Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экспериментальная гаплоидия у яровой мягкой пшеницы

ВАК РФ 03.00.05, Ботаника

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Зарянова, Лидия Дмитриевна

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Спорофитный путь развития микроспор in vitro у яровой мягкой 10 пшеницы

1.2. Оптимальная фаза развития микроспор при индукции эмбриоидогенеза

1.3. Влияние низких положительных температур на эмбриоидогенез в. 27 культуре изолированных пыльников яровой мягкой пшеницы

1.4. Молекулярно-генетические особенности эмбриоидогенеза у яровой 29 мягкой пшеницы

1.5. Эффективность морфогенеза и регенерации растений в культуре изолированных пыльников яровой мягкой пшеницы

1.6.3аюпочение

2. Материал и методы исследований

2.1. Растительный материал

2.2. Методы исследований

2.2.1. Методы культивирования изолированных пыльников

2.2.2. Цитологические методы исследования

2.2.3. Биохимические методы исследования

2.2.3.1. Выделение тотальной ДНК

2.2.3.2. Выделение мРНК

2.2.3.3. Дифференциальный РНК дисплей

2.2.3.4. Метод полимеразной цепной реакции 57 2.2.3.4. Статистические методы исследования

3. Влияние различных факторов на эмбриоидогенез у яровой мягкой 61 пшеницы

3.1. Зависимость эмбриоидогенеза от стадии развития микроспор и 61 состояния стенок гнезда пыльника

3.2. Исследование функциональной активности генов при индукции 73 эмбриоидогенеза низкими положительными температурами

4. Генетическая изменчивость при эмбриоидогенезе у 91 яровой мягкой пшеницы

4.1. Геномная изменчивость

4.2.Селекционно-генетическая оценка андроклинных удвоенных 94 гаплоидных линий яровой мягкой пшеницы

4.3. Молекулярно-генетическая оценка сортов яровой мягкой пшеницы 100 и их андроклинных удвоенных гаплоидных линий

Обсуждение результатов

Выводы

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экспериментальная гаплоидия у яровой мягкой пшеницы"

Зрелые пыльцевые зерна представляют собой мужской гаметофит и состоят из двух или более клеток. Это уникальная структура, играющая значительную роль в образовании плода. Пыльцевые зерна широко использовались в качестве материала для изучения механизмов воспроизведения растений задолго до развития более передовых физиологических и биохимических технологий и технологий культуры растительных клеток, тканей и органов. К ним относятся примеры множества исследований, направленных на изучение и уточнение таксономии растений, по палеоботанике, палинологии, при изучении партенокарпии, реакции несовместимости, разведении растений и генетике. Таким образом, пыльцевые зерна - это универсальный объект исследования многих растениеводческих наук. Уникальность такого явления состоит в том, что микроспоры и пыльцевые зерна развиваются в пыльниках. Пыльник - это особая интегрированная система, способная к саморегулированию как биохимических и физиологических процессов, происходящих в нем, так и всех морфогенетических процессов, свойственных растению в целом, в том числе, чередования поколений спорофит-гаметофит. В связи с этим важно исследование особенностей бесполого пути размножения в культуре изолированных пыльников таких важных для народного хозяйства видов, как яровая мягкая пшеница.

Актуальность темы диссертации. В современных ботанических, генетических, молекулярно-биологических, биотехнологических и селекционных исследованиях важнейших сельскохозяйственных культур существуют проблемы, решение которых возможно только с помощью новых, нетрадиционных методов, позволяющих выявить генетический потенциал растений.

Сказанное в большей степени относится к методу культивирования изолированных пыльников, основанного на использовании явления андрогенеза in vitro - процесса образования гаплоидного растения (спорофита) из микроспоры или клеток пыльцевого зерна - гаметофита высших растений (Guha, Maheshvari, 1964). Этот уникальный феномен связан с переключением программы развития спорогенных клеток с обычного для них гаметофитного пути на принципиально иной - спорофитный путь развития. Смены поколений (спорофитного на гаметофитное), характерной для растений in vivo, не происходит, а производные спорогенных клеток -микроспоры и пыльцевые зерна ведут себя подобно зиготам (Батыгина, 1983, 1987, 1993; Горбунова, 1993). Поэтому андрогенез in vitro рассматривается как особая система размножения растений (Суханов, 1983), позволяющая ускоренно получать полностью гомозиготные растения-регенеранты при гомозиготизации гаплоидных растений, выращенных из микроспор гибридных форм в культуре изолировнных пыльников.

Культивирование изолированных пыльников основано на использовании явления прямого или непрямого андрогенеза in vitro (Vasil, Nitsch, 1975; Sangwan, Sangwan-Norrel, 1987). При прямом андрогенезе in vitro образование гаплоидного растения происходит за счет микроспор или клеток пыльцевого зерна, развивающихся в эмбриоиды. Прямой андрогенез in vitro связан с явлением эмбриоидогенеза как типа бесполого размножения растений (Batygina, 1990). В свою очередь, эмбриоидогенез рассматривается как путь морфогенеза в культуре пыльников (Batygina, 1984, 1986; Kudarov et al., 1990). При непрямом андрогенезе in vitro микроспоры или клетки пыльцевого зерна образуют недифференцированный каллус, который после переноса на среду, индуцирующую органогенез, дает начало растениям-регенерантам различной степени плоидности. Непрямой андрогенез in vitro связан с явлением гемморизогенеза как типа бесполого размножения растений (Batygina, 1990), в то же время, гемморизогенез (органогенез) рассматривается как путь морфогенеза в культуре пыльников (Kudarov et al., 1990). Следует подчеркнуть, что эмбриоидогенез несомненно является более выгодным способом получения гаплоидов in vitro (Суханов, 1983; Шамров и др, 1988; Горбунова и др, 1987; Батыгина и др, 1992), поскольку он не связан со сложным многоступенчатым процессом морфогенеза через каллус, требующим трудоемкой процедуры пассирования.

В литературе, посвященной экспериментальной гаплоидии, наиболее распространен термин андрогенез in vitro, хотя на наш взгляд, применение этого термина для обозначения процесса образования гаплоидных растений из микроспор и/или клеток пыльцевого зерна не совсем удачно. Действительно, согласно существующей терминологии, биолог (как ботаник, так и зоолог) подразумевает под «андрогенезом» мужской партеногенез — развитие нового организма из гаметы - спермия (Подцубная-Арнольди, 1976; Токин, 1987). Кроме того, как справедливо отмечает B.C. Тырнов (1986), термин «андрогенез in vitro» многословен, зачастую слова «in vitro» опускаются, что приводит к путанице двух понятий - «андрогенез in vitro» и собственно «андрогенез». Чтобы избежать этого, для явления «андрогенез in vitro» был предложен термин «андроклиния» (Гаплоидия и селекция, 1976), однако, к сожалению, этот термин практически не получил распространения, особенно в зарубежной литературе. Далее , в нашей работе мы будем придерживаться термина «андроклиния», а прямой андрогенез in vitro будем называть эмбриоидогенезом. Здесь же уместно дать определение «эмбриоида» и «каллуса».

