Антимикробное и инсекто-акарицидное действие биоцида Агро-Велт и его применение на объектах ветнадзора

Игуменщев, Петр Александрович

Автореферат диссертации по теме "Антимикробное и инсекто-акарицидное действие биоцида Агро-Велт и его применение на объектах ветнадзора"

На правах рукописи

ИГУМЕНЩЕВ Петр Александрович

Антимикробное и инсекто-акарицидное

действие биоцида Агро-Велт и его применение на объектах ветнадзора

06.02.02 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

06.02.05 - ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

2 6 И¡0/12012

Москва-2012

005046535

Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГБОУ ВПО МГАВМиБ).

Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор

Грязнева Татьяна Николаевна

Официальные оппоненты: Мирзаев Микаиль Нурбагандович -доктор биологических наук, профессор, ФГБОУ ВПО МГАВМиБ, заведующий научно-исследовательской лабораторией иммунобиотехнологии;

Бондаренко Владимир Олегович - доктор биологических наук, ФГБУ ««Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов», ведущий научный сотрудник отдела качества и стандартизации фармакологических лекарственных средств для животных.

Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко».

Защита состоится «_££_» Сйл^лЛ&Л 2012 г. в ч. на за-

седании диссертационного совета Д.220.042.01 при ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина», по адресу: 109472, г. Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел. (495) 377-93-83.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина».

Автореферат разослан «11 » 2012 года и разме-

щен на сайте http://www.vak.ed.gov.ru.

Гнездилова Л.А.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Разработка и применение на объектах ветнадзора комплексных биоцидов с антимикробным и инсекто-акарицидным действием имеет важное значение, т.к. подобные средства позволяют не только обеззараживать окружающую среду от патогенных микроорганизмов, но и уничтожать членистоногих, являющихся переносчиками возбудителей инфекционных болезней человека и животных (Смирнов A.M., 2006; Иванова Е.Б., 2011, Шандала М.Г., 2011).

По данным Россельхознадзора, в последние годы в РФ наблюдается ухудшение эпизоотической ситуации по трансмиссивным природно-очаговым болезням животных. В значительной мере, предпосылками этого являются рост импорта животных, нарушения ветеринарно-санитарных мероприятий на объектах ветнадзора, недостаточная эффективность используемых вакцинных и лекарственных препаратов. Поэтому, дезинфекция, дезинсекция и дезакаризация как способ профилактики инфекционных болезней животных, приобретает все большую значимость.

С учетом отмеченного, изучение эффективности новых биоцидов в качестве антибактериальных, противогрибных и инсекто-акарицидных средств при профилактике инфекционных болезней животных представляет собой актуальную задачу для ветеринарии.

Цель и задачи исследований. Цель исследований - определение антимикробного и инсекто-акарицидного действия комплексного биоцида Агро-Велт и оценка его эффективности при дезинфекции, дезинсекции и дезакаризации объектов ветнадзора.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить основные свойства Агро-Велта, определяющие перспективность его использования для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора.

2. Определить антибактериальную и противогрибную активность Аг-ро-Велта in vitro.

з

3. Определить инсекто-акарицидное действие Агро-Велта в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях.

4. Изучить острую и хроническоую токсичность Агро-Велта для теплокровных животных.

5. Определить микрофлору организма насекомых и клещей, собранных в лесопарковой и лесной зонах Москвы и Московской области.

6. Изучить антимикробное и инсектицидное действие Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы.

7. Провести производственные испытания Агро-Велта на объектах ветнадзора.

8. Разработать технологические режимы дезинфекции, дезинсекции и дезакаризации биоцидом Агро-Велт объектов ветнадзора.

9. Разработать проект нормативной документации на Агро-Велт с целью регистрации его для применения на территории РФ.

Научная новизна.

1. Впервые, для ветеринарной практики предложено комплексное дезинфицирующее средство с инсекто-акарицидным действием на основе субстанции «Велтон» и циперметрина, перспективное для обеззараживания и дезинсекции окружающей среды при профилактике трансмиссивных природно-очаговых инфекционных болезней животных.

2. Установлено, что Агро-Велт обладает высокой смачивающей и проникающей способностью, не проявляет коррозионного действия, белковый индекс средства позволяет проводить обеззараживание окружающей среды без предварительной механической очистки поверхностей.

3. Доказано, что Агро-Велт безвреден для теплокровных животных, не обладает сенсибилизирующими и кумулятивными свойствами и не оказывает кожно-резорбтивного действия. По величине ЬО50 при нанесении на кожу и при ингаляционном воздействии Агро-Велт относится к 4 классу малоопасных веществ и может применяться в присутствии животных.

4. Впервые, в сравнительном аспекте, определена микрофлора организма насекомых и иксодовых клещей, собранных в лесопарковой зоне г. Москвы и в лесной зоне Московской области. По своему составу микро-

флора членистоногих, обитающих на территории мегаполиса, была разнообразнее, чем у насекомых и клещей лесной зоны и содержала, наряду с почвенными сапрофитами и гнилостными бактериями, патогенные микроорганизмы - кандиды, стафилококки, эшерихии, сальмонеллы.

5. Создана экспериментальная методика, позволяющая определять эффективность комплексных биоцидов с антимикробным и инсекто-акарицидным действием в условиях лесопарковой зоны мегаполиса.

6. Показана высокая антимикробная активность Агро-Велта в отношении широкого спектра патогенных бактерий и грибов. Минимальная антимикробная концентрация средства для вегетативных форм микроорганизмов составляет 0,05%, для спорообразующих бактерий, дерматофитов и плесневых грибов - 0,2%.

7. Установлено эффективное инсекто-акарицидное действие Агро-Велта при концентрации рабочих эмульсий 0,2% в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях, в условиях лесопарковой зоны мегаполиса и в животноводческих хозяйствах.

Практическая значимость.

1. Для применения в ветеринарии в качестве дезинфицирующего и ин-секто-акарицидного средства для обеззараживания объектов окружающей среды и уничтожения членистоногих - переносчиков возбудителей инфекционных болезней животных, предложен комплексный, эффективный, безвредный биоцид Агро-Велт, который прошел производственные испытания.

2. Результаты исследований включены в проект СТО 71954720-00062012 на средство Агро-Велт, предназначенное для дезинфекции, дезинсекции и дезакаризации окружающей среды.

3. Разработан проект инструкции по применению биоцида Агро-Велт для профилактики инфекционных болезней животных.

4. При проведении производственных испытаний Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы, а также в скотоводческих и свиноводческих хозяйствах изучена антимикробная, инсектицидная и акари-цидная активность биоцида Агро-Велт, дана оценка его воздействия на

5

разные виды микроорганизмов и членистоногих, показана высокая дезинфицирующая и инсекто-акарицидная эффективность средства, что подтверждено актами, утвержденными руководителями хозяйств Московской и Челябинской областей.

5. Разработаны технологические режимы дезинфекции, дезинсекции и дезакаратизации объектов ветнадзора биоцидом Агро-Велт.

6. Результаты исследований по применению биоцида Агро-Велт на объектах ветнадзора используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ по дисциплинам «Санитарная микробиология», «Ветеринарная микробиология и микология».

Личный вклад соискателя. Автору принадлежат непосредственное осуществление исследований по изучению острой и хронической токсичности Агро-Велта на лабораторных животных; определение антимикробной и инсекто-акарицидной активности Агро-Велта в отношении тест-штаммов разных видов микроорганизмов, а также клещей и насекомых; производственные испытания биоцида в условиях лесопарковой зоны мегаполиса и в животноводческих хозяйствах; разработка нормативной документации на Агро-Велт; анализ и обобщение полученных результатов.

В работе использованы материалы, полученные лично автором, а также в соавторстве с директором НИИ биоцидов и нанобиотехнологий, кандидатом медицинских наук Ивановой Е.Б., которой выражаю глубокую благодарность за помощь и поддержку.

Апробация результатов диссертации. Основные результаты исследований были представлены на выставке, посвященной 90-летию ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2009); на выставке «Звезда Подмосковья» (Ра-менское, Московской области, 2010); на выставке в «Экспо-Центре» (Москва, 2010); доложены на XVIII Международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2010); на XIX Международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2011); на VII Международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2011); на Международной научно-практической конференции «Задачи ветеринарной науки в реализации доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации (Москва, 2011); на III Международ-

6

ной научно-практической конференции «Научно-техническое творчество молодежи - путь к обществу, основанному на знаниях. Приоритетные направления развития науки и техники - технологический прорыв в мировое сообщество» (Москва, 2011); на Всероссийской научной конференции «Эколого-географические аспекты инфектологии» (Новосибирск, 2011).

Публикации. По результатам диссертации опубликовано 10 статей, в т.ч. 6 статей в научных журналах, рекомендованных ВАК (Ветеринарная медицина, Биозащита и биобезопасность, Дезинфекция. Антисептика, Жизнь без опасностей, Нанотехнологии и охрана здоровья) и 2 - в сборниках научных трудов.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 179 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (118 источников, из которых 64 отечественных и 54 иностранных). Работа содержит 34 таблицы, 31 рисунок, 22 страницы приложений.

На защиту выносятся следующие положения и результаты:

1. Основные свойства комплексного биоцида Агро-Велт, определяющие перспективность его использования на объектах ветнадзора.

2. Результаты изучения антимикробной активности и инсекто-акарицидного действия биоцида Агро-Велт.

3. Агро-Велт безвреден для теплокровных животных и по величине LD50 относится к 4 классу малоопасных веществ.

4. Технологические режимы дезинфекции, дезинсекции и дезакариза-ции биоцидом Агро-Велт объектов ветнадзора.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа выполнена в период с 2009 по 2012 гг. на кафедре микробиологии в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ. Эксперименты по определению острой и хронической токсичности Агро-Велта на лабораторных животных были

7

проведены на базе НИИ биоцидов и нанобиотехнологий (г. Москва) и в виварии кафедры микробиологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ.

Биоцид Агро-Велт представляет собой концентрат эмульсии в виде прозрачной жидкости светло-желтого цвета. Содержит в качестве действующих веществ субстанцию Велтон (10%) и циперметрин (25%).

