Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экологические особенности ксилотрофных базидиомицетов родов Laetiporus Murrill и Ganoderma P. Karst. Пензенской области

ВАК РФ 03.00.24, Микология

Автореферат диссертации по теме "Экологические особенности ксилотрофных базидиомицетов родов Laetiporus Murrill и Ganoderma P. Karst. Пензенской области"

На правах рукописи

Озерова Надежда Семеновна

Экологические особенности ксилотрофных базидиомицетов родов Laetíporus Murrill и Ganoderma Р. Karst.

Пензенской области.

Специальность 03.00.24. — «Микология»

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва 2006

Диссертационная работа выполнена в Федеральном государственном учреждении высшего профессионального образования «Пензенская государственная сельскохозяйственная академия».

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Иванов Александр Иванович Официальные оппоненты: профессор, доктор биологических наук

Гарибова Лидия Васильевна, кандидат биологически наук Гордиенко Павлина Васильевна

Ведущее предприятие - Пермский Государственный Педагогический университет.

Защита состоится 10 ноября 2006 года в 15 часов 30 минут на заседании диссертационного совета Д 501.001.46 в Московском Го су дар ств енном Университете им. М.В. Ломоносова по адресу: 119992 Москва, ГСП-2, Ленинские горы МГУ Биологический факультет, аудитория М-1 факс: (495) 939-39-70

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке биологического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан « » октября 2006 года

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат биологических наук^^^^б^^^Н^. Гусаковская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность и практическая значимость работы.

Одним из приоритетных направлений социального развития Российской Федерации является федеральная целевая программа «Предупреждение и борьба с заболеваниями социального характера (2002-2006 годы)». Важным условием ее реализации является разработка н внедрение в медицинскую практику результатов научно-исследовательских работ, связанных с профилактикой заболеваний. Создание иммуномодулирующих лекарственных средств, обладающих профилактическим, антибактериальным и адаптогенным действием, позволит эффективнее обеспечивать претворение в жизнь мероприятий данной программы.

В качестве природного источника, указанных препаратов, в последнее время часто используют базшшальные макромицеты. Биологически активные вещества, обнаруженные в плодовых телах, а также культуральном мицелии данных грибов, повышают сопротивляемость организма к неблагоприятным факторам, стимулируют иммунную систему, способны регулировать кровяное давление, а также понижать содержание холестерина и сахара в крови. Кроме того, лекарственные средства на основе базидиомицетов преодолевают лекарственную устойчивость микроорганизмов, не обладают токсичностью и отрицательным побочным действием (Краснопольская, 1998). К видам, перспективным с точки зрения поиска перечисленных выше веществ, относятся некоторые представители афиллофороидных грибов, в частности трутовик серно-желтьщ - Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond, et Sing., трутовик лакированный - Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) Karst, и трутовик плоский -Ganoderma applanation (Pers.) Pat., порядок Aphyllophorales, Bosidiomyccta.

L. sulphureus характеризуется наличием в глубинном мицелии целого ряда комплекса биологически активных липофильных соединений: полиеновых жирных кислот, стероидных соединений, фосфолипидов и др. (Капитанов; 1996). Выше указанные соединения обладают алтимутаге иными,

антиканцерогенными, им му i ¡смодулирую щи ми, . радиопротекторными свойствами. Основными биологически активными веществами, входящими в состав биомассы грибов рода Ganoderma, являются полисахариды, обладающие противораковой активностью (Краснолольская, 1998). Из G. lucidum было изолировано более 30 биологически активных тритерпенов, которые способны стабилизировать уровень артериального давления, повышать сопротивляемость стрессу, препятствовать накоплению свободных радикалов (Бисько, Митропольская, 2001). Указанные виды грибов были использованы в качестве объектов исследования. Результаты изучения их экол ого-биол огических особенностей могут быть использованы в качестве теоретической основы для разработки способов ; их промышленного культивирования для получения биологически активных веществ. Это определяет актуальность выбранного направления исследований.

Цели н задачи исследований.

Цель настоящей работы состояла в изучении эколого-биологических особенностей L. sulphureus, G, lucidum и G. applanatum.

В ходе исследований были поставлены следующие задачи:

1. . Изучить закономерности расселения рассматриваемых видов в природных условиях, ИХ:приуроченность к древесным субстратам, сроки развития базидиом и внутривидовой полиморфизм.

2. Дать оценку функциональной роли L. sulphureus, G. lucidum, G. applanatum в лесных экосистемах Приволжской лесостепи.

3. Выявить оптимальные питательные среды для развития мицеяиапьных культур изучаемых видов.

4. Изучить отношение мицелиальных культур к таким экологическим факторам как температура, свет, реакция среды.

5. Определить диапазон изменчивости штаммов чистых культур по морфолого-культуральным признакам.

6. Изучить возможность поверхностного культивирования мицелиальных

культур на жидкой питательной среде.

7. Выяснить возможность использования зерна пшеницы и различных

отходов сельскохозяйственного производства для выращивания мицелия

изучаемых видов.

Научна« новизна.

Экологические особенности видов L. sulphureus, G. lucidum, G. applanatum в условиях Приволжской лесостепи ранее не изучались. Полученные в результате исследований данные, выявили закономерности распространения, динамику плодоношения и функциональную роль рассматриваемых видов в экосистемах. Впервые изучен внутривидовой полиморфизм L, sulphureus, а также морфолого-культуральные свойства трех видов ксилотрофных базидиомицетов.

Практическая значим ость.

Проведенные исследования позволили выявить оптимальные условия для развития мицелиальных культур L sulphureus, . G, lucidum, G. applanatum, особенности состава питательных сред, освещения, температуры. Полученные данные можно использовать для разработки производственных регламентов поверхностного и глубинного культивирования мицелия изученных вцдоч.

Апробация работы.

Результаты исследований и основные положения диссертационной работы докладывались на международной конференции «Физиология растений - основа фитобиотехнолопт» (Пенза, 2003); на VIII молодежной конференции ботаников в Санкт-Петербурге (Санкт-Петербург, 2004.); международной научно-практической конференции «Роль почв в сохранении устойчивости ландшафтов и ресурсосберегающее земледелие» (Пенза,* 2005); всероссийской

научно-практической конференции «Проблемы охраны и экологического мониторинга природных ландшафтов и биоразнообразия» (Пенза, 2006).

Публикация результатов исследования.

По теме диссертационной работы опубликовано б научных статей.

Структура и объем диссертации.

Работа изложена на 121 странице текста компьютерной верстки, состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной материалам и методам исследований, трех глав, содержащих результаты собственных исследований и выводов. Работа содержит 17 таблиц, 3 приложения и 54 рисунка, включая фотографии,, диаграммы и графики. Слисок литературы включает 155 источников, из них 36 — зарубежные.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

■ ' Данный раздел включает анализ номенклатурного статуса L. sulphureiis, G. lucidum, G. applanation, описание географического распространения названных видов, обзор публикаций, посвященных исследованиям морфолого-культуральных особенностей изучаемых видов, а также аспектам использования афиллофорондных базидиомицетов в качестве продуцентов биологически активных веществ.

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

При выполнении работы объектами исследования служили следующие виды грибов: Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond, et Sing., Ganoderma lucidum (Cuit:,Fr.) Karst., Ganoderma applanatum (Pers.) Pat Основным материалом исследований были результаты полевых и лабораторных исследований автора.

Изучение экологических особенностей указанных видов афиллофорондных базидиомицетов осуществлялось в течение 4-х лет (2002-

2005 гг.) в природных экосистемах Приволжской лесостепи маршрутным и стационарным методом. На стационарных участках наблюдения согласно методическому руководству по изучению экологии грибов (Великанов, Сидорова и др., 1980), определяли распространенность, интенсивность плодоношения изучаемых видов афиллофороидных грибов, а также обилие и, общественность плодовых тел. Сбор плодовых тел проводился по общепринятым методикам. При определении видов использовали определители следующих авторов: W. Jülich (1984); A.C. Бондарцев (1953); М.А. Бондарцева (1998). При обработке " собранного материала подробно описывались характерные диагностические признаки свежих базидиом: окраска, форма шляпки, консистенция, цвет ткани, вкус мякоти, а также их возрастные изменения.

