Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экологические аспекты реакции моллюсков Dreissena Polymorpha (Pallas, 1771) на действие ионов тяжелых металлов

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Экологические аспекты реакции моллюсков Dreissena Polymorpha (Pallas, 1771) на действие ионов тяжелых металлов"

На правах рукописи

ПАВЛОВСКАЯ Валерия Владимировна

ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕАКЦИИ МОЛЛЮСКОВ DREISSENA POLYMORPHA (PALLAS, 1771) НА ДЕЙСТВИЕ ИОНОВ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ

03.00.16 -«Экология»

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Калининград - 2007

003173152

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательн< учреждении высшего профессионального образования «Калининграде^ государственный технический университет»

Научный руководитель.

кандидат биологических наук, доцент Залуцкая Елена Андреевна

Официальные оппоненты

доктор биологических наук, профессор Саускан Владимир Ильич доктор биологических наук, профессор Сынзыныс Борис Иванович

Ведущая организация: Казанский государственный

университет

Защита состоится 1 ^ноября 2007 г. в 16$0 часов на заседании диссертационного совета К 212 084 05 в ФГОУ ВПО «Российский государственный университет им И Канта» по адресу 236040, г Калининград, ул Университетская, 2, факульте биоэкологии, аудитория 143

Отзывы на автореферат направляются по адресу 236040, г. Калининград, ул Университетская, 2, факультет биоэкологии, кафедра ботаники и экологи растений

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Российског государственного университета им. И Канта (236040, г Калининград, ух Университетская, 2)

Автореферат разослан « /У » ¿>/6*t<Ct&4iljp 2007 1

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук, доцент

И.Ю. Губарева

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В последние десятилетия в экосистемах водоемов наблюдаются изменения, которые происходят под влиянием естественных факторов окружающей среды и хозяйственной деятельности человека. Поэтому особую актуальность приобретают исследования закономерностей реакций водных организмов на меняющиеся условия окружающей среды Угрозу для жизнедеятельности гидробионтов представляют тяжелые металлы и их соединения (Кадмий* .., 1994; Челомин, 1998; Яп, 2003, Подгурская, 2006).

Высокий уровень загрязнения среды тяжелыми металлами приводит к снижению видового разнообразия гидробионтов (Брень, 1998) Использование гидробионтов в качестве биоиндикаторов позволяет судить о значении этих токсикантов Как организмы-индикаторы токсичности водной среды исследовались многие группы гидробионтов водоросли (бурые, красные, зеленые) и животные (костистые рыбы, ракообразные, моллюски полихеты и др). Установлено (Христофорова, 1989, Киричук, 2006), что именно моллюски являются наиболее чувствительными организмами к содержанию ионов тяжелых металлов в воде

Для определения действия ионов тяжелых металлов на гидробионтов используют метод определения удельного содержания белков -металлотионеинов в тканях (Ротг, 1995, Morris, 1999; Raspor, 1999, ДаНилин, 2002). В качестве тест-объектов использовались морские и речные.рыбы (Hamilton, 1986, Christer, 1991), морские беспозвоночные (омар, моллюски) (Roesyadi, 1994, Bebiano, 1999, Danihn, 2005), пресноводные моллюски Anodonta cygnea и Urtio pictorum (Данилин, 2002) Синтез белков -металлотионеинов в теле моллюсков, представляет собой ответ на действие стрессорных факторов физической и химической природы, в том числе тяжелых металлов (Lafontaine, 2000, rourang, 2005) Б связи с этим весьма актуальным является изучение влияния концентрации тяжелых металлов в воде на содержание тяжелых металлов и металлотионеинов в теле D polymorpha.

Цель работы - исследование особенностей накопления тяжелых металлов (Zn2+, Cd2+, Cu2+ и Pb2+) и металлотионеинов в теле D polymorpha, установление возможности использования моллюска D polymorpha в качестве тест-объекта при определении загрязнения тяжелыми металлами водоемов.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи-

1 Определить сезонную динамику накопления Zn2+. Cd2*. Cu2+

и в теле D polymorpha из оз. Форелевое

3

V

2 Установить влияние сезонного содержания Хп2+, С«12+, Си2+ и РЬ2+ в воде и теле £> ро1утогрЬа на уровень металлотионеинов в теле моллюсков

3 Изучить межвидовые отличия в содержании 7п2+, С<12+, Си2+ и РЬ2+и металлотионеинов в теле моллюсков

4 Выявить влияние содержания в воде Сё2+, Си2+ и РЬ2+ на изменение уровня металлотионеинов, рН межстворчатой жидкости и выживаемость £> ро1утогрЪа

5 Оценить возможность использования белков металлотионеинов в теле £> ро1утогрИа, как показателя содержания тяжелых металлов в процессе биологического мониторинга.

Положения, выносимые на защиту

1 Содержание в теле О ро1утогрИа РЬ2\ Сё2+, 2пг+ и Си , а также накопление металлотионеинов зависит от содержания в воде тяжелых металлов

2 £> ро1утогрИа способна регулировать концентрацию 2п2+ в теле независимо от его содержания в окружающей среде.

3 При раздельном введении в воду РЬ2+, Сс12+, 2п2+и Си2+ выявлено понижение выживаемости на фоне повышения металлотионеинов и изменения рН межстворчатой жидкости Наиболее токсическое действие на организм £) ро1утогрЬа оказывает Си2+

4 Содержанием в воде РЬ2+, Сё2+, 2п2+ и Си2+ определяет уровень металлотионеинов в теле И ро1утогрИа, который можно рассматривать как механизм защиты организма от действия тяжелых металлов среды и использовать в качестве биоиндикатора в системе биомониторинга.

Научная новизна. Впервые установлены зависимости между содержанием РЬ2+, Сс12+, Ъп* и Си2+ и уровнем металлотионеинов в теле О ро1утогрИа от содержания тяжелых металлов в воде Выявлено влияние содержания в воде РЬ2+, Сс12+, 2п2+ и Си2+ на выживаемость на фоне повышения металлотионеинов и изменения рН межстворчатой жидкости. Установлено, что Си2+ оказывает наиболее токсическое действие на организм В ро1утогрка Показана способность О ро1утогрИа регулировать концентрацию 2п2+ в теле независимо от его содержания в окружающей среде

Практическая значимость Результаты, полученные при исследовании особенностей накопления металлотионеинов в теле £> ро1утогрИа позволяют определить пути адаптации гидробионтов к неблагоприятным факторам среды обитания и понять физиолого-биохимические механизмы их

устойчивости Поэтому установление закономерностей накопления металлотионеинов под действием экологических факторов (тяжелых металлов) имеет не только теоретическое, но и большое практическое значение для решения конкретных задач биомониторинга. Обоснована возможность использования уровня металлотионеинов в теле D polymorpha в качестве биоиндикационного параметра в системе биомониторинга Полученные результаты можно использовать при чтении курсов по «Гидробиологии», «Экологии», «Экологической токсикологии».

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на 9-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых (Пущино, 2005), на 5-й и 6-й Международных научных конференциях «Сахаровские чтения 2005, 2006 гг.: Экологические проблемы XXI века» (Минск, Беларусь, 2005, 2006), The 2nd International Conference on Radioactivity in the Environment & the 6th International Conference on Environmental Radioactivity in the Arctic and the Antarctic (Nice, France, 2005), II региональной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Техногенные системы и экологический риск» (Обнинск, 2005), Международной научной конференции «Инновации в науке и образовании -2005» (Калининград, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы экологии и природопользования» (Москва, 2006), V съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность) (Москва, 2006), The Conference «Technology Science Works in the Western Lithuania» (Klaipeda, Lithuania, 2006).

Декларация личного участия автора. Автором самостоятельно в полевых условиях собран и обработан в лаборатории материал по D polymorpha; определены концентрации Pb2+, Cd2+, Zn2+ и Cu2+, а также уровень удельного содержания металлотионеинов в теле D polymorpha, определено влияние содержания в воде РЬ2+ (0,03 мг/л), Cd2+ (0,001 мг/л), Си2+ (1,0 мг/л), Zn2+ (1,0 мг/л) на выживаемость D polymorpha, проведены эксперименты по оценке возможности использования белков металлотионеинов в теле D polymorpha, как показателя загрязнения водной среды тяжелыми металлами.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы Работа изложена на 102 страницах машинописного текста, включает 12 таблиц и 9 рисунков. Библиографический список содержит 116 отечественных и 89 зарубежных источников

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований

Материалом для проведенных исследований послужили двустворчатые моллюски вида D polymorpha, обитающие в оз Форелевое. Исследования проводили в течение 2004 - 2006 гг. посезонно:

- весной (апрель), - летом (июнь), - осенью (сентябрь),- зимой (декабрь). Сбор материала осуществляли с помощью орудия «кошка-грабли». Сбор производился с берега вручную Моллюсков идентифицировали до вида, используя «Определитель беспозвоночных Европейской части СССР (планктон и бентос)» (1977), а также определитель В.И. Жадина «Моллюски пресных вод СССР» (1952) Производили измерение высоты, длины и выпуклости раковины, их соотношения с помощью штангенциркуля с точностью до 1мм

Препарирование осуществляли, ориентируясь по анатомическому атласу внутреннего строения двустворчатых моллюсков (Цихон-Луканина, 1987) Извлеченное тело моллюсков очищали от посторонних включений и взвешивали на торсионных весах с точностью до 0,1 мг Подготовленные таким образом пробы до анализа хранили при температуре минус 40°С.

Материал готовили к анализу согласно методике (Eaton, 1982, Данилин, 2004). Определение уровня металлотионеинов в теле D polymorpha осуществляли во ВНИИ сельскохозяйственной радиологии и агроэкологии г. Обнинск радиохимическим методом

Исследования по содержанию тяжелых металлов (Zn, Pb, Cd, Cu) в воде и теле D polymorpha были проведены в физико-химической лаборатории ВНИИ АТЛАНТНИРО г Калининград по следующим стандартам ГОСТ 26929-86, ГОСТ 30178 - 96, ИСО 8288 - 86. Тяжелые металлы во всех видах проб определяли методом атомно-абсорбционной спектроскопии Zn, Cu, Pb, Cd (спектрометр плазменно-эмиссионный Varían Liberty AX Sequential ICP-AES)

Токсикологическому исследованию предшествовал период акклимации животных, моллюсков выдерживали в аквариумах с водопроводной водой в течение 14 дней с постоянной аэрацией

Моделирование загрязнения водоема свинцом, кадмием, цинком и медью проводили в лабораторных условиях Для проведения экспериментов моллюски были отсортированы по размеру (1,6-2,2 см) Опытных животных разделили на пять групп по 90 особей в каждой. Первая группа животных служила контролем и содержалась в аквариуме с водопроводной водой, вторая группа была помещена в аквариум, содержащий РЬ2+ (0,03 мг/л), третья группа -Cd2+ (0,001 мг/л), четвертая -Си2+ (1,0 мг/л), пятая - Zn2+ (1,0 мг/л) Все группы животных находились в примерно сходных условиях: аквариумах одинакового объема, при одинаковом освещении, температуре и

аэрации, без кормления Экспозицию опытных животных проводили в течение 21 суток. Для экспериментов брались концентрации токсикантов, соответствующие значениям их ПДК для водоемов рыбохозяйственного назначения

Для математической обработки полученных результатов использован пакет компьютерных программ Excel 2000 (Microsoft Inc, 1999), Statistica for Windows, v 5 0 (Statsoft Inc , 1995) Основной массив экспериментальных данных обрабатывали с помощью программ описательной статистики с вычислением среднего арифметического, среднего квадратического отклонения, стандартной ошибки, коэффициента корреляции Пирсона При оценке достоверности различий средних данных использовали /-критерий Стьюдента

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Сезонные изменения содержания тяжелых металлов в теле D. polymorpha

На биоаккумулирование металлов может влиять целый ряд физиологических и экологических факторов, в то же время данных о влиянии сезона на содержание тяжелых металлов в теле моллюсков недостаточно Полученные нами данные о влиянии содержания Zn2+, Cd2+, Cu2+ и Pb2+ в воде оз Форелевое на динамику тяжелых металлов в теле D polymorpha представлены в таблице 1, а их графические зависимости представлены - на рисунке 1

Таблица 1 - Сезонные изменения содержания тяжелых металлов в теле £> ро1утогр!ш (мг/кг сух массы) и воде оз Форелевое (мг/л)

Сезон Cd Си РЬ Zn

D polymor, aha

Весна 0,27 ±0,02 6,2 ±1,1 0,37 ±0,14 37,00 ±2,94

Лето 0,13 ±0,02" 2,2 ±0,71" 0,29 ±0,09 28,16 ±1,98"