Изучение антимикробного и инсекто-акарицидного действия Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны было проведено в парке «Кузьминки» г. Москвы. Производственные испытания Агро-Велта и его безопасность для сельскохозяйственных животных провели в хозяйствах Московской (ЗАО "Агрофирма Борец", Дмитровского района) и Челябинской (совхоз «Половинное», Октябрьского района) областей.

В сравнительном аспекте были проведены бактериологические исследования насекомых и клещей, собранных в лесопарковой зоне г. Москвы и в лесной зоне Подмосковья (Истринский р-он, с. Первомайское).

Антимикробную активность Агро-Велта изучали с использованием тест-штаммов E.coli 1257, P.aeruginosa АТСС 27853; S.typhimurium 11, S.aureus 906, B.cereus 96, C.albicans 15, T.gypseum НИИД, A.niger НИИД.

В экспериментах по изучению токсичности Агро-Велта было использовано 120 белых мышей, 20 белых крыс, 20 морских свинок, 10 кроликов, 5 коров черно-пестрой породы, 10 поросят-отъемышей.

Исследования проводили в соответствии с методическими указаниями «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (1987); Руководством Р 4.2.2643-10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности» (2011); Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (2005); СанПиН 2.1.2.1188-03; Инструкцией по проведению ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации (2001) и др.

Экспериментальные данные обрабатывали статистически с использованием пакета компьютерных программ «Statistica 6,0» и анализом результатов по Ашмарину И.П. и Воробьеву A.A.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Изучение основных свойств Агро-Велта, определяющих перспективность его использования для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора

Комплексный биоцид Агро-Велт обладает важными свойствами, обуславливающими перспективность его применения для обеззараживания объектов ветнадзора и уничтожения насекомых и клещей - переносчиков возбудителей инфекционных болезней: поверхностное натяжение 0,2% эмульсии Агро-Велта составляет 0,74 мН/м, что свидетельствует о высокой проникающей способности средства; величина краевого угла смачивания рабочих эмульсий Агро-Велта составляет 34 градуса, что исключает необходимость использования ПАВ; Агро-Велт не обладает коррозионной активностью; белковый индекс средства равен 1, что свидетельствует о том, что Агро-Велт можно использовать на объектах ветнадзора без их предварительной санитарной очистки; рабочие эмульсии Агро-Велта сохраняют физико-химические и антибактериальные свойства после замерзания и оттаивания; бактерицидное действие Агро-Велта сильнее бактерицидного действия фенола в 14 раз.

Определение антибактериальной и противогрибной активности Агро-Велта in vitro

Было приготовлено 11 разведений Агро-Велта в концентрациях от 0,02 до 2,0 %. Исследования проводили в отношении бульонных культур тест-штаммов бактерий и грибов и на батистовых тест-объектах.

Бактерицидная активность Агро-Велта в отношении бульонных тест-культур и на батистовых тест-объектах была аналогична и составила для S.aureus 906 - 0,04%, для E.coli 12570, P.aeruginosa АТСС 27853, S.typhi-murium 11 и С.albicans 15- 0,05%.

В отношении бульонных тест-культур B.cereus 96, T.gypseum НИИД и A.niger НИИД бактерицидная активность Агро-Велта составила 0,1%, на батистовых тест-объектах - 0,2%.

onn /

КОЕ/мл

400 300

600-К

500

Ш

0 Ecoli В S.aureus

□ P.aeruginosa

□ S.typhimureum

200-^

В C.albicans □ B.cereus

100-' 0+

■ T.gypseum О A.niger

0,02 0,04 0,05 0,1

Концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта

Рис. 1. Антимикробная активность рабочих эмульсий Агро-Велта

Таким образом, минимальная антимикробная концентрация Агро-Велта для вегетативных форм микроорганизмов составляет 0,05%, для спорообразующих бактерий, дерматофитов и плесневых грибов - 0,2%.

Определение инсекто-акарицидного действия Агро-Велта в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях

Оценку инсекто-акарицидной активности Агро-Велта проводили методом принудительного контактирования членистоногих с обработанными впитывающими (фанера) и невпитываюхцими (стекло) влагу тест-поверхностями. Пластины смачивали рабочими эмульсиями Агро-Велта в концентрациях 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,5; 1,0; 2,0 из расчета 50 мл/м2.

Для испытания инсектицидного действия Агро-Велта использовались мухи комнатные, мухи-жигалки, комары (р. Aedes), осы обыкновенные, разные виды пауков и жуков, муравьи черные и рыжие, которых собирали в парке Кузьминки г. Москвы.

Наиболее чувствительными к инсектицидному действию Агро-Велта оказались комары, муравьи черные домашние и пауки, менее чувствительными - разные виды жуков, осы и муравьи рыжие.

Для комаров, муравьев черных и пауков эффективной инсектицидной концентрацией Агро-Велта являлся 0,1%, для мух комнатных и мух-жигалок - 0,2%, для ос и муравьев рыжих - 0,4%, для разных видов жуков - 0,5%.

Разные виды жуков

Осы и муравьи рыжие

Мухи

Комары, муравьи черные домашние, пауки

Рис. 2. Эффективные инсектицидные концентрации Агро-Велта

Arpo-Велт в эффективных инсектицидных концентрациях убивал мух, комаров и пауков через 1-2 сек., ос - через 10-15 сек., жуков - через 60 сек., муравьев черных - через 30 сек. При воздействии на рыжих муравьев наблюдалась гибель насекомых через 5-10 мин.

Для испытания акарицидного действия Агро-Велта в качестве биологического материала в лабораторных экспериментах использовали гама-зоидных (Ornithonyssus bacoti Hirst - крысиные и Dermanyscus gallinae -куриные) и иксодовых клещей.

Оценивали степень поражения клещей (обратимый и необратимый нокдаун, гибель) после окончания экспозиции, а затем через 24; 48 и 72 часа (острое действие). Остаточное действие оценивали, подсаживая членистоногих на обработанные поверхности через 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 10; 14; 21 и более суток. Если количество погибших членистоногих не превышало 50%, остаточное действие Агро-Велта считали законченным.

-I

0,1 0,2 0,3 0,4 0,5

Концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта

и

□ на стекле ■ на фанере

0,05 0,1 0,2 0,4 0,5 Концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта

У

Необратимый нокдаун

—V-

Гибель

Рис. 3. Степень поражения крысиных клещей рабочими концентрациями Агро-Велта

Было установлено, что при 0,2% Агро-Велта на стекле гамазоидные клещи погибали мгновенно, при 0,05% - через сутки. Через 15 мин экспозиции у 98% крысиных и куриных клещей наблюдался необратимый нокдаун при концентрации средства 0,05%.

Ш на стекле ■ на фанере

0,05

Концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта ^----■> ^--^

Необратимый нокдаун

Гибель

Рис. 4. Степень поражения куриных клещей рабочими концентрациями Агро-Велта

У 80% иксодовых клещей через 15 мин экспозиции 0,05% раствором Агро-Велта отмечали обратимый нокдаун на стекле, у 60% клещей - на фанере. При концентрациях Агро-Велта 0,1; 0,2 и 0,4% наблюдали необратимый нокдаун у 95-98% иксодовых клещей с последующей их гибелью через 24 ч.

0,05 0,1 0,2 0,4 0,5

^_Концентрации рабочих эмульсий Агро-Велта

Обр. нокдаун Необратимый нокдаун ГиЗель'

Рис. 5. Степень поражения иксодовых клещей рабочими концентрациями Агро-Велта

Остаточная активность Агро-Велта сохранялась 4 недели на уровне 100% для всех видов изученных клещей. Через 6 недель на стекле через 60 мин погибало 70% куриных, 80% крысиных и 50% иксодовых клещей.

Таблица 1. Остаточная акарицидная активность Агро-Велта для клещей при подсадке их на обработанные стеклянные поверхности

Концентра- Количество (%) погибших

Вид клеща ция Агро- при подсадке через (недели)

Велта, % 3 4 6 9

Dermanyscus gallinae 0,2 100 100 70 50

Ornithonyssus bacoti Hirst 0,2 100 100 80 65

Ixodes ricinus 0,5 100 100 50 20

Оптимальной концентрацией рабочих эмульсий Агро-Велта для гама-зоидных клещей является 0,2%, для иксодовых клещей - 0,5%. Агро-Велт

13

обладает остаточным акарицидным действием в течение не менее 6 недель, поэтому срок повторной обработки средством объектов ветнадзора можно проводить через 3-5 недель в зависимости от вида членистоногого, его численности, типа поверхности и состояния объекта.

Изучение острой и хронической токсичности Агро-Велта для теплокровных животных

По степени воздействия на организм теплокровных животных при однократном введении в желудок Агро-Велт относится к III классу опасности в соответствии с классификацией ГОСТ 12.1.007-76. При однократном воздействии на кожные покровы средство относится к IV классу мало опасных веществ. По лимитирующему показателю токсичности для инсектицидных средств - зоне острого и подострого биоцидного эффекта пары Агро-Велта в виде 0,5% водной эмульсии относятся к 4 классу мало опасных веществ. При многократном контакте с неповрежденной кожей 0,5% эмульсии Агро-Велта кожно-резорбтивное действие средства не выявлено. При контакте со слизистыми оболочками глаз средство оказывает умеренно выраженное раздражающее действие и не обладает сенсибилизирующими и кумулятивными свойствами.

Определение микрофлоры организма насекомых и клещей, собранных в лесопарковой и лесной зонах Москвы и Московской области

Для определения микробной обсемененности членистоногих в парке Кузьминки г. Москвы и в лесной зоне д. Первомайское Истринского района Московской области были собраны разные виды насекомых и иксо-довые клещи. Была изучена бактериальная обсемененность разных видов мух, комаров, пауков, жуков, муравьев, иксодовых клещей в сравнительном аспекте. Каждой особи членистоногих было не менее 10 шт.

