Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экзополифосфатазы дрожжей Saccharomyces cerevisiae

ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Кулаковская, Татьяна Валентиновна

Введение А

Актуальность проблемы а' а

Состояние вопроса, цель и задачи исследования а

Научная новизна работы ' а

Практическая значимость работы а

Апробация работы А А

Публикации А

Благодарности а

Часть 1. Обзор литературы. Неорганические ю-бо полифосфаты: локализация, функции, ферменты метаболизма.

Глава 1. Полифосфаты у прокариот. и

1.1. Локализация в клетке. 13

1.2. Функции полиРу прокариот. 15

1.2.1. Резерв фосфата. 15

1.2.2. Участие в процессах запасания и использования энергии. 16

1.2.3. Сохранение в связанной форме и детоксикация катионов 19-21 металлов.

1.2.4. Участие в формировании структуры и функции клеточной 21-22 оболочки.

1.2.5. Участие в формировании мембранных каналов и транспорте.

1.2.6. Регуляция активностей ферментов.

1.2.7. Регуляция экспрессии генов, адаптация к стационарной фазе и 23-26 стрессовым условиям.

Глава 2. Полифосфаты у низших эукариот.

2.1. Локализация в клетке: 27

2.2. Функции полиРу низших эукариот, 29

2.2.1. Резерв фосфата. 29

2.2.2. Участие в биоэнергетических процессах. 30

2.2.3. Участие в запасании и связывании катионов.

2.2.4. Формирование и функционирование клеточной оболочки. 31

2.2.5. Регуляция активности ферментов. 3 3 2.2. б. Участие в регуляции активности генов и обеспечении 34выживания в стрессовых условиях.

Глава 3. Полифосфаты у высших эукариот.

Глава 4. Ферменты обмена неорганических полифосфатов 41*52 прокариот и эукариот.

Глава 5. О компартмент-специфичности ферментов и //"// эволюционном происхождении эукариотической клетки.

Часть 2. Материал и методы исследования. 61- и

1. О&ьект исследования.

2. Получение фракций клеточных органелл и цитозоля. 61

2.1. Получете сферотастов из дрожжевых клеток. 62

2.2. Фракция цитозоля.

2.3. Вакуоли. 63

2.4. Вакуолярные мембраны и вакуолярный сок.

2.5. Ядра. 64

2.6. Митохондрии. 66

2.7. Получение растворимой фракции митохондрий и 68 митохондриалъных мембран.

2.8. Солюбшизация белков мембранной фракции митохондрий. 68

3. Характеристика полученных субклеточных фракций по 69-70 активностям марклуных ферментов.

4. Очистка полифосфатаз из препаратов субклеточных фракций. 70

4.1. Очистка полифосфатазы из фракции цитозоля. 70

4.2. Очистка полифосфатазы из вакуолярного сока.

4.3. Очистка полифосфатазы из растворимой фракции 72 митохондрий.

4.4. Определение молекулярных масс полифосфатаз. 72

5. Определение фосфогидролазных активностей. 73-746. Определение белка. 74-75 7* Очистка полифосфатов от примесей ортофосфата и пирофосфата.

8. Определение ортофосфата. 75

9. Получение антител.

10. Электрофорез белков.

11. Иммуноблоттинг белков. 76

12. Определение ЛрН и Ем.

13. Опыты по транспорту радиоактивных субстршпов.

Часть 3. Результаты и их обсуждение. 78-171 Характеристика экзополифосфатаз различных компартментов клеток дрожжей 8асскаготусе

Глава 1. Обнаружение полифосфатазных активностей в 78. препаратах субклеточных фракций дрожжей 5. сггех

§1аг.

Глава 2. Цитозоль.

2.1. Некоторые свойства полифосфатазной активности фракции цитозоля 8. cerevisiae.

2.2. Аденозин-5'-тетрафосфат и гуанозин-5'-тетрафосфат -субстраты экзополифосфатазы цитозоля дрожжей 8. сегеу{$1ае.

2.3. Очистка полифосфатазы из фракции цитозоля 8. сегеу181ае.

2.4. Свойства очищенной полифосфатазы цитозоля.

90 90

Глава 3. Вакуоли.

3.1. Характеристика препарата изолированных вакуолей дрожжей 8. сегеп81ае: транспортные системы, их свойства и механизмьи

3.2. Фосфогидролазы вакуолей 8. сегеп81ае: локализация и влияние некоторых ингибиторов.

3.3. Сравнение свойств полифосфатазных активностей вакуолярного сока и тонопласта

3.4. Очистка и характеристика экзополифосфатазы вакуолярного сока.

106-133 106

Глава 4. Митохондрии.

4.1.0бнаружение полифосфатазной активности в митохондриях дрожжей.

4.2. Сравнение экзополифосфатазных активностей растворимой и мембранной фракций митохондрий.

4.3. Очистка экзополифосфатазы из растворимой фракции митохондрий.

134-161 134

Глава 6. Ядра.

5.1. Первичная характеристика фосфогидролаз ядер дрожжей 8. сегег1$1ае.

5.2. Свойства полифосфатазной активности изолированных ядер 8. сегеп81ае

162-168 162

Глава 6. Влияние условий культивирования на активность полифосфатаз некоторых компартментов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экзополифосфатазы дрожжей Saccharomyces cerevisiae"

Актуальность проблемы

Изучение неорганических полифосфатов (полиР), линейньк полимеров, в которых фосфатные остатки связаны фосфоангидридной связью, является актуальной проблемой современной биохимии. Кроме очевидной роли резерва фосфата, этим полимерам теперь совершенно обоснованно придается роль важных регуляторных соединений у организмов, стоящих на различных стадиях эволюционного развития, от прокариот до животных и растений (Кулаев,1975; Kulaev, 1994; Komberg, 1995).

Получены данные, свидетельствующие об участии поли? в процессах запасания и расходования энергии (Кулаев, 1975; Kulaev, 1979; Kulaev and Vagabov, 1983; Kornberg, 1995), в поддержании ионного баланса (Lichko et al., 1982; Keasling, 1997), в структурной организации клеточной стенки (Kulaev and Vagabov, 1983; Kulaev, 1994), в формировании специальных каналов, ответственных за транспорт некоторых ионов и, возможно, ДНК через биологические мембраны (Reusch and SadofF, 1988; Рош, 2000), в регуляции экспрессии генов и активности ферментов метаболизма ДНК, РНК и полисахаридов (Komberg, 1995; Kornberg, 1999; Komberg et al., 1999).

Изучение полиР и ферментов их метаболизма приобрело в последние годы новое значение для биотехнологии. Основой разрабатываемых в настоящее время биотехнологических процессов очистки сточных вод от фосфата является запасание полиР бактериями, обитающими в илах очистных сооружений (Deinema et al, 1985; Мино, 2000; Кислинг и др., 2000, Кортсти и др.,2000). Обнаружение участия полиР и экзополифосфатаз в регуляции жизненного цикла клеток костной ткани открывает новые пути поиска лекарственных средств, эффективных для лечения заболеваний, связанньпс с нарушением обменных процессов в этой ткани (Шредер и др., 2000). Установленная недавно взаимосвязь между метаболизмом полиР и патогенностью микроорганизмов представляет особый интерес для разработки подходов в борьбе с инфекционными заболеваниями и для получения вакцинных штаммов (Komberg étal, 1999).

На основе полиР создаются биодеградабельные волокна и материалы для нужд медицины и техники (Griffith, 1992; Nelson et al., 1993; Romberg, 1999).

Из5Аение метаболизма полиР актуально в свете проблем современной геохимии и экологии. Присутствие в почвах избьггка орто- и полифосфатов вследствие техногенного загрязнения влияет на трансформацию органических и минеральных соединений в почве, на характер доминирующих почвенных микробных сообществ и в конечном итоге на продуктивность сельскохозяйственных культур (Кудеярова, 1993).

ПолиР широко применяются в качестве моющих средств и пищевых добавок (Е-452), что делает необходимым изучение путей утилизации этих полимеров живыми организмами.

Одним из широко распространенных ферментов метаболизма полиР является экзополифосфатаза (полифосфат фосфогидролаза КФ 3.6.1.11.), отщепляющая ортофосфат с конца полимерной цепи полиР. Экзополифосфатазы не только играют чрезвычайно важную роль в метаболизме полиР в целом, но и участвуют в биологических процессах, важных с точки зрения биотехнологии и медицины: очистке сточных вод от фосфата микроорганизмами активированных илов (Кортсти и др., 2000; Кислйнг и др.,2000), развитии клеток костной ткани (Шредер и др., 2000)

У эукариотических микроорганизмов экзополифосфатаза является наиболее активным ферментом метаболизма полиР. Однако систематические данные о свойствах экзополифосфатаз, их локализации и сравнительной характеристике у эукариот до недавнего времени отсутствовали. Поэтому актуальной задачей является сравнительное изучение свойств экзополифосфатаз на примере модельного эукариотического организма.