Осень 0,39 ± 0,04я' 7,04 ± 1,41* 1,45 ±0,23"* 21,97 ±0,99"*

Зима 0,59 ±0,02" 4 с 9,42 ± 1,27е4 0,43 ± 0,12е 20,73 ± 1,22"'*

оз Форелевое

Весна 0,0007 ±0,0002 0,021 ±0,009 0,013 ±0,003 0,0224 ±0,0076

Лето 0,0006 ±0,0001 0,032 ±0,008 0,01 ± 0,001 0,0183 ±0,0085

Осень 0,0013 ± 0,0001 "* 0,04 ± 0,004" 0,039 ±0,002" 4 0,02 ±0,0029"

Зима 0,0025 ± 0,0002"*с 0,0008 ± 0,0002"* с 0,002 ± 0,0009" *с 0,00539 ±0,00015"4 с

а - достоверное отличие (р <. 0,05) по сравнению с данными для весны , Ь -достоверное отличие (р 5 0,05) по сравнению с данными для лета, с - достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с данными для осени

Са у = 0,293Ьп(х)+2,347 Я = 0,98 Си у = - 1,157Ьп(х)+1,110 Я = 0,70

[11=0,92, Р<0,05] [11=0,37, Р<0,05]

По осям - Концентрация металла Зависимость аппроксимирована логарифмическим уравнением В квадратных скобках - коэффициент корреляции Пирсона (Я) и уровень значимости (Р)

Рисунок 1 - Зависимость между концентрацией 2пг+, С(12+, Си2+ и РЬ2+ в теле й ро1утогрИа и в воде оз Форелевое

Выявлено, что, начиная с апреля, содержание РЬ2+, Хп2+, Сй2+ и Си2+ в теле Б ро1утогрИа из оз Форелевое понижалось Так, в июне концентрации Сё2+, Си2+ и РЬ2+ понизились соответственно на 48, 35 и 78% по сравнению с апрелем Необходимо отметить повышение к осени концентрации Сс12+, Си2+ и РЬ2+ в теле И ро1утогрЪа так, в сентябре концентрации Сс12+, Си2+ и РЬ2+ повысились соответственно на 33, 31 и 20% по сравнению с июнем При этом содержание РЬ2+ в теле £> ро1утогрИа,

достигнув максимума в сентябре (1,45 мг/кг), к декабрю снизилось на 30% В то же время концентрация Zn2+ снижалась непрерывно с апреля по декабрь в июне снизилась на 16, в сентябре - 59, в декабре - 56 по сравнению с апрелем.

Регрессионный анализ зависимости концентрации Pb2+, Zn2+, Cd2+ и Cu2+ в теле D polymorpha и в воде оз Форелевое показал, что значение R логарифмических уравнений было выше для зависимостей между концентрацией РЬ2+ и Cd2+ в теле D polymorpha и в воде оз Форелевое, чем для зависимостей между концентрацией Zn2+ и Си2+ в теле D polymorpha и в воде оз Форелевое (рис 1)

Коэффициент корреляции Пирсона между концентрацией Zn2+, Cu2+, Cd2+ и Pb/+ в теле D polymorpha и в воде составило соответственно 0,44,0,37, 0,92, 0,87 (рис 1) Высокие значения коэффициента корреляции между концентрацией Cd2+ и РЬ2+ в теле D polymorpha и в воде оз Форелевое показывают, что концентрация этих металлов в теле моллюсков зависит от их содержания в воде И, наоборот, более низкие значения коэффициента корреляции между концентрацией Zn2+ и Си2+ в теле D polymorpha и в воде оз Форелевое показывают более эффективное регулирование организмом моллюсков аккумуляции данных металлов

Сезонную изменчивость содержания Zn2+, Cu2+, Cd2+ и Pb2+ в теле D polymorpha можно объяснить особенностью репродуктивного цикла этого вида Так, в апреле происходит активное созревание гонад у моллюска, в мае-июне начинается нерест, интенсивность которого повышается до июля, а затем к сентябрю наступает стадия покоя (Bragina, 2004).

Во-первых, в период созревания гонад масса половых продуктов резко возрастает и составляет от 5 до 50% ежегодного прироста у D polymorpha, что приводит к понижению относительного содержания тяжелых металлов в теле моллюска (Chase, 1999) Нами показано, что созревание гонад и последующий нерест в течение лета объясняют особенности сезонных колебаний концентрации металлов в теле D polymorpha Так, концентрация Zn2+ и Си2+ в теле D polymorpha снизилась к июню, когда созревание гонад у большинства моллюсков было завершено, а нерест находился в самой активной фазе

Во-вторых, снижение концентрации Zn2+ в теле моллюсков во время нерестового периода происходит за счет выноса Zn2+ вместе с половыми продуктами (Kwan, 2003) После нереста содержание липидов в теле моллюсков снижается, в то время как концентрация Zn2+, Cu2+, Cd2+ и Pb2+ в теле моллюсков начинает увеличиваться (Kwan, 2003)

Установлено, что Zn2+, Cd2+, Cu2+, Pb2+ накапливаются моллюсками всех крупных таксонов пластинчатожаберными (Z) polymorpha, Unio rostratus, U piclorum), переднежаберными (Viviparus viviparus) (Киричук, 2006) и легочными (Lymnea stragnalis, Planorbarius purpura) (Киричук, 2006)

Для оценки степени аккумуляции металлов в теле D polymorpha нами использован коэффициент накопления (КН), под которым понимают

9

отношение концентрации металлов в теле гидробионтов к их содержанию в окружающей среде (Кадмий ..., 1994).

Величина КН для моллюсков разных видов приведена в таблице 2 Выявлено, что разные виды моллюсков обладают не одинаковой способностью к аккумуляции перечисленных выше металлов в своих организмах

Самые высокие значения KHzn отмечены у моллюсков D polymorpha, U pictorum, A cygnea, L stragnahs, Р purpura, V vmparus, при этом KHZn для V vmparus в 16 раз выше, чем для D polymorpha. Величина KHcj у D polymorpha выше соответственно в 16 и 19 раз по сравнению с V vmparus и U pictorum

Коэффициенты накопления Zn2+, Cd2+, Cu2+, Pb2+ у моллюсков разных видов отличаются, при этом, нами отмечена одна общая закономерность, в наибольшей степени моллюски видов D polymorpha, U pictorum, A cygnea, L stagnalis, P purpura, V vmparus накапливают Zn2+, a моллюски видов U rostratus, С ponderosum в большей степени - Pb2+.

Таблица 2 - Коэффициенты накопления Ха, Си, Cd иРЬ в теле моллюсков разных видов

Объект исследования KHzn KHc„ KHcd КНрь

D polymorpha* 1682 295 385 28

U pictorum" 547 48 20 -

A cygnea" 321 156 57 -

*** U rostratus 6150 985 44 7284

L stagnalis"* 8893 660 111 6157

Р purpura'" 13993 3446 87 5980

V viviparus'" 27095 1718 24 3319

- по собственным данным, " - по данным Минакова 2005 г, - по данным Киричук 2006 г

По величине аккумуляции тяжелых металлов гидробионты подразделяются на макро-, микро-, деконцентраторов (Никаноров, 1985). К макроконцентраторам относятся виды у которых КН > 15000, к микроконцентраторам - виды с КН = 10000-15000, к деконцентраторам - с КН < 10000. По показателям КН D polymorpha, U pictorum, A cygnea, U rostratus, С ponderosum, L stagnalis относятся к деконцентраторам По КНс, KHcd и КНрь виды Р purpura, V vmparus - декноцентраторы, по KHZn вид Р purpura - микроконцентраторы, а вид V viviparous - макроконцентраторы

Таким образом, моллюски поглощают значительные количества тяжелых металлов Коэффициенты накопления свидетельствуют как о загрязнении среды Тх?*, С62+, Си2+ и РЬ2+, так и о биологической доступности и возможности их включаться во все физиологические и биохимические процессы организма Рассчитанные КН отражают, что разные виды моллюсков обладают различной способностью к аккумуляции тяжелых металлов

Межвидовые различия в содержании тяжелых металлов в теле

моллюсков

Анализ содержания тяжелых металлов в теле моллюсков разных видов и в воде позволяет выявить особенности организма накапливать тяжелые металлы из окружающей среды (Яп, 2003)

Установлено, что содержание 2п2+, Сс12+, Си2+ и РЬ2+ в теле Б ро\утогрЬа варьирует от 0,34 до 26,96 мг/кг, при этом £> ро\утогрЬа аккумулирует 2п2+ и Си2+ в максимальных количествах (табл 3) Аналогичные данные были получены при исследовании моллюсков II ркШ им и А cygnea (Минакова, 2005)

Таблица 3 - Содержание Си, Ъъ, РЬ, Сс1 в теле моллюсков разных видов (мг/кг сух. массы) и воде (мг/л)

Объект исследования га Си Сс1 РЬ

Вода оз Форелевое 0,022 ±0,008 0,021 ±0,009 0,0007 ± 0,0002 0,013 ±0,003

й ро1утогрИа 37,00 ±2,94 6,2 ± 1,1 0,27 ±0,02 0,37 ±0,14

Водар Урал 0,029 ±0,003 0,005±0,001 0,003±0,001 н/о

II р1с1огит 15,86 ±3,08 0,24±0,08 0,06±0,003 н/о

А су^пеа 9,31± 2,4 0,78±0,19 0,17±0,08 н/о

Примечание, уровень значимости данных р< 0,05

Показано, что концентрации Ха2+, С<12+, Си2+ и РЬ2+ в теле £) ро1утогрИа выше, чем у и рюЮгит и А cygnea.

Моллюски видов II рю1огит и А сувяеа, также как и й ро1утогрИа в наибольших количествах накапливают Ъг?*, причем его содержание в теле

О ро1утогрИа выше соответственно в 2 и 4 раза, чем в теле (/ рШогит и А су^еа, при одинаковом содержании 2п1+ в воде р Урал и оз. Форелевое.

При более высокой (в 4 раза) концентрации Си2+ в воде оз. Форелевое, чем в р. Урал, содержание Си2+ в теле й ро!утогрИа выше соответственно в 8 и 23 раза, чем в теле А cygnea и и рШогит В то время как при более низкой (в 4 раза) концентрации С<12+ в воде оз Форелевое, чем в р. Урал, его содержание в теле й ро!утогрИа выше соответственно в 1,5 и 4,5 раза, чем у А cygnea и и рШогит.

В исследуемых пробах воды р Урал и теле И рШогит и А су%пеа РЬ2+ не был обнаружен, в то время как при концентрации РЬ2+ 0,013 мг/л в воде оз. Форелевое его содержание в теле £) ро1утогрИа составило 0,37 мг/кг.

Установлены особенности накопления Хп2+, Са2+, Си2+ и РЬ + у моллюсков разных видов с учетом которого КН расположены в следующий ряд-

-дляБ ро1утогрИа-КНрЪ>КНСа>КНсл>КНгв';

-для II рШогит - КНо*> КНс„> КН2п

- для А cygnea - КНса > КНСц > КН2п",

- для I/ гоятт -КНС(1 > КНсц > КН2„ >КНРЬ*";

-дляЬ stagnalls-КНСа>КНси>КНРЬ>КН2п*",

- для Р ригрига -КНС11> КНСи> КНРЬ >КН2п*";

- для V Утрагия -КН« > КНСи > КНРЬ> КН2п"\

' - по собственным данным;

- по данным Минакова 2005 г.;

- по данным Киричук 2006 г.

Наши данные согласуются с результатами о взаимодействии «металл-металл» у других моллюсков. По токсичности тяжелые металлы для моллюсков можно расположить в следующий ряд: Си > N1 > С<1 > РЬ > Ъъ. > А1 > V > Сг > Бе > Бе = Со > Мп > > Мо (Тотаык, 1995)

Межвидовые отличия в содержании тяжелых металлов в теле моллюсков можно объяснить отличиями в содержании металлов в различных зонах обитания моллюсков, а, во-вторых, неодинаковой способностью данных видов к накоплению металлов.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют об отличиях в содержании тяжелых металлов в теле моллюсков разных видов, что можно объяснить как экологическими факторами, так и физиолого-биохимическими особенностями данного вида.

Сезонные изменения содержания металлотионеинов в теле моллюсков

/). ро1утогрНа

Известно, что у гидробионтов, в частности у двустворчатых моллюсков, избыток тяжелых металлов переводится в нетоксичную форму особыми цитоплазматическими белками металлотионеинами Содержание металлотионеинов в биологических объектах используют в качестве показателя загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами (Данилин, 2004), при этом, необходимо отметить, что влияние сезона на содержание металлотионеинов в теле И ро1утогрЬа недостаточно исследовано

Полученные нами данные о сезонных изменениях содержания металлотионеинов в теле моллюсков В ро!утогрЪа представлены в таблице 4

Выявлено увеличение концентрации металлотионеинов в теле моллюсков Б ро1утогрЪа от весны к зиме Так, с апреля по июнь содержание металлотионеинов в теле О ро1утогрИа увеличилось в 2,7 раза, с июня по сентябрь - в 1,2 раза, а с сентября по декабрь - в 2,4 раза. Таким образом, с апреля по декабрь содержание металлотионеинов в теле О ро1утогрИа из оз Форелевое увеличилось в 8 раз.

