Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экспериментальное обоснование применения низкомолекулярной ДНК из молок лососевых рыб и напитков на натуральной основе с низкомолекулярной ДНК при псевдотуберкулезе

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Павлинич, Сергей Николаевич

ВВЕДЕНИЕ.«.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ГЛАВА 1. Патогенмость Yersinia pseudotuberculosis как функция бкомолекул н возможность снижения их активности с помощью имму нокорректоров.-.

И.Факторы патоген косгн Ypseudotuberculosis, их роль в патогенезе ннфскчнн.—

1.1.1. Факторы пагогенностн Y. pseudotuberculosis с адгезивной н и нвазм вной фу н кцией.

1.1.2. Факторы пагогенностн У pseudotuberculosis с знтнфагоцнтарнон функцией.

1.1.3. Факторы патогенности Ypseudotuberculosis с токсической фук кцней.„♦♦.♦„. . „«.„.

L2. Иммунокорректоры пептидной природы из наземных животных н активные компоненты нуклеиновых кислот из морских гилробиоитов,

СОБСТВ ЕН НЫ Е ИССЛЕДОВА НИЯ.,.

ГЛАВА 2.1Управления, объекты и истоды исследовання.-.

ГЛАВА 3. Изучение действия ншкомолекулярной ДНК из молок лососевых рыб при экспериментальном псевдотуберкулезе,.

3.1. Влияние профилактического скармливания иДНК из молок лососевых рыб мышам на инфицирование Ypstruckxuberculosis печени и селезенки мышей .,

3.2. Инфицирование Y,pseudotuberculosis печени и селезенки мышей при лечебном применении мДНК из молок лососевых рыб.

3.3. Влияние иДНК из молок лососевых рыб на выживаемость мышей, зараженных Y. pseudotuberculosis.,„,.

3.4. Действие иДНК из молок лососевых рыб на реализацию ннвазнвных свойств Vpseudortiberculosis.

3.5. Ослабление действия токсинов Y.pseudotuberculosis с помощью мДИК ю молок лососевых рыб.-.■.«».■■.».«.«.,.„

ГЛАВА 4. Исследование действия nun н г кон ни натуральной основе с низкомолекулярной ДНК из молок лососевых рыб при экслернмеьгталыюм псевдотубсркулпс.—

4.1. Динамика пораженки печени и селезенки мышей бактериями псевдотубсркулси после профилактического употребления напитков на натуральной ос новс с нДНК из молок лососевых рыб.

4.2. Инфицирование бактериями псевдотуберкулеза печени и селезенки мышей прн лечебном использовании налитков на натуральной основе с нДНК из молок лососевых рыб, -.

4.3. Влияние налитков на натуральной основе с нДНК из молок лососевых рыб на выживаемость мышей, инфицированных Y.pseudotuberculosis.

4.4. Исследование влияния нДНК и нагни кои ла основе тыквенного сока и соевого молока с нДНК на тяжесть токе пиемии у мышей.

ГЛАВА 5. Изучение действия нДНК ит молок лососевых рыб и напитков на натуральной основе с нДНК на фагоцитоз, окислительную и антнокислнтельнуюактнвность леритонсальных клеток.

5.1, Изучение фагоцитоза ^'pseudotuberculosis макрофагами пернтонеалыюй полости мышей, получавших налиткн ла натуральной основе с нДНК из молок лососевых рыб по профилактической схеме. .„.

5.2. Влияние нДНК ш молок лососевых рыб и напитков, включающих и ДНК, на окислительную и антнокиелнтельную активность перитоиеальнмх клеток в норме и при воздействии термолабнльного летального токсина Y,pseudotuberculosis.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экспериментальное обоснование применения низкомолекулярной ДНК из молок лососевых рыб и напитков на натуральной основе с низкомолекулярной ДНК при псевдотуберкулезе"

Заболеваемость псевдотуберкулезом в РФ на протяжении многих лет остается на стабильно высоком уровне (Ющенко Г.В.,1999). По данным Е.Н. Беляева и А.А. Ясинского из Федерального Центра Госсанэпиднадзора, показатель заболеваемости псевдотуберкулезом на 100 тыс. населения в России составил на 2004 г. 3,9°/оооо- Во Владивостоке такой показатель составлял 7,06°/оооо» что превышало показатели общей заболеваемости псевдотуберкулезом по России в два раза. Согласно данным, полученным от Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, заболеваемость псевдотуберкулезом в РФ в 2005 г. составляла 3,40й/оооо> в Приморском крае - этот показатель был выше и составлял 4,47°/оооо- Показатель заболеваемости псевдотуберкулезом во Владивостоке также оставался на достаточно высоком уровне - 4,22 °/оооо

Несмотря на значительный прогресс в изучении эпидемиологии, этиологии, клиники, патогенеза псевдотуберкулеза, по-прежнему остаются нерешенными вопросы. Это касается, прежде всего, тактики лечения данной болезни. Заболевание характеризуется полиморфизмом клинических проявлений, частым возникновением рецидивов и осложнений. Возбудитель псевдотуберкулеза продуцирует разные факторы патогенности - адгезии, инвазин, белки III- системы секреции, токсины, дающие ему способность проникать в организм, противостоять защитным системам, продуцировать токсины, размножаться в тканях, вызывать повреждения различных органов и систем. Факторы патогенности играют главную роль в инициации и развитии генерализованного инфекционного процесса. Снижение действия этих факторов на организм является важной задачей медицинской науки и практики.

В настоящее время, согласно действующей государственной политики в Российской Федерации, одним из приоритетных направлений в области здорового питания населения является разработка и внедрение новых продуктов, обогащенных активными компонентами на основе натурального сырья и их использование в медицине в качестве профилактических и лечебных средств.

Биологически активные вещества из источников растительного и животного происхождения широко используются при различной патологии. В экономически развитых странах мира уделяется повышенное внимание изучению биологически активных добавок к пище и их производству. Им принадлежит довольно стабильный и широкий сектор в структуре современного производства обогащенных пищевых продуктов.

В России рынок биологически активных добавок к пище в настоящий момент оценивается примерно в 2,3 млрд. долларов, что обусловлено повышенным интересом к ним населения.

В последнее десятилетие происходит активное освоение морских ресурсов в качестве источников новых биологически активных веществ (БАВ). Особенно внимательно изучается действие БАВ тинростима из нервных ганглиев кальмара, митилана - из мантии мидии, зостерина, транслама, фукоидана, полученных из морских водорослей.

Главной мишенью этих веществ в организме являются фагоцитирующие клетки, в большей степени - клетки моноцитарно-макрофагального ряда (Гажа А.К., и соавт., 1999; Запорожец Т.С., и соавт., 2004). К числу БАВ из морских гидробионтов относится низкомолекулярная ДНК (нДНК) из молок лососевых рыб. К началу наших исследований не было известно о применении нДНК при инфекционной патологии, в том числе при псевдотуберкулезе.

Целью исследования явилось изучение влияния нДНК из молок лососевых рыб и напитков, содержащих нДНК, при профилактическом и лечебном их применении на динамику тяжести инфекционного процесса при псевдотуберкулезе и способность возбудителя реализовать действие факторов патогенности с инвазивной, антифагоцитарной и токсической функциями.

Основные задачи:

1. Изучить влияние нДНК на обсемененность внутренних органов (печени, селезенки) экспериментальных животных Y.pseudotuberculosis в динамике инфекции при профилактическом и лечебном применении.

2. Исследовать возможность снижения патогенного воздействия бактерий псевдотуберкулеза на организм мышей с помощью нДНК.

3. Изучить влияние нДНК на способность Y.pseudotuberculosis проникать в эпителиальные клетки.

4. Выявить возможность снижения действия токсинов Y.pseudotuberculosis на организм экспериментальных животных при профилактическом и лечебном использовании нДНК и напитков с нДНК.

5. Оценить выживаемость экспериментальных животных и размножение Y.pseudotuberculosis в их внутренних органах (селезенке и печени) при профилактическом и лечебном употреблении напитков с нДНК на основе соевого молока и тыквенного сока.

6. Изучить влияние нДНК в составе напитков на фагоцитоз бактерий псевдотуберкулеза клетками перитонеального экссудата мышей.

7. Исследовать активность окислительной и антиокислительной систем перитонеальных фагоцитов мышей в ответ на действие термолабильного токсина Y.pseudotuberculosis после профилактического употребления напитков с нДНК.

Научная новизна и теоретическая значимость работы

Впервые при экспериментальном псевдотуберкулезе изучено профилактическое и лечебное действие нДНК из молок лососевых рыб и напитков с нДНК на основе тыквенного сока и соевого молока.

- Обнаружено, что нДНК ослабляет действие факторов патогенности Y.pseudotuberculosis с инвазивной, антифагоцитарной и токсической функциями, а также способность возбудителя размножаться в организме экспериментальных животных и вызывать их гибель.

- Выявлено, что нДНК при профилактическом и лечебном применении существенно снижает количество Y.pseudotuberculosis в органах животных в динамике псевдотуберкулезной инфекции и способствует их выживанию.

- Установлено, что под воздействием нДНК в тестах in vitro ослабляется способность возбудителя проникать в эпителиальные клетки линии СПЭВ.

- Показано, что профилактическое скармливание мышам напитков на основе тыквенного сока и соевого молока, содержащих нДНК, способствует усилению фагоцитоза Y.pseudotuberculosis клетками перитонеального экссудата этих животных.

- Определено, что профилактическое скармливание мышам нДНК отдельно или в составе пищевого напитка стимулирует окислительную активность в перитонеальных макрофагах животных, повышая при этом активность их антиоксидантных ферментов.

- Выявлено, что при профилактическом и лечебном употреблении животными нДНК или напитков с нДНК наблюдается снижение патогенного воздействия термолабильного и термостабильного токсинов бактерий псевдотуберкулеза на организм экспериментальных животных.

Практическая ценность работы

На основе проведенных исследований впервые сконструированы новые безалкогольные напитки на основе соевого молока и тыквенного сока с добавлением бифидобактерий и нДНК из молок лососевых рыб. Материалы диссертации были использованы при разработке и внедрении научно-технической документации (ТУ 9224-128-02067936-2004; ТУ 9224-12902067936-2004) на обогащенные нДНК из молок лососевых рыб безалкогольные напитки на основе тыквенного сока и соевого молока. Получены санитарно-эпидемиологические заключения о качестве и безопасности разработанных напитков с нДНК.

Результаты исследований обосновывают использование нДНК из молок лососевых рыб и напитков, на основе тыквенного сока и соевого молока с нДНК, в курсе комплексного лечения и для сезонной профилактики псевдотуберкулезной инфекции.

Апробация результатов диссертационной работы

Материалы диссертации представлены на различных научных форумах международного, российского, регионального уровней.

Международных: II Международном симпозиуме «Пищевые биотехнологии: проблемы и перспективы в XXI веке» (Владивосток, 2004); VI Тихоокеанской научно-практической конференции молодых ученых с международным участием «Актуальные проблемы экспериментальной, профилактической и клинической медицины» (Владивосток, 2005); на международном молодежном симпозиуме «Устойчивость и безопасность в экономике, праве, политике стран Азиатско-Тихоокеанского Региона» (Хабаровск, 2005); на международной научной конференции «Актуальные проблемы современной медицины - 2005» (Минск, 2005); на I международной научно-технической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы технологии живых систем» (Владивосток, 2005); на III Международной научно-практической конференции «Технологии и продукты здорового питания. Функциональные и лечебно-профилактические пищевые продукты, продукты детского и школьного питания» (Москва, 2005); на VIII Всероссийском конгрессе «Оптимальное питание - здоровье нации» (Москва, 2005); на 13 Международном конгрессе по приполярной медицине в рамках международного полярного года (Новосибирск, 2006).

