Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему

Биологически активные фосфоаналоги аминокислот обмена метионина

ВАК РФ 03.00.03, Молекулярная биология

Содержание диссертации, кандидата химических наук, Алферов, Кирилл Вячеславович

ВВЕДЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Метаболизм метионина.

1.1 Биологические реакции трансметилирования.

1.2 Другие Ме1(Айо)-зависимые процессы.

1.3 Биологическая роль и применение S-метилметионина.

1.4 Катаболизм метионина.

1.5 Регулирование обмена метионина фосфорорганическими аналогами серосодержащих аминокислот.

1.6 Микробная L-метионин-у-лиаза.

2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

2.1 Синтез фосфорорганических аналогов у-замещенных серосодержащих аминокислот.

2.2 Стабильность фосфорорганических аналогов S-аденозилметионина и S- метилметионина.

2.3 Синтез фосфорорганических аналогов гомосерина.

2.4 Взаимодействие фосфорорганических аналогов аминокислот обмена метионина с L-метионин-у-лиазой.

2.5 Энантиоселективный синтез фосфиновых аналогов у-замещенных серосодержащих аминокислот.

2.6 Влияние фосфинового аналога метионина на клетки

Citrobacter intermedius.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

3.1 Препараты и оборудование.

3.2 Синтез фосфорорганических аналогов серосодержащих аминокислот.

3.3 Исследование устойчивости фосфорорганических аналогов S-аденозилметионина и S-метилметионина.

3.4 Синтез фосфорорганических аналогов гомосерина.

3.5 Взаимодействие фосфорорганических аналогов аминокислот с L-метионин-у-лиазой из С. intermedius и C.freundii.

3.6 Энантиоселективный синтез фосфиновых аналогов у-замещенных серосодержащих аминокислот.

3.7 Влияние фосфинового аналога метионина на клетки

Citrobacter intermedius.

ВЫВОДЫ.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биологически активные фосфоаналоги аминокислот обмена метионина"

Обширное семейство природных и синтетических фосфорорганических аналогов аминокислот включает большую группу соединений, относящихся к фосфиновым 1 и фосфоновым 2 кислотам, в основе разнообразной физиологической активности которых лежит влияние на обмен аминокислот и особенности действия которых во многом зависят от строения фосфорсодержащего фрагмента.

В 1-аминоалкилфосфонатах 2 двухосновная фосфонатная группа Р(0)(0Н)2 значительно отличается размерами, геометрией и кислотностью от карбоксильной группы аминокислоты, что делает представления о прямом структурном подобии фосфонатов 2 аминокислотам достаточно формальными. Вместе с тем, строение фосфонатов 2 позволяет рассматривать их как стабильные аналоги лабильных переходных состояний или промежуточных соединений в ферментативных превращениях аминокислот, что явилось основой создания новых видов ингибиторов ферментов аминокислотного обмена [1] и гаптенов для каталитических антител [2].

Модификация фосфонатного фрагмента с заменой гидроксильной группы на водород вызывает кардинальные изменения базовых биохимических характеристик фосфоаналогов. Исследования по взаимодействию фосфинатов 1 с ферментам обмена аминокислот показали, что введение одноосновной группы Р(0)(0Н)Н вместо

II

II О 0 1

О 2 карбоксильной группы аминокислоты не сказывается качественно на связывании аналогов 1, но приводит к существенному снижению скоростей субстратных превращений [3]. Изучение биологической активности этих аналогов показало, что они способны, подобно аминокислотам, к транспорту через микробные клеточные стенки [4].

Существенно, что способность фосфинатов 1 к субстратным превращениям и образованию в качестве продуктов новых фосфорорганических соединений оказалась связанной с их биологической активностью. Таким образом, аминоалкилфосфинаты 1 могут рассматриваться как изостеры природных аминокислот и являются перспективным источником химических инструментов для энзимологических исследований и биологически активных веществ.

