Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологические свойства рекомбинантного вируса осповакцины, экспрессирующего ген env вируса лейкоза крупного рогатого скота

ВАК РФ 03.00.06, Вирусология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Листкова, Наталья Алексеевна

1 .ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность темы

Вирус лейкоза крупного рогатого скота вызывает у животных хроническую персистентную инфекцию. Хотя вирус не обладает сильной контагиозностью, уровень инфицированное™ в стадах, где не проводят противолейкозные мероприятия, может достичь 80-90% (Schwartz- et Levy, 1994). Существующие методы борьбы с распространением BJIKPC-инфекции основаны на выявлении и изоляции инфицированных животных. Однако в хозяйствах с высоким уровнем инфицированности такой подход не дает желаемого результата и экономически нецелесообразен. Введение в систему мер борьбы с лейкозом крупного рогатого скота вакцинопрофилактики может существенно ускорить и удешевить процесс оздоровления стад от ВЖРС (Шишков В.П. и др., 1983; Ohishi et al., 1988).

Поиски новых подходов к разработке вакцины против BJIKPC связаны с уникальными свойствами этого вируса: способностью встраиваться в геном клетки иммунного ряда, успешно избегать иммунного ответа хозяина и, в результате, устанавливать персистентную инфекцию. Использование вируса осповакцины в качестве вектора, экспрессирующего гены BJIKPC, - одно из перспективных направлений создания нового типа вакцин.

При разработке любых вакцин основными требованиями являются безопасность и иммунологическая эффективность. В случае с рекомбинантными вакцинами проблема безопасности становится наиболее актуальной (Marcus-Secura et al., 1989). Пока не разработаны методы определения полной безвредности генноинженерных вакцин, поскольку результатом генетических модификаций могут быть изменения вирулентности, тканевого тропизма, круга хозяев вируса и т.д. Важная часть оценки безвредности рекомбинантных вирусов осповакцины ( РВОВ) - оценка генетической стабильности вирусов. Также необходима более тщательная идентификация генотипических и фенотипических маркеров аттенуации ( Moss, 1996).

Для определения безвредности и иммуногенности РВОВ Меморандум ВОЗ (1985) предусматривает:

1. исследование безвредности и эффективности препарата на лабораторных животных;

2. клиническое исследование вакцины на том виде животных, для которых она предназначена, поскольку данные о безопасности и эффективности вакцины, полученные для одного вида животных, не могут быть применимы к другому виду;

3. изучение возможной передачи вируса среди животных одного вида, между различными видами, а также от животного человеку.

Предметом настоящего исследования является изучение безвредности, реактогенности и профилактической эффективности противолейкозного вакцинного препарата на основе рекомбинантного вируса осповакцины.

1.2. Цель и задачи исследования

Целью настоящей работы является определение безвредности, реактогенности и профилактической эффективности нового рекомбинантного вакцинного препарата против лейкоза крупного рогатого скота на основе вируса осповакцины штамм \¥11-ВЬУ-4Ю;к+.

В процессе выполнения настоящей работы решались следующие задачи:

1. определить безвредность РВОВ для крупного рогатого скота;

2. изучить реактогеность и особенности инфекционного процесса, вызываемого РВОВ у телят;

3. изучить способность РВОВ к диссеминации в организме крупного рогатого скота;.

4. определить способность РВОВ передаваться от вакцинированных животных невакцинированным;

5. определить профилактическую эффективность вакцинного препарата на основе штамма WR-BLV-4Ktk.

6. определить критерии успешной вакцинации рекомбинантным вирусом осповакцины.

Научная новизна и практическая ценность работы.

Создание рекомбинантных вирусов, экспрессирующих ген епу ВЛКРС -новое направление в области разработки специфических средств иммунопрофилактики лейкоза крупного рогатого скота.

Проведено изучение безвредности нового вакцинного препарата для крупного рогатого скота; определены особенности течения инфекционного процесса, вызванного РВОВ у телят. Выявлена неспособность РВОВ к диссеминации в организме крупного рогатого скота и распространению его среди животных. В производственных условиях показано, что препарат обладает профилактической эффективностью против ВЛКРС.

Список сокращений

ВЛКРС - вирус лейкоза крупного рогатого скота

ВЛКРС-инфекция - инфекция, вызываемая у животных крупного рогатого скота

ВОВ - Ьирус осповакцины

РВОВ - рекомбинантный вирус осповакцины

Крс - крупный рогатый скот

БОЕ - бляшкообразующие единицы

ИД50 - инфицирующая доза

СУ- 1 - линия клеток почки зеленой мартышки

РЬК - линия клеток почки эмбриона овцы вр51 - гликопротеид ВЛКРС с м.м. 51 кД

ОрЗО - гликопротеид ВЛКРС с м.м. 30 кД

РИД - реакция иммунодиффузии

РГЗТ - реакция гиперчувствительности замедленного типа

2. Литературный обзор

Заключение Диссертация по теме "Вирусология", Листкова, Наталья Алексеевна

5.Выводы

1. Показано, что рекомбинантный вирус осповакцины штамм WRBLV4Ktk+, экспрессирующий ген епу ВЛКРС, безопасен для крупного рогатого скота при внутрикожном введении в дозе 0,2 мл с титром 109 БОЕ/мл.