Морфолого-культуральные свойства видов изучались на кафедре биологин и экологии Пензенской государственной сельскохозяйственной ■ академии. При этом, согласно методике A.C. Бухало (1988), устанавливали значение ростового коэффициента, выявляли оптимальную агаризованную среду для культивирования штаммов чистых культур изучаемых видов, гзучалн отношение к температуре, освещению и реакции среды, описывали микроморфологию мицелия чистых культур. В данных исследовштях были использованы 5 штаммов чистых культур L. sulphureus, 4 штамма G. lucidum и 2 штамма G.' applanatiim, выделенных с разных мест обитания и различных пород деревьев (табл. 1).

Таблица 1

Штаммы чистых культур, используемые в работе .

Штамм J[лодовое тело, его характеристика Древесный субстрат Место сбора плодового теля

С-3 L. sulphureus Базидномы светло-охристой (г-5)1 юкраскн; L. sulphureus (Fr.) Bond, et "Sin&forma imbricalus (Fr.) B. et G. Ива белая. Пойма р.Суры, окр. г. Пензы

6 L. sulphureus Поверхность шляпки охряно -желтая (г-6); гнменофор желтовато-белый (ж-6); мякоть на изломе белая Дуб обыкновенный. Широколиственный лес на водораздельном , участке

. 5 L. sulphureus Окраска поверхности плодового тела кремовая, (г-7) Тополь белый Лесопарковая зона К Пензы.

1 /- sulphureus Поверхность шляпки - ярко оранжевая (ж-1); Валежная ива Пойма р. Суры, - окр. г. Пензы

28 L sulphureus Крупное черепицеобразное ■ плодовое тело. Поверхность темно-оранжевая (п-б); Ива белая Пойма р.Суры,. . окр. г. Пензы

1-П G. lucidum Шляпка 25 см в диаметре, темно-фиолетовая с эксцентрической темно-коричневой ножкой. Дуб обыкновенный Парк Лет ижевского санатория, Аркадонского р-на, Саратовской области

1 G. lucidum ' ' Не известно Дуб обыкн. Кавказ

3 G. lucidum Не известно Не известно Корея

6 G. lucidum Не известно Дуб обыкн. Московская область

7 G. applanatum Шляпка светло-коричневой окраски. Возраст, приблизительно 7 лет. Пень дуба обыкн. Шн рокол иственный лес на водораздельном уч-ке

18 <7. applanatum Шляпка темно коричневой окраски, Возраст, 3 года Валежный ствол лещины обыкн. Шн роколиственный лес на водораздельном уч-ке

1 Характеристика окраски дается по шкале цветов А.С. Бондарцева (\95$)-

При изучении влияния экологических факторов на скорость роста мицелиальных культур в культуре использовались линейные методы измерения. Замеры производились с интервалом в 2-3 дня до полного обрастания субстрата мицелием. Затем производился расчет средней скорости роста мицелия (мм/сут). Для установления влияния температурного фактора на жизнедеятельность грибов; их культивировали на картофельно-глюкозном агаре (КГА) при температурах: +10°С; +23°С; +35°С. Для изучения влияния света на рост и развитие мицелиальных культур, колонии, выращенные на КГА, помещали в следующие условия: полная темнота; освещенность в течение двенадцати часов в сутки; круглосуточное освещение. Для выяснения влияния разной концентрации ионов водорода в среде на рост и развитие мицелиальных культур использовали КГА с разными значениями рН (Давыдкина, 1980). Культуры инкубировали в термостате при +24°С. Все опыты проводили в 3-х кратной повторности.

При изучении накопления биомассы мицелия, культуры выращивали поверхностно в колбах Эрленмейера на жидкой питательной среде (среда Чапека) (Давыдкина, 1980). Инкубирование осуществлялось в термостагге при +24 С в течение тридцати суток. Затем отделяли мицелиальную пленку от жидкости, высушивали ее на воздухе и определяли воздушно-сухую • массу мицелия. Опыт проводили в 3-х кратной повторности.

Наличие целлюлоз определяли путем выращивания культур на фильтровальной бумаге с добавлением среды Чапека (Дудка, Вассер, 1982). Повторность опыта 3-х кратная.

Для культивирования видов на органических субстратах использовали отваренное зерно пшеницы, подсолнечную лузгу, соломенную резку, дубовые опилки и их следующие сочетания: соломенная резка 70% + подсолнечная лузга 30%; соломенная резка 60% + лиственные опилки 40%; подсолнечная лузга 50%+ дубовые опилки 50%; соломенная резка 60%+ подсолнечная лузга 20% + дубовые опилки 20%.

Математическую обработку данных проводили по общепринятым методикам (Рокицкий, 1967), Наименьшую существенную разницу (НСР) рассчитывали используя программу составленную по методике Б.А. Доспехова (1985).

III ЭКОЛОГИЯ ИЗУЧАЕМЫХ ВИДОВ АФИЛЛОФОРрИДНЫХ ГРИБОВ

ь*

,. _ 3.1. Экологические особенности Laetiporus sulphureus.

L. sulphureus в районе исследований обитает на древесине следующих видов деревьев: дуб обыкновенный (Quercus robur)^ ива белая и ломкая (Salix alba, S. Jragi/is), реже тополь белый (Populus alba) н -ясень обыкновенный (Fraximus excelsior). Продолжительность, образование и обилие плодовых тел данного вида зависят от погодных условий, а основными лимитирующими факторами данных процессов являются температура и влажность места обитания. Сезонную динамику развития базидиом L, sulphureus отражает рис. 1, на котором показано, что у изучаемого вида наблюдается два периода массового образования и активного развития базидиом.

Рис. 2, Сезонная динамика плодоношения L. sulphureus в условиях района исследований

Первый период длится с мая по июнь, второй - с августа по октябрь. Погодные условия в указанное время характеризуются высокой относительной влажностью воздуха (65%) и среднесуточной температурой +21-23°С, При повышении температуры выше +25°С (июнь-июль) плодоношение прекращается н возобновляется при ее снижении и обилии осадков. При оптимальных условиях продолжительность развития базидиом L sulphureus составляла 20 — 26 суток, причем, с возрастом заметно увеличивалась их масса, менялась форма, окраска, консистенция и вкус. Окончание развития плодовых тел данного вида чаще всего было связано с разрушением и поеданием их массы насекомыми и слизнями. Таким образом, образуя значительную биомассу плодовых тел, рассматриваемый вид имеет важное экологическое значение, являясь звеном пищевой цепи.

Выявлено предпочтение данным видом перестойных насаждений, где деревья имеют диаметр стволов более 50 см. На таких деревьях базидиомы L. sulphureus были значительно крупнее и состояли из нескольких массивных шляпок, черепицеобразно соединенных у основания. На деревьях, диаметром 25-30 см, плодовые тела были одиночными и небольших размеров. На иве белой, в пойме р. Суры, была обнаружена разновидность L. sulphureus, которая Г. Бурдо и А. Гальзеным определялась как Polyporus imbricatus (Fr.) В. et G. A.C. Бондарцев (1953) рассматривает данный таксон, как разновидность Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond, et Sing, forma imbricatus B. et G. В ходе изучения морфолого-культуральных свойств мицел иал ьной культуры Laetiporus sulphureus forma imbricatus было установлено, что данная разновидность имеет ряд особенностей, а именно светлую окраску колонии и медленный рост мицелия. Таким образом, можно предположить, что это четкий внутривидовой таксон. Однако эта проблема требует дальнейшего изучения, так как одна находка не дает оснований для подобных выводов.

Было установлено, что заражение L. sulphureus является одной из главных причин отмирания старых деревьев ивы и дуба, так как под действием ферментативного комплекса гриба развивается бурая гниль древесины, что

делает ее очень хрупкой и обуславливает дальнейшее разламывание стволов деревьев под действием ветра.

3.2.Экологические особенности Ganoderma lucidum.

