Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологические свойства пастерелл и вопросы лабораторной диагностики пастереллеза

ВАК РФ 03.00.07, Микробиология

Автореферат диссертации по теме "Биологические свойства пастерелл и вопросы лабораторной диагностики пастереллеза"

- •• ъ

1ИНИСТЕРСТВ0 ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ КАЗАХСТАН ЛМАТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ИМ. С.Д.АСФЕНДИЯРОВА

На правах рукописи

УДК 616.98:579.843.95}-083,18-083.33(574)

ДЕРНОВАЯ ВАЛЕНТИНА ФРИДРИХОВНА

БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПАСТЕРЕЛЛ И ВОПРОСЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ПАСТЕРЕЛЛЕЗА

03.00.07. - микробиология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Алматы. 1996

Работа выполнена в лаборатории микробиологии чумы Казахского противочумного научно-исследовательского института.

Научные руководители - доктор медицинских наук,

профессор В.И. Степанов;

- кандидат биологических наук, доцент Т.И.Тугамбаев.

Официальные оппоненты-

доктор медицинских наук, профессор А.Л.Котова -доктор ветеринарных наук, профессор К.Б.Бияшав

Ведущее учреждение

- Казахский Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней ИЗ РК

Защита состоится 19Э6 г. в часов на за-

седании специализированного Совета.Д. 09.01.01 при Алматинс-ком государственном'медицинском институте им. С. Д. Асфендияро-ва по адресу: Алматы> 480012, ул. Толе-бн, 88.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Алма-тинского государственного медицинского института им. С.Д.Ас-фендиярова. ^

Авторефераг разослан я'/' У? - 1996 г.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат медицинских наук

Т. А.Султанова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Научный и практический интерес к пастереллезу обусловлен широким распространением возбудителя в природе, регистрацией не только спорадических случаев заболевания ладей, но и крупных вспкшек среди сельскохозяйственных и диких животных( Степанов и др., 1S61": Мартиневский и др., 1.984 и др.).. Кроме того, клиническая диагностика пастереллеза чрезвычайно затруднена из-за многообразия проявлений. маскирующего его под другие инфекционные и неинфекционные заболевания, а также вследствие недостаточного знакомства медицинских работников с этой инфекцией.

В Республике Казахстан были отмечены лиеь спорадические случаи пастереллеза людей(Семиотрочев и др..1965; Алма-ниязова и др. .1989). ' .

Одной из актуальных задач является выяснение уровня" и этиологической структуры заболеваемости, разработка эффективных методов лабораторной диагностики, доступных для применения в практических лабораториях. В настоящее время многие авторы (Борисенкова, Болотников, 1966; Бовкун, 1976,1977; Кольчак. 1979; Сидоров, Агаейа. 1982; Ярцев и др., 1989; Catter, 1972; Brogden, 1979) считают целесообразным самостоятельное применение серологических методов или в сочетании с бактериологическим последовавшем материала.

В литературе имеются ссылки на исследования в области иммунодиагностики пастереллеза, однако эти исследования не вышли за рамки эксперимента.

Цель работы. Изучение этиологической структуры,пастереллеза людей в Казахстане и совершенствование методов лабораторной диагностики этого заболевания.

Задачи исследования:

- изучить географическое распространение пастереллеза в Казахстане;.

- изучить культуральные,- морфологические, ферментативные и патогенные свойства культур пастерелл. выделенных в Казахстане;

- изучить чувствительность к антибактериальным препаратам пастерелл, изолированных от людей, грызунов и из объектов внешней среды;

- оптимизировать получение бактериальной масс» Pasteu-геПа multocida и режимы получения и очистки бактери-

альных-антигенов; • -

- разработать препараты для серологической диагностики пастереллеза и изучить'их эффективность для диагностики заболеваний у людеЛ и. животных.

' Научная новизна работы. Комплексное исследование этиологической значимости ■ пастерелл в инфекционной патологии, изучение их биологических особенностей позволило установить ряд неизвестных и малоизученных фактов-и выдвинуть ноЕие положения. Впервые в результате проведенных, работ:'

- выявлены 2 крупные вспышки пастереллеза у людей, вызванные заражение!.; от мяса больных животных;

- выделен штамм Р.®уКсс1йа нового биовара, лизирующий. эритроциты морской сеинки;

-разработаны иммунобиологические препараты для серологической диагностики пастереллеза, которые апробированы в условиях вспышек и эпизозТологического обследования природных очагов зоонозных инфекций. При этом установлены их высокая эффективность, .надезшость, информативность, и специфичность. - '

Практическая значимость работы! Изучена этиологическая структура пастереллеза. у людей е Республике • Казахстан, что валено как для планирования противоэпидемических мероприятий, так и для организации ла5ораторной диагностики.

Разработаны и Енедрены в практику здравоохранения-новые диагностические; препараты'для диагностики пастереллеза.

Показано, что экспериментальный пастереллезньш ко-диаг- .. настикум позволяет б ранние Сроки в 100% случаях подтвердить принадлежность выделенных культур к пастереллам.'

' Выявление-'антител при . пастерелйезе с помощью разработанного нами эритрсцитарного антигенного диагностикума может быть использовано в практических лабораториях при массовых серологических исследованиях с-дифференциально-диагностической целью.

Впервые выявленная и лабораторно подтвержденная вспышка пастереллеза у. людей, заразившихся от мяса крупного рогатого скота, имеет практическое значение:для работников здравоохранения в плане ранноГ: клинической и лабораторной диагностики пастереллеза и болев, эффективной организации мероприятий по профилактике И боръое с этим инфекционным заболеванием.

, На основании клинических наблюдений и изучения чувотви-'

тельности выделенных от людей культур к антибиотикам, разработаны принципы антибактериальной терапии пастереллеза.

Два штамма пастерелл, выделенных от людей, депонированы в коллекции микроорганизмов КазПЧНКИ:

1. штамм Pasteurella multoclda li 3 нового биотипа-sheep в качестве эталонного для производства диагностических препаратов;

2. штамм Pasteurella pneumotropica N 33. впервые выделенный от человека & Казахстане.

На основании результатов исследований разработаны: 1. " Руководство по клинике, лечению. зпидемиолопш, профилактике и лабораторной диагностике пастереллеза"( Утв. МЗ РК 4.0В.1993). 2. " Методические рекомендации по изготовлению и применению иммуноглобулинового пастереллезного Ко-диагности-кума для индикации пастерелл"( Утв. Ученым. Советом КазПЧНИИ 15.10. 1993 )'. 3. " Методические рекомендации по гигиенической экспертизе мяса и мясопродуктов" ( Утв. .МЗ РК 1995 г.).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Екявленная впеовые В.Казахстане вспышка пастереллеза была вызвана новым биоваром Pasteurella multoclda. sheep, отличающийся. способностью лизировать эритроциты морской свинки.