В разрабатываемой Т.Б.Батыгиной концепции репродукции (Батыгина, 1987, 1993; Batygina, 1990) эмбриоид рассматривается как зародышеподобная биполярная структура, образующаяся асексуально, как зачаток нового растительного организма, как одна из структурных единиц бесполого размножения цветковых растений in vivo и in vitro. В рамках то же концепции каллус рассматривается гетерогенная интегрированная структура (система), образующаяся в результате пролиферации клеток на поверхности отдельных структур растительного организма; каллус формируется, как правило, из исходно разных клеток генеративных или вегетативных органов; состоит из групп неоднородных клеток, имеющих морфогенетические потенции, которые реализуются различными путями (эмбриоидогенез, органогенез, гистогенез).

Критическое отношение к гипотезе эмбриоидогенеза/прямого андрогенеза in vitro из одиночной клетки высказывалось почти 30 лет назад (Homes et al.,1967; Torrey, 1967), что вполне естественно, так как из-за отсутствия детальных цитоэмбриологических данных о начальных этапах эмбриоидогенеза из одиночной изолированной клетки трудно говорить о прямом и организованном пути образования эмбриоида и сейчас. В настоящее время имеются разрозненные публикации о цитологических особенностях разных этапов эмбриоидогенеза у яровой мягкой пшеницы (Размологов и соавт., 1979; Shumann et al., 1986; Kruger et al., 1988; Barnabas et al., 1988; Higuchi, 1991).

Совершенно не разработаны подходы к унификации процесса культивирования изолированных пыльников яровой мягкой пшеницы, что приводит к разночтению результатов культивирования. Поэтому невозможно сравнивать экспериментальные данные, полученные разными авторами, успешно работающими в данной области (Дьячук и др., 1986; Приходько, 1988; Barnabas et al., 1989; Foroughi-Wehr, et al., 1990; Shimada et al., 1993; Henry et al., 1993; Горбунова, 1993; Першина и др., 1993).

До настоящего времени открыт вопрос об индукторах эмбриоидогенеза. Остается далекой от окончательного решения и ключевая проблема эмбриоидогенеза - механизм переключения программы развития микроспор/клеток пыльцевого зерна с гаметофитного пути на спорофитный. Не исследованы вопросы: каковы предпосылки этого явления в условиях in vivo; каковы начальные этапы дифференциации микроспор по пути эмбриоидогенеза и/или каллусогенеза и каковы эндогенные факторы, предопределяющие выбор различных путей морфогенеза. Поэтому можно предположить, что исследование молекулярно-генетических особенностей ответной реакции экспланта на условия культивирования являются 9 решающими для понимания путей морфогенеза. Изучение этих вопросов может иметь принципиальное значение, так как, знание механизмов «переключения» генетических систем развития микроспор, могло бы приблизить к возможности управления процессом морфогенеза в культуре изолированных пыльников и решению фундаментальной проблемы современной биологии - проблемы морфогенеза.

Цель исследования заключалась в комплексном изучении ключевых событий, происходящих в микроспорах яровой мягкой пшеницы под влиянием условий культивирования при спорофит—спорофитном пути развития.

При реализации поставленной цели решались следующие задачи:

1. Цитологический мониторинг микроспор, способных инициировать спорофит—спорофитный путь развития.

2. Изучение цитологических характеристик морфогенных микроспор.

3. Исследование экспрессии генов спорофитного пути развития при воздействии низкими положительными температурами на микроспоры.

4. Молекулярно-генетический анализ изменчивости ДНК при культивировании изолированных пыльников яровой мягкой пшеницы.

5. Анализ структуры урожая и генетической изменчивости у удвоенных гаплоидных форм яровой мягкой пшеницы.

1. Обзор литературы

Заключение Диссертация по теме "Ботаника", Зарянова, Лидия Дмитриевна

ВЫВОДЫ

1. Показано, что на путь бесполого размножения в культуре изолированных пыльников вступают микроспоры, находящиеся на поздней фазе микроспорогенеза. Ни размер микроспоры, ни размеры ядра и ядрышек не играют определяющей роли при эмбриоидогенезе.

2. Цитологический мониторинг дифференциальных путей морфогенеза в культуре изолированных пыльников показал наличие принципиальных различий в начальных путях эмбриоидогенеза и каллусогенеза: а) при эмбриоидогенезе первое деление ядра микроспоры приводит к образованию равных ядер и клеток, которые развиваются в многоклеточные структуры с упорядоченным расположением клеток, затем такие структуры прорастают в эмбриоиды; б) на путь каллусогенеза вступают микроспоры, первое деление ядра которых неравное, что и обуславливает образование структур с нерегулярным, неупорядоченным расположением клеток.

3. Впервые исследована функциональная активность генов, определяющих ответ микроспор на воздействие низкими положительными температурами: получена кДНК, анализ которой с использованием специфических праймеров указывает на возможное участие в регуляции экспрессии спорофитной генетической информации в культуре изолированных пыльников ферментных систем клеточного цикла, в частности, протеинкиназ сёс 25 и сс1с 2.

4. Впервые показана дифференциальная экспрессия транскриптов, накапливающихся в микроспорах в ответ на воздействие пониженных

121 положительных температур на пыльники яровой мягкой пшеницы поздней стадии микроспорогенеза. Эта спорофитная генетическая информация реализуется в перестройке веретена деления первого митоза и появлении микроспор с двумя равными ядрами, что характеризует начало эмбриоидогенеза.

5. Показано, что условия культивирования изолированных пыльников, не вызывают генетических изменений в ДНК, доказательством чего является отсутствие у исследованных генотипов и их андроклинных удвоенных гаплоидных линий молекулярного полиморфизма ДНК, изученного методом ЯАРВ-РСЯ анализа ДНК с использованием 15 праймеров.

6. Исследована возможность сохранения стабильности генома при культивировании изолированных пыльников, что позволяет получать полностью гомозиготные формы из гибридных линий и чистые линии из многолинейных сортов.

7. Показано, что молекулярные спектры ДНК у гибридной формы Фотос, характеризующейся уникальной продуктивностью морфогенеза в культуре изолированных пыльников, помимо ампликонов, свойственных родительским сортам Жница и Московская 35, содержат дополнительные полиморфные локусы.

