировать деление бластомеров и ускорять развитие доимплантационных зародышей мыши могут привлечь внимание фармакологов и клиницистов.

Поскольку иммунорфин является селективным агонистом неопиоидного (не чувствительного к налоксону) рецептора Р-эндорфина он может быть успешно использован для выявления и исследования данного типа рецептора на различных типах клеток.

Основные положения, которые выносятся на защиту:

1. Подобно (3-эндорфину, (З-эндорфинподобный пептид иммунорфин и его фрагмент 610 активируют иммунокомпетентные клетки человека и мыши in vitro: усиливают индуцированную конканавалином А пролиферацию Т-лимфоцитов донорской крови, увеличивают адгезию, распластывание, миграцию макрофагов мыши, а 9 также их способность переваривать бактерии вирулентного штамма Salmonella typhimurium 415. Внутрибрюшинное введение иммунорфина(б-Ю) мышам приводит к возрастанию активности перитонеальных макрофагов, Т- и В-лимфоцитов селезенки.

2. Меченные 12э1 иммунорфин и иммунорфин(б-Ю) с высоким сродством и специфичностью связываются с неопиоидными (не чувствительными к налоксону) рецепторами (3-эндорфина на Т-лимфоцитах человека, а также на синаптических мембранах коры больших полушарий головного мозга крысы.

3. Иммунорфин усиливает рост клеток Т-лимфобластных лейкемических линий человека Jurkat и МТ-4 in vitro.

4. Иммунорфин стимулирует деление бластомеров и ускоряет развитие зародышей мышей на ранних стадиях. В его присутствии среде культивирования до стадии бластоцисты развивается в 1,6 раза больше зародышей, чем в контроле.

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Малкова, Наталья Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что (3-эндорфннподобный пептид иммунорфин и его фрагмент 6-10 активируют иммунокомпетентные клетки человека и мыши in vitro: усиливают индуцированную конканавалином А пролиферацию Т-лимфоцитов донорской крови, увеличивают адгезию, распластывание, миграцию перитонеальных макрофагов мыши, а также их способность переваривать бактерии вирулентного штамма Salmonella typhimurium 415. Показано, что внутрибрюшинное введение иммунорфина(6-10) мышам приводит к возрастанию активности перитонеальных макрофагов, а также Т- и В-лимфоцитов селезенки.

2. Обнаружено, что 1251-меченые иммунорфин и иммунорфин(б-Ю) с высоким сродством и специфичностью связываются с нечувствительными к налоксону рецепторами Р-эндорфина на Т-лимфоцитах человека, а также на синаптических мембранах коры больших полушарий головного мозга крысы.

3. Установлено, что иммунорфин усиливает рост Т-лимфобластных лейкемических клеточных линий человека Jurkat и МТ-4 in vitro.

4. Показано, что иммунорфин стимулирует деление бластомеров и ускоряет развитие доимплантационных зародышей мыши.

98

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Обзор литературы показывает, что в результате ограниченного протеолиза биологически активных белков-предшественников (в качестве примера взяты иммуноглобулин G, гемоглобин и альбумин) образуются пептиды, модулирующие функции иммунной, нервной, эндокринной, сердечно-сосудистой и других систем организма. В настоящее время уже не вызывает сомнений то, что такие пептиды образуются в организме и играют роль сигнальных молекул. Однако каталитическое расщепление функциональных белков, приводящее к образованию биологически активных пептидов, может происходить лишь при наличии в организме воспаления, приводящего к резкому изменению рН среды и активации кислых протеаз. Поэтому не удивительно, что продукты гидролиза IgG, гемоглобина, альбумина, помимо активации клеток иммунной системы регулируют и процесс воспаления: увеличивают проницаемость сосудов и способствуют выходу гистамина из тучных клеток. Изучение функций таких пептидов, возможно позволит более детально охарактеризовать реакционную способность организма на внедрение инфицирующего агента, введение антигена или физическое повреждение тканей.

В обзоре приведены многочисленные примеры успешного применения пептидов - фрагментов иммуноглобулина G и гемоглобина в медицинской практике. Следует подчеркнуть ценность таких качеств пептидых препаратов, как высокая активность, практически полное отсутствие токсичности и иммуногенности. В то же время, клиническое применение эндогенных пептидов лимитируется их полифункциональностью. Поэтому основной задачей исследователей является получение аналогов с узким спектром действия. Не менее важными требованиями

Часть II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Глава 1. Материалы и методы 1. Реактивы

В работе использовали 1,3,4,6-тетрахлор-За,6а-дифенилгликоурил (Иодоген), [Ме15]энкефалин и [3-эндорфин, фенилметилсульфонилфторид (Sigma, США); GF/C (Whatman, Великобритания); налоксон, гентамицин (ICN, США); раствор Хэнкса, краситель Гимза, акридиновый оранжевый, трипановый синий, фиккол/верографин (плотность 1,077 г/смЗ) (ПанЭко); ЛПС Salmonella typhi (Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Россия), жидкий сцинтиллятор "Ready Gel" (Beckman, США). Все остальные использованные в работе реактивы были отечественного производства марки х.ч. или о.с.ч.

Меченые соединения: [метил-3Н]тимидин (уд. активность 76 Ки/ммоль), [1251-Туг27]р-эндорфин (уд. активность 2000 Ки/ммоль) (Amersham, Англия), Na125I (уд. активность 2x106 Ки/моль) (Санкт-Петербургское отделение Российского объединения "Изотоп").