Всероссийских: на Второй Всероссийской конференции с международным участием «Инфекции, обусловленные иерсиниями» (Санкт-Петергург,2006).

Региональных: V межрегиональной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные проблемы здоровья населения Сибири: гигиенические и эпидемиологические аспекты» (Омск, 2004); на IV научно-практической конференции «Инфекционная патология в Приморском крае» (Владивосток, 2004); на XXXVI научной межвузовской конференции по итогам научно-исследовательской работы (Владивосток, 2005); на научно-практической конференции «Значение биотехнологии для здорового питания и решения медико-социальных проблем» (Калининград, 2005).

Публикации. Основные положения и результаты исследований опубликованы в 16 работах, в том числе в 3 статьях в центральной печати.

Структура диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы по материалам и методам исследований, трех глав собственных исследований, заключения, выводов, рекомендаций для внедрения результатов исследования в медицинскую науку и практику, указателя литературы. Текст диссертации размещен на 152 страницах, проиллюстрирован 16 рисунками и 8 таблицами. Список литературы включает 275 источников, из них 95 отечественных авторов.

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Павлинич, Сергей Николаевич

выводы

1 На модели псевдотуберкулсзноЙ инфекции показано, что биологически активное вещество - ннзкомолекулярная ДНК из молок лососевых рыб и напитки на основе соевого молока и тыквенного сока с нДНК, существенно облегчают тяжесть течения экспериментальной инфекции у мышей при профилактическом и лечебном применении.

2.Установлено, что нДНК уменьшает количество Y.pseudotuberculosis в органах мышей (печень, селезенка) в динамике инфекции, повышает выживаемость животных без применения этаотропного лечения,

3.Выявлено, что нДНК снижает способность возбудителя псевдотуберкулеза проникать в эпителиальные клегки перевиваемой клеточной культуры линии С ГО В in vitro.

4.Профилактическое и лечебное использование нДНК значительно ослабляет патогенное воздействие токсинов бактерий псевдотуберкулсза на организм животных.

5.Профилактическое и лечебное применение напитков с нДНК уменьшает обсемененность органов (печени,с елезенкн) Ypseudotuberculosis и повышает выживаемость мышей, инфицированных летальной дозой бактерий.

6.Профнлактнческое и лечебное использование напитков с нДНК снижает патогенное действие токсинов ^pseudotuberculosis.

7.Установлеко, что профилактическая и лечебная схемы, включающие в себя напитки на основе соевого молока н тыквенного сока с нДНК, усиливают фагоцитоз Y.pseudotuberculosis перитоиеальнымн клетками мышей и способствуют очищению органов от возбудителя.

В.Профилактнческое скармливание животным и ДНК отдельно или в составе пищевого напитка повышает окислительную активность в пернтонеальных фагоцитах экспериментальных животных, стимулируя при этом активность антиоксидантных ферментов. рекомендации для внедрения результат** исследований в медицинскую науку и практику

Совокупность материалов и наблюдений, подученных в ходе исследований, позволяет рекомендовать для ннедреиня следующее:

- а медицинскую науку

1. При исследовании влияния биологически активных веществ из морских шлробионтов на функциональную активность фагоцитирующих клеток рекомендуется использовать определение изменения их окислительной активности и активности аитиокиелнтельной ферментной системы клеток под воздействием БАВ при добавлении в систему стимулирующею инфекционного агента, так как определенные биологически активные вещества проявляют свое действие непосредственно в условиях окислительного стресса.

2. При разработке новых комбинированных продуктов питания, обогащенных биологически активными компонентами из морских гндробионтов, рекомендуется учитывать целесообразность внесения БАВ в состав продукта и возможные его действия при дальнейшем использовании, которые во многом зависят как от дозы используемого вещества, так и исходного состояния организма.

- в медицинскую практику

1. Полученные результаты являются основанием для применения нДНК из молок лососевых рыб и разработанных безалкогольных напитков с нДНК на основе тыквенного сока и соевого молока, в комплексном курсе лечения пссвдатуберкулсза.

2, Рекомендуется использовать нДНК как отдельно, так и в составе созданных безалкогольных напитков на основе тыквенного сока н соевого молока для сезонной профилактики псевдотуберкулезнои инфекции.

- в учебный процесс

Рекомендуется использовать в учебном процессе кафедр микробиологии, иммунологии, пищевой биотехнологии новые данные о факторах лдтогенностн бактерий псевдотуберкулеза и полученные данные о механизмах возможного действия на них нммуномодулятора -ннзкомолекулярноЙ ДНК. выделенной из молок лососевых рыб.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На Дальнем Востоке и в Сибири широко распространена дальневосточная с карл a m неподобная лихорадка — одно от наиболее известных клниико-эпндемнческих проявлений псевдогуберкулеза. На современном этапе изучения данного заболевания сформулирована концепция его патогенеза, которая свидетельствует о многоэтапное™ патогенетической цепи псевдотуберкулеза, которая во многом определяет чрезвычайное разнообразие клинических форм этой болезни. По механизму патогенеза исевдотуберкулез относиться к общим инфекциям, протекающим с гематогенной и лнмфогеннон днссеминацией возбудителя но организму с выраженным токсико-аллсргнческнм синдромом (Сомов Г.П., и соавт, 2001). Ранее считалось, что генерализация пеевдотуберкулезной инфекции становиться возможной лишь после накопления бактерий в региональных лимфатических узлах - первичных очагах, и нарушении барьерной функции последних (Борисова М.А,,1971). Однако в дальнейшем было установлено, что бактерии псевдотуберкулеза обладают высоким ннвазнвкым потенциалом и способны в течение первых 10-15 минут от момента внедрения проникать через слизистые оболочки в эпителиальные клетки и в кровь с последующим размножением микроорганизмов во внутренних органах (Тимченко Н.Ф., 1989; Тимченко Н.Ф., и соавт., 1990). Кроме того, возбудитель данной инфекции способен длительное время поддерживать свою жизнеспособность в клетках, противостоять иммунной системе организма хозяина, что зачастую сопровождается явлениями вторичного иммунодефицита и частыми рецидивами заболевания. Понимание патогенеза псевдотуберкулеза необходимо для раскрытия роли факторов натогенностн возбудителя на разных этапах инфекции, которые играют важную роль в развитии заболевания, определяют его тяжесть течения н исход.

Факторы патогснности Y.pseudotuberculosis играют ключевую роль а инициации инфекционного процесса. Считается, что способность вызывать инфекционное заболевание сформировалась у бактерий в направлении приобретения функций, позволяющих нм проникать в организм хозяина, противостоять его защитным силам, а также вызывать нарушения деятельности физиологически важных систем. Последовательность возникновения этих функций у микроорганизмов в значительной степени отражает этапы развития самого инфекционного процесса (Езелчук 1С).В., 1985). Одной ит первых функций, которая позволяет бактериям проникать в новую среду обитания, является адпезнвно-ннвазивная. Однако она не обеспечивает микробу защиту от иммунной системы организма, поэтому у возбудителя леевдотуберкулеза сформировались факторы патогенносгн с антифагоцитарной функцией, к которым относятся белки 111 системы секреции.

Как известно, значительную роль в инфекционной патологии играют токсины микроорганизмов. У некоторых видов бактерий они обусловливают развитие основного снмптомокомлскса болезни, например, экзотоксин C-diphtheriac и эктеротоксин V.cbolcrac, у других - токсины E.coli, гемолизины P. vulgaris, P.morganii - играют роль в отдельных проявлениях инфекции (Вертиев Ю.В.,1987; РороПГ M.R., 2005), У бактерий псевдотуберкулеза термостабнльный н термолабильный токсины значительно утяжеляют течение инфекции за счет их выраженных циготокснческих воздействий на ткани и органы.

Все три функции: эдцезнвно-инвазивная, антифагоцитарная и токсическая участвуют а формировании патогенности микроорганизмов, и в этом смысле гнвтогенность является полидетермннангным или полнфункциональнмм свойством бактерий. За каждой функцией патогенных бактерий стоят определенные биологические молекулы и биологически активные вещества, которые квалифицируют как факторы патогенности,

Генерализованный характер псевдотуберкулезной инфекции, в частности, случаев, сопровождающийся септическими и хирургическими осложнениями, а иногда тяжелым повреждением жизненно важных органов и летальным исходом, придаст большое значение правильной профилактике и своевременному лечению данного заболевания, которое до сих пор часто затруднено вследствие недостаточности данных о факторах патосенностн и механизмах их действия,

В последнее время при заболеваниях различной этиологам, в том числе и не инфекционных, наряду с традиционным лечением используют биологически активные вещества, в том числе и препараты нуклеиновых кислот и ДНК природного происхождения - с целью активации иммунной системы и повышении нсспецифической резистентности организма. Препараты ДНК из морских гидробиоитов нашли широкое применение в практике ряда кардиологических, кожно-венерологических, офтальмологических заболеваний. О применении препаратов ДНК при инфекционной патологии сведения в литературе, как правило, единичны. Так, Е.А. Зайцевой с соавт. (2005), JI.H. Федяннной с соаат. (2004) было установлено, что нДНК из молок лососевых рыб, введенная по лечебной н профилактическим схемам неинбредным мышам, экспериментально зараженных Listeria monocytogenes, ускоряет элиминацию микроорганизмов из печени и селезенки без применения этнотропных препаратов. К началу наших исследований данных о применении ДНК при псевдотуберкулезе в доступной нам лн!ературе не было обнаружено.

В связн с важностью проблемы снижения патологического воздействия различных биомолскул возбудителя на организм с помощью биологически активных веществ натурального происхождения мы исследовали влияние низкомолскулярной ДНК из молок лососевых рыб и безалкогольных напитков на основе тыквенного сока и соевого молока, содержащих и ДНК, в профилактической и лечебной схеме при экспериментальной псевдотуберкулезной инфекции. При этом мы оценивали влияние нДНК н напитков с и ДНК из молок лососевых рыб на динамику и тяжесть инфекционного процесса, способность возбудителя реализовать действие факторов патоген кости с адгсэивно-инвазивной. антнфагоци гарной и токсической функциями.

Полученные данные позволяют сделать заключение, что профилактическое скармливание нДНК животным на протяжении 7 суток до интраперитонеального инфицирования их бактериями псевдотуберкулеза оказывает влияние на динамику обсемененности печени и селезенки, способствуя очищению органов от возбудителя.

Установлено, что нДНК нз молок лососевых рыб приводит к снижению количества бактерий во внутренних органах и способствует более быстрому очищению организма от возбудителя псевдотуберкулеза- Профилактическое скармливание животным нДНК до заражения их бактериями псевдотуберкулеза в 100%-летальной дозе также способствует их 75- 100% выживанию без этиотроиного лечения.

Ранее Беседковой Н.Н. с соавт. (1999) было установлено, что нДНК обладает нммуиотропным действием и способно повышать поглотительную и переваривающую активность клеток системы мононуклелрных фагоцитов в отношении Е.соН.

Выживаемость опытных животных в высоком проценте случаев, обуславливает усиление иммунного ответа к Y.pseudotuberculosis под действием низкомолекулярной ДНК нз молок лососевых рыб.

Важным зтапом в развитии инфекционного процесса при псевдотуберкулезе является способность Y.pseudotuberculosis проникать через эпителиальный барьер в клетки. На модели in vitro было показано, что нДНК взаимодействует с эпителиальными клетками перевиваемой культуры СПЭВ, что приводит к снижению количества бактерий, ассоциированными с клетками.