В данной работе в качестве такого модельного микроорганизма выбраны дрожжи Saccharomyces cerevisiae. Во-первых, это эукариотический микроорганизм, следовательно, ряд закономерностей поведения полиР и ферментов их метаболизма в его клетках может быть перенесен на клетки других эукариот. Во-вторых, дрожжи, обладают не только большим и весьма метаболически подвижным пулом полиР, но и содержат их в различных компартментах клетки (Kulaev and Vagabov, 1993).

В-третьих, по данным последних лет в клеточных органеллах и компартментах дрожжей полиР имеют структурные и функциональные особенности. Это позволяет предполагать наличие в каждом компартменте ферментов метаболизма полиР, отличающихся по свойствам, регуляции и, возможно, генетическим детерминантам. В-четвертых, геном этих организмов полностью секвенирован, что должно облегчать впоследствии задачу идентификации генов изучаемых ферментов.

Актуальность изучения свойств экзополифосфатаз дрожжевой клетки в первую очередь обусловлена стремлением понять роль полиР в метаболизме той или иной органеллы этих организмов, а также оценить участие экзополифосфатаз в регуляторных процессах у эукариот в целом. Кроме того, подобное исследование представляет безусловный интерес и с точки зрения подтверждения или опровержения широко обсуждаемой в настоящее время гипотезы об эндосимбиотическом происхождении эукариотической клетки и независимом происхождении ее органелл от различных примитивных прокариот.

Состояние вопроса, цель и задачи исследования

К началу данной работы сведения о ферментах полиР обмена бьши получены с использованием частично очищенных препаратов из бесклеточных экстрактов. Они обобщены в ряде обзоров (Harold, 1966; Kulaev, 1979; Kulaev and Vagabov, 1983; Wood and Clark, 1988). Была очищена до гомогенного состояния и хорошо изучена единственная экзополифосфатаза из дрожжей - экзополифосфатаза клеточной оболочки (Андреева и др., 1990; Андреева и Окороков, 1990; Andreeva and Okorokov, 1993). В течение последующих лет были получены очищенные препараты экзополифосфатаз из гомогената дрожжевых клеток (Wurst and Komberg, 1994; Lorenz et al., 1994). Однако, в этих работах не ставился вопрос о локализации дрожжевых экзополифосфатаз, о возможности существования особых форм экзополифосфатаз в различных компартментах клетки, подобно тому как это характерно для АТФаз и пирофосфатаз. Между тем, в клетках Escherichia coli обнаружено два фермента, проявляющих экзополифосфатазную активность и имеющих различные функции (Akiyama et al., 1993; Keasling et al., 1993), a гены, кодирующие эти ферменты, не проявляют гомологии (Komberg et al., 1999). Структурно-функциональные особенности, присущие полиР различных компартментов дрожжевой клетки, позволяют предполагать, что эти компартменты могут обладать специфическими для них ферментами метаболизма полиР, в частности экзополифосфатазами.

Целью работы бьшо провести систематическое изз'чение экзополифосфатаз различных компартментов модельного эукариотического микроорганизма, дрожжей 5'. сегеУ151ае, выяснив, в какой степени для этих ферментов характерно явление компартмент-специфичности.

Были поставлены следующие задачи: вьгаснить, присутствуют ли в цитозоле, вакуолях, ядрах и митохондриях специфические экзополифосфатазы; выявить их особенности по сравнению с другими фосфогидролазами; очистить экзополифосфатазы из препаратов некоторых субклеточных фракций; провести сравнение свойств экзополифосфатаз указанных компартментов.

Научная новизна работы

Впервые показано, что для экзополифосфатаз дрожжей 8. сегеу181ае характерно явление компартмент-специфичности: клеточная оболочка, цитозоль, вакуоли, ядра, митохондрии обладают особыми формами экзополифосфатаз, различающимися между собой по совокупности физико-химических свойств.

Основным новым подходом при из5?чении ферментов полиР метаболизма в эукариотической клетке, который был применен в настоящей работе, явилось использование очищенных субклеточных фракций для иззАения свойств и очистки локализованных в них ферментов полифосфатного обмена, что позволило выявить ранее неизвестные формы экзополифосфатаз эукариотической клетки, в частности, экзополифосфатазу, прочно связаннзА с мембраной митохондрий, особенностью которой является ингибируемость двухвалентными катионами, и вакуолярную экзополифосфатазу, особенностью которой является высокая специфичность по отношению к полифосфатам с большой длиной цепи.

На основании полученных данных выявлены наиболее важные признаки, по которым различные формы экзополифосфатаз можно дифференцировать друг от Друга.

Установлено, что одна из изученных экзополифосфатаз, экзополифосфатаза цитозоля, способна наряду с неорганическими полиР эффективно гидролизовать аденозин- и гуанозин-тетрафосфаты, которые по литературным данным являются сигнальными молекулами, имеющими отношение к преодолению клеткой стрессовых условий (Guгanowski е! а1., 1998).

Получены первые доказательства того, что активности экзополифосфатаз в каждом компартменте по-разному регулируются при изменении условий культивирования.

Практическая значимость работы в связи с все расширяющимся использованием полиР в биотехнологии, изучение ферментов их метаболизма приобретает практическое значение. С одной стороны, знание свойств и способов регуляции этих ферментов позволяет лучше понимать условия накопления и расходования поли? в клетках. С другой стороны, эти ферменты могут быть применены в биотехнологических процессах, связанных с использованием поли? или получением полиР заданной степени полимерности.

В данной работе предложены методы получения препаратов дрожжевых экзополифосфатаз с различной субстратной специфичностью, которые могут быть использованы в биотехнологических процессах, связанных с утилизацией полифосфатов, и при биохимических исследованиях этих полимеров.

В работе развиты и усовершенствованы методы препаративного выделения субклеточных фракций из дрожжевой клетки.

Полученные данные используются при чтении лекции по биохимии микроорганизмов на биологическом факультете МГУ.

Апробация работы

Результаты работы были доложены на ряде конференций: на 6-м (Дортмунд, 1988) и 7-м (Прага, 1989) Малых симпозиуме по транспорту и биоэнергетике дрожжей, на 15-м Международном специализированном симпозизпме по дрожжам (Рига, 1991), на конференции "Биосинтез ферментов микроорганизмами" (Москва, 1993) на конференции "Биосинтез и деградация микробных полимеров. Фундаментальные и прикладные аспекты" (Пущино, 1995) на 2-м съезде Российского биохимического общества (Москва, 1997), на конференции, посвященной памяти академика Е. М. Крепса (Петербург, 1999), на 9

Международном симпозиуме "Современные проблемы биохимии и биотехнологии микроорганизмов" (Пущино, 2000)

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 30 статей.

Благодарности

Автор приносит искреннюю благодарность и признательность своему учителю и научному консультанту член-корреспонденту РАН Игорю Степановичу Кулаеву за постоянное внимание к работе и плодотворное обсуждение ее результатов. Автор благодарит коллег, совместно с которыми проводились многие эксперименты, к.б.н. Л. П. Яичко и к.б.н. Н. А. Андрееву. Автор благодарит к.б.н. В. В. Дмитриева за электронно-микроскопический контроль субклеточных фракций, к. ф.-м.н. И. А. Свдорова и к.ф.-м.н. А. В. Карпова за математическую обработку кинетических данных, к.б.н. Ф. А. Бровко и X. М. Бозиева за получение иммунной сьшоротки, ст. лаборанта Н. А. Косенкову за помощь при проведении экспериментов, И. В. Кулаковского за помощь в оформлении диссертации, а также всех сотрудников отдела биохимии микроорганизмов ИБФМ РАН за содействие при выполнении работы и активное обсуждение результатов.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Кулаковская, Татьяна Валентиновна

Заключение

Основным результатом данной работы является то, что впервые было показано, что каждый компартмент дрожжевой клетки обладает собственными экзополифосфатазами, ферментами, которые осуществляют реакцию отщепления ?! с конца цепи полиР разной степени полимерности (рис. 57). Эти ферменты значительно различаются друг от друга по своим физико-химическим свойствам, субстратной специфичности, реакции на изменения в условиях культивирования, и, по-видимому, функции и способам регуляции. При изучении метаболизма поли? в эукариотической клетке необходимо учитывать свойство компартмен-специфичности, присущее ферментам обмена полиР.

Цитозоль

Полифосфатаза 1

Рис. 57. Локализация экзополифосфатаз в клетке дрожжей 5*. сеге\птае.

ИззАение свойств 40-кДа экзополифосфатазы цитозоля, экзополифосфатаз вакуолярного сока и растворимой фракции митохондрий было проведены на препаратах очищенных ферментов. Основные особенности полифосфатазньк активностей, наблюдаемью на препаратах соответствующих субклеточных фракций, сохранялись после очистки.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Кулаковская, Татьяна Валентиновна, Пущино

1. Андреева Н. А., Окороков Л. А, Кулаев И.С. Очисткам некоторые свойства полифосфатазы клеточной оболочки дрожжей Saccharomyces carlsbergensis.il Биохимия. 1990. Т.55 (6). С. 1094-1103.