2. Экспериментальные животные

В работе использовали самцов и самок мышей и крыс, полученных из питомника ФИБХ РАН и Института теоретической и экспериментальной биофизики РАН (Табл. 3).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Малкова, Наталья Владимировна, Москва

1. Калюжный А. Е., Платонов Е. С., Миронова О. В., Сухих Г. Т. Действие опиоидов на развитие доимплантационных мышиных зародышей // Бюл. эксп. биол. мед. 1989. - Т. 108. - С. 622-624.

2. Наволоцкая Е.В. Структурно-функциональные исследования а2-интерферона, интерлейкина-2 и иммуноглобулина G1 человека с помощью синтетических пептидов: Автореф. дис. . докт. биол. наук: 14.00.36 / Иститут иммунологии РАН. Москва, 1994.-47 с.

3. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология / Москва: Мир, 2000. 592 с.

4. Учитель И.Я. Макрофаги в иммунитете / Москва, 1978. 200 с.

5. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов / Москва: Медицина, 1984.272 с.

6. Чипенс Г.И., Веретенникова Н.И., Вегнер Р.Э., Гниломедова JI.E., Розенталь Г.Ф. Структурные основы действия пептидных и белковых иммунорегуляторов / Рига: Зинатне, 1990.-326 с.

7. Amoscato A.A., Davies P.J.A., Babcock G.F., Nishioka K. Receptor-mediated internalization of tuftsin // // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. -P. 114-34.

8. Aronowski J., Wleklik M., Gumulka S.W., Luczak M., Konopinska D. Modification of morphine withdrawal: effect of tuftsin, Lys4.-tuftsinyltuftsin, tetrapeptide fragment (1-4) of substance P and its amide // Life Sci. 1985. - V. 37. - P. 1649-53.

9. Ashish, Grover A., Kishore R. Characterization of a novel type VII beta-turn conformation for a bio-active tetrapeptide rigin. A synergy between theoretical and experimental results // Eur. J. Biochem. 2000. - V. 267. - P. 1455-63.

10. Babcock G.F., Amoscato A.A., Nishioka K. Effect of tuftsin on the migration, chemotaxis, and differentiation of macrophages and granulocytes // Ann. N.Y. Acad. Sci. -1983.-Y. 419.-P. 64-74.

11. Baici A., Knopfel M., Fehr K., Skvaril F., Boni A. Kinetics of the different susceptibilities of the four human immunoglobulin G subclasses to proteolysis by human lysosomal elastase // Scand. J. Immunol. 1980. -V. 12. - P. 41-50.

12. Bardin C.W., Chen C.L., Morris P.L., Gerendai I., Boitani C., Liotta A.S., Margioris A., Krieger D.T. Proopiomelanocortin-derived peptides in testis, ovary, and tissues of reproduction // Recent. Prog. Horm. Res. 1987. - V. 43. - P. 1-28.

13. Blok-Perkowska D., Muzalewski F., Konopinska D. Antibacterial properties of tuftsin and its analogs // Antimicrob. Agents Chemother. 1984. - V. 25. - P. 134-6.

14. Brantl V., Gramsch C., Lottspeich F., Mertz R., Jaeger K.H., Herz A. Novel opioid peptides derived from hemoglobin: hemorphins // Eur. J. Pharmacol. 1986. - V. 125. - P. 309-10.

15. Bromberg Y., Pick E. Activation of macrophage adenylate cyclase by stimulants of the oxidative burst and by arachidonic acid two distinct mechanism // Cell Immunol. - 1981. -61. -P. 90-103.

16. Bruley-Rosset M., Hercend Т., Rappaport H., Mathe G. Immunorestorative capacity of tuftsin after long-term administration to aging mice // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. -P. 242-50.

17. Bump N.J., Lee J., Wleklik M., Reichler J., Najjar V.A. Isolation and subunit composition of tuftsin receptor // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1986. - Y. 83. - P. 7187-91.

18. Bump N.J., Najjar V.A. Reichler J. The characteristics of purified HL60 tuftsin receptors // Mol. Cell. Biochem. 1990. - V. 92. - P. 77-84.

19. Carr D.J.J. The role of endogenous opioids and their receptors in the immune system // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1991. - V. 198. - P. 710-20.

20. Carraway RE. Rapid proteolytic generation of neurotensin-related peptide(s) and biologic activity during extraction of rat and chicken gastric tissues // J. Biol. Chem. 1984. -V. 259.-P. 10328-34.

21. Carraway R.E., Mitra S.P., Cochrane D.E. Structure of a biologically active neurotensin-related peptide obtained from pepsin-treated albumin(s) // J. Biol. Chem. 1987. -V. 262.-P. 5968-73.

22. Carraway R.E., Mitra S.P., Ferris C.F. Pepsin treatment of mammalian plasma generates immunoreactive and biologically active neurotensin-related peptides in micromolar concentrations// Endocrinol. 1986. - Y. 119. -P. 1519-26.

23. Carraway R.E., Cochrane D.E., Boucher W., Mitra S.P. Structures of histamine-releasing peptides formed by the action of acid proteases on mammalian albumin(s) // J. Immunol. 1989. -V. 143. - P. 1680-4.

24. Catane R., Schlanger S., Weiss L., Penchas S., Fuks Z., Treves A.J., Gottlieb P., Fridkin M. Toxicology and antitumor activity of tuftsin // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419.-P. 251-60.

