Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экологическая значимость адаптации популяции дрожжей к температурному фактору

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Калюжин, Владимир Анатольевич

Введение.

Глава 1. Литературный обзор.

Глава 2. Методика проведения исследований.

2.1. Объект и методы исследований.

2.2. Среда для культивирования дрожжей.

2.3. Экспериментальная установка.

2.4. Исследуемые показатели культуры и оценка точности их поддержания в турбидостате.

2.5. Схема проведения экспериментов.

Глава 3. Результаты экспериментальных исследований.

3.1. Рост и развитие культуры дрожжей в условиях стационарного температурного режима.

3.2,Ответная реакция культуры дрожжей на быструю смену температуры культивирования.

3.2.1. Переходные процессы при субоптимальной температуре.

3.2.2. Переходные процессы в области оптимальной температуры.

3.2.3. Переходные процессы в области супраоптимальной температуры.

3.2.4. Переходы из субоптимальной области температур в оптимальную и обратные переходы.

3.2.5.Переходы из области оптимальной температуры в супраоптимальную область и обратные переходы.-„.

3.2.6. Переходы из области субоптимальной температуры в область супраоптимальной и обратные переходы.

3.2.7. Изменение свойств дрожжей при температурных переходах.

Глава 4. Анализ и обсуждение полученных результатов.

4.1. Влияние стационарного температурного режима на рост и развитие дрожжей.

4.2. Рост и развитие дрожжей при переменном температурном режиме.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Экологическая значимость адаптации популяции дрожжей к температурному фактору"

Одним из факторов определяющих скорость роста и размножения микроорганизмов, в том числе и дрожжей, является температурный фактор. Природные популяции дрожжей обитают в условиях переменного температурного режима. Температурные условия определяются суточным ходом температуры. Так, в летний период, суточная температура достигает минимума в ночное время, а в послеполуденное время достигает максимума. В ряде случаев, послеполуденный максимум превышает температурный оптимум у большинства видов, представителей естественной микрофлоры. Наиболее существенны суточные колебания температуры испытывают те виды, которые обитают на открытых поверхностях. К числу таких видов относятся и дрожжи, обитающие в поврежденных плодах и ягодах, а также в местах истечения древесных и растительных соков.(Билай, 1989; Квасников и др., 199.1; Бабьева и др., 1992).

Адаптация микроорганизмов к переменному температурному режиму достаточно хорошо изучена на хемостатных культурах (Позмогова и др., 1981; Позмогова и др., 1982). Однако спектр возможных ответных реакций у хемостатной культуры ограничен. Ограничения обусловлены тем, что адаптация к переменному температурному режиму развивается в условиях лимитирования культуры, каким-либо одним жизненноважным источником питания, а скорость размножения изначально фиксирована.

Вместе с тем известно, что скорость размножения микроорганизмов зависит от температуры культивирования ( Перт, 1978). Если скорость размножения хемостатной культуры может измениться в сторону повышения, то это явление не будет реализовано, так как максимальная скорость роста ограничена скоростью протока. При, снижении скорости размножения, при температурном переходе, до величины ниже скорости протока, происходит „вымывание биомассы из ферментера. Это», в свою очередь, приводит к изменению соотношения количества лимитирующего субстрата, поступающего в ферментер, к количеству биомассы. В данном случае, на единицу веса биомассы, на протяжении опыта, поступает всё большее и большее количество лимитирующего фактора. Следовательно, ответная реакция формируется в условиях изменения уровня лимитирования. Тем самым, адаптация к новому температурному режиму формируется на фоне другого переходного процесса. Очевидно, ' что однозначная интерпретация полученных результатов невозможна. По этой причине, более надежные результаты по изучению переходных процессов, при смене температуры культивирования, могут быть получены в опытах с нелимитированными культурами. Этому требованию удовлетворяет турбидостатный метод культивирования, где используется среда с многократной насыщающей концентрацией трофических компонентов, а скорость протока зависит от скорости размножения культуры.

Тем самым, опыты с турбидостатной культурой позволяют изучать ответную реакцию в чистом виде, поскольку снимается влияние побочных и сопутствующих факторов. Однако, число публикаций посвященных этому вопросу очень ограничено. Изучались, в основном, температурные переходы с оптимальной температуры и супраоптимальной (Самойленко и др., 1981). Тем самым, отсутствует полная картина адаптации дрожжей к условиям моделирующим суточный ход температуры. Для заполнения этого пробела была проведена данная работа.

Цель работы заключалась в исследовании феномена адаптации дрожжей к изменению температуры культивирования, в области температур, обычных для природных популяций.

В задачи исследования входило:

1. Разработка метода надежной оценки скорости размножения дрожжей при турбидостатном культивировании.

2. Изучение дрожжей при стационарном температурном режиме.

3. Исследование динамики переходных процессов у дрожжей при смене температуры культивирования.

4. Интерпретация экологической значимости адаптации дрожжей к изменению температуры культивирования.

Работа была выполнена в течение 1981 -1997 г. в лаборатории биокинетики и биотехнологии научно-исследовательского института биологии и биофизики при Томском Госуниверситете.

Эксперименты проводились с культурой дрожжей полученной из ВКПМ.

В ходе работы было проделано свыше четырех тысяч измерений различных показателей, отражающих рост и развитие дрожжей.

В результате исследований прослежено изменение удельной скорости роста дрожжей, объема клеток и возрастного состава культуры при температурных переходах. Обнаружено явление временной термотолерантности. Прослежена динамика синтеза фактора временной термотолерантности. ; Высказано предположение, что фактор термотолерантности, формирующийся при ночном понижении температуры, позволяет дрожжам активно размножаться в период дневного максимума температуры,

Полученные результаты позволяют объяснить особенности адаптации природных популяций дрожжей к суточному ходу температуры. А также позволяют использовать температурный фактор как средство управления скоростью роста размножения дрожжевых клеток, их объемом и возрастным составом популяции, что может найти применение в промышленной микробиологии.