G. lucidum является редким видом для лесостепи правобережного Поволжья. Вид был обнаружен только на древесине дуба обыкновенного. Было выяснено, что период развития плодовых тел G. lucidum на изучаемой территории начинается в конце августа и продолжается до середины сентября (25-28 сут.). В Пензенской области G, lucidum был отмечен двумя находками. Найденные плодовые тела отличались малыми размерами. Диаметр шляпки не превышал 10 см. Вероятно, это объясняется малым диаметром пня (30 - 35 см) на котором они были обнаружены. В Саратовской области наблюдения за плодоношением G. lucidum проводили в искусственно посаженной дубраве (Иванов, 2002). В указанном районе исследований, базидиомы были обнаружены у основания ствола усыхающего дерева дуба (диаметр = 52 см), возраст которого был более 100 лет. Обнаруженные плодовые тела характеризовались большими размерами шляпок, достигающих 15 - 25 см в диаметре. Иожки имели длину от 10 до 15 см, соответственно размеру шляпки. Как видно из выше изложенного материала, масса и размер базидиом G. lucidum зависели от диаметра ствола пораженного дерева.;

3.3. Экологические особенности С. applanatum.

G. applanatum в районе исследований является мало распространенным видом. Его плодовые тела наблюдались, в большинстве случаев, в поймах рек, смешанных лесах на сухостое, валеже и пнях таких деревьев, как дуб обыкновенный, ива белая, ива ломкая, реже - береза бородавчатая (Betula verrucosa), ясень обыкновенный (Fraximus excelsior) и лещина обыкновенная (Corylus avellana). Для изучения биологии размножения и распространения G, applanatum исследовалась общая продукция спор и динамика спорообразования данного вида. На > изучаемой территории освобождение базидиоспор G. applanatum начиналось обычно в кЪнце июля и продолжалось в течение месяца или более, в зависимости от погодных условий в исследуемый

год. Выяснилось, что оптимальными для данного процесса являются высокая относительная влажность (65 %) и среднесуточная температура +18-20°С.

IV МОРФОЛОГО-КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ШТАММОВ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР ИЗУЧАЕМЫХ ВИДОВ АФИЛЛОФОРОИДПЫХ ГРИБОВ 4.1. Морфолого-культуральныс особенности штаммов чистых культур L sulphtireus. В результате изучения линейной скорости роста мицелиальных культур Lsulp}mreus на разных агаризованных питательных средах самый активный рост культуры был выявлен на КГА, где средняя скорость роста штаммов варьировала от 4,77 до 8,82 мм/сут. Менее интеисивно осваивалась среда из отвара пшеницы. Добавление в агаризованные питательные среды дубовых опилок _ способствовало значительному повышению скорости роста лишь у одного штамма, другие оказались менее отзывчивыми. Сусло - агар (CA) оказался наименее благоприятной средой для роста мицелия данного вида, скорость'роста мицелия при этом составляла от 2,05 до 6,49 мм/сут.

Учитывая ростовые коэффициенты штаммов JL sulphur ens, из них можно было выделить 2 группы: быстрорастущие и медленнорастущие. Необходимо отметить, ч~о наибольшими ростовыми характеристиками обладали штаммы, выделенные из яркоокрашенных плодовых тел, что указывает на возможную корреляцию между жизненной активностью грибного организма и количественным содержанием пигмента в нем. Медленнорастущий штамм был выделен из светлоокрашенного плодового тела, найденного на иве белой и относящегося к одной из разновидностей трутовика серно-желтого - Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond, et Smg. forma imbricatus B. et G.

Колонии всех штаммов L. sulphureus по классификации Дж. Сталперс (StaJpers, 1978) относились к порошковидному типу без ясно выраженной, концентрической зональности, с неровными краями. Следует подчеркнуть, что

штаммы, выделенные из более пигментированных плодовых тел, отличались и значительно большей ' пигментацией мицелия. Микроморфология штаммов также имела небольшие отличия, но в целом она характеризовалась наличием тонкостенных узких гиф и отсутствием пряжек. На КГА, у наиболее пигментированного и быстрорастущего штамма (штамм 28), на концах некоторых гиф наблюдались булавовидные утолщения с более плотными стенками, определенные нами как терминальные хламидоспоры.

В ходе изучения влияния экологических факторов на рост и развитие штаммов чистых культур £. 5и}р}тгеи$, было установлено следующее: 1) температурный оптимум составляет от +23° до +25°С (рис. 2);

■ температура 30 С □ температура 23 С

■ температура 15 С

| г Скорости роста, мм/сут т

Рис. 2 Скорость роста штаммов Ь. зиф/гигеш (мм/сут) при разной температуре культивирования

2) наиболее активный рост штаммов Ь. з^рИигеиз имеет место при отсутствии освещения;

3) наиболее интенсивный рост большинства штаммов отмечается на средах с рН 4,5 (до 12,2 мм/сут), слабый рост мицелия штаммов наблюдается на среде с рН 7,4 (минимальное значение 3,5 мм/сут).

При поверхностном культивировании на жидкой питательной среде Ь. 5и1ркигег1з в течение тридцати суток накопление массы мицелия было незначительным и составляло 0,2 г. При этом мицелий Ь. зи!рЬигеш был

порошкообразным, рыхлым, низкой плотности, желтой окраски, с короткими гифами и после высушивания уменьшался в объеме и распадался на отдельные комочки.

В последние годы высшие базидиомицеты особенно интенсивно изучают с целью поиска среди них продуцентов ферментов, пригодных для использования в медицине, пищевой промышленности, сельском хозяйстве и т.д. L. sulphureus вызывает бурую гниль древесины и следовательно характеризуется целлюлозолитической активностью (Бондарцев, 1953). Наши исследования в данном направлении показали, что штаммы чистых культур L. sulphureus слабо разрушают целлюлозный субстрат (фильтровальная бумага). Масса фильтровальной бумаги уменьшилась в среднем на 4,96 %. Наиболее активными деструкторами целлюлозы были быстрорастущие и более пигментированные штаммы L. sulphureus.

4.2. Морфолого-культуральные особенности мицелия штаммов чистых культур G. lucidum. Исследования показали, что штаммы чистых культур G. lucidum наиболее активно росли на КГА. Необходимо отметить высокую скорость роста штамма, выделенного из плодового тела, найденного на территории Саратовской области (штамм 1-П). В результате такого отличия,

его отнесли к быстрорастущим (ростовой коэффициент равен 184), а остальные,

* * *

используемые в работе штаммы (штаммы 1, 3, 6) к медленнорастущим.

Мицелиальные культуры исследуемых штаммов G. lucidum отличались друг от друга. Их подробное описание и фотодокументация представлены в работе. Микроморфологические признаки 'штаммов данного вида также были различны. При микроскопическом изучении штамма I-П были выявлены интересные особенности: пряжки у данного штамма встречались редко; анаморфы, присущие другим штаммам G. lucidum, не были обнаружены ни в период развития, ни во время хранения культуры; в первые дни культивирования на агаризованной среде мицелий был многоядерный. Указанные отличия в микроморфологи и, вероятно, объясняют его быстрый рост в культуре. Как было показано в разделе 3.2,, штамм 1-П характеризовался

и' некоторыми морфологическими особенностями плодового тела, из которого оИ был выделен. Плодовое тело достигало диаметра 25 см, а ножк^ была длиной 15 см. Возможно, штамм 1-П, в силу своих особенностей, представляет внутривидовой таксон. Однако эта проблема требует дальнейшего изучения.

При изучении влияния температуры на рост мицелия чистых культур G. lucidum, штаммы 1, 6 и 1-П показали максимальную, скорость роста при температуре +25°С, которая составила 5,9; 6,2 и 21,4 мм/сут соответственно. Относительно отношения к температурному фактору штамм 3 отличался от всех, так как оптимальной для него оказалась температура +32°С, скорость роста при этом составила 12,2 мм/сут. По-видимому, это. связано с тем, что для роста этого штамма G. lucidum необходимы более теплые регионы, где он встречается наиболее часто.

Круглосуточное освещение оказывало ингибирующее воздействие на рост мицелия данного вида.

При выращивании G. lucidum на КГА с разными показателями pH, наиболее благоприятной для большинства штаммов оказались кислая (pH 4,5) среда (рис. 3).

скорость .

роста (мм/сут)

I 3

штаммы

Рис. 3 Скорость роста штаммов С.1исШит на средах с различными

значениями рН

(НСРо.0! для штаммов; 1-П •= 1,3,1 =» 0,26,3 = 2,27; 6 = 0,03)

Штамм 3, в отличие от всех, показал наибольшую скорость роста (11,5 мм/сут) на слабо кислой среде (pH 6,2), Необходимо отметить отличие данного штамма, выделенного из плодового тела собранного на Кавказе, от остальных, при изучении влияния экологических факторов на его морфолого-кул ьтурал ьн ые свойства.