Было установлено, что микрофлора у членистоногих из лесопарковой зоны Москвы и из лесной зоны Московской области различалась по родовому и видовому составу. От мух, обитающих как в лесопарковой зоне Москвы, так и в лесной зоне Московской области, были выделены бациллы, эшерихии и аспергиллы. От мух, обитающих в городской черте,

14

дополнительно выделяли патогенные для белых мышей сальмонеллы и стафилококки, а также гнилостные бактерии из рода Pseudomonas.

Таблица 2. Микрофлора изучаемых насекомых

Членистоногие Виды микроорганизмов, выделенные от членистоногих

в лесопарковой зоне в лесной зоне

Мухи Escherichia coli Escherichia coli

Bacillus subtilis Bacillus subtilis

Aspergillus niger Aspergillus niger

Pseudomonas herbicola -

Salmonella typhimurium _

Staphylococcus aureus

Комары Bacillus subtilis Bacillus subtilis

Escherichia coli Ш

Пауки Bacillus subtilis Bacillus subtilis

- Lactobacterium brevis

Жуки Bacillus subtilis Bacillus subtilis

Aspergillus niger Aspergillus niger

Муравьи черные Bacillus subtilis Bacillus subtilis

Escherichia coli -

Муравьи рыжие Bacillus subtilis Bacillus subtilis

- Lactobacterium brevis

От комаров, пауков, жуков и черных муравьев, собранных в лесопарковой зоне, были выделены бациллы, эшерихии и аспергиллы. От таких же насекомых, обитающих в лесной зоне, эшерихии не выделялись, однако в их организме были обнаружены лактобактерии (бента бактерии).

Таблица 3. Микрофлора изучаемых клещей

Членистоногие Виды микроорганизмов, вьщеленные от клещей

В лесопарковой зоне В лесной зоне

Клещи иксодовые Bacillus subtilis Bacillus subtilis

Escherichia coli -

Mycobacterium -

Staphylococcus aureus -

Candida albicans -

- Erisipelothrix rhusiopathiae

- Lactobacterium brevis

- Clostridium pasteurianum

От клещей, собранных в лесопарковой зоне, были выделены бациллы, эшерихии, микобактерии, патогенные стафилококки и кандиды. От клещей из лесной зоны выделяли бациллы, возбудителя рожи свиней, лакто-бактерии растений и свободно живущих клостридий.

Таким образом, насекомые и иксодовые клещи, обитающие в лесопарковой зоне г. Москвы и в лесах Подмосковья, обсеменены сапрофитными, гнилостными, условно-патогенными и патогенными бактериями и грибами. Членистоногие лесопарковой зоны содержат более широкий спектр микроорганизмов, опасных для человека и животных.

Изучение антимикробного и инсектицидного действия Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы

Целью данного этапа работы являлось определение в условиях лесопарковой зоны мегаполиса антимикробной и инсектицидной активности биоцида Агро-Велт. Работа была проведена в парке Кузьминки Москвы.

Выбранный участок парка был поделен на 30 квадратов, площадью 1 м2 каждый - 12 квадратов для отбора контрольных проб и 18 квадратов -для обработки биоцидом.

До начала эксперимента с целью определения микробной обсеменен-ности почвы с 3 контрольных и с 9 опытных участков были отобраны по 6 проб верхнего слоя почвы на глубину до 2 см.

Из отобранных проб почвы общепринятыми методами выделяли бактерии и грибы и проводили их идентификацию до вида, изучая культу-рально-морфологические и биохимические свойства.

Для определения плотности заселения почвы живыми биообъектами, с ее поверхности, а также из почвы на глубину до 2 см с этих же 3 контрольных и 9 опытных участков были собраны все виды насекомых, клещей, моллюски и др. Оставшиеся 9 опытных участков почвы орошали 0,2% раствором Агро-Велта, с расходом средства 150 мл/м2 и выдерживали в течение 1, 2 и 3 часов. Контрольные участки аналогично орошали стерильной водопроводной водой. Через время экспозиции с опытных и контрольных участков также отбирали пробы почвы для микробиологи-

ческих исследований и собирали живые и погибшие биообъекты.

Установлено, что почва на исследованных участках в парке Кузьминки обсеменена следующими микроорганизмами: E.coli, P.vulgaris, H.alvei, P.aeruginosa, S.epidermidis, S.aureus, B.subtilis, B.lentimorbus, B.thuringien-sis, C.perfringens, A.fumigatus, A.niger, A.flavus, F.graminearum. Протей, синегнойная палочка и золотистый стафилококк были патогенными для белых мышей. Из членистоногих были обнаружены жуки (8,3%), пауки (15,6%), муравьи (6%), мошки (7%), лесные клопы (3%) и др.

После обработки опытных участков парка Кузьминки биоцидом Агро-Велт из проб почвы были выделены грибы Aspergillus niger. Бактериальная микрофлора не была обнаружена.

Антибактериальная активность 0,2% рабочей эмульсии Агро-Велта при экспозиции 3 часа составила 100%, противогрибная активность -80%, инсектицидная активность 92,7%.

Проведение производственных испытаний Агро-Велта на объектах ветнадзора

Производственные испытания антимикробной и инсектицидной активности Агро-Велта позволили установить, что однократное применение для дезинфекции и дезинсекции 0,1%-ной эмульсии средства методом орошения, с расходом средства 100-150 мл/м2 и экспозицией 180 мин. обеспечивает 100% дезинфекционную и 90% дезинсекционную эффективность средства как в летний, так и в зимне-весенний периоды.

Применение Агро-Велта в присутствии лабораторных животных (мыши, крысы, морские свинки и кролики), поросят-отьемышей и дойных коров не вызывало нарушений клинического состояния животных, а также раздражения слизистых оболочек глаз и верхних дыхательных путей.

Разработка технологических режимов обеззараживания объектов ветнадзора биоцидом Агро-Велт

С учетом проведенных исследований были разработаны технологические режимы применения биоцида Агро-Велт в качестве дезинфицирующего и инсекто-акарицидного средства на объектах ветнадзора.

17

Таблица 4. Режимы дезинфекции объектов ветнадзора Агро-Велтом при инфекциях бактериальной этиологии

Объекты Концентрация Экспози- Способ обез-

обеззараживания эмульсии, % ция, мин зараживания

при не спорообразующих бактериальных инфекциях

Поверхности в помещениях 0,1 60 Протирание

(пол, стены, перегородки), пред- 0,2 30 или ороше-

меты ухода за животными, обо- 0,5 15 ние

рудование, автотранспорт и др.

Спецодежда, уборочный инвен- 0,5 60 Замачива-

тарь 1,0 30 ние

при сибирской язве и клостридиозах

Поверхности в помещениях 0,5 120 Протирание

(пол, стены, перегородки), пред- 1,0 60 или ороше-

меты ухода за животными, обо- 2,0 30 ние

рудование, автотранспорт и др.

Спецодежда, уборочный инвен- 0,5 60 Замачива-

тарь 1,0 30 ние

2,0 15

При инфекционных болезнях, вызванных неспорообразующими бактериями, необходимо применять Агро-Велт в концентрациях от 0,1 до 1,0% при экспозиции 15-60 мин, при сибирской язве - от 0,5 до 2,0% при экспозиции 15-120 мин, при кандидозах и дерматофитозах - от 0,1 до 1,0% при экспозиции 15-90 мин, в отношении плесневых грибов - от 0,2 до 2,0% при экспозиции 15-90 мин.

При борьбе с насекомыми и гамазоидными клещами необходимо применять Агро-Велт в концентрациях от 0,04 до 0,4%, а против иксодо-вых клещей - 0,5%.

ВЫВОДЫ

1. Биоцид Агро-Велт - комплексное инсекто-акарицидное средство с антимикробным действием, эффективное против бактерий и грибов - возбудителей инфекционных болезней животных, а также против насекомых и клещей, являющихся переносчиками патогенных микроорганизмов.

2. Агро-Велт обладает свойствами, обуславливающими перспективность

его применения на объектах ветнадзора: поверхностное натяжение средства составляет 0,74 мН/м, величина краевого угла смачивания - 34 градуса, белковый индекс равен 1, фенольный коэффициент - 14, коррозионная активность отсутствует, физико-химические и бактерицидные свойства сохраняются после замерзания и оттаивания.

3. Агро-Велт проявляет бактерицидное и фунгицидное действие в отношении культур тест-штаммов E.coli 12570, S.aureus 906, P. aeruginosa АТСС 27853, S. typhimurium 11, C.albicans 15, B.cereus 96, T.gypseum НИИД и A.niger НИЩ. Минимальная антимикробная концентрация средства для вегетативных форм микроорганизмов составляет 0,05%, для спорообразующих бактерий, дерматофитов и плесневых грибов - 0,2%.

4. Агро-Велт обладает инсекто-акарицидной активностью в отношении разных видов членистоногих. Для комаров, муравьев черных, пауков и гамазоидных клещей эффективной концентрацией является 0,1% средства, для мух - 0,2%, для ос и муравьев рыжих - 0,4%, для разных видов жуков и иксодовых клещей - 0,5%.

5. Остаточное инсекто-акарицидное действие Агро-Велта сохраняется в течение 4 недель для 100% изученных членистоногих. Через 6 недель на обработанных средством поверхностях в течение 60 мин погибает 100% насекомых, 70% куриных, 80% крысиных и 50% иксодовых клещей.

6. По степени воздействия на организм животных при введении в желудок Агро-Велт относится к 3 классу умеренно опасных веществ, при ингаляционном воздействии и нанесении на кожу - к 4 классу мало опасных веществ. Средство не обладает сенсибилизирующими, кумулятивными свойствами и не оказывает кожно-резорбтивного действия.

7. У насекомых и иксодовых клещей, обитающих в лесах Подмосковья, обнаружены E.coli, B.subtilis, E.rhusiopathiae, C.pasteurianum, L.brevis, A.niger. От членистоногих лесопарковой зоны Москвы выделены E.coli, S.typhimurium, S.aureus, Mycobacterium, B.subtilis, P.herbicola, C.albicans, A.niger. Членистоногие лесопарковой зоны мегаполиса содержат более широкий спектр микроорганизмов, опасных для человека и животных.