2. Разработанные имму?!ог'лобулиновь!й Ко-диагностнкум и эритроцитарный антигенный диагностику*« существенно ускоряет процесс-идентификации культур и позволяет внедрить в практику серологическую диагностику пастереллеза.

Публикации и апробация работы. По теме диссертации onvO пиковано 11 научных работ, 4 сданы в печать, оформлены и получены свидетельства на 4 рационализаторских предложений, изданы 1 руководство и 1 методические рекомендации, утверждены 1 нетолйческие рекомендации!

Основные положения работы доложены и .обсуждены на научных конференциях и Ученых Советах Казахского противочумного научно-исследовательского института (1992.1993,1994.1995 г.г.) . на Всероссийской научной конференции в г. Саратове (1Э93), на Межгосударственной научной конференции в г. Алматы (1934), на научной конференции кафедры микробиологии АГМИ, на научно-практической конференции инфекционистов, эпидемиологов и бактериологов Костанайской области (1995).

Материалы исследований включены в лекционный материал и

практические занятая по зоокозным инфекциям на курсах первичной специализации к усовершенствований врачей по особо • опасны:«: инфекциям кг базе отдела- подготовки специальных кадров при Казгхзксм противочумном НИИ, в лекции и практические занятия сс студентами Алмгтинско-го Государственного медицинского института.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из' введения, обзора литературы, главы "Материалу » метода".« -2-х глав собственных исследоваг ний, . обсуждения результатов; выводов, списка цитируемой литературы. Рабата изложена на' 172 • страницах машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами, 5 рисунками. Список использованной литературы гклхчает 165 работ на русском и 80 -на иностранных языках.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Исследование материала-от больных людей, полевого мате- . риала, идентификация культур , серологические исследования, другие эксперименты проводились на базе лаборатории микробиологии чумы Казахского-противочумного научно-исследовательского института (Алматы).

В работе рук050Дствсвались " Методическими рекомендациями по эпидемиологическому надзору за зоонозами в населенных пунктах Казахстана" (Степанов с соавт..1387). "Методическими рекомендациями по пастереллезу" (Степанов с соавт..3989), работами Домарадскрго И.В. (1971), Берги {1980>. Семиотроче-ва В.Л. с соавт. ¡1985), Smith J.Е. et al. (1965). Katanson Robert M. et ai. (¡980)', Wagner. 5. und and. (1588).

На протяжении 1992-1995 годов было исследовано бактериологически от больных с подозрением на пастереллез 435 проб, серологически - 565 сывороток.

Материал от больннх поступал из городской инфекционной клинической больницы, первой детской инфекционной больницы, инфекционного отделения'железнодорожной больницы г. Алматы.

Из объектов внешней среды исследовано 23 пробы мяса, 3 пробы почвы, 2 шкуры, тавотных.

На идентификации из Талдыкорганской, Костанайской областей поступило '336 культур.

Для изучения чувствительности и специфичности антигенного диагностикума были использованы ешсритки 574 экспериментально зараженных лабораторных гавоткых, разлачние аггж>-

' . ' ' 5

' тинкруказие глммерчешгё и экспериментальные сыворотки,- сыво-ретли больных 1;зстеге ляо'зом. людей и сиесротки больных "други-мл заболеваниями (яерс-иййэзы. я^еря'оалвирусные гэпатиты и др.). а тшоке злорсгж лалей' !i интактнкх Животных.

Для. пгоес-гки специфичности п1$тереллегного иммуноглобу-линобого Ко-диагн'остикума' использована 53 штаммов Pasteurel-la 'ha-:i.iolyUca и-' Fastpureila- nulteelda. 10 отамяов Yersinia enterocoiitlco. 15 штаммов.Yersinia pseudotuberculosis, .18 штампов Escherichia coil..15 штаммов"Listeria monocytcgenos. 10 штаммов Erysipslothrlx iliwsicpatla, U йгааШв Salmonella. i£2 -втакма Yersinia, роз Vis. ; -

Для выявления, этиологической структуры пастерёллеза Ь&па создана коллекция.культур из 129 штаммов, б том числе' .от больных людей 87 культур.. га мясё-17. от серой-крысы -9. от грызунов..- 7; от блох,- 2, от сайги - 4, от птпц - 1. из шкурк КРС - i; л1з'почш.---2' культуры.: . , . •

Гёнол;п ическу» активность определяли на агаре Хогшнге-ра. ' содержащем. 1.5% отдутых .эритроцитов.овцУ' или морской свинки- и глйкозы. -

- Видовую принадлежность пастерел'л определяли По класси-Фнкапкп Fredprlksen Vf. ' (1973).-' '•■•••.•

' Биохимическую активность'-ркйвлялй с помощью модифицированного 'аппарата Емельянова на пластинках агара Хоттингера. содержащем 3% гекрлйз'ярсранной крови. IX соответствующего углевода или спирта..:

Исследование материала от больных .проводилось параллельно путем посевов на питательные среды й проведением биологической, пробы на белых мышах.

Вирулентность.штаммов пастерелл изучали На белых мышах при подкожном их заражении, вычисляя Li) 50 по Керберу. в модификации Аюмарина.Й,П. с соавт. (1962). ■■

При исследовании сывороток ладей'в комплексе о. бактериологическими исследованиями применялись РА й РИГА. . .

Наличие в крови грызунов антител к возбудителям зооноз-ных инфекций определяли в РНГА пользуясь "Инструктивйо-нето-дическйми материалами по применению серологических методов диагностики при зпизоотологическом обследовании природных очагов чумы" ( Кузнецова с ссавт.. 1383). " :

Для определения типоспецяфичнссти пастереллезного имму-нсглобулйнового Ко-диагностикума было взято 234 штамма гете-

Объем и методы проведенных собственных исследований

Методы выявления Объем исследований

больные люди сайта, птнш дикие грыв.. серые крысы блохи. внешняя ' среда мясо куль- . тури ЭКСПРР1 б.М. *мент.ли м.св. ?вотные кролики

Бактериологический Бак-, посев Бвопроба 435/51 73/24 ,153/5 819/15 79/9 28807/3 126/4 ' 23/17 23/6 336/39 112/24 765 8/2

Серологический. РА РИГА 73/49 360/51 58/2 1591/16 79/3 574 18/4 34/17 34/25

Примечание: - числитель - количество исследованных проб • .- знаменатель - количество положительных результатов

о

рогенных культур Yersinia enterocolltlca. Yersinia pseudotuberculosis, Escherichia coll. Listeria monocytogenes, Erysl-pelothrix rhusiopatia. сальмонелл. Yersinia pestls.

Специфичность пастереллезного эритроцктарного антигенного липополисахаридного диагностикума определяли в РИГА с пастереллезными. туляремийными, бруцеллезными, чумными, псевдотуберкулезными, кишечяоиерсиниознкки. сибиреязвенными, поливалентными эшерихиозикми. шигеллезньвш и салъмонеллезны-ми сыворотками.