В экспериментально созданной системе «вне живого организма» взаимодействие нДНК с эпителиальными клетками исключает влияние иммунокомпетентных клеток, реагирующих на проникновение чужеродных бактерий в организм и защищающих клетки организма от проникновения в них патогенных бактерий. Следовательно, можно предположить, что и ДНК оказывает влияние на процесс адгезии и инвазии бактерий в клетки. На каком именно этапе это воздействие более всего проявляется в данный момент точно сказать нельзя, поскольку для этого требуются специальные исследования Тем не менее, известно, что действие нД1 IK из молок лососевых рыб может реалиэовываться на разных стадиях инфекционного процесса, в частности, на этапах приближения возбудителя к эпнтелноцнтам, блокируя при этом лнганды бактерий — адгезины и/или инвазнны, предотвращая развитие адсорбции. Кроме того, возможно воздействие нДНК на рецепторы a-ji-ннтегрикы клеточной мембраны эннтелноцнтов, которые необходимы в процессе ннтерналнзицнн К pseudotuberculos is внутрь клетки. Возможно, нДНК предотвращает связывание бактерий с этими рецепторами, что препятствует реолизашш механизма инвазии. Предотвращение или снижение адгезии с помощью конкурентного нпгибнрования биологически активными веществами адгезинов иди клеточных рецепторов, является перспективным направлением в системе профилактики инфекционных заболеваний (Макаренкова И.Д., Компанец Г, Г., Запорожец Т.С., 2006). Очевидно, что применение нДНК вносит определенные коррективы в протекание процессов функционирования аппарата III системы секреции бактерий, важным этапом которых является проникновение белков-эффекторов возбудителя, например, цн тотокенна YopH, внутрь клетки. Как следствие этого, возможно снижение токсического действия бактерий пссвдотубсркулеза на организм,

В настоящее время известно, что токсины возбудителя играют существенную роль о патогенезе псевдотуберкулсза. Прн попадании в теплокровный организм Y pseudotuberculosis наряду с нквазнвнымн свойствами, проявляют и свой токсический потенциал. Они продуцируют в теплокровном организме разные виды токсинов, среди которых особое место занимают термостабильный летальный токсин и термодабндьнын летальный токсин - видоспсцифичеекис белки }'pseudotubercuIosis< способные вызывать полнорганныс поражения.

Например, в механизмах действия TCTYp важную роль играет способность его ннгибнровать синтет белка в клетке, усиливать нерекнсиос окисление лнпндов клеточной стенкн и снижать активность фагоцитов.

Нами впервые было обнаружено, что скармливание животным нДНК за I сутки, в момент введения и после введения этих токсинов бактерий псевдотуберкулеза в концентрации, вызывающей 100% гибель животных в контроле, предотвращает гибель мышей в высоком проценте случаев. При исследовании влияния ннзкомолскулярной ДНК нз молок лососевых рыб в составе напитков, разработанных нами на основе тыквенного сока и соевого молока напитков на характер течения псевдотуберкулезной инфекции у животных, которым скармливали эти напитки с профилактической и лечебной целью, установлено снижение показателей обсемененноети бактериями псевдотуберкулеза печени и селезенки по сравнению с контрольной группой животных.

Снижение количества бактерий в органах животных, инфицированных Y.pseudotuberculosis н употреблявших с лечебной целью нагшток с нДНК нз молок лососевых рыб без зтнотропного лечения, вероятно, является следствием стимулирующего влияния и ДНК на клеточный иммунитет мышей, что в конечном итоге способствует меньшему поражению бактериями внутренних органов. Это подтверждается также тем фактом, что уже с первых суток приема напитка на основе тыквенного сока с нД11К уровень поражения нерсиннямн органов у животных в опытной группе был значимо ниже, чем в контрольной.

Нами также было установлено, что как профилактическое, так и лечебное использование нДНК из молок лососевых рыб и напитков с нДНК способствует 75 - 300% выживанию мышей при введении им 100% летальной дозы ^.pseudotuberculosis, прн полной гибели животных в контроле. Такие же данные были получены н прн введении мышам 100% летальной концентрации термостабнльного н термолабильного летальных токсинов. Животные выживали в высоком проценте случаев при использовании нДНК как отдельно, так и в составе напитков на основе тыквенного сока и соевого молока в качестве профилактического и лечебного компонента питания в течение нескольких суток наблюдения за ними после введения токсинов I'.pseudotuberculosis.

Возбудитель псевдотуберкулсза способен противостоять поглотительной и переваривающей активностям фагоцитов, а также длительно выживать и даже размножаться в цитоплазме этих клеток (Беседнова Н.И, 1979; Simonct A, etal., 1984), В названных процессах играют роль разные факторы патогенности перси пий. В отношении антифагоцнтарной функции патогенных иереи и нй установлена значительная роль белков Ш-снстсмы секреции (Comctis G.R., 2002). Кроме того, определено, что фагоциты являются одной из мишеней действия многих бактериальных токсинов, в том числе и для термостабнльного летального токсина неренннй (Ailken R., Him TJt, 1995; DcHaan L. et al„ 1999; Тимченко 11.Ф. и соавт., 2004).

Ввиду этого, исследование изменения функциональной активности фагоцитов под действием активных компонентов нз морских гндробнонтов при псевдотуберкулсзе является оправданным для выявления возможных механизмов их действия.

Ранее дальневосточными учеными было установлено стимулирующее действие нДНК нз молок лососевых рыб на фагоцитарную активность пернтонеальных макрофагов мышеи ш vivo по отношению к E-Coli. (Беседноаа КН. с соавт., (999).

В настоящей работе, нами выявлена, что профилактическое (в течение 7 дней) нероральное употребление животными и ДНК из молок лососевых рыб в составе напитка на основе тыквенного сока оказывает стимулирующее влияние на функциональную активность пернтонеальных нейтрофнлов мышей, увеличивая их фагоцитарные показатели,

При фагоцитозе н клетках происходит рост продукции активных форм кислорода (Маянсккй Л.Н., Маянскнй Д.И., [983). В нормальных условиях свободнорадикальная атака ограничивается антнокендантнон системой клетки. Экспериментальными исследованиями покачано, что биологически активные компоненты, выделенные из морских гидробнонтов, являются природными ангноксидангамн (Шахман и соавт., 1998; Хис С. et а!., 1998),

Однако до енх пор, влияние нДНК из молок лососевых рыб на окислительную и антнокислительную ферментную системы макрофагов оставалось не изученным.

Нами впервые исследовано влияние hi ДНК из молок лососевых рыб, и напитков, содержащих нДНК, на окислительную н антнокиелнтельную ферментную системы клеток иеритонеального экссудата мышей как отдельно, так и при воздействии на макрофаги термолабнльного легального токсина Y. pseudotuberculosis.

Вследствие проведанных наблюдений установлено. что профилактическое скармливание животным нДНК отдельно, или в составе пищевого напитка, переводит нормальную окислительную активность в перитонсальных макрофа1ах мышей в энергетически более благоприятный режим, повышая прн этом активность таких антноксидантных ферментов клеток, как СОД и каталаза.

Однако понижение окенлантной активности фагоцитов, которое происходит прн добавлении термолабнльного летального токсина Y.pseudotuberculosis неблагоприятно для организма, поскольку снижает возможности зашиты клетки, В этом случае нДНК из лососевых рыб защищает клетки от действия термолабнльного токсина, стабилизируя их окислительную активность, снижая активность антноксидантных ферментов, возвращая их до нормальных уровней, наблюдаемых в интактных клетках, не инкубированных с токсином.

По-видимому, регуляторная активность нДНК в отношении окендантно-антнокс илантного баланса зависит от исходного его уровня в клетках н осуществляется через ряд вторичных посредников, к примеру, могут стимулироваться рецепторы клетки, передающие сигнал к активации цДМФ, а это, а свою очередь, может сопровождаться целым комплексом внутриклеточных процессов. Кроме того, возможно также воздействие нДНК на выработку противовоспалительных факторов.

Так, L, BhagaJ, F.G. Zhi, D. Yu (2003) была отменена стимуляция короткими фрагментами ДНК животного происхождения секреции ИЛ-2, ИЛ-б и ИЛ-12, а также активация ядерного фактора транскрипции NF-kappa. Известно, что зтот фактор опосредует выработку ряда провоспалительяых факторов, в том числе TNF-<i, которые тесно связаны с оксидантиымн механизмами клетки. Установлено, что короткие фрагменты ДНК также стимулировали выработку цитокннов в клеточных культурах, выделенных от человека и индуцировали секрецию у-интерферонов в чувствительных клеточных культурах из ткани селезенки мышей, что было связано со стимуляцией Th2. Этн же фрагменты ингнбнровалл рост человеческой опухоли in vivo.

Нужно отметить, что нДНК может оказывать влияние на факторы врожденного и приобретенного иммунитета, ослабляя воздействие факторов патогеиностн бактерий пссвдотубсркулеза на организм животных.

Данное вещество может предотвращать реализацию бактериями псевдотуберкулеза действия факторов патогеиностн с иннизинной функцией. При описании влияния, оказываемого ДНК, необходимо учитывать и исходный состав самой ДНК. В зависимости от того, какие нуклеотидные последовательности обнаружены в структуре ДНК - по их качественному н количественному составу, по содержанию азотистых оснований, размерам, и в зависимости от места их расположения в цепи, могут наблюдаться те или иные воздействия (Gomis S, et al., 2003; Bhagat L.T Zhi F.G., Yu D.,2003; Ucv I.D., Kiiazawa H. et al,, 2005).

Известно, что ряд природных мономерных пептидов и аминокислот способны активировать иммунитет при нх профилактическом нс пользован ни. Еще в 1986 Г. Белокрыловым с соавт. было показано, что введение различных аминокислот подопытным животным приводило к ускорению преобразования клеток костного мозга в Т-лимфоииты и увеличению выработки антител в ответ на появление инфекционного агента. Выяснилось, что девять аминокислот, таких как - асларагнновая кислота, аргинин, глутаминовая кислота, цистенн, сернн, треонин, триптофан, алан ни н валик усиливают иммунный ответ у животных, Причем, аспарагииовая кислота оказалось лидером по стимулированию иммунитета, увеличивая более чем в полтора раза выработку1 Т-лимфоцитов и антител.

ТЛ. Пнвненко, Е.В. Якут. Л,М. Эпштейном (1998) установлено, что гндрализат молок лососевых (кеты) содержит в своем составе свободные аминокислоты, обладающие иммуностимулирующим действием.

В результате исследований, проведенных нами, было выявлено, что профилактическое и лечебное применение и ДНК из молок лососевых рыб при псевдотуберкулезе снижает способность бактерий псевдотуберкулеза проникать в клетки и ткани, уменьшает обсемеценность органов мышей (печени н селезенки) Ypscudotuberculosts в линамнкс нифекпин, ослабляет воздействие токсинов бактерий на организм и повышает жизнеспособность животных,

Использование напитков с нД1 IK на основе соевого молока и тыквенного сока с профилактической н лечебной целью, приводит к усилению фагоцитоза )'.pseudotubctvulosis пернтонеальнымн макрофагами мышей, способствует более быстрому очищению органов (печени и селезенки) животных от бактерий псевдотуберкулеза и снижает патогенное действие термостабильною и термолабильного летальных токсинов.

Профилактическое скармливание животным нДНК как отдельно, так и в составе напитка на основе тыквенного сока, переводит нормальную окислительную активность в перитонеальиых макрофагах мышей а более благоприятный для клеток энергетический режим, повышая при этом активность антноксидантных ферментов.

Таким образом, анализируй результаты исследований, полученные при изучении профилактического и лечебного действия нДНК как отдельно, так и а составе напитков, а именно: высокий процент выживаемости животных, получавших нДНК, при введении нм 100% легальной концентрации токсинов y.pseudotuberculosis и 100% летальной дозы бактерий, прн полной гибели мышей в контроле - свидетельствуют о резком ослаблении тяжести течения инфекционного процесса в организме под влиянием и ДНК нз молок лососевых рыб,

В целом, объяснение механизмов действия нДНК на организм, снижающих патогенное воздействие бактерий псевдотуберкулеза, на современном этапе требует углубленных исследований. Полученные в этом направление данные будут способствовать пониманию процессов, происходящих при внедрении возбудителя ^pseudotuberculosis в организм, а также разработке новых эффективных средств профилактики и лечения заболевания.

11В

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Павлинич, Сергей Николаевич, Владивосток

1. Ас. 1489185 СССР, Способ получения термостабнльного токсина Yersinia pseudotuberculosis I Н,Ф- Тимченко, Ю.В, Вертиев, Е.П. Нсдашковская (РФ) №1489185; заявл, 26,08.84; опубл. 30.10,87, Бюл. 18,

2. Ашмарин, И,П. Статистические методы в микробиологических исследованиях i И.П. Ашмарин, А.А. Воробьев. Л.:Медгнз, 1963.- 177с.

3. Белокрылое, Г. А- Стимуляция иммуногенеза ненротензнном, пентагастрином и тнмогеном н пути се реализации / Г,А. Белокрылов, М.В. Молчанова, О.Я. Попова // Бюл, зкепер бнол. н мед. 1989. -№11, -С. 584-587.

4. Бердышей, Г.Д. Нуклеиновые кислоты пойкилогермных морских животных / ГЛ. Бердыше в. Киев.: Наукова думка, 1973. - 172 с,

5. Бсселнова, Н.Н, Дезокснрнбонукленновая кислота (ДНК) иг молок рыб -перспективы клинического применения / Н.Н. Бсселнова, Л.М. Эпштейи. Владивосток: ТИНРО-Центр, 2002. - 38с.

6. Ьеседнова. Н.Н- Иммуноактнвныс пептиды из морских организмов / Н.Н.Беседнова, Л.М. Эпнгтсйн, А,К. Гажа tt Тнхоокеан. мед. журн. 1999, •№). - С. 50- 54.

7. Беседнова, ПН Иммунотропные свойства биополимеров из морских гидробнонзов / Н.Н. Беседнова И Бюл. СО РАМН. 1998, - №2. - С. 2632.

8. Беседнова, Н.Н- Иммунотропные свойства биополимеров нз морских гидробнонтов / Н.Н.Беседнова, Т.С. Запорожец И Всстн. ДВО РАН, -1993.-№415.-С.37-45.

9. Бсселнова. Н.Н. Экспериментальное и клнннхо-иммунологнческос изучение псевдотуберкулезнон инфекции: автореф, дне . д-ра. мед, наук ! Беседнова Наталья Николаевна М. 1979. - 47с.

10. Биологически активная пищевая добавка лезокенрибонуклеиновая кислота (ДНК) нз молок лососевых рыб / Ю.И. Касьянснко.

11. Л.МЭпштсЙн, А-К. Гажа и др. // Извести* ТИНРО. 1999 - Т. 125. - С. 139-146.

12. Бисага, Л.В. Выделение, очистка и некоторые свойства токсинов Yersinia pseudotuberculosis / Л. В. Бисага. EJ1. Недашковская U Сборник научных трудов молодых ученых НИИЭМ СО РАМН. Новосибирск, 1992, - С. 21 - 28.

13. Борисова, МА Висцеральная патология, патогенез, диагностика и лечение пссвлотуберкулеза (дальневосточной скарлагнноподобной лихорадки): дис. .д-ра. мед. наук / Борисова Мария Александровна М., 1971.-С. 46,

14. Бурцева, Т.И. Секрстирусмая тнрпениоподобная протеииазв Yersinia pseudoiubercutosis > Т.И, Бурцева, Л„С. Бузолева, Г.П. Сомов // Биохимия 1995. - Т.60. .№ 6 - С. 1589- 1595.

15. Варвашевич, Т.Н. Эколого-бнохнмическис подходы к изучению бактериальных инфекций / Т.Н. Варвашевич Н Бюл. СО АМН СССР-1986 -№4-С, 57-62.

16. Вертиев, Ю,В, Токсин-опосрелованная обусловленность инфекционных заболеваний / Ю-В. Вертиев II Жури, микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1987. - № 3, - С. 86 - 93.

17. Влияние низкомолскуляркой ДНК из молок лососевых рыб на кроветворение в эксперименте / Л.Н.Федянниа, В-В. Потапова, ЛА.Иванушко и др, // Антибиотики и химиотерапия 2004. - Us 4. - С. 710.

18. Влияние полидезокенрнбонуклеида на продукцию цитокинои и пролиферацию культур клеток человека in vitro f О-Н. Щегловитова, Е В. Мирокченкова, Ю.А. Романов и др. // Иммунология 2005. - №2. - С, 87 -90.

19. Водопьянов, СО. Адгезия Yersinia pseudotuberculosis ссротнпа III / С.О.Водопьянов. Б.Н. Мншанькин, В.К, Кнрдесв // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1984. - № 10. - С. 36-40.

20. Воробьев. А А. Принципы классификации и стратегия применения иммнуомодуляторов в медицине / АА Воробьев Н Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2002. - № 4. - С. 93-98.

21. Выбор моделей для определения патогенных свойств возбудителя псевдотуберкулеза / Г.Я, Ценева, Ю.Е. Полоцкий. В.К. Кяеганов и др. // Журн. микробиологии, эпидемиологи и иммунобиологии 1982. - № М.-С. 68-71.

22. Далии, М.В. Адгеэнны микроорганизмов / М.В. Далин, И.Г. Фиш. М.: Медицина. 1985.-184 с.

23. Действие термостабильного летального токсина Yersinia pseudotuberculosis на биосинтез белка in vitro / Н.Ф, Тимченко, ЛЛ.Тсренгьев, Е,П. Недашковская, и лр. Н Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2004. - № 3. - С. 15-18.

24. Езепчук, Ю.В. Патогенносгь как функция биомолекул / Ю.В, Езепчук. -М,: Медицина, 1985. 240 с.

25. Зайцев. В.Г Методологические аспекты исследований свободно-радикального окисления и антноксндантной системы организма I В.Г. Зайцев, В.И. Закрсвскнй И Всстн. Волгоград, мед. акад. 1998. - №4. -С. 49-53.

26. Залмовер. И,Ю- Клинические формы дальневосточной екарлатино-подобной лихорадки / И.Ю. Залмовер // Сборник трудов Владивостокского НИИЭМ. -1969. Вып. 4,-С. 197- 202.

27. Запорожец, Т.С. Механизмы активации нейтрофилов биополимерами морских гидробионтов / Т.С. Запорожец // Антибиотики и химиотерапия.- 2003. -Т. 48, N° 9. С. 3 - 7.

28. Земсков, A.M. Иммуиокоррсгнрукнцне нуклеиновые препараты н нх клиническое применение / A.M. Земскоа. В.Г. Персдсрнй, В,М, Земсков. -Киев,: Здоров'я, 1994.-231 с.

29. Зенков, Н.К. Активированные кислородные метаболиты в биологических системах / Н.К. Зенков. Е.Б. Меньшикова I/ Успехи соврем, бнологнн -1993. Т. 113,Ns 3 -С. 286 - 296,

30. Изучение некоторых свойств Yersinia pseudotuberculosis на различных биологических моделях ! Н.Ф. Тимченко, Л-М, Исачкова, Е^А- Шнпачсва и др. //Жури микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1983,- №5, С. 43-46.

31. Иммунотролные свойства деюксирнбонуклеи новой кислоты из молок лососевых рыб / Н.Н. Беседнова, Ю.И. Касьяиенко, Л.М, Эпштейн н др. // Антибиотики и химиотерапия. 1999. - №10. -СЛЗ-15,

32. Исачкова, Л.М. Взаимодействие Yersinia pseudotuberculosis с эпителием тонкой кишки при экспериментальной инфекции / Л.М. Исачкова, А.А .Жаворонков, Н.Ф. Тимченко // Бюл, экспсрим биологии и медицины- 1985. -№7.-С, 117-120.

33. Исачкова, Л.М, Псевдотуберкулез: пато- и морфогенез: автореф. лис—д-ра, мед. наук / Исачкова Лариса Михайловна М,, 1991. -46

34. Использование сыворогкн к термостабильному токсину для идентификации Yersinia pseudotuberculosis / B.C. Венедиктов,

35. A.Л.Бессднов. Е.Г1 Недашковская, Н.Ф. Тимченко И Клнннч. лаб. днагностака 1994. - Jfe б. - С, 44 - 45.

36. Кззьяиин, А В. Иммунологические эффекты молокина / А.В. Казьяннн,

37. B.В. Юшков // Журн. микробиологии, злндемнологнн и иммунологии — 1998. №2.-С. 97-99.

38. Каплнна, Э.Н Дерннат природный иммуномодулятор для детей и взрослых / Э.Н. Каплина, Ю.П. Вайнберг. М.: Научная книга, 2005. -216с.

39. Каплина, Э.Н. Некоторые итоги клинического применения препарата дерннат с 1976 по 2000 г. I Э.Н. Каплнна И Использование препарата дерннат в различных областях медицины: материалы 1-й Всерос. конф. М., 2000, С 47.

40. Касьяненко. Ю.И. Дезоксирнбонукленновая кислота из морских гилробионтов / Ю.И. Касьяненко, Л-М. Эпштсйн // Тезисы докладов на Всесоюзном съезде биохимического о-ва РАН. М„ 1997. - С. 504.

41. Касьяненко, Ю.И. Сравнительные физико-химические характеристики низкомолекулярной ДНК из морских гидробнонтов / Ю.И. Касьяненко, Т.Н. Пивненко// Известия ТИНГО. 1999. - Т. 125.-С, 152-158.

42. Клебанов, Г.И. Клеточные механизмы праймннга и активации фагоцитов /Г.И. Клебанов, Ю.А. Владимиров// Успехи соврсмсн. бншютни 1999. -ТЛ19, №6-С.462 - 475.

43. Коновалова, ГТ. Антнаксндаитная актнвиоегь нарафармацевтиков, включающих природные ингибиторы свободнораднкальных процессов / Г.Г, Коновалова. А.К. Тнхазе, В.З. Ланкик // Бюл. эксперим. биологии медицины 2000. - N* I, - С. 56 - 58.

44. Коррекция дефектов фагоцитоза при псевдотуберкулез кой инфекции нммуномодуляторамн природного происхождения /Т.С. Запорожец, Н,В, Крылова, Л А. Иванушко и др. И Жури, микробиологии эпидемиологии и иммунологии 1997. -№5.-С55-58.

45. Логвиненко, А.А. Влияние тсрмостабнльного токсина Yersinia pseudotuberculosis на иммунную систему (экспериментальные исследования); автореф, дне. .канд. мед, наук / Логвиненко Анна Александровна Владивосток, 2000. - 24 с.

46. Макаренкова, И,Д. Ингнбнрованне адгезии патогенных микроорганизмов на эукариотнческнх клетках / И.Д Макаренкова, Г-Г. Компанец, Т.С. Запорожец // Жури, микробиологии эпидемиологии и иммунологии — 2006 N? 3. - С. 121-125.

47. Манушина, Т. И Аптноксидашныс зффекгы БАД из гидробнонтан в составе рыбных жиров t Т.И. Манушина, Т.К. Лсбская Н Техника и технологии пищевых производств на рубеже 21 века; материалы научн,-практнч. конф. МГТУ, 2000. - С. 132-133.

48. Машковскнй, М.Д. Лекарственные средсгва; в 2 Т. / М.Д. Машковский. -М.; Медицина, 1993, Т. 2. 94 с.

49. Механизмы выживания бактерий / О.В, Бухарин, А.п. Гннцбург, Ю,М. Романова. Г Л Эяь-Регнстан. М.: Медицина, 2005. - 152 с.

50. Нсдашковская, Н.П, Выделение, очистка и некоторые свойства термолабильного летального токсина Yersinia pseudotuberculosis f П.ГШедашковская И Проблемы инфекционной патологии в Сибири, на Дальнем Востоке и Крайнем Севере, Новосибирск. 1996 - С. 16 - 17.

51. Некоторые механизмы действия олигоиуклеотндов: стимуляция иммунной системы н уменьшение поражения головного мозга при клещевом энцефалите / В.Я. Кармышева, В.М. Рохель, Г.И Фокина и др. // Вопр. вирусологии 1998. - Т. 43, №1. - С. 39 - 42.

52. Олиферук. Н.С Оценка фагоцитарной и бактерицидной активности нентрофилов, макрофагов и незрелых дендритных клеток /

53. H.С.Олнферук, А.Н. Ильинская, Б.В. Пннегин И Иммунология 2005. - №1.-C 10-12.

54. Орехов, А.Н, Инициативы РАЕН но продвижению БАДI А Н. Орехов // Рынок БАД. 2002.-№2.-С. 17-20.

55. Осипов, А.Н. Активные формы кислорода и их роль в организме / А.Н, Осипов, О.А. Азизова, Ю,В, Владимиров // Успехи биолог, химии. 1990. -T.3I,№ 8-С. 180-208.

56. Очистка экзотоксина псевдотуберкулезного микроба методами гель-ироиикающей и ионообменной хроматографии / Н.Г. Пономарев. А.Ю, Пашин, М.Н. Джапаридзе и др. И Вопросы профилактики приролноочаговых инфекций Саратов, 1983. - С- 42 - 47,

57. Пацгин, А.Ю. Совершенствование методов выделения и идентификации экзотоксина псевдотуберкулезного микроба: автореф. дне. . канд. мед. наук / Пашин, А.Ю. Саратов, 1986,-23 с.

58. Iluuiy к. Л.К, Препараты ДНК как потенциальные терапевтические средства / Л.К. Пашух, Г.Н. Апрышко, Е.М. Трещали на // Хны фармац. жури. - 1995. - № 29- - С. 61 - 64.

59. Петров, В.Ф. Получение природных биологически активных препаратов новое направление исследований в НПО «Биомсд» / 8-Ф- Петров, Г-М-Сафонова//Журн. микробиологии, эпидемиологии н иммунологии -1998 -№2 -С,95-97.

60. Покровский, В.И. Псевдотуберкулез: руководство по инфекционным болезням ! под ред. В.И. Покровского, К М. Лобанова. М.: Медицина, 1986 - 126 с.

61. Полоцкий, Ю.Е, Экспериментальный пссвлотубсркулезный энтероколит / Ю.Б. Полоцкий, В.Е, Ефремов, Г,Я. Ценева // VI Всесоюзн. конф. по клинической биохимии, морфологии и иммунологии инфекционных болезней: тез. докл. Рига, 1983. - С. 150 - 152.

62. Получение высокополимерной ДНК нз молок лососевых рыб / Ю-П.Вайнбсрг, Э.Н. Каплина, ПА. Кольцов н др. Н Хим фарм журн. -1982. № 7, - С. 67 -70.

63. Получение н свойства производных ДНК и молок лососевых рыб / Ю.И.КасьяненкО, Ю.В. Ковалева. Л.М, Эпштейн, А.А. Артюков // Известия ТИНРО. 1997,-Т. 120.-С. 37- 43.

64. Потапова, В. В. Иммуномодулирующие н радиозащитные свойства биологически активных веществ нз морских гкдробноитов; автореф. дне. . канд. мед. наук / Потапова Вера Владимировна Владивосток, 2005. -26 с.

65. Применение БАД ДНКаС и ДНКаВИТ в комплексном лечении больных листерноэом (Информационное письмо) / Е.А. Зайцева, Л.Н. Федянина. В.А. Иоанне н др. Владивосток. 2005. - 24 с.

66. Рогачева, С.А. Влияние ДНК на кроветворение нормальных животных / С.А. Рогачева, ГГ. Русинооа. Э.Г- Шарова // Цитология, 1970, - Т. 12, №7.-С, 912-918.

67. Рыкова, Е.Ю. Активирующее нлняние ДНК на иммунную систему / Е.Ю. Рыкова, П.П. Лактионов, В.В. Власов Н Успехи современ. биологии -2001.-Т. 121,№4 -С. 160-171.

68. Сергеев, А.Н, Экзотоксин бактерий песндотуЗеркулеза н его биологическая характеристика: антореф, дне. . квнд, мед. наук 1 Сергеев А.Н. Саратов, 1980. - 22 с.

69. Серебряная, Н.Б. ДНК как иммуностимулятор / Н.Б. Серебряная,

70. A.А.Новмк И Мед. иммунология 2001. - № 3. - С. 27 - 34.

71. Система антнокендантиой защиты организма и старение / А.А. Подколзнн, А.Г. Мегрел адзе, В.И. Донцов и др. // Профилактика старения. 2000. - J4? 3. - С. 4 - 25.

72. Специфическая н нсспецифнческая иммунокоррскния / A.M. Земской,

73. B.М. Земское, В.И. Золодеев, Е.А. Бжоэовскнн // Успехи современ. бнологнн 1997. - Т. И 7, № 6 - С 261 - 268,

74. Стимуляция суперантигеном Yersinia pseudotuberculosis продукции иммуношгтоккнов in vitro / А.В. Воропаев, И. А. Шурыгнна, В .Т. Климов н др. //Тихоокеан. мед, журн. 2001. - № 2. - С. 16 - 18.

75. Терехов, О.П, Иммунная система эндогенная система питания многоклеточных организмов / О.П. Терехов // Иммунология - 2005. - №1. -С. 59 - 62.

76. Термостабильный токсин Yersinia pseudotuberculosis t Е.И- Недашковская, Н.Ф. Тимченко, АЛ. Беееднов, Ю.В. Вертнев // Жури, микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1995, - № 4. - С. 5 - 9.

77. Тимченко, Н.Ф. Входные ворота, пути проникновения н распространения Y.pseudotuberculosis в теплокровном организме I Н.Ф. Тимченко. Ф.Ф.Антонеико N Жури. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1990. - № 10. - С 30 - 34.

78. Тимченко, Н.Ф. К патогенезу псевдотуберкулеза / Н.Ф. Тимченко, Г.П.Сомов// Персии позы. Новосибирск, 1983. - С. 56-62,

79. Тимченко, Н.Ф- Материалы по микробиологической характеристике возбудителя дальневосточной скарлати неподобной лихорадки {псеадотуберкулез человека): дне. .канд. мед, наук / Тимченко Нелли Федоровна Владивосток, J972. - 24 с.

80. Тимченко, Н.Ф- Моделирование инициации псевдотуберкулезной инфекции / Н.Ф- Тимченко, В.С, Венедиктов, Т.Н. Павлова it Журн. микробиологии* эпидемиологии и иммунологии 1988. -№5 - С. 16 -20.

81. Тимченко, Н.Ф- Патогенетическое значение пенхрофнльностн Yersinia pseudotuberculosis: автореф, дне. ,,,д-ра мед. наук / Тимченко Нелли Федоровна Владивосток, 1989, - 39 с.

82. Тимченко, Н.Ф- Патогенетическое значение пенхрофнльностн Yersinia pseudotuberculosis ! Н.Ф. Тимченко, ГЛ. Сомов // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 1986. - № 3. - С, 34 - 38.

83. Токсины Yersinia pseudotuberculosis / Н.Ф. Гнмченко, Е.П, Недашковская, Л.С. Дол матова. Л, М- Сомова-Исачкова. — Владивосток; Прим-полнграфкомбннат. 2004 219 с,

84. Хаитов, p.M. Иммуномодуляторы: механизм действия и клиническое применение / P.M. Хаитов, Б.В. Пннегин И Иммунология 2003. - № 24, -С-196- 203.

85. Ценева, ГЛ. Молекулярные аспекты вирулентности нерсиннй / Г.Я.Цснсва, НЮ. Солодовни кова, Е.А. Воскресенская И Клинич. микробиология н антимнкроб. химиотерапия 2002. - Т. 4, № 3. - С. 248 -266.

86. Шахман, А.В. Актноксндантное действие фосфолинндного комплекса, выделенного из морских организмов / А. В. Шахман, З.М, Даценко. В.Н.Шумейко И Укр. бнохнм. журн, 1994. -№4.-С, 87-95.

87. Шаыдченко. И.Н. Цитокинсекрегнруемая функция нейтрофильных гранулоцнтов / И.Н. Швыдченко, И В, Нестерова, Е.Ю. Синельникова U Иммунология -2005.-№1.-С.

88. Шкринскнй, B.C. Проблемы иммуностимулирующей терапии t В СЛНиринский. Е.А. Жук // Иммунология 199 J. - №3. - С, 7 - 10,

89. Шувалова, Е,П- Инфекционные болезни / Е.П. Шувалова. М.; Медицина, 1990, - 210с.

90. Эффективность пероральното применения нового иммунокоррсктора природного происхождения / Л.М- Эпштейн, Г. А. Боровская, М.М.Левачев н др. И Вопр. шплинт 1997, - № 1. - С. 10 - 13.

91. A cell-surface molecule selectively expressed on murine natural interferon-producing cells that blocks secretion of interferon-alpha / A, Blasius, W.Vermi, A- Knjg et al.//Blood. 2004. - Vol. 103, № IL-P. 4201 - 4206.

92. Aepfelbacher. M. Modulation of Rho GTPascs and the actin cytoskeleton by YopT of Yersinia t M, Aepfelbacher, R, Zuinbihl, J, Heesemarm It Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2005. - Vol. 291. - P. 167 - 175.

93. Aitkcn. R. Bacterial toxins as novel antigen delivery systems / R. Aitkcn, T.R. Hirst // Overstock Prod. Scien. 1995 . - Vol. 42, Jfc 2-3. - P. 163 - 172.

94. Alfano, J.R. The type III (Hrp) secretion pathway of plant pathogenic bacteria t J R. Alfano, A. Collmer И Bacteriology , -1997. -Vol. 179, № 18. -P. 5655-5662.

95. An aspartate residue of the Yersinia pseudotuberculosis tnvasin protein that is critical for intcgrin binding / J.V. Leong. P.E. Morrissey, A. Marra, R.R. Isberg// EMBO. J, 1995. - Vol. 14,-P. 422-431.

96. Analysis of vifC, an operon involved in the secretion of Yop proteins by Yersinia /Т, Mtchiels, J.-C. Vanooteghem, C. RouVroft et aL If Bacteriology . -1991, Vol. 173, - P 4994-5009.

97. Aneiros, A, Bioactive peptides from marine sources: pharmacological properties and isolation procedures I A. Aneiros, A. Garateix // Chromatogr, B, Analyt, Technol. Biomed. Life Sci, 2004. - Vol. 803, № 1 - P, 41 - 53.

98. Antknudative activities of several marine polysacchrides evaluated in a phosphatidylcholine liposomal suspension and organic solvents I C, Xue, G.Yu, T. Hirata el al. H Biosci. Biotechnol. Biochem. - 1998, - Vol. 62, Jfe 2. - P. 206 - 209.

99. Bactcrial LPS arid CpG DNA differentially induce gene expression profiles in mouse macrophages / J J. Gao, V. Diesl, T. Witimann et al- // J, Endotoxin Res, 2003. - Vol. 9, № 4. - P. 237 - 243,

100. Baldwin, M.R. The type III cytotoxins of Yersinia and Pseudomonas aeruginosa that modulate the actin cytoskeleton / M.R. Baldwin, J.T, Barbieri U Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2005, - Vol, 291, - P, 147 - 166.

101. Bazamyi. V.V. The mechanism of the immunotropic effect of aspartic acid / V.V. Bazamv!, A,P. lastrcbov ft Biull. Eksp, Biol. Med. 1990. - Vol. II0. -P. 468 - 469.

102. Beachamp, CO. Superoxide dismutase: improved assays and an assay applicable to acrilamidc gels / C.O. Beachamp, I. Fridovich I/ Anal. Biochem.- 1971. Vol. 44. - P. 276 - 287.

103. Black, D.S. The RhoGAP activity of the Yersinia pseudotuberculosis cytotoxin YopE is required for antiphagocytic function and virulcnce / D.S. Black, J. В BlisJta// Mol. Microbiol 2000. - Vol. 37, №3. - P. 515 - 527,

104. Hliska, J-B. The Yersinia pseudotuberculosis adhesin YadA mediates intimate bacterial attachment to and entry into Hcp-2 cells I J.B. Bliska, M C.Copass. S. Fatkow // Infect. Immun. 1993, - Vol. 61. - P- 3914-3921.

105. Broide. D.H. Immunostimulatory sequences of DNA and conjugates in the treatment of allergic rhinitis / D.H. Broide // Curr. Allergy Asthma Rep. -2005. Vol. 5, - P. 182-185.

106. Buttncr, D. Getting across bacterial type in efTector proteins on their way to the plant cell t D. Buttncr, U. Bonas U EMBO. - 2002. - Vol . 21, Л 20. - P 5313-5322.

107. Buttner, D, Port of entry the type III secretion translocation of pathogenic bacteria / D. Butuier, U. Bonas // Trends Microbiol. - 2002. - Vot. 10, - P, 186- 192114. Camiel, E, The Yersinia high-pathogcnicity island / E. Carniel // Intern.

108. Microbiol. 1999. - Vol, 2. - P. 161 - 167.

109. Clark, ЕЛ. Intcgrirts and signal transduction pathways: the road taken / K A.Claik, J.S- Brugge It Scicnce. 1995. - Vol. 268. P. 233 - 239.

110. Clark, M,A- M-cell surface beta 1 inlegrin expression and invasin-mcdialed targeting of Yersinia pseudotuberculosis to mouse Peyer's path cells / M,A, Clark, B.H. Hirst, М.Л, Jepson // Infcct- Immun. 1998 - Vol . 66. - P. 1237 -1243.

111. Clinical role for a superantigcn in Yersinia pseudotuberculosis infection / j.Abe, M. Qnimaru. S. Matsumotp et al. H Clin. Jnvestig. 1997. - Vol. 99. -P. 1823 - 1830.

112. Clonic epithelial physiology is altered in response to the bacterial superantigcn Yersinia pseudotuberculosis mitogen t G.A.E. Donnelly, j. Lu, T.Takeda et al. H Infcct, Dis. 1999. - Vol. 180. - P. 1590 - 1596.

113. Cornells, G.R. How Yop, find their way out of Yersinia / G.R. Cornelis U Moll. Microbiol. 2003. - Vol. 50, № 4. - P. 1091 - 1094.

114. Cornelis, GR. Yersinia type 111 secretion: send in the efiectors / G.R-Comelis И Cell Biol, 2002. - Vol . 158, № 3. - P. 401 408.

115. Cornelis. G.R. Yersinia type III secretion / G.R.Comelis t! Cell Biol. 2003. -Vol. 162, №2.-P. 410-416.

116. CoUeret, S, The evolutionary of effectors downstream of Cdc42 and Rac / S.Cotteret, J. ChemofT // Genome Biol. 2002. - Vol 3. № I. - P. 0002.1 -00021.

117. CpG oligonucleotides act as adjuvants that switch on T helper I (thl) immunity I R.S. Chu, O.S. Tagnori, A.M. Krieg et a!7/ J. Exp. Med, 1997. -Vol. 186. Hf 10.-P. 1623-1631.

118. CpG pcnla- and Hcxadcoxyribonucleotides as potent immunomodulatory agents i L, Bhagal, F.G. Zhu, D. Yu et al. // Btochem. Biophys. Res, Common. 2003. - Vol. 300, № 4. - P. 853 - 861.

119. CpG-containing QDN has a limited role in the protection against Toxoplasma gondii / R- Saavcdra, R. Leyva, E.P, Tenorio et al. // Parasite Immunol. 2004. - Vol. 26, № 2. - P. 67 - 73.

120. Cytokine induction by a bacterial DNA-specific modified base I H.Tsuchiya, T. Matsuda. I I. Harashima, H. Kamiya U Biochem. Biophys. Res. Commun. -2005. Vol. 326, № 4. - P. 777 - 781,

121. Cytoprotective effects of carveditol against oxygen free radical generation in rat liver / G.E, Ronsein, D,8. Guidi, J.C, Benassi et al. U Redox Rep. -2005. -Vol. 10, ЛЗ-- P. 131-137.

122. Cytotoxicity and calcium-dependent antigen of Yersinia / K-T. Okamoto, T. Kobayashi, S. Shinoda et al. // Microbiol. Immunol. 1984. - Vol, 28. № I. -P. 33-49.

123. Davidson, J.N. The biochemistry of the nucleic acids / J.N. Davidson. NY: Academic Press. 1972. - P. 62 - 70.

124. Dersck P. A region of the Yersinia pseudotuberculosis invasin protein enhances inicgnn-mediated uptake into mammalian cells and promotes self" association / P. Persch. R-R Isberg И EMBO. J. 1999. - Vol. 18, № 5. - P 1199-1213.

125. Dietary1 nucleic acid and intestinal microbiota synergistically promote a shift in the Thl/Th2 balance toward Thl-skcwed immunity / N, Sudo, Y. Aiba, N.Oyama et al. H Ink Arch. Allergy Immunol. 2004. - Vol. 135, № 2. - P. 132- 135.

126. Ding, Q. Pyrroloquinoline and Pyridoaeridine Alkaloids from marine sources / Q. Ding, K. Chichak, J.W. Lown // Cuir. Med. Chem, 1999. - №6, -P.t- 27.

127. Disruption of signaling by Yersinia effector YopJ, a ubtquitin-like protein protease / K. Orlh, Z. Xu, MB. Mudgett et al. // Science, 2000. - Vol. 290. -P. 1594-1597.

128. Disruption of target cell adhesion structures by die Yersinia effector YopH requires interaction with the substrate domain of pl30Cas / L. Mogemark, K.McGee, M. Yuan et aJ. // Eur. J. Cell Biol. 2005. - Vol. 84, № 4. - P.477-489.

129. Dotan, I. Probiotics in inflammatory bowel dtsise: possible mechanisms of action /1. Dotan, D. Rachmilewitz // Curr. Opin. Gastroenterol, 2005. - Vol, 21,№4.-P. 426-430,

130. Dukuzumuremyi. J.M, The Yersinia protein kinase A is a host factor inducible RhoA/Rac-binding virulence factor / J.M. Dukuzumuremyi,

131. ELRosqvist, В Haltberg ti J. Biol. Chetn 2000. - Vol, 275. № 45. P 35281 -35290.

132. Effect of polydcoxyribonuclcotidc on human fibroblasts in primary culture 1 P. Sini, A. Denti, G. Cattarini et si, // Cell Biochem. Funct, 1999. - Vol. 17. -P. 107-114.

133. Efficient uptake of Yersinia pseudotuberculosis via integrin receptors involves a Raci-Arp 2/3 pathway that by passes N-WASP function / M.A.AIrutz, A. Srivastava. K. W. Wong ct al, // Mol. Microbiol. 2001. - Vol. 42. №3,-P. 689-703.

134. Eitel, J. The YadA protein of Yersinia pseudotuberculosis mediates hight-efTiciency uptake into human cells under environmental conditions in which invasin is repressed / J. Eitel, P. Dersch // Infect. Immun. 2002. - Vol. 70, № 9-P, 4880-4891.

135. Evidence for superamigen production by Yersinia pseudotuberculosis / J. Abe. T. Takcda, Y. Watanabe et al, U Immunology 1993. - Vol, 151, - P 4183-4188,

136. Fallman, M. Resistance to phagocytosis by Yersinia ! M. Fallman, F. Deleuil, K. McGee // Intern. J. Med. Microbiol. 2002- - Vol. 29. - p. 501 -509,

137. Fallman, M. Yersinia pseudotuberculosis inhibits Fc receptor-mediated phagocytosis in J774 cells / M. Fallman. K- Andersson, S. Hakansson // Infect lmmun. 1995. - Vol. 63, №8. - P. 3117 - 3124.

138. Faulkner, DJ. marine natural products J D.J, Faulkner H Nat. Prod- Rep. -2000.-Vot. 17.-P. 7-55.

139. Fhlenbruck, Y. Aminosaurcn ats Therapie / Y. Fhlenbruck, A. van Mil ft Scicncc. 1993. - Vol. 214, № 12. - P. 1216 - 1229.

140. Ftnlay, B. Exploitation of Mammalian Host Cell Functions by bactcrial Pathogens / 8. Finlay, P- Cossait ft Scicncc, 1997. - Vol. 276. - P. 718 -725,

141. Rile, the protein responsible for flagellar hook lenght control in Salmonella, is exported during hook assembly I T. Minamino, B. Gonzalez-Pedrajio, K Yamaguchi el al. ft Mot. Microbiol. 1999. - Vol, 34. - P. 295 - 304.

142. Forsberg, A. In vivo expression of virulence genes of Yersinia pseudotuberculosis / A. Forsberg, R. Rosqvist И Infect. Agents Dis. 1993. -Vol. 59.-P.275 - 278.

143. Frondoside C, a new nonholostanc triterpene glycoside from the sea cucumber Cucumaria frtmdosa: structure and cytotoxicity of lis desut fated derivative / S-A. Avilov, OA- Drxwdova, VJ. Kalinin et al. it Can. j. Chem. -1998.-№76.-P. 137-141.

144. Gripenberg-Lcrche, С. Rote of YadA-mediated collagen binding En arthritogcnicity of Yersinia enterocolitica serotype 0:8: experimental studies with rats / С. Gripenberg-Lerche, M. Skumik, P. Toivanen // Infect, Immun. -1995. Vol. 63. P. 3222 - 3226.

145. Guan, K, Protein tyrosine phosphatase activity of an essential virulence determinant in Yersinia / K. Guan, J.E. Dixon !i Science 1990. - Vol. 249. -P.553-556.

146. Haefner, B. Drugs from the deep: marine natural products as drug candidates /B. Haefner//Drug. Dtscov,Today. -2003. -№S,-P. 536- 544.

147. He. S.Y. Type III protein secretion mechanism in mammalian and plant pathogens / S.Y. He,. К Nomura, T.S. Whittam H Biochimica et Biophysica Acta. 2004. - Ш 1694. - P. 181 -206.

148. Hcisc, T. Identification of a domain in Yersinia virulence factor YadA that is crucial for cxtracellulair matrix-specific cdl adhesion and uptake ! T. Heise, P.Dersch // Proc. Natl. Acad Sci. USA. 2006 - Vol. 103, № 9 - P. 3375 -3380.

149. Heparin interferes with translocation of Yop proteins into HeLa cells and bind to LcrG, a regulatory component of the Yersinia Yop apparatus / A.P. Boyd, M P Sory, M. Iriarte et al. // Mol, Microbiol. 1999. - Vol. 27 - P 425-436.

150. Ни. X. Computational analysis of tyrosine phosphatase inhibitor selectivity for the virulence factors YopH and SptP ! X. Ни, M. Vujanac, C.E. Stebbins t! J, Mol Graph, Model. 2004 - Vol. 23,№ 2. - P. 175 - 187.

151. Hueck, C- J. Type III protein secretion systems in bacterial pathogens of animals and plants / C, J. Hucck // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998, - Vol. 62, №2.-P. 379-433.

152. Immunothcrapeutic utility of stimulatory and suppressive oligodeoxynuclcolides t K,J, Ishii, I. Gursel. M. Gurscl. D,M. Klinman tt Science. 2005. - Vol. 132. - P. 3420 - 3432,

153. In vitro GAP activity towards RhoA, Racl and Cdc42 is not a prerequisite for YopE induced HeLa cell cytotoxicity / M. Aili, M. Telepnev. B. Hallberg ct at. t! Microb. Pathog. 2003. - Vol. - 34, № 6. - P. 297 - 308.

154. Inhibition of МАРК and NF-кпрра В pathways is necessary for rapid apoptosis in macrophages infected with Yersinia / Y. Zhang, A.T. "ling, K.B.Marcu, J.8, Bliska i! J. Immunol. 2005. - Vol, 174, Jfe 12. - P. 7939 -7949.

155. Integrin function: molecular hierarchies of cytoskelctai and signaling molecules t S. Miyamoto, H. Teramoto. O A. Coso. et al. U Cell, Biol, 1995. -Vol. 131.-P. 791 -805.

156. Iriarte, M, YopT, a new Yersinia Yop effector protein, affects the cytoskeleton of host cells / M. Iriarte, G.R, Cornells tt Mol, Microbiol. 2000, - Vol. 29.- P.9I5-929.

157. Isberg, R.R. Pathways for the penetration of enteroinvasivc Yersinia into mammalian cells / R.R. Isberg // MoL Biol. Med. 1990. - Vol. 7. - P. 73 -82.

158. Isberg, R.R. Subversion of intcgrins by cntcrcpathogcnic Yersinia / R.R. Isberg, P. Barnes // Cell, 2001. - Vol . I14. - P. 21 - 28.

159. Krieg, A.M. From bugs to drugs: therapeutic immunomodulation with oligonucleotides containing CpG sequences from bacterial DNA / A.M. Krieg // Antisense Nucl. Acid Drug Dev. 2001. - Vol. И. № 3, - P. 181 - I SB.

160. IxrG is required for efficient translocation of Yersinia Yop effector proteins into eukariotic cells / M.R. Sarker, M P. Sory, A,P. Boyd et al. // Infect. Immun, 1998 - Vol. 66, - P. 2976 - 2979,

161. Lei, J. Marine Natural Product Database / J, Lei, J.A. Zhou // J. Chem. Inf. Comput. Set. 2002. - Vol. 42. № 3. - P. 742 - 748.

162. Leong, J.V, A 76 amino acid disulfide loop in the Yersinia pseudotuberculosis invasin protein is required for integrin receptor recognition I J.V. Leong, P.E Momssey, R.R. Isberg /I Biol. Chem, 1993 - Vol, 268. -P. 20524-20532.

163. Logsdon, L.K. Requirement of the Yersinia pseudotuberculosis effectors YopH and YopE in colonization and persistence in intestinal and lymph tissues / L.K. Logsdon, J. Mecsas // Infect. Immun. 2003. - Vol. 9. - P. 4595 -4607,

164. Mayer, A.M. Marine pharmacology in 2001-2: antitumour and cytotoxic compounds / A,M, Mayer, K.R. Gustafson // Eur. J. Cancer. 2004. - Vol. 40, № 18. - P. 2676-2704.

165. Melnikov, V.P. Test of nitro blue tctrazolium reduction in mononuclear phagocytes t V.P. Melnikov // Lab. bus. 1991. № 8. - P. 51 - 53.

166. Metalloproteinase and cytokine production by THP-I macrophages following exposure to chitosan-DNA nanoparticles / F. Chellat, A. Grandjean-Laquerriene, R. Lc Naour et a\J! Biomaterials. 2005. - Vol. 26, № 9. - p. 961 -970.

167. Miyamoto. S. Synergistic rales for receptor occupancy and aggregation in integrin transmembrane function / S. Miyamoto, S-K. Akiyama, K M Yamada // Science. 1995. - Vol, 267, - P 883 - 885.

168. Miyoshi-Akiyama, T, Purification and partial characterization of a product from Yersinia pseudotuberculosis with the ability to activate human T cell / T.Miyoshi-Akiyama, K. Imanischi. T, Uchiyama U Infect Immun, 1993. -Vol. 61, № 9. - P. 2553-2559.

169. Mota. L,J. The bacterial injection kit; type III secretion systems / L.J. Mota, G.R. Cornells// Ann. Med. 2005. - Vol, 37, № 4 P. 234 - 249.

170. Mucosal immunogcnicity and adjuvant activity of the recombinant A subunit of the Escherichia coli heat-labile enterotoxin / L, DeHaan. H. Holtrop, W.R. Verweij et al. H Immunol. 1999. - Vol. 97, № 4. - P, 706 - 713,

171. Newman. DJ. Marine natural products and related compounds in clinical and advanced preclinical trials / DJ. Newman, G-M. Cragg И J. Nat. Prod, -2004. Vol. 67, № 8. - P. 1216 - 1238.

172. Ncyt, C. Insertion of a Yop translocation pore into the macrophage plasma membrane by Yersinia pseudotuberculosis; requirement for translocators YopB and YopD / C. Neyt, G.R. Cornclis // Mol. Microbiol. 1999. Vol. 33, -P. 971 -981.

173. Neyt, C. Role of SycD. the shapcrone of the Yersinia Yop translocators YopB and YopD / С Ncyt, G.R. Cornells H Mol. Microbiol, 1999. - Vol. 31. -P. 143- 156.

174. Olby, R DNA before Watson-Crick t R. Olby // Nature. 1974. ■ № 248. -P. 782 - 785.

175. Outer membrane protein YatLA of enteropathogenic Yersinia mediates specific binding to cellular but not plasma fibroneclin / H. Sehulz-Koops, H Bnridiardt, J Heesemann el al, // Infect, Immun. 1993. - Vol. 61. - P. 2513-2519.

176. Oxidative stress-mediated hepatotoxieity of iron and copper / LA Videla, V. Fernandez, G. Tapia, P. Varela // Biometals. 2003, - Vol. 16, № I. - P. 103-111.

177. Paerregaard, A. Adhesion of Yersinia to rabbit intestinal constituents: role of outer membrane protein YadA and modulation by intestinal mucous t A, Paerregaard, F. Espcrsen, M. Skumik // Contrib. Microbiol. Immunol, -1991. -Vol. 12.-P. 171 175.

178. Paerregaard, A. Role of the Yersinia outer membrane protein YadA in adhesion to rabbit intestinal tissue and rabbit intestinal brush border membrane vesicles / A. Paerregaard. F. Espersen, M. Skumik H APMIS. 1991. - Vol. 99.-P, 226-232,

179. Paiumbo, R.N. Bacterial invasin: structure, function, and implication for targeted oral gene delivery t R.N. Paiumbo, C. Wang U Curr, Drug. Deliv. -2006. -Vol. 3.-P. 47-53.

180. Passive immunity to infection with Yersinia spp, Mediated by anti-recombinant V antigen is dependent on polymorphism of V antigen / A. Roggcnkamp, A.M. Gciger, L Leitrttz et al. H Infection Immun. 1997, - Vol. 65.-P-446 - 451.

181. Pathogenesis of defined invasion mutants of Yersinia enterocolitica in a BALB/c mouse model of infection I J.C. Pepc, M.R. Waehtel, E, Wagar, V.L.Miller// Infect. Immun. 1995. - Vol, 63. - P. 4837 - 4848.

182. Phagocytosis mediated by Yersinia invasin induces collagenase-1 expression in rabbit synovia! fibroblasts through a proinflammatory cascade / E. Werner.

183. F. Khcradmand, R.R. tsberg, Z Werb // J, Cell. Sci, 2001. - Vol, 114, № 18.- P. 3333 3343.

184. Plazmid-encoded outer membrane protein YadA mediates specific binding of cntcropathogenie Yersinia to various types of collagen I H. Schulz-Koops, H. Burkhardt, J. Heescmann ct al- H Infect Immun. 1992- - Vol. 60. - P. 2153-2159,

185. Popoff, M R, Bacterial Exotoxins / M R. Popoff // Conirib. Microbiol. -2005.-Vol. 12. P. 28 - 54,

186. Preexposure of murine macrophages to CpG-containing oligonucleotides in nuclear factor kappa В p50 homodimcr-associated hyporesponsivcncss / L. Jin, D P Raymond, T.D. Crabtrec ct at. И Surgery 2002, - Vol, 132, Jfe 2. - P. 245 - 251,

187. Proksch, P. Drugs from the sea opportunities and obstacles / P. Proksch, R, Edrada-Ebcl, R, Ebel // Marine dnigs. - 2003. - AH. - P. 5-17.

188. Protection of chickens against Escherichia coli infections by DNA containing CpG motifs / S. Gomis, L. Babiuk, D.L. Godson el al, // Infect. Immun. 2003. - Vol. 71, № 2. - P. 857 - 863.

189. Protection of neonatal chicks against a lethal challenge of Escherichia coli using DNA containing cytosine-phosphodiestcr-guanine motifs / S. Gomis, L. Babiuk, B. Allan ct a., // Avian. Dis. 2004. - Vol. 48. 813 - 822.

190. Purification and characterization of a novel superantigen produced by a clinical isolate of Yersinia pseudotuberculosis / K. Yoshino, J. Abe, H. Mutata et al. // FEBS LetL 1994. - Vol. 356, №t--P. 141 - 144,

191. Purification, characterization and cloning of a novel variant of the superantigen Yersinia pscudotuberculosis-derived mitogen t T, Ramamurthy, K.I. Yoshino, J. Abe et al. U FEBS LetL 1997. - Vol. 413. - P- 174- 176.

192. Quintana, FJ. DNA vaccination with heat shock protein 60 inhibits cyclophosphamide-accelcraled diabetes / FJ. Quintana, P. Carmi, LR. Cohen // J Immunol. 2002. - Vol. 169, № 10. - P. 6030 - 6035,

193. Rankin S. The integrin-binding domain of invasin is sufficient to allow bacterial entry into mammalian cells I S Rankin, R.R. Isberg. J.M. Leong // Infect. Immun. 1992. - Vol. 60. - P. 3909 - 3912.