Заключение Диссертация по теме "Экология", Калюжин, Владимир Анатольевич

172 ВЫВОДЫ

1. Установлено у популяции дрожжей, в нелимитированных условиях при стационарном температурном режиме, два физиологических состояния. Одно состояние привязано к температуре 12 °С +33 °С, другое к температуре 36 °С+39 °С.

2. Показано, что в границах одного физиологического состояния, адаптация дрожжей к новому температурному режиму по показателю длительности удвоения числа клеток, заканчивается в первом или втором поколении.

3. Установлено, что переход из одного физиологического состояния при повышении температуры продолжается пять-шесть поколений. При понижении температуры - два - три поколения.

4. Обнаружено явление временной термотолерантности. Данное свойство позволяет дрожжам размножаться при супраоптимальной температуре со скоростью, близкой к максимальной в течение двух-трех поколений.

5. Полный синтез систем, обеспечивающих временную термотолерантность дрожжей, осуществляется в течение одного поколения при субоптимальной или оптимальной температуре.

6. Свойство временной термотолерантности, формирующееся при ночном понижении температуры, обеспечивает популяции дрожжей устойчивость к

173 послеполуденному повышению температуры, что позволяет им включать в ареал обитания тропические и субтропические зоны.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В проделанной работе моделировалась способность дрожжей адаптироваться к постоянному и изменяющемуся температурному режиму. Исследование такого рода могут объяснить некоторые особенности экологии изучаемого вида микроорганизмов.

При культивировании дрожжей в стационарных условиях было установлено наличие двух физиологических состояний. Одно состояние характерно для температуры 12 °С н-33 °С, а другое - для температуры 36 °С -н 40 °С. Высказывается предположение, что механизмы морфофизиологических сдвигов при субоптимальной - оптимальной и супраоптимальных температурах различны (Самойленко и др., 1981). Собственные результаты были проанализированы по кинетическим и функциональным показателям культуры дрожжей. С этой целью экспериментальные данные были представлены в координатах длительности ювенильной и постювенильной фаз развития, а также удельной оптической плотности и длительности удвоения числа клеток. Как видно на диаграммах, дрожжи могут находится в двух функциональных состояниях, характеризующихся определенным типом зависимости измеряемых показателей. Переход из одного состояния в другое осуществляется в узком температурном диапазоне (32 °С - 34 °С). Зависимости такого типа характерны для систем, испытывающих фазовый переход.

Сходное явление было обнаружено у ЕзсЫпсЫа соН (Маршелл, 1981): при температуре 32 °С - 33 °С происходит плавление клеточной мембраны, нарушается ее транспортная функция. Можно предположить, что в основе, установленного в собственных опытах явления, также лежит фазовый переход на мембране.

Известно (Уайт, 1957), что при температуре выше 33 °С, дыхательная активность у дрожжей снижается вследствие инактивации митохондрий. Доминирующим типом энергообмена становится гликолиз. По этой причине, фазовый переход можно объяснить нарушением структуры мембран митохондрий. Следовательно, можно предположить, что морфофизиологические изменения у дрожжей, растущих при суб- и супраоптимальных температурах, имеют различную природу и являются функцией двух систем. При этом, перестройка функций осуществляется в узком температурном диапазоне. Можно утверждать, что при 33 °С, когда скорость роста дрожжей максимальна, в наибольшей степени проявляется действие температурного фактора. Температура 33 °С является переломной для таких показателей, как удельная скорость роста, возрастной состав популяции, размер клеток, длительность фаз развития, вследствие того, что при 33 °С происходит перестройка одного типа регуляции метаболизма клетки на другой. Следовательно, при оптимальной температуре, клетка находится в наименее устойчивом состоянии. Это позволяет управлять ее отдельными функциями, изменяя температуру культивирования

Вместе с тем, в природных условиях часто происходит смена условий существования дрожжей. В природных условиях дрожжи, как и все представители животного и растительного мира, живут в переменных условиях. В течение жизни одного поколения изменяются многие жизненно важные показатели, такие, как содержание питательных веществ, рН, содержание кислорода, состав питательного субстрата, освещенность, температура окружающей среды. К числу постоянно изменяющихся показателей относится температура. Так, в течение суток в летнее время, температура окружающей среды понижается до минимального уровня в ночное время и повышается до максимума в послеполуденное время. Очевидно, что наиболее значимым суточный ход температуры будет для видов, обитающих на открытой поверхности. Изучаемый вид дрожжей живет и размножается, в основном, на поверхности твердого субстрата: на поврежденных плодах или ягодах. По этой причине у дрожжей должны были вырабатываться в процессе эволюции такие формы защиты, которые могли обеспечить наибольший комфорт для данного вида. К числу наиболее важных показателей относится скорость размножения. В данной работе рассматривался вопрос о скорости размножения дрожжей в условиях переменного температурного режима.

В ареалах обитания природных популяций дрожжей в летнее время температура окружающей среды обычно изменяется в интервале от 10 °С -12 °С в ночное время и до 38°С - 40°С в дневное время. Тем самым, опыты с повышением температуры моделируют суточный ход в направлении ночь день, а опыты с понижением день-> ночь. Также следует учитывать и то, что в зависимости от погодных условий температурный режим может изменяться не постепенно, а резким скачком на 15°С -20°С. Это было учтено в опытах с температурными переходами 14 °С -+39 °С и 20 °С -»37,5 °С, 14 °С ->30 °С.

