Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

ЭФФЕКТИВНОСТЬ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ОСЕМЕНЕНИИ И ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ

ВАК РФ 03.00.13, Физиология

Автореферат диссертации по теме "ЭФФЕКТИВНОСТЬ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ ПРИ ИСКУССТВЕННОМ ОСЕМЕНЕНИИ И ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ"



На правах рукописи

ГУЬИН СТАНИСЛАВ ИВАНОВИЧ и /

Эффективность биологически активных веществ при искусственном осеменении и трансплантации эмбрионов высокопродуктивных коров

03.00.13 - Физиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискания учёной степени кандидата биологических наук

Дубровной -2006

Работа выполнена на кафедре воспроизводства, искусственного осеменения

и трансплантации эмбрионов сельскохозяйственных животных Федерального государственного образовательного учреждения дополнительного образования (повышения квалификации) специалистов РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ МЕНЕДЖМЕНТА В ЖИВОТНОВОДСТВЕ (ФГОУ РАМЖ)

НаучныА руководитель; кандидат биологических наук, доцент

Тарадайянк Татьяна Егоровна

Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор

Марзанов Нурбнй Сафарбиевнч

кандидат биологических наук

Мороз Татьяна Анатольевна

Ведущая организация; Российский университет Дружбы

Народов

Защита состоится <¿7 > 2006 в 10 часов на заседании дис-

сертационного совета Д 006.013.01 «ри Всероссийском государственном научно-исследовательском институте животноводства (ВГНИИЖ)

Адрес института: 142132, Московская область, Подольский район, пос. Дуб-ровицы, ВГНИИЖ

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВГНИИЖ. Автореферат разослан <&> 2006 года.

Учёный секретарь диссертацно кандидат биологических наук

В.П. Губанова

, имени KA. Тимирязева ЦНБ имени НИ. 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА PiWOWf'

Актуальность темы. Интенсифи[са^^Р_сг1р;р^М'?Нн0гл-предусматривает высокую степень управляемости процессом воспроизводства, что вызывает ряд проблем. Для успешного их решения возникла необходимость в регуляции воспроизводительной функции животных с помощью биологически активных веществ. Однако далеко не все попытки вмешательства в деятельность репродуктивной сферы дают предсказуемый и желаемый результат и не исключают полностью таких явлений, как снижение выхода телят из-за нарушения оплодотворения яйцеклетки, а также эмбриональной смертности, которая, по данным исследователей достигает 24.8% у тёлок и 48, 6% у коров (Устинов А.П., 1970; Casida L.E, 1991). При этом во многих животноводческих хозяйствах среди бесплодных коров часто регистрируются животные с функциональными расстройствами половых органов без выраженных клинических изменений. Это, как правило, сопровождается многократными неритмичными половыми циклами и безрезультатными осеменениями (Нежданов А.Г., 1980; Чомаев A.M., 2005).

В связи с расшифровкой некоторых факторов функции размножения, представилась возможность контроля процесса воспроизведения крупного рогатого скота. Однако данные по этой проблеме требуют всесторонней детализации, с целью выяснения причин нарушения оплодотворяемости яйцеклеток и гибели ранних эмбрионов.

Целью работы является повышение эффективности искусственного осеменения и трансплантации эмбрионов высокопродуктивных коров. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние условий, содержания на воспроизводительные функции самок крупного рогатого скота.

2. Определить степень влияния сезонных факторов на возникновение гинекологических заболеваний у коров и телок.

3. Установить степень влияния лактационной доминанты на продолжительность сервис-периода у коров с удоем от 7 до 10 тыс. кг молока за лактацию.

4. Разработать методы повышения результативности осеменения коров путём применения тканевых препаратов, антиоксидантов, пробиотиков и других биологически активных веществ.

5. Усовершенствовать методы профилактики послеотельных осложнений и стимуляции воспроизводительной функции коров в ранний послеродовой период.

6. Изучить влияние биологически активного препарата колнцииа Е-2 на биохимические, иммунологические показатели крови и оплодотворяемость коров с многократными безрезультатными осеменениями.

7. Установить степень активности применяемых антимикробных препаратов по отношению к патогенной микрофлоре половых путей коров.

S. Изучить влияние колицина Е- 2 на качество и приживляемость эмбрионов крупного рогатого скота при нехирургической пересадке.

Научная новизна работы: Разработаны эффективные методы стимуляции воспроизводительной функции коров с уровнем лактации 7000 - 10000 кг.

Впервые изучено влияние антиоксидантного препарата колнцииа Е- 2 и пробиотика лактоамиловарина на воспроизводительную способность высокопродуктивных коров.

Впервые установлена возможность повышения качества эмбрионов и их выживаемости у реципиентов путем инъекций колнцина Е-2.

Практическая значимость работы. Предложены обоснованные схемы обработки новотельных коров биологически активными препаратами с целью профилактики послеродовых осложнений и лечения животных с гинекологическими заболеваниями. Разработаны рекомендации по улучшению результативности искусственного осеменения высокопродуктивных коров. Предложены усовершенствованные схемы повышения жизнеспособности эмбрионов крупного рогатого скота при искусственном осеменении и трансплантации. Результаты исследований нашли отражение в методических рекомендациях для слушателей системы дополнительного профессионального образования.