8. В условиях лесопарковой зоны мегаполиса антибактериальная ак-

19

тивность 0,2% эмульсии Агро-Велта с расходом средства 150 мл/м2 поверхности почвы и экспозицией 3 часа составила 100%, противогрибная -80%, инсектицидная - 92,7%.

9. Однократное применение для дезинфекции и дезинсекции 0,1%-ной эмульсии Агро-Велта методом орошения, с расходом средства 100-150 мл/м2 и экспозицией 180 мин. обеспечивает 100%-ную дезинфекционную и 90%-ную дезинсекционную эффективность средства в условиях вивария по содержанию лабораторных животных, свиноводческого и скотоводческого хозяйств как в летний, так и в зимне-весенний периоды. Применение Агро-Велта в присутствии животных не вызывает нарушений их клинического состояния, а также раздражения слизистых оболочек глаз и верхних дыхательных путей.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

1. По результатам исследований составлены и утверждены в установленном порядке 2 научных отчета:

- промежуточный отчет «Экспериментальные испытания безопасности, антимикробной и инсекто-акарицидной активности Агро-Велта»;

- заключительный отчет «Производственные испытания дезинфицирующей и инсекто-акарицидной активности биоцида Агро-Велт и разработка режимов дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора».

2. Результаты исследований включены в проект СТО 71954720-00062012 на биоцид Агро-Велт.

3. Разработан проект инструкции по применению биоцида Агро-Велт для профилактики инфекционных болезней животных.

4. Разработаны методические рекомендации по изучению антимикробной и инсекто-акарицидной активности комплексных биоцидов в условиях лесопарковой зоны мегаполиса.

5. При проведении производственных испытаний Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны Москвы, а также в скотоводческих и свиноводческих хозяйствах изучена антимикробная, инсектицидная и акарицидная

активность биоцида Агро-Велт, дана оценка его воздействию на бактерии и грибы, на различные виды насекомых и клещей, показана высокая дезинфицирующая и инсекто-акарицидная эффективность средства, что подтверждено актами, утвержденными руководителями хозяйств Московской (ЗАО "Агрофирма Борец", Дмитровского района) и Челябинской (совхоз «Подовинное», Октябрьского района) областей.

5. Результаты исследований по применению биоцида Агро-Велт для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ по дисциплинам «Санитарная микробиология», «Ветеринарная микробиология и микология».

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Рекомендовать биоцид Агро-Велт зооветспециалистам и владельцам животных в качестве дезинфицирующего и инсекто-акарицидного средства для обеззараживания окружающей среды и объектов ветнадзора с целью профилактики инфекционных болезней животных.

2. Ветеринарным специалистам рекомендуется использовать Агро-Велт для уничтожения иксодовых клещей, мух и комаров, а также их личинок с целью профилактики трансмиссивных природно-очаговых болезней животных.

3. Агро-Велт рекомендуется для обработки спецодежды в качестве ре-пеллентного и инсекто-акарицидного средства.

4. Результаты исследований по изучению бактерицидной, фунгицид-ной и инсекто-акарицидной активности биоцида Агро-Велт рекомендуется использовать в учебном процессе по дисциплинам «Ветеринарная микробиология и микология», «Санитарная микробиология», «Эпизоотология», «Ветеринарная санитария» в ВУЗах РФ по специальностям 111801 «Ветеринария» и 111100 «Зоотехния».

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Актуальность технического регулирования при производстве и применении дезинфицирующих средств ве-

21

теринарного назначения // Дезинфекция. Антисептика.- 2010.- № 1,- Т.1.-С. 26-28.

2. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Применение нано-структурированных биоцидов в ветеринарии / Эколого-географические аспекты инфектологии: матер. Всеросс. Науч. конф.- Новосибирск: Ново-сиб. Гос. аграр. Ун-т.- 2011.- С. 45-51.

3. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Применение биоцида Агро-Велт в условиях лесопарковой зоны мегаполиса / Научно-техническое творчество молодежи - путь к обществу, основанному на знаниях: Сб. докл.Ш Междунар. научно-практич. конф.- М.: МГСУ.- 2011.- С. 321-324.

*4. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Перспективные инновационные проекты в ветеринарии // Ветеринарная медицина.-2011.-№2.-С. 21-24.

*5. Жирихина М.С., Игуменщев П.А., Применение наноструктуриро-ванных биоцидов серии «ВЕЛТ» на объектах ветнадзора //Дезинфекция. Антисептика.- 2011.- № 2 (6).- Т. 2.- С. 50-54.

*6. Жирихина М.С., Игуменщев П.А. Наносредства серии "ВЕЛТ" и их перспективность для ветеринарии //Нанотехнологии и охрана здоровья.- 2011.- № 2 (7).- Т. 3.- С. 50-54.

7. Иванова Е.Б., Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Обеззараживание объектов окружающей среды биоцидом на основе субстанции «ВЕЛТОН» //Прикладная энтомология.- 2011.- № 4 (6).- С. 16-17.

*8. Иванова Е.Б., Грязнева Т.Н., Родионова В.Б., Жирихина М.С., Игуменщев П.А. Перспективы применения наносредств на основе субстанции Велтон для профилактики природно-очаговых и трансмиссивных заболеваний человека и животных //Жизнь без опасностей.- 2012.- № 1.Т. 7.- С. 97-99.

*9. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Экология и животноводство России //Жизнь без опасностей.- 2012.- № 1.- Т. 7.- С. 27-29.

*10. Иванова Е.Б., Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Применение биоцида на основе субстанции Велтон в условиях лесопарковой зоны мегаполиса//Дезинфекция. Антисептика.-2012.-№ 1(9).- Т.З.- С. 36-40.

22

Отпечатано в ООО «Издательство Спутник+» ПД № 1-00007 от 26.09.2000 г. Подписано в печать 16.07.2012 г. Тираж 100 экз. Усл. пл. 1,0 Печать авторефератов (495)730-47-74,778-45-60

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Игуменщев, Петр Александрович

ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ.

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Эпизоотическая ситуация по трансмиссивным природно-очаговым болезням животных в России за 2004-2011 гг.

1.2. Методы профилактики трансмиссивных природно-очаговых болезней животных.

1.3. Дезинфицирующие и инсекто-акарицидные средства, применяемые для обеззараживания окружающей среды.

1.3.1. Дезинфицирующие средства на основе четвертичных аммониевых соединений.

1.3.2. Инсекто-акарицидные средства на основе циперметрина.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.2.1. Изучение основных свойств Агро-Велта, определяющих перспективность его использования для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора.

2.2.2. Определение антибактериальной и противогрибной активности Агро-Велта.

2.2.3. Определение инсекто-акарицидного действия Агро-Велта в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях.

2.2.4. Изучение острой и хронической токсичности Агро-Велта для теплокровных животных.

2.2.5. Определение микрофлоры организма насекомых и клещей, собранных в лесопарковой и лесной зонах Москвы и Московской области.

2.2.6. Изучение антимикробного и инсектицидного действия Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы.

2.2.7. Проведение производственных испытаний Агро-Велта на объектах ветнадзора.

2.2.8. Разработка технологических режимов обеззараживания объектов ветнадзора биоцидом Агро-Велт.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ.

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ

НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ.

Введение Диссертация по сельскому хозяйству, на тему "Антимикробное и инсекто-акарицидное действие биоцида Агро-Велт и его применение на объектах ветнадзора"

Актуальность темы. Разработка и применение на объектах ветеринарного надзора многофункциональных биоцидов с антимикробным и инсекто-акарицидным действием является актуальной задачей, т.к. подобные биоциды позволяют не только дезинфицировать окружающую среду от патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, но и уничтожают во внешней среде летающих и ползающих кровососущих насекомых, являющихся переносчиками возбудителей трансмиссивных природно-очаговых болезней человека и животных (21, 32).

Трансмиссивные природно-очаговые болезни животных (ТПОБ) характеризуются энзоотичностью (приуроченность к определенной местности, клима-тогеографической зоне) и сезонностью проявления. В случаях переноса возбудителей летающими насекомыми трансмиссивные болезни животных обычно распространяются более широко, чем при передаче возбудителя клещами.

К облигатным ТПОБ животных относятся инфекционная катаральная лихорадка овец (блютанг), гидроперикардит, эрлихиоз, инфекционные энцефало-миелиты, инфекционная анемия лошадей, африканская чума лошадей, лихорадка долины Рифт, Найроби болезнь, шотландский энцефаломиелит овец, вирусный узелковый дерматит и др.; к факультативным - сибирская язва, чума верблюдов, африканская чума свиней, туляремия, лептоспироз и др. септические инфекции (48, 61, 88).

По данным Россельхознадзора, за последние годы в РФ наблюдается ухудшение эпизоотической ситуации по африканской чуме свиней, бруцеллезу крупного и мелкого рогатого скота, лейкозу, лептоспирозу и др., а также по ряду трансмиссивных болезней. В значительной мере, предпосылками этого являются рост импорта животных, нарушения ветеринарно-санитарных мероприятий на объектах ветнадзора, недостаточная эффективность используемых средств профилактики инфекционных болезней.

В 2012 г в РФ остается нестабильной ситуация по такой трансмиссивной болезни, как инфекционная катаральная лихорадка овец (блютанг), выявлены положительно реагирующие животные. Угроза болезни исходит из Европы от импортного скота, который может быть поражен вирусом блютанга 8, 4 и 1 се-ротипов, а вакцинация проводится только против 8 серотипа. Риск заноса блютанга со стороны Европейских стран увеличивается с ростом импорта. Поэтому существует возможность массового распространения заболевания в России и формирования природного очага блютанга с учетом распространения потенцио альных переносчиков инфекции на территории РФ до 72 северной широты (49, 63).

Эпизоотические угрозы и основные риски на 2012 и последующие годы связаны с эндемической опасностью распространения сибирской язвы, в результате сохранения на территории России почвенных очагов и снижения внимания к данной болезни на местном уровне (54).