Анализируя и сопоставляя полученные экспериментальные данные, можно утверждать, что скорость роста при температуре 14 °С -33 °С регулируется одной метаболической системой, а при 36 °С - 39 °С - другой системой. При переходах (14 °С -33 °С)-»(36 °С -39' °С) на протяжении ряда поколений продолжает функционировать система регулирования, типичная для исходной температуры. Синтез ее компонентов при переходе в супраоптимальную область замедляется, и через пять-шесть поколений наступает истощение функции. Система регуляции термоустойчивая, поскольку ее высокая активность сохраняется даже при летальной температуре (20°С -»40°С ; 30°С -+40 °С), а при 36 °С и 37,5 °С (25 °С ^36 °С; 30 °С ->37,5 °С), скорость роста на начальном этапе близка к скорости при оптимальной температуре (табл. 8). Наличие системы с указанными свойствами обуславливает у дрожжей временную термотолерантность. При переходах ( 36 °С - 39 °С)-> (14 °С - 33 °С) наблюдается аномально низкая скорость роста (табл. 1.2). Это служит дополнительным подтверждением различия систем регуляции скорости роста, функционирующих при 14 °С - 33 °С и 36 °С - 39 °С, поскольку дрожжам требуется значительное время для перестройки генеративной активности на новый режим. Быстрое переключение скорости роста возможно, если не происходит перестройки функциональных элементов, как это было ранее показано для переходов в диапазоне 14 °С - 33°С . Обобщая полученные результаты, можно сделать следующие выводы. При температурных переходах в границах существования той или иной системы регуляции скорости роста, перестройка генеративной активности практически полностью завершается в первом поколении. Процесс замены одной системы регуляции на другую продолжается на протяжении нескольких поколений. Приведенные закономерности позволяют решать некоторые вопросы, связанные с управлением скоростью роста дрожжей.

Размножение дрожжей в эксперименте шло за счет почкования. Поэтому проявление генеративной активности должно быть связано с почкованием. С целью выявления этой связи была прослежена динамика изменения доли почкующихся клеток в 15-часовых экспериментах. Изучались переходы 20 °С -> 30 °С; 30 °С ->37,5°С ; 20 °С ->37,5 °С. На основании приведенных данных можно выделить три типа ответной реакции: 1) процент почкующихся клеток резко уменьшается , затем быстро увеличивается до исходного значения или выше: 20°С ->30 °С; 30 °С ->37,5 °С; 20 °С ->37,5 °С; 2) кратковременное увеличение доли почкующихся клеток, значительно превышающее число при 1:, и Х2: 30 °С ->20 °С; 3) доля почкующихся клеток изменяется незначительно:

37,5 °С ->30 °С; 37,5 °С ->20 °С. Установлено также, что наиболее существенные изменения доли почкующихся клеток завершаются через 3-5 ч после смены температуры. 5

Первый тип ответной реакции установлен для переходов: а) переходы с повышением температуры в области 14 °С - 33 °С; б) переходы из 14 °С - 33 °С в супраоптимальную область.

Ответная реакция второго типа установлена для переходов в диапазоне 14°С-33 °С при понижении температуры.

По третьему типу реагируют дрожжи: а) при переходах внутри " - супраоптимальной области; б) при переходах из супраоптимального диапазона в область 14 °С - 33 °С .

Сопоставление данных по изменению доли почкующихся клеток выявляет глубокое различие между дрожжевыми клетками, растущими при субоптимальной - оптимальной и супраоптимальной температурах. Так, при прямых и обратных переходах в диапазоне 14 °С - 33°С наблюдаются существенные изменения процента почкующихся клеток. При переходах в супраоптимальном диапазоне доля почкующихся клеток изменяется незначительно. Очевидно, что эти различия указывают на существование двух независимых механизмов регуляции возрастного состава культуры.

Прослеживается взаимосвязь между параметром генеративной активности и динамикой почкования. Так, при переходах (14 °С - 33 °С) ->(37,5 °С - 40°С ) дрожжи в течение значительного промежутка времени сохраняют высокую скорость роста, типичную для диапазона оптимальных температур. Вместе с тем, при тех же переходах доля почкующихся клеток изменяется согласно закономерности, установленной для области 14 °С - 33 °С в случае повышения температуры. Следовательно, в обоих случаях системы, управляющие этими процессами, сходны по свойствам и требуют значительного времени для качественной перестройки. При переходах (37,5 °С - 39 °С) ->(14 °С - 33°С ) также наблюдается аналогия для обоих параметров. Установлено также, что дрожжи, выросшие при 36 °С, проявляют двойственные свойства в условиях температурных переходов, как по показателю генеративной активности, так и по динамике процента почкующихся клеток. Поскольку свойства системы регулирования генеративной активности и системы, контролирующей возрастной состав культуры, во многом сходны, можно предположить, что они в границах соответствующих диапазонов температур имеют одинаковую природу.

В представленной работе выявлены некоторые закономерности поведения дрожжей в условиях быстрой смены температур культивирования в диапазоне 14 °С - 40 °С. Полученные данные позволяют предсказать динамику параметров генеративной активности и процента почкующихся клеток при различных температурных переходах. Это, в свою очередь, делает возможным использовать тепловой фактор, как средство управления ростом и развитием дрожжевой культуры.