Основные положения, выносимые на защиту. Рекомендации по повышению воспроизводительных способностей высокопродуктивных коров.

Усовершенствованные схемы лечебно-профилактических мероприятий в послеотельный период.

Эффективные методы профилактики ранней эмбриональной смертности при искусственном осеменении и трансплантации зародышей крупного рогатого скота с использованием современных биологически активных препаратов.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Ученом совете ФГОУ РАМЖ (2004, 2005 гг.); юбилейной международной научно-практической конференции по проблеме: «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения» (ФГОУ РАМЖ, п. Быково Моск. обл. 2004 г.); международной научно-практической конференции по темам: 1) «Повышение конкурентоспособности животноводства н задачи кадрового обеспечения»; 2) «Генетические маркеры в селекции животных» (ФГОУ РАМЖ, п. Быково Моск. обл., 2005 г.); межкафедральной конференции (ФГОУ РАМЖ, 2005 г.).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано б научных работ.

Объём и структура работы. „ Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследований, результатов собственных исследовании, обсуждения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы, приложения. Материал изложен на 104 страницах машинописного текста, содержит 18 таблиц и 5 рисунков. Список литературы включает 201 источник, в том числе 92 на иностранных языках.

2, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы проводилась в 2002-2004 г. по схеме

(рис.1) на базе Кировской луго болотной опытной станции (ЛОС) на коровах и тёлках чёрно-пёстрой породы и их помесей различной голштинской кровнести с удоем 7000-10000 кг молока. Опытные и контрольные группы животных формировали по принципу аналогов с учётом физиологического состояния» продуктивности, возраста и живой массы. При проведении гинекологической

диспансеризации коров определяли состояние влагалища, матки, яичников, учитывали время отёла, сроки восстановления репродуктивной функции, сроки проявления первой охоты после отёла, сервис-период, индекс осеменения, стельность от первого осеменения, в течение 90 дней после отела, общую стельность, интервалы между повторными осеменениями (удлиненные интервалы, не кратные 18-24, считали свидетельством эмбриональной смертности). Изучали эффективность биологически активных препаратов (колицина Е-2, лактоамиловарина, молозива с йодом), используемых дня нормализации репродуктивных функций коров и тёлок. Обращали внимание на антиоксидант-ные, антимикробные, иммуностимулирующие свойства препаратов с учётом дозы и метода введения. Перед применением колицина Е-2 и после лечения у коров с многократными безрезультатными осеменениями проводили диагностику скрытых эндометритов по методу Флегматова П_А.

Феномены стадии полового цикла и оптимальное время для осеменения устанавливали визуально во время прогулок, дополняя ректальной пальпацией яичников и микроскопическим исследованием слизи по методу Казеева Г. В, Карташовой Г.Н. и др. (патент >6 1711865 РФ от 30.06.1993 г.)

Искусственное осеменение проводили замороженно-оттаяиной спермой быков голшти некой породы ЦСИО (п. Быково, Моск. обл.).

Ко лиц» и Е-2 использовали в схемах суперовуляторной обработки коров-доноров и подготовки телок-реципиентов перед трансплантацией эмбрионов. Выбор доноров осуществляла по следующим показателям: все доноры были после 2-3-х лактации (удой 10-12 тыс. кг молока), без клинических признаков патологии половых органов и нарушения обмена веществ, с хорошо развитыми жёлтыми телами. Обработку доноров проводили по четырехдневной схеме с использованием ФСГ-супер. Извлечение и пересадку эмбрионов проводили нехирургическим методом на 7-ой день после искусственного осеменения. Реципиентами для нехирургической пересадки служили тёлки случного возраста без патологии и аномалий половых органов, с хорошо развитыми желтыми телами.

Общая схема исследований

При изучении показателей, характеризующих хозяйственно-полезные качества скота, использовали данные зоотехнического и племенного учёта.

При проведении экспериментов контролировали состояние здоровья животных на основе биохимических н иммунологических показателей кровн.

Биохимические, иммунологические показатели крови определяли в Кировской областной ветеринарной лаборатории. Состав патогенной микрофлоры маточного содержимого и ее чувствительность к антимикробным препаратам определяли в лаборатории микробиологии научно-исследовательского института сельского хозяйства Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого.

Вирусологические исследования спермы быков-производителей и слизи из половых органов коров проводили в лаборатории вирусологии ВИЭВ (г. Москва).

Полученные данные обработаны биометрически с использованием персонального компьютера.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Влияние динамики молочной продуктивности па воспроизводительные способности коров с удоем более 7000 кг молока

Известно, что с ростом молочной продуктивности возникают проблемы с воспроизводством стада. Снижается оплодотворяем ость от первичных осеменений, возрастает число пренатальных потерь. Вследствие утраты воспроизводительной способности, повышается выбраковка высокоценных животных,

В Кировской ЛОС средняя продолжительность жизни коров 3-4 лактации. Селекция крупного рогатого скота основывается на широком использовании маточного поголовья в подборе с быками голштинской породы, что позволяет повысить гетерозиготность.

