Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экспериментальное обоснование использования цитоэнзимохимических и фагоцитарных показателей нейтрофилов крови в лабораторной диагностике бруцеллеза

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Логвиненко, Ольга Васильевна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Патогенетические особенности бруцеллезной инфекции у человека и лабораторных животных (обзор литературы).

1.1. Патогенетические особенности бруцеллезной инфекции у человека.

1.2. Роль нейтрофилов периферической крови и их ферментов в патогенезе бруцеллеза.

1.3. Патогенетические особенности бруцеллезной инфекции у биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза.'.".:.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Материалы.

2.1.1. Биологические модели с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза.

2.1.2. Люди, больные острой и хронической формами бруцеллеза, доноры.

2.1.3. Штаммы бруцелл.

2.1.4. Питательные среды.

2.1.5. Диагностические препараты.

2.1.6. Приборы.

2.1.7. Реактивы.

2.2. Методы.

2.2.1. Методы моделирования вакцинного, экспериментального бруцеллезного инфекционного и реинфекционного процессов на биологических моделях.

2.2.2. Бактериологический метод исследования.

2.2.3. Кожно-аллергический метод исследования.

2.2.4. Серологические методы исследования.

2.2.5. Цитоэнзимохимические методы исследования.

2.2.6. Методы статистической обработки материала.

Глава 3. Исследование биологических моделей, чувствительных к возбудителю бруцеллеза, на разных стадиях развития вакцинного, инфекционного и реинфекционного процессов с использованием цитоэнзимохимиче-ских и традиционных методов.

3.1. Бактериологическое исследование биологических моделей чувствительных к возбудителю бруцеллеза.

3.2. Серологические и аллергическое исследования биологических моделей чувствительных к возбудителю бруцеллеза.

3.3. Динамика активности цитоэнзимохимических показателей ПМЯЛ у биологических моделей, чувствительных к возбудителю бруцеллеза, в зависимости от их состояния и стадии исследуемого процесса.

Глава 4. Исследование биологических моделей, резистентных к возбудителю бруцеллеза, на разных стадиях развития вакцинного, инфекционного и реинфекционного процессов с использованием цитоэнзимохимических и традиционных методов.

4.1. Бактериологическое исследование биологических моделей резистентных к возбудителю бруцеллеза.

4.2. Серологические исследования биологических моделей резистентных к возбудителю бруцеллеза.

4.3. Динамика активности цитоэнзимохимических показателей ПМЯЛ у биологических моделей, резистентных к возбудителю бруцеллеза, в зависимости от их состояния и стадий исследуемого процесса.

Глава 5. Изучение энзимо-фагоцитарных показателей нейтрофилов крови биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза.

5.1. Разработка способа сочетанной оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза.

5.2. Результаты энзимо-фагоцитарных исследований ПМЯЛ крови морских свинок на разных стадиях развития вакцинного, инфекционного и реинфекционного бруцеллезного процессов.

5.3. Результаты энзимо-фагоцитарных исследований ПМЯЛ крови белых крыс линии Фишер-344 на разных стадиях развития вакцинного, инфекционного и реинфекционного бруцеллезного процессов.

Глава 6. Изучение показателей ПМЯЛ крови при обследовании больных бруцеллезом в условиях инфекционного стационара.

6.1. Результаты обследования больных с диагнозом острая форма бруцеллеза, с использованием бактериологического, аллергического, серологических и цитохимических методов.

6.2. Результаты обследования больных с диагнозом хроническая форма бруцеллеза с использованием бактериологического, аллергического, серологических и цитохимических методов.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экспериментальное обоснование использования цитоэнзимохимических и фагоцитарных показателей нейтрофилов крови в лабораторной диагностике бруцеллеза"

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Успешное решение задачи борьбы с бруцеллезом возможно лишь при условии мобилизации научных сил, практического здравоохранения и ветеринарной службы, поскольку бруцеллез является зоонозной инфекцией, к которой восприимчивы все виды домашних и диких животных. В последние годы отмечается устойчивая тенденция к росту заболеваемости людей бруцеллезом, особенно в районах развитого животноводства (148; 100; 10; 21).

Известно, что клиническая картина бруцеллеза у людей отличается большим полиморфизмом. Среди значительного разнообразия симптомов наиболее часто встречаются радикулиты, артриты, орхиты, поражения опорно-двигательного аппарата, спондилезы. Анализируя доступную нам литературу по проблеме бруцеллеза, мы, прежде всего, обратили вйимание на факт изменения клинического течения заболевания. Оно протекает у людей доброкачественно, но часто формируется хроническая форма, которая приводит к длительной потере трудоспособности и тяжелым социально-экономическим последствиям (190; 127; 176).

В связи с этим, для выбора тактики лечения и реабилитации больных, вопрос прогнозирования течения инфекционного процесса, дифференциации острой и хронической форм приобретает особую важность. В данном случае большое значение имеет своевременность постановки диагноза. Существующие методы диагностики бруцеллеза, основанные на выделении гемо-культуры, данных серологических анализов и аллергической пробы, подтверждают диагноз. Однако они не содержат информацию, позволяющую дать оценку активности течения инфекционного процесса.

Исследования ряда авторов свидетельствуют о том, что при антигенном воздействии (инфицировании, вакцинации), имеет место активация защитных систем организма, о которой можно судить по функциональному состоянию лейкоцитов периферической крови и, прежде всего, полиморф7 ноядерных нейтрофилов (ПМЯЛ). Последние являются активным компонентом в системе гуморально-клеточной кооперации элементов крови в борьбе с возбудителями инфекционных заболеваний (7; 19; 108; 69). Определяющим моментом цитохимического анализа ферментных систем является возможность обнаружения изменений в организме на ранних стадиях развития инфекционного процесса, до появления более глубоких изменений в органах и системах, выявляемых с помощью традиционных методов.

В последнее время опубликован ряд работ, в которых отмечается корреляция активности цитохимических показателей с интенсивностью фагоцитоза в полиморфно-ядерных лейкоцитах при хроническом бруцеллезном процессе (168; 169; 184).

Однако в специальной литературе отсутствуют данные о комплексном изучении течения бруцеллезного инфекционного процесса на цитоэнзимо-химическом уровне, с одновременной постановкой фагоцитарной реакции в сочетании с традиционными методами исследований биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза. До настоящего времени четко не определены показатели информативности энзимо-фагоцитарных тестов при вакцинном, инфекционном и реинфекционном процессах. Нет сведений об использовании энзимо-фагоцитарных показателей крови для оценки стадий течения бруцеллезной инфекции. Изложенное определяет необходимость комплексного исследования инфекционного процесса у экспериментальных биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллезе'.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ. Экспериментальное обоснование возможности ранней диагностики острой и хронической форм бруцеллезной инфекции, на основе изучения комплекса бактериологических, аллергических, серологических и цитоэнзимохимических показателей на модели чувствительных и резистентных к возбудителю бруцеллеза лабораторных животных. 8

ОСНОВНЫЕ ЗАДАЧИ РАБОТЫ:

- установить корреляцию данных бактериологических, серологических, аллергических исследований с цитоэнзимохимическими показателями периферической крови у биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза при вакцинном и экспериментальном инфекционном процессах;

- выявить наиболее информативные цитоэнзимохимические показатели, определяемые в ПМЯЛ периферической крови чувствительных к возбудителю бруцеллеза биологических моделей, позволяющие достоверно судить о фазе (острая, хроническая) течения бруцеллезного инфекционного процесса;

- разработать способ оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза, повышающий достоверность диагностики клинических форм данного инфекционного процесса;

- апробировать в клинических условиях цитоэнзимохимические методы исследования ПМЯЛ периферической крови людей, больных бруцеллезом, для дополнительного лабораторного подтверждения формы протекающего инфекционного процесса.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ.

- Получены новые данные о характере изменений цитоэнзимохимиче-ских показателей ПМЯЛ периферической крови в динамике развития бруцеллезного инфекционного и вакцинного процессов, а также при реинфекции у экспериментальных биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза.

- Научно обоснована и экспериментально доказана принципиальная возможность дифференцирования фаз течения бруцеллезной инфекции по активности цитохимических показателей ПМЯЛ периферической крови.

- Разработан «Способ сочетанной оценки функциональной активности 9 нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза», на который оформлена заявка на изобретение № 97113230/13 от 31.01.1997 года и получено положительное решение ФИПС о выдаче патента РФ от 18.01.1999 года

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ.

- Результаты выполненной работы легли в основу "Методических рекомендаций по проведению цитоэнзимохимических исследований лейкоцитов периферической крови людей больных бруцеллезом и использованию цитоэнзимохимических показателей для дифференциальной диагностики клинических форм бруцеллеза", которые одобрены Ученым Советом, утверждены директором СтавНИПЧИ (протокол № 5 от 27 мая 1997г.) и используются в практической работе Ставропольского краевого центра по лечению и диагностике бруцеллеза и кафедры инфекционных болезней Ставропольской медицинской академии;

- разработанный способ сочетанной оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза позволяет проводить одновременный учет активности энзимов, содержания катионных белков (КБ), а также количества лизированных бактериальных клеток, т.е. ускоряет получение информации о состоянии защитных систем организма, инфицированного возбудителем бруцеллеза, для прогнозирования течения заболевания и выбора тактики лечения больных бруцеллезом людей.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ.

1. Материалы комплексного исследования экспериментальных биологических моделей с различной чувствительностью к возбудителю бруцеллеза по показателям бактериологических, серологических, аллергических и цитохимических методов на разных этапах бруцеллезного инфекционного, вак

10 ценного и реинфекционного процессов.

2. Результаты изучения диагностической значимости цитоэнзимохими-ческих показателей ПМЯЛ периферической крови в дифференциальной диагностике острой и хронической форм бруцеллезного процесса.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

По материалам диссертации сделаны сообщения на Всесоюзной конференции «Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным» (Новосибирск, 1989), на Всесоюзной научно-практической конференции «Молекулярные механизмы развития инфекционных заболеваний» (Звенигород, 1990), на научно-практической конференции, посвященной 100-летию открытия возбудителя чумы (Ставрополь, 1995), на научно-практической конференции, посвященной 60-летию противочумной службы на Кавказе (Ставрополь, 1995), на научной конференции, посвященной 100-летию образования противочумной службы России (Саратов, 1997).

Диссертация обсуждена и одобрена на межлабораторной научной конференции Ставропольского научно-исследовательского противочумного института (1999г.)

