Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Эффективность применения гонадотропинов для вызывания суперовуляции у мясных коров
ВАК РФ 03.00.13, Физиология
Автореферат диссертации по теме "Эффективность применения гонадотропинов для вызывания суперовуляции у мясных коров"
РГ6 од
2 1 мгли 1ооя вс'Убссий
■•1СКПЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТНЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЖИВОТНОВОДСТВА (ВИЖ)
Не правах рукописи 'Лукмпков Мнцх&т Мухямгалэзич
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ГОНАДОТРОПИКСЕ ДЛЯ ВЫЗЫВАНИЯ СУПЕРОВУЛЯЦИИ У МЯСНЫХ КОРОБ
03, ОС. 13 - физиология человека и животных
(физиология сельскохозяйственных животных)
В Т С Р Е Ф Е Р А т
циссертацяк на соискание „>'шаой степени кандидата ииологьческих н^ук
п. Дубровины Московской области 1993
Рабога LE.'i'üiiiKa хо i'oероссл::с:го:- за;-чка-лсачадо:-:£?елъс::оы
МЮЯОГЭ .
Научные руководители: ,-;кгор ссолопггасгсх кауг,
~ 00 х со с cp -ie^.e'vz-pz^j-'b
казд^а? биологических sayi;
" >- • Г-J
А/ » иГчЫ
Сандальные огзгонента: доктор бкодоггиесюз; ре?-*,
upO¿'-GCCOp . Li
кг:д;;ца1 <я:ологЕчес1игс нау::
■ а.н.;юыт?одсв
"адущз'е учрезденае: Россг-'с-с:;; гоо?охк2чео:й;2
поЕьланий кьаззфссациг сэреищ-
T173Ï1ÎT. KSJров
3a^i¿ даеовдгаск OCCÄSCCS " 6 " 1C/L0JU% I9S3 i.
2 *»/On часов на заосда.тл! с.:о15.кла.з:^ок\:и:о1с Cossic ¿.Cüu.j при Scepoacaitacou саучяэ-лослоло^агсльско^ гзезнуутз к^ю^иоепдсю,,
> Адрес ЕнехЕзгзта: I42GI2, Иссхозсжя. об.-.., Подольск^': р-к, zoo. ¿¿¿роыду.
ЧУ
. ¿r.
Автореферат разослал " У " IS5G г.
Гчелш; секретарь oa6i,;-i.iZ3r.po2ainc<rú Согеса,
OilC-ljIIC'ioCKii/t i^.VIx ¿i. ¿¿/i
- с -
I. СЕЛЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность тени,. Одной из актуальных проблем современного • т»вотноводства.является увеличение производства мяса, поэтому необходимо /«пользовать репродуктивный потенциал хи-ьотннх; способных интенсивно увеличивать массу тела, с высоким лоэф(]!»цментом трансформации корма в мчснуь продукцию.
Трансплантация эмботонов способствует воспроизводству высокопродуктивного ^кота к более сжатые токи; знач"тельно повышает эффективность селекции коров, дает возможность оценивать их по качеству "отом^тва, укогчть темпы селекции. Трансплантация теоретически считается наиболее реальным методом, где можно целенаправленно повышать двойневость.
Программы трансплантации эмбрионов в мясном скотоводстве имеют свои особенности, связанные с физиологическим состоянием
животных мяснчх пород и со спецификой технологии их содержания-.
с
К числу нерешенных вопросов в «ясном скотоводстве отно-"ятс^ отбор коров для использован"я в качестве доколов гкб*""с-чов, гормональное вызывание полиовуляци", получение -олг.оцек-ных омбсоиов и их нгизкивляемость после -ересадкг ~ецттиентам, которые требуют дополнительных исследований и научного решения.
Целью настоящего исследования является изыскание наделках коитешев отбора и подготовки мясных коров-доноров, уовешен-'■тзованче методов направленной синхронизации половых циклов, сравнительное изучение эффективности действия гормональных препаратов ФСГ и ГСНК на уровень супепсвуляции, число и качество омбсонов, ппижмЕляемость их после нехит>угг™ческой пересадки, определение влияния некоторых факторов на эти показатели.
Поставленная цель исследований достигалась решением сле-дувапх основных задач:
- определить кстаертто атбога мясках копов-донооов эмбрионов на основе пламенной цзннот--», восптек-эвод'тельной способности, физиолоп»чегхого состояния <' не.тип возможной саязи
с гормональным фоном в кпонр коров на дэнь гормональной обработки;
- разработать более оффекттеный метод синхронизации охоты у доносов и реципиентов с '*спользоэанчем различных ппеленато"е
Iонадотгопяого V лютеолиткческого действия;
~ изучить эффективность гог>яонального вызывания гупзгову-дяштм у мясных коров с использованием различных гипофизапных гонадотоопных препаратов;
- определить влияние некогогых фактогов на прм-живлчемисть о но ""'о ко а кгг-гугг'.'ческой -егз садке.
Научнас ноз'тзка заклвчазтоя в определении ■эф1ект'ч?ности, г'но-'п&риого ^йлликудосТ'<мукзго гормона 0±-СГ) у. стандартного препарата ГСЗл прч гормональном зкзывинта супетзсяу ляц>пг у мясных котов, изучена взаимосвязи концентрации прогестерона острадмола в к^оък мясных хоров перед гормональной обработкой я факторов, определяющих эффективность трансплантации.
практическое значение работы состоит в разработке системы целенаправленного отоопа подготовки «ясных коров-доноров, выявления более эффективных гормональных препаратов для вызы^а-ч-я'супуовуляцчи у получения оптимального числа эмбрионов у
мясных пород.
Апробация полученных данных. О.'-новные положения диссертации доложены и получили положительную оценку на;
- ежегодных ученых советах Вп'"?!4Са;
- Хг межреспубликанской научно—тактической конференции у-лодых учених •* спзцчаяястов "Резервы увеличен1.?- нго"зеодстьа
ч повышения качества сельскохозяйственной продукции", - Оренбург, 1992 (24-26 марта);
- Хт! межрегиональной научнс-^Т8кт",-1е^1<оя конференции молодых ученых и специалистов '''Пути -^оизводства я П&ЭСТ5ВЫ поБьЕсекпя качества селъгкохозрй-т^енноа продукции", • Оренбург1393 (31 марта - й апреляj.
Основные положения <* ^пактт'че^к'тс чгедлогктека»» дие из выполненных"^следований, внедтг.тся в центпе трансплантации омбгионов «ясного ¡"кота ВН^-Са
Объем работы, диссертация изложена на III оттентах маши-ноп!'сного текста. Состоит иг» ■введения, обзора литесатуры, т*>«» зультатов собственных исследований, обсуждения-, выводов и практических предложений. Содержит 22 таблицы» 3 писунка. Список использованной литературы включает 151 наименования-, в том числе S*t иностранных.
2» КЬТЕРад " МЕТОДЫ РПСЩОВМШЙ
"'^следогання проводили а период о [УэС по 1993 гг. в центре трансплантации эмбрионов ВКЧ'!МСа 01Х "йкспет'ментальное"
г.Оренбург,
Б качестве донопоз эмбрионоб использовали короб гепефогд«» окой породы 3-11-летнего возраста-с. живей-«aeeot'. Jt-5&«5-5G-ar;—-
Реципиентами служили тзлки симментальской породы в возрасте 16-115 мае с живой массой 360-380 кг. Копоеы-дсноры и телки« реципиенты были клинически эдоговн, с наскальной физиологией половой системы.
Коенление животных осуществляли по нормам, разработанным ли ш;:чмсе8
Д.'Iii с-нхроннзации охоты у жтаотнкх ч вызывания суг.етювуля-
пии использовали »стро&ш, КнЛатратюо'пт, ФСГ-пг ГСШ, фолли-гтмтч*« грофоллон.
ФСГ-п (США) при лыэ ивании суперовудяшт применяли в дозах 36 и 50 мг, филл'.сгпопин - 1200 Щ„ грофоллон - ЮСО КБ. Использовали 2 с»эрии грофоллона (0369 и 0690)..
да« профилактическасьиадг/ катки коров* перед гормональной обработкой «спользозалг смесь гентамицине с пенициллином.
Для выяснения взаимосвязи исходных концентраций прогестерона у. оотрадиода в косви у мясных когюв-даноров.гезультатами гошоиальных обработок проводили отбор проб крови перед еинхво-нгсацлей охоты,, г. день охотц, перед гормональной обработкой и и ,емь лш ло.чт->г донора.
Определен«« концентраций прогестерона и астрадиола осуществили радиобиологическим методом к лаборатории йвдок.р«ном-гии НИИРГЬ.
Отбор воров^доноров, их горнокалькус обработку, осеменение, кохипурптческоо извлечениз, поиск к оценку качества зародышей, выбор реципиентов, и пересадку эмбрионов выполняли по методике В'«а (1990).
Цифровой матеотал обрабатывали биометрическим методом по Н.А.Пдохинскому (1970), на микрокалькуляторе МК-56.
3. РЕЗУЛЬТАТУ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1, Отбор мясных коров для использования в качеслве доноров эмбрионов
для использования в качество доноров коров отбирали по следующим критериям: генетический потенциал, воспроизводительны? статус, состояние здоровья-, возраст, соответствие с.тандатп'у породы.
Б мясном слуговодстве в зависимости от поставленной за— дач-?: получение быков-тпансплантантов от издающихся родителей
или увеличение выхода дгойневых телят путем подсадки эмбтоо» нов, )-!огут бить Изменены критерии отбора коров-доноров,
Некотогые исследователи рекомендуют использовать выбпакс' ганких мясных коров в качестге одноразовых доноров эмбрионов.
Установлено, что результаты супеРО£ул°цни коров *ъ пле «дга по равнению с результатами выбракованных коров достове? но вкач (табл.1).
Таблица X
Супепокуляцня и выход нормальна* эмбрионов у мясных копоз различной племенной ценности
Показатель
Коровы
племядра : выбракованные
г!г;гч1ботйнс коров
12
/Чагч-'оэало супесовуляцией - %") 1С - 83,3 6 - 66,7
05 уляцнй на донора 7,6+0,74х 5,3+С, %
"олич-птельннх доноров по извле-чг-нн.о ембг/ионов (п - %У 1С - 100 ч - 66,7
Получййо загодылей на донора 6,>0,63 4,7+0,55
в т.ч. нормальных эмбрионов 3,8+0,78 2,2+0,55
Процент от числа зародышей
Пг-мечание: х - Р<0,05
У коров I группы получена реакция яичников суперовуляцией у 10 из 12, или 83,3/5, у коров 1 группы - 66,7%. Положительных
донопол по извлечению эмбрионов в I группе было 100^, во П • 66, Т/? от числа реагирующих суперовуляцией, от обработанных коров - 83,3 и соответственно. У коров из племядра число онудяцнй на донора было 7,6, у выбракованных - 5,3, то есть на
9
- 7 -
2,3 овуляций достоверно больше (Р<0,05).
Возрастные рамки для доноров строго не ограничены. Однако, следует." отметить, что как среди молодых, так и среди старых животных проблематичных по извлечении эмбрионов коров-доноров встречается чаще (табл.2).
Таблица 2
Число овуляций и выход нормальных эмбрионов у коров разного возраста
Показатель :-Возраст (лет)_
: 3-5 : 6-8 : 9-11
Обработано животных II 12 8
Реагировало супероБулчцией (п - %J 8 - 72,7 10 - 83,3 6 - 75,0
Число овуляций на донора 8,4+0,92 7,6+0,74 7,2+0,66
Положительных доноров по извлечению эмбрионов (п - %) 7 - 87,5 10 - 100 5 - 83,3
Получено зародьгаей ка донора 7,7+0,89 6,3+0,63 6,8+0,56
в т.ч. нормальных -3,7+0,45 3,8+0,78 3,1+0,32
Процент от числа эародьшей . 48,1 60,3 45,6
В расчете на одного донора получено в среднем в I группе 7,7, во П -6,3, в i - 6,8 зародышей, в том числе нормальных -3,7; 3,8 it 3,1 соответственно. Процент полноценных эмбрионов m группам животных составил 48,1; 60,3; 45,6 от общего числа полученных зародышей. Среднее количество эмбрионов на донора и процент пригодных в трансплантации у доноров 3-8 лет выше, чем у доноров 9-IL лет. У. старых коров выход нормальных эмбрионов оказался менее 50$ от числа заводные».
Известно, что упитанность тесно связана с временем появле-i летжой половой охоты после отела. Так, при длительном иг,-
пользования животаих в птюгпамме трансплантации возрастает вероятность, их ожирения-, что ухудаает омботопгодуктивнолть
•• .ттрудпя&т выполнение программной работы, '
Результаты исследований показали, что киаотные с различ-
■. г.'ппнчостьв неодинаково реагируют суперовуляцией.на го-
•3 группе кото» средней упитанности число реагировавших ••сныу .-т,гтгтт В7что на 12,5 и 20,85? больше, чем у ... .-'ысаей и нике средней упитанности. Аналогичное прегму-•""'тм было получено в числе овуляций> з&оодышей и нормальных »кио-с»;«! донопа.
3.2. Сравнительная оценка эффективности различных схем синхронизации охоты у коров-доноров и т е ло к-пеципиентов
Синхронизация охоты у коров, особенно у телок, активизипу-•n.vuivY' фуяхцнк» и позволяет программировать пев -работу по '
'•.••юдптъу " пересадке эмбрионов. ! :;.>учсна еффектияность 3 схем синхронизации охоты у процоссс подготовь коров к синхронизации охоты их vw.v. на 3 групп». В первую группу гкдачилн животных по •::•;! -•■'.)i-ошо выраженного активного желтого тела в одном из яичйкко^. Оу.оту синхронизировали введением аналога простаглан-во второй группе « двукратно с интервалом II :■ г. третьей ПГФ^-альфа применялся в комбинация с #СГ (фоллитропин - 150 ВД). В двух последних группах псиали в охоту почти одинаковое число животных 83,7 и 84,6/5 (табл.3). В первой : - '.-г-,- стот показатель составил 45%. Большинство коров проявило признаки, охиты 2 течение 'Ю часов. Однако, число их в казэдой
группе было маличным (55,6; 66,7 и 61,8% соответственно).
Таблица 3
Результаты синхрониз&цни oxoit* ^КОРОВ-ДОНОРОВ (п - %)
однокгат-: ИР^двукрат-
цикозатело . • пи по желтому телу :но с интерва-:. :лом II дней x
Обработано коров 12 43 26
Проявили признаки охоты 9-75 36 -83,7 22 - 84,6
в том числе: через 24 часа 3 - 33,3 7 - 19,4 I -4,6
через 48 часов 5 - 55,6 24 - 66,7 IB - 81,8
через 72 часа I - ИД 5 - 13,9 3 - 13,6
Не пришли в охоту 3-25 7 - 16,3 4 - 15,4
Число коров, пригодных б качестве доноров 8 - 66,7 32 - 74,4 20 - 76,9
Одним из критериев оценки эффективности синхронизации остального цикла коров является их пригодность в качестве доноров эмбрионов на 8-10 день индуцированного цикла. Таких коров, имеющих в яичн"ках к началу стимуляции суперовуляции, с четко выраженными желтыми телами было больше во П и 111 группах (74,4 и 76,9/0 от количества обработанных, что на 7,7 и 10,2$ больше, чем в I группе. По отношению к числу коров, проявивших 'признаки охоты, их.было больше в Щ;группе. (.90,950-, а в двух первых гпуп» пах несколько меньше, ио равное между собой (88,9%),
Аналог/чкый опыт проведен на телках-реципиентах. Телок в охота разделили на тш группы. Первую группу животных обработали двукратно с интервалом II дней клатрапростином, вторую -аналогично эстпофаном, третью - однократно эстрофаном а сочетании с фоллитропином в дозе 150 Щ. (табл,4).
Наибольшее число телок, проявивших признаки охоты, отмечены
Таблица 4
Результаты синхронизации охоты у телск-оециггаентов (п » ¡0
Токазатедь
гклатпапвос-:острофан .
:ттш де у к гат -: д в у к ратн о,:* :ко, интесгал^'нторзал : ; II дней :11 дней :
Обработано телок 24 50 36
1ооявилп признаки охоты 13 - 54,2 38 - 76 29 - 80,6
в том числе: через 24 часа 2 - 15,4 7 - 18,4 3 - 10,3
через 48 часов 9 - 69,2 26 - 68,4 22 - 75,9
через 72 часа 2 • 15,4 5 - 13,2 4 - 133Б
Не пришли в охоту 11 . 45,8 12 - 24 17 - 19,4
Имел« желтые тела 10 - 41,7 23 - -46 21 - 58,3
из них: отличные 3 - 30 9 - 39,1 II - 52,4
хорошие 3 - 30 8 - 34,8 6 » 28,6
удовлетворительн ые - 40 б - 26,1 4 » 19,0
Не имели желтого тела - 58,3 27 - 54 15 41,7
в группах зевотных, синхронизированных однократно эстрофаном з сочетании с ФСГ, что составило 8С,6$, минимальное число телок било при применении клат'тапростина (54,2%).
Цель синхронизации можно считать достигнутой лишь в том случае, если на предполагаемый день пересадок в яичнике живот» -них будет хоооло выраженное желтое тело.
В первой группе число телок, имевших желтое тело в.яичниках, составило 41,7%, во П и Ш - соответственно 46 и 58,3^. Наибольшее число животных с желтыми телами хорошего и отличного качества оказалось в Ш группе (8152), наименьшее « в I группе
(60$). Отсутствие желтых тел ко времени пересадок в I группе отмечено у 58,3$, во П - 54 и в Ш - 41,7$ телок.
Приведенные данные сведетельствуют, что из испытанных схем синхронизации охоты не во всех случаях можно добиться высоких показателей прихода в охоту. Вместе с тем, применение для этой цели только ПГ^1*- сопровождается расседаан"ем сроков проявления охоты от 24 до 72 часов после второй иньекцим. Кроме нарушения синхронизации проявлений охоты этот фактор отп«ца-тельно сказывается и на пригодности телок в качестве реципиентов. Включение в схему синхронизация $СГ способствует синхронному наступлений охоты у животных, увеличению потенциальных доноров и реципиентов. В связи с этим для синхронизации охоты наиболее результативной является схема применения- ПГФ^. в сочетании с ¿СГ.
3,3. Результаты вызывания- суперовуляции у мясных коров пои применении разных гонадотсопинов
В последние годы, в связи с ограниченным поступлением гормональных препаратов импортного производства, более доступными остаются- ГСШ и $СГ (фоллитоопин, грофоллон).
Исследования показали, что у коров одной и той же породи при одних и тех же условиях кормления и содержания наблюдаются различия а реакции яичников на разные гокадотропины (табл.5).
Данные табл.5 показывают, что из примененных препаратов ни один не дает гарантии реакции супзровуляцми у всех обработанных коров. Наибольшее число животных, реагировавших супесозу-дяцией отмечено во П и Ш группах 66,7%, в 17 и I - 80,0 и 73,3$ соответственно. Однако не все животные, реагировавшие о.упепову-,,.<цией, дали заподызи и нормальные эмбрионы.
7совень супероэуляции и качество эмбрионов у мясных коров при применен т?, газ чих гонедотгоиных препаратов
показатель • ГСЗН Г *СГ-н ; *°*£?!Т7Х>" I
. . ■*— пин : лон
'бсаботаяо корой
'еагиговало супер-вуляцией (п -
исло овуляций на донога
случено зародышей на донога
в том числе: нормальных
депнепирозанных
нзоплодзтворённых
яйцеклеток
15 15 15 15
II - 73,3 13 - 86,7 13 - £6,7 Ш - 60 „О
5,2+С,42хх 8,1+0,53** 7,6+0,57 7,6+0,4?
+,2^С,5ехк 6,7+0,36хх 6,5+0,37 5,7+0,32
2,^+0,52х 4,3+0,46 * 4,1+0,58 3,1+0,70
0,5+0,22 0,7+0,22 0,8+0,23 0,9+0,27
1,3+0,25 1,740,36 1,5*0,4 1,7+0,39
Примечание: х - Р-С0,С5, хх - Р/.0,С1
Основным ¡стп тесием оценки обвей эффективности тоги ...» чгко: •• реиага'.а то» вызывании суиеговуляцин рмяетея количество полно-енаих, погодных для трансплантации эмбрионов» Максимальное исло ттактных эмбрионов - 4,3+0,46 на донога получено во П пу-пе, мгнималькое - 2,"41,52 - в I, подученная разница стати» гичесхи достсззсуа (Р-^С.С^).
Примерно равнее количество нормальных эмбрионов 4,3 и 4-,!
1 донора получено в группе ксов, обработанных 4СГ-п и фолли-
■(опмном-.
Исследовали стадии гезв-тна эмбрионов у^мяеных коров-доноров, 5работаннж различными препаратами- У доноров всех <г групп на день цикла эмбрионы от £8 до 96$ находились на стадии разви» т поздней морулы ч сакнед бластоцисти (табл.6)»
Качество * стадия развития окбсонов у мясных короэ-доносов при использовании разных гонадотропинов
Показатель | ГСЖ : $СГ-п ! Гпофсл-
• . « чип • Лип
Исследовано эмбрионов 26 56 53 37 -
та них: отличные 3 - 11,5 12 - 21,4 10 - 16,9 5 - 13,5
хорошие 9 - 34,6 23 - 41,1 25 - 49,1 17 - 46,0
удовлетворительные 14 - 53,9 21 - 37,5 17 - 32,0 15 - 40,5
Мопулы: ранние 3 - 11,5 - - I - 2,7
поздние 17 - 65,4 41 - 73,2 42 - 79,2 26 - 70,3
Бластоцисты: ранние 6 - 23,1 13 - 23,2 9 • 17,0 9 - 24,3
поздние -. 2 - 3,6 2 - 3,8 I - 2,7
суккы морул и бластоиистоэ пр« обработке препаратами ЗСГ большая часть из них приходится поздним ио пулам до 79,2$, и при обработке ГСЖ - до 65,4^» Отмечены некоторые различия в соотношении морул бдастоцист по группам. Лишь небольшое число заподыаей П, ¡2 и 17 групп достигло стадии поздней бласто-игтсты. У доногов, обработанных ГСЖ я грофоллоном, встречаются в незначительном количестве мопулы ранней стадии развития.
Оценка качества зародышей показала: наибольшее ч/сло отличного качества эмбрионов подучено при испальзовантп» американского нрепатжта. ФСГ-п и-фодлитпопина (21,4 и 18,соответственно). У доноров, обработанных ГСЖ, получено лишь II,5£ отличных эмбрионов. Чг полученных интактных эмбрионов большая часть хопоавго качества (34,6; 41,1; 49,1 и 46,0) за исключении I группа, где хорошие эмбпионы составляли 34,6?, а удов-л&твогятальпыа - больше половины (53,9^).
- IM ~
На основан;'.- «слученных данных можно заключить, что иа«бо~ лее эффективном для вызывания супетюзуляцин яхляется препарат ФСГ-п -T50V3I эдства "ЗА. "репапат фзллитпслт'ь пс среднему числу окуляйй V полученных-заводыаей. на донора пгапт"чески не уступает Применение грэфоллона обесечигас. высокий уровень-"'— --супег.овуляц«и у доноров, получение большого числа зарод кзей, но при гтои отмечаете?: уменьшение выхода ••нтактнкх эмбрионов "ри увеличении дол« пео^яодот^огенних «йцеклегок и дегенашгр!* ванных эмбрионов.
„ Крн'лечч'пацил и scttwpm т» крови мясных
коров-доноров в день охоты у г,сред гормональной обработкой
для эффективного использования метода трансплантации эмбрионов большое практическое значение имеет правильный отбор когоь-доиоров, таг. как одной из едетасивавпих причин широкого тгакт»ч;• at?o«s -в««етс«г отсутствие надежных
критериев отбора т* подготогки корог-донороь.
С этой целы нами проведены исследования по определекиь содстг/аьия прогестерона и эстпедкола э кроен мясных коро?-до-hdpob перед гормональной обработкой.
„Для исследования у гивотных Стада кровь из яремной ген.-до синхронизации охоты, в день схеть, на з день никла и а дег.г. охоты после супеговулшт» (табл.7).
до синхронизации охоте средняя хонцеиттация прогестерона в крови коров была 0,95+0,13 (tais- 0,35; 1,9). вели сравнивать данчне индивидуально мегду взятием до синхронизации- и в день охоты, то нлбллда^тсР снижение концентрации прогестерона, за . исключением одного животного, у которого в дальнейшем отсутствовала реакция суперэвуляции. Тькл-е наблюдалось отсутствие теак-
Таблица 7
Концентрация половых гормонов в крови у мясных коров-доноров
День взятия крови
_Гогмоны_
прогестерон, : эстпадиол, нг/мл : сг/ил
до синхронизации охоты 0,95+0,13 13,38+0,?S
Б дань охоты 0,37+0,05 Н,С6+0,98
Перед обработкой 1,80+0,21 12,69+1,21
В день охоты после обработки 0,59+0,07 16,06+2,63
ции полиовуляции у животных с концентрацией прогестерона, если в 0 день была вызе 0,5 нг/мл.
Содержание прогестесонь в 0 день было 0,37+0,05, а в день охоты после стимуляции суперовуляции - 0,59+0,07, или в 1,5 за выше» Однако при содержании 0,8-1,0 нг/мл реакция суперовуляции отсутствовала.
Концентрация эстрадиола по циклам существенно не меняется-и не характеризует половой цикл. Самая Еысокая зго концентрация от 22 до 40 нг/мл отмечается у животных с отсутствием полиовуляции после гормональной обработки.
Концентрация прогестерона э крови перед гормональной обработкой колебалась от С,8 до 3,0 нг/мл. Средний показатель составил 1,8+0,21 нг/мл. Каждому ушЕнл прогестерона соответствует определенное количество овуляций, то есть как- увеличение, так и уменьшение среднего показателя- характеризуется сокращением числа овуляций. Однако при концентрации от I до 2 нг/мл и от 2 до 3 нг/мл разница не существенна (8,1 и 7,6 соответственно). Концентрация- прогестерона в крови животных перед обработка до I нг/мл совпадала с низким уровнем овуляций н числом
нормальных эмбпнонов (табл.8), идя вообще отсутствовала реакция яичников. Подобной зависимости числа овуляций от концентрации ост^аднола в опыте не наблюдалось.
------ .......________________Таблица 8
Число овуляций и полученных рмбтонов 3 зависимости — от концентрации прогестерона в к~оеи кя^кшс кс->ов-доноров перед горкональнзй обработкой
Гог!-:г.:: : _На донора
прогестерон,нг/мл:зггрбдгол,пг/кл : овуляций эмбрионов
до Cf9 0 - 9 3,7+1,1 1,4+0,12
от I до 2 Ь - 18 5,1+0,76 4,5+С,37
от 2 до 3 14 - 16 7,6+0,54 3,1+0,25
Анализ данных, полученных г опыте, я литературы показал, что максимальное содержание как прогестерона, так и эстпадиояа г, ;;г.оггт м""чнх коров иике, чек у молочных.
Tea:!'!/ образом, мехху урлки«. прогестерона перед гошонаяь-ной обработкой с числом овуляций и нормальных эмбрионов v^ncaux сотое установлена прямая связь. Перед вызыванием суперовуляции сонцентрация прогестерона в крови у мясных коров должна быть ie менее I нг/мл, а опт«мальным его уровнем следует считать
I нг/мл.
3,5, Факторы» влияащие на супероЕуляцию, выход
и качество эмбрионов у мясных короб
Результаты наблюдений свидетельствуют, что на реакции по» гиовуляции оказывает влияние время года. Низкая- эффективность
'тмечеиа з летний период в сравнении с зимне-весенним и оеенне-имнкм (табл.9).
Влияние сезона года на уровень суперовуляции и качество эмбрионов у мясных котов-доноров
Показатель
Обработано коров Реагировало
Получено зародышей на донора
дегенерипованных
неоплодотворенных яйцеклеток
• Период года
: осенне-: зимний : зимне: весенний | летний
15 2В 25
1 12 - 80,0 27 - 96.4 23 - 92,0
8,9+0,40 9,6+0,61 4,4+0,42
7,5+0,43 8,2+0,22 2,2^0,31
3,4+0,22 2,8+0,41 4,7+0,40 2,2+0,40 0,8+0,26 0,5+0,15
1,3+0,20 1,3+0,31 0,9+0,14
Среднее количество овуляций на доноса в зимне-весенний и осенне-зимний периоды составило 9,6 и 8,9, в летний - 4,4, или в 2 раза меньше. Аналогичная тенденция наблюдается' и по числу извлеченных зародьшей. Однако нормальных эмбрионов у животных, обработанных в зимне-весенний период, было больше, чем в другие сезоны года.
В результате работы было установлено, что заметное влияние на оплодстворяемость яйцеклеток оказывало место введение спермы в половые пути самок (табл.10).
Пои введении спермы в шейху матки получена в среднем на донора 2,6 качественных эмбриона, что составило 37,7% от числа извлеченных зародызей. При этом дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток достигло 29,0 и 33,3$ соответствен но. Более высокие результаты по выходу нормальных эмбрионов был
Результаты осеменения косов-донопов замороженно-оттаянной спермой в зависимости от места ее введения
показатель ------- -: Введение спепмы р отдел матки
: лейка " : тело : рога
Количество коров 6 . 7 7
Число овуляций на донора 7,6+0,61 7,8-0,54 7,7+0,65
Получено зародышей на донора 6,9+0,53 7,4+0,42 7,1+0,57
в том числе: нормальных 2,6+0,44 3,5+0,37 3,2К),43
дегенешрованных 2,0+0,40 2,1+0,34 2,4+0,38
неоплодотвопенных яйцеклеток 2,3+0,12 1,8+0,21 1,5+0,14
получены при осеменении копов-донооов с супеговуляцией в тело и гога матки. Так, в среднем на донора при этом получено coot» аетстяокно 3,5 и 3,2 качественных эмбрионов. Число неоплсдотворенных яйцеклеток снижалось от 9 до 12$ по ствненто с введением спегмы в шеяку матки.
Таким образом, пн" искусственном осеменении мясных конов-доносов с полиовуляцией ректо-цервикальным способом, оптимальные результаты по оплодотворяемости яйцеклеток и выходу полноценных эмбрионов можно получить нр" введении спермы непосредст« венно в тело и рога матки.
З.б. Факторы, влияющие на результаты извлечения-, пересадки и приживляемости эмбрионов
Технология нехирургического извлечения уточняется и совершенствуется в основном при работе с молочным скотом. Мясной скот, в отличии от молочного, имеет ряд биологических и анатомо-физиологических особенностей репродуктивных органов. Так, из-
¡M"vi:u:, ■■m- "иэчеп матки et' рогов всегда мсньзе, чем у иолоч~ nos KOrJi'K„ Пг>:> гектольиои обсясдог.днпп Maine, имеет тмшз&одуя рогидность, особенно в пепиоди усиления половой активности, ö при механических воздействиях начитает быстрее и сильнее сокращаться.
Необходимой', условиями успелього и-л »лечения эмбрионов' яг-дяотся достаточный практический опыт ч унени» манипулировать а т.оцесс гимиваиия; тем не неноо сф'.ыютдоышй анализ полученных данных показал, что ^ат'-тор r;¡r;-;i¿ "¡''п'кп'губ" «каст :тг:;:ос п-чг'мущессйо перед катс-тсроц конт''уздчп В'йа при использо^ани;' ИХ у мясных кооом~доног.оь.
Чгч пзресадке сие>:зполучо;шта OHVöHOb катетерами вовмг-ру!:ц'!:- "Кассу'' н "(íoil'siадт Л;-.:.'" остренных разлнх'-Ц в пр"лпг,-ляемост;< но уг"ганосла;;о. ло;.'.и;г'"у:,.. :•: г ос : -,, опргдел:!!^;';-: процент стельности пецппиента, ос.та<,гсз мастиг-г-п-о « omr.- теч-н'.пса, осуществляющего пепессдку•
Таблица II
Птптвляемость омбпионов --¡рм обга&гглс доноров различи ы ми гон ао т г о с чисм-«
Показатель : ГОН ! '.ГДЧ< ;
Чвсесожвио элбоиопоп У 1Ь 17 12
Число реципиентов 3 Í.5 13 9
Стольник пецнпчэнтон i в 5
чйоцоит стельности 20,0 '¡0,0 22,2
Диализ таблиц« AÏ покоя ыэдо:', чго по:: пергсадке ске;»их ¡'-"оной, полученных от мясных Kor.oB-;»oKoroï>, обработанних Л, при-и^ляекость составила 20,0$, пси использовании ЗОГ-п
..-.20 -
« фоляитпопнна - гоответственно на 20 и 18,5? больше, чем а. группе ГСМ. При сг.авненки трех препаратов ггуппы &СГ установлено, что качбольиая пгижнэлтемость свежих гмбрионов получена ь гг.уппе доноров, обработанных &СГ-п (40,0?), наименьшая -обработанных грофоллоном (22,2%). ппи обработке доноров фодли-тропнном лригивляемость эмбрионов незначительно уступает аме-чикакскому ФСГ.
Пгоиеденные омиты показали, что при правильном выборе метода !« учете необходимых условий нехнпургичеокой пересадки тее-а.'лио «окно получать приемлемые результаты (табл.12).
Таблица 12
Результаты пересадки эмбрионов мясных коров-доноров
показатель •.Пересадка: Подсадка : 2 эмбриона :1 эмбпи- : I эмбпи- : в пазныё ро-: она *. она : га матки
пересажено эмбрионов 17 13 24
Число рец"пчентов 17 13 12
Стельных реципиентов 5 6 3
Процент стельности 46,1 25,0
Число отелов деойнями - 2 1
Процент дройневых отелов - 33,3 33,3
Получено телят 5 _jL.
Было пересажено 5;гего 5*) зкбпиока: из них 17 эмбрионов по одному такому же числу реципиентов, 13 эмбрионов 13 реципиентам в контрлатеральннй рог матки предварительно осемененным телкам, 24 эмбриона - 12 реципиентам no I эмбоиону в каждый
рог матк"-.
Относительно к числу реципиентов процент стельности госта-
рил по группам 29,4; 46,1 и 25,0^. Самый высокий m лдент гтедъ-ности был во П группе, где реципиентам в кснтряатеральный рог матки подсаживали по I эмбриону, то есть на 13 реципиентов получено 6 телят, в Щ - на 12 нец"пиентов - 4 теленка, что составило 61,5 и 33,32 соответстьснно.
Вероятно, причиной снижения понкивля скости омбпконов при пересадке двух эмбрионов в разные рога матки является неоднократное раздражение катетером шейки катки реципиентов при расширении церг-пкального какала и манипуляциях с маткой, что, видимо нарушает естественный пзким пгчкчвляемости.
Процент двойневых отелов состарил во П и Ш группах 33,3$.
Необходимо отметить, что во всех группах наблюдались мертворожденные.
Результаты исследований показали, что при ппаг^лы.о;'. tbv'o-ре метода, соблюдении основных условий нехмрупгической пересадки, а также при высоком качестве пересаживаемых эмбрионов, есть возможность получать двойнсвыэ отелы.
4. ВЫВОДЦ
1. В качестве доноров омбттнол на .юдходящимя являются коровы в возрасте от 3 до 9 лот заводской упитанности.
2. Применение простагландинов в сочетании с $'СГ г.п 9-13-й день астрального цикла обеспечивает проявление полноценной охоты в более равном, промежутке времени у большинства корок-доноров. • .
3. Уровень еуперовуляцит у коров-доноров эмбрионов находится в тесной зависимости от типа применяемого гонодотропина. Препарат ГСНК по своему биологическому действий уступает ппе^а-г-йту §СГ по числу нормальных окбоиоиоа г; их ппикивлчемостч.
фоллитропин по сьот биологическим хшастеам и действ« в дозе 12С0 Е1 не уступает другим препагатам аналогам.
Ч< Уровень супеповудяции у мясных колоз зависит от сезона года/ Лучаие результаты суперовуляции, опдодотворяемости.яйце»
клеток и у «хода нормальных эмбрионов получены г осенне-зимний и зимне-весенний непиодк года., " .-
Оптимальным у соврем прогестерона р к-оь;: мясных коров-доноров перед гормональной обработкой является 2 нг/мя.
6с Более высокие показатели яи ^евости у мясных короб набхыдаатся пои подсадке эмбрионов в контрлатеральный рог мат*»« предварительно осеменен..да ргципиектам.
5. аРАКТ!*Ч.РШ*Е ПЩКШИЯ
[, Для трансплантации л качестве доноров эмбрионов веко-нридуетсй-использовать мясных коров в зозрвете от 3 до 9 лет, лаиодской упитанности, с содержанием прогестерона в кпови гормональной обработкой но нию? { иг/кл. ¿о Гормональную обработку и пересадку эмбрионов целесообразно проводить в осенне-зимний и зимне-?осенний периоды года е ксштрлатеральный рог матки предварительно осемененным реци-
Список опубликованных работ по теме диссертации:
1, Муглмнов М.М3 Результаты вызывания суперовуляции у мясных..1согов-доноров грофоллоном и фоллитропинок // Тр.Всесосз, НИИ нпсн„ скотоводства. Оренбург, 1991. » С, 109-110.
2.. Хилькевич С.Н., Мухмино? М.М, Влияние некоторых факто- .
ров на получение эмбпионов крупного рогатого скота // Тр, ВссиО'.я. ййЧ' хч«и# скотоводства, - Оренбург, 1991. - С.114-115, '
~ 23 -
3, Мукминоь М.М. Подготовка донотчв-омбписнов мясного скота Ц Тезисы докл. XI Межреспубликанской науч.-пгакт» конф. молодых ученых и специалистов, - Opeuíjvtr, 1992. - С. 35-36.
4,' Хилькзвич G.H., Мукмкиов М.М. Профилактика эндометрита пш нехирупгическоы извлечении зародышей у коров-доногоз // Тезисы докл. XI Межреспубликанской науч.-практ. конф» молодых ученых и специалистов. - Оренбург, 1992, - С,41,
5, Осеменение коров-доноров мясных пород при суперовуляции / Гавриков A.M., Абуов А.Г., Кт-нзеев В.Н,, Мукминов М.М.// Молочное и мясное скотоводство. - 1992, - # 3. - С.16-17,
6, Сергеев Н.Ч,, Доронин E.H., Мукминов М.М. Сравнительная оценка синхронизации охоты телок-пеципиентоЕ острофгано.м и к лат pama ст ином // Информационный листок. - К; 192-92. - Оренбургский ЩШ?, 1992.
7, Вызывание суперовуляции у мясных воров-доноров / Гавриков A.M., Мазуровсхмй .4.3», Мукминов .М.М,, Кинзеев В,Н,// Информационный листок. - ß 264-92. Оренбургский ЦКТЧ, 1992,
8« Критерии отбора и подготовки к ясных коров к г-уперэву-ляции / Гавриков A.M., Мукминов М.М,, Кинзеев В.Н., Юлда-лев i'l.C. // Тезисы докл. ХП Межрегиональной науч.-практ. конф. молодых ученых и специалистов. - Оренбург, 1993, ~ С,54-55.
9, Мукминов М.М,; Гавриков А,М, Синхронизация охоты у копоз-донорог V телок реципиентов // Тезисы докл. ХП Межрегиональной науч.-практ. конф. молодых уче;:ых и специалистов, -Оренбург, 1993, - С.58-59,
10. Сравнительная сценка оффе&тивности различных схем спи-ронизации охоты у мясных коров-доноров./ Гавриков A.M., Фунтиков В.Ф., с ев B.C., Мукминов М.М, // г,ифопнац"ончнй листок. - ? 72-93.'- Оренбургский ЦНТ«, ШЗ,
- Мукминов, Мидхат Мухамадиевич
- кандидата биологических наук
- п. Дубровицы, Московской обл., 1993
- ВАК 03.00.13
- ПОЛУЧЕНИЕ, ОЦЕНКА КАЧЕСТВА И ПЕРЕСАДКА ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО ОКОТА
- Усовершенствовани критериев отбора и подготовки коров мясных пород доноров-эмбрионов
- Получение, ценка качества и пересадка эмбрионов крупного рогатого скота
- Получение двоен и влияние отела на воспроизводительные функции коров и сохранность молодняка
- Эффективность использования высокопродуктивных коров с различным физиологическим статусом в качестве доноров эмбрионов