Однако эффект гетерозиготной основы подавляется неблагоприятным воздействием на результативность осеменения некоторых факторов. Одни из

них - лактационная доминанта, корректирующая продолжительность сервис-периода.

Целью наших исследований было выявление пика лактации и определение степени влияния лактационной доминанты на эффективность искусственного осеменения.

Всего было исследовано 220 коров по 4-м лактация м. Были учтены сроки достижения пика лактации по месяцам и время её спада, эффект от первых осеменений ло пика лактации и после спала, также был учтён индекс осеменения до пика лактации и после него. Результаты данных исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1

Влияние уровня лактации на результаты искусственного осеменения

Показатели

Лакта- Пик лактации После пика лактации

ция Кол- Стельн Индекс Жив-х Кол- Стельн. Индекс Жив-х

во ко- от 1-го осем. С гинек. во ко- от 1-го осем. с гинек.

ров, п осем., заболев. ров, п осем., заболев.

п-% п-% п-% п-%

1 32 1(КНЗ 3.22 4-12.5 21 13-61.9 2.22 1 -4.8

2 33 9-27.3 3.84 3-9.1 18 11-61.1 2.27 0

3 32 9-28.1 3.32 2-6.3 19 12-63.2 2.20 0

4 21 6-28.6 3.34 3-14.3 17 10-58.8 2.29 0

5 и 12 3-25.0 3.91 4-33.3 15 8-533 2.34 I -6.7

старше

Всего 130 37-28.0 3.53 16- 90 54-60.8 2.26 2-5.7

±3.9** 123 ±5.1 ±2.4

* ±3.1*

- р<0.05; *** - р <0.001

Установлено, что наиболее высокие результаты по оплодотво ряемостн для высокопродуктивных коров получены после снижения влияния лактационной доминанты. Так, стельность после первого осеменения возросла на 32,8 %, индекс осеменения снизился более чем на 1. Однако при этом сервис-

период увеличился до 130-140 дней. При более раннем осеменении на 6,6 % возрастает риск возникновения гинекологических заболеваний, причем для животных 5-ой лактации и старше этот показатель выше на 26,6 %.

3.2. Влияние моциона на воспроизводительную способность телок голштпнекой породы Мы предприняли попытку определить степень проявления воспроизводительной способности » уровень эмбриональной смертности среди животных, находящихся на привязи и пользующихся моционом на выгульных площадках. Результаты эксперимента приведены в таблице 2.

У телок, содержащихся на привязи, отмечали, главным образом, аре-активные, алибидные и анэстральные циклы, 10% животных имели фолликулярные кисты и проявляли признаки нимфомании.

Таблица 2

Воспроизводительная способность тёлок при различных способах содержания

Показатели Условия содержания

Беспривязное Привязное

Количество животных, п 20 20

Животные с полноценным

ЦИКЛОМ, п-% 20-100.0 11-55.0

Животные с неполноценным

циклом, п-% 0 9-45,0±11.1

Животные с удлинёнными интер-

валами между повторными осе- 2-10.0±6.7 8-40.0±11.0*

менениями, п-%.

Стельные от первого осеменения,

п-%. 12-60.0±11.0 8-40.0*11.0

Стельные всего, п-% 20-100.0

Индекс осеменения 1.5І0.5 3.5±0.5**

Животные с кислотным перерож-

дением яичников, п-%. 0 2-10.0±6.7

Животные с задержанием после-

да, п-% 2-10.0±6.7 7-43.8±11.1*

* - Р <0.05; ** - Р<0.01

Полноценные по продолжительности и наличию всех феноменов половые циклы фиксировали лишь у 55% телок этой группы. Это затрудняло выявление животных в охоте и осеменение их в оптимальное время, что не могло не сказаться на оплодотворяемосги: стельных после первичных осеменений было на 20% меньше, индекс осеменения больше на 2.

Кроме того, в группе животных, не пользующихся моционом, в 40% случаев наблюдали удлиненные интервалы между повторными осеменениями, несвойственные физиологически нормальным половым циклам. Это расценивали как проявление эмбриональной смертности. Во второй группе такие удлиненные циклы регистрировали лишь у 10% телок.

После отела у 43,8% первотелок, содержащихся на привязи, наблюдали задержание последа, в то время как в группе животных, пользующихся моционом, было всего 2 случая задержания последа, что составило лишь 10%. У 10% животных, находящихся на привязи, наблюдал» кисты яичников.

Таким образом, моцион положительно влияет на репродуктивную функцию телок и позволяет в значительной степени профилактировать послеродовые осложнения.