Полученные результаты позволяют утверждать следующее. При температурном ходе в направлении 14 °С ->30°С скорость размножения дрожжей перестраивается на новый режим в течение одного поколения. Тем самым, при повышении температуры в период с ночного времени к полуденному, скорость размножения дрожжей безынерционно увеличивается. При дальнейшем повышении температуры отмечается инерционность в скорости размножения дрожжей. Так, в переходных условиях, при смене температуры на супраоптимальную: (14 °С + 30°С )-»(36 °С -¿-40 °С), дрожжи в течение нескольких поколений размножаются со скоростью, близкой к той, которая отмечена для оптимальной температуры. Время, в течение которого сохраняется это свойство, может значительно превышать длительность периода послеполуденного повышения температуры. Тем самым, такая инерционность позволяет дрожжам переживать период максимума температуры, без потери в скорости размножения. Очевидно, такой способ защиты от перегрева дает значительные преимущества природным популяциям дрожжей. Вместе с тем, данное свойство постоянно восстанавливается в периоды ночного понижения температуры или в дневное время при похолодании. Очевидно, свойство временной термотолерантности позволяет дрожжам значительно расширить

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Калюжин, Владимир Анатольевич, Томск

1. Александров В.Я. Реактивность клеток и белки. - Д.: Наука, 1985. - 318с.

2. Амелуксен Р., Мэдок Э. Жизнь микробов при высоких температурах: механизмы и молекулярные аспекты // Жизнь микробов в экстремальных условиях.- М., 1981.- С. 248 321

3. Андреев O.A., Олейникова JI.B., Петров JI.H., Дигина О.Ю. Температура плавления ДНК и тепловой оптимум роста клеток бактерий // Биофизика.-1986.-Вып. 31.-№ 1 -С.149- 151.

4. Ацидофильный термотолерантный штамм дрожжей Candida Utilis, полученный в условиях непрерывного культивирования. Андреева Е.А., Позмогова И.Н., Работнова И.Л., Новиков В.Н. / Микробиология. 1978.-Т.47.- Вып.1. - С.56 - 60.

5. Бабьева И.П., Чернов И.Ю. Биология дрожжей. М.: Изд-во МГУ, 1992. -96с.

6. Бакуняева Н.И. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования/ Под ред. Кост Е.А. М.: Медицина.- 1975. 226с.

7. Баросс Д., Морита Р. Жизнь микроорганизмов при низких температурах: Экологические аспекты // Жизнь микробов в экстремальных условиях. М.-1981. С.19 - 88.

8. Бекер М.,Е., Кристансонс М.Ж., Виестур У.Э. Биотехнология микробного синтеза.- Рига: Зинатнс. 1980. 351с.

9. Бекер М.Е., Дамберг Б.Э., Рапопорт А.И. Анабиоз микроорганизмов.- Рига: Зинатнс, 1981.-252с.

10. Берри Д. Биология дрожжей.- М., 1985. 96с.

11. Билай В.И. Основы общей микологии.- Киев: Выща школа, 1989. 392с.

12. Блохина И.Н., Савкина М.А., Угодников Г.А. Хемостатное культивирование при лимитировании роста / Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. М.: Наука, 1980.- С.7 19.

13. Бочарова H.H., Черныш В.Г. Влияние резервных углеводов клетки на повышение сохраняемости, хлебопекарных дрожжей // Микробиология,-1979. Вып.1.-Т.48.- С.153 - 156.

14. Бривкалне И.К., Дамберг Б.Э. Биохимические свойства и дыхательная активность дрожжей Saccharomyces cerevisiae 14 при смене условий культивирования и регидротации // Микробиологические препараты. Рига: Зинатнс, 1976.-С. 86-95.

15. Виестур У.Э., Кузнецов A.M., Савенков В.В. Системы ферментации / Рига: Зинатнс.'- 1986. 386с.

16. Влияние субмаксимальной температуры на свойство хемостатной культуры Candida Utilis. Андреева Е.А., Позмогова И.Н., Хаврычев М.П., Шульговская Е.М. // Микробиология. 1977. - Т.46. - Вып.1. - С.29 - 32.

17. Влияние экстремальных температур на метаболизм водородокисляющих бактерий. Волова Т.Г., Трубачев И.Н., Калачева Г.С., Барашков В.А. //Микробиология.- 1982.- Т.51.- Вып.З. С.386 - 391.

18. Влияние температуры и аэрации на рост и спорообразование Bacillus thuringiensis. Игнатенко Ю.Н., Сахарова З.В., Ховрычев М.П., Шевцов В.В //Микробиология . 1982. - Т.52, Вып.5. - С.716, - 718.

19. Гаврилова H.H. Липиды микроорганизмов для кормовых целей / Обзорная информация. Серия Ш, Производство и применение микробного белка. -М.-1985.- 58с.

20. Гирард Б., Снелл Э. Биохимические факторы / Методы общей бактериологии. М.Мир.- 1983.- Т,-1.- С. 198 277.

21. Головлев Е.Л. Влияние лимитирования роста на метаболизм микроорганизмов // Лимитирование и ингибирование микробиологических процессов. Пущино.- 1980.-С.22 34.

22. Демченко Л.Н., Кобрина Ю.П. Получение термоустойчивых хлебопекарных дрожжей методом индуцированного мутагенеза // Микробиология. 1979.-Т.48.- Вып.5.- С.892- 895.

23. Дрю С. Жидкая культура / Методы общей бактериологии. М., 1983.- Т. 1С. 374-441.

24. Дудина Л.П., Дедюхина Э.Г., Ерошин В.К. Влияние скорости роста и природы лимитирующего субстрата на состав биомассы Hansenula Polymorpha //Микробиология. 1985. - Вып. 4.- Т.54. - 595с.

25. Жакоб Ф., Моно Ж. Регуляция активности генов / Регуляторные механизмы клетки. М.-1964.-С.278 306.

26. Жестянников В. Д. Радиорезестентность термоустойчивых штаммов Escherichia coli //Реакция клеток на экстремальные воздействия. Изд. АН СССР М-Л.- 1963. С.135 - 142.

27. Ждан Пушкина С.М. Основы роста культур микроорганизмов / Л. Изд-во ЛГУ.- 1983.- 188с. , v

28. Ждан-Пушкина С.М., Вербицкая Н.Б., Кондратьева М.Д. Сукцинатдегидрогеназная активность клеток Escherihia Coli после теплового стресса и в процессе репарации // Микробиология. 1986.- Т.55.- Вып.З.-357с. i

29. Иванов В.Н. / Энергетика роста микроорганизмов. Киев: Наукова Думка.-1981.- 140с.

30. Иванов В.Н., Угодчиков Г.А. / Клеточный цикл микроорганизмов и гетерогенность их популяций. Киев: Наукова Думка.- 1984.- 280с.

31. Иерасуолименский Н.Д. Основы физиологии микробов. Изд-во АН СССР М.- 1963.- 244с.

32. Изменение содержания АТФ в клетках хемостатных культур дрожжей под воздействием субмаксимальных температур. Шульговская Е.М., Позмогова И.Н., Ховрычев М.П., Ибрагимов С.И. //Микробиология. 1977.- Т.46.-Вып.2.- С. 223-226.

33. Изменение размеров клеток Corynebacterium glutamicum при культивировании на среде с уксусной кислотой. Саламаха О.В., Тихомирова Л.А., Рогатых Н.П., Зударев Т.Н. //Микробиология. 1986.- Т.55. - Вып.З -413с.

34. Изменения ультраструктуры клеток Anacystis nidulans при разных температурах. Никитина К.А., Ермакова Л.Р., Ходжаев М.Н., Гусев М.В. // Микробиология.- 1979.- N.48.- №3. С.476 - 480.

35. Иннис У., Ингрэм Д. Жизнь микроорганизмов при низких температурах: механизмы и молекулярные аспекты // Жизнь микробов в экстремальных условиях. М. 1981. - С.89 - 123.

36. Исаева B.C., Жвирбиянская А.Ю. Роль компонентов клеточной стенки пивоваренных дрожжей в явлении флокуляции. Успехи микробиологии. М.-Наука.- 1976.-Вып.11.- С.174- 189.

37. Калюжин В.А., Евдокимов Е.В., Плеханов Г.Ф. Динамика развития ответной реакции на тепловой стресс у дрожжей при проточном культивировании //Микробиология. 1984.- Т.53.- Вып.6.- 923с.

38. Калюжин В.А., Евдокимов Е.В., Плеханов Г.Ф. Влияние температуры культивирования на дрожжи в нелимитированных условиях // Биологические науки. №8.- 1985.- 85с.

39. Калюжин В.А. Ответная реакция турбидостатной культуры дрожжей на быстрое однократное изменение температуры культивирования //Микробиология. 1987.- Т.56.-Вып.1. - С.78 - 83.

40. Кантор Ч., Шиммел П. / Биофизическая химия.- М.- Мир.- Т.З.- 1985.- 536с.

41. Карасевич Ю.Н. / Экспериментальная адаптация микроорганизмов.- М.-Наука.- 19775.-С. 1 179.

42. Квасников Е.И., Щелокова И.Ф. / Дрожжи. Биология. Пути использования. Киев.- Наукова Думка.- -1991,- 327с.

43. Кишковская С.А., Бурьян Н.И. Термотолерантные варианты винных дрожжейУ/Микробиология. 1980.- Т. 49.- Вып.1.- С.156 - 160.

44. Коновалов С.А. / Биохимия дрожжей. Пищепромиздат. М.- 1962,- 272с.

45. Коротяев А.И. / Механизмы саморегуляции бактериальной клетки. М.-Медицина.- 1973.

46. Костилоу Р. Биофизические факторы // Методы общей бактериологии.- М.-Мир.- 1983.- Т.1.-С.163 197.

47. Котельникова A.B., Звягильская P.A. Особенности структуры и функций митохондриальных мембран низших эукариотов дрожжей // Биомембраны.-структура, функции, методы исследования. Рига.- Зинантс.- 1977. - С. 123 -145.

48. Кудрявцев В.И. Систематика дрожжей. М. Изд-во АН СССР.- 1954. 428с.

49. Кох А. Измерение роста // Методы общей бактериологии. М. 1983. - С.442 -511.

50. Лакин Г.Ф. / Биометрия. М. Высшая школа.- 1980. 396с

51. Левин В.Л. , Морфофизиологические изменения в популяции дрожжей Saccoharomyces cerevisiae при адаптации их к пониженным температурам //

52. Реакция клеток и их белковых компонентов на экстремальные воздействия. Наука.- М-Л.- 1966. сб.№ 12.- С. 110-115.

53. Лирова С.А. Переходные состояния хемостатных культур микроорганизмов как метод изучения их физиологии при различных условиях культивирования // Теория и практика непрерывной культуры микроорганизмов. М., Наука. -1980 С.59 - 82.

54. Логинова Л.Г., Головачева P.C., Егорова Л.А. Жизнь микроорганизмов при высоких температурах. М., Наука.- 1966. 296с.

55. Логинова Л.Г. Физиологические особенности термофильных микроорганизмов // Успехи микробиологии. М., Наука.- 1971.- Вып.7.- С. 108 -120. v

56. Логинова Л.Г. Причины, обуславливающие возможность существования термофилов при повышенной температуре. Современные представления о термофиллах микроорганизмов. М., Наука.- 1973. С. 15 - 23.

57. Логинова Л.Г., Головачева P.C., Головина И.Г. Современные представления о термофиллах микроорганизмов. М. Наука.- 1973. С.1 - 275.

58. Маршелл Э. / Биофизическая химия.- М., Мир.- 1981.- Т. 1.

59. Матяшова Р.Н., Соколов Г.В., Лозинов А.Б. Влияние лимитирования роста дрожжей на дыхательную цепь, экономический коэффициент и критическую для дыхания концентрацию кислорода //Микробиология. 1978.- Вып. 5.-Т.47.-С.790 - 798.

60. Мецлер Д. Биохимия. Химические реакции в живой клетке. М. Мир.- 1980.-Т.2.- 607с.

61. Минкевич И.Г. Переходные процессы при установлении стационарных режимов роста микроорганизмов в хемостатной культуре // Теория и практика непрерывной культуры микроорганизмов. М., Наука.- 1980. С. 4758.

62. Мунгиев ¿A.A., Колпинов Ю.Г. Описание метаболизма клетки с учетом саморегуляции // Лимитирование и ингибирование микробиологических процессов. Пущино.-1980. С. 152-165.

63. Мутафов С.Б., Родригес Х.Л., Минкевич И.Г, Влияние температуры на максимальную удельную скорость роста дрожжей Candida utilis на средах с этанолом и глюкозой // Прикладная биохимия и микробиология. 1985.- 21.-№1.- С.85 - 91.

64. Некоторые свойства цитологических мембран термофильных бактерий. Буяло О.Д., Головачева P.C., Логинова Л.Г., Харатьян Е.Ф., Островский Д.Н. /Микробиология. 1973.- Т.42.- Вып.2.- С.280 - 286.

65. Некрасов Б.В./ Курс общей химии. М.-1954.

66. Николе Д. Биоэнергетика. Введение в хемиосмотическую теорию. М., Мир.-1985.- 190с.

67. Нокс Р. Влияние температуры на образование адаптивных ферментов, развитие микробов и лекарственную устойчивость //Адаптация умикроорганизмов под редакцией Имшенецкого. Изд-во иностранной литературы.- М., 1956.

68. Об изучении физиологического состояния микроорганизмов. Головлев Е.Л., Литвиненко Л.А., Шкидченко А.Н., Шульга A.B. // Микробиология.-1982.- Т.51.- Вып.1.- С. 171-174.

69. Особенности аэробного размножения некоторых дрожжей. Витринская • A.M., Розманова Н.В., Палагина Н.К., Хрычева А.И. //Микробиология.1973.- Т.42.-Вып.2.- С. 274-279.

70. Окороков Л.А. Механизмы и энергетика транспорта неорганических ионов у микроорганизмов / Рост микроорганизмов. Пущино.- 1984. С. 127 - 141.

71. Паников Н.С. Кинетика роста микроорганизмов. М., Наука.- 1991.- 312с. ч

72. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М., Мир.-1978.- 332с.

73. Петков П., Жобро М., Костов В., Балашева М. Влияние на температурата на инкубация вчерху количеството на РНК белтчек и въглехидрати в клеткети на някон видове дрожди // «Acta microbiol bylg.» 1982,- 10. -С.72 76.

74. Печуркин Н.С., Терсков И.А. Анализ кинетика роста и эволюции микробных популяций в управляемых условиях. Новосибирск.- 1975.- Изд-во «Наука» Сибирское отделение.- 216с.

75. Печуркин Н.С. Популяционная микробиология / Наука.- Сиб.отделение.-Новосибирск.- 1978. 278с.

76. Печуркин Н.С., Брильков A.B. Влияние факторов среды на устойчивость микробных культур в открытых системах // Рост микроорганизмов, Пущино.-1984.-С.104-118.

77. Плевако Е.А., Гивартовский Р.В. Технология дрожжевого производства/ М., 1949.- Пищепромиздат.

78. Полишук A.M. Регуляция репликации ДНК в клетках эукариотов //Успехи современной биологии. 1986.- 101.- №3.-С.329 343.

79. Позмогова И.Н. Дрожжи развивающиеся при повышенных температурах //Современные представления о термофили микроорганизмов. М., Наука.-1973.-С. 127- 135.

80. Позмогова И.Н. Деление микроорганизмов на группы по их отношению к температуре //Современные представления о термофилах микроорганизмов. М., Наука.- 1973. С.7 - 14.

81. Позмогова И.Н. Микроорганизмы в условиях неоптимальных для размножения (нарушение корреляции между процессами катаболизма и анаболизма) //Успехи микробиологии. М., Наука, 1974.- Вып.9. С.84 - 95.

82. Позмогова И.Н., Медведева Г.А. Влияние повышенной температуры на цикл развития дрожжей Candida utilis //Микробиология. 1978.- Т. 47.- Вып.З.-С.534- 538.

83. Позмогова И.Н., Ховрычев М.П., Королев П.Н. Влияние повышенных температур на синтез РНК и белка в клетках синхронной культуры Candida utilis //Микробиология. -1978.- Т.47 Вып.5.- С.888 892.

84. Позмогова И.Н., Изучение хемостатных культур при ингибировании повышенной температурой //Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. М., Наука.- 1980. С. 36 - 46.

85. Позмогова И.Н. Изучение хемостатных культур при ингибировании повышенной температурой //Теория и практика непрерывного культивирования микроорганизмов. М., Наука.- 1980. 36с.

86. Позмогова И.Н.,> Куимова Т.Ф. Цитология дрожжей Candida utilis при различных температурных режимах непрерывного культивирования.//Микробиология,- 1982,- Т.51, Вып.З, С.463 - 465.

87. Позмогова И.Н. Культивирование микроорганизмов в переменных условиях. М.: Наука, 1983, 104с.

88. Работнова И.Л., Иванова И.И. Рост и развитие микробных культур.//Успехи микробиологии. Вып.7, М., Наука, 1971, С. 67 - 107.

89. Работнова И.Л. Физиологическая изменчивость микроорганизмов и ее регулирование. Успехи микробиологии. М., Наука, 1975, Вып. 10, - С. 120 -131.

90. Работнова И.Л. Проблема культивирования микроорганизмов. //Микробиология. 1977,- Т.46, Вып.5, С.796 - 810.

91. Работнова И.Л., Позмогова И.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизмов. М., Наука, 1979, 207с.

92. Работнова И.Л. Об изучении физиологического состояния исследуемых микро-организмов. //Микробиология, -1980, Т.49, Вып.4, - С.634 - 638.

93. Работнова И.Л. Ингибиторы роста и метаболизм микроорганизмов. //Лимитирование и ингибирование микробиологических процессов. Пущино, 1980, отв. Ред. Ерошин В.К. С. 3 - 21.

94. Позмогова И.Н., Шульговская Е.М., Шкоп Я.Я., Цвид Е.Е. Рост дрожжей в условиях переменных температур и возможность происхождения термотолерантных форм //Микробиология. -1981. -Т.50. Вып. 5. С.878 -884.

95. Рукавцов Б.И. Кариология дрожжей //Успехи микробиологии. М., Наука.-1972. -Вып.8. -С.3 -34.

96. Самойленко В.А., Петрикевич С.Б. Влияние температуры на морфологию и скорость роста Candida utilis в лимитированных и нелимитированных условиях культивирования //Микробиология.- 1981.-Т.50.-В.5.- 873с.

97. Свечникова Т.А., Подгорский B.C. Влияние температуры на дыхание и активность ферментов метилтрофных дрожжей Candida boidinii //Микробиологический журнал. 1985.-Т.47.-№2.-48с.

98. Свирежев Ю.М., Логофет Д.О. Устойчивость биологических сообществ. М., Наука.- 1978.-352с.

99. Селье Г. На уровне целого организма. М., Наука.- 1972.- 123с.

100. Семихатова Н.М. Хлебопекарные дрожжи. М., Пищ. Промышленность, 1980.-200с.

101. Скулачев В.П. Трансформация энергии в биомембранах. Наука, М., 1972.-204с.

102. Сокурова E.H. Митоз дрожжей (Клеточные циклы при вегетативном размножений) //Успехи микробиологии, М., Наука.- Вып.11.- 1976.- С.З 20.

103. Суханова K.M. температурные адаптации у простейших. Наука.-Ленинградский отдел.- Л.,- 1968.- 268с.

104. Теней М., Брок Т. Жизнь микрорганизмов при высоких температурах: экологические аспекты //Жизнь микробов в экстремальных условиях. М., Мир.- 1981.-С. 186-247 *

105. Тихонова Г.В. Протондвижущая сила, как способ энергообеспечения бактериального транспорта //Биомембраны структура, функции, методы исследования. Зинатке. Рига, 1977. С. 165 - 185.

106. Тулемисова К.А., Мамонова Л.П., Бекмаханова Н.Е. Термофильные микроорганизмы Южного Казахстана. Алма-Ата, Наука.- 1984.- 160с.

107. Уайт Дж. Технология. Пищепромиздат. М., 1957.- 392с.

108. Ушаков Б.П. Современное состояние вопроса о механизме теплового повреждения и причинах изменения теплоустойчивости клеток //Теплоустойчивость клеток животных. Наука.- М-Л.- 1965.- сб.№8. С.5-54.

109. Уэбб Ф. Биохимическая технология и микробиологический синтез. М., Медицина.- 1969.- 560с.

110. Файгль Ф. Капельный анализ органических веществ. Госуд. Научно-техническое из-во химической литературы. М., 1962.- 836с.

111. Феофилова Е.П. Трегалоза, стресс и анабиоз //Микробиология.- 1992.-Т.61.- Вып.5.- 741с.

112. Феофилова Е.П., Терешина В.М., Михайлова M.B. Изменения в углеводном и липидном составе мицелия Cunninghamella Japónica во время длительного высокотемпературного стресса //Микробиология,- 1993.- Т.62.- Вып.1.- 62с.

113. ПЗ.Позмогова И.Н., Шкоп Я.Я., Цвид Е.Е., Рябчук В.А., Винаров А.Ю. Хемостатное культивирование дрожжей Candida utilis при нестационарных температурных условиях //Микробиология. -1982.- Т.51.- Вып.2.- С.236 -239.

114. Хмель И.А. Регуляция скорости роста и связанные с ней перестройки клеток микроорганизмов //Успехи микробиологии.- М., Наука.- 1970.-Вып.6.- С.58 85.

115. Ш.Хориути Т. Новик А. Термолабильная система репрессии //«Регуляторные механизмы клетки», под ред. Збарского И.Б. М., Мир.- 1964.- С.335-357.

116. Шапошников В.Н. Техническая микробиология. Советская наука. М., 1948.- 412с.

117. Шафеев Р.Н., Закаидзе Сахвадзе Л.И. Техническая микробиология. Тбилиси.- 1981.-232с.

118. Шерман М.Ю. Участие белков теплового шока в осморегуляции Escherichia coli // Молекулярная биология.- 1987. Т.21.- Вып.1. - С. 189 - 193.

119. Шехтман М.Б. Об изменениях стационарного состояния дрожжевой хемостатной культуры //Микробиология,- 1985.-Т.54.- Вып.З.- С.375 380.

120. Шкидченко А.Н. Лабильность физиологического состояния дрожжей Candida utilis при постоянной скорости роста хемостатной культуре //Лимитирование и ингибирование микробиологических процессов.-Пущино.- 1990.- С.165 - 173. J

121. Шкидченко А.Н., Шульга A.B., Турина Л.В. Влияние pH и температуры на содержание белка в биомассе дрожжей при непрерывном культивировании //Микробиологический журнал,- 1985.- Т.47.- №3. -38с.

122. Штрейблова Е. Клеточный цикл у дрожжевых организмов //Успехи микробиологии, М., Наука.- 1979.-Bbin.14.-С.181-190.

123. Элисашвили В.И., Сошникова М.В. Изучение условий возникновения теплового стресса у Pseudomonas genicylata //Микробиология.- 1984. Т.53.-Вып.З.- С.483-487.

124. Effects of environmental stress in recovery media on colony formation by sublethally heat injured Saccaromyces arivisiae // "Trans. Brit. Mycol. Soc." 1982.-78.-№3.-536-540.

125. Bradbury J. ^Howard, Foster Joanne R., Hammer Brendon, Lindsay James, Myrrell William G. The source of the heat resistance of bacterial spores. Study ofwater in spores by NMR // "Biochim. Et biophys. Acta".- 1981.- 678.- №2.- 157164.

126. Brock Thomas D. Life at high temperatures // "Science".- 1985.- 230.- № 4722.132-138 англ.

127. Edgerton Mary E., Brimblecombe Peter. Thermodynamics of halobacterial environmtnts // "Can. J. Microbiol" 1981.- 27.- №9,- 899-909.

128. Francis David, Lin Lois. Heat shock in a cellular slime mold Polysphondylium pallidum // "Develop. Biol.".- 1980.- 79.- №1.- 238-242.

129. Harada Kazuki, Uchida Aritsune, Kadota Hajime. The effect of growth rate of Micrococcus radiodurans on its heat sensitivity // "Nippon suisan gakkishi, Bull. Jap. Soc. Sci. Fish".- 1982.- 48.- №3.- 415-419.

130. Johnston G.C., Singer R.A., Sharrow S.O., Slater M.L. Cell division in the yeast Saccharomyces cerevisiae growing at different rates // "J. Gen. Microbiol".- 1980.-118.-№2.-479-489.

131. Katsui Noriaki, Tsuchido Tetsuaki, Takano Mitsuo, Shidasaki Lsao. Effect ofpreincubation temperature on the heat resistance of Escherichia coli having different fatty acid composition // "J. Gen. Microbiol".- 1981.- 122.- №2.- 357361.

132. Kwast R. H ., Verrips C. T. Heat resistance of Salmonella senftenberg ZZ5 Wat various sucrose concentrations in distilled water.- "Eur. J. Appl. Microbiol, and Biotechnol.".- 1982.- 14.- № 3.- 193-201.

133. Madeira Lopes A., Cabeca -Silva C. The dependence temperature of thermal death, growth and yield of Candida tropicalis // "Z. allg. Microbiol.".- 1984.- 24.-№2.- 133-135.

134. Madeira Lopes A. The influence of temperature on< the relations between thermal death, growth and yield in Candida utilis // " J. Basic. Microbiol." fruher: Z. allg. Mikrobiol.- 1985.-25.-№1.-39-42.

135. Mutafov S.B., Minkevich J.G. Temperature effect on the growth of Candida utilis VKM-Y 2332 on ethanol. ^

136. Ng Henry. Effect of growth conditions on heat resistance of Arizona grown in a chemostat// "Appl and Environ. Microbiol".- 1982.- 43.- №5.- 1016-1019.

137. Oshima Tairo. Molecular mechanisms of bacterial adaptation to high temperatures // "Mol. Evol. Protein Polymorphism and Neutral Theory." Tokyo, Berlin s.a.- 1982.-349-356.

138. Pellon Jose R., Gomez Reinaldo F. Repair of thermal damage to the Escherichia colinucleoid // "J.Bacteriol ".- 1981.- 145.-№3.- 1456-1458.

139. Put Henriette M.C., De Jong J. Heat resistance studies of yeasts vegetative cells versus ascospores: erythromycin inhibition of sporulation in Kluyveromyces and• Saccharomyces species // "J. Appl.Bacteriol.".- 1982.- 53.- №1.- 73-79.

140. Rogers P.J., Taylor V.K., Egan A.F. Energeties of growth of Microbacterium thermospactum at low temperatures // "Arch. Microbiol.".- 1980.- 128.- №2.- 152156.

141. Selvam Ramasamy . Effect of growth substrates on phosphatases of Aspergillus nidulans under heat stress //"Indian I. Exp. Biol.".- 1980.- 18.- №4.- 365-368.

142. Smith lames L., Benedict Robert C., Haas Michael, Palumbo Samuel A. Heat injury in Stephylococcus aureus 196 E: protection by metabolizable and non -metabolizable sugars and polyols // "Appl. And Environ. Microbiol".- 1983.- 46.-№66.-1417-1419.

143. Thompson P.W., Wheals A.E. Asymetrical division of Saccharomyces cerevisiae in glucoselimited chemostat chemostat culture // "J. .Gen. Microbiol.".- 1980.-121.-№2.-401-409.

144. Torreggiani Danila, Toledo R.T. Influence of sugars on heat inactivation, injury and reparir of Saccharomyces cerevisiae // "I. Food. Sci".- 1986.- 51.- №1.- 211215 англ.

145. Trueba F J., van Spronsen E.F., Traas I., Woldringh C.L. Effect of temperature on the size and shape of Escherichia coli cells // "Arch. Microbiol.".- 1982.- 131.-№3.- 235-240.

146. Verrips C.T., Kwast R.H. Recovery of heat injured Citrobactep freundii cells // "I. Appl. Bacterid".- 1982.- 52.- №1.-15-20.192

147. Yatvin Milton B., Gipp Jerry J., Klessig Darrel R., Dennis Waren H. Hyperthermic sensitivity and growth stage in Escherichia coli // "Radiat. Res.".-1986.- 106.-№1.-78-88.

148. Zaritsky Arieh. Effects of growth temperature on ribosomes and other physiological properties of Escherichia coli // "J. Bacterial".- 1982.- 151.- №1.485-486.