Однако до настоящего времени не было осуществлено систематического изучения их свойств как аналогов субстратов ферментов обмена аминокислот, в особенности тех, коферментом которых является пиридоксаль-5'-фосфат (РЬР). О

II .X рС он

Ш2 Шз

1а У=8СН3, Х=Н 1г Я=А<1о, Х=Н, У=С1

2а У=8СН3, Х=ОН 26 Я=Аао, Х=ОН, У=ОАс

16 У=8Н, Х=Н 1д Я=СН3, Х=Н, У=1

1в У=8Ас1о, Х=Н 2в Я=СН3, Х=ОН, У=1

1ж У=ОН, Х=Н 1е Я=СН3, Х=Н, У=ОТз

2д У=ОН, Х=ОН 2г Я=СН3, Х=ОН, У=ОТб

В настоящей работе основными химическими объектами исследования были фосфиновые и фосфоновые аналоги аминокислот обмена метионина (1а-ж, 2а-д), что определялось значимостью процессов биометилирования в клеточном метаболизме, а также активностью /д подобных веществ, как антибактериальных агентов, ингибиторов роста опухолевых клеток и эффективных фунгицидов [4-6]. Энзимологические исследования проводились на ферменте катаболизма метионина - PLP-зависимой L-метионин-у-лиазе, регулирование активности которой рассматривается как перспективное направление дизайна селективных антимикробных агентов [7].

Целью настоящей работы являлось выявление и изучение свойств фосфиновых и фосфоновых аналогов метионина и родственных веществ, определяющих особенности их химического поведения и взаимодействия с биологическими объектами на примере L-метионин-у-лиазы и клеток Citrobacter intermedius - продуцента этого фермента

В соответствии с целью и задачами исследования в Литературном обзоре обсуждаются основные реакции метаболизма метионина и S-аденозилметионина (Met(Ado)) и некоторые способы их химического регулирования. Особое внимание уделено рассмотрению свойств микробной PLP-зависимой L-метионин-у-лиазы и обсуждению * возможностей использования фосфорорганических аналогов серосодержащих аминокислот для воздействия на метионин- и Met(Ado)-зависимые процессы.

Постановка задачи и результаты исследования являются приоритетными, их научная новизна и практическая ценность состоит в следующем:

Найдены и исследованы новые свойства фосфорорганических аналогов S-аденозилметионина - эффективных биорегуляторов Met(Ado)-зависимых процессов. Разработан оригинальный способ получения фосфинового и фосфонового аналогов гомосерина из фосфорорганических аналогов S-метилметионина.

Найдено, что фосфорорганические аналоги метионина эффективно связываются с PLP-зависимой L-метионин-у-лиазой и являются >4 конкурентными ингибиторами фермента. Показано, что фосфиновые аналоги метионина и гомосерина претерпевают медленные субстратные превращения под действием фермента в фосфиновый аналог кетобутирата. Установлено, что стереохимия ферментативной реакции сохраняется в случае фосфиновых аналогов аминокислот. Исследованы спектральные свойства комплексов фосфинового и фосфонового аналогов метионина с L-метионин-у-лиазой.

Для фосфинового аналога метионина исследована рН-зависимость кинетических параметров реакции а,у-элиминирования. Установлено, что форма зависимости и оптимальные значения рН для ферментативной реакции сохраняются при переходе от природного субстрата к его фосфиновому аналогу.

Предложен химико-энзимологический метод синтеза оптически активных фосфиновых аналогов серосодержащих аминокислот.

Впервые показано, что фосфиновый аналог метионина способен индуцировать биосинтез L-метионин-у-лиазы в клетках С. intermedins подобно природной аминокислоте.

Проведенные исследования демонстрируют перспективность использования аналогов для тонкого химического регулирования обмена серосодержащих аминокислот и представляют интерес для изучения механизма действия PLP-зависимых ферментов, выяснения зависимости каталитических свойств от строения и кислотно-основных свойств ионизируемых групп субстрата,

Отдельные части диссертации были представлены на Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии» (Москва, Россия, 2002), на 3-м съезде Биохимического общества (Санкт-Петербург, Россия, 2002), на 5-й международной Школе-конференции «Green Chemistry» (Венеция, Италия, 2002).

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Метаболизм метионина

В прокариотах и клетках растений метионин синтезируется из аспарагиновой кислоты (Схема 1). ноос. лн ноос vT»

АсОН, SucOH nh2

СООН nh2

АсСоА^. „ SucCoA

CH3SH

АсОН, SucOH

Схема 1. Биосинтез метионина Ч

Гомосерин, образовавшийся после восстановления дистальной группы аспарагиновой кислоты, ацилируется с помощью гомосерин ацетилтрансферазы или гомосерин сукцинилтрансферазы с использованием в качестве доноров ацильных групп соответствующих производных кофермента А. В реакции О-ацетильных производных гомосерина с цистеином образуется цистатионин, который расщепляется до гомоцистеина и пирувата аммония в цистатионин-Р-лиазной реакции. Гомоцистеин далее метилируется до метионина, используя метил-тетрагидрофолат или ониевые соединения, такие как бетаин, Б-метилметионин в качестве источников метальных групп (Схема 1). В бактериях метионин и гомоцистеин могут синтезироваться непосредственно из О-ацетилгомосерина путем взаимодействия с Н^Б или СНзБН [8].

Метионину принадлежит важнейшая роль в процессе инициации синтеза белка. В реакции, катализируемой метионил-тРНК синтетазой, метионин превращается в метионил-тРНК через промежуточное образование смешанного ангидрида с АМФ, который остается связанным с активирующим ферментом:

О О

II II

Ас1е

НзСБ

СОО' АТР> НзСБ

N112

ОН ОН

В клетках имеется два вида метиониновых тРНК - инициаторная и элонгаторная, обозначаемые соответственно тРНКиМе1 и тРНКэМе1. Молекулы тРНКэМй участвуют в образовании обычных метионил-тРНК, поставляя остатки метионина для внутренней части полипептидной цепи. У прокариот метионин, связанный с инициаторной тРНК акцептирует формильную группу от NlO-формилтетрагидрофолиевой кислоты в результате реакции трансформилирования, катализируемой специфическим ферментом. Формилированный комплекс метионин-тРНКиМе1 участвует в инициации биосинтеза белка у прокариот. У эукариот комплекс метионин- тРНКиМе1 не формилируется [9].

Важнейшей реакцией метионина является его превращение в S-аденозилметионин (Met(Ado)) (Схема 2, стадия 1), который является одним из ключевых соединений клеточного метаболизма, участвуя в многочисленных реакциях биоалкилирования. Биосинтез Met(Ado) из метионина и АТР катализируется Ме1(Ас1о)-синтетазой [10]. Реакция заключается в переносе аденозинового фрагмента на тиоэфирный атом серы метионина. Для проявления максимальной активности фермента необходима высокая концентрация однозарядных и двузарядных катионов. Ме1(Аёо)-синтетаза имеет трифосфатазную активность. Наиболее изученными и эффективными ингибиторами Ме1(Аёо)-синтетазы являются 1-аминоциклопентанкарбоновая кислота и Ь-*/ис-2-амино-4-метоксибутен-3-овая кислота. Эти соединения обладают высокой противоопухолевой активностью [11], так как сильно снижают внутриклеточное содержание Met(Ado), особенно важного для роста опухолевых клеток.

В следующих двух главах рассматриваются наиболее важные процессы с участием Met(Ado) и некоторые способы воздействия на них.

СООН

НзСБч

СООН

СООН >Ш3

СООН О

4 СНзБН + КИз БИОСИНТЕЗ 12!/ БЕЛКА

СООН

СН3РН4

Н2К Н

АТР 1

СН3)2МСН2СООН (СНз)зЫ'СН2СООН

Г'

11

10^

СООН '

ААо н?о н2тм" 'н >л У (ад-ме^лао) 3

Н2Ы 'соон

НБег

НзСБАао МТА лае он он

У> он он

Схема 2. Основные реакции метаболизма метионина (пунктирными стрелками обозначены процессы, не присущие клеткам животных).

Заключение Диссертация по теме "Молекулярная биология", Алферов, Кирилл Вячеславович

выводы

1. Найдены и исследованы новые свойства фосфорорганических аналогов Б-аденозилметионина - эффективных биорегуляторов Ме1;(Ас1о)-зависимых процессов. Обнаружены высокая устойчивость и различия в механизмах распада аналогов по сравнению с природным прототипом.

2. Разработан оригинальный способ получения фосфинового и фосфонового аналогов гомосерина из фосфорорганических аналогов Б-метилметионина.

3. На примере взаимодействия фосфорорганических аналогов метионина с Ь-метионин-у-лиазой показано, что введение фосфиновой или фосфоновой групп вместо карбоксильной группы природной аминокислоты не сказывается существенно на связывании аналогов с ферментом. Обнаружено, что фосфиновые аналоги метионина и гомосерина претерпевают медленные превращения под действием фермента в новое фосфорорганическое соединение - фосфиновый аналог кетобутирата. В наблюдаемой зависимости кинетических параметров реакции а,у-элиминирования от рН для фосфинового аналога метионина не проявляется значение рКа аминогруппы субстрата.

4. Установлено, что при существенных топохимических различиях фосфиновой и карбоксильной групп, природная стереохимия ферментативных реакций а,у-элиминирования и у-замещения сохраняется в случае превращений фосфинового аналога метионина.

5. Разработан химико-энзимологический метод синтеза оптически активных фосфиновых аналогов серосодержащих аминокислот.

6. Впервые показано, что фосфиновый аналог метионина способен индуцировать биосинтез Ь-метионин-у-лиазы в клетках С. ШегтесИт подобно природной аминокислоте.

Библиография Диссертация по биологии, кандидата химических наук, Алферов, Кирилл Вячеславович, Москва

1. Kafarski P., Lejczak В. Biological activity of aminophosphonic acids, Phosphorus, Sulfur and Silicon, 1991, 63, 193 - 215.

2. Хомутов P.M. О путях создания пиридоксаль-5'-фосфат зависимых каталитических антител, Биохимия, 2002, 67:1312-1316.

3. Dingwall J. G. Phosphorus containing amino acids biologically active natural and unnatural products, in Proc. Ill Int. Conf. Chem. and Biotech. Biol. Active Comps. Bulgaria, Sofia, 1985, V. 1, p. 87 - 103.

4. Хомутов P.M, Жуков Ю.Н., Хомутов A.P., Хурс E.H., Крамер Д.Л., Миллер Дж.Т., Портер К.В. Фосфиновый аналог метионина тормозит рост лейкозных клеток L1210 и превращается в фосфиновый аналог S-аденозилметионина, Биоорганическая химия, 2000, 26,735-737.

5. Жуков Ю.Н., Вавилова Н.А., Воинова Т.М., Хурс Е.Н., Джавахия В.Г., Хомутов P.M. Фунгицидная активность фосфиновых аналогов аминокислот обмена метионина, Доклады Академии наук, 2004. Т. 397. № 1.С. 1-3.

6. Walker J., Barrett J. Parasite Sulfur Amino Acid Metabolism, Int. J. for Parasitology, 1997, V. 27, No. 8, p. 883 897.

7. Soda K. Microbial Sulfur Amino Acids, Methods in enzymology, 1987, V. 143,453-456.

8. Ингрем В., Биосинтез макромолекул, 1975, Москва, «Мир»

9. Stock J., Stock A. What is the role of receptor methylation in bacterial Chemotaxis? Trends Biochem. Sei., 1987,12, 371 375.

10. Noort Van J.M., Krall B., Sinjorgo K.M., Persoon N.L.M., Johanns E.S.D., Bosch L. Methylation in vivo of elongation factor EF-Tu at lysine-56 decreases the rate of tRNA-dependent GTP hydrolisis, Eur. J. Biochem., 1986, 160, 557-561.

11. Brown P.T.H. DNA methylation in plants and its role in tissue culture, Genome, 1989,31,717-729.

12. Selker E.U., Fritz D.Y., Singer M.J. Dense nonsymmetrical DNA methylation resulting from repeat-induced point mutation in Neurospora, Science, 1993, 262, 1724 1728.

13. Weissbach A., Ward C., Bolden A. Eukaryotic DNA methylation and gene expression, Curr. Topics Cell Regul., 1989, 30, 1-21.

14. Macnab J.C., Adams R.L., Rinaldi A., Orr A., Clark L. Hypomethylation of host cell DNA synthesized after infection or transformation of cells by herpes simplex virus, Mol. Cell Biol, 1988, 8, 1443 1448.

15. Wu J, Issa J.-P, Herman J, Basset D.E., Nelkin B.D., Baylin S.B. Expression of an exogenous eukaryotic DNA methyltransferase gene induces transformation ofNIH 3T3 cells, Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1993, 90, 8891 8895.

16. Doerfler W. Abortive infection and malignant transformation by adenoviruses: integration of viral DNA and control of viral gene expression by specific patterns of DNA methylation, Adv. Virus. Res., 1991, 39, 89 -128.

17. Rosl F., Arab A., Klevenz В., zur Hasen H. The effect of DNA methylation on gene regulation of human papillomaviruses, J. Gen. Virol., 1993, 74, 791 -801.

18. Alix J.-H. Relationship between methylation and maturation of ribosomal RNA in prokaryotic and eukaryotic cells, N.Y.: The Humana Press, 1986, 175- 187.

19. Moss В., Barbosa E., Keith J.N. Specificity of mRNA methyltransferases. -In: Transmethylation N.Y.: Elsevier, 1979, 373 380.

20. Киселев О.И., Пиотровский JI.Б. Структура, биосинтез и функции 5'-концевых групп (кэпов) мРНК.- В сб.: Итоги науки и техники, серия Молекулярная биология, М: 1979, т.16, 139-195.

21. Banerjee A.K. 5'-Terminal cap structure in eukaryotic messenger ribonucleic acids, Microbiol. Rev., 1980, 44, 175 205.

22. Reddy R., Singh R., Shimba S. Methylated cap structures in eukaryotic RNAs: structure, synthesis and functions, Pharmacol. Ther., 1992, 54, 249267.

23. Salvatore F., Isso P., Colonha A., Traboni C., Cinino F. Transfer RNA methyltransferases: Properties and role in the maturation of tRNA, In: Transmethylation. N.Y.: Elsevier, 1979, 449-456.

24. Hau F. The methylation of tRNA, Biochimia, 1976, 58, № 6, 629-645.

25. Kim S.H., Sussman J.L. Transfer RNA: Structure-function correlation, Horiz. Biochem. Biophys., 1977,4,159-200.

26. Borek E., Gehrke, Waalkes T.P. Aberrant methylation of tRNA in tumor tissue. In: Transmethylation. N.Y.: Elsevier, 1979,457-463.

27. Lombardini J.B., Talalay P. Effect of inhibitors of adenosine triphosphate: L-methionine S-adenosyltransferase on levels of S-Adenosylmethionine and L-methionine in normal and malignant mammalian tissues, Mol. Pharmacol., 1973, 9, №4, 542-560.

28. Baldessarini R.J., Carbone P.P. Adenosylmethionine elevation in leukemic white blood cell, Scince, 1965, 149, № 3684, 644.

29. Орлов H.H. Сравнительное содержание SAM и SAH в тканях некоторых экспериментальных опухолей в процессе их роста, Вопр. мед. химии, 1980, т. 26, в. 5, 699-704.

30. Робер-Жеро М., Ледерер Э. Антивирусное, антимитогенное и антималярийное действие синтетических аналогов S-аденозилгомоцистеина, В кн.: Итоги и перспективы развития биоорганической химии и молекулярной биологии., М.: Наука, 1978, 111-127.

31. Coward J.K., Bussolotti D.L., Chang C.D. Analogs of S-adenosylhomocysteine as potential inhibitors of biological transmethylation. Inhibition of several methylases by S-tubercidinylhomocysteine, J. Med. Chem, 1974, v. 17, N 12, 1286-1289.

32. Raies A., Lawrence F., Robert-Gero M., Loche M., Cramer R. Effect of 5-•A deoxy-5-S-isobutyl adenosine on polyoma virus replication, FEBS Lett.,1976, 72, № 1,48-52.

33. Pugh C.S.G., Borchardt R.T. Effects of S-adenosylhomocysteine analogues on Vaccinia viral messenger ribonucleic acid synthesis and methylation, Biochemistry, 1982, 21, №7, 1535-1541.

34. Borchardt R.T., Kuonen D., Huber J.A., Moorman A. Inhibition of calf thymus and rat hypothalmic synaptosomal protein carboxymethyltransferase by analogues of S-adenosylhomocysteine, Mol. Pharmacol., 1981, 21, 181186.

35. Borchardt R.T. N- and O-methylation, In Enzymatic basis of detoxification, Academic press, New York, 1980, V. 2,43 62.

36. Borchardt R.T., Keller B.T., Patel-Thombre U. Neplanocin A. A potent inhibitor of S-adenosylhomocysteine hydrolase and of vaccinia virus replication in mouse L929 cells, J. Biol. Chem., 1984,259,4353 4358.

37. Tabor C.W., Tabor H. 1,4-Diaminobutane (putrescine), spermidine and spermine, Annual Rev. Biochem., 1976, 45, 285 306.

38. Pegg A.E., McCann P. S-Adenosylmethionine decarboxylase as an enzyme target for therapy, Pharmacol. Ther., 1992, 56, 359-377.

39. Shapiro S.K., Hather A.N. The enzymatic decomposition of S-adenosyl-L-methionine, J. Biol. Chem., 1958, 233, № 3, 631-633.

40. Swiatck K.R., Simon L.N., Chao K.-L. Nicotinamide Methytransferase and S-adenosylmethionine: 5'-methylthioadenosine hydrolase. Control of transfer ribonucleic acid methylation, Biochemistry, 1973, V. 12, № 4, 1273-1280.

41. Riscoe M.K., Ferro A.J., Fitchen J.H. Methionine recycling as a target for antiprotozoan drug development, Parasitology today, 1989, 5, 330-333.

42. Riscoe M.K., Tower P.A., Peyton D.H., Ferro A.J., Fitchen J.H. Methionine recycling as a target for antiprotozoan drug development, in Biochemical protozoology, Taylor and Francis, London, 1991, 450-457.

43. Toohey J.I. Methylthio group cleavage from methylthioadenosine. Description of an enzyme and its relationship to the methylthio requirement of certain cells in culture, Biochem. Biophys. Res. Com., 1977, 78, № 4, 1273-1280.

44. Mudd S.H., Mann J.D. Activation of methionine for transmethylation VII. Some energetic and kinetic aspects of reaction catalysed by the methionine-activating enzyme of bakers yeast, J. Biol. Chem., 1963, 238, № 6, 21642170.

45. Khappe J., Schmitt T. A novel reaction of S-Adenosyl-L-methionine correlated with the activation of pyruvate formiate-lyase, Biochem. Biophys. Res. Com., 1972,48, № 1, 58-64.

46. Zappia V., Ayala F. Studies on the activation of lysine-2,3-aminomutase by 7-i (-)-S-adenosyl-L-methionine, Biochem. Biophys. Acta, 1972, 268, № 2, 573580.

47. Plantavid M., Maget-Dana R., Douste-Blazy L. Inhibition of phosphatidylethanolamine biosynthesis by 5-adenosylmethionine, FEBS Lett., 1976, 72, № 1,169-172.

48. Theologis A. One rotten apple spoils the whole bushel: the role of ethylene in fruit ripening, Cell, 1992, 70, 181-184.

49. Bottiglieri Т., Hyland K. S-Adenosylmethionine levels in psychiatric and neurological disorders: a review, Acta Neurol. Scand., 1994, 154, 19-26.

50. Williams J.H., Jasik A.D. A markedly anti-lipotropic action of methionine, Nature, 1963, 200, N2,472.

51. Shapiro S.K. Biosynthesis of methionine from homocysteine and s-methylmethionine in bacteria, J. Bacterid., 1956, 72, 730-735.

52. Sato C.S., Byerrum R.U., Albersheim P., Booner J. Metabolism of y-t methionine and pectin esterification in a plant tissue, J. Biol. Chem., 1958,233,128-131.

53. Букин B.H., Хучуа Г.Н. S-метилметионин витамин U, В кн.: Витамин U (S-метилметионин): природа, свойства, применение, Москва, Наука, 1973, 7-22.

54. Cooper A. J. L. Biochemistry of sulfur-containing amino acids, Annual Review of Biochemistry, 1983,52, 187-222.

55. Barret J. Amino acid methabolism in helmints, Advances in Parasitology, 1991,30,39-105.

56. Biryukov A.I., Osipova T.I., Khomutov R.M. a-Aminophosphonous acids: the substrates of ATP-PPj exchange reaction, catalysed by aninoacyl-tRNA synthetases, FEBS Lett., 1978, 91, 246 248.

57. Сырку В.И., Завалова JI.JI., Хомутов P.M. Химическое регулирование "Л S-аденозилметионин зависимых ферментативных реакцийфосфорорганическими аналогами S-аденозилметионина и S-аденозилгомоцистеина, Биоорганическая химия, 1986, 12, № 6, 839-841.

58. Steere J.A., Sampson Р.В., Honek J.F. Synthesis of an a-Aminophosphonate nucleoside as an inhibitor of S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase, Bioorg.&Med. chem. left., 2002, 12, 3, 457-460.

59. Щипанова А.И, Жуков Ю.Н., Осипова Т.И., Хурс E.H., Хомутов P.M. Тез. докл. 7 съезд офтальмологов России. 16-20 мф. МЗ РФ, Об-во офтальмологов. М., 2000, 168-169.

60. Tanaka Н., Esaki N., Soda К. Properties of L-methionine-y-lyase from Pseudomonas ovalis, Biochemistry, 1977, 16, 100-106.

61. Ito S., Nakamura Т., Eguchi Y. Purification and characterization of methioninase from Pseudomonas putida, J. Biochem., 1976, 79,1263-1272.

62. Фалеев Н.Г., Троицкая M.B., Ивойлов B.C., Карпова B.B., Беликов В.М. Метионин-у-лиаза в клетках Citrobacter intermedius. Синтез S-бутил-Ь-гомоцистеина и 8-бутил-Ь-цистеина, Прикл. биохимия и микробиол., 1994,30,3,458-463.

63. Nakayama Т., Esaki N., Lee W.-J., Tanaka I., Tanaka H., Soda K. Purification and properties of L-methionine-y-lyase from Aeromonas sporogenes, Agric. Biol. Chem., 1984,48, 2367-2369.

64. Lockwood B.C., Coombs G.H. Purification and characterization of L-methionine-y-lyase from Trichomonas vaginalis, Biochem. J., 1991, 279, 675-682.

65. Inoue H., Inagaki K., Eriguchi S., Tamura Т., Esaki N., Soda K., Tanaka H. Molecular characterization of the mde operon involved in L-methionine catabolism of Pseudomonas putida, J. Bacteriol., 1997, 179, № 12, 39563962.

66. Dias В., Weimer В. Purification and characterization of L-methionine-y-1 lyase from Brevibacterium linens BL2, Appl. Environ. Microbiol., 1998, 64,3327-3331.

67. Coombs G.H., Mottram J.C. Trifluoromethionine, a prodrug designed against methionine-y-lyase-containing pathogens, has efficacy in vitro and in vivo against Trichomonas vaginalis, Antimicrobial agents and chemotherapy, 2001,45,6, 1743-1745.

68. Esaki N., Nakayama Т., Sawada S., Tanaka H., Soda K. NMR Studies of substrate hydrogen exchange reactions catalysed by L-methionine-y-lyase, Biochemistry, 1985, 24, 3857-3862.

69. Inoue Н., Inagaki К., Adachi N., Tamura Т., Esaki N., Soda K., Tanaka H. Role of tyrosine 114 of L-methionine-y-lyase lyase from Pseudomonas putida, Biosci. Biotechnol. Biochem., 2000, 64(11), 2336-2343.

70. Alexander F.W., Sandmeier E., Metha P.K., Christen P. Evolutionary relationships among pyridoxal 5'-phosphate dependent enzymes. Regio-specific a, (3 and у families, Eur. J. Biochem., 1994, 219, 953-960.

71. Кухарь В.П., Солоденко B.A. Фосфорные аналоги аминокарбоновых кислот, Успехи химии, 1987, 51(9), 1504-1532.

72. Петров К.А., Чаузов В.А., Ерохина Т.С. Аминоалкильные фосфорорганические соединения, Успехи химии, 1974, 43(11), 20452087.

73. Baylis Е.К., Campbell C.D., Dingwall J.G. 1-Aminoalkylphosphonous acids. Part 1. Isosteres of the protein amino acids, J. Chem. Soc. Perkin Trans, 1984, 1, № 12, 2845-2853.