2.' Инфекционный процесс, вызванный у крупного рогатого скота рекомбинантным вирусом осповакцины, экспрессирующим ген епу ВЛКРС, штамм \\П-ВЬУ-4Ю:к+, идентичен инфекционному процессу, вызванному вирусом осповакцины.- .

3. Определена реактогенность вакцинного препарата на основе штамма WR-BLV-4Ktk+ для крупного рогатого скота. Реактогенность выражается в образовании типичного оспенного поражения на месте введения препарата, кратковременного небольшого повышения температуры у некоторых животных и развития регионарного лимфаденита.

4. У крупного рогатого скота, вакцинированного рекомбинантным вирусом осповакцины, экспрессирующим ген епу ВЛКРС, не развилось никаких поствакцинальных осложнений за весь период наблюдения (39 месяцев).

5. Не установлена возможность передачи рекомбинантного вируса осповакцины, экспрессирующего ген епу ВЛКРС, от вакцинированных невакцинированным животным при совместном содержании. Показана невозможность повторного пассажа рекомбинантного вируса осповакцины на

107 телках.

6. Рекомбинантный вирус осповакцины штамм \¥11-ВЬУ-4К1к+ полностью элиминируется из кожи с места введения через 16-24 суток после введения препарата, в зависимости от введенной дозы; вне места введения в организме привитых телок вирус не обнаружен.

7. Вакцинный препарат на основе рекомбинантного вируса осповакцины штамм \\^-ВЬУ-4КЛк+ при введении телкам обеспечивает защиту их от заражения ВЛКРС в течение года после прививки; затем профилактическая эффективность препарата снижается.

8. Показано уменьшение вероятности развития гематологической стадии лейкоза у крупного рогатого скота, вакцинированного рекомбинантным вирусом осповакцины, экспрессирующим ген епу ВЛКРС штамм WR-BLV-4Ktk+ по сравнению с невакцинированными животными.

9. Апробирован метод определения успешности вакцинации крупного рогатого скота рекомбинантным вирусом осповакцины, экспрессирующим ген епу ВЛКРС. Показано, что введение крупному рогатому скоту, вакцинированному рекомбинантным вирусом осповакцины, инактивированного гликопротеида ВЛКРС вызывает у животных появление антител к ^р51 в более ранние сроки, чем у невакцинированных.

108

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Листкова, Наталья Алексеевна, Москва

1. Альтштейн А.Д., Анджапаридзе О.Г., Антонова О.Г. и др. Двойные рекомбинанты вируса осповакцины, экспрессирующие поверхностный антиген вируса гепатита В и тимидинкиназу вируса простого герпеса./ДАН СССР.-1986.-т.289.-с.1493-1496

2. Альтштейн А. Д., Бендукидзе К. А., Захарова Л.Г. и др. Экспрессия оболочечного гликопротеида вируса бычьего лейкоза рекомбинантными вирусами осповакцины/Тр.ВИЭВ.-1991.-т.70.-с.101-107

3. Альтштейн А. Д. Вирусные инфекции и генетическая инженерия.//Биотехнология.-1987.-т,3,№3.-с.276-283

4. Альтштейн А.Д., Валихов А.Ф. Подходы к живой вакцине против бычьего лейкоза на основе вируса осповакцины.- 5 конф.Рос.Федерации»Новые направления биотехнологии», Пущино 18-22 мая 1992: Тез.докл.-Б.М.Д992.-С.52

5. Альтштейн А.Д., Захарова Л.Г., Гриненко Н.Ф. Получение и изучение поксвирусных рекомбинантов, экспрессирующих чужерожные гены//Молекул.генет.,микробиол. и вирусол. 1994.-№4.-с.27

6. Альтштейн А.Д., Захарова Л.Г., Лопарев В.Н. и др. Получение рекомбинанта вируса осповакцины, индуцирующего поверхностный антиген вируса гепатита Б, на основе штамма ЛИВП./ ДАН СССР.-1985.-т.285.-с.696-699109

7. Брацлавская О.И., Нагаева Л.И., Ильина Я.С. и др. Экспрессия генома BLV в патогенезе лейкоза крупного рогатого скота //Изв. Ан ЛатвССР, 1986.-№11.-c.69-74

8. Букринская А.Г., Жданов В.М. Молекулярные основы патогенности вирусов.//М.:Медицина, 1991

9. П. Бургасов П.Н., Безденежных И.С. Научные основы организации профилактики инфекционных болезней. // М.:Медицина,1977.-с.38-40Д 19138

10. Вагабов P.M. О неспецифической резистентности к гетерологической вирусной инфекции после иммунизации осповакциной.//Вопр. Вирусологии.-1978.-№4.-с.463-466

11. Валихов А.Ф. Биологические свойства вируса лейкоза крупного рогатого скота: диагностика и профилактика инфекции.: Дисс.доктора биол.наук/ М., 1992110

12. Валихов А.Ф., Галеев Р.Ф. Динамика иммунного ответа у телят при введении инактивированного иммуногена на основе гликопротеида вириона ретровируса лейкоза.// Бюл.ВИЭВ.-1982.-№48.-с.12-13