Таблица 4 - Сезонные изменения содержания металлотионеинов в теле И ро1утогрка из оз. Форелевое

Сезон Содержание МТ, мкг/г

Весна 2,73 ±0,17

Лето 7,38 ±0,41"

Осень 9,3 ± 0,95 аЬ

Зима 22,4 ± 6,41

а - достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с данными для весны, Ъ -достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с данными для лета; с -достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с данными для осени

Зависимость содержания металлотионеинов в теле О ро\утогрка и концентрацией Сс12+, Си2+ и РЬ2+ в воде оз Форелевое показана на рис 2

Значение Я логарифмических уравнений для зависимостей между уровнем металлотионеинов и концентрацией тяжелых металлов в воде составило для Сё (Я = 0,91), Си (Я = 0,89), РЬ (Я = 0,74), Ъл (Я = 0,97) соответственно.

Си у = - 4,080Ьп(х) - 7,539 Я = 0,89 РЬ у = - 5,055Ьп(х) - 12,792 Я = 0,74 [11=0,48, Р<0,05] №=0,14, Р<0,05]

По оси х - Концентрация металла в воде оз Форелевое, оси у - содержание металлотионеинов в теле Э роХутогрЪа Зависимость аппроксимирована логарифмическим уравнением. В квадратных скобках - коэффициент корреляции Пирсона (II) и уровень значимости (Р)

Рисунок 2 - Зависимость между концентрацией гп2+, Си2+, Сс12+ и РЬ2+ в воде оз Форелевое и содержанием металлотионеинов в теле £> ро!утогрИа

Значение коэффициента корреляции Пирсона между содержанием металлотионеинов в теле £) ро1утогрИа и концентрацией 2п2+, С<12+, Си2+ и РЬ2+ в воде составило соответственно 0,95, 0,48,0,92, 0,14 Высокие значения коэффициента корреляции между уровнем металлотионеинов и концентрацией Хп2+ и Сё2+ в воде оз Форелевое показывают, что уровень металлотионеинов в теле Ю ро\утогрЪа зависит от их содержания в воде. И

наоборот более низкие значения коэффициента корреляции между уровнем металлотионеянов в теле £) ро1утогрИа и концентрацией Си2+ и РЬ2+ в воде оз Форелевое показывают более эффективное регулирование организмом моллюсков аккумуляции данных металлов

Зависимость содержания металлотионеинов в теле В ро1утогрИа и концентрацией 2п2+, Сс12+, Си2+ и РЬ2+ в теле моллюска показана на рис 3

Си у = 6,678Ьп(х) -0,895 И. = 0,50 Ъп у = - 25,969Ьп(х) + 85,326 Я = 0,82 [11=0,43; Р<0,05] [Я=0,63; Р<0,05]

По оси х - Концентрация металла в теле £> ро\утогрНа, оси у - содержание металлотионеинов в теле О ро1утогрка. Зависимость аппроксимирована логарифмическим уравнением В квадратных скобках - коэффициент корреляции Пирсона (Я) и уровень значимости (Р)

Рисунок 3 - Зависимость между концентрацией 2п2+, Си2+, Сд2+ и РЬ2+ и содержанием металлотионеинов в теле й ро!утогрИа

Значение R логарифмических уравнений для зависимостей между уровнем металлотионеинов и концентрацией тяжелых металлов в теле D polymorpha составило для Zn (R = 0,82), Cd (R = 0,69), Cu (R = 0,50), Pb (R = 0,003) Значение коэффициента корреляции Пирсона между содержанием металлотионеинов и концентрацией CdiT, ZniT, Cu и РЬ'Т в теле D polymorpha составило соответственно 0,70, 0,63, 0,43, 0,0005. Высокие значения коэффициента корреляции между уровнем металлотионеинов и концентрацией Zn2+ и Cd2+ в теле D polymorpha показывают, что уровень металлотионеинов зависит от их содержания в теле D polymorpha. И наоборот более низкие значения коэффициента корреляции между уровнем металлотионеинов и концентрацией Си2+ и РЬ2+ в теле D polymorpha показывают, что уровень металлотионеинов не зависит or содержания данных металлов в теле моллюсков.

Значение R логарифмических уравнений было выше для зависимостей между уровнем металлотионеинов и концентрацией тяжелых металлов в воде для Cd (R = 0,91), Cu (R = 0,89), Pb (R = 0,74), Zn (R = 0,97), чем для зависимостей между уровнем металлотионеинов и концентрацией этих металлов в теле D polymorpha.

Полученные нами данные согласуются с результатами Bordin (Bordin, 1997) по определению металлотионеинов в теле М balthica. Концентрация металлотионеинов в теле М balthica увеличилась в 8 раз с апреля по декабрь, такие же результаты получены для других морских и пресноводных беспозвоночных (Hamilton, 1986; Christer, 1991, Roesijadi, 1994, Bebiano, 1999, Danilin, 2005, Данилин, 2002)

Таким образом, установлена сезонная динамика металлотионеинов в теле D polymorpha достигающая минимума в апреле и максимума в декабре Более высокие значения коэффициентов корреляции между концентрацией Zn2+, Cd2+, Cu2+ и Pb2+ в воде оз. Форелевое, теле D polymorpha и уровнем металлотионеинов в теле моллюсков показывают, что содержание металлотионеинов в теле моллюсков зависит от концентрации Zn2+ и Cd2+ как в воде, так и в теле D polymorpha

Межвидовые различия в содержании металлотионеинов в теле

моллюсков

Металлотионеины - белки, участвующие в формировании ответной реакции клетки на стресс (БапПа di Торр!, 1999, ОеМоог, 2000). Они обнаружены во всех исследованных эукариотических организмах, а также в клетках прокариот (Ка§1,1988)

Установлено, что разные виды животных обладают различной способностью синтезировать металлотионеины (рис. 4). Показаны межвидовые различия в содержании металлотионеинов между моллюсками, обитающими в водах с различной соленостью М ейи1и, О ро1утогрЬа, II

16

рШогит (Данилин, 2004), А с)ц>пеа (Данилин, 2004), М ЬаНЫса (Вогс11П, 1997). Удельное содержание металлотионеинов в теле £> ро1утогрИа составляет 10,3 мкг/г. В среднем удельное содержание металлотионеинов в теле М е<Ык в 3,39 раза выше, чем в теле Б ро1утогрЪа. Не обнаружено достоверных отличий в содержании металлотионеинов у II рШогит, А cygnea и Ьутпаеа ер

1-М eduhs, 2-D polymorphs, 3-М balthica (Bordm, 1997), 4 - Planorbanus sp (Данилин, 2002), 5 - U pictorum (Данилин, 2004), 6 -A cygnea (Данилин, 2004), 7 - Lymnaea sp. (Данилин, 2002)

Рисунок 4 - Содержание металлотионеинов в теле моллюсков разных видов

Уровень металлотионеинов в теле Lymnaea sp. (Данилин, 2002), составлял 1,6 мкг/г, что в 6,4 раза ниже, чем в теле D polymorpha, и в 22 раза ниже, по сравнению, с М eduhs. Содержание металлотионеинов у D polymorpha, М balthica и Planorbarius sp. достоверно не отличались. Различия в индукции металлотионеинов показаны для моллюсков М balthica и Littonna littorea в работах Langston и Zhou (Langston, 1987а, 1987b).

Полученные результаты свидетельствуют об отличиях в содержании металлотионеинов в теле моллюсков разных видов, обусловленные, на наш взгляд, как местами обитания, характером питания, различием занимаемых экологических ниш, так и разной способностью к активации контролирующих синтез металлотионеинов генов.

МК1/Г

Изменение содержания тяжелых металлов в теле £>. ро1утогрка при действии ионов тяжелых металлов

Установлено, что в условиях эксперимента при содержании в воде С<12+, Си2+ и РЬ2+ на уровне 1 ПДК происходит накопление этих металлов в теле И ро\утогрЪа (табл 5) За ПДК принимается наибольшая допустимая (недействующая) концентрация токсического вещества для наиболее слабого (чувствительного) звена среди всех тест-объектов (Владимиров, 1991).

Таблица 5 - Концентрация тяжелых металлов (мг/кг сухой массы) в теле £> ро1утогрка в условиях эксперимента

Вода, мг/л Период эксперимента, сутки

Металл Контроль Эксперт 1 9 21

ент Контроль Контроль Эксперимент Контроль Эксперимен

са 0,0005 ± 0,0001 0,001 0,27 ±0,02 0,22 ± 0,02 0,36 ±0,03° 0,31 ±0,02 0,45 ± 0,04"'

Си н/о 1 6,2 ± 1,11 5,4 ±0,92 10,03 ± 1,16" 2,13 ±0,22" 16,25 ± 1,1«'

РЬ и/о 0,03 0,37 ±0,14 0,28 ±0,04 0,55 ±0,04 0,12 ±0,02° 1,06 ±0,15*'

гп 0,001 ±0,0002 1 37,0 ±2,94 36,8 ± 22 40,46 ±2,68 37,17 ±3,12 37,05 ±2,2

Примечание а - достоверное отличие (р <, 0,05) по сравнению с 1 сут; Ь -достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с 9 сут

На 9 сутки в эксперименте при раздельном содержании в воде с Сё2+, Си2+ и РЬ2+ на уровне 1 ПДК содержание этих металлов в теле £> ро1утогрЬа увеличилось соответственно в 1,3, 1,7 и 1,5 раза по сравнению с 1-ми сутками

В эксперименте на 21 сутки концентрации С<12+, Си2+ и РЬ2+ в теле ро1утогрИа возросли соответственно в 1,7, 2,6 и 2,9 раза по сравнению с 1-ми сутками и соответственно - в 1,3, 1,6 и 1,9 раз по сравнению с 9-ми сутками

Необходимо отметить, что в течение всего периода эксперимента не происходило статистически значимого увеличения содержания 2п1+ в теле Б ро1утогрИа при концентрации 2п1+ в воде на уровне 1 ПДК.

В контроле на 9 сутки наблюдалось понижение содержания РЬ2+, С<12+ и Си2+ в теле £) ро1утогрИа соответственно в 1,3, 1,2, 1,1 раза по сравнению с 1 сутками. На 21 сутки в эксперименте содержание РЬ2+и Си2+ в теле £> ро\утогрЪа понизилось также в 2,3 и 2,5 раза соответственно по сравнению с 9 сутками, в то время как концентрация С<12+ увеличилась в 1,4 раза При этом, в контроле в течение всего периода эксперимента не

выявлено статистически значимого изменения концентрации Zn2+ в теле D polymorpha.

Выявлены отличия в динамике накопления Pb2+, Cd2+, Cu2+ и Zn2+ в теле D polymorpha. Различия в степени аккумуляции Zn2+, обусловлены, по нашему мнению, более выраженной физиологической регуляцией моллюсками аккумуляции данного металла, что согласуются с данными Amiard (Amiard, 1987) на М eduhs. По мнению Amiard моллюски способны регулировать концентрацию Zn2+ в теле, такая закономерность обнаружена у всех изученных двустворчатых моллюсков (Lakshmanan, 1989, Lushibtzky, 2005), амфипод (Ahsanullah, 1991, Borgmann, 1993) и других изученных беспозвоночных (Raindow, 1989, Smolders, 2002)

Таким образом, выявлены отличия в динамике накопления Pb2+, Cd2+, Си и Zn2+ в теле D polymorpha. Показана способность D polymorpha регулировать концентрацию Zn2+ в теле независимо от содержания его в окружающей среде Эти данные исключают возможность использовать D polymorpha для мониторинга загрязнения водной среды Zn2+.

Выживаемость моллюсков D. polymorpha при действии ионов тяжелых

металлов

Биохимические механизмы формирования повышенной устойчивости гидробионтов к воздействию тяжелых металлов разнообразны Одним из показателей устойчивости организма к токсическому действию ионов тяжелых металлов является выживаемость

Установлено влияние содержания в воде Pb2+, Zn2+, Cd2+ , Си2 на уровне 1 ПДК на выживаемость D polymorpha (рис. 5)

20 -

10 •

0 -I-1-,-.-.-.-.-.-.

О 3 в В 12 15 18 21

время, суши

Рисунок 5 - Выживаемость моллюсков й ро1утогрЬа в опытах при раздельном содержании в воде РЬ2+, 2п 2+, Cd2+ и Си2+

На 9 день эксперимента в опыте при раздельном введении Си2+, Zn2f, Pb2+ и Cd2+ выживаемость снижается соответственно на 17, 15, 12 и 2% по сравнению с контролем.

На 21 сутки эксперимента в опытах с Cu2+ . Zn2+ . Pb2+ и Cd2* выживаемость D polymorpha понизилась на 72, 25, 17 и 7 % по сравнению с контролем, а по сравнению с 9 сутками - соответственно на 55, 10, 5 и 5%

Известно, что синтез металлотионеинов в организме гидробионтов является ответом на действие стрессорных факторов физической и химической природы, в том числе тяжелых металлов, которым отводится главная роль в развитии толерантности при воздействии тяжелых металлов (Doherty,1988; Bebianno, 1991; Klaassen, 1989; Posthuma, 1993; Lafontaine, 2000, Pourang, 2005) При этом метаплотионеины участвуют в метаболизме необходимых клеткам металлов (Zn, Мп, Си и др) и детоксифицируют тяжелые металлы (Pb, Cd и др ).

Полученные нами данные о влиянии содержания в воде Cu2+ , Zn2+ , Pb2+ и Cd2+ на содержание металлотионеинов в теле D polymorpha в эксперименте представлено в таблице 6

Таблица 6 - Содержание металлотионеинов (мкг/г) в теле D polymorpha в условиях эксперимента

Сутки Контроль Cd Си Pb Zn

1 2,73 ±0,17

9 3,1 ±0,11 7,25 ± 0,4я 7,05 ± 0,39° 6,13 ±0,1" 5,69 ±0,2"

21 2,8 ± 0,09 18,05 ± 2,14 1 17,2 ± 1,9я 6 17,77± 1,2"'1 10,28 ± 0,91"1'

Примечание а - достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с 1 сут, b -достоверное отличие (р < 0,05) по сравнению с 9 сут

На 9 сутки эксперимента в опыте с РЬ2+, Ъх?*, Cd2+ и Си2+ отмечено повышение уровня металлотионеинов в теле моллюсков соответственно в 2,9, 2, 2,6 и 2,6 раза по сравнению с 1 сутками На 21 сутки эксперимента содержание металлотионеинов в теле моллюсков возросло соответственно в 6,5, 3,8, 6,6, 6,2 раза по сравнению с 1 днем, а по сравнению с 9 днем уровень металлотионеинов в теле Б ро1утогрУш понизился соответственно - в 2,9, 1,8, 2,5 и 2,4 раза

В контроле, в течение всего эксперимента, не происходило статистически значимого изменения содержания металлотионеинов в теле Б ро1утогрЬа (таб 12), при снижении концентрации Си2+ и РЬ2+ в теле Б ро1утогрИа в 2,6 и 2,9 раза соответственно на 21 сутки Отсутствие изменения содержания металлотионеинов в теле Б ро1утогрИа связано с обезвреживанием ионов исследуемых металлов и будет определяться скоростью выведения ионов металлов из организма моллюсков

Водородный показатель (рН) представляет собой фактор,

регулирующий активность организмов. Оптимальное значение рН среды для жизни В. ро!утогрЪа лежит в пределах рН 7,0-8,0. Показатель рН оз. Форелевое приблизительно составляет рН 7,9.

При содержании моллюсков в течение 21 дня при раздельном введении С<12+, РЬ 2п2*, Си2+ на уровне 1 ПДК отмечено изменение рН межстворчатой жидкости в сторону увеличения кислотности по сравнению с контролем (рис. 9). Известно, что ионы тяжелых металлов изменяют рН межстворчатой жидкости в сторону увеличения кислотности (Шкорбатов, 1990).

7,8

* Отличие от контроля достоверно, р<0,05.

Рисунок 9 — рН межстворчатой жидкости О. ро1утогрЬа после 21 дня содержания в воде с ионами тяжелых металлов

Снижение рН межстворчатой жидкости отмечалось при экспозиции моллюсков в среде с тяжелыми металлами и составило Си2+- 7,5, гп2+- 7,57, РЬ2+- 7,62, С<12+- 7,65. Наибольшее влияние на изменение рН оказывали Си : отмечено самое низкое значение рН.

Установлено влияние рН на выживаемость £>. рсАутогрИа. При рН межстворчатой жидкости 7,77 выживаемость в контроле составляла 100%, при раздельном введении в воду Си2+, 2п2+, РЬ2+ и Сс12+ рН межстворчатой жидкости изменилась соответственно на 0,27, 0,20, 0,15 и 0,12. Самая низкая выживаемость А ро1утогрИа отмечена в воде с содержанием Си2+ - 1,0 мг/л, при наименьшем значении рН межстворчатой жидкости, что можно объяснить токсическим действием Си2+ на организм А ро1утогрЬа вследствие нарушения структуры медьсодержащего белка гемоцианина

(Стадниченко, 1998, Божков, 1991), входящего в состав гемолимфы моллюсков

Таким образом, выявлено отрицательное влияние Си2+, 2п2+, РЬ2+ и Сё2+ при раздельном введении на уровне 1 ПДК на выживаемость £> ро1утогрИа Установлена прямая зависимость между снижением выживаемости и изменением рН межстворчатой жидкости у 23 ро1утогрЪа Одновременное увеличение уровня металлотионеинов в теле Б ро1утогрка и изменение рН межстворчатой жидкости, что по нашему мнению, можно рассматривать как механизм защиты организма от токсического действия Си2+, гп , РЬ2+и Сс12+.

X). ро1утогрка как индикатор загрязнения водоема тяжелыми металлами

К преимуществам биологического мониторинга относится то, что полученная с его помощью информация позволяет дать интегральную картину, учитывающую всю совокупность действующих факторов, а также синергические и антагонистические эффекты их взаимодействия, в том числе и тех, которые не отслеживают контролирующие уровень техногенного загрязнения службы, поскольку они ориентированы на анализ фиксированной номенклатуры техногенных токсикантов Данная проблема особенно актуальна при биоиндикации разовых, залповых сбросов предприятии в водоемы За короткий промежуток времени в воде достигаются значительные концентрации поллютантов токсическое действие которых будет испытывать экосистема водоема В этот период необходимо, что бы используемый биоиндикатор в кратчайшие сроки дал информационный отклик, и был специфичен к определенному типу загрязнения После прекращения действия загрязнителя, в результате разбавления, переноса с током воды и тд, биоиндикатор должен как можно быстрее вернуться на контрольный уровень Однако, одним из существенных недостатков методов биологического мониторинга является сохранения повышенных показании биоиндикатора значительное время после прекращении действия стрессорного фактора.

Использование в целях биологического мониторинга уровня металлотионеинов в моллюсков позволяет прямо оценить биологическое действие физических и химических агентов окружающей среды

Полученные нами данные показывают способность В ро1утогрИа накапливать в теле тяжелые металлы. Изменение содержания МТ свидетельствует об информативности данного биохимического показателя как биоиндикатора токсического действия ионов тяжелых металлов

Полученные данные позволяют предположить, что уровень белков -металлотионеинов в теле й ро1утогрИа может быть использован для экологического мониторинга действия ионов тяжелых металлов Действительно, показано, что при действии РЬ2+, Сс12+, Си2+ и индукция металлотионеинов в теле £> ро1утогрка будет обусловлена в большей

22

степени поступлением ионов С(12+ что позволяет судить об избирательности данного показателя на действие ионов Сс12+

Представленные результаты свидетельствуют об эффективности и информативности использования содержания металлотионеинов в теле Б ро\утогрЬа в качестве биоиндикационного параметра в программах биологического мониторинга антропогенно загрязненных тяжелыми металлами территорий

ВЫВОДЫ

1. Содержание Сс12+, Хп2*, РЬ2+ и Си2+ в теле Б ро1утогрИа имеет сезонную динамику. Концентрация РЬ2+ и Сс12+ теле Б ро1утогрка зависит, а 2п2+ и Си2+ — не зависит от их содержания в воде

2 Постоянный уровень 2п2+ в теле Б ро1утогрИа свидетельствует об ее способности регулировать концентрацию 2п2+ независимо от его содержания в окружающей среде

3 Рассчитанные коэффициенты накопления С<12+, РЬ2~ и Си2+ для Б ро1утогрИа• КНРЬ (28) > КНСи (295) > КНС<1 (385) >КН2п (1682) показывают, что моллюски обладают различной способностью к аккумуляции тяжелых металлов

4 Установлена сезонная динамика содержания металлотионеинов в теле Б ро1утогрИа, которая зависит как от концентрации 2п2+ и С(121" в воде, так и в теле Б ро1утогрка

5 Межвидовые различия в содержании тяжелых металлов и металлотионеинов в теле Б ро!утогрИа обусловлены как экологическими факторами, так и физиолого-биохимическими особенностями вида.

6 При содержании в воде РЬ2+ (0,03 мг/л), 2п2+ (1,0 мг/л), Сс12+ (0,001 мг/л), Си2+ (1,0 мг/л) отмечено снижение выживаемости Б ро1утогрЬа на фоне увеличения содержания уровня металлотионеинов в теле Б ро1утогрИа и изменения рН межстворчатой жидкости.

7. Изменение уровня белков - металлотионеинов в теле Б

ро1утогрЪа можно рассматривать как механизм защиты организма от

токсического действия Си2+, 2п2+, РЬ2+ и Сс12+ и может быть использован в

качестве биоиндикатора в системе биомониторинга

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Павловская В.В. К вопросу изучения видового и полового различия содержания металлотионеинов в моллюсках Dreissena polymorpha и Mytilus edulis обитающих в водоемах Калининградской области / В.В Павловская, И.А. Шестакова // 8 Московская международная телекоммуникационная конференция молодых ученых и студентов «Молодежь и наука» МИФИ. - Москва, 2004 (httpV/molod mephi ru/reports asp?rid=598)

2. Павловская В.В Различия содержания металлотионеинов у двустворчатых моллюсков разных видов У И.А Данилин, В.В. Павловская, Е А Залуцкая // 9-ая Международная Пущинская школа-конференция молодых ученых «Биология - Наука XXI века»: Сборник материалов. -Пущино, 2005 - с. 293.

3 Павловская В В Экологический мониторинг водных объектов с хроническим комплексным загрязнением тяжелыми металлами / И А. Данилин, В В. Павловская, Е А Залуцкая // Материалы 5-ой международной научной конференции Сахаровские чтения 2005 • «Экологические проблемы XXI века», - Минск, Республика Беларусь, 20-21 мая 2005г. - С. 105-106

4. Pavlovskaya V.V. Assessment of Metallothionein Concentration in Bivalve Molluscs Tissues Monitor Freshwater Pollution by heavy metals and radionuclides /1A Danilin, V V Pavlovskaya // The 2nd International Conference on Radioactivity in the Environment, - Nice, France, 2-6 October 2005. P 570573

5. Павловская В.В. Анализ ответной реакции моллюска Dreissena polymorpha при действии ионов тяжелых металлов с позиции биоиндикации / В В. Павловская, Е А. Залуцкая, И.А Данилин // Материалы 6-ой международной научной конференции Сахаровские чтения 2006 года. Экологические проблемы XXI века - Минск, Республика Беларусь - 18-19 мая 2006г - С 197-200

6 Павловская В В Анализ содержания металлотионеинов у двустворчатых моллюсков разных видов обитающих в водоемах с различной степенью антропогенной нагрузки / И А. Данилин, В.В. Павловская, Е А. Залуцкая // «Вестник РУДН» серия Экология и безопасность жизнедеятельности - М,-2006 -№1(13) - С 16-19

7. Павловская В В Экологические аспекты реакции моллюсков Dreissena polymorpha на действие тяжелых металлов / И.А Данилин, В В Павловская // Экологическое состояние природной среды и научно-

практические аспекты современных мелиоративных технологий: Сб науч. тр. Вып. 2. - Рязань: Мещерский филиал ГНУ ВНИИГиМ, - 2006. - С 22-28

8 Павловская В В Эндоэкологические аспекты реакции моллюсков на загрязнение водоема радионуклидами / И А Данилин, В В Павловская // V съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность). - Москва, - 2006 - с. 97

9. Павловская В В. Содержание тяжелых металлов в тканях Dreissena polymorpha / В В Павловская, И А Данилин, Е А Залуцкая // The Conference «Technology Science Works in the Western Lithuania», Klaipeda university. - Klaipeda, Lithuania, - 2006 -c 226-227.

10 Павловская B.B Сезонные изменения металлотионеинов в тканях Dreissena polymorpha / Е А Залуцкая, В В Павловская, И А Данилин // The Conference «Technology Science Works in the Western Lithuania», Klaipeda university - Klaipeda, Lithuania, - 2006. - c. 227-229

11. Павловская В В Удельное содержание металлотионеинов в тканях моллюсков - биоиндикатор загрязнения водоема тяжелыми металлами / И А Данилин, В В Павловская II «Вестник РУДН» серия Экология и безопасность жизнедеятельности - М, - 2006 - №2 (14). - С. 87-92

ПАВЛОВСКАЯ Валерия Владимировна

Экологические аспекты реакции моллюсков Dreissena polymorpha (Pallas, 1771) на действие ионов тяжелых металлов

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Подписано в печать 10 10 2007г Заказ № 58 Объем 1,5 уел п л Тираж 100 экз

Отпечатано в типографии ИП Мишуткиной И В 236000, г Калининград, ул Ген-лейт Озерова, 17Б, 3 зг, каб 8 Тел +7 4012 571752

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Павловская, Валерия Владимировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Характеристика металлотионеинов.

1.2. Уровень металлотионеинов как биоиндикационный параметр загрязнения водной среды тяжелыми металлами.

1.3. Адаптации двустворчатых моллюсков к антропогенным факторам среды.

1.4. Основные черты биологии Dreissena polymorpha (Pallas, 1111).

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА РАЙОНА ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Гидрологическая характеристика оз. Форелевое.

2.2. Гидрохимическая характеристика оз. Форелевое.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА.

3.1. Материал.

3.2. Методика.

3.2.1. Сбор и измерение материала.

3.2.2. Метод выделения и определения содержания металлотионеинов у D. polymorpha.

3.2.3. Метод определения тяжелых металлов в теле

D. polymorpha и в воде.

3.2.4. Метод измерения рН межстворчатой жидкости.

3.2.5. Моделирование экосистемы для оценки влияния токсикантов (Pb2+, Cd2+, Zn2+, Cu2+) на D. polymorpha.

3.2.6. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

4.1 Сезонные изменения содержания тяжелых металлов в теле D. polymorpha.

4.2 Межвидовые различия в содержании тяжелых металлов в теле моллюсков.

4.3 Сезонные изменения содержания металлотионеинов в теле D. polymorpha.

4.4. Межвидовые различия в содержании металлотионеинов в теле моллюсков.

4.5. Изменение содержания тяжелых металлов D. polymorpha в теле при действии ионов тяжелых металлов.

4.6. Выживаемость моллюсков D. polymorpha при действии ионов тяжелых металлов.

4.7. D. polymorpha как индикатор загрязнения водоема тяжелыми металлами.

ВЫВОДЫ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

Г6ФДГ металл отионеины тяжелые металлы

- предельно допустимая концентрация

- коэффициент накопления

- дезоксирибонуклеиновая кислота

- глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа

- глутатион восстановленный

- перекисное окисление липидов

- бактериостатические свойства сыворотки крови

- гексокиназа

- пируваткиназа

- фермент пентозофосфатного пути

- фитохелатины

- центральная нервная система

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологические аспекты реакции моллюсков Dreissena Polymorpha (Pallas, 1771) на действие ионов тяжелых металлов"

В последние десятилетия в экосистемах водоемов наблюдаются изменения, которые происходят под влиянием естественных факторов окружающей среды и хозяйственной деятельности человека. Поэтому особую актуальность приобретают исследования закономерностей реакций водных организмов на меняющиеся условия окружающей среды. Угрозу для жизнедеятельности гидробионтов представляют тяжелые металлы и их соединения (Кадмий:., 1994; Челомин, 1998; Яп, 2003; Подгурская, 2006).

Высокий уровень загрязнения среды тяжелыми металлами приводит к снижению видового разнообразия гидробионтов (Брень, 1998). Использование гидробионтов в качестве биоиндикаторов позволяет судить о значении этих токсикантов. Как организмы-индикаторы токсичности водной среды исследовались многие группы гидробионтов: водоросли (бурые, красные, зеленые) и животные (костистые рыбы, ракообразные, моллюски полихеты и др.). Установлено (Христофорова, 1989; Киричук, 2006), что именно моллюски являются наиболее чувствительными организмами к содержанию ионов тяжелых металлов в воде.

Для определения действия ионов тяжелых металлов на гидробионтов используют метод определения удельного содержания белков - металлотионеинов в тканях (Ротт, 1995; Morris, 1999; Raspor, 1999; Данилин, 2002). В качестве тест-объектов использовались морские и речные рыбы (Hamilton, 1986; Christer, 1991), морские беспозвоночные (омар, моллюски) (Roesijadi, 1994; Bebiano, 1999; Danilin, 2005), пресноводные моллюски Anodonta cygnea и Unio pictorum (Данилин, 2002). Синтез белков - металлотионеинов в теле моллюсков, представляет собой ответ на действие стрессорных факторов физической и химической природы, в том числе тяжелых металлов (Lafontaine, 2000; Pourang, 2005).

В связи с этим весьма актуальным является изучение влияния концентрации тяжелых металлов в воде на содержание тяжелых металлов и металлотионеинов в теле D. polymorpha.

Цель работы - исследование особенностей накопления тяжелых

21 л |, 2+ 21 металлов (Zn , Cd , Си и РЬ ) и металлотионеинов в теле А polymorpha', установление возможности использования моллюска А polymorpha в качестве тест-объекта при определении загрязнения тяжелыми металлами водоемов. . '

Для достижения поставленной цели необходимо было решить "' -следующие задачи:

1. Определить сезонную динамику накопления Zn2+, Cd2+, Cu2+ и Pb в теле A polymorpha из оз. Форелевое.

2. Установить влияние сезонного содержания Zn2+, Cd2+, Cu2+ и Pb в воде и теле A polymorpha на уровень металлотионеинов в теле моллюсков.

3. Изучить межвидовые отличия в содержании Zn2+, Cd2+, Cu2+ и I

Pb и металлотионеинов в теле моллюсков. Л I Л г Л I Л I

4. Выявить влияние содержания в воде

ZnZT, Cdz , Си и РЬ на изменение уровня металлотионеинов, рН межстворчатой жидкости и выживаемость A polymorpha.

5. Оценить возможность использования белков металлотионеинов в теле A polymorpha, как показателя содержания тяжелых металлов в процессе биологического мониторинга.

Положения, выносимые на защиту

1. Содержание в теле A polymorpha Pb2+, Cd2+, Zn2+ и Cu2+ , а также накопление металлотионеинов зависит от содержания в воде тяжелых металлов.

2+

2. Д polymorpha способна регулировать концентрацию Zn в теле независимо от его содержания в окружающей среде.

I ^| 2+ 2|

3. При раздельном введении в воду Pb , Cd , Zn и Си выявлено понижение выживаемости на фоне повышения металлотионеинов и изменения рН межстворчатой жидкости. Наиболее токсическое действие на организм Д. polymorpha оказывает Си . I 21 21 21

4 Содержание в воде

Pb , Cd , Zn и Си определяет уровень металлотионеинов в теле Д polymorpha, который можно рассматривать как механизм защиты организма от действия тяжелых металлов среды и использовать в качестве биоиндикатора в системе биомониторинга.

Научная новизна. Впервые установлены зависимости между о I л I л I ^ I содержанием Pb , Cd , Zn и Си и уровнем металлотионеинов в теле Д polymorpha от содержания тяжелых металлов в воде. Выявлено влияние

Л I ^ г ^ I О I содержания в воде Pb , Cd , Zn и Си на выживаемость на фоне повышения металлотионеинов и изменения рН межстворчатой жидкости. Установлено, что Си2+ оказывает наиболее токсическое действие на организм Д polymorpha. Показана способность Д. polymorpha регулировать концентрацию Zn2+ в теле независимо от его содержания в окружающей среде.

Практическая значимость. Результаты, полученные при исследовании особенностей накопления металлотионеинов в теле Д polymorpha позволяют определить пути адаптации гидробионтов к неблагоприятным факторам среды обитания и понять физиолого-биохимические механизмы их устойчивости. Поэтому установление закономерностей накопления металлотионеинов под действием экологических факторов (тяжелых металлов) имеет не только теоретическое, но и большое практическое значение для решения конкретных задач биомониторинга. Обоснована возможность использования уровня металлотионеинов в теле Д polymorpha в качестве биоиндикационного параметра в системе биомониторинга. Полученные результаты можно использовать при чтении курсов по «Гидробиологии», «Экологии», «Экологической токсикологии».

Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на 9-й Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых (Пущино, 2005), на 5-й и 6-й Международных научных конференциях «Сахаровские чтения 2005, 2006 гг.: Экологические пН проблемы XXI века» (Минск, Беларусь, 2005, 2006), The 2 International Conference on Radioactivity in the Environment & the 6th International Conference on Environmental Radioactivity in the Arctic and the Antarctic (Nice, France, 2005), II региональной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Техногенные системы и экологический риск» (Обнинск, 2005), Международной научной конференции «Инновации в науке и образовании - 2005» (Калининград, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы экологии и природопользования» (Москва, 2006), V съезде по радиационным исследованиям (радиобиология, радиоэкология, радиационная безопасность) (Москва, 2006), The Conference «Technology Science Works in the Western Lithuania» (Klaipeda, Lithuania, 2006).

Декларация личного участия автора. Автором самостоятельно в полевых условиях собран и обработан в лаборатории материал по D. polymorpha; определены концентрации Pb2+, Cd2+, Zn2+ и Си , а также уровень удельного содержания металлотионеинов в теле D. polymorpha; определено влияние содержания в воде РЬ (0,03 мг/л), Cd (0,001 мг/л), ОТ (1,0 мг/л), Zn (1,0 мг/л) на выживаемость D. polymorpha; проведены эксперименты по оценке возможности использования белков -металлотионеинов в теле D. polymorpha, как показателя загрязнения водной среды тяжелыми металлами.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 работ.

Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы. Работа изложена на 102 страницах машинописного текста, включает 12 таблиц и 9 рисунков. Библиографический список содержит 118 отечественных и 89 зарубежных источников.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Павловская, Валерия Владимировна

ВЫВОДЫ I ^ I А I л I

1. Содержание Cd , Zn , Pb и Си в теле D. polymorpha имеет fji сезонную динамику. Концентрация Pb и Cd теле D. polymorpha зависит, a Zn2+ и Си2+ — не зависит от их содержания в воде.

2. Постоянный уровень Zn в теле D. polymorpha свидетельствует об ее способности регулировать концентрацию Zn2+ независимо от его содержания в окружающей среде.

3. Рассчитанные коэффициенты накопления Cd2+, Zn2+, Pb2+ и Cu2+ для D. polymorpha: KHPb (28) < KHCu (295) < KHCd (385) < KHZn (1682) показывают, что моллюски обладают различной способностью к аккумуляции тяжелых металлов.

4. Установлена сезонная динамика содержания металлотионеинов в теле D. polymorpha, которая зависит как от концентрации Zn и Cd в воде, так и в теле D. polymorpha.

5. Межвидовые различия в содержании тяжелых металлов и металлотионеинов в теле D. polymorpha обусловлены как экологическими факторами, так и физиолого-биохимическими особенностями вида.

6. При содержании в воде РЬ2+ (0,03 мг/л), Zn2+ (1,0 мг/л), Cd2+ (0,001 мг/л), Си (1,0 мг/л) отмечено снижение выживаемости D. polymorpha на фоне увеличения содержания уровня металлотионеинов в теле D. polymorpha и изменения рН межстворчатой жидкости.

7. Изменение уровня белков - металлотионеинов в теле D. polymorpha можно рассматривать как механизм защиты организма от токсического действия Си , Zn , Pb и Cd и может быть использован в качестве биоиндикатора в системе биомониторинга.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Павловская, Валерия Владимировна, Калининград

1. Алемов С.В. О создании искусственных поселений мидий в целях гидробиологической очистки морских нефтесодержащих вод / С.В. Алемов // Искусственные рифы для рыбного хозяйства: Тез. докл. М.: ВНИРО, -1987.-С. 69-71.

2. Аристова Г.И. Дрейссена Куршского залива и перспективы ее использования / Г.И. Аристова // Труды Калининградского технического института рыбной промышленности и хозяйства: сб. науч. тр. / КГТУ. Калининград. 19686. - Вып. 20. - С. 85 - 93.

3. Аристова Г.И. Дрейссена Куршского залива и перспективы ее использования/ Г.И. Аристова // Труды Калининградского технического института рыбной промышленности и хозяйства: сб. науч. тр. / КГТУ. Калининград. 1968а. - Вып. 20. - С. 17-21.

4. Баранов И.В. Основы биопродукционной гидрохимии / И.В. Баранов М.: Легк. и пищ. пром-сть, - 1982. - 109 с.

5. Бедова П.В. Использование моллюсков в биологическом мониторинге состояния водоемов / П.В. Бедова, Б.И. Корупаев // Экология. 1998. - № 5.-С. 410-411.

6. Берникова Т.А. Озеро Форелевое / Т.А. Берникова // Калининградская область. Очерки природы. Калининград. - 1999. - С. 90-91.

7. Берникова Т.А. Экологическое состояние озера Форелевое / Т.А. Берникова, В.Ф. Дубравин, Н.А. Цупикова и др. // Известия КГТУ

8. Материалы международной конференции «Инновации в науке и образовании 2004». - Калининград. - 2005. - № 7. - С. 30 - 34.

9. Биологические инвазии в водных и наземных экосистемах / под ред. А.Ф. Алимов, Н.Г. Богуцкая. М.: Товарищество научных изданий, 2004. - 436 с.

10. Биргер Т.И. Метаболизм водных беспозвоночных в токсической среде / Т.И. Биргер. Киев: Наукова думка, -1972. - 456 с.

11. Божков А.И. Проявление генотоксичности тяжелых металлов в клетках водорослей и инфузорий / А.И. Божков, Е.В. Усенко // II Всесоюз. конф. по рыбохоз. токсик.: Тез. докл. СПб., 1991. - 1. - С. 54-55.

12. Брень Н.В. Беспозвоночные как мониторы полиметаллического загрязнения донных отложений / Н.В. Брень, В.Г. Домашлинец // Гидробиол. журн. -1998. Т. 34, №5. - С. 80-93.

13. Виселина Т.Н. Изменение активности ферментов углеводного обмена у моллюсков под действием кадмия / Т.Н. Виселина, О.Н. Лукьянова // Биология моря. 2000. - Т. 26, № 4. - С. 278 - 280.

14. Владимиров A.M. Охрана окружающей среды / A.M. Владимиров, Ю.И. Ляхин, Л.Т. Матвеев и др. Л.: - Гидрометеоиздат, - 1991. - 423с.

15. Воскресенский К.А. Пояс фильтраторов как биологическая система моря / К.А. Воскресенский // Тр. ГОИН. 1948. - Вып. 6, № 18. - С. 55 - 119.

16. Галактионов В.Г. Очерки эволюционной иммунологии / В.Г. Галактионов. -М.: Наука,-1995.-256 с.

17. Гидрометеорологические исследования внутренних водоемов Прибалтики: Итоговый отчет / под ред. Т.А. Берниковой. Калининград. -1991.- 15 с.

18. Говорин И.А. Роль двустворчатых моллюсков в очищении морской среды от бактериального загрязнения / И.А. Говорин // Биология моря. 2000. -Т. 26,№2.-С. 77-85.

19. Давыдов C.JL, Тарасов В.И. Тяжелые металлы как супертоксиканты XXI века / C.JI. Давыдов, В.И. Тарасов М.: Изд-во РУДН, - 2002. - 140 с.

20. Данилин И.А. Участие металлотионеинов в формировании ответной реакции растительных и животных клеток на действие у-излучения и ионов кадмия: дис. канд. биол. наук / И.А. Данилин. Обнинск. - 2004. - 107 с.

21. Дин Р. Процессы распада в клетке / Р. Дин. М.: Мир, 1981. - 120 с.

22. Догель В. А. Зоология беспозвоночных животных / В. А. Догель. М.: Высш. шк., - 1975. - 560 с.

23. Дрейссена. Dreissena polymorpha (Pall.) {Bivalvia, Dreissenidae): Систематика, экология, практическое значение: Место вида в биоценозах / А.Ю. Каратаев, В.П. Ляхнович, С.А. Афанасьев и др.; под ред. Я.И. Старобогатов.-М.: Наука, 1994.-С. 180-195.

24. Дрейссена. Dreissena polymorpha (Pall.) {Bivalvia, Dreissenidae): Систематика, экология, практическое значение: Условия обитания / В.П. Ляхнович, А.Ю. Каратаев, С.М. Ляхов и др.;. под ред. Я.И. Старобогатов-М.: Наука, 1994.-С. 109-119.

25. Жадин В.И. Моллюски пресных вод СССР / В.И. Жадин. М., Л.,: Изд-во АН СССР,-1952.-450 с.

26. Жадин В.И. Реки, озера, водохранилища СССР, их фауна и флора / В.И. Жадин, С.В. Герд. -М.: Учпедиз. 1961. - 135 с.

27. Зевина Г.Б. Обрастания в морях СССР / Г.Б. Зевина- М., Изд. Москов. унта,-1972.-С. 149-152.

28. Кадмий: экологические аспекты. Гигиенические критерии состояния окружающей среды 135. Женева: Всемирная организация здравоохранения, 1994. - 160 с.

29. Капков В.И. Водоросли как биомаркеры загрязнения тяжелыми металлами морских прибрежных экосистем: автореф. дис. доктора, биол. наук / В.И. Капков.-М.- 2003.-34 с.

30. Качалова O.JI. Dreissena polymorpha (Pallas) в бассейне р. Даугавы / O.JI. Качалова Н.А. Слока // Труды ин-та биол. внутр. вод. -1964. Вып. 7(10). -С. 47-54.

31. Качанова А.А. О росте Dreissena polymorpha (Pallas) в Учинском водохранилище и каналах Мосводопровода / А.А. Качанова // Учинское и Можайское водохранилища. М. 1963. - С. 226-234.

32. Качество воды: определение токсических элементов, пламенные атомно-абсорбционные спектрометрические методы: ИСО 8288 86.

33. Киричук Г.Е. Особенности накопления ионов тяжелых металлов в организме пресноводных моллюсков / Г.Е. Киричук // Водная токсикология. 2006. - С. 99-110.

34. Кирпиченко М.Я. К экологии Dreissena polymorpha (Pallas) в Цимлянском водохранилище / М.Я. Кирпиченко // Труды ин-та биол. внутр. вод. АН СССР.-1971.-Вып. 21.-С. 142-154.

35. Константинов А.С. Общая гидробиология / А.С. Константинов. М.: Высшая школа, 1986. - 470 с.

36. Котеров А.Н. Влияние цинк-металлотионеина на перекисное окисление липидов в клетках костного мозга грызунов / А.Н. Котеров, З.А. Требенок, Н.Б. Пушкарева и др. // Радиац. биология. Радиоэкология. 1998а. - Т. 38. -Вып. 3. - С. 426-430.

37. Котеров А.Н. Радиоадаптивный ответ in vitro нестимулированных лимфоцитов крыс по металлотионеиновому тесту / А.Н. Котеров, И.В. Филлипович // Радиац. биология. Радиоэкология. 2002. - Т. 42. - №. 2. -С. 130-135.

38. Котеров А.Н. Радиобиология металлотионеинов / А.Н. Котеров, И.В. Филлипович // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. - Т. 35. - Вып. 2. -С. 162-180.

39. Котеров А.Н. Связь между содержанием металлотионеином в костном мозге, печени и выживаемостью облученных мышей после введения хлористого кадмия / А.Н. Котеров, А.Ю.Сазыкин, И.В. Филлипович // Радиобиология. -1993.-Т. 33.-Вып. 1.- С. 122-127.

40. Котеров А.Н. Содержание металлотионеинов в костном мозге и печени мышей и в лимфоцитах человека после общего у-облучения / А.Н. Котеров, А.Ю. Сазыкин // Радиац. биология. Радиоэкология. 1994. - Т.34. - Вып. 2.- С. 190-195.

41. Криволуцкий Д.А. Биоиндикация в системе наук о состоянии окружающей человека среды / Д.А. Криволуцкий // Пробл. экол.: Метер. 1 Учредит, совещ. акад. наук соц. стран по пробл. "Экология", Суздаль, май, 1990 -Петрозаводск. 1990. - С. 42-69.

42. Лукьяненко В. И. Токсикология рыб / В. И. Лукьяненко. М.: Высш. шк., -1967.-245 с.

43. Луферов В.П. О пагоне прибрежья Рыбинского водохранилища / В.П. Луферов // Экология и биология пресноводных беспозвоночных. Труды ин-та биол. внутр. вод., JL: Наука, 1975. - Вып. 8 (11). - С. 51-54.

44. Львова А.А. Экология Dreissena polymorpha (Pall.) Учинского водохранилища: дис. канд. биол. наук / А.А. Львова. М. - 1977. - 114 с.

45. Львова А.А. Роль донных организмов в трансформации органического вещества и в процессах самоочищения водоемов / А.А. Львова, Э.И. Извекова, Н.Ю. Соколова // Тр. Всесоюзного гидробиологического общества. 1980. - Т. 23. - С. 171 - 177.

46. Ляхов С.М. Работы Института биологии внутренних вод АН СССР по защите гидротехнических сооружений от обрастаний дрейссеной / С.М. Ляхов // Труды ин-та биол. внутр. вод. 1964. - Вып. 7 (10). - С. 66-70.

47. Майстренко В.Н. Эколого-аналитический мониторинг супертоксикантов / В.Н. Майстренко, Р.З. Хамитов, Т.К. Будников. М.: Химия, - 1996. - 319 с.

48. Микряков В.Р. Влияние солей некоторых тяжелых металлов на картину белой крови молоди ленского осетра Acipenser baeri Brandt / В.P. Микряков, Т.Б. Лапирова // Вопр. ихтиологии. 1997. - Т. 37. - № 4. - С. 538-542.

49. Миловидова Н.Ю. Черноморский макрозообентос в санитарно-биологическом аспекте / Н.Ю. Миловидова, Л.Н. Кирюхина. Киев: Наукова думка, - 1985. - 104 с.

50. Минакова В.В. Двустворчатые моллюски родов Unio и Anodonta -компоненты биологических ресурсов р. Урал и участие их лизоцима в процессах регуляции бактериоценозов: дисс. канд. биол. наук / В.В. Минакова. Оренбург, 2005. - 157 с.

51. Миронов О.Г. К вопросу об использовании гидробионтов в борьбе с загрязнением моря / О.Г. Миронов // Гидробиол. журн. 1985. - Т.21. - № 5.-С. 24-28.

52. Миронов О.Г. Мидии как элемент гидробиологической системы очистки загрязненных морских вод / О.Г. Миронов // Водн. ресурсы. 1988. - № 5. -С. 104-111.

53. Михеев В.П. О линейном росте Dreissena polymorpha (Pallas) в некоторых водохранилищах европейской части СССР / В.П. Михеев // Тр. Ин-та биологии внутр. вод АН СССР. 1964. - Вып.7 (10). - С. 55 - 65.

54. Немова Н.Н. Влияние некоторых токсических факторов на лизосомальные протеиназы пресноводных рыб / Н.Н. Немова, B.C. Сидоров // Гидробиол. журн. 1990. - Т. 16. - № 4. - С. 69 - 73.

55. Немцева Н.В. Микробиологическая характеристика биоценотических взаимоотношений гидробионтов и ее значение в санитарной оценке водоема: автореф. дис. д-ра мед. наук / Н.В. Немцева. Челябинск. -1998.-38 с.

56. Нефедова Е.М. Роль лизоцима гидробионтов в процессах самоочищения водоемов: дис. канд. биол. наук / Е.М. Нефедова. Оренбург. - 2001. -174 с.

57. Нижегородова JI.E. Влияние стока реки Дунай на микробиоценоз северозападной части Черного моря / JI.E. Нижегородова, JI.M. Нидзвецкая // III Всесоюз. конф. по морской биологии: Тез. докл. Киев. - 1988. - Ч. 2. - С. 126-127.

58. Никаноров A.M., Жулидов А.В., Покаржевский А.Д. Биомониторинг тяжелых металлов в пресноводных экосистемах. Д.: Гидрометеоиздат, 1985.-144 с.

59. Николайкин Н.И. Экология: учеб. для вузов / Н.И. Николайкин, Н.Е. Николайкина, О.П. Мелехова. М.: Дрофа, - 2003. - 624 с.

60. Новиков Ю.В. Методы исследования качества воды водоемов / Ю.В. Новиков, К.О. Ласточкина, З.Н. Болдина. М.: Медицина, - 1990. - 400 с.

61. Ноздрюхина Л.Р. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека / Л.Р.Нозрюхина. М.: Наука, 1977. - 183 с.

62. Определитель пресноводных беспозвоночных России и сопредельных территорий / ред. С. Я. Цалолихин; РАН, Зоол. ин-т. Т. 6, Моллюски. Полихеты. Немертины, СПб.: Наука, 2004. 526 с.

63. Определитель пресноводных беспозвоночных СССР (планктон и бентос). -Л.: Гидрометеоиздат, 1977. - 360 с.

64. Павлова Е.С. Моллюски индикаторы миграции и распределения металлов в шельфовых экосистемах / Е.С. Павлова // Док. МОИП: Зоол. и ботан. - М.: Изд-во МГУ, - 1987. - С. 24 - 26.

65. Плавильщиков Н.Н. Определитель насекомых / Н.Н. Плавильщиков. М.: Топикал, 1994.-544 с.

66. Подгурская О.В. Механизмы детоксикации тяжелых металлов у морских моллюсков семейства Mytilidae: дис. канд. биол. наук /О.В. Подгурская. -Владивосток. 2006. - 106 с.

67. Попов П.А. Множественный формы ферментов живородки речной как маркеры токсического загрязнения воды: дис.канд. биол. наук / А.П. Попов.-М., 2002.-171 с.

68. Рамад Ф. Основы прикладной экологии / Ф. Рамад. JI: Гидрометеоиздат, 1981.-544 с.

69. Ротт Г. М. Содержание металлотионеинов у пресноводных моллюсков, обитающих в водоемах средней полосы России / Г. М. Ротт, В. А. Романцова, Б. И. Сынзыныс // Экология. 1999. - № 4. - С. 306 - 308.

70. Ротт Г.М. Свойство радиации в малых дозах и низкоинтенсивного ионизирующего излучения вызывать индукцию металлотионеинов / Г.М. Ротт, О.А. Сморызанова, В.А. Романцова // Радиац. биология. Радиоэкология. 1995. Вып. 4. С. 507-510.

71. Русин В.Я. Механизмы повышения неспецифической сопротивляемости организма / В.Я. Русин // Актуальные вопросы промышленной токсикологии. 1970. - № 4. - С. 108 - 127.

72. Саенко Г.Н. Металлы и галогены в морских организмах / Г.Н. Саенко. -М.: Наука, 1992.-199 с.

73. Саенко Г.Н. Роль марикультуры в охране биосферы / Г.Н. Саенко // Междунар. симпоз. по современным проблемам марикультуры в социалистических странах: Тез. докл. Большой Утриш, 1989. - С. 17 -18.

74. Селье Г. Очерки об адаптационном синдроме / Г. Селье. М.: Медицина, 1960.-254 с.

75. Скопцова Г.Н. Роль зообентоса в самоочищении воды водохранилища / Г.Н. Скопцова. Самоочищение воды и миграция загрязнений по трофической цепи. М.: Наука, 1984. - С. 81 - 85.

76. Смирнова Н.Ф. Экологическая характеристика некоторых мысовых видов двустворчатых моллюсков в районе Костромской ГРЭС / Н.Ф. Смирнова // Влияние тепловых электростанций на гидрологию и биологию водоемов: Сб. тр. Борок, 1974. - С. 168 - 170.

77. Соколов В.Е. Международная программа по биоиндикации антропогенного загрязнения природной среды / В.Е. Соколов, Я.Шаланки, Д.А. Криволуцкий // Экология 1990 - № 2. - С. 30-34.

78. Соколова Н.Ю. Фауна канала Учинского водохранилища и изменение ее при увеличении скорости течения / Н.Ю. Соколова, А.А Львова, Т.Д. Зинченко // Тез. докл. IV съезда Всесоюз. гидробиол. о-ва. Киев. - 1981. -С. 157- 158.

79. Спиридонов Ю.И. Исследование дыхания дрейссен полярографическим методом / Ю.И. Спиридонов // Вопросы физиологической и популяционной экологии. Саратов. 1972. - Вып.2. - С. 15-21.

80. Старобогатов Я.И. Раки, моллюски / Я.И. Старобогатов. JL: Лениздат, 1982.-126 с.

81. Старобогатов Я.И. Систематика и палеонтология / Старобогатова Я.И.// Дрейссена Dreissena polymorpha (Pall.) (Bivalvia, Dreissenidae): Систематика, экология, практическое значение. М.: Наука, 1994. - С. 1846.

82. Строганов Н.С. Моделирование возможных изменений экосистемы при загрязнениях по чувствительности гидробионтов к токсикантам /Н.С. Строганов // Влияние загрязняющих веществ на гидробионтов и экосистемы водоемов. Л. - 1979. - С. 142 - 149.

83. Строганов Н.С. Некоторые общие вопросы анализа действия оловоорганических соединений на гидробионтов / Н.С. Строганов // Оловоорганические соединения и жизненные процессы гидробионтов. М. -1975.-С. 241-259.

84. Строганов Н.С. Токсикология водных животных в связи с действием сточных промышленных вод на водоем / Н.С. Строганов // Зоол. журн. -1940. Т. 19, № 4. - С. 566 - 479.

85. Сырье и продукты пищевые. Атомно-абсорбционный метод определения токсических элементов (способ сухого озоления): ГОСТ 30178 96. Введ. 1998-01-01. М.: Изд-во стандартов, 1999. -11 с.

86. Сырье и продукты пищевые. Подготовка проб. Минерализация для определения токсичных элементов: ГОСТ 26929-86. Введ. 1996-01-01. -М.: Изд-во стандартов, 1999. 20 с.

87. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В.Ю. Урбах // М: Медицина, 1975. - 295 с.

88. Флеров Б.А. Изучение адаптации гуппи к фенолу / Б.А, Флеров // Гидробиол. журнал. 1970. - № 3. - С. 104 - 106.

89. Францевич И.И. Моллюски индикаторы загрязнения среды радионуклидами / И.И. Францевич, И.В. Паньков, А.А. Ермаков // Экология. - 1995. - № 1. - С. 57-62.

90. Хочачка П. Биохимическая адаптация / П. Хочачка, Д. Сомеро. М.: Мир, 1988.-567 с.

91. Христофорова Н.К. Биоиндикация и мониторинг загрязнения морских вод тяжелыми металлами / Н.К. Христофорова. М.: Мир, 1989. - 267 с.

92. Цветков И.Л. Кислая фосфатаза гидробионтов как фермент-индикатор биохимической адаптациик воздействию тоскических веществ / И.Л. Цветков, С.Л. Зарубин, Г.А. Урванцев и др. // Известия АН. Сер. биология. -1997.- №5.-С. 539-545.

93. Цихон-Луканина Е.А. Трофология водных моллюсков / Е.А.Цихон-Лукаина. М.: Наука, - 1987. - 176 с.

94. Челомин В.П. Биохимические механизмы адаптации мидии Mytilus trossulus к ионам кадмия и меди / В.П. Челомин, Н.Н. Бельчева, М.В. Захарцев // Биология моря. 1998. - Т. 24, № 5. - С. 319 - 325.

95. Шилов И.А. Экология: учеб. для биол. и мед. спец. вузов / И.А. Шилов. -М.: Высшая шк., 2001. 512 с.

96. Шитиков В.К. Количественная гидроэкология: методы, критерии, решения: в 2 кн. / В.К. Шитиков, Г.С. Розенберг, Т.Д. Зинченко. М.: Наука, 2005.- Кн.1.- 2005.- 281с.

97. Шкорбатов Г.Л. Методы изучения двустворчатых моллюсков / Г.Л. Шкорбатов, Я.И. Старобогатов. Л.: Зоологический ин-т АН СССР, 1990. -205 с.

98. Шкорбатов Г.Л. Эколого-физиологический анализ структуры волжских популяций Dreissena polymorpha (Pallas) / Г.Л. Шкорбатов // Тезисыдокладов IV съезда Всесоюзного гидробиологического общества. Киев. -1981.-Т. 4. С. 75-76.

99. Шостак Е.И. Характеристика ответных реакций антибактерий рода Rhodococcus на воздействие факторов среды: дис. канд. биол. наук / Е.И. Шостак.-2004.-164 с.

100. Шуйский В.Ф. Закономерности лимитирования пресноводного макрозообентоса экологическими факторами: дис. докт. биол. наук /В.Ф. Шуйский. СПб. - 1997. - 639 с.

101. Шулькин В.М. Влияние концентрации металлов в донных отложениях на их накопление митилидами Crenomytilus grayanus и Modiolus kurilensis / В.М. Шулькин, В.Я. Кавун, А.В.Ткалин и др. // Биология моря. 2002. - Т. 28.- № 1. - С. 53-60.

102. Яп К.К. Зависимость между массой мягких тканей, толщиной раковины и накоплением тяжелых металлов (Cd, Си, РЬ, и Zn) у зеленой мидии Регпаviridis / K.K. Яп, А. Измаил, С.Г. Тан // Биология моря. 2003. - Т. 29. - № 5.-С. 358-362.

103. Abdullah A.N.S. Isolation and characterisation of two divergent type 3 metallothioneins from oil palm, Elaeis guineensis / A.N.S. Abdullah, C. S. Cheah, J. D. Merphy // Plant Physiol. Bioch. 2002. - V. 40. - P. 255 - 263.

104. Abel J. Inhibition of hydroxyl-radical-generated DNA degradation by metallothionein / J. Abel, N. de Ruiter // Toxicol. Lett. 1989. - V. 47. - P. 191 -196.

105. Ahsanullah M. Sublethal effects and bioaccumulation of cadmium, chromium,copper and zinc in the marine amphipod Allorchestes compressa / M. Ahsanullah, A. R. Williams // Mar. Biol. 1991. - V. 108. - P. 59 - 65.

106. Amyot M. Total metal burdens in the freshwater amphipod Gammarus fasciatus: contribution of various body parts and influence of gut contents / M. Amyot, B. Pinel-Alloul, P.G.C. Campbell et al. // Freshwater Biol. 1996. - V. 35.-P. 363-373.

107. Andrews G.K. New insights into the mechanisms of cadmium regulation of mouse metallothionein-I gene expression / G.K. Andrews, D. Bittel, T. Dalton et al. // Metallothionein IV. Ed. C. Klaassen. Basel: Birkhauser Verlag, 1999. -P. 227-232.

108. D.A. Avraamova, B.I. Synzynys, V.A. Romantsova et al. // Metallothionein IV / Ed. C. Klaassen.-Basel: Birkhauser Verlag, 1998. - P. 633 - 640.

109. Bairoch A. The SWISS-PROT protein sequence data bank and its supplement TrEMBL / A. Bairoch, R. Apweiler // Nucleic Acid. Res. 1996. - V. 24. - P. 21-25.

110. Bakka A. Radioresistance in cells with high content of metallothionein / A. Bakka, A.S. Johnsen, L. Endersen et al. // Experientia. 1982. - V. 38. - P. 381 -383.

111. Bebianno M. J. Metallothionein induction in Mytilus edulis exposed to cadmium. / M. J. Bebianno, W. J. Langston // Mar. Biol. 1991. - V. 108. - P. 91-96.

112. Bebianno M.J. Metallothionein induction in mussels exposed to a metal mixture / M.J. Bebianno, W.J. Langston // Metallothionein IV. Ed. C. Klaassen. Basel: Birkhauser Verlag, -1999. P. 187 -194.

113. Bleeker, E. A. J. Ecotoxicity of lead to the zebra mussel Dreissena polymorpha (Pallas) / E. A. J. Bleeker, M. H. S. Kraak, C. Davids // Hydrobiol Bull. 1992, -V. 25(3).-P. 233-236.

114. Bordin G. Metallothionein-like metalloproteins in the Baltic clam Macoma balthica: seasonal variations and induction upon metal exposure / G. Bordin, J. McCourt, F.C. Raposo et al. // Mar. Biol. 1997. - V. 129 (3). - P. 453 - 463.

115. Borgmann, U. Accumulation, regulation and toxicity of copper, zinc, lead and mercury in Hyalella azteca / U. Borgmann, W. P. Norwood, C. Clarke // Hydrobiologia. 1993. - V. 259. - P. 79 - 89.

116. Bradley R.W. Acclimation of rainbow. Saimo gairdneli Richardson, to zinc: kinetic and mechanism of enhanced tolerance induction / R.W. Bradley, C. Duqiiesnay, J.B. Spragne // J. Fish Biol. 1985. - V. 27. - P. 367 - 379.

117. Bremner I. Nutritional and physiologic significance of mettallothionein / I. Bremner // Method Enzymol. 1991. - V. 205. - P. 25 - 39.

118. Bremner I. Metallothionein and the trace minerals /1. Bremner, J.H. Beattie. // Annu. Rev. Nutr. 1990. - V.10. - P.63 - 83.

119. Castelli J. Flora bakteriana marine heterotrofika em ostras Mytilus edulis / J. Castelli // Invest. Pesq. 1966. - № 30. - P. 639 - 651.

120. Castro A. Presencia de Salmonella en ostiones / A. Castro, J. Gonsalez, C. Espeleta et al. // Rev. Cub. Hig. Epidemiol. 1990. - V. 1990, № l. - p. 88 -93.

121. Chan H.M. Exogenous metallothionein and renal toxicity of cadmium and mercury in rats / H.M. Chan, M. Satoh, R.K. Zalups et al. // Toxicology. 1992. -V. 76.- P. 15-26.

122. Chase M.E. The ecology of the zebra mussel (Dreissena polymorpha) in the lower Great Lakes of North America: II. Total production, energy allocation and reproductive effort / M.E. Chase, R.C. Bailey // J. Great Lakes Res. 1999. - V. 25.-P. 122-134.

123. Cherian M.G. Cellular adaptation in metal toxicology and metallothionein / M.G. Cherian, M. Nordberg // Toxicology. 1983. - V.28. - P. 1 - 15.

124. Cherian M.G. The nuclear-cytoplasmic presence of metallothionein in the cell during differentiation and development / M.G. Cherian, J.C. Lau, M.D. Apostolova et al. // Metallothionein IV. Ed. C. Klaassen. Basel: Birkhauser Verlag, 1999.- P. 291-294.

125. Choudhuri S. Role of hepatic lysosomes in the degradation of metallothionein / S. Choudhuri, J.M. McKim, C.D. Klaassen // Toxicol. Appl. Pharm. 1992. -V. 115.- P. 64-71.

126. Christer H. Regulation of metallothionein in teleost fish during metal exposure / H. Christer. Goteborg, - 1991. - P. 47 - 53.

127. Dauvin J.-C. Le benthos, temoin des variations de l'environement / J.-C. Dauvin // Oceanis. 1993. - V. 19, - № 6. - P. 25 - 33.

128. De Moor J.M. Metals and cellular signaling in mammalian cells / J. M. De Moor, J.D. Koropatnick // Cell.Mol. Biol. 2000. - V. 46. - № 2. - P. 367 -381.

129. Dunn M.A. Metallothionein / M.A. Dunn, T.L. Blalock, R.J. Cousins // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1987. - V. 185. - P. 107 - 119.

130. Eaton D.L. Dose-response effects of various metal ions on rat liver metallothionein, glutathione, heme oxygenase and cyto-chrome P-450 / D.L.Eaton, N.H. Stacey, K.L Wong et al. // Toxicol. Appl. Pharm. 1980. -V. 55.-P. 393-402.

131. Eaton D.L. Evaluation of the Cd / Hemoglobin affinity assay for the rapid determination of metallothionein in biological tissues / D.L. Eaton, B.F. Toal // Toxicol. Appl. Pharm. -1982. V. 66. - P. 134 - 142.

132. Fowler B.A. Nomenclature of metallothionein / B.A. Fowler, C.E. Hindebrand, Y. Kojima et. al. // Experientia Suppl. 1987. V. 52. - P. 19 - 22.

133. Fukino H. Mechanism of protection by zinc against mercuric chloride toxicity in rats: effects of zinc and mercury on glutathione metabolism / H. Fukino, M.

134. Hirari, Y.M. Hsueh et al. // J. Toxicol. Env. Health. 1986. - V. 19. - P. 75 -89.

135. Grill E. Phytochelatins: the principal heavy-metal complexing peptides of higher plants / E. Grill, E.-L. Winnacker, M.N. Zenk // Science. 1985. - V. 230. - P. 674-676.

136. Gundacker C. Tissue-specific heavy metal (Cd, Pb, Cu, Zn) deposition in a natural population of the zebra mussel Dreissena polymorpha (Pallas) / C. Gundacker // Chemosphere. 1999. - V. 38. - P. 3339 - 3356.

137. Hamer D.H. Metallothionein / D.H. Hamer // Annu. Rev. Biochem. 1986. - V. 55.-P. 913 -951.

138. Hamilton S.J. Metallotionein in fish: review of its importance in assessing stress from metal contaminants / S.J. Hamilton, P.M. Mehrle // Trans. Am. Fish. Soc. -1986.-V. 115.-P. 596-609.

139. Hogstrand C. Binding and detoxification of heavy metals in lower invertebrates with reference to metallotionein / C. Hogstrand, C. Haux // Сотр. Biochem. Phys. 1991. -V. 100-P. 137-141.

140. Hogstrand C. Metallotionein as an indicator of heavy metal exposure in two subtropical fish species / C. Hogstrand, C. Haux // J. Exp. Mar. Biol. Ecol. -1990.-V. 138.-P. 69-84.

141. Kagi J.H.R. Biochemistry of metallothionein / J. H. R. Kagi, A. Schaffer // Biochem. J. 1988. - V. 27. - P. 8509 - 8515.

142. Kagi J.H.R. Metallothionein: a cadmium- and zinc- containing protein from equine renal cortex / J.H.R. Kagi, B.L. Vallee // J. Biol. Chem. 1960. - V. 235. -P. 3460-3465.

143. Kang Yu.-J. Glutathione is involved in the early cadmium cytotoxicity response in human lung carcinoma cells / Yu.-J. Kang, M.D. Enger // Toxicology. 1988. -V. 48.-P. 93-101.

144. Karin M. Metallothioneins: proteins in search of function / M. Karin // Cell. -1985.-V.41.-P.9-10.

145. Keltjens W.G. Phytochelatins as biomarkers for heavy metal toxicity in maize: single metal effects of copper and cadmium / W. G. Keltjens, M.L. Beusichem // J. Plant Nutr. 1998. - V. 21(4). - P. 635 - 648.

146. Klaassen C.D. Induction of mettallothionein / C.D. Klaassen, L.D. Lehman-McKeeman // J. Am. Coll Toxicol. 1989. - V. 8. - P. 1315 - 1321.

147. Klaverkamp J.F. Acclimation to cadmium toxicity by white suckers: cadmium binding capacity and metal distribution in gill and liver cytosol / J.F. Klaverkamp, D.A. Duncan // Environ. Toxicol. Chem. 1987. - V. 6. - P. 275 -289.

148. Koropatnick J. Organ-specific metallothionein induction in mice by X-irradiation. / J. Koropatnick, M. Leibbrandt, M.G. Cherian // Radiat. Res. -1989.-V.l 19.-P. 356-365.

149. Kosower N.S. The glutathione status of cells / N.S. Kosower, E.M. Kosower // Int. Rev. Cytol. 1978. - V. 54. - P. 109 - 160.

150. Kraak M.H.S. Chronic ecotoxicity of Zn and Pb to the zebra mussel Dreissena polymorpha / M.H.S. Kraak, Y.A. Wink, S.C. Stuijfzand et. al. // Aquat. Toxicol. 1994. - V. 30. - P. 77 - 89.

151. Krishanakumar P.K. Caratenoid content and tolerance of green mussel Perna viridis (Linnaeus) to acute mercury and zinc toxicity / P.K. Krishanakumar, R. Damodaran, P.N.K. Nambisan // Indian J. Mar. Sci. 1987. - V. 16. - P. 155 -157.

152. Kazaryan A. M. Lead, learning and collecting in Hermissenda / A. M. Kazaryan, H.T.Epstein,T.J.Nelsonetal. //Biol.Bull.- 1989 №2.-P. 198-201.

153. Matsubara J. Metallothionein induction: a measure of radioprotective action / J. Matsubara // Health Phys. 1988. - V. 55. - P. 433 - 436.

154. Meister A. Glutathione /А. Meister, M.E. Anderson // Annu. Rev. Biochem. -1983.-V. 52.-P. 711-760.

155. Ochi T. Cytotoxicity of an organic hydroperoxide and cellular antioxidant defense system against hydroperoxides in cultured mammalian cells / T. Ochi, S. Miyaura // Toxicology. 1989. - V. 55. - P. 69 - 82.

156. Olsson P.-E. Increased hepatic metallotionein content correlates to cadmium accumulation in environmentally exposed perch {Perca fluviatilis) / P.-E. Olsson, C. Haux // Aquat. Toxicol. 1986. - V. 9. - P. 231 - 242.

157. Perrin D.D. Complex formation of zinc and cadmium with glutathione / D.D. Perrin, A.E. Walt // Biochem. Biophys. Acta. 1971. - V. 230. - P. 96 - 104.

158. Petersen C.E. The extent of anthropogenic disturbance on the aquatic assemblages of the east branch of the DuPage River, Illinois, as evaluated using stream arthropods / C.E. Petersen // Trans. III. State Acad. Sci. 1994. - V.87. -№ 1-2.- P. 29-35.

159. Phillips D.J.H. Quantitative aquatic biological indicators: their use to monitor trace metal and organochlorine pollution / D.J.H. Phillips // Elsevier Applied Science. London, - 1980. - 115p.

160. Phillips D.J.H. Biomonitoring of trace aquatic contaminants / D.J.H. Phillips, P.S. Rainbow // Elsevier Applied Science. London, - 1992. - 371p.

161. Postal W.S. The binding of copper (II) and zinc (II) to oxidized glutathione / W.S.Postal, E.J.Vogel, C. Young et al. // J. Inorg. Biochem. 1985. - V. 25. -P. 25-33.

162. Posthuma L. Heavy metal adaptation in terrestrial invertebrates: a review of occurrence, genetics physiology and ecological consequences / L. Posthuma, N.N. Van Straalen // Сотр. Biochem. Phys. 1993. - V. 106. - P. 11 - 38.

163. Pourang N. Distribution of trace elements in tissues of two shrimp species from the Persian Gulf and roles of metallothionein in their redistribution / N. Pourang, J.H. Dennis // Environ. Int. 2005. - V. 31. - P.325-334.

164. Pourang N. Tissue distribution and redistribution of trace elements in shrimp species with the emphasis on the roles of metallothionein / N. Pourang, J.H. Dennis, H. Ghrorchian // Ecotoxicology. 2004. - V. 13. - P.519-535.

165. Quesada A.R. Direct reaction of H202 with sulfhydryl groups in HL-6022 cells: zinc-metallothionein and other sites / F.R. Quesada, R.W. Byrnes, S.O. Krezoski et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1996. - V. 334. - P. 241 - 250.

166. Rainbow P.S. Comparative strategies of heavy metal accumulation by crustaceans: zinc, copper and cadmium in a decapod, an amphipod and a barnacle / P.S. Rainbow, S. L. White // Hydrobiologia. 1989. - V.174. - P. 245-262.

167. Raspor В. Assessment of metal exposure of marine edible mussels by means of a biomarker / B. Raspor, J. Pavicic, S. Kozar et al. // Metallothionein IV. Ed. C. Klaassen. Basel: Birkhauser Verlag. 1999. - P. 629 - 632.

168. Roe S.I. Temporal variation of organochlorine contaminants in the zebra mussel Dreissena polymorpha in Lake Erie / S.I. Roe, H.J. Maclsaac // Aquat. Toxicol. 1998.-V. 41.-P. 125-140.

169. Roesijadi G. Metallothionein and its role in toxic metal regulation / G. Roesijadi // Сотр. Biochem. Phys. 1996. - V. 113:2. - P. 117 - 123.

170. Roesijadi G. Metallothionein indication as a measure of response to metal exposure in aquatic animals / G. Roesijadi // Environ. Health Persp. 1994. -V. 73.- P. 83-90.

171. Rossman T.G. Spontaneous mutagenesis in mammalian cells is caused mainly by oxidative events and can be blocked by antioxidants and metallothionein / T.G. Rossman, E.L. Goncharova // Mutat. Res. 1998. - V. 402. - P. 103 -110.

172. Salanki, J. Physiological background for using freshwater mussels in monitoring copper and lead pollution / J. Salanki, K. V.-Balogh // Hydrobiologia 1989. -V. 188/189.-P. 445-454.

173. Sanita di Toppi L. Response to cadmium in higher plants / L. Sanita di Toppi, R. Gabbrielli // Environ. Exp. Bot. 1999. -V. 41. - P. 105 - 130.

174. Seagrave J.C. Effects of cadmium on glutathione metabolism in cadmium sensitive and cadmium resistant Chinese hamster cell lines / J.C. Seagrave, C.E. Hildebrand, M.D. Enger // Toxicology. 1983. - V. 29. - P. 101 -110.

175. Smolders R. Transplanted zebra mussels {Dreissena polymorpha) as active biomonitors in an effluent Dominated river / R. Smolders, L. Bervoets, R. Blust // Environmental Toxicology and Chemistiy. - 2002. - V. 21. - P. 1889 -1896.

176. Tomasik P. Metal-metal interaction in biological system. Part 4 Freshwater snail Bulinus globnus / P. Tomasik, Ch. M. Magadza, M. Sungano et al. // Water Air Soil Poll. 1995. - 83, № 1-2. - P. 123 - 145.

177. Wiesner L. Temporal and spatial variability in heavy metal of Dreissena polymorpha (Mollusca: Bivalvia) in the Szczecin Lagoon (North Eastern, Germany) / L. Wiesner, B. Gunther, C. Fenske // Hydrobiologia 2001. - V. 443.-P. 137-145.