Публикации. Основное содержание диссертации изложено в 15 опубликованных работах.

11

Заключение Диссертация по теме "Микробиология", Логвиненко, Ольга Васильевна

122 ВЫВОДЫ

1. Впервые проведено комплексное экспериментальное исследование бактериологических, серологических, аллергических и цитоэнзимохимиче-ских показателей у чувствительных и резистентных к возбудителю бруцеллеза биологических моделей на разных стадиях инфекционного, вакцинного и реинфекционного процессов.

2. Установлены достоверные различия в характере изменений ферментативной активности ПМЯЛ периферической крови у чувствительных и резистентных к бруцеллезу биологических моделей при экспериментальном бруцеллезном инфекционном и вакцинном процессах.

3. Установлена корреляция показателей функционально-метаболической активности ПМЯЛ крови с данными бактериологических, серологических исследований и аллергической пробой Бюрне при оценке различных форм и сроков развития экспериментального бруцеллезного процесса у биологических моделей, чувствительных к возбудителю бруцеллеза.

4. Разработан "Способ сочетанной оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза", повышающий достоверность диагностики различных форм бруцеллеза.

5. Экспериментально доказана и подтверждена в клинических условиях целесообразность использования совокупности показателей бактериологических, серологических, аллергических и энзимо-фагоцитарных реакций для определения тяжести течения и степени активности бруцеллезного инфекционного процесса у людей. Для острой фазы характерно увеличение фагоцитирующей активности нейтрофилов крови, активности ЩФ, ЛДГ и понижение активности МПО. Хронизация процесса влечет за собой угнетение

123 основных показателей функциональной (фагоцитирующей и лизирующей функций) и ферментативной (ЩФ) активности нейтрофилов.

6. Разработаны, апробированы и рекомендованы для использования в работе диагностических лабораторий инфекционных стационаров схемы и методические приемы использования цитохимических показателей периферической крови для оценки фаз течения инфекционного бруцеллезного процесса.

124

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В решении проблемы борьбы с бруцеллезом значительная роль отводится его своевременной диагностике. Вопросам диагностики бруцеллеза посвящены работы многих исследователей (128; 13; 156; 210; 253).

Проявление бруцеллезной инфекции у человека очень разнообразно. Ретроспективный анализ многочисленных фактов ошибочной диагностики свидетельствует о том, что возможна имитация даже таких заболеваний, как малярия, грипп, ревматизм, туберкулез, лихорадка, которые ни по патогенезу, ни по этиологии ничего общего с бруцеллезом не имеют (175; 41; 242; 257; 250). Ошибочная диагностика бруцеллеза влечет за собой неправильное лечение, что приводит к хронизации процесса. Переход острой формы в хроническую создает определенные затруднения при диагностике и лечении.

По-видимому, не требуется дополнительных доказательств важности диагностики в ранний период развития инфекционного бруцеллезного процесса, до появления глубоких изменений в органах и системах. Еще одним, немаловажным аспектом диагностики бруцеллезной инфекции является дифференциация вакцинного и: инфекционного процессов. В ряде работ (80; 99; 14; 221) приводятся данные о том, что при повторной вакцинации, при использовании большой дозы вакцинного штамма, а также у людей без клинических проявлений заболевания, могут обнаруживаться антитела в диагностических титрах и положительная проба Бюрне.

В диагностике заболевания бруцеллезом большую роль играют правильно собранный анамнез, клиническое обследование и данные лабораторных методов исследования: микробиологического, аллергического, серологического. Указанные методы используются в комплексе и направлены, главным образом, на подтверждение клинического диагноза, однако они недостаточно информативны в плане оценки активности течения инфекционного процесса и прогноза заболевания. Восполнить этот пробел, в какой-то

110 мере, возможно при дополнительном использовании цитохимических методов исследования. Рядом авторов (76; 184; 199) установлены изменения функциональной и метаболической активности ПМЯЛ периферической крови макроорганизма при ряде инфекционных заболеваний. Определяющим моментом функционально-метаболических исследований клеток крови считается выявление нарушений функций ферментных систем на ранних стадиях развития инфекционного процесса. Применительно к бруцеллезной инфекции работ, посвященных изучению цитохимической активности нейтро-филов крови, в доступной нам литературе последних лет, сравнительно немного (187; 169; 177).

Учитывая изложенное, в нашей работе были использованы, наряду с традиционными, дополнительные цитохимические методы исследования функционально-метаболической активности ПМЯЛ.

С этой целью были проведены серии экспериментов с использованием биологических моделей чувствительных и резистентных к возбудителю бруцеллеза - морских свинок и белых крыс линии Фишер-344 соответственно. Для моделирования экспериментального бруцеллезного процесса использовали культуру вирулентного штамма B.melitensis 565, а для иммунизации -культуру вакцинного штамма В.abortus 19. Группу вакцинированных животных через 30 суток заражали культурой вирулентного штамма B.melitensis 565, считая таких животных реинфицированными.

При проведении экспериментов (заражение, вакцинация, реинфекция), в сравнительном аспекте изучали динамику изменений бактериологических, серологических, аллергических, а также цитохимических показателей ПМЯЛ у чувствительных и резистентных к возбудителю бруцеллеза биологических моделей в фазе острого (15-30 суток) и хронического (60-90 суток) течения бруцеллезного процесса.

В ряде работ (182; 214 и др.) отмечается зависимость обсемененности макроорганизма бруцеллами от вирулентности, использованных в опыте

Ill штаммов. Нами было установлено, что у чувствительных биологических моделей развитие вакцинного процесса сопровождалось максимальными бактериологическими показателями на 15 сутки исследования. Полученные результаты не превышали значение ИО у зараженных морских свинок. В то же время у зараженных животных, максимальное значение ИВ и ИО определялось на 30 сутки, когда по мнению ряда исследователей, происходит генерализация инфекционного процесса.

В отдаленные сроки постановки опыта у зараженных животных, высев бруцелл из органов уменьшался и был достаточно скудным, а у вакцинированных морских свинок - отсутствовал. Картина бактериологических находок у реинфицированных животных отличалась недостаточным полиморфизмом, с максимальными показателями ИВ и ИО на 30 сутки после заражения и отрицательными результатами через 90 суток.

Из литературных источников известно, что наиболее интенсивное обсеменение органов белых крыс наблюдается на 10 сутки после заражения культурой возбудителя бруцеллеза (40; 182). В нашей работе первые исследования мы проводили на 15 сутки после введения инфекта и отмечали максимальные показатели ИВ и ИО. У вакцинированных животных максимальные бактериологические показатели выявлялись на 21 сутки. В обеих исследованных группах через 45 суток высев бруцелл из органов не наблюдался. Полученные значения ИВ и ИО были не высокими. У реинфицированных животных только в первые сроки исследования (15-30 сутки), высевались единичные КОЕ при посеве из места ведения и из паховых лимфатических узлов.

Анализируя результаты бактериологического исследования экспериментальных биологических моделей, мы отметили у чувствительных животных более высокие числовые значения ИВ, ИО и увеличение срока высевае-мости бруцелл.

Исследования позволили установить максимальное числовое значение

112 указанных показателей у морских свинок на 15-45 сутки, а у крыс линии Фишер-344 - на 15-30. В дальнейшем у резистентных животных наблюдалось угасание инфекционного и вакцинного процессов.

При проведении серологических исследований у чувствительных биологических моделей, максимальные серологические показатели, при развитии вакцинного процесса определялись на 15-30 сутки, после введения культуры бруцелл, что совпадало с максимальными значениями ИВ и ИО. Развитие инфекционного процесса характеризовалось высокими серологическими титрами в более поздние сроки (30-45 сутки), когда рост бруцелл был скудным.

У реинфицированных животных титры агглютининов и гемагглюти-нинов были достаточно высокими во все сроки наблюдения.

В группе резистентных биологических моделей при развитии как инфекционного, так и вакцинного процессов, высокие титры в серологических реакциях определялись на 30-45 сутки исследования. У реинфицированных животных динамика серологических изменений была такой же, как у морских свинок.

Учитывая все вышеизложенное можно заключить, что острая фаза инфекционного процесса характеризуется максимальными бактериологическими результатами, нарастанием титров серологических реакций. Наши исследования показали, что самые высокие цифровые значения указанных показателей у морских свинок отмечались на 15-45 сутки, а у крыс линии Фишер-344 на 15-30. После чего у резистентных животных происходило угасание инфекционного процесса, которое характеризовалось понижением титров серологических данных до отрицательных (на 90 сутки) и отсутствием бактериологических находок.

У чувствительных биологических моделей, при уменьшении значения ИВ и ИО, титры серологических реакций продолжали оставаться достаточно высокими. Мы считаем, что этот факт можно рассматривать, как условную

113 хронизацию процесса.

Аллергическая перестройка, определяемая внутрикожной пробой Бюрне, у чувствительных животных, наиболее ярко проявлялась при заражении морских свинок вирулентным штаммом бруцелл, однако, на 15 сутки, размер отечности был больше у реинфицированных биологических моделей.

Учитывая поставленную задачу - разработку дополнительного теста для диагностики и дифференциации острой и хронической форм бруцеллезной инфекции, мы определяли в ПМЯЛ периферической крови содержание КБ и активность МПО, а также гидролитических (КФ, ЩФ, КНЭ) и окислительно-восстановительных ферментов (НАДФ-Н-оксидаза), участвующих в процессе фагоцитоза.

Цитохимические исследования дали возможность достаточно полно охарактеризовать отличительные признаки инфекционного, реинфекционно-го и вакцинного процессов, оценить функциональную активность ферментных систем на разных этапах развития инфекционного бруцеллезного процесса.

Установлено, что изменение цитохимических показателей в ПМЯЛ периферической крови зависело от формы протекающего в организме экспериментального животного процесса и от стадии его развития, а также от степени резистентности использованных в опыте биологических моделей. Так, уже на 15 сутки после вакцинации, в разгар развития вакцинного процесса, увеличивалась активность отдельных ферментов (ЛДГ, НАДФ Н-оксидаза, КФ), а также содержание КБ. Подобное проявление цитохимической активности нейтрофилов можно рассматривать как закономерную реакцию макроорганизма на введение антигена. У резистентных к возбудителю бруцеллеза биологических моделей, развитие вакцинного процесса сопровождалось изменением метаболизма в ПМЯЛ, несколько отличного от наблюдаемого нами у морских свинок. Общим, для использованных в опыте животных, было увеличение активности исследуемых ферментных систем, которое отмеча

114 лось при генерализации вакцинного процесса, т.е. на 15 сутки и с небольшими колебаниями прослеживалось до конца исследования (до 90 суток). Наиболее выраженным, у крыс линии Фишер, было изменение активности МПО. Особенно четко это прослеживалось при сравнении с результатами исследования чувствительных животных, у которых только на 45 сутки с момента вакцинации наблюдался высокий уровень активности данного фермента.