Для получения гипериммунной сыворотки с высоким титром антител в качестве контрольной на специфичность и чувствительность антигенного зритроцитарного пастереллезного диаг-ностикума нами была предложена оригинальная методика иммунизации кроликов.

Формалиниззцию эритроцитов проводили no-Cslzmas в модификации Меньшова П. И. и Шмутера М.Ф. (1959).

Для приготовления пастереллезного антигенного препарата на основе бараньих эритроцитов использовали антиген P.multo-cicia N 9.

В качестве сенситина использовали три вида антигена: антиген ( LPS) по вестфалю. антиген Буавена и антиген, полученный по модифицированному методу с 0.025 н. трихлорук.сус-ной кислотой.

Конструирование зритроцитарного диагностикума проводили на основе полученных антигенов с использованием различных методов сенсибилизации по:

Boyden s.v.(1951). Мелиховой ,Р.Б. (1974) и разработанной нами методике, позволившей получать высокочувствительные и специфичные препараты.

Статистическую обработку полученных результатов проводили по методикам Ойвина И.А. (I960). Уровень достоверности определяли по таблице Стьюдента. Данные считали достоверными при р < 0.05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЕ

В ходе выполненных исследований нами выявлена стойкая приуроченность пастереллеза к определенным очаговым территориям (Актюбинская. Западно-Казахстанская. Алматинская. Тал-

дккорганская.области),' на которых проводились наши иссгедо-ванкя. Зарат.еннссть диких.грызунов в пр/.гчде по $шим дпкннм

• : • ' & ■ колебалась в 'средней от О, i + 0. с ! 5.4 до 3.7 i 0.4 я, Позбу-дитель удалось, изолировать 'ст доиоьой -*вд« { 'ьаражёшюсть 0.5 ¿ 0.1%). от большоП-песчанки (. зараженноегь. о. i••'♦0. от : малого суслика г зараженность û,i + О.О-Ш, '.

Впервые выявлена шфкуляря-возбудителя пчетерелдеза в йушкукеком и Таукуизкои автономных очагах чум«( Цвдкент-ская, Кгцсылская и .Талгшорганская области). .При обследовании на зараженность- илакощггакщих 11 видов • изолирован;! 22 штамма пастерелл. из которых 18 ¿¡жшков отнесены к Р. n.ul cocida. а -1 -к P.i.aeraolytiea.. Чаще всего возбудитель ш^еляли от большой песчанка i зараженность.о,5 % ,0.1?). '

При обследовании 171 сайгака выделено 2 культура Р.киХ-tocida. 14 фазанов - 1 штамм Р.юийоеШ.

В очагах чумы пастерел.ш встречались на 17,сй-обследует МОЙ . площади. Большая часть штамшв . отнесена j;"P.esaltûcid'4 (32,0 i 0,42), остальные' (18.Ох;0,m - к P'.haejnolytica: Очаги пастереллеза. чаще/ всего сочетались с ареалзцн распространения возбудителей кишечного иероиниоза и сальконелле-за. реже -'^ризипелоида, лг.стериоза, псевдртуоеркулеза я чу-цы.. ' Наиболее зараженными паетбре&яезом '5 Среднеазиа.текси пустынном, очаге чуда • оказались - доковая' йищь (зараженность 0,5 0,32).. большая песчанка (0,1+ 0,012).'. Особую угрозу представляет- -зараженность вовЬ.удитедо! пастереллеза Промысловых БИДОЗ хивотких И ПТИЦ. ..

В некоторых очагах ( Волго-Уральскнй} пастереллы Получены только от Слзх. : . -.

■ , . В 1S91-19S5 п. г, ми проводили исследование грцз-унов й-зонах интенсивного освоешя земель (дачных .участков'- и 'зон отдыха) в четыре*: '.областях Казахстана и шрнуляшш в .них патогенных микробов. Всего исследовано 3478 грызунов Л 5 видов, ■от Которых изолированы 11 -культур пастерелл, среди них нре-вадкровата ( р s: 0.05) Pasleürella .miütocida над Pasleurella haemolytica ....'-.'_".. , ''

". -Нарбольшая.Заражённость'позвоночных животных выявлена в-Таддокорганской ( Q,8 i,0,С4'%),■ Алматинской-( 0.6 í 0,04:?; и Западно-'Казахстац'сШ;. ( 0:4 ± 0,03%) . наименьшая - в Кы-зылорппнеки'ц (0,1* ù,.0w)'S) Областях! • .

Па степени зараженности на первом , месте стоп¡ серая крыса'. (2,2 'i О.Ш.' далее -следует- нолек.ч мдаь ( О, ? ♦ 0. ib). Р-ммая зараженность обнаружена'у доуоь ú ншм : 0. :<>•_

0.01%) и у десной мыши (0.1 + 0,02-%).

Кроме того, при исследовании 396 блох и клещей разных видов выделена одна культура Р. mal toe ida.

Учитывая значительную зараженность грызунов возбудителями пастереллеза. близость этих грызунов к жилищу к местам отдыха человека и легкость передачи этой инфекции от грызунов человеку, следует прг.нать большую роль грызунов как резервуаров пастереллеза.

Циркуляция возбудителя пастереллеза среди диких Грызунов представляет определенную эпидёмическую опасность, так как это может способствовать инфицированию домашнего скота.

Эпизоотологпческие особенности пастереллеза сельскохозяйственных животных изучали путем анализа ветеринарной отчетности. а также при выездах в неблагополучные по пастерел-лезу области Казахстана (Костанайская.1995г.).

lía основании проведенного анализа установлено, что к пастереллезу восприимчивы все виды сельскохозяйственных животных. Наиболее пораженными оказались лошади (зараженность в разные годы колебалась от П.7 ± 2,0% дл 22.2 t 3.4%), затем крупный рогатый скот { от 6. 2 ± 0,335 до 13.5 £ ОА%). свиньи (от 7.2 t 1.6Я. до 10.5 *fi,5%). птицы домашние ( от 6.1+0,5 ДО 12.3 + 0.7%).

Широкое распространение пастереллеза среди домашних животных и птицы, естественно, влияет на ухудшение эпидемиологической обстановки.

В период 1993-1995 гг. в Алматанскбй области отмечен подъем заболеваемости пастереллезом ладей- (всего заболело 73 человека). Эпидемиологическими особенностями заболеваемости были: возникновение Нескольких вспышек, источником инфекции при которых служило мясо сельскохозяйственных животных, заражение в основном происходило контактно-раневым путем, профессиональный состав заболевших был неоднородным.

В ноябре 1993 года впервые в г.Алматы зарегистрирована вспышка пастереллеза. Одновременно заболело 4> человек, 37 из них были госпитализированы в 1-ю клАшческую инфекционную больницу. '

Из 42 проб мяса конины и говядины, доставленных из очагов, выделены 17 культур пзстерелл. а также из шкуры и почвы, с места забоя. • '

В настоящее время сложилась неблагополучная обстановка

по пастереллезу в Костанайской области.

