Экспериментальное исследование влияния больших доз аскорбиновой кислоты на возраст - зависимое содержание биополимеров в органах и тканях.

Шаехмуллина, Айгуль Разифовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Экспериментальное исследование влияния больших доз аскорбиновой кислоты на возраст - зависимое содержание биополимеров в органах и тканях.
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Экспериментальное исследование влияния больших доз аскорбиновой кислоты на возраст - зависимое содержание биополимеров в органах и тканях."

На правах рукописи

Шаехмуллина Айгуль Разифовна

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ БОЛЬШИХ ДОЗ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ НА ВОЗРАСТ-ЗАВИСИМОЕ СОДЕРЖАНИЕ БИОПОЛИМЕРОВ В ОРГАНАХ И ТКАНЯХ

03.00.04 - Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Уфа-2008

Работа выполнена в Институте нефтехимии и катализа Российской академии наук

Научный руководитель:

доктор биологических наук, профессор Башкатов Сергей Александрович

Официальные

доктор медицинских наук, профессор Шараев Петр Низамиевич

оппоненты:

доктор медицицинских наук, профессор Никоноров Александр Александрович

Ведущая организация:

ГОУ ВПО «Челябинская государственная медицинская академия Росздрава»

Защита диссертации состоится <<

» »¿¿^¿^ 2008 г. в и/О

» на заседании

диссертационного совета Д 208 006 03 в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу. 450000, г Уфа-центр, Ленина, 3

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»

Автореферат разослан » г

Ученый секретарь диссертационного совета,

доктор медицинских наук, профессор Мирсаева Г.Х

Общая характеристика работы

Актуальность темы. На сегодняшний день не существует однозначного мнения о биохимических механизмах старения и их регуляции (Анисимов В И, 2003, Киселев JIJI, 2000, Bohr V А, 2002) Многочисленные данные литературных источников констатируют наличие возрастных изменений концентраций низко- и высокомолекулярных эндогенных соединений в органах и тканях организма человека и животных, при этом наблюдения авторов фрагментарны и часто противоречат друг другу Известно, что внешние и внутренние проявления старения, с позиций медицинской биохимии, обусловлены изменением количественного и качественного состава биополимеров межклеточного вещества (матрикса) соединительной ткани органов, основными из которых являются гликозаминогликаны (ГАГ) (Зимницкий А Н, Башкатов С А, 2004) С возрастом изменяется фракционный состав ГАГ, прежде всего, за счет уменьшения доли гиалуроновой кислоты (ГК), что, в частности, приводит к уменьшению влагоудерживающих возможностей тканей и внешне проявляется снижением их тургора и пастозностью

Отметим, что ГАГ метаболизируются в глюкуронат-ксилулозном метаболическом цикле (ГКЦ) (Дегли С, Никосон Д, 1973), и для замедления процессов старения представляется обоснованным в разумных пределах оптимизировать процессы метаболизма гликозаминогликанов Представляется весьма вероятным, что этого эффекта можно добиться за счет нагрузки ГКЦ продуктами метаболизма гликозаминогликанов, что по механизму обратной связи обеспечит изменение обмена этих полисахаридов и, как следствие, протеогликанов Наиболее перспективным кандидатом на роль такого метаболита выступает аскорбиновая кислота Применяя аскорбиновую кислоту в больших дозах, можно замедлить процессы старения (Pauling L, 1979)

числе человека) и морских свинок аскорбиновая кислота не синтезируется из-за отсутствия двух специфических ферментов ГКЦ (L-гулонат гулоно-у-лактонгидролазы (альдонолактоназы) 3 1 1 18 и гулоно-у-лактон кислород-оксидоредуктазы (L-гулонолактоноксидазы) 113 8 (Дэгли С, Николсон Д, 1973) Она относится к витаминам, однако, по механизму своего действия является типичным физиологическим метаболитом

Катаболизм гликозаминогликанов с образованием аскорбиновой кислоты у крыс протекает также в глюкуронат-ксилулозном цикле, поэтому представляется вероятным, что нагрузка этого цикла большим количеством АК должна замедлить катаболизм ГАГ, замедляя процессы старения, и направить основной предшественник их синтеза - УДФ-глюкуроновую кислоту в реакции глюкуро-нидной конъюгации, обеспечивающие процессы детоксикации в организме и тем самым повысить его неспецифическую резистентность В качестве уровней однократного воздействия аскорбиновой кислоты нами были выбраны дозы 100 и 500 мг/кг, превышающие нормальный биосинтез этого метаболита у крыс соответственно в 2 и 10 раз и не вызывающие летальных эффектов, что не противоречит основным фармакологическим принципам испытания биологической активности веществ В указанной связи следует отметить, что в фармакологических исследованиях часто используются дозы 1/10 - 1/30 от уровня средне-смертельного воздействия, то есть от DL50

К эмпирическим предпосылкам настоящей работы можно отнести экспериментальные данные о фармакологической эффективности больших дозировок аскорбиновой кислоты, полученные дважды лауреатом Нобелевской премии Лайнусом Полингом и опубликованные им в работах «Витамин С и простуда» (Pauling L, 1976) и «Рак и витамин С» (Paulmg L , 1979) В этих книгах Л Полинг отмечал, что систематическое применение больших доз аскорбиновой кислоты улучшает состояние больных На наш взгляд, это заключение свидетельствует в пользу доводов о повышении аскорбиновой кислотой неспецифической резистентности организма

Таким образом, выбирая аскорбиновую кислоту в качестве средства, модулирующего обмен веществ, можно решить следующие задачи, а именно предложить новые подходы к геропротекции путем регуляции обмена веществ нормальными метаболитами на примере аскорбиновой кислоты для аскорбат-независимого вида (крыс) и сделать с учетом полученных результатов и сведений научной литературы теоретическую попытку экстраполировать полученные результаты на аскорбат-зависимые виды, в том числе человека

По данным физиологических и биохимических исследований (Рашидов Н.Р , 2002), скорость старения организма обратно пропорциональна эффективности функционирования его печени С состоянием печени напрямую связан обмен различных биополимеров - липопротеинов (Конопля Е Ф, Лукша Г М, 1991, Коркуиасо О В и др ,1993, Королевская Л И и др, 2003, Кустаров В Н, Черниченко И И, 2003), нуклеиновых кислот (Сергеев П В идр,1982), проте-огликанов, гликопротеинов (Зимницкий А Н , Башкатов С А, 2006, Зимницкий А Н, Башкатов С А, 2005)

Подводя итог вышеуказанному, отметим, что необходимым условием прогнозирования геропротекторного эффекта у аскорбиновой кислоты является доказательство ее способности проявлять антагонизм в отношении возраст-зависимых сдвигов биохимических показателей и, прежде всего, снижения содержания в органах и тканях гиалуроновой кислоты

Цель исследования. Оценить влияние возраста и аскорбиновой кислоты на содержание нуклеиновых кислот, белково-липопротеиновый состав крови, содержание гликозаминогликанов и их фракционный состав в органах и тканях крыс различного возраста Задачи:

1 Определить содержание гликозаминогликанов и их фракций (гиалуроновой кислоты, хондроитин- и гепарансульфатов) в печени, головном мозге и коже крыс различного возраста

2 Изучить возрастные особенности содержания нуклеиновых кислот в органах и белково-липопротеиновый состав крови крыс различного возраста

3 Изучить влияние больших доз аскорбиновой кислоты на спектр гликоза-миногликанов и их фракций (гиалуроновой кислоты, хондроитин- и гепа-рансульфатов) в печени, головном мозге и коже крыс различного возраста

4 Оценить влияние больших доз аскорбиновой кислоты на содержание нуклеиновых кислот в органах и белково-липопротеиновый состав крови крыс различного возраста

5 Оценить возможность использования показателей гликозаминогликанов в качестве биохимических маркеров возрастных изменений организма Научная новизна. Проведенные исследования позволили существенно

расширить представления о патохимических процессах старения организма и биохимических механизмах, лежащих в основе фармакологических эффектов аскорбиновой кислоты Показано, что с возрастом в органах и тканях подопытных крыс уменьшается уровень гиалуроновой кислоты и возрастает содержание сульфатированных гликозаминогликанов - хондроитин- и гепарансульфатов, а в сыворотке крови крыс - повышается содержание общего белка, р-липопротеинов и снижается уровень альбумина и а-липопротеинов Впервые установлено, что в организме стареющих белых неинбредных крыс аскорбиновая кислота в дозах 100 мг/кг и 500 мг/кг способствует уменьшению содержания гликозаминогликанов в органах и тканях крыс, и повышению содержания нуклеиновых кислот в печени В этих же дозах аскорбиновая кислота проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты, способствуя повышению ее содержания в органах и тканях крыс, и уменьшению концентрации сульфатированных ГАГ - хондроитин- и гепарансульфатов

Научно-практическая значимость выполненного исследования заключается в том, что гиалуроновая кислота, но не суммарные гликозаминогликаны, может выступать в качестве биохимического маркера интенсивности процессов старения организма Практически продемонстрировано, что физиологический метаболит (в нашем случае аскорбиновая кислота) может быть использован для биохимического регулирования обмена биополимеров в организме Представ-

ляются перспективными дальнейшие исследования аскорбиновой кислоты в качестве средства, влияющего на количественный и качественный состав гди-козаминогликанов в органах и тканях

Внедрение результатов исследования. Результаты проведенного исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах фармакологии №1 и №2 ГОУ ВПО «БГМУ Росздрава»

Основные положения, выносимые на защиту.

1 С возрастом наблюдается уменьшение соотношений несульфатированные сульфатированные гликозаминогликаны, альбумин общий белок, а-липопротеины р-липопротеины

2 Аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты в органах и тканях крыс, а также содержания альбуминовой и а-липопротеиновой фракций сыворотки крови

3. Применение аскорбиновой кислоты в дозах 100 и 500 мг/кг способствует повышению содержания нуклеиновых кислот в печени

4 Представляется перспективным изучение аскорбиновой кислоты в качестве потенциального геропротекгора

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Всероссийских научно-практических конференциях «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Уфа, 2006, 2007), на V Международной научно-практической конференции «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных» (Пенза, 2007), на XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2007), на научной конференции аспирантов и молодых ученых «Молодежь, образование, наука» (Уфа, 2007), на научном семинаре Института нефтехимии и катализа РАН (Уфа, 2007)

По теме диссертации опубликовано 7 - работ, в том числе 1 в издании, рекомендованном ВАК

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 166 страницах, содержит 82 таблицы, 39 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы, включающего 335 источников, из которых 137 отечественных и 198 иностранных авторов и приложения.

Содержание работы

Материалы и методы исследования. Основным объектом исследования настоящей работы были следующие биохимические показатели белых неин-бредных крыс в возрасте 1, 3, 6, 12 и 18 месяцев содержание гликозаминогли-канов и их фракций (гиалуроновой кислоты и сульфатированных гликозами-ногликанов), нуклеиновых кислот в головном мозге, печени и коже, белковые и липопротеиновые фракции сыворотки крови В качестве предмета исследования выступало изучение влияния больших дозировок аскорбиновой кислоты, введенных внутрижелудочно, на возрастную динамику вышеуказанных биохимических показателей

Основные эксперименты были выполнены в осенне-зимний период на 560 белых неинбредных крысах различного возраста Животных содержали на стандартном рационе вивария Условия проведения экспериментов для всех групп были идентичными Эксперименты выполняли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08 1977 № 755) АК вводили в дозах 100 или 500 мг/кг внутрижелудочно 1 раз в сутки в течение двух недель крысам 12 и 18 месячного возраста После этого в головном мозге, печени и коже крыс определяли биохимические показатели В качестве базовых биохимических методик для определения гликозаминогликанов, их фракций и нуклеиновых кислот были использованы гельфильтрация на се-фадексе G-25 и анионообменная хроматография на DEAE-целлюлозе (Зимниц-кий А H, Башкатов С А, 2004), электрофоретическое определение фракционного состава белков и липопротеинов сыворотки крови При обработке полу-

ченных данных рассчитывали средние значения, стандартные отклонения, вычисляли ^критерий Стьюдента для независимых выборок, применяли однофак-торный дисперсионный анализ

Результаты исследования. Изучение влияния возраста на суммарное содержание ГАГ и их фракций (ГК, ХС и ГС) в головном мозге, печени и коже подопытных крыс показало (табл. 1), что во всех органах суммарное содержание ГАГ увеличивалось к 18-месячному возрасту (р<0,01) При этом возрастало содержание их сульфатированных фракций - ХС и ГС (р<0,01) (табл2 и 3) Уровень ГК, наоборот, падал, достигая минимума у 18-месячных животных (р<0,001) Наиболее выраженные изменения наблюдались в печени (рис 1) Полученные данные свидетельствуют о перераспределении фракционного состава ГАГ в сторону сульфатированных гликанов

Таблица 1 - Содержание гиалуроновой кислоты (мкг/г ткани) в органах и __тканях крыс различного возраста, М±т_

Возраст, мес. п Орган

Мозг Печень Кожа

1 8 11,15 ±6,11 17,6±9,88 5,64±2,89

3 6 12,78 ±3,71 18,77±3,82* 13,75±3,71*

6 6 8,40±3,81 5,43±3,05* 5,53±1,6

12 6 7,02±2,23 3,98±1,46* 3,92±1,52

18 6 7,28±2,53 1,78±0,65* 1,93±0,45*

Примечание: здесь и далее *- значения статистически значимы (р< 0,05) с группой «1 месяц»

