Бесплатный автореферат и диссертация по сельскому хозяйству на тему

Древесные нематоды рода Bursaphelenchus-распространение и потенциальная опасность для хвойных лесов России

ВАК РФ 06.01.11, Защита растений

Автореферат диссертации по теме "Древесные нематоды рода Bursaphelenchus-распространение и потенциальная опасность для хвойных лесов России"

На правах рукописи

ОРЛИНСКИЙ Павел Дорианович

ДРЕВЕСНЫЕ НЕМАТОДЫ РОДА ВиКВАРНЕЬЕЫСНиБ - РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ПОТЕНЦИАЛЬНАЯ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ ХВОЙНЫХ ЛЕСОВ РОССИИ

Специальность 06.01.11,- Защита растений

Автореферат диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Балашиха - 2000

Работа выполнена на кафедре защиты растений в Российском Государственном Аграрном Заочном Университете.

Научный руководитель: академик РАСХН, доктор биологических

наук, профессор П.И. Сусидко

Научный консультант: заслуженный деятель науки, доктор биологических наук, профессор Е.Г. Мозолевская

Официальные оппоненты: доктор биологических наук Н.Д.Романенко; кандидат биологических наук, доцент СЯ.Кручина

Ведущая организация: ВНИИ лесоводства и механизации лесного хозяйства (г.Пушкино Московской обл.)

Защита диссертации состоится ¿у^с.^ 2000 г.

в часов на заседании диссертационного совета Д 120.35.09 в

Московской сельскохозяйственной академии имени К.А. Тимирязева по адресу: 127550, Москва, Тимирязевская ул., 49. Ученый совет МСХА.

С диссертацией можно ознакомиться в ЦНБ МСХА.

Автореферат разослан 2000 г.

Ученый секретарь диссертационного совета -

профессор В.В. Исаичев

^ 6?. 9 ^^¿¿^/и^,о

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ-------------------

Актуальность темы. Россия, обладая огромными лесными ресурсами, шяется одним из основных поставщиков хвойных лесоматериалов в )льшинство стран мира. В связи с этим возникают многочисленные проблемы 1рантинного порядка, вызванные боязнью государств-импортеров российской >евесины завезти к себе опасных, но пока отсутствующих на их территории, •едителей леса и лесоматериалов. При этом наиболее часто требования гставляются по стволовым вредителям и по сосновой древесной нематоде.

Нематода Bursaphelenchus xylophilus, которая в течение последнего олетия являлась причиной массовой гибели сосновых деревьев в Японии и IIA /Mamyia 1984, 1986, 1987/ представляет наибольшую опасность для ойных лесов, поэтому большинство стран включило в карантинные списки и у нематоду, и ее основных переносчиков - усачей рода Monochamus /Linit 88,1990/. Для России этот вид входит в перечень I.A. карантинных ганизмов, отсутствующих на территории страны. Учитывая огромную ологическую и экономическую значимость хвойных насаждений России, учение этого карантинного вида является на сегодняшний день одним из мых актуальных вопросов лесного карантина.

На территории России широко распространен вид-двойник сосновой евесной нематоды Bursaphelenchus mucronatus, поражающий все виды эйных пород, составляющих лесной фонд Российской Федерации. Считается, э этот вид не является патогенным для леса, однако выявление роли этого ганизма и его переносчиков в лесопатологических процессах является также маловажной темой научных исследований.

Цель исследования — изучить возможность акклиматизации сосновой ^весной нематоды на территории Российской Федерации, определить пути ее ;пространения в случае заноса на территорию страны и степень опасности, вставляемой этим организмом для российских лесов.

Для этого решались следующие задачи:

- Сбор и анализ древесных проб в различных регионах России и культивация выделенных нематод рода Bursaphelenchus.

- Сбор потенциальных переносчиков древесных нематод - насекомых, и выделение из них нематод.

- Изучение возможности образования внутри- и межвидовых гибридов древесных нематод рода Bursaphelenchus.

- Проверка патогенности древесных нематод Bursaphelenchus xylophilus и В.mucronatus и их гибридов для саженцев сосны обыкновенной.

- Разработка рекомендаций по проведению карантинных обследований и инструкции по предотвращению заноса и распространения нематоды ВигварЪе1епсЫ$ ху\орЫ1т на территории Российской Федерации Научная новизна. Впервые проведено изучение распространения нематод рода Виг$арИе1епски$ на территории Сибири и Европейской части России. Проведенными исследованиями установлено, что нематода В.ху1орЫ1их на территории России отсутствует. Напротив, древесная нематода В.тисгопаЫ5 обнаружена во всех обследованных районах. Впервые в мировой практике проведено скрещиваниее российских популяций В.тисгопаШя с популяциями Вху1орЫ1ш и В.тисгопаШз из других стран мира. Гибриды указанных популяций успешно размножились в лабораторных условиях. Выявлены насекомые-переносчики указанных нематод в РФ и проведены опыты определению их патогенности для хвойных пород на территории страны. В ходе исследований выяснено, что древесные нематоды не представляют опасности для лесных насаждений РФ, однако способны выживать и размножаться в климатических условиях средней полосы России. Тем самым доказана опасность, представляемая древесными нематодами для экономики страны в качестве объекта, вызывающего фитосанитарные санкции стран-импортеров лесолродукции.

Практическая ценность работы. Разработанная на основании проведенных исследований методика по сбору, выделению и определению нематод в лесах России, и правила по ввозу и карантинному досмотру древесной продукции из стран распространения В.ху1орИИю. внедрены в практику работы Госинспекции по карантину растений РФ. Эта методика позволяет успешно осуществлять защиту стратегической безопасности страны.

Апробация работы. Основные материалы работы доложены на двух международных Симпозиумах Российского общества нематологов (1997 год -Москва, 1999 год - Санкт-Петербург), на совещании "Проблемы лесной фитопатологии и микологии" (Москва, 1997), на международном симпозиуме "Устойчивость сосновых лесов к увяданию сосны" (Токио, 1998) , на научной конференции МГУЛ (Москва, МГУЛ, 1999 г). Правила по ввозу и досмотру древесной продукции успешно внедрены в практику работы Государственной инспекции по карантину растений Российской Федерации.

Публикации- По теме диссертации опубликовано 10 работ.

Объем работы. Диссертация изложена на 133 стр. машинописного текста, содержит 39 таблиц, 8 рисунков и графиков и состоит из введения, 7-ми глав, включая рекомендации по проведению карантинных обследований, выводов, списка использованной литературы, включающего 127 источников, в том числе 91 на иностранных языках, и приложений.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Экспериментальная часть работы по изучению распространения древесных нематод рода Вигзарке1епсИиз в России проводилась в различных регионах страны. Были отобраны сосновые, кедровые, пихтовые и еловые пробы с усохших или срубленных деревьев в лесу и на складах лесоматериалов. При сборе проб отмечалось наличие ходов различных стволовых вредителей. Для взятия пробы на исследуемом дереве делались два поперечных надпила на расстоянии 5-10 см. друг от друга, глубиной 1-5 см. Затем с помощью топора откалывался кусок древесины между сделанными надпилами. Пробы откладывались каждая в отдельный бумажный пакет. Районы исследований и количество отобранных проб представлены в табл. 1.

Таблица 1.

Районы отбора проб на древесных нематод___

Регион, где проводился Общее количество В том числе по породам

отбор проб отобранных проб Сосна Кедр Пихта Ель

Зеспублика Коми 20 5 15

Нижегородская область 4 3 1

Ивановская область 10 10

Свердловская область 20 5 4 2 9

воронежская область 40 40

1орты г.Петербурга 20*

Московская область 20 5 15

5 СЕГО 134 68 4 .2 40 j

- в Петербурге пробы отбирались с поддонов и другой упаковочной тары

неопределенного породного состава

Выделение проб проводилось в лабораторных условиях по методу оронок Бермана /Ваегшапп, 1917 при температуре +25°С. Через 12 часов ыделивншеся нематоды рассматривались под микроскопом и определялись.

Эксперимент по изучению скрещиваемости нематод был проведен на азе ВНИИ карантина растений. В опыте «пользовались канадский изолят '.xylophilus BxQ-52A М (BxQ) - Canada, Quebec, Abies, российский изолят '.mucronatus BmKOMY(BmK) - Russia, Komy, Picea и французский изолят .mucronatus BmFr(BmF) - France, Pinuspinaster.

Популяции, используемые в скрещивании, культивировались на грибе otrytis cinerea Pers., выращенном на солодовом агаре.

з

Для производства неоплодотворенных самок были взяты личинки стадиях L3 и L4. Выделенные личинки сажались по одной на кусочки araj (5x5 мм) с покровом Botrytis cinerea Pers., на 2-3 дня при температуре 20-25°» Затем нематоды были выделены индивидуально из каждого кусочка, разделен на самок, самцов и личинок, и использованы в экспериментах.

Скрещивание проводилось в стеклянных пробирках (d=8-llMM) дистиллированной водой. В пробирку помещалась самка одной популяции и самца другой популяции. Повторяемость одного варианта - 10 ра Скрещивание проводилось, как реципрокное. В качестве контроля для каждс из используемых в опыте популяций 5 пробирок были заражены самкой и самцами одной культуры нематод. Для проверки наличия патогенеза, несколь* самок от каждой популяции были по одной посажены в пробирки.