2. Андреева Н.А., Окороков Л. А. Некоторые свойства высокоочищенной полифосфатазы клеточной, оболочки дрожжей Saccharomyces cerevisiae.il Биохимия. 1990. 55 (12). С. 2286-2292.

3. Белозерский А.Н. О химической природе волютина. // Микробиология. 1945. Т. 14. С. 29-33.

4. Белозерский А.Н. Выступление в дискуссии на симпозиуме «Возникновение жизни на Земле». // Москва. Изд-во АН СССР. 1959. С. 370.

5. Белозерский А.Н., Кулаев И.С. Полифосфаты и их значение для процессов развитияА5/?ег§77/шшААег.//Биохимия. 1957. Т. 22(1-2). С. 29-39.

6. Бобык М.А., Кулаев И.С. Обнаружение у Neurospora crassa нового фермента 1,3-дифосфоглицерат:полифосфатфосфотрансферазы.// Биохимия. 1971.Т.36. (2). С. 426-429.

7. Вагабов В.М., Кулаев И.С. Неорганические полифосфаты в корнях кукурузы. // Докл. АН СССР. 1964. Т. 158. N1. С. 218-219.

8. Вагабов В.М. Биосинтез углеводных компонентов клеточной стенки дрожжей.// ОНТИ НЦБИ. Пущино. 1988.

9. Вагабов В.М., Трилисенко Л.В., Кулаев И.С. Внутриклеточный аргинин стимулирует вакуолярную полифосфатазу Neurospora crassal II Докл. АН СССР. 1989. Т. 311. С. 991-993.

10. Вагабов В.М., Чемоданова О.В., Кулаев И.С. Влияние неорганических полифосфатов на величину отрицательного заряда клеточной оболочки дрожжей.// Докл. АН СССР. 1990. Т.313. N 4. С. 989-992.

11. Вагабов В.М., Трилисенко Л.В., Щипанова И.Н., Сибельдина Л.А., Кулаев И.С. Изменение длины цепи неорганических полифосфатов в зависимости от стадии роста Saccharomyces cerevisiae. /7Микробиология. 1998.Т.67.С. 193-198.

12. Вагабов В.М., Трилисенко Л.В., Кулаев И.С. Зависимость длины цепи неорганических полифосфатов от содержания ортофосфата в среде у дрожжей. // Биохимия. 2000.Т. 65(3).С. 414-420.

13. Валиханов М.Н., Сагдулаев И.Н. Об отсутствии высокомолекулярных полифосфатов в хлоропластах хлопчатника. // Физиология растений. 1979. Т. 226, С. 116-122.

14. Валиханов М.Н., Бекназаров В.О., Игамназаров Р.П. Изучение возможной роли полифосфатов как источников фосфатного питания для хлопчатника.// Физиология растений. 1980. Т. 227. С. 296-300

15. Громов Б.В. Удивительный мир архей. // Соросовский образовательный журнал. 1997. N 3. С. 23-26.

16. Диксон М., УэббЕ.С. Ферменты. //Москва, «Мир», 1982.

17. Звягильская P.A., Котельникова A.B. Биохимия дрожжевых митохондрий. // Москва. Наука. 1973.

18. Егоров С.Н., Кулаев И.С. Выделение и свойства триполифосфатазы гриба Neurosporacrassa. //Биохимия. 1976.1.41(9). С. 1958-1967.

19. Кислинг Дж.Д., Вэн Дайен С. Дж., Трелстэд П., Ренниджер Н., МакМахон К. Метаболизм полифосфатов и проблемы биотехнологии и защиты окружающей среды.//Биохимия. 2000. Т. 65 (3). С. 385-394.

20. Кондрашова М.Н. Накопление и использование янтарной кислоты в митохондриях. // В сб. «Митохондрии. Молекулярные механизмы ферментативных реакций.» Москва. Наука. 1972. С.151-170.

21. Коношенко Г.И., Чернышова Е., Крицкий М.С., Кулаев И.С. О локализации и возможной роли полифосфатдеполимераз в кл&тках Neurospora crassa. //Докл. АН СССР. 1972. Т.206. N1. С. 233-235.

22. Кортсти Г., Аппельдорн Л. , Бонтинг К.Ф.С., Ван Нил Дж., Ван Вин Х.Дж. Биохимия и экология усовершенствованного биологического удаления фосфора. //Биохимия. 2000. Т. 65(3). С. 394-405.

23. Крицкий М.С., Белозерская Т. А., Кулаев И.С. О взаимоотношении обмена РНК и полифосфатов у некоторых грибов. // Докл.АН СССР. 1968. Т. 180. N 3. С. 746-748.

24. Крицкий М.С., Черньшюва Е., Кулаев И.С. О корреляции накопления некоторых фракций неорганических полифосфатов и РНК у Neurospora crassa Ad 28-610. // Докл. АН СССР. 1970. Т. 192. N 5. 1166-1169.

25. Кудеярова А.Ю. Педогеохимия орто и полифосфатов в условиях применения удобрений.// Москва. Наука. 1993.

26. Кулаев И.С. Биохимия неорганических полифосфатов.// Москва. Изд. МГУ. 1975.

27. Кулаев И. С. Эволюционные аспекты биохимии неорганических полифосфатов. // Молекулярная биология. 1995.Т. 29(6). С. 1210-1217.

28. Кулаев И.С., Крашенинников И.А., Кокурина И.А. О локализации неорганических полифосфатов и нуклеотидов у Neurospora crassa.ll Биохимия. 1966. Т.31 (4). С. 850-858.

29. Куликова О.Г., Савостьянов Г.А., Белявцева Л.М., Разумовская Н.И. Исследование АТФазной активности и АТФ-зависимой аккумуляции СаАА ядрами скелетных мышц : эффекты денервации и электрической стимуляции. //Биохимия. 1982. Т. 47(7). С. 1216-1221.

30. Курода А., Отаке X. Молекулярный анализ накопления полифосфатов у бактерий. //Биохимия. 2000. Т. 65(3). С. 362-368.

31. Личко Л.П. Компартментация неорганических ионов и регуляция их уровня в цитоплазме эукариотических микроорганизмов.// Дисс. канд. биол. наук, Пущино. 1981.

32. Личко Л.П. Биоэнергетика вакуолярной мембраны дрожжей.// ОНТИ НЦБИ Пущино. 1994.

33. Лозинов А.Б., Финогенова Т.В., Глазунова Л.Р., Илларионова В.И. Лимитирование роста и сверхпродукция некоторых метаболитов дрожжами Candida lipofytica. IIМикробиология. 1974. Т. 43(5). С. 786-790.

34. Маргелис Л. Роль симбиоза в эволюции клетки.// Москва. Мир. 1983.

35. Мино Т. Селекция полифосфат-аккумулирующтх бактерий для усовершенствованного биологического удаления фосфата в активированных илах при технологических процессах удаления сточных вод.// Биохимия. 2000. Т.65 (3). С. 405-414.

36. Наумова И.Б., Рогозина СВ., Зарецкая М.Ш. О структуре тейхойевой кислоты клеточной cieYiKRActinomyces violaceus. //Докл. АН СССР. 1969. Т. 188. С.710-712.

37. Несмеянова М.А., Дмитриев А., Кулаев И.С. Высокомолекулярные полифосфаты и ферменты полифосфатного обмена в процессе роста культуры Escherichia соИ. //Микробиология. 1973.Т. 42. N2. С. 213-219.

38. Несмеянова М.А., Дмитриев А., Кулаев И.С. Регуляция экзогенным ортофосфатом ферментов фосфорного обмена и уровня полифосфатов у Escherichia соИК-12. //Микробиология. 1974. Т.43. N2. С. 227-234.

39. Несмеянова М.А., Гонина С. А., Северин А.И., Кулаев И.С. Метаболическая регуляция некоторых фосфогидролаз у Escherichia соИ. II Микробиология. 1974. т.43. N6. С. 955-960.

40. Несмеянова М. А. Полифосфаты и ферменты полифосфатного обмена у Escherichia соИ. // Биохимия. 2000. Т. 65(3). С. 368-374.

41. Окороков Л. А. Транспорт и регуляция концентраций неорганических ионов у грибов. // Дисс. докт. биол. наук. Пущино. 1983.

42. Островский Д.Н., Сепетов Н.Ф., Решетняк В.И., Сибельдина Л.А. Изучение локализации полифосфатов в клетках микроорганизмов с помощью а'-Р ЯМР с разрешением 78 Мгц. //Биохимия. 1980. Т. 45. С.517-525

43. Петров В.В. Изучение транспорта ионов и метаболитов в везикулы плазматических мембран дрожжей Saccharomyces carisbergensis. // Дисс. канд.биол. наук. Пущино. 1987.

44. Попова Т.Н. Изоцитратдегидрогеназы: формы, локализация, свойства и регуляция. //Биохимия. 1993. Т. 58. С. 1861-1879.