Содержание КБ у морских свинок на 15 сутки исследования было выше, чем у белых крыс. У последних только на 21 сутки содержание КБ достоверно повышалось (Р<0,01). Полученные нами данные позволяют предположить, что, возможно, на ранних этапах формирования вакцинного процесса у чувствительных и резистентных к бруцеллезу животных, различные представители микробицидной системы играют ведущую роль. У крыс линии Фишер таким представителем кислородзависимой системы нейтрофилов является МПО, у морских свинок - кислороднезависимые КБ. Вместе с тем, участие систем, ответственных за образование активных форм кислорода, было достаточно высоким в обеих группах использованных в опыте животных.

Изменение активности КФ, при развитии вакцинного процесса у резистентных и чувствительных животных, было однотипным, но изначально этот показатель был выше у морских свинок. Активность ЩФ у крыс снижалась на 15 сутки исследования, а в более поздние сроки значительно увеличивалась. У морских свинок увеличение активности этого фермента на 15-30 сутки после вакцинации было достоверным. В более поздние сроки активность ЩФ было ниже, чем в контрольной группе животных. В результате проведенного эксперимента мы установили, что формирование поствакцинального иммунитета характеризовалось существенным усилением интенсивности фагоцитоза ПМЯЛ, увеличением в последних содержания КБ, активности МПО и КФ с максимальными показателями на 30-45 сутки, при активной элиминации бруцелл вакцинного штамма из организма.

115

Исходя из тезиса о том, что вакцинация обеспечивает клеточным стенкам макроорганизма повышенную устойчивость к патогенному воздействию возбудителя, можно заключить, что повышение цитохимической активности в организме вакцинированных животных обусловлено естественными изменениями ферментных систем.

Несмотря на имеющуюся информацию о том, что 1 млрд взвесь вакцинного штамма бруцелл может вызывать у чувствительных к бруцеллезу животных, перестройку, сходную по клиническим (152), серологическим и кожно-аллергическим (80) проявлениям с инфекционным процессом, вакцинный штамм не способен в полной мере активизировать метаболические процессы фагоцитирующих клеток, как в случае с использованием вирулентной культуры бруцелл.

Исследование основных цитохимических показателей энергетического обмена (ключевого фермента гликолиза ЛДГ и главного производителя активных форм кислорода - НАДФ-Н-оксидазы) позволило сделать предположение, что в процессе развития инфекционного процесса энергообеспечение нейтрофилов периферической крови не страдает. Полученные данные подтверждают предположение высказанное О.М.Гробовой (58), при обследовании больных хроническим водпалением легких.

Выявляя участие кислородзависимых (МПО) и кислороднезависимых (КБ) микробицидных систем, мы установили основную роль миелоперокси-дазного комплекса у резистентных к бруцеллезу животных на ранних стадиях развития инфекционного процесса. Достоверное изменение содержания КБ определялось в более поздние сроки исследования. У чувствительных биологических моделей в острой фазе инфекционного процесса отмечалось незначительное увеличение содержания КБ в нейтрофилах периферической крови. Переход острой формы в генерализованную характеризовался максимальными показателями содержания белка. При формирование хронического процесса содержание исследуемых ЦХП понижалось, но полученные

116 результаты превышали контрольные величины, что подтверждает мнение В.Н.Букина (35) о зависимости содержания КБ от активности бруцеллезного процесса.

Исходя из вышеизложенного можно сделать заключение о том, что между размножением, расселением бруцелл в макроорганизме и содержанием КБ наблюдается обратная зависимость.

Данные, полученные нами в результате исследования, свидетельствуют об ингибирующем действии вирулентного штамма бруцелл на ферментативные процессы в клетках макроорганизма, именно на ранних этапах развития инфекционного процесса у чувствительных и резистентных к бруцеллезу животных. Так, помимо перечисленных выше цитохимических показателей, понижалась активность КФ, а активность ЩФ и МПО достоверно не отличалась от контрольных величин у интактных животных. Недостоверное изменение цитохимических показателей, на ранних стадиях формирования инфекционного процесса, может происходить либо за счет токсического воздействия размножающихся микробов на форменные элементы крови (240), либо объясняется стресс-реакцией макроорганизма в ответ на введение антигенного материала (220). В любом случае развитие инфекционного процесса влечет за собой структурные изменения, что обусловливает более яркий сдвиг метаболической активности ПМЯЛ.

У морских свинок, зараженных без предварительной вакцинации, повышение исследуемых показателей ферментативной активности в условиях опыта, наблюдалось на 30-45 сутки, у крыс линии Фишер на 21-30.

Проведенные нами исследования позволяют сделать вывод о высокой степени лабильности ферментных систем фагоцитирующих клеток, чувствительных к бруцеллезу животных. Последнее подтверждается более выраженными колебаниями энзимохимических показателей и пролонгированным угнетением метаболических процессов в ПМЯЛ, по сравнению с резистентными биологическими моделями.

117

Развитие бруцеллезной инфекции в иммунизированном организме характеризовалось интенсивной элиминацией возбудителя, активным антите-лообразованием в сочетании с максимальными показателями цитохимической активности нейтрофилов периферической крови.

По результатам наших исследований суммарное действие культур вирулентного и вакцинного штаммов вызывало более выраженные цитохимические реакции в ПМЯЛ, в отличии от вакцинации и в более ранние сроки, чем у зараженных биологических моделей. Увеличение активности исследуемых ферментов и микробицидных систем на 15 сутки после постановки опыта, можно расценивать как проявление экстренной мобилизации защитных сил иммунизированного макроорганизма на повторную встречу с культурой вирулентного штамма бруцелл.

У животных, зараженных бруцеллезом после предварительной иммунизации, процесс элиминации бруцелл из организма и образование специфических антител происходил более интенсивно, чем у зараженных или вакцинированных. Исходя из вышеизложенного можно заключить, что между генерализацией инфекционного процесса, элиминацией возбудителя и увеличением ферментативной активности в ПМЯЛ существует прямая зависимость.

Следующим этапом наших исследований было определение метаболической и фагоцитирующей способностей ПМЯЛ в процессе постановки ОФР.

Большое количество исследований по фагоцитозу проведено на нейтрофилах, т.к. они составляют большинство фагоцитирующих клеток крови. Высокая скорость обновления нейтрофила (каждые 10 часов) позволяет ему фиксировать и давать самую свежую информацию о происходящих изменениях (92; 87; 7; 39; 267).

Эффективное течение фагоцитоза достигается лишь при полной сбалансированности показателей метаболизма в ПМЯЛ (96). Фагоцитарный

118 процесс состоит из ряда последовательных и взаимообусловленных стадий (188). Контакт фагоцитов с антигеном, приводит к запуску механизмов окислительного метаболизма клеток, который, в свою очередь, активизирует ки-слороднезависимые (КБ) и кислородзависимые (МПО) системы, участвующие в разрушении или киллинге фагоцитированных клеток (188; 236; 243; 242). Следующей стадией развития процесса становится лизис разрушенных бактерий, происходящий в кислой среде под действием гидролитических ферментов. Считается (141), что для лизиса бактерий необходимо разрушение их в начальной стадии фагоцитоза. По мнению исследовател р ( 186) наиболее объективное представление о функциональном состоянии ПМЯЛ можно получить при их стимуляции в процессе постановки ОФР.

Для оценки эффективности протекающего фагоцитарного процесса, мы разработали "Способ сочетанной оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза". Способ включает определение активности ферментов и содержания микробицидных систем, после постановки ОФР в нашей модификации. Модификация метода включает изменения по 4 параметрам (замена лимоннокислого натрия гепарином, использование живой культуры бруцелл, применение 0,5 и 2 часовой экспозиции инкубационной смеси, учет лизированных форм бактерий).

Данные, полученные нами в результаты проведения опыта, дают основание говорить о том, что развитие вакцинного и реинфекционного процессов сопровождаются усилением фагоцитирующей функции нейтрофилов у чувствительных и резистентных к возбудителю бруцеллеза животных, во все сроки наблюдения. Максимальные показатели поглотительной активности определялись на 30-45 сутки после вакцинации. У зараженных морских свинок увеличение фагоцитирующей активности нейтрофилов мы наблюдали при затухании инфекционного процесса. Обращает на себя внимание высокая способность к лизису бактериального агента ПМЯЛ крыс линии Фишер

119

344, особенно выраженная через 2-3 месяца после заражения.

Учет цитохимических показателей после постановки ОФР выявил максимальное понижение активности исследуемых ферментов и микроби-цидных систем у морских свинок на 15-30 сутки развития вакцинного процесса. Содержание КБ и активность МПО преимущественно понижались в первые 0,5 часа постановки опыта, а активность гидролитических ферментов продолжала уменьшаться и через 2 часа.

У резистентных животных изменение метаболической активности нейтрофилов происходило постепенно через 0,5 и 2 часа. При развитии инфекционного процесса выраженное понижение метаболической активности ПМЯЛ в обеих группах животных, наблюдалось в острой фазе.

Установлено, что нейтрофилы периферической крови животных, зараженных после вакцинации, обладают высокой способностью не только фагоцитировать бактерии, но и активно их уничтожать. Однако в этом случае не наблюдалось подавления активности ферментов, отмеченного у зараженных без предварительной вакцинации животных.

Таким образом, результаты экспериментов, проведенных на животных свидетельствуют о том, что микробицидные системы (КБ, МПО) и ферменты (КФ, ЩФ) в сочетании с ОФР,могут служить дополнительным диагностическим тестом для дифференциации форм инфекционного бруцеллезного процесса.

Поскольку поиск доступных для практических учреждений методов диагностики продолжает оставаться актуальным, нами проведена работа по оценке применения цитоэнзимохимических показателей ПМЯЛ крови больных бруцеллезом людей в клинических условиях.