3.3. Восстановление воспроизводительной функции коров с помощью биологически активных вешесгв

Проанализировав состояние здоровья высокопродуктивных коров, установили, что чаше всего встречаются задержание последа, эндометриты, фолликулярные кисты. Наибольшее число животных с гинекологическими заболеваниями приходится на май - июнь. Учитывая влияние лактационной доминанты, мы предприняли попытку активизировать воспроизводительную функцию с помощью современных биологически активных препаратов и их сочетаний.

Для профилактики послеродовых заболеваний нами были использованы н оценены по эффективности сочетания биологически активных веществ и тканевых препаратов (гетеромолозиво в сочетании с 5 %-м спиртовым раствором йода, ПДЭ, АСД(2фр,), ссднмнн, тетравит, колншшЕ-2).

Животные были разделены на 5 групп по 30 голов. Препараты вводили сразу после отёла: 1-ой группе - 20 мл молозива с 0,3 мл 5 % -го спиртового раствора йода и 10 мл седимина внутримышечно; второй труппе - 20 мл ПДЭ подкожно и 10 мл седимина внутримышечно с повторением через 20 дней; третьей группе сразу после отела и еше дважды с интервалом 7 дней внутримышечно вводили по 10 мл 10% эмульсин ЛСД (2 фр.) на тетравите; четвертой группе — по 20 мл колицина Е-2 внутримышечно трижды с интервалом 7 дней. Коровам контрольной группы вводили внутримышечно по 10 мл физраствора (табл.3).

Таблица 3

Влияние биологически активных веществ на воспроизводительные способ-

ности новотельных коров

Показатели Группы

1-я: молозиво, йод, седимин 2-я: ПДЭ, седимин 3-я: АСД, тетравнт 4-я: колицин Е-2 5-я: контроль

Количество живот- 30 30 30 30 30

ных, п

Период от отела до 32.0±2.0** 35.0±1.0** 35.312.1* 36,2±2.3 42±2.0

первого эструса, дн.

Стельные через 22-733 21-70 24-80.0 21-70.0 12-40.0

90 дн. после отела ±8.1** ±8.4* ±8.9** ±10.2** ±8.9

Из них от первичн. 8-36.4 7-33.3 15-62.5 9-42.9 3-25.0

осем., п- % ±8.0 ±7.7 ±11.1** ±10.2 ±5,5

Сервис-период, дн. 130±4.0* 136+2.0*** 95±5.0*** 100±2.5*** 152І3.0

Индекс осеменения 2.0 2.3 1.9 2,0 5.4

Задержаний после- о*** 0*** Р**# 10-33.3

да, п-% ±8.6

Кол-во послеродо- 2-6.7 2-6.7 0** 1-3.3 8-2 6.6

вых эндометритов, ±4.6 ±4.6 ±4.9 ±8.01

п-%

*- Р <0.05; ** - Р<0.01; *** - Р <0.001

Данные таблицы свидетельствуют, что комплексное использование биологически активных веществ позволяет, в определённой степени, нормализовать показатели воспроизводства у новотельных коров и снизить количество

гинекологических заболеваний. Во всех опытных группах отмечено сокращение, по сравнению с контролем, периода от отела до первого эструса. Так, средняя продолжительность периода от отела до первой охоты в группе коров, которым вводили молозиво с йодом и седимином, составила 32 дня, что на 10 дней короче, чем в контрольной группе. При использовании колицина Е-2 разница составила 6, I дня в пользу данного препарата.

Наилучший показатель оплодотворяем ости от первичных осеменений (62.5%) и индекс осеменения (1.9) получен в группе коров, обработанных АСД (2 фр.) с тетравитом. В контрольной группе эти показатели равны 25.0% и 5.4, соответственно. Использование колицина Е-2 и АСД (2 фр.) с тетравитом позволило сократить сервис-период на 57 дней и 52 дня, соответственно.

Установлено, что гетеромолозиво с йодом в сочетании с седимином ничуть не уступает и даже превосходит по эффективности препарат ПДЭ.

Случаев заболевания коров эндометритами при использовании колицина Е-2 было на 21.6% меньше, чем в контрольной группе. Отмечено подавление роста микрофлоры матки препаратом колииин Е-2 от 1 до 4мм.. При введении АСД (2 фр.) с тетравитом больных эндометритом не зафиксировано. В опытных группах не было животных с задержанием последа. В группе коров, которым вводили колицик Е-2, отметили 3.3% случаев возникновения послеродового эндометрита. В контрольной труппе этот показатель составил 26.6%.

Наименьший сервис-период зарегистрирован в группе коров, которым инъецировали 10%-ную витаминную эмульсию препарата АСД (2 фр.).

Таким образом, введение новотельным коровам биологически активных веществ дает возможность значительно снизить риск возникновения эндометритов, что, несомненно, положительно влияет на последующую оплодо-творяемость. Такая профилактика позволяет уберечь слизистую оболочку матки от непосредственного негативного воздействия лекарственных веществ, то есть сохранить благоприятные условия для развития зародыша.

Наиболее доступно применение молозива с 5%-ным спиртовым раствором Йода. Кроме того, лечение молозивом является наиболее физиологичным

и экологически чистым методом. По нашим наблюдениям, вводить препарат лучше внутримышечно, что не вызывает лослеинъекционных осложнений в виде отеков и абсцессов.