25. Cerpa-Poljak A., Lahnstein J., Mason K.E., Smythe G.A., Duncan M.W. Mass spectrometric identification and quantification of hemorphins extracted from human adrenal and pheochromocytoma tissue // J. Neurochem. 1997. - V. 68. - P. 1712-9.

26. Cheng Y.C., Prusoff W.H. Relationship between the inhibition constant (KI) and the concentration of inhibitor which causes 50 percent inhibition (150) of an enzymatic reaction // Biochem. Pharmacol. 1973. - V. 22. - P. 3099-108.

27. Cochrane D.E., Carraway R.E., Feldberg R.S., Boucher W., Gelfand J.M. Stimulated rat mast cells generate histamine-releasing peptide from albumin // Peptides. 1993. - V. 14. -P. 117-23.

28. Constantopoulos A. Congenital tuftsin deficiency // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419.-P. 214-9.

29. Constantopoulos A., Najjar V.A. Tuftsin, a natural and general phagocytosis-stimulating peptide affecting macrophages and polymorphonuclear granulocytes // Cytobios. 1972,-V. 6.-P. 97-100.

30. Contractor S.F., Mason R.M., Oakey M. Purification and properties of human placental cathepsin D // Placenta. 1982. - V. 3. - P. 45-56.

31. Corazza G.R., Zoli G., Ginaldi L., Cancellieri C., Profeta V., Gasbarrini G., Quaglino D. Tuftsin deficiency in AIDS // Lancet. 1991. - V. 337. - P. 12-3.

32. Dagouassat N., Garreau I., Sannier F., Zhao Q., Piot J.M. Generation of VV-hemorphin-7 from globin by peritoneal macrophages // FEBS. 1996. - V. 382. - P. 37-42.

33. Duethman D., Dewan N., Conlon J.M. Isolation of the opioid peptide Leu-Val-Val-hemorphin-7 from bronchoalveolar lavage fluid of a patient with non-small cell lung cancer // Peptides. -2000.-V. 21.-P. 137-42.

34. Dutta R.C., Puri A., Anand N. Immunomodulatory potential of hydrophobic analogs of Rigin and their role in providing protection against Plasmodium berghei infection in mice // Int. Immunopharmacol. 2001. -V. 1. - P. 843-55.

35. Erchegyi J., Kastin A.J., Zadina J.E., Qiu X.D. Isolation of a heptapeptide Val-Val-Tyr-Pro-Trp-Thr-Gln (valorphin) with some opiate activity // Int. J. Pept. Protein Res. 1992. -V. 39.-P. 477-84.

36. Fahlbusch В., Dornberger G. Studies of assay conditions for macrophage migration from an agarose droplet // Acta Biol. Med. Ger. 1979. - V. 38. - P. 1453-60.

37. Fitzwater S., Hodes Z.I., Scheraga H.A. Conformational energy study of tuftsin // Macromolecules. 1978. -V. 11. - P. 805-11.

38. Florentin I., Martinez J., Maral J., Pelletier M., Chung V., Roch-Arveiller M., Bruley-Rosset M., Giroud J.P., Winternitz F., Mathe G. Immunopharmacological properties of tuftsin and some analogues // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 177-91.

39. Fruitier I., Garreau I., Piot J.M. Cathepsin D is a good candidate for the specific release of a stable hemorphin from hemoglobin in vivo: VV-hemorphin-7 // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1998. - V. 246. - P. 719-24.

40. Fruitier I., Garreau I., Lacroix A., Cupo A., Piot J.M. Proteolytic degradation of hemoglobin by endogenous lysosomal proteases gives rise to bioactive peptides: hemorphins // FEBS Lett. 1999. - V. 447. - P. 81-6.

41. Gergely J., Sarmay G. The two binding-site models of human IgG binding Fcgamma receptors // FASEB J. 1990. - V. 4. - P. 3275-83.

42. Gershonov E., Granoth R., Tzenoval E., Gaoni Y., Fridkin M. 1-Aminocyclobutanecarboxylic acid derivates as novel structural elements in bioactive peptides: application to tuftsin analogs // J. Med. Chem. Neuropathol. 1997. - V. 30. - P. 213-22.

43. Giedroc D.P., Puett D. Binding of a synthetic beta-endorphin peptide to calmodulin // Mol. Pharmacol. 1985. - V. 28. - P. 588-93.

44. Gispen W.H. ACTH and brain membrain phosphorylation: a model for modulation by neuropeptide // Acta Biol. Med. Gen. 1982. - V. 41. - P. 279-88.

45. Gilman S.C., Schwartz J.M., Milner R.J., Bloom F.E., Feldman J.D. p-endorphin enhances lymphocyte proliferative responses // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982. - V. 79. -P. 4226-4230.

46. Gilmore W., Weiner L.P. р-endorphin enhances interleukin-2 (IL-2) production in murine lymphocytes // J. Neuroimmunol. 1988. - V. 18. - P. 125-138.

47. Glamsta E.L., Marklund A., Hellman U., Wernstedt C., Terenius L., Nyberg F. Isolation and characterization of a hemoglobin-derived opioid peptide from the human pituitary gland // Regul. Pept. -1991. V. 34. - P. 169-79.

48. Glamsta E.L., Meyerson В., Silberring J., Terenius L., Nyberg F. Isolation of a hemoglobin-derived opioid peptide from cerebrospinal fluid of patients with cerebrovascular bleedings // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - V. 184. - P. 1060-6.