13. Валихов А.Ф., Кузьмичев B.C., Иванова JI.A. и др. Иммуногенность рекомбинантного вируса осповакцины, экспрессирующего оболочечный гликоиротеид вируса бычьего лейкоза.// Тр.ВИЭВ.-1991.-т.70.-с.92-100

14. Варшавер Н.Б. Гены-супрессоры злокачественности.// Мол.ген., микробиол. и вирусол.- 1996.-№1.-с. 3-10

15. Воробьев A.A., Подкуйло В.Н., Михайлов В.В. и др. Непарантеральные методы иммунизации против оспы.// ЖМЭИ.-1997.-№5.-сЛ 17-121

16. Вороненко И.Е., Дубов Н.С., Черкас Г.И. и др. К вопросу об этиологии вспышки оспенного заболевания коров и работников животноводческих ферм.//ЖМЭИ.-1971.-№1.-с. 98-99

17. Вылков И.Н. Патология лимфатических узлов.// София: Мед и физк.-1980.-е. 106-118

18. Гурвич Э.В., Вилесова И.С. Вирус вакцины и поствакцинальный энцефалит.//Ас1а Virol.-1 983.-t.27.-c. 154-159

19. Гурвич Э.Б., Мовсесянц A.A., Степаненкова Л.П. Об участии вируса вакцины в патогенезе различных клинических форм поствакцинальных осложнений.//Ж.микробиол.-1979.-№11.-е.73-781.I

20. Жданов B.M. Эволюция вирусов.// М.¡Медицина.- 1990.- с.287297

21. Заграбян Л.И., Арзуманян Ж.Р., Аракелян B.C. и др. Случай оспы у коров.//Ветеринария.-1986.-№6.-с.30-31

22. Залевский Д.И. Некоторые аспекты специфической профилактики лейкоза крупного рогатого скота.//Тр. ВИЭВ.-1991 .-т.70.-с. 107-111

23. Залевский Д.И., Галеев Р.Ф., Валихов А.Ф. Изучение иммунного ответа у телят и кроликов на введение инактивированного вируса лейкоза крупного рогатого скота.//Бюл.ВИЭВ.-1988.-вып.67.-с.48-50

24. Иванова A.B. Сравнительная характеристика рекомбинантных штаммов вируса осповакцины, экспрессирующих поверхностный гликопротеид вируса лейкоза крупного рогатого скота: Автореф.дис. .канд.биол.наук// ВИЭВ,М.-1997

25. Кадыров У.Г. Оспа./В кн. Патолого-анатомическая диагностика болезней крупного рогатого скота.; Под ред.Шишкова В.П. и др.-М.:Агропромиздат.-1987.-с. 141 -146

26. Kapp Я., Хэнкок, Хенри Л.и др. Лимфоретикулярные болезни.// М.'.Медицина.-1980.-С.43-50112с

27. Кауфман P.C., Филдс Б.Н. Патогенез вирусных инфекций. В кн.Вирусология.//М.: Мир.-1989.-т.1.-с.277-306

28. Кокуричев П.И. Атлас патологической анатомии сельскохозяйственных животных.// JI.:Колос.-1973 .-с. 108-111

29. Колонцов A.A. Классификация вирусов человека и животных по материалам 6-го доклада Международного комитета по таксономии вирусов.//Мол.ген.,микробиол. и вирусол.-1998.-№2.-с.З8-41

30. Конычева В.В., Ильинская Т.Н., Чапенко C.B. и др. Роль экспрессии вируса лейкоза крупного рогатого скота в патогенезе гемобластозов.// Вопросы онкологии.-1987-т.ХХХ 111 .-№ 1.

31. Корзенко В.Н., Сайковская В.А., Протасеня С.Г. и др. Оспа крупного рогатого скота.//Ветеринария.-1964.-№7.-с.312-34

32. Лихачев Н.В., Борисович Ю.Ф. Биологические свойства возбудителя оспы.// Ветеринария.-1964.-№7.-с. 12-15

33. Лоуи Д.Р. • Трансформация и онкогенез: ретровирусы. В кнБирусология.//М. :Мир.-1989.-С.433-486

34. Медуницын Н.В. Вакцинология.//М.:Триада-Х.-1999.-е. 129-132

35. Мельников С .Я. Коревые вакцины: новые направления, новые стратегии.//Вопр. Вирусол.-1996.-№2.-с.79-81

36. Минаев В.Д. К вопросу об оспе у животных.// ЖМЭИ.- 1970.-№ 1.-е. 146113

37. Мэрфи Ф.А. Таксономия вирусов. В кн. Вирусология.//М.:Мир.-1989.-С.20-54

38. Мэрфи Б., Ченок Р. Противовирусная иммунизация. В кн. Вирусология.// М. :Мир.-1989.-е. 145-190

39. Парфанович М.И., Симонян Г.А., Лазаренко A.A. и др. Исследование инактивированной цельновирионной вакцины из вируса лейкоза крупного рогатого скота. Тез. Докл.Всесоюзн.конф. 9-11 окт. 1984. УНИВИ, Ташкент.-1984.-с.159

40. Райзман Б. Размножение фирусов: общие представления.: В кн Вирусология.// М:Мир.-1989.-т. 1.-е. 124-137