Таблица 2 - Содержание хондроитинсульфатов (мкг/г ткани) в органах и тканях крыс различного возраста, М±т

Возраст, мес. п Орган

Мозг Печень Кожа

1 8 25,35±5,59 20,31±4,82 24,58±12,39

3 6 18,07±2,37* 10,85±3,50* 10,22±3,69*

6 6 22,25±7,45 11,15±3,70 * 23,37±9,70

12 6 28,5±2,82 28,70±10,64 30,37±5,58

18 6 30,27±3,43 32,82±7,32* 39,40±1,16*

Таблица 3 - Содержание гепарансульфатов (мкг/г ткани) в органах и тка-_ нях крыс различного возраста, М±ш_

Возраст, n Орган

мес. Мозг Печень Кожа

1 8 10,03±4,09 7,88±2,59 13,51±6,34

3 6 5,32±0,60 15,00±2,13* 13,45±3,72

6 б 7,97±3,00 14,28±2,62* 16,22±4,54

12 6 18,77±3,19* 17,98±2,68* 20,63±2,33*

18 6 23,05±2,29* 21,28±2,65* 23,43±2,10*

30 25 20

м I-

-с 15 и

л" 10 х Ф У

"> 5 с °

-10

Рис. 1. Влияние возраста на содержание гиалуроновой кислоты в печени крыс

Результаты исследования влияния аскорбиновой кислоты на суммарное содержание ГАГ и их фракций (ГК, ХС и ГС) в головном мозге, печени и коже 12-месячных крыс (табл 4) продемонстрировали следующие закономерности Суммарное содержание ГАГ уменьшалось только в головном мозге (р<0,05) Уровень ХС и ГС снижался (р<0,01) во всех исследованных органах, а ГК, наоборот, увеличивался (р<0,001) (рис 2). Из этого можно сделать вывод о перераспределении фракционного состава ГАГ под действием АК в сторону не-сульфатированных гликанов

Bo3p, LS Means Current effect F(4, 27)=13,835, p=,000001 Effective hypothesis decomposition Vertical bars denote 0,95 confidence intervals

1 3 6 12 18

Возраст, мес

Таблица 4 - Содержание гиалуроновой кислоты (мкг/г ткани) в органах 12-месячных крыс, получавших различные дозы аскорбиновой кислоты,

М±т

Доза a Орган

Мозг Печень Кожа

0 6 7,02±2,23 3,98±1,46 3,92±1,52

100 6 10,10±1,06* 11,30±2,47* 6,96±2,12*

500 6 10,20±1,33* 14,63±1,44* 9,33±0,67*

Примечание: здесь и далее *- значения статистически значимы (р< 0,05) с контрольной группой

t— г

J0 X

У 0} с

Аскорбиновая кислота, мг/кг

Рис. 2. Влияние аскорбиновой кислоты на уровень гиалуроновой кислоты в печени крыс в возрасте 12 месяцев

Ack k-Ta", LS Means Current effect F(2,15)=51,963, p=,000001 Effective hypothesis decomposition Vertical bars denote 0,95 confidence intervals 18 |---.-

5,5 50 45 £ 40 35

л" 3,0 £

1 25 £ 2,0

1,5

1,0

0,5

0 100 500

Аскорбиновая кислота, мг/кг

Рис. 3. Влияние аскорбиновой кислоты на уровень гиалуроновой кислоты в печени крыс в возрасте 18 месяцев

Результаты изучения влияния возраста на суммарное содержание ГАГ и их фракций (ГК, ХС и ГС) в головном мозге, печени и коже 18-месячных крыс (табл. 5) выявили следующие закономерности Содержание ГАГ уменьшалось в печени и коже (р<0,05) Уровень ХС и ГС снижался во всех органах (р<0,05), а ГК, наоборот, повышался (р<0,001) (рис 3) Таким образом, и у крыс более старшего возраста аскорбиновая кислота проявляет однонаправленный метаболический эффект в сторону повышения несульфатированных гликанов

Таблица 5 - Содержание гиалуроновой кислоты (мкг/г ткани) в органах 18-месячных крыс, получавших различные дозы аскорбиновой кислоты,

М±ш

Доза n Орган

Мозг Печень Кожа

0 6 7,28±2,53 1,78±0,65 1,93±0,45

100 6 7,95±1,82 3,50±0,66* 4,58±0,97*

500 6 8,60±1,39 4,43±0,71* 6,28±2,67*

"Ack K-Ta" LS Means

Current effect F(2,15)=23,978, p=,00002 Effective hypothesis decomposition Vertical bars denote 0,95 confidence intervals

Таблица 6 - Фракционный состав белков (%) сыворотки крови крыс раз-

личного возраста, п=б, М±ш

Возраст, БЕЛКИ

мес. Общ.белок Альбум. а-1 глоб. а-2 глоб. В-глоб. Y-глоб.

1 53,37±5,50 51,85±2,68 4,92±0,90 9,85±1,20 13,07±1,92 20,33±3,68

3 51,78±2,41 52,22±1,93 4,85±0,77 10,22±1,35 13,08±2,15 19,65±2,36

6 58Д0±1,57 50,32±2,08 3,87±0,73* 10,83±1,64 13,93±1,69 Г 21,42±2,96

12 71,92±8,00* 40,88±3,37* 4,55±2,44 11,57±2,42 17,03±3,11* 27,40±5,88*

18 84,67±4,84* 44,95±2,66* 2,87±0,63* 12,38±2,01* 17,73±3,37* 22,30±5,98

Таблица 7 - Фракционный состав липопротеинов (%) сыворотки крови

крыс различного возраста, М±т

Возраст, мес. п ЛИПОПРОТЕИНЫ

а-лип. al -лип преВ-лип. lî-лип.

1 8 43,07±21,77 8,03±2,38 12,02±4,84 43,70±19,39

3 б 45,90±15,07_j 3,77±1,25 * 12,33±2,80 41,60±12,89

6 б 41,83±14,21 8,48±4,91 22,22±8,23 * 36,78±15,69

12 б 51,93±7,83 8,68±2,26 15,22±3,99 31,27±9,82

18 6 28,62±7,02 7,28±3,44 21,99±8,66 * 46,25±2,40

Возр, LS Means Current effect F(4,25)=46 862, p=,00000 Effective hypothesis decomposition Vertical bars denote 0,95 confidence intervals

95 90 85 80 75

0 70

1 65

ID 60 О

55 50 45 40

1 3 6 12 18

Возраст, мес

Рис. 4. Влияние возраста на содержание общего белка в сыворотке крови крыс

С возрастом изменялось содержание белковых и липопротеиновых фракций в сыворотке крови крыс (табл 6 и 7) Так, содержание общего белка (рис 4) и а2-глобулинов повышалось (р<0,001), а альбуминов - снижалось (р<0,001) Влияние аскорбиновой кислоты на биохимические показатели в сыворотке крови 12- и 18-месячных крыс выражалось в снижении уровня Р-липопротеинов (р<0,01) и повышении а-липопротеинов (р<0,01)

Определение нуклеиновых кислот позволило установить (табл 8) умеренное снижение их концентрации в тканях кишечника, мозга и сердца (р<0,05) В легких уровень НК был достаточно стабильным Однако в печени обе дозировки аскорбиновой кислоты и 100, и 500 мг/кг увеличивали их содержание (р<0,01) По нашему мнению, это можно объяснить повышением интенсивности синтетических процессов в организме.

Таблица 8 - Содержание нуклеиновых кислот (мкг/г ткани) в органах

крыс, получавших различные дозы аскорбиновой кислоты, М±ш

Доза, мг/кг п Орган

Кишечник Легкие Мозг Печень Сердце

0 б 811+76 642+50 411±50 534±65 464±77

100 6 676±63* 651±47 292±35* 1127±143* 422±70

500 6 520±49* 542±39* 350±42* 1025+130* 325+54*

Обсуждение полученных результатов. Теоретической основой выполненной работы было предположение о способности аскорбиновой кислоты в больших дозировках ингибировать обмен гликозаминогликанов в организме аскорбат-независимых видов и тем самым замедлять интенсивность процессов старения При проведении экспериментальных исследований нами было обнаружено, что с возрастом у подопытных крыс в органах уменьшается содержание несульфатированных ГАГ (гиалуроновой кислоты) и повышается уровень сульфатированных ГАГ (хондроитин- и гепарансульфатов) Напомним, что основная функция ГК - формирование протеогликановых комплексов, представляющих собой основные структурообразующие единицы межклеточного мат-рикса Представляется важным, что обмен ГАГ протекает чрезвычайно интенсивно Так, период полужизни молекул ГК составляет в зависимости от ткани

всего от 2 до 5 суток Недостаток ГК и избыток СГАГ неизбежно ведет к нарушению морфологических (пастозность, сморщивание) и физиологических свойств органов и тканей На фоне уменьшения соотношения ГК СГАГ в органах нами наблюдалось в сыворотке крови уменьшение содержания альбумина и а-липопротеинов, сопровождающееся ростом уровня (5-липопротеинов

Известно, что альбумин - в количественном отношении наибольшая и самая однородная фракция белков плазмы В организме альбумин выполняет следующие функции транспортную, регулятора коллоидно-осмотического давления плазмы, белкового резерва организма Одной из основных особенностей альбумина является способность связывать большое число различных соединений Среди этих соединений - жирные кислоты, стероиды, билирубин, гемин, органические красители, лекарственные препараты (сапицилаты, сульфаниламиды, барбитураты, антибиотики), ионы кальция, меди и другие Из сказанного следует, что снижение концентрации альбумина в крови неизбежно ведет к неблагоприятным для организма последствиям

Обсуждая констатированное нами возраст-зависимое уменьшение соотношения а-липопротеины Р-липопротеины отметим, что в настоящее время выделяют четыре основных класса ЛП, отличающихся по размеру, удельному весу (плотности), подвижности при электрофорезе, содержанию ХСТ и ТГ, а также по составу апопротеинов- хиломикроны (ХМ), липротеины очень низкой плотности (ЛПОНП) или пре-бета-липопротеины, липопротеины низкой плотности (ЛПНП) или бета-липопротеины, липопротеины высокой плотности (ЛПВП) или альфа-липопротеины (Ларский Э Г, 1971) ЛПОНП синтезируются в печени Повышение ЛПОНП увеличивает вероятность развития атеросклероза ЛПНП также синтезируются в печени и являются основным холесте-ринсодержащим классом ЛП, на долю которого приходится около 70% общего ХСТ плазмы крови Физиологическая роль ЛПНП заключается в транспорте ХСТ к его "потребителям", в основном к надпочечникам, другим эндокринным органам и к самой печени. Окисленные формы ЛПНП инициируют формирование атеросклеротической бляшки ЛПВП представляют собой небольшие час-

тицы, богатые фосфолипидами и белками. Они синтезируются преимущественно в печени и в тонком кишечнике Основная роль ЛПВП заключается в эвакуации избытка ХСТ из сосудистой стенки и других тканей Предполагается, что ЛПВП обладают протекторным эффектом за счет благоприятного влияния на функции эндотелия и предупреждения образования окисленных форм ЛПНП Нами установлено, что с возрастом снижается уровень а-ЛП (ЛПВП) и повышается уровень |3-ЛП (ЛПНП), что приведет к неблагоприятным последствиям Полученные нами данные и их анализ позволяют считать доказанным первое положение, вынесенное нами на защиту «С возрастом наблюдается уменьшение соотношений несульфатированные сульфатированные гликоза-миногликаны, альбумин общий белок, а-липопротеины (3-липопротеины»

В биохимических исследованиях ГАГ и их фракции (ГК, ХС и ГС) традиционно определяют по содержанию в них уроновых кислот Вместе с тем в природе существуют и другие соединения, в той или иной степени модулирующие цветную реакцию Дише на уроновые кислоты. Большинство фракций ГАГ состоят из повторяющихся дисахаридов, включающих уроновую кислоту и аминосахар, поэтому дня повышения надежности результатов наших исследований мы определили в составе наших образцов и гексозамины (аминосахара по установившейся терминологии) Среди сульфатированных ГАГ имеется фракция, не содержащая уроновые кислоты Это - так называемые нейтральные ГАГ - кератансульфаты Для их регистрации в составе сульфатированных ГАГ мы определили незамещенные моносахариды (нейтральные сахара) Обращает на себя внимание, что все три биохимические методики определения фракционного состава ГАГ (по уроновым кислотам, по амино- и нейтральным саха-рам) дали сходные результаты, что усиливает доказательную базу нашего исследования

Подчеркнем, что печень и кожа являются органами, выполняющими значительный объем синтеза гликозаминогликанов В наших исследованиях именно в печени и коже аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг ингиби-ровала биосинтез гликозаминогликанов и их фракций В этих же дозах АК по-

вышала концентрацию нуклеиновых кислот, а также альбуминовой и а-липопротеиновой фракций сыворотки крови, что позволяет считать доказанным второе положение, вынесенное на защиту, а именно «Аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты в органах и тканях крыс, а также альбуминовой и а-липопротеиновой фракций сыворотки крови»

В печени экспериментальных животных повышался уровень нуклеиновых кислот, очевидно, за счет рибонуклеиновой их доли Полученные результаты позволяют принять третье положение, выносимое на защиту «Применение аскорбиновой кислоты в дозах 100 и 500 мг/кг способствует повышению содержания нуклеиновых кислот»

Вместе с тем, логично обсудить эти результаты в части их согласованности с данными других авторов и возможности прогнозирования получения сходных эффектов от применения аскорбиновой кислоты на аскорбат-зависимых видах животных, в том числе и человеке

Так, по данным Spmdler К Р etal (1989), аскорбиновая кислота в концентрации 50 мкг/мл в культуре клеток костной и хрящевой тканей крыс на 21% увеличивала синтез ДНК, на 50-60% - коллагена и не влияла на интенсивность синтеза сульфатировнных гликозаминогликанов Schwartz E.R, Adamy L (1988) констатировали, что аскорбиновая кислота в той же концентрации в культуре клеток хондроцитов человека повышала интенсивность синтеза сульфатирова-ных ГАГ, оцениваемый по включению 358-сульфата на мг ДНК Levene С I, Bates С J (1970) изучали влияние аскорбиновой кислоты в близкой к вышеуказанной дозировке на синтез коллагена и гликозаминогликанов в культуре клеток фибробластов мышей, при этом авторы отмечали увеличение анаболизма коллагена, но не ГАГ. Zhou L, Higginbotham Е J, Yue В У (1998) исследовали влияние аскорбиновой кислоты в концентрациях 100 и 250 мкг/мл на уровень фибронектина, ламинина и коллагена в культуре хрящевой ткани быка, и констатировали увеличение всех трех показателей под воздействием обеих дозировок аскорбиновой кислоты

Таким образом, по нашим данным и по указанным сведениям литературы, аскорбиновая кислота увеличивает биосинтез нуклеиновых кислот Однако, в отличие от авторов, наблюдавших увеличение или неизменность синтеза ГАГ, мы, наоборот, наблюдали его угнетение Это явление можно объяснить тем, что в наших исследованиях концентрация аскорбиновой кислоты в органах и тканях была существенно выше и по механизму отрицательной обратной связи, который широко распространен в метаболических процессах, замедляла биосинтез ГАГ Интересно, что Spindler КР (1989) в качестве объекта для исследования метаболических эффектов аскорбиновой кислоты выбрали, как и мы, ткани крысы, которая является аскорбат-независимым видом Вышеупомянутые Levene С I, Bates С J изучали влияние аскорбиновой кислоты на ткани мышей, также принадлежащих к аскорбат-независимым видам животных Zhou L , Higginbotham Е J, Yue В Y также работали с аскорбиновой кислотой на культуре клеток аскорбат-независимого вида (быка) в концентрациях 100 и 250 мгк/мл (1998) Представляется важным, что последнее исследование по уровню воздействия аскорбиновой кислоты приближается к нашей модели Так, мы наблюдали биологические эффекты АК в дозах 100 и 500 мг/кг, что при экстраполяции на культуру ткани составит соответственно 100 и 500 мгк/мл

Очевидно, что эти авторы, также как и мы, рассматривают биологические эффекты аскорбиновой кислоты с позиций ее участия в биохимических реакциях как нормального метаболита, а не витамина Это согласуется с мнением известного отечественного биохимика Бышевского А Ш (1994), относящего к витаминам низкомолекулярные органические вещества, выполняющие в организме в малых количествах пластические функции и не синтезирующиеся в нем Иными словами, аскорбиновая кислота по уровню ее потребления организмом аскорбат-зависимых видов существенно превышает критерии, характерные для других витаминов, и может рассматриваться в качестве нормального метаболита

В большой обзорной статье González М J (2005) отмечается, что цитоста-тическое действие витамина С было и остается предметом больших дискуссий,

вместе с тем, авторы не сомневаются в научной обоснованности полезности аскорбиновой кислоты, по крайней мере, как вспомогательного средства медикаментозной помощи онкологическим больным

Завершая обсуждение полученных нами результатов, отметим, что, очевидно, аскорбиновая кислота в антискорбутных дозах обеспечивает весь комплекс биохимических реакций, описанный классической медицинской биохимией При повышенных уровнях ее воздействия начинают наблюдаться эффекты повышения неспецифической резистентности организма к неблагоприятным воздействиям со стороны окружающей и внутренней среды за счет экономии и перераспределения фонда УДФ-глюкуроновой кислоты, которая в меньшей степени расходуется при биосинтезе ГАГ и может быть использована в реакциях глюкуронвдной конъюгации

С учетом вышеизложенного, можно объяснить антагонизм аскорбиновой кислоты в отношении возраст-зависимых изменений содержания гликозами-ногликанов следующим образом По-видимому, в процессе старения генетически запрограммировано снижение уровня ГК в тканях и повышение ХС и ГС Это происходит на фоне нарушения функционирования многочисленных биохимических, клеточных и физиологических систем организма Введение больших доз АК замедляет функционирование глюкуронат-ксилулозного цикла, что приводит к снижению интенсивности биосинтеза ГАГ на фоне повышения интенсивности реакций глюкуронидной конъюгации, косвенным подтверждением которой выступает обнаруженное нами под действием АК повышение уровня нуклеиновых кислот в печени

Комментируя потенциальную практическую значимость полученных результатов и четвертое положение, вынесенное на защиту «Представляется перспективным изучение аскорбиновой кислоты в качестве потенциального геро-протектора», отметим, что можно провести определенные параллели между возрастными группами подопытных животных и периодизацией жизни человека

Выводы

1 С возрастом в головном мозге, печени и коже крыс уменьшается уровень гиалуроновой кислоты и возрастает содержание сульфатированных гли-козаминогликанов - хондроитин- и гепарансульфатов

2 В сыворотке крови крыс с возрастом повышается содержание общего белка, |3-липопротеинов, снижается уровень альбумина и а-липопротеинов.

3 Применение аскорбиновой кислоты в дозах 100 и 500 мг/кг способствует уменьшению содержания гликозаминогликанов в головном мозге, печени, коже крыс и повышению концентрации нуклеиновых кислот в печени

4 Аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты, способствуя повышению ее содержания в органах и тканях крыс, и уменьшению концентрации сульфатированных ГАГ - хондроитин- и гепарансульфатов

5 Содержание гиалуроновой кислоты в тканях, но не суммарные гликоза-миногликаны, можно считать потенциальным биохимическим маркером возраст-зависмых изменений в организме

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1 Башкатов, С А Экспериментальная геропротекция аскорбиновой кислотой / С.А Башкатов, А Р Шаехмуллина, О Е. Ерофеева И Медицинская наука и образование Урала - 2007 -№5 (49) - С 4-7

2 Шаехмуллина, А Р Влияние аскорбиновой кислоты на возрастную динамику содержания гликозаминогликанов в организме /АР Шаехмуллина, С А Башкатов, Т И Парфенова, Р Ш Суфиярова // Материалы V Международной научно - практической конференция «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных» -Пенза,2007 -С.-163-165

3 Шаехмуллина, А Р Большие дозы аскорбиновой кислоты как важный фактор замедления старения организма и сохранения его продуктивности /АР Шаехмуллина, С А Башкатов, Т И Парфенова, Р Ш Суфиярова // Материалы Всероссийской научно - практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» - Уфа, 2007 - С 240-242

4 Шаехмуллина, А Р Возрастная динамика содержания гликозаминоглика-нов в печени крыс и ее модуляция метаболитами глюкуронат - ксилулоз-ного цикла /АР Шаехмуллина // Материалы XII Всероссийской научно -практической конференция «Молодые ученые в медицине» - Казань, 2007 -С229-230

5 Шаехмуллина, А Р Аскорбиновая кислота как важный фактор замедления старения организма /АР Шаехмуллина // Материалы научной конференции аспирантов и молодых ученых «Молодежь, образование, наука» -Уфа,2007 -С48-50

6 Шаехмуллина, А Р Новый подход к оценке биологического возраста / А Р Шаехмуллина, С А Башкатов, Т И Парфенова, Р Ш Суфиярова // Материалы Всероссийской научно - практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» - Уфа, 2006 -С116-117

7 Петренко, ЕГ. Использование белковых фракции в качестве маркеров при совместном элекгрофоретическом определении белков и липопро-теинов сыворотки крови / Е Г Петренко, С А Башкатов, А Н Зимниц-кий, А Р Шаехмуллина // Материалы Всероссийской научно - практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» -Уфа, 2006 - С.84-86

Список сокращений

• АК - аскорбиновая кислота

• ГАГ - гликозаминогликаны

• ГК - гиалуроновая кислота

• ГКЦ - глюкуронат-ксилулозный цикл

• ГС - гепарансульфаты

• ЛП -липопротеины

• ЛПОНП - липопротеины очень низкой плотности

• ЛПНП - липопротеины низкой плотности

• ЛПВП - липопротеины высокой плотности

• НК - нуклеиновые кислоты

• СГАГ - сульфатированные гликозаминогликаны

• ТГ - триглицериды

• ХС - хондроитинсульфаты

• ХСТ - холестерин

Шаехмуллина Айгуль Разифовна

03 00 04-Биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Лицензия № 0177 от 10 06 1996 г Подписано в печать 04 04 2008 г Бумага офсетная Отпечатано на ризографе Формат 60x84 1/16 Уел -печ листов 1,5 Уч -изд л 1,7 Тираж 100 экз Заказ № 184

450000, г Уфа, ул Ленина, 3, ГОУ ВПО «Башгосмедуниверситет Росздрава»

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Шаехмуллина, Айгуль Разифовна

03.00.04 - Биохимия

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор С.А. Башкатов

На правах рукописи

Шаехмуллина Айгуль Разифовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список принятых сокращений.

I. ВВЕДЕНИЕ.

П. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Обмен гликозаминогликанов.

2.1.1. Структурно-фундиональная характеристика гликозаминогликанов.

2.1.2. Биохимические особенности функционирования глюкуронат-ксилулозного цикла.

2.1.3. Роль гликозаминогликанов в функционировании органов и тканей.

2.2. Общая характеристика основных теорий старения.

2.2.1. Свободно-радикальная теория старения.

2.2.2. Генетическая теория старения.

2.2.3. Элевационная теория старения.

2.2.4. Иммунологическая теория старения.

2.3. Особенности нарушений биохимического гомеостаза при старении.

2.3.1. Возрастная динамика биохимических показателей печени.

2.3.2. Возрастная динамика биохимических показателей головного мозга.

2.3.3. Возрастная динамика биохимических показателей кожи.

2.3.4. Возрастная динамика биохимических показателей сыворотки крови.

2.4. Современные представления о биохимических механизмах фармакологической активности аскорбиновой кислоты.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Определение фракционного состава гликозаминогликанов в органах.

3.2. Определение аминосахаров.

3.3. Определение нейтральных Сахаров

3.4. Спектрофотометрическое определение суммарного содержания 61 нуклеиновых кислот.

3.5. Определение белка по Лоури.

3.6. Определение фракционного состава белков и липопротеинов сыворотки крови.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1. Влияние возраста на содержание гликозаминогликанов и их фракций в органах животных.

4.2. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание гликозаминогликанов и их фракций в органах 12-месячных животных.

4.3. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание гликозаминогликанов и их фракций в органах 18-месячных животных.

4.4. Влияние возраста на содержание аминосахаров во фракциях гликозаминогликанов.

4.5. Влияние возраста на содержание нейтральных Сахаров во фракциях гликозаминогликанов.

4.6. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание аминосахаров во фракциях гликозаминогликанов в органах 12-месячных крыс.

4.7. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание нейтральных Сахаров во фракциях гликозаминогликанов в органах 12-месячных крыс.

4.8. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание аминосахаров во фракциях гликозаминогликанов в органах 18-месячных крыс.

4.9. Влияние аскорбиновой кислоты на содержание нейтральных Сахаров во фракциях гликозаминогликанов в органах 18-месячных крыс.

4.10. Влияние возраста на содержание белков и липопрпотеинов в сыворотке крови.

4.11. Влияние аскорбиновой кислоты содержание белков, липопротеинов в сыворотке крови крыс 12 и 18- месяцев.

4.12. Влияние аскорбиновой кислоты на биосинтез нуклеиновых кислот в органах крыс.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экспериментальное исследование влияния больших доз аскорбиновой кислоты на возраст - зависимое содержание биополимеров в органах и тканях."

Актуальность работы. На сегодняшний день не существует однозначного мнения о биохимических механизмах старения и их регуляции [5, 65, 157]. Многочисленные данные литературных источников констатируют наличие возрастных изменений концентраций низко- и высокомолекулярных эндогенных соединений в органах и тканях организма человека и животных, при этом наблюдения авторов фрагментарны и часто противоречат друг другу. Известно, что внешние и внутренние проявления старения, с позиций медицинской биохимии, обусловлены изменением количественного и качественного состава биополимеров межклеточного вещества (матрикса) соединительной ткани органов, основными из которых являются гликозаминогликаны (ГАГ) [57, 176]. С возрастом изменяется фракционный состав ГАГ, прежде всего, за счет уменьшения доли гиалуроновой кислоты (ГК), что, в частности, приводит к уменьшению влагоудерживающих возможностей тканей и внешне проявляется снижением их тургора и пастозностью.

Отметим, что ГАГ метаболизируются в глюкуронат-ксилулозном метаболическом цикле (ГКЦ) [39], и для замедления процессов старения представляется обоснованным в разумных пределах замедлить (оптимизировать) процесс биосинтеза гликозаминогликанов. Представляется весьма вероятным, что этого эффекта можно добиться за счет нагрузки ГКЦ продуктами метаболизма гликозаминогликанов, что по механизму обратной связи обеспечит замедление биосинтеза этих полисахаридов и, как следствие, протеогликанов. Наиболее перспективным кандидатом на роль такого метаболита выступает аскорбиновая кислота. Применяя аскорбиновую кислоту в больших дозах, можно замедлить процессы старения [278].

В организме крыс аскорбиновая кислота (АК) синтезируется в глюкуронат-ксилулозном цикле в количестве примерно 50 мг/кг в сутки и является одним из метаболитов биосинтеза гликозаминогликанов (ГАГ). У приматов (в том числе человека) и морских свинок аскорбиновая кислота не синтезируется из-за отсутствия двух специфических ферментов ГКЦ (L-гулонат: гулоно-у-лактонгидролазы (альдонолактоназы) 3.1.1.18 и гулоно-у-лактон: кислород-оксидоредуктазы (L-гулонолактоноксидазы) 1.1.3.8 [39]. Она относится к витаминам, однако, по механизму своего действия является типичным физиологическим метаболитом.

Катаболизм гликозаминогликанов с образованием аскорбиновой кислоты у крыс протекает также в глюкуронат-ксилулозном цикле, поэтому представляется вероятным, что нагрузка этого цикла большим количеством АК должна замедлить катаболизм ГАГ, замедляя процессы старения, и направить основной предшественник их синтеза - УДФ-глюкуроновую кислоту в реакции глюкуронидной конъюгации, обеспечивающие процессы детоксикации в организме и тем самым повышая его неспецифическую резистентность. В качестве уровней однократного воздействия аскорбиновой кислоты нами были выбраны дозы 100 и 500 мг/кг, превышающие нормальный биосинтез этого метаболита у крыс соответственно в 2 и 10 раз и не вызывающие летальных эффектов, что не противоречит основным фармакологическим принципам испытания биологической активности веществ. В указанной связи следует отметить, что в фармакологических исследованиях часто используются дозы 1/10 - 1/30 от уровня среднесмертельного воздействия, то есть от DL50.

К эмпирическим предпосылкам настоящей работы можно отнести экспериментальные данные о фармакологической эффективности больших дозировок аскорбиновой кислоты, полученные дважды лауреатом Нобелевской премии Лайнусом Полингом и опубликованные им в работах «Витамин С и простуда» («Vitamin С and the Common Cold») [278] и «Рак и витамин С» («Cancer and Vitamin С»). В этих книгах Л. Полинг отмечал, что систематическое применение больших доз аскорбиновой кислоты улучшает состояние больных. На наш взгляд, это заключение свидетельствует в пользу доводов о повышении аскорбиновой кислотой неспецифической резистентности организма.

Таким образом, выбирая аскорбиновую кислоту в качестве средства, модулирующего обмен веществ, можно решить следующие задачи, а именно: предложить новые подходы к геропротекции путем регуляции обмена веществ нормальными метаболитами на примере аскорбиновой кислоты для аскорбат-независимого вида (крыс) и сделать с учетом полученных результатов и сведений научной литературы теоретическую попытку экстраполировать полученные результаты на аскорбат-зависимые виды, в том числе человека.

По данным физиологических и биохимических исследований [103], скорость старения организма обратно пропорциональна эффективности функционирования его печени. В свою очередь, с состоянием печени напрямую связан обмен других биополимеров - липопротеинов [70, 71, 73, 75], нуклеиновых кислот (НК) [110], протеогликанов, гликопротеинов [58, 59].

Цель исследования: оценить влияние возраста и аскорбиновой кислоты на содержание нуклеиновых кислот, белково-липопротеиновый состав крови, содержание гликозаминогликанов и их фракционный и состав в органах и тканях крыс различного возраста.

Задачи исследования:

1. Определить содержание гликозаминогликанов и их фракций (гиалуроновой кислоты, хондроитин- и гепарансульфатов) в печени, головном мозге и коже крыс различного возраста.

2. Изучить возрастные особенности содержания нуклеиновых кислот в органах и белково-липопротеиновый состав крови крыс различного возраста.

3. Изучить влияние больших доз аскорбиновой кислоты на спектр гликозаминогликанов и их фракций (гиалуроновой кислоты, хондроитин- и гепарансульфатов) в печени, головном мозге и коже крыс различного возраста.

4. Оценить влияние больших доз аскорбиновой кислоты4 на содержание нуклеиновых кислот в органах и белково-липопротеиновый состав крови крыс различного возраста.

5. Оценить возможность использования показателей гликозаминогликанов в качестве биохимических маркеров возрастных изменений организма.

Научная новизна Проведенные исследования позволили существенно расширить представления о патохимических процессах старения организма и биохимических механизмах, лежащих в основе фармакологических эффектов аскорбиновой кислоты. Показано, что с возрастом в органах и тканях подопытных крыс уменьшается уровень гиалуроновой кислоты и возрастает содержание сульфатированных гликозаминогликанов - хондроитин- и гепарансульфатов, а в сыворотке крови крыс - повышается содержание общего белка, p-липопротеинов и снижается уровень альбумина и а-липопротеинов. Впервые установлено, что в организме стареющих белых неинбредных крыс аскорбиновая кислота в дозах 100 мг/кг и 500 мг/кг способствует уменьшению содержания гликозаминогликанов в органах и тканях крыс, также способствует повышению содержания нуклеиновых кислот в печени. В этих же дозах аскорбиновая кислота проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты, способствуя повышению ее содержания в органах и тканях крыс, и уменьшению концентрации сульфатированных ГАГ -хондроитин- и гепарансульфатов.

Практическая значимость выполненного исследования заключается в том, что гиалуроновая кислота, но не суммарные гликозаминогликаны, может выступать в качестве биохимического маркера интенсивности процессов ртарения организма. Практически продемонстрировано, что физиологический метаболит (в нашем случае аскорбиновая кислота) может быть использован для биохимического регулирования обмена биополимеров в организме. Представляются перспективными дальнейшие исследования аскорбиновой кислоты в качестве средства, влияющего на количественный и качественный состав гликозаминогликанов в органах и тканях.

На защиту выносятся следующие научные положения:

1. С возрастом наблюдается уменьшение соотношений несульфатированные : сульфатированные гликозаминогликаны; альбумин : общий белок; а-липопротеины : Р-липопротеины.

2. Аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты в органах и тканях крыс, а также содержания альбуминовой и а-липопротеиновой фракций сыворотки крови.

3. Применение аскорбиновой кислоты в дозах 100 и 500 мг/кг способствует повышению содержания нуклеиновых кислот в печени.

4. Представляется перспективным изучение аскорбиновой кислоты в качестве потенциального геропротектора.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Всероссийских научно-практических конференциях «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Уфа, 2006, 2007); на V Международной научно-практической конференции «Новые медицинские технологии в охране здоровья здоровых, в диагностике, лечении и реабилитации больных» (Пенза, 2007); на XII Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2007); на научной конференции аспирантов и молодых ученых «Молодежь, образование, наука» (Уфа, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 166 страницах, содержит 80 таблиц, 39 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, списка литературы, включающего 335 источников, из которых 137 отечественных и 198 иностранных авторов, приложения.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Шаехмуллина, Айгуль Разифовна

VI. выводы

1. С возрастом в головном мозге, печени и коже крыс уменьшается уровень гиалуроновой кислоты и возрастает содержание сульфатированных гликозаминогликанов - хондроитин- и гепарансульфатов.

2. В сыворотке крови крыс с возрастом повышается содержание общего белка, p-липопротеинов, снижается уровень альбумина и а-липопротеинов.

3. Применение аскорбиновой кислоты в дозах 100 и 500 мг/кг способствует уменьшению содержания гликозаминогликанов в головном мозге, печени, коже крыс и повышению концентрации нуклеиновых кислот в печени.

4. Аскорбиновая кислота в дозах 100 и 500 мг/кг проявляет антагонизм в отношении возраст-зависимого снижения концентрации гиалуроновой кислоты, способствуя повышению ее содержания в органах и тканях крыс, и уменьшению концентрации сульфатированных ГАГ -хондроитин - и гепарансульфатов.

5. Содержание гиалуроновой кислоты в тканях, но не суммарные гликозаминогликаны, можно считать потенциальным биохимическим маркером возраст-зависмых изменений в организме.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Шаехмуллина, Айгуль Разифовна, Уфа

1. Абрамов Ю.В., Володина Т.В., Маркина Л.Г., Ребров Л.Б. Гликозаминогликаны кожи при эмоциональном стрессе // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999 Т.127.- №2 - С.134-136.

2. Агапова Е.Н., Крутовская О.В., Михалев И.Д., Ткаченко A.M., Фаунова

3. B.И., Денисова Т.П. Белково-липидный состав, свертывающая и антисвертывающая системы крови у долгожителей // Геронтология и гериатрия. -Киев.-1973. С.213-215.

4. Ангелова-Гатева П., Стойнев Г., Иванова Е. Некоторые биохимические показатели кровяной плазмы долгожителей. Геронтология и гериатрия. Ежегодник. Долгожители. Киев, 1973. - С.203-205.

5. Андреева М.П., Раскин A.M. Заболевания надпочечников // Руководство по внутренним болезням, 2002,- Т.7.- С.423-499.

6. Анисимов В. И. Молекулярные и физиологические механизмы старения.-С-Петербург: Наука, 2003. С.468.

7. Анисимов В. И. Изменения уровня биогенных аминов в головном мозге лабораторных животных и человека в процессе развития и старения // Успехи физиол. наук.-1979.- Т:10.- №1.-С. 54-75.

8. Анисимов В.И. Современные представления о природе старения // Успехи современной биологии.-2000. Т.120 - С.146-164.

9. Анисимов В.И., Аратюнян А.В., Опарина Т.И. и др. Возрастные изменения активности свободнорадикальных процессов в тканях и сыворотке крови крыс // Российский физиологический журнал им. И.М.Сеченова. 1999. Т.84.1. C. 502-507.

10. Ата-Мурадова Ф.А., Донцов В.И. Пересадка эмбрионального гипоталамуса: путь восстановления истощенных с возрастом регуляторных программ // Профилактика старения. 1998. Вып.1. - С.77-79.

11. Бабаева А.Г. Традиционные и нетрадиционные представления о роли системы иммуногенеза в организме // Вестник АМН СССР. 1986. № 1. -С.22.

12. Баклаш В., Иорханова А., Кветнянски Р. Катехоламины и их синтез в процессе старения // Геронтология и гериатрия. Киев, 1976. С. 163- 166.

13. Баренбойм Г.М., Маленков А.Г. Биологически активные вещества. Новые принципы поиска. М.: Наука, 1986. - С.368.

14. Башкатов С.А. Гликозаминогликаны в механизмах адаптации организма. Уфа: БашГУ, 1996. - С.144.

15. Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Универсум, 1993. - С.400.

16. Березов Т.Г., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1982. -С. 750.

17. Берштейн Л.М. Эстрогены, старение и возрастная патология //Успехи геронтологии.-1998. №2. - С.90-97.

18. Биохимический справочник.- Киев: Вища школа, 1979. 304 с.

19. Богацкая Л.Н. Особенности липидного обмена и его регуляция у долгожителей. // Геронтология и гериатрия. Ежегодник. Долгожители. Киев,1973. С.196-203.

20. Бойд У. Основы иммунологии.- М.: Мир, 1969.- С. 647.

21. Брехман И.И. Человек и биологически активные вещества, 2-е изд. М.: Наука, 1980.-С.120.

22. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты и синтетические ингибиторы радикальных реакций II Успехи химии.- 1975. Т.44. - №10. - С.874-886.

23. Бычков С.М., Захарова М.М. Новые данные о гликозаминогликанах и протеогликанах // Вопр. мед. хим. 1979. - №3. - С.227-237.

24. Бычков С.М., Кузьмина С.А., Биологическая роль гиалуроновой кислоты (обзор) // Вопросы медицинской химии.-1986. Т.31.-№ 1-2.- С.19-32.

25. Бычков С.М., Кузьмина С.А., Изучение механизма стерического исключения клеток, осуществляемого протеогликанами // Бюлл. Экспер. Биол. И Мед.-№ Ю.-1992а. С.272 -278.

26. Бычков С.М., Кузьмина С.А., Протеогликаны как факторы стерического исключения и адгезии клеток // Успехи современной биологии,- 19926.-Т. 112.-№2. С.273-280.

27. Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. Биохимия для врачей.-Екатерининбург: Уральский рабочий, 1994 384с.

28. Ваганов Ф.В. О роли лимфоцит-фибробластных контактов в заживлении ран // Архив патологии.- 1984.- № 6,- С.47.

29. Ванюшин Б.Ф., Бердышев Г.Д. Молекулярно-генетические механизмы старения,- М.: Наука, 1977,- С.300.

30. Введение в клиническую биохимию (основы патохимии) / Под ред. Иванова И.И.- Л.: Медицина, 1969.-493с.

31. Вейнберг А.Я., Самохвалов Н.И. Функция ганглиозидов и родственных соединений на поверхности мембраны // Успехи биолог.химии,- 1974.-Т. 15.-С. 208-231.

32. Вельтищев Ю.У. Наследственные аномалии обмена витаминов. // Генетика,- 1980. Т.5. - С.123-148.

33. Вержиковская Н.В., Валуева Г.В., Сабольч И. Возрастные особенности дейодирования тироксина и экстратиреоидного образования прямого и обратного трийодтиронина // Вопросы геронтологии. Киев, 1978. С.43-48.

34. Галь Э., Медьеши Г., Верецкеи JL Электрофорез в разделении биологических макромолекул. -М.: Мир, 1982. С.446.

35. Гацко Г.Г, Жукова А.С., Чайка Л.Д. Жировая ткань при старении. Минск: Наука и техника, 1985. С.184.

36. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. Л.: Медицина, 1986. - 280с.

37. Гофман Э. Динамическая биохимия. М.: Медицина, 1971. - 321с.

38. Гулько В.В. Взаимоотношение цинка и кадмия в печени и почках человека в зависимости от возраста // Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969. С. 11-15.

39. Дэгли С., Николсон Д. Метаболические пути.- М.:Мир, 1973. 310с.

40. Дейл 3. Влияние 17-бета-эстрадиола на метаболизм коллагена I и III типов у лабораторных животных разного возраста // Вопросы геронтологии. Эндокринные механизмы старения и возрастной патологии. Вып. X. Киев, 1988. С.27-34.

41. Дейл 3, Сохорова JI., Михль Дж., Фролькис В.В. Анализ возрастных изменений содержания и интенсивности синтеза белков плазматических мембран // Вопросы геронтологии.- 1982. С.3-13.

42. Денисенко П.П. Экстремальные состояния как фармакологическая проблема // Поиск фармакологических средств для профилактики и ранней терапии нарушений, вызванных экстремальными факторами: Сб. науч. тр. Ленинградского СГМИ.-Л., 1986. С. 4-7.

43. Дильман В. М. Четыре модели медицины. М.: Медицина, 1987. - С.288.

44. Дильман В.М. Старение, климакс и рак. Л.: Медицина, 1968. - С.378.

45. Дильман В. М. Эндокринологическая онкология. Л.: Медицина, 1983.

46. Донцов В.И. Иммунобиология постнатального развития. М.:РАН, МОИП. Наука, 1990. - С.260.

47. Дубина Т.Л. О биохимических методах оценки биологического возраста экспериментальных животных. // Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969. - С.97-109.

48. Дубинская В.А., Виноградова Е.В. Кожа человека: влагообмен и старение //Клиническая геронтология. 2000. №7-8. - С.22-26.

49. Ермолаев О.Ю. Математическая статистика для психологов. М.:Флинта, 2002.-С.336.

50. Жижина Г.П. Роль апоптоза в нормальном онтогенезе, патогенезе и старении // Клиническая геронтология. 2002. Т.8. №4. - С.3-9.

51. Журавлев А.И. Биоантиокислители в животном организме // Биоантиокислители: Тр. Моск. об-ва исп. природы. М.: Наука, 1975. - Т.52. -С.15-29.

52. Зайдиева Я.З. Гормональная терапия в перименопаузе. // Акушерство и гинекология. 1995. №3 - С.28-30.

53. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы патохимии.- СПб., 2001. С.374-379

54. Захариева С., Кирянов А., Златарев.О., Наврькова Ю. Базальный уровень пролактина плазмы крови у старых людей и больных гиперпролактинемией различных типов //Вопросы геронтологии.- 1980. С.40-42.

55. Зимина Н.П., Дмитриев И.П., Рыкова В.И. Состав и степень сульфатирования гликозаминогликанов из тканей животных различных видов: гетерогенность и тканевая специфичность гепарансульфатов // Биохимия,- 1987. Т.52.-Вып.6. - С.984-990.

56. Зимина Н.П. Рыкова В.И., Дмитриев И.П. Сравнительная характеристика состава и степени сульфатирования гликозаминогликанов покоящихся и активно пролиферирующих тканей. // Биохимия.- 1987. Т. 52,- С. 856-861.

57. Зимницкий А.Н., Башкатов С.А. Гликозаминогликаны в биохимических механизмах адаптации организма к некоторым физиологическим и патологическим состояниям. М.: Фармацевтический бюллетень: Глобус; 2004,- С.208.

58. Зимницкий А.Н., Башкатов С.А. Сопряженность биосинтеза гликозаминогликанов с ядерным и микросомальным аппаратом клетки. Молекулярная биология. 2006.- 40 (2).- С.289-99.

59. Зимницкий А.Н., Башкатов С.А., Уразбаев В.Н. Тандемные повторы ДНК и концепция матричного синтеза протеогликанов. М.: Лабиринт; 2005.

60. Иванова И.И Введение в клиническую биохимию (основы патохимии) / Под ред.- Л!: Медицина, 1969. С.493.

61. Ивантер Э.В., Коросов А.В. Основы биометрии: введение в статистический анализ биологических явлений и процессов. Петрозаводск: ПТУ, 1992.-С.163.

62. Измайлов Д.М., Обухова JI.K. Мелатонин как геропротектор: эксперименты. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999.- Том 127. №2. С.205-206.

63. Кательницкая Л.И. Тезисы конференции. Возрастные аспекты патологии внутренних органов. Ростов-на-Дону, 1998. С.46.

64. Киселев JI.JI. Геном человека и биология XXI века.// Вестник Российской Академии Наук. 2000. Т.70. - С.414- 424.

65. Клещенко Е. Аскорбинка по Полингу: вопрос решен или забыт? //Химия и жизнь.-1999.-№10. С.18-22.

66. Кожура И.М. Содержание фракций белков и липопротеидов в сыворотке крови кроликов разного возраста при экспериментальном атеросклерозе // Механизмы старения. Киев: Государственное медицинское издательство УССР, 1963. -С.121-126.

67. Кольман Я., Рем К.Г. Наглядная биохимия. М.: Мир, 2000.- 469с.

68. Кольтовер В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы // Успехи геронтологии. 1998. №2. - С.37-42.

69. Конопля Е.Ф., Лукша Г.М. Гормоны и старение. Цитоплазматическая рецепция стероидных гормонов. Минск.: Наука и техника, 1991. - С. 173.

70. Коркуиасо О. В., Чеботарев Д. Ф., Калиновская Е. Г. Гериатрия в терапевтической практике. Киев: Здоровье, 1993. - С.840.

71. Коркушко О.В. Возрастная характеристика белкового спектра сыворотки крови у практически здоровых людей пожилого и старческого возраста. // Сборник Механизмы старения Киев: Государственное медицинское издательство УССР, 1963. - С.84-95.

72. Королевская Л.И., Серова Л.Д., Лукьянчиков B.C., Чеботарева Е.В, Климакс и постменопаузный остеопороз. // Клиническая геронтология. 2003. Т.9. №9. - С.55-61.

73. Крылов Ю.Ф., Неугодова Н.П., Смирнов П.А. Роль биотрансформации лекарственных средств в реализации фармакологического эффекта // Вестник АМН СССР. 1984. - №12. - С.76-80.

74. Кустаров В.Н., Черниченко И.И. Перименопауза и ее осложнения. // Клиническая геронтология. 2003. Т.9. №1. - С.45-49.

75. Курашвили Р.Б., Мегрелишвили Г.Н., Думбадзе Э.Г Зарандия Л.Т., Шатиришвили Э.Г. Некоторые показатели липидного обмена и системы свертывания крови у долгожителей. // Геронтология и гериатрия. Ежегодник. Долгожители. Киев, 1973. С.205-208.

76. Кухта В.К., Олецкий Э.И., Стожаров А.Н. Белки плазмы крови: Патохимия и клиническое значение. Справочник. Минск: Беларусь. 1986. -С.79.78. .Лабори Г. Метаболические и фармакологические основы нейрофизиологии. -М.: Медицина, 1974.- С. 168.

77. Лабори Г. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты). -М.Медицина, 1970. С.384.

78. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - С.352.

79. Ларский Э.Г.Методы зонального электрофореза. Москва, 1971. С.110.

80. Ластовская Т.Г. Содержание сульфгидрильных групп в некоторых тканях и митохондриях крыс различного возраста /Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969. С.45-50.

81. Лашнеева Н.В., Тутельян В.А. Индукция цитохрома Р-450 в печени крыс при воздействии полихлорированных дифенилов // Фармакология и токсикология,-1984. №6. - С. 77-80.

82. Литошенко А.Я. Некоторые стороны системы биосинтеза белка митохондрий печени в старости // Геронтология и гериатрия. Ежегодник. Продление жизни: прогнозы, механизмы, контроль. Киев, 1979. С.87-91.

83. Логаткин М.Н. Критерии адекватного питания. Л.: ЛПМИ, 1984. - С.88

84. Макинодан Т., Юнис Э.Иммунология и старение. М.: Мир, 1980. - С. 277.

85. Мартин Р., Мартин Г., Мурадян Х.К. Возрастные особенности влияния гидрокортизона на активность РНК-полимераз и транскрипцию разных классов РНК в печени крыс. / Сборник статей Вопросы геронтологии. Под. Ред. Чеботарева Д.Д. 1978. С.49-56.

86. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия -2-ое изд. пер с англ. СПб.: Невский диалект, 2002. - С.784.

87. Матковская Т.А., Юрьева Э.А., Сухоруков B.C., Столяров Ю.Ю. О профилактике возрастных изменений кожи // Военно-медицинский журнал. 2000. -№8.-С.16-20.

88. Меньшиков В.В. Руководство по клинической лабораторной диагностике. -М.: Медицина, 1982. С.576.

89. Мешкова Н.П., Северин С.Е. Практикум по биохимии.-М.:Изд-во МГУ, 1979,- 430с.

90. Морозов В. Г., Хавинсон В.Х. Пептидные биорегуляторы (25-летний опыт экспериментального и клинического изучения).- СПб.: Наука, 1996-С.74.

91. Морозов В.Г., Хавинсон В.Х. // Успехи геронтологии. 1997. T.l. - С.74.

92. Нагорный Л.В., Никитин В.И., Буланкин И.И. Проблема старения и долголетия. М.:Медгиз, 1963. - С.740.

93. Никитин Ю.П., Бондарева З.Г. Отева Э.А., Филимонова Т.А. Липидный состав сыворотки крови у здоровых и больных старческого возраста и долгожителей. // Клиническая медицина 1991. - №6 - С.32-35.

94. Оловников A.M. Принцип маргинотомии в матричном синтезе полинуклеотидов. // Докл. Акад. Наук. 1971. Т.201. - С.1496-1499.

95. Оловников А. М, Внутриядерные ионные фонтаны как регуляторы деятельности генома: фонтанная гипотеза доминанты и некоторые эпигенетические эффекты // Мол. Биол. 2000. Т.35. - С.163-176.

96. Оловников А. М. Редусомная гипотеза старения и контроля биологического времени в индивидуальном развитии // Биохимия. 2003. Т. 68.-С.7-41.

97. Пименов Ю.С. Кровь здоровых людей при старении. //Гематология и трансфузиология. 1993. №3 - С.43-45.

98. Пристром М. С. Особенности клиники и диагностики ишемической болезни сердца и гипертонической болезни у лиц старших возрастов // Диагностика кардиологических заболеваний / Под ред. В. В. Горбачева. М.: Высшая школа, 1990. - С. 246-257.

99. Разумович А.Н. Энергообразующие системы при старении организма. // Обмен и функции стареющего организма. Минск,1969. С.25-30.

100. Разумович А.Н., Коробенкова М.М., Иткина Э.А. Возрастные изменения активности аденозин-трифосфатазы и глюкозо-6-фосфатазы // Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969. С. 32-37.

101. Рашидов Н.Р. Человек в мире и его печень // Медицинская кафедра. 2002. №2,-С.116-129.

102. Рихтер В., Богацкая JI.H. Возрастные изменения липопротеидлипазы. Вопросы геронтологии. Киев, 1978. С.75-80.

103. Роничевская Г.М., Рыкова В.И. Исследование органной специфичности антимитотического действия гликопептидов, выделенных из препаратов РНК. Докл. АН СССР, 1977. -Т. 237, №2. - С.481-483.

104. Ружье А. УФА-лучи, насколько они опасны? // 2001. №3. - С.21-24.

105. Саркисов К.Г., Ступина А.С., Коркушко О.В., Шапошников В.Н., Тарасенко О. Б. Ультраструктурные особенности кровеносных капилляров кожи человека при старении // Вопросы геронтологии и гериатрии. Каранда, 1978.-Вып. II- С.166-167.

106. Северин М.В., Юшков Б.Г., Ястребов А.П. Регенерация тканей при экстремальных воздействиях на организм. Екатеринбург, 1993. - 187с.

107. Сергеев П.В., Галенко-Ярошевский П.А., Шимановский H.JI. Очерки биохимической фармакологии. М.: РЦ "Фармединфо",199б. - 384с.

108. Сергеев П.В. и соавт. Биохимическая фармакология. М.: Высшая школа, 1982. -С.343.

109. Серов В.В., Шехтер В.Б. Соединительная ткань М.: Медицина, 1981. -С.312.

110. Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. Л.: Медицина, 1969,- С.376.

111. Соболич И. Изменение уровня тиреоидных гормонов в крови людей старческого возраста под влиянием тиреотропного гормона // Вопросы геронтологии. Киев, 1980. С.19-22.

112. Соловьев Г.М., Петрова И.В., Ковалев С.В. Иммунокорекция, профилактика и лечение гнойно-септических осложнений в кардиохирургии. М.: Медицина, 1987. - С.160.

113. Стейси М., Баркер С. Углеводы живых тканей. М.:Мир,1965. - С.324.

114. Страйер Л. Биохимия: в 3-х т. Пер. с англ. М.: Мир,1985. - Том 3. -С.400.

115. Султанов М.Н. Содержание холестерина, белковых фракций и ацетил-нейраминовой кислоты у долгожителей Нахичеванской АССР // Геронтология и гериатрия. Ежегодник. Киев, 1973. С.208-213.

116. Титов В.Н., Амелюшкина В.А. Электрофорез белков сыворотки крови: методические основы и диагностическое значение. М.: Оптимум пресс, 1994.-С.50.

117. Уайт. Дж. Основы биохимии. М.: Мир, 1982. - Т.З. - С.232.

118. Устройство электрофореза белков сыворотки крови на пленках из ацетата целлюлозы с регулируемыми параметрами напряжения и тока УЭФ-01 «Астра» (1999) АСТР.054954.001ПС, ТУ 944163-001-54312116-99.

119. Фролькис В.В. Нейрогормональные соотношения в старости // Вопросы геронтологии. Эндокринные механизмы старения и возрастной патологии. Вып.Х. Киев, 1988. С.4-15.

120. Фролькис В.В. Синдромы старения // Вестник АМН СССР. 1990. №1 -С.8-12.

121. Фролькис В.В. Старение и биологические возможности организма. М.: Наука, 1975.-С.273.

122. Фукс Б.Б., Фукс Б.И. Очерки морфологии и гистохимии соединительной ткани.- JI.Медицина,1968. 216с.

123. Хавинсон В.Х. Пептидная регуляция старения. //Вестник РАМН. 2001 -№12. С.16-20.

124. Хавинсон В.Х., Баринов В.А., Арутюнян А.В., Малинин В.В. Свободнорадикальное окисление и старение. СПб.: Наука, 2003. - С.327.

125. Хмелевский Ю.В., Усатенко O.K. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии. Киев: Здоровье, 1987. - С160.

126. Хочачка П., Сомеро Дж. Стратегия биохимической адаптации. Мир, 1977. -С.216-228

127. Хьюз Р. Гликопротеины.-М.: Мир.- 1985.

128. Чеботарев Д.Ф., Маньковский Н.В., Фролькис В.В. Руководство по геронтологии-М.: Медицина, 1978. -С.503.

129. Чеботарев Д.Ф., Коркушко О.В., Коваленко А.И. Некоторые гемостатические показатели крови и сосудистой стенки у пожилых и старых людей. // Здравоохранение. Кишинев, 1985. №2 - С.22-26.

130. Шелюженко А. А., Браиловский А .Я. Кожные болезни у лиц пожилого и старческого возраста. Киев: Здоровье, 1982. - С.200.

131. Эмануэль Н.М. Ингибиторы радикальных процессов (антиоксиданты) и возможности продления жизни. Геронтология и гериатрия. Киев, 1979. -С.118-127.

132. Эмануэль Н.М. Свободные радикалы и старение // Геронтология и гериатрия. Ежегодник.- 1975. С.103.

133. Ястребов А.П., Юшков Б.Г., Большаков В.Н. Регуляция гемопоэза при воздействии на организм экстремальных факторов. Свердловск, 1988. -С.153.

134. Affinito P., Palomba S., Sorrentino C., Di Carlo C., Bifulco G., Arienzo M.P., Nappi C. Effects of postmenopausal hypoestrogenism on skin collagen //Maturitas.- 1999. V.33. -N3. -P.239-247.

135. Aron-Brunetiere R. The menopause and the skin (author's transl) //Sem. Hop.- 1980. V.56. - N33-36. - P.1368-1373.

136. Ashikari-Hada S., Habuchi H., Kariya Y., Itoh N., Reddi AH., Kimata K. Characterization of growth factor-binding structures in heparin/heparan sulfate using an octasaccharide library//Biol Chern 2004,- V.279.-P.12346-12354.

137. Avci FY., Karst NA., Linhardt RJ. Synthetic oligosaccharides as heparinmimetics displaying anticoagulant properties. // Curr Pharmac Design.-2003.-№9.-P. 2323-2335.

138. Baerwald-De La Torre K., Winzen U., Halfiter W., Bixby JL. Glycosaminoglycandependent and -independent inhibition of neurite outgrowth by agrin. //JNeurochem.- 2004.-V. 90.-P. 50-61.

139. Banliegy.i G., Braun L., Csala M., Puskas F., Mandl J. Ascorbate metabolism and its regulation in animals // Free Radic. Biol. Med. 1997. -Vol.23. - №5.-P.793-803.

140. Barbo D.M. The physiology of the menopause // Med. Clin. North. Am. -1987. V.71. - N1. -P.ll-22.

141. Barnadas M.A., Colomo L., Cureii R., Moragas J.M. Expression of the p53 protein in sun-damaged skin //Acta Der. Venereol. 1996. - V.76. - N3. - P.203-204.

142. Bernstein E.F., Lee J, Brown DB, Yu R, Van Scott E. Glycolic acid treatment increases type I collagen mRNA and hyaluronic acid content of human skin // Dermatol. Surg. 2001. - V.27. - N5. -P.429-433.

143. Bernstein E.F., Underhill C.B., Hahn P.J., Brown D.B., Uitto J. Chronic sun exposure alters both the content and distribution of dermal glycosaminoglycan //Br. J. Dermatol. 1996. - V.135. - N2 -P.255-262.

144. Biasco M. A., Gottlieb G. J, etai. Essential role of mouse telomerase in highly proliferative organs //Nature. 1998. - V.392. - P.569-574.

145. Bird T.A., Schvartz N.B., Peterkofsky B. Mechanism for the decreased biosynthesis of cartilage proteoglycans in the scorbutic guinea pig // J. Biol. Chem. 1986. - Vol.261. -№24. -P.11166-11172.

146. Bird T.A., Spanheimer R.G., Peterkofsky B. Coordinate regulation of collagen and proteoglycan synthesis in costal cartilage of scorbutic and acutely fasted, vitamin C-suplemented guinea pigs. // Arch. Biochem. Biophis. 1986. - № 246 (1). -P.42-51.

147. Bitar M.S., Shapiro B.H. Abberation of heme and hemoprotein in age female rats //Mech. Ageing. Dev. 1987. - V.38. - N2. - P.189-197.

148. Bohr V. A. Human premature aging syndromes and genomic instability // Mech.Ageing Dev. 2002. - V.123. - P.987-993.

149. Bolognia J.L. Dermatologic and cosmetic concerns of the older woman //Clin.Geriatr. Med. 1993. - V.9. - N1. -P.209-229.

150. Bolognia J.L., Braverman I.M., Rousseau M.E., Sarrel P.M. Skin changes in menopause //Maturitas. 1989. -V.ll. - N4. - P.295-304.

151. Bonte F., Dumas M., Chaudagne C., Meybeck A. Comparative activity of asiaticoside and madecassoside on type I and III collagen syntesis by cultured human fibroblasts. //Ann. Pharm.Fr. 1995. - V.53. - N1 - P.38-42

152. Boyd A.S., Naylor M., Cameron G.S. Pearse A.D., Gaskell S.A., Neldner K.H. The effects of chronic sunscreen use on the histologic changes of dermatoheliosis //J.Am.Acad.Dermatol. 1995. - V.33. - N6. - P.941-946.

153. Boyle J., Luan В., Cruz T.F., Kandel R.A. Characterization of proteoglycan accumulation during formation of cartilagenous tissue in vitro // Osteoarthritis Cartilage. 1995. - Vol.3. - №2. -P.117-125.

154. Bray В.J., Rosengren R.J. Retinol potentiates acetomiphen-induced hepatotoxity in the mouse: mechanistic studies // Toxicol. Appl. Pharmacol. -2001. -Vol.173. -№3. P.129-136.

155. Brincat M., Moniz C.F., Studd J.W., Darby A.J., Magos A., Cooper D. Sex hormones and skin collagen content in postmenopausal women //Br. Med. J. (Clin Res Ed). 1983. - V.5. - P.1337-1338.

156. Brizztsr K.R. Neuronaging and neural pathology // In*. Relations Between Normal Aging and Disease / Ed. A. H. Johnson. New York: Raven Press, 1985. P. 191-224.

157. Broniarczyk-Dyla G., Joss-Wichman E.J. Ageing of the skin during menopause // Eu.r Acad. Dermatol. Venereol. 2001. - V.15. - N5. - P.494-495.

158. Buchanan DD., Jameson EE., Perlette J., Malik A., Kennedy R. Effect of buffer, electric field, and separation time on detection of aptamer-ligand complexes for affinity probe capillary electrophoresis // Electrophoresis.- 2003.-V.24.-P.1375-1382.

159. Buller HR., Agnelli G., Hull RH., Hyers TM., Prins MH., Raskob GE. Antithrombotic therapy for venous thromboembolic disease. The Seventh ACCP Conference on Antithrombotic and Thrombolytic Therapy // Chest.- 2004.-V.126.-P.401-428.

160. Cassaro C.M.F., Dietrich C.P. Distribution of sulfated mucopolysaccharides in invertebrates //J. Biol. Chem. 1977. - Vol.252, №7. - P.2254-2261.

161. Castelo-Branco С., Duran M., Gonzalez-Merlo J. Skin collagen changes related to age and hormone replacement therapy // Maturitas. 1992. - V.15. - N2. -P.113-119.

162. Casu В., Naggi A. Antiangiogenic heparin-derived heparan sulfate mimics // Pure Appl Chem.- 2003.- V.75.-P.155-164.

163. Casu В., Guerrini M., Torri G. Structural and conformational aspects of the anticoagulant and antithrombotic activity of heparin and dermatan sulfate // Current Pharmac Design.- 2004,- V. 10.-P.939-949.

164. Chai W., Leteux C., Westling C., Lindahl U., Feizi T. Relative susceptibilities of the glucosamine-glucuronic acid and N-acetylglucosamine-glucuronic acid linkages to heparin lyase III // Biochemistry.- 2004.-V. 43.-P.8590-8599.

165. Chan-Yeung M., Ferreira P., Frohlich J., Schulzer M., Tan F. The effects of age, smoking, and alcohol on routine laboratory tests // Am. J. Clin. Pathol. -1981. -V.75.-N3. -P.320-326.

166. Chaplin M. F. and J. F. Kennedy. Carbohydrate analysis. A practical approach /Editedby,- Oxford, Wachigton, 1986. - P. 228.

167. Chen S., Beehler В., Sugimoto G., Tramposch KM. Effects of all-trans retinoic acid on glycosaminoglycan synthesis in photodamaged hairless mouse skin // J. Invest. Dermatol. 1993. - V.101. - N2. - P.237-239.

168. Chung J.H., Yano K., Lee M.K., Uoun C.S. at al. Differential effects of photoaging vs intrinsic aging on the vascularization of human skin //Arch Dermatol 2002. V. 138. - N11. - P.l437-1442.

169. Coming B.J., Su J.H., Cotman C.W. Neuritic involvement within bFGF immunopositive plaques of Alzheimer's disease // Exp. Neurol. 1993. V.124. -№2. - P.315-325.

170. Coon M.J., Persson A.V. Microsomal cytochrome P-450: A central catalyst indetoxication reactions //Enzymatic basis of detoxication /Ed. Jakobt V.B. N.Y., 1980.-Vol.1. - P. 117-134.

171. Curri S. Histochemical aspects of the aging of connective tissue //Phlebologie. 1986. - V.39. - N4. - P.791-4.

172. Cutler R. Oxidative stress: its popential relevance to human disease and longevity determinants // Age. 1995. - V. 18. - P. 91-96.

173. De-la-Torre M., Wells A.F., Bergh J., Lindgren A. Localization of hyluronan in normal breast tissue, radial scar, and tubular breast carcinoma // Hum.Pathol. 1993-V.24.-№12.-P. 1294-1297.

174. De Lignieres B. Ovarian hormones and cutaneous aging //Rev. Fr. Gynecol. Obstet. 1991. - V.86. - N6. -P.451-454.

175. Di Minno G., Mannucci PM., Tufano A et al. The first ambulatory screening on thromboembolism a multicentre, cross-sectional, observational study on risk factors for venous thromboembdism // Thromb Haemost.- 2005.-V. 3.-P.1459-1466.

176. Dini L., Rossi L., Marchese E., Ruzittu M.T., Rotilio G. Age-related changes in the binding and uptake of Cu, Zn superoxide dismutase in rat liver cells // Mech . Ageing. Dev. 1996. -V.90. -N1. -P.21-33.

177. Dietrich C.P., Sampaio L.O., Toledo O.M.S. Characteristic distribution of sulfated mucopolysaccharides in different tissuse and their mitochondria // Biochem. and Biophys. Res. Commun 1977. - Vol.75.- №2.- P.329-336.

178. Dong S., Cole GJ., Halfter W. Expression of collagen XVIII and localization of its glycosaminoglycan attachment sites // Biol Chem.-2003.-V.27,- P. 17001707.

179. Dogru-Abbasoglu S., Tanger-Toptani S., Ugernal B. etc. // Mech.Ageing.Devel. 1997. - V.98. - P.177-180.

180. Edward M, Oliver RF. Changes in the synthesis, distribution and sulphation of glycosaminoglycans of cultured human skin fibroblasts upon ascorbate feeding. //Cell Sci.- 1983,-N. 11.-P.245-254.

181. Edward, M. Ascorbate induced changes in glycosaminoglycan synthesis and distribution of normal and SV40-transformed fibroblasts. // J. Cell Sci. -1986.-N.9.- P.217-229.

182. Fedarco N.S., Conrad H. E. Unique heparansulfate in the nuclei of hepatocytes: structural changes with the growth state in the cell // J. Cell. Biol.-1986.-Vol. 102.-P.587-589.

183. Fedarco N.S., Conrad H. E. Unique heparansulfate in the nuclei of hepatocytes: structural changes with the growth state in the cell // J. Cell. Biol.-1986.-Vol. 102.-P.587-599.

184. Finch С. Е/ Neurons, glia, and plasticity in normal brain again // Успехи геронтологии 2002. Т. 10 С. 35-39.

185. Fink R.M, Lengfelder E. Hyaluronic acid degradation by ascorbic acid and influence of iron. // Free Radic. Res. Commun. 1987. - Vol.3. - №1-5. - P.85-92.

186. Fisher G.J., Kang S., Varani J., Bata-Csorgo Z. Mechanisms of photoaging and chronological skin aging //Arch. Dermatol. 2002. - V.138. - Nil. - P. 14621470.

187. Freyman T.M., Yannas I.V., Yokoo R., Gibson L.J. Fibroblast contractile force is independent of the stiffness wich resists the contraction // Exp Cell Res.-2002,- Vol.272 (2).-P.153—62.

188. Garg H.G., Siebert E.P., Swann D.A. Isolation and some structure analyses of a copolymeric chondroitin sulfate-dermatan sulfate proteoglycan from post-burn, human hypertrophic scar //Carbohydr. Res.-1990. Vol.197. - P.159-169.

189. Geerts W.H., Pineo GF., Heit JA., Bergqvist D., Lassen MR., Colwell CW., Ray JG. Prevention of venous thromboembolism // The Seventh ACCP Conference on Antithrombotic and Thrombolytic Therapy.- 2004.-V.126.-P.338-400.

190. Ghersetich I., Lotti Т., Campanile G., Grappone C., Dini G. Hyaluronic acid in cutaneous intrinsic aging // Int. J. Dermatol. 1994. - V.33. - N2. - P.l 19-122.

191. Glaser J.H., Conrad H.E. Chick emryo liver beta-glucuronidase. Comparison of activity on natural artificial substrates // J. Biol. Chem. 1979. - Vol.254. -N.14.-P. 6588-6597.

192. Glowaski A., Kozma E.M., Olczyk K., Kucharz E.J. Glycosaminoglycans -structure and function // Postery Biochem.- 1995. Vol. 41. - №23. - P.139-148.

193. Gomes P.B., Dietrich C.P. Distribution of heparin and other sulfated glycosaminoglycans in vertebrates //Сотр. Biochem. and Physiol.- 1982. -Vol.73.-N.4. -P.857-863.

194. Gong F., Jemth P., Escobar Galvis ML., Vlodavsky I., Horner A., Lindahl U., Li J-P. Processing of macromolecular heparin by heparanase // Biol Chem.-2003.-V.278.-P.35152-35158.

195. Gow S.M., Turner T.I., Glasier A. The clinical biochemistry of the menopause and hormone replacement therapy. //Ann. Clin. Biochem. 1994. -V.31. -N6-P.509-528.

196. Gruber C.J., Wieser F., Gruber I.M., Ferlitsch K., Gruber D.M., Huber J.C. Current concepts in aesthetic endocrinology. //Gynecol Endocrinol. 2002. - V.16. -N6. -P.431-441.

197. Hagner-Mcwhirter A., Lindahl U., Li J. Biosynthesis of heparin/heparan sulfate: mechanism of epimerization of glucuronyl C5. //Biochem. J. 2000. -Vol.347.-N.1.-P.69-75.

198. Hall D.M., Xu L., Drake V.J., Oberley L.W., Oberley T.D., Moseley P.L., Kregel K.C. Aging reduces adaptive capacity and stress protein expression in the liver after heat stress // J. Appl. Physiol. 2000. -V.89. - N2. - P.749-759.

199. Hassell J., Yamada Y., Arikawa-Hirasawa E. Role of perlecan in skeletal development and diseases // Glycoconjugate .- 2003.-V.19.-P.263-267.

200. Hayflick L., Moorhead P. S., The serial cultivation of human diploid cell strains // Exp. Cell Res. -1961. V.25. - P.585-621.215. .Hayftick L., New approaches to old age // Nature. 2000. - V.403. - P.365.

201. Hata R.I., Nagai Y. A low-sulfated chondroitin sulfate in rat blood: an acidic glycosaminoglycan wih a hight metabolic rate // Biochim. Biophys. Acta. 1978. -Vol.543.-N.2.-P.149-155.

202. Hata R, Sunada H, Arai K, Sato T, Ninomiya Y, Nagai Y, Senoo H. Regulation of collagen metabolism and cell growth by epidermal growth factor and ascorbate in cultured human skin fibroblasts // Eur J. Biochem.- 1988.-N.15.-P.261-267.

203. Henriksen J., Ringborg L.H., Roepstorrf P. On-line size-exclusion chromatography/mass spectrometry of low molecular mass heparin // Mass Spectrom.-2004.-V. 39.-P.1305-1312.

204. Herbert V. Vitamins and "Health" Foods.- G.F.Stickley & Co: Philadelphia, 1980.-P.94-96.

205. Higami Y., Shimokawa I., Tomita M., Okimoto Т., Koji Т., Kobayashi N., Ikeda T. Aging accelerates but life-long dietary restriction suppresses apoptosis-related Fas expression on hepatocytes // Am. J. Pathol. 1997. - V.151. - N3. -P.659-663.

206. Hilmer S.N., Warren A., Cogger V.C., Fraser R., McLean A.J., Sullivan D., Le Couteur D.G. The effect of aging on the immunohistochemistry of apolipoprotein E in the liver //Exp. Gerontol. 2004. - V.39. - N1 - P.53-57.

207. Hirsh J., Raschke R. Heparin and low-molecular-weight heparin. The Seventh ACCP Conference on Antithrombotic and Thrombolytic Therapy //Chest.-2004.-V.126.-P.188-203.

208. Hogasen K., Mollnes Т.Е., Harboe M. Heparin binding properties of vitronectin are linked to complex formation as illustrated by in vitropolymerization and binding to the terminal complement complex // J.Biol.Chem. -1992. V.267, №32. - P.23076-23082

209. Hook M., Kjellen L., Jahansson S., Robinson J. Cell-surface glycosaminoglycans. // Annual Rev. Biochem . 1984. - N.6. - P.847-869.

210. Hoppensteadt DA., Fareed J., Kaiser B. Tissue factor inhibitor: potential implications in the treatment of cardiovascular disorder // New Therapeutic Agents in Thrombosis and Thrombolysis,-2003.-P. 231-300.

211. Hunter G.K., Heersche J.N.M., Aubin J.E. Isolation of three species of proteoglycan synthesized by cloned bone cells //Biochemistry.- 1983. Vol.22.-N.4. - P.831-837.

212. Ibbotson S.H., Moran M.N., Nash J.F., Kochevar I.E. The effects of radicals compared with UVB as initiating species for the induction of chronic cutaneous photodamage // J. Invest. Dermatol. 1999. - V.112. - N 6. -P.933-938.

213. Jeffrey D., Zhang L. Influence of core protein sequence on glycosaminoglycan assembly. Current Opinion in Structural Biology. 1996. -V.5. - P.663-670.

214. Jeffrey D Esko. Influence of core protein sequence on glycosaminoglycan assembly /Jeffrey D Esko, L. Zhang // Current Opinion in Structural Biology. -1996.-Vol.5.-P. 663-670.

215. Jermyn M. A. Increasing the Sensitivity of the Anthrone Method for Carbohydrate / M. A. Jermyn // Analytical biochemistry. 1975. - Vol.68. -P.332-335.

216. Jorge A., Robertson W., Robertson K. Ascorbic acid and the synthesis of chondroitin sulfate // Biochimica and biophysica acta. 1998 - Vol.124. - N.l. -P.86-94.

217. Jouis V., Bocquet J., Pujol J.P. Effect of ascorbic acid on secreted proteoglycan from rabbit articular chondrocytes // FEBS Lett. 1985. - Vol.186. -N.2. - P.233-240.

218. Juhlin L. Hyaluronan in skin //J. Intern. Med. 1997. - V.242 - N 1 - P.61-66.

219. Kampmann J.P., Sinding J., Moller-Jorgensen I. Effect of age on liver function //Geriatrics. 1975. - V.30. - N 8. - P.91-95.

220. Kao J., Huey G., Kao R., Stern R. Ascorbic acid stimulates production of glycosaminoglycans in cultured fibroblasts // Exp. Mol. Pathol. 1990. - Vol.53. -N.l. - P.l-10.

221. Kazuyuki S., Hiroshi K. Recent advances in the study of the biosynthesis and functions of sulfated glycosaminoglycans // Current Opinion in Structural Biology. 2000. - Vol.10. -N.5. -P.518-527.

222. Kligman L.H., Schwartz E., Sapadin A.N., Kligman A.M. Collagen loss in photoaged human skin is overestimated by histochemistry //Photodermatol Photoimmunol Photomed. 2000. - V.16. - N 5 - P.224-228.

223. Knudson W., Loeser R.F. CD-44 and integrin matrix receptors participate in cartilage homeostasis // Cell Mol Life Sci.-2002.-Vol.59 (1).- P.36-44.

224. Koide N., Tsuji T.Proteoglycan // Kan. Tan. Sui. 1995. - Vol. 31. - N.3. -P.361-369.

225. Kolset S.O., Gallander J.T. Proteoglycans in haemopoetic cell // Byophys. Acta.-1990.- Vol. 1032.-P.191-211.

226. Kresse H., Schonlierr E. Proteoglycans of the extracellular matrix and growth control // J. Cell Physiol.-2001.- Vol/189. (3).- P.266-274.

227. Lakatta E. G. Age-related alteration in the cardiovascular response to adrenergic mediatr stress // Fed. Proc. 1980. Vol. 39. P. 3173-3177.

228. Laurent T.C., Fraser J.R., Hyaluronan // FASEB J.-1992.-Vol.6.- P.2397.

229. Levene С. I., Bates C. J. Growth and Macromolecular Synthesis in the 3T6 Mouse Fibroblast. General Description and the Role of Ascorbic Acid // Journal of Cell Science.-1970.-Vol.7.-P.671-682.

230. Li W., Johnson DJD., Esmon C.T., Huntington J.A. Structure of the ntithrombin-thrombin-heparin ternary complex reveals the antithrombotic mechanism of heparin // Nature Str Mol Biol.- 2004.-V. 11.-P.857-862.

231. Limoli C.L., Kaplan M.I., Corcoran J. et al. Chromosomal instability and its relationship to other end points of genomic instability // Cancer Res.- 1997.- V. 57. -N24. -P.5557-5563.

232. Limoli C.L., Kaplan M.I., Phillips J.W. et al. Differential induction of chromosomal instability by DNA strand-breaking agents // Cancer Res. 1997. -V.57. - N18. - P.4048-4056.

233. Limoli C.L., Hartmann A., Shephard L. et al. Apoptosis, reproductive failure, and oxidativ stress in Chinese hamster ovary cells with compromised genomic integrity //Cancer Res. 1998. - V.58. - N16. - P.3712-3718.

234. Lindahl U Kjellen L. // Biology of proteoglican. Eds Wight T.N., Mecham R.P. Orlando': Acad. Press. 1987. P.59.

235. Linster C.L., Van Schaftingen E. Rapid stimulation of free glucuronate formation by non-glucuronidable xenobiotics in isolated rat hepatocytes //J. Biol. Chem. 2003. - Vol.278. - N.38. - P.36328-36333.

236. Liu D., Shriver Z., Venkataraman G., EI Shabrawi Y., Sasisekharan R. Tumor cell surface heparan sulfate as cryptic promoters or inhibitors of tumor growth and metastasis // Proc Natl Acad Sci U S A.- 2002. Vol. 99 (2). P.568-573.

237. Longas M.O., Russel C.S. Chemiclal alteration of hyaluronic acid and dermatan sulfate detected in aging human skin by infrared spectroscopy //Biochim. Biophys. Acta. 1986. - V.884. - N 2. - P.265-269.

238. Lowry O.H., Rosebrough N.I., Farr A.L. et al. Protein measurement with the Folin phenol reagent//J. of Biol. Chem. -1951. V.193. - P.265-275.

239. Margelin D., Fourtanier A., Thevenin Т., Medaisko C., Breton M., Picard J. Alteration of proteoglycans in ultraviolet-irradiated skin //Photochem. Photobiol. -1993 V.58. -N2. -P.211-218.

240. McAuliffe A.V. High glucose inhibits effect of ascorbic acid on 35S. sulfate incorporation in mesangial cell and matrix proteoglycan / A.V. McAuliffe, E.J.

241. Fisher, S.V. McLennan // Diabetes Ras. Clin. Pract. 1997. - Vol.37. - N.2. -P.101-108.

242. McAuliffe A.V., Brooks B.A., Fisher E.J., Molyneaux L.M., Yue D.K. Administration of Ascorbic Acid and an Aldose Reductase Inhibitor (Tolrestat) in Diabetes: Effect on Urinary Albumin Excretion // Nephron.-1998.-Vol.80.-P.277-284.

243. Meisatni R. Aging of the nervous system structural and biochemical changes // Physiological Basis of Aging and Geriatrics / Ed. P. S. Timiras, New York: Macmil-lan Publishing Co., 1988. P. 123-143.

244. Meyer L.J., Stern R. Age-dependent changes of hyaluronan in human skin // J. Invest. Dermatol. 1994. - V.102. - N 3. -P.385-389.

245. Melde SL. Enoxaparin-induced retroperitoneal hematoma. Ann Pharmacother.- 2003.-V.37.-P.822-824.

246. Miyachi Y., Ishikawa O. Dermal connective tissue metabolis in photoagein //Australas J. Dermatol. 1998. - V.39. - N 1. - P.19-23.

247. Miyamoto I., Nagase S. Age-related changes in the molecular weight of hyaluronic acid from rat skin //Jikken. Dobutsu. 1984. - V. 33. - N 4 - P.481-485.