Анализ заболеваемости показал,что с сентября по декабрь 1994г. в Костанайской области зарегистрировано.и бактериологически подтверждено 77 случаев заболевания этой инфекцией.

За 5 месяцев 1995 г. по Костанайской области зарегистрировано 256 больных пастереллезом. в том числе детей - 35. Лабораторно и клинически диагноз подтвержден у 232 человек (90,6 + 1,7%). только клинически у 24 (9.4 4 1,72). Заболевание зарегистрировано .в городах Ксстанае -.221. Рудном - 3,. Лисаковске - ! к в 4-х районах: Костанайском - 21, Семиозер-ном - 8. Алтынсаринском 1' федоровское по 1 случаю. Имели место 2 смертельных случая (1 в 19?4г. .1 - в 1595г.).

Максимальная заболеваемость отмечается среди люде:) от 20 до 40 лет - 46.7 + 0.6%. от Н до лет - 34.5 ± 0.7й.

Заболеваемость регистрировалась с сентября 1994г. по .март 1995 года, пик приходился на февраль, месяц 1995 г..

Г!рй эпидемиологическом расследовании установлено, что причиной роста заболеваемости людей послужил подъем инфицированное?!* сельскохозяйственных животных, С начала 1995 года в 43 хозяйствам области среди скота и птицы выявлен пасте-реллез.

. Возбудитель пастереллеза . выделен из'230 проб патологи^ ческого катериала от яиеотных,. 96.5 +1.2 % из которых - от крупного рогатого скота. Единичные случаи заболевания выявлены у свиней.' домашней птицы и пушных зверей.

В СВЯЗИ.' С полиморфизмом КЛИШ1Ч£!СКНХ проявлений ; от-, сутствия настороженности и достаточных знаний го клинике и диагностике у .практических врачей, - решавшее значение имеет ранняя диагностика.

Культурально-морфологические свойства штаммов . пасте-релл, выделенных, в Казахстане, в основном сходны. Однако существенной морфологической .особенностью пастерелл являются различия в величине и цвете колоний Б-формы, а также, скорости роста на Плотных.питательных средах:

•1) мелкие, прозрачные, голубовато-радужные в косопро-ходацеи свете их образуют-в течений часов бактерии первой генер-диш:

2>. мелкие-, голубовато-прозрачные по краю с переходом в беловато-матовые к центру колонии через 48-72 часов роста;

3). более крушш.;..;' .^лускдато^фопрачнш по край с не- .

и

реходом в беловато-матовые к центру - их формируют в течении 24 часов бактерии, адаптированные к питательным средам пассатами in vitro.

В процессе хранения штаммов происходит.их диссоциация, в результате чего изменяется морфология колоний.

При проведении бактериологических исследований;материала от больных { кровь. патологоанатомическиЯ материал). в мазках- отпечатках от биопробных животных.' в окрашенных по Грзму препаратах обнаруживали мелкие неотрицательные палочки или коккобактерии.как правило, обладающие капсулой и четко выраженной биполярной'окраской их по Романовскому-Гим-зе. . . ' "•. ..

При выращивании на искусственных питательных средах в мазках обычно наблюдали коккоподобные Формы, отличавшиеся от пзотерелл из патологического материала значительно меньшей .велнчйнг.п. а также не обладающие биполярной окраской'.

Нами установлены различия в морфологии микробных клеток с•зависимости от вила искусственной питательной среды. Если на-агаре Хоттингера и мясоиептонном агаре пастереллы вырастали мелкими колониями, в мазках в.виде коккобактерий. то на зритрнт.агаре колонии были более, крупными . а в мазгах- палочковидными. ' ' ... ' ' '

По биохимическим свойствам выделенные штаммы в целом проявляли характерную для пзстерелл ферментативную активность. .. ..."

Все культуры обладали оксидазной. и кзталазной активностью,. Ферментировали глюкозу, сахарозу, манниг. сорбит, ксилозу, галактозу, не ферментировали инозит, рамнозу, были неподвижны, не обладали ФенилаланшшезаминаЗой, не образовывали сероводород. Культуры проявляли бариабильность в отношении лактозы, мальтозы,, арабвнозы. маннозы,. лизина и орни-,тина. Так • лактозу фериентиробали 21,2 + 4,555. арабинозу -68.2 +5,1% . мальтозу - аб.4 i 3.8Ж, маннозу - 66.7t 5.2% штаммов; декарбсксилировалй лязин 91.О-*»?.1%, орнитин - 56.lt 5,4%. а аргинин гидролизировали лишь 7,6+ 2.1% культур.

• При детальном изучении культур Pasteurella mult.oclda мы выявили способность у некоторых из них лизйровать эритроциты морской свинки,что позволило отнести полученные нами культуры Pasteurella multocida к новому биотипу - sheep.

При изучении видовых свойств 87 штаммов паетерелл от

людей 72 отнесены к Pasteurella multoclcia, 113 них 58 - к новому биовару sheep. 14 - к Pasteurella ftaemölytica и 1 культура - к Pasteurella pnemotropica.

Таким образом, в этиолог:::! пастереллеза людей преобладающее сначенле имеет Pasieurella maltociüa - 82.8% (в г. Алма-ты - 31.8?, в КостанаПской области - 84.4л). ь том числе нового биовара sheep 66.73 < в г.Алмзты - 72, "й. в КостанаПской области - 56,2>!;. Pasteurella' fiaemolуtica составила 16.1? ( в г.Алматы - 18.2;'. в КостанаПской области - 12.5;?).' a Pasteurella рпеш? tropica вд^еленз только ст -одного больного в КостанаПской области.

При изучении фс-рментатиькой активности пастерелл мы обратили внимание на оглнчил в биохимической активности в зависимости от вида материала.

Культуры из крови отличались между собой по отношению к лактозе, мальтозе, Мачнсзе. ара'.шозе. оршгпшу.

Наиболее часто ( 29.2 ± 3.5? ) из крови выделялся'вид Pasreurella multccida. не ферментирующий лактозу, арабнноэу, ферментирующий мальтозу, маннпт, наннозу. докэрбокеилирующий лизин и орнлтин и не п:дрол::зируотй аргинин. Остальные 70.8 ♦ 1.5% гемокультур отличались по одному пли нескольким .свойствам: ферментировали лактозу - 45 i 2.7 -А, араОннозу -37.5 + 3,2 Л. не ферментировал:) мзльтозу 8.3 + 4,4 %. не де-карбоксилировали орнитин - 37.5 t 3. 21 шзмкое.

По одному свойству отличались: по арзбшюзе - 4.2%. по мальтозе - 8.4 й, по орнитину - 12,5й. По двум свойствам or. наиболее часто выделяющегося штамма отличались: по лактозе и арабинозе - 33.3%. по маннозе и орнитину - 12.5?5 , гемокуль-тур. По отношению к трен субстратам { лактозе, маннозе и орнитину) отличались 12,53?. культур, выделении/ из кропи.

