Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Экологическая характеристика микрофлоры кожи больных дисбактериозом кишечника

ВАК РФ 03.00.16, Экология

Автореферат диссертации по теме "Экологическая характеристика микрофлоры кожи больных дисбактериозом кишечника"

о

министерство здравосяранеш р» волгоградская медицишкая академия

На правах рукописи

крамлрь Любовь Васильевна

экшошвская характеристика кккромста

ксяи бсйьшх дисбактерисосн кишечника

03.00.16 - Экология 03.00.07 - Микробиология

Автореферат

диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград - 1994

Работа шполнена в Волгоградской медицинской академии.

Яаучше руководители:

доктор медицинских наук, профессор В.Н.ЛАЗАРЕВ,

доктор медицинских наук, профессор И.П.БАЛМАСОВА

Официальные оппоненты:

поктор медицинских наук, профессор Е.А.ЫЕЕРСОН,

члон-корреппоцаент РАЫН, доктор медицинских наук,

профессор Г.Ц.ЕГБ

Ведущее учревденио - Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт.

Защита диссертации состоится ✓/'¿/^/'/'¿¿-ЛЯЪ-Ъ г.

б тё^ часов на заседании специализированного совета К 084.54.03 при Волгоградской медицинской академии (400056, г. Волгоград, бб, пл. Павших борцов, д. I).

С диссертацией мошо ознакомится в библиотеке Волгоградской медицинской академии.

Автореферат разослан " ■^¡¡^^»^ 1994 г!

Ученый секретарь специализированного совета доцент, к.м.н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

АКТУАЛЬНОСТЬ ТШЫ. В настоящее время накоплен большой фактический материал, подтверждающий, что кишечник я кока человека являются биотопами тела, наиболее заселенными микроорганизмами (Ф.Л.Вильшанская, 1978; И.Б.Куваева, 1976;

О.В.Чахава с соавт., 1982, 1984, 1987; У.К.Нобл, 1986;

)

С.И.Сытник, 1989; И.Б.Куваева, К.С.Ладодо, 1992; p.BoubIíoux, 1985; G.Tannock , 1988;, M.Zonberi , 1992).

Многообразие функций микрофлоры в норме и изменения в ее составе при дисбиоэе определяют внимание микробиологов, физиологов, клиницистов к этой проблеме» как и к проблеме нормализации микробиоценоза с помощью бактерийных препаратов (А.®.Фролова с соавт., 1986; К.В.Смирнова, 1990; H.Eleroann , I9SI; В.Раtten et al. , 1981).

Вместе с тем на фоне воздействия неблагоприятных экологических факторов, массового и не всегда контролируемого приема антибиотиков возникают негативные тенденции, среди которых нарушение эволпционда сложившихся микробных экосистем, распространение бактерий с внехромосоыной антибиотнкорези-стеданостью занимают одно из первых мест. Особенно серьезной в последние годы стала проблема нааокомиальных инфекций, вызванных преимущественно условно-патогенной флорой, причем одновременное персисгирование в организме двух и более возбудителей вызывает атипичную клиническую картину, усугубляет тяжесть заболевания, осложняет лечение и диагностику (В.Г.Петровская, 1984; Е.А.Усатова, 1988; С.С.Белокрысенко с соавт., 1992; Л.Н.Ммлютика, 1993; а.МлввоМ et al. , 1962, 1983;

F.Perger , 1991). '•

Образование новой науки микроэкологии, рассматривающей принципы организации и взаимосвязей в бактериальных сообществах, позволило перейти от популяциоиного уровня к изучению микробных биоценозов, однако сведения о характере и выраженности экосистемных сдвигов в биоценозе кожи на фоне развития дисбиотических изменений в кишечнике, носят разрозненный, несистематичный характер, отличаются узким подходом и произвольным толкованием различных показателей (А.А.Ленцнер с соавт., 1966, 1938; Д.Д.Меньшиков с соавт., 1990; j.wbeat et cl,. 1964; p.Eliasг et al. , 1987). Вместе с тем, по мнению А.А.Ленцнер (1986), объективная оценка дисбактериозов должна проводиться комплексно, с учетом микрофлоры не только кишечника, но и других биотопов.'

По ыкенаю В.Н.Немыря с соавт. (1979), А.А.Наумова (1988), состав микрофлоры отдельных биотопов находится в прямой зависимости от воздействия факторов окружающей среды.' Каиматогеографические и экологические особенности Нижнего Поволжья, несомненно, оказывает влияние на качественный и количественный состав микрофлоры лиц, прокиваюцих в этой местности. Однако у лвдей проживающих на данной территории ранее не проводилось изучение ыикробиоценозов Кожи.и кишечника ни в корме,•ни при развитии дисбиотических изменений.

В. эпоху научно-технической революции, для которой характерно усиление взаимодействия общества и природы, социальное значение научных разработок экологических аспектов здоровья населения значительно возрастает (С.С.Навашин, 1987; Б.А.Шен-деров, 1987, 1991). В связи с ролью нормальной микрофлоры в возникновении ряда патологических состоять больное значение приобретают поиски адекватных, экологически обоснованных спо-

собов коррекции микробиоценоза. Изучение изменений и терапия дисбиоценоэов открытых полостей организма приобретают особую актуальность для такого промышленно насыщенного и экологически неблагополучного региона, как Нижнее Поволжье.