49. Glamsta E.L., Morkrid L., Lantz I., Nyberg F. Concomitant increase in blood plasma levels of immunoreactive hemorphin-7 and beta-endorphin following long distance running // Regul. Pept. 1993. - V. 49. - P. 9-18.

50. Gottlieb P., Stabinsky Y., Hiller Y., Beretz A., Hazum E., Tzehoval E., Feldman M., Segal S., Zakuth V., Spirer Z., Fridkin M. Tuftsin receptors //Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. -V. 419.-P. 93-106.

51. Granoth R., Vadai E., Burstein Y., Fridkin M., Tzehoval E. Tuftsin-THF-y2 chimeric peptides: potential novel immunomodulators // Immunopharmacol. 1997. - V. 37. - P. 43-52.

52. Greaves M.F., Brown G. Purification of human T and В lymphocytes // J. Immunol. -1974.-V. 112.-P. 420-3.

53. Gupta C.M., Puri A., Jain R.K., Bali A., Anand N. Protection of mice agains Plasmodium berghei infection by a tuftsin derivative // FEBS Lett. 1986. - V. 205. - P. 3514.

54. Guru P.Y., Agrawal A.K., Singha U.K., Singhal A., Cupta C.M. Drug targeting in Leishmania donovani infections using tuftsin-bearing liposomes as a drug verhicles // FEBS Lett. 1989.-V. 245. - P. 204-8.

55. Harris P., Ralph P. Human Leukemic models of myelomonocytic development: a review of the HL-60 and U-937 cell lines // J. Leuk. Biol. 1985. - V. 37. - P. 407-22.

56. He X., Weyand C.M., Goronzy J.J., Zhong W., Stuart J.M. Bi-directional modulation of T cell-dependent antibody production by prostaglandin E(2) // Int. Immunol. 2002. - V. 14.-P. 69-77.

57. Heijnen С. J., Croiset G., Zijlstra J., Ballieux R.E. Modulation of lymphocyte function by endorphins // Ann. N.Y. Acad. Sci. -1987. V. 496. - P. 161-5.

58. Herman S.Z., Stachura Z., Krzeminski Т., Plech A., Siemion I.Z., Nawrocka E. Central effects of tuftsin // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 156-63.

59. Hisatsune K., Nozaki S., Ishikawa Т., Hayashi M., Nogaki K., Ogawa H. A biochemical study of the phagocytic activities of tuftsin and its analogues // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 205-13.

60. Hobbs M.V., Houghten R.A., Janda J.A., Weigle W.O., Morgan EL. Induction of human В cell differentiation by Fc region activators. I. Identification of an active tetrapeptide // Clin. Immunol. Immunopathol. 1989. - V. 50. - P. 251-63.

61. Hobbs M.V., Morgan E.L., Weigle W.O. Bifunctional lymphocyte regulation by human Fc gamma fragments and a synthetic peptide, p23, derived from the Fc region // Immunol. Lett. 1985b. - V. 9. - P. 201-6.

62. Hobbs M.V., Morgan E.L., Houghten R.A., Thoman M.L., Weigle W.O. Identification of a lymphocyte-activating pentapeptide sequence in the Fc region of human IgGl // J. Immunol.- 1987,-V. 138. P. 2581-6.

63. Julliard J.H., Shibasaki Т., Ling N., Guillemin R. High-molecular-weight immunoreactive beta-endorphin in extracts of human placenta is a fragment of immunoglobulin G // Science. 1980. - V. 208. - P. 183-5.

64. Kamenskii A.A., Sarycheva N.I., Kalikhevich V.N. Effect of the immunostimulator tuftsin on the heart rate and body temperature of albino rats // Fiziol. Zh. SSSR. 1988. - V. 74. - P. 547-50.

65. Kavai M., Lukacs K., Szegedi G., Szekere M., Erchegyi J. Chemotactic and stimulating effect of tuftsin and its analogues on human monocytes // Immunol.Lett. 1981. -V. 2.-P. 219-24.

66. Khansari D.N., Jafari P. A thymosin-tuftsin conjugate as a new potential immunomodulator in cattle // Adv. Vet. Sci. Сотр. Med. 1990. - V. 35. - P. 161-77.

67. Khristoforov V.S., Kutyshenko V.P., Abramov V.M., Zav'ialov V.P. 1H-NMR studies of the ACTH-like immunoregulatory peptides // Biofizika. 1997. - V. 42. - P. 1180-5.

68. Konopinska D., Nawrocka E., Siemion I.Z., Szymaniec S., Klonowska E. Synthetic and conformational studies with tuftsin and its analogues / Loffet. A edc. Peptides. -Bruxelles: Edit, de I'Universite de Bruxelles, 1976. P. 535-9.

69. Konopinska D., Najjar V.A., Callery M. Synthesis of tuftsinyltuftsin with potential tumoricidal activity // Polish. J. Chem. 1982. - V. 56. - P. 1063-6.

70. Konopinska D., Luczak M., Wleklik M., Gumulka S., Kazanowska B. Elongated tuftsin analogues synthesis and biological investigation // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 1983. - V. 419.-P. 35-43.

71. Kraus-Berthier L., Remond G., Vissali M., Heno D., Portevin В., Vincent M. In vivo immunopharmacological properties of tuftsin and four analogues // Immunopharmacol. -1993.-V. 25.-P. 261-7.