45. Рош Р.Транспорт ионов через мембрану посредством полифосфат- поли-(|3)-гидроксибутиратных комплексов.//Биохимия. 2000. Т. 65(3). С.335-353.

46. Северин А.И., Луста К.А., Несмеянова М.А., Кулаев И.С. Полифосфатаза, связанная с мембранами Escherichia coU. //Биохимия. 1976. Т.41 (2). С. 357362.

47. Скрябин К.Г. Неорганическая пирофосфатаза Ewtfoiwyces magmsii -внутриклеточная локализация и некоторые свойства. // Дисс. канд. биол. наук Москва. 1974.

48. Трилисенко Л.В., Вагабов В.М., Кулаев И.С. Изучение свойств полифосфатфосфогидролазы "leaky" мутанта Neurospora crassa по данному ферменту. // Биохимия. 1982. Т. 47(12). С. 1963-1969.

49. Трилисенко Л.В., Вагабов В.М., Кулаев И.С. Обнаружение и внутриклеточная локализация двух полифосфатфосфогидролаз с разнойсубстратной специфичностью у "slime" варианта Neurospora crassa.// Докл. АН СССР. 1985. Т. 280. N 3. С. 763-765.

50. Умнов А.М., Умнова НС, Кулаев И.С Выделение и некоторые свойства полифосфатазы ТУемголрога crassa. //Молекулярная биология. 1975. Т. 9 (4). С. 594-601.

51. Фримль М. (Ред.) Иммунологические методы. // М. Медицина. 1987.

52. Хахина Л.Н. Концепция А. С. Фаминцина о значении симбиоза в эволюции.//В кн.: Андрей Сергеевич Фаминцын. Л. Наука. 1981.С. 165-181.

53. Шабалин Ю.А., Вагабов В.М., Циоменко А.Б., Землянухина О.А., Кулаев И.С. Изучение полифосфаткиназной активности в вакуолях дрожжей. // Биохимия. 1977. Т. 42 (9). С. 1642-1648.

54. Шабалин Ю.А., Вагабов В.М., Кулаев И.С. Биосинтез высокомо лекулярных полифосфатов из ГДФ-(Р-32)-маннозы мембранной фракцией дрожжей Saccharomyces carlsbergensis. ДАН СССР, 1978, 239,2,490-492.

55. Шабалин Ю.А., Вагабов В.М., Кулаев И.С. О механизме сопряжения биосинтеза высокомолекулярных полифосфатов и маннана у дрожжей Saccharomyces carlsbergensis.II Докл. АН СССР. 1979. Т. 249. N 1. С. 1АЪ-1АЬ.

56. Шабалин Ю.А., Наумов А.В., Вагабов В.М., Кулаев И.С. Обнаружение активности нового фермента долихилдифосфат:полифосфатфосфотранс-феразы у дрожжей.// Докл. АН СССР. 1984. Т.278. N 2. С. 482-485.

57. Шабалин Ю.А , Кулаев И.С. Солюбилизация и свойства долихилдифосфат: полифосфатфосфотрансферазы дрожжей. //Биохимия. 1989. Т. 54. С. 68-75.

58. Шиба Т., Цуцуми К., Ишиге К., НогзАи Т. Неорганические полифосфаты и полифосфаткиназа : новые биологические функции и применение.// Биохимия. 2000. Т. 65 (3). С. 375-385.

59. Шредер Х.С., Курц Л., Мюллер В.Г.Е., Лоренц Б. Полифосфаты в костной ткани.//Биохимия. 2000. Т. 65 (3). С. 353-362.

60. Циоменко А.Б. Секреция белков у дрожжей.// Автореферат дисс. докт. биол. наук. Пущино. 1998.

61. Afanasieva Т.Р., Kulaev IS. Polyphosphate phosphohydrolase from Endomycesmagnusii. //Biochim. Biphys. Acta. 1973. V. 321. P. 336-347.

62. Agutter P.S., McArdle H.J., and McCaaldin B. Evidence for involvement ofnuclear envelope nucleisude triohisohatase in nucleoplasmic translocation of ribonucleoprotein.//Nature. 1976. V. 263. P. 165-167.

63. Ahn K., Romberg A. Polyphosphate kinase from uIscAer/cA/a co//. J. Biol. Chem. 1990. V. 265. P. 11734-39.

64. Akiyama M., Crooke E., Romberg A. The polyphosphate kinase gene of Escherichia coli. Isolation and sequence of theppk gene and membrane location of the protein.//J. Biol. Chem. 1992. V. 267. P. 22556-61.

65. Akiyama M ., Crooke E., Romberg A. An exopolyphosphatase of Escherichia coli. The enzyme and itsppx gene in a polyphosphate Operon.// J. Biol. Chem. 1993. V. 268. P. 633-39.

66. Andreeva N. A., Okorokov L. A. Purification and characterization of highly active and stable polyphosphatase fxom Sacchwomyces cerevisiae cell envelope. /7 Yeast. 1993. V. 9. P. 127-39.

67. Ault-Riche D., Fraley CD., Tzeng CM., Romberg A. Novel assay reveals multiple pathways regulating stress-induced accumulations of inorganic polyphosphdLte in Escherichia coli. //J. Bacteriol. 1998. V.180. P. 1841-47.

68. Barr R., Bottger M., Crane F.L. The effect of selected inhibitors on plasma membrane redox reactions and proton excretion by carrot cells. // Plant Science. 1990. V. 69.P. 33-38.

69. Baltscheflfsky M., Baltscheffsky H. Inorganic pyrophosphate and inorganic pyrophosphatase. // In Molecular mechanisms in bioenergetics. Ed. L Emster. Amsterdam. Elsevier. 1992. P. 331-348.

70. Baltzinger M., Ebel J.P., Remy P. Accumulation of dinucleoside polyphosphates in Saccharomyces cerevisiae under stress conditions. High levels are associated with cell death.//Biochimie. 1986. V. 68. P. 1231-36.

71. Beauvoit B., Rigonlet M., Guerin B., Canioni P. Polyphosphates as a source of high energy phosphates in yeast mitochondria: a P-ISIMR study.// FEBS Lett. 1989. V. 252. P. 17-22.

72. Belozersky A.N. The formation and function of polyphosphates in the development processes of some lower organisms.// Int. Biochim. Congr. 4* .Vienna. 1958. P. 312

73. Bensadoun A. and Weinstein D. Assay of proteins in the presence of interfering materials. // Anal. Biochem. 1976. V. 70. P. 241-250.

74. Blum E., Py B., Carpousis A. J., Higgins C.F. Polyphosphate kinase is a component of the Escherichia coli RNA degradosome.// Molec. Microbiol. 1997. V. 26. P. 38798.

75. Bode G., Mauch F., Ditschuneit H., Malfertheiner P. Identification of structures containing polyphosphate in//e//co3acter/Ay/on. // J. Gen. Microbiol. 1993. V.139. P. 3029-33.

76. Bolesch D. G., Keasling J.D. Polyphosphate binding and chain length recognition of Escherichia coli exopolyphosphatase. // J. Biol. Chem. 2000. V. 275.

77. Bonting C.F., Rorstee G.J., Zehnder A.J. Properties of polyphosphate:AMP phosphotransferase of Ad«eto&acter strain 21QK.II J. Bacteriol. 1991. V.173. P. 6484-88.

78. Bonting C.F., Rortstee G.J., Zehnder A. J. Properties of polyphosphatase of Acinetobacter johnsonii 210 A. II Antonie van Leeuwenhoek. 1993. V. 64. P. 7581.

79. Booth J.W., Guidotti G. An alleged yeast polyphosphate kinase is actually diadenosine-5',5"'-P\P'*-tetraphosphate a,a-phosphorylase. //J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 19377-82.

80. Bourne R.M. A 31 -P-NRM study of phosphate transport and compartmentation in Candida utilis.//Biochim. Biophys. Acta. 1990.V. 1055. P. 1-9.

81. Bowman B.J., Mainzer S.E., Allen R. E,. Slayman C. W. Effects of inhibitors on the plasma membrane and mitochondrial adenosine triphosphatase of Neurospora crassa. //Biochim. Biophys. Acta. 1978. V. 512. P. 13-28.

82. Castuma C.E., Huang R., Romberg A., ReuschR.N. Inorganic polyphosphates in the acquisition of competence in Escherichia coli. //J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 12980-83.

83. Churchill R. A., Sze H. Anion -sensitive HA-pumping ATPase in membrane vesicles from oat roots. //Plant. Physiol. 1983.V. 71. P. 610-617.

84. Clark, J.E., Beegen, H., and Wood, H. G. Isolation of intact chains of polyphosphate from Propionibacterium shermanii grown on glucose or lactate.// J. Bacteriol. 1986. V. 168.P. 1212-1219.

85. Cramer C. L., Davis R. H. Polyphosphate-cation interaction in the amino-containing \amo\es Neurospora crassaBiol. Chem. 1984. V. 259 P. 5152-57.

86. CrookeE., AkiyamaM., RaoN.N., Romberg A. Genetically altered levels of inorganic polyphosphate in Escherichia coU. //J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 629095.