Основываясь на перспективности полученных данных по использованию функциональной и метаболической активности ПМЯЛ, у чувствительных к возбудителю бруцеллеза лабораторных животных мы провели обследование больных острой и хронической формами бруцеллеза в Ставрополь

120 ском краевом центре по лечению и диагностике бруцеллеза. Всего было обследовано 50 больных и 10 клинически здоровых доноров. Постановка диагноза и дифференцирование форм заболевания проводилось с применением традиционных методов.

На момент госпитализации проба Бюрне была резко положительной у больных с хронической формой инфекции и положительной у нескольких (7) человек с острой. Результаты серологического исследования показали высокие титры в реакции Райта и РНГА: от 1:200 до 1:600 и от 1:100 до 1:200 при остром течении заболевания. При переходе острого процесса в хронический происходило угасание иммунного ответа, которое характеризовалось низкими тирами в реакции Райта - 1:100-1:200 и РНГА - 1:50-1:100.

Анализ результатов цитохимического исследования содержания КБ в нейтрофилах периферической крови больных выявил более высокий уровень содержания микробицидных веществ у людей с хронической формой. По мнению ряда исследователей (8; 21), это объясняется реализацией комплекса многочисленных биологических функций полиморфноядерных нейтрофи-лов, особенно при структурных изменениях в органах и тканях, происходящих во время хронизации инфекционного процесса.

Т.Я.Карпенко с соавторами (78) рассматривают повышение активности ЩФ, как возможный благоприятный исход инфекционного заболевания. У больных с острой формой бруцеллеза отмечено повышение активности ЩФ, а с хронической - ее понижение.

Проведенные нами исследования показывают, что развитие острого процесса у людей характеризуется более значительными изменениями активности ферментных систем нейтрофилов по сравнению с хроническим течением болезни.

Полученные энзимо-фагоцитарные данные позволили выявить у больных хронической формой бруцеллеза значительное понижение фагоцитирующей и лизирующей способности нейтрофилов, по сравнению с клиниче

121 ски здоровыми людьми. При остром течении заболевания увеличение фагоцитирующей способности нейтрофилов не сопровождалось высоким значением лизирующей активности. Учет цитохимических показателей после постановки ОФР выявил значительное понижение активности МПО, КФ и содержания КБ при остром течении болезни. В то же время у больных с диагнозом хроническая форма бруцеллеза не наблюдалось существенных изменений активности перечисленных выше ферментов и микробицидных систем. Таким образом, можно заключить, что исследованные нами формы бруцеллезной инфекции характеризовались различной динамикой изменений биологически активных веществ и это, соответственно, расширяет возможности дифференциальной диагностики с использованием цитоэнзимохими-ческих методов исследования.

Нами, совместно с сотрудниками кафедры инфекционных болезней Ставропольской Государственной медицинской академии и Ставропольского Краевого центра по лечению и диагностике бруцеллеза, составлены "Методические рекомендации по проведению цитоэнзимохимических исследований лейкоцитов периферической крови людей, больных бруцеллезом и использованию цитоэнзимохимических показателей для дифференциальной диагностики клинических форм бруцеллеза". Рекомендации используются в Краевом центре по диагностике и лечению бруцеллеза при уточнении клинических форм бруцеллеза у пациентов.

На основании проведенной работы предложен "Способ сочетанной оценки функциональной активности нейтрофилов периферической крови при воздействии возбудителя бруцеллеза", на который получено положительное решение ФИПС.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Логвиненко, Ольга Васильевна, Ставрополь

1. Абулхаиров Г.Ш. Вирулентные свойства штамма В. ovis в опытах на морских свинках и баранах// Бюл. ВИЭВ. 1990. - Вып.73-74. - С. 128-133.

2. Абдувалиев A.A., Мухитдинов И.М. Изменение иммуноглобулинов при первично-хронической форме бруцеллеза у вакцинированных// Актуальные вопросы кишечных и особо-опасных инфекций. Ташкент, 1991. - С.3-4.

3. Авдеев М.Г., Лебедев В.В., Шубич М.Г. Цитохимическое исследование лейкоцитов больных лептоспирозом// Лаб. дело. 1988. - № 11.- С.22-24.

4. Адаменко Г.П. Методы оценки взаимодействия нейтрофильных гранулоцитов и моноцитов крови в смешанной культуре клеток// Кли-нич.лаб.диагностика. 1993. - № 4. - С.53-56.

5. Адаменко Г.П., Козин В.М. Клинико-лабораторная оценка взаимодействия поли и мононуклеарных фагоцитов при воспалительных заболеваниях кожи// Клинич. и лаб. диагностика. 1994. - № 1. - С13-15.

6. Адо А.Д. Патофизиология фагоцитов. М.: Медгиз,1961- 130с.

7. Адо А.Д., Маянский А.Н. Современное состояние учения о фагоцитозе/7 Иммунология. 1983. - № 1. - С.20-25.

8. Александров М.Т., Кудрявицкий А.И. Метод вычисления абсолютных показателей фагоцитоза// Лаб. дело. 1988. - № 9. - С.30-33.

9. Алиев В.А. Цитохимические показатели НАД" и НАДФ" диафоразы в лейкоцитах периферической крови здоровых молодых людей// Лаб. дело. -1977.-№ 8.-С.460.

10. Алиев Э.А. Иммунологическая реактивность различных видов животных при бруцеллезе// Проблемы ветеринарной иммунологии: Науч. Тр. Всесоюз. акад. с.-х. наук. 1985. - С.74-75.

11. Алмазов В.А., Афанасьев H.H., Зарицкий А.Ю. Физиология лейкоцитов человека. Л.: Наука, 1979. - 120с.

12. Алферов В.П., Пигаревский В.Е., Ильина И .Я., Мазиног Ю.А. Не125специфические факторы защиты при острых пневмониях у детей раннего возраста// Вопр.охраны материнства. 1983. - № 6. - С.36-40

13. Амиреев С.А., Крамчанинов Н.Д. Вопросы диагностики бруцеллеза (Обзор отечественной литературы)/ НИИ эпидемиологии, микробиологии и инф. болезней.-Алма-Ата, 1990. 72с. - Деп. во ВНИИМИ 21.3.91.

14. Аракелян П.К. Дифференциация больных и вакцинированных против бруцеллеза овец// Ветеринария. 1996. - № 11. - С. 10-13.

15. Амиркулов И.Н., Пилина Н.П., Ющенко Г.В., Пименова М.Н. Экономический ущерб, наносимый одним случаем бруцеллеза. Социально-экономическая значимость инфекционных болезней. - М., 1982. - С. 111-116.

16. Асадов Ч.Д., Нумерова JI.C., Мирзоева М.Э. Связь между фагоцитарной функцией и цитохимическими показателями нейтрофилов крови // Лаб. дело. 1990. -№ И.-С. 19-21.

17. Афанасьев Ю.И., Ноздрин В.И., Бахшинян М.З., Горячкина В.Л. Структура и функция макрофагов// Успехи современной биол. 1982. - Т.93, Вып.З.- С.421-429.

18. Ашмарин И.П., Кокряков В.Н., Пигаревский В.Е. Катионные белки лейкоцитов, деградация и возможности загрязнения гистонами при выделении// Вопр. мед. химии. 1973. - № 4. - С.381-386.

19. Бажора Ю.И., Буко В.П. Пероксидазная активность и катионные белки фагоцитирующих полиморфноядерных лейкоцитов в норме и при инфекционной патологии в возрастном аспекте// Иммунология. 1988. - № 2. -С.96-96.

20. Бакуев М.М., Саидов М.З., Батуков A.A. Особенности секреции миелопероксидазы и хемилюминисцентного ответа нейтрофилов человека при контакте со стимуляторами различной природы// Иммунология. 1991. -№ 1.-С.15-17.

21. Бахов Н.И., Александрова Л.З., Титов В.Н., Бахов Ю.И., Насонов Е.Л. Нейтрофилы, их роль в регуляции метаболизма тканей// Успехи совре126менной биол. 1987. - Т.104, Вып.215. - С.281 -293.

22. Беклемишев Н.Д. Хронический и латентный бруцеллез. Алма-Ата.: Наука, 1965. 332с.

23. Белозеров Е.С., Муковозова Л.А., Груч А.Д., Исходы острого и по-дострого бруцеллеза// Материалы 111 объединенного съезда гигиенистов, эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов. Алма-Ата, 1980. С. 118119.

24. Белозеров Е.С. Бруцеллез. Л.: Медицина, 1985. - 183с.

25. Белоцкий С.М., Филюкова О.Б., ПашутинС.Б., Диковская Е.С.,Базанова Э.Б. Хемилюмиюесценция нейтрофилов человека под действием условных микробов// ЖМЭИ. 1986. - № 3. - С.89-92.

26. Белъштокова О.В. Неспецифические факторы иммунитета в норме и патологи// Тез. докл. республиканской научной конференции. Томск, 1978.-С.86.

27. Бернет Ф.М. Клеточная иммунология/ пер. с англ. Л.Б.Меклера, 'У.В.Сидоровой, A.M. Оловникова. М.: Мир, 1971. - 544с.

28. Бондарев Л.С., Растунцев Л.П., Белогурова А.Ф. Активность кислой и щелочной фосфатаз нейтрофилов периферической крови при бактериальных и вирусных инфекциях// Лаб. дело. 1973. - № 12. - С.722.

29. Брауде Н.И. Незавершенный фагоцитоз микробов, как следствие127недостаточности лизосом макрофагов// ЖМЭИ. 1967. - № 10. - С.81-85.

30. Бронникова А.К. Бруцеллез животных. Владивосток, 1990. - 144с.

31. Бруцеллез/ Под ред. проф. П.А. Вершиловой. М.: Медгиз, 1961.239с.

32. Брыжанин Г.Г. Поражение нервной системы при бруцеллезе// Здравоохранение Казахстана. 1992. - № 12. - С.34-35.

33. Букин В.Н. Показатели фагоцитоза и неферментных катионных белков при бруцеллезе с учетом активности процесса. Автореф. дис. канд. мед. наук Новосибирск, 1990. - 23с.

34. Бутенко Г.М. Цитохимия и электронная микроскопия клеток крови и кроветворных органов. Киев, 1974 - 127с.

35. Бутенко Г.М., Терешина О.П. Функциональная активность системы мононуклеарных фагоцитов влияние возраста и иммунных комплексов// Иммунология. - 1992. - № 3. - С. 15-17.