72. Martinez J., Laur J., Winternitz F. Synthesis of an IgG fragment decapeptide exhibiting phagocytosis stimulating activity of polymorphonuclear leucocytes // Int. J. Pept. Protein Res. 1983. - V. 22. - P. 119-24.

73. Martinez J., Winternitz F. Bactericidal activity of tuftsin // Mol. Cell Biochem. 1981. -V. 41.-P. 123-36.

74. McCain H.W., Lamster I.В., Bozzone J.M., Grbic J.T. р-endorphin modulates human immune activity via non-opiate receptor mechanisms // Life Sci. 1982. - V. 31. - P. 16191624.

75. Meizel H. Biochemical properties of regulatory peptides derived from milk proteins // Biopolimers. 1997. - V. 43. - P. 119-128.

76. Melzig M.F., Nylander I., Vlaskovska M., Terenius L. р-endorphin stimulates proliferation of small cell lung carcinoma cells in vitro via nonopioid binding sites // Exp. Cell Res. 1995. V. 219. - P. 471-476.

77. Mezo G., Szekerke M., Sarmay G., Gergely J. Synthesis and functional studies of tuftsin analogs containing isopeptide bond // Peptides. 1990. - V. 11. - P. 405-15.

78. Mitin Y.V., Navolotskaya E.V., Vasilenko R.N., Abramov V.M., Zav'yalov V.P. Synthesis and properties of the peptides corresponding to the ACTH-like sequence of human immunoglobulin G1 // Int. J. Pept. Protein Res. 1993. - V. 41. - P. 517-21.

79. Moeller I., Albiston A.L., Lew R.A., Mendelsohn F.A., Chai S.Y. A globin fragment, LVV-hemorphin-7, induces 3H.thymidine incorporation in a neuronal cell line via the AT4 receptor// J. Neurochem. 1999. -V. 73.-P. 301-8.

80. Moeller I., Chai S.Y., Smith I., Lew R., Mendelsohn F.A. Haemorphin peptides may be endogenous ligands for brain angiotensin AT4 receptors // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. Suppl. 1998. - V. 25. - P. S68-71.

81. Moeller I., Lew R.A., Mendelsohn F.A., Smith A.I., Brennan M.E., Tetaz T.J., Chai S.Y. The globin fragment LVV-hemorphin-7 is an endogenous ligand for the AT4 receptor in the brain // J. Neurochem. 1997. - V. 68. - P. 2530-7.

82. Moisan S., Harvey N., Beaudry G., Forzani P., Burhop K.E., Drapeau G., Rioux F. Structural requirements and mechanism of the pressor activity of Leu-Val-Val-hemorphin-7, a fragment of hemoglobin beta-chain in rats // Peptides. 1998 .-V. 19.-P. 119-31.

83. Morgan E.L., Hobbs M.V., Thoman M.L., Janda J., Noonan D.J., Kadar J., Weigle W.O. Induction of human В cell differentiation by Fc region activators. II. Stimulation of IL-6 production // J. Immunol. 1990. - V. 144. - P. 2499-505.

84. Morgan E.L., Hugh Т.Е., Weigle W.O. Isolation and identification of a biologically active peptide derived from the CH3 domain of human IgGl // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1982,-V. 79.-P. 5388-91.

85. Morgan E.L., Spiegelberg H.L., Weigle W.O. Comparison of the binding of radiolabeled human IgG and Fc fragments to murine spleen cells // Scand. J. Immunol. -1979.-Y. 10.-P. 395-402.

86. Morgan E.L., Thoman M.L., Walker S.M., Weigle W.O. Regulation of the immune response. II. Characterization of the cell population(s) involved in the Fc fragment-induced adjuvant effect // J. Immunol. 1980c. - V. 125. - P. 1275-9.

87. Morgan E.L., Weigle W.O. Regulation of Fc fragment-induced murine spleen cell proliferation // J. Exp. Med. 1980a. - V. 151. - P. 1-11.

88. Morgan E.L., Weigle W.O. Polyclonal activation of murine В lymphocytes by Fc fragments. I. The requirement for two signals in the generation of the polyclonal antibody response induced by Fc fragments // J. Immunol. 1980b. - V. 124. - P. 1330-5.

89. Morgan E.L., Weigle W.O. Activation of T lymphocytes by the Fc portion of immunoglobulin // J. Supramol. Struct. 1980c. - V. 13. - P. 479-88.

90. Mosmann T. Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assays // J. Immunol. Meth. V. 65. - P. 55-63.

91. Najjar V.A. Molecular basis of familial and acquired phagocytosis deficiency involving the tetrapeptide, Thr-Lys-Pro-Arg, tuftsin // Exp. Cel. Biol. 1978. - V. 46. - P. 114-26.

92. Najjar V.A. Biological and biochemical characteristics of the the tetrapeptide tuftsin, Thr-Lys-Pro-Arg // Adv. Exp. Med. Biol. 121A (Macrophages Lymphocytes, Pt.A) 1980. -P. 131-47.

93. Najjar V.A. Tuftsin, a natural activator of phagocyte cells: an overview // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983,-V. 419.-P. 1-11.

94. Najjar V.A. The clinical and physiological aspects of tuftsin deficiency syndromes exhibitihg defective phagocytosis // Klin. Wochenschr. 1979. - V. 57. - P. 751-6.

95. Najjar V.A., Constantopoulos A. A new phagocytosis-stimulating tetrapeptide hormone tuftsin and its role in deases // J. Rethiculoendotel. Soc. 1972. - V. 12. - P. 197215.