87. Corbin J.D. and Hardman J.G. (Eds.). Methods in Enzymology. Hormone Action. PartF. Protein kinases. Academic Press. New York-Heidelberg-Tokyo. 1983. V.99.

88. Cowling R.T. and Bimboim H.C. Incorporation of P-32. orthophosphate into inorganic polyphosphates by human granulocytes and other cell types.// J.Biol Chem. 1994. V. 269. P. 9480-9485.

89. Dassa E. and Boquet P.L. Is the acid phosphatase of Escherichia coli with pH optimum 2,5 a polyphoposhate depolymerase?// FEBS Lett. 1981. V. 135. P. 148150.

90. Davies, J.M., Darley, CP., and Sanders, D. Energetics of the plasma membrane pyrophosphatase. // Trends Plant Sei. 1997. V. 2. P. 122- 123.

91. Deinema M.H., Van Loosdrecht M., Schölten A. Some physiological characteristics ofAcinetobacter spp. accumulating large amounts of phosphate. // Wat. Sei. Techn. 1985. V.17.P. 119-25.

92. Dirheimer, G. and Ebel, J.P. Characterisation d'une polyphosphate AMP-phosphotransferase dans Corynebacterium xerosis.il RC Acad. Sei. 1965. V. 260. P. 3787-3790.

93. Drozdowicz Y M., Lu Y.P., Patel V., Fitz-Gibbon S., Miller J.H., Rea P.A.

94. A thermostabile vacuolar-t5T)e membrane pyrophosphatase from the archaeon Pyrobaculum aerophilum: implications for the origins of pyrophosphate-energized pumps.//FEBS Lett. 1999. V. 460(3). P.505-512.

95. DurrM.,UrechR., BoUerT., Wiemken A., SchwenckeJ., NagyM. Sequestration of arginine by polyphosphate in vacuoles of yeast Saccharomyces cerevisiae. 1/ Arch. Microbiol. 1979. V.121. P. 169-75.

96. Ebel J.P. Sur le dosage des metaphosphates dans les microorganismes par hydrolyse différentielle technique et appUcation aux levures.// CR. Acad. Sei. 1948. V.226. P. 2184-2186.

97. Eilam Y., Lavi H., Grossowitz N. Cytoplasmic CaAA homeostasis maintained by a vacuolar CaA" transport system in yeast Saccharomyces cerevisiae.llJ. Gen. Microbiol. 1985. V.131. P. 623-629.

98. Felter S., Stahl A.J.C. Enzymes du métabolisme des polyphosphates dans laleure. III. Purification et propriétés de la polyphosphate-ADP-phosphotransferase. //Biochimie. 1973. V. 55. P. 245-51.

99. Finbow M.E. and Harrison M. A. The vacuolar HA-ATPase: a universal proton pump ofeukaryotes.//Biochem. J. 1997. V. 324. P. 697-712.

100. Gabel N.M.,Thomas V. Evidence for the occurence and distribution of inorganic polyphosphate in vertebrate tissues. 111. Neurochem. 1971. V. 18.P. 1229-1242.

101. Geissdorfer W., Ratajczak G, Hillen W. Transcription of|?pÄ: from Acinetobacter sp. strain AD P l, encoding a putative polyphosphate kinase, is induced by phosphate starvation. // Appl. Environ. Microbiol. 1998. V. 64. P. 896-901.

102. Gergely P., Erdodi F., Bot G. Heparin inhibits the activity of protein phosphatase -1. //FEBS Lett. 1984. V. 169.P. 45 48.

103. Glonek T., Lunde M., Mudgett M., and Myers T. C Studies of biological polyphosphate through the use of Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance. // Arch. Biochim. Biophys.1971. 142. P. 508-513.

104. Gofifeau A., Slayman C W. The proton-translocating ATPase of the fungal plasma membrane.//Biochim. Biophys. Acta. 1981. V. 639. P. 197-222.

105. Gonzales H., Jensen, T.E. Nickel sequestering by poljAAhosphate bodies inStafilococcusaureus. //Microbios. 1998. V. 93. P. 179-85.

106. Gorg A., Postel W., Weser J., Schiwara H.W., and Boeskin W.H. Horizontal SDS electrophoresis in ultrathin poregradient gels for the analysis of urinary proteins.// Sei. Tools. 1985. V. 32. P. 5-9.

107. Greenfeld N. J., Hussain M., Lenard J. Effect of growth state and amines on cytoplasm and vacuolar pH, phosphate and polyphosphate levels in Saccharomycescerevïsiae: a 31-P-nuclear magnetic resonance study.//Biochim. Biophys.

108. Acta. 1987. V. 926. P. 205-14.

109. Griffith E.J. In search of safe mineral fiber.// Chemtech. 1992. V. 22.P. 220-226.

110. Guerin B., Lable P., and Somlo.M. In Meth. Enzymol. Academic Press. New York-Heidelberg-Tokyo 1979. V. 55. P. 149-159.

111. Haesler, P.A., Dieter, L., Rittle, R.J., Shepler, L.S., Paszkowski, A.L., and Moe, O. A. Catalytic properties of Escherichia coU polyphosphate kinase: an enzyme for ATP regeneration. // Biotechnol. Appl. Biochem.1992. V. 15. P.125-133. .

112. Hardoyo, Yamada R., Shinjo H., Rato J., Ohtake H. Production and release of polyphosphate by a genetically engineered strain oiEscherichia co//.//Appl. Environ. Microbiol. 1994. V.60. P. 3485-90.

113. Harold P.M. Inorganic polyphosphates in biology: structure, metabohsm, and functions.// Bacteriol. Rev. 1966. V.30. P. 772-85.

114. Holahan P.R., Rnizner S.A., Gabriel CM. , Swenberg CE. Alterations in phosphate metabolism during cellular recovery of radiation damage in yeast.// Int. J. Radiât. 1988. V. 54. P. 545-62.

115. Huang R.P., Reusch RN. Genetic competence in Escherichia coli requires poly-beta-hydroxybutirate calcium polyphosphate membrane complex and certain divalent cations.//J. Bacteriol. 1995. V. 177. P. 486-90.

116. Hunter T. Athousendand one protein kinases // Cell. 1987. V.50. P. 823829.

117. Hurt E. C, McDowall A., Schimmang. Nucleolar and nuclear envelope proteins of the yeast Saccharomyces cerevisiae. //Eur. J. Cell.Biol. 1988. V.46. P. 554563.

118. Indge R. Polyphosphates in yeast cell vacuoles.// J.Gen Microbiol. 1968. V. 51. P.447-455.

119. Ischige R., Rameds A., Noguchi T., Shiba T. The polyphosphate kinasegene ofPseudomonasaeruginosa. //DNAResearch. 1998. V. 5. P. 157-62

120. Ishige R., Noguchi T. Inorganic polyphosphate kinase and adenylate kinase participate in the polyphosphate: AMP phosphotransferase activity of

121. Escherichia co/z.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000.

122. Jacobson L., Helman M., Yariv J. The molecular composition of the volutin granules ofyeast.//Biochem. J. 1982. V. 201. P. 437-79.

123. Jamai A., Gaillard C, Dehot S., Martinoia E. Dipeptide transport in barley mesophyll vacuoles. //Planta. 1995. V. 196. P.430-434.

124. Jamaki S. ATP-promoted sorbitol transport into vacuoles isolated from apple fruit.// Plant Cell Biol. 1987. V. 28. P. 557-564.

125. Rakinuma Y., Ohsumi Y, Anraku Y. Properties of iT-translocating adenosine triphosphatase in vacuolar membranes of saccharomyces cerevisiae. // J. Biol. Chem. 1981. V. 258. P. 10859-10963.

126. RamimuraR., TsuchiyaE., MiyakawaT.Fukui S,Hirata A. Isolation and characterization of the nuclei from Saccharomyces cerevisiae.il

127. Current Microbiol. 1981. V. 6(3). P. 175-181.

128. Rato J., Yamada R., Muramatsu A., Hardoyo., Ohtake H. Genetic improvement of Escherichia coli for enhanced biological removal of phosphate from waste water.//Appl. Environ. Microbiol. 1993. V. 59. P. 3744-49.

129. Rato J., Yamamoto T., Yamada R., Othake H. Cloning, sequence and characterization of the polyphosphate kinase-encoding gene ippli) of Klebsiella aerogenes. //Gene. 1993. V. 137. P. 237-42.

130. Rawai S., Mori S., Mukai T., Suzuki S., Yamada T., Hashimoto W., Murata R. Inorganic polyphosphate/ATP-NAD kinase of Micrococcus flams and Mycobacterium tuberculosis WilKy. //Biochem. Biophys. Res. Commun. 2000. V.6276(l). P.57-63.

131. Reasling J.D., Bortish Le Roy, Romberg A. Guanosine pentaphosphate phosphohydrolase of Escherichia coli is a long-chain exopolyphosphatase.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. V. 90. P. 7029-33.