248. MorleyA.A. The somatic mutation theory of ageing // Mutat. Res. 1995. -V. 338.- P.19-23.

249. Morris A.J., Turnbull J.E., Riely G.P., Gordon M,Y., Gallagher J.T. Production of heparan sulphate proteoglycans by human bone marrow stromal cells// J. Cell. Sci.-1991.- V.99 (Pt 1). -P.149-156.

250. Muskhelishvili L. , Hart R. W., Turturro A., James S.J. Age-related changes in the intrinsic rate of apoptosis in livers of diet-restricted and ad libitum-fed B6C3F1 mice // Am. J. Pathol. 1995. - V.147. - N 1. - P.20-24.

251. Nambisan B, Kurup PA. Ascorbic acid and glycosaminoglycan and lipid metabolism in guinea pigs fed normal and atherogenic diets Atherosclerosis. // Inn Med. 1975.-N. 11-12.-P.447-461.

252. Pacifi M. Independent secretion of proteoglycans and collagens in chick chondrocyte cultures during acute ascorbic acid treatment. // Biochem. J. 1990. -Vol.15. -N.272(1).- P.193-199.

253. Palacios S. Current perspectives on the benefits of HRT in menopausal women//Maturitas. 1999. - V.33. -N 1. - P.l-13.

254. Pauling L: Vitamin С and the Common Cold. San Francisco: WH Freeman, 1976.- 220p.

255. Peri-Okonny UL., Kenndler E., Stubbs EJ., Guzman N. Characterization of pharmaceutical drugs by a modified nonaqueous capillary electrophoresismass spectrometry method // Electrophoresis.- 2003.-V.24.-P.139-150.

256. Petitou M., Casu В., Lindahl U. 1976-1983, a critical period in the history of heparin: the discovery of the antithrombin binding site // Biochimie.- 2003.-V.85.-P.83-89.

257. Petitou M., van Boeckel CAA. A synthetic antithrombin III binding pentasaccharide is now a drug! // Angew Chem Int Ed.- 2004,-V.43.-P.3118-3133.

258. Petropoulos I., Mary J., Perichon M., Friguet B. Rat peptide methionine sulphoxide reductase: cloning of the cDNA, and down-regulation of gene expression and enzyme activity during aging //Biochem. J. 2001. - V.355. - N 3. -P.819-825.

259. Phillips T.J., Demircay Z., Sahu M. Hormonal effects on skin aging //Clin. Geriatr .Med. -2001. V.17. - N4. -P.661-672.

260. Pierard-Franchimont С., Pierard G.E. Postmenopausal aging of the sebaceous follicle: a comparison between women receiving hormone replacement therapy or not.Dermatology. 2002. - V.204. - N 1. - P. 17-22.

261. Pierard G.E., Letawe C., Dowlati A., Pierard-Franchimont C. Effect of hormone replacement therapy for menopause on the mechanical properties of skin //J. Am. Geriatr. Soc. 1995. -V.43. - N 6. -P.662-665.

262. Popma J.J., Berger P., Ohman E.M., Harrington R.A., Grines C., Weitz J.I. Antithrombotic Therapy during Percutaneous Coronary Intervention // The Seventh ACCP Conference on Antithrombotic and Thrombolytic Therapy.-2004.-V.126.-P.576-599.

263. Quang C., Malek A., Khaledi M. Separation of peptides and proteins by capillary electrophoresis using acidic buffers containing tetraalkylammonium cations and cyclodextrins //Electrophoresis.- 2003.-V.24.-P.824-828.

264. Raine-Fenning N.J., Brincat M.P., Muscat-Baron Y .Skin aging and menopause: implications for treatment. //Am. J. Clin. Dermatol. 2003. - V.4. - N 6. - P.371-378.

265. Ramachandran A., Zhang M., Goad D., Olah G., Malayer J.R., Rassi Z. Capillary electrophoresis and fluorescence studies on molecular beacon-based variable length oligonucleotide target discrimination // Electrophoresis.- 2003.-V.24.-P.70-77.

266. Raman R., Sasisekharan V., Sasisekharan R. Structural insights into biological roles of protein-glycosaminoglycan interactions // Chemistry & Biology.-2005.-V.12.-P.1-11.

267. Ramsden L., Rider С. C. Selective and differential binding of interleukin (IL) 1 alpha. IL - 1 beta, IL - 2 and IL - 6 to glycosaminoglycans // Eur. J. Immunol/ - 1992. - V.22. - №11/ - P.3027 - 3031.

268. Reiter R.J. The pineal gland and melatonin in relation to aging A summary of the theories and of the data //Exp. Gerontol. 1995. - V.30. - P.199-212.

269. Rider C.C. Sulphated glyconjugates in the immune system // Biochem. Soc. Trans. 1992. - V.20. - №2. - P.291-295.

270. Robinson J.A., Robinson H.C. Initiation of chondroiti sulfate syntesis by beta-D-galactosides. Substrates for galactosyltransferase П. // Biochem. J. 1985. -Vol. 227. -N.3. - P.805-814.

271. Romero F.J., Bosch-Morell F., Romero M.J. etc.//Environ.Health Perspect. -1998. V.106. - P.1229-1234.

272. Rosenthal P., Pincus M., Fink D. Sex- and age-related differences in bilirubin concentrations in serum //Clin. Chem. 1984. -V.30. - N 8. - P.1380-1382.

273. Roth G.S., Joseph J.A. Peculiarities of the effect of hormones and transmitters during aging: Modulation of changes in dopamine action // Gerontology. 1988. Vol. 34. P. 22-28.

274. Saad O.M., Leary J.A. Compositional analysis and quantification of heparin and heparan sulfate by electrospray ionization ion trap mass spectrometry //Anal Chem.- 2003.-V.75.-P.2985-2995.

275. Saad O.M., Leary J.A. Delineating mechanisms of dissociation for isomeric heparin disaccharides using isotope labeling and ion trap tandem mass spectrometry // Am Soc Mass Spectrom.- 2004.-V.15.-P.1274-1286.

276. Sanderson R.D., Yang Y., Suva L.J., Kelly T. Heparan sulfate proteoglycans and heparanase-partners in osteolytic tumor growth and metastasis // Matrix Biol.-2004.-V.23.-P.341-352.

277. Sator P.G., Schmidt J.B., Sator M.O., Huber J.C., Honigsmann H. The influence of hormone replacement therapy on skin ageing: a pilot study //Maturitas. 2001. - V.25. - N 1. - P.43-55.

278. Schidt J.B., Binder M., Demschik G., Bieglmaer C., Reiner. Treatment of aging topical'estrogens. // Int. J. Dermatol. 1996. - V.35. - N 9. - P.669-674.

279. Schmitz С, Axmacher В., Zunker U., Korrti. Age- related changes of DNA repair and mitochondrial DNA synthesis in the mouse brain // Acta Neuropathol. 1999. Vol. 97. P. 71-81.

280. Scholefield Z., Yates E.A., Wayne G., Amour A., McDowell W., Turnbull JE. Heparan sulfate regulates amyloid precursor protein processing by BACE1, the Alzheimer // Cell Biol.- 2003.-V.163.-P.97-107.

281. Shigenaga M.K., Hogen T.M., Ames. B.N. // Proc. Natl Acad. Sci. 1994. -V.91. - P.10771.

282. Shojania A.M. More on: laboratory monitoring of low molecular weight heparin necessary? // Thromb Haemost.- 2004.-V.2.-P.2276-2277.

283. Schwartz E. Connective tissue alterations in the skin of ultraviolet irradiated hairless mice //J. Invest. Dermatol. 1988. - V.91. - N 2. -P.158-161.

284. Silbert J.E. Sugumaran G .Intracellular membranes in synthesis, transport, and metabolism of proteoglycans Biochim. // Biophys. Acta. 1995. - Vol. 1241. -N.3. - P.371-384.

285. Spindler K.P., Shapiro D.B., Gross S.B., Brighton C.T., Clark C.C. The effect of ascorbic acid on the metabolism of rat calvarial bone cells in vitro //J. Orthop. Res. 1989. - Vol. 7. -N.5. -P.696-701.

286. Srinivasan S., Govindarajulu A. Impact of oestradiol and progesterone on the glycosaminoglycans and their depolymerizing enzymes of the rat mammary gland // Acta Physiologica Scandinavica.-2000.-Vol.l68.-N.3.-P385.

287. Stringer S.E., Kandola B.S., Pye D.A., Gallagher J.T. Heparin sequencing // Glycobiology.- 2003 .-V. 13 .-P.97-107.

288. Struck H. Possible causes of change in collagen metabolism in aging // Z. Gerontol. 1984. - V.17. - N 2. - P.85-88.

289. Sweeney E.A., Lortat- Jacob H., Priestley G.V., Nacamoto В., Papayannopoulou T. Sulfated polysaccharides increase plasma levels of SDF-1 in monkeys and mice: involvement in mobilization of stem/progenitor cell // Blood.-2002.- Vol. 99 (1). -P.44-51.

290. Takahashi Y., Ishikawa O., Okada K., Kojima Y.s Igarashi Y., Miyachi Y. Disaccharide analysis of human skin glycosaminoglycans in sun-exposed and sun-protected skin of aged people // J. Dermatol. Sci. 1996. - V.ll. - N 2. - P.129-133.

291. Takahashi Y., Ishikawa O., Okada K., Ohnishi K., Miyachi Y. Disaccharide analysis of the skin glycosaminoglycans in chronically ultraviolet light-irradiated hairless mice //J. Dermatol. Sci. 1995. - V.10. - N 2. - P.139-144.

292. Thanawiroon C., Linhardt R.J. Separation of a complex mixture of heparinderived oligosaccharides using reversed-phase liquid chromatography // Chromatogr.- 2003.-V. 114.-P.215-223.

293. Thanawiroon C., Rice K.G., Toida Т., Linhardt R.J. Liquid chromatography/mass spectrometry sequencing approach for highly sulfated heparin-derived oligosaccharides // Biol Chem.- 2004.-V.279.-P.2608-2615.

294. The MATISSE Investigators. Subcutaneous fondaparinux versus intravenous unfractionated heparin in the initial treatment of pulmonary embolism. N Engl //Med.-2003.-V.349.-P. 1695-1702.

295. Thornton M.J. The biological actions of estrogens on skin. //Exp. Dermatol.2002. V. 11. - N 6. - P.487-502.

296. Toole В .P. Hyaluronan in morphogenesis // J. Intern. Med.-1997.- Vol.242.-P.35.

297. Vaillant L., Callens A. Hormone replacement treatment and skin aging //Therapie. 1996. - V.51. - N 1. -P.67-70.

298. Viclund L., Loo B.M., Hermonen J., EI-Darwish K., Jalkanen M., Salmivirta M. Expression and characterization of minican, a recombinant syndecan-1 with extensively truncated core protein // Biochem Biophys Res Commun.- 2002.- Vol.290 (1). -P.146-152.

299. Vlodavsky I., Zcharia E., Goldshmidt O., Eshel R., Katz B.Z., Minucci S., Kovalchuk O., Penco S., Pisano C., Naggi A., Casu B. Involvement of heparanase in tumor progression and normal differentiation // Pathophysiol Haemost Thr.2003.-V. 33.-P.59-61.

300. Vogchan P., Warda M., Toyoda H., Toida Т., Marks RM., Linhardt RJ. Structural characterization of human liver heparan sulfate // Biochim Biophys Acta.-2005.-V.1721.-P.l-8.

301. Von Zglinicki Т., Burkle A., Kirkwood Т. B. L. Stress, DNA damage and ageing an integrative approach // Exp. Gerontology 2001. Vol. 36. P. 1049-1062.

302. Wang Y., Sacomoto K., Khosla J., Saimes P.L. Detection of chondrotin sulfates and decorin in developing fetal and neonatal rat lung // Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol.-2002 Vol.282 (3). P.484-490.

303. Weigel Paul H., Fuller Gerald M., Le Boeuf Robert D. A model for the role of hyaluronic acid and fibrin in the early events during the inflammatory response and Wound healing // J. Theor. Biol.-Vol. 119. -P.219-234.

304. Whitelock J.M., Iozzo R. Heparan sulfate, a complex polymer charged with biological activity// Chem Rev.- 2005.-V.195.-P.2745-2764.

305. Whitesell J.K., Minton M.S. Tables of spectral data for structure determination of organic compounds. London, 1987. Second edition. - P. 195.

306. Willen M.D., Sorrel J.M., Lekan C.C., Davis B.R., Caplan A.I. Pattern of glycosaminoglycan immunostaining in human skin during aging // J. Invest. Dermatol. 1991. - V.96 - N 6. - P.968-974.

307. Zhou L., Higginbotham E.J., Yue B.Y. Effects of ascorbic acid on levels of fibronectin, laminin and collagen type 1 in bovine trabecular meshwork in organ culture // Taylor & Francis.-1998.-Vol.l7.-N.2.-P.211-217.

308. Zouboulis C.C., Boschnakow A. Chronological ageing and photoageing of the human sebaceous gland //Clin. Exp. Dermatol. 2001. - V.26. - N 7. - P.600-607.

309. Zouboulis Ch.C. Intrinsic skin aging. A critical appraisal of the role of hormones //Hautarzt. 2003. - V.54. - N9. - P.825-832.

Информация о работе

Шаехмуллина, Айгуль Разифовна
кандидата медицинских наук
Уфа, 2008
ВАК 03.00.04

Диссертация

Экспериментальное исследование влияния больших доз аскорбиновой кислоты на возраст - зависимое содержание биополимеров в органах и тканях. - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы