Биохимическое обоснование применения антиоксидантов и пробиотиков в комплексной терапии больных метроэндометритом

Мелконян, Карина Игоревна

Бесплатный автореферат и диссертация по биологии на тему
Биохимическое обоснование применения антиоксидантов и пробиотиков в комплексной терапии больных метроэндометритом
ВАК РФ 03.00.04, Биохимия

Автореферат диссертации по теме "Биохимическое обоснование применения антиоксидантов и пробиотиков в комплексной терапии больных метроэндометритом"

На правах рукописи

Мелконян Карина Игоревна

БИОХИМИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИОКСИДАНТОВ И ПРОБИОТИКОВ В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ БОЛЬНЫХ МЕТРОЭНДОМЕТРИТОМ

03.00.04-биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Краснодар 2009

1 7 ДЕК 205Э

003490023

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (ГОУ ВПО КГМУ Росздрава)

Научные руководитель: доктор медицинских наук, профессор

Быков Илья Михайлович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор

Нагиев Эйзудин Рамазанович

доктор медицинских наук, профессор Чередник Ирина Леонидовна

Ведущее организация: Федеральное государственное учреждение «Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» (г. Ростов-на-Дону)

Защита состоится декабря 2009 г. в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208.038.02 при ГОУ ВПО КГМУ Росздрава (350063, г.Краснодар, ул.Седина, 4, тел. (861) 262-73-75).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Росздрава

Автореферат разослан «у^Рноября 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета Д 208.038.02 /"") Л

Л.А.Скорикова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Основная масса воспалительных заболеваний связана с повышением фона активных форм кислорода (АФК), которые являются причиной всплеска реакций свободнорадикального окисления (СРО) и перекисного окисления липидов (ПОЛ) как на местном уровне, в очаге воспаления, так и на уровне организма в целом, что приводит к формированию такого общепатологического состояния как окислительный стресс (ОС). Состояние ОС характерно для большинства болезней человека [Ю.А. Владимиров, А.И.Арчаков, 1972; JI.M. Агаджа-нова, 1998; Р.Г. Мокацян, 1998; М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, 2000; В. Halliwell, J.M.C. Gutteridge, 1999; J.W. Heinecke, 2003], в связи с чем разработка методов диагностики, изучения механизмов его развития и коррекции в условиях острой и хронической патологии представляется важнейшей задачей современной науки и здравоохранения. У больных с воспалительными заболеваниями возникает замкнутый порочный круг: активация СРО вызывает дисбаланс в иммунной системе, а активация иммунных реакций способствует повышенной генерации АФК, что приводит к поддержанию незатухающего воспалительного процесса.

Дисфункция иммунной системы является причиной многих заболеваний, в том числе и репродуктивной системы у женщин, в частности такого распространенного заболевания как метроэндометрит (МЭМ).

Лечение МЭМ невозможно без применения антибиотиков. Однако, на основании имеющихся в литературе сообщений, можно сделать вывод, что лечение антибактериальными препаратами не всегда приводит к полному выздоровлению, а увеличение дозировок и продолжительности лечения способствуют развитию дисбактериозов. Поэтому проведение только антибиотикотерапии зачастую не достаточно эффективно и в комплексное лечение больных с МЭМ необходимо включать пробиотики, имму-номодуляторы и антиоксиданты, учитывая наличие у пациентов дисбаланса в системе про-/антиоксиданты [И.В. Зарубина,П.Д. Шабанов, 2004; C.B. Оковитый, С.Н. Шуленин, A.B. Смирнов, 2005, Н.М. Победи-нский, М.В. Беришвили, 2007].

В настоящее время в медицине используются пробиотики отечественного и зарубежного производства, в частности, такие как Аципол и Бион-3. Пробиотик III поколения Бион-3 с антиоксидантными свойствами способствует нормализации естественной микрофлоры влагалища и желудочно-кишечного тракта, а так же коррекции про-/антиоксидантного баланса.

Для достижения аналогичных показателей при использовании пробиоти-ков индивидуального типа действия целесообразно использование комбинированной терапии: пробиотики плюс антиоксиданты (например, аципол в сочетании с аскорбиновой кислотой) [Н.М. Пасман, P.C. Логинова, 2006]. Однако эффекты различных вариантов комбинированного лечения МЭМ в литературе практически не описаны.

В связи с вышеизложенным, актуальным в настоящий момент является вопрос изучения на клеточном уровне молекулярных механизмов развития и течения МЭМ. Необходимо, уточнение степени оксидативных изменений в эритроцитах и плазмы крови у женщин с этой патологией с выявлением биохимических маркеров ОС, отражающих клиническую картину болезни и позволяющих выявлять на ранних этапах дисфункцию системы антиоксидантной защиты (АОЗ). Изучение в динамике этих показателей на фоне проводимой комплексной терапии послужит основой разработки эффективных схем лечения МЭМ с учетом про— /антиок-сидантного статуса больных.

Цель работы: изучить характер оксидативных изменений в эритроцитах и плазме крови у женщин с МЭМ и определить возможности коррекции этих процессов путем включения в схемы лечения препаратов проби-отической и антиоксидантной направленности.

Задачи исследования:

1. Изучить состояние системы про-/антиоксиданты эритроцитов и плазмы крови у женщин с МЭМ на различных этапах течения заболевания.

2. Оценить in vivo антиоксидантную активность современных проби-отических и антиоксидантных препаратов, используемых при лечении МЭМ.

3. Провести сравнительную оценку эффективности различных комплексных и индивидуальных пробиотических средств в плане коррекции микрофлоры и дисбаланса в системе про-/антиоксиданты у больных с МЭМ.

4. Предложить наиболее эффективные схемы комплексной терапии МЭМ с использованием Бион-3 и комплекса пробиотика и антиоксиданта.

Новизна исследования.

Впервые с помощью интегральных методов исследования доказано наличие и определена выраженность ОС у женщин с МЭМ.

Установлено, что проводимая традиционная терапия купирует воспалительный процесс, но не обеспечивает полную стабилизацию системы про-/'антиоксиданты у больных с МЭМ.

Впервые проведено всестороннее исследование влияния комбинированных пробиотических средств (бион-3), индивидуальных пробиотиков (аципол), а также комбинации пробиотик и антиоксидант прямого действия (аципол+аскорбиновая кислота) на различные показатели системы про-/антиоксиданты у больных МЭМ.

Впервые (на большом клиническом материале) с использованием биофизических и биохимических методов исследования подобранны наиболее эффективные схемы пробиотической и антиоксидантной коррекции ОС у больных с МЭМ.

Практическая ценность.

Внедрение материалов исследования позволит: проводить своевременную диагностику и медикаментозную коррекцию ОС у женщин с МЭМ на клиническом этапе или на стадии стационарного лечения; сократить сроки стационарного лечения или предотвратить госпитализацию больных; получить экономический и социальный эффект; улучшить качество жизни больных с МЭМ.

Внедрение в практику результатов исследования.

Предложенный метод лечения внедрен в практику лечебных учреждений: МУЗ Роддом г.Краснодара, женская консультация №4; МУЗ ГБ № 2 «КМЛДО» Перинатальный центр, женская консультация №5 г. Краснодара.

Результаты работы используется при обучении студентов, интернов, ординаторов, аспирантов на кафедре фундаментальной и клинической биохимии ГОУ ВПО КГМУ Росздрава.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У женщин страдающих МЭМ, нарушается функциональное состояние антиоксидантной системы в связи с интенсивно протекающими свободно-радикальными процессами.

2. Используемая традиционная терапия у больных МЭМ купирует проявления воспалительных реакций, но не оказывает влияния на имеющийся дисбаланс в системе про-/ антиоксиданты, кроме того вызывает явления дисбиоза.

3. Применяемые в комплексном лечении МЭМ пробиотический препарат 1-го поколения (аципол) способствует восстановлению естественного состава микрофлоры, но так же не нормализует полностью баланс в системе про-/ антиоксиданты.

4. Включение в схемы традиционной терапии пробиотических препаратов 1-го поколения (аципол) в комплексе с пероральной формой Уй.С и III-

поколения (бион-3) — как средств направленной фармакологической коррекции окислительного гомеостаза способствует как восстановлению нормальной микрофлоры, так и стабилизации дисбаланса в системе про-/анти-оксиданты, что позитивно сказывается и на состоянии иммунной системы.

5. Наиболее перспективными и эффективными методами диагностики и контроля за клиническим течением МЭМ и эффективностью проводимого лечения являются биофизические показатели плазмы крови: ам-перометрический метод определения общей антиокислительной активности и метод оценки индуцированной хемилюминесценции.

Апробация результатов исследования. Основные положения работы представлялись и обсуждались на XXXIV научной конференции студентов и молодых ученых вузов Южного федерального округа России (г.Краснодар, 2008); научно-практическая конференции молодых ученных и студентов Юга России «Медицинская наука и здравоохранение» (Анапа 2008); IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов (Новосибирск, 2008); VII съезд аллергологов иммунологов СНГ(Санкт-Петербург, 2009).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 2 статьи в центральной медицинской печати, рекомендованной ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 123страницах машинописного текста, иллюстрирована 17 рисунками, содержит 7таб-лицы. Список литературы включает 190 источников, из них 130 отечественных и 60 иностранных.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Для выявления характера нарушений в системе про-/антиоксиданты у женщин с установленным МЭМ, на стадии их обращения к врачу и на фоне различных схем лечения, было проведено изучение основных показателей, характеризующих состояние системы антиоксидантной защиты крови и уровень прооксидантной нагрузки. Материалом исследования послужила гепаринизированая кровь пациентов с МЭМ (п=102). Контролем служили те же показатели крови условно здоровых доноров женского пола (п=13) той же возрастной группы.

Больные с МЭМ были разделены на следующие группы. Группа №1— женщины, прошедшие лечение по общепринятой схеме МЭМ(п=26), группа №2— женщины с МЭМ (п=26), которым в традиционную схему

лечения был включен пробиотический препарат аципол, группа №3 (п=25) больные с МЭМ, которым в традиционный курс лечения были введены пробиотик аципол и витамин С перорально по 500 мг 2 раза в сутки, отдельную 4-ю группу (п=25) составили больные МЭМ, которым в традиционную схему лечения был введен пробиотик III поколения бион-3 (Рис.1).

_________________I

Рис. 1. Распределение больных с МЭМ на исследуемые группы.

Примечание: 1-традиционная терапия; 2— традиционная тера-пия+аципол; 3-традиционная терапия+аципол+ витамин С; 4-традици-оная терапия+ бион-3.

При клиническом обследовании больных применялись традиционно используемые в гинекологии инструментальные и общеклинические методы.

Ультразвуковое исследование с использованием трансвагинальных датчиков с частотой 7,5МГц. Эхографическое исследование осуществляли в условиях наполненного мочевого пузыря. Исследование проводилось у всех 102 пациенток и включало измерение передне-заднего размера матки, нахождение участков воспаления — повышенной эхогенности в миометрии, кист-анэхогенные включения, неравномерность и зазубренность толщины бального слоя.

Таблица 1

Оценка результатов изменений у женщин, больных МЭМ согласно УЗИ (%)

Признаки Контроль п=13 Мегроэвдгокприг и=102

Участки воспаления 0 83

Наличие кист от 0.2-0,6 см 15 64

Увеличение толщины бального слоя 0 52

Увеличение передне-заднего размера матки 0 80.1

Учитывая найденные изменения, была определена стадия заболевания, обширность поражения, степень хронизации процесса, тяжесть нарушения репродуктивной функции. Также была определена в баллах тяжесть клинической картины заболевания, что представлена в таблице № 2.

При целенаправленно организованном опросе у всех обследованных больных выявились нарушения самочувствия общего характера, которые, однако, не всегда можно было с достоверностью объяснить влиянием основного заболевания или его осложнений.

Общеклинические методы исследования проводились на основании приказа №50 МЗ РФ от 10.02.2003 и в соответствии с отраслевыми стандартами объемов обследования и лечения (утвержденными Приказом МЗ РФ от 5.11.1998 № 323) в акушерско-гинекологических стационарах. Общеклинические обследования включали: общий анализ крови, биохимический анализ крови, исследование коагуляционных свойств крови, общий анализ мочи, артериальное давление на обеих руках в динамике, контроль концентрационной функции почек.

Таблица 2

Тяжесть клинической картины метроэндометрита, выраженная в баллах (по Mac Laverty С.М., Shaw P.W., 1995)

Метроэндометрит

Симптомы Баллы

Острый Подострый Хронический

: Альгоменорея 2 1

Ноющая боль внизу жнвота(не 1 связанная с менструацией) 3 1 1

Боль в области крестца с иррадиацией в прямую кишку 2 1

Днспареунпя 3 2 0

Полименорея 2 1 0

; Скудные (мажущие) кровянистые выделения. 3 1 1

Кроме изучения анамнестических данных пациентов, наблюдения за их состоянием, общепринятых клинических и инструментальных методов исследования органов и систем, проводили изучение биохимических параметров, характеризующих выраженность ОС, степень метаболических расстройств и выраженность дисбиоза.

Состояние антиоксидантной системы (АОС) организма больных оценивали по активности антиоксидантных ферментов каталазы (КАТ) и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов, по основному неферментному компоненту АОС — по уровню восстановленных тиоло-вых групп эритроцитов, а также по антиокислительной емкости плазмы — отражающей суммарное количество восстановительных эквивалентов. Активность КАТ исследовали по методу R.Beers [R.Beers и др., 1952] в модификации И.И. Павлюченко [И.И. Павлюченко и др., 2006]. Для определения активности СОД использовали методику В.А. Костюка [В.А.Костюк, А.И.Потапович, Ж.В.Ковалева, 1990] в модификации И.И. Павлюченко [И.И.Павлюченко, и др., 2006]. Количество тиоловых групп определяли с помощью реактива Эллмана [В.Н.Орехович, 1977]. Метод оценки общей антиоксидантной активности (АОА) плазмы крови основан на способности ее компонентов при окислении на поверхности рабочего электрода при определенном потенциале изменять силу электрического тока, регистрируемую при помощи аппарата «Яуза-01-AAA». Полученный сигнал сравнивали с калибровочным стандартом — аскорбиновой кислотой [А.А.Басов и др., 2006.]. Состояние прооксидантной системы оценивали в плазме крови по базальному количеству продуктов окислительной модификации биомолекул, реагирующих при 100°С с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) [И.Д.Стальная, Т.Г.Гаришвили, 1977]. В эритроцитах определяли базальный и индуцированный уровень ТБК-активных продуктов [В.Н.Ушкалова и др., 1993]. Тиобарбитуровое число плазмы (ТБЧпл.), эритроцитов тиобарбитуровое число базальное (ТБЧэр.), индуцированное (ТБЧэрЛпс!) и общее (ТБЧобщ.) выражали в оптических единицах. Уровень продуктов СРО в плазме крови оценивали по максимуму индуцированной вспышки хемилюминесценции (MBXJ1) и по площади затухания вспышки хемилюминесценции (ПВХЛ) с помощью люминотестера LT-01 на основе методики НИИБИ г. Ростова-на-Дону, в модификации [С.Р.Федосов и др., 2007]. Количество эритроцитов для расчета активности ферментов и количества ТБК-активных продуктов в цельной крови определяли фотоколориметрически по методу Ресселя [JI.K. Рессель, И.Тодоров, 1961]. Для многоплановой диагностики ОС использовали также интегральный показатель состояния про-/антиоксидантной системы организма на клеточном уровне — коэффициент окислительной модификации биомолекул эритроцитов (КОМБэр) по методу И.И. Павлюченко [И.И.Павлючен-

ко, А.А.Басов, С.Р.Федосов, 2003]. Перекисная модификация белков в настоящее время выдвигается на ведущий уровень проблем ОС, поэтому мы сочли целесообразным и важным в работе провести также определение уровня карбонильных групп без индукции и с индукцией Fe2" [Е.Е.Дубинина и др., 2000]. Статистической обработкой массивы данных подвергались проверке нормальности распределения с помощью W-критерия Shapiro-Wilk [Р.Royston, 1995] с окончательным подтверждением нормальности при визуальном контроле гистограмм. Для выявления различий между группами применялся тест Манна-Уитни [Н. B.Mann, D. R. Whitney, 1947]. Во всех случаях выполнения статистического анализа достоверными считались результаты с уровнем доверительного интервала более 95% (р<0,05). С целью объективизации статистического анализа в работе приведены вычисленные значения уровня важности.

Статистический анализ производился на ЭВМ с использование свободного программного обеспечения: системы статистического анализа R [R Development Core Team, 2008], пакета офисных программ OpenOffice.org и операционной системы Kubuntu Linux.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При комплексном обследовании 102 больных с различной степенью тяжести МЭМ, нами были получены данные, анализ которых показал наличие дисбаланса в системе про-/антиоксиданты и окислительного стресса у наблюдаемых женщин с МЭМ средней степени выраженности. Общая АОА плазмы крови у пациенток с МЭМ до лечения была снижена в среднем на 28,2% (р<0,05), количество сульфгидрильных групп на 23,9% (р<0,05), активность КАТ на 32,9% (р<0,05), активность СОД на 67,5% (р<0,05). Показатели уровня процессов СРО и ПОЛ, отражающие состояние прооксидантного звена системы про-/антиоксиданты, были в основном повышены, что, по-видимому, связано с развивающимся состоянием ОС. Амплитуда МВХЛ плазмы крови была выше контрольных цифр на 48,5% (р<0,05), ПВХЛ — на 121,4% (р<0,05), содержание ТБК-активных веществ плазмы на 53,2% (р<0,05), эритроцитов на 11,9% (р<0,05), а общее ТБЧ, суммарно отражающее изменения в клеточном и внеклеточном звене крови, на 17,5% (р<0,05). Содержание карбонильных групп без индукции Fe2+ было выше контрольных значений на 83,4%, с индукцией Fe2+ — на 57,2%. Анализ динамики взаимного функционирования основных ферментов системы АОЗ эрит-

роцитов показал значительный дисбаланс в их работе. Расчетный показатель КАТ/СОД у женщин, страдающих МЭМ на стадии развития основных симптомов заболевания, был сдвинут в сторону повышения более чем в два раза, т.е. был выше аналогичного показателя условно здоровых женщин контрольной группы на 104,9% (р<0,05). Это свидетельствует о значительном напряжении в функционировании системы АОЗ организма пациенток с МЭМ, и в большей степени отражает состояние ОС, чем отдельные показатели ферментативной активности КАТ и СОД. Из всех изучаемых показателей ОС у наблюдаемых женщин с МЭМ наиболее выраженное изменение было характерно для интегрального показателя КОМБэр, который на момент обращения был повышен у данной категории гинекологических больных практически в 13 раз. Этот факт подтверждает формирование ОС у больных с воспалительными заболеваниями органов половой системы, в частности с МЭМ уже на ранних стадиях болезни, что является отягчающим фактором течения патологии.

Для изучения динамики процессов образования и устранения АФК и продуктов СРО у больных с МЭМ на фоне проводимой традиционной терапии, включающей в 1) себя антибактериальную терапию (антибиотики широкого спектра действия) комбинированные полусинтетические пени-циллины «Амоксиклав» по 1г. 2-3 раза в день, 2) «Метронидазол» 500 мг 3 раз в день, 3) системные антимикотики «Дифлюкан» по 150 мг 1 раз в неделю, 4) нестероидные противовоспалительные средства «Диклофе-нак» в/м 1 раз в день, 5) аминогликозиды III поколения «Амикацин» 1г 2 раза в день, 6) инфузионную детоксикационную терапию из 10-20 мл(ЫаС10,9%) на 1кг массы тела пациентки; были проведены исследования основных параметров системы АОЗ крови и показателей, отражающих выраженность ОС.

На рис. 2 приведена динамика изменения изучаемых показателей, которая свидетельствует о тенденции к нормализации баланса в системе про-/антиоксиданты у женщин с МЭМ, получающих курс традиционной терапии воспалительного процесса.

Из данных рисунка видно, что в ходе традиционного лечения происходит некоторая коррекция и, в определенных случаях, приближение к физиологическому уровня процессов СРО и ПОЛ, активизированных при развитии воспаления, но многие изучаемые показатели системы про— /антиоксиданты остаются вне нормальных значений и к концу лечения.

Рис. 2. Показатели системы про-/антиоксиданты у наблюдаемых больных с МЭМ на фоне проводимого традиционного лечения.

АОА плазмы крови в ходе традиционного лечения без целенаправленного использования антиоксидантов остаются на уровне значений до лечения, что свидетельствует о напряжении в функционировании системы АОЗ у наблюдаемых больных с МЭМ и после курса проведенной традиционной терапии.

Количество сульфгидрильных групп крови у больных с МЭМ несколько повышалось в результате лечения, но оставалось ниже значений контроля на 17,9% (р<0,05).

Сниженная активность КАТ также повышалась на 18,2% (р<0,05) на фоне традиционного лечения, при этом все же оставаясь ниже контрольных значений и после проведенного лечения. Активность СОД эритроцитов в ходе лечения практически не изменялась. Показатели интенсивности реакций образования и накопления в биологических жидкостях продуктов СРО, обладающих способностью к возбуждению реактивных оксигенных радикалов, в ходе лечения несколько снизились, но оставались значительными. Так, показатель амплитуды МВХЛ был выше показателей контрольной группы на 39,4% (р<0,05), а показатель ПВХЛ на 105,3% (р<0,05). Такое сохраняющееся в ходе

лечения увеличение показателя площади индуцированной вспышки ХЛ свидетельствует о снижении антиоксидантной емкости плазмы крови и организма в целом у больных с МЭМ, что может быть опасным в плане повторных инфекций и дополнительных прооксидантных нагрузок, которые могут вызывать еще более значимое нарастание явлений ОС.

Показатели уровня образования и увеличения пула ТБК-актив-ных веществ в плазме крови и эритроцитах претерпевали значительные изменения в ходе лечения. Активность ТБЧ плазмы после лечения оставался повышенным на 17,7% (р<0,05), в то время когда до лечения она была повышена на 53,1%, а количество эритроцитов практически возвратился к нормальным значениям. Такая же положительная динамика характерна и для ТБЧ общего. Количество карбонильных групп как с индукцией, так и без нее у больных с МЭМ на фоне проводимого лечения снизилось, но оставался выше величин контрольной группы на 32,1-41,4%% (р<0,05), что отражает сохраняющуюся оксидативную нагрузку на углеводородные структуры организма, прежде всего белковой и липидной природы. Соотношение КАТ\СОД в ходе лечения у наблюдаемых больных с МЭМ еще более выросло, превышая показатель контрольной группы на 138,1% (р<0,05). Это, прежде всего, обусловлено тем, что активность КАТ подверглась положительной коррекции, а СОД осталась неизменной. Коэффициент окислительной модификации биоструктур клеток и тканей — КОМБэр после проведенного лечения несколько снизился, оставаясь выше показателей контрольной группы практически на десять пунктов, но ниже показателя у этих же пациентов до лечения на 3 пункта.

Для сравнительного анализа эффективности различных схем комбинированного лечения больные с МЭМ были распределены на группы, что описано выше. Включение в схему традиционного лечения комплекс Аципол + витамин С в терапевтических дозировках было обосновано необходимостью сравнить действие двух пробиотических препаратов в более адекватных условиях, т.к. пробиотический препарат 3 поколения Би-он-3 имеет в своем составе и антиоксидантные компоненты.

Анализ полученных результатов показал эффективность включения в комплекс проводимого лечения пробиотиков и антиоксидантов (табл. № 3).

Таблица 3

Состояние основных показателей прооксидантно-антиоксидантного баланса у пациентов с метроэндометритом и их динамика при использовании различных схем лечения.

1 Показатель МЭМ трад. лечение МЭМ АТБ+ЭБ МЭМ АТБ+аципол МЭМ бион-3

! АОА. шг/л vit С 10,140+0,779 10,695±0,612 11,905+0.840 12,104±1,101 *

МВХЛ, усл.ед. 0.480±0,015 0.442±0.010 0,433±0,013 ® 0,397±0,014 *®

Г113Х.1, усл.ед. 1,194±0,066 1,049±0.033 0,953±0,029 ® 0,901±0,034

ТБЧ плазмы, ОЕ 0,191 ±0.021* 0,213±0,016* 0,177±0,011 * 0.149±0,()09 *

ТБЧ эритроцитов, ОЕ 1,103±0.024 1,085+0,027 1,049±0,019 * 1,061+0.018 *

ТБЧ общее, ОЕ 1,294±0,035'1: 1,298±0,025* 1,226+0,024 * 1.211+0,023 *

; SH-группы, ОЕ 0,420+0.007 0,456±0,008 ®* 0,481±0,005 *® 0,484±0.005 *®

Активность ; каталазы, (ел. : ак-т./Ег) 4,528+0,159 4,655+0,193 4,914+0,269 5,910±0,204 *®

Активность СОД, % ингибиропания (),279±0,(Ю8 0,392±0,(Ю4 *® 0,513±0,007 *® 0,571+0,005 *®

КОМВег 9,986±0.748 6,030±0,958 *® 3,189±0.563 *® 2.831 ±0,564 *®

; КАТ/СОД, КАТ/СОД 16,444+0.714 11,953±0,549 *® 9,588±0,555 *® 10.367+0,361*®

Примечание:

'•■' — статистически достоверные различия при сравнении с группой

«МЭМ до лечения» У — статистически достоверные различия при сравнении с группой «МЭМ трад. лечение».

Так, биофизический показатель плазмы крови — общая АОА, значительно сниженный у больных с МЭМ до лечения, при использовании в комплексной схеме лечения аципола несколько увеличился, но оставался гораздо ниже показателей контроля (на 23,0%) и после курса терапии. При добавлении в схему лечения прямого гидрофильного антиоксиданты — вит. С в терапевтической дозировке вместе с ациполом, как описано ранее, установлен более значимый подъем общей АОА плазмы крови после лечения. Однако этот показатель оставался ниже контрольных значений группы условно здоровых доноров на 14,4%. Наиболее выраженное позитивное корригирующее действие на показатель АОА плазмы крови оказало использование в схемах лечения комплексного пробиотика бион-3. На фоне его применения общая АОА плазмы крови выросла

на 12,1% по отношению к уровню этого показателя до лечения, но оставалась все же на 12,9% ниже показателей контрольной группы.

Максимум вспышки хемилюминесценции

Рис. 3. Показатель максимальной амплитуды вспышки ХЛ плазмы крови у больных МЭМ на фоне различных схем лечения.

Биофизические показатели хемилюминесцентного анализа при использование комплексного лечения имели также позитивную динамику. В сравнении с исходным уровнем амплитуда МВХЛ у больных с МЭМ снизилась, но оставалась выше контрольных значений на 26,4% (р<0,05), 24,1%(р<0,05), и 14,9% (р>0,05) у женщин 2-й, 3-й и 4-й наблюдаемых групп соответственно (рис.3).

Показатель ПВХЛ имел следующие значения на фоне проводимого лечения: у женщин 2-й группы он снизился (по отношению к исходному уровню на момент начала терапевтических мероприятий) на 16,9% (р<0,05), у женщин 3-й группы на 27,2 % ( р<0,05)и на фоне использования Биона-3, у женщин 4-й группы, на 28,9%( р<0,05). При этом необходимо отметить, что данный показатель хоть значительно и снизился, отражая восстановление антиоксида-

нтных ресурсов организма у выздоравливающих женщин с МЭМ, все же оставался весьма высоким и после проведенного традиционного лечения.

У больных с МЭМ показатели ТБК-активных веществ плазмы крови и эритроцитов подверглись в ходе проводимого лечения коррекции, и в разной степени в зависимости от схемы проводимого лечения. ТБЧ плазмы крови снизился у больных 2-й группы на — 14,5%, у больных 3-й группы на — 28,9% и у женщин 4-й группы на — 40,2%. При этом необходимо отметить, что данный показатель, отражающий уровень образования и накопления в биологических жидкостях промежуточных и конечных продуктов СРО, на фоне комплексного лечения у женщин 3-й и 4-й групп возвратился к нормальным значениям, так как они получали направленную ан-тиоксидантную терапию. Показатель ТБЧ эритроцитов снизился на фоне лечения у больных 2-й группы на 7,9%, у больных 3-й группы и 4-й групп он полностью нормализовался. Аналогичные изменения были характерны и для общего ТБЧ. Аципол проявляет такие свойства только в комплексе с прямым антиоксидантом — аскорбиновой кислотой. Уровень карбонильных групп, определяемых с индукцией и без индукции, на фоне применения пробиотика бион-3 к концу лечения при нормализации клинической картины заболевания возвращался к нормальным значениям контрольной группы.

Реакция отдельных изучаемых показателей системы АОЗ крови на проводимую терапию у женщин наблюдаемых групп была неоднозначной. На фоне применения комплексной терапии у пациенток 2-й группы показатель тиоловых групп эритроцитов повысилось на — 16 %, у женщин 3-й группы на — 22,4% и у женщин 4-й группы на — 23,2%. Наиболее значимые изменения произошли у пациенток, получающих в комбинированном лечении пробиотические и антиоксидантные препараты.

Активность каталазы на фоне терапии пробиотиками и антиок-сидантами повышалась и к концу лечения у больных 4-й группы даже несколько превышала величины контрольной группы условно одоровых женщин. У больных 3-й группы этот показатель был всего аа 10,6% ниже показателя контроля, в то время как в начале лечения активность КАТ у них была ниже контрольных значений на 33% . У женщин 2-й группы, получающих аципол, активность ката-

лазы практически не менялась в ходе лечения. Активность СОД эритроцитов у больных 2-й группы увеличилась после лечения относительно величин до лечения на 50% , а у больных 3-й и 4-й групп на 104,2% и 118,01% соответственно. При этом, несмотря на такую позитивную динамику, активность СОД к концу наблюдения, после проведенного курса терапии, оставалась ниже контрольных значений.

Интегральные показатели ОС — коэффициент КАТ/СОД и КОМБэр отражали позитивную динамику восстановления физиологического баланса в системе про-/антиоксиданты. Наиболее значимое и практически равнозначное снижение показателя КОМБэр. произошло у женщин с МЭМ 2-й и 3-й групп, получающих аципол с аскорбиновой кислотой в дополнении к основным схемам лечения и бион-3. У больных данных групп коэффициент окислительной модификации или гиперкатаболизма снизился до 3, что может свидетельствовать о практически полной нормализации процессов СРО и ПОЛ, а также о восстановлении функции системы АОЗ.

Так же у наблюдаемых женщин с МЭМ, получавших традиционное лечение и пробиотик бион-3 в комплексной терапии заболевания, было проведено изучение таких инфекций как Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Candida albicans; Ureaplasma биовары, Staphylococcus aureus, Candida spp. Проводилась оценка содержания лейкоцитов в крови и мазке из влагалища, состояния эпителия, общая оценка флоры, наличие трихомонад, степень чистоты влагалища. Оценка патологической микрофлоры проводилась методом ПЦР и A.F. Genital system.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что женщины, больные МЭМ, являлись носительницами инфекций Gardnerella, Candida, Ureaplasma, Staphylococcus, Candida. Кроме того, при проведении исследований методом ПЦР у 89% обследованных была выявлена Mycoplasma, которая также обнаруживалась при анализе на бактериальный вагиноз. Оценка эффекта традиционного лечения в комплексе с пробиотическим препаратом «Бион-3» показала, что носитель-ство всех инфекций по окончанию полного курса лечения было исключено, что подтверждено обоими методами диагностики. Анализ на бактериальный вагиноз также показал отсутствие патогенной микрофлоры в матке. Результаты бактериологических исследований представлены в таблице 4.

Таблица 4

Результаты бактериологических исследований, проведенных до и после лечения, у женщин с МЭМ, получавших традиционное лечение и дополнительно получавших препарат бион-3.

\^Вид анализа Группа ПЦР A.F. Genital system Анализ на бактериальный вагшю!

МЭМ DR - обнаружено GAR - обнаружено STF - обнаружено CAN - обнаружено Mycoplasma hominis -обнаружено UR - обнаружено GAR - обнаружено STF - обнаружено CAN - обнаружено UR - обнаружено GAR - обнаружено STF - обнаружено CAN - обнаружено Mycoplasma hominis -обнаруж

мэм + тл + «Бион-3» UR - abs GAR-abs STF - abs CAN - abs Mycoplasma hominis -abs UR - abs GAR - abs STF-abs CAN-abs UR-abs GAR-abs STF-abs CAN - abs Mycoplasma hominis -abs

Примечание: GAR — Gardnerella vaginalis, CAN — Candida albicans, UR — Ureaplasma биовары, STF — Staphylococcus aureus, abs — отсутствие.

Для решения вопросов свидетельствующих о наличии или отсутствии воспалительного процесса был проведен клинический анализ крови. Определяли: СОЭ, содержание лейкоцитов и эозинофилов крови. Показатели крови при развитии МЭМ резко изменялись, что свидетельствовало о высокой интенсивности воспалительного процесса: так содержание лейкоцитов крови повысилось в 1,5 раза, СОЭ — в 2,8 раза, содержание эозинофилов — на 141,4 %. После прохождения курса традиционного лечения клиническая картина крови значительно улучшалась, но не достигала уровня нормы. При оценке клинической картины крови на фоне комплексной терапии, включающей традиционные препараты и дополнительно пробиотик «Бион-3», было установлено, что исследуемые показатели крови приблизились к нормальному уровню более, чем при традиционном лечении: содержание лейкоцитов превышало нормальное значение только на 8,7 % и снизилось по сравнению с группой, где был подтверж-

ден диагноз метроэндометрита, на 137,9 %; СОЭ снизилась на 280,2 % и превышала нормальное значение на 4 %; содержание эозинофилов снизилось на 134,5 % по сравнению с МЭМ и превышало норму на 6,9 %. Данные результаты по исследованию показателей ОС и воспалительной реакции показали, что эти процессы тесно взаимосвязаны, и коррекция заболеваний гнойно-воспалительного генеза невозможна без включения в схемы традиционного лечения препаратов пробиотической, иммуномо-дулирующей и антиоксидантной коррекции.

ВЫВОДЫ

1. Проведенными исследованиями установлено, что у гинекологических больных с МЭМ развивается значительный дисбаланс в системе про-/антиоксиданты за счет превалирования первого звена данной системы. Это проявляется усилением реакций свободно-радикального окисления, выражающихся увеличением интегрального показателя окислительной деструкции (КОМБэр) в 13 раз, интенсивности БВХЛ на 48,6%, ПВХЛ на 121,4% и снижением общей антиоксидантной активности плазмы крови на 27,7%.

2. Наиболее эффективными методами диагностики и контроля над клиническим течением МЭМ и проводимым лечением, в плане быстроты и экономической целесообразности, являются предлагаемые в работе биофизические показатели оценки окислительного стресса: амперометри-ческий способ определения общей антиоксидантной активности плазмы крови и методы индуцированной хемилюминесценции.

3. Применение курса традиционной терапии (с использованием современных антибиотиков) при МЭМ купирует проявления воспалительной реакции, практически не оказывая влияния на имеющийся дисбаланс в системе про-/антиоксиданты (показатель общей антиоксидантной активности плазмы крови остается сниженным на 26,8%, показатель БВХЛ увеличенным на 39,4%, ПВХЛ увеличена 105,4%.

4. Использование в комплексном лечении МЭМ пробиотических препаратов 1 поколения (аципол по 1 капсуле 3 раза в день) способствует восстановлению естественного состава микрофлоры, что подтверждено бактериологическими посевами, но не нормализует баланс в системе про-/антиоксиданты (тиоловые группы снижены на 16%, АОА снижена на 23%, уровень ТБК-активных продуктов увеличен на 16%, БВХЛ на 26,4%, КОМБэр повышен в 6 раз.).

5. Включение в схемы традиционной терапии комбинированного пробиотического препарата бион-3, обладающего антиоксидантным действием, или пробиотика аципол в комплексе с пероральной формой витамин С в терапевтических дозировках приводит к значительному восстановлению дисбаланса метаболизма и состава микрофлоры у больных с МЭМ.

6. Использование в комплексном лечении больных с МЭМ пробиотического препарата третьего поколения (бион-3) оказалось наиболее эффективным и перспективным в плане устранения воспалительного процесса, нормализации микрофлоры и функционирования системы атиок-сидантной защиты, так как после курса проведенного лечения все изучаемые показатели практически не отличались от показателей контрольной группы условно здоровых доноров

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки функционального состояния организма больных с МЭМ, прежде всего, состояния системы антиоксидантной защиты, тесно взаимосвязанной с системой иммунной защиты, целесообразно использовать методы выявления дисбаланса в системе про-/антиоксиданты, отражающие уровень окислительного стресса.

2. Наиболее объективным является метод интегрального показателя КОМБэр, суммарно отражающий степень истощения системы антиоксидантной защиты и уровень прооксидантной нагрузки у больных с воспалительными заболеваниями, который у больных с МЭМ увеличивается более, чем в 10 раз.

3. Для контроля за течением болезни и проводимым лечением, в плане быстроты и экономической целесообразности, наиболее эффективными методами являются биофизические показатели оценки окислительного стресса — амперометрический способ определения общей антиоксидантной активности плазмы крови и методы индуцированной хеми-люминесценции.

4. Для эффективного патогенетического лечения больных с МЭМ необходимо включать в схемы традиционной терапии пробиотики индивидуального действия в комплексе с антиоксидантами (аципол по 1 капсуле 3 раза в день за 30 минут до приема пищи и аскорбиновая кислота до 2г. в сутки) или комбинированные пробиотические средства третьего поколения с антиоксидантным компонентом (бион-3 по 1 капсуле 2 раза в день за 60 минут до приема пищи).

СПИСОК НАУЧНЫХ РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ:

1. Власов, Р.В. Состояние антиоксидантной системы крови у больных метроэндометритом / Р.В. Власов, К.И. Мелконян, В.В. Малышко, И.И. Павлюченко // Современные проблемы науки и образования.— 2008.— №4, прил. № 1,— С.160.

2. Малышко, В.В. Уровень продуктов окислительной модификации биомолекул в крови у больных метроэндометритом / В.В. Малышко, К.И. Мелконян, Р.В. Власов // Современные проблемы науки и образования. 2008. — № 4, прил. № 1.— С. 172.

3. Быков, И.М. Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови у больных метроэндометритом / И.М. Быков, A.A. Ладуть-ко, Е.Е. Есауленко, К.И. Мелконян // 4 съезд Рос. о-ва биохимиков и молекулярных биологов. — Новосибирск,2008. — С.421.

4. Есауленко, Е.Е. Роль металл-катализируемого окисления белков в патогенезе метроэндометрита / Е.Е. Есауленко, К.И. Мелконян, A.A. Ладутько, И.М. Быков // 4 съезд Рос. о-ва биохимиков и молекулярных биологов. — Новосибирск, 2008. — С.448.

5. Павлюченко, И.И. Способ интегральной биохимической оценки уровня окислительного стресса у больных при различных патологических состояниях / И.И. Павлюченко, A.A. Басов, Е.А. Губарева, К.И. Мелконян, М.А. Макарова, Т.В. Еремина, А.Э. Моргоев // 4 съезд Рос. о-ва биохимиков и молекулярных биологов. — Новосибирск, 2008. — С.438.

6*. Мелконян, К.И. Возможности коррекции процессов свободнора-дикального окисления биомолекул пробиотиками у больных метроэндометритом / К.И. Мелконян , И.М. Быков // Аллергология и иммунология.- 2009. -Т.10, №2. -С.251.

7*. Мелконян, К.И. Влияние пробиотиков и на показатели системы про-/антиоксиданты у пациентов с метроэндометритом / К.И. Мелконян, И.М. Быков, И.И. Павлюченко, Н.В. Белкина // Кубанский научный медицинский вестник.— 2009.-№3(108). — С.75-78.

8. Быков, И.М. Роль свободных радикалов в формировании мегоэндо-метрита / И.М. Быков, И.И. Павлюченко, К.И. Мелконян // Вестник новых медицинских технологий.— 2009. — Т.— 16, №1.— С. 260.

* Работа, опубликована в журнале, включенном ВАК в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИИ

АОА— антиоксилительная активность, антиоксидантная активность АОЗ— антиоксидантная защита АФК— активные формы кислорода КАТ— каталаза

КОМБ-коэффициент окислительной модификации биомолекул МВХЛ-максимальная вспышка хемилюминесценции МЭМ— метроэндометрит ОС— окислительный стресс

ПВХЛ — площадь вспышки хемилюминесценции

СОД— супероксиддисмутаза

СРО — свободнорадикальное окисление

БН-сульфгидрильные группы

ТБК-тиобарбитуровая кислота

ТБЧ— тиобарбитуравое число

Мелконян Карина Игоревна

03.00.04-биохимия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Подписано в печать 25.11.2009 г. Набор компьютерный. Гарнитура Times. Усл.п.л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ М» 25/11/01. Отпечатано методом ризографии.

Издательство «MD-production». г. Краснодар, ул. Красноармейская, 90, оф. 5. Тел. (861) 299-97-35.

Содержание диссертации, кандидата медицинских наук, Мелконян, Карина Игоревна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. РОЛЬ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В

ПАТОГЕНЕЗЕ ГИНЕКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ЛЕЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТАМИ.

1.1. Роль перекисного окисления липидов в патогенезе гинекологических заболеваний.

1.2. Эффективность препаратов антиоксидантного и пробиотического действия в комплексном лечении метроэндометрита.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Клинико-функциональная характеристика больных МЭМ.

2.1.1. Характеристика групп обследованных женщин.

2.1.2. Бимануальное объективное гинекологическое обследование

2.1.3. Гормональный статус больных метроэндометритом.

2.1.4. Характеристика традиционной медикаментозной терапии МЭМ.

2.1.5. Характеристика комбинированной медикаментозной терапии

2.2. Инструментальные методы исследования.

2.2.1 Ультразвуковое исследование (УЗИ).

2.2.2 Оценка тяжести клинических проявлений МЭМ.

2.2.3. Общеклинические методы исследования.

2.3. Лабораторные методы исследования.

2.3.1. Получение биологического материала для лабораторного исследования.

2.3.2. Материал для клинического биохимического анализа.

2.4. Методики оценки прооксидантно-антиоксидантного статуса биологического материала.

2.4.1. Люминол-зависимая Н202-индуцированная хемилюминесценция.

2.4.2. Амперометрический анализ антиокислительной активности

2.4.3. Определение активности каталазы.

2.4.4. Определение активности супероксиддисмутазы.

2.4.5.Определение продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой.

2.4.6. Определение количества сульфгидрильных групп.

2.4.7. Методика расчета интегрального показателя коэффициента окислительной модификации биомолекул эритроцитов.

2.4.8. Методика определения количества эритроцитов в цельной крови.

2.4.9. Определение уровня карбонильных групп белков (окислительной модификации) по реакции с 2,4-динитрофеннлгидразином.

2.5. Статистические методы исследования.

ГЛАВА З.ОКСИДАТИВНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ЭРИТРОЦИТАХ И ПЛАЗМЕ КРОВИ У ЖЕНЩИН БОЛЬНЫХ МЕТРОЭНДОМЕТРИТОМ И СПОСОБЫ ИХ АНТИОКСИДАНТНОЙ КОРРЕКЦИИ.

3.1. Состояние системы антиоксидантной защиты организма и уровень перекисного окисления липидов у больных МЭМ до начала лечения.

3.2. Сравнительная оценка состояния систем антиоксидантной защиты организма и перекисного окисления липидов у женщин, больных МЭМ до и после курса традиционного лечения.

ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ СИТЕМЫ ПРО-/АНТИОКСИДАНТЫ КРОВИ У БОЛЬНЫХ МЭМ НА ФОНЕ ПРОВОДИМОЙ ТЕРАПИИ.

4.1. Влияние парафармацевтического препарата бион-3 на устранение дисбиоза при лечении метроэндометрита.

Введение Диссертация по биологии, на тему "Биохимическое обоснование применения антиоксидантов и пробиотиков в комплексной терапии больных метроэндометритом"

Основная масса воспалительных заболеваний связана с активацией процессов свободнорадикального окисления (СРО) и перекисного окисления липидов (ПОЛ) как на местном уровне, так и на уровне организма в целом. С другой стороны длительная прооксидантная нагрузка на организм (стрессы, переохлаждение, перегревание, повышенный фон Ультрафиолетового облучения, радиация, излучение, курение, алкоголь, погрешности питания и др.) приводят к напряжению в работе антиоксидантной системы (АОС), ее дисфункции и, как следствие, инициации неконтролируемых процессов СРО. Это может стать причиной развития окислительного стресса (ОС). Проблемой ОС является угнетение стресс-лимитирующих систем и активация стресс реализующих систем, что выступает в роли предиктора различных функциональных и метаболических расстройств. В первую очередь страдает иммунная системы, при этом может происходить как ее избыточная активация, так и угнетение. Дисфункция иммунной системы является причиной многих заболеваний, в том числе и метроэндометрита (МЭМ).

МЭМ является достаточно распространённым полиэтиологическим и полипатогенетическим заболеванием в гинекологии, которое имеет тенденцию к хронизации процесса при несвоевременном или неправильном лечении, а также в случае дефектов иммунной системы. Так, у амбулаторных гинекологических больных МЭМ занимает одно из ведущих мест по частоте заболеваний женских половых органов. При избыточной генерации активных форм кислорода (АФК), вызванной разнообразными причинами, процесс СРО принимает каскадный характер. Это приводит к нарушениям структуры и функций различных биомембран с последующем освобождением из лизо-сом протеолитических ферментов, которые обладают агрессивным действием в отношении биосубстратов клеток. Может происходить разобщение процессов окислительного фосфорилирования и сопряженного с ним тканевого дыхания, развитие гипоэнергетических состояний и, как результат, к тяжелому дисбалансу клеточного метаболизма. В свою очередь, метаболиты СРО интенсифицируют каскад преобразований арахидоновой кислоты, что способствует накоплению в очаге воспаления полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ), активация которых также сопровождается образованием свободных радикалов.

Таким образом, возникает замкнутый круг, активация СРО вызывает дисбаланс в иммунной системе, а активация иммунных реакций способствует генерации активных форм кислорода , что является основой поддержания незатухающего воспалительного процесса, разорвать который возможно использованием антиоксидантов. Поэтому, естественно, вопросы лечения воспалительных заболеваний, а именно антиокислительной терапии гинекологических заболеваний являются весьма актуальными.

По данным различных авторов, у 80-95% больных МЭМ доминирующим микроорганизмом является Staphylococcus aureus, определяемым в посевах на микрофлору, что свидетельствует о неправильной или недостаточной терапии заболевания, предшествующего МЭМ [О.Г. Елисютина, Е.С. Феден-ко, 2006].

Однако попытки уменьшить колонизацию Staphylococcus aureus с помощью антибиотиков и других терапевтических средств до сих пор не имели достаточного эффекта. По завершении антибактериальной терапии степень колонизации Staphylococcus aureus у больных МЭМ довольно быстро возвращалась к исходному уровню, т.е. источником реколонизации может являться не восстановленная естественная флора влагалища. На основании этого можно сделать вывод, что лечение только антибактериальными препаратами не всегда приводит к полному выздоровлению, а увеличение дозировок и продолжительности лечения способствуют развитию дисбактериозов, поэтому комплексное лечение необходимо включать препараты с иммуномоду-лирующими и антиоксидантнымы свойствами [И.В. Зарубина, П.Д. Шабанов, 2004; С.В. Оковитый, С.Н. Шуленин, А.В. Смирнов, 2005, Н.М. Победин-ский, М.В. Беришвили, 2007].

На данный момент разработаны препараты, обладающие как пробиоти-ческими, так и антиоксидантными свойствами, которые следует использовать для коррекции традиционной антибактериальной терапии.

Применение в комплексном лечении гинекологических заболеваний пробиотиков III поколения типа бион-3 с антиоксидантными свойствами способствует более быстрому купированию проявлений заболеваний, нормализует флору во влагалище, а так же антиокислительный гомеостаз, уменьшает интенсивность процессов перекисного окисления липидов, улучшает метаболические процессы в организме, а так же может использоваться комбинированная терапия, пробиотики плюс антиоксиданты (например, аципол в сочетании с аскорбиновой кислотой) [Н.М. Пасмаи, P.C. Логинова, 2006].

В связи с вышеизложенным актуальным является изучение на клеточном уровне молекулярных механизмов развития и течения МЭМ, а именно уточнения оксидативных изменений в эритроцитах и сыворотке крови у женщин с этой патологией, с изменением биохимических маркеров окислительного стресса, отражающих клиническую картину болезни. Изучение в динамике показателей свободно-радикальных процессов и ПОЛ на фоне проводимой комплексной терапии послужит основой разработки эффективных схем лечения МЭМ с учетом про- /антиоксидантного статуса.

Цель работы: изучить характер оксидативных изменений в эритроцитах и плазме крови у женщин с МЭМ и определить возможности коррекции этих процессов путем включения в схемы лечения препаратов пробиотиче-ской и антиоксидантной направленности.

Задачи исследования:

2. Оценить in vivo антиоксидантную активность современных пробио-тических и антиоксидантных препаратов, используемых при лечении МЭМ.

4. Предложить наиболее эффективные схемы комплексной терапии МЭМ с использованием бион-3 и комплекса пробиотика и антиоксиданта.

Новизна исследования.

- Впервые с помощью интегральных методов исследования доказано наличие и определена выраженность ОС у женщин с МЭМ.

- Установлено, что проводимая традиционная терапия купирует воспалительный процесс, но не обеспечивает полную стабилизацию системы про-/антиоксиданты у больных с МЭМ.

- Впервые проведено всестороннее исследование влияния комбинированных пробиотических средств (бион-3), индивидуальных пробиотиков (аципол), а также комбинации пробиотик и антиоксидант прямого действия (аципол+аскорбиновая кислота) на различные показатели системы про-/антиоксиданты у больных МЭМ.

- Впервые (на большом клиническом материале) с использованием биофизических и биохимических методов исследования подобранны наиболее эффективные схемы пробиотической и антиоксидантной коррекции ОС у больных с МЭМ.

Практическая ценность.

Внедрение в практику результатов исследования.

Предложенный метод лечения внедрен в практику лечебных учреждений: МУЗ Роддом г.Краснодара, женская консультация №4; МУЗ ГБ №2 «КМЛДО» Перинатальный центр, женская консультация №5 г. Краснодара.

Основные положения, выносимые на защиту

4. Включение в схемы традиционной терапии пробиотических препаратов 1-го поколения (аципол) в комплексе с пероральной формой Vit. С и III-поколения (бион-3) - как средств направленной фармакологической коррекции окислительного гомеостаза способствует как восстановлению нормальной микрофлоры, так и стабилизации дисбаланса в системе про-/антиоксиданты, что позитивно сказывается и на состоянии иммунной системы.

5. Наиболее перспективными и эффективными методами диагностики и контроля за клиническим течением МЭМ и эффективностью проводимого лечения являются биофизические показатели плазмы крови: амперометрический метод определения общей антиокислительной активности и метод оценки индуцированной хемилюминесценции.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 123 страницах машинописного текста, иллюстрирована 17 рисунками, содержит 7 таблиц. Список литературы включает 190 источников, из них 130 отечественных и 60 иностранных.

Заключение Диссертация по теме "Биохимия", Мелконян, Карина Игоревна

ВЫВОДЫ

1. Проведенными исследованиями в работе установлено развитие значительного дисбаланса в системе про-/антиоксиданты у гинекологических больных с МЭМ в сторону превалирования первого звена ОС, что проявляется усилением реакций свободно-радикального окисления, выражающихся увеличением интегрального показателя окислительной деструкции (КОМ-Бэр) в 13 раз, интенсивности БВХЛ на 48,6%, ПВХЛ на 121,4% и снижением общей антиоксидантной активности плазмы крови на 21,1%.

2. Наиболее эффективными методами диагностики и контроля за клиническим течением МЭМ и проводимым лечением, в плане быстроты и экономической целесообразности, являются предлагаемые в работе биофизические показатели оценки окислительного стресса — амперометрический способ определения общей антиоксидантной активности плазмы крови и методы индуцированной хемилюминесценции.

3. Применение курса традиционной терапии (с использованием современных антибиотиков) при МЭМ купирует проявления воспалительной реакции, практически не оказывая влияния на имеющийся дисбаланс в системе про-/антиоксиданты (показатель общей антиоксидантной активности плазмы крови снижен на 26,8%, показатель БВХЛ увеличен на 39,4%, ПВХЛ увеличена 105,4, и в большинстве случаев (от 70 до 75%), является частой причиной развития дисбиоза (появлением патологической микрофлоры gardnerella vaginalis, Candida albicans, Ureaplasma).

4. Использование в комплексном лечении МЭМ пробиотических препаратов 1 поколения (аципол по 1 капсуле 3 раза в день) способствует восстановлению естественного состава микрофлоры, что подтверждено бактериологическими посевами у наблюдаемых женщин, но не нормализует баланс в системе про-/антиоксиданты (тиоловые группы снижены на 16%, АОА снижена на 23%, уровень ТБК-активных продуктов увеличен на 16%, БВХЛ на 26,4%, КОМБэр повышен в 6 раз.).

5. Включении в схемы традиционной терапии комбинированного про-биотического препарата бион-3, обладающего антиоксидантным действием или пробиотика аципол в комплексе с пероральной формой витамин С в терапевтических дозировках приводит к значительному восстановлению окислительно- восстановительного метаболизма и состава микрофлоры у больных с МЭМ.

6. Использование в комплексном лечении больных с МЭМ пробиоти-ческого препарата третьего поколения (бион-3) оказалось наиболее эффективным и перспективными в плане устранения воспалительного процесса, нормализации микрофлоры и функционирования системы атиоксидантной защиты, так как после курса проведенного лечения все изучаемые показатели практически не отличались от показателей контрольной группы условно здоровых доноров.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для оценки функционального состояния организма у больных с МЭМ, и прежде всего, состояния системы антиоксидантной защиты, тесно взаимосвязанной с системой иммунной защиты целесообразно использовать методы оценки дисбаланса в системе про-/антиоксиданты, отражающие уровень окислительного стресса.

2. Наиболее объективным из применяемыми методами является использование интегрального показателя КОМБэр, суммарно отражающего степень истощения системы антиоксидантной защиты и уровень проокси-дантной нагрузки у больных с воспалительными заболеваниями, который у больных с МЭМ увеличивается более чем в 10 раз.

3. Наиболее эффективными методами контроля за течением болезни и проводимым лечением, в плане быстроты и экономической целесообразности, являются проверенные в работе биофизические показатели оценки окислительного стресса - амперометрический способ определения общей антиоксидантной активности плазмы крови и методы индуцированной хемилюми-несценции.

4. Для эффективного патогенетичского лечения больных с МЭМ необходимо включать в схемы традиционной терапии пробиотики индивидуального действия в комплексе с антиоксидантами (аципол по 1 капсуле 3 раза в день за 30 минут до приема пищи и аскорбиновая кислота до 2 г. в сутки) или комбинированные пробиотические средства третьего поколения с антиокси-дантным компонентом (бион-3 по 1 капсуле 2 раза в день за 60 минут до приема пищи).

Библиография Диссертация по биологии, кандидата медицинских наук, Мелконян, Карина Игоревна, Краснодар

1. 2000 болезней от А до Я / под ред. Ю.Л. Шевченко, И.Н. Денисова, Э.Г. Улумбекова. - М., 2003. - 1600 с.

2. Абакарова П.Р. Терапия вульвовагинального кандидоза с применением препарата «Гинофорт» // Гинекология. 2006. Т. 8, № 1. - С. 17-19.

3. Абидов, М.Т., Мустафаев Маг.Ш., Тхазаплижева Л.В. Влияние Та-мерита на секрецию ИЛ-lß у больных одонтогенными флегмонами // Сб. науч. тр., посвящ. 75-летию основания каф. ЧЛХ и стом. BMA им. С.М.Кирова. СПб., 2004. - С. 11.

4. Абрамченко В.В., Башмакова М.А., Корхов В.В. Антибиотики в акушерстве и гинекологии: Рук. СПб., 2000. - 218 с.

5. Абрамченко В.В., Костючек Д.Ф., Хаджиева Э.Д. Гнойно-септическая инфекция в акушерской и гинекологической практике. СПб.,-2000. - 520 с.

6. Абрамченко В.В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве / Абрамченко В.В., Костюшов Е.В., Щербинина Л.А. СПБ.: LOGOS, 1995. -120 с.

7. Абрамченко В.В., Костюшов Е.В., Данилова Н.Р. Пролонгирование эффекта ß-адреномиметиков (гинипрала) в сочетании с комплексом унитол-аскорбиновая кислота // Проблемы репродукции. 2001.-Т. 7, № 4. - С. 51-52.

8. Агаджанова A.A. Основные подходы в комплексной терапии анти-фосфолипидного синдрома в клинике невынашивания беременности // Акушерство и гинекология,- 1999. № 3. - С. 6-8.

9. Айламазян Э.К. Антиоксиданты в комплексной терапии позднего токсикоза беременных и связанной с ним хронической гипоксией плода // Акушерство и гинекология. 1990.- № 3. - С. 30-34.

10. Акушерство: нац. рук. / под ред. Э.К. Айламазяна, В.И. Кулакова, В.Е. Радзинского, Г.М. Савельевой. М., 2009. - С. 436-464.

11. Аллергология. Клинические рекомендации. / под ред. P.M. Хаито-ва, Н.И. Ильиной. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006,- 228 с.

12. Андреева И.В. Потенциальные возможности применения пробио-тиков в клинической практике // Клинич. микробиология, антимикробная химиотерапия. 2006.- Т. 8, № 2. - С. 151-168.

13. Анкирская A.C., Муравьева В.В., Фурсова С.А. и др. // Пробл. мед. микологии. 2004. - Т. 6, № 2. - С. 56-57.

14. Арутюнян A.B., Дубина Е.Е., Зыбина H.H. Методы оценки свобод-норадикального окисления и антиоксидантной системы организма: метод, рекомендации. СПб., 2000. - 104 с.

15. Бабышевский А.Ш., Терсенов O.A. Биохимия для врачей.- Екатеринбург, 1994. 378 с.

16. Байрамова Г.Р., Абакирова П.Р., Прилепская В.Н. // Тез. Междунар. конгр. "Практическая гинекология: от новых возможностей к новой стратегии". М., 2006. - С. 17-18.

17. Барсуков В.И. Плазменно-эмиссионные и атомно-адсорбционные методы анализа и инструментальные способы повышения их чувствительности. М., 2004.- 130 с.

18. Басов A.A., Павлюченко И.И., Плаксин A.M., Федосов С.Р. Использование аналогово-цифрового преобразователя в составе системы сбора и обработки информации с хемилюминитестером LT-1 // Вестн. новых мед. технологий. 2003. - Т. 10, № 4 - С. 67-68.

19. Бондаренко В.М., Чупринина Р.П., Воробьева М.А. Механизм действия пробиотических препаратов. // БиоПрепараты. 2003. - № 3. С. 2-5.

20. Бондаренко В.М., Воробьев A.A. Дисбиозы и препараты с пробио-тической функцией // Журн. микробиологии 2004. - № 1. - С. 84-92.

21. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Препараты пробиотики, пребиоти-ки и синбиотики в терапии и профилактике кишечных дисбактериозов // Фарматека. 2003. - № 7. - С. 56-63.

22. Валенкевич Л.Н., Яхонтова ОИ. Болезни органов пищеварения. -СПб., 2006.- 238 с.

23. Василькова Е.В., Тетелютина Ф.К., Жуковская И.Г. Взаимодействия компонентов витаминно-минеральных комплексов и рациональная витаминотерапия. Витаминно-минеральный комплекс АЛФАВИТ. М., 2006. - С. 26-29.

24. Витамины и микроэлементы у беременных и кормящих как обязательное условие здорового потомства: метод, рекомендации. М., 2007.- Ч. 1-2.-С. 31-33.

25. Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и азота для диагностики профилактики и терапии // Биохимия.-2004.- Т. 69, вып. 1. С. 5-7.

26. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский образовательный журн. 2000. - № 12. - С. 13-19.

27. Власова М.А., Островская О.В., Львов Н.Д., Никитина A.A. // Вопр. вирусол. 2001. - Т. 36, № 6. - С. 501-503.

28. Гадаева И.В. Клинические значения маркеров апоптоза у больных наружным генитальным эндометриозом: автореф. дис. канд. мед. наук. -М.,2002. 19 с.

29. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М: Практика , 1999. —572 с.

30. Давыдов В.В., Божков А.И. Метаболизм эндогенных альдегидов: участие в реализации повреждающего действия окислительного стресса и его возрастные аспекты // Биомед. химия. 2003. - Т. 49, № 4. - С. 374-387.

31. Джанашия М.М, Айламазян Э.К., Костюшков Е.В., Омельянюк Е.В. Антиоксиданты в физиологических и патологических процессах жизнедеятельности организма / под ред. Э.К. Айламазяна. СПб., 2001. 64 с.

32. Джанашия М.М. Нарушение функционального состояния антиок-сидантной системы организма у беременных пиелонефритом и способы и ее медикаментозной коррекции: автореф. дис. . канд. мед. наук. СПб., 2002. -25 с.

33. Елисютина О.Г., Феденко Е.С. Возможности фармакологического контроля нарушении микробиоциноза кожи и слизистых у больных осложненными формами атопического дерматита// Росс. Аллергологич. журн. -2006. с. 36-39.

34. Жиляев Н.И. Диагностика и лечение воспалительных заболеваний внутренних половых органов женщин на основе оценки ПОЛ и активности биоантиоксидантной системы: автореф. дис. . канд. мед. наук.- Киев, 1992. -35 с.

35. Заболевания внутренних органов в амбулаторной практике / под ред. Радченко В.Т. СПб.: Диалект, 2004. 238 с.

36. Заболевания шейки матки, влагалища и вульвы / под ред. проф. В.Н. Прилепской. 3-е изд. - М.: МЕД-пресс-информ, 2003. 387 с.

37. Зазубина И.В., Шабанов П.Д. Бемитил в качестве антиоксидантно-го средства при активации перекисного окисления липидов гипоксическим фактором: метод, рекомендации для врачей. СПб., 2002. - 22 с.

38. Зазубина И.В., Шабанов П.Д. Молекулярная фармакология антиги-поксантов. СПб., 2004. - 386 с.

39. Зайцев A.A., Карпов О.М., Стрекачев А.Ю. Новые возможности антибактериальной терапии инфекций в хирургической практике // Антибиотики и химиотерапия 2003. Т. 48, № 5. С. 34-36.

40. Зайцев В.Г., Островский О.В., Закревский В.И. Связь между химическим строением и мишенью действия как основа классификации антидотов прямого действия // Эксперим. и клинич. фармакология. 2003. - Т. 66, № 4. -С. 66-70.

41. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Общая патофизиология с основами иммунологии. СПб., 2008. - 656 с.

42. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Патохимия (Эндокринно-метаболические нарушения). СПб., 2007. — 768 с.

43. Звягинцева Т.Д., Сергиенко Е.И. Дисбактериоз кишечника: клиническое значение и перспективы лечения // Эксперим. клинич. гастроэнтерология. 2003. - № 3. - С. 70-74.

44. Зинчук В.В., Борисюк М.В. Роль кислородосвязывающих свойств крови в поддержании прооксидантно-антиоксидантного равновесия организма // Успехи физиологич. наук. 1999. - № 3. - С. 38-49.

45. Использование различных методов лечения хронического неспецифического цервицита // Материалы 10 юбил. Всерос. Науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. - С. 270.

46. Ищенко А.И. Новые технологии и малоинвазивная хирургия в гинекологии. М., 2004. - 238 с.

47. Казачкова Э.А. Патогенез, клинико-морфологическая характеристика и лечение воспалительных заболеваний матки и придатков: автореф. дис. д-ра мед. наук. Челябинск, 2000. - 21 с.

48. Камышников B.C. Клинические лабораторные тесты от А до Я и их диагностические профили. М., 2005. - 320 с.

49. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М., 2004. - 920 с.

50. Карманный справочник по диагностическим тестам / под. ред. B.C. Камышникова. М., 2004. - 464 с.

51. Квинн П.Дж. Соответствует ли распределение а-токоферола в мембранах его предполагаемым функциям // Биохимия. 2004, Т. 69, вып. 1. - С. 74-84.

52. Киселев В.И., Ляшенко А.А Молекулярные механизмы регуляции гиперпластических процессов. М., 2005. - 239 с.

53. Кисина В.И., Забиров К.И. Урогенитальные инфекции у женщин: клиника, диагностика, лечение. М., 2005. — 123 с.

54. Кишкун A.A. Биологический возраст и старение: возможности определения и пути их коррекции. М., 2008. - 976 с.

55. Кишкун A.A. Руководство по лабораторным методам диагностики. -М., 2007.-800 с.

56. Кишкун A.A. Справочник заведующего клинико-диагностической лабораторией. М., 2008. - 704 с.

57. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О. / Оценка антиокислительных свойств плазмы крови с применением желточных липопротеидов // Лаб. дело. 1988 - № 3 - С. 59-62.

58. Клиническая интерпретация лабораторных исследований / под ред.

59. A.Б. Белевитина, С.Г. Щербака. СПб., 2006. - 384 с.

60. Клинические рекомендации для практикующих врачей / под ред. Денисова И.Н., Кулакова В.И., P.M. Хаитова, Ю.Л. Шевченко. М., 2002. -1200 с.

61. Клинические рекомендации. Акушерство и гинекология / под ред.

62. B.И. Кулакова. М., 2008. - 302 с.

63. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Хорева М.В., Соколова Е.В. Система цитокинов, комплемента и современные методы иммунного анализа. -М., 2000. 346 с.

64. Козлова В.И., Пухнер А.Ф. Вирусные, хламидийные и микоплаз-менные заболевания гениталий: рук. для врача. М., 1995. - С. 85-141.

65. Комаров Ф.И., Коровкин Б.П. Биохимические показатели в клинике внутренних болезней: (справочник) М.,: МЕДпресс, 1999. - 226 с.

66. Кононова И.Н., Иванова И.П. Состояние микробиоциноза влагалища и местного иммунитета у пациенток с дистрофическими изменениями вульвы // Материалы 10 юбил. Всеросс. науч. форума «Мать и дитя». — М., 2009. С. 330-331.

67. Крамарский В.А., Зорин И.Г., Дудакова В.Н., Сверкунова НЛ. Современный критерий диагностики развития воспалительных осложнений в послеоперационном периоде // Материалы 10 юбил. Всеросс. науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. - С. 332-333.

68. Кудрин A.B., Громова O.A. Микроэлементы в иммунологии и онкологии. М., 2007. - 544 с.

69. Кукер И.И. Процессы радикалообразования в плаценте при плацентарной недостаточности // Росс. Вест, акушера-гинеколога. 2004. - № 4. - С. 36-38.

70. Кулаков В.И., Адамян Л.В. // Материалы 16 Междунар. конгр. с курсом эндоскопии "Новые технологии в гинекологии". М., 2003. - С. 3-6.

71. Кулаков В.И., Голубев В.А. Итоги научных исследований по акушерству и перинатологии, проведенных 2005 году (по м-лам диссертаций, утвержденных ВАК) //Акушерство и гинекология.- 2006. № 5. - С. 55-61.

72. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита // Соросовский образовател. журн. 1999. -№ 1.-С. 2-8.

73. Ланкин В.З., Тихадзе А.К., Кухарчук В.В., Беленков Ю.Н. Биоанти-оксиданты- универсальные лекарственные средства? // Антиоксиданты в профилактике и комплексной терапии свободнорадикальных патологий: сб. материалов науч. симп. М., 2002. С. 3-18.

74. Лекарственные средства, применяемые в акушерстве и гинекологии / под ред. В.И. Кулакова, В.Н. Серова. М.,2007. - 384 с.

75. Липова Е.В. Урогенитальные инфекции у женщин: проблемы и пути решения // Гинекология. 2008. - № 10, прил. 5. - С. 35-38.

76. Литвицкий П.Ф. Патофизиология: учеб.; в 2 т.- 3-е изд., испр. и доп. М., 2006 - Т. 2. - 808 с.

77. Лопаткин К.А. Урология. М., 2002. - С. 122-124.

78. Луценко Н.С., Волошина Н.М. Состояние местных процессов ПОЛ и антиоксидантной системы после криолечения фоновых зоболеваний шейки матки // Педиатрия, акушерство и гинекология.-2000.-№ 2. С. 17-19.

79. Малова И.О. Вильпрафен в лечении смешанной хламидийно-микоплазменной инфекции урогенитального тракта у женщин репродуктивного возраста //Вестн. дерматологии и венерологии. 2004. - №3. - С. 69-72.

80. Маркус Р., Коулстон Э. Жирорастворимые витамины // Клиническая фармакология по Гудману и Гилману / под общ. ред. А.Г. Гилмана: в 4 т.; пер. с англ. М., 2006. С. 1362-1376.

81. Маршал В.Дж. Клиническая биохимия. СПб., 2002. 384 с.

82. Матюшин Б.Н., Логинов A.C. Активные формы кислорода: цито-токсическое действие и методические подходы к лабораторному контролю при поражении печени (обзор литературы) // Клиническая лаб. диагностика. 1996.-№4.- С. 51-53.

83. Медицинская лабораторная диагностика (программы и алгоритмы) / под ред. Карпищенко А.И. СПб.: Итермедика, 2001. - 544 с.

84. Меньшикова Е.Б. Антиоксидантный статус при сахарном диабете у беременных и метаболические эффекты эссенциальных фосфолипидов // Человек и лекарство: тез. докл. 13 Рос. Нац. Конгр. М., 2006. - С. 214.

85. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К., Ланкин В.З., Бондарь И.А., Труфа-кин В.А. Окислительный стресс: патологические состояния и заболевания. Новосибирск, 2008. 284 с.

86. Морозкина Т.С., Мойсеенок А.Г. Витамины. Минск, 2002.- 112 с.

87. Мостовой Ю.М., Любчак P.C. Сидоров A.A. Эндотелиновая система в патогенезе заболеваеий внутренних органов. Киев, 2005. - 235 с.

88. Мустафаев Маг.Ш, Тхазаплижева Л.В. Тамерит и его влияние на количественное соотношение субпопуляций лимфоцитов у больных с флегмонами челюстно-лицевой области// Материалы 1 Всероссийской конф. по иммунологич. терапии. Сочи, 2003. - С. 246.

89. Никулин Б.А. Пособие по клинической биохимии / под. ред. Л.В. Акуленко. М., 2007. - 256 с.

90. Оковитый C.B., Шуленин С.Н., Смирнов A.B. Клиническая фармакология антигипоксантов и антиоксидантов. СПб., 2005. - 72 с.

91. Окороков А.Н. Диагностика болезней внутренних органов -Диагностика желудочно-кишечного тракта. М., 2002. Т. 6 - 464 с.

92. Омельянюк Е.В., Покровский С.Э. Комплексное лечение женщин с послеродовыми воспалительными заболеваниями с учетом состояния анти-оксидантной системы // Вестн. рос. ассоц. акушеров и гинекологов. -1997. -№ 3 С. 82-83, 89.

93. Павлюченко И.И., Басов A.A., Федосов С.Р. Система лабораторной диагностики окислительного стресса. Патент на полезную модель № 54787. — Заявл. 19.01.2006; опубл. 27.07.2006-Б.21.

94. Павлюченко И.И., Басов A.A., Федосов С.Р. Способ диагностики окислительного стресса организма человека. Патент на изобретение № 2236008. Заявл. 28.07.2003; Опубл. 10.09.2004 - Б.25.

95. Павлюченко И.И., Федосов С.Р., Басов A.A. Программа регистрации сигналов хемилюминотестера ЛТ-1. Свидетельство об официальной регистрации программы для ЭВМ № 2006611562. Заявл. № 2006610783 от 16.03.2006.

96. Пальцев М.А., Иванов A.A., Северин С.Е. Межклеточные взаимодействия.- М., 2003. 233 с.

97. Пальцев М.А. Молекулярная медицина -2004.- № 4.- С. 3-8.

98. Паномарев И.В. Городничева Ж.А. Нарушение в системе гемостаза у беременных с патологическим уровнем антифосфолипидных антител при гестозе. // Акушерство и гинекология. 1999. № 3. - С. 20-22.

99. Пасман Н.М., Логинова P.C. Лечение и профилактика дисбиоза у больных хроническим сальпингоофоритом: метод, рекомендации для врачей. -Новосибирск, 2006. 18 с.

100. Патология: рук. / под ред. М.А. Пальцева, B.C. Паукова, Э.Г. Улумбекова. М., 2002. - 960 с.

101. Пешкова В.И., Пономаренко В.И., Сысоева И.А. Комплексное лечение бактериального вагиноза у женщин на санаторно-курортном этапе М.,2000. -№3. С. 116-118.

102. Побединский Н.М., Берешвили М.В. Механизмы лечебно-профилактического действия антиоксидантов-флавоноидов // Акушерство и гинекология. 2007. - № 3. - С. 28-33.

103. Прилепская В.Н., Байрамова Г.Р. Грибковые инфекции в гинекологии. Принципы лечения // Гинекология 2007. - С. 45-49.

104. Прилепская В.Н. Клиника, диагностика и лечение вульвовагинита с разной этиологией (клиническая лекция) // Гинекология. 2001. - Т. 6, № 3. -С. 201.

105. Пшеничникова Т.Б., Передеряева Е.Б., Гадаева З.К. Метаболический синдром и васкулярный риск // Материалы 10 юбил. Всеросс. науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. С. 390-391.

106. Пшенникова М.Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в развитии патологии // Патологич. физиология и эксперим. терапия. -2000.-№2.-С. 24-31

107. Ребров В.Г., Громова O.A. Витамины, макро- и микроэлементы. -М., 2008. 960 с.

108. РЛС Доктор. М., 2004. - 960 с.

109. Савельева Г.М. Антонова Л.В. Острые воспалительные заболевания внутренних половых органов женщины. М. ГЭОТАР-МЕД, 2004. - 480 с.

110. Савельева B.C., Гельфанда Б. Р., Филимоновой М.И. Перитонит: Практ. рук. М., 2006.- 345 с.

111. Серов В.Н., Маркин С.А. Критические состояния в акушерстве: Рук. для врачей. М., 2003. - 704 с.

112. Серов В.Н. Изучение эффективности полижинакса в лечении неспецифических бактериальных и грибковых кольпитов // Рос. журн. кожных и венерических болезней. 2004. № 2. - С. 59-61.

113. Сидельникова В.И, Лифшиц В.М. Значение лабораторной диагностики в терапии артериальной гипертонии // Качество жизни. 2005.- № 3. - С. 34-37.

114. Сидорова И.С, Коган Е.А., Унанян А.Л. Миома матки (современные проблемы этиологии, патогенеза, диагностики и лечения) / под ред. И.С. Сидоровой. М., 2002. - С. 168-183.

115. Сидорова И.С., Барсель В.А., Эдокова А.Б. Выраженность процессов перекисного окисления липидов и состояния механизмов антиокси-дантной защиты // Проблемы репродукции. 2001. - № 5. - С. 24-26.

116. Сидорова И.С., Боровкова И.В., Мартынова И.В., Солоницын А.Н. Роль окислительного стресса в патогенезе гестоза // Акушерство и гинекология. -2007. № 3. - С. 3-5.

117. Скачков H.H., Дубровина С.О., Маклюк A.M., Зинкин В.И, Зин-кина Е.В., Егоров Ю.И. Лечение гиперпластических процессов эндометрия у больных с метаболическим синдромом // Материалы 10 юбил. Всеросс. науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. С. 408-409.

118. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: Добро и зло // Соросов-ский образовательный журн. 1996. - № 3. - С. 4-16.

119. Соколов Д.И., Солодовникова Н.Г., Павлов О.В. и др. // Бюл. эксперим. Биологии и медицины. 2005. - Т. 140, № 11. - С. 552-555.

120. Соколовский В.В. Тиолсульфидное соотношение крови как показатель состояния неспецифичной резистенции организма. СПб., 1996. - 30 с.

121. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии. -М., 1977. С. 66-68.

122. Телль Л.З., Лысенков С.П., Шастун С.А. Патологическая физиология: интерактивный курс лекций. М.,2007. - 672 с.

123. Тихомиров А. Л., Олейник ЧГ. Кандидозный вулъвовагинит: от этиологии до современных принципов терапии. Методическое пособие для врачей акушеров-гинекологов / под ред. акад. РАМП проф. В.Н. Серова. М., 2004.-39 с.

124. Ткаченко Э.Р. Комбинированное лечение распространенных форм наружного генитального эндометриоза и его влияния на иммунную систему: автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 1995. - 21 с.

125. Увелев Ю.В. Пазычев A.A. ПОЛ в патогенезе эндометриоза яичников // Вестн. Росс, ассоц. акушеров-гинекологов. 1998. - № 2. - С. 26-31.

126. Унанян А.Л. Эндометриоз тела матки и яичников: новые аспекты патогенеза, клиники и лечения: автореф. дис. . д-ра мед. наук. М., 2007. 23 с.

127. Ушкалова В.Н., Иоанидис Н.В. Кадочникова Г.Д. Деева З.М. Контроль перикисного окисления липидов. Новосибирск : Медкнига, 1993. -С. 573.

128. Фалер Д.М., Шилдс Д. Молекулярная биология клетки: руководство для врачей; пер. с англ.- М., 2006. 256 с.

129. Фармакоэпидемиология антибактериальных средств, применяемых при лечении инфекций органов малого таза // Материалы 10 юбил. Все-росс. науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. - С. 394.

130. Федосов С.Р., Басов A.A., Виноградов М.В., Пшидаток Д.В., Ма-лышко В.В. Способ повышения информативности прибора «Хемилюминоте-стер LT-1» // Современные проблемы науки и образования,- М., 2006. № 4. прил. № 1.-С.162.

131. Фомина О.А., Пешев Л.П. Интенсивность мембранных реакций ПОЛ и уровень эндогенной интоксикации у больных эктопиями шейки матки. // Материалы 10 юбил. Всеросс. науч. форума «Мать и дитя». М., 2009. -С. 425.

132. Харевич Д.А. Фармакология: учеб. 8-е изд., перераб., доп. и испр. -М., 2005.-736 с.

133. Хасигов П.З., Подобед О.В., Кцоева С.А. и др. Металлопротеи-назы матрикса нормальных тканей человека // Биохимия. 2001. - Т. 66, № 2.-С. 167-179.

134. Хрянин А.А., Решетников О.В., Кривенчук Н.А. и др. Распространенность хламидийной и гонококковой инфекций в зависимости от сексуального поведения женщин // Акушерство и гинекология. 2004. - № 4. — С. 44-47.

135. Чиркин А.А., Доценко Э.А., Юпатов Г.И. Липидный обмен. М., 2003.- 128 с.

136. Шанин Ю.Н., Шанин В.Ю., Зиновьев Е.В. Антиоксидантная терапия в клинической практике. СПб., 2003. — 128 с.

137. Adamska-Dyniewska Н. ред. Terapia monitorowana. Wydziat Nauk Medycznych PAN i Tow. Ter. Monit. Lodz 1994. - 653 p.

138. Alexander B.D., Byrne T.C., Smith K.L. et al. // J. Of Clin. Microbiol.- 2007.- V. 45, № 3.- P. 698-706.

139. Andersson M.I., MacGoivan A.P. Development of quinolones // J An*timicrob Chemother. 2003, 51; Suppl. SI. P. 1-11.

140. Brune Kay. Prostaglandins and the mode of action of antipyretic analgetic drugs // Am. J. Med. 1983. - V. 75, № 5a. - P. 19-23.

141. Chakravarty N., Nielsen E. Regeneration of mast cells after histamine secretion //Adv. Histamine Res. Proc. Int. Histamine Symp. Okayama, 26-27 July, 1981. Oxford e. a., 1982. - P. 47 - 56.

142. Chali L., Szolcsanyi I., Lembeck E. Antidromic vasodilatation and neurogenic inflammation. Satellite Symp. of the 29 th. Int. Congr. of Physiological Sciences. Newcastle. Australia, 1983. Acad. Kiado. Budapest, 1984. - 353 p.

143. Christodoulakos G.E., Lambrinoudakil V., VourtsiA.D. et al. The effect of low dose hormone therapy on mammographic breast density. Maturitas, 2006, 54: P. 78-85150. Cross J.V., Tempelton D.J. Thiol oxidation of cell sinaling proteins:

144. Controlling an apototic equilibrium //J.Cell.Biochem. -2004. Vol. 93. - P. 104111.

145. Cuppens J.L., Goodwin J.S. Endogenous prostaglandin E2 enhaces policlonal immunoglobulin productin by tonically inhibiting T-supressore //Cell. Immunol. 1982. - V. 70. - P. 49 - 55.

146. Diclofenac and pirprofen modify pityitary and hypothalamic betaen-dorphin concentrations /Sacerdote Paole, Mouza Giancarlo, Manteguzza Paolo, Panerai Alberto E. //Pharmacol. Res. Commun. 1985. - V. 17, № 8. - P. 679 -684.

147. Erman A., Schwortzman M., Raz A. Indomethacin but not aspirin inhibits basal and stimulated lipolysis in rabbit kidney //Prostaglandins. 1989. - V. 20, № 4. - P. 689 - 702.

148. Fantone J.C., Ward P.A. Role of oxygen-derived free radicals and metabolites in leukocyte-dependent inflammatory reactions //Am. J. Pathol. 1982. — V. 107.-P. 397-418.

149. Flick M.R., Hoeffel J.M., Staub N.C. Superoxide dismutase with heparin prevents increased lund vascular permeability during air emboli in sheep //J. Appl. Physiol.- 1983.-V. 55.-P. 1284- 1291.

150. Forman H.J., Fukuto J.M., Torres M. Redox signaling: thiol chemistry defines which reactive oxygen and nitrogen species can act as second messengers // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2004. - Vol. 287. - P. 246-256.

151. Goldenberg R.L., Thompson C. // Am. J. Obstetr. Gynecol.-2003.- V. 189.-P. 861.

152. Gurer Orhan H., Sabir H.U., Ozgunes H. Correlation between clinical indicators of lead poisoning and oxidative stress parameters in controls and lead-exposed workers // Toxicology. 2004. - Vol. 195, N 2-3. - P. 147-154.

153. Hartung H.-P., Wolters K., Toyka K.V. Substance P: binding properties and studies on cellular responses in guinea pig macrophages //J.Immunol. -1986.-V. 136, N 10.-P. 3856 3863.

154. Holzheimer RG; Dralle H. Antibiotic therapy in intra-abdominal infections. A review on randomised clinical; trials // Eur. J. Med. Res.- 2001; 6 -P. 277-91.

155. Huber W. Orgotein-(Bovine Cu-Zn superoxide dismutase), an antiinflammatory protein drugs: Discovery, toxicology and pharmacology //Eur.J. Rheumatol. Inflam. 1981. - V. 4. - P. 173 - 182.

156. James A.M., Smith R.A.J. Murphy M.P. Antioxidant and prooxidant properties of mitochondrial Coenzyme Q // Arch. Biochem Biophys. 2004. - V. 423.-P. 47-56.

157. Keating GM, Scott Lf. Moxifloxacin. A review of its use in the management of bacterial infections.//Drugs 2004; 64 (20): 2347-77.

158. Klein H., Cremer G. Superoxid-Dismutase (Peroxinorm) bei extraartikularen Weichteilaffektionen //Rheumamedizin. 1981. — V. 4. - P. 136 - 141.

159. Mann H. B., Whitney D. R. On a test of whether one of two random variables is stochastically larger than the other. // Annals of Mathematical Statistics. 1947.-№ 18.-P. 50-60.

160. Markiewicz A.: Chronobiol. Int. 9, 452, 1992.

161. Palmblad J., Malmsten C.L., Uden A.M. et al. Leukotriene B4 is a potent and stereospecific stimulator of neutrophil chemotaxic and adherence //Blood. 1981. - V. 58(3). - P. 658 - 661.

162. Papadia A., Gerbaldo D., Fulcheri E. Et al. // Minerva Ginecol.-2007.- Vol. 59, N 2. P.l 17-124/

163. Perez H.D., Weksler B.B., Goldstein I.M. Generation of Chemotaxic Lipid from arachidonic acid by exposure to a superoxide generation system //Inflammation. 1980. - V. 4 (3). - P. 313 - 328.

164. Pharmacology and pathophysiology of leukotrienes /Thomas R. Jones, Gordon Letts, Chi-Chung Chan et all. //Leukotrienes and Lipoxygenases. Chem. Biol, and Clin. Aspects. 1989. - P. 309 - 403.

165. Piroxicam: a review of its pharmacological properties and therapeutic efficacy /Brogden R.N., Heel R.C., Speight T.M., Avery G.C. //Drugs. 1981. -V. 22, №3.-P. 165 - 187.

166. Poole L.B., Karplus P.A., Claiborne A Protein sulfenic acids in redox signaling // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2004.- Vol. 44. - P. 325-347.

167. Pupita F., Frausini G., Gaggi S. Clinical pharmacology of superoxide dismutase //Wortrag anlablich der 1st World Conference on Inflammation Antirheumatics, Analgetics, Immunomodulators. — 5th Future Trends in Inflammation Venedig. - 1984.-124 p.

168. Reinberg A., Labrecque G., Smolensky M.: Chronobiologie et Chronotherapeutique. Medicine-Sciencesm, Flammarion, Paris 1992. 357 p.

169. Royston P. A remark on Algorithm AS 181: The W test for normality // Applied Statistics. 1995. - № 44. - P. 547-551.

170. Stohs S.J., Lawson T.A., Anderson J. et al. Effects of oltipras, BHA, ADT and cabbage on glutathione metabolism, DNA damage and lipid peroxidation in old mice//Mech. Ageing Develop. 1996.-V. 37, №2.-P. 137- 145.

171. Stranford M.R., Hodgkiss R.J., Watra R.R. Brief communication: studies on the role of antioxidants in radioprotection //Pharmacol. Ther. 1988. -V. 39, № l.-P. 324-325

172. Syperoxide dismutase et polyarthrite rhymatoide /Camus J.P., Emerit I., Michelson A.M. et al. //Rev. Rhum. 1980. - V. 47. - P. 489 - 492.

173. The role of nonsteroidal antiinflammatory drugs and non narkotics in analgesia /Aecona Nicola S., Dahe Stephen L. et al. //Hosp. Formul. 1991. - V. 22, № 8. - P. 723 - 725, 729, 732 - 736.

174. Vapaatalo H. Leukotrienes and their antagonists in inflammatory and rheumatic reaction //Naunyn-Schiniedebergs Arch. Pharmacol. 1989. - V. 340, Suppl.-P. 213 -215

175. Wacke R., Forster S., Adam U et al. Penetration of moxifloxacin into the human pancreas following a single intravenous or oral dose, J. Antimicrob. Chemother. 2006; 58 (5): 994-9.

176. Wagenlehner F., Naber K. Treatment of bacterial urinary tract infections: presence and future // Eur. Urol. 2006. - 49:235-244/

177. Weissman G. Pahtways of arachidonate oxidation to prostaglandins and leucotriens //Semin. Arthr. Rheu. 1983. - V. 13, № 1. - P. 123 - 129.

178. Whitehouse M.W. The molecular pharmacology of anti-inflammatory drugs: some possible mechanism of action at the biochemical level //Biochem. Pharmacol. 1988. - V. 17, № 3, suppl. - P. 293 - 307.

179. Whitley R.J. Optimizing the Management of genital Herpes / Ed. Royal Society of Medicine/ Ltd. 2000.- P.24-27.

180. Yamada T., Murayama T., Andoh M. Adjuvant hydrodistension under epidural anesthesia for interstitial cystitis // Int. J. Urol.- 2003.- 10 (Suppl): 16-18.

181. Zylka N., Zylka V. Orgotein (Peroxinorm) Bei Peliarthritis humero-scapularis //Rheumamedizin. 1982. - V. 4. - P. 175 - 185.

182. НАУЧНЫЕ РАБОТЫ, ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

183. Власов Р.В. Состояние антиоксидантной системы крови у больных метроэндометритом / Р.В. Власов, К.И. Мелконян, В.В. Малышко, И.И. Пав-люченко // Современные проблемы науки и образования. 2008. - №4, прил. № 1. - С. 160.

184. Малышко В.В. Уровень продуктов окислительной модификации биомолекул в крови у больных метроэндометритом / В.В. Малышко, К.И. Мелконян, Р.В. Власов // Современные проблемы науки и образования. 2008. № 4, прил. № 1.-С. 172.

185. Быков И.М. Интенсивность окислительной модификации белков плазмы крови у больных метроэндометритом / И.М. Быков, A.A. Ладутько, Е.Е. Есауленко, К.И. Мелконян // 4 съезд Рос. о-ва биохимиков и молекулярных биологов. Новосибирск, 2008. - С. 421.

186. Есауленко Е.Е. Роль металл-катализируемого окисления белков в патогенезе метроэндометрита / Е.Е. Есауленко, К.И. Мелконян, A.A. Ладутько, И.М. Быков // 4 съезд Рос. о-ва биохимиков и молекулярных биологов. -Новосибирск, 2008. С. 448.

187. Мелконян К.И. Возможности коррекции процессов свободноради-кального окисления биомолекул пробиотиками у больных метроэндометритом / К.И. Мелконян , И.М. Быков // Аллергология и иммунология. 2009. -Т. 10, №2.-С. 251.*

188. Мелконян, К.И. Влияние пробиотиков и на показатели системы про-/антиоксиданты у пациентов с метроэндометритом / К.И. Мелконян,

189. И.М. Быков, И.И. Павлюченко, Н.В. Белкина // Кубанский научный медицинский вестник. 2009. - №3(108). - С.75-78.*

190. Быков И.М. Роль свободных радикалов в формировании метоэн-дометрита / И.М. Быков, И.И. Павлюченко, К.И. Мелконян // Вестник новых медицинских технологий. 2009. - Т. - 16, № 1. - С. 260.

191. Работа, опубликована в журнале, включенном ВАК в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий.

Информация о работе

Мелконян, Карина Игоревна
кандидата медицинских наук
Краснодар, 2009
ВАК 03.00.04

Диссертация

Биохимическое обоснование применения антиоксидантов и пробиотиков в комплексной терапии больных метроэндометритом - тема диссертации по биологии, скачайте бесплатно

Автореферат

Похожие работы