132. Reasling J.D, HupfG. A. Genetic manipulation of polyphosphate metabolism affects cadmium tolerance in Escherihia coli. //Appl. Enviroment.

133. Microbiol. 1996. V. 62. P. 743-46.

134. Reasling J.D. Regulation of intracellular toxic metals and other cations by hydrolysis of polyphosphate. //Ann. New York Acad. Sci. 1997. V. 829.P. 243249

135. Keefe A.D., Miller S.L. Potentially prebiotic synthesis of condensed phosphates. //Orig. LifeEvol. Biosph. 1996. V. 26. P. 15-25.

136. Keyhani S., Lopez J.L., Clark D.S., Keasling J.D. Intracellular polyphosphate content and cadmium tolerance in Anacystis nidulans R2. // Microbios. 1996. V. 88. P. 105-14.

137. Kisselev L. L., Justesen J., Wolfson A. D., andFrolovaL. Y.: Diadenosine oUgophosphates (ApNA), a novel class of signalling molecules. // FEB S Lett. 1998. V. 2427. P. 157-163.

138. Klionsky D.J., Herman P.K., Emr S.D. The fungal vacuole: composition, function, and biogenesis.//Microbiol. Rev. 1990. V. 254. P. 266-292.

139. Kolarov J., Kulpa J., Baijot M. and Goffeau A. Characterization of a protein serine kinase from yeast plasma membrane. // J. Biol. Chem. 1988. V. 263. P. 10613-10619.

140. Komine Y., Eggink L.L., ParkH., Hoober J.K. Vacuolar granules in

141. Chlamydomonas reinhardtii: polyphosphate and a 70-kDa polypeptide as major components. //Planta. 2000. V. 210(6). P. 897-905.

142. Konishi J., Wakagi T., Oshima T., Yoshida M. Purification and properties of the ATPase solubilized from membranes of an acidothermophilic archaebacterium Sulfolobus acidocaldarius. Ii J. Biochem. 1987. V. 102. P. 1379- 87.

143. Romberg A. Inorganic polyphosphate: toward making a forgotten polymer unforgottable. //J. Bacteriol. 1995. V. 177. P. 491-96.

144. Romberg A. Inorganic polyphosphate: a molecule with many functions.

145. Progress in molecular and subcellular biology. Inorganic polyphosphates. Biochemistry, biology, biotechnology. H. C.Schroder and W. G.E. Muller (Eds.) Springer-Verlag. Berlin-Heidelberg-New York. 1999. V. 23. P. 253-275.

146. Romberg A., Horecker B.L. Glucose -6-phosphate dehydrogenase. // In Meth. Enzymol. 1955. V. 1. P. 323.

147. Romberg A., Romberg S., Simms E. Methaphosphate synthesis by enzyme from Escherichia coli. //Biochim. Biophys. Acta. 1956. V. 20. P. 215-27.

148. Romberg A., Rao N.N., Ault-RichD. Inorganic Polyphosphate: a moleculewith many functions. // Ann. Rev. Biochem. 1999. V. 68. P.89-125.

149. Rulaev I. S. The biochemistry of inorganic polyphosphates. // New York. Wiley. 1979.

150. Rulaev I.S.: Some aspects of enviromental regulation of microbial phosphorus metabolism.// /« Rulaev I.S., Dawes A.E., Tempest D.W. (eds.), Enviromental regulation of microbial metabolism. Academic Press, Inc. Orlando, Florida. 1985. P. 1-25.

151. Rulaev, I.S.: The physiological role of inorganic polyphosphates in microorganisms: some evolutionary aspects. HIn: Dawes, E. A.ed.). Novel Biodegradabile Microbial Polymers. Rluwer Academic PubHshers, Dordreht, Boston, London. 1990. P. 223-233.

152. Rulaev I. S. Inorganic polyphosphate functions at various stages of cell evolution. // J. Biol. Phys. 1994. V.20. P.255-273.

153. Rulaev I. S., Vagabov V.M. Polyphosphate metabolism in microorganisms. //Adv. Microbiol. Physiol. 1983. V. 24. P. 83-171.

154. Rulaev I.S. Vagabov V.M. Rulakovskaya T.V. New aspects of inorganic polyphosphate metabolism and function. // J. Bioscience and Bioengineering. 1999. V. 88. N 2. P. 111-130.

155. Rumble R.D., Romberg A. Inorganic polyphosphate in mammalian cells and tissues. // J. Biol. Chem. 1995. V. 270. P. 5818-22.

156. Rumble R. D., Romberg A. Endopolyphosphatases for long chain polyphosphate in yeast and mammals.// J. Biol. Chem. 1996. V. 271. P. 27146-51.

157. Ruroda A., Romberg A. Polyphosphate kinase as a nucleoside diphosphate kinase in Escherichia coH and Pseudomonas aeruginosa. II Proc. Natnl. Acad. Sci. USA. 1997. V. 94. P. 439-42.

158. Ruroda A., Murphy H., Cashel M., Romberg A. Guanosine tetra and pentaphosphate promote accumulation of inorganic polyphosphate in Escherichia coU. //L Biol. Chem. 1997. V. 272. P. 21240-43.

159. Rusano S., Ishihama A. Functional interaction of Escherihia coli RNApolymerase with inorganic polyphosphate. // Genes to Cells. 1997. V. 2. P. 433441.

160. Labarca C. and Paigen K. A simple rapid and sensitive DNA assay procedure. //Anal. Biochem. 1980. V. 102. P. 344-352.

161. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. //Nature. 1970. V. 227. P.680-685.

162. Langen P., Liss E. Uber den Polyphosphates der Hefe. // Naturwisseschaften. 1958. V. 45. 191-97.

163. Leyhausen G., Lorenz B., Zhu H., Geurtsen W., Bohnensack R., MuUer W.E.G., and Schroder, H.C.: Inorganic polyphosphate in human osteoblast-like cells. // J. Bone Mineral Research. 1998. V. 13. P. 803-812

164. Lichko L.P., Okorokov L.A., Rulaev I.S. Participation ofvacuoles in regulation of RA MgAA and orthophosphate ions in cytoplasm of the yeast Saccharomyces carlshergensis. //Arch. Microbiol. 1982. V. 132. P. 289-93.

165. Lichko L.P., Okorokov L.A. Purification and some properties of membrane -bound and solyble pjnrophosphataseofyeast vacuoles.//Yeast. 1991. V.7. P.805-812.

166. Lieberman L. Uber das Nuclein der Hefe und Runstliche Darstellungeines Nucleus Eiweiss und Metaphosphatsaure. // Ber. Chem-Ges. 1888. V. 21. P. 598-607.

167. L ohm an R. Untersuchungen an den kondensierten Phosphaten der Hefe. // Biochem. Z. 1956. V. 328. P. 1-11.

168. Lorenz B., Muller W.E.G, Kulaev I.S., Schroder H.C.J. Purification and characterization of an exopolyphosphatase from Saccharomyces cerevisiae. // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 22198-204.

169. Lorenz B., Leuck J., Kohl D., Muller W.E.G., Schroder HC. Anti-HIV1 activity of inorganic polyphosphates. // J. Acquir. Immun. Defic. Syndr. Hum. Retrovirol. 1997. V. 14. P. 110-18.

170. Lorenz B., MunknerJ., Oliveira M P., RuusksaluA, Leitao J.M. et al. Changes in metabolism of inorganic polyphosphate in rat tissues and human cells during development and apoptosis. // Biochim. Biophys. Acta. 1997. V. 1335. P. 51-60.

171. Lowry O .H., Rosehrough A., Farr A., Randall J. Protein measyrement with the Folinphenol reagent. //I Biol. Chem. 1951. V. 193. P. 265-275.

172. Maier S.R., Scherer S., Loessner M.J. Long-chain polyphosphate causes celllysis and inhibits Bacillus cereus septum formation, which is dependent on divalent cations. // Appl. Environ. Microbiol. 1999. V. 65(9). P.3942-9.

173. Mansurova S.E. Inorganic pyrophosphate in mitochondrial metabolism.// Biochim. Biophys. Acta. 1989. V. 977. P. 237-47.

174. Marin B., CretinH., D'Auzac. Energization of solute transport and accumulation at the tonoplast level in Hevea latex. // Physiol Veg. 1982. V. 20. P. 333-346.

175. Martinoia E., Flügge U.I, Kaiser G., Heber U., Heidt H.W. Energy-dependent uptake of malate into vacuoles isolated from barley mesophyl protoplasts. //Biochim. Biophys. Acta. 1985. V. 806. P. 311-319.

176. Martinoia E., Massonneau A., Frangne N. 2000. Transport of solutes across the vacuolar membrane of higher plants. //Plant. Cell. Physiol. V. 41 (11). P. 11751186.

177. Martiny-Baron G, Scherer G.E.F. Phospholipid-stimulated protein kinase in plants.// J. Biol.Chem. 1989. 264. (30) 18052-59.