1.6. Заключение

Гаплоидия - одно из типичных отклонений от полового размножения, и по существу, является одной из форм апомиксиса, т.е. размножения без оплодотворения (Хохлов, 1965, 1967). Н.И. Вавилов еще в 1932 г. писал, что «.надлежит уделить особое внимание . разработке методики получения гомозиготных растений путем удвоения хромосом у гаплоидных, диплоидных и других форм».

В современных селекционных и генетических исследованиях одной из важнейших задач является быстрое достижение константности селектируемого материала. Сказанное относится к сортам ТгШсшп аезйуит Ь., для которых не имеется другой возможности быстрого получения гомозиготных форм из гибридных популяций.

Таким образом, для яровой мягкой пшеницы андроклиния - это вид бесполого размножения, способствующий быстрому получению константных генотипов.

2. Материалы и методы исследования 2.1. Растительный материал

Объектом исследования служили сорта, гибридные формы первого и последующих поколений и селекционные линии яровой мягкой пшеницы -ТгШсит аевйуит Ь. Характеристика происхождения некоторых представителей из исследованной коллекции приведена в таблице 2.1.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Зарянова, Лидия Дмитриевна, Уфа

1. Ананьев Е.В., Бочканов С.С., Сонина Н.В., Лукьянюк С.Ф., Игнатова С.А. Изменение структуры хлоропластного генома у регенерантов тритикале, полученных из микроспор при культивировании пыльников // Доклады ВАСХНИЛ. 1986. №6. С.1-3.

2. Батыгина Т.Б. Эмбриология пшеницы. Л.: Колос, 1974. 206 с.

3. Батыгина Т.Б. Пыльник как модель изучения морфогенетических потенций и путей морфогенеза//Тез. докл. Всесоюз. симп. "Развитие мужской генеративной сферы растений (морфо-физиологические аспекты)". Симферополь, 1983. С. 9-10.

4. Батыгина Т.Б. Хлебное зерно: Атлас. Л.: Наука. Ленингр. отд-ние, 1987. 103 с.

5. БатыгинаТ.Б. Эмбриоидогенез как способ образования индивидуума в естественных условиях и в культуре in vitro // Тез. докл. на П съезде Всесоюз.об-ва физиологов растений. М., 1990. С.14.

6. Батыгина Т.Б. Эмбриоидогения новая категория способов размножения цветковых растений//Тр. Ботан. ин-та им. В.Л.Комарова. Вып. 8. СПб., 1993. С. 15-25.

7. Батыгина Т.Б., Круглова H.H., Горбунова В.Ю. Культура изолированных пыльников злаков с позиции экспериментальной эмбриологии растений (методологические аспекты). Уфа: БНЦ УрО РАН, 1992. 32 с.

8. Батыгина Т.Б., Терехин Э.С., Алимова Г.К., Яковлев М.С. Генезис мужских спорангиев Gramineae и Ericaceae // Бот. журн. 1963. Т. 48. № 8. С.1108-1120.

9. Бродский В.Я. Трофика клетки. М.: Наука, 1966. 354 с.

10. Бутенко Р.Г. Культуро изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.:Наука, 1964. 272с.

11. Вавилов Н.И. Генетика на службе социалистического земледелия (1932)//Вавилов Н.И. Избр. соч. М.: Колос, 1966. С. 32-56.

12. Внучкова В.А., Чеботарева Т.М., Глущенко Г.И. Получение гаплоидов и фертильных андрогенетических линий пшеницы при посадке пыльников in уйго//Состояние и развитие сельскохозяйственной биотехнологии. М.: Колос, 1986. С. 74.

13. Внучкова В.А., Чеботарева Т.М. Оптимизация условий получения гаплоидов пшеницы при посадке пыльников in vitro// Докл. ВАСХНИЛ, 1990. № 5. С. 6-9.

14. Внучкова В.А., Анащенко A.B. Создание перспективных линий яровой пшеницы при использовании метода гаплоидии in vitro // Докл. Рос. акад. с.-х. наук. 1993. №1. С. 12-15.

15. Гаплоидия и селекция. М.: Наука. 1976. 221 с.

16. Геращенков Г.А., Горбунова В.Ю., . Зарянова Л.Д., Рожнова H.A., Вахитов В.А. RAPD ПЦР- анализ изменчивости генома сортов яровой мягкой пшеницы и их андроклинных дигаплоидных форм //Генетика. 2000. Т 36, №8. С. 1081-1087.

17. Горбунова В.Ю. Способ культивирования изолированных пыльников злаковых растений//А.С. 1724688.1992. Бюлл. № 13.

18. Горбунова В.Ю. Генетические предпосылки спорофитного пути развития микроспор злаков в условиях in vitro. Уфа: УНЦ РАН, 1993. 104 с.

19. Горбунова В. Ю., Докичева Р. А., Кужлева Н. Г. Изменчивость сортовяровой пшеницы по признаку «андроклиния» в изолированной культуре пыльников//Исследования по генетике и селекции растений на Урале: Информ. материалы. Свердловск. 1987. С.29-30.

20. Горбунова В.Ю., Круглова H.H. Методические аспекты культивирования изолированных пыльников пшеницы. Уфа: БНЦ УрО АН СССР. 1988. 20 с.

21. Горбунова В.Ю., Круглова H.H. Влияние генетической детерминации уровня эндогенных фитогормонов на выход андрогенных новообразований у пшеницы/ТГенетика. 1994. Т. 30. Прилож. С. 34.

22. Гостимский С.А., Багрова А.М., Ежова Т.А. Обнаружение и цитогенетический анализ изменчивости, возникающей при регенерации растений из культуры тканей посевного гороха // Докл. АН СССР. 1985. Т.283. №4. С. 1007-1011.

23. Гостимский С.А., Кокаева З.Г., Боброва В.К. Использование молекулярных маркеров для анализа генома растений // Генетика 1999. Т. 35. № 11. С. 1538-1549.

24. Дьячук П.А., Дьячук Т.И., Кудашкина C.B., Сафронова Н.Ф., Давыдов С.Д. Получение гаплоидных растений мягкой пшеницы саратовских сортов в культуре пыльников//Доклады ВАСХНИЛ. 1986. № 10. С. 3-10.

25. Дьячук Т.И., Дьячук П.А. Культура пыльников злаков: современное состояние, проблемы, перспективы // С.-х. биол. 1989. № 5. С. 3-10.

26. Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В., Полшцук В.Е. Методы культуры ткани в физиологии и биохимии растений. Киев: Наукова думка. 1980. С.3-277.

27. Круглова H.H. Темпы развития пыльцевых зерен в пределах соцветия двукисточника тростникового/ТВестник ЛГУ. Серия биол. 1984. Депон. в ВИНИТИ № 3886-84.10 с.

28. Круглова H.H. Эмбриология двукисточника тростникового Phalaroides arundinaceae (L.) Rausch.Z/Автореф. Дисс. канд. биол. наук. Л., 1985. 24 с.

29. Круглова H.H., Горбунова В.Ю., Батыгина Т.Б. Периодизация развития пыльника злаков. Уфа: БНЦ УрО АН СССР, 1991.18 с.

30. Крупнов В.А. Генная и цитоплазматическая мужская стерильность растений. М: .Колос. 1973.277 с.

31. Крупнов В.А., Мартынов С.П., Седловский А.И., Добротовская Т.В. Методические указания по использованию метода ОСП (односемя с растения на потомство) в селекции самоопыляющихся культур. М.: ВАСХНИЛ. 1983. 36 с.

32. Крупнов В.А. Сравнительная оценка биотехнологических методов в селекции злаков // Вестн. с.-х. науки. 1989. №3. С.24-29.

33. Кузьменко А.И., Дьячук Т.И., Галкин А.Н., Данилова В.А., Зотова Г.К. Об итогах изучения андрогенных линий яровой пшеницы // Сел. и семен. 1990. №4. С.10-12.

34. Кунах В.А., Адонин В.И., Алпатова Л.К., Ткачук З.Ю., Потапальский А.И. Цитогенетические действия нативных и модифицированных тиофосфамидом РНК на культутру тканей Haplopappus gracilis // Цитология. 1985. Т.27. С.476-487.

35. Лукьянюк С.Ф., Игнатова С.А. Влияние различных факторов на гаплопродукцию при культивировании пыльников тритикале // Науч.-техн. бюлл. Всес. селекц.-генет. ин-та. 1986. №2. С. 41.

36. Нгуен Хонг Минь, Смирнов В.А., Балашова H.H. Генетические различия по потребности к фитогормонам//Изв. АН Республики Молдова.

37. Биол. и хим. науки. 1991. №5. С. 13-20.

38. Орел Л.И. Цитология мужской цитоплазматической стерильности кукурузы и других культур.М:. Колос .1974. 283 с.

39. Палилова А.Н. Цитоплазматическая мужская стерильность у растений. Минск: Наука и техника. 1969.277 с.

40. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений // М.:Колос, 1974. С.66-102.

41. Першина JI.A., Нумерова О.М., Белова Л.И., Девяткина Э.П., Шумный В.К. Особенности андрогенеза у мягкой пшеницы, межвидовых и меж родовых гибридов//Сиб. биол. журн. 1993. Вып. 3. С. 3-9.

42. Подцубная-Арнольди В.А. Цитоэмбриология покрытосеменых растений. Основы и перспективы. М.: Наука 1976. 508 с.

43. Приходько Н.И. Получение гаплоидов в культуре пыльников мягкой яровой пшеницы//Науч.-техн. Б.лл. ВНИИ растениеводства. 1988. N 174. С. 51-59.

44. Прозина М.Н. Ботаническая микротехника. М.: Высшая школа, 1960.206 с.

45. Пухальский В.А. К разработке системного подхода в определении генов, детерминирующих количественные и качественные признаки//С.-х. биол. 1992. №1. С.17-21.

46. Размологов В.П., Пухальский В.А. Культура пыльцевых зерен Triticum aestivum L. in укго//Докл. Акад. наук СССР. 1979. Т.244. №5. С. 1278-1280.

47. Резникова С.А. Пыльник как интегрированная система//Тез. докл. Всесо.зн. симп. "Развитие мужской генеративной сферы растений (морфофизиологические аспекты)". Симферополь, 1983. С. 69-70.

48. Резникова С.А. Цитология и физиология развивающегося пыльника.1. М.: Наука, 1984. 272с.

49. Сатарова Т.Н. Особенности культуры пыльников кукурузы на примере генотипа В14XWÍ9//h3b. РАН. Сер. биол. 1994. № 5. С. 771.

50. Сиволап Ю.М., Солоденко А.Е., Бурлов В.В. RAPD анализ молекулярно-генетического полиморфизма подсолнечника (Helianthus arniusy/Генетика. 1998. Т34. №2. С.266- 271.

51. Стегний В.Н., Чудинова Ю.В., Салина Е.А. RAPD — анализ разнопродуктивных сортов и гибридов льна культурного (Linum usitatissimum Ь.)//Генетика. 2000. Т. 36. №10. С.1370-1373.

52. Супрунова Т.П., Кочиева Е.З., Лаптева М.К., и др. Молекулярный анализ вариабельности генома соматических гибридов.: Сб. тр. VII междунар. Конф. «Биология клеток растений in vitro, биотехнология и сохранение генофонда» . М., 1997. С.351.

53. Суханов В.М. Андроклиния и ее особенности у пшеницы: Автореф. Дис. канд. биол. наук. Саратов. 1983. 24 с.

54. Токин Б.П. Общая эмбриология. М.: Высшая школа. 1987. 480 с.

55. Тураев А.М., Шамина З.Б. Оптимизация состава среды для культивирования пыльников хлопчатника//Физиол. раст. 1986. Т. 33. № 3. С. 565-571.

56. Тырнов B.C. Андрогенез in vitro у растений//Биология развития и управление наследственностью. М.: Наука. 1986. С. 138-164.

57. Хеберле-Борс Э. Гаплоидные спорофиты и функциональные мужские гаметофиты из культивируемой in vitro незрелой пыльцы табака// Биология культивируемых клеток и биотехнология. М.: Наука, 1991. С. 146.

58. Хохлов С.С. Апомиксис: Классификация и распространение у покрытосеменных//Успехи современной генетики. М.: Наука, 1967. Вып.11. С.43-105.

59. Хохлов С.С. Полиплоидия и апомиксис у покрытосеменных растениМПолиплоидия и селекция. М.: Наука, 1965. С. 62-69.

60. Шамина З.Б. Андрогенез и получение гаплоидов в культуре пыльников и микроспор // Культура клеток растений. М.: Наука, 1981. С. 124126.

61. Ainsworth С. Isolation of RNA from Floral Tissue of Rumex Acetosa (Sorrei) // Plant Mol. Biol. Reporter 1994. V. 12. № 3. p.198-203. (Ref. Number: 1252).

62. Albert J.A., Wahlberg J., Lundeberg J., Cox S., Sandstrom E., Wahren В., Uhlen M. Persistence of azidothymidine-resistant human immunodeficiency virus type 1 RNA genotypes in post- treatment sera // J. Virol. 1992. v.66. P.5627-5630. (Ref. Number: 735).

63. Allen R.L., Londstale D.M. Molecular characterization of one of the maize poly-galacturonase gene family members which are expressed during late pollen development // Plant J. 1993. V.3 №2. P.261-271. (Ref. Number: 1557).

64. Astwood JD., and Hill RD. Molecular biology of male gamete development in plants An averview. In Pollen Biotechnology, S.S Mohapatra and R.B. Knox, eds. New York: Chapman and Hall. 1996. P. 3-37.

65. Baenziger P.S.,Wesenberg D.M., Schaffer G.W., Galun E., Feldman M. Variation among anther culture derive doubled haploids of "Kitt" wheat // Proc. Intern. Sympl. Wheat Genetics. Kyoto. 1983. P.575-581.

66. Barnabas B., Fransz P., Schell J. Ultrastructural studies on pollenembryoginesis in maize (Zea mays L.) // Plant Cell Repts. 1987. V.6. #3. P. 212-215.

67. Barnabas B., Szakacs E., Liszt K. Cytological aspects of in vitro androgenesis in cereals//Sexual reproduction in higher plants. Berlin, 1988. P. 113118.

68. Barnabas B., Szakasz E., Kovacs G. Induction of haploid plants from wheat (Triticum aestivum L.) anther culture//Sver. Utsadesforen. Tidskr. 1989. V. 99. # 2. P.l 15-123.

69. Batygina T.B. Problems of morphogenesis in situ, in vivo and in vitro/ZProc. intern, sympos. "Plant tissue and cell culture: application to crop improvement". Prague: Czechosl. acad. sci. press, 1984. P. 43-49.

70. Batygina T.B. The place of embryoidogeny in system of flowering planth reproduction//Abstr. XI internal sympos. "Embryology and seed reproduction". Leningrad: Nauka, 1990. P. 17.

71. Beaumont V.H., Rocheford T.R., and Widholm J.M. Mapping the anther culture response genes in maize (Zea mays L.)//Genome. 1995. V.38. P.968- 975.

72. Becraft P.W., Taylor J.A. Effects of nucleus, cytoplasm and male sterile nucleus cytoplasm combination on callus initiation in anther culture of wheat//Suphytica. 1989. V.44. P.235-240.

73. Bernard S. In vitro androgenesis in hexaploid Triticale: determination of physical condition increasing embryoid and green plant production// Z/Pflanzenzucht. 1980. V.85. P.308-321.

74. Bhojwani S.S., Dunwell J.M., Sunderland N. Nucleic acid and protein contents of embryogenic tobacco pollen//J. Exp. Bot. 1973. V.24. №13. P.863-871.

75. Binarova P., Straatman K., Haus В., Haus G., Van Lammeren A.A.M. Nuclear DNA synthesis during the induction og embryogenesis in cultured microspores and pollen of Brassica napus L. Theor.Appl.Genet. 1993. V.87. P.9-16.

76. Blaydes D.F. Interaction of kinetin and various inhibitors in the growth of soybean tissues/ZPhysiol. Plant. 1966. V.19. № 3, P.748-753.

77. Bogani P., Simoni A., Lio P. et al. Genome Них in tomato cell clones cultured in vitro in different physiological equilibria. II. A RAPD analysis of variability //Genome. 1996. V. 39. P. 846-853.

78. Boutilier K.C, Treacy В., Hattori J., Ouellet T. and Miki B.L. Understanding the molecular mechanisms of microspore embryogenesis. 1999.

79. Bullock W., Baenziger P., Schaeffer G. Anther culture in wheat {Triticum aestivum L.) Fi's and their reciprocal crosses//Teor. And Appl. Genet. 1982. V.62. №2. P.155-159.

80. Buyser J., Bachelier В., Henry Y. Gametic selection during wheat anther culture // Genome. 1989 V.32. P. 54-56.

81. Buyser J., Henry Y., Lonnet P., Hertzog R., and Hespel A. "Florin": a doubled haploid wheat variety developed by the anther culture method//Plant Breed. 1987. V.98. №1. P.53-56.

82. Buyser J., Henry Y., Taleb G. Wheat androgenesis: cytogenetical analysis and agronomie perfomance of doubled haploids // Z. Pflanzenzucht. 1985 V.95. P. 23-34.

83. Charmet G., Bernard S., Bernard M. Origin of aneuploid plants obtained by anther culture in tritikale//Can. J. Genet, and Cytol. 1986. V.28. # 3. P.444-452.

84. Charsynska M., Pfnenko. Inhibition of cytokinesis in the microspores of Tradescantia bracteata Small, by caffeine//Acta Soc. Bot. Pol. 1976. V.45. P.469-476.

85. Chen C.C., Howarth M.J., Peterson R.L., Kasha K.J. Ultrastructure of androgenetic microspores of barley during the early stages of anther culture //Canad. J. Genet.Cytol. 1984. V. 26. #4. P.484-491.

86. Chen Ch., Tsay H., Huuang Ch. Rice (Oryza sativa L.): factors af fecting androgenesis/ZBiotechnology in agriculture and forest. Berlin, 1986. P. 123.

87. Chu Ch.-Ch. Establishment of an efficient medium for anther culture of rice through comparativ experiments on the nitrogen soureces//Sci. Sinica. 1975. V.18. #5. P.659-668.

88. Chuang Ch.-Ch., Quang T.W. A set of potato media for wheat anther culture //Proc. sympos. on Plant Tissue Culture. Peking: Sci. Press. 1978. P. 51-56.

89. Clapham D. Haploid Hordeum plants from anthers in vitro//Ibid. 1973. V. 69. P. 142-155.

90. Clapham D. In vitro development of callus from the pollen of Lolium and Hordeum // Z. Pflanzenzucht. 1971. Y.65. #2. P.285-292.

91. Cordewener J.H.G., Busink R., Traas J.A., Custers J.B.M., Dons H.J.M., Compagne M.M.L. Induction of microspore embryogenesis in Brassica napus L. Is accompained by specific changes in protein synthesis/ZPlanta. 1994. V.195. P.50-56.

92. Dale P.J. Pollen dimorphism and anther culture in barley/ZPlanta. 1975. V. 127. # 3. P.213.

93. Day A., Ellis T.H.N. Deleted forms of plasmid DNA in albino plants from cereal anther culture//Curr. Genet. 1985. V.9. P.671-678.

94. De Fossard R.A.Summation: method for producting of haploids/ZHaploidsin higher plants: advances and potential. Proc. 1-st Intern. Symp. Guelph: University of Guelph. 1974. P.145-150.

95. De la Pena."In vitro" culture of isolated meiocytes of rye, Secale cereale L.//Environ, and Exp. Bot. 1986. V.26. #1. P.17-23.

96. Devaux P. Variation in the Proportion of Fertile Colchicine Treated Haploid Plants Derived from Whinter Barley Hybrids // Plant Breed. 1989. V.103. №3. P.247-250.

97. Dickinson H.G. The physiology and biochemistry of meiosis in the anther // Intern. Rev. Cytol. 1987. V. 107. P. 79.

98. Dunwell J.M., Sunderland N. Pollen ultrastructure in anther culture of Nicotiana tabacum. 1. Early stages of culture//J. Exp. Bot. 1974. V.25. №85. P.852-861.

99. Eady C., Lindsey K and Twell D. The significance of microspore division and division symmetry for vegetative cell-specific transcription and generative cell differentiation// Plant Cell. 1995. v.7. p.65-74/

100. Evans D.A., Sharp W.R., Medina-Filho H.P. Somaclonal and gametoclinal variation//Amer .JJBot. 1984. V.71. P.759-764.

101. Evans D.A., Sharp W.R., Medina-Filho H.P. Somaclonal and gametoclinal variation//Amer.J.Bot. 1984. V.71. P.759-764.

102. Fang G.-W., Liang H.-M. Influence of cold pretreatment on the efficiency anther culture of rice//Acta physiol. sin. 1985. V. 11. N 4. P. 366-380.

103. Foroughi-Wehr B., Mix G., Gaul H., Wilson H.M. Plant prodaction from cultured anther of Hordeum vulgare L.//Z.Pflanzenzucht. 1976. V.77. P. 198-204.

104. Foroughi-Wehr B., Zeller F. In vitro microspore reaction of different German wheat cultivars//Theor. and Appl. Genet. 1990. V. 79. N 1. P. 77-81.

105. Fried W. and Foroughi-Wehr B. Field perfomanse of androgenetic doubledhaploids spring barley from F1 hybrids // Z. Pflanzenzuchtg. 1983 V90. P. 177-184.

106. Gallais A. Quantitativ Genetics of Doubled Haploid Population and Applicatoin to the Theory of Line Development // Genet. 1990. V.124. №1. P.199-206.

107. Gorska Brylass A. Transitory callose envelope surrounding the generative cell in pollen grains//Acta Soc. Bot. Pol. V. 36. # 3. Suppl. P.38.

108. Graham D.S. The isolation of high molecular weight DNA from whole organisms of large tissue masses // Analyt. Biochem. 1987-V85. P609-613.

109. Grégoire S., Marie D., Brown S., Picard E. Can one identify and sort viable P-type pollen of Triticum aestivum/ZBiol. Cell. 1989. V. 67. N 3. P. 38-40.

110. Guha S., Maheshwari S. In vitro production of embryos from anther of Datura//Nature. 1964. V. 204. N 4957. P. 497.

111. Guha-Mukherjee S. Genotypic differences in the in vitro formation of embryoids from rice pollen //J. Expt. Bot. 1973. Vol. 24. N 78. P. 139-144.

112. Guo Zh., Sun A., Wang Yu. Studies on induction of pollen plants and androgenesis in maize//Acta bot. sin. 1987. V. 20. N 3. P. 204-208.

113. Hadwiger M.A., Heberlr-Bors E. Pollen plant production in Triticum turgidum ssp. Durum//Proc. Intern, sympos. "Genetic manipulation of plant breedings". Berlin; New York: Waler de Gruyter, 1986. P. 303.

114. Hassawi D.S., Liang G.H. Effect of cultivar, incubation tempera ture and stage of microspore development on anther culture in wheat and triticale/ZPlant Breed. 1990. V. 105. N 4. P. 335.

115. Hassawi D.S., Sears R.G., Liang G.H. Micrispore development in the anther culture of wheat (Triticum aestivum L.) // Cytologia. 1990. V. 55. N 3. P. 475.

116. He D.-G., Ouyang J.Callus and plantlet formation from cultured wheat anthers at different developmental stages// Plant Sci. Lettera. 1984.V.33. P71-79.

117. He D.-G., Ouyang J.-W. Observation of androgenesis in cultured wheat anthers //Acta bot. sin. 1985. V. 27. N 5. P. 469-475.

118. Heberle-Bors E. Experimental control of pollen development//in: Androgenesis and Haploid Plants (in memory of J-P Bourgin). eds: Chupeau Y., Caboche M., Henry Y. 1998. P. 38-53.

119. Heberle-Bors E. Genotypic control of pollen plant formation in Nicotiana tabacum L. //Theor. Appl. Genet. 1984. Vol. 68. N 1. P. 475-479.

120. Heberle-Bors E. In vitro haploid formation from pollen: a critical review//Theor. and. Appl. Genet. 1985. V. 71. N 3. P. 361-375.

121. Heberle-Bors E. In vitro pollen embryogenesis in Nicotiana tabacum L. and its relation to pollen, sex balance, and floral induction of pollen donor plants/ZPlanta. 1982a. Vol. 156. N 5. P. 396-401.

122. Heberle-Bors E. Induction of embryogenic pollen grains in situ and subsequent in vitro pollen embryogenesis in Nicotiana tabacum by treatments of the pollen donor plants with feminizing agents // Physiol, plant. 1983. V.59. N 1. P. 67-72.

123. Heberle-Bors E. On the time of embryogenetic pollen grain induction during sexual development of Nicotiana tabacum L. plants //Planta. 1982b. Vol. 156. N5. P. 402-406.

124. Heberle-Bors E., Odenbach W. In vitro pollen embryogenesis and cytoplasmic male sterility in Triticum aestivum II Z. Pflanzenzucht. 1985. V.95. №1. P. 14-22.

125. Heberle-Bors E., Reinert J Isolated pollen cultures and pollen dimorfism //Naturwissenschaiten. 1980. V.67. P.311.

126. Heberle-Bors E., Reinert J. Environmental control and evidence for predetermination of pollen embryogenesis in Nicotiana tabacum pollen// Protrplasma. 1981. V.109. P.249-255.

127. Henry Y., Marcotte J.-L., de Buyser J. Nuclear gametophytic genes from chromosome arm 1RS improve regeneration of microspore-derived embryos//Genome. 1993. V. 36. N 5. P. 808-811.

128. Higuchi N., Maeda E. Reobservation with light microscope of scanning electron microscopic speciments in rice callus cultures//Jap. Journ. Crop Sci. 1991. V. 60. N2. P. 278-282

129. Hirt H. Multiple roles of MAP kinases in plant signal transduction/ Trends Plant Sci. 1997. v.2.p.l 1-15.

130. Hlasnikova A.Androgenesis in vitro evalusted from aspects of genetics//Z. Pflanzenzacht. 1977. V.88. №1. P.44-56.

131. Horner M., Street H.E. Pollen dimorphism origin and significance in pollen plant formation by anther culture//Ann. Bot. 1978. V. 42. N 180. P. 763.

132. Hu H. Wheat: improvement through anther culture/ZBiotechnology in agriculture and forestry. Berlin. 1986.V. 2, C. 1, P. 55-72.

133. Hu H., Jing J., Xi Z., Wang X. Production of aneuploids and heteroploids of pollen derived plants // Proc. 5-th Intern. Cong. Plant Tissue and Cell Culture. Peking. 1982. P.421-424.

134. Jacobson E., Sopory S.K The influence and possible recombination of genotypes on the production of microspore embryoids in anther cultures of Solanum tuberosum and dihaploid hybrids // Theor. Appl. Genet. 1978. V.52. P.l 19-123.

135. Karsia I., Bedo Z., Balla L. The effekt of repeated anter cultural on in vitro androgenesis of wheat ( Triticum aestivum L.) // Cereal Res. Commun. 1991. V 19. № 4. P. 425-430.

136. Kleijer G., Schmid J., Winzeier H., Fried P.M. La culture d antheres: possibilités et limites dans la selection du ble et de 1 epeautre//Rev. suisse Agr. 1986. V. 18. N6. P. 305.

137. Koinuma K., Mochizuki N., Inoue Y. Embryoid and callus induction and plant regeneration by anther culture of Japanese local varientles of maize (Zea mays L.)//Bull. Nat. Grassland Res. Inst. 1990. N 43. P. 13-22.

138. Kruger H.-U. Ein Beitrag zum Verlauf der Androgenese bei Weizen // Arch. Zucht. 1988. B. 18. N 3. P. 133-138.

139. Kudarov B.R., Anapiaev B.B., Bogouspaev K.K., Shamrov I.I., Batygina T.B. Pathwey of morphogenesis in culture of wheat // XI Intern. Symp. Embryology and Seeds Reproduction: Abstracts. Leningrad. 1990. P.212.

140. Kudirka D., Schaeffer G., Baenziger P. Wheat: genetics variability through anther cultnure//Biotexhnology in agriculture and forestry. V. 2. Gröps I. Berlin. 1986. P.39-54.

141. Kudirka D., Schaeffer G., Baenziger P.Cytogenetic characteristics of wheat plants regenerated from anther calli of "Centuck" // Can. J. Genet. Cytol. 1983. V.25. P.513-517.

142. Kyo M. and Harada H. Specific phosphoproteins in the initial period of tobacco pollen embryogenesis. Planta. 1990. v. 182. p.58-63.

143. Machida Y., Nishihama R., and Kitakura S. Progress in studies of plant homologs of mitogen-activated protein (MAP) kinase and potential upstream components in kinase cascades. Crit.Rev.Plant Sci 1997. v.16. p.481-496.

144. Marburger J.E., Jauhar P.P. Agronomic, Isozime, and Cytogenetic Characteristics of "Chris" Wheat Doubled Haploids // Plant Breed. 1989. V.103. №1. P.73-80.

145. Mascarenhas J.P. Molecular mechanisms of pollen tube growth and differentiation. Plant Cell. 1993.v.5. p.1265-1275.

146. McCormick Sh. Male gametophyte development // Plant Cell. 1993. V.5. N10. P.1265.

147. Miah M.A.A., Earle E.D., Khush G.S. Inheritance of callus formation ability n anther cultures of rice, Orysa sativa L. // Theor Appl. Genet. 1985. V. 70. N.2. P. 113-116.

148. Mitchell A.Z., Hanson M.P., Skvinsky R.C., Ausubel F.M. Anther culture of Petunia: genotipes with high frequency of callus, root or plantlet formation // Z. Pflanzenphysiol. 1980. V 100. P. 131-146.

149. Nitch J.P. Haploid plants from pollen // Z. Pflanzenzucht. 1972.V.67. P.318.

150. Ouyang J.-W. Induction of pollen plants in Triticum aestivum //Haploids in higher plants in vitro. New York; Heidelberg; Berlin: Springer-Verlag, 1986. P. 26-41.

151. Ouyang T.W., Hu H., Chuang C.C., Tseng C.C. Induction of pollen plants from anthers of Triticum aestivum L. Cultured in vitro//Sci. Sin. 1973. V. 16. N 1. P. 79.

152. Park S .J., Walsh E.J., Reinbergs E., Song L.S.P., Kasha K.J. Field perfomance of doubled haploid barley lines in comparison with lines developed by the pedigree and single descent methods // Can. J. Plant Sei. 1976. V.56. P.467-474.

153. Pechan P.M., Bartels D., Brown D.C., and Schell J. Messenger RNA and protein changes associated with induction of Brassica microspore embryogenesis//Planta. 1991. v. 184. p. 161-165.

154. Picard E., de Buyser J Nouveaux resaltuts concernoung la culture de antheres in vitro de bio tendro (Triticum aestivum) effects d un choe termigue et de la position de 1 anthere dans 1 epi //C.R.Acad. Sei. 1975. Ser. D. 281. №2-3. P.127-130.

155. Picard E., de Buyser J. Obtention de plantules haploides de Triticum aestivum L. a partiv de culture d'antheres in vitro // C.R.Acad Sc. Paris.1973.V.277. P 1463-1466.

156. Picard E., de Buyser J., Henry V. Technique de Production d'haploides de ble par culture d'antheres in vitro // Selec. Franc. 1978. № 26. P. 25-37.

157. Picard E., de Buyser J., Henry V. Technique de Production d'haploides de ble par culture d'antheres in vitro // Selec. Franc. 1978. № 26. P. 25-37.

158. Qu R.-D., Chen Y. A preliminary research on the function of callus induction frequency by cold pretreatment in rice anther culture // Acta phytophysiol. sin. 1983. V. 9. N 4. P. 375-381.

159. Raghavan V Distribution of poly(A)-containing RNA during normal pollen development and during induced embryogenesis in Hyoscyamus niger.} II Cell Biol 1981v.89. p.593-606.

160. Raghavan V Embryogénie determination and ribonucleic ribonucleic acid synthesis in pollen grains of Hyoscyamns niAer// Am J Bot 1979. v.66. p. 36-39.

161. Rashid A., Reinert J. High frequency embryogenesis in ab initio pollen cultures of Nicotiana tabacum var. Badischer Burley/ZNaturwissenschaften. 1981b. №68. P. 378-379.

162. Rashid A., Reinert J. In vitro differentiation of embryogenic pollen control by cold treatment and emryo formation in ab initio pollen cultures of Nicotiana tabacum var. Badischer Burley/ZProtoplasma. 1981c. V. 106. N 2. P. 285-294.