Сложной также остается в РФ эпизоотическая ситуация по туляремии, лептоспирозу, инфекционному энцефаломиелиту, кровепаразитарным болезням людей и животных (малярия, пироплазмоз, трипаносомоз и др.), переносчиками которых являются насекомые и клещи (60).

Меры профилактики трансмиссивных природно-очаговых болезней включают защиту животных от нападения кровососущих членистоногих (смена выпасов, перевод на стойловое содержание, использование репеллентов), уничтожение переносчиков, мелиоративные мероприятия в местах выплода переносчиков, иммунизацию животных.

Однако против 85% трансмиссивных болезней животных специфическая профилактика не разработана, остается проблемным вопрос выделения и идентификации многих возбудителей заболеваний, при ряде болезней до сих пор не ясен патогенез, недостаточно изучены этиологические факторы.

Поэтому, дезинфекция и дезинсекция как способ ликвидации трансмиссивных инфекционных болезней животных приобретает первостепенное значение. Именно оперативное прерывание эпизоотической цепи путем уничтожения во внешней среде возбудителей болезней и их переносчиков наиболее эффективно сдерживает развитие эпизоотического процесса и распространение трансмиссивных болезней (19, 20).

Как указывает Смирнов A.M. (60), многие виды микроорганизмов, циркулирующие в окружающей среде, способны формировать устойчивость не только к антибиотикам, но и к дезинфицирующим средствам, которые на протяжении длительного времени широко применяются в ветеринарной практике (хлорсодержащие, щелочи, альдегиды). Кроме того, ряд дезинфектантов медленно бионизируются, некоторые (диоксины, тригамометаны и др.) трансформируются во внешней среде до весьма опасных для здоровья человека и животных соединений, обладают коррозионной активностью, нестабильны при хранении, не обладают достаточной эффективностью при обеззараживании воздуха, оборудования и поверхностей из синтетических и органических материалов.

До сих пор широко используемые в России хлор-формол-фенол-содержащие биоциды являются опасными для здоровья людей и животных.

Средства, применяемые в последние годы для уничтожения насекомых и клещей, снизили свою эффективность в результате их адаптации к ним.

По мнению отечественных и зарубежных ученых (31, 32, 89, 96, 115), при изыскании новых биоцидов ветеринарного назначения предпочтение необходимо отдавать многофункциональным средствам, обладающим широким спектром антимикробного, противопаразитарного и инсектицидного действия, являющихся безвредными для людей и животных и экологически безопасными.

Одно из наиболее удачных решений этой проблемы было найдено учеными НПО «ВЕЛТ», которые создали наноструктурирующую антимикробную субстанцию Велтон на основе клатрата дидецилдиметиламмоний бромида с карбамидом, которая активна против широкого спектра бактерий, грибов и вирусов. Субстанция Велтон не обладает коррозионным действиием, относится к 4 классу мало опасных веществ и является экологически безопасной. В составе дезинфизирующих средств, антисептиков и лекарственных препаратов субстанция Велтон показала высокую антимикробную эффективность и является перспективным средством для конструирования биоцидов с многофункциональным действием.

В 1960-е гг. на основе пиретринов - группы природных инсектицидов, выделенных из цветков далматской ромашки («пиретрума»), были созданы эффективные инсектицидные средства широкого спектра действия. Затем были созданы синтетические пиретроиды (перметрин, циперметрин, дельтаметрин (децис), фенвалерат, цигалотрин, флуцитринат, фенпропатрин, циперметрин и др). Эти инсектициды во всём мире регулярно применяются для борьбы с сельскохозяйственными насекомыми-вредителями на протяжении последних 30 лет, поэтому многие насекомые выработали резистентность к средствам на их основе, что резко снижает эффективность агрохимических мероприятий и зачастую вынуждает заметно (в 3-10 раз) увеличивать нормы расхода инсектицида. Используемым в настоящее время пиретроидам присущ и целый ряд других недостатков, как экономических (сложность синтеза, дороговизна), так и экологических (недостаточная избирательность действия и наличие ряда нежелательных побочных эффектов).

Всё это обуславливает необходимость создания и внедрения в практику ветеринарии новых высокоэффективных биоцидов, обладающих эффективным антимикробным и инсекто-акарицидным действием, безвредных для человека и животных и безопасных для окружающей среды.

Учеными НИИ биоцидов и нанотехнологий (г. Москва) создан новый биоцид Агро-Велт, представляющий собой контактно-кишечный инсекто-акари-цид с антимикробным действием в форме эмульсии. В качестве активно действующих веществ Агро-Велт содержит субстанцию Велтон и циперметрин.

С учетом отмеченного, изучение эффективности действия Агро-Велта в качестве антибактериального, противогрибного и инсекто-акарицидного средства при профилактике трансмиссивных природно-очаговых инфекционных болезней животных представляет собой актуальную задачу для ветеринарии.

Цель и задачи исследований. Цель настоящих исследований - определение антимикробного и инсекто-акарицидного действия комплексного биоцида Агро-Велт и оценка его эффективности при дезинфекции, дезинсекции и деза-каризации объектов ветнадзора.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить основные свойства Агро-Велта, определяющие перспективность его использования для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора.

2. Определить антибактериальную и противогрибную активность Агро-Велта in vitro.

3. Определить инсекто-акарицидное действие Агро-Велта в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях.

4. Изучить острую и хроническоую токсичность Агро-Велта в отношении теплокровных животных.

5. Определить микрофлору организма насекомых и клещей, собранных в лесопарковой и лесной зонах Москвы и Московской области.

6. Изучить антимикробное и инсектицидное действие Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы.

7. Провести производственные испытания Агро-Велта на объектах ветнадзора.

8. Разработать технологические режимы дезинфекции, дезинсекции и де-закаризации биоцидом Агро-Велт объектов ветнадзора.

9. Разработать проект нормативной документации на Агро-Велт с целью регистрации его для применения на территории РФ.

Научная новизна.

1. Впервые, для ветеринарной практики предложено комплексное дезинфицирующее средство с инсекто-акарицидным действием на основе субстанции «Велтон» и циперметрина, перспективное для обеззараживания и дезинсекции окружающей среды при профилактике трансмиссивных природно-очаговых инфекционных болезней животных.

2. Установлено, что Агро-Велт обладает высокой смачивающей и проникающей способностью, не проявляет коррозионного действия, белковый индекс средства позволяет проводить обеззараживание окружающей среды без предварительной механической очистки поверхностей.

3. Доказано, что Агро-Велт безвреден для теплокровных животных, не обладает сенсибилизирующими и кумулятивными свойствами и не оказывает кож-но-резорбтивного действия. По величине 1Л350 при нанесении на кожу и при ингаляционном воздействии Агро-Велт относится к 4 классу малоопасных веществ и может применяться в присутствии животных.

4. Впервые, в сравнительном аспекте, определена микрофлора организма насекомых и иксодовых клещей, собранных в лесопарковой зоне г. Москвы и в лесной зоне Московской области. По своему составу микрофлора членистоногих, обитающих на территории мегаполиса, была разнообразнее, чем у насекомых и клещей лесной зоны и содержала, наряду с почвенными сапрофитами и гнилостными бактериями, патогенные микроорганизмы - кандиды, стафилококки, эшерихии, сальмонеллы.

5. Создана экспериментальная методика, позволяющая определять эффективность комплексных биоцидов с антимикробным и инсекто-акарицидным действием в условиях лесопарковой зоны мегаполиса.

6. Показана высокая антимикробная активность Агро-Велта в отношении широкого спектра патогенных бактерий и грибов. Минимальная антимикробная концентрация средства для вегетативных форм микроорганизмов составляет 0,05%, для спорообразующих бактерий, дерматофитов и плесневых грибов -0,2%.

7. Установлено эффективное инсекто-акарицидное действие Агро-Велта при концентрации рабочих эмульсий 0,2% в отношении разных видов насекомых и клещей в лабораторных условиях, в условиях лесопарковой зоны мегаполиса и в животноводческих хозяйствах.

Практическая значимость.

1. Для применения в ветеринарии в качестве дезинфицирующего и инсектоакарицидного средства для обеззараживания объектов окружающей среды и уничтожения членистоногих - переносчиков возбудителей инфекционных болезней животных, предложен комплексный, эффективный, безвредный биоцид Агро-Велт, который прошел производственные испытания.

2. Результаты исследований включены в проект СТО 71954720-0006-2012 на средство Агро-Велт, предназначенное для дезинфекции, дезинсекции и дезака-ризации окружающей среды.

3. Разработан проект инструкции по применению биоцида Агро-Велт для профилактики инфекционных болезней животных.

4. При проведении производственных испытаний Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны г. Москвы, а также в скотоводческих и свиноводческих хозяйствах изучена антимикробная, инсектицидная и акарицидная активность биоцида Агро-Велт, дана оценка его воздействия на разные виды микроорганизмов и членистоногих, показана высокая дезинфицирующая и инсекто-акарицидная эффективность средства, что подтверждено актами, утвержденными руководителями хозяйств Московской и Челябинской областей.

5. Разработаны технологические режимы дезинфекции, дезинсекции и деза-каратизации объектов ветнадзора биоцидом Агро-Велт.

6. Результаты исследований по применению биоцида Агро-Велт на объектах ветнадзора используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ по дисциплинам «Санитарная микробиология», «Ветеринарная микробиология и микология».

Личный вклад соискателя. Автору принадлежат непосредственное осуществление исследований по изучению острой и хронической токсичности Агро-Велта на лабораторных животных; определение антимикробной и инсекто-акарицидной активности Агро-Велта в отношении тест-штаммов разных видов микроорганизмов, а также клещей и насекомых; производственные испытания биоцида в условиях лесопарковой зоны мегаполиса и в животноводческих хозяйствах; разработка нормативной документации на Агро-Велт; анализ и обобщение полученных результатов.

В работе использованы материалы, полученные лично автором, а также в соавторстве с директором НИИ биоцидов и нанобиотехнологий, кандидатом медицинских наук Ивановой Е.Б., которой выражаю глубокую благодарность за помощь и поддержку.

Апробация результатов диссертации. Основные результаты исследований были представлены на выставке, посвященной 90-летию ФГБОУ ВПО МГАВМиБ (Москва, 2009); на выставке «Звезда Подмосковья» (Раменское, Московской области, 2010); на выставке в «Экспо-Центре» (Москва, 2010); доложены на XVIII Международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2010); на XIX Международном ветеринарном конгрессе (Москва, 2011); на VII Международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (Москва, 2011); на Международной научно-практической конференции «Задачи ветеринарной науки в реализации доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации (Москва, 2011); на III Международной научно-практической конференции «Научно-техническое творчество молодежи - путь к обществу, основанному на знаниях. Приоритетные направления развития науки и техники - технологический прорыв в мировое сообщество» (Москва, 2011); на Всероссийской научной конференции «Эколого-географические аспекты инфектологии» (Новосибирск, 2011).

Публикации. По результатам диссертации опубликовано 10 статей, в т.ч. 6 статей в научных журналах, рекомендованных ВАК (Ветеринарная медицина, Биозащита и биобезопасность, Дезинфекция. Антисептика, Жизнь без опасностей, Нанотехнологии и охрана здоровья) и 2 - в сборниках научных трудов.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 179 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, данные о практическом использовании научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы (118 источников, из которых 64 отечественных и 54 иностранных). Работа содержит 34 таблицы, 31 рисунок, 22 страницы приложений.

Заключение Диссертация по теме "Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов", Игуменщев, Петр Александрович

4. ВЫВОДЫ

1. Биоцид Агро-Велт - комплексное инсекто-акарицидное средство с антимикробным действием, эффективное против бактерий и грибов - возбудителей инфекционных болезней животных, а также против насекомых и клещей, являющихся переносчиками патогенных микроорганизмов.

2. Агро-Велт обладает свойствами, обуславливающими перспективность его применения на объектах ветнадзора: поверхностное натяжение средства составляет 0,74 мН/м, величина краевого угла смачивания - 34 градуса, белковый индекс равен 1, фенольный коэффициент - 14, коррозионная активность отсутствует, физико-химические и бактерицидные свойства сохраняются после замерзания и оттаивания.

3. Агро-Велт проявляет бактерицидное и фунгицидное действие в отношении культур тест-штаммов Е.coli 12570, S.aureus 906, P. aeruginosa АТСС 27853, S. typhimurium 11, С.albicans 15, B.cereus 96, T.gypseum НИИД и A.niger НИИД. Минимальная антимикробная концентрация средства для вегетативных форм микроорганизмов составляет 0,05%, для спорообразующих бактерий, дерматофитов и плесневых грибов - 0,2%.

4. Агро-Велт обладает инсекто-акарицидной активностью в отношении разных видов членистоногих. Для комаров, муравьев черных, пауков и гамазо-идных клещей эффективной концентрацией является 0,1 % средства, для мух -0,2%, для ос и муравьев рыжих - 0,4%, для разных видов жуков и иксодовых клещей - 0,5%.

5. Остаточное инсекто-акарицидное действие Агро-Велта сохраняется в течение 4 недель для 100% изученных членистоногих. Через 6 недель на обработанных средством поверхностях в течение 60 мин погибает 100% насекомых, 70%) куриных, 80%> крысиных и 50% иксодовых клещей.

6. По степени воздействия на организм животных при введении в желудок Агро-Велт относится к 3 классу умеренно опасных веществ, при ингаляционном воздействии и нанесении на кожу - к 4 классу мало опасных веществ. Средство не обладает сенсибилизирующими, кумулятивными свойствами и не оказывает кожно-резорбтивного действия.

7. У насекомых и иксодовых клещей, обитающих в лесах Подмосковья, обнаружены E.coli, B.subtilis, E.rhusiopathiae, C.pasteurianum, L.brevis, A.niger. От членистоногих лесопарковой зоны Москвы выделены E.coli, S.typhimurium, S.aureus, Mycobacterium, B.subtilis, P.herbicola, C.albicans, A.niger. Членистоногие лесопарковой зоны мегаполиса содержат более широкий спектр микроорганизмов, опасных для человека и животных.

8. В условиях лесопарковой зоны мегаполиса антибактериальная активность 0,2% эмульсии Агро-Велта с расходом средства 150 мл/м2 поверхности почвы и экспозицией 3 часа составила 100%), противогрибная - 80%), инсектицидная - 92,7%).

9. Однократное применение для дезинфекции и дезинсекции 0,1%-ной эмульсии Агро-Велта методом орошения, с расходом средства 100-150 мл/м2 и экспозицией 180 мин. обеспечивает 100%-ную дезинфекционную и 90%-ную дезинсекционную эффективность средства в условиях вивария по содержанию лабораторных животных, свиноводческого и скотоводческого хозяйств как в летний, так и в зимне-весенний периоды. Применение Агро-Велта в присутствии животных не вызывает нарушений их клинического состояния, а также раздражения слизистых оболочек глаз и верхних дыхательных путей.

5. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

1. По результатам исследований составлены и утверждены в установленном порядке 2 научных отчета:

- промежуточный отчет «Экспериментальные испытания безопасности, антимикробной и инсекто-акарицидной активности Агро-Велта»;

- заключительный отчет «Производственные испытания дезинфицирующей и инсекто-акарицидной активности биоцида Агро-Велт и разработка режимов дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора».

2. Результаты исследований включены в проект СТО 71954720-0006-2012 на биоцид Агро-Велт.

3. Разработан проект инструкции по применению биоцида Агро-Велт для профилактики инфекционных болезней животных.

4. Разработаны методические рекомендации по изучению антимикробной и инсекто-акарицидной активности комплексных биоцидов в условиях лесопарковой зоны мегаполиса.

5. При проведении производственных испытаний Агро-Велта в условиях лесопарковой зоны Москвы, а также в скотоводческих и свиноводческих хозяйствах изучена антимикробная, инсектицидная и акарицидная активность биоцида Агро-Велт, дана оценка его воздействию на бактерии и грибы, на различные виды насекомых и клещей, показана высокая дезинфицирующая и ин-секто-акарицидная эффективность средства, что подтверждено актами, утвержденными руководителями хозяйств Московской (ЗАО "Агрофирма Борец", Дмитровского района) и Челябинской (совхоз «Подовинное», Октябрьского района) областей.

5. Результаты исследований по применению биоцида Агро-Велт для дезинфекции и дезинсекции объектов ветнадзора используются в учебном процессе в ФГБОУ ВПО МГАВМиБ по дисциплинам «Санитарная микробиология», «Ветеринарная микробиология и микология».

6. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ

1. Рекомендовать биоцид Агро-Велт зооветспециалистам и владельцам животных в качестве дезинфицирующего и инсекто-акарицидного средства для обеззараживания окружающей среды и объектов ветнадзора с целью профилактики инфекционных болезней животных.

2. Ветеринарным специалистам рекомендуется использовать Агро-Велт для уничтожения иксодовых клещей, мух и комаров, а также их личинок с целью профилактики трансмиссивных природно-очаговых болезней животных.

3. Агро-Велт рекомендуется для обработки спецодежды в качестве репел-лентного и инсекто-акарицидного средства.

4. Результаты исследований по изучению бактерицидной, фунгицидной и инсекто-акарицидной активности биоцида Агро-Велт рекомендуется использовать в учебном процессе по дисциплинам «Ветеринарная микробиология и микология», «Санитарная микробиология», «Эпизоотология», «Ветеринарная санитария» в ВУЗах РФ по специальностям 111801 «Ветеринария» и 111100 «Зоотехния».

Библиография Диссертация по сельскому хозяйству, кандидата биологических наук, Игуменщев, Петр Александрович, Москва

1. Антонов Б.И., Яковлева Т.Ф., Дербинова В.И.Лабораторные исследования в ветеринарии: биохимические и микологические.- М.: Агропромиздат.1989.-324 с.

2. Арефьева Л.И., Маневич Л.А., Федорова Л.С.Бактерицидная активность некоторых зарубежных препаратов /Основные направления дезинфекционного дела: Сб.науч.тр.- М.: НИИ дезинфектологии.- 2007.- С. 9-12.

3. Афиногенова Т.Е. Чашечный метод оценки эффективности дезинфек-тантов и антисептиков /Методическое пособие.- СПб: СПбМА.- 2000.- С. 5-7.

4. Ашмарин И.П., Воробьев А.А.Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Гос. из-во мед. Литературы.- 1962. - 290 с.

5. Белан A.A. Организация и меры борьбы с гнусом в нефтедобывающих районах Западной Сибири. В сб.: Проблемы борьбы с гнусом.- М.: МГУ.1990.- С. 21-25.

6. Безуглова Т. И., Безуглов В. А. Микродозатор для топикального нанесения инсектицидов //Мед. паразитол. и паразит, болезни.- 2000.- Т. 46.- № 1.-С. 111- ИЗ.

7. Беляев В.И. Инсектицидные свойства феноформ-форте. Сельское и промысловое хозяйство Крайнего Севера: Тр. НИИСХ Крайнего Севера.1996.- Т. 22.-С. 101-104.

8. Ю.Богданова E.H., Маркина В.В., Кулемина Е.Г. Чувствительность к репеллентам некоторых видов слепней.- В сб.: Проблемы дезинфекции и стерилизации.- М.: Агропром.- 1997.- Ч. 3.- С. 7-15.

9. Бороздин Э.К. Оводовые инвазии и поражения, вызываемые кровососущими двукрылыми насекомыми.- В кн.: Северное оленеводство.- М.: Мир.-1979.- С. 271-279.

10. Брюшинина Г.Т. Испытание репеллента МГК-326 и инсектицида МГК-264 против гнуса: Тр. ВНИИВС «Проблемы ветеринарной санитарии».-М.: ВНИИВС.- 2000.- Т. 56.-С. 114-117.

11. Бухарин О.В., Перунова Н.Б., Еремин М.Н. Отбор дезинфектантов, подавляющих персистентный потенциал патогенов /Актуальные вопросы теории и практики дезинфектологии: Сб. науч. тр.- М.: НИИ дезинфектологии.-2008.-Т. 1.- С.-91-92.

12. Вашков В.И. Современные химические инсектициды, используемые в медицинской дезинфекции.- В кн.: Проблемы дезинфекции и стерилизации.-М.: Медицина.- 1991.- Т. 2.- Вып. 21.- С. 3-8.

13. Вилькович В.А. Дезинфекционное дело. М.: Медицина.- 2007. - 430 с.

14. Грапов А.Ф., Мельников H.H. Современные инсектициды и акарици-ды //Ж. ВХО им. Д.И.Менделеева.- 1984.- XXIX.- Т I,- С. 40-53.

15. Грязнева Т.Н., Иванова Е.Б., Кудинова Т.А.Изучение биоцидных свойств препарата "Миковелт" в отношении дерматофитов //Ж. Жизнь без опасностей.-М.: Издательский дом "ВЕЛТ".-2008.- № 4.-С. 96-97.

16. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Актуальность технического регулирования при производстве и применении дезинфицирующих средств ветеринарного назначения //Дезинфекция. Антисептика.- 2010.- № 1.- Т.1.- С. 26-28.

17. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Применение наност-руктурированных биоцидов в ветеринарии /Эколого-географические аспекты инфектологии: матер. Всеросс. Науч. конф.- Новосибирск: Новосиб. Гос. аг-рар. Ун-т.- 2011.-С. 45-51.

18. Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Перспективные инновационные проекты в ветеринарии //Ветеринарная медицина.-2011.-№ 2.-С. 21-24.

19. Гудзь О.В., Овчинников В.Г., Писько Г.Т. Противомикробные свойства поверхностно-активных антисептических средств производных полимети-лендиамина//Микробиол. журн.-1987.- № 9.- С. 82-83.

20. Гудзь О.В., Писько Г.Т. Влияние четвертичных аммониевых соединений на функциональное состояние цитоплазматической мембраны Escherichia coli //Микробиол. журн.- 1988.- Т. 50.- № 3.- С. 75-78.

21. Гудзь О.В., Писько Г.Т. Молекулярные аспекты действия поверхностно-активных веществ на микроорганизмы //Фармакология и токсикология: Республ. междувед. сборник.- К.: Здоров'я.- 1993.- С. 106-111.

22. Гудзь О. В. Итоги и перспективы клинического применения дезинфекционных средств из группы четвертичных аммониевых соединений //Провизор.- 1998.- № 12.- С. 46-48.

23. Дмитриева B.C., Семенов С.М.Микробиологический контроль активности антибиотических препаратов.- М.: Медицина.- 1995.- 363 с.

24. Еремеева Н.И., Кравченко М.А. Действие дезинфектантов на основе ЧАС на клинические штаммы микобактерий с множественной лекарственной устойчивостью //Материалы международного съезда фтизиаторов.- М.: НИИТ.-2007.- С.120-121.

25. Жирихина М.С., Игуменщев П.А. Наносредства серии "ВЕЛТ" и перспективность их применения в ветеринарии //Нанотехнологии и охрана здоровья.-2011.-С. 50-51.

26. Иванов А.Ю., Фомченков В.М. Зависимость повреждающего действия поверхностно-активных веществ на клетки Escherichia coli от фазы роста культуры //Микробиология.- 1989.- Т. 58, вып. 6.- С. 969-975.

27. Иванова Е.Б. Современные отечественные универсальные дезинфицирующие средства, кожные антисептики и дезинфицирующие салфетки серии «ВЕЛТ» на основе ЧАС //Дезинфекц. дело. 2000. - № 2. - С. 30-34.

28. Иванова Е.Б., Емшанов О.В. Инновационные отечественные разработки в области дезинфекции на основе современных нанобиотехнологий //Актуальные вопросы теории и практики дезинфектологии: Сб. науч. тр.- М.: НИИ дезинфектологии.- 2008.- Т. 1.- С.- 118-120.

29. Иванова Е.Б., Грязнева Т.Н., Игуменщев П.А. Применение биоцида на основе субстанции Велтон в условиях лесопарковой зоны мегаполиса //Биозащита и биобезопасность.- 2011.- № 3.- С. 21-23.

30. Игуменщев П.А., Жирихина М.С. Применение наноструктурирован-ных биоцидов серии «ВЕЛТ» на объектах ветнадзора //Дезинфекция. Антисептика.-2011.- С. 50-51.

31. Йоффе Б.С., Бабаян Е.П., Злотник P.E. Синтез и применение катион-ных ПАВ //Хлорная промышленность.- М.: НИИТЕХИМ.- 1988.- 42 с.

32. Коваленко Л.В. Современные инсектициды. Химия и практическое использование //Лекция. М.: МХТО им. Д.И.Менделеева.- 1986.- 48 с.

33. Коваленко Л.В. Инсектициды и акарициды на основе фосфороргани-ческих соединений и метилкарбаматов: Учебное пособие.- М.: МХТО им. Д.И.Менделеева.- 1995.- 48 с.

34. Крученок Т.Б. Научные основы направленного поиска новых дезинфицирующих средств и изучение механизма их действия //Проблемы дезинфекции и стерилизации: Сб.науч.тр.- M.: ММА.- 1995.- С. 6-13.

35. Курзаев Г.М. Изучение инсектицидных свойств фамофоса и байтекса на оводах и слепнях таежной зоны.- В сб.: Проблемы животноводства и пушного звероводства на Крайнем Севере.- Новосибирск: НГУ.- 1997.- С. 85-87.

36. Лиманов М.О., Иванов С.Б., Крученок Т.Б. Синтез и бактерицидная активность катионных поверхностно-активных веществ, содержащих асимметричный атом азота //Хим.-фарм. журн.- 1984.- № 6.- С. 703-706.

37. Ляпунов H.A., Бобылева Л.Г., Иванов Л.В.Исследование катионных поверхностно-активных веществ солей алкиламидопропилдиметилбензилам-мония //Фармация.- 1984.- T. XXXIII.- № 3.- С. 26-30.

38. Методические указания по оценке токсичности и опасности дезинфицирующих средств.- МУ 1.2.1105-02.- М.: Стандарт.- 2002.- 30 с.

39. Методические указания о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики.- М.: Печ. цех Госагропрома СССР.-1987,- 158 с.

40. Непоклонов A.A., Метелица В.К. О метаболизме и сроках сохранения хлорофоса в организме крупного рогатого скота.- Тр. ВНИИВС «Проблемы ветеринарной санитарии».- М.: ВНИИВС.- 1971.- Т. 39.- С. 155-164.

41. Новикова Э.А., Вакар М.В. О применении новых метрологических стандартов на методы измерений при анализе дезинфекционных средств /Актуальные вопросы теории и практики дезинфектологии: Сб. науч. тр.- М.: НИИ дезинфектологии.- 2008.- Т. 2.- С.- 78-80.

42. Павлов С.Д. Результаты испытания некоторых инсектицидов против двукрылых кровососущих насекомых-эктопаразитов с.-х. животных.- Материалы ветеринарной арахно-энтомологии и ветеринарной санитарии.- Тюмень: ТСХИ.- 1990.- Вып. 2.- С. 133-142.

43. Павловский Е. Н. Природная очаговость трансмиссивных болезней в связи с ландшафтной эпидемиологией зооантропонозов.- М.: Литиздат.- 1969.Т. 1.- 255 с.

44. Промоненков В.К., Короткова O.K. Новые направления синтеза и применения пиретроидов // Ж. ВХО им. Д.Ц.Менделеева.- 1978.- XXLLL- Т. 2.-С. 170-178.

45. Пхакадзе Т.Я. Активность антисептиков и дезинфектантов в отношении отдельных видов неферментирующих грамотрицательных бактерий //Лаб дело.-1991.-№ 10.-С. 58-61.

46. Рябов C.B., Шутова М.И. К вопросу о путях оздоровления природных очагов зоонозных инфекций /Актуальные вопросы теории и практики дезин-фектологии: Сб. науч. тр.- М.: НИИ дезинфектологии.- 2008.- Т. 2.- С.- 92-95.

47. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ /Под общей редакцией Хабриева Р.У.- 2- изд., перераб. и доп.- М.: ОАО «Издательство «Медицина».- 2005.- 832 с.

48. Руководство Р 4.2.2643-10 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности.- М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора.-2011.-615 с.

49. Сборник методических указаний по применению дезинфекционных средств и кожных антисептиков: 9-е изд., доп. и перераб. /Под ред. Е. Б. Ивановой. М.: НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН.- 2005.- 320 с.

50. Сборник опубликованных материалов по актуальным вопросам де-зинфектологии и применению дезинфекционных средств серии «BEJIT» / Под ред. Е. Б. Ивановой. М.: НЦССХ им. А. Н. Бакулева.- 2006.- 196 с.

51. Синтез и применение некоторых четвертичных солей аммония, содержащих диоксолановое кольцо /Ганиуллина Э.Р., Рольник JI.3. Ягофарова Г.Г. и др. //Сб.науч.тр. «Проблемы теоретической и экспериментальной химии».- Екатеринбург: ЕГУ.- 2004.- С. 52-53.

52. Смирнов A.M. Актуальные проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии /Актуальные проблемы медико-биологи-ческой защиты: Сб.науч.тр.- М.: Нац. союз «МБЗ».- 2006.- С. 156-160.

53. Чернявская М.А., Павлова И.Б. Структурно-функциональные изменения клеток сферопластов эшерихий при воздействии катионного поверхностно-активного вещества //Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунобиол.-1983,-№2.-С. 62-66.

54. Шандала М.Г. Методологические проблемы современной дезинфектологии /Актуальные проблемы дезинфектологии в профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний: Сб.науч.тр М.: ИТАР-ТАСС.- 2002.- С. 916.

55. Цыганова C.B. Дезинфекция, дезинсекция, дератизация на птицефабриках промвшленного типа.- М.: ЗАО «Новые печатные технологии».- 2012.274 с.

56. Aeree Fred, Jr. Beroza Morton. Quantitative gas chror matography of isomers of insect repellent N-N-diethyl tolnamidae.- J. Econ. Entomol., 2002, v. 55, N 5 : 619-622.

57. Babb J. Methods of cleaning and disinfection //Zentr Sterilization.- 1993.-№ 4.- P. 227-37.

58. Best M. Efficacies of selected disinfectants against Mycobacterium tuberculosis //J. Clin. Microbiol.- 2000.- № 10.- P. 2234-2239.

59. Birss V. Adsoiption of quaternaiypyridinium compounds at Pt electrodes in neutral and weakly alkaline solutions // J. of Electroanalytical Chemistry. -2003.-No. 550-551.-P. 67-69.

60. Blanton F.S., Travis B.V. Control of adult mosguitoes in Alaska with Aeriol Sprays.- J. Econom. Entomol., 1990, v. 43, N 3, p. 347-350.

61. Brogton A.E., De Foliart G.K., Kontach B.H. Tly control for 65 (Hoards Dairyman, may, 25, 1965), 2005, v. 110, N 10, p. 604-606.

62. Block S. Disinfection, Sterilisation and Preservation. /Block S. //4th ed. Lea & Febiger.- Philadelphia, London.- 1991.- P. 225-255.

63. Cupkova V. Study on interaction of amine oxides and new type of organic ammonium salt with Bacillus cereus spores //Actafac. pharm. Univ.- 1998.- P. 131161.

64. Denyer S.P. Mechanisms of action of antibacterial biocides //Int Biodete-rior Biodegrad.- 1995.- 36.- P. 227-245.

65. Dremova V.P., Markina V.V. Zur Frage der minimalen effectiven Dosierungen der Repellents.- Angen Parasit., 1995, Bd. 3,. s. 177-180.

66. Dychdala G.R. Chlorine and chlorine compounds //In: Block S.S., editor. Disinfection, sterilization and preservation. 3rd ed. Philadelphia: Lea & Febiger.-1983.- P. 157-82.

67. Gibel W. Löhs K, Wildner J.P. Ober die kanserogenc, hamatotoxische und hepatotoxische Wirkung pestiisider orgamsclncr .- Phosphorverbindungen. Archiv Geschvulstforschung.- 1983, Bd. 41, S. 311-328.

68. Golini V.l., Wright B. Relative Abundance and seasonal distribution of Tabanidae (Diptera) near Guelf, Ontario.- J. Canad. Entomol., 1998, v. 110, N 4, p.385.398.

69. Gorman S.P. Antimicrobial activity, uses and mechanism of action of glu-taraldehyde //J. Appl Bacteriol.- 2000.- 48:161-190.

70. Frese K., Thiel W. Zur Pathologie der Hautverander und.en beim Krie-belmuckenbefall des Rindes.-Zbl. Veterinarmed., 2004, B. 21, N 8, p. 618-624.

71. Fuch-Godec R. The adsorption, CMC detemiination and corrosion inhibition of some N-alkyl quaternary ammonium salts on carbon steel surface in 2M H2S04 // Colloids and Surface A: Physicochem. Eng. Aspects. 2006. - Vol. 280. -No. 1-3.-P. 130-139.

72. Jiang X. Effect of calcium ions on pitting corrosion and inhibition performance in C02 corrosion of N80 steel // Corrosion science. 2006. - Vol. 48. - No. 10. -P. 3091 -3108.

73. Jong R. Withdrawl of Disinfectant Hit by Safety Fears //BBC News on Line.- 2002.- P.

74. Knapp F.W., Pass B.C. Low volume aerial sprays for mosquito control. — J. Mosquito News, 1986, v. 26, N 1, p. 22-25.

75. Kunz Sidney E. Highlights of veterinary entomology: 1992-1997.- Bull. Entomol. Soc. Amer., 2008, v. 24, N 4, p. 401-406.

76. Koricanac Z. A comparative polarographie investigation of symmetric bis(pyridinium oximes) //Acta pharm. Jugosl.- 1984.- V. 34.- № 1.- P. 27-33.

77. Larson E. Alcohols. In: Block S.S., editor. Disinfection, sterilisation and preservation. Philadelphia: Lea & Febiger.- 1991.- P. 191-203.

78. Ma H. Impedance spectroscopic study of corrosion inhibition of copper by surfactants in the acidic solutions // Corrosion science. -2003.-No.45.-P. 867-882.

79. Merianos J.J. Quaternary ammonium antimicrobial compounds. In: Block S.S., editor. Disinfection, sterilisation and preservation //Philadelphia: Lea & Febiger.- 1991.- P. 225-255.

80. Mbithi J.N. Bactericidal, virucidal, and mycobactericidal activities of reused alkaline gluteraldehyde in an endoscopy unit. //J Clin Microbiol.-1993;31:2988-2995.

81. McDonnell G. Antiseptics and Disinfectants: Activity, Action and Resistance //Clinical Microbiology Reviews.- 2002. P. 147-179.

82. Mount G.A., Gah an G.B., Lofgren C.S. Evaluation of Insecticides in the Laboratory Against Adult and Larwal Stable Flies.- J. Econom. Entomol., 1995, v. 58, N4, p. 685-687.

83. Mount G.A., Lofgren C.S., Games B.W. Comprarisons of thermal and nonthermal aerosols of malation, fention and nailed for control of stable flies and saltmarch mosquitoes.- J. Mosquito News, 1996, v. 26, N 2, p. 132-138.

84. Mouchet Jaen., Quiroga Mercedes. La resistance aux insecticides chez les culicines.- Cah. ORSTOM. Entomol. med. et parasitai., 1976, v. 14, N 2, p. 111-123.

85. Niu L. Corrosion inhibition of iron in acidic solutions by alkyl quaternary ammonium halides: correlation between inhibition efficiency and molecular structure // Applied Surface Science. 2005. - Vol. 252. - No. 5. - P. 1634-1642.

86. Noor E.A. The inhibition of mild steel corrosion in phosphoric acid solutions by some N-heterocyclic compounds in the salt form // Corrosion Science. -2005.-No. 47.-P. 33-55.

87. Nowiers, ki R.M., Git tins A.R. The Horse Flies and Deer Flies of Idaho (Diptera: Tabanidae).-Univ.of Idaho College of agriculture. Agric. experimental station. Res. Bull., 1996, N 96, 48 p.

88. Patrick R., Michael A., Robert H. Manual of clinical microbiology // Washington: ASM PRESS.- 2007.- P. 227-245.

89. Pant C.P., Self L.S. Recoveri after Knockdown and non-contact toxicitv of carbamates-'Carbamult and Arprocarb. J. Mosqito News. 2000, v. 28,- N 4, p. 630638.

90. Pant C.P. and Joshi G.P. Alfield stidy of an airborne toxic effect of Baygon residual sprey.- J. Mosquito News, 1999, v. 29, N 4, p. 674-677.

91. Quelennec G. Lutte chimique control les arthropodes d'intered medical. Evaluation des nouveaux insecticides. Insecticides operationneles. Insecticides nouveaux.- J. Med. trop. (France), 1988, v. 38, N 6, p. 643- 650.

92. Ranganthan N.S. Chlorhexidine. In: Ascenzi J M., editor. Handbook of disinfectants and antiseptics.- New York: Marcel Dekker.- 1996.- P. 235-264.

93. Rath burn Carlisle B. Insecticides for the control of mos-. quitoes and other Diptera.- J. Mosquito News, 1999, v. 39, N 1, p. 58-63.

94. Rutledge L.G., So field R.K., Moussa M.A. A bibliography of diethyl tol-uamide.- Bull. Entomol. Soc. Amer., 2002, v. 24,- N 4, p. 431-439.

95. Rutala W.A. APIC guideline for selection and use of disinfectants //J. Infect Control.- 1996; 24:313-42.

96. Russell A.D. Bactarial spores and chemical sporicidal agents //Clin. Microbiol. Rev.- 1990.- № 2.- P. 99-119.

97. Russell A.D. Microbial susceptibility and resistance to biocides.- ASM News.- 1997.- 63.-481-487.

98. Russell A.D., Hugo W., Aylyffe G. Evaluation of the antibacterial and antifungal activity of disinfectants. Principles and practice of disinfection, preservation and sterilization.- Oxford: Blackwell scientific publications.- 1991.- P. 78-81.

99. Russell A.D. Activity of biocides against mycobacteria //J. Appl Bacteriol, Symp Suppl.- 1996;81:87S-101S.

100. Schule T.L., Hansens E.J. Some Envi- rinmental factors affecting the daily and seasonal movements of the salt marsh Greenhead. Tabanus nigrovittatus.- Environmental Entomol.- 1995, N 6, p. 965-971.

101. Stevens L.F., Stround R. F. Control of mosquito adults and larvae with ultra-low volume aerial applications of Baytex and Baytex- Baygon mixture.- J. Mosquito News., 1996, v. 26, N 2, p. 124-128.

102. Thompson P.H. Collecting metods for Tabanidae (Diptera).-Ann. Entomol. Soc. Amer., 1999, v. 62, p. 50-57.

103. Thompson P. H. Tabanidae (Diptera) of Texas. 1 Coastal march species, West Galveston Bay; incidence, frequency, abundance and seasonal distribution.-Proc. Ent. Soc. Wash, 2003, v. 73, N 3, p. 90-92.

104. Thompson P.H. Tabanidae (Diptera) of Texas 3. Post oak belt species, Na-vasota river watershed; incidense frequency, abundance and seasonal distribution.- J. Proceedings of the Entomol. Soc. of Washington, 1994, v. 76, N 1, p. 35-38.

105. Travis B. V, Applewhite K. H, Smith H. Control of Mosquito Larvae in Alaska with DDT.- J. Econom. Entomol, 2000, v. 43, N 3, p. 350-353.

106. Williams R.E, Knapp F.W, Clarke Jr.J.L. Aerial insecticide applications for control of adult mosquitoes in the ohio River Basin.- J. Mosquito News, 2001, v. 39, N 3, p. 622-626.

107. Zhang D. Studies of corrosion inhibitors zinc-manganese batteries: quino-line quaternary ammonium phenolates // Corrosion science. -2001.-No. 43. P. 16271636.