41. Руководство по общей эпизоотологии. Под ред. Бакулова В.И., Третьякова А.Д.//М.:Колос.-1979

42. Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней. Под ред. Покровского В.И.//М.Медицина.-1993

43. Сарнгадхаран М.Г., Маркхэм П.Д., Галло Р. Вирусы Т-клеточных лейкозов человека. В кн. Вирусология.// М.:Мир.-1989.-с.ЗЗ 1-382

44. Симонян Г.А., Хисамутдинов Ф.Ф. Ветеринарная гематология.// М.:Колос.-1995.-е. 126-127

45. Скалинский Е.И., Борисович Ю.Ф., Штефан М.К. Лабораторная диагностика оспы животных.// Ветеринария.-1968.-№ 11 .-с.67-69

46. Феннер Ф., Мак-Ослен Б., Миме С. и др. Биология вирусов животных.//М. :Мир.-1977.-c.281-342114

47. Хайдрих Х.-Д., Грунер И. Болезни крупного рогатого скота.// М.:Агропромиздат.-1985.-c.70

48. Цибиногин В.В., Чапенко C.B., Нагаева C.B. и др. Делеция нуклеиновых последовательностей БЛВ в клетках тканей крупного рогатого скота.//Изв. АН ЛатвССР.-1982.-№7.-с. 104-109

49. Цилинский Я.Я. Популяционная структура и эволюция вирусов.// М. Медицина.-1988

50. Черное В.И., Антонова Т.П., Митина И.В. и др. //Молекул.генетика.-1983 .-№ 10.-С.21-24

51. Черное В.И., Челяпов Н.В., Антонова Т.П. и др. Использование вируса осповакцины в качестве вектора для создания живых генно-инженерных вакцин.// Вирусы и вирусные, забол.- 1990.-№18.-с.59-60

52. Черное В.И., Унанов С.С., Антонова Т.П. и др. Изучение свойств тканевой оспенной вакцины производства Московского научно-исследовательского института вирусных препаратов.// Вопр.вирусологии.-1977.-№1.-с.71-75

53. Шишков В.П., Бурба Л.Г., Валихов А.Ф. и др. Опыты по иммунизации крупного рогатого скота против экспериментальной инфекции.//Труды ВИЭВ.-1983.-Т.59.-С.56-58

54. Щелкунов С.Н. Молекулярные основы вирулентности ортопоксвирусов.//Вестник РАМН.-1998.-№3.-с.24-29115

55. Яковлева И.Я., Корчмару И.Ф.,Богданская Н.И. Диагностика лимфаденопатий.// Кишинев: Штиинца.-1984.-е.

56. Ada G.L. How do vaccinia-vectored vaccines fit into human immunization programmes? //Res.Virol.-1989.-140, №5 .-p.470-473

57. Alexandersen S., Carpenter S., Christensen J. et al. Identification of alternatively spliced mRNAs encoding potencial new regulatory proteins in cattle infected with bovine leukemia virus. //J.Virol.-1993.-67.-p.39-52

58. Appleyard G., Haper A.J., Boulter E.A. An antigenic difference between intracellular and extracellular rabbitpox virus.// J.Gen. Virol.-1971.-13.-p.9-17

59. Becker Y. The need for characterization of pathogenicity genes of recombinant DNA viruses used as human vaccines.// Virus Genes.- 1987.-1,N1.-p.l 17-120

60. Berkowitz E.M., Pogo B.G-T. Molecular characterization of two strains of Shop fibroma virus.//Virology.-1985.-142,N2.-p.437-440

61. Bolognesi D.P. Potential leukemia virus subunit vaccines: discussion.// Cancer Res.- 1976.-36, N2.-p.655-656

62. Brown F. From Jenner to genes the next generation of virus vaccines./ZMol.Pathol. :Symp., London, Dec., 1986.-London, 1987.-p.75-84

63. Brown F. How do vaccinia-vectored vaccines fit into animal immunization programes?//Res.Virol.-1989.-140,N5.-p.474-476116

64. Bruck K., Rensonnet N., Portetelle D. et al.// Biologically active epitopes of bovine leukemia virus glicoprotein GP51: their dependence on protein glycosylation and genetic variability.// Virology.-1984.-136,Nl .-p.20-31

65. Burny A., Bruck C., Couez D. et al. Enzootic bovine leukemia: its relevance as a model system for human T-cell leukemia.// Hum.T-cell Leuk./Lymphoma Virus. Cold Spring Harbor,N.Y.-1984.-h. 17-24

66. Burny A., Bruck C., Cleuter Y. et al. Bovine leukemia virus, a versatile agent with various pathogenic effects in various animal species.//Cancer Res.-1985.-45,N9,Suppl.-p.4578-4582

67. Burny A., Cleuter Y., Kettmann R. et al. Bovine leukemia: Facts fnd hypotheses derived from the study of an infectious cancer.// Adv.Vet.Sci.and Comp.Med.-1988.-32.-p. 149-170

68. Buller B., Smith G.L., Cremer K. et al. Decreased virulence of recombinant vaccinia virus expression vectors is associated with a thymidine kinase-negative phenotype.//Nature (London).-1985.-317.-p.813