96. Najjar V.A., Nishioka K. "Tuftsin": a natural phagocytosis stimulating peptide // Nature. 1970. - V. 228. - P. 672-3.

97. Najjar V.A., Linehan L., Konopinska D. The antineoplastic effects of tuftsin and tuftsinyltuftsin on B16/5B melanoma and L1210 cells // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419.-P. 261-7.

98. Naldini L., Cirillo D.; Moody T.W., Comoglio P.M., Schlessinger J., Kris L. Solubilization of the receptor for the neuropeptide gastrin-releasing peptide (bombesin) with functional ligand binding properties // Biochem. 1990. - V. 29. - P. 5153-60.

99. Naville D., Barjhoux L., Jallard C., Saez J.M., Durand P., Begeot M. Stable expression of normal and mutant human ACTH receptor. Study of ACTH binding and coupling to adenilate cyclase // Mol. Cell Endocrinol. 1997. -V. 129. - P. 83-90.

100. Navolotskaya E.V., Malkova N.V., Zargarova T.A., Lepikhova T.N., Zav'yalov V.P., Lipkin V.M. Synthetic beta-endorphin-like peptide immunorphin binds to non-opioid receptors for beta-endorphin on T lymphocytes // Peptides. 2001. - V. 22. - P. 2009-13.

101. Nieber K., Oehme P., Arefolov V.A., Valdman A.V. Effect of the N-terminal tetrapeptide of substance P SP(l-4) and tuftsin on the pre-and postsynaptic transmitter outflow in rat adrenal gland slices // Biomed. Biochim. Acta. 1988. - V. 47. - P. 663-6.

102. Nikiforovich G.V. Calculation of stable conformations of tuftsin // Bioorg. Khim. -978.-V. 4. -P. 1427-30.

103. Nishimura K., Hazato T. Isolation and identification of an endogenous inhibitor of enkephalin-degrading enzymes from bovine spinal cord // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1993.-V. 194.-P. 713-9.

104. Nishioka K. Anti-tumor effect of the physiological tetrapeptide tuftsin // Br. J. Cancer.- 1979. V. 39.-P. 342-5.

105. Nishioka K., Babcock G.F., Philips J.H., Banks R.A., Amoscato A.A. In vivo and in vitro antitumor activities of tuftsin // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 234-41.

106. Nishioka K., Hopfer R.L., El-Hagin Т., Lopez-Berestein G. Prophylaxis of Candida albicans infection with tuftsin // J. Antimicrob. Chemother. 1986. - V. 17. - P. 361-3.

107. Nishioka K., Hurr K.J., Dessens S.E., Rodriguez T.Jr. A comparative study of Leu'jTuftsin and tuftsin, a natural phagocytosis-stimulating peptide // Int. J. Biochem. -1991.-V. 23.-P. 627-30.

108. Nishioka К., Obeyesekere N.U., McMurray J.S. Enhanced phagocytosis activity of cyclic analogs of tuftsin // Biochem. Pharmacol. 1995. - V. 49. - P. 735-8.

109. Nishioka K., Wagle J.R., Minter A.M., Rodriguez T.Jr., Dessens S.E. Tuftsin-enhanced thymidine incorporation by murine splenic monocytes // Int. J. Immunopharmacol. -1990. -V. 12. P. 905-8.

110. Nyberg F., Sanderson K., Glamsta E. The hemorphins: a new class of opioid peptides derived from the blood protein hemoglobin // Biopolimers. 1997. - V. 43. - P. 147-56.

111. O'connor S.D., Smith P.E., Al-Obeidi F., Pettitt B.M. Quenched molecular dynamic simulations of tuftsin and proposed cyclic analogues // J. Med. Chem. 1992. - V. 35. - P. 2870-81.

112. Oh Y., Alpuche-Aranda C., Berthiaume E., Jinks Т., Miller S.I., Swanson J.A. Rapid and complete fusion of macrophage lysosomes with phagosomes containing Salmonella typhimurium II Infection and Immunity. 1996. - V. 64. - P. 3877-83.

113. Ortega E., Forner M.A., Barriga C. Effect of (3-endorphin on adherence, chemotaxis and phagocytosis of Candida albicans by peritoneal macrophages // Сотр. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 1996. -V. 19. - P. 267-74.

114. Paradovski A., Rozda M., Nawrocka E., Siemion I.Z. Effects of intra venous tuftsin administration on histamine concentration in tissues of rabbits and guinea-pigs // Arch. Immunol. Ther. Exp. 1991. - V. 39. - P. 159-64.

115. Passwell J.H., Colten H.R., Schneeberger E.L., Marom Z., Merler E. Modulation of human monocyte functions by Fc fragments of IgG: a comparison to other monocyte 'activators' // Immunol. 1980. - V. 41. - P. 217-25.

116. Pawan K., Ivanov B.B., Kabilan L., Rao D.N. Construction of a synthetic immunogen: use of the natural immunomodulator polytuftsin in malaria vaccines against RESA antigen of Plasmodium falciparum II Vaccine. 1994. - V. 12. - P. 819-24.

117. Peltz G.A., Grundy H.O., Lebo R.V, Yssel H., Barsh G.S., Moore K.W. Human Fc gamma RIII: cloning, expression, and identification of the chromosomal locus of two Fc receptors for IgG // Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 1989. - V. 86. - P. 1013-7.

118. Phillips J.H., Nishioka K., Babcock G.F. Tuftsin-induced enhancement of murine and human natural cell-mediated cytotoxicity // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 192203.