36. Веглинская Е.А. Некоторые итоги и перспективы использования цитохимических методов исследования при изучении естественного иммунитета// Вопросы иммунологии и молекул, биологии. Тез. докл. конф. Нальчик, 1984. С.47-48.

37. Веркина JI.M., Васильева Г.И. Новый метод оценки противочумного иммунитета у людей// Клинич. лаб. диагностика. 1996. - № 3. - С.30-32.

38. Вершилова П.А., Чернышева М.И. Князева Э.Н. Патогенез и иммунология бруцеллеза. М.: Медицина, 1974. - 272с.

39. Виноградова A.A. К вопросу о клиническом течении современного бруцеллеза// Зоонозные болезни человека. Нальчик, 1986. - С. 18-20.

40. Вихоть Н.Е. Фагоцитарная активность при стафилококовой инфекции//ЖМЭИ. 1981. -№4. -С.8-15.

41. Возженникова Г.В. Клинико-иммунологическая характеристика побочных реакций медикаментозной терапии при бруцеллезе: Автореф. дис.канд. мед. наук. Д., 1988. - 24с.128

42. Вольский H.H., Зенков Н.К., Меныцикова Е.Б., Любимов Г.Ю. Участие активированных кислородных метаболитов в иммунорегуляции //Тез. докл. 1 Съезда иммунологов России, Новосибирск,23-25 июня, 1992. Новосибирск, 1992. - С.92-93.

43. Гайдара Б., Желудков М.М., Чернышева М.И. Оценка эффективности методов лабораторной диагностики бруцеллеза// ЖМЭИ. 1994. - № 4. -С.55-58.

44. Галанин В.Н., Юнусходжаев Э., Токмакова А.И., Мамедов Л.А. Способ определения фагоцитарной активности лейкоцитов:/ A.c. 1355932, СССР. Заявл. 17.02.86, № 4023409.

45. Галко И.К. Иммунологические исследования населения в отношении бруцеллеза// Мед. журнал Узбекистана. 1982. - № 3. - С.62-63

46. Гарбузенко Т.С., Потапов М.Г. Влияние лимфоидных клеток человека на антителозависимую клеточную цитотоксичность нейтрофилов против опухолевых клеток// Иммунология. 1996. - № 1. - С.20-23

47. Голубева Н.Н., Константинова Т.Н., Комиссарова И.А. Изучение цитохимической активности при антигенном воздействии. Сообщение 1. Де-гидрогеназы лимфоцитов при введении бычьего сывороточного альбумина и эритроцитов барана// ЖМЭИ. 1978. - № 9. - С.86-90.

48. Голубинский Е.П., Дубровина В.И., Бойкова И.С. Кислородзависи-мый метаболизм при фагоцитозе Ь-форм чумного микроба// Актуальные проблемы профилактики ООИ и природно-очаговых инфекционных болезней. Иркутск, 1994. - С.31-32.

49. Гольдберг Е.Д. О содержании кислой и щелочной фосфатаз в лим-фоидных элементах периферической крови и кроветворных органов у ин-тактных крыс и мышей// Бюл. экспер. биол. 1978. - Т.85, № 3. - С.112-128

50. Гольдберг Е.Д., Карпова Г.В., Мелик-Чайказян В.В., Болынанина С.А. Морфофункциональная характеристика лимфоцитов в норме и при патологии// Всесоюзный съезд гематологов и трансфузологов: Тез. Докл. 22-26 окт. 1979, Баку. М., 1979. - С.107-108.

51. Гордиенко С.М. Гиперчувствительность замедленного типа и неспецифический клеточный иммунитет. Роль мононуклеарных фагоцитов// ЖМЭИ. 1986. - № 3. - С.56-61.

52. Грекова Н.А. Факторы естественной защиты организма при бруцеллезе. Сообщение!. Влияние вакцинного и инфекционного процесса при бруцеллезе на содержание лизоцима в организме животного//ЖМЭИ. 1967. - № 5. С.42-44.

53. Губина Е.А. К цитологической и цитохимической характеристике иммуногенеза при ассоциированной иммунизации живыми вакцинами// Материалы межинститутской конференции по бруцеллезу 4-6 октября 1971.1301. М, 1971. -С.73-75.

54. Гублер Б.В. Вычислительные методы распознавания патологических процессов. JL: Медицина, 1970. - С.119-121.

55. Джалилов К.Д., Имамолиев У.Н. Клинические особенности течения подострого бруцеллеза в очаге козье-овечьего вида// Мед. журнал Узбекистана. 1992.-№ 1.-С.13-16.

56. Домашенко О.Н., Бондарев JI.C. Исследование катионных белков лейкоцитов у больных острым и хроническим гепатитом//Лаб. дело. 1998. -№ 9. - С.25-27.

57. Дуглас С.Д., Куи П.Г. Исследование фагоцитоза в клинической практике: Пер. с англ. М., 1983. - 187с.

58. Ерин А.Н., Прищепов Е.Д., Перемыкин В.В., Воробьев A.A. Механизм инактивации микроорганизмов фагоцитами// ЖМЭИ. 1983. - № 12. -С.3-9.

59. Желудков М.М., Сулейманов А.К., Магомедова Д.А. Актуальные вопросы лабораторной диагностики бруцеллеза// Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций. Тез докл. науч. конф. Ставрополь, 1991. -С.29-31.

60. Жумадилова Э.К., Байсугуров Ж.Б. Ферментные системы фагоцитирующих мононуклеаров при различных вариантах течения бруцеллеза// Здравоохранение Казахстана. 1989. - № 6. - С.29-31.

61. Жуманбаева К.А. Возрастные особенности течения бруцеллеза. Ав-тореф. дис. д-ра мед. наук М., 1989. - 45с.

62. Заводнова О.С. Ферментативный статус клеток периферической131крови у детей раннего возраста с менингококковой инфекцией и гнойным менингитом. Автореф. дис. канд. мед. наук Ставрополь, 1994. - 24с.

63. Заславская М.И., Маянский А.Н. Особенности нейтрофилзависи-мой воспалительной реакции на фоне внутрисосудистой активации крови// Нижегородский мед.журнал. 1992. - № 4. - С.29-33.

64. Зайцева Л.Г., Васильева Е.И. К механизму комбинированного воздействия иммуномодуляторов на фагоцитарные клетки// ЖМЭИ. 1994. - № 4. - С.73-77.

65. Земсков В.М. Достижения в исследовании метаболизма фагоцитов// ЖМЭИ. 1985. - № 12. - С.85-92.

66. Земсков В.М., Барсуков A.A., Безносенко С.А. Изучение функционального сотояния фагоцитов человека (Кислордзависимый метаболизм и подвижность клетки): Метод, рекомендации. М., 1988. - 44с.

67. Здродовский П.Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии. -М.: Медгиз, 1963.-468с.

68. Иванова Л.А., Васильева Е.В., Соколов В.В. Взаимосвязь количества, метаболических характеристик лимфоцитов с показателями гуморального иммунитета в иммунопатологическом процессе// Лаб. дело. 1979. - № 2. -С.100-100.

69. Исин Ж.М., Шишкина Т.С., Айкимбаев A.M. Кислородзависимая цитотоксичность как маркер активности фагоцитов в иммуногенезе при чуме // Иммунология. 1993. - №1. - С.31-34.

70. Истманова Т.С., Алмазов В.А., Катаев C.B. Функциональная гематология. Л. 1973. - 295с.

71. Карпенко Т.Я., Сура В.В. Диагностическая информативность определения цитохимических свойств нейтрофилов крови у больных ревматоидным артритом/ЛГер. Архив. 1994. - № 5. - С.51-55.

72. Карбышев Г.Г., Баташев В.В., Крушинов В.Д., Кучин В.В., Уралева B.C., Усаткин А.Р., Подолако М.П., Корешкова Е.А., Братнова Т.Н., Носов132

73. A.M. Бруцеллез в структуре заболеваемости // Современные аспекты природной очаговости, эпидемиологии и профилактики особо опасных инфекционных болезней.: Тез. докл. науч. конф.,Омск, октябрь 1993. Ставрополь, 1993. - С.54-55.

74. Касымова Х.А., Шпыряева Е.А. Клинические сдвиги в состоянии здоровья людей, привитых против бруцеллеза живыми вакцинами вне очага инфекции// Бруцеллез в Казахстане. Алма-Ата, 1965. - С. 126-126.

75. Катосова Р.К., Катосова JI.K., Левина Л.А. Динамика ферментного статуса лейкоцитов в инкубационном периоде на модели сальмонеллезной инфекции// ЖМЭИ. 1980. - № 11. - С.53-56.

76. Кирюхин А.Н., Хромцев A.B., Филатов A.B., Бовин Н.В., Соловьев М.Е., Багурин П.С., Земсков В.М. Ингибирование фагоцитоза моноцитов, связанное с особенностью гликозилирования Fc-фрагмента моноклональных антител// Иммунология. 1993. - № 2. - С. 13-17.133

77. Кононов A.B. Патоморфология инфекционного процесса при изменчивости возбудителя ( на модели бруцеллеза) Автореф. дис. канд. мед. наук Омск, 1979. - 21с.

78. Кортев А.И., Перекопсая Т.И., Харина Н.П. Бруцеллез.-Челябинск, 1976.- 110с.

79. Кичиева Б.Н., Чернышева М.И., Желудков М.М., Мусаев Н.Б. Сравнительное изучение иммуноглобулинов и специфических антител в сыворотках больных хроническим бруцеллезом// ЖМЭИ. 1982. - № 4. - С.86-90.

80. Кишов М.Г., Грабовский B.C. Функциональная характеристика лейкоцитов при старении человека// Иммунология. 1996. - № 4. - С.4-10.

81. Козенко В.Н. Бруцеллез человека. Минск, 1980. - 40с.

82. Козинец Г.И., Альперович В.В., Тамленова Н.П. Исследование функциональных свойств лимфоцитов периферической крови здоровых людей// Лаб. дело. 1971. - № 7. - С.387-387.

83. Копьева Т.Н., Кактурский Л.В. Определение диагностической информативности неспецифических морфологических признаков //Арх.патологии. 1976. - № 12. - С.60-63.

84. Кулаков Б.В., Коробко А.Г., Пинегин Б.В. Влияние некоторых ци-токинов на цитостатическую и цитотоксическую функцию нейтрофилов периферической крови человека// Иммунология. 1997. - № 3. - С.48-50.

85. Кульберг А.Я. Регуляция иммунного ответа. М.: Медицина, 1986. - 224с.

86. Курманова К.Б., Абильпанова Г.К., Сахишева С.Ш. Состояние иммунной системы у больных бруцеллезом// Аллергология и клиническая иммунология. Алима-Ата, 1989. - С.80-87.

87. Леонтович В.А. Биохимия лейкоцитов// Нормальное кроветворение и его регуляция. М., 1976. - С.260-274.

88. Лецкий В.Б. Цитохимические исследования лейкоцитов. Л., 1973.-32с.

89. Лим A.A., Гордиенко Л.Н. О возможности дифференциации вакцинированных против бруцеллеза животных от больных// Роль науки в интенсификации сельского хозяйства: Материалы конф., Омск, 20апр. 1990. Новосибирск, 1990. - С.71-72.

90. Лямкин Г.И., Таран И.Ф. Лабораторная диагностика бруцеллеза (Методическое пособие). Ставрополь, 1994. -4 2с. -Р ус. - Деп. в ВИНИТИ 19.09.94, №2215-В94.

91. Мазинг Ю.А. Нейтрофильные гранулоциты и системы защиты ор135ганизма// Арх. патологии. 1991. - Т.53, № 9. - С.70-73.

92. Маянский А.Н., Куравская М.С., Пикуза О.И., Макарова Т.П., Па-зюк Е.А., Радживин А.П. Опсоническая функция альтернативного пути активации комплемента: способ определения и клиническая характеристика// Иммунология. 1982. - № 3. - С.84-87.

93. Маянский А.Н., Чеботарь И.В., Конышкина Т.М. Неоднордность нейтрофилов человека в реакциях специфической адгезии// Иммунология. -1989. -№3.-С.55-77.

94. Маянский А.Н., Маянский Д.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге.- Новосибирск: Наука, 1989. 341с.

95. Маянский А.Н. Фагоцитоз проблемы и перспективы// Вестн. Рос. АМН. 1993. -№ 4. - С.52-55.

96. Маянский А.Н., Пикуза О.И. Клинические аспекты фагоцитоза. Казань: Магариф, 1993. 192с.

97. Михайлова З.М., Нарциссов Р.П., Катосова J1.K. Влияние иммунизации на ферментативную активность лимфоцитов и некоторых органов в эксперименте//Микробиология. 1972. - № 5. - С. 106-112.

98. Муковозова Л.А., Белозеров Е.С., Секербаев А.Х. Циркулирующие иммунные комплексы при бруцеллезе// Иммунология. 1983. - № 2. -С.77-79.

99. Муковозова Л.А. Клиника современного бруцеллеза, вызванного Br. Melitensis// Клинич. медицина. 1986. - Т.64. № 11. - С.51-55.

100. Нагоев Б.С. Фагоцитарная активность при некоторых кишечных инфекционных заболеваниях// Лаб.дело. 1980. - №6. - С.345-347.

101. Нагоев Б.С., Габрилович И.М., Фокичева Н.Х. Цитохимия лизосо-мального лейкоцита у больных хроническим бруцеллезом//3оонозные болез136ни человека. Орджоникидзе, 1983. - С. 13-17.

102. Нагоев Б.С. Функционально-метаболическая активность лейкоцитов при инфекционных заболеваниях. Автореф. дис.д-ра мед наук. М.,1985.

103. Нагоев Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците. Нальчик,1986. 144с.

104. Нагоев Б.С., Афшагова М.М. Состояние внутриклеточной микро-бицидной системы лейкоцитов у больных пищевыми токсикоинфекциями //ЖМЭИ. 1993. - № 6. - С.28-30.

105. Нарциссов Р.П. Цитохимия СДГ лимфоцитов кролика в иммуногенезе// Патологическая физиология и экспериментальная терапия . Мед. -1970. -№6. -С.50-50.

106. Нарциссов Р.П., Катосова J1.K. Активность дегидрогеназ лимфоцитов в иммуногенезе// Проблемы гематологии и переливания крови. 1971. - № 12.-С.37-41.

107. Нарциссов Р.П. Диагностическая и прогностическая ценность цитохимического определения дегидрогеназ лимфоцитов/7 Вестн. АМНСССР. -1978. № 7. - С.71-74.

108. Нестеренко В.Г. Определение завершенности фагоцитарной реакции с помощью выявления лизосомальных катионных белков// Лаб. дело. -1982. -№5.-С.267-268.

109. Ньехматов A.C., Амиреева A.C., Хасанов А.Х. Диспансеризация и ее роль в снижении заболеваемости бруцеллезом у работников мясоперерабатывающих предприятий республики// Актуальные вопросы кишечных и137особо опасных инфекций. Ташкент, 1991. - С.55-61.

110. Объедков Г.А. основные достижения в изучении патогенеза и иммуногенеза бруцеллеза, совершенствование его диагностики// Соверш. систем и методов в борьбе с бруцеллезом и туберкулезом животных. Новосибирск, 1987.-С.7-12.

111. Ойвин И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований// Пат. физиология. 1960. - № 4. - С.76-85.

112. Островский H.H. Проблемы клиники, диагностики и терапии бруцеллеза// Зооонозные инфекции человека. Нальчик, 1986. - С.3-8.

113. Островский H.H., Щербак Ю.Ф., Желудков М.М. Методические рекомендации по диагностике, лечению и реабилитации. М., 1987. -32с.

114. Островский H.H. Иммунологическая реактивность при бруцеллезе обусловленная аэрогенным инфицированием. Патогенез, иммунологи^кли-ника и диагностика инфекционных болезней. - М., 1992. - С.53-55.

115. Пальцин A.A. Некоторые вопросы современного учения о поли-морфноядерных лейкоцитах// Арх патологии. 1988. - Вып 8. - С.85-90.

116. Пастушенков В.А., Митин Ю.А. Цитохимический метод оценки активности дегидрогеназ в лимфоцитах// Клин.лаб.диагн. 1993. - № 2. -С.42-44.

117. Пауков B.C., Кауфман О.Я. Структурно-функциональная характеристика нейтрофильных гранулоцитов и их роли в формировании воспалительных и иммунных процессов// Арх. патологии. 1983. - Т45, № 5. - С.3-13.

118. Первушин Б.П. Вопросы микробиологической и иммунологической диагностики бруцеллеза у человека. М.: Медгиз, 1962. - 248с.138

119. Перегудов Т.А., Вождаев Н.С., Бричук П.Ф., Мун К.Б. Морфологические изменения у животных, привитых вакциной из штамма В.abortus 82. // Ветеринария. 1987. - №9. - С.28-30.

120. Петров Р.В. Регуляция функций иммунной системы// Арх патологии. 1983. - Т45, № 4. - С.3-11.

121. Петрович Э.И. Цитоэнзимохимические исследования лимфоцитов периферической крови при красной волчанке// Вопр. ревматологии. 1978. -№ 1. -С.62-60.

122. Пигаревский В.Е. Зернистые лейкоциты и их свойства. М.: Медицина, 1978. 127с.

123. Пигаревский В.Е. Полиморфноядерный лейкоцит и макрофаг в реакциях воспаления и гиперчувствительности// Арх. патологии. 1983. -Т.45, № 11. -С.14-22.

124. Пигаревский В.Е., Мазинг Ю.А., Кокряков В.Н. Возрастные изменения системы нейтрофильных гранулоцитов// Всесоюзный съезд патологоанатомов. Москва, 1989. - С.232-234.

125. Пигаревский В.Е. Клинико-морфологические тесты оценки функционального состояния нейтрофильных гранулоцитов// Архив патологии. -1987. № 2. - С.77-82.

126. Пинегин Б.В., Бурая Т.Л., Бутаков A.A. Влияние некоторых имму-номодуляторов на функциональную активность полиморфно-ядерных лейкоцитов периферической крови здоровых людей in vitro// ЖМЭИ. 1994. - № 3. - С.79-82.

127. Пирс Э. Гистохимия. М.: Изд-во иностр. лит., 1962. - 962с.

128. Плецитый АД.Ф., Фомина В.Г. Влияние вакцинного процесса на неспецифическую фагоцитарную активность лейкоцитов периферической крови// Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1973. - № 3. - С.76-79.

129. Покровский В.И., Годованный Б.А., Ющук Н.Д. Современные аспекты проблемы неспецифического иммунитета при инфекционных болезнях// ЖМЭИ. 1983. - № 12. - С.76-82.

130. Покровский В.И., Лобань K.M. Руководство по инфекционным болезням. М, 1986. - 464с.

131. Покровский В.И., Голубинский Е.П., Годованный Б.А. Основные проблемы эпидемиологии, клиники, лечения бруцеллеза// Бруцеллез, лептос-пироз, чума (клинико- эпидемиологические аспекты). М., 1989. - С. 1-21.

132. Покровская М.П., Коганова Л.С. Цитологические методы изучения механизма иммунитета. Свердловск: Медгиз, 1947. - 89с.

133. Провотворов В.М., Солодовникова Е.Ю. Изучение ферментов макрофагов альвеолярного лаважа при различных формах хронического бронхита// Лаб. дело. 1987. - № 9. - С.663-663.

134. Ременцова М.М. Краткий исторический очерк изучения бруцеллеза// Труды Каз. ин-та эпидем., микробиол. и инф болезней.-Алма-Ата, 1975. -Т.9. С.3-6.

135. Ременцова М.М., Студенцова В.К. Значение иммунологических реакций при бруцеллезе// Актуальные вопросы иммунодиагностики ООИ. Ставрополь, 1986. 4.2. - С.59-65.

136. Ременцова М.М., Касаткина И.Л. О нецелесообразности вакцинации против бруцеллеза// Поствакцинальные осложнения: патогенез, профи140лактика, лечение: Материалы Всесоюзной научно-практической конф., Ленинград 19-20 ноября. М., 1991. - С.90-90.

137. Робинсон М.В. Морфология и метаболизм лимфоцитов. М.: Наука, 1986. - 124с.

138. Садыков К.Б., Смагулов З.И., Розенсон Р.И., Садыкова С.С. Кли-нико-иммунологические особенности подострого бруцеллеза// Здравоохранение Казахстана. 1992. - № 6. - С.42-43.

139. Сапов И.А., Новиков B.C. Неспецифические механизмы адаптации человека. Л.: Наука, 1984 - 221с.