3.4. Эффективность вакцинации коров против ИРТ-ИПВ при искусственном осеменении В настоящее время весьма актуален вопрос сохранения высокоценных животных, неблагополучных по инфекционным заболеваниям, в частности вирусной этиологии. При разработке методов предупреждения распространения и передачи возбудителей вирусных заболеваний, особенно ИРТ-ИПВ (инфекционный ринотрахеит-инфекционный пустулезный вульвовагинит), важное место занимает изучение благополучия животных по инфекционным болезням. Исследованиями, проведенными в ВИЭВ в октябре 2003 года, у животных нашего хозяйства были обнаружены антитела к вирусу ИРТ-ИПВ В этой связи, для повышения оплодотворяемости и снижения эмбриональных потерь были проведены лечебно-профилактические мероприятия.

Животным с клиническими признаками ИРТ вводили внутримышечно миксоферон в лечебных дозах, санировали матку и влагалище 2%-ным раствором молочной кислоты.

Профилактика заключалась в вакцинации сухостойных клинически здоровых коров сухой куяьтуралькой ассоциированной вакциной против вирусного ринотрахеита. Было вакцинировано 64 коровы. Вирусвакцину ВИЭВ против ИРТ крупного рогатого скота вводили, согласно инструкции и схеме ВИЭВ. Результаты исследований приведены в таблице 4.

Данные таблицы свидетельствуют, что после вакцинации вдвое возрос показатель стельности от первого осеменения, который составил 68,7%. Общий показатель стельности составил 93,7%, что на 15,7% выше, чем у животных, не подвергшихся вакцинации. Интервал между повторными осеменениями в опытной группе составил 21±2,5, что вполне укладывается в продолжительность нормального полового цикла.

Таблица 4

Влияние вакцинации против ИРТ на ошюдотаоряемость и эмбриональную

выживаемость

Показатели. Группы животных

Опытная Контрольная

Количество животных 64 64

Стельные через 90 дн.

после отела 60-93.8±3.0 50-78.1 ±7.3

Стельные после 1-го

осем., п - % 44-68.7±5.8** 22-34.4±8.4

Интервал между по-

вторными осемене- 21±2.5±2.5* 28±2.2±2.2

ниями (дней).

Количество коров с

гинеколог» ческими 4-б,2±3.0 14-2].8±7^

заболеваниями, п - %

* - Р <0.05; **-Р<0.01

В группе животных, не прошедших вакцинацию, интервалы между повторными осеменениями составили 28±2,2 дня, что свидетельствует о ранней эмбриональной смертности.

Следовательно, ассоциированную культуральную вирусвакцину против ИРТ крупного рогатого скота можно применять для уменьшения пренаталь-ных потерь при неблагополучии по данному заболеванию.

Важным показателем, заслуживающим внимания в этом эксперименте, является количество коров с возникшими после отела гинекологическими заболеваниями. Главным образом, регистрировали гнойно-катаральные эндометриты, вестибулиты и весгабуловагиниты, т.е., по сути, клинические проявления ИРТ-Ш1В.

Среди животных, прошедших профилактическую вакцинацию, было зарегистрировано лишь 6,1% с гинекологической патологией, в то время как в контрольной группе таких животных было на 15,$% больше.

3.5. Эффективность молочнокислого пробиотика лактоам иловарина при лечении животных с хроническими и субклиническими эндометритами

Лечебные мероприятия при скрытых и хронических формах эндометритов часто бывают неэффективным из-за больших экономических затрат и далеко не всегда физиологически оправданы. Поэтому целью наших исследований была апробация нового недорогого мягко действующего на слизистые оболочки молочнокислого пробиотика лактоамююварина. В ветеринарной практике его применяют для профилактики желудочно-кишечных заболеваний у телят и поросят в качестве иммуномодулятора и антимикробного препарата.

Для лечения лактоамиловарнном были отобраны коровы с хроническими гнойно-катаральными и с суб клиническими эндометритами. Лактоамилова-рин вводили по 20 мл в каждый рог матки дважды с интервалом 4$ часов. Результаты опыта приведены в таблице 5. В контрольной группе животных использовали 1% масляный раствор окситетраци клина внутри маточно пятикратно с интервалом 48 часов.

Предварительно определили чувствительность микрофлоры матки к указанным препаратам. Наибольшую активность проявил окситетраци клин.

Таблица 5

Эффективность лактоам иловарина при эндометритах

Показатели Препараты

лактоам и ловарин окситетрациклин

Кол-во коров, п Стельные от 1-го осеменения, п - % Стельные от 2-го осеменения, п - % Стельные от 3-х и более осеменений, п -% Стельные всего, п - % Осталось яловыми, п-% 60 14-23.3*5.4 18 - 30.0±5.9 21-35.0±6,2 53 - 88.3±4,1 7-П.б±4.1 60 15-25.0±6.8 27-45.0±7.9 12-20.0±6.3 54-90.0*4.7 6-І 0.0±4.7

После проведения лечебных мероприятий с использованием лактоамило вари на достоверных различий результатов не наблюдали: стельных коров было лишь на 1,7% меньше, чем после лечения животных окситетрацикли-ном (88,3% против 90,0%). Следовательно, лактоамиловарин практически не уступает по лечебному эффекту антибиотику окситетрациюшну, применяемому при эндометритах. Кроме того, схема введения лактоамиловарина менее трудоемка и не требует ограничений при использовании молока.