На 10-й день после заражения живые личинки поколения FI были учтен и посажены на кусочки агара 10x10мм с Botrytis cinerea Pers. (по 10 личинок i кусочек) с целью проверки фертильности Fl. Все особи родительско1 поколения, выжившие к моменту проверки пробирок, (только в случае нaлич^ живых самцов и самки), также были высажены на незараженные кусочки агар (10x10мм) с грибом. Для контрольных опытов проводились те же операции, чт и для всех остальных. Через 10 дней кусочки агара были выделены по мето/ Бермана и все нематоды посчитаны.

Эксперименты по изучению патогенности нематод Bursaphelenchi xylophilus и B.mucronatus проводились в период с 3.08.1996. по 22.09.1997 открытом грунте Московской области, и с 1.07.1997 по 09.1998 в открыто грунте Воронежской области. В опытах использовались саженцы сосн обыкновенной (Pinns sylvestris) - в Московской области 2-летние саженцы, Воронежской области - 5-летние.

Для эксперимента в Московской области использовался российски изолят B.mucronatus из Республики Коми (BmKOMY). Для эксперимента открытом грунте Воронежской области использовался один изолят B.xylophih (BxQ-52A-M, Канада, Квебек) и два изолята B.mucronatus (BmFr, Франция BmKOMY, Россия, Коми). Также в опыте использовались межвидовые межпопуляционные гибриды указанных изолятов, полученнь: экспериментальным путем.

За день до опыта нематоды были выделены по методу воронок Берман В день заражения было подсчитано число выделившихся нематод на объе инокулюма, после чего произведена инокуляция нематод на саженцы соснь Для этого в верхней трети каждого саженца наносилась ранка путем сняти маленького участка ксилемы. Затем вокруг ранки к стволику прикреплялс

ирафильм в виде воронки, в которую вводился инокулюм с нематодами (по 500 и 2000 особей на саженец).---------

Повторность опытов составляла 5-6 саженцев на каждый вариант сражения. В качестве контроля в такое же количество саженцев был введен шокулюм без нематод, и 5-6 саженцев оставались нетронутыми для контроля, ¡аражение осуществлялось порядно - на 1 ряд саженцев была инокулирована >дна и та же популяция.

После окончания эксперимента саженцы были вынуты из почвы, и (ыделены в лабораторных условиях. Для выделения брались навески по 20 г. из ¡ередины каждой трети высоты стволика и 10 г. из кроны. Количество (ыделенных нематод было рассчитано на грамм древесины, и подсчитаны »тдельно самцы, самки и личинки.

Сбор насекомых для изучения их роли в переносе сосновых древесных ¡ематод проводился в Вогулкинском лесхозе Свердловской области и в Солнечногорском районе Московской области.

Сбор насекомых в Свердловской области проводился на верхнем складе [есоматериалов, в конце июля 1997 года. Были собраны имаго усача vlonochamus sutor, M.urussovi, M.gaUoprovincialis, Rhagium inquisitor, короедов ps typographic, Hylurgops glabratus и H.palliatus.

Насекомые были расчленены, и поставлены (по одной особи на воронку) га выделение в воду по методу Бермана. Через сутки выделившиеся нематоды ¡ыли рассмотрены под бинокуляром. Особи, похожие на личинок bursaphelenchus, были посчитаны и посажены в чашки Петри, на гриб. Причем >соби, выделенные из разных насекомых, были помещены в 'отдельные чашки. Гашки Петри с нематодами были поставлены в термостат. За неделю нематоды ¡азвились в имаго, после чего были выделены по методу Бермана и определены.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Распространение нематод Bursaphelenchus x\lophilus и B.mncronatus на рритории Российской Федерация. При полевых обследованиях на территории )ссии нематоды Bursaphelenchus xylophilus не выявлено. Однако практически :зде обнаружено присутствие близкородственного вида Bursaphelenchus ucronatus . Результаты выделения древесных проб представлены в таблице 2.

Из данных табл. 2 видно, что B.mucronatus присутствует во всех |бследованных регионах, кроме портовой зоны Санкт-Петербурга, где пробы 1тбирались из упаковочных материалов, обладающих влажностью < 20%. В 1ижегородской и Воронежской областях распространенность B.mucronatus ыше, чем в остальных регионах.

Общие результаты анализа древесных проб, собранных на территории Российской Федерации, на наличие древесных нематод рода ВигзарИекпсИи,

Район отбора проб Процент проб, зараженных В. mucronatus. по породам, % Всего, %

Сосна Кедр Пихта Ель

Коми, 1995 40% 13% 25%

Нижегородская область, 1996 66% 0% 50%

Ивановская область, 1997 30% 30%

Свердловская область, 1997 20% 50% 0% 17з% 20%

Воронежская область, 1997 42% 42%

С-Петербург, 1997 0%

Московская область, 1998 40% 13% 20%

Всего 40% 50% 0% 15% 26%

Исходя из наших данных и опираясь на данные других исследователе полученные на дальнем востоке и в Тюменской области /Eroshenko & Krugli 1996; Kulinich & Kolossova, 1994/, можно утверждать, что сосновая древесн; нематода Bursaphelenchus xylophilus на территории России отсутствует, одна! широко распространен вид-двойник Bursaphelenchus mucronatus. При этс необходимо учесть, что в наших исследованиях большая часть зараженнь проб имела на себе следы питания личинок усачей рода Monochamus. Ни одном из обследованных районов не было отмечено усыхающих деревьев признаками поражения сосновой древесной нематоды.

Скрещивание канадского изолята Bursaphelenchus xylophilus российским (Коми') и французским изолятами Bursaphelenchus mucronatu Партогенеза у самок изучаемых видов не выявлено. При межвидово скрещивании в воде самок B.xylophilus и самцов В.mucronatus бых произведено несколько большее количество личинок Fl, чем в реципрокнь; скрещиваниях (табл. 3.), однако при скрещивании на грибе Botrytis einen численность популяции(Р1-Рп) на 10-й день оказалась выше при скрещивани самцов B.xylophilus и самок B.mucronatus (табл. 5.). При скрещивании личине поколения Fl на Botrytis cinerea без родительских особей (табл. 4 фертильность обнаружена только в комбинации BxQ52xBmKOMY, причем дальнейшем эта популяция была успешно размножена в лаборатории условиях для дальнейших исследований. При проведении скрещивания i грибе с родительскими особями (табл. 5.) в межвидовых комбинация обнаружилась способность к произведению генераций F2-Fn. Потомсте

б

комбинаций Вх052хВтР и ВтРхВх052"не смг»*ю развиваться в лабораторных

,'словиях.

Таблица 3.

Скрещивание взрослых особей нематод в пробирках с водой

Комбинация (fxm) Число Среднее число Среднее Коэффициент

опытов личинок Fl на квадрагическое вариации

10-й день отклонение (%)

n х ь V

BxQ52xBxQ52 5 9 5.92 65.7%

BmKOMYxBmKOMY 5 9.6 14.91 155.3%

BmFxBmF 5 4 5.43 135.7%

BxQ52xBmKOMY 10 3.3 5.59 169.1%

BmKOMYxBxQ52 10 2 2.21 110.6%

BxQ52xBmF 10 2 2 45 122.5%

BmFxBxQ52 10 1 20 200.0%

BmKOMYxBmF 10 1.2 2.1 174.8%

BmFxBmKOMY 10 2 3.53 176.4%

Внутривидовое скрещивание (между французской и российской юпуляциями B.mucronatus) привело к образованию жизнеспособной юпуляции, однако в эксперименте по скрещиванию личинок Fl на В.cinerea в сомбинации BmKOMYxBmF был получен отрицательный результат. В другой сомбинации в этом опыте и в обеих комбинациях при скрещивании на грибе с юдительскими особями было получено потомство, численность которого ;начительно выше межвидовых скрещиваний и весьма близка к контрольным ¡крещиваниям. Эти популяции успешно размножались в лабораторных условиях и были в дальнейшем использованы в других опытах.

Обобщенные результаты экспериментов по меж- и внутривидовой ибридизации нематод B.xylophüus и B.mucronatus представлены в таблице 6. 4з этих результатов видно, что появление генерации Fl не находится в ¡ависимости от комбинации скрещивания. Различия начинают прослеживаться -олько в опытах по проверке фертильности поколения Fl. В контрольном жрещивании при абсолютно равных условиях нематода B.xylophilus (BxQ-52A-Л) произвела меньшее количество фертильного потомства, чем обе популяции 3.mucronatus.