119. Piot J.M., Zhao Q., Guillochon D., Ricart G., Thomas D. Isolation and characterization of two opioid peptides from a bovine hemoglobin peptic hydrolysate // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 1992,-V. 189.-P. 101-10.

120. Przewlocki R., Hassan A.H., Lason W., Epplen C., Herz A., Stein C. Gene expression and localization of opioid peptides in immune cells of inflamed tissue: functional role in antinociception // Neuroscience. 1992. - V. 48. - P. 491-500.

121. Ratcliffe A., Stanworth D.R. The use of synthetic gamma-chain peptides in the localization of the binding site(s) on human IgGl for the Fc receptors of homologous monocytes and heterologous mouse macrophages // Immunol. Lett. 1982. - V. 4. - P. 21521.

122. Raychaudhuri G., McCool D., Painter R.H. Human IgGl and its Fc fragment bind with different affinities to the Fc receptors on the human U937, HL-60 and ML-1 cell lines // Mol. Immunol. 1985. - V. 22. - P. 1009-19.

123. Rocchi R., Biondi L., Filira F., Gobbo M., Dagan S., Fridkin M. Synthesis of modified tuftsin containing monosaccharides or monosaccharide derivaties // Int. J. Peptide Protein Res. 1987b. - V. 29. - P. 250-61.

124. Rocchi R., Biondi L., Filira F., Tzehoval E., Dagan S., Fridkin M. Glyco-tuftsin derivatives modulate interleukin-1 and tumor necrosis factor production // Int. J. Pept. Protein Res.-1991.-V. 37.-P. 161-6.

125. Sanderson K., Nyberg F., Khalil Z. Modulation of peripheral inflammation by locally administered hemorphin-7 // Inflamm. Res. 1998. - V. 47. - P. 49-55.

126. Schneider Y.J., de Duve C., Trouet D. Fate of plasma membrane during endocytosis. III. Evidence for incomplete breakdown of immunoglobulins in lysosomes of cultured fibroblasts // J. Cell Biol. 1981. - V. 88. - P. 380-7.

127. Schweigerer L., Schmidt W., Teschemacher H., Gramsch C. P-endorphin: surface binding and internalization in thymoma cells // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 18985. - V. 82. -P. 5751-5.

128. Sedmark J.J., Grossberg S.E. A rapid sensitive and versatile assay for protein using coomassie brilliant blue G-250 // Anal. Biochem. 1977. - V. 79. - P. 544-52.

129. Segal S., Tzehoval E., Feldman M. The function of tuftsin and similar sequences in other proteins // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 168-76.

130. Shaker M. Shahabi N.A., Sharp B.M. Expression of naloxone-resistant p-endorphin binding sites on a20 cells: effect of concanavalin A and dexamethasone // Immunopharmacol. 1994.- V. 28.-P. 183-92.

131. Shahabi N.A., Burtness M.Z., Sharp B.M. N-acetyl-P-endorphini-31 antagonizes the supressive effect of p-endorphin 1.31 on murine splenocyte proliferation via a naloxone-resistant receptor// Biochem. Biophys. Res. Com. 1982. - V. 175. - P. 936-42.

132. Shahabi N.A., Linner K.M., Sharp B.M. Murine splenocytes express a naloxone-insensitive binding site for (3-endorphin // Endocrinol. 1990a. - Y. 126. - P. 1442-8.

133. Shahabi N.A., Peterson P.K., Sharp B. р-endorphin binding to naloxone-insensitive sites on a human mononuclear cell line (U937): effects of cations and guanosine triphosphate // Endocrinol. 19906. -V. 126. - P. 3006-15.

134. Siemion I.Z., Kluczyk A. Tuftsin: On the 30-year anniversary of Victor Najjar's discovery // Peptides 1999. - V. 20. - P. 645-74.

135. Silberring J., Nyberg F. Rapid analysis of endogenous LVV-hemorphin-7 in cerebrospinal fluid by size-exclusion chromatography and electrospray ionization mass spectrometry // J. Chromatogr. A. 1997. - Y. 777. - P. 41-5.

136. Simpkins C.O., Dickey C.A., Fink M.P. Human neutrophil migration is enhanced by P-endorphin // Life Sci. 1984. - V. 34. - P. 2251-5.

137. Singh A.K. Proteolytic machinery of glomerular epithelial cells against IgG // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1992. - V. 186. - P. 639-44.

138. Slemmon J.R., Wengenack T.M., Flood D. Profiling of endogenous peptides as a tool for studing development and neurological disease // Biopolimers. 1997. - V. 43. - P. 157-70.

139. Spirer Z., Weisman Y., Zakuth V., Fridkin M., Bogair N. Decreased serum tuftsin concentrations in sickle cell disease // Arch. Dis. Child. 1980. - V. 55. - P. 566-7.

140. Spirer Z., Zakuth V., Orda R., Wiznitzer Т., Mondorf W., Stefanescu Т., Fridkin M. Acqired tuftsin deficiency // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1983. - V. 419. - P. 220-6.

141. Spirer Z., Zakuth V., Tzehoval E., Dagan S., Fridkin M., Golander A., Melamed I. Tuftsin stimulates IL-1 production by human mononuclear cells, human spleen cells and mouse spleen cells in vitro II J. Clin. Lab. Immunol. 1989. - V. 28. - P. 27-31.