194. Regulation of CpG-induccd immune activation by suppressive oiigodcaxynuclcotidcs I D,M. Klinman, R. Zeuner, H. Yamada et al. H EMBO. 2005, - Vol. 24. - P. 1230 - 1242.

195. Ridley, A J. The small GTP-binding rho regulates the assembly of focal adhesions and actin stress fibers in response to growth factors / A,J, Ridley, A.Hall // Cell. 1992. - Vol. 70. - P. 401 - 410.

196. Role of CpG ODN in concanavalin A-induced hepatitis in mice / 1С Abe, H. Ohira, II. Kobayashi et al.// Fukush. J. Med. ScL 2005. - Vol. 51. - P. 41-49.

197. Role of the betta-l-intcgrin cytoplasmic tail in mediating invasin-promoted internalization of Yersinia / A- Gustavsson, A. Armulik, C. Brakcbusch et al. U Cell Sci. 2002. - Vol. 115. - P. 2669 - 2678.

198. Role of the Yop and adhesins in resistance of Yersinia pseudotuberculosis to phagocytosis / N. Grosdent, I. Maridonneau-Parini, M.P. Sory, G.R. Comelis tf Infect, Immun 2002. - Vol. 70. - P. 4165- 4176.

199. Rosqvist, R. Intracellular targeting of the Yersinia YopE cytotoxin in mammalian cells induces actin microfilament disruption / R. Rosqvist, A.Forsbcrg, H. Wolf-Watz // Infect, Immun. 199L - Vol. 59. № 12. - P. 4562-4569.

200. Same characteristics of a heat-labile toxin from Pasture!la pseudotuberculosis / J.A, Brawn, WX, West, W V, Banks, I D. Marshall H Inf. Dis. 1969. - Vol. 119, № 3. - P. 229 - 236.

201. Schar, M. Comparative studies on toxin of Pastcurella pestis and Pasteurclla pseudotuberculosis / M. Schar. E. Thai H Proc. Soc, Exp. Biol. Med. 1955. -Vol. 88, №1,-P. 39-42.

202. Sequence-analysis of the gene for a novel superantigen produced by Yersinia pseudotuberculosis and expression of the recombinant protein / Y, Ito, J Abe, K. Yoshino et al. t! Immunology. 1995. - Vol. 154. tfe 11.-P. 58965906.

203. Sesquiterpene lactones inhibit Yersinia invasin protein-induced IL-8 and MCP-1 production in epithelial cells i G.A. Grass!, S. Fessele, I. Merfort et al, // Int. J. Med. Microbiol. 2005. - Vol. 295, № 8. P. 531 - 538.

204. Signal transduction by intcgrins: increased protein tyrosine phosphorylation caused by clustering of beta I intcgrins / L.J. Kombcrg, H.S, Harp, C.E, Turner et al, U Proc, Nad. Acad, Sci, USA, 1991. - Vol . 88. - P. 8392 - 8396.

205. Sorg, J.A. Substrate recognition of type 111 secretion machines-testing the RNA signal hypothesis / j.A. Sorg, N.C. Miller, O. Schneewind // Cell. Microbiol, 2005. - Vol. 7, № 9. - P. 1217 - 1225.

206. Strong immunostimulation in murine immune cells by Lactobacillus rhamnosus GG DNA containing novel oligodeoxynucleotide pattern / I.D, Licv, H. Kitazawa, T. Schimosato el al. U Cell Microbiol. 2005, - Vol, 7, № 3,-P. 403-414,

207. Structure and sequence ananlysis of Yersinia YadA and Moraxella UspAs reveal a novel class of adhesins t E, Hoiczyk, A. Roggcnkamp, M Reichenbecheret al. // EMBO. 2000. - Vol. 19. P. 5989 - 5999.

208. Superantigen YPMa exacerbates the virulence of Yersinia pseudotuberculosis In mice / C. Carnoy, C. Mullet. H. Mullcr-Alouf et al Л Infect. Immun. 2000. - Vol. 68, № 5. - P 2553-2559.

209. Synergistic action of immunostimutalory DNA and fcganima receptor IIB-crosslinking on B-cell pbenotype and function / J. L. Bjersing, A, Tarkowski, S, Lundin, L.V. Collins // Immunobiology. 2005 Vol. 210. № I. - P. 23 -32.

210. Synthesis of tri peptides as potent Yersinia protein tyrosine phosphatase inhibitors / K. Lee, S.K. Boovanahalli, K.Y. Nam et al. H Bioorg. Med. Chcm. Lett, 2005. - Vol. 15, Hi 18. - P. 4037 - 4042,

211. Tahtr, EI. YadA. the multifacetcd Yersinia adhesin / EJ. Tahir. M. Skumik It Int. J. Med. Microbiol. 2001. - Vol 291. - P. 209 - 218.

212. Targeting RacI by the Yersinia effectors protein YopE inhibits caspase-l-mediated maturation and release of intcrleukin-t-bctta / P. Schotte, G.Denecker, A.Van den Broeke et al. // j. Biol. Chem. 2004. Vol. 279, № 24.-P. 25134-25142.

213. The high-pathogenicity island of Yersinia pseudotuberculosis can be inserted into any of the three chromosomal asn tRNA genes / С. Buchriescr, R. Brosh, S. Bach ct al. // Mol. Microbiol, 1998. - Vol. 30, - P. 965 - 978.

214. The psa locus is responsible for thermoinducible binding of Yersinia pseudotuberculosis to cultured cells I Y. Yang. J J. Merriam. J.P, Mueller. R.RJsbcrg 1! Infect, Immun. 1996. - Vol, 64. - P. 2483 - 2489.

215. The surface-located YopN protein is involved in calcium signal transduction in Yersinia pseudotuberculosis / A. Forsbcrg, A. Viitanen, M. Skumik. RWolf-Watz // Mol. Microbiol. 1991,- Vol. 5. - P. 977 - 986.

216. The V-antigen of Yersinia forms a distinct strurc at the lip of injectisome needles / C-A. Mullcr, P. Bittt, A- Schirley et al. // Science. 2005. - Vol. -310.-P. 674 - 676.

217. The V-antigen of Yersinia is surface exposed before target cell contact and involved in virulence protein translocation / J. Pettersson, A. Holmstrom, J.Hill et al. // Mol. Microbiol. 1999. - Vol. 173 . - P. 1607 - 1616.

218. The virulence plasmid of Yersinia, an antihost genome / G.R. Cornelis, A. Boland, A. Boyd et al. // Microbiol. Mol. Biol. Rev. 1998. - Vol. 62. - P. 1315- 1352.

219. The Yersinia pestis type III secretion needle plays a role in the regulation of Yop secretion i J. Torroellaa, M.W. Jackson. J.W. Pennock, G.V. piano // Mol. Microbiol. 2005. - Vol, 57, № б, - Р. 1719 -1733.

220. The Yersinia Yop virulon: LcrV is required for extrusion of the translocators YopB and YopD / M.R. Sarker, C. Neyt, I, Stainier, G.R. Cornells // Bacterid. -1998.-Vol. 180.-P. 1207-1214.

221. Thomas, R. Attachment of Yersinia pestis to human respiratory cell lines is inhibited by certain oligosaccharides / R. Thomas, T. Brooks U J. Med, Microbiol. 2006, - Vol. 55. - P, 309-315.

222. TLR9 signals after translocating from the ER to CpG DNA in the lysosome / E. LaB, A, Schoenemeyer, A. Visintin et at. // Cell, Sci. 2005. - Vol. 124. -P, 1342- 1350.

223. Iran Van Nhieu, G. Bacterial internalization mediated by beta I chain integrins is determined by ligand affinity and receptor density I G. Tran Van Nhieu, R.R. Isberg//EMBG J. 1993. - Vol. 12, № 5. - P. 1887 - 1895.

224. Two substrate-targeting sites in the Yersinia protein tyrosine phosphatase co-operate to promote bacterial virulcnce / M.i. Ivanov, j.a. Stuckey, h.l. Schubert et al. // Mol. Microbiol, 2005. - Vol. 55, Jfc 5. - P. 1 346 - 1356.

225. ТуеЛ, a protein involved in control of Yop release and in translocation of Yersinia Yop effectors / M. Iriarte, M.P. Soiy, A. Boland et at H EMBO J. -1998. Vol. 17. - P. 1907 - 1918.

226. Use of CpG oligodeoxynuclcotides as immune adjuvants / D.M, Klinman, l>. Cunie, I. Gursel, D. Verthclyi // Immunol, Rev. 2004. - Vol. 199. - P 201-216,

227. Virulence plasmid^encoded YopK is essential for Yersinia pseudotuberculosis to cause systemic infection in mice / A. Holmstrom, r. Rosqvi&t, H. Wolf-Watz, A. ForsbeTg U Infect. Immun. 1995. - Vol. 63, - P, 2269 - 2276.

228. Visser, L.G. Role of Yop, in inhibition of phagocytosis and killing of opsonized Yersinia pseudotuberculosis by human granulocytes i L.G. Visser, A. Annema, R. van Furth ft Infect. Immun, 1995. . - Vol. 63. - P, 2570 -2575.

229. Yad A mediates specific binding of enteropathogenic Yersinia to human intestinal submucosa / M. Skumik, Y, Tahir, M. Saannen et а1У/ Infect. Immun. 1994. - Vol. 62. - P. 1252 - 1261.

230. Yang, Y. Cellular internalization in the abscnce of invasin expression is promoted by the Yersinia pseudotuberculosis yadA product / Y. Yang, R.R Isberg// Infect, Immun. 1993. - Vol. 61. P. 3907 - 3913.

231. Yang. Y, Transcriptional regulation of the Yersinia pseudotuberculosis pH6 antigen adhesin by two envelope-assotiatcd components / Y. Yang, R.R. Isberg // Mol. Microbiol. 1997. Vol. 24. - P, 499 - 510.

232. Yersinia invasin, a bacterial beta-l-inlcgrin ligand, is potent inducer of lymphocyte motility and migration tio collagen type IV and fibmnectin t l.Atencibia, N.C. Suatez, H- Wolf-Watz, K.G. Sundqvist // Immunology. -1997 Vol, 159.-P. 1853- 1859.

233. Yersinia pseudotuberculosis produces a cytotoxic necrotizing factor / H.A. Loekman, R,A, Gillespie, B,D, Baker, E. Schakhnovich // Infect. Immun. -2002. Vol. 70, № 5. - P. 2708 - 2714.

234. Yersinia pscudotuberculosis-induced calcium signaling in neutrophils is blocked by the virulence effector YoplI / K. Andersson. K.E. Magnusson, M Majeed et al. // Infect, Immun. 1999. - № 3. - P. 2567 - 2574,

235. Yersinia YopJ acetylates and inhibits kinase activation by blocking phosphorylation / S. Mukheijee, G Keitany, Y, Li et al. // Science. 2006. -Vol. 312.-P. 1211-1214.

236. YopB and YopD constitute a novel class of Yersinia Yop proteins t S. Ilakansson. T. Bergman, J.-C. Vanooteghem, G.R. Cornells, H. Wolf-Watz H Infect. Immun. 1993. - Vol, 61, - P. 71 - 80.

237. YopJ of Yersinia pseudotuberculosis is required for the inhibition of macrophages TNF-a production and downreguiation of the MAP kinase p38 and JNK / L.F. Palmer, S, Hobbie, J-E. Galan, J.B. Bliska ti Mol. Microbiol. 2000 -Vol. 27.-P. 953 955.

238. Yo:i of Yersinia spp. Palhogftlic far humans I K.C\ Stndcy, t. SEtry.ypek,