74. Chalmers M.E., Kosolapoff G. N. The Synthesis of Amino-substituted Phosphonic Acids. Ill, J. Amer.Chem. Soc., 1953, 75, № 21, 5278-5280.

75. Grobelny D. A New Synthetic Route to 1-Aminoalkylphosphonous Acids, Synthesis, 1987, 942-943.

76. Maier L., Diel P.J. Organic phosphorus compounds. Preparation, physical and biological properties of aminoarylmethylphosphonic and -phosphonous acids, Phosphorus, Sulfur & Silicon, 1991, 57, 57-64.

77. Jiao X., Verbruggen C., Borloo M., Bollaert W., Groot A., Dommisse R., Haemers A. A novel synthetic route to 1-aminoalkylphosphinic acids, Synthesis, 1994, 23-24.

78. McCleery P.P., Tuck B. Synthesis of 1-aminoalkylphosphinic acids. Part 2. An alkylation approach, J. Chem. Soc. Perkin Trans 1,1989, 1319-1329.

79. Хомутов P.M., Осипова Т.И. Новый метод синтеза а-аминофосфонистых и а-аминофосфоновых кислот, Изв. Академии Наук, Сер. хим., 1978, 8, 1954.

80. Жуков Ю.Н., Хомутов А.Р., Осипова Т.И., Хомутов P.M. Синтез фосфиновых аналогов серосодержащих аминокислот, Изв. Академии Наук. Сер. хим., 1999, № 7, 1360-1363.

81. Hoffman J.L. Chromatographic analysis of the chiral and covalent instability of S-adenosylmethionine, Biochemistry, 1986, 25, 4444-4449.

82. Пурдела Д., Вылчану P. Химия органических соединений фосфора, М.: Химия, 1972, 630-631.

83. Арбузов Б.А., Ярмухаметова Д.Х. Синтез гетероциклических соединений с фосфором в кольце. Сообщение 1. Синтез производных окса- и диоксаоксидофосфорина, Изв. АН СССР, ОХН, 1960, 8, 17671771.

84. Кухарь В.П., Свистунова Н.Ю., Солоденко В.А., Солошонок В.А. Ассиметрический синтез фтор- и фосфорсодержащих аналогов аминокислот, Успехи химии, 1993, 62(3), 284-302.

85. Brand L.M., Lowenstein J.M. Inhibition of adenylato succinase by adenylato phosphopropionate and related compounds, Biochemistry, 1978, 17, 1365-1370.

86. Sosnovsky G., Lukszo J., Gravela E., Zuretti F. In search of new anticancer drugs. 13. Phosphinic and phosphonic analogs of ornithine, J. Med. Chem., 1985,28, 1350-1354.

87. Хомутов P.M., Хурс E.H., Джавахия В.Г., Воинова T.M., Ермолинский Б.С. Ингибирование биосинтеза поликетидов 1-аминоэтилфосфонистой кислотой, Биоорг. химия, 1987,13, 1422-1424.

88. Хурс Е.Н., Осипова Т.И., Хомутов P.M. Ферментативное переаминирование фосфорорганических аналогов аспартата и глутамата, Биоорг. химия, 1989,15, 552-555.

89. Metzger Н., in Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Thieme Verlag, Stuttgart, 1971, 10, № 4.

90. Kikugawa K., Ichino M. Direct halogenation of sugar moiety of nucleosides, Tetrahedron Lett., 1971, 2, 87-90.

91. Букин B.H., Хучуа Г.Н., Рубцов И.А. Синтез S-метилметионина, В кн.: Витамин U (S-метилметионин): природа, свойства, применение, Москва, Наука, 1973, 146-150.

92. Fitch P.J. Synthesis of hypophosphite esters from orthocarbonyl compounds, J. Am. Chem. Soc., 1964, 86(1), 61-64.

93. Cleland W.W. Statistical analysis of enzyme kinetic data, Methods Enzymol., 1979, 63, 103.

94. Friedmann T.E., Haugen G.E. Pyruvic acid, the determination of keto acids in blood and urine, J. Biol. Chem., 1943, 147, 415-443.