Штаммы чистых культур G. lucidum при выращивании на жидкой питательной среде показали активный рост в течение всего периода исследований. При этом, наиболее интенсивное накопление биомассы было характерно для штамма 1-П. Средняя масса мицелиальной пленки данного штамма при культивировании на жидкой питательной среде в течение тридцати суток составила в среднем 0,88 г. С целью изучения стимуляции роста и накопления биомассы на жидкой питательной среде мицелия G. lucidum в среду вводили различные микроэлементы в виде солей, взятых в концентрации 10'5 г/л. Действие микроэлементов на развитие мицелия изучаемого вида оказалось различным (табл. 2).

Таблица 2

Воздушно-сухая масса мицелия штамма 1-П G. lucidum (г), выращенного на жидкой питательной среде с добавлением солей в концентрации 10"5г/л

Контроль Действие солсй в концентрации 10"s г/л. HCPo.os

KaGesOn Na2SeC>4 KMnO« CuSO« ZnS04

0,88 1,67 0,82 0,92 0,33 0,69 0,121

Изменение по отношению к контрольному варианту +89,8 % -6,8 % +4,5 % -62,5% -21,6% , J

Из всех изучаемых микроэлементов наибольшее стимулирующее действие оказал германий, при этом показатели биомассы были выше, чем в контрольном варианте па 89,8 %. Небольшое увеличение массы мицелия G. lucidum наблюдалось при добавлении в питательную среду марганца. Действие других исследуемых, микроэлементов было или нейтральным (селен), или отрицательным.

При изучении целлюлозолитаческой активности чистых культур С, 1исШит выяснилось, что штаммы резко отличаются по данному признаку. Указанный вид в естественных условиях вызывает белую гниль древесины, что предполагает наличие лигнииолитических ферментов. Однако, штаммы 3 и 1-П активно росли на целлюлозном субстрате (фильтровальная бумага) и показали способность к его разрушению, таким образом подтверждается наличие целлюлозолитических ферментов у данного вида.

4.3. Морфолого-культуральные особенности мицелия штаммов чистых культур <7. арр1апагипи Штаммы С. арр1апаШт показали сходные ростовые характеристики на КГА и СА. Резкое отличие в росте между ними наблюдалось только на пшеничном агаре с добавлением опилок (8,2 и 5,6 мм/сут). Средний ростовой коэффициент штаммов данного вида на К1 А при температуре +25°С был равен 40,5, что характеризует вид С. арр!апашт в культуре как медленнорастущий. Штаммы чистых культур данного вида характеризовались колониями войлочного типа с неровными краями и разной степенью концентрической зональности. Мицелий был очень плотным, что затрудняло его разделение при пересевах.

В отличие от других изучаемых штаммов афиллофороидных грибов, мицелий С. арр!апаШт, при выращивании на агаризованных питательных средах на 1 поверхности колонии образовывал „ маленькие узелки, предполагаемые примордии. Со временем эти образования приобретали коричневую окраску и останавливались в своем развитии. Микроморфология штаммов чистых культур С. арр!атшшт характеризовалась толстостенными, слабоветвяодимися гифами с круто изогнутыми, часто встречающимися, пряжками.

Влияние экологических факторов на морфолого-культуральные свойства штаммов чистых культур б. арр1апашт было следующее:

1) оптимальная температура культивирования +25°С;

2) наличие ингибирующего действия круглосуточного освещения;

3) наиболее активный рост на слабокислой (рН 6,2) среде (8,2-10,5 мм/сут).

Необходимо отметить, что на кислых и слабокислых средах лримордии в виде маленьких узелков на поверхности колонии преобразовывались через четырнадцать суток после посева в короткие (0,1-0,3 см) шиповндные образования.

При поверхностном культивировании штаммов. О. applanatum на жидкой питательной среде в течение тридцати суток накопление массы мицелия характеризовалось средними показателями и составляло в среднем 0,61 г, Мицелиальная пленка толщиной 2 мм после извлечения была очень плотной, а после высушивания незначительно уменьшалась в объеме и станозилась хрупкой. *•-■■'

При выявлении целлюлозолитической активности у штаммов G. applanatum не наблюдалось роста и развития мицелия на целлюлозном субстрате, что, вероятно, объясняется экологическими особенностями вида. G. applanatum в естественных условиях вызывает белую гниль древесины, т. е. использует в качестве источников питания лигнин.

V КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ИЗУЧЕННЫХ ВИДОВ ГРИБОВ НА РАЗЛИЧНЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ СУБСТРАТАХ В ходе лабораторных исследований выяснилось, что использование отваренного зерна пшеницы в качестве субстрата для получения посевного мицелия изучаемых видов подходит только для L. sulphvreus и G. lucidum.

Скорость роста последнего превышала показателя других видов на данной

t " 4

среде в среднем в полтора раза. Мицелий G. applanatum в процессе роста на обваренном зерне пшеницы сильно уплотнялся, что затрудняло дальнейший пересев мицелиальной культуры и не допускало использование данного субстрата для выращивания посевного мицелия G. applanatum. -

Для изучения особенностей культивирования видов афиллофорондных грибов на органических субстратах были взяты: измельченная солома пшеницы, подсолнечная лузга, дубовые опилки и их сочетания. Выяснилось, что исследуемые вндыло-разному осваивали указанные субстраты (рис. 4).

—iX— L. sulphureus —*— G. lucidum —СИ G. Hpsiense

11,8

9,4_____v

10,2

8,8

солома лузга опилки солома, солома, солома, лузга,

лузга опилки лузга, опилки опилки

Рис. 4 Скорость роста (мм/сут) изучаемых видов афиллофоровых, грибов на различных органических субстратах

Лучшим субстратом из отходов растениеводства для L. sulphureus можно считать подсолнечную лузгу, а для G. lucidum ТГ G. applanatum - солому пшеницы, что, вероятно, связано со специфическим для каждого вида набором ферментов. Самый медленный рост у всех изучаемых видов наблюдался на субстрате из дубовых опилок. При их выращивании на средах комбинированных из разных органических субстратов увеличение скорости роста не наблюдалось, что показало нецелесообразность их использования.

Образование примордиев наблюдалось только у G. applanatum, причем это происходило на всех исследуемых органических субстратах, за исключением дубовых опилок.

выводы

1. В районе исследований изучаемые виды грибов связаны с древесиной следующих видов деревьев: L. sulphureus - с древесиной дуба обыкновенного, ивы белой и ломкой, реже тополя белого и ясепя обыкновенного; G. lucidum - с древесиной дуба обыкновенного; G. applanatum - с древесиной дуба обыкновенного, ивы белой и ломкой, реже ясеня обыкновенного, лещины обыкновенной н березы бородавчатой.

2. Формирование плодовых тел L. sulphureus приходится на период с конца мая по середнну июня и с середины августа по ноябрь. Ритм плодоношения в разные годы неодинаков, что обусловлено гидротерм нческими условиями. Оптимальным среднесуточным температурным диапазоном для формирования базидиом этого вида является+21-23° С.

3. Установлена прямая корреляция между размерами плодовых тел L. sulphureus и G. lucidum и диаметрами стволов пораженных деревьев.

4. Изученные виды играют определенную роль в лесных экосистемах Приволжской лесостепи: L. sulphureus является широко распространенным видом, способствует естественному отмиранию старых деревьев дуба и ивы; G. applanatum относится к числу мало распространенных видов, является активным деструктором сухостоя и вал ежа.

5. Штаммы чистых культур L. sulphureus, а также G. lucidum при выращивании на агаризованных средах разделились на группы быстрорастущих и медленнорастущих. Быстрорастущие штаммы L. sulphureus были выделены из яр ко о крашенных, а медленнорастущие -из светлоокрашенных плодовых тел.

6. Для большинства штаммов г изученных видов оптимальной температурой роста мицелия в чистой культуре является +25°С, а оптимальным интервалом значений pH среды являются 4,5 - 6,2. Освещение в течение двенадцати и двадцати четырех часов в сутки оказывает ингибирующее действие на рост мицслиальных культур всех изученных видов.