Скрещивание 10 личинок Fl на грибе Botrycis cinerea

Комбинация (fxm) Число Средняя Среднее Коэффициент

опытов численность квадратическое вариации

нематод(Рп) на отклонение (%)

10-й день

n X S V

BxQ52xBxQ52 4 323.75 489.92 151.33%

BmKOMYxBmKOMY 2 480 325.27 67.76%

BmFxBmF 2 560 622.25 111.12%

BxQ52xBmKOMY 2 10 14.14 141.42%

BmKOMYxBxQ52 2 0

BxQ52xBmF 2 0

BmFxBxQ52 2 0

BmKOMYxBmF 2 0

BmFxBmKOMY 2 575 813.17 141.42%

Таблица f

Скрещивание взрослых особей нематод на грибе Botrycis ciner ea

Комбинация (fxm) Число Средняя Среднее Коэффициент

опытов численность квадратическое вариации

нематод(Рп) на отклонение (%)

10-й день

n X S V

BxQ52xBxQ52 2 880 876.81 99.64%

BmKOMYxBmKOMY 2 1250 1767.77 141.42%

BmFxBmF 4 1125 1314.98 116.89% j

BxQ52xBmKOMY 4 1.75 3.5 200.0%

BmKOMYxBxQ52 8 21.875 29.51 134.91%

BxQ52xBmF 7 2.14 5.67 264.93%

BmFxBxQ52 7 22.14 21.19 95.67%

BmKOMYxBmF 6 268.3 285.69 106.47%

BmFxBmKOMY 4 525 147.9 28.17%

__________________Таблица 6.

Результаты меж- и внутривидовой гибридизации нематод B.xylophilus и

B.mucronatus

Комбинация Число скрещиваний % фертильных средняя числ. 1

(fxm) родительских особей скрещиваний Fl фертильных J

Всего Давших Fl (х>10. п т.ч. с популяций на 10-1

родит, особями) й день I

N п % F(%) х 1

|b.\Q х BxQ 7 7 100 83 610 8

BmK х BmK 7 4 57 100 1153 I

BmF х BmF 9 5 55 100 1405 I

BxQ x BmK 14 6 43 33 20 I

BmK x BxQ 18 10 55 43 53 1

BxQ x BmF 17 6 35 33 15

BmF x BxQ 17 9 53 43 43 I

BmK x BmF 16 6 37 83 650 1

BmF x BmK 14 7 50 66 400 К

При межвидовом скрещивании количество опытов с появлением ертильного поколения Fl и численность дальнейших генераций гораздо ниже, ем в контрольных опытах и внутривидовых комбинациях. Однако при фещивании B.xylophilus с обеими популяциями B.mucronatus, количество пытов с появлением фертильного Fl и итоговая численность популяций выше случаях, когда самок B.mucronatus скрещивали с самцами B.xylophilus.

При внутривидовом скрещивании российской и французской популяций .mucronatus показатели жизнеспособности Fl значительно выше, чем при ежвидовых комбинациях, но при этом все же заметно ниже контрольных (рещиваний в обеих популяциях.

Заражение саженцев сосны Pinus sylvestris нематодами Bursaphelenchus 'lophilus (Канада) и Bursaphelenchus mucronatus (Россия - Коми, Франция), а |кже их меж- и внутривидовыми гибридами. В Московской области первая эоверка саженцев, произведенная 20 сентября 1996 года, показала, что гматоды не распространились в корни саженцев, но выжили в стволике, ризнаков усыхания на саженцах не отмечено. Результаты выделения эедставлены в табл. 7.

Результаты выделения нематод из инокулированных саженцев через 48 дней после заражения (заражение - 3.08.1996., выделение - 20.09.1996.).

№ саженцев Варианты заражения

В.тисгопснш Кошу Инокулюм без нематод

Корни Стволик Корни Стволик

1. 0 19 0 0

2. 0 33 0 0

Среднее 0 26 0 0

В результате первого выделения очевидно, что заражение прош/ успешно, хотя численность выживших нематод значительно ниже, че численность инокулированных. (в среднем - 1,7%).

По завершении опыта (22.09.1997.) отмечено усыхание 1 саженц зараженного нематодами В.тисгопаШ Кошу и 2 саженцев, в которые бь: введен инокулюм без нематод. Однако ни из усохших, ни из здоровых саженце особей В.тисгопаШ выделено не было. Можно предположить, что в условия Московской области популяция из Республики Коми не только не вредоносн но и не способна выжить в саженцах сосны.

В результате инокуляции нематод на саженцы сосны обыкновенной условиях Воронежской области (средняя температура июля +20°С) усыханк саженцев не произошло. Плотность всех популяций нематод значительн сократилась. При выделении не выявлено ни одной особи гибрид» межд В.тисгопаШз КОМУ и В.ху1орЫ1из 052-А-М. Особи межпопуляционног гибрида В.тисгопаШ КОМУ х В.тисгопаШ Рг были обнаружены только одном из 5 зараженных саженцев в предельно низкой плотности. Особи чисты изолятов нематод выделились в случае инокуляции В.ху1орМ1ш (352-А-М из ] го, в случае инокуляции В.тисгопаЫз КОМУ из 3-х, и в случае инокуляци В.тисгопаЫз Рг из 4-х саженцев сосны. Симптомы усыхания появились лиш на веточках 2-х саженцев сосны, зараженных французским изолято В.тисгопаШ. На этих растениях в районе поселения нематод отмечено легко пожелтение хвои, меньшие засмоленность и относительный вес древесинь Результаты выделения нематод из саженцев сосны представлены в таблице 8.

Анализируя данные по выделению нематод из инокулированны саженцев сосны можно отметить, что канадская популяция В.ху1орЫ1т 0-52; выделилась только из нижней трети саженцев (распространилась ниже мест заражения). Молодое поколение у этой популяции отсутствует, что говори о малой вероятности ее выживания и развития. Гибрид между российской

ю

Результаты выделения нематод Bursaphelenchus xylophilus и B.mucronatus из искусственно зараженных саженцев Pirtus sylvestris в условиях открытого грунта черноземной зоны России (Воронежская область)

Заражение - 1 июля 1997 года; выделение - 20 октября 1998 года

Популяция Количес! Наличие Часть Количество выделившихся

нематод во симптомо стволика особей Bursaphelenchus

саженцев саженца на 1 грамм древесины

с живым1 усыхания Личижн Самок Самцов Всего

нематода У

ми саженцев

^.xylophilus 1 Нет Верхняя 1/3 0 0 0 0

J-52A Середина 0 0 0 0

<анада Нижняя 1/3 0 0.1 0,05 0,15

Ветки 0 0 0 0

В среднем 0 0,03 0,01 0.04

'ибрид 0 Нет Верхняя 1/3 0 0 0 0

'.V.Q-52A х Середина 0 0 0 0

iwKOMY Нижняя 1/3 0 0 0 0

Ветки 0 0 0 0

В среднем 0 0 0 0

'.mucronalus 3 Нет Верхняя 1/3 0 0 0 0

:omy Середина 0 0.1 0.05 0,15

'оссия Нижняя 1/3 0 0.05 0.05 0.1

Ветки 0 0.4 0.2 0,6

В среднем 0 0.1 0,06 0,16

ибрид 1 Нет Верхняя 1/3 0 0 0 0

'.«.КОМУ x Середина 0,05 0.05 0.05 0,15

./«.Fi- | Нижняя 1/3 0 0 0 0

i Ветки 0 0 0 0

В среднем 0,01 0.01 0,01 0.04

mucronatus 4 Есть Верхняя 1/3 0,7 0.5 0.4 1,6

г Середина 0,255 0,24 0.24 0,65

>ранция Нижняя 1/3 0 0 0 0

Ветки 0 0 0 0

В среднем 0.27 0.2 0.17 (>,64

и

французской популяциями Вигзар11е1епсИш тисгопМш находился только в середине саженца (учитывая сильный прирост сосны в верхней трети, на момент выделения середина саженца является местом инокуляции), не распространившись в другие его части. При этом популяция представлена в равной степени личинками, взрослыми самцами и самками, что указывает на возможность дальнейшего ее развития. Среднее число выделившихся особей российской популяции Виг$арке1епсНт тисгопсИт в 4 раза выше, чем у двух предыдущих (0,16 и 0,04 особей на грамм растительной ткани соответственно). При этом нематоды находились около места инокуляции, в нижней трети саженцев, и в ветках. Однако молодое поколение в популяции отсутствовало, так что возможность дальнейшего развития популяции весьма сомнительна. В лучшем состоянии находилась французская популяция ВигБаркеЫпскиз тисгопМш, обнаруженная в 4 из 5 зараженных саженцев. У этих саженцев отмечалось легкое пожелтение хвои и меньшая, по сравнению с другими, засмоленность стволика. Нематоды выделились из места инокуляции и выше него. Несмотря на низкую среднюю численность нематод в среднем по 5 саженцам (0,64/г.раст.тк.), максимальная плотность была 2 особи на грамм растительной ткани. При этом доля молодого поколения колебалась от 39 до 52%, что говорит о возможности дальнейшего развития и размножения популяции.

Насекомые-переносчики нематод рода Виг<;арке1епскт на территории России. Из насекомых, собранных на нижнем складе Вогулкинского лесничества (Свердловская область) нематод не выделилось. В Московской области из собранных насекомых была выделена нематода ВипарИекпсИш тисгопшш. Результаты выделения нематод из насекомых в Московской области представлены в таблице 9.