178. Matile P. Biochemistry and function ofvacuoles.// Ann. Rev. Plant. Physiol.1978. V. 29. R 193-213.

179. Matile P., Wiemken A. The vacuole as the lysosome ofthe yeast cell.// Arch. Microbiol. 1967. V. 56. P. 147-155.

180. Mellerharel Y, Argaman A, Benbashat D, Navon G, Aharonowitz Y, et al. Inhibition by polyphosphate of phytopathogenic polygalakturonases from Botrytis cinerea. //Can. J. Microbiol. 1997. V. 43. P. 835-40.

181. Mino, T., Van Loosdrecht, M.C.M., and Heijnen J.J. Microbiology and biochemistry of the enhanced biological phosphate removal process. // Wat. Res. 1998. V. 32. P. 3193-3207.

182. Muhammed A., Rodgers A., and Hughes D. F. Purification and properties of a polymetaphosphatase from Corynebacterium xerosis. II J. Gen. Microbiol. 1959. V. 20. P. 482-495.

183. MurataR., RatoJ., Chibatal. Continuous production of NADP by immobilized Brevibacterium ammoniagenes cells. // Biotechnol. Bioeng.1979. V. 21 .R887-895.

184. Murata R., Uchida T., Rato J., Chibata I. Polyphosphate kinase: Distribution, some properties and its application as an ATP regenerating system.// Agric. Biol. Chem. 1988. V. 52. P. 1471-77.

185. Nagy M. Studies of purine transport and purine contents in vacuoles isolated from S. cerevisiae. //Biochim. Biophys. Acta. 1979. V. 558. p.221-232.

186. Naumova I.E., Yanushkene N. A., Streshinskaya G. M. and Shashkov A. S. Cell wall anionic polymers and peptidoglycan of Actinoplanes philippinensis

187. Arch Microbiol. 1990. V. 154. P.483-488.

188. Nelson N. 1992. Evolution of organeller proton-ATPases.//Biochim. Biopys.

189. Acta. V. 1100. P. 109-124.

190. Nelson N. Energizing porters by proton-motive force. // J. Exp. Biol. 1994. V. 196. P. 7-13.

191. Nelson SR., Wolford L.M., Lagow R.J., Capano P.J., and Davis W.L. Evaluation of a new high-performance calcium polyphosphate bioceramics as a bone graft material. // J. Oral Maxilofacial Surgery. 1993. V.51. P. 1363-1371.

192. Nicolay K., Schefifers W. A., Bruinenberg P. M., and Raptein R. Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance studies of intracellular pH, phosphate compartmentation and phosphate transport in yeast. // Arch. Microbiol. 1982. V. 133. P. 83-89.

193. Noguchi T., Shiba T. Use of Escherichia coU polyphosphate kinase for oligosaccharide synthesis. //Biosci. Biotechnol. Biochem 1998. V. 62. P. 159496.

194. Nunez C.G. A., Callier D.A.S. Studies on the polyphosphate cycle in Candida utilis. Effect of dilution rate and nitrogen so urce in continuous culture. // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1989. Y. 31. P. 562-66.

195. Offenbacher S., RlineH. Evidence for polyphosphate in phosphorylated non histone nuclear proteins.// Arch. Biochem. Biophys. 1984. V. 231. P. 114-23.

196. Ogawa N., Tzeng CM . , Fraley CD ., Romberg A. Inorganic polyphosphate in vibrio cholerae: genetic, biochemical, and physiologic features. // J. Bacteriol. 2000. V. 182(23). P. 6687-93.

197. Ohsumi Y. and Anraku Y. Active transport driven by proton motive force in a vacuolar membrane vesicles of Saccharomyces cerevisiae.il J.Biol. Chem. 1981. V. 256. R 2079-82.

198. Ohsumi Y. and Anraku Y. Calcium transport driven by proton motive force in a vacuolar membrane vesicles of Saccharomyces cerevisiae. II J. Biol. Chem. 1983. V. 258. P. 5614-17.

199. Ohtake H., Yamada K., Hardoyo, Muramatsu A., Anbe Y., Kato J., and Shinjo H. Genetic approach to enhanced biological phosphorus removal.//Wat. Sei. Technol.1994. V. 30. P. 185-192.

200. Okorokov L. A., Lichko L P., Kulaev I.S. Vacuoles: the main compartment of potassium, magnesium and phosphate ions in Saccharomyces carlshergensis cells. // J. Bacteriol. 1980. V. 144. P. 661-65.

201. Okorokov L. A., Lichko L.P., Andreeva N. A. Changes of ATP, polyphosphate and contents in Saccharomyces carlshergensis during uptake ofMnAA and glucose. //Biochem. Internat. 1983. V. 6. P.481-88.

202. Okorokov L. A., Lichko L.P. The identification of a proton pump on vacuoles of the yeast Saccharomyces carlshergensis: ATP ase is an electrogenic iT-translocase.// FEBS Lett. 1983. V. 155 (1). P. 102-106.

203. Okorokov L.A., Andreeva N.A., Lichko L.P., Valiakhmetov A.Y. Transmembrane gradient of ions as an energy source in the yeast Saccharomyces carlshergensis. Biochem. Internat. 1983. V. 6(4). V.AQi-All.

204. Okorokov L. A. Several compartment of Saccharomyces cerevisiae are equipped with CaAA-ATPase(s). //FEMS Microbiol. Lett. 1994. V. 117. P. 311-318.

205. Oshima T. Origin and early evolution of live. // Advanced Material-93. VT / Frontiers in Material, Science and Engeneering. Ed. Somiya et al. Trans. Mat. Res. Sourc. JPN. V. 9B. Elsevier Science. B. V. 1994. P. 1066-1077.

206. Pedersen P.L. and Carafoli E. Ion motive ATPases.ILEnergy coupling and work output. // Trends.Biochem Sei. 1987. V. 12. P. 186-189.

207. Pepin CA . and Wood Y . G Polyphosphate glucokinase from Propionibacterium shermanii: kinetics and demonstration that the mechanism involves both processive and nonprocessive type reactions. //J. Biol. Chem.1986. V. 261. P. 4476-80.

208. Phillips N.F., Horn P.J., Wood H.G The polyphosphate and ATP dependent glucokinase üom Propionibacterium shermanii: both activities are catalyzed by the same protein. // Arch. Biochem. Biophys. 1993. V. 300.1. P. 309-319

209. PickU., BentalM., ChitlamE., Weiss M. Polyphosphate-hydrolysis a protective mechanism against alkaline stress?// FEES Lett. 1990. V. 274. P. 15-18.

210. Pick U., Weiss M. Polyphosphate hydrolysis within acidic vacuoles in responce to amino-induced alkaline stress in the halotolerant alga Dunaliella salina. ll Plant. Physiol. 1991. V. 97. P. 1234-40.

211. PilatusU., Mayer A., Hildebrandt A. Nuclear polyphosphate as apossible source of energy during the sporulation ofPhysarum polycephalum.// Arch. Biochem. Biophys. 1989. V. 275. P. 215-23.

212. PisoniR.L,, LindleyE.R. Incorporation of 32-P. orthophosphate into long chain of inorganic polyphosphate within lysosomes of human fibroblasts.// L Biol. Chem.1992. V. 267. P. 3626-31.

213. Potashkin J. A., Zeigel R.F., and Huberman J. A. Isolation and characterization of residual nuclear structures from yeast. //Experimental Cell research. 1984. V. 153. P. 374-388.

214. Rao N. N., Romberg A. Inorganic polyphosphate support resistance and survival of stationary-phase Asc/zer/c/j/a co//.//J. Bacteriol. 1996. V.178. P. 1394-1400.

215. Rao N. N., Liu S., Kormberg A. Inorganic polyphosphate in Escherichiacoli: the phopshate regulon and the stringent responce.// J. Bacteriol. 1998. V. 180 P. 2186-93.

216. Rao N. N., Torriani A. Utilization hy Escherichia coli of high-molecular-weight, linear polyphosphate: roles of phosphates and pore proteins. // J. Bacteriol. 1988. V. 170. P. 5216-23.

217. Rao R., Slayman C.W. Plasma membrane and related ATPases. // In

218. The Mycota ni.Biochemistry and Molecular biology. Eds. Brambl/Marzluf Beriin, Heidelberg. Springer-Verlag.l996.P. 29-49.

219. Rashid M. H., Romberg A.Inorganic polyphosphate is needed for swimming,swarming, and twitching motilities ofPseudomonas aeruginosa.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000.V. 97(9). P.4885-90.

220. Rashid M.N., Rao N. N, Romberg A. Inorganic polyphosphate is requiredfor motility of bacterial pathogènes. // J. Bacterid. 2000. V. 182.P. 225-227.

221. Rea P. A., Poole R.J. Vacuolar i T translocating pyrophosphatase. // Ann. Rev. Plant. Physiol. Plant. Mol. Biol. 1993. V. 44. P. 157-180.

222. Reader V. The relation of the growth of certain microorganisms to the composition of the medium: 1. The synthetic culture. // Biochem. J.1927.V. 21. P. 901-907.