Перспективность избранной нами теш в теоретическом и практическом аспектах подтверждается ее включением в целевую комплексную программу "Колонизация микробами организма человека в условиях неблагоприятной экологической обстановки" (МЗ РФ), а танго в сводный тематический план научно-исследовательских работ по проблемам республиканского значения, курируемый Научным Советом по микробиологии АМН РФ.

ЦЕЛИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Определение диагностического и прогностического значения особенностей микробиоиеноза кожи людей, страдающих дисбактериозом кишечника, проживающих в экологически неблагополучном регионе Нижнего Поволяья; оценка эпццемической значимости отдельных представителей микробиоценоза; поиск путей биологической коррекции дйсбиоза.

•В соответствии с поставленными целями были определены задачи работы:

1) изучение колонизации основными симбионтами и транзи-торной микрофлорой кишечника и кожи здоровых лиц, проживающих в г.Волгограде;

2) определение качественного и количественного состава аэробной.флоры, колонизирующей'кишечник и козу больных дисбактериозом лвдей;

3) выяснение экологической значимости микрофлоры биотопов кожи человека в связи с их анатомическими особенностями и выделение прогностически неблагоприятных топоде« в качестве объектов эпидемиологического мониторинга;

.4) разработка алгоритма оценки состояния микробиоценоза

на основании его детальной характеристики;

5) изучение эффективности биологической коррекции дис бактериоза кожи и рекомендация данного метода..

НАУЧНАЯ НОВИЗНА. Впервые проведено комплексное изучение микрофлоры кожи и кишечника здорового человека и определена экологическая значимость ценотипов флоры.

Установлено существование у здоровых лодей трех ценотипов корыоценоэа кожи. При развитии дисбактериоэа выявлена структурная перестройка биоценоза, заключающаяся в исчезновении основных симбионтов, сыене абсолютных доминант, появлении в ыикробиоценозе с болькой частотой условно-патогенных видов. Доказано, что степень бактериальной обсемененности кожи зависит от состояния килечной микрофлоры и достоверно повышается у больных дисбактериозом. Кроме того, у больных выявлено сни-кение устойчивости микробиоценозов и воздействию возмущающих факторов, что приводит к массивной контаминации условно-патогенными микроорганизмами. С наибольшей интенсивностью эти процессы происходят на коже промежности и межпальцевых проме-нутков, что позволило выделить их в качестве объектов эпидемиологического мониторинга.

Предложен эффективный экологически чистый способ коррекции иикрофяоры кони при помощи кисломолочной-смеси "Наринэ".

Проведенные исследования дали основание обосновать тактику профилактических и лечебных мероприятий у больных с дисбко-зами различных биотопов тела.

ПОЯСНЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА. ЗАЩИТУ. Основными представителями микрофлоры к галечника здоровых людей являются бкфвдо- и лак-тобактерии. Состав аллохтонной флоры у лиц, проживеющкх в г. Волгограде, пестр и разнообразен.

Дисбактериоз кишечника характеризуется элиминацией пн~ дигенной анаэробной флоры, что приводит к заселению кишечника ассоциацией условно-патогенных бактерий, имеющих выраженные агрессивные свойства.

Микрофлора ком здоровых лвдей зависит от анатомо-физпо-логических особенностей биотопов и представлена тремя ценотп-памя.

Развитие дисбактериоза кишечника седо? к структурной перестройке цснотипа коии с развитием днсбпотическнх нарушений.

Изучение экологических параметров микрофлоры позволило определить состояние ыикробиоценоза, степень патологических сдвигов и оценить эффективность коррекции.

Подученные результаты дали основание рекомендовать использование дактобактерии штеша 317/402 "Наринэ" в качества экологически чистого корректора мккробиоцеяоза нояи.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Результаты проведенных исследований далн основание дифференцированно подойти к оценке клинических данных при дисбактериозэ и дать практическому здравоохранению рекомендации по комплексного лечению больных.

■ Определение экологических параметров микрофлоры кона используется в качестве дополнительного критерия оценки тяяести патологического процесса и проведения комплексного корригирующего лечения.

Предложен новый комплексный способ терапии дисбактериоза кожи и слизистых оболочек (рац. предложения № 40-92, 5.12,92, $ 34-93, 1.05.93), опубликованы ыетоднческпэ рекомендации для врачей "Колонизационная резистентность пищеварительного тракта", 1992, "Колонизация микроорганизмами когл в нормо и патологии", 1992, "Экологическая характеристика микрофлоры полости рта в норме и патологии", 1992.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТ® ИССЛЕДОВАНИЯ. По материалам дис^ сертации опубликовано 10 работ, оформлено 5 рационализаторских предложений, изданы методические рекомендации для врачей.

Результаты работы внедрены в учебный процесс кафедр инфекционных болезней, микробиологии, вирусологии и иммунологии Волгоградской медицинской академии, включены в лекции и практические занятия. Исследование экологических параметров микрофлоры и биологический метод коррекции используются в лаборатории диагностики дисбактериозов при кафедре, микробиологии Волгоградской медицинской академии.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Материалы исследований и основные положения долоиещ на научных сессиях Волгоградской медицинской академии (1290, 1991, 1992), X, ХЛ, ХШ областных конференциях молодых ученых-медиков и врачей г. Волгограда (1988, 1992, 1993).