Как видно из таблицы, подтверждено предположение об участии насекомых в распространении нематод рода ВипарИекпсИю на территории России. Причем перенос нематод осуществляется преимущественно усачами рода МопосИатиэ, как и в других странах мира. Перенос нематод В.тисгопаШ осуществляется в трахейной системе имаго. По результатам выделения видно, что основным переносчиком нематоды ВигзарИекпсИю тисгопсЛт в России является усач Мопоскатт galloprovincialis. В проведенных обследованиях изучаемая нематода была выделена из 16% особей Мопоскатт вШог и из 25% особей М^аИоргоутааИз. Среднее число личинок на имаго насекомых в М^аЦоргоутааПх (68 особей) также выше, чем в М.бШог (44 особи). Учитывая, широкую распространенность М^а11ор)^тЫаИз в России, в случае проникновения на территорию страны Виг$арке1епски$ ху!орЫ1ш существуют все условия для ее распространения с этим насекомым.

Выделение нематод Виг&арке1епсЬт тисгопаШз из жуков стволовых вредителей в Московской области в июле 1998 года.

Вид насекомого Количество собранных особей Особей с личинками нематоды B.mucronalus Максималь ное число личинок на насекомое Минимальное число личинок на насекомое Среднее число личинок на насекомое

Monochamus sutor 18 3 75 21 44

Monochamus galloprovincialis 20 5 ПО 15 68

Rhagium inquisitor и 0

Ips typographus 46 0

Hylurgops glabratus 12 0

Hylurgops palliatus 19 0

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРОВЕДЕНИЮ КАРАНТИННЫХ ОБСЛЕДОВАНИЙ

Обследование с помощью ловчих деревьев. Обследование проводится 1утем выкладки в насаждениях срубленных ловчих деревьев. Деревья !ыкладываются в марте - за месяц до возможного начала лета переносчиков. Необходимо учитывать, что основные переносчики нематод рода bursaphelenchus - усачи рода Monochamus - предпочитают изреженные, хорошо фогреваемые насаждения. Анализ деревьев лучше всего проводить в июле-1вгусте, после откладки усачами яиц. Целесообразно оценивать и фошлогодние деревья, заселенные личинками Monochamus. Пробы отбираются 1 местах, где имеются живые личинки усачей, либо заметны следы их питания, 'азмер пробы 10x5x5 см. Для обнаружения нематод рода Bursaphelenchus юстаточно отобрать 10-15 проб с одного места обследования. В случае шхождения нематоды Bursaphelenchus xylophilus, и подтверждения шагностики этого вида экспертизой гельминтологов, на район ее обнаружения шкладывается карантин. Извещаются карантинные инспекции регионов, в ;оторые произведена отправка лесоматериалов в текущем году; отправка [есоматериалов из района допускается только после окорки, а также сушки по методу Kiln drying, или фумигации метилбромидом. Карантинные инспекции

13

должны отследить все поступившие из района обнаружения нематоды лесоматериалы, отобрать из них древесные пробы, и, в случае обнаружения Bursaphelenchus xylophilus, подвергнуть эти лесоматериалы уничтожению, либо Kiln drying. Необходимо проверить на сосновую древесную нематоду и находящиеся рядом хвойные насаждения и склады лесоматериалов.

Обследование усыхающих насаждений. В случае обнаружения насаждения, в котором имеются усыхающие деревья с признаками поражения сосновой древесной нематодой, равномерно по площади отобрать 10 модельных деревьев с наиболее типичными признаками. В первую очередь необходимо оценить наличие признаков поражения их вредителями или возбудителями болезней лесных пород. После оценки всех возможных факторов, приведших к усыханию, необходимо отобрать пробы с поваленных деревьев. В случае обнаружения в пробах нематод рода Bursaphelenchus, вывод о том, что они являются причиной усыхания насаждения можно делать лишь в при отсутствии других неблагоприятных факторов, могущих вызвать такие симптомы. Если в ходе определения возникло подозрение на наличие в насаждении нематоды Bursaphelenchus xylophilus, необходимо сделать временные препараты и отправить их в отдел лесного карантина ВНИИ Карантина Растений. При подтверждении идентификации проводятся карантинные мероприятия, указанные выше. Если в древесине присутствует нематода Bursaphelenchus mucronatus, и именно она является причиной усыхания (т.е. присутствует во всех изученных деревьях при отсутствии других причин для усыхания), необходимо также вызвать экспертов ВНИИКР.

ВЫВОДЫ

Из результатов проведенной экспериментальной и теоретической научно-исследовательской работы можно сделать следующие выводы:

1. Нематода Bursaphelenchus xylophilus отсутствует на территории России, однако распространена в близлежащих странах (Китай), выживает в природных условиях России, может образовывать гибриды с российскими популяциями Bursaphelenchus mucronatus, и следовательно является опасным карантинным объектом для Российской Федерации.

2. Нематода Bursaphelenchus mucronatus напротив, широко распространена в хвойных насаждениях Российской Федерации

3. Российские популяции Bursaphelenchus mucronatus не представляют опасности для хвойных пород на территории России.

4. В Европейской части России переносчиками Bursaphelenchus mucronatus являются усачи Monochamus sutor и Monochamus galloprovincialis.

5. Сосновая древесная нематода может быть завезена в Россию из Северной Америки, Японии, Китая, Кореи и Тайваня с лесоматериалами, не

14

рошедшими окорку итермическую обработку (Kiln drying)- а также с паковочными материалами и древесными отходами. При этом она способна ыжить в Российских условиях и распространиться в лесах с помощью усачей

эда Monochamus.

6. Для большей части российских лесов Bursaphelenchus xylophilus не редставляет биологической опасности, однако может причинить серьезный эед в климатических условиях лесов Приморья и предгорных лесов Северного авказа /Kulinich & Kolossova, 1994/. При этом леса Приморья являются зиболее подверженными риску заноса сосновой древесной нематоды, эскольку там осуществляется активный торговый обмен с Северной мерикой, Японией и Китаем.

7. Несмотря на отсутствие опасности для хвойных насаждений большей зсти России, B.xylophilus может нанести серьезный ущерб Российской сономике. Лесопродукция является одним из основных объектов экспорта из эссии. В год за рубеж отправляется около 10 млн. м3 хвойной лесопродукции. ри этом средняя цена ее продажи зарубежным поставщикам составляет около )$, что составляет около 1680 рублей на начало мая 1999 года. Все страны-лпортеры российской лесопродукции выдвигают самые строгие карантинные >ебования к сосновой древесной нематоде, поэтому в случае ее обнаружения в эссии последствия для лесоторговли могут быть весьма печальными, ведение эмбарго маловероятно, т.к. древесная промышленность Европы :ржится в основном на российском лесе, однако вполне вероятно 1ачительное снижение цен на российскую лесопродукцию и введение ¡язательной обработки ее по методу Kiln drying. Учитывая, что к такой >работке на территории России большинство поставщиков леса не готовы, церб может оказаться весьма значительным.

8. Bursaphelenchus xylophilus может образовывать жизнеспособные [бриды с российской популяцией B.mucronatus в лабораторных условиях, щако в природе эти гибриды не выживают.

Из вышеизложенного очевидно, что сосновая древесная нематода trsaphelenchus xylophilus является опасным карантинным видом для )ссийской Федерации, представляющим опасность как части хвойных юаждений, так и экономике страны. Кроме того необходимо учесть, что шичие труднодоступных лесных массивов в Сибири значительно усложнит >нтроль за распространением этого организма. Поэтому необходима разумная [стема карантинных мероприятий, направленных на предотвращение заноса сновой древесной нематоды в Россию.

Список опубликованных работ по теме диссертации:

1. Кулинич О.А., Орлинский П.Д., Колосова Н.В. Потенциальные переносчик! сосновой древесной нематоды // "Защита и карантин растений", №6, 1996 -с.35-36.

2. Kulinich О.А., Orlinski P.D., Kolosova N.V. Cross hybridization of B.xylophilut isolates from Canada with B.mucronatus isolates from Russia // Abstracts о "Second English language international Symposium of the Russian Society o; Nematologists", Moscow, 1997 - p.14-15.

3. Kulinich O.A., Orlinski P.D. Distribution of conifer beetles (Scolytidae, Curculionidae, Cerambicydae) and wood nematodes (Bursaphelenchus spp.) ir European and Asian Russia // Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 28, 1998 - p. 39-52.

4. Kulinich O.A., Orlinski P.D. Results of cross-hybridization of Bursaphelenchus mucronatus isolates from Russia and France and B.xylophilus isolates from Canada // Abstracts of "Symposium on Sustainability of Pine Forests in Relation to Pine Wilt and Decline", Tokyo, 1998 - p.24.

5. Kulinich O.A. Tjurin A.A., Orlinski P.D. Surveys for the pinewood nematode and a review of the related research in Russia // Proceedings of international Symposium Tokyo, 27-28 Oct. 1998 - p.49-51.

6. Орлинский П.Д. "Требования стран-импортеров российской древесины по

вредителям леса" // "Защита и Карантин растений", №7, 1999 - с.24-27.

*

7. Kulinich О.А., Orlinski P.D. Distribution and pathogenicity of pinewood nematode Bursaphelenchus spp. in Russia // Тезисы 3-го международного симпозиума по круглым червям. "Труды Зоологического Института", т. 280., С-Петербург, 1999 - с. 96.

8. Орлинский П.Д., Кулинич О.А. Методические указания по выявлению и диагностике сосновой древесной нематоды Bursaphelenchus xylophilus и инструкции по предотвращению ее заноса и распространения на территории Российской Федерации // Росгоскарантин. 1999 - 25 с.