Наиболее типичной культурой из зева ( 40 + 3.62/ является Pasteurella mtiltoclda, ферментирущал мальтозу и декар-бэксилирующэя лнзин. не ферментирующая лак! озу, машю.зу, араблнозу, не гидролизирущан аргинин. Ферментировали: лак-: тозу 6.7 + 5,5%, 1шш:>зу - 26,7 + 4,43. арабпнозу ' 20,0 i 4.-8 дечарбскеилфи.ш.и орнитин - 26,7 + 4,4?, гидролизи-ровалл аргинин - 20,0 j. 4.8% культур.

По. количеству отличительных свойств вшшлию: ко одно- -му Свойству (маниоза - 13,3%)., • по дм (малмоза и пргшши}-ТО.Ч'1?. ( маннозе и ¿1 нитииу' - Si 7г ' ь-.т-лмм'!В. По т* "м or -ft;- -

твпм i манного, арабинозе и орнитину) отличались 13.3%. по четырем свойствам отличались 13.3% культур из зева.

Для Pasteurella multocida, выделенных из ран, наиболее типичными ( 57.1?) были культуры, ферментирующие лактозу, мальтозу, маннозу, арабинозу. декарбоксилирующие лизин и ор-нитич. fie Ферментировали: лактозу и арабинозу - по 35.7% штампов; не декарбокснщфог.алп лизин - 7,2 t 2.05?. гидроли-зпровали аргинин - 7.22 культур. 42,9% штаммов отличались от .тили-того по двум свойствам ( 35,7« по отношению к лактозе и арабинозе и 7,2>' - по-отношению к. лизину и аргинину).

Нами отмечены ' различия ферментативных свойств пасте-рьлл. выделенных сг людей в разных регионах Казахстана { Апитинская и Костзиайская области).

От больных из различных областей Казахстана выделяются Pasteurella GNltoclda четырех биоЕаров. 8 Алматинской области выделяются чашэ всего культуры первого и пятого бновзров. в Коотанайской области - шестого и четвертого биоваров.

il l в пределах г.иоварсв нами отмечены отличия в ферментации .¡екотьрых углеьодоь ( арабинозы, мальтозы, маннита) и декада кснлпровашм аминокислот { лизина).

Т' I им образом, мы подтвердили данные Hussalni S.П. (К'/;■). ТапаКа а. (192-:).' Рягузоьа В.С. (1934), Капитана-ки И. с. Ц563). о том. что биохимические тести нельзя использовать дпя дифференциации сБвягевыделенных штаммов пастергпл. По ферментативной акгавности пастерелл определяют их вид. а Енутриьидову» дифференциацию не осуществляют (HecMleston. et al.,, 1972; Борисенкова А. Н.. 1Э32).

Результаты каких исследований по видовому составу пастерелл <.т грызунов и Слсх совпадают с выводами Цепко И. Н. (1S93) Ро, в отличии от сведений Семиотрочева В.Л. и др. (1985), изученные нами культуры P. mill toclcia в 70.2 ■*% ферментировали мальтозу, в 19, О % - лактозу. Культуры пастерелл. выделенные от сайп!, также как описывают Степанов В.М. и др. i1989!. не ферментировали лактозу и арабинозу. но. в противоположность их результатам, ферментировали мальтозу.

Впервые в Казахстане от сайги ' выделена Pasteurella pneumotropi-a. имеюцая [ти нт уреазу. но. в отиичии '-г Pas leurell'a mva. не обладают->л способностью денитриМщнрогать нитрачн.

]':у ! г!---iA.cni л;"/(;-.й пчст»1} <-диктат но-.бхо

дикость его эффективного лечения. Нами была изучена чувствительность к 25 антибиотикам и некоторым химиотерапевтическим препаратам-39 штаммов пастерелл. выделенных в различных областях республики от людей.

Из взятых в исследование штаммов 4 относилось к Р.йае-то1уИса, 33 - к Р.гаи11ос1йа и 1 - к Р. рпеито1гор1са.

Показано, что из-за высокой степени разброса по чувствительности нельзя рекомендовать ни один из испытанных антибиотиков для лечения больных без обязательного определения чувствительности к взятому Препарату. Можно лишь определить группу препаратов, в отношении которых вероятность успеха при лечении выше по сравнению с другими антибиотиками: это прежде всего хинолоньг (сифло'кс). Затеи в порядке убывания надежности макролиды ( эритромицин), пенициллини ( ампициллин). тетрациклин, левомицетин. цефалоспортш.

Чувствительность к антибиотиклм колебалась и в ьависи-мости от территориальной принадлежности пастерем. Штаммы, выделенные во время вспыжи пастереллеза в 1993 году в г. Алматы, обладали высокой чувствительностью к пенициллину (ЙЙК до С.4 мкг/мл). сифлоксу (НЙК до 0,15 мкг/мл), но были ке чувствительны к тетрациклину <• 6.4 мкг/мл). Пастерел лы, изоЛ1фованные от больных г. Алматы за 1991-1995 г.г.. были чувствительны не.-только к пенициллину и сифлоксу, но г. тетрациклину (Ш1К во \ мкг/мл). В то же гремя штаммы . изолированные. от больных за. эти годы в Кос-танайской области, оказались более устойчивыми к ристомицину (НИК >50 мкг/мл). гентамицииу [НИК 18 ыкг/нл). но белее чувствительными к лс-вомицетину. (НИК 6 мкг/мл) и цефалоспоринам I по!:оления ( це-фамеэину, цефалотину. лоигацефу), минимальная ингибирующа^ концентрация которых составляет 1.5. 0.3 и 0.7 мкг/мл соответственно.

■ Отличаются высоксЯ чувствительностью к цефалоспоринам ШИК 0,3 мкг/мл). пешшлликам - карбеницйллину(МКП 1.5мкг/мл). ампициллину (МЖ<0,3 мкг/мл) штаммы пастерелл. выделенные от сайги. .

Учитывая то, что практически к любому антибиотику отдельный штаим.. вызвавший заболевание, может быть достаточно устойчивым, а также та. что этиологический диагноз может быть неясен, при постановке диагноза "пастереллез" или подозрении на него необходима комплексная антибактериальная

терапия (т.е. использование минимум двух антибиотиков). Пре- • паратами выбора в соответствии с нашими данными являются препараты из групп хинолонов. макролидов. а также также тетрациклин. пенициллины. левомицетин, цефалоспорины.

Малая результативность и длительность бактериологического исследования (3-8 дней) при пастереллезе, особенно протекающем в острой форме, требует разработку серологических методов исследования как простых, доступных, специфичных и чувствительных. позволяющих получать результаты исследования •в течение 2.5-3'часов. .

Потому нами разработаны, иммунобиологические препараты для ускоренной диагностики пастереллеза и идентификации выделенных культур ( иммуноглобулинов«?! Ко-диагностикум н аритроцитарш-й антигенный диагностику»),

Лспытание показало, что приготовленный нами Ко-диагностикум выявлял только соответствующие гомологичные антигены, положительная реакция агглютинации, отмечена в течении 10-:5 секунд с образованием мелкозернистого агглвтината и просвещением субстрата диагностикума. .

Л:я получения антигенного эритроцитарного пастереллез-ного диагностакума нами была предложена новая методика выделения гнтигена. диагностикума и получения птерикиунной сыворотки. ■ "'•

Анализ полученных данных показал, что наибольший титр антител выявлен с диагностикумом. • полученным путем экстракции водао-Зенольнш. метедс-м на холоду-. Оптимальная доза нагрузки сенситина была в пределах 75-80 мкг/ил. ¡Даксималыша титр антител, выявленных диагностикумам, полученных с помощью LF3 антигена 2816 ¿156,7 ( t » 17.9, Р <0,001 ). 8 То время как с антигеном Буавена 3680 t 1S5.9 ( t « 18.7. Р < 0.0O1) и по модифицированной методике 5152 -»379.9 ( t =13.6, ,Р < 0.001). .

Накболее чувствительным явился диагностику*, получений по оригинальной методике с помощью дезоксихолата натрия. Среднегеометрический титр антител с диагностикумом, приготовленным по БоПдену (1951), при нагрузке сенситина в 500 мкг/мл составлял 1560-5 (t=7,3'. Р < 0.001). в то время как. с диагностикумом,. приготовленным ио-йелиховой(ÍS74) -1792+313,5 ít-5.7, Р < O^QOl) и с препаратом, приготовленным 'по разработанной нами методике 9280+14ПП, 4 ( t=6,3. Р< 0.(Щ.

Чувствительность РИГА с использованием пастереллезного антигенного эритроцитарного диагностикума была достоверно выше, чем объемной РА, при этом среднегеометрические титры выявленных антител составили соответственно 1:10090 и 1:1596 ( Р < 0.001).

Кроме того, число Положительных находок среди исследованных сывороток было несколько больше, чем при применении РА. Наши данные свидетельствуют о высокой чувствительности полученного эритроцитарного препарата, применение которого позволяет выявлять антитела в очень высоких титрах ( от 1:128GQ до 1: 102400), тогда как максимальные титры РА не превышали 1:6400. Особенно высокие титры сывороточных антител отмечались у переболевших пастереллезом через 4 месяца от начала болезни (титры от I: 51200 до 1: 102400).

Впервые пастереллезный эритроцитарный антигенный диаг-ностикум был апробирован в 1993г. при проведешш эпизоотоло-гического обследования Джуйгарского Алатау в Талдыкорганской . области, S результате обследования на пастереллез более 4-х тысяч грызунов получены положительные результаты у. И . видов диких кивотных из 24 исследованных, что составило 1.4%.

В результате серологических исследований (постановка РИГА) 1896 сывороток грызунов из районов коллективного сздо-вбдства нами выявлен .1.0% полокительных реакций в. титрах от 1:86 ДО 1:640 ( 1:60 - 65.ОХ, 1:160--.32.835. 1:320 - 2.23?). Антитела к пастереллам выявлены у домовых, полевых, лесных мышей, серых крыс и гребенщиковых песчанок.

Выяснилось и преимущество серологического метода исследований по сравнении с бактериологическим. Так. 1,07, 3f.ерь-ков имели антитела к пастереллезному микробу, тогда как про-, цент бактериологического подтверждения был значительно ниже (0,3%). Титры в РИГА колебались от 1: 80 до 1:320.

С целью эпиднадзора за зоонозными инфекциями нами в урочище Медео было исследовано 254 грызунов и птиц 12 видов. Антитела к возбудителю пастереллеза выявлены у 3,5% животных: лесных мышей, тяньшанских полевок и лесных сонь. Тигру, антител к возбудителю пастереллеза Sumí довольно высокими и составили в среднем 1:210.

В литературе имеются описания спорадических случаев заболевания пастереллезом людей в Казахстане. Однако при этом необходимо учитыгать,что из-за . трудностей лйбораторной к

... 17

ялпническси дплгайотакк чкггь 'запопэданш! нижет .проходить пол 'другими диагнозами. Поотсму частоту встречаемости пасте-релг.егп среди лвдеП нельзя считать достоверней' и необходимы аироккэ специальные исследования. в этсн направлении.

Б ¡053 г.- в .Саркаадсксм ряййнё Ташржьрсааскоа- облзсти

• поп серолопгЬсксн обследовании- на пастереллез сыворотки ли-хосэлнсеп Сольной Б. ЛЭ лет. в РНГа-с экспериментальной сери:-.:!' партере-ллезиор антигенного • ¿ритрошггарнога диагностику:« выявлены антитела в-тктрв. 1:6-10.

Р но.-:!:(.',о 1933 года впервые-в г! Алматы зарегистрирована есниага пистс-редл^за. ' когда в городскую' ннфекцнениук кданц-чег;:у£>" б:-лыишу .кос тупило-40 человек с первичным диагнозом

, ' Ьсзбуд:пе;.ь екбифскоЗ'. ягшгне &$л' выделен. Учитывая не-типи'ц-.'у.а для сибирской язви- клинику заболевания, исследование .зеегз материала одновременно проводилось'на иерсиниоз, пасте-реллез. листеридз. эршаеяоид и другу» патогенную шкроФла-ру. (ялк-.рул-енне И£И; боктёгноскощш.материала из содержимого .г.о:п::::; ь.у&'с-.^ь и нясз грамстрицателвних. бяполйрно'' окрашенных 1Шёч«и ¿к! -^оцкоГ.йктср'пй .с -капсулой позволило заподозрить ¡:-!.с ге(..;ллгз.- "рцш&шае культуры Давали гюлакйтзльнув .-реакцию аг'гжтш.'зции- цз стекле с экспериментальной серией пастц-сЛ.'.-оного Ко-д;пгпос.';икуиа.Таким образом, подозрение на еибиргч ус я:.&у Сиво'снято -и в- короткие сроки поставлен диаг- . иоз -"•гас'/.-.-рг'лйг". .- . . ''',."

Бйк-г»'ри6.согичег-иоа я.о-д^'сбруДенлв ¡диагноза составило -1Э. 2 + 1. Ьс. Наиболее высская висеваеиость была из еодерш-мого.козиых а>!4ектов - £5 ч 0..455, из'смывов е зеса вцзеваэ-мссть' -ооитопила 66.1 -¿-. о, ЭХ, -из крови больных - 36.7 1 1.7Х. из кг.прч - 16.7. + 2/21. • .; .

При иссл-'-аовании в Н?ГА. еьшороток от больных 4^.5«. случаен пулИсИ» • иолс5:ители;1«е • -результаты в титрах 1:320 -■целООО, • й ерзж-м ЫЮоп. У 25.Зл больных диагноз подтвержден - только в РИГА'.- Лабораторное цодшерэдпииэ диагноза составы о 71,5 -6.. 72. " ■'" .'• ."

•В последующие годы-из инфекционных счздриаров г.Алматы стал поступить для исследования.материал от больных с пред-пс.ло<иие;цш;м- лиоп1'-ьо1-!,-ииастереляез": кровь, слывя из г-.-вз, есд«-рй1П-;ое к-'цних «иМк'кд'св: сывороТ?.«. Всего исследовано 70?

• проГ V? лин. Л'!П1'нг»з лЬопраторн? пг-дтверхлен 'у 73 болшк.

Наиболее высокой была высеваемоеть из пунктатов и раневого содержимого -50,0 ± 12,1% и 40.9 + 2.1%. Высеваемоеть из крови, смывов из зева И испражнений составила соответственно 10,2 J, 8.7 + 1,9% и 6.4 i 3.1%.

Бактериологическое подтверждение диагноза -.составило 50.6 + 1.1Х. Применение иммуноглобулиновогб пастереллезногс Ко-диагностикума позволило уже на а день исследования . иден-тифицировагь культуры пастерелл.

Серологическое подтверждение диагноза составляло 69,9 ±. 0,1%. Специфические антитела к антигену пастерелл выявлялись в титрах от 1:640 до 1:100000.

Таким образом, разработанные нами эритроцитарный пасте-реллезный . антигенный й иммуноглобулиновый диагностикумы являются высокочувствительными и специфическими препаратами. Применение их в клинике позволяет значительно ускорить диагностику пастереллеза, что особенно важно для дифференциации этого заболевания о'т таких особо опасных инфекций как чума, сибирская язва, туляремия и других остро протекающих заболеваний. .

вывода

1. В результате проведенных исследований выявлено широкое распространение пастереллеза на территории« Казахстана среди сельскохозяйственных животных, диких и синантропных грызунов со стойкой приуроченностью к определенным территориям.

2. Показана большая роль диких и синантропных грызуноЕ как резервуаров пастереллеза в природе, представляющих эпидемиологическую опасность Для заражения сельскохозяйственных животных и людей. , •

3. Впервые в результате комплексного лабораторного исследования выявлены 2 вспышки пастереллеза среди людей, связанные с заражением от мяса больных животных.

4. В этиологии пастереллеза диких и синантропных грызунов. сельскохозяйственных животных' и людей преобладающее значение имеет Pasteurella multocida. Выделен новый биовар Pasteurella multoclda sheep, обладающий токсином, лизирующик эритроциты морской свинки.

5. Выявлена широкая ' вариабельность' ферментативных свойств пастерелл. что не'позволяет использовать эти призка-

ки для внутривидовой дифференциации свежевыделенных отакмов

пастерелл,

6. Определена группа' препаратов для комплексной антибактериальной терапии; препаратами выбора но мере убывания надежности являются хинолоны. накролиды. тетрациклкны, пени-циллины, левомвцетины. цефалоспорины. Обязательным является использование двух и более препаратов.из разных групп.

7. Разработаны диагностические иммунореагенты. позволяющие зз короткое время идентифицировать возбудитель пасте' реллеза или выявить специфический иммунный ответ. В условиях

вспышек показана эффективность, Надежность» информативность, специфичность и экономичность этих препаратов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Л^я целей серологической диагностики пастереллеза у ладей и »ивотных рекомендуется применение разработанного нами эритроиитарного антигенного пастереллезного диагностикума, .позволяющего в короткие сроки с высокой надежностью, проводить диагностику.

Юя быстрой идентификации выделенных культур рекомендуется использование предложенного нами пастереллезного икиу-'ноглобулинового Ко-диагностику»«. ■ .

В целях ускорения и удешевления эпидемиологического надзора целесообразно продолжить изучение распространения пастереллеза й Казахстане с помощью серологических методов с использованием разработанных нами препаратов.

Изучение ферментативной активности свежевыделенных штаммов пастерелл рекомендуется использовать только для определения родовой;и видовой принадлежности. .

Для рационального лечения пастереллеза рекомендуется комплексная Знтнбиотикотерапия, вкличающзя набор' из двух-трех препаратов из групп хинолонов. макролидов, тетра-циклинор, пенициллинов, левомицеишов, цефалоспоринов.

СПИСОК РАБОТ. ОПУБЛЙКОВАШШХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

"1. Дерновая В. Ф..' Семиотрочэв и. IL . ..Степанов в: К.. Безрукова ,1. С. Захаров Н. И.. Гражданое.'А. К./ Мезенцев В. И. Новый тип возбудителя гсдстереллезэ. полученного от человека //Здравоохранение- Казахстана.- - 18Э-1:. - К 9. - С. 35-30.

2. йшроаский- "-А.й:. Дерновая В.Ф. , Летальный случаи пастереллеза //Здравоохранение Казахстана. . - 1994. ~ |Т ©. -С. 73-74. \ '

3. Степанов В.И..' Нека-'^ченко Т. В.-. Некрасова Л. Б. Безрукова Л.С.,, Гахинов K.P.-. Карпов A. A.., Пеле С.Б:. Путятин В. Е.. Дерновая В..Ф.; о зараженности теплокровных- животных 8 мувнкуиском' автономном очаге чуш сопутствующими ннфе1сцият ми. // Материалы .'."ежгосударс г. кокф. "!!роф.цлакт;1Кп •« меры борьбы с чуксЯ",посБ,100-летИй. открытия возбудителя чумы.-., ч АЛКатЫ. 1934. - С. 263-254:

4. Дерновая В.'ф/. ;Сгеианоз В. м.. Дерновой Л, Г.. Вдова-, ченко Н. ¡1;. Чалая И. Ю.. Чернов А..С. О яепыикё. пастереллёза в Алматы в 1993 г. , /'/ КатериаЛш •Кежгосударст. научной конф. "Профилактика и меры, борьбы с'-чукой". поси. .100-,летпю открытия• возбудителя чумы.:-Алматы, .1994. - с. 245-246.''

5. Безверхний А. В. , Ковалёва-Г. Г.-- Соколов П. Н.; . Безрукова Л. С/. Дмитровский А. 11.Тугамбйев. Т, И,. Дерновал- В. '!>., Ме-ка-Меченко Т.В..;, ПоГребеик? А.Г-.ЗойНозкые инфекции s Джул-гарскбм Алатау //Материалы.МежгосударсТ:научной конф,"Профилактика и меры борьбы с чумой"., поев. 100-летию открытия, возбудителя чумы. - Алматы.1S94. - Г. 243:

6. Дерновая 8. ¿ Степанов В."М., Сул'ейненов Б. М. . Безруко ва л. С.. Айманова О'.Я. .Шлекенова-Р.З. . Секиотр'очев В. Л.'.'Некрасова Л. Е.. йёкайеченко Т. В. , Соколов П.Н. Лодааева Л, У.-. Бабищи C.H. Лабораторная диагностика пастереллеза во время вспышки. 1993 г.- в Алматы //Материалы Межгосударств, науч. конф. 'Профилактика . и . меры борьбы с чу?<(ой-".посв. юо-летт открытия возбудителя чумы. - Ллматы.19Э4. - с;246-247..

7." Дерновая В. Ф.. Тугамбаев Т. И. Серологические исследования при пастереллйзе , у ..людей •//Материалы Межгосу -дарст.научной конф. "Профилактика и меры борьбы с чу -мой",посв, 100-летию открытия возбудителя чумы.- . Ална-ТЫ, 1994. - С.247-248. [

8. Степанов В.М;.Мека-Иечеико. Т. В.. Гавр'плэк. о. В.. Нек-

расова Л.Е., Безрукова Л.е.. Дерновая В.Ф. К вопросу о лис-териозе и пастереллбзе домашней птицы. //Материалы Межгосу-дарст.научной конф."Профилактика и меры борьбы с чумой", поев. 100-летию открытия возбудителя чумы.-Алматы/1994. - С. 262-263. '

9. Соколов Г1-Н.. СуюновЖ. С... Безрукова Л. С., Есмагам-бетовЖ. 0.. Кальнсанов Г. К.. Сергазиев А. С., Некрасова Л. Е., Дерновая, В.Ф., Мека-Меченко Т. В. Распространенность зооноз-ных инфекций в Приаральских Каракумах // Здравоохранение Казахстана. - 1995. - й 4. - С. 20-22.

10. Дерновая В.Ф., Степанов'В. И.. Безрукова Л. С., Мека-Меченко Т. В., Некрасова Л. Е.. Семиотрочев В.Л., Лугов-скал А.К. Клинико-эпидемиологический спектр пастереллеза в Республике Казахстан. // Сборник тезисов" Здоровье населения Республики Казахстан и, пути его повышения". - Алматы, 1995.

СЛ17-120.

: il. Дерновая В.Ф., Тугамбаев Т.И. Диагностикум эритроци-тарчый пастереллезный антигенный липополисахаридный.' Стендовое сообщение. // Всероссийская научная конф." Иммунология и специфическая профилактика особо опасных инфекций" - Саратов, 1G93.. ■

МЕТОДИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

1. Степанов В. М., Безрукова Л. С.', Семиотрочев' В. Л. .■ Аймано-ва 0. Я.. Некрасова Л.Е-.. Дмитровский А. iL, Степанова A.A., Дерновая В.Ф., Цепко И.Н. Руководство по клинике,лечению, .эпидемиологии, профилактике и Лабораторной, диагностике пастереллеза. - Алматы,1993.-36 с.

2. Дерновая В.Ф_ Степанов В.М., Некрасова Л.Е., Безрукова- Л.С., Семиотрочев В.Л.. Методические рекомендации по применению иммуноглобулинового пастереллезного Ко-диагности-кума для индикации пастерелл-// Алматы, 1993. - 6 с.

3. Апсеметова U.A. / Дерновая В.Ф. Методические рекомендации но гигиенической экспертизе мяса и мясопродуктов // Алматы, 1995. - 13 с.

РАЦИОНАЛИЗАТОРСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1.Степанов В.М., Семиотрочев В.Л.. Безрукова Л.С., Дерновая В.Ф. Усовершенствование метода иммунизации кроликов для получения иммунной паетереллезной сыворотки ( Удостоверение Казахского противочумного НИИ 1! 2 от 21. 10.92)

2. Тугамбаев Т. И.. Дерновая В.Ф. Метод сенсибилизации форматированных эритроцитов ( Удостоверение Казахского противочумного НИИ N 1 от 21 мая 1996 г.)

3. Тугамбаев Т.И.. Лерновая В.Ф.- Схема иммунизации кроликов для получения гипериммунной пастереллезной сыворотки

( Удостоверение Казахского противочумного НИИ N 2 от 21 мая 1996г.)

4. Тугамбаев Т.И., Дерновая В.Ф. Способ экстракции антигена пастерелл и его очистка ( Удостоверение Казахского противочумного НИИ N 3 от 21 мая 1996г.)

Дерновап Валентина Фридрнховна

Пастереллдн биологиялык; касиеттер! жене пастервапезд1 лабораторияда аныкгау мэселелер!

Од,00.07 - микробиология

Медицина гылымдарыныц кандидаты дережесЫ any yuJiH уСынылтан диссертацияным

Кыск^ша мазмуны

Пастереллез- адамдарга nayinii, ауылщаруашылыгына экономикалык зор зиян тиг1зетЫ кеи xapafaH зооноз. Наукас xepiHici эралуан болгандыцтан пастерс:ллезд1 клиникалык, аныкдау ете киынта согады.Жумыстын кажетти /iiri пасгереллезд1 лабораторияда аныкдау тэс!лдерш1ц алсЬ,щпнде.

Республикада пастереппездж таралуы, табигатта аурудын коз1 болып .табылатын кем1рушшерди poni керсетшдк БелЫген пастереллез коздыру-шысынын культуралык, жэне биохимиялык касиегтер! уйрен'щд>> Р. multocida ныи манызынын артыцшылыгы керсет(лД1, TeHt3 шошкасыныи эритроциты ыдырататын tokcuh'i бар P. multocida sheer жана биовары белЫд!. Бактерияга карсы комплекст» терапияга к,ажет прелараттар тобы аныкталды, экономикалык тургыдан шы^ынды аз та лап етеш, эпидемиялык, туртыдан жорары акпаратты ашктагыш иммунореагенттер ¡степ шыгылды, оларды пайданапу нэтижесЫде алташ рет пастереллездМ адамдар арасьш-да 2 таралуы айк,ындалды. Осы препарагтарта нормативтИехникалык кужаттар дайындалды.

Summary

DKRNOVAYA VALENTIUA FRIDRIKHOVNA

TO BIOLOGICAL PROPERTIES Of PABTiSUREitLAS AND LABORATORY DIAGNOSIS OF PASTEURELLOSIS

Tor confirnation of the degree of the candidate of medical science

Codes 03.00.07 - microbiology

Pasteurellosis is the wide spreading zoonosis that creates an epidemic danger to people and inflicts the heavy economic losses on agriculture. The clinical diagnosis of pasteurellosis; is very difficult because this disease has multiform'clinical manifestations. The actuality of this scentific v.ork is conditioned by imperfection of laboratory diagnosis of pasteurellosis. Geographical distribution of pasteurellosis in Kazakhstan and the role wild and intradomestic rodents as the reservoirs of the infection in the nature are showed in the dissertation. The close study of cultural and biochemical properties of isolated pasteurellas revealed that P. multocida is predominant importance. New biovar P. multocida sheep producing toxin that causes lysis of guinea pig erythrocytes was isolated. The group of medicaments for complex antibacterial therapy is defined. Diagnostic immunoreagents being economically cheap and epidemiologically high informative were worked out. Their usititf had permitted us to reveal firstly two outbreaks of human pasti; urellosis. The normative technical■documentation for these reagents are made ready.