При сравнении эффективности лактоамиловарина для животных с хроническими и субклиническими эндометритами получили лучшие результаты лечебных мероприятий при хроническом течении заболевания, чем при скрытой форме (табл.6).

Количество животных, стельных после первого осеменения, было на 6,5% больше в группе коров, проявлявших до начала лечения признаки хронического эндометрита.

Обшая стельность после проведения лечебных мероприятий в группе коров с хроническими эндометритами была лишь на 3,4% выше, чем среди животных со скрытыми эндометритами.

Таблица 6

Сравнительная эффективность лактоамиловарина при хронической и субклин нческой формах эндометрита

Показатели Хронические эндометриты Субклинические эндометриты

Кол-во коров, п 30 30

Стельные после 1-

го осеменения, п% 8-29.6 6-23.1

Стельные после 2-х

осеменений, п % 10-37.0 8-30.8

Стельные после 3-х

и белее осемене- 9 - 33.3 12-46.2

ний, п %

Стельные всего,п % 27 - 90±5.5 26 - 8б.6±б,2

Таким образом, препарат лактоамиловарии, являясь экологически безопасным и недорогим, обладает достаточно высокой эффективностью.

3.6. Сравнительная эффективность антимикробных препаратов

при лечении коров с острыми эндометритами Для лечения животных с острыми эндометритами использовали лактоамиловарин н 2%-ную молочную кислоту.

Было отобрано 20 коров с острыми послеродовыми эндометритами и разделено на 2 группы по 10 голов (табл. 7). Первой группе коров внутрима» точно вводили 2%-ную молочную кислоту (по 50 мл в каждый рог), второй группе - лактоамиловарин (по 50 мл в каждый рог). Курс лечения: 7 введений с интервалом 48 часов.

Таблица 7

Эффективность антимикробных препаратов при острых эндометритах

у коров

Показатели Препараты

2 %-ная мол. кислота лактоамиловарин

Кол-во коров, п 10 10

Время от отёла до первой

охоты, дн. 35±2 38±3

Общая оплодотворяе-

мость.п -% 8-80.0 7 - 70.0

в т. ч. от 1-го осеменения,

п-% 4-50.0 3-42.9

Индекс осеменения 1.75 1.86

Сервис-период, дн. 90±6*** 102±5***

*** -р<0.001

Анализ опыта показал, что лактоамиловарин несколько уступает по эффективности молочной кислоте, при использовании которой общая оплодо-творяемость достигла $0%. Стельность от первого осеменения составила 50%, чтона7.1% выше, чем в группе животных, обработанных лактоамило-

варином. Сервис-период в группе животных, обработанных молочной кислотой, короче в среднем на 12 дней.

3.7. Применение биологически активных веществ для снижения эмбриональной смертности при искусственном осеменении и трансплантации эмбрионов

Современные экономические условия диктуют необходимость повышения интенсивности селекционной работы по совершенствованию племенных и продуктивных качеств животных. Это, в свою очередь, требует повышения эффективности метода искусственного осеменения и более широкого использования трансплантации эмбрионов.

Успех сводится к повышению выживаемости эмбрионов. Как известно, причины пренатальных потерь обусловлены нарушением генетических, иммунных, эндокринных взаимоотношения в системе «самка — зародыш», а также патологическими изменениями гениталий, связанными с различного рода заболеваниями.

С целью повышения неспеиифического иммунитета и резистентности организма самок применяют биологически активные вещества различной природы, в том числе еще мало известный в ветеринарной гинекологии препарат - колнцнн Е-2.

Для эксперимента по снижению эмбриональных потерь при искусственном осеменении было отобрано 120 коров, интервал между повторным осеменением у которых составил в среднем 30±4,5 дня, что может свидетельствовать о ранней эмбриональной смертности. До применения колицина Е-2 констатировали отсутствие у этих животных кист, скрытых и клинических эндометритов.

Животных разделили на 4 группы: в первой группе сразу после осеменения внутримышечно вводили колицин Е-2 в дозе 20 мл, животным второй группы инъецировали одновременно колицин Е-2 в дозе 20 мл и сурфагон в

дозе 10 мкг, в третьей группе использовали сурфагон в дозе 10 мкг и тетра-витв дозе 10 мл внутримышечно.