142. Sugiyama K., Ogino Т., Ogata K. Histamine release induced by proteolytic digests of human serum albumin: isolation and structure of an active peptide from pepsin treatment // Jpn. J. Pharmacol. 1989. -V. 49. - P. 165-71.

143. Surkis R., Rubinraut S., Dagan S., Tzehoval E., Fridkin M., Yosefh R.B., Catane R. Polytuftsin: a potential precursor for slow release of the phagocytosis stimulating peptide tuftsin // Int. J. Biochem. 1990. - V. 22. - P. 193-5.

144. Sydbom A., Ware J., Mogard M.H. Stimulation of histamine release by the peptide kinetensin // Agents Actions. 1989. - V. 27. - P. 68-71.

145. Szikra J., Benyhe S., Orosz G., Darula Z., Piot J.M., Fruitier I., Monory K., Hanoune J., Borsodi A. Radioligand binding properties of VV-hemorphin 7, an atypical opioid peptide // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - V. 281. - P. 670-7.

146. Teschemacher H., Koch G., Brantl V. Milk-protein-derived opioid receptor ligands // Biopolimers. 1997. - V. 43.-P. 99-118.

147. Thoman M.L., Morgan E.L., Weigle W.O. Activation of T lymphocytes by the Fc portion of immunoglobulin // J. Supramol. Struct. 1980. - V. 13. - P. 479-88.

148. Titov V.M., Meshcheryakova E.A., Balashova T.A., Andronova T.M., Ivanov V.T. Synthesis and immunological evaluation of the conjugates composed from a muramyl peptide GMDP and tuftsin // Int. J. Peptide Protein Res. 1995. - V. 45. - P. 348-55.

149. Tong Y., Wang H. Homo sapiens immunoglobulin G1 Fc fragment mRNA, partial cds. ACCESSION AF150959. Submitted (12-MAY-1999) Applied Mol. Biol., Microbiol. & Epidemiol., 20 Dongdajie, Beijing 100071, China.

150. Trudelle Y., Brack A., Delmas A., Pedoussaut S., Rivaille P. Synthesis of a new carrier for immunization: polytuftsin // Int. J. Peptide Protein Res. 1987. - V. 30. - P. 54-60.

151. Tsong S.D., Phillips D., Halmi N., Liotta A.S., Margioris A., Bardin C.W., Krieger D.T. ACTH and beta-endorphin-related peptides are present in multiple sites in the reproductive tract of the male rat // Endocrinol. 1982. - V. 110. - P. 2204-6.

152. Wagle J.R., Ansevin A.T., Dessens S.E., Nishioka K. Specific translocation of tuftsin (Thr-Lys-Pro-Arg), a natural immunomodulating peptide, into the nuclei of human monocytes // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1989. - V. 159. - P. 1147-53.

153. Wahlstrom Т., Laatikainen Т., Salminen К., Leppaluoto J. Immunoreactive beta-endorphin is demonstrable in the secretory but not in the proliferative endometrium // Life Sci. 1985. -V. 36. - P. 987-990.

154. Watanabe T. Binding of Fc fragments of IgG from human and seven animal species to Mycoplasma salivarium cells // Microbios. 1993. V. 76. - P. 77-84.

155. Wleklik M.S., Levy S.V., Luszak M., Najjar V.A. Supression of Friend virus-induced leukemia in mice by tuftsin // J. Gen. Virol. 1986. - V. 67. - P. 2001-4.

156. Wleklik M.S., Luszak M., Najjar V.A. Tuftsin induced tumor necrosis activity // Mol. Cell. Biochem. 1987. - V. 75. - P. 169-74.

157. Woods J.A., Shahabi N.A., Sharp B.M. Characterization of a naloxone-insensitive (3-endorphin receptor on murine peritoneal macrophages // Life Sci. V. 1997. - P. 573-86.

158. Valdeavella C.V., Blatt H.D., Pettitt B.M. Simulation of conformers of tuftsin and a cyclic tuftsin analog // Int. J. Peptide Protein Res. 1995. - V. 46. - P. 372-80.

159. Van Der Bergh P., Rozing J., Nagelkerken L. Two opposing modes of action of p-endorphin on lymphocyte function // Immunol. 1991. - V. 72. - P. 537-43.

160. Van Der Bergh P., Rozing J., Nagelkerken L. Identification of two moieties of of P-endorphin with opposing effects on rat T-cell proliferation // Immunol. 1993. - V. 79. - P. 18-23.

161. Veretennikova N.I., Chipens G.I., Nikifirovich G.V., Betinsh Y.R. Rigin, another phagocytosis-stimulating tetrapeptide isolated from human IgG. Confirmations of a hypothesis // Int. J. Pept. Protein Res. 1981. - V. 17. - P. 430-5.120

162. Yang Y.R., Chiu Т.Н. Opioid and antiopioid actions of Tyr-MIF-1, Tyr-W-MIF-1 and emorphin-4 on rat locus coeruleus neurons: intracellular recording in vitro // Chin. J. Physiol. 1997. - V. 40.-P. 131-5.

163. Yatskin O.N., Philippova M.M., Blishchenko E.Yu., Karelin A.A., Ivanov Y.T. LVV-and VV-hemorphins: comparative levels in rat tissues // FEBS Lett. 1998. - V. 428. - P. 286-90.

164. Zhao Q., Garreau I., Sannier F., Piot J.M. Opioid peptides derived from hemoglobin: hemorphins // Biopolimers. 1997. - Y. 43. - P. 75-98.