140. Саркисов Д.С., Пальцин A.A. Новые данные о функциональной морфологии лейкоцитов при гнойно-септических процессах// Арх. Патол.-1992.-№ 1. С.3-8.

141. Сафронова В.М., Локтев H.A., Рак Л.А., Логвиненко О.В. Цитохимические и гематологические показатели лейкоцитов крови у крыс линии Фишер-344 в зависимости от сезона года, пола и возраста.-Ставрополь, 1985.141- 14с. Деп. в ВИНИТИ 22.04.85, № 4951-В85.

142. Сафронова В.М., Локтев H.A., Афанасьев E.H., Рак Л.А. Сравнительное изучение экспериментального бруцеллеза у белых крыс в разные сроки года. Ставрополь, 1987. - 15с. Деп. в ВИНИТИ 11.03.87, № 1758-В87.

143. Сафронова В.М., Афанасьев E.H., Руднев С.М., Рак Л.А. Цитохимическое исследование лейкоцитов периферической крови белых крыс интактных и зараженных бруцеллезом. Ставрополь, 1987. - Юс. Деп. в ВИНИТИ 11.03.87, № 1757-В87.

144. Сафронова В.М., Ляпустина Л.В., Логвиненко О.В. Цитохимическое исследование инфекционного и вакцинного процессов при экспериментальном бруцеллезе у крыс линии Fisher. Ставрополь, 1990. - 12с. Деп. в ВИНИТИ 14.04.90, № 2104-В90.

145. Сафронова В.М., Локтев H.A., Ткаченко Л.И., Логвиненко О.В., Горбунов H.A., Ширанович М.П. Функционально-метаболическая активность нейтрофилов крови при разных клинических формах бруцеллеза// ЖМЭИ. 1997. - № 1. - С.61-63.

146. Семейкин A.B., Дьяков Г.Н. Метод получения первичной культуры стромальных клеток тимуса крыс и исследование их секреторной функции // Иммунология. 1991. - № 6. - С.30-31.

147. Сиротинин Б.П. Эволюция резистентности и реактивности организма. -М., 1981. 117с.

148. Слуцкий В.В. Возрастные особенности метаболизма лимфоцитов периферической крови человека в онтогенезе в различных условиях двигательной активности. Автореф. дис. канд. мед. наук Киев, 1984. 23с.

149. Соло дун Ю.В., Осипенко И.И., Скварцова Р.Г., Репита Л.П. Мор-фофункциональная оценка иммунологичности живой бруцеллезной вакцины // ЖМЭИ. 1987. - № 8. - С.44-47.

150. Струков А.И., Пауков B.C., Кауфман О .Я. Клеточный скелет лейкоцитов в норме и патологии// Архив патологии. 1983. - № 6. - С.81-82.

151. Строганов А.П. Бруцеллез (лекции Центрального ин-та усовершенствования врачей). М, 1988. - 20с.

152. Сулейманов А.К. Клинико-иммунологические аспекты патогенеза, лечения и иммунореабилитации больных бруцеллезом. Автореф. дис.д-ра мед. наук. М., 1992. - 48с.

153. Сулейманов А.К., Ющук Н.Д., Никулин В.Н., Кузнецов В.Ф., Желудков М.М. Функциональная активность нейтрофилов периферической крови у больных хроническим бруцеллезом // ЖМЭИ. 1993. - № 4. - С.99-103.

154. Суслова Г.Ф., Шименко В.М., Нарциссов Р.П. Формирование и взаимосвязь активности некоторых дегидрогеназ при развитии крысят// Архив патологии. 1975. - № 12. - С.37-41.143

155. Сюч Н.И., Василенко И.А., Бабакова C.B. Оценка функциональной активности нейтрофилов крови человека// Тез. докл. 1 съезда иммунологов. -Новосибирск, 1992. С.469-469.

156. Таран И.Ф. К изучению некоторых особенностей патогенеза и иммуногенеза при бруцеллезной инфекции// Зоонозы.-Ставрополь, 1966. -С.74-74.

157. Таран И.Ф., Лямкин Г.И. Бруцеллез (микробиология, иммунология, эпидемиология, профилактика). Ставрополь, 1996. - 170с.

158. Ткаченко Л.И. Функционально-метаболическая активность ней-трофильных гранулоцитов у больных с различными клиническими формами бруцеллеза в процессе комплексного лечения. Автореф. дис. канд. мед. наук Ставрополь, 1995. 23 с.

159. Ташлиев А.Р., Дратвин С.Л. Изучение фагоцитарной активности нейтрофилов крови у больных с хроническими бронхитами и острыми пневмониями // Здравоохранение Туркменистана. 1984. - № 9. - С.25-27.

160. Учитель И.Я. Макрофаги в иммунитете. М., 1978. - 120с.

161. Филюкова О.Б., Снастина Т.Н., Белоцкий С.М., Марчук А.И., Ти-мин E.H., Базанова Э.Б. Стимуляция респираторного взрыва нейтрофилов здоровых людей различными концентрациями S.aureus// ЖМЭИ. 1987. - № 9. - С.58-59.

162. Хазипов Н.З., Василевский Н.М., Ионова О.П., Шошокин В.А. Фагоцитарная реакция макрофагов морских свинок, иммунизированных против бруцеллеза// Ветеринария. 1985. - № 12. - С.27-30.

163. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные подходы к оценке ос144новных этапов фагоцитарного процесса// Иммунология. 1995. - № 4. -С.3-8.

164. Ходжаев Ш.Х. Клиника рецидивов и течение бруцеллеза в иммунном организме: Автореф. дис.канд. мед. наук. М., 1960. - 24с.

165. Цитология ферментов: Пер. с англ./ Под ред. A.A. Покровского. -М.: Мир, 1971.-345с.

166. Цитохимические исследования лейкоцитов (методические рекомендации) / Под ред. В.Б. Лецкого: Л., 1973. 78с.

167. Шалыгина Н.Б., Шалыгина А.Ю., Астафьева Н.В., Габрилович Д.И. Цитохимия лимфоцитов и нейтрофилов в динамике различных форм дифтерии у взрослых// Микробиология. 1991. - № 1. - С.58-60.

168. Шафран М.Г. Миелопероксидаза нейтрофильных лейкоцитов// Успехи современной биол. 1981. - Т.92. - № 3(6). - С.365-379.

169. Штритер В.А. Материалы по иммунологии бруцеллеза. Автореф. дис. докт. мед. наук Москва, 1940. 42с.

170. Шубич М.Г., Нагоев Б.С. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии. М. 1980. -274с.

171. Шубич М.П., Примаченко Н.В., Лебедев В.В. Щелочная фосфатаза нейтрофилов в дифференциальной диагностике лептоспироза// Лаб. дело. -1983. -№ 12.-С.54-55.

172. Шубич М.Г., Авдеева М.Г., Лебедев В.В., Шмелев С.И. Особенно145сти лимфоцито-моноцито-нейтрофильных взаимодействий при разной тяжести течения лептоспироза (цитохимические исследования)// Клинич. лаб. диагностика. 1994. - № 4. - С.25-27.

173. Шурлыгина А.В., Труфакин В.А. Хронобиологические аспекты структурно-функциональной организации иммунной системы// Успехи современной биологии. 1987. - Т.104. Вып.2(5). - С.368-380.

174. Abramson I.S., Mills E.L. Depression of neutrophil function induced by viruses and its role in secondary microbiol infection// Rev. Infect. Dis. 1988. -Vol.10. - P.326-341.

175. Allisjn A.C. Role of macrophage activation in the pathogenesis of chronic inflammation and its pharmacological control// Adv. Inflam. Res. 1984. -Vol.7. -P.201-230.

176. Arai G.F., Lulu Q.R. Khatten M.I. Specific IgE responsein patients with brucellosis // Epedimial. Infec. 1990. - Vol.105, No3. - P.571-579.

177. Astaldi G., Verga Z. The glicogen content of the cells of lymphatic leukemia// Acta Haemat. 1957. - Vol.17, No3. - P. 129-136.

178. Azaye L.N., Winter A.I. Comparative protection of mice aggainst virulent attenuated strains of brucella abortus by passive transfer of immune T cells or serum// Infection and Immunity. 1990. - Vol.58, Nol. - P.254-256.

179. Azziza I., Servitie O., Pallares R., Fernandes Z. Viladrich P., Rufi G., Peyri I., Gudiol F. Characteristic Cutaneus lesions in patients with brucellosis// Archives of Dermatology. 1989. - Vol.12, - №3. - P.380-384.

180. Babior B. M., Kipnes R.S., Curnutte I.T. Biological defense of mechanism: the production of superoxide, a potential bactericidal agent// Clin. Invest. 1973. - Vol.52. - P.971-986.

181. Babior Bernard Le polynucléaire neutrophile: une arme a double tranchant// Int.Med. 1992. - No205, Suppl. - P. 120-121.

182. Baggiolini M. The enzymes of the granules of polymorphonuclear lucocytesand their functions// Enzyme. 1972. - Vol.13. - P. 132-138.146

183. Baggiolini M. Phagocyte activation and its modulation by drugs// Pharmacology of inflamation. Amsterdam, 1985. - P. 117-137.

184. Barham William B., Church Preston, Brown John E., Paparello Scott Misidentification of Brucella species with use of rapid bacterial identification system// Clin. Infect, diseases. 1993. - Vol.17, No6. - P. 1068-1069.

185. Barret A.J. The Possible role of neutrophil proteinases in damage to articular cartilage// Agent a Action. 1978. - Vol.8. - P. 11-26.

186. Borgres, Thone F., De Cree S., De Cock W. Alcaline phosphatase activity in human polymorphnonuclear leucocytes// Hystochem. 1978. - Vol.10, Nol. - P.31-43.

187. Bousetta M. Diagnostic an laboratoire de la brucellosis animale// Arch, inst, Pasteur. Tunis. 1991. - Vol.68, No3-4. - P.285-293.

188. Bjerrum Ole Weis Human neutrophyl and function with special reference to cytochrome b 599 and f32 microglobulin// Dan. Med. Bull. 1993. -Vol.40, No2.-P.163-189.

189. Bouza E., de la Torre M.J., Parras F„ Juerrero A., Rodriguez creixems EM„, Gobernado Brucellar meningits // Rev. Infect. Dis. - 1987. - V. 9, N 4. - P. \ 810-822.