69. Buller R., Mark L., Chakrabarti S. et al. Deletion of the vaccinia virus growth factor gene reduces virus virulence.// J.Virol.-1988.-62,N3.-p.866-874

70. Chen G., Willems L., Portetelle D. et al. Synthesis of functional bovine leukemia virus (BLV) p34tax protein by recombinant baculoviruses.//Virology.-1989.-173,NL-p.343-347

71. Chevallier N., Berthellemy M., Rhun D. et al. Bovine leukemia virus induced lymphocytosis and increased cell survival mainly involve the CD 1 lb+ B-lymphpcyte subset in sheep.// J.Virology.-1998.-72,N5.-p.4413-4420

72. Chua T., Smith C., Reith R. et al. Inflammatory responses and the generation of chemoattractant activity in cowpox virus-infected tissues.// Immunology.-1990.-69,N2.-p.202-208

73. Coulstone J., Naif H., Brandon R. et al. Molecular cloning and sequencing of an Australian isolate of proviral bovine leukemia virus DNA: comparison with other isolates.// J.Gen.Virology.-1990.-71 ,N8.-p. 1737-1746

74. Dalrymple J. Vaccinia-vectored vaccines for exotic diseas immunization programmes.// Res.Virol.-1989.-140,N5.- p.477-480

75. Daniel R. v Gatei M., Good M. Recombinant viral vaccines for enzootic bovine leucosis.// Immunol.Cell Biol.- 1993.-7l/5.-p.399-404

76. Datt N. Comparative studies of pigpox and vaccinia viruses. Serological relationship. Host range pathogenicity.// J.Comp.Path.-l964.-74.-p.62-80

77. Depelchin A., Letesson J., Lostrie-Trussart N. et al. Bovine leukemia virus (BLV) infected B-cells express a marker similar to the CD5T cell marker.// ImmunolXetters.-1989.-v.20.-p.69-76118

78. Dequiedt F., Kettmann R., Burny A. et al. Mutation in the p53 tumor-supressor gene are frequentlt associated with bovine leukemia virus-induced leukemogenesis in cattle, but not in sheep.//Virology.-1995.-209.-p.676-683

79. Dequiedt F., Willems L., Kerkhofs P. et al. Lack of mutation in the WAF-1/CIP1 gene during bovine leukemia virus induced leukemogenesis.// Vet.Imtnunol.Immunopathol.-1997.-59.-p.311-322

80. Doherty P., Allan J., Lynch F. et al. Dissection of an inflammatory process induced by CD8+ T cells.// Immunol.Today.-1990.-11 .-p.55-59

81. Fenner F., Burnet F. A short description of the poxvirus group (vaccinia and related viruses).// Virology.-1957.-4.-p.305-314

82. Flexner C., Moss B., London W et al. Attenuation and immunogenicity in primates of vaccinia virus recombinants expressing human interleukin-2.//Vaccine.-1990.-8,N1 .-p. 17-21

83. Giavedoni L., Jones L., Mebus C. et al. A vaccinia virus double recjmbinant expressing the F and H genes of rinderpest virus protects cattle against rinderpest and causes no pock lesions.// Proc.Nat.Acad.Sci.USA.-1991.-88(18).-p.8011-8015119

84. Gibbs E., Johnson R., Osborn A. The differential diagnosis of viral scin infections of the bovine teat. //Vet.Rec.-1970.-87.-p.602-609

85. Gillispie J., Geissinger C., Scott F. et al. Response of dairy calves to vaccinia virus that express foreign genes.// J.Clin.Microbiol.-l986.-23.-p.283-288

86. Gupta P., Kashmiri S., Erisman M. et al. Enchanced expression of the c-myc gene in bovine leukemia virus-induced bovine tumors.// Cancer Res.-1986.-46,N12.-p.6295-6298

87. Haas L., Divers T., Casey W. Bovine leukemia virus gene expression in vivo.//J. Virol.-1992.-66.-p.6223-6225

88. Hanlon C.,Ziermers E., Hamir A. et al. Cerebrospinal fluid analysis of rabid and vaccinia-rabies glycoprotein recombinant in orally vaccinated raccoons.// Am. J. Vet.Res.-1989.-50.-p.364-367

89. Hartsock R. Post vaccinal lymphadenitis hyperplasia of lymphoid tissue that simulates malignant lymphomas.//Cancer.-1968.-21 .-632-649

90. Heeney J.,Valli P., Jacobs R. et al. Evidence for bovine leukemia virus infection of peripheral blood monocytes and limited antigen expression in bovine lymphoid tissue.//Lab.Invest.-1992.-66.-p.608-617

91. Herrera E., Del Mar Lorenzo M., Blasco R. et al. Functional analysis of vaccinia virus B5R protein: Essential role in virus envelopment is independent of a large portion of the extracellular domain.// J.Virol.-l 998.-72/1 .-p.294-302

92. Honma T., Onuma M., Suneya M. et al. Cytotoxic antibody on cattle and sheep exposed to bovine leukemia virus.// Arch.Virol.-1980.-66.-p.293-299120

93. Ichibashi Y. Vaccinia-specific hemagglutinin.// Virology.-1977.-76.-p.517-538

94. Ichibashi Y., Dales S. Biogenesis of poxvirus: Interrelationship between hemagglutinin production and polycaryocetosis.// Virology.-1971.-46.-p.533-543