7. При добавлении некоторых микроэлементов в жидкую питательную среду, где поверхностно культивировался G. Lucidum, заметное стимулирующее действие оказал германий.

8. Лучшим субстратом для выращивания посевного мицелия L. sulphureus и G. lucidum является зерно пшеницы. Для, искусственного

■ культивирования L. sulphureus , рекомендуется - использовать подсолнечную лузгу, а для G. lucidum и G. applanatum — солому пшеницы. Данные субстраты могут быть рекомендованы для биотехнологических целей.

Автор выражает сердечную благодарность д.б.н. А. И. Иванову за внимательное руководства, а также Г.В. Ильиной, С.А. Сашенковой, . Д.Ю. Ильину за поддержку и помощь в проведении работы.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Козырева Н.С.» Сашенкова С.А., Блипохватов А.Ф., Иванов А.И. Влияние соединений селена на мицелиальные культуры трутовых грибов И Физиология растений — основа фитобиотехнологии. Материалы международной конференции. Пенза, 2003. - С. 179-180.

2. Сашенкова С.А., Ильина Г.В., Козырева Н.С., Иванов А.И. Рост и морфологические особенности мицелия чистых культур трутовика серно-желтого {Laetiporus sulphureus (Bull.:Fr.) Murrill ) в зависимости от

22

условий культивирования // Материалы международной научно-практической конференции. Минск, 2004. - С.56-58.

Озерова Н.С. Рост и морфологические особенности мицелия трутовика серно-желтого Laetiporus sulphureus в зависимости от культивирования И Материалы VII Молодежной конференции ботаников в Санкт-Петербурге. - СПб, СПГУТД, 2004. - С. 70 - 71.

Сашенкова С.А., Ильина Г.В., Озерова Н.С., Иванов А.И. Эколого-биологические особенности трутовика серно-желгого (laetiporus sulphureus (Bull.:Fr.) Murrilt) на основе изучения ею мицелиальных культур И Микология и фитопатология, 2005. - Т. 37. - Вып. 3. - С. 14-19.

Озерова Н.С. Экологические особенности трутовика серно-жслтого Laetiporus sulphureus (Bull :Fr.) Murrill в условиях Пензенской обгасти // Материалы hi е лсд у народной научно-практической конференции. Пенза.

2005.- С. 311-313.

Озерова Н.С., Иванов Д.В., Иванов А.И. Трутовик серно-желтый (Laetiporus sulphureus (Fr.) Bond, et Sing.) в лесных экосистемах лесостепи правобережного Поволжья // Проблемы охраны и экологического мониторинга природных ландшафтов и биоразнообразия; сборник статей Всероссийской научно-практической конференции. - Пенза: РИО ПГСХЛ,

2006. - С.74-76.

Подписано в печать2.10.06. Объем 1 усл. п.л. Тираж 100 экз.

Заказ №611

Отпечатано с готового оригинал-макета в мини-типографии. Свидетельство №5551. 440600, г.Пенза, ул. Московская, 74

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Озерова, Надежда Семеновна

ВВЕДЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Номенклатура изучаемых видов грибов.

1.2. Географическое распространение изучаемых видов ксилотрофпых базидиомицетов.

1.3. Морфолого - культуральпые особенности изучаемых видов афиллофороидных базидиомицетов.

1.4. Аспекты использования афиллофороидных грибов в качестве продуцентов биологически активных веществ.

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Природные условия района исследований

2.2. Сбор и обработка материала.

III ЭКОЛОГИЯ ИЗУЧАЕМЫХ ВИДОВ АФИЛЛОФОРОИДНЫХ

ГРИБОВ.

3.1. Экологические особенности Laetiporus sulphureus на территории Пензенской области.

3.1.1. Закономерности расселения L. sulphureus.

3.1.2. Динамика плодоношения L. sulphureus.

3.2.Экологические особенности G. lucidum в условиях лесостепи правобережного Поволжья.

3.3. Экологические особенности G. applanatum в условиях Пензенской области.

IV МОРФОЛОГО-КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ

ШТАММОВ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР ИЗУЧАЕМЫХ ВИДОВ.

4.1. Морфолого-культуральные особенности мицелия штаммов чистых культур L sulphurous.

4.2. Морфолого-культуральные особенности мицелия штаммов чистых культур G. lucidum.

4.3. Морфолого-культуральные особенности мицелия штаммов чистых культур G. applanatum.

4.4. Сравнительная характеристика морфолого-культультуральных свойств чистых культур изучаемых видов.

V КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ИЗУЧАЕМЫХ ВИДОВ ГРИБОВ НА РАЗЛИЧНЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ СУБСТРАТАХ.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологические особенности ксилотрофных базидиомицетов родов Laetiporus Murrill и Ganoderma P. Karst. Пензенской области"

Одним из приоритетных направлений социального развития Российской Федерации, является федеральная целевая программа «Предупреждение и борьба с заболеваниями социального характера (2002-2006 годы)». Важным условием ее реализации, является разработка и внедрение в медицинскую практику результатов научно-исследовательских работ, связанных с профилактикой заболеваний. Создание иммуномодулирующих лекарственных средств, обладающих профилактическим, антибактериальным, адаптогенным действием, позволит эффективнее обеспечить претворение в жизнь мероприятий данной программы.

В качестве природного источника, указанных препаратов, в последнее время часто используют грибы класса Basidiomycctes. Биологически активные вещества, обнаруженные в плодовых телах, а также культуралыюм мицелии данных грибов, повышают сопротивляемость организма к неблагоприятным факторам, стимулируют иммунную систему, способны регулировать кровяное давление, а также понижать содержание холестерина и сахара в крови. Кроме того, лекарственные средства на основе базидиомицетов преодолевают лекарственную устойчивость микроорганизмов, не обладают токсичностью и отрицательным побочным действием (Краснопольская, 1998). К видам, перспективным сточки зрения поиска перечисленных выше веществ, относятся некоторые представители ксилотрофных базидиомицетов, а в частности трутовик серно-желтый - Laetiporus sulphurcus (Fr.) Bond, et Sing., трутовик лакированный - Ganodcrma lucidum (Curt.: Fr.) Karst. и трутовик плоский -Ganodcrma applanation (Pers.) Pat. порядок Aphyllophorales, Basidioinycota. Указанные виды грибов были использованы в качестве объектов исследования. Изучение их экологических особенностей является теоретической основой для разработки способов промышленного культивирования, а также получения культурального мицелия обладающего лечебными свойствами, что определяет актуальность выбранного направления исследований.

Целью настоящих исследований явилось изучение экологических особенностей /,. sulphurous,G. lucidum и G. applanatum.

В ходе исследований были поставлены следующие задачи:

1. Изучить закономерности расселения рассматриваемых видов в природных условиях, их приуроченность к древесным субстратам, сроки развития базидиом и внутривидовой полиморфизм.

2. Дать оценку функциональной роли /,. sulphureus, G. lucidum, G. applanatum в лесных экосистемах Приволжской лесостепи.

3. Выявить оптимальные питательные среды для развития мицелиальных культур изучаемых видов.

4. Изучить отношение мицелиальных культур к таким экологическим факторам как температура, свет, реакция среды.

5. Определить диапазон изменчивости штаммов чистых культур по морфолого-культуральным признакам.

6. Изучить возможность поверхностного культивирования мицелиальных культур на жидкой питательной среде.

7. Выяснить возможность использования зерна пшеницы и различных отходов сельскохозяйственного производства для выращивания мицелия изучаемых видов.

Научная новизна работы состоит в том, что впервые выявлены закономерности распространения, динамика плодоношения и функциональная роль L. sulphureus, G. lucidum, G. applanatum в экосистемах. Изучен внутривидовой полиморфизм L sulphureus, а также морфолого-культуральные свойства трех видов ксилотрофных базидиомицетов.