190. Bucher A., Gaustad P., Pape E. Chronic neurobrucellosis due to brucella melitensis// Scand. J. Infect. 1990. - Vol.22, No2. - P.223-227.

191. Carr J. The kupfer cell. Amsterdam Elesevire north.-Holland Biomed. Prese 1978. - 118p.

192. Canning P.C., Dueoe B.L., Roth J.A. Opsonin-dependent stimulation of bovin neutrophil oxidattv metabolism by Brucella abortus // Amer. J. Vet. Res. -1988. Vol.49, No2. - P.160-163.

193. Cittadim A. Energy metabolism of isolated rat thymuscells// Mol. Cell. Biochem. 1975. - Vol.8, Nol. - P.46-57.

194. Cooper C.W. Prevalens of antibody to brucella in asymptomatic well individuals in Saudi Arabia// Trop. Med and hyg. 1992. - Vol.95, No2. - P. 140147142.

195. Cochrane C.G., Aikin B.S. Polymorphonuclear leucocytes in immunological reaction: the destruction of vascular basement membrane in vivo and in vitro/ J.Ezp. Med. 1966. - Vol 124. - P.733-752.

196. Cohn L.A. The macrophage versalive element of inflamation // Harvey Lectures. - New York, 1983. - Vol.77. - P.63-81.

197. Crosby E.S., Jlosa L., Qucsada M.M. Hemotologic changes in brucellosis// Infect. Dis. 1984. - Vol.50, No3. - P.419-422.

198. Dapino P., Dallegri F.,Sacchetti C. Induction of neutrophil respiratory burs by tumour necrosis factor- alpha, priming effect of solid phase fibronectUn and intervention of CDllb-CD18 integrins// Clin. And Exp. Immunol. 1993. -Vol.94, No3.-P.533-538.

199. Isabel Ana, Bardosa Colaco Macrofago marcadores bioquimicos e activacao // Bol.Fac.Farm.Coimbra. - 1991. - Vol.15, Nol. - P.61-83.

200. Ianbon F. Immunological practique de la brucellose// Infectiologic. -1992. -No41.-P.8-12.

201. Gallego M.C., Lapene M.A. The interaction of Brucella.melitensis 16-M and caprine polymorph onuclear leucocytes // Comp. Immunol. Microbiol. And Infect. Disease?,- 1990. Vol.13.,- No2. - P.59-65.

202. Garcia-Rosas C., Plasa A., Diaz-Espada F. Alkaline phosphatase activity as a membrane markers for activated B cells// Immunol. 1982.-Vol. 129, Nol.- P.52-55.

203. Hakim Jaeques.Pleins feux sur de polynycleaire neutrophile// Int. Med.- 1992. No205, Suppl. - P.8.-9.

204. Hayhae F.G. , Quaglino D. Haematological cytochemistry churchill livin stone. Edinburgh, London, 1980. - 374p.

205. Hubrankova Marta Dynamische studies der phagozytären leukozytenaktivitat nach der Ehposition von asbest und Basaltfasern bei ratten// Zentralbl. Hyg. und unweltmed. - 1993. - Vol.194, No3. - P.292-300.148

206. Jirillo Emilio, Decandia Pasqua, Riboud Maria Hosaria, Cannuscio Bruno, De Simone Claudio, Antonaci Salvatore// Immunopharmacol and Immunotoxicol. 1992. - Vol.14, No3. - P.343-354.

207. Kaplow L.S. A histochemical procedure for localizing and evaluating leukocyte alkaline phosphotase activity in smears of blood and marrow// Blood the j.of Hematolog. 1955. - NolO. - P.1023-1029.

208. Kaplow L.S. The relastionship of mieloperoxidaze activity to neutrophil maturity indicators of infection // Blood Cells. 1986. - Vol. 12, Nol. - P. 153165.

209. Karnovsky M.L. Metabolic basis of phagocytic basis of phagocytic activity// Physiol Rev. 1962. - Vol.42. - P. 143-168.

210. Karnovsky M.L. The metabolism of leukocytes// Leu. Hemat. 1968. -Vol.5.-P.156-165.

211. Klebanoff S.J., Clark R.A. The neutrophil function and Clinical disorders. Amsterdam, 1978. - 189p.

212. Koch C. Bactericidal activity of human neutrophil granulocytes // Acta Pathol. Microbiol. Scand. 1978. - P.266-168.

213. Kreutzer D.L., Dreytus L.A., Robertson D.C. Interaction of polymorphnonuclear leukocyte? with smooth and rough strains of Brucella abortus // Infect and immun. 1979. - Vol.23, No3. - P.737-742.

214. Kroegel C., Kapp A. Effektormechanismen und pathogenetische funktionen des eosinophilen Granulozyten// Gelben Heften. 1993. - Vol.33, No3. -P.101-117.

215. Lange S., Natterman H., Klaus C. Brucella hautalltgie beim Schaf hervorgerufen durch Yersinia enterocolitica// Monatch, Veterinarmed. - 1990. -Vol. 45, No8. - P.279-282.

216. Langermans A.M., Hasenbans W.L.W., van Furth R. // Immunol. Meth.-1994. Vol.145. - P.1588-1594.

217. Lehrer R.I. Esterases in human leukocytes// Ann Rev. Immunol.1491992. -Vol.132. -P.105-128.

218. Lubani M.M., Lulu A.R., Araj G.F., Khateeb M.J., Quortam M.A.F., Dudin K.J. Pulmonary brucellosis// The Quarterly Journal of medicine. 1989. -Vol.71, No264.-P.319-325.

219. Monginic C., Fernandez T., Turovetzky A. Comparative study of cell -immunaenzymatic method for Ig G and Ig M antibrucella antibodies in the diagnosis of human brucellosis // Appl. Bacteriol. 1990. - Nol. - P.86-92.

220. Pages M. Romain B., Campelio C., Blard J.M., Labauge R. Neurobrucelloses Train observations// Sem. hop, Paris. 1992. - Vol.66, No2'2-23. -P.650-654.

221. Plammet M. Brucellosis and immunity: humoral and cellular component in mice// 2nd Forum in microbiology " Brucella and brucellosis an update": Ann. Inst. Pasteur microbiol. 1987. - Vol.138. - P. 105-110.

222. Potasman Isreal, Even Lea, Banai Menachem, Cohen Ella, Jaffe Michael Brucellosis: an unusual diagnosis for a seronegative patient with abscesses and ulcerative cjlities// Rev. Infec. Diseases. 1991. - Vol.13, No6. - P.1039-1042.

223. Raspopin V.L., Secarbaev A. Kh., Kosenson R.I. Immunopathologic aspects of chronic brucellosis // Eur.Fed. Immunol.Soc. 10-th Meet. Edinburh, 1012 Sept., 1990. Edinburh, 1990. - P.10-36.

224. Roos D. The metabolic response to phagocytosis // The cell Biology of Inflamation. New York, 1980. - P.337-385.

225. Roussetta M. Diagnostic an laborataire de la brucellose animall// Arch. Inst. Pasteur Tunis. 1991. - Vol.68, No3-4. - P.185-193.

226. Roux I., Vaille I.L. Role de laboratoire dans le diagnostic des brucellosis // Rev. Fr. Lab. 1991. - Vol20, No.227. - P.31-35.150

227. Santos Gouzalez Jesus, Aefara Reina Consuelom Marquez Soleno Manuel, Lara Fernandez Ambrosio Brucellosis aquda, pancitopenia e hipoplasia medular// Med.Clin. 1993. - Vol.101, No 17. - P.677-678.

228. Serre A., Bascoule S., Vendrell I.P., Cannat A. Human immune response to brucella infection// Ann Inst. Pasteur /Microbiol. 1987. - Vol. 138, Nol. - P.117-120.

229. Schmidt I., Ristori J.M., Beytout J., Buissiere J.L., Maladie de Still L'adulte indeute par la brucellose ine nouvelle observatie ou// Rev. rhum, et malad, ostea artic. 1993. - Vol.60, NolO. - P.706-708.

230. Smith I.M.Mangell G.L. Brucella Species// Principle and practice of infection diseases. New York. - 1979. - P. 1772-1784.

231. Smith K.K., Oadri S.M., Hussain A. Predictive value of brucelosis in respons for the diagnosis of brucelosis in endemic areas// Med. Sei. Res. 1991. -Vol.19, No8. - P.243-244.

232. Smith Lourie D., Fichet Thomas A. Patogenesis of brucella// Transactions of the American microscopicsl Society. 1990. - Vol.109, Nol. -P.209.

233. Sollmeron J., Rodrigues Lapata M., Saimero O., Manzano L., Vagner S. Alvarez - Mon M. Impaired activity of natural killer cells inpatients with acute brucellosis// Clin. Infect. Dis. - 1992. - Vol. 15, No5. - 164-110.

234. Sorcin E., Stecker V.l., Bornel I.L. Chemotaxis of leukocytes and inflammation/'/ Series Haematol. 1970. - Vol.3. - P. 131-162.

235. Susano Rue, Fecno Jose, Telenti Mauricio, Moreno Alfonso Brucella abortus y ofectacin miocardia// Enferm infect y microbiol clin. 1993. - No6. -P.340-341.

236. Spink W.W. The nature of brucellosis// Mineapolis, university Mine-sota press. 1956. - 464p.

237. Tobias L., Cordes D.O., Schurig G.G. Placental pathology of the pregnant mouse inoculated with Brucella abortus strain 2308// Vet. pathol. 1993.151-Vol.30, No2. P. 119-129.

238. Zeya H.J., Spitznagel J.K. The production of complement by mononuclear cells from guinea pig lungs// Lab. Investin. 1968. - Vol.24, No3. - P.229-336

239. Watson Fiona, Robinson Jonh, Edwards Steven W. Neutrophil function in whole blood and after purification: Change in receptor expression, oxidase activity and responsiveness to cytokines// Biosci.Rept. 1992. - Vol.12, No2. -P. 123-133.

240. Young E.I., Borcher M., Kreutzer F.L., Musher D.M. Phagocytosis killing of Brucella by human polymorphonuclear leukocytes// Infect. £>is. 1985. - No4. - P.682-690.

241. Young E.I., Gomes C.I., Yewn D.H., Musher D.M. Compurision of Brucella abortus and Brucella melitensis infections of mice and their effect on auqired cellular resistance// Infect.Immun. 1979. - Vol.26, No2. - P.655-680.