95. Imada T., Kawamura H., Nishimori T. et al. Evaluation of the pathogenicity and immunogenicity of vaccinia virus to piglets.// Jap.J.Vet.Sci.-1989.-51,Nl.-p.96-104

96. Itamura S., Morikawa Y., Shida H.et al. Biological and immunological charaterization of influenza virus hfemagglutinin expression from the haemagglutinin locus of vaccinia virus.//J.Gen. Virol.-1990.-71.-p. 1293-1301

97. Jonson R., Kaneene J. Bovine leukemia virus and enzootic bovine leucosis.//Vet.Bul.-1992.-62,N4.-p.288-312

98. Karupiah G., Coupar B., Ramshaw I. Et al. Vaccinia virus-mediated damage jf murin ovaries and protection by virus-expressed interleukin-2.//Immunol.and Cell Biol.-1990/-68,N5.-p.325-333

99. Keefe R.,Choi Y., Ferrick D. et al. Bovine cytokine expression during different phases of bovine leukemia virus infection.// Vet.Immunol.Immunopathol.-1997.-56, /4.-p.39-51

100. Keefe R., Ferrick D., Stott J. Cytokine transcription in lyphonodes of cattle in different stages of bovine leukemia virus infection.// Vet.Immunol.Immunopathol.-1997.-59.-p.271 -283121

101. Kerkhofs P., Heremans H., Burny A. et al. In vitro and in vivo oncogenic potencial of bovine leukemia virus G4 protein.// J.Virol.-1998.-72,N3/-2554-2559

102. Kettmann R., Cleuter Y., Mammerickx M. et al. Genomic integration of bovine leukemia virus: comparison of persistent lymphocytosis with lymphnode tumor form of enzootic bovine leucosis.// Proc.Nat.Acad.Sci.USA.-1980.i,77.-2577-2581

103. Kettman R., Deschamps J., Claustriaux J. et al. Chromosome integration domain for bovine leukemia provirus in tumors.// J.Virology.-1983.-47.-p.l46-150

104. Kieny M., Lathe R., Drillien R. et al. Exoression of rabies virus glycoprotein from a recombinant vaccinia virus.//Nature.- 1984.-312.-p. 163-166

105. Klintewall K., Ballagi-Pordany A., Naslund K. et al. Bovine leukemia virus: Rapid detection of proviral DNA by nested PCR in blbod and organs of experimentally infected cjalves.//Vet.Microbiol.-1994.-42.-p.l91-204

106. Kotwal G., Moss B. Vaccinia virus encoded a secretory polypeptide structurally related to complement control proteins.// 1988.- 335,N6168.- p.176-178

107. Kono Y., Arai K., Sentsui H. et al. Protection against bovine leukemia virus infection in sheep by active and passive immunization.// Jap.J.Vet.Sci.-1986.-48,Nl.-p.l 17-125122

108. Knowless D., Cheevers W., McGuire T. et al. Severity of arthritis is predicted by antibody response to gpl35 in chronic infection with caprine arthritis-encephalitis virus.//J. Virology.-1990.-64.-p.2396-2398

109. Kumar S., Andrew Expression of bovine leukemia env gene by recombinant vaccinia virus.// Virus.Res.-1990.-17,N2.-p. 131-142115; Lane J., Ruben F., Neff J. et al. Complications of smallpox vaccination.//N.Engl. J.Med.-1969.-281 .-p. 1201 -1208

110. Lane J., Ruben F., Neff J. et al. Cjmplications of smallpox vaccination, 1968: results of ten statewide surveys.Z/J.Infect.Diseases.-1970.-122.-p.303-309

111. Lasky L. Current status of the development of an AIDS vaccine.// J.Arnold Arboretum.-1989.-70,N3.-p. 153-172

112. Lauder I., Martin W., Murrey M. et al. Experimental vaccinia infection of cattle: A comparison with other virus infection of cow's teats.// Vet.Rec.-l 971 .-89.-p.571.-578

113. Letessson J., Van der Broecke A., Marbaix C. et al. FACS analysis of bovine leukemia virus (BLV)- infected cell lines with monoclonal antibodies (mAbs) to B cells and to monocytes/macrophages.// Vet.Immunol.Immunopathol.-1991.-27.-p.207-213

114. Leteson J.J., Mulumba M., Depelchin A. Reactivity of the workshop CD5 panel antibodies on western blot of cell lysate.// Vet.Immunol. and Imunopathol.-1991 .-27.-p.239123

115. Loh P., Riggs J. Demonstration of the sequential development of vaccinia antigens and virus in infected ctlls: observation with cytochemical and differential fluorescent procedures.// J.Exptl.Med.-1961.-114.-p. 149-160

116. Mackett M., Yilma T., Ross T. et al. Vaccinia virus recombinants: expression of VSV genes and protective immunization of mice and cattle.// Science,.-1985.-227 -p.226-227

117. Mackett M., Smith G. Vaccinia virus expression vectores.// J.Gen.Virol.-1986.-67.-p.2067-2082

118. Mamoun R., Astier T., Guillemain J. et al. Bovine Lymphosarcoma: processing of bovine leukemia virus-coded proteins.// J.Gen. Virol.-1983.-64,N12.-p.2791-2795

119. Mamoun R., Morisson M., Rebeyrotte N. Sequence variability of bovine leukemia virus env gene and its relevance to the structure and antigenicity of the glycoproteins.//J.Virol.- 1990.-64,N9.-p.4180-4188

120. Marbaix G.,.Kettmann R., Deschamps J. Enzootic bovine leucosis and bovine leukemia virus. Gene Express. Norm, and Transform.Cells. Proc. NATO/Gulbenkian Found., Sintra-Estoril, 25 May-4 June, 1982.// New York;London.- 1983.-p.231-245

121. Marcus-Secura C., Quinnan G., Risk and benefits of vaccinia-vectored vaccine use from the regulatory respective.// Res.Virol.-1989.-140,N5.-p.467-469124

122. Marly F. The promise and challenge of vaccinia-vectored vaccines.//Res. Virol.-1989.-140, N5.-p.463-465

123. Miller J. Bovine leukemia virus vaccine.// Anim.Models of Retrov.Inf. and their Relationship to AIDS.-1987.-p.421-430

124. Miner J., Hruby D. Vaccinia virus: A versatile toole for moleculat biologist.//Trends Biotechnol.-1990.-8,Nl.-p.20-25

125. Monke D.R., Rohde R.F., Hueston W.H et al. Estimation of the sensitivity and specificity of the agar gel immunodiffusion test for bovine leukemia virus: 1296 cases (1982-1989).//JAVMA.-1992.-12.-p. 2001-2004

126. Morens D. Antibody-dependent enchancement of infection and the pathogenesis of viral disease.// Clin.Infec.Diseases.-1994.-19,N3.-p.500-512

127. Morgan M., Copeland T., Oroszlan S. Structural and antigenic analysis of bovine and feline leukemia viruses.// J. Virol.-1983 .-46,N1.-177-186

128. Moss B. Genetically engineered poxvirus for vaccination and safety.// Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1996.-93.-p.l 1341-11348125

129. Moss B., Flexner C. Vaccinia virus expression vectors.// Annu.Rev.Immunol.-1987.-5.-305-324

130. Mussgay M., Dietrshold B., Frenzel B. et al. The bovine leucosis virus.//Med.Microbiol. and Immunol.-1977.-164,N1-3.-p.131-138

131. Naotaka I., Hidefiimi F., Takane M. et al. p53 mutation as a potencial factor / for tumor development in enzootic bovine leucosis.// Vet.Immunol.Immunopathol.-1997.-55.-p.351-358

132. Ohishi K., Maruyama T., Shida H. et al. Immunogenicity of a recombinant vaccinia virus expression envelop glycoprotein of bovine leukemia virus.//Vaccine.-1988.-6,N5.-p.428-432

133. Okada K., Kuwamoto R., Numakunai S ey al. An observation of persistent lymphocytosis in calves inoculated with the vaccinia virus -bovine leukemia virus env gene recombinant.// J.Faculty Agriculter Iwate University.-1993.-21,N3.-191-200

134. Oldstone , Tishon A., Eddleston M. Vaccination to prevent persistent viral infection.// J.Virol.-1993.-67/7.-p.4372-4378

135. Onuma M., Driscoll D., Olson C. Location of antigens associated with bovine leukemia virus.//Arch.Virol.-1977.-55.-p.131-137

136. Onuma M., Watarai S., Mikami T et al. Cell fusion activity of bovine leukemia virus.//J.Gen.Virol.-1980.-48,N2.-p.421127

137. Onuma M., Sagata N., Okada K. et al.Integration of bovine leukemia virus DNA in the genoms of bovine lymphosarcoma cells.// Microbiol. And Immunol.-1982.-26,N9.-p.813-820

138. OnumaM., Hodatsu T., Yamamoto S. et al. Protection by vaccination against bovine leukemia virus infection.// Amer.J.Vet.Res.-1984/-45,N6.-p.l212-1215 ,

139. Oroszlan S., Copeland T., Schultz A. et al. Biosynthesis and chemical characterization of bovine leukemia virus gene products.// J.Cell Biochem.-1986.Suppl.-N 10a.-p.209

140. Palumbo G., Pickup D., Fredrickson T. et al. Inhibition of an inflammatory response mediated by a 38-K protein of cowpox virus.// Virology.-1989 -172.-p.262-273

141. Panicali D., Mazzara G., McKenzie S. et al. Expression of HIV-1 genes by monovalent and multivalent vaccinia vectors.//J.Cell. Biochem.-1989.-suppL138.-p.258

142. Patarca R., Haseltine W. Similarities among retrovirus proteins.// Nature.-1984.-312,N5994.-p.496128

143. Patrascu I., Coman S., Sandu I et al. Specific protection against bovine leukemia virus infection conferred on cattle by the Romanian inactivated vaccine BL-VACC-RO.// Rev.Roum.Med -Virol.- 1980.-3 l,N2.-p.95-102

144. Payne E., Norrby Adsorbtion and penetration of enveloped and naked vaccinia virus particles.//J.Virol.-1978.-27.-p. 19-27