Проведенные исследования позволили выявить оптимальные экологические условия для развития мицелиальных культур L. sulphureus, G. lucidum, G. applanatum, особенности состава питательных сред, освещения, температуры. Полученные данные можно использовать для разработки производственных регламентов поверхностного и глубинного культивирования мицелия изученных видов.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение Диссертация по теме "Микология", Озерова, Надежда Семеновна

ВЫВОДЫ

В районе исследований изучаемые виды грибов связаны с древесиной следующих видов деревьев: L. sulphureus - с древесиной дуба обыкновенного, ивы белой и ломкой, реже тополя белого и ясеня обыкновенного; G. lucidum - с древесиной дуба обыкновенного; G. applanatum - с древесиной дуба обыкновенного, ивы белой и ломкой, реже ясеня обыкновенного, лещины обыкновенной и березы бородавчатой.

Формирование плодовых тел L. sulphureus приходится на период с конца мая по середину июня и с середины августа по ноябрь. Ритм плодоношения в разные годы неодинаков, что обусловлено гидротермическими условиями. Оптимальным среднесуточным температурным диапазоном для формирования базидиом этого вида является +21-23° С.

Установлена прямая корреляция между размерами плодовых тел L. sulphureus и G. lucidum и диаметрами стволов пораженных деревьев.

Изученные виды играют определенную роль в лесных экосистемах Приволжской лесостепи: L. sulphureus является широко распространенным видом, способствует естественному отмиранию старых деревьев дуба и ивы; G. applanatum относится к числу мало распространенных видов, является активным деструктором сухостоя и вал ежа.

Штаммы чистых культур L. sulphureus, а также G. lucidum при выращивании на агаризованных средах разделились па группы быстрорастущих и медленнорастущих. Быстрорастущие штаммы L sulphureus, были выделены из ярко окрашенных, а медленнорастущие -из светлоокрашенных плодовых тел.

Для большинства штаммов изученных видов оптимальной температурой роста мицелия в чистой культуре является +25°С, а оптимальным интервалом значений рН среды являются 4,5 - 6,2. Освещение в течение двенадцати и двадцати четырех часов в сутки оказывает ингибирующее действие на рост мицелиальных культур всех изученных видов.

При добавлении некоторых микроэлементов в жидкую питательную среду, где поверхностно культивировался G. lucidum, заметное стимулирующее действие оказал германий.

Лучшим субстратом для выращивания посевного мицелия L. sulphureus и G. lucidum является зерно пшеницы. Для искусственного культивирования L. sulphureus рекомендуется использовать подсолнечную лузгу, а для G. lucidum и G. applanatum - солому пшеницы. Данные субстраты могут быть рекомендованы для биотехнологических целей.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Озерова, Надежда Семеновна, Москва

1. Автономова А.В. G. lucidum (Curt.: Fr.) Karst., трутовик лакированный: штаммовое разнообразие, антибиотические свойства и противоопухолевое действие. Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 2006. -24 с.

2. Авцыи А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова JI.C. Микроэлементозы человека,- М.: Медицина, 1991. 496 с.

3. Бадалян С.М., Гаспаряп А.В., Гарибян Н.Г. Исследование аптиоксидантной активности некоторых базидиальных макромицетов // Микология и фитопатология. 2003. - Т. 37. - Вып. 5. - С. 63-67

4. Беккер З.И. Физиология и биохимия грибов. М.: Изд-во МГУ, 1988.227 с.

5. Беккер З.Э. Влияние внешних воздействий на плодоношение грибов // Успехи современной биологии. 1936. - №3. - С. 491 - 508

6. Белова Н.В., Природа биологической активности высших грибов // Успехи медицинской микологии. 2001. - Т.1. - С. 230-233.

7. Билай В.И., Билай Т.И., Мусич Е.Г., Трансформация целлюлозы грибами Киев: Наук, думка, 1982. - 295 с.

8. Бисько Н.А., Митропольская НЛО., Гулич М.П., Ольшевская О.Д., Ятченко Е.А. Перспективы использования лекарственного гриба G. lucidum в лечебно-профилактических целях // Успехи медицинской микологии 2001. -Т.1. - С 234 - 236

9. Бисько Н.А., Бухало А.С., Вассер С.П. Высшие съедобные базидиомицеты в поверхностной и глубинной культуре. Киев: Наук, думка, 1983.-312 с.

10. Бондарцев А.С. Трутовые грибы европейской части СССР и Кавказа. М.; Л.: Изд-во АН СССР, 1953. 1106 с.

11. Бондарцев А.С. и Зингер Р.А. Руководство по сбору высших базидипльных грибов для научного их изучения. // Тр. бот. инст. АН СССР, -сер. II, Споровые раст. Вып. 6. М.;Л. - 1950.- С. 499-572

12. Бондарцева М.А. Семейства альбатрелловые, апорпиевые, болетопсиевые, бондарцевиевые, ганодермовые, котициевые, лахнокладиевые, полипоровые, пориевые, ригидопоровые, феоловые, фистулиновыею Спб.: Наука, 1998.-391 с.

13. Брагинцева Л.М. Грибы источник биологически активных веществ // Успехи медицинской микологии. - 2001. -Т.1. - С. 242-245

14. Брехман И.И., Нестеренко И.Ф. Природные комплексы биологически активных веществ: Сахар и здоровье человека. Л.: Наука, 1988,- 93 с.

15. Бурова Л.Г. Экология грибов макромицетов. М.: Наука, 1986. - 221с.

16. Бурова Jl.Г. Влияние теплового режима и освещенности местообитания на развитие и распределение макромицетов в широколиственно-еловых лесах Подмосковья // Микология и фитопатология. 1978. -Т.1.- Вып. 5. -С. 369-371

17. Бухало А.С. Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре.-Киев: Наук, думка, 1988,- 144 с.

18. Бухало А.С., Соломко Э.Ф., Пархоменко Л.П., и др. Опыт глубинного выращивания Pleurotus ostrestus (Fr.) Kumm. на комплексных средах // Производство высших съедобных грибов СССР. Киев: Наук, думка, 1978. - С. 29-32

19. Вассер С.П. Принципы ботанической номенклатуры и ее применение в связи с новым международным кодексом ботанической номенклатуры// Биологические основы рационального использования, преобразования и охраны растительного мира. Киев, 1984. С. 53-68

20. Веселкин Д.В. Микоризные грибы как индикаторы техногенных нарушений экосистем // Проблемы общей и прикладной экологии: Материалы молодеж. конф. Екатеринбург, 1996 - 156 с.

21. Великанов Л.Л., Успенская Г.Д. Некоторые вопросы экологии грибов (пути формирования основных экологических групп грибов, их место и роль в биогеоценозах)//Итоги науки и техники: Ботаника. М.: ВИНИТИ, 1980. -Т.4. -146 с.

22. Великанов Л.Л., Сидорова И.И., Успенская Г.Д. Полевая практика по экологии грибов и лишайников. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1980. - 112 с.

23. Воронкевич. И.В., Горлепко. М.В., Журавлев. И.И. и др. Грибы друзья и враги человека. М.: Советская наука, 1956. - 186с.

24. Гаврилова В.П., Яковлева Н.С., Биотехнологическое использование базидиомицета Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) Karst. // Успехи медицинской микологии. 2001. - Т.1.- С. 261-263

25. Гвоздикова Т.С., Мишин Л.Т., Черноок Т.В., Пленина Л.В., Капич А.Н. // Успехи медицинской микологии. 2003. - Т.З. - С.- 218-220

26. Гордиенко П.В. Экологические особенности дереворазрушающих грибов в лесных биоценозах среднего Сихотэ-Аланя: Дис. .канд. биол. наук. М.: МГУ, 1979.-149 с.

27. Горлепко М.В., Бондарцева М.А., Гарибова Л.В., Сидорова И.И., Сизова Т.П. Грибы СССР. М.: Мысль, 1980. - 303 с.

28. Горлепко М.В, Гарибова Л.В., Сидорова И.И., и др. Все о грибах. М.: Лесн. пром-ть, 1986.-280 с.

29. Горленко H.B. Грибы, как источник пищевых белков //Микология и фитопатология,- 1983. Т.17.-Вып. З.-С. 177-181

30. Давыдкина Т.А. Стереумовые грибы Советского Союза. JI.: Наука. Лепипгр. отд-е, 1980. - 143 с.

31. Дворнина А.А. Базидиальные съедобные грибы в искусственной культуре.-Кишинев: Штиица, 1990.-109 с.