9. Орлинский П.Д. Древесные нематоды рода Bursaphelenchus - потенциальная опасность для российских лесов // «Защита и карантин растений» № 1, 2000 -с. 32-33;

10. Орлинский П.Д. Древесные нематоды Bursaphelenchus xylophilus и B.mucronatus: потенциальная опасность для хвойных насаждений России // «Экология, мониторинг и рациональное природопользование» - сб. научных трудов, вып.302 (I) МГУ леса, 2000 - с. 158-161.

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Орлинский, Павел Дорианович

ВВЕДЕНИЕ

I. ДРЕВЕСНЫЕ НЕМАТОДЫ РОДА BURSAPHELENCHUS КАК ОБЪЕКТ ИССЛЕДОВАНИЯ.

1.1. Карантинные требования стран-импортеров российской лесопродукции к древесным нематодам и вредителям хвойных пород.

1.2. История изучения древесных нематод.

1.3. Хозяева и симптомы заболевания.

1.4. Биологические особенности и экология нематод Bursaphelenchus xylophilus и В. mucronatus.

1.5. Меры борьбы, применяемые против сосновой древесной нематоды в странах ее распространения.

II. МЕТОДИКА И ОБЪЕМ ВЫПОЛНЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Метод сбора и анализа древесных проб и культивации выделенных нематод рода Bursaphelenchus.

2.2. Метод сбора потенциальных переносчиков древесных нематод - насекомых, и выделения из них нематод.

III. РАСПРОСТРАНЕНИЕ ДРЕВЕСНЫХ НЕМАТОД.

3.1. Распространение древесных нематод в мире.

3.2. Климат стран происхождения и распространения древесных нематод.

3.3. Климат районов проведения экспериментальных работ.

3.4. Результаты изучения распространения древесных нематод в России.

IV. ПЕРЕНОСЧИКИ ДРЕВЕСНЫХ НЕМАТОД.

4.1. Насекомые, отмеченные в качестве переносчиков нематод

Bursaphelenchus xylophilus и В. mucronatus.

4.2. Потенциальные переносчики нематод B.xylophilus и В. mucronatus в России.

4.3. Результаты изучения роли насекомых в распространении древесных нематод.

V. ВОЗМОЖНОСТЬ ОБРАЗОВАНИЯ ГИБРИДОВ ДРЕВЕСНЫХ НЕМАТОД.

5.1. Опыты зарубежных исследователей по проверке скрещиваемости нематод Bursaphelenchus xylophilus и Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda: Aphelenchoididae).

5.2. Метод проведения эксперимента по скрещиванию древесных нематод.

5.3. Результаты эксперимента по гибридизации древесных нематод.

VI. РЕЗУЛЬТАТЫ ОЦЕНКИ ПАТОГЕННОСТИ ДРЕВЕСНЫХ НЕМАТОД ДЛЯ ДЕРЕВЬЕВ ХВОЙНЫХ ПОРОД В РОССИИ.

6.1. Общие сведения о патогенности древесных нематод.

6.2. Метод проведения экспериментов по патогенности древесных нематод для саженцев сосны.

6.3. Результаты опытов по проверке патогенности древесных нематод.

VII. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРОВЕДЕНИЮ КАРАНТИННЫХ ОБСЛЕДОВАНИЙ И ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРЕДОТВРАЩЕНИЮ ЗАНОСА И РАСПРОСТРАНЕНИЯ НЕМАТОДЫ BURSAPHELENCHUS XYLOPHILUS НА ТЕРРИТОРИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ.

7.1. Рекомендации по проведению карантинных обследований.

7.2. Инструкция по предотвращению заноса и распространения сосновой древесной нематоды на территорию Российской Федерации.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Древесные нематоды рода Bursaphelenchus-распространение и потенциальная опасность для хвойных лесов России"

Актуальность темы. Россия, обладая огромными лесными ресурсами, является одним из основных поставщиков хвойных лесоматериалов в большинство стран мира. В связи с этим возникают многочисленные проблемы карантинного порядка, вызванные боязнью государств-импортеров ^ российской древесины завезти к себе опасных, но пока отсутствующих на их территории, вредителей леса и лесоматериалов. При этом наиболее часто требования выставляются по стволовым вредителям и по сосновой древесной нематоде.

Нематода Bursaphelenchus xylophilus, которая в течение последнего столетия являлась причиной массовой гибели сосновых деревьев в Японии и США /Mamyia 1984, 1986, 1987/ представляет наибольшую опасность для хвойных лесов, поэтому большинство стран включило в карантинные списки и эту нематоду, и ее основных переносчиков - усачей рода Monochamus /Linit 1988,1990/. Для России этот вид входит в перечень 1.А. карантинных организмов, отсутствующих на территории страны. Учитывая огромную экологическую и экономическую значимость хвойных насаждений России, изучение этого карантинного вида является на сегодняшний день одним из самых актуальных вопросов лесного карантина.

На территории России широко распространен вид-двойник сосновой древесной нематоды Bursaphelenchus mucronatus, поражающий все виды хвойных пород, составляющих лесной фонд Российской Федерации. Считается, что этот вид не является патогенным для леса, однако выявление роли этого организма и его переносчиков в лесопатологических процессах является также немаловажной темой научных исследований.

Цель исследования - изучить возможность акклиматизации сосновой древесной нематоды на территории Российской Федерации, определить пути ее распространения в случае заноса на территорию страны и степень опасности, представляемой этим организмом для российских лесов.

Для этого решались следующие задачи:

- Сбор и анализ древесных проб в различных регионах России и культивация выделенных нематод рода Bursaphelenchus.

- Сбор потенциальных переносчиков древесных нематод -насекомых, и выделение из них нематод.

- Изучение возможности образования внутри- и межвидовых гибридов древесных нематод рода Bursaphelenchus.

- Проверка патогенности древесных нематод Bursaphelenchus xylophilus и В.mucronatus и их гибридов для саженцев сосны обыкновенной.

- Разработка рекомендаций по проведению карантинных обследований и инструкции по предотвращению заноса и распространения нематоды Bursaphelenchus xylophilus на территории Российской Федерации

Научная новизна исследований заключается в том, что впервые проведено изучение распространения нематод рода Bursaphelenchus на территории Сибири и Европейской части России. Проведенными исследованиями установлено, что нематода B.xylophilus на территории России отсутствует. Напротив, древесная нематода В. mucronatus обнаружена во всех обследованных районах. Впервые в мировой практике проведены эксперименты по скрещиванию российских популяций нематоды В.mucronatus с популяциями В.xylophilus и В.mucronatus из других стран мира. Гибриды указанных популяций успешно размножились в лабораторных условиях. Впервые выявлены насекомые-переносчики указанных нематод в РФ и проведены опыты определению их патогенности для хвойных пород на территории страны. В ходе исследований выяснено, что древесные нематоды не представляют опасности для лесных насаждений РФ, однако способны выживать и размножаться в климатических условиях средней полосы России. Тем самым доказана опасность, представляемая древесными нематодами для экономики страны в качестве объекта, вызывающего фитосанитарные санкции стран-импортеров лесопродукции.

Практическая значимость работы заключается в том, что разработанная на основании проведенных исследований методика по сбору, выделению и определению нематод в лесах России, и правила по ввозу и карантинному досмотру древесной продукции из стран распространения B.xylophilus. внедрены в практику работы Государственной инспекции по карантину растений РФ. Эта методика позволяет успешно осуществлять защиту стратегической безопасности страны.

Апробация работы. Основные материалы работы доложены на двух международных Симпозиумах Российского общества нематологов (1997 год - Москва, 1999 год - Санкт-Петербург), на совещании "Проблемы лесной фитопатологии и микологии" (Москва, 1997), на международном симпозиуме "Устойчивость сосновых лесов к увяданию сосны" (Токио, 1998), на научной конференции МГУЛ (Москва, МГУЛ, 1999 г). Правила по ввозу и досмотру древесной продукции успешно внедрены в практику работы Государственной инспекции по карантину растений Российской Федерации.

Публикации. По данной теме опубликованы: 3 научные статьи в журнале "Защита и карантин растений", 1 статья в Бюллетене ЕОЗР, 5 докладов на международных научных конференциях, "Методические указания".

Автор считает своим долгом выразить глубокую благодарность преждевременно ушедшему научному руководителю работы - академику РАСХН, доктору биологических наук, профессору 1П.И. Сусидкс!; научному консультанту - заведующей кафедры защиты леса и экологии МГУЛ, доктору биологических наук, профессору Е.Г.Мозолевской, а также всем сотрудникам МГУЛ, РГАЗУ, Росгоскарантина и ТСХА, оказавшим неоценимую помощь при создании данной диссертации.

I. ДРЕВЕСНЫЕ НЕМАТОДЫ РОДА BURSAPHELENCHUS КАК ОБЪЕКТ

Заключение Диссертация по теме "Защита растений", Орлинский, Павел Дорианович

ВЫВОДЫ

Из результатов проведенной экспериментальной и теоретической научно-исследовательской работы получены результаты, из которых можно сделать следующие выводы:

1. Нематода Bursaphelenchus xylophilus широко распространена на территории Северной Америки, Японии, Китая, Кореи и Тайваня. Этот вид вызывает в районах своего распространения усыхание деревьев хвойных пород. Bursaphelenchus mucronatus распространена как в Северной Америке, так и на всей территории Евразии, однако не представляет серьезной опасности для лесонасаждений. Жизненный цикл обеих нематод тесно связан с насекомыми, преимущественно - усачами рода Monochamus, переносящими их с одного дерева на другое.

2. На территории России нематода Bursaphelenchus xylophilus отсутствует, однако широко распространена нематода Bursaphelenchus mucronatus.

3.В Европейской части России переносчиками Bursaphelenchus mucronatus являются усачи Monochamus sutor и Monochamus galloprovincialis.

4. Bursaphelenchus xylophilus может образовывать жизнеспособные гибриды с российской популяцией B.mucronatus в лабораторных условиях, однако в природе эти гибриды не выживают. Также возможно образование жизнеспособных гибридов между различными популяциями Bursaphelenchus mucronatus, которые могут выживать в природе.

5. Bursaphelenchus xylophilus не представляет серьезной опасности для деревьев хвойных пород на европейской части Российской Федерации, однако способна выживать и размножаться в климатических условиях России. Российские популяции Bursaphelenchus mucronatus также не представляют опасности для хвойных пород на территории России. Напротив, французская популяция при инокуляции на саженцы хвойных, вызывает у них симптомы усыхания.

6. Сосновая древесная нематода может быть завезена в Россию из с лесоматериалами, не прошедшими окорку и термическую обработку (Kiln drying), а также с упаковочными материалами и древесными отходами. При этом она способна выжить в Российских условиях и распространиться в лесах с помощью усачей рода Monochamus.

7. Несмотря на отсутствие опасности для хвойных насаждений большей части России, B.xylophilus может нанести серьезный ущерб Российской экономике. Лесопродукция является одним из основных объектов экспорта л из России. В год за рубеж отправляется около 10 млн. м хвойной лесопро-дукции. При этом средняя цена ее продажи зарубежным поставщикам составляет около 70$, что составляет около 1680 рублей на начало мая 1999 года. Все страны-импортеры российской лесопродукции выдвигают самые строгие карантинные требования к сосновой древесной нематоде, поэтому в случае ее обнаружения в России последствия для лесоторговли могут быть весьма печальными. Введение эмбарго маловероятно, т.к. древесная промышленность Европы держится в основном на российском лесе, однако вполне вероятно значительное снижение цен на российскую лесопродукцию и введение обязательной обработки ее по методу Kiln drying. Учитывая, что к такой обработке на территории России большинство поставщиков леса не готовы, ущерб может оказаться весьма значительным.

Из вышеизложенного очевидно, что сосновая древесная нематода Bursaphelenchus xylophilus является опасным карантинным видом для Российской Федерации, представляющим опасность как части хвойных насаждений, так и экономике страны. Кроме того необходимо учесть, что наличие труднодоступных лесных массивов в Сибири значительно усложнит контроль за распространением этого организма. Поэтому необходима разумная система карантинных мероприятий, направленных на предотвращение заноса сосновой древесной нематоды в Россию.

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Орлинский, Павел Дорианович, Балашиха

1. Агроклиматический справочник по Воронежской области. // Л., Гидрометеоиздат, 1958 166 с.

2. Агроклиматический справочник по Коми АССР. // Сыктывкар, 1961 170 с.

3. Агроклиматический справочник по Московской области. // 2 изд., М, «Московский рабочий», 1967 135 с.

4. Бей-Биенко, Г.Я. Жесткокрылые и веерокрылые. // Определитель насекомых европейской части СССР в пяти томах, Т.П. -М., Л., Наука, 1965 668 с.

5. Витвицкий, Г.И. Климаты Северной Америки. // Географгиз, 1953 287 с.

6. Воронцов, А.И. Лесная энтомология. // М., Высшая школа, 1982. 368 с.

7. Гусаковский, В.В. Рогохвосты и пилильщики. // Фауна СССР. Насекомые перепончатокрылые, т. II., вып.1., 1ч. -М.,Л., АН СССР, 1935 539 с.

8. Гусаковский, В.В. Пилильщики (Tenthredinoidea) // 2 ч. Фауна СССР, Насекомые перепончатокрылые, Т.П., вып.2., 2ч. -М.,Л., АН СССР, 1947 -451 с.

9. Гусев, В.И., Римский-Корсаков, М.Н., Яцентковский, А.В., Шиперович, В.Я., Полубояринов, И.И. Лесная энтомология // 4-е изд., перераб.- М.,Л., Гослесбумиздат, 1961 488 с.

10. Ерошенко, А.С., Круглик, И.А. Патогенные нематоды сосны корейской на юге Дальнего Востока России. // Кедрово-широколиств. леса Дал. Вост., Матер. Междунар. конф. Хабаровск ,1996 - с. 70-71.

11. Кирьянова, Е.С., Кралль, Э.Л. Паразитические нематоды растений и меры борьбы с ними // Том 1, Л., «Наука», 1969 - 447 с.

12. Кожанчиков, И.В. Волнянки (Orgydae). // Фауна СССР, Насекомые чешуекрылые, т. XII М, Л, АН СССР, 1950 - 582 с.

13. Коренченко, Е.А. Новые виды нематод семейства Aphelenchoididae -паразитов стволовых вредителей лиственницы Даурской. // Зоологический журнал, т.59. Вып.12, 1980 с.1768-1780.

14. Кулинич, О.А. Методические указания по выявлению, определению паразитических нематод лесных древесных пород и методы защиты от них. // -М, АН СССР, 1990 70 с.

15. Кулинич, О.А. Сосновая древесная нематода Bursaphelenchus xylophilus. // Справочник по карантинным вредителям для территории Российской Федерации. Нижний Новгород, "Арника", 1995 - с. 103-106

16. Кулинич, О.А., Орлинский, П.Д., Колосова, Н.В. Потенциальные переносчики сосновой древесной нематоды. // Защита и Карантин Растений, 6, -М, 1996-с. 35-36

17. Лебедев, А.И., Борушко, И.С., Егорова, А.Ю. Климатический справочник Западной Европы.// -Л, Гидрометеоиздат, 1979 678 с.

18. Лер, П.А. Жесткокрылые, или жуки. // Определитель насекомых дальнего востока России, т III. Владивосток, Дальнаука, 1996 - 556 с.

19. Логвиновский, В.Д. Точильщики сем. Anobiidae. // Фауна СССР. Насекомые жесткокрылые, т. XIV. вып.2. - Л, Наука, 1985 - 175 с.

20. Мамаев, Б.М. Стволовые вредители лесов Сибири и Дальнего Востока. // -М, Агропромиздат, 1985 208 с.

21. Маслов, А.Д., Ведерников, Н.М., Андреева, Г.И., Зубов, П.А., Крангауз, Р.А., Ляшенко, Л.И., Павлинов, Н.П. Защита леса от вредителей и болезней // Справочник, 2-е изд., перераб. и дополн. М, Агропромиздат, 1988 - 414 с.

22. Медведев, Г.С. Чешуекрылые // Определитель насекомых европейской части СССР в пяти томах, т. IY., 1 ч. Л, Наука, 1978 - 711 с.

23. Медведев, Г.С. Чешуекрылые // Определитель насекомых европейской части СССР в пяти томах, т. IY., 3 ч., JI, Наука, 1986 - 506 с.

24. Медведев, С.И. Пластинчатоусые -ceM.Scarabeidae. Подсем. Melolonthinae. // Фауна СССР. Насекомые жесткокрылые, т. X. вып.1., 1ч. -М, JI, АН СССР, 1951-512 с.

25. Мозолевская, Е.Г., Белова, Н.К., Лебедева, Г.С. Практикум по лесной энтомологии. // Учебное издание. 3-е изд., перераб. и дополн.-М, Экология, 1991 -256 с.

26. Мордкович, Я.Б., Сметник, А.И. Обеззараживание леса и лесоматериалов. // Сборник руководящих документов по лесному карантину. -М, «Агрорус», 1998-с. 27-28.

27. Парамонов, А.А. Происхождение нематод. Эколого-морфологическая характеристика фитонематод. Общие принципы таксономии // Основы фитогельминтологии, т.1, Издательство Академии Наук СССР, -М, 1962 -480 с.

28. Плавильщиков, Н.Н. Жуки-Дровосеки // Фауна СССР. Насекомые жесткокрылые, т. XXII, 2 ч. -М, Л, АН СССР, 1940 784 с.

29. Плавильщиков, Н.Н. Жуки-Дровосеки. Подсемейство Lamiinae // Фауна СССР. Насекомые жесткокрылые, т. XXIII., вып.1., 3 ч. М, Л, АН СССР, 1958-592 с.

30. Спесивцев, П.Н. Определитель короедов Европейской части СССР (за исключением Крыма и Кавказа). // Изд. 3, Под ред. М.Н. Римского-Корсакова, Госсельхозиздат. М, 1931 - 103 с.

31. Старк, В.Н. Короеды // Фауна СССР. Насекомые жесткокрылые, т. XXXI. -М, Л, АН СССР, 1952 462 с.

32. Холодковский, Н.А. Хермесы, вредящие хвойным деревьям. // Сельскохозяйственная монография Н.А.Холодковского. 2-е изд., перераб.и дополн. Петроград, Главное управление землеустройства и земледелия, Департамент земледелия. 1915 - 89 с.

33. Черепанов, А.И. Усачи северной Азии. Prioninae, Disteniinae, Lepturinae, Asemiinae. // т. 1. 1979 - 472 с.

34. Черепанов А.И. Усачи северной Азии. Lamiinae:Saperdini, Tetraopini. // т.4., 1985-256 с.

35. Штакельберг А.А., Павловский Е.Н. Вредители леса // Справочник, тт. 1,2 -М, Л, АН СССР, 1955 1097 с.

36. Ambrogioni, L., Cerchiarini, G., Irdani, T. & Tossani, N. Indagine preliminare sulla diffusion di Bursaphelenchus spp. (Nematoda) in pinete Italianem. Redia, LXXVII, n.2, 1994, p. 273-278.

37. Baermann, G. Eine einfache Methode zur Auffindung von Ankylostomum (Nematoda) Larven in Erdproben. Geneesk. Tijdschr. Ned. Indie, 57, 1917, p. 131-137.

38. Blangez, G. Summary of Plant Quarantine Pest and Disease Situations in Canada. Agriculture Canada Publications, 1989, 106 p.

39. Bojun,Y.& Qouli,W. Distribution of the pinewood nematode in China and susceptibility of some Chinese and exotic pines to the nematode. Canadian Journal of Forest Research, 17, 1989, 51-57.

40. Bolla, R.I. & Boshert, M. Pinewood nematode species complex: interbreeding potential and chromosome number. Journal ofNematology, 25,1992, p. 227-238.

41. Braasch, H. First detection of Bursaphelenchus mucronatus in Germany and a Siberian isolate of Bursaphelenchus mucronatus and related Bursaphelenchus species., Nachrichtenblatt des Deutschen Pflanzenschutzdienstes, 46, 1991, p. 276-281 (in German).

42. Braasch, H. Pathogenicity of different isolates and hybrids of Bursaphelenchus xylophilus and B.mucronatus to coniferous seedlings under Central European field condition, 1993, p. 287.

43. Braasch, H. Untersuchungen zur Pathogenitat des Kiefernholznematoden (Bursaphelenchus xylophilus) fur verschiedene Koniferen unter mitteleuropaischen Freilandbeidingungen. Mitt.a.d.Biol. Bundesanst., H.301., 1994b, p.471

44. Braasch, H. Host and pathogenicity tests with pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus) from North America under Central European weather conditions. Nachrichtenblatt des Deutschen Pflanzenschutzdienstes, 49 (9), 1997, p. 209-214.

45. Burnes, T.A. The pine wood nematode in Jack pine infested with dwarf mistletoe. For. Sci., 31, 1985, p. 866-870.

46. Cheng, H., Maosong, L. & Ruju, Q. A study on the morphological diagnosis and the pathogenicity of Bursaphelenchus mucronatus. Journal of the Nanjing Agricultural University, 2, 1986, p. 55-61.

47. Choi, Y.E. & Moon, Y.S. Survey on distribution of pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus) and its pathogenicity to pine trees in Korea. Korean Journal of Plant Pathology, 5, 1989, p. 277-286.

48. Council Directive (77/93 EEC) of 21 December 1976 on protective measures against the introduction into the Community of organisms harmful to plant products and against their spread within the Community, (91/683), EPPO/OEPP, 1998, 99 pp.

49. De Guiran, G. & Boulbria, A. Les nematodes des pins. Caracterisation de la souche francaise et risque d'introduction et d'extention de Bursaphelenchus xylophilus in Europe. Bulletin OEPP/EPPO, 16, 1986, p. 445-452.

50. De Guiran, G. & Bruguier, N. Hybridization and phylogeny of the pine wood nematode (Bursaphelenchus spp.). Nematologica, 35, 1990, p. 321-330.

51. Dropkin, V.H., Foudin, A.S. Report of the occurence of Bursaphelenchus lignicolus-induced pine wilt disease in Missouri. Plant Dis. Rep., 63, 1979, p. 904-905.

52. Dwinell, D.J. First report of pine wood nematode in Mexico. Plant Disease, 77, 1993, p. 846.

53. Dwinell, L.D. Ecology of the Pinewood Nematode in Southern Pine Chip Piles. USDA. Southeastern Forest Experimental Station, Res. Pap. SE-258, 1986, 14 p.

54. Dwinell, L.D. Pine wood nematode in southern pine chips exported from Georgia. In "Pathogenicity of the pine wood nematode", Edited by M.J. Wingfield, The American Phytopatological Society. St. Paul. MN, 1987, p. 50-58.

55. Dwinell, L.D. Population dynamics of Bursaphelenchus xylophilus in air-dried loblolly pine wood. Phitopathology, 1994, p. 1090.

56. Dwinell, L.D. & Nickle, W.R. An overwiew of the Pine Wood Nematode Ban in North America. North Amer. Forestry Publication, No.2., 1989, 13 p.

57. Finney-Crawley, J.R. Insect vectors involved in the spreand of pinewood and other nematodes pathogenic to trees in Canada. Nematologica, 34(3), 1988, p. 2-8.

58. Furuno, T & Futai, K. Effects of pine wood nematode upon the growth of pine species. Bulletin Kyoto University Forests, 57, 1986, p. 112-127.

59. Futai, K. & Furuno, T. The variety of resistances among pine species to pinewood nematode, Bursaphelenchus lignicolus. Bull. Kyoto Univ. Forests, 51, 1979, p. 23-36.

60. Futai, K., Sutherland, J.R. Pathogenicity and attraction to host extracts of Canadian pinewood nematodes: studies with Scots pine, western larch and black spruce eldling. Canadian Journal of Forest Research., 19, 1989, p. 1256-1261.

61. Halik, S. & Bergdahl, D.R. Long-term survival of Bursaphelenchus xylophilus in living Pinus sylvestris in an established plantation. Europ. Journ of For. Path., 24, 1994, p. 357-363.

62. Harmey,J.H. & Harmey,M.A. Detection and identification of Bursaphelenchus xylophilus with DNA fingerprinting and polymerase chain reaction. Journal of Nematology, 25, 1993, p. 406-415.

63. Ishibashi, N. & Kondo, E. Occurence and survival of the dispersal forms in pine wood nematode, Bursaphelenchus lignicolus, with reference to the survival. Appl.Entomol.Zool. 12, 1977, p. 293-302.

64. Ishii, K., Kurinobu, S. & Furukoshi, T. Tree form of Pinus thunbergii x Pinus massoniana hybrid. Annual Report. Kanto Forest Tree Breeding Institute, 16, 1982, p. 235-240.

65. Katagiri, K. & Shimazu, M. Search for pathogenic bacteria and fungi to Monochamus alternatus. J. Jpn. For. Soc., 60, 1980, p. 179-182.

66. Kiyohara, T. Effect of temperature on the disease incidence of seedlings inoculated with Bursaphelenchus lignicolus. Trans. 84th Mtg.Jpn.For.Soc., 1973, p. 334-335.

67. Kiyohara, T & Tokushige, Y. Inoculation experiments of a nematode, Bursaphelenchus sp. onto pine trees. J.Jpn.For.Soc., 56, 1971, p. 136-145.

68. Kolossova, N.V. Bursaphelenchus eroshenkii n.sp. (Nematoda: Aphelenchoididae) from the Russian Far East, with a key to some species of Bursaphelenchus Fuchs, 1937. Russian Journal of Nematology, 6(2), 1998, p. 161-164.

69. Kulinich, O.A. & Kolosova, N.V. Distribution of the nematode Bursaphelenchus mucronatus in the Russian Far East. Abstr. 22nd Int. Symp. Eur. Soc. Nematol., Ghent, 7-12 Aug, 1994, Nematologica 41, 1995, p.312.

70. Kulinich, O.A. & Kolossova, N.V. The potential of the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus to become established in countries of the former USSR. Russian Journal of Nematology. Vol.3, 1995, p. 35-48.

71. Kulinich, O.A., Kruglic, I.A., Eroshenko, A.S. & Kolosova, N.V. Occurrence and distribution of the nematode Bursaphelenchus mucronarus in the Russian Far East. Russian Journal of Nematology Vol.2, No2, 1994, p. 113-119.

72. Linit, M.J. The insect component of pine wilt disease in the United States. In "Pathogenisity of the Pine Wood nematode". Ed. by M.J.Wingfield., The Amer.Phyt.Ser., 1987, p. 66-73.

73. Linit, M.J. Nematode-Vector Relationships in the pine wilt diseasesystem. J.Nematol., 20.(2), 1988, p. 227-235.

74. Linit, M.J. Transmission of Pinewood Nematode Through Feeding Wounds of Monochamus carolinensis (Coleoptera: Cerambycidae). J.Nematol., 22(2), 1990, p. 231-236.

75. Magnusson, C. & Kulinich, O.A. A taxonomic appraisal of the original description, morphology and status of Bursaphelenchus kolymensis Korentchenko, 1980 (Aphelenchida: Aphelenchoididae). Russian Journal of Nematology, 4(2), 1996, p. 155-161.

76. Magnusson, C. & Schroeder, L.M. First record of a Bursaphelenchus-species (Nematoda) in Monochamus beetles in Scandinavia. Anz. Schadlingskde., Pflanzenschutz, Umweltschutz, 62, 1989, p. 53-54.

77. Malek, R.B. & Appleby, J.E. Epidemiology of Pine Wilt in Illinois. Plant Disease, Vol.68, No.3, 1984, p. 180-187.

78. Mamiya, Y. Pine wood nematode Bursaphelenchus lignicolus Mamiya & Kiyohara as a causal agent of pine wilt disease. Rec.Plant Prot.Res., 5, 1972, p. 46-60.

79. Mamiya, Y. Pine wilting disease caused by the pine wood nematode Bursaphelenchus lignicolus in Japan. JARQ, 10, 1976, p. 206-211.

80. Mamiya, Y. The Pine Wood Nematode. In "Plant and Insect Nematodes" (Ed. W.R.Nickle), Marcel Deccer, New-York, 1984, p. 589-628.

81. Mamiya, Y. Interspecific Hybridization between Bursaphelenchus xylophilus and B.mucronatus (Aphelenchida: Aphelenchoididae). Appl.Ent.Zool., 21(1), 1986, p. 159-163.

82. Mamiya, Y. Origin of the pine wood nematode and its distribution outside the United States. In "Pathogenisity of the Pine Wood nematode". Ed. by M.J.Wingfield. The Amer.Phyt.Ser, 1987, p. 59-65.

83. Mamiya, Y. & Enda, N. Bursaphelenchus mucronatus n.sp. (Nematoda: Aphelenchoididae) from pine wood and its biology and pathogenicity to pine trees. Nematologica, 25, 1979, p. 353-361.

84. Mamiya, Y. & Kiyohara, T. Description of Bursaphelenchus xylophilus n.sp. (Nematoda: Aphelenchoididae) from pine wood and histopatology of nematode-infested trees. Nematologica, 18, 1972 p. 120-124.

85. McNamara, D.S., Stoen, M. A survey for Bursaphelenchus spp. in pine forests in Norway. Bull.OEPP/EPPO, Vol. 18.(3), 1988, p. 231-363.

86. Microsoft Encarta World Atlas, Электронная географическая энциклопедия, 1999.

87. Morimoto, К. & Iwasaki, A. Role of Monochamus alternatus (Coleoptera: Cerambycidae) as a vector of Bursaphelenchus lignicolus (Nematoda: Aphelenchoididae). J.Jpn.For.Soc, 54, 1972, p. 177-183.

88. Nickle, W.R., Golden, A.M., Mamiya, Y. & Wergin, W.P. On the taxonomy and morphology of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Buhrer) Nickle 1970. J.Nematol, 13, 1981, p. 385-392.

89. Nickle, W.R. A taxonomic review of the genera of the Aphelenchoidea (Fuchs, 1937) Thorne, 1949 (Nematoda: Tylenchida). J.Nematol, 2, 1970, p. 375-392.

90. Ogura, N. Выведение in vitro дисперсионных форм сосновой древесной нематоды Bursaphelenchus xylophilus (Nematoda: Aphelenchoididae). 20 Int.Congr. Entomol., Firemze, Aug. 25-31, 1996, p.31-32 (in English).

91. Palmisano, A.M., Ambrogioni, L. & Caroppo, S. Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda: Aphelenchoididae) su Pinus Pinaster in Italia, Redia 75, 1992, p. 517-527.

92. Pest Risk Assessment of the Importation of Larch from Siberia and the Soviet Far East. Forest Service of United States Department of Agriculture, 1991,440 p.

93. Plant Quarantine Retrieval System (электронная база данных), Version 3.7, European And Mediterranean Plant Protection Organization, 1998.

94. Riga, E., Beckenbach, K. & Webster, J.M. Taxonomis relationships of Bursaphelenchus xylophilus and B.mucronatus based on interspecific and intraspecifics cross-hybrydization and DNA analises. Fundam. appl. Nematol.,15, 1992, p. 391-395.

95. Riga, E., Sutherland, J.R. & Webster, J.M. Pathogenicity of pinewood nematode isolates and hybrids to scots pine seedlings. Nematologica, 37, 1991, p. 285-292.

96. Sakuta, K., Gyokusen, K., Ahata, H. & Saito, A. Abnormal symptoms in roots of Pinus thunbergii seedlinss inoculated with Bursaphelenchus xylophilus. Bull.KyushuUniv.For, 71, 1994, p. 27-34.

97. Schauer-Blume, M. Preliminary investigations on pathogenicity of European Bursaphelenchus species in comparison to Bursaphelenchus xylophilus from Japan. Revue de Nematologie, 13, 1990, p. 191-195.

98. Schauer-Blume, M. Crossing experiments with Bursaphelenchus isolates from Europe and Japan. Z. Pflanzenkrankh. Pflanzenschutz, 99, 1992, 304-309.

99. Shoji, T. Eradiation of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus, and the pine sawyer, Monochamus alternatus, in pine logs by the winter application of metam-ammonium (NC5). Japanese Journal of Nematology, 15, 1985, p. 61-63.

100. Shong, T.S. & Tang, J.S. The occurrence of the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus in Taiwan. Proceedings of 6 R.O.C. Symposium of Electron Microscopy, 1985, p. 38-39.

101. Schroeder, L.M., & Magnusson, C. Transmission of Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda) to branches and bolts of Pinus sylvestris and Picea abies by the cerambycid beetle Monochamus sutor. Scand.J. For.Res., 7, 1992, p. 107-112.

102. Smith, J.M., McNamara, D.G., Scott, P.R. & Harris, K.M. Quarantine Pests for Europe. Data Sheets on Quarantine Pests for EC and for EPPO, England, CABI &EPPO, 1996,912 р.

103. Steiner, G. & Buhrer, E.M. Aphelenchoides xylophilus n.sp. a nematode associated with blue-stain and other fungi in timber. J.Agric.Nematol, 9, 1934, p. 5-8.

104. Takase, I., Oyama, H. & Fuyishita, A. Chemical control of pine wilting disease, caused by Bursaphelenchus xylophilus, and absorption and distribution of pesticides in the pine trees. Journal of Pesticide Sciences, Japan, 7, 1982, p. 473-480.

105. Takeshita, K., Hagihara, Y. & Ogawa, S. Enviromental analysis to pine damage in Western Japan. Bull.Fukuoka For.Exp.Sta, 24, 1975, p. 1-45.

106. Tamura, H. & Enda, N. Mesostigmatid mites associated with Japanese pine sawyer beetle. Jpn. J. Appl. Ent. Zool, 24, 1980, p. 54-61.

107. Tomminen, J. Presence of Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda: Aphelenchoididae) fourth dispersal stages in selected conifer beetles in Finland. Silva Fennica, 24, 1990, p. 273-278.

108. Tomminen, J. Pathogenicity studies with Bursaphelenchus mucronatus in scots pine in Finland. Eur.J.For.Path, 23, 1993, p. 236-243.

109. Tomminen, J., Nuorteva, M., Pulkkinen, M. & Vakeva, J. Occurence of the nematode Bursaphelenchus mucronatus (Nematoda: Aphelenchoididae) in Finland. Silva Fennica, 23(4), 1989, p. 271-277.

110. Tomminen, J., Akar, H. Infestation of four coleopteran species by the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus (Nematoda, Aphelenchoididae) living in wood chips. Entomologica Fennica, 1, 1990, p. 171-174.

111. Tomminen, J., Halik, S. & Bergdahl, D.R. Incubation temperature and Time Effects on Life Stages of Bursaphelenchus xylophilus in Wood Chis. Journal of Nematology, 23(4), 1991, p. 477-484.

112. Warren, J.E., Edwards, O.R. & Linit, M.J. Influence of bluestain fungi on laboratory rearing of pinewood nematode infested beetles. Fundam.appl.Nematol, 18(1), 1995, p. 95-98.

113. Webster, J.J., Anderson, R.V., Baillie, D.L., Beckenbach, K., Curran, J. & Rutherford, T.A. DNA probes for differentiating isolates of the pine wood nematode species complex. Revue de Nematologie, 13, 1990, p. 255-263.

114. Wingfield, M.J. Transmission of pine wood nematode to cut timber and girdled trees. Plant Disease, 67, 1983, p. 35-37.

115. Wingfield, M.J., Branchette, R.A., Nicholls, Т.Н. & Robbins, K. The Pine Wood nematode: a comparison of the situation in the United States and Japan. Can.J.For.Res, 12, 1982, p. 71-75.

116. Wingfield, M.J., Branchette, R.A The Pine Wood nematode Bursaphelenchus xylophilus in Minnesota and Wisconsin: insect associates and transmission studies. Can.J.For.Res, 13, 1983, p. 1068-1076.

117. Wingfield, M.J., Branchette, R.A & Kondo, E. Comparison of the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus from pine and balsam fir. Eur.J.For.Pathol, 13, 1983, p. 360-372.

118. Yang, B.J., Wang Q.L. Distribution of the pine wood nematode in China and susceptibility of some Chinese and exotic pines to the nematodes. Canadian Journal of Forest Research 19, 1989, p. 1527-1530

119. Yano, M. Report of investigation on the death of pine trees. Sanrin. Koho, 4, 1913, p. 1-14.

120. Zhang, B.J., Huang, Y-C. A list of important plant diseases in China. Review of Plant Pathology, 69(3), 1990, p. 97-118.