СТРУКТУРА I! ОБЪЕМ. Диссертационная работа изложена на 144 страницах машинописного текста, иллюстрирована 7 рисунками и 34 таблицами, состоит иа введения,"обзора литературы,' семи глав собственных исследований, заключения, выводов и ука- , вателя литературы, включающего 147 отечественных и 90 зарубежных источников.

. СОДЕРЖАНИЕ РАБОШ МАТЕРИАЛЫ И ЫЕГСда ИССЛЕДОВАНИЙ

Для выполнения поставленных задач проведено клинико-лабораторное обследование 457 человек, из которых 350 страдали дисбактериозом кишечника.

Из 350 больных 6 явлениями кишечного дисбактеркоза у 85

(24,3 %) последний был обусловлен грибами Кандида, у 57 (16,2 %) бактериями рода протей, у 37 (10,6 %) стафилококками, у 171 больного (48,9 %) наблхдалась микробная ассоциация перечисленных выше микроорганизмов.

Возраст обследуемых больных и здоровых был от 7 до 35

■ лет.

Для изучения микрофлоры тела человека исследовали в динамике десять биотопов - кишечник, коду головы, груди, аиво-та, спины, мехпальцоБЫх промежутков рук, нилотах третей обеих голеней, промежности.

Количественный и видовой состав кишечной микрофлоры изучали по методике Н.Наепо1 (1965) в модификации Р.В.Эпштейн-Литвак и О.Л.Вильшанской (1977), при этом определяли как частоту высеваемости отдельных ввдов, так и их количественные показатели в пересчете на I г 'фекалий. При исследовании микробного пейзажа кишечника учитывали: I) общее количество микроорганизмов; 2) лакто- ^и бифвдобактерии; 3) микробы семейства ЕпигоЬаегег1асва* ; 4) стафилококки; 5) стрептококки; 6) дрожжевые грибы; 7) бактероиды.

Забор материала для исследования кожной микрофлоры производили по методике В.С.Крамарь (1989), при этом изучали: I) общую микробную обсемененность; 2) грамположительные кокки семейства Шсгосоесасвае - стафилококки, микрококки, стрептококки; 3) коринебактерии; 4) дрожяеподобные грибы рода Кандида; 5) грамотрицательге*е микроорганизмы (энтеробактерии, псевдомонады и т.д.).

Биохимическую идентификацию выделенных штаммов осуществляли по схемам, принятым для каждого рода и вцда бактерий со-главно классификации Берги (1980).

"Диагностику дисбактериоза осуществляли по результатам

бактериологических исследований фекалий в совокупности с клинической картиной болезни. Оценку результатов бактериологических исследований проводили исходя из современных представлений о нормальных соотношениях различных видов микроорганизмов в биоценозе.

Для раскрытия закономерностей существования микроорганизмов был применен экологический подход к оценке микрофлоры, позволяющий осуществить описание сообществ, составляющих биотический компонент экосистемы макрооргашзм-микрофлора. Это дало возможность проследить основные направления изменений микроэкологии кожи при дестабилизации ыикробиоценоза желудочно-кишечного тракта.

Значимость каждого ввда в сообщество оценивали, используя показатели численности и частоты встречаемости (Р.Уитте-кер, 1980).

Кроме того, определяли типологию доминант по методике . С.И.Сытник (I9S8), степень доминантности ввда в структуре сообщества (Ю.Одум, 1986), встречаемость определенных тйпологн-

t

ческих групп микроорганизмов (М.Б.Наткевичайте-Иванаускене, 1285). Для сравнительной оценки стабильности микроэкосистем использовали индекс видового разнообразия ( Е.В1шрвоп ,1949).

Статистическая обработка материала проводилась в соответствии с общепринятыми приемами медицинской статистики (И.Б.Ашмарин, А.А.Воробьев, 1962)..Для обработки полученных результатов использовались стандартные-программы для микрокалькулятора "Электроника МК-54" в автоматическом режиме и режиме программирования (D.H.Иванов, О.Н.Погорелюк, 1990).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ СБСУВДЕНИЕ

Под нашим наблюдением находилось 350 человек, у которых выявлены явления кишечного дисбактериоза. Наиболее часто дис-бактериоз обнаруживали у больных, страдающих заболеванием толстой и тонкой кишок. Группой сравнения были 107 практически здоровых людей.

• Анализ результатов исследований колонизации кишечника здоровых лиц, проживающих в г. Волгограде, показал, что доминирующей группой, характерной для эубиоза здоровых людей, являлись бесспоровые анаэробные бактерий (бифвдобактерии и бактероиды), на долю которых приходилось до 96-97 % от общего количества микроорганизмов кишечника.

Аэробные бактерии, представленные кишечными палочками, стрептококками, лактобациллаки, энтерококками, составляли б сумме менее 5 %. '

, Количественное содержание в I г исправлений бифвдобакто-рий и бактероидов варьировало от Г до-10 млрд, а кишечных палочек лактобацилл, стрептококков и энтерококков - от одного до ста и более миллионов.

Принимая во внимание значительные колебания результатов, полученных при исследовании колонизационной резистентности, понятие "нормальная микрофлора," нами определено как средне-физиологическая величина микробной обсемеиенности лиц контрольной группы, при этом были установлены закономерности микробной экологии в зависимости от анатоио-физиологаческих особенностей биотопов.

Так микробиоценоа кишечника характеризовался высоким содержанием ивдигенных микроорганизмов - бифвдум н лактобокто-

рий ( 1в9,1±0,3 и 1в 8,4*0,2 КОЕ/г соответственно), значительном диапазоном колебаний кишечных палочек (от 6,4 ди Хе 9,2 КОЕ/г испражнений). Выявлена широкая представленность

С

аллохтонной флоры - условно-патогенных энтеробактерий (79,2$), грибов рода Кавдвда (26,1 %), ртафилококков (19,6 %), Однако данные микроорганизмы при значительной частоте высева обнаруживались в исправлениях здоровых людей в количестве не более 1В 4 НОЕ/г.

Изучение бактериальной колонизации коки показало, что иосмотря на значительный диапазон вариаций, микрофлора здоровых виц"отличается значительным постоянством.

По данным наших исследований плотность микробных популяций является основополагающей характеристикой сообщества и зависит от топографии экологической ниши. Наибольшие ее значения отмечены на коне промеаности (288,76^21,52 КОЕ/см2), минимальные - на коке груди, спины, кивота (28,37±1,98; 47,Ш. ^4,54 и 58,94^6,65 КОЕ/см2). Средняя величина микробной обсе-иенэнности составила 119,17114,07 КОЕ/см2.

Пргобдадшцей в численном и видовом' отношении в биоценозе копи бала граштоложительная флора, которой колонизировалось 100'$ обследуемых лиц. - "

Представители данной группы в 84',5 случаев обнаруживались в-монокультуре, при этом частота ассоциаций не превышала 15,5 %.

Анализ структурно-функциональной организации позволил выделить доминирующие группы, составляющие 99,6 % всего сообщества. Постоянными представителями микробиоцешза были кокки (100 %), при этом у большинства обследуемых они обнаруживались

о л

в титрах 10 -10 . В значительном проценте наблюдений (63,5 %) выявлялись дифтероцды, однако в меньших количествах - 10--10".

Наиболее редко обнаруживались условно-патогенные представители - эшерихии (10,4 %), канадцы (8,4 %), протеи (7,4 %), псевдоионады (4,7 %). Среди аэробной флоры высевались такло бациллы, частота обнаружения которых не превышала 11,2 %, а содержание находилось в пределах от 1,07 до 4,21 КОЕ/сИ2.

Основную часть микрофлоры кожи составляли представители семейства Шегососсасеаэ - стофило- и микрококки.

В сообщества стафилококков ведущее место принадлежало коагулазоотрицатеяьныы видам, которыми были колонизированы зео обследуете (100 %), при этом достоверной разницы в преобладании частоты обнаружения на каком-либо биотопе не еыяв-лейо. Доминирующим видом в сообществе был з.ор1йогя1(11о , который заселял от 8 до II когных докусов тела человека одновременно, при этом изолированно его высевали с когл 60,8 % обследуемых. Етороо место по частоте колоштзации в группе КОС занижал П. саргорЬуисия , пиделяс'.иЯ в 11,6 - 14,3 % случаев, вогетируя в ввде монокультуры у 10,2, в"ассоциации с эпи-дермг.ль'г.г!.! стафилококке« у 4,1 % лиц.

Носктельстга золотистого стафилококка выявлено у 33,6 % обследованных, при этом чаще всего его обнаруживали на коне ' промежности (31,7 %), волосистой части головы (16,8 %), мая-пальцевых промежутков правой и левой рук (17,8 и 15,9 % соответственно).

Средняя величина бактериальной колонизации В.©р1с1эга1(Цо и В.яаргорЬуНсиз составила 72,97^3,63 и 6,36-1,27 КОЕ/с«2, В.аигэиз- 42,53-3,14 КОЕ/см2 соответственно.

Второе место в микрофлоре копи здоровых людей занимали шгарегаокки. Встречаемость их на различных биотопах тела колебалась от 57 до 84 %. При частоте встречаемости, сравнимой со стафилококками, они уступали им в количественном отношении,

т.к. плотность их популяции была в 2-.I0 раз меньшей. Аналогичная закономерность выявлена и для коринебактерий: размах их встречаемости составил от 50 % до 65,4, средняя плотность колонизации 4,I7tO,98 микробных клеток на I см2.

В литературе дискутируется вопрос о колонизации тела человека грамотрицательньши бактериями, отражая различные взгледы исследователей на распространенность здорового носи-тельства.

По данным наших исследований, частота колонизации кояи здоровых лодей граынегативньши микроорганизмами не превышала 18 %. При этом установлено, что встречаемость н плотность колонизации находится в зависимости от топографии экологической ниши. Чаще всего и в больших количествах они обнаруживались на коже промеаности (17,8-1,3 %; 18,02±1,63 КОЕ/сы2), меапаль-цевых прокегутков правой (15,8-1,0 fi; 12,00^0,26) и левой (10,3tl,2 %\ 13,18tl ,93 КОгУсМ2) pyic.

Грибы рода Candida 'занимали незначительное место в микрофлоре здоровых ладей. Ими было колонизировано 23,3 % эдоро-вых лиц. Еысок11й процент обнаружения кондид объясняется тем, что у всех обследуемых грибы высевались но более чей в I - 2 биотопах.

Исследование микрофлоры кишечника 350 человек, страдающих дисбактериозом, показало, что, наибольшим изменениям подвергается иаднгеннал флора - бифидо- и лактобактерии. Так, в достаточном титре аактобациллы обнаруживали только у 7,2, би-фвдобактерии - 4,6 % обследованных. Среднее содержание их в кишечнике больных характеризовалось низким удельным весом с разницей на 2-4 порядка логарифма относительно нормы. Это ■ приводило к значительному возрастанию контаминации кишечника условно-патогенными микроорганизмами.

Так, у 86,6 % обследованных выделяли энтеробактерии в количестве свыше 6 КОЕ/г, а у 79,4 - грибы рода Кацлцца со средним содержанием 15 5,9^0,3 КОЕ/г. Стафилококки обнаруживали в кишечнике больных в 2 раза чаще в количестве 5,2 ^0,2, при этом в 10,3 % случаев высевали в.аигаио , не характерный для микрофлоры здоровых.

При этом нами отмечено, что при развитии микроэкологиче-сних сдвигов в кишечнике, условно-патогенные микроорганизмы часто вегетируют в ввде ассоциаций (48,9 %), что усиливает степень их патогенность.

Известно, что нарушение микробного ценоза кишечника закономерно приводит к перестройке иммунного статуса макроорганизма. Эти изменения, в свою очередь, вызывают сдвиги в микробном пейзаже кожи больных.

Анализ микрофлоры кожи 53 человек с клиникой латентного (компенсированного) дисбактериоза показал, что колонизация данной группы лиц не претерпевает существенных изменений. Однако; в ее структуре пррисходят некоторые количественные сдвиги, не сопровождающиеся.качественной перестройкой.

Развитие субкомпенсацик процесса в кишечнике усугубляет данные нарушения. Это проявляется, прежде всего, в достоверном увеличении как бактериальной плотности так и качественными изменениями в таксономической структуре микробиоценока.

Анализируя микрофлору кожи данной группы больных, мы выявили значительное количество бактериальных ассоциаций (53,6 %, р 0,05). При этом наиболее часто обнаруживали сочетания грибов с граыположительной флорой 4 %), реже гран-позитивных бактерий с грамотрицательными бактериями (16,2 %). Одновременное вегетирование грамположительных, грпмнегативннх микробов с грибами выявляли в 13,7 наблюдений.

Следует отметить, что нами были обнаружены биотопы, колонизированные только грамнегативными бактериями - 3,4 %, грибами - 1,1 %, либо же их сочетанием - 1,3 %.

Установлено, что кожа больных дисбактериозом широко и массивно контаыинирована грамнегативными бактериями. Так наиболее часто их выделяли с кожи промежности (52,9 %), межпальцевых промежутков (32,6 и 29,4 %). Одновременно отмечали увеличение плотности колонизации, носившее достоверный характер на всех изучаемых биотопах.

Изучение колонизации дрожжеподобными грибами показало, что процесс заселения данными микроорганизмами кожи больных затронул все изучаемые анатомические участки, причем частота встречаемости грибов возростала в 3-10 раз, а плотность колонизации ими в 3-30 раз в зависимости от биотопа.

Анализ видового состава наиболее многочисленной группы микробиоценоза - стафилококков, позволил установить, что плотность популяции сообщества достоверно увеличивается. Однако этот процесс происходит за счет появления в структуре микробиоценоза золотистого стафилококка', обнаруживаемого на коже 52,1 % обследуемых, и уменьшением участия 8.«р1<1»гп1сЦ.в. Так частота встречаемости В.ер1йегт1<11в на коже больных варьировала от 36,3 % ка спине до 50 % на левой голени, тогда как ■в группе здоровых этот показатель имел величину от 66,4 до -88,2*. .

Таким образом, проведенные исследования показали, что развитие процессов декомпенсации микробиоценоза кишечника сопровождается интенсивным заселением кожи условно-патогенными микроорганизмами. Однако, популяции, выделенные с кожи различных групп обследуемых, могут быть неоднородными по своим биологическим свойствам.

Изучение равнозначного количества пггаммов в.аигаио , подученных с кошт больных и здоровых лиц показало, что больные, страдающие дисбантериозом, являлись носителями преимущественно (72 %) штампов эковара в1п1ав-П, обладающего высокими агрессивными характернотиками, тогда как здоровые чаще (88 %) колонизировались эковаром в1паае-1.

Коагулазоотрицательные стафилококки больных, были представлены биотипом I и П, тогда как в группе здоровых все выделенные штаммы отнесены к физиологичным биотипам И и 1У, не встречающимся у больных.

Изучение признаков патогенности энтеробактерий, показало существенные различия в способности образовывать ДНК- и РНК-азу, фосфатазу и гемолизин, утилизировать Конго красный. Достоверное увеличение этих признаков у микроорганизмов, выделенных с коки больных, свидетельствует о ¡ее большей вирулентности и указывает на гетерогенность популяций. • 1 Такт« образом, нами установлено, что микрофлора коки болытш: претерпевает существенные изменения. Однако cai.ro перечисление .встречающихся микроорганизмов еще не дает представления о конкретном мшгробиоценозе.

Развитие микроэкологии, рассматривающей коду как среду обитания, а ее микрофлору как открытую саморегулирующуюся систему с'многообразием взаимодействий меяду особями и популяция.™, позволяет определить основные направления изменений ее функционирования при воздействии различных дестабилизирующих факторов.

Главная роль микроэкологии - установить, соответствуют ли данные свойства повторяющимся структура}.! дане в том случав, когда сообщества резко отличаются по видовому составу, соизмерить силу нарушений, сравнить реакцию на нарушение и сопоста-

вить их устойчивость к изменениям. С этих позиций представляется интересным сравнить основные экологические параметры ыикробиоценозов различных групп обследуемых.

Изучение бактериальной плотности дает представление о размерах микробного сообщества. Это своеобразный "рейтинг" биотопа, характеризующий пространство ресурсов и среды обитания.

Изучение бактериальной обсемененности коки позволило установить характерные закономерности внутрибиотопного распределения микроорганизмов. Промежность и кона ыеглальцевых промежутков оказались самыми густонаселенными зонами у здоровых воден. Данные биотопы были обсеменены на 1-2 порядка выше другие и у больных дисбактериозоы кишечника. Следовательно, вцут-рибиотопное распределение микроорганизмов не зависит от физиологического состояния, а связано с особенностями строения.

Если учесть, что руки и промежность являются, кроме того., мебтом наиболее интенсивного обмена микрофлорой, то данный факт приобретает большое практическое значение и является убедительным доводом.в пользу выбора этих участков в качестве ' объектов эпидемиологического, диагностического и прогностического наблюдения.

Установлено, что центральным зве$юы' структурно-функциональной организации экосистемы является совокупность населяющих ее микроорганизмов.

Изучение таксономической структуры показало значительное расширение видового разнообразия у больных. В'обеих группах преобладали кокковые микроорганизмы. У здоровых людей среди всех выделенных культур 09,6 % составили представители родов Staphylococcus , Micrococcus и Corynebacteri.ua , относящиеся к резидентной флоре кони. Наиболее многочисленными сби-

тателями коал оказались стафилококки, среди которых преобладал В.ер1<1егт1с11в . Высокая частота встречаемости этого видя и значительный удельный вес позволили считать его доминирующим микроорганизмом сообщества. Таким образом определилось ■ доминирующая группа шпсробиэценоаа кони здорового человека, состоящая из В.ер1с1огп1<Ца , микрококков и коринебактерий.

Долгое время принадлежность к реэидонтшй флоро определялась по частоте встречаемости. Анализ доминантности, получаемой на основе данного показателя, позволил установить, что в структуре микробиоценоза больных происходит перераспределение доминирующих видов. Так, доминантность стафилококков не претерпела существенных изменений, тогда как для микрококков отмечено ее резкое сшжеюте, причем э таком биотопе как кола грудп, отмечен переход последних в разряд случайных вид^п (С < 25 %); в остальных биотопах значение индекса из ггревьпга-ло 50 что позволило отнести их к разряду дополнительных. Показатель постоянства коринебактерий, напротив,' возрастал

изучаемых топодемвх (р<^0,01), что, по-видкмрцу, в некоторой степени компенсировало утрату-доминирования микрококков.

Наибольшее увеличение доминирования (а 2-7 раз) .отмечэггз для граанегативных бактерий и грибов. При этом з группе 'сравнения значение показателя для дагогш: шгкроорггипташв не превышало 25 На кояэ промеяноетн показатель постоянства грсмот-рицателышх бактерий составил 52,9 грибов - 60,8 т.е. 0!ш Енступэли в датам бготопо в качестве постоянных видов и принимали участие в формирования цэштипа пока больных лкдеА.

Изменение до;.ппгантного состава микрофлоры болыпга про-слеаено нпгга при анализе индексов флористической зна*пп.»сти'.

Установлено, что наиболее йначнншп в микрофлоре здоровых людей были стафилококки, микрококки и корииебактерки. 7

больных ышсрэкощщ утраунян яццырущео положение, уступив рвою окологичесдую »апцу энтеробактерида и грибам. Значимость стафилококков оставалась высокой в основном за счет увеличения встречаемости Б.аигеив. Приведенные исследования показали увеличение индекса транзиторной микрофлоры за счет снижения таковой для резидентных микроорганизмов. О-гсвда можно сделать вывод, что аиачшость- представителей ыикробцоценоза деобходи^о оценивать на только на уровне таксонов надвидово-го ранга, но и на уровна вода.

Анализируя видовой состав сообщества стафилококков микрофлоры коки больных по величине лвдекса доминирования в структуре популяции, ш установили, что лидирующее положение Б.ер1йагкй&1е , характерное для. ыикробцоценоза здоровых, по-всеыестно утрачивается. Кроме того, нами выявлено увеличение этого индекса для сапрофитического и золотистого стафилококков, занявших апологические ниши

В группе больных отмечали появление биотопов, в-которых условно-патогенные микроорганизмы либо занимают доминирующее положение, либо выравниваются с основными симбионтами по его величине (кока груди, живота, промежности). В этом процессе принимают участие сапро'фитические стафилококки и коринебакто--рии, компенсирующие уменьшение доминантности

Полученные данные дали основание предположить, что лидирующее положение Б.ер1с1егтШ.1з в ыккробиоценозе здоровых лиц предопределяет колебания чнсленностн и встречаемости остальных водов сообщества. Воздействующие факторы, прямо или косвенно .влияющие на колонизацию микрококками и эпвдермальныыи •стафилококками, по своей интенсивности превышающие компенсаторные механизмы экологической системы, индуцируют микроэкологические нарушения. Данные процессы характеризуют собой раз-

витие дисбактериоза кожи, определяемого у 84 % обследуемых больных.

Таким образом, изменения доминирующей структуры микробиоценоза имеют последовательный характер и соответствующие проявления на уровне экосистемы. У больных происходят иерархические сдвиги и смена абсолютных доминант, возникают новые биоценотические отношения, которые квалифицируются как дис-бактериоз.

Вместе с тем, основываясь только на полученных данных« невоэмонно оценить все разнообразие Изменений. Для характеристики микробиоценозов количественные параметры необходимо , дополнять качественным!, одним из которых является индекс видового разнообразия.

в.ЫсЯоивьиш (1978) показал, что видовое разнообразие является средством функциональной стабильности экосистемы. Изучение индексов ыихробиоценозов кожи здоровых ладей выявило наименее устойчивые биотопы - промежность (1,84), меяпадьцв-?ые промежутки правой (2,15) п левой (2,23) рук. Именно в данных биотопах процессы экологической, сукцессии у больных дне-бактериозом достигали наибольшей интенсивности, в результате чего значения индекса максимально увеличивались (4,21, 4,06 и 4,01). Насыщение видового разнообразия транзиторныли видами в дальнейшем стабилизирует данше экосистемы. Возникает своего рода порочный круг: микробиоценозы кожи промежности, кистей рук первыми и при минимальных воздействиях дестабилизируются с развитием дисбактериоза, а процессы нормализации в данных биотопах, напротив, наиболее затруднены.

Приведенные нами данные позволяют выявить основные тенденции микроэкодогических сдвигов у больных. Однако микрофлора каждого индивидуума отличается своими, присущими ему осо-

бенностяыи. •

Нами предложен алгоритм оценки индивидуальных вариантов ценотипа кожи на основа учета доминирующих видов сообщества.

Среди представителей резидентной флоры коси доминантный состав микробиоценоза формируют эпидермальный стафилококк, инкрококки и коринебактерии. Именно при данном составе, названном нами ценотшюы I порядка, наблюдается сбалансированность окосистеш. Исчезновение в.ер1йопа1<11в или замещение его другими видами, входящими в структуру сообщества, отражает изменение пропорций ыевду представителями ценотипа, что приводит к повышению емкости среды обитания и снижению физио-логичности (ценотипи П и Ш порядка). Параметры данных нормо-ценозов свидетельствуют о субкомпенсации. Показателями декомпенсации является наличие несвойственных видов, что расценивается как дисбактериоз.

В микрофлоре коки здоровых лвдей прослеживается последовательная градация от наиболее физиологичного ценотипа (нормо-ценоз I) через промежуточный (П) к наименее физиологичному (нормоценоз Ю. Установлено, что частота дпебиоза не превыза-ла 39 %. Нами выявлено, что у больных дисбактериозоы происходят достоверные изменения ценотипа с уменьшением градиента встречаемости от наиболее физиологичного (первого типа) через менее физиологичный второй и третий к дисбактериозу. Частота дисбиотического варианта составляла от 31 до 80 % в зависимости от биотопа (р 4 0,05).

Изменения в микрофлоре имели достоверную прямую корреляцию с частотой развития заболеваний коки у данной группы больных .* Подобные нарушения требуют коррекции. С этой целью нами использован препарат молочнокислых бактерий штамма 317/402 "Наринз" (Я.А.Ерзинкян, 1971). Его применение подкреплено по-

ложительныыи результатами.коррекции микробиоценоза кишечника. Однако при приеме препарата "per ов " его действие на кожнуа микрофлору носит опосредованный характер и не обладает достаточной эффективностью, что подтвервдено результатами, полученной в группе сравнения.-

Изучение терапевтической эффективности препарата проведено у 43 человек. Контрольную группу составили 23 больных с аналогичной выраженностью заболевания, принимавший "Наринэ* только внутрь. Возраст больных э обеих группах варьировал от 7 до 35 лет.

Анализ результатов показал, что обработка коки "Наринэ" приводила к элшптацил О.аигэиз , грамнзгативных микроорганизмов и грибов: у 79,1 % больных отмечено их полюо исчазново-няо, у 16,3 % - значительное уменьшение тяггснсивности колонизации.

Плотность популяций S.aurauo уменьшилась в 4, грибов рода Кавдида - в 8, энтеробактерий - в .3 раза. Одновременно происходило увеличение численности резидентных представителей: в 3 раза возросла плотность микрококков, в 2 - коагула-зоотрицатольных стафилококков.

У всех больных отмечали клиническое уяучзенио ист шшо исчезновение симптоматики. Необходимо отметить отсутствие побочных действий и аллергических реакций ко время лечения.

Подученные данные позволяет отнести кисломолочные бактерии штамма 317/402 ("Наринэ") к эффективный мягким и экологически чистым модуляторам микробиоцэноза. Коррекция микрофлоры с применением данного препарата отличается хорошей управляемостью п полной безвредностью для больных.