163. Rashid, A., Reinert J. Differentiation of embryogenic pollen in cold-treated buds of Nicotiana tabacum var. Badischer Burley and nutritional requirements of the isolated pollen to form embryos// Protoplasma. 1981a. V. 106. N 1. P. 137-144.

164. Reinbergs E., Song L.S.P., Choo T.M., Kasha J. Yield stability of double haploid lines of barley // Can. J. Plant Sci. 1978. V.58. P.929-933.

165. Reynolds T.L., Crawford R.L. Changes in abundance of an abscisic acid-responsive, early cysteine-labeled metallothionein transcript during pollenembryogenesis in bread wheat (Triticum aestivum) // Plant Mol Biol. 1996. v.32(5). P.823-829.

166. Robert PR., Gaudin V., Lunness P., Coen ES., Doonan JH. Distinct classes of cdc2-regulated genes are differentially expressed during the cell division cycle in plants. Plant Cell. 1996. V.8. p. 1465-1476.

167. Rose Ju.B., Dunwell J.M., Sunderland N. Anther culture of Sorghum bicolor (L). Maench. I. Effect of panicle pretreatment, anther incubatoin temperature and 2,4-D concentration //Plant Cell Tissue Organ Culture. 1986. V. 6. Nl.P. 15-22.

168. Sagi L., Barnabas B. Evidence for cytoplasmic control of in vitro microspore embriogenesis in the anther culture of wheat (Triticum avestivum L.) // Theor. Appl. Genet. 1988. V. 78. № 6. P. 867-872.

169. Sangwan R.S., Sangwan-Norreel B.S. Biochemical cytology of pollen embryogenesis //Intern. Rev. Cytol. Orlando 1987. V.107. P. 221-272.

170. Sangwan R.S., Sangwan-Norrell B.S. Biochemical cytology of pollen embryogenesis//International review of cytology. V. 107. Orlando, 1987. P. 221272.

171. Schumann G. Beeinflussung morphogenetischer Prozesse dure Temperaturvorstimulation in Antherenkulturen von Triticale // Arch. Zucht. 1986. B. 16. N3. S. 153-159.

172. Schumann G. Zur Morphologie und Entwicklung androgenetischer Makrostrukturen inntherenkulturen von Triticale. Arch Zu chtungsforsch. 1987.Bb.17. H.4, S.245-257.

173. Shimada T., Otani M., Hatanaka H. Genetic factors of the anther culture response in Japanese winter wheat cultivars//Bull. Res. Inst. Agr. Resour. 1993. N 3. P. 1-4.

174. Sunderland N. Anther culture as a means of haploid induction// Haploidesin higher plants: advances potential. Guelph: University of Guelph Press. 1974. P. 92-122.

175. Sunderland N. Pollen and anther culture/ZPlant tissue and cell culture. Oxford: Oxford Univ. press, 1973. P. 205-239.

176. Sunderland N. The concept of morphogenic competence with referen ce to anther and pollen culture/ZPlant cell culture in crop improvement. New York; London: Plenum press, 1983. P. 125.

177. Sunderland N., Roberts M., Evans L.J. Wildon D.C. Multicellular pollen formation in cultured barley anthers. 1. Independent division of the generative and vegetative cells//J. Exp. Bot. 1975. V. 30. N 119. P.l 133-1144.

178. Sunderland N., Roberts M., Evans L.J., Wildon D. Multi cellular pollen formation in cultured barley anthers // J. Exp. Bot. 1979. Vol. 30. N 119. P. 11331144.

179. Sunderland N., Wicks F.M. Embryoid formation in pollen grains of Nicotiana tabacum//J. Exp. Bot. 1971. V. 22. N 70. P. 213-226.

180. Sunderland, N. Induction of growthin the culture of pollen.// In: Differentiation in vitro (eds Zeoman M., Trumen D.).Cambrige. Cambrige Univ. press. 1982. P. 1-24.

181. Tanaka J. Defferentiation of generative and vegetative cells in angiosperm pollen. Sex. Plant Reprod. 1997. V.10. pl-7.

182. Torrey J.G. Morphogenesis in relation to chromosomal constitution in longterm plants tissue cultures // Physiol, plant. 1967. V.20. #2. P.265-275.

183. Touraev A. Ilham A, Vicente O. and Heberle-Bors E. Stress induced microspore embiyogenesisfrom tobacco microspores: an optimized system for molecular studies. // Plant Cell Rept. 1996a. V. 15. P.561-565.

184. Touraev A. Indrianto A., Wratscko I., Vicente O. and Heberle-Bors E.

185. Efficient microspore embryogenesis in wheat (Triticum aestivum) induced by starvation at high temperatures. //Sex. Plant Repr. 1996b. V. 9. P.209-215.

186. Touraev A., Vicente O., and Heberle-Bors E. Initiation of microspore embryogenesis by stress. Trend Plant Sci. 1997. V.2. P.297-302.

187. Twell D., Park S.K., Lallane E. Asymmetric division and cell-fate determination in developing pollen//Trends in plant science. 1999. V.3. №8,-P.305-310.

188. Vasil I.K. The New Biology of Pollen // Naturwissenschschaften. 1973. B. 60. H. 5. S. 247-253.

189. Vasil I.K., Nitsch C. Experimental production of pollen haploids and their esteblishment of a radioimmunoassay for ribosylzeatin/ZPlant Physiol. 1981. -uses // Z.Pflanzenphysiol. 1975. № 3. S.191-212.

190. Wei Z.M. Pollen callus culture in Triticum aestivum II Theor. Appl. Genet., 1982. V. 63. № 1, P.71-73.

191. Wenzel G., Hoffman F., Potrykus I., Thomas E. The separation of viable rye microspores from mixed population and their development in culture/ZMolec. Genet. 1975. V. 138. N 1. P. 293-297.

192. Wenzel G., Hoffman F., Thomas E. Increased induction and chromosome doubling of androgenetic haploid rye // Theor. Appl. Genet. 1977. V. 51. P81-86.

193. Wheatley W.G., Marsolais A.A., Kasha K.J. Microspore growth and anther staging in barley anther culture// Plant Cell Repts. 1986. V. 5. # 1. P. 47.

194. Yistra B., Touraev A., Benito-Moreno R.-M., Stoeger E., van Tunen A.J., Vicente O., Mol J.N.M.,and Heberle-Bors E. Flavonois stimulate development, germination and tube growth of tobacco pollen/ZPlant physiol. 1992. V.100. P.902-907.

195. Zapata F.J., Torrizo L.B., Romero R.O., Alejar M.S. Androgenesis in