32. Девочкин Л.А. Шампиньоны,-М.: Агропромиздат, 1989,- 174 с. Денисова Г.В. Влияние неорганических соединений селена на рост и развитие базидиальпых макромицетов: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1999.-26 с.

33. Денисова Г.В. Об отзывчивости различных штаммов Agaricns bisporiis на обработку селеном: Тез. докл. мол. ученых Пенза, 1998,- С. 29-30

34. Джеффри Ч. Биологическая номенклатура. М.: Мир, 1980. -253 с.

35. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. -М.: Мир, 1982,- 960 с.

36. Доспехов Б.А. Методика полевого опыта. М.: Агропромиздат, 1985.351 с.

37. Долгополов К.В., Федорова Е.Ф. Поволжье. М.: Просвещение, 1967.205 с.

38. Дудка И.А., Вассер С.П., и др. Методы экспериментальной микологии (справочник). Киев.: Наук, думка, 1982. - 550 с.

39. Дудка И.А., Вассер С.П. Грибы. Справочник миколога и грибника. -Киев: Наук, думка, 1987. 535 с.

40. Дудка.И.А, Вассер.С.П . Грибы. Киев: Наук, думка, 1988. - 130 с. Жаков С.И. Климат: Природа Пензенской области. - Саратов: Приволж. кн. изд., 1970. С. 47-82

41. Завьялова Л.А., Гарибова Л.В., Подходы к изучению ксилотрофных базидиомицетов перспективных в фармакологии // Успехи медицинской микологии. 2001. - Т.1. - С. 326-327

42. Завьялова Л.А., Чистякова Е.Л., Инсарова И.Д., Антимонова А.В. Штаммовое разнообразие трутовика лакированного Ganodcrma lucidum П Микология и фитопатология. 2005. - Т. 39. - Вып. 1. - С. 27-33

43. Иванов А.И. Биота макромицетов лесостепи правобережного Поволжья. Автореф. дис. доктора биол. наук. М., 1992. - 34 с.

44. Иванов А.И. Гастеромицеты Пензенской области // Новости сист. нисш. раст. Л., 1983.-Т. 20. С. 83-84

45. Иванов А.И., Антонов И.С., Власова Т.Г. Растительность Пензенской области. Саратов: Сарат. с.-х. ин-т им. Н.И. Вавилова, 1989. - 40 с.

46. Иванов А.И., Давыдкина Т. А. Ком ирная О.Н. Новые данные об афиллофоровых грибах и гастеромицетах Приволжской возвышенности // Новости сист. низш. раст. Л., 1989. - Т. 26. - С. 60-62

47. Иванов А.И., Иванова В.А. Макромицеты рудеральных местообитаний в условиях Пензенской области // Микология и фитопатология. 1997. - Т.31. -Вып. 5. - С. 22-27

48. Иванова В.А. Эколого-биологическая характеристика рудеральных видов агарикоидпых грибов лесостепи правобережного Поволжья (Пензенская область) и перспективы их использования: Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1998. - 17 с.

49. Ильина Г.В. Особенности культивирования мицелия трутовика лакированного (Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.)P. Karst.) на естественных субстратах // Роль науки в развитии АПК: материалы научно-практической конференции. Пенза: РИО ПГСХА, 2005. - С.56-58

50. Капитанов А.Б., Пименов A.M. Каротиноиды как антиоксидантные модуляторы клеточного метаболизма // Успехи современной биологии. 1996. -Т. 116.-Вып. 2.-С. 179-193

51. Красная книга. Редкие и охраняемые растения и животные Волгоградской области // Брылев В.А., Баштаник Д.Ф., Володина Н.Т. и др. -Волгоград, 1992. 142 с.

52. Красная книга Пензенской области. Т. 1. Растения н грибы. - Пенза, 2002.- 159 с.

53. Красная книга. Редкие и охраняемые растения и животные Саратовской области Саратов, 1996. - 263 с.

54. Краснопольская JI.M. Грибы класса Basidiomycetes источники лекарственных веществ // Современные проблемы микологии, альгологии и фитопатологии: сборник статей. М.: МГУ - ИД «Муравей», 1998. -С. 230-232

55. Кузнецов К.А. Почвы // Природа Пензенской области. Саратов: Приволж. кн. изд., 1970. С 114-129

56. Курс низших растений: Учебник для студентов ун-тов/ Великанов J1.J1., Гарибова Л.В., Горбунова Н.П., Горленко М.В. и др.; под ред. М.В.Горленко.-М.: Высш. школа, 1981. -504 с.

57. Лил л и В., Барнетт Г. Физиология грибов.-М.: Мир, 1975. -553 с.

58. Маслова Р.А. Рост афиллофоровых грибов на средах с различными источниками углеродного питания // Микология и фитопатология. 1973. - Т.7. -Вып.2. -С.95 - 101

59. Мацкевич Н.В. Аспекты изучения и охраны генофонда редких и исчезающих видов растений и грибов // Современные проблемы Красной книги СССР: Сб. тр. ВНИИ Природы. М., 1989. С. 65-73

60. Мацкевич Н.В., Лутков А.А. Аспекты изучения и охраны биоразнообразия редких объектов растительного мира и грибов // Проблемы охраны биоразнообразия России: Тез. докл. науч. конф. Пенза, 1996. С. 8.

61. Мерзликина Е.Н. Геологическое строение: Природа Пензенской области. Саратов, 1970. С.42-82

62. Мильков Ф.Н. Среднее Поволжье. М.: Изд-во АН СССР, 1953. 262 с.

63. Мир растений. Т.2. Грибы. / Отв. ред. М.В. Горленко. -М.: Просвещение, 1991. 479 с.

64. Морозкина Т.С., Мойсеенок А.Г. Витамины: Краткое рук. для врачей и студентов мед., фармацевт, и биол. специальностей. Мн.: ООО «Асар», 2002. -112 с.

65. Москалец П.В. Экология дикорастущего Agaricus bisporiis (J. Lange) Imbach в лесостепи правобережного Поволжья (Пензенская область) Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1997. - 16 с.

66. Мухин В.А. Биота ксилотрофных базидиомицетов Западно-Сибирской равнины. Екатеринбург: УИФ Наука, 1993. - 230 с.

67. Мухин В.А. Экология процессов биологического разложения // Эколого-водохозяйственный вестник. Екатеринбург, 1998. С 56-59

68. Мюллер Э., Лёффлер В. Микология М.: Мир, 1995, - 343 с.

69. Негруцкий С.Ф., Шапошник Ю.А., Сычев П.А., Демченко С.П., Полтавец С.А. Горное грибоводство. Донецк: РИП "Лебедь", 1995. -167 с.

70. Негруцкий С.Ф. Физиология и биохимия низших растений. Киев: Выща школа, 1990.-200 с.

71. Низовская О.П., Милова Н.М. К сравнительной физиологической характеристике грибов из порядка афиллофоровых и агариковых в культуре // Кормовые белки и физиологически активные соединения. Л.: Наука, 1973. С. 13-19

72. Новиков Ю.В. Охрана окружающей среды. М: Высшая школа, 1987.287 с.

73. Новиков Ю.В. Экология, окружающая среда и человек. М: ФАИР, 1998. -320 с.

74. Нудьга Л.А., Петрова В.А., Кевер Е.Е., Макарова Т.В. Изучение гидролиза хитин-глюканового комплекса гриба Aspergillus niger фосфорной кислотой// Журнал прикладной химии.-2002. Т. 75. - Вып. 11.-С. 101-103

75. Пармасто Э.Х. Распространение афилофоровых грибов базидиоспорами //Изв. АН Эст. ССР, биол., 1970. Т. 19. - Вып.4. -С. 89-102

76. Ранчева Ц. Интенсивное производство шампиньонов. М.: Агропромиздат, 1990. -189 с.

77. Рекомендации по выращиванию грибов вешенки. М., 1983.- 25 с.

78. Решетникова И.А. Накопление селена и фракционирование его изотопов микроорганизмами. Деструкция лигнина ксилотрофпыми макромицетами. М., 1997.-197 с.

79. Рипачек В. Биология дереворазрушающих грибов. М.: Лесная промышленность, 1967. -276 с.

80. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика. Минск: Выща школа, 1967.- 326 с.

81. Сашенкова С.А. Эколого-биологические особенности гастероидных грибов юго-востока русской равнины. Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1999.-25 с.