Таблица 3

Сравнительная эффективность биологически активных веществ при ис-

кусственном осеменении

Показатели Группы животных

1-я: колнцин Е-2 2-я: сурфагон, КОЛИЦНН 3-я: сурфагон, тегравит Контроль: тегравит

Обработано коров, п 30 30 30 30

Стельных всего, п % 29- 96.6 29 -96.6 28 -93.3 24 - 80.0

±3,3 ±3.3 ±4.6 ±7.3

в т. ч. после 1-го осе- 15-51.7 17-58.6 13-46.4 9-37.5

менения, п-% ±8.4* ±6,9*** ±9,1 ±8.8

После 2-го осемене- 7- 24.1 9-31.0 10-35.7 10-41.6

ния, п-% ±7,8 ±7.5 ±8.7 ±9.0

После 3-х и более п-% 7-24.1 3-10.3 5-17.8 5-20.8

±7.8 ±4.6 ±7.0 ±7.4

*-р<0-05;*** -р<0.001

Через 10 дней после осеменения были произведены повторные инъекиии в тех же дозах. Контролем служила группа животных, которым после осеменения вводили по 10 мл тетравита (табл. В).

Во всех опытных группах отмечали повышение оплодотворяемости и выживаемости зародышей. Самой эффективной оказалась схема лечения сурфагоном с кодицином, поскольку оплодотворяемость после первого осеменения в этой группе животных была на 21.1% выше, чем в контрольной. Общая стельность в контрольных группах была выше на 13.3 — 16.6%, по сравнению с контролем.

Кроме того, был проведен иммунологический анализ крови коров до применения колицмнаЕ-2 и после. Результаты приведены в таблице 9.

Из таблицы видно, что до введения колицина Е-2 количество общих иммуноглобулинов крови находится в пределах нормы, уровень циркулирующих иммунных комплексов значительно ниже нормы.

Таблица 9

Влияние колицина Е-2 на иммунологические и биохимические показатели

крови

Показатели До введения После введения Физиол.

колицина Е-2 колииина Е-2 норма

Общие иммуно- 214±12,0 218±4,0 95-390,0

глобулины (мг %)

ЦИК (ед.опт.пл.) 7±2,0 34±4,0* 32 - 46,0

Общий копяемент 18±3,0 19±2,0 15-22,0

(СН 50)

Бета-лизины (%) 17±4,0 27±3,0* 25 - 55,0

Лизоцим (%) 3.2±1,0 7.4±2,0 4.6-16,0

БАС (%) 38±10,0* 76±8,0* 80-100,0

Щелочная фосфа- 128±3,0 115±4,0 50 -120,0

таза (нм оль/с л)

АЛТ (мккат/л) 0.7±0.2 0.4±0.1 0.39 - 0.5

ACT (мккат/л) ОЛіО.ОІ 0.2±0.02 0.2-0.4

ФАН(%) 62±7,0 63±4,0 59-96,0

р<0.05

Комплемент и фагоцитарная активность нейтрофилов находятся в пределах физиологической нормы, однако понижено количество лизоцима. В два раза ниже нормы бактерицидная активность сыворотки крови при высоком уровне щелочной фосфатазы. Кроме того, практически в 1,5 раза повышен уровень АЛТ.

На основании этих данных можно заключить, что у коров наблюдается нарушение минерального, белкового обмена, функции печени, снижена резистентность. После инъекции иммуностимулятора колицина Е-2 иммунологические показатели крови приблизились к норме.

Таким образом, колицин Е-2 нормализует деятельность иммунной системы, повышая резистентность организма, что положительно сказывается на воспроизводительной способности самок.

Схему введения колицина Е-2 в сочетании с сурфагоном можно рекомендовать для нормализации поповой функции у коров с многократными безрезультатными осеменениями.

Показатель приживляемости эмбрионов после нехирургической пересадки подвержен еше большим колебаниям, чем оплодотворяемость при искусственном осеменении. В этой связи, на наш взгляд, уделено недостаточно внимания степени подготовленности реципиентов. Важно не только учитывать возраст, живую массу, состояние половых органов н степень развитости желтого тела у реципиента, но предпринять меры для стабилизации гомео-стаза и повышения резистентности организма.

Нами были проведены опыты по усовершенствованию схем обработок коров-доноров и телок-реципиентов с помощью биологически активных веществ.

В первый день гормональной обработки коровам-донорам контрольной группы ввели внутримышечно по 20 мл колицина Е-2. Перед осеменением, в начале охоты, донорам вводили по 10 мкг сурфагона и 20 мл колицина Е-2 внутримышечно. Результаты приведены в таблице 10.

Таблица 10

Влияние колицина Е-2 на количество и качество эмбрионов при трансплантации

Группы

Показатели опытная Контрольная

Кол-во коров-доноров, п 5 5

Реагировало суперовуляцией, п-% 5-100 5-100

Положительных по извлечению, п-% 4-80 3-60

Получено эмбрионов всего, П 21 14

в т.ч. пригодных к пересадке, п-% 12-57.1 6-42.9

Дегенерировал ных, п-% 9-42.8 8-57.1

Неоплодотворенных яйцеклеток, п-% 0 0

Установлено, что введение колицина Е-2 н сурфагона в схему суперову-ляторной обработки доноров позволило повысить количество положительных по извлечению доноров на 20%, а выход эмбрионов, пригодных к пересадке, - на 14,2%.