выводи

I.. Кокный ыикробкоценоз здоровых двдеа характеризуется опредеденныу распределением микроорганизмов, Окн объединяются в пространственные репродуктивные группировки, неодинако-ЕЫ8 по численности, и заселяют все биотопы кожи. К основополагающим характеристике^ биоценоза коза! относится общая микробная плотность, которая у здоровых людей равна 119,17 -14,07 КОЕ/с^.

2. Иикрофлора кизечника жителей Волгограда характеризуй ется доминированием анаэробных бифидо- и лактобактерий и широкой .представленностью условно-патогенных микроорганизмов, определяемых у 72 % лиц.

I ,

3. У здоровых людей выявлено три цзготипа микрофлоры кожи, что СЕИдетельствуе-т о многообразии кормы в природе. В микробиоценозе установлен групповой характер распределения доминант, для которых определена различная окологпческоя значимость. , -

4. Первичный этап колонизации условно-патогенными бактериями коки здоровых яэдей происходит бессимптомно и только у. 39 % из "них моает расцениваться как дисбиотическая реакция.

С наибольшей интенсивностью этот процесс происходит на коке промежности и межпальцовых промежутков кистей рук, что позволяет выделить их в качестве объектов эпццемиологического мониторинга.

б. Дцсбактериоз кишечника приводит к глубоким,нарушениям микробиоцаноза когш с изменением его таксономической, иерархической и функциональной структуры. Больные дисбактериовом являются нэ только одним из потенциальных источников распростра-

нения условно-патогенных.микроорганизмов с открытых биотопов тела, но и группой высокого риска.

6. Характер симбионтинх отнопекнй усяовко-патогенкнх бактерий, интенсивно колонизирующих Kosjr бояьтвлг, шявиз основные причины заселения как стафилококками, так и грамотри-патвльными бактериями, заключающиеся э its высоком якотоптчо-ском сходство. Обнаружена высокая гетерогсгапсть погулять, колонизирующих коду п кгаечнлк бояъгак дясваттркогсм эти. Опа заключается з посызс:шой продуяст фермвптов агрессии и скорости протекания бтшотчэсгскх процессов, являющихся одним из пусковых моментов пт^чдцнокпэго процесса.

7. Разработан способ коррекции дксбшза контг, пютчаа-ций отмену антибиотиков, тиэиачолко обпвукрепяязщйй теряпкя

(вптаыикы' В j, Bg, В., С, А), а тагстэ пртекзгздс волочет кислого продукта "Нарипэ". Эффективность прсд-зглслиого способа доказана ¡.гспфобко логическими исследованиям, проведстялги до л после лечения".

Список печатных работ, опубляковддаих по тс:.?» диссертации

\

1. Никрофлора кявзчнака детей при пкгапояопидоээ // Тезисы научных докладов на IX областной ко!5$ертпют молодых ученых-медиков и врачей. - Волгоград, Iv'-З. - С. 2?.

2. Колонизационная резистентность слизистых оболочек здоровых людей (И.Г.Пономарваа, Г.Н.Усатова, А.В.Похитилов)

// Деп. в ГЦ«® 22017 от 23.12.91.

3. Экологическая характеристика микрофлоры кожи здоровых лгпеЯ (А.Б.Покатнжов, О.Г.Крашрь) Ц Деп. в ГЦНЖ W Д-22677 от 5.08.1992.

4. Колонизационная резистентность кожи эдорових людей

. (А. Б.По катило в, О.Г.Кршарь) Н Дел. в ПЦМВ » Д-22676 от 6.08.1992.

5. Экологическая характеристика микрофлоры погости рта едоровых ввдей (И.Г.Пономарева) // Дел. в ГЦВМБ № Д-22675 от 6.08.^992.

6. Особеншсти микрофлоры верхних дыхательных путей больных дисбактериоаоы кишечника // Тезисы докладов ХШ конференции молодых ученых. - Волгоград, 1993. - С. 47.

7. Коррекция дисбиотических нарушений кожной микрофлоры 6 помощью кисломолочной смеся "Наринэ" (М.А.Бербенцева, О.Г.Крамарь) // Деп. в ГЦШБ & Д-23413 от 3.06.1993.

8. вотирование семейных очагов дисбактериоеа кишечника (О.Г.Крамарь) // Деп. в ГЦШБ * Д-23412 от 3.06.1923.

9. Коррокция дксбкоцеюза кожи при помощи кисломолочной смеси "Наринэ" (О.Г.Крамарь) // Тезисы докладов ХШ конференции молодых ученых. - Волгоград, 1993. - С. 48.

10. Экологическая характеристика микрофлоры полости рта (И.Г.Пономарева) // Тезисы докладов ЯП конференции молодых ученых. - Волгоград, 1993. - С. 81.

Методические рекомендации

1. Колонизация микроорганизмами кожи в норме и патологии (О.Г.Крамарь, И.Г.Пономарева, Н.Л.Ткаченко и др.). Методические рекомендации для врачей. - Волгоград, 1992. - 20 с.

2. Экологическая характеристика микрофлоры полости рта в

норме и патологии (И.Г.Пономарева). Методические рекомендации

/

для врачей. - Уссурийск, 1992. - 18 о.

3. Колонизационная резистентность пищеварительного тракта

(Т.СЛпжикова, И.Г.Пономарева, Г.Н.Усатова и др.). йстодичс-саие реконоццашп для врачей. - Волгоград, 1992. - 13 ,о.