82. Сафонов М.А. Трутовые грибы Оренбургской области: Монография. -Оренбург: Издательство ОГПУ, 2000. 152 с.

83. Сержапина Г.И. Змитрич И.И. Макромицеты. 2-е изд. Минск: Вышейша школа, 1986. - 214 с.

84. Сивочуб О.А. Каталог культур базидиомицетов коллекции Ботанического института им. В.Л. Комарова Российской Академии паук. -Санкт-Петербург: Наука, 1992. 25 с.

85. Сидорова И.И. Макросистема грибов: методология и изменения последнего десятилетия // Новое в систематике и номенклатуре грибов. Под. ред. Ю.Т. Дьякова, Ю.В. Сергеева. М.: Национальная академия микологии, 2003.-496 с.

86. Степанова-Картавепко Н.Т. Афиллофоровые грибы Урала: Тр. ин-та экологии растений и животных. Вып.50. - Свердловск: УФАН СССР, 1967. -295 с.

87. Столлер Б.Б. Шампиньоны. Теория и практика выращивания. М.: ИЛ, 1956.-88 с.

88. Сулига Е.М., Иванов Д.В. Ксилотрофы западной части Саратовской области // Сборник материалов II Международной научно-практической конференции «Состояние биосферы и здоровье людей». Пенза, 2002.

89. Сурков В.А., Павлова М.Е. Экологические группы грибов. М., 1998,27с.

90. Торшин С.П., Ягодин Б.А., Удельнова Т.М., Голубкина Н.А., Дудецкий А.А. Влияние микроэлементов Se, Zn, Mo при разной обаспеченности почвы микроэлементами и серой па содержание селена в растениях яровой пшеницы и рапса//Афохимия.-1996.-№5.-С.54-64

91. Уранов А.А. Материалы к фитосоциологическому описанию заповедной степи Пензенской губ. в связи с законом константности: Тр. по изуч. заповеди. Отд. охраны природы Главнауки НКП РСФСР, 1925, Вып. 7. - С. 1-40

92. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Меморская А.С. Достижения и проблемы новой отрасли биотехнологии: получение медицинских препаратов па основе биологически активных веществ мицелиальных грибов // Успехи медицинской микологии. 2001. - Т.1. - С,- 254-256

93. Феофилова Е.П. Каротиноиды грибов: биологические функции и практическое использование // Прикладная биохимия и микробиология. 1994. -Т. 30. Вып. 2.-С. 181-195

94. Феофилова Е.П. Хитин грибов: распространение, биосинтез, физико-химические свойства и перспективы использования. М.: Наука, 2002. 365 с.

95. Частухин В.Я., Николаевская М.А. Биологический распад и ресинтез органического вещества в природе. JI.: Наука, Лениигр. отд., 1969. 326 с.

96. Чистякова Е.Л., Штаммовое разнообразие трутовика лакированного Ganoderma lucidum // Микология и альгология 2004. М.: Прометей МПГУ, -2004.-С. 149-150

97. Шиврина А.Н., Низковская О.П. и др. Биосинтетическая деятельность высших грибов. Л.: Наука, 1969. - 241 с.

98. Шиврина А.Н. Биологически активные вещества высших грибов,- М,-Л.: Наука, 1965.-199 с.

99. Шульга. К.В., Карклина Э.И. Грибы наших лесов. -Минск: Ураджай, 1966. -195с.

100. Boidin J. Nuclear behaviour in the mycelium and the evolution of Basidiomycetes // Evolution in the Higher Basidiomycetes: An Intern, symp. / Ed. R. Peterson. Knoxville. - 1971. - P. 129-148

101. Bourdot H. et Galzin A. Hymenomycetes de France. Paris, 1928. -P. 1-761 Donk M.A. Revision der Niederlandischen Hoinobasidiomycetae -Aphyllophoraceae, II // Medd. Univ. Utrecht. 1933. № 9. 278 p.

102. Fris E.M. Systema mycologicum. Lund, 1821-1822. Vol. 1-2. 520 p. Fris E.M. Elenchus fugorum sistens Commentarium in Systema Mycologinm. 1. Gryphiswaldiae. 1828. - 238 p.

103. Fris E.M. Epicrisis systematis tnycologici, seu synopsis Hymenomycetum. Upsala, 1836-1838.-610 p.

104. Futrakul N., et al. Ganoderma lucidum suppresses endothelial cell cytotoxicity and proteinuria in persistent proteinuric focal segmental glomerulosclerosis (FSGS) nephrosis // Clin Hemorheol Microcirc, 2004. P. 267272

105. Jiilich W. Die Nichtblatterpilze, Gallerpilze und Bauchpilze. Aphyllophorales, Heterobasidiomycetes, Gasteromycetes. Jena: Gustav Fischer, 1984.-625 p.

106. Jiilich W. Hegher taxa of Basidiomycetes. Vaduz: J. Cramer, 1981,- 485 p. Gillet С. C. Les champignons gui croissant en France. Paris, 1874-1878. P.1.828

107. Guminska B. Macromycetes Iak w Peninskim Parku Narodo\vymi-"Acta mycol", 1976. Vol. 12. №1. - P. 67-72

108. Haard R.T., Kramer C.L. Periodicty of spore discharge in Hymenomycetes // Mycologia, 1970. Vol. 6. - P. 54-63

109. Hedgcock G. G. Notes on some diseases of trees in our national forests.

110. Phytopathology, II, 1912, p. 75

111. Quelet L. Flore mycologigue de la France et des pays limitrophes. Paris,1888.-P. 1 -492

112. Karsten P. A. Kritisk Ofversigt af Finland Basidsvampar. Bidr. Kanned. Finl. Nat. Folk., 1889.-P. 1 -470

113. Karsten P.A. Enumeratio Boletinearum et Polyporearum fennicarum, systemate novo dispositaaim. Rev. Мус., Ill, 9, 1881. P. 16-19.

114. Symb.Bot. Upps. -1944. -P. 140-144

115. Mizuno, T. Oriental Medicinal tradition of Ganoderma lucidum (Reishi) in China. Seoul, Korea: II-Yang Pharm. Co. Ltd, 1996. P.101-106

116. Murrill W. A. Nort American Flora, IX. Polyporaceae. New York, part I,1907. P. 1-72

117. Murrill W.A. The Polyporaceae of North America, II. The genus Fomes. Bull. Тогт. Bot. Club, XXX, 1903. P. 225 - 232

118. Murrill W.A. North American Flora, IX. Polyporaceae. New York, part 2,1908.-P. 73-132

119. Nobles M.K. Cultural characters as a guide to the taxonomy and phylogeny of Polyporaceae // Can. J. Bot. 1958 - Vol. 36. - №6 - P. 883-926

120. Oyama J. , Joshida Т., Tagushi H. The artifical cultivation of mycorrhisa forming Basidiomycetes // Mushroom Sci.- 1974.- Vol. 9,- Pt.l.- P. 719 731

121. Patouillard N. Le genre Ganoderma. Bull. Soc. Мус. Fr., 1889. -P. 65 80 Perliman D. Studies on the growth and metabolism of Polyporus anceps in submerger culture // Amer. J. Bot.- 1949,- Vol.36.-№2.- P. 180-184

122. Shiao MS, et al. Natural products and biological activities of Ganoderma lucidum. Am Chem Soc, 1994. P. 342-354

123. Stalpers J. A. Identification of wood inhabiting Aphyllophorales in pureculture // Stud. Mycol.- I978.-№ 16.- 248 p.

124. Singer R. The Agaricales in modern taxonomy. 3 th ed. Vaduz, 1975. - 9121. P

125. Shope P.F. The Polyporaceae of Colorado. Ann. Miss. Bot. Gard., XVIII, 1931,- P. 287-457

126. Woodall A.A., Lee S.W., Weesie R.J. e.a. Oxidation of carotenoids by free radical: relationship between stmcture and reactivity // Biochim. Et Biophys. Acta. -1997,-Vol. 36, №1. P. 33-42

127. Wachtel-Galor S., Tomlinson В., Benzie I.F. Ganoderma lucidum "Lingzhi", a Chinese medicinal mushroom: biomarker responses in a controlled human supplementation study. // Br J Nutr. 2004. - P. 263-269