В следующем эксперименте, с целью повышения приживляемости эмбрионов, был использован колицин Е-2, который вводили в дозе 10 мл внутримышечно телкам-реципиентам в день пересадки. Результаты приведены в таблице 11.

Таблица 11

Влияние колицина Е-2 на приживляемость эмбрионов

Показатели Опыт (колицин Е-2) Контроль

Пересажено эмбрионов, л Из них прижилось, п-% 8 5 - 62.5 10 4-40.0

В экспериментальной группе, где реципиентам вводили колицин Е-2, прижилось 62.5 % зародышей. В контрольной группе прижилось лишь 40 %, что на 22.5% меньше.

Таким образом, колицин Ё-2 можно рекомендовать для практического применения, с целью повышения выживаемости зародышей крупного рогатого скота при искусственном осеменении и трансплантации.

ВЫВОДЫ

1.Установлено влияние лактационной доминанты на воспроизводительные способности высокопродуктивных коров: стельность от первого осеменения ниже на 32.8%, индекс осеменения выше на 1,27 до стабильного снижения среднесуточного удоя.

2. Активный моцион телок увеличивает стельность от первого осеменения на 20% и сокращает число послеотельных осложнений на 33,8%.

3. Установлено, что наибольшее количество животных с гинекологическими заболеваниями приходится на май-июнь

4. Комплексное использование биологически активных веществ (АСД-2 фр., тетравита, коли пин а Е-2) позволяет снизить риск возникновения задержания последа на 33.3%, гинекологических заболеваний - более чем на 20%.

5. Колицин Е-2 нормализует иммунологические и биохимические показатели крови коров с многократными безрезультатными осеменениями. Лучшие результаты по оплодотворяемости (58.6% стельных от первого осеменения) получены при сочетании колицина Е-2 и сурфагона.

6. Колицин Е-2 и лактоамиловарин проявляют активность против патогенной микрофлоры матки.

7. Колицин Е-2 в сочетании С сурфагоном позволяет повысить количество положительных по извлечению доноров на 20%, а выход эмбрионов, пригодных к пересадке, на 14,2%. Инъекция колицина Е-2 реципиентам при пересадке повышает приживляемость эмбрионов на 22,5%

ИРА КТ1РШСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для нормализации половой функции новотельным коровам следует вводить трехкратно с интервалом 7 дней 10% эмульсию АСД 2-ОЙ фракции на тетравнте.

2. Для повышения оплодотворяемости и жизнеспособности эмбрионов следует при искусственном осеменении вводить по 20 мл колицина Е-2 и 10 мкг сурфагона внутримышечно.

Список работ, опубликованных по теме диссертации; I. Губин С.И., Тарадайник Т.Е Нормализация обмена вешеста с помощью биологически активных препаратов. // Материалы международной научно-практической конференции по проблеме: «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения» - ФГОУ РАМЖ, п. Быково Моск. обл., 2004, - Вып. 10. - С. 173-174

2. Губин С.И., Тарадайник Т.Н, Лебедев В.И. Применение биологически активных веществ для снижения эмбриональной смертности у крупного рогатого скота при искусственном осеменении и трансплантации эмбрионов // Материалы международ ной научно-практической конференции по темам:

1) «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения»; 2) «Генетические маркеры в селекции животных» - ФГОУ РАМЖ, п. Быково Моск. обл., 2005. - Вып. 11. -С. 48-50

3. Губин С.И. Сравнительная эффективность антимикробных препаратов при лечении коров с острыми эндометритами. // Материалы на международной научно-практической конференции по темам: 1) «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения»; 2) «Генетические маркеры в селекции животных». - ФГОУ РАМЖ, п. Быково Моск. обл., 2005.-Вып. IL-C.47

4. Тарадайник Т.Е., Гавриков A.M., Лебедев В.И., Губин. С.И. Способы повышения выживаемости эмбрионов крупного рогатого скота при нехирургической пересадке: Методические рекомендации для слушателей РАМЖ -пос. Быково, Моек, обл., 2005. - 27 С.

5.Тарадайник Т.Е, Белоножкин В.П., Лебедев В.И, Губин. С.И Использование биологически активных веществ в рамках гинекологической диспансеризации крупного рогатого скота: Методические рекомендации для слушателей РАМЖ - пос. Быково, Моск. обл., 2005. - 20 С.

6. Губин СИ., Тарадайник Т.Е., Лебедев В.И.Применение биологически активных вешеств при искусственном осеменении и трансплантации эмбрионов // Молочное и мясное скотоводство. - 2006. — № 6. — С.36-38.

Издательство РУЦ ЭБТЖ 142132, Московская обл., Подольский р-н, п. Дубровмш Тел. (8-27) 65-14-24, (8-27) 65-14-07

Сдано в набор 19.09.06. Подписано в печать 20.09.06 Заказ № 25. Уч.-изд.л. 1,2. Тираж 100экз.

Отпечатано в типографии РУЭЦ