145. Payne L. Identification of the vaccinia hemagglutinin polypeptide from a ctll system yielding large amounts of extracellular enveloped virus.// J.Virol -1979.-31 .-p. 147-155

146. Payne L. Significance of extracellular enveloped virus in the in vitro and in vivo dissemination of vaccinia.// J.Gen.Virol.-1980.-50.-p.89-100

147. Pensiero M., Jennings G., Schmaljohn C. et al. Expression of the Hantaan virus M genom segment by using a vaccinia virus recombinant.// J.Virol.-1988.-3 .-p.696-702

148. Portetelle D., Bruck C., Burny A. et al. Detection of complement dependent lytic antibodies in sera from bovine leukemia virus infected animals.// Vet.Res.-1978.-9.-p.667-674129

149. Portetelle D., Dandoy C., Burny A. et al. Syntetic peptides approach to identification of epitopes on bovine leukemia virus envelope glycoprotein gp51.// Virology.-1989.-169,N1 .-p.34-41

150. Portetelle D., Limback K., Burny A. Recombinant vaccinia virus expression of the bovine leucosis virus env gene.// Vaccine.-199 l.-9.-p. 194-200

151. Powers M., Grossman D., Kidd L. et al. Episodic occurrence of antibodies against the bovine leukemia virus rex proyein during the course of infection in sheep.//J.Virol.-1991.-65.-p.4959-4965

152. Pyeon D., O'Reilly K., Splitter G. Increased interleurin-10 mRNA expression in tumor -bearing or persistently lymphocytotic animals infected with bovine leukemia virus.//J.Virol.-1996.-70.-p.5706-5710

153. Pyeon D., Splitter G.A. Interleukin-12 p40 mRNA expression in bovine leukemia virus-infected animals: increase in alymphocytosis but decrease in persistene lymphocytosis.//J.Virol.-1998.-72:8.-p.6917-6921

154. Sagata N., Yasunaga T., Ohishi K. et al. Comparison of the entire genomes of bovine leukemia virus and human T-cell leukemia virus and characterization of their unidentified open reading frames.// EMBO Journal.-1984.-3,N13.-p.3231-3237

155. Sagata N., Yasunaga T., Tzuzuku-Kawamura J. et al. Complete nucleotide sequence of the genom of bovine leukemia virus: Its evolutionary relationship to other retroviruses.// Proc.Natl.Acad.Sci USA.-1985.-82.-p.677-681130

156. Sagata N., Yasinaga T., Ogawa Y. et al. Bovine leukemia virus: unique structural features of its evolutionary relationship to human T-cell leukemia virus.//Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1984.-81.-p.4741-4745

157. Sastry K., Arlinghaus R. A novel HIV vaccine strategy.// hematol.Pathol.-l 990.-4,N3.-p. 157-159173,. Schwartz I., Levy D. Bovine leukemia virus.// Vet.Res.-1994.-25.-p.521-536

158. Schwartz I., Bensaid A., Polak B. et al. In vivo leukocyte tropism of bovine leukemia virus in sheep and cattle.// J.Virol.-1994.-68.-p.4589-4596

159. Simon J., Werner G. Vaccinia virus infection of the central nervous system in X-irradiated mice.// Infect.Immun.-1979.-25.-p. 1035-1042

160. Smith G., Mackett M., Moss B. Infection vaccinia virus recombinants that express hepatitis B virus surface antigen. //Natura (London).-1983 .-302.-p.490-495

161. Thomas I., Brohier B., Languet B. et al. Primary multiplication site of the vaccinia-rabies glycoprotein recombinant virus administered to foxes by the oral route.//J.Gen.ViroL-1990.-71,Nl.-p.37042

162. Uckert W., Hertling I., Kraft R. et al. Structural components of bovine leukemia virus: further biochemical and immunological characterization of major structural proteins and glycoproteins.//Virus Res.- 1986.-4,N4.-p.343-356

163. Voneche V., Callebant J., Kettmann R. et al. The 19-29 amino acid fragment of GP51 adopts an amphiphillic structure and plays a key role in the131fusion events induced by bovine leukemia virus.// J.Biol.Chem.-1992.-267.-p.15193-15197

164. Willems L., Chen G., Portetelle D. et al. Cellular immortalization and transformation by the bovine leukemia virus tax gene product.// Arch.lnt.Physiol.of Biochem.-1990.-98,N2.-p.749

165. Willems L., Thienpont E., Kerkhofs D. et al. Bovine leukemia virus an animal model for the study of intrastrayn variability.// J.Virol.-1993.-63/2.-p. 1086-1089

166. Yilma T., Hsu D., Jones L. et al. Protection of cattle against rinderpest with vaccinia virus recombinants expressing the HA or J gene.// Science.-1988.-242,N4881 .-p. 1058-1061

167. Yoshinaka Y., Oroszlan S. Bovine leukemia virus post-envelope gene coded protein: evidence for expression in natural infection.// Biochem. And Biophys.Res.Commun.-1985.-131,Nl.-p.347-354

168. Zhou J., Crawford L., McLean L. et al. Increased antibody responses to human papillomavirus type 16 LI protein expressed by recombinant vaccinia132virus lacking serine protease inhibitor genes.// J.Gen.Virol.-1990.-7l,N9.-p.2185 2190