Эколого-физиологический потенциал природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов

Ильина, Галина Викторовна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Эколого-физиологический потенциал природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов
ВАК РФ 03.02.08, Экология (по отраслям)

Автореферат диссертации по теме "Эколого-физиологический потенциал природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов"

Ильина Галина Викторовна

ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ ПРИРОДНЫХ ИЗОЛЯТОВ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ

03.02.08 - экология (биологические науки) 03.01.06 - биотехнология

2 7 ОКТ 2011

Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора биологических наук

Саратов-2011

4858160

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пензенская государственная сельскохозяйственная академия»

Научный доктор биологических наук, профессор

консультант: Гарибова Лидия Васильевна

Официальные доктор биологических наук, профессор

оппоненты: Краснопольская Лариса Михайловна

доктор биологических наук, профессор Коннова Светлана Анатольевна

доктор биологических наук, профессор Никитина Валентина Евгеньевна

Ведущая Государственное образовательное учреждение

организация: высшего профессионального образования

«Пермский государственный педагогический университет»

Защита состоится И ноября 2011 г. в Ю00 часов на заседании диссертационного совета Д 212.243.13 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского» по адресу: 410012, г. Саратов, ул. Астраханская, д. 83, E-mail: biosovet@sgu.ru

С диссертацией можно ознакомиться в Зональной научной библиотеке имени В. А. Артисевич ГОУ ВПО «Саратовский государственный университет имени Н.Г. Чернышевского».

Автореферат разослан « » P/tSVJdfux. 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета ъ/ЯИМШ^*"Ь» С. А. Невский

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Ксилотрофные базидиальные макромицеты - уникальная группа организмов, способная к полной деструкции лигноцеллюлоз, обеспечивающая мобилизацию депонированного в древесине углерода (Мухин, 1993). В качестве специфического компонента экосистем, составляющего основу механизма регуляции процессов накопления и разложения растительных остатков, ксилотрофные базидиомицеты представляются весьма актуальными объектами исследования. Ряд крупных монографический работ второй половины XX века (Бондар-цев, 1953; Бондарцева, Пармасто, 1986; Бондарцева, 1998; Erikson et al, 1973-1988; Jülich, Stalpers, 1980) предопределил интенсивное развитие экологического направления исследований этой группы грибов. За рубежом преобладающим стал природоохранный аспект (Knudsen, Vesterholt, 1990; Kotiranta, Niemelä, 1996), а в отечественных исследованиях реализовывались традиции классической экологии (Бондарцева, 2000; Мухин, 2003; Стороженко, 2002; Змитрович и др., 2003; Сафонов, 2003; Арефьев, 2006 и др.). На сегодняшний день довольно ограничены сведения, касающиеся аспектов биологии видов, различающихся экологическими особенностями, в условиях культуры, о потенциале различных географических и экологических изолятов in vitro, возможностях сохранения генофонда редких и охраняемых видов в качестве мицелиальных культур. Однако, только в условиях чистой культуры возможно детальное исследование экологических особенностей вида и установление параметров, оптимальных для реализации природного потенциала гриба. В последние десятилетия ксилотрофные базидиомицеты заняли одно из ведущих мест в качестве объектов биотехнологии.

Вышесказанное свидетельствует об актуальности исследований экологии ксилотрофных базидиомицетов, целесообразности создания коллекций их чистых культур, располагающих достаточным объемом экспериментального материала и работы с природными изолятами, потенциально перспективными в биотехнологии.

Цель и задачи исследований. Цель работы - выявление экологических особенностей ксилотрофных базидиомицетов в лесных экосистемах лесостепи Правобережного Поволжья и оценка физиологического и биотехнологического потенциала изолятов видов с различными экологическими особенностями в условиях чистой культуры. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

- изучить таксономическую и трофическую структуру биоты ксилотрофных базидиомицетов с учетом особенностей их взаимодействия с древесными субстратами в районе исследований;

- исследовать функциональные роли группировок видов ксилотрофных базидиомицетов в сукцессионном ряду разложения древесины;

- создать коллекцию изолятов ксилотрофных базидиомицетов, вызывающих разные типы гнилей древесины, выделенных с различных древесных пород и субстратов различной степени деструкции;

- разработать оптимальные приемы культивирования видов с учетом их экологических особенностей и степени функциональной зависимости физиологического потенциала от условий культивирования;

- разработать приемы, обеспечивающие максимальную сохранность морфоло-го-физиологических параметров мицелиальных культур и генофонда редких и занесенных в Красные Книги РФ и Пензенской области видов;

- исследовать влияние ряда лимитирующих экологических факторов на мице-лиальные культуры ксилотрофных базидиомицетов в лабораторных условиях с целью установления пределов толерантности и оценки связи устойчивости к различным воздействиям с эколого-биологическими особенностями видов;

- изучить роль метоксильных групп лигнина, как трофического и корригирующего процессы морфогенеза фактора;

- выявить взаимосвязь между эколого-физиологическими особенностями культур и их биотехнологической перспективностью.

Научная новизна и теоретическая значимость. Изучены экологические особенности ксилотрофной микобиоты лесостепи Правобережного Поволжья, установлены закономерности формирования трофических связей видов и древесных пород - их природных субстратов. Выявлена связь между широтой субстратной приуроченности видов грибов в природе и степенью внутривидового полиморфизма в культуре. Комплексно изучена роль важнейшей составляющей природного субстрата - лигнина как трофического и корригирующего фактора в развитии ксилотрофных базидиомицетов. Изучены механизмы адаптации ксилотрофных базидиомицетов к фунгициду полиеновой природы. Установлено стимулирующее влияние метоксильных групп лигнина на процесс синтеза эргостерина и плодоношение в культуре у грибов белой гнили.

Практическая значимость. Создана коллекция мицелиальных культур базидиомицетов - представителей ксилотрофной микобиоты лесостепи Правобережного Поволжья. Коллекция включает 44 вида и 215 штаммов грибов, принадлежащих

к разным систематическим и экологическим группам, в том числе в ней представлены редкие и занесенные в Красные Книги РФ и Пензенской области виды. Показаны возможности культивирования видов, независимо от их субстратной специфичности в природе, на субстратах, содержащих экстрагированные метоксилиро-ванные лигноцеллюлозные компоненты. С помощью разработанного метода скрининга отобраны штаммы ксилотрофных базидиомицетов, перспективные в качестве продуцентов стеринов. Получены положительные решения по заявкам на патентование оригинальной рецептуры субстратов и способа получения плодовых тел ксилотрофных базидиомицетов, перспективных в биотехнологии. Разработана биологически активная добавка к рациону сельскохозяйственных птиц на основе мицелия Ganoderma lucidum, которая апробирована в условиях крупнейшего птицеводческого комплекса Пензенской области (ООО ПТФ «Васильевская»), Подана заявка на патентование. Запатентован способ хранения мицелиальных культур, обеспечивающий сохранение продуктивных свойств штаммов и генофонда редких видов, в том числе, занесенных в Красные Книги РФ и Пензенской области. Полученные данные относительно особенностей экологии ксилотрофных базидиомицетов используются в процессе преподавания курсов «Экология» и «Основы экологии» в ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА».

Положения, выносимые на защиту:

1. Лесные экосистемы лесостепи Правобережного Поволжья представляют собой богатый резерват видов и штаммов ксилотрофных базидиомицетов, составляющих различные эколого-трофические группировки.

2. Комплексная оценка экологического статуса вида в природе позволяет оптимизировать процесс искусственного культивирования, а статус чистой культуры расширяет возможности исследования важнейших сторон экологии ксилотрофных базидиомицетов в природе.

3. По эколого-физиологическим характеристикам культуры можно судить о потенциальной метаболической активности и, как следствие, биотехнологической ценности штамма.

4. Широта субстратной специфичности в отношении древесных пород и стадии разложения древесины является одним из факторов, определяющих степень штаммового полиморфизма вида в культуре.

5. Метоксильные группы лигнина служат индуктором синтеза эргостерина у грибов белой гнили и стимулятором плодоношения ксилотрофных базидиомицетов.

Работа выполнена в лаборатории биохимии при кафедре биологии животных и ветеринарии Пензенской государственной сельскохозяйственной академии (свидетельство о состоянии измерений №264-224-2008), в соответствии с плановой тематикой "Исследование эколого-биохимического и биотехнологического потенциала ксилотрофных базидиомицетов" (№ гос. регистрации 0120.0850925), а также «Повышение продуктивных качеств животных и разработка рациональных технологий производства продукции животноводства в условиях Среднего Поволжья» (№ гос. регистрации 0120.1064496). В ходе исследований использовалась материальная и приборная база Центральной экоаналитической лаборатории Регионального Центра государственного экологического контроля и мониторинга по Пензенской области (аттестат аккредитации в системе СААЛ РОСС Ри. 0001.515921).

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на конференциях, форумах и симпозиумах: Международной конференции, посвященной 80-летию кафедры микологии и альгологии МГУ и 90-летию М.В. Горленко «Современные проблемы микологии, альгологии и фитопатологии» (Москва, 1998); II Съезде ботаников «Проблемы ботаники на рубеже XX -XXI веков» (Санкт - Петербург, 1998); Международном симпозиуме «Проблемы изучения и охраны биоразнообразия и природных ландшафтов Европы» (Пенза, 2001); Международной конференции «Физиология и биохимия культивируемых грибов» (Саратов, 2002); 1-ом Международном Съезде микологов России (Москва, 2002); Всероссийской научно - практической конференции «Вопросы прикладной экологии» (Пенза, 2002); Всероссийской научной конференции, посвященной 130-летию со дня рождения И.И. Спрыгина «Охрана растительного и животного мира Поволжья и сопредельных территорий» (Пенза, 2003); Международной научной конференции «Биология, систематика и экология грибов в природных экосистемах и агрофито-ценозах» (Минск, 2004); Международной научно - практической конференции «Проблемы охраны природных ландшафтов и биоразнообразия России и сопредельных стран» (Пенза, 2004); Научно - практической конференции, посвященной памяти профессора А.Ф. Блинохватова «Образование, наука, медицина: эколого-экономический аспект» (Пенза, 2006); Всероссийской научно - практической конференции «Проблемы охраны и экологического мониторинга природных ландшафтов и биоразнообразия» (Пенза, 2007); Всероссийской научно - практической конференции «Мониторинг природных экосистем в зонах защитных мероприятий объектов по уничтожению химического оружия» (Пенза, 2007); Юбилейной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения М.В. Горленко «Высшие ба-зидиальные грибы: индивидуумы, популяции, сообщества» (Москва, 2008); II

Международном Съезде микологов России (Москва, 2008); Международной научной конференции, посвященной 135-летию со дня рождения И.И. Спрыгина «Биоразнообразие: проблемы и перспективы сохранения» (Пенза, 2008); V Международной конференции «Изучение грибов в биоценозах» (Пермь, 2009); I и II Междисциплинарных Микологических форумах (г. Москва, 2009, 2010); Всероссийской научно - практической конференции «Достижения и перспективы развития биотехнологии» (Пенза, 2010); XX Международном Салоне Инноваций и инвестиций (Москва, 2010); Областном форуме «Инновационные технологии в медицине и фармакологии» (Пенза, 2011); Второй международной выставке «Инновации и технологии», (Москва, 2011), IV Российском форуме «Российским инновациям -Российский капитал» (Оренбург, 2011).

Публикации. Автором опубликовано 95 работ, включая 13 статей в изданиях, входящих в "Перечень периодических научных изданий, рекомендуемых ВАК ...", 66 работ (статьи и тезисы) в сборниках научных трудов, 2 монографии, 9 учебно-методических изданий по экологической тематике, получены 5 патентов РФ и 2 положительных решения о выдаче.

Личный вклад соискателя. Автору принадлежит идея исследования, разработка путей экспериментального выполнения и теоретическое обоснование всех основополагающих задач, поставленных в диссертационной работе, ключевая роль на всех этапах исследования и интерпретации полученных результатов. В совместных публикациях доля автора составляла от 20 до 60%.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, 9 глав, заключения, выводов, списка использованных литературных источников и приложений. Работа изложена на 370 страницах машинописного текста, основная часть содержит 32 таблицы, 34 рисунка, 47 фотоиллюстраций. Список литературы включает 455 источников отечественных и зарубежных авторов.

Благодарности

Автор выражает глубочайшую признательность научному консультанту, профессору Лидии Васильевне Гарибовой. Слова искренней благодарности за важные советы и поддержку автор выражает заведующему кафедрой микологии и альгологии МГУ им. М.В. Ломоносова профессору Ю.Т. Дьякову, а также ведущему научному сотруднику А.Н. Лихачеву и всем сотрудникам кафедры. За понимание и всестороннее содействие, неоценимую помощь автор благодарит своего учителя -профессора А.И. Иванова, за помощь в реализации приборных измерений - своих коллег: Д.Ю. Ильина, A.A. Костычева, A.B. Скобанева и всех сотрудников РЦГЭКиМ по Пензенской области.

Глава 1. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ РОЛЬ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ЭКОСИСТЕМЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В БИОТЕХНОЛОГИИ (Обзор литературы)

В главе приводится информация относительно функциональной роли ксило-трофных базидиомицетов в экосистеме. Описаны особенности экологии представителей разных трофических и сукцессионных группировок ксилотрофных мак-ромицетов в контексте их взаимодействия в процессе разложения древесины (Дроздова, Белова, 1982; Денисова, 1991; Змитрофич и др., 2007; Арефьев, 2010; Hatakka et al, 1993; Evans, 1995; Shiryaev et al., 2010). Указана уникальная способность ксилотрофных грибов к трансформации органических соединений растительного происхождения, которая сохраняется и в условиях чистой культуры (Горленко,1967; Каламеес, 1975; Бурова, 1986; Решетникова, 1997; Becker, 1956). Проведен анализ концепций выделения узких трофических группировок среди ксилотрофных базидиомицетов, в частности по спектру субстратной специализации (Мурашкинский, 1939; Частухин, 1945; Мухин, 1993; Брындина, 2000; Сафонов, 2006; Vasiliauskas et. al., 2007). Уделено внимание ферментным системам грибов белой и бурой гнили, а также истории вопроса относительно механизмов деструкции древесного субстрата грибами (Schacht, 1863; Hartig, 1878; Kirk, 1971; Ander, Eriksson, 1978; Eriksson, Vallander, 1980; Kirk, 1983; Otien and Blanchette, 1984; Фенгел, 1988; Morgan, Lewis, Watkinson, 1990; Paszczynski, Crawford, 2008).

Подробно анализируется эволюция взглядов относительно статуса чистой культуры в эколого-микологических исследованиях (Высшие съедобные базидио-мицеты.,,1983; Бухало, 1988; Semerdgieva, 1965; Stalpers, 1978).

В главе указываются направления использования ксилотрофных базидиомицетов в сфере производства пищевого белка, в целях биодеструкции поллютан-тов различной природы, в качестве продуцентов БАВ (Горбатова и др., 2000; Бо-лобова и др., 2002; Костина, 2008; Паршин и др., 2008; Ying et al, 1987; Pointing, 2001; Bending, et al., 2002; Mori, Kondo, 2002; Smith et al, 2002; Mougin et al., 2002). Резюмируется, что разработка приемов регуляции ростовых и синтетических процессов у базидиомицетов в культуре с учетом их экологического статуса в природе является перспективным направлением исследований.

Глава 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Регион Правобережного Поволжья обладает рядом специфических природных особенностей, что отражается как на видовом составе растительных субстратов ксилотрофных базидиомицетов, так и на распространении и экологии последних. Оценка экологической структуры микобиоты исследуемого региона проводилась с использованием маршрутных полевых исследований в лесных экосистемах изученного региона. Определение грибов проводили с использованием определителей (Бондарцев, 1953; Бондарцева, Пармасто, 1986; Бондарцева, 1998; Jülich, 1984). Порядки и семейства в работе приводятся по системе, приведенной на сайте Index Fungorum (СABl Databases, 2010). В качестве основной системы для определения трофической специализации видов использована система В.Г. Стороженко (2002) с некоторыми модификациями, позволившими несколько конкретизировать понятия, применительно к региону исследований. Для лабораторных экспериментов отобраны 215 штаммов 44 видов ксилотрофных базидиомицетов, различающихся субстратной приуроченностью, степенью трофической валентности, типами вызываемых гнилей.

Выделение, оценка ростовых показателей и хранение чистых культур проводилось по общепринятым методикам (Бухало, 1988). Для оценки штаммового разнообразия разных видов в культуре использовали методику, основанную на принципе парных сравнений для построения аддитивных функций полезности (Елта-ренко, 1995).

Определение содержания метоксильных групп (-ОСН3) в субстратах и древесине разной степени разложения осуществлялось методом Цейзеля в модификации с применением газо-жидкостной хроматографии (Закис, 1987). В работе использован газовый хроматограф Varían CP 3800 с пламенно-ионизационным детектором, оснащённый капиллярной колонкой CP-Wax 52 СВ (полиэтиленгликоль). С целью получения модельного соединения методом сернокислотного гидролиза в модификации Комарова был выделен лигнин Классона (Фенгел, 1988; Оболенская, 1991; Боголицин, 1994), а с целью перевода его в водный раствор была осуществлена его перколяция (Грушников, 1973). Показатели оксидазной и пероксидазной активности мицелия определялись спектрофотометрически (Александрова, 1999; Барыкина, 2000; Стрельцов, 2009; Gramss, 1997). Оценка целлюлазной активности проводилась косвенно с использованием глюкозооксидазного метода (Синицын, 1995). Определение содержания эргостерина в мицелии грибов осуществлялось методом газо-жидкостной хроматографии (Гёрёг, 1985) на хроматографе «Кристалл-

2000 М» с пламенно-ионизационным детектором, оснащённым набивной колонкой с насадкой - 5% SE-30 на носителе «Инертон». Для построения градуировочных графиков использовались стандарты фирмы «Мегск». Оценка уровня окислительного стресса культур проводилась при помощи определения маркерного соединения - малонового диальдегида (МДА) по методу Michara et al. (1980). Активность фермента глутатионпероксидазы (ГПО) определяли в сопряженной системе с глу-татионредуктазой по методу Mills (1959). Определение содержания общего белка, альбумина, триглицеридов, фракций холестерина в сыворотке крови экспериментальных животных, получавших кормовые добавки на основе мицелия грибов, проводили по общепринятым методикам (Методы клинических исследований, 1987).

Статистическая обработка проводилась с помощью программы «Statistica 6.0», дисперсионного и корреляционного анализов полученных массивов (ANOVA). Для оценки значимости полученных корреляционных коэффициентов использовался t-критерий Стьюдента при уровне значимости 0,95 (Халафян, 2007).

Глава 3. ЗНАЧЕНИЕ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В ЛЕСНЫХ ЭКОСИСТЕМАХ ЛЕСОСТЕПИ ПРАВОБЕРЕЖНОГО ПОВОЛЖЬЯ

В районе исследований описано 249 видов ксилотрофных базидиомицетов, относящихся к 99 родам, 40 семействам, 10 порядкам и 3 классам: Agaricomycetes, Dacrymycetes, Tremellomycetes.* Распространение в лесных экотопах лесостепи Правобережного Поволжья получили представители следующих порядков: Hymenochaetales, Polyporales, Russulales, Thelephorales, Agaricales, Boletales, Corticiales, Dacrymycetales, Auriculariales, Tremellales. Ядро ксилотрофной микобиоты составляют представители первых двух порядков. Ведущими по количеству видов семействами являются Polypo-raceae, Strophariaceae, Pluteaceae, Mycenaceae, Inocybaceae, Hymenochaetaceae и Physalac-riaceae. На них приходится более 60% выявленных видов ксилотрофных базидиомицетов. Коэффициент родовой насыщенности семейств, в среднем, составляет 2,62. Наиболее крупными родами, насчитывающими свыше 5 видов, являются Phellinus, Polyporus, Mycena, Pleurotus, Pluteus и Pholiota (табл. 1). Определенную долю составляют роды, представленные одним видом (в составе семейств Bolbitiaceae, Coniophoraceae, Corti-ciaceae, Cyphellaceae, Entolomataceae, Gloeophyllaceae, Gomphidiaceae, Fistulinaceae, Hy-grophoropsidaceae, Meripilaceae, Schizophyllaceae, Sparassidaceae, Bondarzewiaceae, Stereaceae, Thelephoraceae, Tremellaceae)

*B настоящей работе использована система Index Fungorum (CABI Databases, 2010) www.indexfungorum.org/Names/Names.asp

Таблица 1

Структура биоты ксилотрофных базидиомицетов лесных экосистем лесостепи Правобережного Поволжья (семейства, представленные более чем одним видом)

Семейство Число родов/видов (доля в составе биоты, %) Семейство Число родов/видов (доля в составе биоты, %)

Polyporaceae 16/36 (14,5) Tricholomataceae 4/5 (2,0)

Strophariaceae 6/31 (12,4) Auriculariaceae 2/4 (1,6)

Pluteaceae 2/28(11,2) Schizoporaceae 2/4 (1,6)

Mycenaceae 7/24(10,0) Hericiaceae 2/3 (1,2)

Hymenochaetaceae 3/14 (5,6) Marasmiaceae 2/3 (1,2)

Inocybaceae 5/14 (5,6) Peniophoraceae 1/3 (1,2)

Physalacriaceae 5/11(4,4) Phanerochaetaceae 3/3 (1,2)

Psathyrellaceae 1/11(4,4) Lyophyllaceae 2/2 (0,8)

Agaricaceae 4/10 (4,0) Dacrymycetaceae 1/2 (0,8)

Fomitopsidaceae 6/7 (2,8) Ganodermataceae 1/2 (0,8)

Pleurotaceae 2/7 (2,8) Paxillaceae 1/2 (0,8)

Meruliaceae 4/5 (2,0) Tapinaceae 1/2 (0,8)

Биологическое разложение древесины сопровождается сменой видового состава грибов. В зависимости от положения в сукцессионном ряду разложения древесины и в контексте трофической специализации видов в данной работе будут использованы определения «облигатный паразит», «факультативный паразит», «факультативный сапротроф», «сапротроф». Преобладающей в районе исследований является группировка факультативных паразитов (рис. 1). Она складывается, в основном, представителями семейств Hymenochaetaceae, Polyporaceae, Fomitop-sidaceae. Долю облигатных паразитов формируют отдельные агрессивные виды, такие как Heterobasidion annosum, Phellinus trémula, которые осуществляют заражение живых деревьев, разложение их древесины, тем самым, разрушая древостой. На уровне лесного сообщества указанные группы видов осуществляют стратегическую задачу создания другого, более устойчивого и соответствующего эко-топу по породным и структурным характеристикам фитоценоза.

Факультативная составляющая сапротрофного комплекса представлена видами, изредка заселяющими ослабленные деревья, однако чаще встречающимися на валеже и субстратах, подвергшихся частичному разложению. Эта группировка обеспечивает разрушение отмерших древесных растений, пней и сухостоя и фор-

мируется представителями семейств Meruliaceae, Stereaceae, отдельными представителями Polyporaceae (в частности, родов Trametes, Pycnoporus, осуществляющи-

□ Облигатные паразиты

□ Факультативные паразиты

□ Факультативные сапротрофы

■ Сапротрофы

Рис. 1. Доли группировок с различными трофическими стратегиями в составе биоты ксилотрофных базидиомицетов в районе исследований

Группировка сапротрофов представлена видами, завершающими процесс деструкции древесных остатков и развивающимися на погруженном в почву, практически разложившемся отпаде или остатках пней, реже в гниющих дуплах деревьев, таким образом, не оказывающими существенного влияния на структуру древостоя. К этой группировке в районе исследований следует отнести представителей родов Coprinus, Tubaria, Mycena, Pluteus, Volvariella, Hypholoma, Stropharia.

Биодеструкция клетчатки и лигнина древесины осуществляется базидиальны-ми грибами, соответственно определяющими развитие бурой или белой гнили древесины. Основную долю (73%) в составе ксилотрофной микобиоты района исследований составляют грибы белой гнили, грибы бурой гнили - порядка 18%, остальное (9%) - грибы смешанной гнили (рис. 2). Блок грибов белой гнили связан с консорциями основных лесообразующих (дуб, сосна) и мелколиственных, формирующих вторичные леса (береза, осина) пород. Это широко распространенные представители родов Trametes, Inonotus, Phellinus, Ganoderma. Меньший по объему блок грибов бурой гнили, связан, в основном, с лесообразующими породами: дубом (Laetiporus sulphureus, Daedalea quercina, Fistulina hepático) и сосной (Fomitopsis pinícola, Sparassis crispa). Грибы смешанной гнили также связаны с указанными породами и представлены, в частности, видами: Inonotus dryadeus, Phellinus pini, Heterobasidion annosum.

О 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Доля, % от общего числа

□ Грибы белой гнили ¡3 Грибы смешанной гнили ■ Грибы бурой гнили

Рис. 2. Доли ксилотрофных базидиомицетов, вызывающих разные типы гнилей древесины в лесных сообществах района исследований

Специфику видового состава Приволжской лесостепи, по сравнению с западносибирской, создает присутствие видов, узкоспециализированных по отношению к древесине дуба. Они составляют 12% от видового состава изученной микобиоты, и, в основном создают ее неморальный элемент (Скобанев, 2010). По широте субстратной специфичности среди ксилотрофных базидиомицетов выделяют: эв-ритрофы первого порядка, развивающиеся на древесине всех основных лесообра-зующих пород; эвритрофы второго порядка, развивающиеся на древесине лиственных или хвойных пород; стенотрофы, развивающиеся на древесине какой-либо одной породы (Брындина, 2000). Однако существуют виды, развивающиеся на близких видах древесных растений, или на очень небольшом количестве субстратов. При этом их нельзя отнести к эвритрофам второго порядка, поскольку это понятие охватывает только такую характеристику субстрата, как принадлежность к лиственным или хвойным породам. В связи с этим, представляется целесообразным подразделение группы стенотрофных видов на подгруппы: поливалентные (осваивающие набор близких субстратов) и моновалентные (встречающиеся лишь на одном характерном субстрате) стенотрофы. Таким образом, выделяется четыре группы. Такой классификации мы придерживаемся в настоящей работе.

Анализ трофических особенностей ксилотрофной микобиоты района исследований позволил выявить преобладание доли поливалентных стенотрофных видов (35,8%). Затем следуют моновалентные стенотрофы - 30,9%, эвритрофы вто-

poro порядка - 26,1% и, наконец, наименьшую долю составляют эвритрофы первого порядка - 7,2% (рис. 3).

7,2

И Эвритрофы I порядка

30,°

26,1

□ Эвритрофы II порядка

35,8

ЕЗ Поливалентные

стенотрофы Ü Моновалентные стенотрофы

Рис. 3. Соотношение долей группировок ксилотрофных базидиомицетов с различными особенностями трофической специализации в лесных экосистемах Правобережного Поволжья, %

Стенотрофный блок в основном представлен видами, связанными с древесиной дуба и сосны, причем названные субстраты зачастую характеризуются ярко выраженной спецификой видового состава колонизирующих их ксилотрофов. Большинство прочих (лиственных) пород характеризуются довольно сходными микокомплексами.

В созданной нами коллекции мицелиальных культур поддерживаются 215 штаммов 44 видов ксилотрофных базидиомицетов. Среди них представлены виды, относящиеся к разным семействам порядков: Hymenochaetales: Coltricia per-ennis (L.) Murrill, J. Mycol., Inonotus dryadeus (Pers.) Murrill, Inonotus obliquus (Pers.: Fr.) Pilät, Phellinus igniarius (L.) Quel., Ph. pini (Brot.) Bondartsev & Singer, Ph. robustus (P. Karst.) Bourdot & Galzin, Ph. tremulae (Bondartsev) Bondartsev & P.N. Borisov; Polyporales: Sparassis crispa (Wulfen) Fr., Daedalea quercina (L.) Pers., Fomitopsis pinicola (Sw.) P. Karst., Laetiporus sulphureus (Bull.) Murrill, Piptoporus betulinus (Bull.) P. Karst., Ganoderma applanatum (Pers.) Pat., Ganoderma lucidum (Curtis) P. Karst., Bjerkandera adusta (Willd.) P. Karst., B.fumosa (Pers.) P. Karst., Daedaleopsis confragosa (Bolton) J. Schrot., Fomes fomentarius (L.) J.J. Kickx, Lenzites betulina (L.) Fr., L. warnieri Durieu & Mont., Polyporus squamosus (Huds.) Fr., P. varius (Pers.) Fr., Pycnoporus cinnabarinus (Jacq.) P. Karst., Trametes gibbosa (Pers.) Fr., T. hirsuta (Wulfen) Pilät, T. pubescens (Schum.: Fr.) Pilat, T. suaveolens (Fr.)Fr., T. versicolor (L.) Lloyd; Russulales: Heterobasidion annosum (Fr.) Bref., Stereum hirsutum (Willd.) Pers.; Agaricales: Chondrostereum purpureum (Pers.) Pouzar,

Fistulina hepatica (Schaeff.) Sibth, Armillaria mellea (Vahl) P. Kumm., Flammulina ve-lutipes (Curtis) Singer, Pleurotus cornucopiae (Paulent) Rolland, P. dryinus (Pers.) P. Kumm., P. ostreatus (Jacq.) P. Kumm., P. pulmonarius (Fr.) Quél., Schizophyllum commune Fr., Pholiota aurivella (Batsch) P. Kumm., P. decussata (Fr.) M.M. Moser, Phyllotopsis nidulans (Pers.) Singer; Thelephorales: Thelephora terrestris Ehrh., Auricu-lariales: Auricularia mesenterica (Dicks.) Pers.

Среди изученных видов представлены эвритрофы первого и второго порядков, поли- и моновалентные стенотрофы в отношении древесных субстратов, виды, осуществляющие различные стадии разложения древесины в природе: обли-гатные и факультативные паразиты, факультативные сапротрофы.

Обнаружено высокое разнообразие культурально-морфологических характеристик у штаммов изученных видов. Отмечаются существенные различия в скоростях роста, микро- и макроморфологии мицелия, формировании анаморф (бласто-конидий, артроконидий, хламидоспор) в культуре, значениях ростовых коэффициентов. Для оценки штаммового разнообразия разных видов в культуре нами предложено использовать методику расчета коэффициента вариабельности (QW) в пределах вида, основанную на принципе парных сравнений, используемом для построения аддитивных функций полезности (Елтаренко, 1995). Данная методика позволяет учесть значение не только наличия или отсутствия тех или иных признаков, но и возможные варианты их проявления, а также разные степени значимости и объективности. Сравниваемые признаки представляли собой пять основных параметров, лежащих в основе культурально-морфологической характеристики штаммов (средняя скорость роста, тип колонии, характер анаморфы, наличие телеоморфы на стерильных средах и ростовой коэффициент). Были проведены расчеты QW для всех изученных видов, однако приводятся только для тех из них, представительство которых в коллекции превышало пять штаммов (рис. 4). При сопоставлении полученных результатов с эколого-трофическими характеристиками видов в природе, обнаружена связь штаммового разнообразия в культуре с широтой трофического диапазона вида в природе, что подтверждает наши предположения. Максимальной вариабельностью (QW>0,40) обладают виды, относящиеся к эвритрофам первого и второго порядков с позиций разнообразия древесных субстратов произрастания и их степени разложения. Виды, характеризующиеся выраженной спецификой местообитания и трофической специализации, не проявляют в культуре значительной вариабельности в характеристиках штаммов (QW<0,30).

A. mesentterica Ph. aurivella Sh. commone P. pulmonarius P. ostreatus F. velutipes

F. hepático Th. terrestris

S. hirsutum H. annosum T. versicolor T. hirsuta T. gibbosa P. cinnabarinus L. warnieri L. betulina

F. fomentarius

B. adusta

G. lucidum

G. applanatum P. betulinus

L. sulphureus F. pinícola Ph. tremulae Ph. robustus Ph. pini I. obliqus C. perennis

0,00 0,10 0,20 0,30 0,40 0,50 0,60 0,70 0,80 QW

Рис. 4. Различные степени штаммовой вариабельности видов ксилотрофных ба-зидиомицетов в условиях чистой культуры

Определенную долю составляет группа видов, для которых характерна средняя степень вариабельности культуральных признаков, незначительная разница в скоростях роста, слабо выраженные отличия в макро- и микроморфологии (0,30<QW<0,40). Их субстраты представлены небольшим набором видов, но отмечается варьирование положения в сукцессионных рядах разложения древесины.

■■MJmmJ

=Я

Полученные данные свидетельствуют о существовании связи между широтой субстратной специализации вида в отношении природного древесного субстрата и степенью его внутривидового полиморфизма в культуре.

Глава 4. ОСОБЕННОСТИ РАЗВИТИЯ ШТАММОВ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ В УСЛОВИЯХ ГЛУБИННОЙ КУЛЬТУРЫ

При погруженном культивировании выявлены несколько морфотипов глубинного мицелия: мицелиальные филаменты - роды Bjerkandera, виды С. perennis, I. dryadeus, I. obliquus, S. hirsutum, F. hepatica, S. commune; рыхлые, опушенные пеллеты - роды Phellinus, Polyporus, а также виды Р. betulinus, L. sulphureus, Н. annosum, F. pinícola; плотные пеллеты с гладкой поверхностью - представители рода Ganoderma, а также видов F.fomentarius, Р. cinnabarius. Причем среди пеллет последнего типа обнаруживаются гигантские, с тенденцией к дифференцировке мицелия внутри такой структуры, что отмечено для культур видов - представителей родов Trametes, Lenzites. Размеры структур варьировали в довольно широких пределах (от 10,0 мкм до 12,5 мм). Образование плотных пеллет у афиллофороид-ных грибов характерно для видов с димитической и тримитической гифальными системами, тогда как преимущественно филаментный рост - для видов с мономи-тической. Наблюдается своеобразная параллель: моно— ди— тримитическая гифальная система и филаменты - рыхлые пеллеты - плотные пеллеты с внутренней дифференциацией (рис. 5). Проведенный анализ соответствий на основе выборки, составленной представителями афиллофороидных грибов, позволил установить наличие трех групп, различающихся по типу морфологических структур при глубинном развитии. Обособленность существующих группировок отмечается с большим значением инерции (1=99,27%), что свидетельствует в пользу предполагаемой закономерности.

У различных видов и штаммов обнаружена разная способность к накоплению биомассы, а также установлено, что эти параметры определенным образом (г=0,45) коррелируют со скоростями роста мицелия в поверхностной культуре (рис. 6).

а) б) в)

Рис. 5. Основные морфотипы глубинного мицелия штаммов различных видов: а) филаменты С. perennis (штамм СРе-3) (х 200);б) рыхлые опушенные пеллеты F. pinícola (штамм Fpi-2) (х 200); в) плотная гигантская пеллета Т. versicolor (штамм Trw-2) (в натуральную величину), на поперечном срезе заметна тенденция к дифференциации мицелия (показана стрелкой)

Scatterplot: Vari vs. Var2 (Casewise MD deletion) Var2 = 1,8650 + ,30594 * Vari Correlation: r= ,44965

Varl I ""<495% confidence

Рис. 6. Корреляционная зависимость и уравнение регрессии между показателями скоростей роста и накопления биомассы глубинного мицелия у штаммов различных видов ксилотрофных базидиомицетов (вариант 1 - средняя скорость роста, мм/сут; вариант 2 - биомасса, г/л)

Таким образом, исходя из известных показателей скорости роста мицелия штамма на агаризованных средах, с высокой вероятностью можно предполагать продуктивные свойства культуры, что упрощает процесс скрининга штаммов, перспективных в биотехнологии.

У штаммов изученных видов ксилотрофных базидиомицетов выявлены существенные различия в отношении к содержанию кислорода в культуральной жидкости. Кластерный анализ на основе метода «ближайшего соседа» позволил обнаружить, что установленные отличия прослеживаются у культур на видовом уровне. Сравнительно большая потребность в кислороде объединяет культуры видов, образующих in situ однолетние плодовые тела: С. perennis, I. obliquus, L. sulphureus, P. betulinus, B. adusta, P. cinnabarinus, F. hepatica, S. commune.

Обнаружена тенденция связи между потребностью в кислороде и характером гнили древесины, отмечаемым для того или иного вида в природе. Повышенные концентрации предпочитают виды, для которых показана заболонная гниль, а низкое содержание растворенного кислорода удовлетворяет виды, вызывающие сердцевинную гниль. Однако для более четких выводов в данном контексте выборка недостаточна, поэтому следует говорить лишь о тенденциях такой связи.

Глава 5. ОСОБЕННОСТИ РАЗВИТИЯ ВИДОВ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ С РАЗЛИЧНЫМИ ТРОФИЧЕСКИМИ СТРАТЕГИЯМИ В УСЛОВИЯХ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ

Для исследований были отобраны представители облигатных паразитов: Ph. tremulae, S. crispa, H. annosum; факультативных паразитов: I. obliquus, L sulphureus, F.fomentarius, F. hepatica и факультативных сапротрофов: F. pinícola, G. applanatum, G. lucidum и P. cinnabarinus.

Выявлены отличия в предпочтении разных питательных сред представителями различных трофических группировок (использован непараметрический тест Дункана). Для группировки облигатных паразитов на всех изученных средах установлены минимальные скорости роста. У факультативных паразитов и факультативных сапротрофов на всех изученных средах отмечены относительно высокие средние скорости роста, причем последние наилучшим образом развивались на крахмалистых средах. Более полной реализации физиологического потенциала облигатных и факультативных паразитов, прежде всего редких и ценных в биотехнологии видов, можно достичь использованием некоторых ростовых факторов, а также адаптогенов различной природы.

Изучено воздействие парааминобензойной кислоты (ПАБК) на рост и развитие культур. Установлено, что ПАБК в концентрации 0,005 г/л оказывает позитивное влияние на развития мицелия большинства штаммов изученных видов, различающихся трофическими стратегиями и представляющих интерес с позиций практической экологии и биотехнологии (рис. 7).

н о

S 12

о р.

о о. о к

о «

g р.

2 -■

lull

Ii/

УК

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31

Штаммы □ Ряд1 ■ Ряд2

Рис. 7. Влияние ПАБК на скорость роста штаммов ксилотрофных базидио-мицетов: ряд 1 - контроль (КГА); ряд 2 - опыт (КГА+ПАБК). Штаммы: I. obliquus l-IO-l, 2-10-2, 3-10-3; Ph. tremulae: 4-Pht-l, 5-Pht-2; 6-Pht-3; 5. crispa: 7-AI-10

F. pinicola: 8-Fpi-l, 9-Fpi-2, 10-Fpi-3; L. sulphureus: ll-PD-99, 12-PD-01, 13-Ah-02

G. applanation: 14-G-l, 15-G-2, 16-G-3; G. lucidum: 17-G1-1, 18-G1-3, 19-G1-6 F.fomentarius: 20-AH-96, 21-Nic-02, 22-Lp-05; P. cinnabarinus: 23-PyC-l, 24-PyC-2: 25-PyC-4; H. annosum: 26-Han-l, 27-Han-2, 28-Han-3; F. hepatica: 29-Fh-l, 30-Fh-la, 31-Fh-5 (планки погрешностей - ошибка средней, р<0,05)

Не изменяя существенно темпов развития в целом, ПАБК сокращает продолжительность фазы адаптации культур видов, обладающих паразитной трофикой (Ph. tremulae, S. crispa, H. annosum) к субстрату. Характерной чертой влияния ПАБК на штаммы факультативных паразитов и факультативных сапротрофов оказалось позитивное воздействие на стадиях логарифмического и стационарного роста, когда доступные ресурсы субстрата в большей степени исчерпаны.

Полученные результаты косвенно свидетельствуют о стимуляции обменных процессов у факультативных сапротрофов, связанных с вовлечением в метаболизм труднодоступных источников углерода.

В качестве адаптогенных добавок также испытаны селенат натрия (NajSeCU) и 9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен (селенопиран, СП-1). Соединения вносили в среду в концентрациях 10"6 г/л в пересчете на селен. Оценка результатов с использованием теста Дункана показала, что виды, склонные к паразитной трофике в природных условиях, обнаруживают факты стимуляции органической формой селена, а обладающие сапротрофной трофикой - неорганической. Общей тенденцией является более ранний переход к фазе стационарного роста, при этом отмечается существенное сокращение фазы адаптации, и незначительное сокращение фазы логарифмического роста. Эффект синхронизации развития культуры отмечался нами ранее на примере микромицетов - продуцентов антибиотиков (Ильина и др., 2000). Позитивное воздействие селенопирана на развитие штаммов облигатных паразитов, вероятно, определяется частичным снятием окислительного стресса, неминуемо развивающихся у паразитов ex situ.

Обнаруженные факты позволяют рекомендовать ряд соединений (парааминобензойная кислота, селенат натрия, 9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен) в качестве компонентов питательных сред для культивирования изолятов ксилотрофных базидиомицетов.

Глава 6. ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СОЕДИНЕНИЙ СЕЛЕНА ПРИ ХРАНЕНИИ КОЛЛЕКЦИОННЫХ КУЛЬТУР КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ

При длительном хранении и частых пересевах культуры нередко изменяют физиологические и продуктивные параметры. Отчасти это обусловлено спонтанной диссоциацией штаммов, инициируемой окислительными стрессами.

Изучены возможности использования соединений селена (селенат натрия, 9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен) при хранении культур S. crispa и G. lucidum. Состояние культур оценивалось по маркерным показателям: скорости роста, степени базофилии протоплазмы, оксидазной активность культуры. Установлено, что указанные соединения способствуют сохранению физиологических параметров хранящихся культур в течение 18-24 месяцев.

Предположение о том, что соединения селена нивелируют негативное влияние свободных радикалов, нашло подтверждение при определении содержания

в мицелии хранящихся культур биохимического маркера окислительного стресса - малонового диальдегида (МДА). Предварительно проведенный анализ жирнокислотного состава мицелия выявил преобладание ненасыщенных жирных кислот (моноеновых, диеновых), что свидетельствует о существовании ресурса для образования МДА при активизации окислительных процессов.

Уровень МДА в мицелии определяли на этапе адаптации к субстрату, в периоды логарифмического и стационарного роста, на разных сроках хранения. В фазу адаптации уровень МДА находится на довольно высоком уровне, что свидетельствует о наличии окислительного стресса (табл. 2). С переходом культур к логарифмическому и стационарному росту содержание МДА в мицелии несколько снижается и стабилизируется.

Таблица 2

Содержание малонового диальдегида в мицелии штаммов G. lucidum и S. crispa на стадии активного роста и после продолжительного хранения при температуре 4°С (нмоль/г)

Время развития мицелия с момента инокуляции Виды, штаммы

G. lucidum S. crispa

G1-1 G1-3 G1-6 AI-10

трое суток (фаза адаптации) 88,6±2,14 102,1±1,22 94,5±2,05 123,4±3,24

пять суток (фаза логарифмического роста) 64,6±1,96 80,5±2,04 85,1±4,43 112,7±5,96

семь суток (фаза стационарного роста) 59,9±2,55 75,9±4,37 82,1±3,29 88,4±1,90

девять суток (фаза стационарного роста) 60,1±2,81 87,8±3,47 90,2±4,75 84,2±3,77

После хранения в течение:

3 месяцев 40,8±1,80 51,2±6,38 141,9±4,75 77,8±6,12

6 месяцев 93,8±7,24 84,9±8,23 210, 5±5,79 126,9±4,38

9 месяцев 115,9±3,53 171,5±4,59 262,3±1,75 162,5±5,30

12 месяцев 148,1±4,57 214,0±6,57 105,2±2,72 147,9±5,84

18 месяцев 107,8±4,08 177,6±5,47 104,2±1,78 -

24 месяцев 91,2±2,54 168,1±3,21 100,6±3,33 -

Содержание МДА в образцах мицелия, хранящегося на средах с добавлением соединений селена, сравнивали с показателями, отмеченными в контроле на стадии логарифмического роста (рис. 8).

оо

□ Исходное содержание в контрольном образце, принятое за 100%

□ Опыт 1

■ Опыт 2

□ Контроль

ГГ

<ч

Рис. 8. Динамика содержания малонового диальдегида (МДА) в образцах мицелия G. lucidum (на примере штамма Gl-З) при продолжительном хранении на различных средах: контроль - КГА; опыт 1 - КГ А, обогащенный Na2Se04; опыт 2 - КГА, обогащенный 9-фенил-симметричным-октагидроселеноксантеном (вещества добавлены в концентрации 10"4 г/л среды в пересчете на селен)

Полученные результаты свидетельствуют о значительном нивелировании для мицелия фактора окислительного стресса и целесообразности использования соединений селена в практике хранения культур ксилотрофных базидиомицетов.

Эргостерин, входящий в состав мембран грибов, является своеобразной биохимической мишенью для повреждающего действия полиеновых макролидов, в том числе нистатина. В литературе сообщается о различных механизмах, обеспечивающих устойчивость к нистатину у дрожжей и мицелиальных грибов, которые в той или иной степени связаны с изменением синтеза эргостерина, однако, по

Глава 7. АДАПТАЦИИ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ К ВОЗДЕЙСТВИЮ ПОЛИЕНОВОГО МАКРОЛИДА НИСТАТИНА

данному вопросу нет единого мнения. Вероятно одновременное существование различных систем адаптации.

В качестве объектов исследования изучены тканевые (Gl-1, Gl-3, G1-6) и споровые (GD-I-1, GD-I-2, GD-I-4) изоляты G. lucidum. Определена концентрация нистатина, лимитирующая развитие изученных штаммов (120 ЕД/мл), условно эти штаммы названы полиенчувствительными. Путем высева базидиоспор на питательные среды, содержащие нистатин в указанной концентрации, получены пять полиентолерантных дикариотических штаммов G. lucidum: GD-II—ун1, GD-II-yH2, GD-II-унЗ, GD-II-yH4, GD-II-yH5.

Обнаружены различия в содержании эргостерина даже между обычными (полиенчувствительными) штаммами G. lucidum в 1,3-2,1 раза. Значительное его содержание обнаружено в мицелии штамма G1-1, характеризующегося повышенной склонностью к образованию базидиом в чистой культуре. Показатели содержания эргостерина в мицелии изученных полиентолерантных штаммов превышают среднее значение, установленное для полиенчувствительных в 2,0-2,4 раза (рис. 9).

\ 0,25 у---

f 0,2 ---гЬ-

5 Ш- Г+1

6 Fl m

a o,i5 — —■ —,-ь— ,—■-

о ri-,

£ 0,1— III—Щ—\П-^

я ------------__

g 0,05 — — — — — — —m-Л— —И— -

* 0 I Т 1 I ■■' Т I I . I I I

g GDII GDII GD II GDII GD II Gl-1 Gl-3 Gl-6 GD-I- GD-I- GD-I-

-ун1 -ун2 -унЗ -ун4 -ун5 1 2 4

I I Содержание эргостерина в разных штаммах -Среднее для полиенчувствительных штаммов

Рис. 9. Содержание эргостерина в образцах мицелия разных штаммов G. lucidum (р<0,05, планки погрешностей - ошибка средней)

Полиентолерантные штаммы быстро формируют примордии. Дифференцированные зачатки плодовых тел, имеющие типичную для вида структуру, образуются в короткие сроки (9-12 суток от момента посева). Отмечена своеобразная цепь событий: после освоения вегетативным «первичным» мицелием площади питательной среды, поверх образуется бархатистая корочка, богатая артроспорами. Из

■h

in [Ь ph

Г1!

Г1 Г"1

1— —г

артроспор прорастает «вторичный» мицелий, образующий плотные островки, на которых формируются зачатки плодовых тел (рис. 10).

Рис. 10. Формирование примордиев G. lucidum: слева штамм GD П-ун1, справа штамм GD Н-ун2

Результаты определения содержания эргостерина в частях мицелия и базиди-омах свидетельствуют о сопряженности морфогенетических процессов и интенсивности биосинтеза эргостерина у изученного вида (рис. 11).

GDII -ун 1 GDII -ун2

Штаммы

□ Вегетативный мицелий В Коричневая корочка ¡3 Примордии ES Базидиомы

Рис. 11. Содержание эргостерина в разных частях мицелия колоний G. lucidum (р<0,05, планки погрешностей - ошибка средней)

Изучены также полиенчувствительные штаммы Р. ostreatus: ПН-10, РЮ(К)-05 (тканевые изоляты); РЮ-1-09 РЮ-1-10 (споровые изоляты), а также полиентоле-рантные споровые изоляты (Р1-ун1, PI- ун2, Pl-унЗ, Р1-ун4, Р1-ун5). Некоторые из полиентолерантных штаммов характеризовались исключительно медленным ро-

стом, а другие, напротив, интенсивным. Среди таких штаммов обнаружены как характеризующиеся относительно высокими, так и пониженными, по сравнению с контрольными штаммами, показателями содержания эргостерина (рис. 12).

о s

® а

о» 5Г

t=c

0,8 0,6 0,4 0,2

Р1-ун1 Р1-ун2 Р1-унЗ Р1-ун4 Р1-ун5 ПН-10 PIO PIO-I- PIO-I-

(К)-05 09 10

IZJ Содержание эргостерина в разных штаммах — Среднее для полиенчувствительных штаммов

Рис. 12. Содержание эргостерина в образцах мицелия разных штаммов Р. ostreatus

Штаммы с повышенным содержанием эргостерина обладали более выраженной склонностью к образованию примордиев, а у штаммов с пониженным его содержанием их образование происходило менее интенсивно (рис. 13).

а)

в)

Рис. 13. Примордии на мицелии штаммов Р. оя^еаШ: а) полиенчувстви-тельный штамм ПН-10 (тканевый изолят); б) полиентолерантный штамм Р1-ун1; в) полиентолерантный штамм Р1-ун2

Таким образом, изученные виды ксилотрофных базидиомицетов, являющиеся в свою очередь исключительно важными объектами биотехнологии, характеризуются разными стратегиями формирования устойчивости к экзогенному воздействию полиенов. Установленные закономерности могут быть использованы при

скрининге штаммов - перспективных продуцентов эргостерина, а также склонных к плодоношению в условиях культуры.

Глава 8 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИСТОЧНИКОВ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ И ЛИГНИНА ПРИ КУЛЬТИВИРОВАНИИ КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ

Лигнин, как компонент природного субстрата ксилотрофов, влияет на морфогенез гриба в естественных условиях (Фенгел, 1988). В качестве трофических факторов изучены формы лигнина с разной степенью конденсации молекулы -экстрагированные системой полярных и неполярных растворителей нативные и метанолизные опилки древесины дуба. Экстрагирование материала обеспечивает возможность развития на нем видов, которые не встречаются в природе на древесине дуба и прочих лиственных пород. Метанолиз - модификация лигнинсодер-жащего материала, позволяющая существенно увеличить в нем число доступных метоксильных групп и олигомерных фрагментов лигнина (Закис, 1987). Содержание метоксильных групп в нативных опилках составляло 18,9 мг/г материала или 0,61 мМ/г; а в опилках, подвергшихся метанолизу - 41,6 мг/г (1,32 мМ/г), что в целом соответствует определенным нами показателям соответственно, в здоровой и фаутной древесине дуба (Ильина и др., 2006). Содержание холоцеллюлозы в образцах опилок отличалось недостоверно и составляло от 78,7 до 81,6%.

Установлено, что факультативные сапротрофы активнее осваивают метано-лизный субстрат. Альтернативные группировки, напротив, лучше развиваются на нативных опилках. Сапротрофные виды эволюционно адаптированы к эффективному использованию обилия метоксильных групп в значительной степени разрушенной древесины, что следует учитывать при работе с их культурами.

Изучение активности ферментов ксилотрофных базидиомицетов проводилось при твердофазном культивировании на экстрагированных нативных и метанолиз-ных дубовых опилках, пропитанных солевым раствором Чапека. Полученные данные представлены на примерах штаммов, для которых отмечены максимальные показатели, однако выявленные и описываемые ниже закономерности прослеживаются на видовом уровне (табл. 3).

На метанолизных опилках, по сравнению с нативными, достоверно снижается общая оксидазная активность у паразитных видов, что, вероятно, определяется воздействием фенольных компонентов субстрата. Это, возможно, и является одной из причин приуроченности этой группы грибов к живым деревьям, древесина

которых на начальных этапах колонизации имеет небольшое, по сравнению с фаутной, содержание мономерных и олигомерных фенолъных структур (Фенгел, 1978).

Таблица 3

Общая оксидазная, пероксидазная и целлюлазная активность мицелия штаммов

изученных видов на нативных (Н) и метанолизных (М) опилках

Штамм Фе эментативная активность

общая оксидазная, ед.оп.пл.хЮО/гхсек общая пероксидазная, ед.оп.пл. х 100/гхсек общая целлюлазная (по убыли холоцеллюлозы), %

Н М Н М Н М

I. оЬПдиия, 10-3 0,65±0,13 0,61±0,12 0,53±0,11 5,80±1,16 8,30±1,66 18,30±3,66

РИ. 1гети1ае, РЫ-З 0,24±0,05 0,11±0,02 2,64±0,53 1,12±0,22 1,70±0,34 3,60±0,72

Г. ртсо1а, ¥р[-3 0,09±0,02 0,33±0,07 0,26±0,05 0,11±0,01 14,10±2,82 20,32±4,06

Ь. $и1рЫгет, АЬ-02 0,11±0,02 - 0,13±0,03 - 13,73±2,74 17,67±3,52

б. арр!апаШт, в-3 0,09±0,02 0,19±0,04 1,75±0,35 4,00±0,80 7,80±1,56 18,22±3,64

& 1иас1ит, 01-3 0,38±0,08 0,58±0,12 2,06±0,41 5,90±1,18 8,12±1,62 19,68±3,92

Е. /отеШапия, Ьр-05 0,15±0,03 0,27±0,05 1,83±0,36 2,90±0,58 5,97±1,18 9,62±1,92

Р. стпаЬагтш, РуС-4 0,62±0,12 0,51±0,10 0,53±0,11 - 6,91±1,38 14,62±2,92

Н. аппо.чит, Нап-3 0,31±0,06 0,13±0,03 0,45±0,09 - 10,30±2,06 17,56±3,5

И. ИераНса, РЬ-5 0,32±0,06 0,19±0,04 0,47±0,09 - 15,90±3,18 16,55±3,3

Установленное увеличение оксидазной активности на субстрате с доступными фенольными компонентами лигнина у сапротрофных видов, может свидетельствовать о наличии у них индуцибельных форм оксидазных ферментов. Метано-лизный субстрат может содержать разнообразные фенольные компоненты, такие

как сирингалдазин, гваякол, пирокатехин и другие, являющиеся индукторами биосинтеза ферментов, в частности лакказ (Горбатова, 2007).

При развитии на нативном субстрате все виды грибов обладают в разной степени выраженной пероксидазной активностью, а выявленные отличия в основном связаны не с широтой трофической специализации, а с типом вызываемой гнили. Высокая активность характерна, за редким исключением, для возбудителей белой (Ph. tremulae, G. applanation) и смешанной гнили {F. fomentarius). Возбудители бурой гнили при культивировании на метанолизных опилках показали снижение активности пероксидаз.

При развитии на нативных опилках представители бурой гнили активнее, чем представители белой, разрушали целлюлозу, при этом достоверных отличий в утилизации целлюлозы на разных субстратах у грибов бурой гнили не обнаружено. Рост на метанолизном субстрате сопровождался более интенсивным потреблением целлюлозы у представителей белой гнили. Фенольные компоненты лигнина, и, в частности, содержащие метоксильные группы, индуцируют выработку целлюлазных ферментов у грибов этой группы (Muller, 1988). Это подтверждается полученными результатами и свидетельствует о целесообразности дериватизации лигноцеллюлозных субстратов для биоконверсии.

В ходе исследований общей оксидазной и общей пероксидазной активностей обнаружены достоверные различия показателей у штаммов грибов белой гнили, чего не отмечено для представителей бурой. Для выяснения возможных зависимостей в эксперимент были включены 15 видов грибов (по пять штаммов каждого, итого 75 штаммов), вызывающих белую коррозионную гниль древесины: С. perennis, I. obliquus, Ph. tremulae, G. applanatum, G. lucidum, В. adusta, F. fomentarius, L. betulina, L. warnieri, P. cinnabarinus, T. gibbosa, T. hirsuta, T. versicolor, H. annosum, T. terrestris. Данные, полученные при исследовании скоростей роста на лигноцеллюлозном субстрате, результаты определения общей оксидазной и общей пероксидазной активностей штаммов были сопоставлены с их «исходными» ростовыми характеристиками, зафиксированными на сусло-агаре. Обнаружена корреляция ростовых показателей на агаризованных и твердофазных субстратах (г = 0,76, р<0,05). Это позволяет оперировать терминами «относительно быстрорастущие» и «относительно медленнорастущие» без дополнительных уточнений, не принимая во внимание характер субстрата. Установлено существование зависимостей между скоростью роста мицелия и сторонами ферментативной активности у культур изученных видов (рис. 14).

Рис. 14. Трехмерная проекция зависимости уровней общей оксидазной (ООА) и общей пероксидазной (ОПА) активностей штаммов от средних скоростей роста мицелия

Таким образом, быстрорастущие штаммы грибов белой гнили, в среднем характеризуются более высокой общей пероксидазной, а медленнорастущие - общей оксидазной активностью. Данную закономерность, с определенной долей вероятности (г=0,86 по оксидазной активности и г=0,30 - по пероксидазной), можно использовать в ходе скрининга перспективных штаммов.

Изучено влияние лигноцеллюлозных компонентов на процесс накопления биомассы и синтез эргостерина культурами в глубинных условиях. Экспериментальные среды были приготовлены на основе экстрактов - перколятов лигнинов Классона (Оболенская, 1991), в которые было добавлено 30,0 г/л глюкозы и 3,0 г/л целлобиозы. При анализе сухого вещества перколятов нативного и метанолизного лигнинов была установлена существенная разница в содержании метоксильных групп - показатели составили 2,50±0,06 мМ/г и 7,45±0,03 мМ/г соответственно.

Контрольной служила среда Чапека, модифицированная комплексом Сахаров аналогично экспериментальным средам.

Внесение перколятов позитивно повлияло на ход накопления биомассы мицелия изученных видов, причем большинство штаммов (за исключением облигатных паразитов) наилучшим образом реагировали на внесение метанолизного лигнина (табл. 4).

Таблица 4

Влияние перколятов лигнина на процесс накопления биомассы и синтез эргостерина мицелием некоторых видов ксилотрофных базидиомицетов

Вид, штамм Варианты питательных сред (на основе среды Чапека)

контроль экстракт нативного экстракт метанолизного

лигнина лигнина

масса % эрго- масса % эргосте- масса навес- % эрго-

навески (мг) стерина навески (мг) рина ки (мг) стерина

I. obliquus, 10-2 2983,7 ±182,1" 0,74 ±0,04"* 3113,3 ±133,1" 0,79 ^ ±0,02а* 3023,0 ±104,3" 1,31 ^ ±0,02Ь*

Ph. tremulae, 1611,2 0,41 2052,3 0,46 1439,7 0,69

Pht-1 ±131,0" ±0,01"* ±152,7 ь Я* ±0,02 ±71,3 ь* ±0,02

Fpinicola, 5694,0 0,38 7529,5 0,35 8506,1 0,39

Fpi-1 ±82,4 ±0,03"' ±151,5" ±0,04"* ±153,8 " ±0,01"*

L. sulphureus, 5782,1 0,32 6108,1 0,41 6832,3 0,47

PD-99 ±80,7 ±0,07"* ±78,9" ±0,02" ±132,1Ь ±0,0б"

G. applana- 3179,3 0,70 4321,8 1,08 4751,1 1,03

tum, G-2 ±102,2 ±0,09 ±122,5" ±0,03" ±144,4Ь ±0,09"'

G. lucidum, 3638,2 0,87 3104,4 0,91 5303,2 1,49

Gl-3 ±74,2" ±0,0 Ia* ±121,1 ±0,02а* ±139,11' ±0,02 Ь*

F.fomentarius, 3081,7 1,06 5831,3 1,20 4107,2 1,42

Nic-02 ±83,7 ±0,04 ±160,з" ±0,06"* ±182,6" ±0,05h*

P. cinnabari- 3292,2 1,11 5062,8 1,19 3619,5 1,50

nus, PyC-1 ±90,3 ±0,13"* ±144,8Ь ±0,02а* ±172,9а ±о,озь*

H. annosum, 2894,3 0,65 2774,3 0,68 1652,3 0,76

Han-2 ±100,2Ь ±0,01"* ±102,91' ±0,03"* ±23,9" ±0,04"*

F. hepático. 2093,3 1,60 3575,7 1,72 4643,4 1,56

Fh-5 ±89,6 ±0,04" ±113,Ia ±0,04 ±84,8Ь ±0,06"*

Примечание: результаты теста Дункана -а,Ь - маркировка групп по достоверным различиям в показателях биомассы; а*,Ь* - по содержанию эргостерина

Данный показатель следует рассматривать как один из факторов, определяющих положение вида в сукцессионных рядах деструкции древесины в природе.

Содержание эргостерина выше в образцах мицелия, выращенного на средах с добавлением перколятов метанолизного лигнина, что достоверно отмечено для представителей белой гнили, и, как исключение для представителя бурой гнили Ь. эЫрЬигет (см. табл. 4). Стимуляция процессов образования эргостерина не обнаруживает достоверной корреляции с процессами стимуляции накопления биомассы мицелия. Вероятно, помимо затрат этого вещества на пластический обмен, культуры накапливают материал для синтеза на его основе веществ и образования структур на последующих стадиях развития, формируя резерв для синтеза вторичных метаболитов, связанных с протеканием репродуктивных процессов. Установленные закономерности предполагают исследование влияния лигноцеллюлозных компонентов субстратов на процессы образования репродуктивных структур в условиях поверхностного культивирования на плотных средах.

При внесении в картофельно-глюкозный агар (КГА) опилок в количестве 2% от массы среды, обнаружен факт стимуляции роста большинства штаммов. У ряда культур, в присутствии лигноцеллюлозных источников, на 12-15 сутки развития было отмечено формирование мицелиальных узелков, а на 20-25 сутки сформировались типичные примордии (табл. 5).

Таблица 5

Формирование зачатков плодовых тел на мицелии штаммов изученных видов ксилотрофных базидиомицетов на разных средах в стерильных условиях

Вид, штамм Сроки появления зачатков плодовых тел (сутки после холодильника) и их дифференцирование на разных средах*

КГА (контроль) КГА + нативные опилки КГА + метанолиз-ные опилки

12 15 20 25 12 15 20 25 12 15 20 25

I. obliquus, 10-1 - - - - + + + +д + + +д +д

Ph. tremulae, Pht-1 + + - + + +

S. crispa, AI-10 - - - - - - - - - - - -

F.pinicola, Fpi-2

L. sulphureus, PD-01 - - - - - - - - - - - -

G. applanatum G-l - - - + + + + + + + + +д

G.lucidum, Gl-1 - - + +д + + +д +д + +д +д +д

F.fomentarius, Nic-02 + + +д +д +д

P.cinnabarinus, PyC-1 + + +д +д

КГА (контроль) КГА + нативные опилки КГА + метанолизные опилки

Н. annosum, Нап-2 - - - - - - - - - - - -

F. hepatica, Fh-5 - - - - - - - - - - - -

F. velutipes, FV-9 - - + +д - + +д +д - +д +д +д

Р. ostreatus, РЮ(23)-08 - - +д +д - + +д +д - + +д +д

S. commune, SZ-2 - - - - - - - - - - +д +д

P. aurivella, PhoA-5 - - - - - - - + - + +д +д

*Обозначения: «-» - примордиев не отмечено; «+» отмечены зачаточные структуры примордиев (узелки); «д» - дифференцированные примордии, заметен гимено-фор

На средах, содержащих метанолизные источники лигнина, отмечено раннее формирование базидиом Р. ostreatus, F. velutipes, F. fomentarius, S. commune, P. au-rivella, P.cinnabarinus. Примордии на таких средах характеризовались, по сравнению с контрольными вариантами, более выраженными, типичными для видов габитусами, с хорошо выраженной дифференциацией (рис. 15).

Рис. 15. Базидиомы, сформированные на КГ А с добавлением метанолизных опилок, 20 сутки: слева - Р. стпаЪагтив (штамм РуС-1), справа - Р. аигпеПа (штамм Р1юА-5)

Образование зачатков плодовых тел и базидиом наблюдалось только у представителей грибов белой гнили. Модельные опыты показали, что грибы этой группы активно деметилируют метоксильные группы (Фенгел, 1988). Опыты с меченым (14С) лигнином свидетельствуют, что при разложении лигнина грибами белой гнили конечный продукт метаболизма С02 образуется главным образом из меток-сильных групп и в небольшой степени из углерода пропановых цепей и ароматических колец. Таким образом, нет сомнения в том, что метоксильные группы не-

безразличны для культур грибов белой гнили. Метоксильные группы лигнина (концентрация которых заметно выше в древесине, уже подвергшейся процессам деструкции в природе), могут служить факторами плодоношения не только в искусственных, но и в естественных условиях, где могут выступать также и своеобразным фактором отбора.

Глава 9. ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ БАЗИДИОМ И ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРОДУКТОВ НА ОСНОВЕ МИЦЕЛИЯ Ganoderma lucidum

Разработки, связанные с исследованиями возможностей получения стадии те-леоморфы у грибов, перспективных в качестве продуцентов биологически активных веществ, актуальны по многим причинам (возможность верификации вида, ведение селекционной работы). Основным компонентом разработанных нами субстратов для получения плодовых тел G.lucidum по интенсивной технологии служила гидролизованная ржаная солома. Субстрат подвергался кислотному гидролизу, об эффективности которого судили по убыли массы и совокупной концентрации Сахаров в перколяте. Затем гидролизованный субстрат запаривался и помещался в термоустойчивые пластиковые пакеты, которые укупоривались ватно-марлевыми пробками и подвергались стерилизации. Изучены следующие композиции:

- гидролизованная солома - традиционный субстрат, контроль;

- гидролизованная солома в комплексе с экстрагированными нативными опилками (80% : 20%) - первый вариант;

- гидролизованная солома с экстрагированными метанолизными опилками (80% : 20%) - второй вариант.

Процессы морфогенеза протекали более интенсивно в вариантах с использованием метанолизных опилок: примордии, появившиеся, в среднем, на 12 суток ранее, чем в альтернативном варианте и контроле, характеризовались ярко выраженной пигментацией. Показательно сравнение состояния базидиом, полученных при реализации первого и второго вариантов опытов на 55 сутки развития, когда базидиома, полученная на субстрате с метанолизными опилками, уже приступила к спороношению, а у выросшей на субстрате, содержащем нативные опилки, только началось формирование гименофора (рис. 16). Таким образом, отмечена достоверная стимуляция морфогенетических процессов метанолизными лигноцеллю-лозными компонентами субстрата. Метоксильные группы лигнина могут служить

фактором, стимулирующим переход культуры к вторичному метаболизму, поскольку одной из иллюстраций этой фазы развития служит телеоморфа.

Рис. 16. Базидиомы G. lucidum, полученные в лабораторных условиях на субстратах разного состава (55 сутки развития с момента инокуляции субстратов): на переднем плане - субстрат содержит метанолизные опилки; на заднем плане -субстрат содержит нативные опилки

Исследована возможность использования субстратного мицелия, представляющего собой, фактически, отход грибного производства, после высушивания до постоянной массы и измельчения до фракции 10,0-50,0 мкм, в качестве кормовой добавки к рациону сельскохозяйственной птицы. В условиях крупнейшего в Пензенской области птицеводческого комплекса (ООО ПТФ «Васильевская) проведена серия испытаний кормовой добавки к рациону кур-несушек породы «Бройлер» на биохимические показатели сыворотки крови и материала яиц, получено соответствующее комиссионное заключение о результатах исследований. Установлено достоверное позитивное влияние добавки на белковый и липидный обмен птиц родительского стада, причем особого внимания заслуживает факт увеличения пропорциональной доли в составе холестерина липопротеидов высокой плотности. Зафиксирована стабилизация антиоксидантного статуса птиц: показан рост активности глутатионпероксидазы на фоне снижения концентрации малонового диаль-дегида в сыворотке (рис. 17). Этот факт представляет значительный интерес, поскольку речь идет о фундаментальной проблеме возможности стимуляции адаптационных процессов животных, и, безусловно, требует пристального внимания.

О ^ä И u

о И

1200 у 1000 --

н ч

(н hQ

ч о

200

-ь

-- -ь \ -

-- —1— -

- 4

<С W

а Я

со

сь

ч о U

I I Активность ГПО -*- Содержание МДА

Контроль Опыт

Рис. 17. Влияние кормовой добавки на основе мицелия G. lucidum к рациону птиц на показатели окислительного статуса сыворотки: активность глутатионпе-роксидазы (ГПО) и содержание малонового диальдегида (МДА) (планки погрешностей - ошибка средней, р<0,05)

Изучены показатели активности глутатионпероксидазы и содержания МДА и в массе желтка (рис. 18).

70 |

60 g 50 я

40 ej; CZI Активность ГПО

30 о Содержание МДА к

20 § й

10 & о 5

5000

я g

О I 4000 С «

ь §

S й 3000

о >,

§ Е 2000

я л

£ *

< s 1000

Контроль Опыт

Рис. 18. Влияние кормовой добавки на основе мицелия G. lucidum к рациону птиц родительского стада на показатели окислительного статуса желтка: активность глутатионпероксидазы (ГПО) и содержание малонового диальдегида (МДА) (планки погрешностей - ошибка средней, р<0,05)

Использование добавки на основе мицелия позволило повысить показатели яйценоскости родительского стада на 12%, способствовало повышению рентабельности производства яиц на стадии их получения и инкубации. Существенное

снижение доли выбракованных яиц обеспечило увеличение объема инкубации на 10 %. Использование добавки на основе сухого измельченного мицелия G. lucidum к рациону кур родительского стада способствует росту показателей вывода на 5 %. На наш взгляд, это тесно связано с процессом стимуляции антиоксидантной системы птиц, о чем свидетельствуют факты, приведенные выше. Использование предложенной добавки рекомендовано к внедрению в практику птицеводства в сфере производства яиц и получения молодняка.

ВЫВОДЫ

1. Таксономическая и экологическая структура ксилотрофных базидиомице-тов лесных экосистем лесостепи Правобережного Поволжья характеризуется высоким разнообразием. Описанные в районе исследований 249 видов различаются широтой трофической специализации, трофическими стратегиями использования субстрата и типами вызываемых гнилей древесины; 215 штаммов 44 видов, составляющие репрезентативную выборку, вошли в созданную коллекцию мицели-альных культур.

2. В составе ксилотрофной микобиоты района исследований превалирует группировка с факультативно-паразитической трофической специализацией. Широкое распространение получили виды, вызывающие развитие белой коррозионной гнили древесины. В соответствии с особенностями структуры лесных экосистем (участие коренных пород - дуба и сосны в составе древостоев) в структуре ксилотрофной микобиоты преобладает группировка поливалентных стенотрофов.

3. Установлена зависимость между широтой субстратной специализации вида в отношении природного древесного субстрата и степенью его внутривидового полиморфизма в культуре. Эвритрофные виды характеризуются более высокой степенью штаммового разнообразия, что проявляется в достоверных отличиях макро - и микроморфологических характеристик мицелия, в формировании различного типа анаморф, на фоне относительного однообразия этих показателей у штаммов стенотрофных видов.

4. Изученные виды различаются зонами оптимума и пределами толерантности по отношению к содержанию растворенного кислорода при развитии в глубинных условиях: повышенную потребность в кислороде имеют виды, формирующие in situ однолетние плодовые тела.

5. Особенности морфогенеза структур мицелия при погруженном культивировании у представителей Hymenochaetales и Polyporales связаны с типом

гифальной системы: для видов с мономитической гифальной системой в целом выявлена тенденция к филаментному, а для характеризующихся ди- и тримити-ческой - к пеллетному росту. Дифференцировка мицелия внутри пеллеты отмечена у видов с тримитической гифальной системой, тогда как для видов с дими-тической характерно формирование рыхлых однородных структур, в связи с чем, последнюю группу можно рассматривать как переходную в отношении особенностей глубинного роста.

6. Использование в качестве адаптогенных добавок к питательным средам парааминобензойной кислоты в концентрации 0,005 г/л и 9-фенил-симметричного-октагидроселеноксантена в концентрации 10"6 г/л (в пересчете на селен) оптимизирует развитие, что имеет особое значение при культивировании редких и охраняемых видов. Органические (9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен) и неорганические соединения селена (селенат натрия) при добавлении к питательной среде в концентрациях 10"4 г/л (в пересчете на селен) позволяют увеличить сроки хранения мицелиальных культур при температуре 4°С до 18-24 месяцев. Жизнеспособность, ростовые, биохимические характеристики (скорость и характер роста, базофилия протоплазмы, ферментативная активность, способность к образованию базидиомы) сохраняются на достаточном уровне.

7. Определены диапазоны и механизмы толерантности видов Ganoderma lucidum и Pleurotus ostreatus к воздействию полиенового макролида нистатина. У толерантных к нистатину штаммов G. lucidum установлена интенсификация синтеза эргостерина; толерантность Р. ostreatus определяется как интенсификацией, так и альтернативным путем - пассивацией синтеза эргостерина у разных штаммов. У всех нистатинтолерантных штаммов, характеризующихся интенсификацией продукции эргостерина, установлены выраженные способности к плодоношению на стерильных средах.

8. Быстрорастущие на агаризованных питательных средах штаммы грибов белой гнили, в среднем характеризуются более высокой общей пероксидазной, а медленнорастущие - более выраженной общей оксидазной активностью.

9. Лигноцеллюлозный субстрат, обогащенный метоксильными группами, ингибирует оксидазную активность видов с паразитной специализацией в природе и стимулирует таковую у большинства сапротрофных видов; он повышает пе-роксидазную и целлюлазную активность у видов, вызывающих белую гниль. Метоксильные группы лигнина стимулируют процесс биосинтеза эргостерина культурами грибов белой гнили и плодообразования у грибов этой группы в

условиях чистой культуры. Есть все основания рекомендовать включение мета-нолизных лигноцеллюлозных материалов в субстрат для получения плодовых тел G. lucidum по интенсивной технологии.

10. Кормовая добавка, созданная на основе мицелия G. lucidum, вносимая в количестве 0,1% от массы сухого рациона, интенсифицирует пластический обмен сельскохозяйственных птиц родительского стада: в сыворотке крови обнаружено увеличение содержания альбумина на 15%, триглицеридов - на 9%. Отмечен рост уровня холестерина на 12% , за счет фракции липопротеидов высокой плотности. Установлена стимуляция антиоксидантной системы птиц: в сыворотке крови на 19%, а в желтке - в 2,3 раза возрастает активность фермента глутати-онпероксидазы; снижается содержание малонового диальдегида соответственно на 32% и в 2,5 раза. Применение добавки к рационам на основе мицелия G. lucidum обеспечивает увеличение показателей яйценоскости на 12%, объема инкубации на 10% и показателей вывода на 5%.

ОСНОВНЫЕ РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ Публикации в изданиях, рекомендуемых перечнем ВАК РФ

Блинохватов А.Ф., Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Ильин Д.Ю. Влияние соединений селена на рост и развитие грибов I. Микромицеты // Микология и фитопатология. 2000. Т. 34, Вып. 5. С.42-45.

Блинохватов А.Ф., Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Ильин Д.Ю. Влияние соединений селена на рост и развитие грибов II. Макромицеты // Микология и фитопатология. 2000. Т. 34, Вып. 5. С.46-50.

Сашенкова С.А., Ильина Г.В., Козырева Н.С., Иванов А.И. Рост и морфологические особенности мицелия чистых культур трутовика серно - желтого Laetiporus sulphureus в зависимости от условий культивирования // Микология и фитопатология. 2005. Т. 39, Вып. 1. С.35-40.

Иванов А.И., [Блинохватов А.Ф., Ильин Д.Ю., Ильина Г.В., Костычев A.A., Озерова Н.С. Биоабсорбция микроэлементов и их влияние на ростовые и метаболические свойства грибов // Нива Поволжья. 2007. №3 (4). С. 7-10.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Лыков Ю.С. Роль специфики лигнинсодержащих субстратов при культивировании ксилотрофных грибов in vitro // Микология и фитопатология. 2009. Т. 42, Вып. 2. С.35-40.

Гарибова Л.В., Ильина Г.В. Региональные коллекции мицелиальных культур как возможность сохранения природного разнообразия базидиомицетов, а также

их физиолого-биохимических особенностей // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. №1. С.38-39.

Ильина Г.В., Лыков Ю.С., Костычев A.A. Изучение антимикробной активности местных штаммов Laetiporus sulphureus Bond, et Sing. // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. №2. С. 178-179.

Ильина Г.В., Гарибова Л.В. Использование нистатина при скрининге штаммов базидиомицетов, способных к синтезу стеринов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2010. №1. С. 251.

Ильина Г.В., Лыков Ю.С. Особенности развития мицелиальных культур паразитных видов базидиальных макромицетов ex situ // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2010. №1. С. 115.

Иванов А.И., Ильина Г.В., Скобанев A.B., Скобанев Ар.В. Эколого-биологическая характеристика видов рода Trametes в условиях Пензенской области // Микология и фитопатология. 2010. Т. 44, Вып. 3. С. 197-204.

Ильина Г.В., Лыков Ю.С. Особенности распространенных в лесостепи Правобережного Поволжья видов ксилотрофных базидиомицетов в природе и чистой культуре // Поволжский экологический журнал. 2010. № 4. С. 263-273.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Гарибова Л.В. Влияние нистатина на биосинтез эрго-стерина базидиомицетами // Микология и фитопатология. Т. 48 (1). 2011. С. 112-118.

Монографии

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Селен в грибах и микроорганизмах // Селен в биосфере. Пенза, 2001. - С. 56-95.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Скобанев A.B. Коллекция культур базидиальных макромицетов (Basidiomycota) Пензенской ГСХА. Каталог видов и штаммов. Пенза: РИО ПГСХА. 2009. 70 с.

Авторские свидетельства, патенты

Денисова (Ильина) Г.В., Блинохватов А.Ф., Иванов А.И. Способ стимулирования роста посевного мицелия шампиньона // Патент на изобретение № 213641. М., 1999.4 с.

Ильин Д.Ю., Блинохватов А.Ф., Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Ты-щенко А.Ф., Сергеева Н.В., Михалева Т.В., Полунина Е.Е. Способ интенсификации биосинтеза гелиомицина// Патент на изобретение №2157848. М., 2000. 12 с.

Ильин Д.Ю., Блинохватов А.Ф., Ильина Г.В., Иванов А.И. Способ хранения культур микроорганизмов // Патент на изобретение №2185435. М., 2002. 14 с.

Статьи, тезисы в сборниках трудов научных конференций, симпозиумов, форумов

Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Влияние неорганического соединения селена на рост и плодоношение грибов // Труды научной конференции профессорско-преподавательского состава и специалистов сельского хозяйства: сб. науч. тр. Пенза:, 1997. С. 84-85.

Денисова (Ильина) Г.В., Блинохватов А.Ф., Иванов А.И., Сашенкова С.А. Влияние соединений селена на скорость роста мицелия базидиальных грибов различных таксономических групп // Методологические основы познания биологических особенностей грибов - продуцентов физиологически активных соединений и пищевых продуктов: сб. науч. тр. Донецк, 1997. С. 102-103.

Денисова (Ильина) Г.В., Сашенкова С.А. Влияние витамина Bi (тиамина) и ультрамикроэлемента селена на рост мицелия гастеромицетов в культуре // Проблемы охраны и рационального использования природных экосистем и биологических ресурсов: сб. науч. тр. Пенза, 1998.С. 251-252.

Иванов А.И., Денисова (Ильина) Г.В., Иванова В.А., Сашенкова С.А., Моска-лец П.В. Влияние различных концентраций солей и микроэлементов на напочвенные макромицеты // Проблемы ботаники на рубеже XX-XXI веков: сб. науч. тр. С-Пб., 1998. С. 23-24.

Денисова (Ильина) Г.В. Влияние соединения селена на сроки образования плодовых тел у базидиальных макромицетов различных таксономических групп // Современные проблемы науки в АПК: сб. науч. тр. Пенза, 1999. С. 15-17.

Денисова (Ильина) Г.В. Влияние соединений селена на степень накопления биомассы мицелия грибов // Материалы конференции., посвященной 60-летию ПГПУ: сб. науч. тр. Пенза, 1999. С. 30-33.

Денисова (Ильина) Г.В., Блинохватов А.Ф., Ильин Д.Ю. Универсальная роль элемента селена в объектах биосферы // Эколого-экономические проблемы лесостепных регионов: сб. науч. тр. Пенза, 2000. С. 8-13.

Блинохватов А.Ф., Денисова (Ильина) Г.В., Ильин Д.Ю., Иванов А.И., Вихре-ва В.А., Хрянин В.Н. Значение элемента селена для объектов биосферы // Эколого-экономическое развитие России (анализ и перспективы): сб. науч. тр. М., 2000. С. 145-152.

Blinochwatow A., Iwanow А., Сhrjanin W., Uyina G., Wicrjewa W. Die Bedeutung des Selen Für die Biosphäre // Forschungs - Fhorum. №14. Jahhre Fachhochschule, Neubrandenburg, Dezember 2001. S. 8-9.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Использование элемента селена как фактора замедления процессов старения мицелиальных культур // Проблемы изучения и охраны биоразнообразия и природных ландшафтов Европы: сб. науч. тр. Пенза, 2001. С. 112-114.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Опыт использования соединений селена при производственном культивировании некоторых съедобных грибов // Физиология и биохимия культивируемых грибов: сб. науч. тр. Саратов, 2002. С. 20-21.

Сашенкова С. А., Ильина Г.В. Некоторые особенности физиологии питания га-стероидных базидиомицетов в культуре // Физиология и биохимия культивируемых грибов: сб. науч. тр. Саратов, 2002. С. 16-17.

Ильин Д.Ю., Ильина Г.В., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Особенности онтогенеза ряда микромицетов - продуцентов антибиотиков на глубинных средах, содержащих соединения селена // Современная микология в России: сб. науч. тр. М., 2002. С. 297.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. О роли базидиаль-ных макромицетов в трансформации селена в экосистемах // Современная микология в России: сб. науч. тр. М., 2002. С. 297-298.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Биоабсорбция микроэлементов гастероидными базидиомицетами в природных экосистемах и в эксперименте // Современная микология в России: сб. науч. тр. М., 2002. С.79.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Стимуляция развития мицелия и плодоношения при экстенсивном методе культивирования грибов рода вешенка (Pleurotus) селе-натом натрия // Экологические аспекты интенсификации сельскохозяйственного производства: сб. науч. тр. Пенза, 2002.С. 155-156.

Ильин Д.Ю., Ильина Г.В. Использование элемента селена при длительном хранении культур микроорганизмов // Охрана растительного и животного мира Поволжья и сопредельных территорий: сб. науч. тр. Пенза, 2003. С. 114-115.

Иванов А.И., Ильина Г.В., Сашенкова С.А., Озерова H.A. Эколого - биологические особенности трутовика серно - желтого (Laetiporus sulphureus (Bull. Fr.) Murrill) на основе изучения его мицелиальных культур // Биология, систематика и экология грибов в природных экосистемах и агрофитоценозах: сб. науч. тр. Минск, 2004. С. 220-222.

Ильина Г.В. Возможность использования соединения селена как адаптогена в практике работы с культурами базидиальных макромицетов // Материалы VIII Молодежной конференции ботаников в Санкт - Петербурге: сб. науч. тр. С.-Пб., 2004. С. 66.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Биоабсорбция микроэлементов базидиальными макромицетами в условиях нарушенных антропогенных ландшафтов // Экологические проблемы наследия холодной войны и пути их преодоления: сб. науч. тр. Пенза, 2004. С. 72.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Возможность использования культивируемых макромицетов доя оптимизации иммунного статуса организма // Экологические проблемы наследия холодной войны и пути их преодоления: сб. науч. тр. Пенза, 2004. С. 73-74.

Ильина Г.В. Изучение и практический смысл использования накопительного потенциала макромицетов как биоаккумуляторов селена // Экология человека: концепция факторов риска, экологической безопасности и управления рисками: сб. науч. тр. Пенза, 2004. С. 141-144.

Ильина Г.В. Некоторые аспекты культивирования агарикоидных макромицетов в целях утилизации отходов сельскохозяйственного производства // Материалы Юбилейной конференции кафедры селекции и семеноводства ПГСХА: сб. науч. тр. Пенза, 2004. С. 88-92.

Ильина Г.В. Особенности культивирования мицелия трутовика лакированного Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P. Karst на естественных субстратах // Роль науки в развитии АПК: сб. науч. тр. Пенза, 2005. С. 56-58.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Лещенко П.П., Ариповский A.B. Исследование жирнокислотного состава базидиомы Fistulina hepático Pers. // Роль науки в развитии АПК: сб. науч. тр. Пенза, 2005. С. 95-97.

Ильин Д.Ю., Ильина Г.В., Лещенко П.П., Ариповский A.B. Исследование жирнокислотного состава базидиом Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P. Karst и Ganoderma applanatum (Pers.) Pat. // Роль науки в развитии АПК: сб. науч. тр. Пенза, 2005. С. 97-98.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Использование базидиальных макромицетов для рециклизации отходов сельскохозяйственного производства // Животновъдни науки, Volum XLII №5. София, 2005. С. 264-268.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Влияние различных микроэлементов на степень накопления биомассы мицелия ксилотрофных базидиомицетов, перспективных в биотехнологии // Образование, наука, медицина: эколого-экономический аспект: сб. науч. тр. Пенза, 2006. С. 29.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Культурально - морфологические свойства штамма трутовика лакированного Ganoderma lucidum II Роль науки в развитии АПК сб. науч. тр. Пенза, 2005. С. 118-120.

Ильина Г.В. Возможности стимуляции образования зачатков плодовых тел макромицетов на стерильных субстратах // Роль почв в сохранении устойчивости ландшафтов и ресурсосберегающее земледелие: сб. науч. тр. Пенза, 2005. С. 304-305.

Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Влияние различных микроэлементов на степень накопления биомассы мицелия ксилотрофным базидиомицетом Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P. Karst, перспективным в биотехнологии // Наука и образование -сельскому хозяйству : сб. науч. тр. Пенза, 2006. С. 51.

Ильина Г.В. Динамика и показатели роста мицелия штаммов трутовика лакированного (Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P. Karst) в глубинной культуре // Мониторинг природных экосистем в зонах защитных мероприятий объектов по уничтожению химического оружия: сб. науч. тр. Пенза, 2007. С. 71-73.

Ильина Г.В. Интенсивность накопления мицелиальной биомассы ксилотроф-ных базидиомицетов в глубинной культуре в зависимости от параметров культивирования // Высшие базидиальные грибы: индивидуумы, популяции, сообщества: сб. науч. тр. М., 2008. С.188-189.

Ильина Г.В., Лыков Ю.С. Особенности роста штаммов ксилотрофных базидиомицетов на плотных питательных средах различного состава // Современная микология в России: сб. науч. тр. М., 2008. С. 129.

Скобанев A.B., Ильина Г.В. Эколого-трофические особенности распространенных в Пензенской области видов лигнинразрушающих базидиомицетов в природе и искусственной культуре // Биоразнообразие: проблемы и перспективы сохранения: сб. науч. тр. Пенза, 2008. С. 399^400.

Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Лыков Ю.С., Костычев A.A. Значение состава и способа подготовки субстрата для развития мицелиальных культур грибов - кси-лотрофов при твердофазном культивировании // Образование, наука, практика: инновационный аспект: сб. науч. тр. Пенза, 2008. С. 59.

Иванов А.И., Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Скобанев A.B., Костычев A.A. Изучение биоаккумуляции химических элементов грибами как актуальное направление микологических исследований // Образование, наука, практика: инновационный аспект: сб. науч. тр. Пенза, 2008. С. 33-38.

Ильина Г.В. Изучение и практический смысл использования накопительного потенциала макромицетов как биоаккумуляторов селена // Образование, наука, практика: инновационный аспект: сб. науч. тр. Пенза, 2008. С. 33-34.

Ильина Г.В. Значение парааминобензойной кислоты как ростового фактора при культивировании грибов на лигноцеллюлозных субстратах // Роль почвы в сохранении устойчивости агроландшафтов: сб. науч. тр. Пенза, 2008. С. 245-247.

Ильина Г.В., Гарибова Л.В., Ильин Д.Ю. Роль изучения штаммового полиморфизма в раскрытии природного потенциала ксилотрофных базидиомице-тов//Материалы V Международной конференции «Изучение грибов в биоценозах»: сб. науч. тр. Пермь, 2009. С. 97-101.

Ильина Г.В. Биотехнологический потенциал ксилотрофных базидиомицетов: возможности и перспективы // Достижения и перспективы развития биотехнологии: сб. науч. тр. Пенза, 2010. С. 43-47.

Ильина Г.В. Роль коллекции мицелиальных культур в изучении естественных ресурсов ксилотрофных базидиомицетов // Достижения и перспективы развития биотехнологии: сб. науч. тр. Пенза, 2010. С. 47-51.

Ильина Галина Викторовна

ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ ПРИРОДНЫХ изолятов КСИЛОТРОФНЫХ БАЗИДИОМИЦЕТОВ

Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора биологических наук

Подписано в печать 29.06.2011. Формат 60x84 1/16. Бумага офсетная. Гарнитура Times. Печать офсетная. Печ. л. 3.0. Тираж 150 экз. Заказ 136 Т

Типография Саратовского университета. 410012, Саратов, ул. Б. Казачья, 112. Тел.: (8452) 27-33-85

Содержание диссертации, доктора биологических наук, Ильина, Галина Викторовна

ВВЕДЕНИЕ .:.

Глава 1. Функциоиал ы гая роль ксилотрофных базидиомицстов в экосистеме и перспективы их использования4 в; биотехнологии» (обзор литературы) .:.13;'

1.1. Особенности биологии представителей разных трофических и : сукцессиопных группировок ксилотрофных макромицетов.

1.2. Современные представления о ферментных системах грибов. белой и бурой гнили.24*

1.3. Статус чистой культуры в микологических исследованиях.

1.4. Коллекции культур базидйальных макромицетов как возможность максимального раскрытия и сохранения их природного потенциала.

1.5. Эколого-трофические потребности базидиомицетов в условиях чистой культуры.:.

1.6. Ксилотрофные базидиомицеты как перспективный объект биотехнологии.:.

1.7. Использование низкомолекулярных соединений различной природы для регуляции ростовых и синтетических процессов у базидиомицетов;в 'культуре.

Глава 2. Материал и методы исследований.

2.1. Эколого-географическая характеристика района выделения изолятов:.

212. Объекты исследования

2:3. Методы исследований.

Глава 3. Значение ксилотрофных базидиомицетов в лесных экосистемах лесостепи Правобережного Поволжья . 15 2:

3.1. Эколого-трофические особенности биоты ксилотрофных базидиомицетов в районе исследований.

3;2. Связь внутривидового (штаммового) полиморфизма видов ксилотрофных базидиомицетов,сих экологическими

•••' особенностями.;.

33 . Формирование анаморф у видов ксилотрофных базидиомицетов в условиях чистой культуры.:.

Глава 4. Особенности развития штаммов ксилотрофных базидиомицетов в условиях глубинной культуры.

4.1. Особенности морфогенеза структур мицелия при погруженном культивировании у некоторьгх представителей ксилотрофных базидиомицетов .:.

4:2. Влияние концентрации кислорода на рост и продуктивные свойства некоторых видов ксилотрофных базидиомицетов в условиях глубинной культуры.

Глава 5 . Особенности развития видов ксилотрофных базидиомицетов с различными трофическими стратегиями в условиях чистой культуры.

5.1. Развитие культур видов с различными трофическими стратегиями на распространенных агаризованных средах.

5.2. Использование парааминобензойной кислоты в качестве фактора, оптимизирующего развитие мицелия редких и ценных с позиций биотехнологии видов ксилотрофных базидиомицетов в чистой культуре.

5:3. Использование соединений селена при,культивировании штаммов ксилотрофных базидиомицетов разных трофических стратегий.

Глава 6. Возможности использования соединений селена при хранении коллекционных культур ксилотрофных базидиомицетов1.

Глава 7. Адаптация некоторых видов ксилотрофных базидиомицетов к воздействию полиенового макролида нистатина.

7.1. Особенности толерантных к действию токсичных концентраций нистатина штаммовGanoderma lucidum.

7.2. Особенности толерантных к действию токсичных концентраций нистатина штаммов Pleurotus ostreatus.

Глава 8. Использование комплексных источников целлюлозы и лигнина при культивировании штаммов ксилотрофных базидиомицетов.

8.1. Влияние различных по структуре комплексных источников целлюлозы и лигнина на рост и развитие мицелия ксилотрофных базидиомицетов.

8.2. Активность некоторых ферментов ксилотрофных базидиомицетов при твердофазном культивировании.

8.3. Штаммовые особенности ферментативной активности представителей грибов белой гнили на лигноцеллюлозном субстрате.

8.4. Влияние экстракта перколированного лигнина на процесс синтеза эргостерина штаммами некоторых видов ксилотрофных базидиомицетов.

8.5. Влияние лигноцеллюлозных компонентов субстрата на процессы плодообразования у ксилотрофных базидиомицетов в условиях чистой культуры.

Глава 9. Технология получения базидиом и возможности использования продуктов на основе мицелия Ganoderma lucidum

9.1. Оригинальные рецептуры субстратов и технология получения плодовых тел Ganoderma lucidum.

9.2. Возможности использования*мицелия G. lucidum в качестве кормовой добавки к рациону сельскохозяйственной птицы.

9.2.1. Влияние кормовых добавок на основе мицелия G.lucidumna. биохимические показатели сыворотки крови птиц родительского стада.

9.2.2. Влияние кормовой добавки на основе мицелия G. lucidum к рациону птиц родительского стада на продуктивность, биохимические и инкубационные показатели яиц.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Эколого-физиологический потенциал природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов"

Актуальность» темы. Ксилотрофные базидиальные макромиц представляют собой; уникальную, как ¿ теоретических, так и с приклада: позиций; группу. . организмов. Исключительно велика: р дереворазрушающих грибов в природных экосистемах. Широко известью фактом? является, то, что основные запасы углерода аккумулиров^. контитентальной растительностью,1 и,, прежде всего, лесами: Существз^-данные, что только; в лесном покрове России аккумулировано, около 34 мгззтз т углерода, поэтому леса следует рассматривать как естественный резервз^ регулирующий глобальный цикл органического углерода (Орлов, 1 Замолодчиков и др., 2005). Естественная мобилизация, депонированного древесине углерода возможна путем ее биологического разложен Последнее протекает при? участии обширного комплекса организ образующих в природе ксилофильные сообщества. Несомненно, ведзлзп: роль в этих процессах принадлежит дереворазрушающим базидиаль>^= грибам, которые являются единственной группой организмов, способна полной деструкции лигноцеллюлоз (Мухин, 2003). При этом гр^^ разрушающие древесину, растут на живых и на мертвых деревьях и по тг-деструкции древесины их различают как грибы бурой, белой и смеша.^^: гнили (Buswell, ОсЦег, 1987). Грибы бурой гнили, атакуя древеса разрушают полисахариды, (целлюлозу, гемицеллюлозу) а лигнин подверг-лишь частичному деметилированию. Грибы, белой гнили- разрушающие компоненты древесины, являются; ее наиболее мощными природ^: в

Е=цая к згспу вой сну, деструкторами. Развиваясь, на древесине разной степени разложена з -соответственно, различного химического состава, в целом ксилотро сТ .

-ЭЮТ все и, базидиомицеты могут быть разделены на ряд специфических экох трофических группировок, которые будут обладать, разными физиог пкзгобиохимическими свойствами. Современные подходы позволяют выде среди дереворазрушающих базидиомицетов значительное количество ц группировок. При этом нередко возникают спорные моменты, связаьгЕ= лить атсих ге с отнесением разными исследователями отдельных видов , грибов к разным эколого-трофическим группам. В этом случае встает необходимость разработки культурально-морфологических критериев для уточнения специфики жизненной, стратегии и узкой: эколого-трофической принадлежности того йли иного вида:

Таким образом,., в качестве важного компонента экосистем,, ксилотрофные: базидиомицеты в настоящее время представляются; весьма? актуальными; объектами исследования: Ряд крупных монографический работ второй половины XX века (Бондарцев, 1953; Бондарцева, Пармасто, 1986; Бондарцева, 1992; Erikson et al, 1973-1988; Jülich, Stalpers, 1980) предопределил интенсивное развитие экологического направления исследований. При этом за рубежом преобладающим стал природоохранный аспект (Knudsen, Vesterholt, 1990; Kotiranta, Niemelä, 1996), а в отечественных исследованиях реализовывались традиции классической экологии (Бондарцева, 2000; 2004; Стороженко, 2002, 2002, 2007; Мухин, 2003; Змитрович и др., 2003; Сафонов, 2003, Арефьев, 2006 и др.). Актуальным направлением экологических исследований стало моделирование ксиломикокомплексов^ разработка теоретических подходов к оценке их. устойчивости и изучению сукцессий на древесине (Мухин, 2003). Подобные исследования, связанные, с исследованием роли эдификаторов, видов ценорезерва, динамики соотношения различных эколого-трофических групп и их функциональной устойчивости,, составляют ядро фундаментальных исследований дереворазрушающих грибов на сегодняшний день. При этом данные об исследованиях различных сторон биологии и экологии этих видов в культуре, о результатах изучения разнообразия географических и экологических изолятов, о возможностях сохранения генофонда видов в качестве мицелиальных культур, их интродукции и реинтродукции, практически отсутствуют.

В последние десятилетия ксилотрофные базидиомицеты уверенно заняли одно из ведущих мест в качестве объектов биотехнологии. Работы, проведенные в этом плане, касаются вопросов культивирования грибов-продуцентов пищевых белков, ферментов, других соединений с ценными свойствами. Выделение этих веществ стало основой для разработки лекарственных препаратов, биологически активных профилактических добавок. Фармакологическое действие макромицетов отличается большим многообразием (Краснопольская и др., 2002). Они обладают антимикробными, адаптогенными, иммуностимулирующими, седативными и прочими ценными свойствами, используются в качестве гипотензивных, капилляроукрепляющих, противоязвенных, противораковых и других средств. Исследовательские работы, проведенные в этом ключе в последние десятилетия, свидетельствуют о существовании значимых культурально-морфологических и метаболических штаммовых отличий у представителей различных видов базидиомицетов (Соболева и др., 2007). Поиск новых штаммов в природе, ведение селекционной работы с культурами являются перспективными приемами для максимального раскрытия потенциала организмов этой группы.

Вышесказанное свидетельствует об актуальности исследовании: экологии ксилотрофных базидиомицетов, целесообразности создания коллекций их чистых культур, располагающих достаточным объемом экспериментального материала и работы с природными изолятами, потенциально перспективными в биотехнологии.

Иель и задачи исследований. Цель работы - выявление экологических особенностей ксилотрофных базидиомицетов в лесных экосистемах лесостепи Правобережного Поволжья и оценка физиологического и биотехнологического потенциала изолятов видов с различными экологическими особенностями в условиях чистой культуры. Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: изучить таксономическую и трофическую структуру биоты ксилотрофных базидиомицетов с учетом особенностей их взаимодействия с л древесными субстратами в районе исследований;

- исследовать функциональные роли группировок видов ксилотрофных базидиомицетов в сукцессионном ряду разложения древесины; создать коллекцию изолятов ксилотрофных базидиомицетов, вызывающих разные' типы гнилей? древесины, выделенных с различных древесных пород и субстратов различной степени деструкции;

- разработать оптимальные приемы, культивирования видов с учетом их экологических особенностей и степени функциональной зависимости физиологического потенциала от условий культивирования;

- разработать приемы, обеспечивающие максимальную сохранность морфолого-физиологических параметров мицелиальных культур и генофонда редких и занесенных в Красные Книги РФ и Пензенской области видов;

- исследовать влияние ряда лимитирующих экологических факторов на мицелиальные культуры ксилотрофных базидиомицетов в лабораторных условиях с целью установления пределов толерантности и оценки связи устойчивости к различным воздействиям с эколого-биологическими особенностями видов;

- изучить роль метоксильных групп лигнина, как трофического и корригирующего процессы морфогенеза фактора;

Практическая значимость. Создана коллекция мицелиальных культур базидиомицетов! - представителей ксилотрофной микобиоты лесостепи Правобережного? Поволжья. Коллекция включает 44 вида и 215' штаммов-; грибов, принадлежащих к разным систематическим и экологическим* группам, в том числе в ней представлены редкие и занесенные в Красные Книги РФ и Пензенской области виды. Показаны возможности культивирования видов, независимо от их субстратной специфичности- в, природе, на субстратах, содержащих экстрагированные метоксилированные лигноцеллюлозные компоненты. С помощью разработанного метода скрининга отобраны штаммы ксилотрофных базидиомицетов, перспективные в качестве продуцентов стеринов. Получены положительные решения по заявкам на патентование оригинальной рецептуры субстратов и способа, получения плодовых тел ксилотрофных базидиомицетов, перспективных в биотехнологии. Разработана биологически активная добавка к рациону сельскохозяйственных птиц на основе мицелия Ganoderma lucidum, которая апробирована в условиях крупнейшего птицеводческого комплекса Пензенской области (ООО ПТФ «Васильевская»). Подана заявка на патентование. Запатентован способ хранения мицелиальных культур, обеспечивающий сохранение продуктивных свойств штаммов и генофонда, редких видов, в том числе, занесенных в Красные Книги РФ и Пензенской области. Полученные данные относительно особенностей экологии ксилотрофных базидиомицетов используются в процессе преподавания курсов «Экология» и «Основы экологии» в ФГОУ ВПО «Пензенская ГСХА».

Положения, выносимые на защиту:

1. Лесные экосистемы лесостепи Правобережного Поволжья представляют собой? богатый резерват видов и штаммов ксилотрофных базидиомицетов, .составляющих различные эколого-трофические группировки.

4. Широта субстратной специфичности в отношении древесных пород и стадии разложения древесины является одним из факторов, определяющих: степень штаммового полиморфизма вида в культуре.

Работа выполнена в лаборатории биохимии при кафедре биологии животных и ветеринарии Пензенской государственной сельскохозяйственной академии (свидетельство о состоянии измерений №264-224-2008), в соответствии с плановой тематикой "Исследование эколого-биохимического и биотехнологического потенциала ксилотрофных базидиомицетов" (№ гос регистрации 0120.0850925), а также «Повышение продуктивных качеств животных и разработка рациональных технологий производства продукции: животноводства в условиях Среднего Поволжья» (№ гос. регистрации 0120.1064496). В ' ходе исследований использовалась материальная и приборная база Центральной экоаналитической лаборатории Регионального Центра государственного экологического контроля и мониторинга по Пензенской области (аттестат аккредитации в системе CAAJI РОСС PXJ 0001.515921). i

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на конференциях, форумах и симпозиумах: Международной конференции посвященной 80-летию кафедры микологии и альгологии МГУ и 90-летию М.В. Горленко «Современные проблемы микологии, альгологии и фитопатологии» (Москва, 1998); II Съезде ботаников «Проблемы ботаники на рубеже XX -XXI веков» (Санкт - Петербург, 1998); Международном симпозиуме «Проблемь1 изучения и охраны биоразнообразия и природных ландшафтов Европы» (Пенза,. 2001); Международной конференции «Физиология, и биохимия культивируемых грибов» (Саратов, 2002); 1-ом Международном; Съезде: микологов: России (Москва, 2002);: Всероссийской научно — практической конференции «Вопросы прикладной экологии» (Пенза, 2002); Всероссийской научной конференции; посвященной 130-летию со дня рождения И.И. Спрыгина «Охрана растительного и животного мира Поволжья и сопредельных территорий» (Пенза, 2003); Международной научной конференции «Биология, систематика и экология грибов в природных экосистемах и агрофитоценозах» (Минск, 2004); Международной научно - практической конференции «Проблемы охраны природных ландшафтов и биоразнообразия России и сопредельных стран» (Пенза, 2004); Научно - практической конференции, посвященной памяти профессора А.Ф. Блинохватова «Образование,, наука, медицина: эколого-экономический аспект» (Пенза, 2006); Всероссийской научно - практической конференции «Проблемы охраны и экологического мониторинга природных ландшафтов и биоразнообразия» (Пенза, 2007); Всероссийской научно - практической конференции «Мониторинг природных экосистем в зонах защитных мероприятий объектов по уничтожению химического оружия» (Пенза, 2007); Юбилейной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения М.В.

Горленко «Высшие базидиальные грибы: индивидуумы, популяции, * 1 сообщества» (Москва, 2008); II Международном Съезде микологов России (Москва, 2008); Международной научной конференции, посвященной 135-летию со дня рождения И.И. Спрыгина «Биоразнообразие: проблемы и перспективы сохранения» (Пенза, 2008); V Международной конференции «Изучение грибов в биоценозах» (Пермь, 2009); I и II Междисциплинарных Микологических форумах (г. Москва, 2009, 2010); Всероссийской научно i . . . . I практической конференции «Достижения и перспективы развития биотехнологии» (Пенза, 2010); XX Международном Салоне Инноваций и инвестиций (Москва, 2010); Областном форуме «Инновационные технологии в медицине и фармакологии» (Пенза, 2011); Второй международной выставке «Инновации и технологии», (Москва, 2011), IV Российском форуме «Российским инновациям - Российский капитал» (Оренбург, 2011).

Публикации. Автором опубликовано 95 работ, включая 13 статей- в изданиях, входящих в "Перечень периодических научных изданий, рекомендуемых ВАК .", 66 работ (статьи и тезисы) в сборниках научных трудов, 2 монографии, 9 учебно-методических изданий по экологической тематике, получены 5 патентов РФ и 2 положительных решения о выдаче.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, 9 глав, заключения, выводов, списка использованных литературных источников и приложений. Работа изложена на 370 страницах машинописного текста, основная часть, содержит 32 таблицы, 34 рисунка, 47 фотоиллюстраций. Список литературы включает 455 источников отечественных и зарубежных

Заключение Диссертация по теме "Экология (по отраслям)", Ильина, Галина Викторовна

выводы

1. Таксономическая и экологическая структура ксилотрофных базидиомицетов лесных экосистем лесостепи Правобережного Поволжья характеризуется высоким разнообразием. Описанные в районе исследований 249 видов различаются широтой трофической специализации, трофическими стратегиями использования субстрата и типами вызываемых гнилей древесины; 215 штаммов 44 видов, составляющие репрезентативную выборку, вошли в созданную коллекцию мицелиальных культур.

2. В составе ксилотрофной микобиоты района исследований превалирует группировка с факультативно-паразитической трофической специализацией. Широкое распространение получили виды, вызывающие развитие белой коррозионной гнили древесины. В соответствии с особенностями структуры лесных экосистем (участие коренных пород — дуба и сосны в составе древостоев) в структуре ксилотрофной микобиоты преобладает группировка поливалентных стенотрофов.

3. Установлена-зависимость между широтой субстратной специализации вида в отношении природного древесного субстрата и степенью его внутривидового полиморфизма в культуре. Эвритрофные виды характеризуются более высокой степенью штаммового разнообразия, что проявляется в достоверных отличиях макро - и микроморфологических характеристик мицелия, в формировании различного типа анаморф, на фоне относительного однообразия этих показателей у штаммов стенотрофных видов.

5. Особенности морфогенеза структур мицелия при погруженном культивировании у представителей Hymenochaetales и Polyporales связаны с типом гифальной системы: для видов с мономитической гифальной системой в целом выявлена тенденция к филаментному, а для характеризующихся ди- и тримитической - к пеллетному росту. Дифференцировка мицелия внутри пеллеты отмечена у видов с тримитической гифальной системой, тогда как для видов с димитической характерно формирование рыхлых однородных структур, в связи с чем, последнюю группу можно рассматривать как переходную в отношении особенностей глубинного роста.

7. Определены диапазоны и механизмы толерантности видов Ganoderma lucidum и Pleurotus ostreatus к воздействию полиенового макролида нистатина. У толерантных к нистатину штаммов G. lucidum установлена интенсификация синтеза эргостерина; толерантность Р. ostreatus определяется как интенсификацией, так и альтернативным путем — пассивацией синтеза эргостерина у разных штаммов. У всех нистатинтолерантных штаммов, характеризующихся интенсификацией продукции эргостерина, установлены выраженные способности к плодоношению на стерильных средах.

8. Быстрорастущие на агаризованных питательных средах штаммы грибов белой гнили, в среднем характеризуются более высокой общей пероксидазной, а медленнорастущие — более выраженной общей оксидазной активностью.

9. Лигноцеллюлозный субстрат, обогащенный метоксильными группами, йнгибирует оксидазную активность видов с паразитной специализацией в s t , природе и стимулирует таковую у большинства сапротрофных видов; он повышает пероксидазную и целлюлазную активность у видов, вызывающих белую гниль. Метоксильные группы лигнина стимулируют процесс биосинтеза эргостерина культурами грибов белой гнили и плодообразования у грибов этой группы в условиях чистой культуры. Есть все основания рекомендовать включение метанолизных лигноцеллюлозных материалов в субстрат для получения плодовых тел G. lucidum по интенсивной технологии.*

10*. Кормовая добавка, созданная на основе мицелия G. lucidum, вносимая в количестве 0,1% от массы сухого рациона, интенсифицирует пластический обмен сельскохозяйственных птиц родительского стада: в сыворотке крови обнаружено увеличение содержания альбумина на 15%, триглециридов - на 9%. Отмечен рост уровня холестерина на 12% , за счет фракции липопротеидов высокой плотности. Установлена стимуляция антиоксидантной системы птиц: в сыворотке крови на 19%, а в желтке - в 2,3 раза возрастает активность фермента глутатионпероксидазы; снижается содержание малонового диальдегида соответственно на 32% и в 2,5 раза. Применение добавки к рационам на основе мицелия G. lucidum обеспечивает увеличение показателей яйценоскости на 12%, объема инкубации на 10% и показателей вывода на 5%.

Заключение

Экологические исследования, проводимые в природных условиях и параллельно в лабораторных, способны дать ключ для объективного решения целого ряда проблем и внести определенный вклад в теорию. В настоящей работе сделана попытка систематизации связей между экологическими особенностями видов в природе и характером их развития в условиях культуры. Проведенные с этой целью полевые исследования и анализ существующих данных позволил систематизировать трофические группировки распространенных в лесостепи Правобережного Поволжья ксилотрофных базидиомице-тов по спектру трофической приуроченности, как в отношении видовой принадлежности субстратов, так и в отношении состояния последних. Осуществлены обзор существующих подходов к выделению трофических группировок по ширине трофической валентности и анализ специфики трофических связей дереворазрушающих грибов в пределах района исследований. Установлены доли выделенных трофических группировок в районе исследований (эвритрофов первого и второго порядков и стенотрофного блока, дифференцированного нами на поли- и моновалентные стенотрофные виды), что впервые реализовано применительно к данному региону. Кроме того, известно, что ксилотрофные базидиомицеты различаются по отношению к степени деструкции древесины, которую колонизируют (облигатные и факультативные паразиты, сапротрофы). Выделение таких категорий среди дереворазрушающих базидиомицетов и определение принадлежности видов к той или иной из них — весьма дискуссионный аспект в области экологии грибов. Исследования физиологических особенностей их развития в культуре, бесспорно, способствуют решению целого ряда открытых вопросов. Сформирована коллекция мицелиальных культур ксилотрофных базидиомицетов, доли представителей различных трофических группировок в которой пропорциональны таковым, установленным в природных условиях. При изучении культурально-морфологических параметров разнообразия изолятов изученных видов при развитии ex situ установлена четкая тенденция связи между широтой субстратной приуроченности вида в природе (по отношению к породам деревьев и степени разложения древесного субстрата) и разнообразием культурально-морфологических характеристик в культуре. При этом привязанность вида в большей степени к древесине на ранней, или, напротив, на поздней стадии разложения, оказывает достоверное влияние на характер его развития,и трофические потребности в культуре. С этих позиций, основываясь на полученных результатах лабораторных исследований, обосновано выделение групп видов с паразитной или сапротрофной стратегиями развития. Облигатные ( паразиты встречающихся в природе исключительно на живых деревьях способны развития в условиях чистой культуры, что свидетельствует о существенной специфике данной группировки; вероятно, связанной с их некро-трофной стратегией освоения живого субстрата в природе. Тем не менее, достоверные отличия в процессе развития представителей этой группировки в культуре от изолятов видов с иными трофическими стратегиями, свидетельствуют о целесообразности градации культур по особенностям трофики in situ и учета этих особенностей при культивировании.

Разнообразие представленных в коллекции видов по особенностям биологии, типам и локализации вызываемой гнили древесины и значительное штаммовое представительство каждого вида позволили выявить ряд ценных закономерностей в развитии сходных по некоторым параметрам групп. Для большинства из представленных в коллекции видов в литературе показаны те или иные возможности их использования в биотехнологии (в качестве продуцентов биологически активных веществ: стеринов, пигментов, ферментов, антибиотиков и т.д.). В связи с этим, выявленные общебиологические закономерности, определяющие оптимальные приемы культивирования на основе ряда морфолого-физиологических характеристик видов, приобретают вы; сокое практическое значение. В частности, в практике глубинного культивирования с целью получения биомассы мицелия, учет различных потребностей видов в обеспеченности культуральной жидкости растворенным кислородом способствует оптимизации процесса накопления биомассы и наиболее полной реализации продуктивного потенциала изолята. Выявлены закономерности формирования глубинных структур у афиллофороидных представителей ксилотрофных базидиомицетов. Повышенная потребность в кислороде обнаружена у видов, образующих in situ однолетние плодовые тела. Еще одним интересным моментом представляется обнаруженная связь между потребностью в кислороде и характером гнили древесины, отмечаемым для того или иного вида в природе. Так, повышенные концентрации кислорода зачастую определяли оптимизацию накопления биомассы у видов, для которых показана заболонная, либо сплошная гниль, а также гниль сердцевинного типа, распространяющаяся к периферии. Напротив, хорошо развиваются при относительно низком содержании растворенного кислорода в среде виды, вызывающие только сердцевинную, реже сплошную гниль, а также гниль, распространяющуюся от периферии к центру. Изученные виды в пределах названных групп формируют тесные группировки при использовании кластерного анализа.

Культивирование видов с различными трофическими стратегиями позволило установить перспективы использования ряда эссенциальных факторов, оптимизирующих развитие культур. Указано, что относительно более полной реализации физиологического потенциала культур ксилотрофных базидиомицетов, прежде всего редких и ценных в биотехнологии видов, можно достичь использованием некоторых ростовых факторов, а также адаптогенов различной природы. Установлена эссенциальность парааминобензойной кислоты (ПАБК), применение которой сокращает продолжительность фазы адаптации к субстрату, что особенно ценно при культивировании видов с паразитическими стратегиями развития. Полученные данные свидетельствуют и о стимуляции обменных процессов у факультативных сапротрофов на этапе вовлечения в метаболизм труднодоступных источников углерода. В целом, полученные результаты подтверждают постулат о роли и месте ПАБК в метаболических процессах микроорганизмов, и, в частности, ксилотрофных базидиомицетов, как эссенциального ростового фактора (Овчинников, 1987).

Значительный блок исследований посвящен изучению роли соединений селена в практике культивирования и хранения ценных в биотехнологии штаммов ксилотрофных базидиомицетов. При исследовании влияния на ход развития культур неорганического (селенат натрия) и органического соединения селена (9-фенил-симметричный-октагидроселеноксантен) обнаружена, у представителей разных трофических группировок, неоднозначная реакция. Полученные на основе теста Дункана группировки распределяются таким образом, что виды, склонные к паразитной трофике в природных условиях, обнаруживают стимуляцию роста органической формой селена, а обладающие сапротрофной трофикой - неорганической. Общей тенденцией культур, развивающихся в присутствии соединений селена, является более ранний переход к фазе стационарного роста, при этом отмечается сокращение фазы адаптации (что особенно заметно на примере медленнорастущих культур об-лигатных паразитов), и некоторое сокращение фазы логарафмического роста. Фаза стационарного роста несколько растягивается во времени и стабилизируется. У большинства изученных штаммов показатели темпов роста в этот период увеличиваются незначительно, по сравнению с контролем. Эффект синхронизации развития культуры на примере микромицетов — продуцентов антибиотиков отмечался нами ранее и описан в ряде работ (Ильина и др., 2000; Ильин и др., 2001). Возможно, в данном случае обнаруживается результат действия подобного механизма, то есть нивелируются факторы окислительного стресса, провоцирующие старение культуры. Использование соединений селена в практике хранения культур обеспечило сохранение последних в жизнеспособном состоянии в течение длительного периода, более стабильный, относительно контрольных показателей, антиоксидантный статус мицелия, что в совокупности свидетельствуют о значительном нивелировании фактора окислительного стресса. Известно, что селен, как часть глутатионпероксидазы, оказывает защитное действие при окислительном стрессе, катализируя распад перекиси водорода или разложение гидроперекисей ли-пидов и тем самым, прерывая переокислительную цепную реакцию свободных радикалов (Grossman and Wendel, 1983). Кроме того, в ряде литературных источников на, соединения селена — селенаты — указывают как на антиметаболиты (Birkett and Rowlands, 1981). В данном случае имеет место стабилизация обменных процессов, на фоне которой замедление метаболических реакций? влечет за; собой торможение свободнорадикальных процессов. О фундаментальных позиций полученные результаты свидетельствуют в пользу общебиологической концепции роли селена в живых организмах. Такой способ хранения культур является авторской разработкой и запатентован (Патент№2185435, 2002).

Любые разработки в области биотехнологии предполагают в качестве обязательных этапов скрининг штаммов продуцентов того или иного продукта (биомассы или ценных метаболитов), а также периодическую верификацию самого продуцента. Открытие новых биологически активных веществ, продуцируемых высшими базидиальными грибами, в настоящий период идет нарастающими темпами. С этих позиций исследования, проводимые с целью разработки новых методов скрининга, становятся все более актуальными.

В ходе проведенных исследований предложен метод скрининга перспективных штаммов — продуцентов стеринов. Сродство эргостерина и некоторых ценных метаболитов стериновой природы и их производных (ганодеро-вые, ганодериковые кислоты и т.п.) свидетельствует о целесообразности подобных исследований. Метод основан на селекционном отборе штаммов, резистентных к воздействию полиенового макролида нистатина. Впервые установлены токсичные для базидиальных макромицетов концентрации названного полиена, установлены возможные пути адаптации к его действию у разных видов; Ряд этих адаптаций связан с интенсификацией синтеза эргостерина. Не исключено^ что и в естественных условиях, аналогичный механизм (воздействие антибиотиков полиеновой природы, продуцируемых микроорганизмами, входящими в консорцию растения-субстрата), может выступать в качестве одного из факторов отбора штаммов ксилотрофных базидиомице-тов, способных к реализации полного жизненного цикла (от базидиоспоры до базидиоспоры). Общебиологическое значение имеет показанная в работе связь динамики эргостерина в мицелии с протеканием морфогенетических процессов культур.

Особый интерес при проведении исследований представляло изучение роли и влияния на ход развития культуры со стороны компонентов природного субстрата дереворазрушающих грибов — источников целлюлозы и лигнина. По мнению ряда авторов, лигнин, как компонент древесного субстрата, может влиять на морфогенез культуры в естественных условиях (Фенгел, 1988). Традиционно в практике грибоводства используются твердые органические лигноцеллюлозные субстраты, однако корригирующая и трофическая роль лигнина практически не исследована. Поскольку лигнин древесины на разных стадиях ее разложения характеризуется различной структурой, прежде всего, различной доступностью свободных метоксильных групп, в исследования были включены лигноцеллюлозные материалы с разной степенью конденсации молекулы лигнина и разным количеством доступных метоксильных групп. Выявлена связь между концентрацией метоксильных групп в субстрате и интенсивностью развития культур. Установлено, что активнее осваивают обогащенный метоксильными группами субстрат представители видов, чаще встречающихся в природе на древесине высокой степени разложения, причем вне зависимости от типа вызываемой гнили. Вероятно, такие виды эволюци-онно адаптированы к эффективному использованию обилия метоксильных групп древесины, в .значительной степени разрушенной. Путем обогащения метоксильными группами глубинных сред удалось повысить продукцию биомассы мицелия у большинства изученных видов грибов, возбудителей белой гнили древесины. Известные из литературы модельные опыты с различными метоксилированными фенолами показали, что грибы белой гнили де-метилируют метоксильные группы (Ма1опеу, 1978), а эксперименты с меченым (14С) лигнином свидетельствуют, что при разложении лигнина грибами белой гнили конечный продукт метаболизма С02 образуется главным образом из метоксильных групп' и в небольшой степени из углерода пропановых цепей и ароматических колец (Фенгел, Вегенер, 1988). Таким образом, достоверно показано: трофическая роль лигнина, включение метоксильных групп лигнина в метаболизм ксилотрофных базидиомицетов; а также целесообразность .использования метоксилированных лигноцеллюлоз-ных материалов в качестве компонентов питательных сред для дерево-разрушающих базидиомицетов. В отношении корригирующей роли лигнина - обнаружена интенсификация процесса синтеза эргостерина культурами грибов белой гнили в присутствии в среде метоксилированного субстрата (экстракта лигнина). Установленная связь динамики этого метаболита в мицелии и морфогенеза культуры показала возможность стимуляции внесением лигноцеллюлозных, обогащенных метоксильными группами, материалов, процесса плодоношения у грибов указанной группы в условиях чистой культуры. Показаны возможности модификации разных сторон ферментативной активности мицелиальных культур путем обогащения среды такими компонентами.

С позиций биотехнологии важным и заслуживающим внимания моментом представляется обнаружение зависимостей между ростовыми характеристиками культуры и некоторыми сторонами ее ферментативной активности. Относительно быстрорастущие на агаризованных и твердофазных питательных субстратах штаммы грибов белой гнили, в среднем характеризуются более высокой общей пероксидазной, а медленнорастущие — более выраженной общей оксидазной активностью. С фундаментальных позиций обнаруженные факты свидетельствуют о параллельном существовании различных эколого-биохимических стратегий, причем реализуемых на внутривидовом уровне. С практических же позиций, обнаруженные закономерности, с определенными долями вероятности, можно использовать при скрининге штаммов — перспективных продуцентов ферментов.

Верификация вида продуцента возможна в основном при наличии плодового тела. Использование в качестве компонентов питательного субстрата лигноцеллюлозных источников, обогащенных метоксильными группами, обеспечило возможность получения телеоморфы у изученных грибов белой гнили. О триггерной роли указанных компонентов лигнина в процессе морфогенеза базидиом. свидетельствует тот факт, что примордии и зрелые бази-диомы на стерильной среде у большинства видов удалось получить лишь при использовании метоксильных групп лигнина. На основе полученных данных разработана и запатентована лабораторно-промышленная технология получения типичных базидиом одного из наиболее перспективных в биотехнологии видов ксилотрофных базидиомицетов — Ganoderma lucidum (Патент

3 I

9773126, 2011). Технология позволяет одновременно решить целый ряд актуальных задач: биоконверсию отходов растениеводства и лесоперерабатывающей промышленности, получение плодовых тел G. lucidum — ценного фармацевтического сырья, а также получение массы отработанного вегетативного мицелия на гидролизованном органическом носителе, пригодного для приготовления на его основе кормовой добавки к рационам сельскохозяйственных животных. Разработанная добавка апробирована в условиях t * предприятия, освидетельствована актом комиссионного испытания и рекомендована к внедрению.

Таким образом, совокупность проведенных исследований позволила раскрыть некоторые перспективные стороны физиологического потенциала природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов. Установленные факты и закономерности, полученные с использованием большого объема экспериментального материала, представляют определенный интерес, как с теоретических, так и прикладных позиций. Результаты проделанной работы могут быть использованы в курсах общей экологии, экологии грибов, микробиолоI гии, а также в практике биотехнологии.

Библиография Диссертация по биологии, доктора биологических наук, Ильина, Галина Викторовна, Пенза

1. Автономова A.B., Краснопольская JI.M., Максимов В.Н. Оптимизация состава питательной среды для погружённого культивирования Ganoderma lucidum (Curt.:Fr.)P.Karst// Микробиология. 2006. Т.75, №2. С. 186-192.

2. Автономова A.B., Краснопольская JI.M. Противоопухолевые и иммуномодулирующие свойства гриба бессмертия Ganoderma lucidum П Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты. М., 2007. С. 216-224.

3. Азаров В.И., Буров A.B., Аболенская A.B. Химия древесины и синтетических полимеров. С.-Пб, 1999. 628 с.

4. Айзенштадт М.А., Боголицын К.Г. Пероксидазное окисление лигнина и его модельных соединений // Химия растительного сырья. 2009. №2. С. 518.

5. Александрова Г.П., Медведева С.А., Бабкин В.А., В.А. Соловьёв, Малышева О.И., Иванова С.З. Влияние состава питательной среды на лигниназную активность базидиомицета Phanerochaete crysosporium // Химия древесины. 1989. №6. С. 77-80.

6. Александрова Г.П., Медведева С.А. Биоотбелка сульфатной целлюлозы оксидазными ферментами гриба Daedaleopsis confragosa // Химия растительного сырья. 1999. №2. С. 81-84

7. Алпатьев A.M., Архангельский A.M., Подопелов Н.Я., Степанова А.Я. Физическая география СССР. М.: Высшая школа, 1976. 272 с.

8. Андреева В.А. Фермент пероксидаза: участие в защитном механизме растений. М.: Наука, 1988. 128 с.

9. Антоненко JT.A., Клечак И.Р., Нишпорская О.И. Отбор культур базидиальных грибов Coriolus zona tus (Trametes zonatus) на жидких питательных средах // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. №2. С. 159.

10. Ю.Антонов И.С., Саволей Ю.П. Леса Пензенской области. Пенза, 1988. 35 с.11 .Арефьев С.П. Системный анализ биоты дереворазрушающих грибов: автореф. дисс. доктора биол. наук. Тюмень, 2006. 47 с.

11. Арефьев С.П. Системный анализ биоты дереворазрушающих грибов. Новосибирск: Наука, 2010. 260 с.

12. Астапенко В.В. Что такое микоценоз, фитоценоз и биоценоз с позиций- системного подхода // Микология и фитопатология. 1989 Т. 23, вып. 6.1. С. 505-509.

13. Ахмедова З.Р. Биодеградация растительных отходов грибом Pleurotus ostreatus // Биотехнология. 1992. Т. 26, вып. 3. С. 109—115.

14. Бабицкая В.Г., Щерба В.В., Пучкова Т.А., Смирнов Д.А. Факторы, влияющие на образование полисахаридов Ganoderma licidum II Прикладная биохимия и микробиология. 2005. Т. 41, № 2. С. 194—199.

15. Бабицкая В.Г., Щерба В.В., Паромчик И.И., Осадчая О.В., Филимонова Т.В., Рожкова З.А. Новый продукт функционального назначения с грибами рода вешенка // Микробные биотехнологии: фундаментальные и прикладные аспекты. Минск, 2007, С. 292—298.

16. Бадалян С.М., Гаспарян A.B., Гарибян Н.Г. Исследование антиоксидантной активности некоторых базидиальных макромицетов // Микология и фитопатология. 2003. Т. 37, вып. 5. С.63-67.

17. Бартошевич Ю.Э., Дмитриева C.B., Заславская П.Л. Спорогенез, биосинтез антибиотика и систематическое положение Fusidium coccineum //Антибиотики. 1983. №7. С. 483-485.

18. Барыкина Р.П., Веселова Т.Д., Джалилова Х.Х. Основы микротехнических исследований в ботанике. Справочное руководство. М.: МГУ, 2000. 127 с.

19. Беккер З.Э. Физиология грибов и их практическое использование. М.: МГУ, 1963. 267 с.

20. Беккер З.Э. Физиология и биохимия грибов. М.: МГУ. 1988. 230 с.

21. Беккер Е.Г. Выделение, свойства и основные закономерности действия ; • лигнолитических ферментов (лакказы, лигниназы, Мп-пероксидазы)автореф. дисс. канд. химич. наук. М., Д993. 27 с.

22. Белова Н.В., Ефремова И.Я. Препараты из высших базидиальных грибов -î объект патентно-правовой охраны // Микология и фитопатология. 1992. Т.26, вып. 4. С. 321-324.

23. Беляева Т.В. Оптимизация биосинтеза антибиотика фузидина с помощью комплекса генетических и физиологических методов // дисс.канд. биол. наук. М.:НИИПМ, 1984. 170 с.

24. Билай В.И., Билай Т.И., Мусич Е.Г. Трансформация целлюлозы грибами. Киев: Наук, думка, 1983. 295 с.

25. Бисько H.A., Дудка И.А. Биология и культивирование съедобных грибов рода вешенка. Киев: Наукова думка, 1987. 148 с.

26. Бисько H.A., Фомина В.И., Володина Е.П., Билай В.Т. Изменение химического состава субстрата при культивировании Pleurotus ostreatus

27. II Микол. и фитопатол. 1986. Т. 20, вып. 5. С. 392-395.

28. Бисысо H.A., Митропольская Н.Ю., Гулич М.П., Ольшевская О.Д., Ятченко Е.А. Перспективы использования лекарственного гриба G. lucidum в лечебно-профилактических целях // Успехи медицинской микологии. 2001. Т.1. С 234-236

29. Блинохватов А.Ф., Иванов А.И., Вихрева В.А., Денисова Г.В., Ильин Д.Ю., Хрянин В.Н. Значение селена для объектов биосферы // Эколого-экономическое развитие России (анализ и перспективы): Альманах, поев. 10-летию РАЕН. М., 2000. С. 145-152.

30. Боголицин К.Г. Химия сульфитных методов делигнификации древесины. М.: Экология, 1994. 228 с.

31. Бойко М.И., Просянок М.В., Терещенко Г.С., Али М. И. Утилизация лигносульфоната дереворазрушающими грибами // Современная микология в России. М., 2008. С. 324.

32. Болдырев A.A. Окислительный стресс и мозг // Соросовский образовательный журнал. 2001. Т. 7. № 4. С. 21-28.

33. Болобова A.B., Аскадский A.A., Кондращенко В.И., Рабинович M.JI. Теоретические основы биотехнологии древесных композитов. Книга II: Ферменты, модели, процессы. М.: Наука, 2002. 343 с.

34. Болыная Советская Энциклопедия (БСЭ) Т. 12- М., 1969-1978.

35. Бондарцев, A.C. Трутовые грибы европейской части СССР и Кавказа. М.: Изд-во АН СССР, 1953. 1106 с.

36. Бондарцев A.C., Зингер P.A. К естественной системе трутовых грибов.3 .Сов. Бот., № 1, 1943. С. 29^13.

37. Бондарцев A.C., Зингер P.A. Руководство по сбору высших базидиальных грибов для научного их изучения. // Тр. Бот. инст. АН СССР, сер. II, Споровые раст., вып. 6, M.-JL, 1950, стр. 499-572.

38. Бондарцева М.А. Видовой состав, распространение в лесных биоценозах и экологическая функция дереворазрушающих трутовых грибов // Научные основы устойчивости лесов к дереворазрушающим грибам. М.: Наука. 1992. С. 90-140.

39. Бондарцева М.А., Свищ Л.Г., Балтаева Г.М. Некоторые закономерности распространения трутовых дереворазрушающих грибов // Микология и фитопатология. 1992. Т. 26, вып. 6. С. 442-447.

40. Бондарцева М.А. Определитель грибов России. Порядок афиллофоровые. Вып. 2. С-Пб.: Наука, 1998. 391 с.

41. Бондарцева М.А. Эколого-биологические закономерности функционирования ксилотрофных базидиомицетов в лесных экосистемах // Грибные сообщества лесных экосистем. Петрозаводск: Карельский НЦ РАН, 2000. С. 9-25.

42. Бондарцева М.А. Адаптация к субстрату как один из факторов эволюции афиллофороидных грибов // Грибные сообщества лесных экосистем. М.Петрозаводск, 2004. Т.2. С. 21.

43. Бондарцева М.А.; Пармасто Э.Х. Определитель грибов СССР. Порядок афиллофоровые. Вып. 1 (семейства гименохетовые, лахнокладиевые, кониофоровые, щелелистниковые). Л.: Наука, 1986. 192 с.

44. Брагинцева Л.М. Грибы источник биологически активных веществ //Успехи медицинской микологии. М.: Национальная академия микологии. 2005. Т. V. С.252-254

45. Брындина Е.В. Действие выбросов медеплавильного завода на сообщества ксилотрофных базидиомицетов южной тайги // Сибирскай экологический журнал, 2000, №6. С. 679-684.

46. Бурова Л.Г. Экология грибов макромицетов. М.: Наука, 1986. 223 с.

47. Бухало A.C. Влияние различных источников углерода и азота в синтетических средах на рост базидиомицетов // Микология и фитопатология. 1972. Т. 6, вып. 3. С. 241-244.

48. Бухало A.C. Высшие съедобные базидиомицеты в чистой культуре. Киев: Наукова думка, 1988. 144 с.

49. Бухало A.C., Митропольская Н.Ю. Коллекция культур шляпочных грибов института ботаники имени н. г. холодного национальной АН Украины / 1 Съезд Микологов России. 2002. С. 131.

50. Вакин А.Т. Грибные .болезни и другие пороки дубрав по исследованию в Чувашской АССР. М.: Гослестехиздат., 1932. С. 1-127.

51. Вакин А.Т. Грибные повреждения древесины лиственных пород в Теллермановском лесу // Тр. Инст: леса, III, 1950. С. 107-132.

52. Ванин С. И. Курс лесной фитопатологии. Ч. 1. Болезни и повреждения,

53. Г вызываемые грибами. М.-Л. : Госиздат, 1931. 324 с.

54. Ванин С.И. Методы исследования грибных болезней леса и повреждений древесины. Гослестехиздат, Л., 1934. С. 1-228.

55. Ванин С.И. Паразитные и сапротрофные грибы древесных пород в различных насаждениях восточной части Касимовского уезда Рязанской губ. // Мат. по ми кробиолог. обслед. России, III, 1916, С. 37-74.

56. Василюк В.М., Кругова О.Д., Мандровская Н.М. Активность пероксидазы и каталазы у сои, инокулированой Тп5-мутантами Bradyrhizobium japonicum II Физиология и биохимия культурных растений. 2007. Т. 39. № 3. 334-342.

57. Вирина A.M. Изучение влияния полиеновых антибиотиков на состав клеток Candida albicans // Тезисы VII конференции молодых ученых и специалистов ЛНИИА. Л., 1975. С. 55-57.

58. Вовк А.Д., Соляник И.В., Сенюк О.Ф., Ковалев В.А., Задорожная Л.В., Немченко H.H., Кляуз Н.В., Горовой Л.Ф. Клиническая эффективность микотона при лечении хронических гепатитов С // Успехи медицинской микологии. 2006. С. 183-185.

59. Воронков М. Г., Мирсков Р. Г. Четвертое рождение германия // Химия и Жизнь. 1982. №3. С. 54-56.

60. Гарибова Л.В. Лекомцева С.Н. Основы микологии. Морфология и систематика грибов и грибоподобных организмов. Учебное пособие. М.: Товарищество научных изданий КМК, 2005. 220 с.

61. Гарибова Л.В. Обзор и анализ современных систем грибов. Петрозаводск, 1999. 28 с.

62. Гарибова Л.В., Барсукова Т.Н., Иванов А.И. Эколого-биологическая характеристика Pleurotus ostreatus (Jacg.: Fr.) Kumm. // Биологические науки. №7. 1989: С. 73-77.

63. Гарибова Л.В., Завьялова Л.А., Александрова Е.А., Никитина В.Е. Биология Lentinus edodes. I. Морфолого-культуральные и физиолого-биохимические особенности // Микология и фитопатология. 1999. Т. 32, вып. 2. С. 107-110.-

64. Гарибова Л.В, Антимонова A.B., Завьялова Л.А., Краснопольская Л.М. Рост и морфологические признаки мицелия трутовика лакированного Ganoderma lucidum в зависимости от условий культивирования // Микология и фитопатология. Т. 37, вып. 3. 2003. С. 14—19.

65. Гарибова Л.В., Завьялова Л.А., Чайка М.Н. Теоретическое и практическое значение коллекций высших базидиальных грибов в развитии342биотехнологий // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты. М., 2007. С. 17-24.

66. Гарибова JI.B., Ильина Г.В. Региональные коллекции мицелиальных культур как возможность сохранения природного разнообразия штаммов: базидиомицстов //. Иммунопатология^ аллергология^ инфектология. 2009. №1. G. 38-39:

67. Геннис Р.\ Биомембраны. Молекулярная структура и функции. Пер. с англ. М.: «Мир», 1997. 622 с.

68. Гёрёг Ш. Количественный анализ стероидов. Пер. с англ. М.: Мир, 1985.504 с.

69. Головлева Л.А., . Леонтьевский А. Биодеградация лигнина // Успехи микробиологии. 1990. Вып. 24. С. 128-155.

70. Горбатова О.Н., Жердев A.B., Королева A.B. Триазиновые пестициды:• структура, действие на живые организмы, процессы деградации // Успехибиологической химии. 2006. Т. 46. С. 343-348

71. Горбатова О.Н., Королева О.В., Ландесман Е.О., Степанова Е.В., Жердев A3. Индукция биосинтеза лакказы как способ увеличения потенциала детоксификации базидиомицетами // Прикладная биохимия и микробиология. 2006 Т. 42, №4. С. 468—474.

72. Горбунова И.А., Власенко В.А., Теплякова Т.В., Косорогова Т.А., Михайловская И1Н. Ресурсы лекарственных грибов на юге Западной Сибири // Хвойные бореальной зоны. 2009. №1. С. 12-21.

73. Горбунова И.А., Власенко В.А., Теплякова Т.В., Косорогова Т.А., Михайловская И.Н. Коллекция культур грибов Засадной Сибири как основа для дальнейших биотехнологических исследований //Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. №1. С. 39-40.

74. Гордиенко П.В. Особенности расселения некоторых видов ксилотрофов на субстрате с различными параметрами // Микология и фитопатология: 1986. Т.20, вып. 2. С. 131-134.

75. Гордиенко П.В. Экологические особенности дереворазрушающих грибов в лесных биоценозах среднего Сихотэ-Алиня: дисс. канд. биол. наук. М.: МГУ, 1979. 149 с.

76. Горленко М.В. Сельскохозяйственная фитопатология. М.: Высшая школа, 1968. 169 с.

77. Горленко М.В. Миграция фитопатогенных организмов // Вестн. Моск. Унта. 1971. №6. С. 96-112.

78. Горленко М.В., Гарибова JI.B., Сидорова И.И., Сизова Т.П., Успенская Г.Д. Все о грибах. М.: Лесная промышленность, 1985. 280 с.

79. Горшина Е.С., Скворцова М.М., Высоцкий В.Г. Биотехнологический препарат лекарственного гриба траметеса опушенного // Успехи медицинской микологии. 2001. Т. 1. С. 274-276.

80. Горшина Е.С., Русинова Т.В., Бирюков В.В., Морозова О.В., Шлеев C.B., Ярополов А.И. Динамика оксидазной активности в процессекультивирования базидиального гриба рода Trametes Fr. // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. №6. С. 638-644.

81. Горшина, Е.С. Грибы рода Trametes FR. как объекты биотехнологии / Е.С. Горшина // Современная микология в России (второй съезд микологов России). Том 2. 2008. С. 328-329.

82. Грушников О.П., Елкин В.В. Достижения и проблемы химии лигнина. М., «Наука», 1973. 296 с.\

83. Давыдкина Т.А. Стереумовые грибы Советского союза. Л.: Наука, 1980. 143 с.

84. Двориииа A.A. Базидиальные съедобные грибы в искусственной культуре. Кишинев: Штиинца, 1990. 111 с.

85. Денисова Н.П. Протеолитические ферменты базидиальных грибов, таксономические и экологические аспекты их изучения: автореф. дисс. канд. биол. наук. 1991. 31с.

86. Денисова Н.П. Лечебные свойства грибов. Этномикологический очерк. СПб.: СПбГМУ, 1998. 59 с.

87. Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. Влияние неорганического соединения селена на рост и плодоношение грибов // Сб. тр. науч. конф. спец. сельского хоз-ва. Пенза, 1997. С. 84-85.

88. Денисова (Ильина) Г.В. Влияние неорганических соединений селена на рост и развитие базидиальных макромицетов: дисс. канд. биол. наук. М., 1999. 130 с.

89. Денисова (Ильина) Г.В., Блинохватов А.Ф., Иванов А.И. Способ стимулирования роста посевного мицелия шампиньона // Патент на изобретение № 213641. М., 1999. 4 с.

90. Демидчик В.В., Соколик А.И., Юрин В.М. Поступление меди в растения и распределение в клетках, тканях и органах // Успехи современной биологии. 2001. Т. 121. С. 190-197.

91. Дзыгун Л.П., Дудка И.А. Влияние твёрдых добавок на рост Laetiporus sulphureus в глубинной культуре // Микология и фитопатология. 2008. Т. 42, вып. 3. С. 232-239.

92. Диксон М., Уэбб Э. Ферменты. Пер. с англ. М.: Мир, 1982. 960 с.

93. Добровольский В.В. Роль органического вещества почв в миграции тяжелых металлов //Природа, 2004. №7. С. 35-39.

94. Довженко Н.В., Куриленко A.B., Бельчева H.H., Челомин В.П. Окислительный стресс, индуцированный кадмием, в тканях двухстворчатого моллюска Modiolus modiulus // Биология моря. 2005. Т. 31. №5. С. 358-362.

95. Древаль К.Г., Бойко С.М. Динамика экзо- и эндоглюканазной активности некоторых высших дереворазрушающих грибов в зависимости от источника углерода в питательной среде // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. № 1. С. 77.

96. Дроздова Т.Н., Белова Н.В. Ферментный спектр некоторых грибов семейства Polyporaceae // Микология и фитопатология. 1982.Т. 18, вып. 1. С. 33-36.

97. Дудка И.А., Бисько H.A., Билай В.Т. Культивирование съедобных грибов. Киев, 1992. 160с.

98. Дудкин М.С., Громов B.C., Ведерников H.A. Гемицеллюлозы. Рига: «Зинатне», 1991. 488 с.

99. Дьяков Ю.Т. Ботаника: Курс альгологии и микологии. М.: МГУ, 2007. 559 с.

100. Егоров Н.С., Самуилов В.Д. Биотехнология. Книга 1. Проблемы и перспективы. М., 1987. 159 с.

101. Егоров Н.С. Биотехнология. Книга 2: Современные методы создания промышленных штаммов микроорганизмов. М.: Высшая школа, 1988. 208 с.

102. Егоров Н.С., Баранова H.A., Крейер В.Г. Микробные ингибиторы ферментов биосинтеза и этерификации холестерина // Антибиотики и химиотерапия. 1999. №5. С. 38-44.

103. Ежов В.М., Валуйко Г.Г., Луканин О.С., Клечак И.П. Биологические основы выработки белка и пектина из отходов переработки плодов винограда. Киев: Урожай, 1993. 120 с.

104. Елтаренко Е.А. Оценка и выбор решений по многим критериям. Учебное пособие. М.: МИФИ, 1995. 112 с.

105. Ермаков В.В., Ковальский В.В. Биологическое значение селена. М.: Наука, 1974. 298 с.

106. Жаков С.И. Климат: Природа Пензенской области. Саратов: Приволж. кн. изд., 1970. С. 47-82.

107. Завьялова Л.А., Чистякова Е.Л., Инсарова И.Д., Антимонова A.B. Штаммовое разнообразие трутовика лакированного Ganoderms lucidum // Микология и фитопатология. 2005. Т. 39, вып 1. С. 27—34.

108. Закис Г.Ф. Функциональный анализ лигнинов и их производных. Рига: Зинатне, 1987. 230 с.

109. Замолодчиков Д.Г., Уткин А.И., Коровин Г.Н. Конверсионные коэффициенты фитомасса/запас в связи с дендрометрическими показателями и составом древостоев // Лесоведение. 2005. N 6. С. 73—81

110. Змитрович И.В., Псурцева Н.В., Белова Н.В. Эволюционно-таксономические аспекты поиска и изучения лигнинразрушающих грибов — активных продуцентов окислительных ферментов // Микология и фитопатология. 2007. Т.41, вып. 1. С. 57—78.

111. Иванов А.И. Агариковые грибы-ксилотрофы Пензенской области //Микологияи фитопатология. 1981. Т. 15, вып. 3. С. 192—197.

112. Иванов А. И. К флоре агариковых грибов Пензенской области // Нов. сист. низш. раст. Т. 19. 1982. С. 49-55.

113. Иванов А.И. Макромицеты дубрав Пензенской области. I. Ксилотрофы // Микология и фитопатология. 1985. Т. 19, №5. С. 383-388.

114. Иванов А.И. Макромицеты ивняков и ольшаников поймы реки Суры II Микология и фитопатология. 1989. Т.23, вып. 4. С. 322-327.

115. Иванов А.И. Биота макромицетов лесостепи правобережного Поволжья: дисс. доктора биол. наук. М., 1992. 289с.

116. Иванов А.И., Блинохватов А.Ф. О роли базидиальных макромицетов в трансформации ультрамикроэлементов в экосистемах. 1. Биоабсорбция селена // Микология и фитопатология. 2003. Т. 37, вып. 1. С. 10-1 у.

117. Иванов А.И., Блинохватов А.Ф., Денисова Г.В., Ильин Д.Ю. Влияние соединений селена на рост и развитие грибов. II. Макромицеты // Микология и фитопатология. 2000. Т. 34, вып. 5. С. 46-50.

118. Иванов А.И., Ильина Г.В., Скобанев A.B., Скобанев Ар. В. Эколого-биологическая характеристика видов рода Trametes в условиях Пензенской области // Микология и фитопатология. 2010. Том 44, вып. 3. С. 197—204.

119. Ильин Д.Ю. Влияние селена на рост и развитие микромицетов-продуцентов биологически активных веществ: Дисс. на соискание. канд. биол. наук. М., 2001. 126 с.

120. Ильин Д.Ю. Влияние селена на рост и развитие микромицетов-продуцентов биологически активных веществ: автореф. дисс.канд. биол. наук. М., 2001. 22 с.

121. Ильин Д.Ю.1, Блинохватов А.Ф., Денисова (Ильина) Г.В., Иванов А.И., Тыщенко А.Ф., Сергеева Н.В., Михалева Т.В., Полунина Е.Е. Способ интенсификации биосинтеза гелиомицина // Патент на изобретение №2157848. М., 2000. 12 с.

122. Ильин Д.Ю., Блинохватов А.Ф., Ильина Г.В., Иванов А.И. Способ хранения культур микроорганизмов // Патент на изобретение №2185435. М>, 2002. 14 с.

123. Ильин Д.Ю., г Ильина Г.В. Использование элемента селена при длительном хранении культур микроорганизмов // Охрана растительного иживотного мира Поволжья и сопредельных территорий. Пенза, 2003. С. 114-115.

124. Ильина Г.В., Гарибова Л.В., Ильин Д.Ю. Роль изучения штаммового полиморфизма в раскрытии природного потенциала ксилотрофных базидиомицетов // Изучение грибов в биоценозах. Пермь: РИО ПГПУ, 2009. С. 97-101.

125. Ильина Г.В., Сашенкова С.А. Опыт использования соединений селена при производственном культивировании некоторых съедобных грибов // Физиология и биохимия культивируемых грибов. Саратов: СГУ, 2002. С. 20-21.

126. Ильина Г.В. Интенсивность накопления мицелиальной биомассы ксилотрофных базидиомицетов в глубинной культуре в зависимости от параметров культивирования // Высшие базидиальные грибы: индивидуумы, популяции, сообщества. М, 2008. С. 188-189.

127. Ильина Г.В., Ильин Д.Ю., Лыков Ю.С. Роль специфики лигноцеллюлозных субстратов при культивировании ксилотрофных грибов in vitro // Микология и фитопатология. 2009.Т.43, вып. 2. С. 135140.

128. Каламеэс К. А. Положение грибных группировок в структуре экосистем // Изучение грибов в биогеоценозах. Л.: Наука, 1977. С. 6—7.

129. Камзолкина О. В. Цитологические исследования гомокариотических и гетерокариотических штаммов Agaricus bisporus (J. Lange) Imbach //Микробиология. 1996. T. 2. № 65. С. 228-234.

130. Камзолкина О.В., Ершова Е.Ю., Тихонова О.В., Биланенко E.H., Ефременкова О.В. Макро- и микроморфология штаммов Laetiporus siilphureiis II Микология и фитопатология. 2007. Т 41., вып. 2. С. 208-216.

131. Т. 26, вып. 6. С. 486-492.

132. Карапетян А.Р., Автономова A.B., Краснопльская Л.М. Биологически активные полисахариды базидиальных грибов // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты. М., 2007. С. 24-33.

133. Каталог коллекцн культур шапинкових гриб1в (ЮК) / Бухало A.C., митропольска Н.Ю. Кшв: 1нститут боташки iM. М.Г. Холодного HAH1. Украши. 2001.40 с.

134. Клёсов A.A., Черноглазое В.М., Ермолова О.В. Влияние лигнина на ферментативный гидролиз лигноцеллюлозных материалов //Биотехнология. 1985. Т.З. С. 106-112.

135. Клечак И.Р., Антоненко Л.А., Крысюк Ю.С. Активность внеклеточных ферментов дереворазрушающих базидиомицетов Coriolus QUEL (Trametes FR.) на различных • источниках углерода и азота // Иммунопатология, аллергология; инфектология. 2010. № 1. С. 253.

136. Коваленко А.Е. Экологический обзор грибов из порядков Polyporales s.str., Boletales, Agaricales s.str., Russulales в горных лесах центральной части Западного, Кавказа // Микол. и фитопатол. 1980. Т. 14, вып. 4. С. 300-314.

137. Ковальский В.В., Раецкая Ю.И., Грачева Т.И. Микроэлементы в . растениях и кормах. М., 1971. 64 с.

138. Кожемякина Н.В., Турина C.B., Ананьева Е.П. Глубинное культивирование некоторых базидиомицетов // Второй съезд микологов России «Современная микология России». Том 2. Mi: Национальная академия микологии, 2008. С. 330.

139. Королёва О.В. Лакказы базидиомицетов: свойства, структура; механизм действия и практическое применение: автореф. дисс. докт. биол. наук. М., 2006:24 с.

140. Костина E.F., Атыкян H.A., Чигажева Н.Д., Ревин В.В. Биодеградация дизельного топлива' при совместном культивировании Lentinus tigrinus и Rhodococcus erythrópolis II. Иммунология, аллергология, инфектология. 2009. №1. С. 184-185:

141. Костычев A.A. Биоабсорбция тяжелых металлов и мышьяка агарикоидными и гастероидными базидиомицетами: автореф. дисс.канд. биол. наук. М., 2009. 23 с.

142. Кочкина Г.А. Европейские коллекции культур: микробное разнообразие в надежных руках 7/ Микология и фитопатология. 1996. Т. 30, вып. 1. С. 62-63.

143. Кочкина Г.А.,, Иванушкина H.E., Озерская С.М. Антимикробные свойства базидиального гриба Lentinula edodes (Berk.) Pegler // Материалы III Междунар. конгр. "Наука и практика грибоводства". Россия,, Кашира, 1996. С. 87-89.

144. Красная книга Пензенской области. Т. 1. Растения и грибы. Пенза, 2002. 159 с.

145. Красная книга Российской Федерации. М.: ACT, 2002. 864 с.

146. Краснопольская JI.M., Белицкий И.В., Федорова Г.Б., Катруха Г.С. Pleurotus djamor: способы культивирования и антивирусные свойства // Микология и фитопатология. 2001. Т. 35, вып 1. С. 62-67.

147. Краснопольская JI.M., Белицкий И.В., Антимонова A.B. и др. Культивирование гриба Ganoderma lucidum (Curt.rFr.) Р. Karst и оценка его биотехнологической активности // Медико-фармацевтический форум. М., 2002. С. 172-173.

148. Крутов В.И., Минкевич И.И. Грибные болезни древесных пород. Петрозаводск, 2002. 196 с.

149. Кудрин А.Н. Научные основы применения неорганических и органических соединений селена в медицинской практике // Витамины. 1975. Вып. 8. С. 128-134.

150. Кулаева О.Н. Новые направления в физиологии растений. М.: Наука, 1985. С. 62-83.

151. Кузнецов К.А. Почвы // Природа Пензенской области. Саратов: Приволж. кн. изд., 1970. С. 114-129

152. Курнаев С.Ф. Основные типы леса средней части Русской равнины. М.: Наука, 1968. 335 с.

153. Курсанов Л.И. Микология. М., 1940. 480 с.

154. Лабораторные методы исследований в клинике: справочник / Под ред. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987. 368 с.

155. Лугаускас А., Репечкене Ю. Коллекция миромицетов лаборатории изучения биодеструкторов института ботаники Литвы // Современная микология в России. 2002. Т.1. С. 136.

156. Левит М.Н., Шкроб A.M. Лигнин и лигниназа // Биоорганическая химия: обзорные статьи. 1992. № 3. С. 309-345.

157. Лилли В., Барнетт Г. Физиология грибов. Пер. с англ. М.: Мир, 1975. 553 с.

158. Липатова В.В. Растительность пойм // Растительность европейской части СССР. Л.: Наука, 1980. С. 346-359.

159. Манская С.М., Кодина Л.А. Геохимия лигнина. М.: «Наука», 1975. 232 с.

160. Маслова P.A. Влияние различных источников азота на рост дереворазрушающих грибов в культуре // Микология и фитопатология. 1969. Т. 3, вып. 5. С. 452-457.

161. Маслова P.A. Рост афиллофоровых грибов на средах с различными источниками углеродного питания // Микология и фитопатология. 1973. Т.7, вып. 2. С. 95-101.

162. Мерзликина E.H. Геологическое строение // Природа Пензенской области. Саратов, 1970. С. 42-82.

163. Методы экспериментальной микологии / Под ред. Билай В.И. Киев, 1982. 550 с.

164. Мехтиева H.A., Рабкрин H.A. Значение явления серно-селенового антагонизма в развитии почвенных гифомицетов и накопление ими селена / Селен в биологии. Баку: Элм, 1981. С. 252-255.

165. Мильков Ф.Н. Среднее Поволжье: Физико-географическое описание. М.- Л.: Изд-во АН СССР, 1969. 263 с.

166. Миркин Б.М. Теоретические основы современной фитоценологии. М.: Наука, 1985. 126 с.

167. Мирчинк Т.Г. Почвенная микология. М.: МГУ, 1976. 206 с.

168. Морозкина Т.С., Мойсеенок А.Г. Витамины: Краткое руководство для врачей и студентов мед., фармацевт, и биол. специальностей. Минск: ООО «Асар», 2002. 112 с.

169. Мосин О.В. Сырьевые ресурсы в биотехнологии. М., 2002. 96 с.

170. Мурашкинскин К. Е. Горно-таежные трутовики Сибири // Тр. Омского сельскохозяйственного института им. С. М. Кирова, 1939. Т. 27. С. 75—108.

171. Мухин В.А. Роль базидиальных дереворазрушающих грибов в лесных биогеоценозах// Лесоведение. 1981. №1. С. 46—53.

172. Мухин В.А. Флора и экология ксилотрофных базидиомицетов предлесотундровых редколесий Северного Приобья. Препринт. Свердловск: УНЦ АН СССР, 1985. 70 с.

173. Мухин В. А. Флора ксилотрофных базидиальных грибов предлесотундровых редколесий Северного Приобья // Микология и фитопатология. 1987. Т. 21, вып. 2. С. 130-134.

174. Мухин В.А. Экологические закономерности формирования и структуры биоты ксилотрофных базидиомицетов Западно-Сибирской равнины: автореф. дисс. доктора биол. наук. М, 1990. 32 с.

175. Мухин В .А. Биота ксилотрофных базидиомицетов Западно-Сибирской равнины. Екатеринбург: Наука, 1993. 231 с.

176. Негруцкий С.Ф. Физиология и биохимия низших растений. Киев: Выща школа, 1990. 200 с.

177. Низковская О.Н. Противоопухолевые свойства высших базидиомицетов // Микология и фитопатология. 1983. Т. 17, вып. 1. С. 243-247.

178. Никитин В.М., Оболенская A.B., Щёголев В.П. Химия древесины и целлюлозы. М.: Лесная промышленность, 1978. 80 с.

179. Никитин С.И. Чувствительность Pleurotus ostreatus к нистатину //Материалы юбилейной конференции, посвященной 85-летию кафедры микологии и альгологии МГУ им. М.В. Ломоносова. М., 2004. С. 101—102.

180. Никитина В.Е., Цивилева О.М., Гарибова Л.В. Стимуляторы лектиновой активности Lentinus edodes на синтетических агаризованных средах // Биотехнология. 2004. № 3. С. 49-54.

181. Никитина О.В. Внеклеточные оксидоредуктазы лигнинолитического комплекса базидиального гриба Trametes pubescens II Вестн. Моск. Ун-та. сер. 2. Химия. 2005. Т. 46. № 4. С. 267-273.

182. Никитина О.В. Внеклеточные оксидоредуктазы лигнолитического комплекса базидиального гриба Trametes pubescens (Shumach.) Pilât.: афтореф. на соискание канд. биол. наук. М., 2006. 26 с.

183. Николайчук Л.Ф., Шубина Е.Е., Розенцвет O.A., Козлов В.Г. Влияние ионов меди, свинца и кадмия на рост мицелия и состав липидов Pleurotus ostreatus II Микология и фитопатология. 2005. Т. 39, вып. 2. С. 56-61.

184. Оболенская A.B., Ельницкая З.П., Леонович A.A. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы: учебное пособие для вузов. М.: Экология, 1991. 320 с.

185. Обрезкова Н.В., Белова Н.В., Шамолина И.И., Плотникова О.Д. Возможности использования базидиальных грибов в биотехнологии переработки твёрдых отходов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2010. № 1. С. 261.

186. Овчинников Ю. А. Биоорганическая химия. М.: Просвещение, 1987. 815 с.

187. Одум Ю.Р. Экология. Т. 1. Пер. с англ. М.: Мир, 1986. 325 с.

188. Озерова Н.С. Экологические особенности ксилотрофных базидиомицетов родов LaetiporusMurrlM и Ganoderma Р. Karst.: автореф. дисс.канд. биол. наук. М., 2006. 21 с.

189. Озерская С .М: Биоразнообразие организмов: Роль центров1 микробных ресурсов// Микология и фитопатология. 1996. Т.ЗО, вып. 5.-6. С. 81—84.

190. Озерская С. М. Кочкина Г. А., Иванушкина Н. Е., Заиромегова К. М., Еремина С. С. Коллекции грибов России // Современная микология в России. Т.1. С. 138.

191. Озерская С.М., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е., Василенко А.Н. / Fungalds: база данных о разнообразии грибов в коллекциях культур

192. Иммунопатология^ аллергология, инфектология. 2010. №1. С. 49.

193. Орлов Д.С. Химия почв. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1992. 399 с.

194. Пармасто Э.Х. „Определитель рогатиковых грибов СССР. M.- JL: Изд-во «Наука», 1965. .167 с.

195. Пармасто Э.Х. , Трутовые грибы Севера Советского Союза ; //Микология и фитопатология. 1967. Т. 1, вып. 4. С. 280-286.

196. Паршин А;А., Надежина О.С., Кадималиев Д.А., Атыкян H.A. . Деструкция фенола грибом «белой, гнили» Lentinus tigrinus И Современнаямикология в России. М., 2008. С. 337—338.

197. Пензенская лесостепь: учебное пособие по экологии для . общеобразовательных учебных заведений / под ред. Т.А. Чернецовой.

198. Пенза: ИПК и ПРО, 1999. 176 с.

199. Постнова E.JI. Исследование внутривидового полиморфизма, штаммов 2 . .Ganoderma lucidum, (W. Curtis: FR.) P. Karst.: автореф. дисс.канд. биол. 2 наук. М., 2009. 21 с.

200. Псурцева Н.В., Белова Н.В., Алехина И.А. Биотехнологические . возможности использования коллекционных культур базидиомицетов

201. Биотехнология. 1994. № 7. С. 35-39.

202. Псурцева Н.В., Шахова Н.В., Шевченко М.В. Поиск и изучение культур базидиомицетов активных продуцентов окислительных ферментов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2010. № 1, С. 263.

203. Рабинович М.Л., Мельник М.С. Прогресс в изучении целлюлолитических ферментов и механизм биодеградации высокоупорядоченных форм целлюлозы // Успехи биологической химии. Т. 40.2000. С. 205-266.

204. Рагимова М.М., Мурадов П.З. Биосинтез окислительных ферментов ксилотрофными. базидиальными грибами семейства Coriolaseae Иммунопатология; аллергология, инфектология. 2010. № 1. С. 264—265.

205. Райтвийр А.Г. Определитель гетеробазидиальных грибов (Heterobasidiomycetidae) СССР. Л., Наука, 1967. 114 с.

206. Рахмакулова З.Ф., Федяев В.В., Абдуллина O.A., Усманов И.Ю. Формирование адаптационных механизмов у пшеницы и кукурузы к повышенному содержанию цинка // Вестник Башкирского университета. 2008 Т. 13. № 1.С: 43-46.

207. Ребриков Д.Н., Степанова Е.В., Королёва О.В. Лакказа лигнинолитического гриба Trametes hirsuta: очистка и характеристика фермента, клонирование и первичная структура гена // Прикладная биохимия и микробиология. 2006. № 6. С. 645-653.

208. Рекомендации по выращиванию грибов вешенки. М., 1983. 25 с.

209. Решетникова, И.А. Поиск грибов - продуцентов пероксидазы // Микология и фитопатология. 1992. Т. 26, вып. 5. С. 383-387.

210. Решетникова И.А. Деструкция лигнина ксилотрофными макромицетами. Накопление селена и фракционирование его изотопов микроорганизмами. М., 1997. 197 с.

211. Рипачек В. Биология дереворазрушающих грибов. М.: Лес. пром., 1967. 275 с.

212. Ровбель Н.М. Физиолого-биохимические свойства базидиальных грибов сорбентов тяжелых металлов. М., 2006. 187 с.

213. Ровбель Н.М., Гончарова И,А., Смирнов Д.А. Оценка сорбционной активности глубинной биомассы высших базидиальных грибов по отношению к ионам меди // Микология и фитопатология. 2004. Т. 38, вып. 4, С. 73-77.

214. Русинова Т.В. Разработка технологии биосинтеза фермента лакказы базидиальными грибами рода Trametes: автореф. дисс. канд. техн. наук. М., 2007. 20 с.

215. Русинова Т.В., Сальцова И.Ю., Батуринец A.A. Изучение влиянияиндукторов на синтез лакказы промышленным штаммом Trametes hirsuta

216. CF-28 // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2009. № 2. С. 204:. 205.

217. Салманова Л.С., Соболевская Т.Н. Питательная среда для культивирования продуцента цитолитических ферментов / Патент на изобретение №94003762/13. М., 1994. 12 с.

218. Сафонов М.А. Структура сообществ ксилотрофных грибов. Екатеринбург: УрО РАН, 2003. 269 с.

219. Сафонов М.А. Афиллофороидные грибы, обитающие на широколиственных породах на южном Урале и южном Приуралье // Вестник ОГУ. 2006. №5. С. 102-106.г354

220. Семерджиева М. Генетический анализ мицелиальных культур гименомицетов//Микология и фитопатология. 1977. Т. 11, вып. 3. С. 199— 205.

221. Семерджиева М. Методы лабораторного культивирования некоторых базидиомицетов// Микология и фитопатология. 1984. Т. 18, вып. 4. С. 339345.

222. Сенюк О.Ф., Горовой Л.Ф., Курченко В.П. Защита генома и возможности грибной биотехнологии // Современная микология в России. М., 2008. С. 340'.

223. Сидоренко М.Л., Ефремова Н.Ю. Гуминовые кислоты как стимуляторы роста грибов // Современная микология России. Том 2. М.: Национальная академия микологии, 2008. С. 341.

224. Сидорова И.И. Макросистема грибов: методология и изменения последнего десятилетия. М.: «Национальная академия микологии»; «Медицина для всех», 2003. 496 с.

225. Синадский Ю.В. Курс лекций по лесной фитопатологии. М.: Изд-во Московского гос. ун-та, 1977. 214 с.

226. Синицын А.П., Гусаков A.B., Черноглазов В.М. Биоконверсия лигноцеллюлозных материалов: учебное пособие. М.: МГУ, 1995. 224 с.

227. Скобанев A.B. Ксилотрофные базидиомицеты (Basidiomycota) Пензенской области и накопление тяжелых металлов и мышьяка их базидиомами: дисс.канд. биол. наук. М., 2010. 118 с.

228. Смирнова О.В., Попадюк Р.В., Яницкая Т.О., Ханина Л.Г. Флористический и эколого-ценотический анализ широколиственных лесов // Восточноевропейские широколиственные леса. М: Наука, 1994. С. 30-48.

229. Смирнова О.В., Ханина Л.Г. Смирнов В.Э. Эколого-ценотические группы в растительном покрове лесного пояса Восточной Европы1 //Восточноевропейские леса: история в голоцене и современность. М., 2004. С. 165-175.

230. Солянов: A.A. Растительный покров / В кн.: Природа Пензенской области. Саратов, 1970. С: 99-102.

231. Ставишенко И.В. Сукцессии ксилотрофных грибов в лесных формациях Висимского заповедника. // Экология процессов биологического разложения древесины. Екатеринбург, 2000. С. 16—30.

232. Степанова Л.В. Выделение и характеристика мицелиального лектина базидиомицета Grifólafi-ondosa (Fr.) S.F. Gray: автореф. дисс.канд. биол. наук. Саратов, 2008.26 с. . .

233. Степанова Н.Т., Мухин В.А. Основы экологии дереворазрушающих . грибов. М.: Наука, 1979. 100 с.

234. Стороженко В.Г., Бондарцева М.А., Соловьёв В.А. Научные основы устойчивости лесов к дереворазрушающим грибам. М.: Наука, 1992. 221 с.

235. Стороженко В.Г. Гнилевые фауты коренных лесов Русской равнины. М. Изд-во ВНИИЛМ. 2002. 156 с.

236. Стороженко , В.Г. Устойчивые лесные сообщества. Теория и эксперимент. Тула: Гриф и К. 2007. 192 с.

237. Тадаши Г., Мелик-Оганджанян Р.Г., Мнацаканян В.А. Изучение и использование свойств гриба Ganoderma lucidum (Pr.) Karst в современной медицинской практике // Альтернативная медицина. М., 1998. С. 29-36.

238. Тишенков, А. Д. Стерильная технология культивирования вешенки и других ксилотрофных видов грибов // Школа грибоводства. 2000: № 3(3). С. 6-13.

239. Трояновская Л.П., Белогуров А.Н., Польских C.B. Практическое применение мицелия высших базидиальных грибов (Lentinus edodes и

240. Ganoderma lucidum) в птицеводстве // Современная микология в России. М., 2008. С. 43-44.

241. Фенгел Д. Древесина (химия, ультраструктура, реакции): Пер. с англ. М.: Лесная промышленность, 1988. 512 с.

242. Феофилова Е.П Биохимическая адаптация грибов к температурному стрессу: обзор // Микробиология. 1994. Т. 63, № 5. С. 757-776.

243. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Горнова И.Б. Изменения в углеводном составе клеток грибов в связи с адаптацией к температурному стрессу II Микробиология. 1994. Т. 63, № 5. С. 792-798.

244. Феофилова Е.П. Использование высших базидиальных грибов для создания лекарственных препаратов // Матер. III Междунар. конгр. "Наука и практика грибоводства". Россия, Кашира, 1996. С. 17—20.

245. Феофилова Е.П. Прогресс в области экспериментальной микологии как основа для создания современных биотехнологий // Микробиология. 1997. Т. 66, № 3. С. 302-309.

246. Феофилова Е.П. Современные направления в изучении биологически активных веществ базидиальных грибов: Обзор // Прикл. биохим. и микробиол. 1998. Т. 34, № 6. С. 597-608.

247. Феофилова Е.П., Горнова И.Б., Меморская A.C., Гарибова Л.В. Липидный состав плодовых тел и глубинного мицелия Lentinus edodes (Berk.) Sing .Lentinula edodes (Berk.) Pegler. II Микробиология. 1998. Т. 67, № 5. С. 655-659.

248. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Меморская A.C., Хохлова Н.С. О различных механизмах биохимической адаптации мицелиальных грибов к температурному стрессу: изменения в составе липидов // Микробиология. 2000. Т. 69, вып. 5. С. 612-619.

249. Феофилова Е.П. Царство грибов: гетерогенность физиолого-биохимических свойств и близость к растениям, животным и прокариотам: обзор // Прикл. биохим. и микробиол. 2001. Т. 37, № 2. С. 141-155.

250. Феофилова Е.П. Хитин грибов: распространение, биосинтез, физико. химические свойства и перспективы использования. М.: Наука, 2002.365 с.

251. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Гарибова Л.В'., Завьялова Л.А., Меморская A.C., Марышова Н.С. Прорастание базидиоспор Agaricus bisporus //Прикл. биохим. и микробиол. 2004. Т. 40, № 2. С. 220-226.

252. Фомина В.И., Бисько H.A., Митропольская Н.Ю., Трухоновец В.В. Зависимость роста мицелия и плодоношения Lentinus edodes от субстрата //Микология и фитопатология. 1999. Т. 33, вып. 6. С. 406—411.

253. Фрейденберг К. К вопросу о химии и биогенезе лигнина. / В кн.: Химия и биохимия лигнина, целлюлозы и гемицеллюлоз. Пер. с англ. М.: Мир, 1969. 334 с. ;

254. Халафян A.A. Statistica 6. Статистический анализ данных. М.: ООО «Бином-Пресс», 2007. 512 с.

255. Цивилёва О.М., Никитина В.Е., Гарибова Л.В. Использование двухвалентного марганца при получении посевного мицелия Lentinus edodes II Микология и фитопатология. 2006.Т. 40, вып. 2. С. 142—145.

256. Цивилева О.М., Никитина В.Е., Панкратов А.Н., Древко Б.И., Лощинина Е.А., Гарибова Л.В. Влияние селенсодержащего препарата ДАФС-25 на рост и лектиновую активность Lentinus edodes И Биотехнология! 2005. № 2. С. 56-62.

257. Цивилева О.М. Внеклеточные лектины lentinus edodes: характеристика, свойства и предполагаемые функции: автореф. дисс.докт. биол. наук. Саратов, 2008. 44 с.

258. Чаевцев Д.А. Роль дереворазрушающих грибов в деградации дубравных экосистем Среднего Поволжья: дисс.канд. биол. наук. СПб., 1998. 160 с.

259. Частухин В. Я. Экологический анализ распада растительных остатков в еловых лесах // Почвоведение. 1945. № 2. С. 102-114.

260. Частухин В.Я., Николаевская М.А. Биологический распад и ресинтез органических веществ в природе. Л., 1969. 325 с.

261. Черноок Т.В., Гвоздкова Т.С., Щерба В.В., Филимонова Т.В., Осадчая О.В. Физиолого-биохимические аспекты образования липидов высшими мицелиальными грибами //Современная микология в России.i М., 2008. С. 152.

262. Шапиро Д.К. Практикум по биологической химии. Минск: Вышейша школа, 1976. 288 с.

263. Шахсеванимуджарад Л.А., Гасымов Ш.Н., Аттаргусейни М.Ю., МурадовП.З., Алиева В. Дж. Роль ксилотрофных базидиомицетов в комплексном использовании растительных ресурсов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2010. № 1. С. 274.

264. Шеляг-Сосонко Ю.Р. О конкретной флоре и методе конкретных флор // Бот. журн. 1980. Т. 65. №6. С. 761-774.

265. Шиврина А.Н. Биологически активные вещества высших грибов. М.-Л.: Наука, 1965. 199 с.

266. Шиврина А.Н., Низковская О.П., Фалина H.H., Маттисон Н.Л., Ефименко О.М. Биосинтетическая деятельность высших грибов. Л., 1969. 199 с. '

267. Шлеев С.В., Зайцева Е.А., Горшина Е.С., Морозова О.В. Спектральное и электрохимическое изучение лакказ базидиальных грибов // Вестн. Моск. Ун-та. Сер. 2. Химия. 2003. Т. 44. №1. С. 35-39.

268. Шнырева А.В. Иммуномодулирующие свойства полисахаридов высших базидиальных грибов // Успехи медицинской микологии. Т. 3. М.: Национальная академия микологии, 2004. С. 189-192. v

269. Шубин В.И. Микотрофность древесных пород. JL: Наука, 1973. 262 с.

270. Юрин В.М. Основы ксенобиологии: учебное пособие Минск: БГУ, 2001.234 с.

271. Ячевский А.А. Паразитные грибы русских лесных пород. Пособие для лесничих и лесоводов. СПб., 1897. 150 с.

272. Ячевский А.А. Определитель грибов. I. Совершенные грибы. СПб., 1913. 934 с.

273. Ainsworth D.C., Hawksworth D.L., Sutton B.C. Ainsworth and Bisby'sdictionary of the fungi 9th edition . D.C. Surrey: C.A.B, 2001. 655 p.

274. Alberts A.W., Chen J., Kuron G. Mevinolin, a highly potent competitive inhibitor of hydroxymethyl-glutaryl coenzyme A reductase and cholesterol-lowering agent // Proc Natl Acad Sci USA 1980.V. 77. P. 3957-3961.

275. Ander P., Erikksson K.E. Lignin degradation and utilization by microorganisms // Progress Industrial. Microbiol. Elsevier Scient. Publ. Comm. Oxford. N.-Y.1987.V.41. P. 1-58.

276. Asada Y., Watanabe A., Ohtsu Y., Kuwahara M. Purification and characterization of an aryl-alcohol oxidase from the lignin-degrading basidiomycete Phanerochaete chiysosporium // Biosci. Biotech. Biochem. 1995. V. 59, № 7. P. 1339-1341.

277. Asiegbu F.O., Adomas A., Stenlid J. Pathogen profile. Conifer root and butt rot caused by Heterobasidion annosum (Fr.) Bref. s.l // Molecular Plant Pathology. 2005. V.6. P. 395-409.

278. Babitskaya V.G. Biologically active substances of mycelia and fruiting bodies of mushrooms Lentinus Fr. and Pleurotus (Fr.) P. Karst. // Intern. J. Med. Mushrooms. 2001. V. 3, №4. C. 42-43.

279. Barceloux D.G.'.Selenium \U Clin. Toxicol. 1999. V. 37. P. 145-172.305*. Bard M. Biochemical and genetic aspects of nystatin resistance in Schizosaccharomyces cerevisae // J. Bacterial. 1972. V. 111. P. 649-657.

280. Berry D.R.The environmental control of the physiology of filamentous fungi //Industrial Mycology. 1975. V. l.P. 16-32.

281. Bettger W.J. Zinc and selenium, site-specific versus general antioxidation // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1993. V. 71, № 9. P. 721-724.

282. Birkett J.A., Rowlands R.T. Chlorate resistance and nitrate assimilation in industrial strains of Pénicillium chnysogenum II J. Gen. Microbiol. 1981. №123. P. 281-285.

283. Blanchette R.A. Manganese Accumulation in Wood Decayed by White Rot Fungi // Ecology and Epidemiology. 1984. Vol. 74, N.6. P. 725-730.

284. Blanchette R.A. Delignification by wood-decay fungi // Annual Review of Phytopathology. 1991. P. 381-398.

285. Blessing C. A., Urginova G. T., Goodson H. V. Actin and ARPs: action in the nucleus // Trends Cell Biol. 2004.V. 14. P. 435-^142.

286. Bobek P., Galbavy S. The oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) effectively prevents the development of atherosclerosis in rabbits // Ceska Slov. Farm. 1999. V. 48. №5. P. 226-230.

287. Boh B., Hodzar D., Dolnicar D., Berovic M., Pohleven F. Isolation and . quantification of, triterpenoid acids from Ganoderma applanatum of Istrian Origin // Food technol. biotechnol. 2000. V. 38 (1). P. 11-17.

288. Bourbonnais R., Paice M.G. Oxidation of nonphenolic substrates an expanded role for laccase in lignin biodégradation // FEBS Lett. 1990. V. 267. P. 99-102.

289. Breene W.M. Nutritional and Medicinal Value of Specialty Mushrooms II Journal of Food Protection. 1989. V. 53(10). P. 883-894.

290. Bulder C.J.E.A. Anaerobic growth, ergosterol content and sensitivity to a polyene antibiotic of the yeast Schizosaccharomyces japonicus II Anionic von Leewenhock. V. 37,1971. P. 353-358.

291. Burnett J.H. Fundamentals of mycology. London: Edward, 1976. 673 p.

292. Buswell J.A., Mollet B., Odier E. Ligninolytic enzyme production by Phanerochaete chiysosporium under conditions of nitrogen sufficiency // FEMS Microbiol. Lett. 1984. V. 25. P. 295-299.

293. Buswell J.A., Odier E. Lignin biodégradation // CRC Crit. Rev. Biotechnol. 1987. V. 6. P. 1-60.

294. Campbel W. The biological decomposition of wood // Wood Chemistry. 1952. V 2. P. 1061-1116.

295. Cancer Research UK. www.cancerresearchuk.org. 2002. V. 7. P. 236—239.

296. Chen, C. L., Chua. M. G. S., Evans, J. E., Chang, H. M. and Kirk, T. K-1981, Chemistry of Lignin Biodégradation by Phanerochaete chrysosporium II The Ekman Days, Int. Symp. Wood Pulp. Chem., Stockholm; 1981. V. 3. P. 75-87.

297. Chen M.M. The Polyporaceae flora of the Sino-Himalaya // Geological and Ecological Studies of Qinghai-Xizhang Plateau. 1981. Vol. II Science Press, Beijing. P. 1173-1178.

298. Cheung W.M., Hui W.S., Chu P.W., Chiu S.W., Ip N.Y. Ganoderma extract activates MAP kinases and induces the neuronal differentiation of rat pheochromocytoma PC12 cells // FEBS Lett. 2000. V. 486. P. 291-296.

299. Choundry S., Panda S.K. Induction of oxidative stress and ultrastructural changes in moss Taxithelium nepalense (Schwaegr.) Broth, under lead and arsenic phytotoxity // Current science. 2004. Vol. 87. № 3. P. 342-348.

300. Collin-Hansen C. First report of phytochelatins in a mushroom: induction of phytochelatins by metal exposure in Boletus edulis II Mycologia. 2007. V. 99 (2). P.161-174.

301. Collins R.A. Polysaccaropeptide from Trametes versicolor has potential for use against human immunodeficiency virus type 1 infection // Life Scince. 1997. Vol. 60(25). P. 383-387.

302. Cote Jr.W.A. Principles of Wood Science and Technology. New York, 1968. 54 p.

303. Crawford R. L. Lignin biodégradation and transformation // John Wiley &

304. Sons, New York, 1981. N.Y. P. 289-296.

305. Czamecki R., Grzybek J. Antiinflammatory and vasoprotective activities of polysaccharides isolated from fruit bodies of higher fungi Polysaccharides from Trametes gibbosa (Pers.: Fr.) Fr. (Polyporaceae) II Phytother Res. 1995. V. 9, №. 2. P. 123-127.

306. Daniel G., Vole J., Kubatova E. Pyranose oxidase: a major source of H2C>2 during wood degradation by Phanerochaete chrysosporium, Trametes versicolor, and Oudemansiellla mucida II Appl. Environ. Microb. 1994. V. 60. P. 2524-2532.

307. De Leo G., Levin S. The multifaceted aspects of ecosystem integrity //ConservationEcology. 1997. V. 1 (1):3. P. 104-111.

308. Dietrich, D., Hickey W.J., Lamar R. Degradation of 4,4-dichlorobiphenyl, 3,3',4,4'-tetrachlorobiphenyI, and 2,2',4,4',5,5-hexachlorobiphenyl by the white rot fungus Phanerochaete chrysosporium // Appl. Environ. Microbiol. 1995. V. 61. P. 3904-3909.

309. Dijkstra F.Y. Studies on mushroom flavours. I.Organoleptic significance of constituents of the cultivated mushroom, Agaricus bisporous II Zeitschrift fur Lebensmittel-Untersuchung und Forschung. 1976. V. 160. P. 255-262.

310. Dix N.J., Webster J. Fungal Ecology. Chapman & Hall, Cambridge, Great Britain. 1995. 438 p.

311. Eddy B. P. Production of mushroom mycelium by submerged cultivation //J. Sci. Food Agr. 1958. V. 9. P. 644-649.

312. Endo A., Kuroda M., Tanzawa K. Competitive inhibition of 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase by ML-236 and ML-236B, fungal metabolites having hypocholesterolemic activity // FEBS Lett. 1976. V. 72. P. 323-326.

313. Eriksson K.E., Blanchette R., Ander P. Microbial and enzymic degradation of wood and wood components // Publ.: Springer-Verlag, Hedelberg, Fed. Rep. Germany. 1990. 125 p.

314. Evans C. Laccase activity in lignin degradation by Coriolus versicolor. In vivo and in vitro studies // FEMS Microbiol. Lett. 1985. V. 27. P. 339-343.

315. Fedotov O., Bugrin Y. Mycelia antioxidizing activity of the strains of genera Pleurotus (Fr.) Kumm. and Flammulina (Curt.: Fr.) Sing. // Uspehi mediczinskoi mikologii. 2001. Vol. 1. P. 252-254.

316. Forrester I.T., Grabski A.C., Burgess R.R., Leatham G.F. Manganese, Mn-dependent peroxidases, and the biodegradationof lignin // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1988. V. 157. P. 992-999.

317. Fries L.: Studies in the physiology of Coprinus. I. Growth substance, nitrogen and carbon re, quirements // SvenskBot. Tidskr. 1955. V 49: 4. P. 345357.

318. Gao Y., Zhou S., Chen G. A phase Ifll Study of a Ganoderma lucidum (Curt.:Fr.) P. Karst (Ling Zhi, Reishi Mushroom) Extract in patients with Chronic Hepatitis B // Int. J. of Medical Mushrooms. 2002. V. 4. P. 321-327.

319. Gao Y., Zhou S. The immunomodulating effects of Ganoderma lucidum //Intern. J. Med. Mushrooms. 2002. V. 4. P. 1-17.

320. Gale E.F., Johnson A.M., Kerridge D. Factors Affecting the Changes in Amphotericin Sensitivity of Candida albicans during Growth // J. genetic Microbiology, V. 87, 1975. P. 20-36.

321. Giardina P., Aurilia V., Cannio R., Marzullo L., Amoresano A., Siciliano R., Pucci P., Sannia G. The gene, protein and glycan structures of laccase from Pleurotus ostreatus //Eur. J. Biochem. 1996. V. 235. P. 508—515.

322. Glenn J.K., Gold M.H. Relationship between lignin degradation and production of reduced oxygen species Phanerochaete chrysosporium II Appl. Environ. Microbiol. V. 49. P. 299-304.

323. Gold M., Alic M. Molecular biology of the lignin-degrading basidiomycete Phanerochaete Chrysosporium I I Microbiological Reviews. 1993. V. 57. P. 605-622.

324. Goodman D. The theory of diversity-stability relationships in ecology // Quart. Rev. Biol. 1975. V. 50. №3. P. 237-266.

325. Green R.V., Gold M.J. Fatty acid-coenzyme A oxidase activity and H202 production in Phanerochaete chrysosporium mycelia // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1984. V. 118. P. 437^143.

326. Gunde-Cimerman N., Plemenitas A., Cimerman A. Pleurotus fungi produce mevinolin, an inhibitor of HMG-CoA-reductase // FEMS Microbiol Lett. 1993. V. 113(3). P. 333-337.

327. Gunde-Cimerman N., Cimerman A. Pleurotus fruiting bodies contain the inhibitor of 3-hydroxy-3-mehtylglutaryl-coenzyme A reductase lovastin // Exp. Mycol. 1995. V. 19. P. 1-6.

328. Hammel K.E. Fungal Degradation of Lignin // CAB INTERNATIONAL Driven by Nature: Plant Litter Quality and Decomposition. 1997. P. 33-45.

329. Hartig R. Die Zersetzungsercheiungen des Holzes der Nadelholbaume und . der Eiche in forstlicher botanischer und chemischer Richtund. Berlin. 1978.211 s.

330. Harvey L., McNeil B. Production of lentinan by submerged cultivation of Lentinus edodes (Berk.) Sing // Intern. J. Med. Mushrooms. 2001. V. 3, № 5. P. 61-63.

331. Hatakka A., Kantelinen A., Tervila-Wilo A., Viikari L. Production of ligninases by Phlebia radiata in agitated cultures // In: Odier E. (ed.), Lignin Enzymic and Microbial Degradation, INRA, Paris. 1986. P. 185-189.

332. Hatakka A. Biodégradation of lignin / In Lignin, Humic Substances and . Goal. Wiley-VGH, Germany. 2001. P. 129-180.

333. Hobbs C. Medicinal mushrooms: Modern clinical uses overview // Intern. J. Med. Mushrooms. .2001. V. 3. P. 86, ,

334. Horriere F. Etude comparative des exigences trophiques de quelques basidiomycetes supérieurs fructifiant sur mileeux synthétiques. Analyse bibliographique//Mushroom Sci. 1979. V. 10(1). P. 665-683.

335. Hsu Y.L., Kuo Y., Kuo P., Ng L., Kuo Y., Lin C. Apoptotic effects of extracts from Antrodia camphovate fruiting bodies in human hepatocellular carcinoma cells line // Cancer Lettr. 2005. V. 221(1). P. 77-89.

336. Ichimura T., Watanabe O., Maruyama S. Inhibition of HIV-1 protease by water soluble lignin-like substance from an edible mushroom, Fuscoporia oblique H Biosc., Biotechn., Biochem. 1998. V. 62. P: 575-577.

337. Ikekawa T., Nakanishi M., Uehara N. Anti-tumor actnion of some basidiomycetes, especially Phellinus linteus H Jap. J. Cancer Res. 1968. V. 59. P. 155-157.

338. Jacqueline K., Sabine W., Urlike L. The influence of Selected Higher Basidiomycetes on the Binding of Lipopolysaccharide to CD 14+ Cells and on the Release of Cytokines // Int. J. of Med. Mushr. 2002. V. 4. P. 229-235.

339. Jacob C., Giles; G.I., Giles N.M., Sies H. Sulfur and selenium: the role of oxidation state in protein structure and function // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 2003. V. 42, № 39. P. 4742-4758.

340. Jeffries T.W. Fermentation of xylulose to ethanol using xylose isomerase and yeast//Biotechnol. Bioeng. Symp. 1981. P. 315-324.

341. Jiang J.H., Dou Y., Feng Y.I. The anti-tumor activity and MDR reversal properties of constituents from Inonotus obliquus II Mycologia i phytopatologia. 2007. P 455-460.

342. Jianbin W. A., Wang H.X., Ng T.B. Peptide with HIV-1 reverse transcriptase . . inhibitory activity from the medicinal mushroom Russula paludosa II Peptides:2007. V. 28, №. 3. P. 560-565.

343. Johri B.N, Brodie H.J.The physiology of production of the antibiotic cyathin .'■ by Cyathus helenae II Canadian Journal of Microbiology. 1971. V. 17(9).1. P. 1243-1245.

344. Jülich W. Die Nichtblatterpilze, Gallerpilze und Bauchpilze. Aphyllophorales, Heterobasidiomycetes, Gasteromycetes. Jena: Gustav Fischer,. 1984. 625 p: ; ,

345. Kabir Y., Kimura S., Tamura T. Dietary effect of Ganoderma lucidum mushroom on blood pressure and.lipid levels in spontaneously hypertensive rats (SHR) //Jl Nutr. Sei: Vitamihol. (Tokyo). 1988. Y. 34. P. 433-438.

346. Kirk T.K., Connors W.J., Zeikus J.G. Requirement for a growth substrate during lignin decomposition by two wood rotting fungi // Appl. Environ. Microbiol. 1976. V. 32. P. 192.

347. Kirk T.K. Degradation and conversion of lignocelluloses // The filamentous fungi / Eds. JiE. Smith et al. London: Advard Arnold Publ. Ltd., 1983. V. 4. P. 266-295. ■.'.:

348. Kirk T., Croan S., Tien M. Production of multiple ligninases by Phanerochaete crysosporium: effect of selected growth conditions and use of a mutant strain // Enzime and Microb. Technoi. 1986. V.8, №1. P. 27-32.

349. Kirk, T.K. Enzymatic "combustion": the microbial degradation of lignin / T.K. Kirk, R L. Farreli// Ann. Rev. Microbiol. 41. 1987. 465-505.

350. Kleinberg M.E., Finkelstein A. Single-Length and Duble-Length Channels Formed by nistatin in Lipid Bilayer Membranes // J. Membrane Biol. 1984. Y. 80, P. 257-269.

351. Knoepfel L., Steinkuhler C., Carri M.T., Rotiliö G. Role of zinc-coordination: and of the glutathione redox couple in the redox susceptibility of human transcription factor;Spl // Biochem. Biophys. Res. Commün. 1994. V. 201, № 2. P. 871-877. .

352. Leatham G.F., Kirk T.K. Regulation of ligninolytic activity by nutrient nitrogen in white-rot basidiomycetes // FEMS Microbiology Letters. 1983. V. 16. P. 65-67.

353. Lee S. S., Wei Y. H., Chen C. F., Wang S. Y., and Chen K. Y. Antitumour effects of Ganoderma lucidum II Journal of Chinese Medicine. 1995. V. 6. P. 1— 12.

354. Leonowicz A., Rogalski J., Wojtas-Wasilewska M.5 Luterek J. Properties and function of lignin peroxidase // Biochemical, molecular and physiological aspects of plant peroxidases. Uneversity of Geneva. 1991. P. 506—517.

355. Leontievsky A.A., Myasoedova N.M., Pozdnyakova N.N., Golovleva L.A. Yellow laccase of Panus tigrinus oxidizes non-phenolic substrates without electron-transfer mediators // FEBS Lett. 1997a. V. 413. P. 446-448.

356. Leontievsky A.A., Vared T., Lankinen P., Shergill J., Pozdnyakova N., Myasoedova N.M.,Kalkkinen N., Golovleva L.A., Cammack R., Thruston C., Hatakka A. Blue and yellow laccases of ligninolytic fungi // FEMS Microbiol. Lett. 1997b. V. 156. P. 9-14.

357. Levander O.A. Selenium / Trace elements in human and animal nutrition. 5th ed. Orlando etal.:,Acad. Press, 1986. V. 2. P. 209-266.

358. Lim Siow J. Ganotherapy. Malaysia, 1998. 29 p.

359. Malek I., Fencle Z. Theoretical and Methodological Basis of Continuous Culture of Microorganisms. New York: Academic Press, 1966. 286 p.

360. Merrill W., Cowling E.B. Role of nitrogen in wood deterioration amount and distribution of nitrogen in fungi // Phytopatology. 1966. V. 56. P. 1083-1090.

361. Michara M., Uchiyama M. Thiobarbituric and value on frech homohgenate of rat as a perameter of lipidperoxidation in aging, CCL4 intoxication and vitamin E deficiency. Biolchem. Med. 1980. V. 23(3). P. 302-311.

362. Mills G.C. Purification and properties of glutatione peroxidase of erythrocytes // J. Biol. Chem. 1959. V. 234, № 3. P. 1051-1068.

363. Mizuno T., Sakai T., Chihara G. Health foods and medicinal usage of mushrooms // Food Reviews International. 1995. V. 11. P. 69-81.

364. Mizuno T. The extraction and development of antitumor-active polysaccharides from medical mushrooms in Japan // Int. J. Mdc. Mushr. 1999. P. 9-29.

365. Mlinaric A., Kac J., Pohleven F. Screening of selected wood-damaging fungi for the HIV-1 reverse transcriptase inhibitors // Acta Pharmacology. 2005. V. 55. P. 69-79.

366. Molzaki S.W., Woods R.A. Polyene resistance and the isolations of sterol mutants of Saccharomyces cerevisae II J. genetic Microbiology. 1972. V. 72. P. 339-348.

367. Morgan Ph., Lewis S.T., Watkinson R. J. Biodégradation of benzene, toluene, ethylbenzene and xylenes in gas-condensate-contaminated groundwater//Environmental Pollution. 1993. V. 82, Iss. 2. P. 181-190

368. Mori, K. Kondo M, Antitumor effects of edible mushrooms- by oral administration // The Lancet. 2002. V. 343. P. 1122-1126.

369. Nobles. M.K. Identification of cultures of wood-inhabiting Hymenomycete //Can: Jt Boti. 1965: V. 43; N. 9. P; 1097-1139.

370. Ohtsuka S., Ueno S., Yoshikumi C. Polysaccharides having an anticarcinogenic effect and a method of producing them from species of Basidiomycetes // UK Patent 1331513. 1973. 22 p.

371. Oyama Y., Oshida T., Taguchi H. The artificial cultivation of mycorhiza-forming basidiomycetes // Mushroom Science IX (Part I). Proceedings of the Ninth international Scientific Congress on the Cultivation of Edible1 Fungi, Tokjw, 1974. P. 714-731.

372. Paszczynski A.; Hugnh V.B., Crawford R. L. Comparison of ligninase-I and . peroxidase-M2 from the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium

373. Biochem. Biophys. Res. Common. 1986. V. 244. P. 750-756.410; Paszczynski A., Crawford R. L. Potential for Bioremediation of Xenobiotic Compounds by the White-Rot Fungus Phanerochaete chrysosporium // Biotechnology Prpgress. 1995.V.11, Iss.4, P; 368-379.

374. Plunkett B.E. Nutritional and others aspects of fruit body production in pure cultures of Gollybia velutipes (Curt.) Fr. I I Ann. Bot. (Gr. Brit.). 1953; V.17, №66. P. 193-217.

375. Poulos T.L., Edwards S.L., Wariishi H., Gold M.H. Ciystallographic refinement of lignin peroxidase at 2A // J. of Biol. Chem. 1993. V. 268. Pi 4400-4420:.

376. Psurtseva N.V., Kiyashko A.A., Gachkova E.Y., Belova N.V. Basidiomycetes culture collection LE (BIN). Catalogue of strains. KMK Scientific Press Ltd. Moscow—St. Petersburg. 2007. 116 p.

377. Reese E.T. The-biological degradation of soluble cellulose derivatives and relationship to the mechanism of cellulose hydrolysis // J. Bacteriol. 1975; Y. 59. P. 485-497. .

378. Ren G., Liu X.Y., Zhu H.K. Evaluation of citotoxic activities of some medicinal polypore fungi from China // Phytotherapy. 2006. V. 77 (5). P; 408— 410.

379. Rezanka T., Sigler K. Biologically active compounds of semi-metals /Phytochemistry, .69, 2008. P. 585-606.

380. Roberts S.K. Plasma membrane anion channels in higher plants and their putative functions in roots // New Phytologist. 2006. V. 169. P. 647 666.

381. Russel R., Paterson M. Ganoderma A therapeutic fungal biofactory //Phytochemistry. 2006. V. 67. P. 1985-2001.

382. Sakamoto M., D. L. Holland and D. A. Jones. Modification of the nutritional composition of Artemia by incorporation of polyunsaturated fatty acids using micro-encapsulated diets // Aquaculture. 1982. V. 28. P. 311-320.

383. Saljoughian M., Pharm D. Adaptogenic or Medicinal Mushrooms // US Pharm. 2009. V. 34(4). P. 16-18.

384. Shaw C.G., Kile G.A. Armillaria root disease. Agricultural handbook №691. Forest service US Department of Agriculture. Washington: D.C., 1991. P. 233.

385. Schutzendiibel A., Polle A. Plant responses to abiotic stresses: heavy metal-induced oxidative stress and protection by mycorrhization. // Journal of experimental botany. 2002. Vol. 53. P. 1351-1365.

386. Scroeder H.A., Frost O.V., Balassa J.J. Essential trace elements in man: selenium // J. Chron. Dis. 1970. V. 23. P. 227-243.

387. Se G. S. Systematic of Ganoderma // Ganoderma Disease of Perennial Crops. CABI Publishing. 2000. P. 3-22.

388. Semerdgieva M. Pestovani a morfologicka posozovani nektrych nub celedi Agaricaceae in vitro // Ceska mycologia. 1965. V. 19, №4. p. 230-239.

389. Sjostrom E. Wood chemistry: fundamentals and applications. Academic Press Ltd. San Diego, California, 1993. 293 p.

390. Sliva D. Ganoderma lucidum in cancer research // Leuk. Res. 2006. V. 30. P.767-768.

391. Smith J.E., Rovyan N.J., Sullivan R. Medicinal mushrooms: their therapeutic properties and current medical usage with special emphasis on cancer treatments. Glasgow: University of Strathclyde, 2002. 256 p.

392. Song J.M., Han S.Y., Na Y.S. Method for producing mushroom mycelia uses thereof / Patent USA №US 2003/0208796, Nov., 2003. 6 p.

393. Stalpers J.A. Identification of wood-inhabiting Aphyllophorales in pure culture // Stadies in Micology. 1978. V. 16. 248 p.

394. Stamets P. Growing gourmet and medicinal mushrooms. Berkeley: Ten Speed Press, 1993. 552 p.

395. Sugimori T., Oyama Y., Omichi T. Studies on basidiomecetes. I. Production of mycelium and fruit body from moncarbohydrate organic substance // J. Fermant. Technol. 1971. V. 49, № 5. P. 435-446.

396. Sugiyama K., Yamakawa A. Dietary eritadenine-induced alteration of molecular species composition of phospholipids in rats // Lipids. 1996. V. 31. P. 399-404.

397. Sundarmoorthe M., Kishni K., Gold M.H., Poulos T.L. The crystal structure of MnP from P. crysosporium at 2.06-A resolution // J. Biol. Chem. 1994. V. 269. P. 32759-32767.

398. Suzuki S., Oshita S. Influence of shiitake (Lentinus edodes) on human serum cholesterol //Mushroom Sci. 1974. V. 9. P. 463^167.

399. Tien M., Kirk T.K. Lignin-degrading ensime from Hymenomycete Phanerochete chiysosporium Burds // Sciens. 1983. V 221. P. 661-663.

400. Tien M., Kirk T.K. Lignin-degrading ensime Phanerochete chrysosporium: purification, characterization and catalytic prorerties of a unique H2C>2 — requiring oxygenase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. V. 81. P. 2280-2284.

401. Tochikura T.S.; Nakashima H., Hirose K., Yamamoto N. A biological response modifier, PSK, inhibits human immunodeficiency virus infection in• vitro 11 Biochem. Biophys. Res. Comm. 1987. V. 148. P. 726-733.

402. Treschov, C. 1944. Nutrition of the cultivated mushroom // Dansk. Bet. Arkiv. V. 11(6). P. 1-180.

403. Vasiliauskas R., Menkis A., Finlay R.D., Stenlid J. Wood-decay fungi in fine living roots of conifer seedlings // New Phytologist. 2007. V. 174, Iss.2 P. 441446.

404. Wachtel-Galor S., Tomlinson B., Benzie I.F. Ganoderma lucidum ("Lingzhi"), a Chinese medicinal mushroom: biomarker responses in a controlled human supplementation study // Br. J. Nutr. 2004. V. 91(2). P. 263.

405. Wang X.M., Yang M., Guan S.H. Triterpenoids in Ganoderma lucidum //J. Pharm. Biomed. Anal., 2000. V. 74 (5). P. 2077-2081.

406. Wasser S.P., Weis A.L. Therapeutic effects of substances occurring in higher Basidiomycetes mushrooms: a modern perspective // Crit. Rev. Immunol. 1999. V. 19. P. 65-96.

407. Wasser S.P. Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysacharides // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. V. 60. P. 258-274.

408. Woodall A.A., Lee S.W., Weesie R.J. e.a. Oxidation of carotenoids by free radical: relationship between structure and reactivity // Biochim. Et Biophys. Acta. 1997. Vol. 36, №1. P. 33-^-2

409. Yamac M., Bilgili F. Antimicrobial activities of fruit bodies and/or mycelial cultures of some mushroom isolates // Pharm. Biol. 2006. V. 44, № 9. P. 660667.

410. Yang Q.Y., Jong S.C. A quick and efficient method of making mushroom spawn // Mushroom Sci. 1989. V. 12. Part 1. P. 631-643.

411. Yassin M., Wasser S.P., Mahajna J. Substances from the medicinal mushroom Daedalea gibbosa inhibit kinase activity of native and T315I mutated Bcr-Abl I I Int. J. Oncol. 2008. Vol. 32. No. 6. P. 1197-1204.

412. Yilmaz F., I§iloglu M. Heavy metal levels in some macro fungi // Turk. J. Bot., 2003. Vol. 27. P.45-56.

413. Yuan J.P., Wang J.H., Liu X., Kuang H.C., Huang X.N. Detetmination of ergosterol in ganoderma spore lipid from the germinating of Ganoderma lucidum by high-performance liquid chromatography // J. Agri Food. Chem. 2006. V. 54. P. 6172-6176.

414. Yuan J.P., Wang J.H., Liu X., Kuang H.C., Zhao S.Y. Simultaneous detetmination of free ergosterol and ergosteryl esters in Cordyceps sinensis by

Информация о работе

Ильина, Галина Викторовна
доктора биологических наук
Пенза, 2011
ВАК 03.02.08

Диссертация

Эколого-физиологический потенциал природных изолятов ксилотрофных базидиомицетов - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы