Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологически активные вещества из клеточных липидов азотфиксирующей бактерии Azotobacter Chroococcum

ВАК РФ 03.00.23, Биотехнология

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Придачина, Нина Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I Бактерии рода Azotobacter и перспективы использования их в сельском хозяйстве

Обзор литературы)

ГЛАВА П ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

1. Материалы и методы.

Характеристика штаммов . 37 Хроматографические препаративные методы выделения веществ

Хроматография в тонком слое (ТСХ) . 40 Спектрометрические методы идентификации веществ.

2. Выделение индивидуальных веществ из клеточных липидов Azotobacter chroococcum и исследование их химических и физикохимических свойств.

Биологические методы определения антибиотической активности

3. Получение препарата азотобактера

ГЛАВА Ш ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

1. Объекты исследования.

2. Липидные вещества клеток . 57 Выделение суммарных клеточных липидов, их разделение и идентификация . ♦

Нейтральные малополярные липиды(углеводо-роды, воска, триглицериды, убихиноны, фе-нольный липид) и антибиотик

3. Убихиноны.

4. Фенольный липид.

5. Антибиотик.

6. Полярные липиды.

ВЫВОДЫ.".

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологически активные вещества из клеточных липидов азотфиксирующей бактерии Azotobacter Chroococcum"

Предусмотренное Продовольственной программой дальнейшее повышение эффективности сельскохозяйственного производства требует внедрения научно обоснованной системы земледелия. Одним из средств, способствующих повышению урожайности полей, является использование удобрений для сельскохозяйственных культур. В этом аспекте заслуживают внимания бактериальные препараты, получаемые на основе свободноживущих бактерий Azotobacter chroococcum. Последние обладают широкими синтетическими возможностями, из которых наибольший интерес цредставляет их способность связывать азот воздуха, и тем самым, обогащать пахотный слой почвы, улучшая азотное питание растений. В СССР с 30-х годов широкое применение получил бактериальный препарат азотобактерин в качестве аналога азотных удобрений. Позднее было обнаружено, что те же вднфо-организмы способны синтезировать ряд биологически активных веществ, таких как, витамины группы В, ауксины, гиббереллины, кини-ны, которые оказывают стимулирующее действие на рост и развитие растений.

Новое направление в использовании азотобактера связано с отбытием его антибиотических свойств. Работами советских ученых впервые было показано, что некоторые штаммы образуют фунги-статические вещества, с широким спектром действия, что позволяет использовать эти организмы с целью оздоровления растений. /Мишуетин, Петрова, 1958; Мишустин и др., 1969/. В этом направлении ведется работа в лаборатории бактериальных удобрений Всесоюзного научно-исследовательского института ми1фобиологичес-ких средств защиты растений и бактериальных препаратов (ВНИИбак-препарат). В ходе исследования почв различных почвенно-климати-ческих зон из 56$ образцов, полученных из южной зоны СССР, были выделены и отселектированы штаммы азотобактера, обладающие антибиотической активностью в отношении фитопатогенных микроорганизмов /Новогрудская, 1973; Алешина и др., 1976/. В настоящее время во ВНИИбакпрепаратов разработана технология получения сухого препарата азотобактерина, в котором сохраняется максимальное количество живых клеток, способных синтезировать наряду с ростоак-тивирующими агентами антибиотические вещества, подавляющие рост фитопатогенных грибов /Алешина и др., 1981; Орловский и др., 1982/. Многолетние испытания опытных образцов совместно с Куйбышевским, Костромским, Волгоградским и Воронежским сельскохозяйственными институтами показали эффективность сухого препарата при использовании его под овощные культуры. Применение азотобактерина снижает количество растений, пораженных болезнями, способствует повышению урожая на II-42&, улучшает качество урожая /Новогрудская и др., 1978; 1981/.

Создание наиболее ценных удобрений должно базироваться на отборе оптимальных культур азотобактера, что, в свою очередь, связано с всесторонним исследованием физиологии, биохимии и химии этих мшфоорганизмов.

В настоящее время достаточно подробно изучены аминокислотный состав суммарного белка и свободных аминокислот азотобактера /Зайцева, 1965/, азотфиксирующая активность различных штаммов /Федоров, 1952 ; Рубенчик, I960; Зиновьева, 1962 ; Мишустин, 1972; Новогрудская, 1973/, способность к витаминообразованию /Красильников, 1958 ; Наумова, 1961; Мишустин и др., 1968 ; Новогрудская, 1973 /, к образованию антибиотика /Мишустин и др., 1958; 1969; Новогрудская, 1973/. Однако, до сих пор отсутствуют какие-либо сведения о таких важнейших компонентах бактериальной клетки как липиды, которые во многом определяют ее жизнеде

- б ятельность. Кроме того, липиды и липофильные вещества могут представлять специальный интерес в силу своей биологической активности. Что же касается антифунгальных веществ, то пока они не были получены в химически чистом виде, что в значительной степени затрудняет стандартизацию бактериальных препаратов по антибиотической активности. Очевидно, что исследования в указанных направлениях будут способствовать более эффективному практическому использованию азотобактера.

Целью настоящего исследования является изучение клеточных липидов культуры азотфиксиругощей бактерии Azotobacter chroococ-СШ1 92, выделение, очистка, изучение химических и физико-химических свойств новых липидов и липофильных метаболитов, в том числе антибиотика, обладающего активностью в отношении грибов, возбудителей болезней растений.

Заключение Диссертация по теме "Биотехнология", Придачина, Нина Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Исследован состав клеточных липидов азотфиксирующей бактерии Azotobacter chroococoum 92.

2. Из клеточных липидов в хроматографически гомогенном состоянии выделен фенольный липид, который охарактеризован как 5-алкил (CjgjCgj) резорцин. Показано, что этот липид является доминирующим в клеточных липидах исследованных культур рода Azotobacter на основании чего предложено рассматривать присутствие указанного резорционолипида как хемотаксономический признак данного'рода. Разработан способ получения 5-алкилрезорци-нов, которые перспективны как дешевые и легкодоступные антиок-сиданты.

3. Разработан способ выделения и очистки противогрибкового антибиотика, цродуцируемого культурой Az.chroococcum 92, Изучены химические и физико-химические свойства антибиотика ; установлено, что последний представляет собой метиловый эфир алифатической тетраеновой кислоты, содержащей гидроксильную и О-метильную группы и является новым соединением, ранее неописанным. Изучен спектр действия антибиотика в отношении фитопа-тогенных грибов.

4. Предложен.способ получения бактериального препарата на основе штамма Az.chroococcum 92, содержащего новый противогрибковый антибиотик.

5. Разработан спектрофотометрический метод определения антибиотика в культуре цродуцента и в сухих препаратам, полученных на ее основе.

6. Из суммарных клеточных липидов исследуемой культуры выделены фракция убихинонов, охарактеризованная как смесь ко-ферментов q 7 и Q д, а также неизвестные ранее жирные ди-, трикетокислоты и полиольный гликолипид.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Придачина, Нина Николаевна, Москва

1. Алешина О.А., Новогрудская Е.Д., Шнейдер Е.Ю. Распространение Azotobactej? образующего антибиотические вещества и перспективы его использования. Тезисы докл. на У съезде Всес.микробиол.общ-ва. Ереван,1975, с.51-52.

2. Алешина О.А., Новогрудская Е.Д., Чекасина Е.В. и др. Способ получения бактериального удобрения. А.с.922105 (СССР). 0публик.23,04 1982, И.б. № 15.

3. Алешина О.А., Новогрудская Е.Д., Чекасина Е.В. и др. Штамм Azotobacter chroococcum (ВНИИбакцрепарат)-107,образующий антигрибной антибиотик. А.с. 522931 (СССР).0публик.05.08. 1976, И.б. № 29.

4. Бабак Н.М. Синтез витамина Bjg различными культурами азотобактера. Тр.Молд.ин-та орошаемого земледелия и овощеводства. Кишенев, 1964, вып.5, № 2, с.40-45.

5. Батраков С.Г., Придачина Н.Н., Кругляк Е.Б., Новогрудская Е.Д., Бергельсон Л.Д. Фенольный липид из Azotobacter chroococcum Химия цриродн.соцд., 1977, № 4, с.494-499.

6. Батраков С.Г., Придачина Н.Н., Кругляк Е.Б., Новогрудская Е.Д., Чекасина Л.В. Жирные ди- и трикетокислоты из клеток азотфикеирующей бактерии Azotovacter chroococcum. Био-орг.химия, 198I, т.7, № 4, с.574-585.

7. Батраков С.Г., Придачина Н.Н., Кругляк Е.Б., Новогрудская Е.Д., Чекасина Е.В. Необычный полиольный липид, 2-С-^-Д-талопиранозил-5-алкил(С|д,С2|) резорцин из азотфикеирующей бактерии Azotobacter chroococcum . -Биоорг.ХИМИЯ, 1982,т.8, № 7, с.980-995^

8. Багдасарян Е.Г. Образование витамина Bjg почвенными бактериями. Микробиология, 1965, вып.34, № 3, с.502-505.

9. Барашкова Н.П., Шенин Ю.Д., Мясникова Л.Т. Actinomyces pneumonitis v§r.altamicus var.nov. -цродуцент новых антибиотиков алтамицинов. Антибиотики, 1976, вып.21, № 6, с.487-491. Ю.Бачинская А.А. О строении и развитии азотобактера. - Тр.

10. Беллами Л. Инфра!фасные спектры сложных молекул. -М.:ИЛ, 1963, с.583.

11. Бельтюкова К.И. Влияние азотобактерина на пораженность сельскохозяйственных растений бактериальными болезнями.-В кн.: Воцросы применения бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1953, с.113-128.

12. И.Березова Е.Ф., Наумова А.Н., Разницына Е.А. О природе дей-стия азотогена. Докл.АН СССР, 1938, вып.ХУШ, № 6, с.357-362.

13. Березова Е.Ф. Роль микроорганизмов в сельском хозяйстве.- В кн.: Получение и црименение бактериальных удобрений. М.: С.-х.литература, 1955, с.93-119.

14. Березова Е.Ф. О сущности действия бактериальных удобрений.-В кн.: получение и црименение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1958, с.23-28.

15. Берне Р. Механизм реакции молекулярного азота. В кн.: Проблемы фиксации азота. М.: Мир, 1982, с.433-453.

16. Беррис Р. Ранний период развития биохимии фиксации азота.- В кн.: Проблемы фиксации азота. М.: Мир, 1982,с.337-351.

17. Блинков Г.Н. Азотобактер и его значение для высших растений. Томск: Томский университет, 1959, с.252.

18. Блинов Н.О., Хохлов А.С. Бумажная хроматография антибиотиков. М.: Наука, 1970, с.364.

19. Бойсен-Иенсен П. Ростовые гормоны растений. М.: Биомедгиз, 1938, с.24-45.

20. Бородулина Ю.С., Самсонова С.Г., Кронгауз Е.А. Петрушен-ко О.П. С кн.: Производство и применение сухих бактериальных удобрений в СССР. М.: ОНТИТЭИмикробиоцром, 1972, с.28

21. Брундза К. Миьдэобиологические процессы в почвах и урожайность с.-х.культур. Вильнюс,: 1978, с.117.

22. Бычковская А.З., Шкляр М.З. Устойчивость цист азотобактера к неблагоцриятным воздействиям. Тр. ВНИИ с.-х. микробиол. М.: 1965, вып.19, с.9-19.

23. Вайсбергер А. Установление структуры органических соединений физическими и химическими методами. М.: Химия,1976,с.531.

24. Виноградский С.Н. 0 синтезе аммиака азотобактером. В кн.: Микробиология почвы. М.: АНСССР, 1952, с.641-644.

25. Виноградский С.Н. 0 синтезе аммиака азотобактером. В кн.: Микробиология почвы. М.: АН СССР, 1952, с.647-660.

26. Виноградский С.Н. Новые исследования по морфологии и физиологии азотобактера. В кн.: Микробиология почвы. М.: АН СССР, 1952, с.667-680.

27. Виноградский С.Н. К морфологии и экологии азотобактера.-В кн.: Микробиология почвы. М.: АН СССР, 1952, с.691-725.

28. Винтика Я. Некоторые вопросы использования азотобактерина в ЧССР. В кн.: Бактериальные удобрения. Л.: Колос, 1964, с.136-150.

29. Гвамичева Н.Э. Микроорганизмы как один из источников накопления витаминов в почве. Сообщ. АН ГрССР, 1962, вып.28,2, с.223-226.

30. Гебгардт А.Г. Некоторые пути повышения эффективности азотобактерина. В кн.: Воцросы црименения бактериальных удобрения. Киев: АН УССР, 1953, c.IOI-III.

31. Гебгардт А.Г. Некоторые данные о механизме действия на растения азотобактера. В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1958, с.38-46.

32. Гинсарь A.M. Влияние азотобактерина на повышение урожайности овса и ячменя в производственных условиях. Автореферат канд.дис.на соискание уч.ст.канд.биол.наук. Одесса с.-х. ин-т. Киев: 1954, с.21.

33. Дитинова Л.В. Синтез витаминов В бактериями. Успехи зоотехн.наук. 1937, вып.2, с.175-179.

34. Доросинский Л.М. Глубинное выращивание азотобактера. -В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: BE УССР, 1958, с.209-215.

35. Доросинский Л.М. Бактериальные удобрения. М.: Сельхозгиз, 1959, с.63.

36. Доросинский JI.M. Бактериальные удобрения дополнительное средство повышения урожая. М.: Россельхозиздат, 1965, с.173.

37. Дятловицкая Э.В., Янчевская Г.В., Бергельсон Л.Д. Липиды опухолей. Сравнительное изучениефосфолипидов почек и не-фромы крыс. Биохимия, 1973, т.38, вып.6,с.1186-1191.

38. Зайцева Г.Н. Биохимия азотобактера. М.: Наука, 1965, с.303.

39. Зиновьева Х.Т. Азотобактер и сельскохозяйственные растения. Киев: Сельхозгиз, 1962, с.178.

40. Зиновьева Х.Т., Клюшникова Т.М. Синтез витаминов культурами Azotobacter chroococcum f адаптированными с некоторыми с.-х. растениями. Мэ-нроб^-ол.ж., 1962, вып.24, № 6,с.26-31.

41. Иконникова М.И. Новый метод повышения урожайности с.-х. культур путем цредпосевной обработки янтарной кислотой. М.: Сельхозгиз, 1952, с.57.

42. Имшенецкий А.А. О филогении Azotobacter chroococcum Микробиология, 1964, т.15, вып.6, с.459-469.

43. Карпинская Н.С. К воцросу о влиянии растения на усвоение свободного азота в почве. Изв.Тимирязевск.с.-х. акад., 1928, № 3, с.121-123.

44. Кейтс М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975, с.322.

45. Клюшникова Т.М., Квасников Е.И. Образование витаминов группы В азотобактером в условиях глубинного культивирования.-М1кроб1ол.ж., 1966, вып.28, с.13-17.

46. Квасников Е.И. Экологические основы применения бактериальных удобрений в условиях Средней Азии. В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР,1958, с.86-92.

47. Коган JI.M., Обольникова Е.А., Замуренко В.А. и др. Идентификация убихинонов в некоторых промышленных микроорганизмах. Прикл.биохимия и ми1фобиол., 1981, т.ХУЛ,вып.5, с.720-723.

48. Костычев С.П., Шелоумова A.M., Шульгина О.Г. Микробиологическая характеристика южных почв. Азотный режим южного берега Крыма. Тр.отд.с.-х.микробиол. Гос.ин-та опытной агрономии, 1926, выпД, с.5-46.

49. Костычев С.П., Шелоумова A.M. связывание атмосферного азота и образование аммиака азотобактером. Изв.ЕН СССР, 1931, с.661-667.

50. Красильников Н.А. История развития азотобактера в связи с цроблемой полиморфизма. Микроб!ол.ж., 1931, вып.1,с.16-23.

51. Красильников Н.А. Определитель бактерий и актиномицетов. -М.-Л.: АН СССР, 1949, с.502-505.

52. Красильников Н.А. Мищюорганизмы почвы и высшие растения. -М.: СССР, 1958,с.244-274.

53. Кретович В.Л., Любимов В.И. Биохимия фиксации азота. Природа, 1964, № 12, с.14-20.

54. Крупина Л.И. Образование гетероауксина различными штаммами азотобактера. Бюл.науч.-техн.информ. по с.-х. микро-биол. Л.: I960, вып.8, с.П-13.

55. Куликовская М.Д. Влияние азотобактера на динамику азота и некоторые группы микроорганизмов в почве. Автор.дис. на соискание уч.ст.канд.биол.наук. Киевский гос.ун-т им.Шевченко, Киев: 1955, с.14.

56. Линчевская М.Л., Калиберда В.М. Влияние бактериальных удобрений на урожай картофеля. В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, №8,с.203-207.

57. Летунова С.В, Образование витамина Bjg различными видами актиномицетов и бактерий, выделенных из илов кобальтовых биогеохимических цровинций. Микробиология, 1958, т.27, вып.4, с.429-435

58. Марго А.А. К воцросу о физиологически активных веществах азотобактера. В кн.: Исследование почв и применение удобрений. Минск: Урожай, 1964, с.40-50.

59. Марьенко В.Г. Шунгистатическое действие Azotobacter chroococcum Докл.Моск.с.-х. адад.им.Тимирязева, 1963, вып.84,с.301-306 ; вып.89, с.328-333.

60. Марьенко В.Г. §унгистатическая активность экологических штаммов Azotobacter chroococcum Докл.Моск.с.-х. акад. им.Тимирязева, 197I, вып.169, с.188-195

61. Мейсель М.Н., Помощникова Н.А. Простой микробиологический метод определения пиридоксина. Биохимия, 1952, т.17, вып.5, с.593-599.

62. Мелконян Ж.С., Будагян Е.Г. Антагонистическое действие азотобактера на фитопатогенные грибы и бактерии. Тр.НИИ мищюбиол. АН АрССР, Ереван, 1981, вып.8, с.78-83.

63. Миненков А.Р. Азотобактер как фактор повышения урожайности. Тр.Горьков.гос. с.-х. ин-та, 1939, вып.2, с.61-67.

64. Мишке И.В., Зикманис П.Б. Проверка эффективности действияОhi -изопентил)аденина на Az.chroococcum 48 методом бумажных дисков. Изв.АН Латв.ССР, 1974, т.5, с.90-92.

65. Мишустин Е.Н. О принципе районирования азотогена. В кн.: Воцросы црименения бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1953, с.26-31.

66. Мишустин Е.Н., Петрова А.Н. Антагонистические взаимоотношения микроорганизмов ризосферы и эффективность азотобактерина. В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1958, с.29-31.

67. Мишустин Е.Н., Наумова А.Н. Бактериальные удобрения, их эффективность и механизм действия. Мигфобиология, 1962,т.32, вып.З, с.542-555.

68. Мишустин Е.Н., Наумова А.Н., Хохлова Ю.М. и др. Антифунгаль-ный антибиотик из культуры Azotobacter chroococcum Микробиология, 1969, т.39, вып.1, с.87-90.

69. Мишустин Е.Н. Микроорганизмы и продуктивность земледелия.-М.: Наука, 1972, с.298-304 ; 322-332.

70. Мишустин Е.Н., Татарова Н.И., Марьенко В.Г. Выделение азотобактером соединений кининного ряда. Изв.Моск.с.-х. акад.им.Тимирязева, 1975, вып.4, с.225-227.

71. Мишустин Е.Н., Черепков Н.И. Биологический азот как источник белка и удобрений. Изв.АН СССР, сер.биол., 1979, вып.5, с.656-678.

72. Мишустин Е.Н., Черепков Н.И. Биологический азот в сельском хозяйстве. -Природа, 1981, № 5, с.28-35.

73. Муромцев Г.С. Результаты исследований по получению и применению гиббереллина. В кн.: МО и эффективность плодородия. М.: Ш СССР, 196I, с.27-31.

74. Муромцев Г.С., Нестюк М.Н. Количественное колориметрическое оцределение гибберелловой кислоты. Вест.с.-х.науки, I960,2, с.I19-122.

75. Наумова А.Н., Мишустин Е.Н., Марьенко В.Г. Природа действия бактериальных удобрений (азотобактерина, фосфобактери-на) на сельскохозяйственные растения. Изв.АН СССР, сер. биол., 1962, вып.5, с.709-717.

76. Наумова А.Н.АЭотобактерин и его эффективность . В кн.: Биологический азот и его роль в земледелии. М.: Наука,1967, с.266-280.

77. Нахимовская М.И. Синтез ростовых веществ типа "биоса" почвенными бактериями. Микробиология, 1941, с.10, вып.6,с.688-700.

78. Новогрудская Е.Д. Некоторые показатели отбора цромышленно-ценных штаммов азотобактера. В кн.: Антибиотики в борьбе с болезнями с.-х. культур. М.: ОНТИТЭИмикробиоцром, 1973, с.23-32.

79. Новогрудская Е.Д. Синтез витаминов группы В производственными штаммами азотобактера. Мшфобиол.пром-сть, 1973,1. II, с.22-25.

80. Новогрудская Е.Д., Петрушенко О.П., Чекасина Е.В. и др. Бактериальный препарат сухой азотобактерин и его влияниена урожай овощных культур. В кн.: Микробиологические процессы в почвах и урожайность с.-х. культур. Вильнюс,1978, с.251-252.

81. Новогрудская Е.Д., Чекасина Е.В., Шнейдер Е.Ю. Влияние углеродного компонента питательной среды на образование антибиотических веществ в культуре азотобактера. В кн.: Микробиологические средства защиты растений. М.: ОНТИТЭИмикро-биопром, 1980, с.83-88.

82. Новогрудская Е.Д., Чекасина Е.В., Макеев Г.В. и др. Азотобактерин как средство снижения пораженности растений болезнями. В сб.: Препараты микробного синтеза сельскому хозяйству. М.:0НТИТЭИми1фобиоцром, 1981, с.109-114,

83. Новоселова Е.Г., Перепелкина Н.И., Коломицева Н.К. и др. Нормализация убихиноном-9 липидного состава ми!фосом печени облученных крыс. Радиобиология, 1979, вып.19, № 4,с.572-575.

84. Одинцова Е.Н. Ми1фобиологические методы определения витаминов. М.: АН СССР, 1959, с.209-323.

85. Орловский В.И., Чекасина Е.В. Ми1фобиологические црепараты повышающие плодородие почв. Ж.Всес.хим.об-ва им.Менделеева, 1982, вып.ОТП, № б, с.28-30.

86. Омелянский В.Л. Морфологические и цитологические исследования над азотофиксиругощими бактериями. Архив биол.наук, 1916, вып.XX, с.24-55.

87. Омелянский В.Л.Связывание атмосферного азота почвенными микробами. М.: АН СССР, 1923, с.3-186.

88. Петрушенко О.П., Желнова Г.С. Влияние питательной среды и физиологического состояния посевной культуры на титр азотобактера цри глубинном выращивании. Микробиол.пром-сть, 197I, вып.З, с.20-22.

89. Петрушенко О.П., Желнова Г.С., Новогрудская Е.Д. Сохранение биологически активных веществ,синтезируемых азотобактером, в сухом препарате. В сб.:Антибиотики в борьбе с болезнями с.-х. культур. М.: 0НТИТЭИми1фобиопром, 1973, вып.2, с.31-37.

90. Петрушеко О.П., Желнова Г.С., Чекасина Е.В. и др. Азотобактерин в растениеводстве. Земледелие, 1977, № 3, с.66-67.

91. Полонская М.С., Короткова B.C., Храпцова Г.И. Азотобактер, выделенный из организма животного. В кн.: Антибиотики в борьбе с болезнями с.-х. культур. - М.:ОНТИТЭИмшфобиопром, 1973, с.110-118.

92. Прида^чина Н.Н., Новогрудская Е.Д., Кругляк Е.В., Чекасина Е.В., Корчак Т.В., Батраков С.Г. Azotobacter chroococcum-продуцент нового противогрибкового антибиотика. Антибиотики, 1982, № I, с.3-5.

93. ЮО.Прида^чина Н.Н. Исследование внутриклеточной липидной фракции из азотфиксиругощей бактерии Azotobacter chroococcum штамм 92. В сб.: Технология производства и эффективность применения бактериальных удобрений. М.: ОНТИТЭИми^фобио-цром, 1982, с.83-90.

94. Ю1.Разницына Е.А. Образование бактериями ростовых веществ типа ауксинов. Докл.АН СССР, 1938, вып.18, № б,с.353-357.

95. Ратнер Е.И., Доброхотова И.Н. К познанию црироды влияния витаминов на активность корней при усвоении растениями минерального азота. ДАН СССР, 1958, вып.122, № 5, с.944-947.

96. ЮЗ.Рубенчик Л.И. Бактериальное удобрение. Ми1фобиология, 1956, т.25, вып. 2, с.Ш-242.

97. Рубенчик Л.И. Физиология азотобактера, Ми1фобиология, 1958, т.ХХУП, вып.4, с.503-511.

98. Ю5.Рубенчик Л.И. К систематике бактерий из семейства Azotobacte-reaceae Ми1фобиология, 1959, т.ХХУШ, вып.3,с.328-337.

99. Юб.Рубенчик Л.И. Азотобактер и его использование в сельском хозяйстве. Киев: АН УССР, I960, с.252.

100. Рубенчик Л.И., Смалий В.Т., Зинввьева Х.Г. и др. Образование витаминов микроорганизмами ризосферы сельскохозяйственных растений. В кн.: Роль микроорганизмов в питании растений и повышение эффективности удобрений. JI., Сельхозгиз, 1965, с.14-21.

101. Самойлов И.И. Современное состояние производства и применения бактериальных удобрений в СССР. Тр.совещ.по вопросам наиболее эффективных способов использования минеральных, органических и бактериальных удобрений.-М.:Сельхозгиз, 1957, с.27-29.

102. Ю9.Самцевич С.А. Влияние мищюбных црепаратов на развитие в степи сеянцев дуба и ясеня. В кн.: Получение и применение бактериальных удобрений. Киев: АН УССР, 1958,с.160-166.

103. ПО.Сандрак Н.А. Внеклеточные метаболиты азотобактера. Кише-нев: ШТИИЦ, 1978, с.94.

104. Ш.Сардарьян Э.О., Шкляр М.С. Выделение и изучение антибиотических веществ ИЗ культуры Azotobacter chroococcum Ми-|фобиол.синтез, 1969, № 3-4, с.П-14.

105. П2.Сардарьян Э.О. 0 связи цроцессов образования пигментов и синтеза физиологически активных веществ Azotobacter chroococcum Биол.ж. Армении, 1974, вып.ХХУП, № II, с.23-29.

106. ПЗ.Сидоревич Н.Г. Триходермин и парша картофеля. Защита растения, 1979, № 7, с.32-34.

107. П4.Смалий В.Т., Бершова О.И. Образование гетероауксина и пан-тотеновой кислоты в цроростках пшеницы. Мцфобхол.ж. АН УССР, 1962, вып.24, № 2, с.15-19.

108. П5.Сушкина Н.Н. Эколого-географическое распространение азотобактера в почвах СССР. М.-Л.: АН СССР, 1949, с.252.

109. Татарова Н.К., Мишустин Е.Н., Марьенко В.Г. 0 природе действия азотобактера на высшие растения. Изв.АН СССР, сер.биол., 1975, № 4, с.565-569.

110. Турецкая Р.Х. Методы определения ростовых веществ на корне-образование. Докл.АН СССР, 1974, вып.57, № 3, с.292-297.

111. Федоров М.В. Биологическая фиксация азота атмосферы. М.: Сельхозгиз, 1952, с.187-217 ; 257-280.

112. Хайс И., Мацек К. Хроматография на бумаге. М.: ИЛ, 1962, с.729-731.

113. Хохлова Ю.М. Классификация и идентификация противогрибковых антибиотиков по хроматографическим спектрам. Изв. АН СССР, сер.биол., 1966, № 3, с.43-53.

114. Чайлахян М.Х. Закономерности онтогенеза и физиология зацветания высших растений. Изв.АН СССР, сер.биол.,1960, № 2, с.206-229.

115. Чекасина Е.В., Анискина З.Н., Белова Р.Н. и др. Разработка технологии производства бактериальных удобрений. -В сб.: Микробиологические средства защиты растений и бактериальные препараты. М.:0НТИТЗИмикробиоцром, 1978, с.73-83.

116. Шавловский Г.М. Участие ми1фоорганизмов ризосферы в снабжении растений витаминами. Докл.АН СССР, 1954, вып.95, № 5, C.II0I-II04.

117. Шевчук В.Е. Азотобактерин. В кн.: Бактериальные удобрения в Восточной Сибири. Восточно-Сибирское изд-во, 1964, с.98-108.

118. Шелоумова A.M., Протодяьконов О.А. Роль азотобактера в азотном питании высших растений по данным вегетационных опытов. Тр.ин-та с.х. микробиол., 1930, выпЛУ, с.41-47.

119. Шелоумова A.M. Азотоген бактериальное удобрение и его применение. Л.; Сельхозгиз, 1938, с.57.

120. Шелоумова A.M. Сущность действия азотогена. Мшфобиоло-гия, 1941, т.Х, вып.1, с.33-42.

121. Шкляр М.С., Сардарьян Э.О. Использование бактерий антагонистов для борьбы с возбудителями альтернариоза капусты грибом Altemaria sp. Изв.АН СССР, сер.биол.,1969, № 5, с.659-661.

122. Шпокаускас А.К., Пакарскте К.И., Далючите Я.А. Распространение азотобактера в почвах Литовской ССР, его азотфикси-рующая активность, биосинтез витаминов В. Тезисы докл. Всесоюзн.конй.по с.-х. микробиол. Л.: I963,c.I3I-I32.

123. Э'делыптейн В.И. Биологические основы получения высококачественной рассады. Сад и огород, 1954, № I, с.10-12.131*Alte R., Shende S. Studies on Azotobacter chroococcum»

124. Morphological, biochem» a physiological character of Az. chroococcum. Zbl.Bacterid.,Parositenk,Infektionskrankh und Hyg. 1981, v.136, p.548-554.

125. Azcon R., Barea J. Synthesis of auxins, gibberelins and cytokinins by Az. vinelandii, Az» beijrinkii related to effect produced on tomato plants. Plant and Soil 1975» v.43, N 3, p.609-619.

126. Azim M., Saraf S. Effect of Azotobacter ofi fixed nitrogen.-Biochem. et biophys. acta. 1956, v.21, N 2, p.321-327.

127. Becking J. Ins Bergey's manual of determination bacteriology. Buchanan a gibbon eds. The Y/illiams a Wilkins Co. 8th Baltimore, 1974, p*253.

128. Beijerink M. Uber Oliginitrophile Microben Zbl.Bacterid. Parasitenk Infektionskrankh. und Hug 1901, v.2, N 7,p.561-5661

129. Bishop Н», Pandya K., King H. Ubiguinone andvitamine К in bacteria. Biochem. J. 1962, v.83, р.б0б*б14.

130. Bisset K., Hale C. The cytology and life cycle of Az.chro-ococcum J.Gen.Micfcobiol. 1953, v.8, N 3, p.442-445.

131. O.Blom J. Bin Versuch der chemishen Vorgangebei der Assimilation des molekularen Stickstoffs durch Microorganismen zu erklaren Zbl Bacterid., Parasitenk. Infektionskrankh und Hyg 1931, v.2, К 84, p.60-63.

132. Bonner J. The role of vitamins in plants development Bot. Rev. 1937, v.3* N 12, p.616-619.142,Brockmann Н», May H., Jenk W. e.a. Die Konstitution des bimocrocins Chem Ber, 1969, v.102, И 9, p.3217-3227.

133. H3.Bukatsch F.,.Heitzer J., Beitrage zur kennthis der Physio-logie von Azotobacter Arch. Micfcobiol. 1952, v.17, ^ 1, p.79-96.

134. Burris R#, Wilson W. Utilisation of combined nitrogen by Azotobacter J.Bacteriol943, v.45, К 1» p.17-25

135. Burris R, Studies on the mechanism of biological nitrogen fixation. Sympos on Inorganic Nitrogen Metabolism Baltimore 1956, p.316,

136. Calancea L. Actiumea stimulatore a bacteriei Az.chroococciuji asupra germinarii griului in presenta microelementelor. -Microbiol. Bucuresti, t970, v.1, p.525-529

137. Carnahan J., Mortenson I»., Mower H. e.a.Nitrogen fixation in cell-free extracts of Clostridium pasteurianum* -Biochem et Biophys Acta, 1960, v.38, . N 1, p.188-191.

138. Cohen Q., Johneston D# Acid production bjt Az «vinelandii-Nature, 1963, v.198, 4876, p.211-215.

139. Daves J.,.Muraca R., Whittic J. e.a. Discovery of Ubigui-none-1,-2,-3 and -4 and the Nuture of Biosynthetic Isoprenylation. Biochemistry, 1967, v.6, p.2861-2871,

140. Eichbera I., Whittaker V., Dawson R. Distribution of lipids in subcellular, particles of guinea pig brain. Biochem. J.,1964, v.92, Ы 1, p.91-100

141. Eisenstark A., MeMahon K., Zisenstark R. A cytological study of a pleomorphie strain Azotobacter with the electron and phase microscope and Robinow nuclear-straining techigue. J.Bacteriol., 1950, v.59, H 1, p.78-87.

142. Folch J., Lees M., Sloane.Stanly G.A. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J.Biol. Chem., 1957, v.226, p.497-499.

143. Folkers K*, Woodruff H.t Fermentation production of Coenzyme Q1q. Patent 3066080 (USA) 01. 195-96.

144. Folkers K,, Jamamura J. Elsevier Biomedical and clinical aspect.of coenzyme Q. North-Holland and Biomedial Press, 1977, p.271.

145. Friis P., Daves J., Folkers K. Isolation of ubiguinones, new member of ubiguinone group, Biochem. et Biophys. Res..Commun. 1966, v.24, H 3, p.252-257»

146. Gassinelli G., Green A., Orezzi P. Hew Antibiotics priduced by, Streptoverticillium orinoce, Acrh.Microbiol. 1967,v.55, N 4, p.358-368.

147. Georhin V., Manuca J., Vintu 0. Contribution to the study of. the efficiency term of the Azotobacter.bacterial fertilizer* Lucrari stintifice Bucureshti,1960,V 2, p.57-70.- 132

148. Grane P., Hatcfi G., Lester R. e.a. Isolation of a quinone from beet heart mitochondria. Biochem. et biophys.acta. 1957, v.25, N 3, p.220-221.

149. Greaves J., Jones L., Lones W. Inoculation of solid with Az.chroococcum. Soil Sci. 1942, v.53, p. 229-231.

150. Gupta G., Das N. Prelimanary sturies on the synthensis of vitamin B^2 ЪУ Azotobacter chroococcum. Sci and Cult., 1959, v.25, N 2, p.149-153.

151. Harper S., Lynch J. Effect of Az,chroococcum on berley seed germination development and seedling. J.Gen.Microbiol., 1979, v.112, N 1, p.45-51.

152. Horvath G., Geimesi J., Mehesfalvi Vajna Z. The structure of olefin a new polyenic autibiotic axhibiting activity. -Tetrahedron Lett., 1973, v.37, p.3643-3648.

153. Jensen H, Azotobacteriaceae• Bacteriol. Rev., 1954, v.18, N 4, p.195-197.

154. Jensen H.L. Note on the biology of Azotobacter. Proc.Soc. Appl. Bacteriol., 1951, v.14, N 1, p.89-94.

155. Imam M., Badowy P. Effect of Azotobacter inoculation on the characters.of carrot radish and chilli., Potato Res., .1978, v.21, N 1, p.1-8.

156. Iswaran V. Stimulatory action of Az.chroococcum on germination of . seed of rye. Sci. and Cult., 1976, v.42, N 3, .p.162-165.

157. Jeckson.R., Brown M., Burlingham S. Similar effects on. tomato plants of Azotobacter.inoculation and application, of gibberellins. -Nature, 1964, v.203, t.4947,p.851-852*

158. Jones J., Collins.P. Influence of Azotobacter.on germination of cotton seed. A canses Parm Res.,1979,v.28, N 2, p.2-7.

159. Kaneshizo 0?., Marr A. Phospholipids of Az. agilis, Agro-bacterium tumefaciens and E. coli. J.lipid Res.,1962, v.3, N 2, p.184-193.

160. Kaneshizo Т., Marr A. Hydroxy fatty acids of Azotobatfter agilis. Biochim et biophys acta, 1963, v.70, N 3,p.271-289.

161. Khullar S., Ohahal V., Kaur P. Effect of Azotobacter inoculation on the chlorophyl contents and other characters of carrot, radish, brinjal and chilli. Indian J.Microbiol., 1978, v.18, N 2, p.138-140»

162. Konde В., Dhage В., More B. Compatibility of pesticides with Azotobacter. J. Maharshtra Agr. Univ.,. 1981, v.6, H 1, P.77-79.

163. Kondo K., Qamada G. Method of producting coenzyme Q10 by Microorganism. Patent 3769170 (USA).

164. Kumagai M., Suhara J., Aoyagit e.a. En enzyme inhibitor panosialin II. Chemistry.of panosialin 5-alkylbenzene-1,3~ . desulfate. J. Autib.,,1971, v.24, p.860~878.

165. Lee. SBurris R.batge-scale.production of.Azotobacter. Ind. a engineer, 1943, v.35, p.333-357, 381.- 134

166. Macura J., Kotkowa M. The continuous cultivation of Azotobacter. Ceskosl. biol., 1953, v.2, H 1, p.41-45.

167. Madrigal R., Spencer G., Plattner R. e.a. Alkylresorcinols in Rapanes Lactevirens seed lipids. lipids, 1977» v.12,1. N 4, p.402-406. .

168. Marcus L., Kaneshiro T. lipids composition of Azotobacter vinelandii in which the internal membane network is induced- 135 or repressed. Biochem. et biophys. acta, 1972, v.288, N 2, p.296-304.

169. Marr A., Kaneshiro T. Lipids of cell envelops of Azotobacter vinelandii. Bacteriol. Proc, Abstr., i960, v.1, N 1,1. P.63-65.

170. Martin J., Ervin J., Shepherd R. Decomposition and binging action of polysyccharides from Azotobacter indicum and other bacteria soil. Soil Sci. Soc. Amer. Proc., 1965» v.29, N 4, p.397-399.

171. Martin J., Ervim J., Shepherd R. Decomposition of the complexes salfs of some microbial and plant polysaccharides in soil. Soil.Sci. Soc. Amer. Proc., 1966, v.30, N 2,p.196-200.

172. Mobin. Associative symbiosis of Az.6h.roo с о ccum and higher plant. Zbl. Bacteriol. Parasitenk Infektionskrankh. Hug,1979, v.134, N 2, p.133-148.

173. Morris H., Giddens J., Brown A. Effect Azotobacter inoculation on. growth of crops. La Agric. Res., 1978, v.19» t.3, p.1-9.-•

174. Norris J. Notes on the classofication of the family Azoto-bacteriacea. Glasgow, Dept. Bacterid., 1960.

175. Parker L., Socolofsky M. Central body of the Azotobacter cyst» J. Bacteriol., 1966, v.91, t.1, p.297-303.

176. Prazmovski A. Azotobacter studien I.Morphologie und Cytologie. -Ball. Acad Sci., 1912, v.7, p.855-861

177. Pridham T. Microbiol, synthensis of riboflavin. Econom. Botany, 1952, v.6, p.185-206.

178. Rao S., Iswaran V. Individual and combined effect of bacterial and algal inoculation on the yield of rice. Curr. Sci., 1977, v.46, N 2, p.50-51.

179. Reczek E., Burton D. Effect of oxygen Tension.on the lipid composition.of Azotobacter.chroococcum. Can. J. Microbiol., 1979, v.25, t.1, p.1239-1244. . . .

180. ReuschR., Sadoff H. lipid Metabolishm guring encystmentof Az.vinelandii. J.Bacteriol. 1981, v.145, N 2, p.889-895.

181. Roberts E. Some.observation.on the.chemistryof biological, nitrogen fixation. Sym.Soc.Exptl.Biol.,1959, v.13,p.24-29- 137

182. Roberts E., Azim M. Note on the utillization of nitrite-N and ammonium-N by Az.vinelandii. In. Symp. on IDnorganic Nitrogen Metabolishm Bait., 1956, p.176.

183. Rouser G*, Kritchevsky G., Helber D. e.a. Lipid composition of beef brain, beef liver and the sea anemone: two approaches to quantitative fractionation of complex lipids. J. Amer.Oil Chem.Soc., 1963, v.40. N 6, p.425-429.

184. Sanoria C., Rao W. Effect of seed bacterization with Azoto£ bacter chroococcum on sozghum and wheat. Indian J. Agr. Sci., 1975, v.45, N 5, p*224-226.

185. Schabacher V», Zeeck A. ^ -Lipomycine. II Die Konstitu-tion von C{ und p -lipomycin. - Tetrahedron Lett.,1973, v.29, p.2691-2699.

186. Shaw N. The detection of lipids on thinlayers chromotograms with the periodate-Schiff reagents. ~ Biochem. et biophys. acta, 1968, v.164, N 2, p.435-439.

187. Shimada, Goshio, Kakogawa. Verfahren zur Hezstellung von Coenzym.Q. Offen legungsschrift 27475Ю (Japan).

188. Stark A. Zur.Frage.der Phizosphare und Bodenimpfung,mit Azotobacter. -Arch, Microbiol., 1942, v.13, N 2, p.164-167.

189. Stende S.,. Arte R., Dingh T, Influence of Azotobacter on ., germination of rice and cotton seed. Curr. Sci.,1977,v.46, .N-.19, p.675-676.

190. Stapp -S. Uber der.Y/ert .von Azotobacter im preparates.fur die deutsche.Sanwirtsohaff. Landwirtsch. Forschung., 1952, .v.13, p.176-205.

191. Stoklasa J. Uber die. chemischen Vorgange bieder Assimilation der elementaren stickstoff. durch.Azotobacter und Rodio-bacter. Ber.Dtsch. bot ges,1906,v.24, p.15-19.- 138

192. Strivastava V., Mischra H. Investigation into zhizosphere microbiologa. Acta Soc. Bot. Pol., 1973, v*42, N 3, p.423-431•

193. Su C., Reusch R., Sadoff H. Patty acids in phospholipids of cell cyst and germinating cyst of Az.vinelandii• -J. Bacterid., 1979, v.137, p.1434-1436.

194. Su 0., Reusch R., Sadoff H. Isolation and characterization of several unique lipids from Azotobacter vinelandii cyst. -Bacteriol., 1981, v.147, H 1, p.80-87; 88-91.

195. Svetashev V., Vaskovsky V. Simplified techique fur thin-layer microchromathography of lipids. J.Chromatogr.,1972, v#67, p.376-379.234*Symons W., Davson 0. Poison Ivy "Urushiol". J.Amer.Ohem. Soc., 1954, v.76, p.2959-2961.

196. Tchan G., Wyzomirska Dzcher. Z*, Wincent I* Preliminary study of taxonomy of Azotobacter- and Azomonas.by.using.roket-line immunoelectrophresis, Ourr.Microbiol., 1980, v.4, H 5,p.265-270.

197. Thakre S., Saxena S. Effect of soil inoculation with Azotobacter along with.molybdanum on iron.a manganese up.take by maize. Indian J.Microbiol.,1972, v.12, N 1, p.11-14.- 139

198. Thompson J., Skerman V., Azotobacteraceaes the taxonomy and ecology of the aerobic nitrogen fixing bacteriae. London-Son-Franeisco Acad. Press., 1979» p.418.

199. Thompson J. Seed inoculation of wheat and barley with Az. chroococcum in Queensland. Queensland J. Agr. Anim. Sci., 1974, v.31, К 2, p.129-138.

200. Vancura J. Detection of gibberelic acid in Azotobacter cultures. Hature, 1961, v.192, 4797, p.88-95.

201. Wilson P. Asymbiotic nitrogen fixation, Handbuch der Pflan-z enphy si оlogi e, 1958, v.8, p.9-13.

202. Jamada G., Azimoto M., Kondo K. Coenzyme Q. System in classification with ascosporogenous Yeast Genus Schizosaccharo-myces and Yeast live.Yenus Endomyces. J. Gen. Appl. Microbiol.,.1973, v.19, p.353-361. . . .

203. Yonehara H., Takeuchi S., Umezawa H. e.a* Variotin- a new antifungal antibiotic produced by Palcilimyces varioti Bainier,var.antibiоticus. J.Antibiot,, 1959, v.12,p.109-111.п^илишшил, Таблица I.

204. Ми1фобные источники убихинонов.№ п/п Микроорганизм Основные компоненты питательной среды Гомолог убихинона Содержание убихинона в сухих клетках, мкг/г Метод выделения убихинона Литература12 3 4 5 б

205. Proteus vulgaris АТСС 6897 Гидролизат казе-ина,дикстроза, мясной бульон Q 10 144 Гидролиз биомассы,экстракция гидролизата,выделение из экстракта убихинона с помощью адсорбционной хроматографии на силикагельной колонке Патент США 3 Обб 080

206. Pseudomoxias denitrificans NPPL В 1665 Синтетическая питательная среда QI0 10 и12 3 4

207. Achromobacter paraffinoclastus ATCC 21230 Дрожжевой экстракт Q9 Q8 950 560

208. Candida tropicales ATCC 20026 Дрожжевой экстракт Q 9 750

209. Phodotorula rubra PERM P-632 Дрожжевой экстракт и мясной бульон QI0 190