223. Resnick S.M., Zehnder A. J. In vitro ATP regeneration from polyphosphate and AMP by polyphosphate: AMP phosphotransferase and adenylate kinase from Acinetobacter johnsonii 21 OA.// Appl. Environ. Microbiol. 2000.V. 6(5). P.2045-51.

224. Reusch R.N. Poly-beta-hydroxybutirate/calcium polyphosphate complexes in eukaryotic membranes. //Roc. Soc. Exper. Biol. Med. 1989. V. 191. P. 377-81.

225. Reusch R.N. Biological complexes ofpoly-B-hydroxybutyrate.// FEMS Rev. 1992. V.103. P. 119-30.

226. Reusch R. N., Sadofif H. L. Putative structure and fimctions of poly-beta-hydroxybutirate/calcium polyphosphate channel in bacterial plasma membranes.// Proc. Natl. Acad. Sei. USA 1988. V. 85. P. 4176-80.

227. Reusch R.N., Huang R.P., Koskkosicka D. Novel components and enzymatic activities of the human erythrocyte plasma membrane calcium pump. // FEB S Lett. 1997. V. 412. P. 592-96.

228. Rodriguez R. J. Polyphosphate present in D N A preparation from filamentous fungal species of Colleotrichum inhibits restriction endonucleases and other enzymes. //Anal. Biochem. 1993. V. 209. P. 291-97.

229. Rottenberg H. The measurement of membrane potential and ApH in cells,organelles and vesicles.// Methods inEnzymol. 1979. V. 55. P. 547-569.

230. Sambrook J., Fritsch E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular cloning. A Laboratory Manual. 2nd edn.// Cold Spring Harbor Laboratory. Cold Spring Harbor, New York. 1989.

231. Schatz G., and Kovac L.Isolation of promitochondria from anaerobically grown S. cerevisiae.// In Meth. Enzymol. Academic Press. New York-Heidelberg-Tokyo. 1974. V. 31. P. 627-632.

232. Schuddemat J., de Boo R., Van Leeuwen C.C.M., Van den Broek P.J.A. and Van Steveninck J. Polyphosphate synthesis in yeast.// Biochem. Biophys. Acta. 1989. V. 100. P. 191-98.

233. Schwenke J. Characterization and integration of the yeast vacuole with cellular function. //Physiol. Veg. 1977. V. 15. P.491-517.

234. Scoarughi GL ., Cimmino C, Donini P. Helicobacter pylori: a eubacterium lacking the stringent response.//1 Bactriol.1999. V. 181. P. 552-55.

235. Serrano R. In vivo glucose activation of the yeast plasma membrane ATPase. FEES Lett. 1983. V. 156. P. 11-14.

236. Shiba T., Tsutsumi R., Yano H, Ihara Y., Kameda A., Tanaka K., Takahashi H., Munekata M., Rao N. N., and Romberg A. et al.1.organic polyphosphate and the induction of RPOS expression. // Proc.Natnl. Acad. Sei. USA. 1997. V. 94. P. 11210-15.

237. Shirahama K. Yazaki Y., Sakano K., Wada Y., Ohsumi Y. Vacuolar function in the phosphate homeostasis of the yeast Saccharomyces cerevisiae.//VXarA. Cell. Physiol. 1996. V. 37. P. 1090-93.

238. Shirai M., Kakada J., Shibata K., Morshed MG., Matsushita T., Nakazawa T. Accumulation of polyphosphate granules in Helicobacter pylori cells under anaerobic conditions. 111. Med Microbiol. 2000. V.49(6). P. 513-9.

239. Skorko R. Polyphosphate as a source of phosphoryl group in protein modification in archebacterium 5w//ö/odM5 ac/öfoca/£form5. // Biochimie. 1989. V. 71. P. 9-10.

240. Skorko R., Osipuk J., StetterK.O. Glycogen-bound polyphosphate kinase from aichaeheLCtenumSulfolobus acidocaldarius. //1. Bacteriol. 1989. V. 171.1. P. 5162-64.247.248.249.250.251252.253254.255256.257.258.259.260.261.

241. SmalheiserN.R. Protein in unexpected locations. //Mol. Biol. Cell. 1996. V. 7. P. 1003-1014.

242. Szymona M., Ostrowsky W. Inorganic polyphosphate glucokinase of Micobacteriumphlei. //Biochim. Biophys. Acta. 1964. V. 85. P. 283-95. Thilo E. Die kondensierten phosphate.//Angew. Chem. 1955. V. 67. P. 141147.

243. Van der Aart Q. J.M., Kleine K., and Steensma H.Y. Sequence anaysis ofthe 43kb CRM1-YLM9-PET54-DIE2-SMIIPH081-YHB4-PFK1 region from right arm of Saccharomyces cerevisiae chromosome VII. // Yeast. 1996. V. 12. P.385-390.

244. Van Groenestijn J.W., Bentvelzen M. M. A., Deinema M.H., and Zehnder A.J.B. Polyphosphate degrading enzymes mAcinetobacter spp. and activated sludge. // Appl. Envirom. Microbiol. 1989. V.55. P.219-223.

245. Van Loosdrecht M. C. M., Hooijmans CM., Brdjanovic D., Heijnen J.J. Biological phosphate removal processes. //Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. V. 48. P. 289-96

246. Van Veen H.W., Abee T., Kortstee G.J.J., Konings W.N., Zehnder A.J.B.

247. Generation of a proton motive force by the excretion of metal phosphate in the polyphosphate-accumulatingAc/wetoeacferjohnsonti strain 21 OA. // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 29509-14.

248. Van der Wilden W., Matile P. Isolation and characterization of yeast tonoplast fragments. //Biochim. Physiol. Pflanz. 1978. V. 173. P. 258-294.

249. Volk S.E., Baikov A.A., Kostenko E.B., Avaeva S.M. Isolation, subunit structure and localyzation of inorganic pyrophosphatase of heart and liver mitochondria. Biochim. Biophys. Acta. 1983. V. 744. P. 127-134.

250. Vorisek J., Knotkova A., and Kotyk A. Fine cytochemical localyzation of polyphosphates in the yeast Saccharomyces cerevisiae. //Zbl. Microbiol. 1982. V. 137. P. 421-432.

251. West M.W., Ponnamperuma C. Chemical evolution and the origin of life. A comprehensive bibliography. // Space Life Sci.1970. V. 2. P.225-95.

252. Westenberg B., Boiler T., Wiemken A. Lack of arginine- and polyphosphatestorage pools in a vacuole-deficient mutant (end 1) of 5'. cerevisiae. //FEBS Lett. 1989. V. 254. P. 133-36.

253. Weimberg R. and Orton W. L. Synthesis and breackdown of the polyphosphate fraction and acid phosphomonoesterase of Saccharomyces meUis and their location in the cell.// J. Bacteriol. 1965. V. 89. P. 740-742.

254. White C, Gadd G.M. The uptake and cellular distribution ofzinc in Saccharomycescerevisiae.il 1. Gen. Microbiol. 1987. V. 133. P. 121-131.

255. Wiame J. M. Etude d'une substance polyphosphate basophile et metachromatique chez les levures.// Biochim. Biophys. Acta. 1947. V. 1. P. 234-255.

256. Wiemken A., Durr M. Characterization of amino acid pools in the vacuolar204compartment of Saccharomycescerevisiae. //Arch. Microbiol. 1974. V. 101. P. 45-57.

257. Wolskamitaszko B. Trehalases from spores and vegetative cells ofyeast Saccharomyces cerevisiae. //J. Basic Microbiol. 1997. V. 37. P. 295-303.

258. Woese C.R., Kandier O., Wheeliss M.L. Towards a natural system of organisms: proposal for the domains Archaea, Bacteria and Eucarya. // Proc. Nat. Acad. Sei. USA. 1990. V.87. P. 4576-4579.

259. Wood H.G., Clark J.E. Biological aspects of inorganic polyphosphates. // Ann. Rev. Biochem. 1988. V. 57. P. 235-60.

260. Wurst H., Romberg A. A soluble exopolyphosphatase of Saccharomycescerevisiae. //J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 10996-10001.

261. Wurst H., Shiba T., Romberg A. The gene for a major exopolyphosphatase of Saccharomyces cerevisiae. //J. Bacteriol. 1995. V. 177. P. 898-906.

262. Yamagata Y., Watanabe H., Saitoh M., Namba T. Volcanic production of polyphosphates and its relevance to prebiotic evolution. // Nature. 1991. V. 352. P. 516-19.

263. Yang Y. C., Bestos M., Chen K.J. Effect of osmotic stress and growth stage on cellular pH and polyphosphate metabolism in Neurospora crassa as studied by 31-P-nuclear magnetic resonance spectroscopy. // Biochim. Biophys. Acta 1993. V. 1179. P. 141-47.

264. Zhu H. and Riggs AF . Yeast flavogemoglobin is an ancient protein related to globins and a reductase family. // Proc. Natnl. Acad. Sei. USA. 1992. V. 89. P. 5015-5019.